CN101185628A - 一种治疗实体肿瘤的依立替康缓释植入剂 - Google Patents

Abstract

依立替康缓释植入剂，含抗癌有效量的依立替康、缓释辅料和一定量的缓释调节剂。实体肿瘤包括胰腺癌、肺癌、肝癌、乳腺癌、脑瘤、卵巢癌、前列腺癌、食道癌、淋巴瘤、骨肉瘤、结直肠癌。缓释辅料主要为聚(L－丙交酯－co－磷酸乙酯)、聚(L－丙交酯－co－磷酸丙酯)、乙醇酸和羟基乙酸的共聚物、聚苯丙生中的一种或其组合，在其降解吸收的过程中能将依立替康缓慢平稳释放于肿瘤局部，因此在明显降低其全身毒性反应的同时还可于肿瘤局部维持有效药物浓度。肿瘤局部放置该抗缓释植入剂不仅能够降低依立替康的全身毒性反应，同时还能选择性地提高肿瘤局部的药物浓度，增强化疗药物及放射治疗等非手术疗法的治疗效果。

Description

一种治疗实体肿瘤的依立替康缓释植入剂

(一)技术领域

本发明涉及一种治疗实体肿瘤的依立替康缓释植入剂，属于药物技术领域。

(二)背景技术

近年的研究表明，肿瘤化疗失败的关键原因在于现有方法未能在肿瘤部位获得有效药物浓度。低剂量药物接触不仅不能杀伤肿瘤，而且容易导致耐受性的产生。单纯提高给药浓度又受到全身毒性的限制。因此，选择性的提高局部药物浓度已经成为当前研究的热点。

盐酸伊立替康(开普拓，Irinotecan Hydrochloride，CPT-11)是半合成喜树碱的衍生物，能特异性抑制DNA拓扑异构酶I。伊立替康可诱导单链DNA损伤，从而阻断DNA复制叉，由此产生细胞毒性。在体内实验中，伊立替康对鼠肿瘤模型显示了广谱的抗瘤活性(PPO3胰导管腺癌，MA-16/C乳腺癌，C38和C51结肠腺癌)。除此之外，伊立替康对人异种移植肿瘤(CO03胰导管腺癌，MA-16/C乳腺癌，C38和C51结肠腺癌，Co-4结肠腺癌，MX-1乳腺癌，St-15和SC-6胃腺癌)以及表达P糖蛋白MDR的肿瘤(长春新碱和阿霉素耐药的P3.88白血病)也有抗瘤活性。

伊立替康在大多数组织中被羧酸酯酶代谢为SN-38，而后者作用于提纯的拓扑异构酶I的活性比伊立替康更强，且对几种鼠和人肿瘤细胞系的细胞毒性也强于伊立替康。研究表明，SN-38或伊立替康的细胞毒性是时间依赖性的，并特异性作用于S期。体外实验中，伊立替康和SN-38的血浆蛋白结合率分别约为65％和95％。严重的骨髓抑制极大地限制了其临床效果的发挥。

最新的研究表明依立替康对多种肿瘤有治疗作用，特别是局部应用对许多实体肿瘤表现出常规疗法难以实现的优越性，见中国专利(ZL200410035927.5，ZL 200510042430.0)。然而现有的方法所制成的缓释制剂释药较快且不稳定，以而不能很好的发挥其临床效果。

(三)发明内容

本发明针对现有技术的不足，提供一种新的缓释植入剂，用于治疗实体肿瘤，不仅效果明显，其全身毒性明显减轻。

本发明基于现有技术的不足，本发明通过大量创造性劳动，用新的缓释辅料和组成配比制成新的缓释制剂，释药缓慢且平稳，从而更好地发挥依立替康的临床效果。

本发明治疗实体肿瘤的缓释植入剂，其特征在于该缓释植入剂含抗癌有效量的依立替康、缓释辅料和一定量的缓释调节剂，其中各组成成分的重量比为：

(1)依立替康      0.1％-40％

(2)缓释辅料      60％-99％

(3)缓释调节剂    0-15％

本发明的依立替康在缓释植入剂中的重量百分比以0.1％到40％为优选，以5％-20％为最优选。

已知的缓释辅料很多，在《缓释辅料大全》(第123页，四川科学技术出版社1993年出版，罗明生和高天惠主编)中对缓释辅料已有详细描述。另外，中国专利(申请号96115937.5；91109723.6；9710703.3；01803562.0)及美国发明专利(专利号5,651,986)也列举了某些缓释辅料。然而，并非所用的缓释辅料均适合于药物的释放，特别是就特定的药物而言，选择其适合的缓释辅料而满足合适的释药行为需经大量创造性的劳动才可实现。

经广泛的研究筛选后发现，在大量的缓释辅料中，适合本发明的缓释辅料主要选自聚(L-丙交酯-co-磷酸乙酯)(p(LAEG-EOP))、聚(L-丙交酯-co-磷酸丙酯)(p(DAPG-EOP))中的一种或其组合。其中，聚(L-丙交酯-co-磷酸乙酯)的分子量峰值为15000-25000、25000-35000或35000-60000，其中以15000-30000、30000-45000为优选，以15000-30000为最优选；聚(L-丙交酯-co-磷酸丙酯)的分子量峰值为10000-20000、20000-30000、30000-40000或40000-80000。其中以15000-25000、25000-35000、35000-45000为优选，以15000-35000为最优选。

缓释调节剂选自木糖醇、低聚糖、甲壳素、钾盐、钠盐、甘露醇、山梨醇、透明质酸、胶原蛋白、软骨素、明胶及白蛋白中的一种或其组合，其中以木糖醇、低聚糖、甲壳素、钾盐、钠盐、甘露醇、山梨醇、软骨素中的一种或其组合为优选，以钠盐、甘露醇、山梨醇、软骨素中的一种或其组合为最优选。缓释调节剂在缓释植入剂中的重量百分比为0-15％，但以1％-15％为优选，但以5％-10％为最优选。

本发明还发现，与单独应用聚乳酸(PLA)、乙醇酸和羟基乙酸的共聚物(PLGA)或聚苯丙生(对羧苯基丙烷(p-CPP)∶癸二酸(SA)共聚物)相比，与甲壳素、钾盐、钠盐、甘露醇或山梨醇等缓释调节剂合用可明显改善其西药特性。

其中聚乳酸(PLA)的分子量峰值为15000-25000、25000-40000或40000-55000或30000-50000；其中以15000-30000、30000-45000为优选，以15000-35000为最优选。

乙醇酸和羟基乙酸的共聚物(PLGA)的分子量峰值为15000-25000、25000-35000、35000-45000或45000-80000；其中以15000-25000、25000-35000、35000-45000为优选，以15000-35000为最优选。乙醇酸与羟基乙酸的重量百分比为90∶10，80∶20，70∶30，60∶40，50∶50或40∶60；其中以80∶20，70∶30，60∶40，50∶50为优选，以60∶40和50∶50为最优选。

聚苯丙生(对羧苯基丙烷(p-CPP)∶癸二酸(SA)共聚物)中对羧苯基丙烷(p-CPP)与癸二酸(SA)的重量百分比为10∶90，20∶80，30∶70，40∶60，50∶50或60∶40；其中以80∶20，70∶30，60∶40，50∶50为优选，以60∶40和50∶50为最优选。

缓释植入剂的用量取决于很多因素，如，但不限于，肿瘤体积、病人体重、给药方式、病情进展情况、药物含量及治疗反应。但其原则是在能够降低肿瘤细胞的修复能力，增加化疗作用效果的同时并不明显增加药物的毒性反应。当全身用药时，有效成分的最大耐受剂量(MTD)在不同种系动物体内有所不同，可为(MTD)为100-500mg/天，本发明缓释植入剂的有效剂量为1-1000毫克/天，以100-800毫克/天为优选，以100-500毫克/患者为最优选。

本发明可制成各种形状，其中有效成份的含量因不同需要而定。可制成各种剂型，如，但不限于，针剂、浑悬液、软膏、胶囊、植入剂、缓释剂及植入缓释剂等，其中植入剂主要为缓释植入剂、控释植入剂、缓释注射剂；呈各种形状，如，但不限于，颗粒样、片状、球形、块状、针状、棒状及模样；可经各种途径给药，如动脉、皮下、肌肉、皮内、腔内、瘤内、瘤周等。给药途径取决于多种因素，如肿瘤所在部位、是否手术或转移、肿瘤体积大小、肿瘤类别、病人年龄、身体状况、生育状况及要求等。为于肿瘤所在部位获得有效药物浓度，可选择性地动脉灌注，腔内灌注，腹腔(i.p.)或胸腔及椎管内给药，也可脏器内放置，如肠腔内、膀胱内、宫腔内、阴道内、胃内及食道内等。在各种途径中，以局部给药，如以选择性动脉、瘤内、瘤周注射为主，以瘤内、瘤周或瘤腔放置或注射的形式为优选，如可选用可种缓释泵、缓释胶囊、缓释剂、植入剂、缓释植入剂及缓释注射剂。

缓释植入剂中各组份及其在组合物中的重量百分含量优选下列之一：

(1)5％的依立替康和95％的聚(L-丙交酯-co-磷酸乙酯)；

(2)10％的依立替康和90％的聚(L-丙交酯-co-磷酸乙酯)；

(3)20％的依立替康和80％的聚(L-丙交酯-co-磷酸乙酯)；

(4)30％的依立替康和70％的聚(L-丙交酯-co-磷酸乙酯)；

(5)5％的依立替康和95％的聚(L-丙交酯-co-磷酸丙酯)；

(6)10％的依立替康和90％的聚(L-丙交酯-co-磷酸丙酯)；

(7)20％的依立替康和80％的聚(L-丙交酯-co-磷酸丙酯)；

(8)30％的依立替康和70％的聚(L-丙交酯-co-磷酸丙酯)。

缓释植入剂中各组份及其在组合物中的重量百分含量进一步优选下列之一：

(A)1％-5％的依立替康和85％-98％的聚乳酸和0.5％-15％的甘露醇；

(B)5％-10％的依立替康和90％-95％的聚乳酸和0.5％-10％的山梨醇；

(C)10％-15％的依立替康和85％-90％的聚乳酸和0.5％-10％的氯化钠；

(D)15％-25％的依立替康和75％-85％的聚乳酸和0.25％-5％的甘露醇；

(E)25％-40％的依立替康和60％-75％的聚乳酸0.1％-8％的山梨醇；

(F)1％-10％的依立替康和90％-99％的乙醇酸和羟基乙酸的共聚物和0.5％-15％的甘露醇；

(G)10％-20％的依立替康和80％-90％的乙醇酸和羟基乙酸的共聚物和0.5％-10％的山梨醇；

(H)20％-30％的依立替康和70％-80％的乙醇酸和羟基乙酸的共聚物和0.5％-10％的氯化钠；

(I)30％-40％的依立替康和60％-70％的乙醇酸和羟基乙酸的共聚物和0.25％-5％的甘露醇；

(J)5％-15％的依立替康和85％-95％的聚苯丙生和1％-5％的甘露醇；

(K)15％-35％的依立替康和65％-85％的聚苯丙生和0.25％-7.5％的甘露醇；

(L)5％的依立替康和93％的聚(L-丙交酯-co-磷酸乙酯)和2％的氯化钠；

(M)10％的依立替康和85％的聚(L-丙交酯-co-磷酸乙酯)和5％的甘露醇；

(N)20％的依立替康和75％的聚(L-丙交酯-co-磷酸乙酯)和5％的甘露醇；

(O)30％的依立替康和65％的聚(L-丙交酯-co-磷酸乙酯)和5％的甘露醇；

(P)5％的依立替康和93％的聚(L-丙交酯-co-磷酸乙酯)和2％的氯化钠；

(Q)10％的依立替康和85％的聚(L-丙交酯-co-磷酸乙酯)和5％的甘露醇；

(R)20％的依立替康和75％的聚(L-丙交酯-co-磷酸乙酯)和5％的甘露醇；

(S)30％的依立替康和65％的聚(L-丙交酯-co-磷酸乙酯)和5％的甘露醇。

其缓释植入剂用于治疗实体肿瘤，包括脑肿瘤、肝癌、肺癌、食管癌、胃癌、乳腺癌、胰腺癌、甲状腺癌、鼻咽癌、卵巢癌、子宫内膜癌、子宫颈癌、肾癌、前列腺癌、膀胱癌、结肠癌、直肠癌、睾丸癌、皮肤癌、淋巴瘤、骨肉瘤、头颈部肿瘤和源于胆囊、口腔、外周神经系统、粘膜、腺体、血管、骨组织、淋巴结、眼睛、的原发或继发的癌、肉瘤或癌肉瘤。其中对富含新生血管的原发或继发肿瘤为优选。

本发明的应用是用于制造治疗上述肿瘤的上述各种药物制剂，其中以针剂、浑悬液、软膏、胶囊、植入剂、缓释剂、缓释植入剂、缓释注射剂为优选，以缓释植入剂、控释植入剂或缓释注射剂为最优选。

该抗癌缓释植入剂中还可加入其它药用成分，如，但不限于，抗菌素、止疼药、抗凝药、止血药等。由于本发明抗癌缓释植入剂可使常规化疗、免疫治疗、高热治疗、光化学治疗、电疗、生物治疗、激素治疗、磁疗、超声治疗、放疗及基因治疗等方法的作用效果加强。因此在局部缓慢释放的同时可与上述非手术疗法合用，从而使其抗癌效果进一步加强。当与上述非手术疗法合用时，本发明抗癌缓释植入剂可与非手术疗法同时应用，也可在非手术疗法实施前几天内应用，其目的在于尽可能增强肿瘤的敏感性，从而为根治各种人体及动物原发和转移实体肿瘤提供一种更有效的新的方法，具有非常高的临床应用价值及显著的经济和社会效益。

当局部应用时，该组合物可直接放置或注射于原发或转移的实体肿瘤周围或瘤体内，可疑瘤细胞残存的部位，也可直接放置或注射于原发或转移的实体肿瘤全部或部分切除后所形成的腔内，也可直接放置或注射于不能手术切除的原发或转移的实体肿瘤内或附近；可单独用于肿瘤的治疗或用于防止术后复发，也可与放疗或化疗量和应用。

本发明的主要成份以生物可容性物质为支持物，故不引起异物反应。支持物体内放置后可降解吸收，故不再手术取出。因在肿瘤局部释放所含药物，从而选择性地提高并延长局部药物浓度，同时可降低由常规途径给药所造成的全身毒性反应。对各种实体肿瘤具有明显的治疗作用。

本发明抗癌组合物可通过许多方案予以实施，其目的只是为了进一步说明，并非对本发明的实施加以任何限制。

本发明的有效成份、缓释辅料和缓释调节剂制成缓释剂的方法和步骤为任意的，相关文献已有详细描述，包括若干种制备缓释制剂的方法：如，但不限于，(i)把载体支持物粉末与药物混合然后压制成植入剂，即所谓的混合法；(ii)把载体支持物熔化，与待包装的药物相混合，然后固体冷却，即所谓的熔融法；(iii)把载体支持物溶解于溶剂中，把待包装的药物溶解或分散于聚合物溶液中，然后蒸发溶剂，乾燥，即所谓的溶解法；(iv)喷雾干燥法；及(v)冷冻干燥法等。其中溶解法可用以微球的制造，其方法是任意的，抗癌缓释植入剂也可包装脂质体中。组合物的有效成分可均匀地包装于整个缓释辅料中，也可包装于载体支持物中心或其表面；可通过直接扩散或经多聚物降解的方式或如此两种方式将有效成分释放。可用任意的方法制备缓释植入剂，但有效成份、缓释辅料和缓释调节剂的组成和比例则经大量研究才可确定。

本发明缓释植入剂的制备方法步骤如下，但不限于此：

1、将称重的缓释辅料放入容器中，加一定量的有机溶剂溶解均匀，有机溶剂的量不严格限定，以充分溶解为宜。

2、加入称重之抗癌有效成份重新摇匀。抗癌有效成份与缓释辅料的用量比例因具体要求而定。

3、去除有机溶剂。真空干燥或低温干燥法均可。

4、将干燥后的固体组合物根据需要制成各种形状。

5、分装后射线灭菌(射线剂量因体积而异)备用。也可用其它方法灭菌。

(四)具体实施方式

实施例一、

将称重(85mg)的缓释辅料(分子量为15000-25000的PLGA，75∶25)放入容器中，加一定量的有机溶剂溶解混匀(以充分溶解为准)后，加入10mg依立替康和5mg甘露醇，重新摇匀后真空干燥去除有机溶剂。将干燥后的固体组合物立即成形，分装后射线灭菌，得到缓释植入剂含10％依立替康。该缓释植入剂在体外生理盐水中的释药时间为25-30天，在小鼠皮下的释药时间为26-32天，无突释。

实施例二

按实施例一所述方法制成缓释植入剂，但所含之抗癌有效成分为下列之一：

(1)1％-10％的依立替康和90％-99％的乙醇酸和羟基乙酸的共聚物和0.5％-15％的山梨醇或甘露醇；

(2)10％-20％的依立替康和80％-90％的乙醇酸和羟基乙酸的共聚物和0.5％-10％的山梨醇；

(3)20％-30％的依立替康和70％-80％的乙醇酸和羟基乙酸的共聚物和0.5％-10％的氯化钠；

(4)30％-40％的依立替康和60％-70％的乙醇酸和羟基乙酸的共聚物和0.25％-5％的甘露醇；

(5)5％的依立替康和93％的乙醇酸和羟基乙酸的共聚物和2％的氯化钠；

(6)10％的依立替康和85％的乙醇酸和羟基乙酸的共聚物和5％的甘露醇；

(7)20％的依立替康和75％的乙醇酸和羟基乙酸的共聚物和5％的甘露醇；

(8)30％的依立替康和65％的乙醇酸和羟基乙酸的共聚物和5％的甘露醇。

实施例三

将称重(80mg)的缓释辅料(分子量为20000-35000的PLGA，50∶50)和5mg氯化钠放入容器中，加一定量的有机溶剂溶解混匀(以充分溶解为准)后，加入15mg依立替康，重新摇匀后真空干燥去除有机溶剂。将干燥后的固体组合物立即成形，分装后射线灭菌，得到缓释植入剂含15％依立替康。该缓释植入剂在体外生理盐水中的释药时间为22-26天，在小鼠皮下的释药时间为22-28天，无突释。

实施例四

按实施例三所述方法制成缓释植入剂，所不同的是所含之抗癌有效成分为下列之一：

(A)1％的依立替康和和95％的聚乳酸和4％的甘露醇；

(B)5％的依立替康和和93％的聚乳酸和2％的甘露醇；

(C)10％的依立替康和85％的聚乳酸和5％的甘露醇；

(D)15％的依立替康和82％的聚乳酸和3％的氯化钠；

(E)20％的依立替康和78％的聚乳酸和2％的氯化钠。

实施例五

将称重(75mg)的缓释辅料(分子量为25000-35000的PLGA，75∶25)放入容器中，加一定量的有机溶剂溶解混匀(以充分溶解为准)后，加入15mg依立替康和10mg甘露醇，重新摇匀后真空干燥去除有机溶剂。将干燥后的固体组合物立即成形，分装后射线灭菌，得到缓释植入剂含15％依立替康。该缓释植入剂在体外生理盐水中的释药时间为28-35天，在小鼠皮下的释药时间为26-33天，无突释。

实施例六

(A)1％的依立替康和和90％的聚乳酸和9％的甘露醇；

(B)5％的依立替康和和90％的聚乳酸和5％的甘露醇；

(C)10％的依立替康和85％的聚乳酸和5％的甘露醇；

(D)15％的依立替康和82％的聚乳酸和3％的氯化钠；

(E)20％的依立替康和78％的聚乳酸和2％的氯化钠。

实施例七

将85mg聚苯丙生(对羧苯基丙烷(p-CPP)∶癸二酸(SA)为50∶50)和10mg甘露醇放入容器中，加入100毫升二氯甲烷溶解混匀后，加入5mg依立替康，重新摇匀后真空干燥去除有机溶剂。将干燥后的固体组合物立即成形，分装后射线灭菌，得含重量百分比5％依立替康缓释植入剂。该缓释植入剂在体外生理盐水中的释药时间为16-22天，在小鼠皮下的释药时间为18-25天。

实施例八

按实施例七所述方法制成缓释植入剂，但所不同的是所含抗癌有效成分为下列之一：

(1)5％的依立替康和90％的聚苯丙生和5％甘露醇；

(2)10％的依立替康和75％的聚苯丙生15％甘露醇；

(3)15％的依立替康和80％的聚苯丙生5％山梨醇；

(4)20％的依立替康和70％的聚苯丙生10％山梨醇。

实施例九

将80mg聚苯丙生(对羧苯基丙烷(p-CPP)∶癸二酸(SA)为30∶70)和5mg氯化钠放入容器中，加入100毫升二氯甲烷溶解混匀后，加入15mg依立替康，重新摇匀后真空干燥去除有机溶剂。将干燥后的固体组合物立即成形，分装后射线灭菌，得含重量百分比15％依立替康缓释植入剂。该缓释植入剂在体外生理盐水中的释药时间为18-25天，在小鼠皮下的释药时间为19-26天。

实施例十

按实施例十所述方法制成缓释植入剂，但所不同的是所含抗癌有效成分为下列之一：

(1)5％-15％的依立替康和85％-95％的聚苯丙生和1％-5％的甘露醇；

(2)15％-35％的依立替康和65％-85％的聚苯丙生和0.25％-7.5％的甘露醇；

(3)5％的依立替康和90％的聚苯丙生和5％甘露醇；

(4)10％的依立替康和75％的聚苯丙生15％甘露醇；

(5)15％的依立替康和80％的聚苯丙生5％山梨醇；

(6)20％的依立替康和70％的聚苯丙生10％山梨醇。

实施例十一

将85mg缓释辅料(分子量为25000-40000的聚乳酸(PLA))和10mg甘露醇放入容器中，加一定量的有机溶剂溶解混匀(以充分溶解为准)后，加入5毫克依立替康，重新摇匀后真空干燥去除有机溶剂。将干燥后的固体组合物立即成形，分装后射线灭菌，得到缓释植入剂含5％依立替康。该缓释植入剂在体外生理盐水中的释药时间为34-40天，在小鼠皮下的释药时间为35-42天。

实施例十二

按实施例十一所述方法制成缓释植入剂，所用缓释辅料选自下列之一或其组合：

(A)1％的依立替康和和95％的聚乳酸和4％的甘露醇；

(B)5％的依立替康和和93％的聚乳酸和2％的甘露醇；

(C)10％的依立替康和85％的聚乳酸和5％的甘露醇；

(D)15％的依立替康和82％的聚乳酸和3％的氯化钠；

(E)20％的依立替康和78％的聚乳酸和2％的氯化钠。

实施例十三

按实施例1到十一所述方法制成缓释植入剂，所用缓释辅料选自下列之一或其组合：

a)分子量为10000-20000、20000-35000或30000-50000的聚乳酸(PLA)；

b)分子量为15000-35000、35000-45000或45000-80000的聚乳酸和羟基乙酸的共聚物(PLGA)；

c)聚苯丙生(对羧苯基丙烷(p-CPP)∶癸二酸(SA)共聚物)，对羧苯基丙烷(p-CPP)与癸二酸(SA)的重量百分比为20∶80、30∶70、40∶60、50∶50或60∶40。

实施例十四

将70、80、90和95mg分子量峰值为10000-25000的p(LAEG-EOP)分别放入甲、乙、丙、丁四个容器中，然后每个中加100毫升二氯甲烷，溶解混匀后，分别向四个容器中加入30mg、20mg、10mg和5mg依立替康，重新摇匀后干燥法制备含30％、20％、10％和5％依立替康的缓释植入剂，其在体外生理盐水中的释药时间分别为52-56、44-48、36-40、和26-32天。

实施例十五

加工成缓释植入剂的方法步骤与实施例十四相同，但所不同的是p(LAEG-EOP)的分子量峰值为25000-45000，所含抗癌有效成分及其重量百分比为：

(1)1％-5％依立替康；

(2)5％-10％依立替康；

(3)10％-20％依立替康；

(4)20％-40％依立替康；

(5)5％的依立替康和93％的p(LAEG-EOP)和2％的氯化钠；

(6)10％的依立替康和85％的p(LAEG-EOP)和5％的甘露醇；

(7)20％的依立替康和75％的p(LAEG-EOP)和5％的甘露醇；

(8)30％的依立替康和65％的p(LAEG-EOP)和5％的甘露醇。

实施例十六

将70、80、90和95mg分子量峰值为10000-25000的p(DAPG-EOP)分别放入甲、乙、丙、丁四个容器中，然后每个中加100毫升二氯甲烷，溶解混匀后，分别向四个容器中加入30mg、20mg、10mg和5mg依立替康，重新摇匀后干燥法制备含30％、20％、10％和5％依立替康的缓释植入剂，其在体外生理盐水中的释药时间分别为62-56、46-50、37-42和33-40天。

实施例十七

加工成缓释植入剂的方法步骤与实施例十六相同，但所不同的是p(DAPG-EOP)的分子量峰值为25000-45000，所含抗癌有效成分及其重量百分比为：

(1)1％-5％依立替康；

(2)5％-10％依立替康；

(3)10％-20％依立替康；

(4)20％-40％依立替康；

(5)5％的依立替康和93％的p(DAPG-EOP)和2％的氯化钠；

(6)10％的依立替康和85％的p(DAPG-EOP)和5％的甘露醇；

(7)20％的依立替康和75％的p(DAPG-EOP)和5％的甘露醇；

(8)30％的依立替康和65％的p(DAPG-EOP)和5％的甘露醇。

实施例十八、肿瘤内植入依立替康对实体肿瘤的抑制作用

将肿瘤细胞(10⁵)接种于小鼠的右侧腋窝皮下，当肿瘤生长至0.8-1.5cm左右时将动物随机分为5组。用70％酒精消毒肿瘤表面皮肤，选择距肿瘤下缘1cm处，剪开1mm长切口，用穿刺针将依立替康植入剂植入肿瘤组织中，治疗后每3天测量肿瘤大小，植入剂包埋后21天处死动物，称体重后完整剥离肿瘤并称瘤重。计算肿瘤抑制率％，DAS.ver1.0药理学软件做统计学处理。

肿瘤抑制率＝(1-给药组平均瘤重/生理盐水组平均瘤重)×100％

实施例十九、肿瘤内植入依立替康缓释植入剂对小鼠肺癌的抑瘤作用

按照实施例十八所述方法和步骤检验依立替康缓释植入剂对小鼠肺癌的抑瘤作用。所用的植入剂辅料为PLGA(分子量为20000-25000，乙醇酸和羟基乙酸的共混比为75∶25)，源自实施例一。本次实验结果见表1。

表1

组别	治疗	肿瘤抑制率(％)	P值
				1	对照组
2	i.p.组	39	＞0.05
				3	5％组	49	＜0.05
4	10％组	54	＜0.01
				5	20％组	78	＜0.01

结果表明，依立替康植入剂较腹腔注射效果明显增强，不同剂量的依立替康植入剂能明显抑制肿瘤生长，肿瘤抑制率与药物剂量呈明显量效关系。

实施例二十比较缓释调节剂的作用

所用的植入剂来自实施例一，以不含缓释调节剂的三个组为阳性对照。实验结果见表2

表2

组别	治疗	肿瘤抑制率(％)	P值
				1	1％对照组	28
2	10％对照组	46
				3	20％对照组	68
4	1％组	58	＜0.05
				5	10％组	68	＜0.05
6	20％组	84	＜0.01

表2可以看出，不含缓释调节剂(甘露醇)的三个对照组1％、10％和20％依立替康植入剂的肿瘤抑制率分别为28％、46％和68％，与含缓释调节剂(甘露醇)的依立替康植入剂组比较，P值均小于0.001。说明含缓释调节剂的依立替康植入剂的抑瘤率明显提高。

实施例二十一、肿瘤内植入依立替康缓释植入剂对小鼠卵巢癌的抑瘤作用

按照实施例十八所述方法和步骤检验依立替康缓释植入剂对小鼠卵巢癌的抑瘤作用，所用的植入剂为5％、10％和20％聚苯丙生(对羧苯基丙烷(p-CPP)与癸二酸(SA)的重量百分比为50∶50)，来自实施例八。实验结果见表3。

表3

组别	治疗	肿瘤抑制率(％)	P值
				1	对照组
2	i.p.组	16	＞0.05
				3	5％组	36	＜0.05
4	10％组	54	＜0.01
				5	20％组	74	＜0.01

证明不同剂量的依立替康植入剂植入小鼠卵巢癌中能明显抑制肿瘤生长，肿瘤抑制率与药物剂量呈明显量效关系。依立替康植入剂肿瘤抑制率分别为36％、54％、74％，与依立替康局部注射组比较，低剂量组P值等于0.001，中、高剂量组P值均小于0.001。

实施例二十二肿瘤内植入依立替康缓释植入剂对小鼠食道癌的抑瘤作用

按照实施例十八所述方法和步骤检验依立替康缓释植入剂对小鼠食道癌的抑瘤作用，所用的植入剂选自实施例六。实验结果见表4。

表4

组别	治疗	肿瘤抑制率(％)	P值
				1	对照组
2	i.p.组	24	＞0.05
				3	5％组	44	＜0.05
4	10％组	68	＜0.01
				5	20％组	88	＜0.01

证明不同剂量的依立替康植入剂植入裸鼠模型人食管癌(9706)实体肿瘤中，均能明显抑制肿瘤生长，肿瘤抑制率与药物剂量呈明显量效关系。依立替康植入剂肿瘤抑制率分别为44％、68％、88％，与依立替康局部注射组比较，P值均小于0.001。

实施例二十三、肿瘤内植入依立替康缓释植入剂对小鼠胰腺癌的抑瘤作用

按照实施例十八所述方法和步骤检验依立替康缓释植入剂对小鼠胰腺癌的抑瘤作用，所用的植入剂辅料为PLGA(分子量为20000-25000，乙醇酸和羟基乙酸的共混比为50∶50)。依立替康在缓释植入剂中的含量为5％、10％和30％，来自实施例二.实验结果见表5。

表5

组别	治疗	肿瘤抑制率(％)	P值
				1	对照组
2	i.p.组	25	＞0.05
				3	5％组	46	＜0.05
4	10％组	72	＜0.01
				5	30％组	82	＜0.01

结果证明不同剂量的依立替康植入剂植入裸鼠模型人胰腺癌(JF305)实体肿瘤中，能明显抑制肿瘤生长，肿瘤抑制率与药物剂量呈明显量效关系。与依立替康局部注射组比较，P值均小于0.001。

实施例二十四、肿瘤内植入依立替康缓释植入剂对小鼠直肠癌的抑瘤作用

按照实施例十八所述方法和步骤检验依立替康缓释植入剂对小鼠直肠癌的抑瘤作用，所用的植入剂辅料为PLGA(分子量为25000-35000，乙醇酸和羟基乙酸的共混比为50∶50)。依立替康在缓释植入剂中的含量为7.5％、15％和25％.实验结果见表6。

表6

组别	治疗	肿瘤抑制率(％)	P值
				1	对照组
2	i.p.组	16	＞0.05
				3	7.5％组	40	＜0.05
4	15％组	68	＜0.01
				5	25％组	84	＜0.01

不同剂量的依立替康植入剂，能明显抑制肿瘤生长，肿瘤抑制率与药物剂量呈明显量效关系。依立替康植入剂肿瘤抑制率分别为40％、68％、84％，与依立替康局部注射组比较，P值均小于0.001。

实施例二十五、肿瘤内植入依立替康缓释植入剂对小鼠前列腺癌的抑瘤作用

按照实施例十八所述方法和步骤检验依立替康缓释植入剂对小鼠前列腺癌的抑瘤作用，所用的植入剂辅料为p(LAEG-EOP)(分子量为10000-25000)。依立替康在缓释植入剂中的含量为5％、10％和20％(来自实施例十四).实验结果见表7。

表7

组别	治疗	肿瘤抑制率(％)	P值
				1	对照组
2	i.p.组	28	＞0.05
				3	5％组	42	＜0.05
4	10％组	68	＜0.01
				5	20％组	80	＜0.01

结果表明，不同剂量的依立替康植入剂植入裸鼠模型人前列腺癌实体肿瘤中，能明显抑制肿瘤生长，肿瘤抑制率与药物剂量呈明显量效关系。依立替康植入剂肿瘤抑制率分别为42％、68％、80％，与依立替康局部注射组比较，P值均小于0.001。

实施例二十六、肿瘤内植入依立替康缓释植入剂对小鼠肝癌的抑瘤作用

按照实施例十八所述方法和步骤检验依立替康缓释植入剂对小鼠肝癌的抑瘤作用，所用的植入剂辅料为p(DAPG-EOP)(分子量为10000-25000)。依立替康在缓释植入剂中的含量为5％、10％和20％(来自实施例十六四).依立替康在缓释植入剂中的含量为7.5％、15％和25％.实验结果见表8。

表8

组别	治疗	肿瘤抑制率(％)	P值
				1	对照组
2	i.p.组	32	＞0.05
				3	5％组	46	＜0.05
4	10％组	70	＜0.01
				5	20％组	86	＜0.01

证明不同剂量的依立替康植入剂，能明显抑制肿瘤生长，肿瘤抑制率与药物剂量呈明显量效关系。依立替康植入剂肿瘤抑制率分别为46％、70％、86％，与依立替康局部注射组比较，P值均小于0.001。

进一步研究发现，肿瘤内植入依立替康缓释植入剂对骨肉瘤、胃癌、结肠癌、淋巴瘤、脑肿瘤、子宫颈癌、肾癌等其它实体肿瘤也具有很好的治疗作用，其作用明显超过依立替康腹腔注射组和局部注射组。另外，毒性反应明显低于依立替康腹腔注射组和局部注射组。缓释调节剂对该药物释放具有明显的调节作用。这一意外发现构成本发明的又一主要技术特征，为应用依立替康治疗实体肿瘤的提供了又一新的选择。

Claims (10)

1.依立替康缓释植入剂，其特征在于该缓释植入剂含抗癌有效量的依立替康、缓释辅料和0-15％的缓释调节剂，其中，

依立替康在缓释植入剂中的重量百分比为0.1％-40％；

缓释辅料选自聚(L-丙交酯-co-磷酸乙酯)或聚(L-丙交酯-co-磷酸丙酯)；

缓释调节剂选自木糖醇、低聚糖、甲壳素、钾盐、钠盐、甘露醇、山梨醇、透明质酸、胶原蛋白、软骨素、明胶及白蛋白中的一种或其组合 当缓释调节剂不为“0”时，缓释辅料选自聚乳酸、聚乳酸和羟基乙酸的共聚物、聚苯丙生。

2.据权利要求所述之抗癌缓释植入剂，其特征在于缓释辅料中聚乳酸的分子量峰值为15000-25000、25000-40000或40000-55000。

3.据权利要求1所述之缓释植入剂，其特征在于缓释辅料中乙醇酸和羟基乙酸的共聚物的分子量峰值为15000-25000、25000-35000、35000-45000或45000-80000

4.据权利要求1所述之抗癌缓释植入剂，其特征在于缓释辅料中乙醇酸和羟基乙酸的共聚物中乙醇酸与羟基乙酸的重量百分比为90∶10，80∶20，70∶30，60∶40，50∶50或40∶60。

5.据权利要求1所述之缓释植入剂，其特征在于缓释辅料中聚苯丙生中对羧苯基丙烷与癸二酸的重量百分比为20∶80，30∶70，40∶60，50∶50或60∶40。

6.据权利要求所述之缓释植入剂，其特征在于缓释辅料中聚(L-丙交酯-co-磷酸乙酯)的分子量峰值为15000-25000、25000-35000或35000-60000。

7.据权利要求1所述之缓释植入剂，其特征在于缓释辅料中聚(L-丙交酯-co-磷酸丙酯)的共聚物的分子量峰值为15000-30000、30000-40000或40000-80000。

8.根据权利要求1所述之缓释植入剂，其特征在于该缓释植入剂的抗癌有效成分中各组份及其在植入剂中的重量百分含量为下列之一：

(1)5％的依立替康和95％的聚(L-丙交酯-co-磷酸乙酯)；

(2)10％的依立替康和90％的聚(L-丙交酯-co-磷酸乙酯)；

(3)20％的依立替康和80％的聚(L-丙交酯-co-磷酸乙酯)；

(4)30％的依立替康和70％的聚(L-丙交酯-co-磷酸乙酯)；

(5)5％的依立替康和95％的聚(L-丙交酯-co-磷酸丙酯)；

(6)10％的依立替康和90％的聚(L-丙交酯-co-磷酸丙酯)；

(7)20％的依立替康和80％的聚(L-丙交酯-co-磷酸丙酯)；

(8)30％的依立替康和70％的聚(L-丙交酯-co-磷酸丙酯)。

9.根据权利要求1所述之缓释植入剂，其特征在于该缓释植入剂的抗癌有效成分中各组份及其在植入剂中的重量百分含量为下列之一：

(A)1％的依立替康和和95％的聚乳酸和4％的甘露醇；

(B)5％的依立替康和和93％的聚乳酸和2％的甘露醇；

(C)10％的依立替康和85％的聚乳酸和5％的甘露醇；

(D)15％的依立替康和82％的聚乳酸和3％的氯化钠；

(E)20％的依立替康和78％的聚乳酸和2％的氯化钠；

(F)5％的依立替康和93％的乙醇酸和羟基乙酸的共聚物和2％的氯化钠；

(G)10％的依立替康和85％的乙醇酸和羟基乙酸的共聚物和5％的甘露醇；

(H)20％的依立替康和75％的乙醇酸和羟基乙酸的共聚物和5％的甘露醇；

(I)30％的依立替康和65％的乙醇酸和羟基乙酸的共聚物和5％的甘露醇；

(J)5％的依立替康和92.5％的聚苯丙生和2.5％的甘露醇；

(K)15％的依立替康和75％的聚苯丙生和10％的甘露醇；

(L)5％的依立替康和93％的聚(L-丙交酯-co-磷酸乙酯)和2％的氯化钠；

(M)10％的依立替康和85％的聚(L-丙交酯-co-磷酸乙酯)和5％的甘露醇；

(N)20％的依立替康和75％的聚(L-丙交酯-co-磷酸乙酯)和5％的甘露醇；

(O)30％的依立替康和65％的聚(L-丙交酯-co-磷酸乙酯)和5％的甘露醇；

(P)5％的依立替康和93％的聚(L-丙交酯-co-磷酸乙酯)和2％的氯化钠；

(Q)10％的依立替康和85％的聚(L-丙交酯-co-磷酸乙酯)和5％的甘露醇；

(R)20％的依立替康和75％的聚(L-丙交酯-co-磷酸乙酯)和5％的甘露醇；

(S)30％的依立替康和65％的聚(L-丙交酯-co-磷酸乙酯)和5％的甘露醇。

10.根据权利要求1所述之缓释植入剂，其特征在于所述缓释植入剂用于制备治疗脑肿瘤、肝癌、肺癌、食管癌、胃癌、乳腺癌、胰腺癌、甲状腺癌、鼻咽癌、卵巢癌、子宫内膜癌、子宫颈癌、肾癌、前列腺癌、膀胱癌、结肠癌、直肠癌、睾丸癌、皮肤癌、淋巴瘤、头颈部肿瘤和起源于胆囊、口腔、外周神经系统、粘膜、腺体、血管、骨组织、淋巴结、眼睛的原发或继发的癌、肉瘤或癌肉瘤的药物制剂。