CN101182503A - 一种酸性液体纤维素酶的生产方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种酸性液体纤维素酶的生产方法，它是采用高产纤维素酶的绿色木霉突变株作为生产菌株，微晶纤维素和玉米浆作为发酵基料，经发酵处理，生产出酸性液体纤维素酶酸性。采用该方法制得的纤维素酶酶活高，成本低，发酵周期短，质量稳定，无毒无污染，可直接使用，而且具有生产工艺简单、操作简便、原料来源广泛、对环境无污染、适合大规模生产等优点。
Description
技术领域
本发明属于酶菌的制取技术领域，特别是一种酸性液体纤维素酶的生产方法。
背景技术
纤维素酶是由多种水解酶组成的一个复杂的酶系，根据各酶功能的差异，分为三大类：C1酶，又叫葡聚糖内切酶，作用于不溶性纤维素表面，随机水解β-1，4-糖苷键；Cx酶，又称葡聚糖外切酶，作用于纤维素线性分子末端，水解β-1，4-糖苷键；BG酶(又叫CB酶)，可将纤维二糖、纤维三糖水解成葡萄糖分子。利用纤维素酶和半纤维素酶可将纤维素和半纤维素降解成可发酵糖，进而通过发酵制取酒精、单细胞蛋白、有机酸、甘油、丙酮及其它重要的化学化工原料。纤维素酶也可用于纤维素、半纤维素的限制性降解，制备成功能性食品添加剂，如微晶纤维素、膳食纤维和功能性低聚糖等。目前，纤维素和半纤维素的利用是国际国内的研究热点课题，其目的是寻求开发利用地球上最丰富、最廉价的可再生资源——植物纤维的途径。此外，纤维素酶还广泛应用于饲料、食品、酿造、纺织、造纸、石油、中成药加工、饮料加工等行业。因此，纤维素酶具有非常广阔的应用前景。然而，我国纤维素酶的生产现状普遍存在酶活力低，存活率不高，易染杂菌，发酵周期长、生产质量不稳定，成本高，不能规模化生产等问题，导致纤维素酶短缺，市场价格居高不下，是制约纤维质原料原料利用的瓶颈。
发明内容
本发明的目的是提供一种酸性液体纤维素酶的生产方法，利用该方法生产的纤维素酶存活率高，发酵周期短，酶活力高，产品质量稳定，生产成本低，能够实现工业化生产。
实现本发明的目的所采取的技术方案是：生产纤维素酶的方法包括以下步骤：
1、菌种选取：在产生纤维素酶的菌株中挑选出绿色木霉突变株作为生产菌株，并在斜面菌台上保存备用；
2、菌种培养：将斜面菌台上的菌株放入培养瓶中在20～40℃的温度条件下培养1～3天，然后放入种子罐中进行通风搅拌培养12～40小时；
3、发酵处理：按重量百分比取0.5～20％的培养菌种、2～6％的微晶纤维素、0.5～3％的玉米浆、70～97％的水混合成发酵浆料，将发酵浆料放入发酵罐中进行通风搅拌发酵，并在发酵过程中每隔1～8个小时按初始发酵浆料重量流加0.01～0.1％的玉米浆和0.01～0.2％的微晶纤维素，温度控制在20～40℃之间，发酵72～200小时，滤去发酵浆料中的残渣，即制得酸性液体纤维素酶。
按照上述方法生产酸性液体纤维素酶，采用高产纤维素酶的绿色木霉突变株，微晶纤维素、玉米浆作为发酵基料，能够保证霉菌生长繁殖快，产品品质好，活力比现有技术生产的纤维素酶提高到2倍以上，同时可以缩短培养、发酵周期，提高生产效率，降低生产成本。该方法还具有生产工艺简单、操作简便、技术容易掌握、原料来源广泛、对环境无污染、适合大规模生产等优点。
本发明生产的酸性液体纤维素酶可广泛应用于饲料、纺织、石油、果蔬加工、造纸业、中成药加工，特别是生物质乙醇制取等领域。发酵得到酶制剂后分离出的固体残渣含有一定量的纤维素酶和菌体蛋白等营养物质，可用作饲料添加剂。
具体实施方式
本发明的酸性液体纤维素酶的生产方法是：先在产生纤维素酶的菌株中挑选出绿色木霉突变株作为生产菌株，以便提高生产效率，降低生产成本，将挑选的菌株存放在斜面菌台上，然后将长势良好的斜面菌台菌株接入三角瓶中在20～40℃的温度条件下培养1～3天，放入种子罐中进行通风搅拌培养12～40小时；再按重量百分比取0.5～20％的培养菌种、2～6％的微晶纤维素、0.5～3％的玉米浆与70～97％的水混合成发酵浆料，放入发酵罐中进行通风搅拌发酵，选用微晶纤维素和玉米浆作为发酵基料，在发酵过程中根据霉菌生长发酵情况，每隔1～8个小时按初始发酵浆料重量流加0.01～0.1％的玉米浆和0.01～0.2％的微晶纤维素，温度控制在20～40℃之间，霉菌生长快、长势好，则可频加、多加玉米浆和微晶纤维素，温度相对降低，反之则可延长补加间隔时间，减少补加量，适当提高发酵温度，发酵72～200小时，视菌体生长情况停止发酵，滤去发酵浆料中的残渣即可制成液体的纤维素酶，生产的霉菌活力高、品质好。
该方法采用高产纤维素酶的绿色木霉突变株作为生产菌株，在低糖培养基中能生长迅速而酶合成不受阻遏，并利用微晶纤维素、玉米浆等进行液体深层发酵生产纤维素酶制剂。制得的纤维素酶酶活与成本比值高，技术易掌握、发酵周期短、产品质量稳定，无毒无污染，完全可以达到我国卫生部2003年第4号公告中用作食品添加剂和饲料添加剂的标准。
实施例1
下面以50L发酵罐试验为实施例对本发明作以详细的说明。
先在纤维素酶中挑选出绿色木霉突变株作为生产菌株存放在斜面菌台上，然后将斜面菌台上的菌株接入三角培养瓶中在40℃的温度条件下培养1天，放入种子罐中进行通风搅拌培养12小时；再按重量百分比取0.5％的培养菌种、2％的微晶纤维素、0.5％的玉米浆与97％的水混合成发酵浆料，放入50L发酵罐中进行通风搅拌发酵，在发酵过程中每隔1个小时按初始发酵浆料重量流加0.01％的玉米浆和0.01％的微晶纤维素，温度控制在40℃，发酵72小时，滤去发酵浆料中的残渣即可制成液体的纤维素酶。
实施例2
下面再以20m3发酵罐试验为实施例对本发明作以详细的说明。
先在纤维素酶中挑选出绿色木霉突变株作为生产菌株存放在斜面菌台上，然后将斜面菌台上的菌株接入三角培养瓶中在20℃的温度条件下培养3天，放入种子罐中进行通风搅拌培养24小时；再按重量百分比取20％的培养菌种、6％的微晶纤维素、3％的玉米浆与71％的水混合成发酵浆料，放入20m3发酵罐中进行通风搅拌发酵，在发酵过程中每隔5个小时按初始发酵浆料重量流加0.1％的玉米浆和0.2％的微晶纤维素，温度控制在20℃，发酵120小时，滤去发酵浆料中的残渣即可制成液体的纤维素酶。
实施例3
下面再以20m3发酵罐试验为实施例对本发明作以详细的说明。
先在纤维素酶中挑选出绿色木霉突变株作为生产菌株存放在斜面菌台上，然后将斜面菌台上的菌株接入三角培养瓶中在30℃的温度条件下培养2天，放入种子罐中进行通风搅拌培养40小时；再按重量百分比取10％的培养菌种、4％的微晶纤维素、2％的玉米浆与84％的水混合成发酵浆料，放入20m3发酵罐中进行通风搅拌发酵，在发酵过程中每隔8个小时按初始发酵浆料重量流加0.05％的玉米浆和0.1％的微晶纤维素，温度控制在30℃，发酵200小时，滤去发酵浆料中的残渣即可制成液体的纤维素酶。
Claims (1)
1.一种液体酸性纤维素酶的发酵生产方法，其特征在于：它包括以下步骤：
(1)菌种选取：在产生纤维素酶的菌株中挑选出绿色木霉突变株作为生产菌株，并在斜面菌台上保存备用；
(2)菌种培养：将斜面菌台上的菌株放入培养瓶中在20～40℃的温度条件下培养1～3天，然后放入种子罐中进行通风搅拌培养12～40小时；
(3)发酵处理：按重量百分比取0.5～20％的培养菌种、2～6％的微晶纤维素、0.5～3％的玉米浆、70～97％的水混合成发酵浆料，将发酵浆料放入发酵罐中进行通风搅拌发酵，并在发酵过程中每隔1～8个小时按初始发酵浆料重量流加0.01～0.1％的玉米浆和0.01～0.2％的微晶纤维素，温度控制在20～40℃之间，发酵72～200小时，滤去发酵浆料中的残渣，即制得酸性液体纤维素酶。
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| CN (1) | CN101182503A (zh) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102154243A (zh) * | 2011-01-10 | 2011-08-17 | 南阳天冠生物发酵有限公司 | 一种微生物混合发酵生产液体纤维素酶的方法 |
| CN101875926B (zh) * | 2009-12-22 | 2011-12-28 | 安徽丰原发酵技术工程研究有限公司 | 一种液态纤维素酶的制备方法 |
| CN102392006A (zh) * | 2011-11-29 | 2012-03-28 | 天津工业生物技术研究所 | 一种提高利用木霉菌生产酸性纤维素酶的产量的生产方法 |
| CN107475223A (zh) * | 2017-09-22 | 2017-12-15 | 宜昌东阳光药业股份有限公司 | 一种酸性纤维素酶的生产方法 |
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2007
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Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101875926B (zh) * | 2009-12-22 | 2011-12-28 | 安徽丰原发酵技术工程研究有限公司 | 一种液态纤维素酶的制备方法 |
| CN102154243A (zh) * | 2011-01-10 | 2011-08-17 | 南阳天冠生物发酵有限公司 | 一种微生物混合发酵生产液体纤维素酶的方法 |
| CN102154243B (zh) * | 2011-01-10 | 2012-09-26 | 南阳天冠生物发酵有限公司 | 一种微生物混合发酵生产液体纤维素酶的方法 |
| CN102392006A (zh) * | 2011-11-29 | 2012-03-28 | 天津工业生物技术研究所 | 一种提高利用木霉菌生产酸性纤维素酶的产量的生产方法 |
| CN107475223A (zh) * | 2017-09-22 | 2017-12-15 | 宜昌东阳光药业股份有限公司 | 一种酸性纤维素酶的生产方法 |
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