CN1012256B - 嫁接砧木插穗和接穗的方法 - Google Patents

Abstract

本方法在于从来自体外培养的一根砧本的草本插穗和一草本接穗开始，将仅含一个芽眼的接穗(12′)插在砧木插穗(12)上，其过程是：将接穗12′的下端15割成两个斜面17，18，通过在其中部切开以使砧木插穗的顶端纵裂。然后通过嵌合将两部分12，12′接合在一起。将上述嫁接体基部放进发育介质21中，并用营养液湿润发育介质21，然后将嫁接体放在处于温度饱和的大气下和温度超过20℃的一个容器中，抑制由砧木长出的芽眼22，将苗木放进温室中或聚乙烯通道下培育一直到所需要的生长阶段为止。

Description

本发明涉及一种生产木质或半木质植物的嫁接苗木特别是葡萄苗的方法和所获得的苗木。

1866年法国出现的葡萄根瘤蚜虫害到1914年使法国的葡萄园遭受彻底的破坏。葡萄园仅在使用法国葡萄秧苗嫁接到抗此虫美国品种或杂种上时才得恢复。该嫁接技术在于把将要埋入土中并生根的砧木与接穗接合，接穗将形成地上部分并将结出葡萄。

当前所使用的方法几乎同重建法国葡萄园的方法是一样的。嫁接是在冬季末在成熟材料上进行，方法是通过将一长度为20～30厘米的美国砧木嫩枝与有一个芽的4～5厘米长的酿酒葡萄种接合。然后，将嫁接体分层处理以便在嫁接处产生连合愈伤组织。15天～21天之后，让嫁接苗在温室中或田间栽培以促进它们生根，在这些操作过程中，接穗接苗，但是成功率较低，约为30-35%。

新技术的发展，特别是生产葡萄苗的体外（试管内）培养，导致了对新嫁接技术的研究。

体外植物无性繁殖可运用所述的生材嫁接法。此技术具有两个主要缺点：

-嫁接是在生根的砧木上实现的，因此，须在体外生产所有生产上所必需的砧木。

-须清除砧木基部的7到8个芽眼，其发育会抑制接穗的生长，这是一项精细，耗时长和繁重的操作。

法国专利FR-A-8601117介绍了一种生材的嫁接用的机械。

本发明目的是通过生产木质或半木质植物的嫁接苗木的方法以获得苗木，特别是葡萄苗，并力求获得在嫁接后较短期限内可用于栽培的苗木，其成功率是迄今为止所未能达到的，且具有较高的质量。

根据本发明的技术是在草本插穗上的嫁接。

尤其特别的是本发明涉及一种木质或半木质植物的嫁接法以获得苗木，它包括下述组合步序：

a）将来自体外培养的至少一支砧木嫩苗和至少一支接穗嫩苗放在温室中或聚乙烯通道下培育，培育足够长的时间以获得具有足够节间长度的草本枝条;

b）在根据上述步序a）所获得的苗木上取得砧木插穗和接穗;

c）将仅含有一个芽的接穗插在砧木插穗上，其过程是：将接穗端割成两个斜面，并切割使砧木插穗顶端中间纵裂，然后通过嵌合使上述两部分装配在一起;

d）将根据上述c）的嫁接体放进发育介质（培养基）中，发育介质是用营养液湿润的;

e）将根据上述d）的嫁接体放进处于湿度饱和的大气下和温度超过20℃的一个容器中;

f）抑制砧木的芽。

g）将苗木放在温室中或聚乙烯通道下培育直至达到所需成长阶段。

本发明还涉及到后述可单独看待的特性及根据技术上可能的所有特性的组合：

-接穗嫩苗是酿酒葡萄品种;

-砧木和接穗嫩苗的培养是在温室中或保护物下进行的，二到三个月之后，就能取插条;

-草本枝条具有一节间长度约为10±2厘米;

-砧木插穗是在被抑制的一个芽眼下的较低部分处切开的;

-砧木插穗是在一个节间的中间部分处切开，包含顶芽眼以及下一个节间的较大部分;

-接穗的下端被切成具有16±4°角度的两个斜面，而砧木插穗的上端切割是沿中心部分纵裂5～10毫米，两部分是通过嵌合而接合的;

-嫁接体的发育介质是一种石棉立方体;

-接穗和砧木插穗的也嵌合可通过其它方法实现，例如英国嫁接法，Omega（奥米加）嫁接法，劈接法（裂口嫁接法）或所有其它接合法;

-整个嫁接体的发育介质是含有泥炭和白榴火山灰混合物或所有其它培养底物的一个钵;

-营养液是从以硝酸钙、硝酸钾、硫酸镁、硝酸铵、磷酸氢二钾、柠檬酸铁和多种微量元素的混合物为基础的溶液中间挑选的;

-容器的温度在20和30℃之间，处于湿度为90～100%下;

-砧木-接穗的融合和根的生长是一致的，约在10天后出现;

本发明的各个优点和特征通过对照以下附图的详细说明而变得明显：

图1和1A说明根据传统方法已有技术的一种嫁接苗木;

图2和2A说明来自体外培养的已有技术的一种嫁接苗木，是通过嫁接于一砧木苗木上而获得。

图3和3A说明来自体外培养的一种嫁接苗木，是通过根据本发明对砧木插穗的嫁接而获得的;

图4说明生产砧木插穗的几个步序;

图5说明生产接穗的几个步序;

图6说明从砧木插穗和接穗开始根据本发明生产嫁接苗的方法。

在图1和1A上，传统苗是用1表示的，它包含一砧木4和接穗 5，7表示根系。这样的苗木1的长度在25和30厘米之间，直径φ₁为6～14毫米，根系7是不够茂密的（仅有几个根），节间长度约10厘米，砧木4和接穗5的融合是粗壮的，且往往带有坏死部分。根据图1所示的苗木是一种休眠阶段的苗木，而图1A所示为生长阶段的苗木，接穗叶子用6标记。

在图2和2A上，来自体外培养的嫁接苗是通过对砧木苗进行嫁接或对生材进行嫁接而取得的，此嫁接苗用2表示，它包括一砧木4′和一接穗5′，7′是根系。这种苗木2的长度是在15和30厘米之间，直径φ₂为1.5到5毫米，它的根系7′具有大量的根毛且较大，节间长度是多变的，看上去差不多是2～5厘米，砧木4′和接穗5′的接合处是一种单纯的肿胀。图2所示苗木是一种休眠阶段苗木，而图2A所示是一种生长阶段的苗木，接穗的叶子用标记6′表示。

在图3和3A上，来自体外培养的本发明的嫁接苗是通过对砧木插穗上的嫁接而取得的，此嫁接苗用3表示，它包含一砧木4″和一接穗5″，7″是根系。苗木3的长度在15和30厘米之间，其直径φ₃是3～5毫米，根系7″有大量的根毛且较大，节间长度在10±2厘米之间，砧木4″和接穗5″的接合处在将来与苗木同化。图3所示的苗木是一种休眠阶段苗木，而图3A所示为生长阶段苗木，6″表示接穗叶子。

图4和图5依次表示获得砧木插穗12和接穗12′的几个步序。图中所示步序Ⅰ和Ⅱ对应于体外培养以取得砧木和接穗的秧苗9，9′。步序Ⅲ表示砧木秧苗8和接穗秧苗8′。当温度条件许可时，秧苗是置于温室中或聚乙烯通道下培育的。在2到3个月内，按照步序Ⅳ就可获得砧木的草本枝条10和接穗的草本枝条10′，它们各具有长度约为10±2厘米的节间11，11′。此时，按照步序Ⅳ在砧木苗木上取得砧木插穗12，并将插穗12的基底部分恰巧在芽眼13下切开或者在节间11的中间 部分14处切开，它包含上芽眼13以及下一个节间11的较大部分。这样采集的砧木插穗12含有节间11的全部或部分，一个带叶子和副芽的中间节间以及顶节间的全部或部分。同时，按图5步序Ⅳ在接穗苗上取得带一个芽眼的接穗12′。

扦插/嫁接或嫁接/扦插的操作成功可通过保持砧木4″和接穗5″上所各自带有全部或部分叶子而受到影响;因为叶子数量太多，可减少1/3的叶面积。

接穗12′的基部15可通过手工或机械嫁接接合到砧木12插穗的顶部16上。不论使用何种方式，嫁接原理是相同的。接穗12′的末端被切成两个各具有16±4°角度的斜面17，18，而砧木插穗12的顶端是沿着其中心处19劈开长度为5～10毫米。该两步序是在图6中由步序Ⅰ和Ⅱ加以表明的。按照图6的步序Ⅲ，两个部分12，12′是通过嵌合20而接合的。于是将苗木的基部按图6上步序Ⅳ所示那样放进发育介质21中。此发育介质21或者由一石棉立方体或者由含有泥炭和白榴火山灰混合物或其它底物的一个钵所构成;两者均为营养液所湿润，然后放进湿度约为90～100%饱和的大气下，和温度为20～30℃的一个容器中。各种溶液可被使用，例如以硝酸钙、硝酸钾、硫酸镁、硝酸铵、磷酸氢二钾、柠檬酸铁及由许多痕量元素构成的一种混合物。如在图6上步序Ⅴ和Ⅵ所表明的，砧木/接穗接合以及根系7″的发出可同时用十来天时间获得，然后很容易地抑制砧木12的芽22，从而使其发育不影响接穗12′。然后将苗木23置于温室中或聚乙烯通道下培育。由此，嫁接后七星期就能获得可栽培于葡萄园的苗木，其成功率为85±5%。

本发明是关于葡萄作物的嫁接法，但是本发明的嫁接法也适用于不属于葡萄作物的所有其它必需进行嫁接的作物。

来自体外培养9，9′的草本材料10，10′呈现一定数量的独到特性， 从而保证了扦插/嫁接或嫁接/扦插的成功。此草本材料与在自然条件下培育的苗木上所取的草本嫩枝相比较具有异乎寻常的超高生根能力。葡萄便是这样的，扁桃属（Amygdalper    sica）GF677、蔷薇等也是这样的。此特性特别对扁桃属是令人吃惊的，因为就植物无性繁殖的传统技术（扦插、压条繁殖法）而言，其生根能力是弱的;从体外培养的材料出发，对于该种作物可获得超过90%的嫩插条的生根，在生根能力未降低前，从试管中取出后可重复进行若干次此操作。

另一方面，来自试管中的砧木4″和接穗5″之间的产物的接合质量大部分取决于两个参与者的生理年龄以及它们的健康状态。关于生理年龄，无可争辩地，来自体外培养的微苗是一种起始材料，其特性非常接近由种子发芽而产生的材料;两种材料在形成过程中都具有形成层，此形成层在分子水平上还不能表现成熟植株所有全部功能。由于试管中培养，提供的砧木和接穗为具有同样生理年龄的生物材料，更确切地说，该生物材料呈现幼苗特性;因此，两个参与者具有更多的可能性或更少的约束力合成一体，从而可快速地和完善地进行融合，保证在砧木4′″的导管和接穗5″的导管之间的良好接合。重要的是要注意因为来自试管中培养的苗木已建立了导致酚化合物大量合成的分子过程，它可通过在节间11中间部分取得的插穗基部的氧化作用而容易地检测到，嫁接成功率降低很多，即30～40%。经常地保持葡萄幼苗的温度超过20℃，尤其是在20和30℃之间就容易推迟葡萄秧苗的此生物化学演变。

人们容易理解本发明方法的优点，首先是经济效益，因为有可能很快地获得可以移植到葡萄园中的大量苗木，在传统的嫁接法中，从一支砧木插穗和一支接穗开始，在6个月和12个月之内可取得0.35支苗。使用未成熟材料嫁接，从一支砧木插条和一支接穗开始，用10个星期可获得0.80支苗。相反地，使用根据本发明的草本嫁接方法，就 有可能从一支砧木苗和一支接穗苗开始，两者各用4个星期，就可取得4支砧木插穗和4支接穗，从而用7个星期提供3.2支苗。既然嫁接在草本相中进行，而此时它具有强繁殖潜力的幼细胞，由此而具有有质量改进的优点。所有这些因素使之能完善的融合，没有传统嫁接中发生的坏死现象。

就健康状态对操作成功的影响而言，还要注意到分生组织的培养会比热疗法引入一个附加的积极因素。事实上，分生组织的培养可能消除因轻度致病尚未知的病毒，即未被热疗法破坏的病毒，因为后者与尖端培养有关。然而，这些看来不引人注目的病毒的繁殖并不是对苗木的发育完全没有影响，如同在嫁接条件下，当人们把两个参与者结合在一起时，这种情况就更加重要了。两个参与者之一可能含有一种极少致病性的病毒，但是它极大地扰乱了另一个参与者的新陈代谢，从而可能或多或少严重地使砧木/接穗的不相容性出现。根据本发明的方法可能限制该情况的出现。

本发明的草本的嫁接法生产的所有木质或半木质植物。

由根据本发明方法所获得的产物，从其直径上充分显示其特性，对于葡萄直径在3～5毫米的范围之间，因为节间长度约10±2厘米，逐渐地接合是处于如图3所示的苗木同化期，从图3中看到砧木4″和接穗5′″的融合是匀称的。

作为步序g）中的例子，要注意到苗23是在温室中或聚乙烯通道下培育约7个星期。砧木和接穗的秧苗（8，8′）在温室或聚乙烯通道下的培养能保证在一个阶段内取得砧木插穗和接穗，而且继续进行直到发育条件不再处于有利情况为止。

通过对指示性品种评估而进行病毒型病害（其病原体尚未被表征）的检测。

苗圃的融合嫁接苗及移植于葡萄园的传统生产系统，在三年以前不可能获得决定性的判断。

对未成熟材料及在体外对未生根秧苗胚轴进行评估的现代技术，可将此时限缩短到嫁接后的几个星期。

与这些病害作斗争，本发明具有与现代技术一样的应答时限，而且具有最简单、最可靠和最经济的优点。

Claims (12)

1、为获得苗木而生产木质或半木质植物的嫁接苗木的方法，其特征在于它括下列组合步序：

a)将来自体外培养的至少一枝砧木秧苗和至少一枝接穗秧苗(9，9′)放在温室或聚乙烯通道下培育，培养一段时间，以获得具有节间(11，11′)的砧木苗8和接穗苗8′草本枝条；

b)在根据上述步序a)所获得的草本枝条(10，10′)上预取砧木插穗(12)和接穗(12′)；

c)将仅含有一个芽的接穗(12′)插在砧木插穗(12)上，其过程是：将接穗(12′)下端(15)割成两个斜面(17，18)，及将砧木插穗(12)顶端的中心部分(19)割开，然后通过嵌合(20)组装上述两部分(12，12′)；

d)将根据上述c)所得的嫁接体移入发育介质(21)中，发育介质是用营养液湿润的；

e)将根据上述d)的嫁接体放入具饱和湿度的大气和温度超过20℃的一个容器中；

f)抑制砧木(4″)所发出的芽(22)；

g)将苗(23)放在温室中或处于聚乙烯通道下培育直到它达到所需生长阶段为止。

2、根据权利要求1所述的方法，其特征在于接穗秧苗8′是一酿酒葡萄品种。

3、根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于砧木和接穗的秧苗（8，8′）是放在温室中或处于保护下培育的，通过一段时期可获得砧木插穗和接穗，而且可继续进行直到发育条件不再处于有利情况。

4、根据权利要求1所述的方法，其特征在于草本枝条（10，10′）的节间（11，11′）具有长度约为10±2厘米。

5、根据权利要求1所述的方法，其特征在于砧木插穗（12）是在一个芽眼（13）下面的基部切开的。

6、根据权利要求1所述的方法，其特征在于砧木插穗（12）是在含有顶芽（13）以及下一节间（11）的较大部分的一个节间（11）的中间部分（14）处切开的。

7、根据权利要求1所述的方法，其特征在于接穗（12′）下端（15）被割成两个具有角度各为16±4°的斜面（17，18），而砧木插穗（12）的顶端在中心部分（19）处劈开长度为5～10毫米，而两个插穗（12，12′）是通过嵌合（20）而接合的。

8、根据权利要求1所述的方法，其特征在于切开作业可从一系列切开作业法中间选择，诸如英国嫁接法、奥米加（Omega）嫁接法、裂口嫁接法或所有其它接合方法。

9、根据权利要求1所述的方法，其特征在于嫁接体的发育介质（21）是一种石棉立方体。

10、根据权利要求1所述的方法，其特征在于嫁接体的发育介质（21）是含有泥炭和白榴火山灰混合物或含有所有其它培养底物的一个钵。

11、根据权利要求1所述的方法，其特征在于营养材料液是从例如以硝酸钙、硝酸钾、硫酸镁、硝酸铵、磷酸氢二钾和柠檬酸铁以及由多种微量元素的混合物为基础的溶液中间挑选的。

12、根据权利要求1所述的方法，其特征在于容器温度为20到30℃之间，湿度为90到100%。

Images