CN101218332A - 从细胞中获得脂类的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及从包含细胞和水的组合物中获得脂类的方法,所述方法包括将所述组合物与干燥剂接触以及从所述细胞中回收所述脂类。本发明还涉及可通过该方法获得的脂类。根据本发明的方法使得能以高产率获得高质量的脂类,并且无需加热步骤。
Description
本发明涉及从包含细胞和水的组合物中获得脂类(lipid)的方法。本发明还涉及可通过该方法获得的脂类。
脂类可通过微生物生产,例如,在发酵工艺中生产。它们还可存在于植物细胞中。脂类有很多用途,例如其可被添加进食物、饲料、营养补充剂和药物中。
从细胞中获得脂类通常涉及从包含细胞和水的组合物中获得脂类。所述组合物例如可以是发酵培养基或通过将部分水与发酵培养基分开(例如通过机械分离步骤)从而经部分脱水的产物。已知有多种工艺允许从包含细胞和水的组合物回收脂类。例如,已知可通过喷雾干燥来干燥组合物,以及通过用有机溶剂萃取从经干燥的产物中回收脂类。但是,在喷雾干燥期间采用的条件下脂类质量可能受损。此外,经干燥产物的形态可能导致随后的萃取效率过低。
WO-A-97036996描述了一种方法,用于从微生物细胞获得脂类,该方法包括将细胞粒化(granulation)为微粒,优选通过挤出进行。对微粒进行干燥,从经干燥的微粒获得脂类,例如通过用有机溶剂萃取来进行。萃取是高效的,得到的脂类是高质量的,并且产率(即,相对细胞中存在的每单位量的脂类而言,所回收的脂类的量)也高。
但尽管WO-A-97036996的方法具有这些优点,人们仍希望获得进一步的改进。特别地,该方法涉及相对较多的步骤,例如粒化以及对微粒的干燥。此外,干燥步骤需要能量。因此,人们想获得仅需要进行较少步骤的方法,其中还能节省能量,并且以高效方式提取脂类。
本发明达到了这一目标,这通过提供一种从包含细胞和水的组合物中获得脂类的方法来实现,所述方法包括:
(a)将所述组合物与干燥剂接触;以及
(b)从所述细胞中回收所述脂类。
根据本发明的方法允许以高产率获得高质量的脂类。根据本发明,在从细胞中回收脂类之前通过加热来干燥细胞的过程不是必需的。这对于热敏感型脂类(例如包含多不饱和脂肪酸(PUFA)的脂类)来说特别有好处。根据本发明的方法还具有下述优点:细粉或尘埃(例如在包括喷雾干燥或碾磨的现有技术工艺中形成的)的形成得以避免或被最小化。此外,我们发现,当通过用溶剂萃取来回收脂类时,使用相对较少量的溶剂即足够获得相对高的产率。本发明还允许在干燥剂存在的情况下通过萃取来回收脂类,即,无须将干燥剂与细胞分开。因此,萃取可以在存在吸收到干燥剂上的水或者被干燥剂吸收的水的情况下进行。这是出人意料的,因为现有技术中都宣称要除去水,以获得高产率(见,例如WO-A-97036996)。
根据本发明的方法包括将包含细胞和水的组合物与干燥剂接触。结果,干燥剂从组合物中吸取水。吸取水的过程可通过吸附和/或吸收来进行。干燥剂并不仅限于特定的干燥剂,能通过吸附和/或吸收从组合物中吸取水的多种试剂均可用作为干燥剂。此类试剂在本领域中还被称为吸附剂和/或吸收剂。
可用于本发明方法中的干燥剂的例子例如硅石(silica,例如硅胶)、活性炭、活性铝、分子筛(例如碳分子筛或沸石)、或经交联的聚合物(例如聚丙烯酸酯)。硅石是优选的。优选地,干燥剂为微粒形式。
优选地,干燥剂具有高的吸收能力。吸收能力指可被单位量的干燥剂吸收的水的量。相对高的吸收能力具有下述优点:使用相对少量的干燥剂即可获得最优的萃取产率。干燥剂可具有每100g干燥剂至少50g水的吸收能力,优选地,每100g干燥剂至少100g水的吸收能力。对于吸收能力而言并无特定上限。实践中,对水而言的吸收能力低于每100g干燥剂20000g水,例如,低于每100g干燥剂10000g水。在本文中使用时,干燥剂的重量指干燥剂的无水重量。可通过本领域技术人员已知的技术来测定吸收能力。一种合适的方法是通过DBP吸收,例如根据DIN 53601来进行。
优选地,干燥剂具有高的比表面积。相对高的比表面积具有如下优点:使用相对少量的干燥剂即可获得最优的萃取产率。干燥剂例如可具有至少25m2/g的比表面积,优选地,至少50m2/g的比表面积,优选地,至少100m2/g的比表面积。干燥剂的比表面积并无特定上限。实践中,比表面积低于2000m2/g,例如低于1000m2/g。可通过本领域技术人员已知的技术来测定比表面积,例如根据ISO 5794/1附件D来进行。
在一种优选的实施方式中,干燥剂是多孔的。这具有如下优点:对吸附而言可用的表面积相对较高。
在根据本发明的方法中,将与干燥剂接触的组合物可包含任何合适量的水。将与干燥剂接触的组合物中的水含量例如为至少5wt.%,例如至少10wt.%,例如至少20wt.%,例如至少30wt.%。对将与干燥剂接触的组合物的水含量来说并无特定上限。将与干燥剂接触的组合物的水含量例如低于98wt.%,优选低于95wt.%,优选低于90wt.%,优选低于80wt.%,优选低于70wt.%。较低的水含量具有如下优点:可使用较少的干燥剂获得最优产率。
本文中使用时,细胞的水含量通过下式给出:
W水/(W细胞+W水)×100%,
其中
W水=组合物中水的重量
W细胞=组合物中细胞的干重
技术人员将理解,细胞干重(W细胞)指无水细胞的重量,但其包括脂类重量。应当理解,组合物中包含的水的重量(W水)包括组合物中水的总重,包括细胞内、细胞间以及细胞外的水。可通过本领域技术人员已知的方法,例如通过在105℃的温度下蒸发水并测定蒸发的水和剩余细胞的重量,来测定W水和W细胞的值,以及由此测定组合物的水含量。例如可使用红外干物质天平。
在一种优选的实施方式中,本发明提供了将与组合物接触的干燥剂的优选用量。我们发现,萃取产率随着与组合物接触的干燥剂用量的增加而增加,直至达到最优产率。基于本发明提供的该教导,技术人员可以通过改变干燥剂用量来确定任何状况下干燥剂的最优用量。
我们特别地发现,干燥剂用量取决于组合物的水含量以及干燥剂的性质。在一种优选的实施方式中,W干燥剂/(W细胞(a)+W水(a))>(1/x)*(1-W细胞(a)/(0.8*(W细胞(a)+W水(a)))),其中,
W干燥剂=将在(a)中与组合物接触的干燥剂的重量
W细胞(a)=将在(a)中与干燥剂接触的组合物中的细胞的干重
W水(a)=将在(a)中与干燥剂接触的组合物中的水的重量
x=干燥剂的吸收能力。
在另一优选的实施方式中,
W干燥剂/(W细胞(a)+W水(a))>(1/x)*(1-W细胞(a)/(0.9*(W细胞(a)+W水(a))))。
在一种优选的实施方式中,根据本发明的方法包括将一定量的干燥剂与组合物接触,使得产率为至少70%,优选至少80%,更优选至少85%,更优选至少90%。本文中使用的产率指相对于细胞中存在的每单位量的脂类而言从细胞中回收的脂类的量。
将与干燥剂接触的组合物可以是包含细胞和水的且从中可获得脂类的任何合适的组合物。组合物可以例如是发酵培养基,或者通过将水与发酵培养基分离(例如通过机械分离)获得的经部分脱水的产物。组合物可以例如是湿滤饼、泥渣(sludge)、浆体、浓缩物和/或膏体。虽然根据本发明,粒化并非必须,但是当细胞为微粒形式,例如挤出物时,根据本发明的方法也能提供优点。
将组合物与干燥剂接触可以以任何合适的方式来进行,优选地,通过将组合物与干燥剂混合来进行,以获得包含细胞和干燥剂的混合物。可以从混合物中回收脂类,例如通过用溶剂萃取来进行。
综上所述,在一种优选的实施方式中,本发明提供了一种方法,用于从包含细胞和水的组合物获得脂类,所述方法包括(a)将所述组合物与干燥剂接触,提供包含细胞和干燥剂的混合物;以及(b)从所述混合物中回收所述脂类。
在另一方面,本发明还提供了一种混合物,其包含(i)包含脂类的细胞和(ii)干燥剂。应当知道,根据本发明的方法的优选方面和/或实施方式将适用于根据本发明的混合物。
在一种优选的实施方式中,该混合物还包含水,其中
W干燥剂,混合物/(W细胞,混合物+W水,混合物)>(1/x)*(1-W细胞,混合物/(0.8*(W细胞,混合物+W水,混合物))),优选地,W干燥剂,混合物/(W细胞,混合物+W水,混合物)>(1/x)*(1-W细胞,混合物/(0.9*(W细胞,混合物+W水,混合物))),其中
W干燥剂,混合物=混合物中干燥剂的重量
W细胞,混合物=混合物中细胞的干重
W水,混合物=混合物中水的重量
x=干燥剂的吸收能力。
混合可在任何合适的混合机中进行,例如,在高剪切力混合机中,例如Orbit ScrewMixer、PlowMixer、PaddleMixer、具有增强条(intensifierbar)的TumbleBlender或者DiosnaMixer。
可从在(a)中以任何合适方式接触产生的细胞中回收脂类。例如,可以通过用溶剂萃取,在将组合物与干燥剂接触期间或之后从细胞中回收脂类。
在一种优选的实施方式中,通过用溶剂萃取从细胞中回收脂类。可使用多种不同的溶剂。溶剂可以例如是C1-10的烷基酯(例如乙酸乙酯或乙酸丁酯)、甲苯、C1-3的醇(例如甲醇、丙醇)、C3-6的烷烃(例如己烷)或者超临界流体(例如液体CO2或者超临界丙烷)。溶剂混合物也是可行的。在一种优选的实施方式中,溶剂是有机溶剂。当溶剂是非极性溶剂时,根据本发明的方法是特别有好处的。最优选地,溶剂是己烷或超临界CO2。
细胞或者包含细胞的混合物可以以任何合适的方式与溶剂接触,例如通过滤过式(percolation)萃取、逆流萃取或者在混合机中萃取来进行。在混合机中的萃取是优选的。在一种优选的实施方式中,使用相对每单位重量的细胞而言2至40单位重量的溶剂。
在本发明的一种实施方式中,在将细胞与溶剂接触之前,将至少一部分干燥剂(例如至少50%)与混合物分开。在一种优选的实施方式中,将包含细胞以及至少一部分干燥剂的混合物与溶剂接触。因此,通过用溶剂萃取来回收脂类的过程可在存在(至少部分)干燥剂的情况下进行。这具有如下优点:无需进行将干燥剂与细胞分开的分离步骤。令人吃惊地,本发明的方法仍然能产生高效萃取,甚至是在存在水的情况下。在一种实施方式中,
W水(b)/W细胞(b)>0.5*W水(a)/W细胞(a)
其中
W水(b)=在(b)中从中回收脂类的混合物中水的重量
W细胞(b)=在(b)中从中回收脂类的混合物中细胞的干重
W水(a)=将在(a)中与干燥剂接触的组合物中的水的重量
W细胞(a)=将在(a)中与干燥剂接触的组合物中的细胞干重。
在另一实施方式中,W水(b)/W细胞(b)>0.7*W水(a)/W细胞(a)。
在另一实施方式中,W水(b)/W细胞(b)>0.8*W水(a)/W细胞(a)。
在另一实施方式中,W水(b)/W细胞(b)>0.9*W水(a)/W细胞(a)。
根据本发明的方法可用于从多种细胞中获得多种脂类。脂类可以例如包含下述化合物中的一种或多种:泥泊司他汀(lipstatin)、司他汀、TAPS、pimaricine、制霉菌素、脂溶性抗生素(例如莱特洛霉素)、脂溶性抗氧化剂(例如辅酶Q10)、胆固醇、植物甾醇、链甾醇、生育三烯酚、生育酚、类胡萝卜素或者黄色色素(xanthophylls)(例如β-胡萝卜素、叶黄素、番茄红素、虾青素、玉米黄质或者角黄素)、脂肪酸(例如共轭亚油酸或者多不饱和脂肪酸(PUFA))。在一种优选的实施方式中,脂类包含浓度为5wt.%的至少一种上述化合物,更优选地,浓度为至少10wt.%(相对脂类重量而言)。
可获得包含例如甘油三酯、磷脂、游离脂肪酸、脂肪酸酯(例如甲酯或乙酯)和/或其组合的脂类。在一种优选的实施方式中,脂类具有至少50%的甘油三酯含量,更优选地,至少70%,最优为至少90%。
在本发明的一种特别优选的实施方式中,脂类包含多不饱和脂肪酸(PUFA),例如具有至少18个碳原子的PUFA,例如C18、C20或者C22PUFA。在一种优选的实施方式中,PUFA是ω-3PUFA(Ω3)或者ω-6PUFA(Ω6)。优选地,PUFA具有至少3个双键。优选的PUFA是
二十二碳六烯酸(DHA,22:6Ω3);
γ-亚麻酸(GLA,18:3Ω6);
α-亚麻酸(ALA,18:3Ω3);
二高-γ-亚麻酸(DGLA,20:3Ω6);
花生四烯酸(ARA,20:4Ω6);以及
二十碳五烯酸(EPA,20:5Ω3)。
在一种优选的实施方式中,脂类包含浓度为至少5wt.%的至少一种PUFA(例如ARA或DHA),例如至少10wt.%,例如至少20wt.%(相对于脂类的重量而言)。
PUFA可以是甘油(单、双或三)酯、磷脂、游离脂肪酸、脂肪酸酯(例如甲酯或乙酯)和/或其组合的形式。优选地,获得这样的脂类,其中所有PUFA中的至少50%是甘油三酯形式。
脂类可以是油或脂肪,例如包含PUFA的油。在根据具体情况略作修正之后,对脂类而言优选的实施方式也适用于油或脂肪。
细胞可以是包含脂类的任何细胞,典型地,细胞已经生产出了脂类。细胞可以是完整的细胞或经破碎的细胞。细胞可以是任何合适来源的。细胞可以例如是植物细胞,例如来自种子的细胞,或者微生物的细胞(微生物细胞)。微生物细胞的例子是酵母细胞、细菌细胞、真菌细胞和藻类细胞。真菌是优选的,优选是Mucorales目的,例如Mortierella、Phycomyces、Blakeslea、Aspergillus、Thraustochytrium、Pythium或者Entomophthora。花生四烯酸(ARA)的优选来源是来自Mortierellaalpiina、Blakeslea trispora、Aspergillus terreus或者Pythium insidiosum。藻类可以是腰鞭毛虫和/或包括Porphyridium、Nitszchia或者Crypthecodinium(例如Crypthecodinium cohnii)。酵母包括Pichia或者Saccharomyces属的,例如Pichia ciferii。细菌可以是Propionibacterium属的。包含脂类的植物细胞的例子包括来自大豆、油菜籽、芥菜、向日葵、椰子、亚麻和棕榈种子。在本发明的一种实施方式中,细胞是包含包括ARA的脂类的植物细胞。
在本发明的一种实施方式中,通过发酵来产生细胞。用于发酵的合适方法是本领域技术人员已知的,例如见WO-A-9737032所公开的。优选地,通过发酵生产的细胞被加热或巴氏灭菌。
在一种优选的实施方式中,根据本发明的方法在将组合物与干燥剂接触之前包括下述步骤中的一个或多个:(i)对细胞进行加热或巴氏灭菌;(ii)通过机械分离将水与细胞分开;(iii)洗涤细胞;以及(iv)压榨细胞。
加热或巴氏灭菌可以在65至120℃的温度下进行。其可使酶(例如脂肪酶和/或脂氧合酶)灭活或变性。
通过机械分离将水与细胞分开的过程可有利地用于获得前文公开的水含量和/或干物质含量的优选值。机械分离可以例如涉及过滤、离心、压榨、沉淀或者使用水力旋流器。
可以以任何合适的方式对脂类进行进一步处理。通过用溶剂萃取来回收脂类时,可以通过蒸发溶剂从溶剂获得脂类。
可对(可以)通过根据本发明的方法获得的脂类进行进一步处理,例如进行酸处理(也被称为脱胶)、碱处理(也被称为中和)、漂白、脱臭、冷却(也被称为冬化)。
(可以)通过根据本发明的方法获得的脂类具有很多用途。其可例如用于制备食物产品,例如人类食物产品(例如婴儿配方食品),或者动物饲料产品。其还可用于制备药物产品或化妆品。因此本发明还提供了包含根据本发明的方法获得的或可根据本发明的方法获得的脂类的食物产品(例如强化食品或营养补充剂),例如人类食物产品(例如婴儿配方食品),或者动物饲料产品,药物产品,化妆品。
现在将参照下述实施例来阐述本发明,但并不欲加以任何限制。
实施例
比较实验A
通过在WO-A-9736996第45页公开的条件下进行Mortierella alpina发酵,来获得含有ARA的发酵培养基,随后在65℃对该发酵培养基进行一小时巴氏灭菌。使用带状过滤器对培养基加以过滤,用水洗,以除去残余的培养基组分,并对其进行压榨。经压榨的滤饼的水含量为60.7wt.%。干物质(细胞,包括细胞中的油)含量为39.3wt.%。按照WO-A-9736996所述对经压榨的滤饼加以挤出,接着用流床干燥机将其干燥至干物质含量为94wt.%。
按照下文所述进行萃取。在第一个萃取阶段,将按照上文所述获得的100克经干燥产物加入到300ml实验室级的正己烷中,在室温(20℃)下进行1小时的磁力搅拌。第一个萃取阶段之后,从固体(包含细胞)倾析出液相(包含溶解于己烷中的油)。在第二个萃取阶段,将剩余的固体加入250ml正己烷,并且搅拌30分钟。在第二个萃取阶段之后,通过真空过滤将液相(包含溶解于己烷中的油)与固体分开。合并来自第一和第二个萃取阶段的液相,之后使用从瑞士Büchi获得的Rotavapor来蒸发己烷。在68℃,100至400mbar之间的压力下运行30分钟。
就本专利申请的目的而言,比较实验A的(含ARA的油的)产率被定义为100%。下述实验中获得的产率被表示为相对比较实验A的产率而言的产率。
参照实验B
重复比较实验A,不同之处在于不进行挤出和干燥。使用比较实验A所述的相同流程来萃取混合物。产率为29.68%。
实施例1
重复参照实验B,不同之处在于,对82份重量单位的经压榨滤饼进行粉碎,将其与18份重量单位的硅石(SIPERNAT22,从德国DegussaAG获得)在Hobart高剪切力混合机中混合。萃取按照同样方式进行。产率为84.68%,这较之没有使用干燥剂的参照实验而言有了55%的提高。
实施例2
重复实施例1,不同之处在于硅石的量从18份重量单位增加到25份重量单位。这导致产率增加(了4.8%,)至89.48%的值。
实施例3
重复实施例2,不同之处在于硅石的量从25份重量单位增加到35份重量单位。这导致产率增加了7.53%,至97.01%的值。
关于实施例1、2和3以及实验A和B的总览参见表1。该表显示,使用干燥剂导致萃取产率提高,并且萃取产率随着所用的干燥剂的量增加而增加。这使得我们可以通过改变所用的硅石的量来获得最优萃取产率。实验显示,使用根据本发明的干燥剂,在不进行挤出和干燥的情况下,可获得基本相同的产率。
表1.通过根据本发明的方法获得的产率,较之实验A、B的产率而言
实验号 | 滤饼(wt.%) | 硅石(wt.%) | 产率 |
比较实验A | 挤出和干燥 | 100 | |
参照B | 100 | 0 | 29.68 |
实施例1 | 82 | 18 | 84.68 |
实施例2 | 75 | 25 | 89.48 |
实施例3 | 65 | 35 | 97.01 |
通过本发明的方法获得的脂类和通过包括挤出和干燥的方法获得的脂类具有基本相同的组成,见表2。
实施例4
按照前述实施例所述,制备具有45.6%干物质含量的经压榨滤饼(Mortierella alpina)。将50g该滤饼与5g聚丙烯酸酯超级吸收剂(LuquasorbFP 800,从德国BASF获得)混合。在搅拌下,用250ml己烷对获得的混合物加以萃取。在7小时萃取之后(蒸发掉己烷之后),测定萃取得到的含有ARA的油的量,发现其为7.8g。
实施例5
重复实施例4,不同之处在于使用10g硅石干燥剂(SIPERNAT22,从德国Degussa AG获得)来代替5g聚丙烯酸酯。7小时萃取之后,萃取得到的含有ARA的油的量为7.8g。
按照WO-A-9736996所述(在不存在干燥剂时)使用经干燥的挤出物来进行实施例4和5的萃取,结果是萃取得到的油在7.65和8.1g之间。
这清楚表明,使用根据本发明的干燥剂,可以无需粒化/挤出和/或通过蒸发干燥,即可获得同样的产率。
表2.通过根据本发明的方法获得的脂类(油)的组成,较之实验A、B而言
本发明(如实施例1-3,但是采用20份重量单位的硅石) | 比较实验A(挤出+干燥) | |
ARA(kg/kg) | 404.5 | 421.5 |
总脂肪酸的ARA% | 46.4 | 46.8 |
聚合物 | 0.6 | 0.5 |
甘油三酯 | 91.9 | 92.2 |
甘油二酯 | 5.5 | 5.4 |
甾醇 | 2 | 2 |
C14:0 | 0.6 | 0.6 |
C16:0 | 13.1 | 13.1 |
C17:0 | 0.4 | 0.4 |
C18:0 | 9.3 | 9.4 |
C18:1w9c | 8.5 | 8.4 |
C18:1w7c | 0.5 | 0.4 |
C18:2w6 | 7.6 | 7.4 |
C20:0 | 0.9 | 0.9 |
C18:3w6 | 3.9 | 3.8 |
C20:1w9 | 0.3 | 0.3 |
C20:2 | 0.7 | 0.7 |
C22:2 | 1.6 | 1.6 |
C20:3w6 | 4.7 | 4.7 |
C24:0 | 1.5 | 1.6 |
Claims (37)
1.一种从包含细胞和水的组合物中获得脂类的方法,所述方法包括:
(a)将所述组合物与干燥剂接触;以及
(b)从所述细胞中回收所述脂类。
2.如权利要求1所述的方法,其中,所述干燥剂具有每100g干燥剂至少50g水的吸收能力。
3.如权利要求1或2所述的方法,其中,所述干燥剂是多孔的。
4.如前述任意一项权利要求所述的方法,其中,所述干燥剂具有至少25m2/g的比表面积。
5.如前述任意一项权利要求所述的方法,其中,所述干燥剂选自硅石、活性炭、活性铝、分子筛(例如碳分子筛或沸石)、或经交联的聚合物(例如聚丙烯酸酯)。
6.如前述任意一项权利要求所述的方法,其中,所述干燥剂是硅石。
7.如前述任意一项权利要求所述的方法,其中,
W干燥剂/(W细胞(a)+W水(a))>(1/x)*(1-W细胞(a)/(0.8*(W细胞(a)+W水(a)))),其中,
W干燥剂=将在(a)中与所述组合物接触的所述干燥剂的重量
W细胞(a)=将在(a)中与所述干燥剂接触的所述组合物中的所述细胞的干重
W水(a)=将在(a)中与所述干燥剂接触的所述组合物中的水的重量
x=所述干燥剂的吸收能力。
8.如前述任意一项权利要求所述的方法,其中,所述方法包括通过发酵获得细胞。
9.如前述任意一项权利要求所述的方法,其中,将在(a)中与所述干燥剂接触的所述组合物是发酵培养基,或者其中,将在(a)中与所述干燥剂接触的所述组合物是通过将水与发酵培养基分离获得的,例如通过机械分离获得的。
10.如前述任意一项权利要求所述的方法,其中,将在(a)中与所述干燥剂接触的所述组合物具有5至95wt.%之间的水含量。
11.如前述任意一项权利要求所述的方法,其中,步骤(a)包括将所述组合物与所述干燥剂混合,给出包含细胞和干燥剂的混合物;以及其中步骤(b)包括从所述混合物中回收所述脂类,可选地,在存在至少部分干燥剂下进行。
12.如权利要求11所述的方法,其中,所述方法包括下述至少之一:
(i)将至少部分干燥剂与混合物分离;和/或
(ii)W水(b)/W细胞(b)>0.5*W水(a)/W细胞(a),其中
W水(b)=在(b)中从中回收所述脂类的混合物中水的重量
W细胞(b)=在(b)中从中回收所述脂类的混合物中细胞的干重
W水(a)=将在(a)中与所述干燥剂接触的所述组合物中的水的重量
W细胞(a)=将在(a)中与所述干燥剂接触的所述组合物中的细胞干重。
13.如前述任意一项权利要求所述的方法,其中,步骤(b)包括通过用溶剂萃取来回收所述脂类。
14.如前述任意一项权利要求所述的方法,其中,所述溶剂是非极性溶剂,例如C3-6的烷烃,优选己烷。
15.如前述任意一项权利要求所述的方法,其中,所述溶剂是超临界流体,例如液体CO2或者超临界丙烷。
16.如前述任意一项权利要求所述的方法,其中,所述方法在(a)之后以及在(b)之前不包括:
涉及加热所述细胞的干燥步骤;和/或
对所述细胞进行粒化,获得微粒。
17.如前述任意一项权利要求所述的方法,其中,所述细胞是微生物细胞,例如酵母细胞、细菌细胞、真菌细胞或藻类细胞。
18.如前述任意一项权利要求所述的方法,其中,所述细胞来自Mortierella、Pythium或者Entomophthora属。
19.如前述任意一项权利要求所述的方法,其中,所述细胞来自Ctyothecodinium属,或者Thraustochytriales目,例如来自Thraustochttrium或Schizochytrium属。
20.如前述任意一项权利要求所述的方法,其中,所述细胞是植物细胞,例如来自种子或坚果的细胞。
21.如前述任意一项权利要求所述的方法,其中,所述脂类包含多不饱和脂肪酸(PUFA),例如Ω-3多不饱和脂肪酸或Ω-6多不饱和脂肪酸。
22.如前述任意一项权利要求所述的方法,其中,所述多不饱和脂肪酸是具有至少18个碳原子的多不饱和脂肪酸。
23.如前述任意一项权利要求所述的方法,其中,所述多不饱和脂肪酸是花生四烯酸(ARA)。
24.如前述任意一项权利要求所述的方法,其中,所述多不饱和脂肪酸是二十二碳六烯酸(DHA)。
25.如前述任意一项权利要求所述的方法,其中,所述脂类包含至少5wt.%的所述多不饱和脂肪酸。
26.如前述任意一项权利要求所述的方法,其中,所述脂类包含下述化合物中的一种或多种:泥泊司他汀、司他汀、TAPS、pimaricine、制霉菌素、脂溶性抗生素(例如莱特洛霉素)、脂溶性抗氧化剂(例如辅酶Q10)、胆固醇、植物甾醇、链甾醇、生育三烯酚、生育酚、类胡萝卜素或者黄色色素,例如β-胡萝卜素、叶黄素、番茄红素、虾青素、玉米黄质或者角黄素。
27.一种混合物,其包含(i)包含脂类的细胞和(ii)干燥剂。
28.如权利要求27所述的混合物,其中,所述脂类是如权利要求21至26中任意一项定义的脂类。
29.如权利要求27或28所述的混合物,其中,所述干燥剂是如权利要求2-6中任意一项定义的干燥剂。
30.如前述任意一项权利要求所述的混合物,其中,所述细胞是如权利要求17至20中任意一项定义的细胞。
31.如前述任意一项权利要求所述的混合物,其中,所述混合物还含水,其中,
W干燥剂,混合物/(W细胞,混合物+W水,混合物)>(1/x)*(1-W细胞,混合物/(0.8*(W细胞,混合物+W水,混合物))),优选地,W干燥剂,混合物/(W细胞,混合物+W水,混合物)>(1/x)*(1-W细胞,混合物/(0.9*(W细胞,混合物+W水,混合物))),其中
W干燥剂,混合物=所述混合物中所述干燥剂的重量
W细胞,混合物=所述混合物中所述细胞的干重
W水,混合物=所述混合物中水的重量
x=所述干燥剂的吸收能力。
32.一种获得脂类的方法,所述方法包括将如前述任意一项权利要求所述的混合物与有机溶剂接触。
33.可通过前述任意一项权利要求所述的方法获得的脂类。
34.一种食物产品,其包含权利要求33所述的脂类,例如所述食物产品是人类食物产品或者动物饲料产品。
35.如权利要求34所述的食物产品,其中所述食物产品是婴儿配方食品。
36.包含如权利要求33所述的脂类的药物产品。
37.包含如权利要求33所述的脂类的化妆品。
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