CN101155583A - 有丝分裂驱动蛋白的抑制剂 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及氟化二氢吡唑化合物,其可用于治疗细胞增殖性疾病,用于治疗与KSP驱动蛋白活性有关的病症以及用于抑制KSP驱动蛋白。本发明还涉及包含这些化合物的组合物以及利用它们在哺乳动物中治疗癌症的方法。
Description
发明背景
本发明涉及二环二氢吡唑化合物,所述二环二氢吡唑化合物是有丝分裂驱动蛋白的抑制剂,特别是有丝分裂驱动蛋白KSP的抑制剂,并且可用于治疗细胞增殖性疾病,例如癌症、增生、再狭窄、心脏肥大、免疫病症和炎症。
用于治疗癌症的治疗剂有紫杉烷类和长春花生物碱类。紫杉烷类和长春花生物碱类作用于在多种细胞结构中存在的微管。微管是有丝分裂纺锤体的主要结构元件。有丝分裂纺锤体负责让基因组复制拷贝分配到细胞分裂所产生的两个子细胞中的每一个中。据推测,药物破坏有丝分裂纺锤体,导致癌细胞分裂被抑制,并且诱导癌细胞死亡。然而,微管形成其它类型细胞结构,包括神经处理过程中的细胞内传送路径。由于这些活性剂不能特异性地针对目标有丝分裂纺锤体,因此它们具有限制其应用的副作用。
用于治疗癌症的活性剂特异性的改善得到了很大关注,这是因为如果可以降低与施用这些活性剂有关的副作用,则可以实现治疗效益。传统上,癌症治疗方面的显著改善与经过鉴定通过新的作用机制起作用的治疗剂有关。这类治疗剂的实例不仅包括紫杉烷类,还包括拓扑异构酶I抑制剂。从这两方面来看,有丝分裂驱动蛋白是新抗癌剂的有吸引力的目标。
有丝分裂驱动蛋白是有丝分裂纺锤体装配和功能所必需的酶,但通常不是其它微管结构的部分,例如在神经处理中。微管驱动蛋白在有丝分裂的所有时期都起必不可少的作用。这些酶是“分子发动机”,其通过将ATP水解成机械力来释放转化能量,所生成的机械力驱动细胞沿着微管运动。足以进行这项作业的催化域是约340个氨基酸的紧凑结构。在有丝分裂期间,驱动蛋白将微管组织成为作为有丝分裂纺锤体的双极结构。驱动蛋白介导染色体沿着纺锤体微管移动以及与有丝分裂的特定时期有关的有丝分裂纺锤体中的结构改变。在实验中打乱有丝分裂驱动蛋白功能引起有丝分裂纺锤体变形或功能障碍,经常导致细胞周期停滞和细胞死亡。
已鉴定出的有丝分裂驱动蛋白有KSP。KSP属于正末端定向微管发动机的进化保守的驱动蛋白亚族,其装配成由反平行的同质二聚体组成的双极同质四聚体。在有丝分裂期间,KSP与有丝分裂纺锤体的微管缔合。将抗KSP的抗体微注射到人细胞内阻止了前中期期间纺锤体极的分离,生成单极纺锤体,并引起有丝分裂停滞和诱导程序化细胞死亡。在其它非人类生物体中,KSP和相关驱动蛋白捆住反平行的微管,并让它们彼此相对滑动,由此迫使两个纺锤体极分开。KSP也可以介导后期B纺锤体延伸,并将微管在纺锤体极处集中。
已经描述过人KSP(也称为HsEg5)[Blangy等人,Cell,83:1159-69(1995);Whitehead等人,Arthritis Rheum.,39:1635-42(1996);Galgio等人,J.Cell Biol.,135:339-414(1996);Blangy等人,J Biol.Chem.,272:19418-24(1997);Blangy等人,Cell Motil Cytoskeleton,40:174-82(1998);Whitehead和Rattner,J.Cell Sci.,111:2551-61(1998);Kaiser等人,JBC 274:18925-31(1999);GenBank登记号:X85137、NM004523和U37426],并且已经描述过KSP基因片段(TRIP5)[Lee等人,MolEndocrinol.,9:243-54(1995);GenBank登记号L40372]。非洲蟾蜍KSP同系物(Eg5)以及果蝇K-LP61F/KRP 130已报道过。
最近有人描述了作为KSP抑制剂的一些二氢吡唑和二氢吡咯化合物(PCT公布WO2003/079973,2003年10月2日;WO 2003/106417,2003年12月24日;WO 2003/105855,2003年12月24日;WO2004/037171,2004年5月6日和WO 2004/058148,2004年7月15日)。
有丝分裂驱动蛋白是发现和开发新的有丝分裂化疗剂的有吸引力的目标。因此,本发明的目的是提供可用于抑制KSP(有丝分裂驱动蛋白)的化合物、方法和组合物。
发明概述
本发明涉及可用于治疗细胞增殖性疾病,治疗与KSP驱动蛋白活性有关的病症以及抑制KSP驱动蛋白的氟化二氢吡唑衍生物。已令人惊讶地发现本发明的化合物与已往公开的在氨基烷基侧链上没有氟原子的KSP抑制剂化合物相比,表现出对PGP(p-糖蛋白)节导的流出物降低的敏感性。本发明化合物可用式I表示:
发明详述
本发明化合物可用于抑制有丝分裂驱动蛋白,并且由式I化合物或其药学上可接受的盐或立体异构体表示:
其中
a独立地是0或1;
b独立地是0或1;
m独立地是0、1或2;
n是0至3;
p是0至2;
R1选自:
1)C1-C10烷基,和
2)C3-C8环烷基,
所述烷基和环烷基任选地被一个或多个选自R6的取代基所取代;或
R2和R4独立地选自:
1)H,
2)ObC1-C10烷基,
3)C3-C8环烷基,
4)卤素,
5)CN,和
6)OH,
所述烷基和环烷基任选地被一个、两个或三个选自R6的取代基所取代;或
R3是卤素;
R5选自F和-CH2F;
R6独立地是:
1)(C=O)aObC1-C10烷基,
2)(C=O)aOb芳基,
3)C2-C10链烯基,
4)C2-C10炔基,
5)(C=O)aOb杂环基,
6)CO2H,
7)卤素,
8)CN,
9)OH,
10)ObC1-C6全氟烷基,
11)Oa(C=O)bNR8R9,
12)S(O)mRa,
13)S(O)2NR8R9,
14)氧原子,
15)CHO,
16)(N=O)R8R9,或
17)(C=O)aObC3-C8环烷基,
所述烷基、芳基、链烯基、炔基、杂环基和环烷基任选地被一个或多个选自R7的取代基所取代;
R7独立地选自:
1)(C=O)aOb(C1-C10)烷基,
2)Ob(C1-C3)全氟烷基,
3)氧原子,
4)OH,
5)卤素,
6)CN,
7)(C2-C10)链烯基,
8)(C2-C10)炔基,
9)(C=O)aOb(C3-C6)环烷基,
10)(C=O)aOb(C0-C6)亚烷基-芳基,
11)(C=O)aOb(C0-C6)亚烷基-杂环基,
12)(C=O)aOb(C0-C6)亚烷基-N(Rb)2,
13)C(O)Ra,
14)(C0-C6)亚烷基-CO2Ra,
15)C(O)H,
16)(C0-C6)亚烷基-CO2H,和
17)C(O)N(Rb)2,
18)S(O)mRa,和
19)S(O)2NR8R9;
所述烷基、链烯基、炔基、环烷基、芳基和杂环基任选地被至多三个选自Rb、OH、(C1-C6)烷氧基、卤素、CO2H、CN、O(C=O)C1-C6烷基、氧原子和N(Rb)2的取代基所取代;或
连接在同一个碳原子上的两个R7结合形成-(CH2)u-,其中u是3至6以及一个或两个碳原子任选地被选自O、S(O)m、-N(Ra)C(O)-、-N(Rb)-和-N(CORa)-的部分所替代;
R8和R9独立地选自:
1)H,
2)(C=O)ObC1-C10烷基,
3)(C=O)ObC3-C8环烷基,
4)(C=O)Ob芳基,
5)(C=O)Ob杂环基,
6)C1-C10烷基,
7)芳基,
8)C2-C10链烯基,
9)C2-C10炔基,
10)杂环基,
11)C3-C8环烷基,
12)SO2Ra,和
13)(C=O)NRb 2,
所述烷基、环烷基、芳基、杂环基、链烯基和炔基任选地被一个、两个或三个选自R6的取代基所取代;或
R8和R9可以与它们所连接的氮一起形成单环或二环杂环,所述杂环在每个环中具有5-7个环原子,并且除了所述氮以外,还任选地含有一个或两个选自N、O和S的另外的杂原子,所述单环或二环杂环任选地被一个、两个或三个选自R7的取代基取代;
Ra独立地选自(C1-C6)烷基、(C3-C6)环烷基、芳基和杂环基;和
Rb独立地选自H、(C1-C6)烷基、芳基、杂环基、(C3-C6)环烷基、(C=O)OC1-C6烷基、(C=O)C1-C6烷基或S(O)2Ra。
本发明的另一实施方案由式II化合物或其药学上可接受的盐或立体异构体表示:
其中
a独立地是0或1;
b独立地是0或1;
m独立地是0、1或2;
R1选自:
1)C1-C10烷基,和
2)C3-C8环烷基,
R2选自:
1)H,
2)C1-C4烷基,
3)卤素,和
4)OH,
所述烷基任选地被一个、两个或三个选自R6的取代基所取代;
R3选自氯、氟和溴;
R5是F;
R6独立地是:
1)(C=O)aObC1-C10烷基,
2)(C=O)aOb芳基,
3)C2-C10链烯基,
4)C2-C10炔基,
5)(C=O)aOb杂环基,
6)CO2H,
7)卤素,
8)CN,
9)OH,
10)ObC1-C6全氟烷基,
11)Oa(C=O)bNR8R9,
12)S(O)mRa,
13)S(O)2NR8R9,
14)氧原子,
15)CHO,
16)(N=O)R8R9,或
17)(C=O)aObC3-C8环烷基,
所述烷基、芳基、链烯基、炔基、杂环基和环烷基任选地被一个或多个选自R6的取代基所取代;
R7独立地选自:
1)(C=O)aOb(C1-C10)烷基,其中r和s独立地是0或1,
2)Ob(C1-C3)全氟烷基,其中r是0或1,
3)氧原子,
4)OH,
5)卤素,
6)CN,
7)(C2-C10)链烯基,
8)(C2-C10)炔基,
9)(C=O)aOb(C3-C6)环烷基,
10)(C=O)aOb(C0-C6)亚烷基-芳基,
11)(C=O)aOb(C0-C6)亚烷基-杂环基,
12)(C=O)aOb(C0-C6)亚烷基-N(Rb)2,
13)C(O)Ra,
14)(C0-C6)亚烷基-CO2Ra,
15)C(O)H,
16)(C0-C6)亚烷基-CO2H,和
17)C(O)N(Rb)2,
18)S(O)mRa,和
19)S(O)2NR8R9;
所述烷基、链烯基、炔基、环烷基、芳基和杂环基任选地被至多三个选自Rb、OH、(C1-C6)烷氧基、卤素、CO2H、CN、O(C=O)C1-C6烷基、氧原子和N(Rb)2的取代基所取代;或
连接在同一个碳原子上的两个R7结合形成-(CH2)u-,其中u是3至6以及一个或两个碳原子任选地被选自O、S(O)m、-N(Ra)C(O)-、-N(Rb)-和-N(CORa)-的部分所替代;
R8和R9独立地选自:
1)H,
2)(C=O)ObC1-C10烷基,
3)(C=O)ObC3-C8环烷基,
4)(C=O)Ob芳基,
5)(C=O)Ob杂环基,
6)C1-C10烷基,
7)芳基,
8)C2-C10链烯基,
9)C2-C10炔基,
1O)杂环基,
11)C3-C8环烷基,
12)SO2Ra,和
13)(C=O)NRb 2,
所述烷基、环烷基、芳基、杂环基、链烯基和炔基任选地被一个、两个或三个选自R6的取代基所取代;或
R8和R9可以与它们所连接的氮一起形成单环或二环杂环,所述杂环在每个环中具有5-7个环原子,并且除了所述氮以外,还任选地含有一个或两个选自N、O和S的另外的杂原子,所述单环或二环杂环任选地被一个、两个或三个选自R6的取代基取代;
Ra独立地选自(C1-C6)烷基、(C3-C6)环烷基、芳基和杂环基;和
Rb独立地选自H、(C1-C6)烷基、芳基、杂环基、(C3-C6)环烷基、(C=O)OC1-C6烷基、(C=O)C1-C6烷基或S(O)2Ra。
在本发明的又一实施方案由式III化合物或其药学上可接受的盐或立体异构体表示:
其中
a独立地是0或1;
b独立地是0或1;
m独立地是0、1或2;
R1选自:
1)C1-C10烷基,和
2)C3-C8环烷基,
R2选自:
1)H,
2)C1-C4烷基,
3)卤素,和
4)OH,
所述烷基任选地被一个、两个或三个选自R6的取代基所取代;
R3选自氯、氟和溴;
R5是-CH2F;
R6独立地是:
1)(C=O)aObC1-C10烷基,
2)(C=O)aOb芳基,
3)C2-C10链烯基,
4)C2-C10炔基,
5)(C=O)aOb杂环基,
6)CO2H,
7)卤素,
8)CN,
9)OH,
10)ObC1-C6全氟烷基,
11)Oa(C=O)bNR8R9,
12)S(O)mRa,
13)S(O)2NR8R9,
14)氧原子,
15)CHO,
16)(N=O)R8R9,或
17)(C=O)aObC3-C8环烷基,
所述烷基、芳基、链烯基、炔基、杂环基和环烷基任选地被一个或多个选自R6的取代基所取代;
R7独立地选自:
1)(C=O)aOb(C1-C10)烷基,其中r和s独立地是0或1,
2)Ob(C1-C3)全氟烷基,其中r是0或1,
3)氧原子,
4)OH,
5)卤素,
6)CN,
7)(C2-C10)链烯基,
8)(C2-C10)炔基,
9)(C=O)aOb(C3-C6)环烷基,
10)(C=O)aOb(C0-C6)亚烷基-芳基,
11)(C=O)aOb(C0-C6)亚烷基-杂环基,
12)(C=O)aOb(C0-C6)亚烷基-N(Rb)2,
13)C(O)Ra,
14)(C0-C6)亚烷基-CO2Ra,
15)C(O)H,
16)(C0-C6)亚烷基-CO2H,和
17)C(O)N(Rb)2,
18)S(O)mRa,和
19)S(O)2NR8R9;
所述烷基、链烯基、炔基、环烷基、芳基和杂环基任选地被至多三个选自Rb、OH、(C1-C6)烷氧基、卤素、CO2H、CN、O(C=O)C1-C6烷基、氧原子和N(Rb)2的取代基所取代;或
连接在同一个碳原子上的两个R7结合形成-(CH2)u-,其中u是3至6以及一个或两个碳原子任选地被选自O、S(O)m、-N(Ra)C(O)-、-N(Rb)-和-N(CORa)-的部分所替代;
R8和R9独立地选自:
1)H,
2)(C=O)ObC1-C10烷基,
3)(C=O)ObC3-C8环烷基,
4)(C=O)Ob芳基,
5)(C=O)Ob杂环基,
6)C1-C10烷基,
7)芳基,
8)C2-C10链烯基,
9)C2-C10炔基,
10)杂环基,
11)C3-C8环烷基,
12)SO2Ra,和
13)(C=O)NRb 2,
所述烷基、环烷基、芳基、杂环基、链烯基和炔基任选地被一个、两个或三个选自R6的取代基所取代;或
R8和R9可以与它们所连接的氮一起形成单环或二环杂环,所述杂环在每个环中具有5-7个环原子,并且除了所述氮以外,还任选地含有一个或两个选自N、O和S的另外的杂原子,所述单环或二环杂环任选地被一个、两个或三个选自R6的取代基取代;
Ra独立地选自(C1-C6)烷基、(C3-C6)环烷基、芳基和杂环基;和
Rb独立地选自H、(C1-C6)烷基、芳基、杂环基、(C3-C6)环烷基、(C=O)OC1-C6烷基、(C=O)C1-C6烷基或S(O)2Ra。
本发明化合物的具体例子包括:
(2S)-3-[(5R)-1-乙酰基-3-(2,5-二氟苯基)-5-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑-5-基]-2-氟代丙烷-1-胺
(2R)-3-[(5R)-1-乙酰基-3-(2,5-二氟苯基)-5-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑-5-基]-2-氟代丙烷-1-胺
(2S)-3-[(5R)-1-乙酰基-3-(2-氟-5-氯代苯基)-5-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑-5-基]-2-氟代丙烷-1-胺
(2S)-3-[(5R)-1-乙酰基-3-(2-氟-5-溴代苯基)-5-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑-5-基]-2-氟代丙烷-1-胺
(2S)-3-[(5R)-1-环丙酰基-3-(2,5-二氟苯基)-5-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑-5-基]-2-氟代丙-1-胺
(2S)-3-[(5R)-1-环丁酰基-3-(2,5-二氟苯基)-5-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑-5-基]-2-氟代丙烷-1-胺
[(1R)-3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2,5-二氟苯基)-5-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑-5-基]-1-(氟代甲基)丙基]胺
[(1S)-3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2,5-二氟苯基)-5-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑-5-基]-1-(氟代甲基)丙基]胺
或其药学上可接受的盐或立体异构体。
本发明的化合物可以具有不对称的中心、手性轴和手性平面(如在:E.L.Eliel和S.H.Wilen,Stereochemistry of Carbon Compounds,JohnWiley&Sons,New York,1994,第1119-1190页中所述的那样),并且可以以外消旋体、外消旋混合物的形式存在,并且可以以单个的非对映异构体的形式存在,以及包括旋光异构体在内的所有可能的异构体及其混合物,所有这些立体异构体都包括在本发明的范围内。此外,本文所公开的化合物可以以互变异构体的形式存在,即使仅描述出一种互变异构结构,这两种互变异构体也都被包括在本发明的范围内。
在任何要素中,当任何变量(例如R7、R8、R9等)出现一次以上时,其在每次出现时的定义都彼此独立。而且,取代基和变量的组合也仅在该类组合能产生稳定的化合物时才被允许。从取代基画到环系上的线表示所指的键可以连接到任何一个可取代的环原子上。如果该环系是多环的,则其指的是该键仅可以连接到最接近环上任何适宜的碳原子上。
应当理解的是,本领域的普通技术人员可以对本发明化合物上的取代基和取代模式进行选择,从而提供化学稳定的并易于通过现有技术中公知的技术以及下面所述的这些方法,从易于获得的原料来进行合成的化合物。如果一个取代基本身被一个以上的基团所取代,应当理解的是只要可以获得稳定的结构,这些多个基团可以位于相同的碳或不同的碳上。短语“任选地被一个或多个取代基所取代”应被看成与短语“任选地被至少一个取代基所取代”相同,并且在这类情况中,另一实施方案将具有0至3个取代基。
本文所用的“烷基”指的是包括具有指定数目碳原子的支链和直链饱和脂族烃基。例如,在“C1-C10烷基”中,C1-C10被定义为包括在直链或支链排列中具有1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个碳的基团。例如,“C1-C10烷基”具体包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基、戊基、己基、庚基、辛基、壬基、癸基等。术语“环烷基”是指具有指定数目碳原子的单环饱和脂族烃基。例如,“环烷基”包括环丙基、甲基-环丙基、2,2-二甲基-环丁基、2-乙基-环戊基、环己基等。在本发明的一个实施方案中,术语“环烷基”包括紧接的上文所述的基团并且还包括单环不饱和脂族烃基。例如,在该实施方案中定义的“环烷基”包括环丙基、甲基-环丙基、2,2-二甲基-环丁基、2-乙基-环戊基、环己基、环戊烯基、环丁烯基等。
术语“亚烷基”是指具有指定数目碳原子的烃二基。例如,“亚烷基”包括-CH2-、-CH2CH2-等。
当在短语“C1-C6芳烷基”和“C1-C6杂芳烷基”中使用时,术语“C1-C6”是指该基团的烷基部分并且没有描述在该基团的芳基和杂芳基部分中的原子数目。
“烷氧基”表示通过氧桥连接的具有指定数目碳原子的环状或非环状烷基。因此,“烷氧基”包括上述烷基和环烷基的定义。
如果没有指定碳原子数目,术语“烯基”指的是包含2至10个碳原子和至少1个碳碳双键的直链、支链或环状非芳族烃基。优选存在1个碳碳双键,并且可以存在至多4个非芳香的碳碳双键。因此,“C2-C6烯基”是指具有2至6个碳原子的烯基。烯基包括乙烯基、丙烯基、丁烯基、2-甲基丁烯基和环己烯基。烯基的直链、支链或环状部分可包含双键并且如果指出是取代的烯基时可以被取代。
术语“炔基”指的是包含2至10个碳原子和至少1个碳碳三键的直链、支链或环状烃基。可以存在至多3个碳碳三键。因此,“C2-C6炔基”是指具有2至6个碳原子的炔基。炔基包括乙炔基、丙炔基、丁炔基、3-甲基丁炔基等。炔基的直链、支链或环状部分可包含三键并且如果指出是取代的炔基时可以被取代。
在某些情况中,可以用包括0在内的碳范围对取代基进行定义,如(C0-C6)亚烷基-芳基。如果芳基是苯基,则该定义包括苯基本身以及-CH2Ph、-CH2CH2Ph、CH(CH3)CH2CH(CH3)Ph等。
本文所用“芳基”指的是在每个环中具有至多7个原子的任何稳定的单环或二环碳环,其中至少一个环是芳香性的。此类芳基的例子包括苯基、萘基、四氢萘基、2,3-二氢茚基和联苯基。在该芳基取代基是二环并且一个环是非芳香性的情况中,应当理解的是连接是通过芳环进行的。
本文所用的术语杂芳基表示在每个环中具有至多7个原子的稳定的单环或二环,其中至少一个环是芳香性的并且包含1至4个选自O、N和S的杂原子。该定义范围内的杂芳基包括但不限制于:吖啶基、咔唑基、噌啉基、喹喔啉基、吡唑基、吲哚基、苯并三唑基、呋喃基、噻吩基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、喹啉基、异喹啉基、唑基、异唑基、吲哚基、吡嗪基、哒嗪基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、四氢喹啉。如下面关于杂环的定义所述,应当理解“杂芳基”还包括任何含氮杂芳基的N-氧化物衍生物。在杂芳基取代基是二环并且一个环是非芳香环或不包含杂原子的情况中,应当理解的是其是分别通过芳环或包含杂原子的环连接的。
本文所用术语“杂环”或“杂环基”是指包含1-4个选自O、N和S的杂原子的3-10元芳族或非芳族杂环,并且包括二环基团。因此,“杂环基”包括上述杂芳基以及其二氢和四氢类似物。“杂环基”的其它例子包括但不限于下列基团:氮杂环丁烷基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并呋咱基、苯并吡唑基、苯并三唑基、苯并噻吩基、苯并唑基、咔唑基、卡啉基、噌啉基、呋喃基、咪唑基、二氢吲哚基、吲哚基、吲嗪基、吲唑基、异苯并呋喃基、异吲哚基、异喹啉基、异噻唑基、异唑基、萘并吡啶基、二唑基、唑基、唑啉、异唑啉、氧杂环丁烷基、吡喃基、吡嗪基、吡唑基、哒嗪基、吡啶并吡啶基、哒嗪基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、喹唑啉基、喹啉基、喹喔啉基、四氢吡喃基、四氢噻喃基、四氢异喹啉基、四唑基、四唑并吡啶基、噻二唑基、噻唑基、噻吩基、三唑基、1,4-二氧杂环己烷基、六氢氮杂基、哌嗪基、哌啶基、吡啶-2-酮基、吡咯烷基、吗啉基、硫代吗啉基、二氢苯并咪唑基、二氢苯并呋喃基、二氢苯并噻吩基、二氢苯并唑基、二氢呋喃基、二氢咪唑基、二氢吲哚基、二氢异唑基、二氢异噻唑基、二氢二唑基、二氢唑基、二氢吡嗪基、二氢吡唑基、二氢吡啶基、二氢嘧啶基、二氢吡咯基、二氢喹啉基、二氢四唑基、二氢噻二唑基、二氢噻唑基、二氢噻吩基、二氢三唑基、二氢氮杂环丁烷基、亚甲基二氧基苯基、四氢呋喃基和四氢噻吩基以及其N-氧化物。杂环取代基可通过碳原子或杂原子连接。
在一个实施方案中,本文所用的术语“杂环”或“杂环基”是指包含1-4个选自O、N和S的杂原子的5-10元芳族或非芳族杂环,并且包括二环基团。因此,在该实施方案中,“杂环基”包括上述杂芳基及其二氢和四氢类似物。“杂环基”的其它例子包括但不限于下列基团:苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并呋咱基、苯并吡唑基、苯并三唑基、苯并噻吩基、苯并唑基、咔唑基、卡啉基、噌啉基、呋喃基、咪唑基、二氢吲哚基、吲哚基、吲嗪基、吲唑基、异苯并呋喃基、异吲哚基、异喹啉基、异噻唑基、异唑基、萘并吡啶基、二唑基、唑基、唑啉、异唑啉、氧杂环丁烷基、吡喃基、吡嗪基、吡唑基、哒嗪基、吡啶并吡啶基、哒嗪基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、喹唑啉基、喹啉基、喹喔啉基、四氢吡喃基、四氢噻喃基、四氢异喹啉基、四唑基、四唑并吡啶基、噻二唑基、噻唑基、噻吩基、三唑基、氮杂环丁烷基、1,4-二氧杂环己烷基、六氢氮杂基、哌嗪基、哌啶基、吡啶-2-酮基、吡咯烷基、吗啉基、硫代吗啉基、二氢苯并咪唑基、二氢苯并呋喃基、二氢苯并噻吩基、二氢苯并唑基、二氢呋喃基、二氢咪唑基、二氢吲哚基、二氢异唑基、二氢异噻唑基、二氢二唑基、二氢唑基、二氢吡嗪基、二氢吡唑基、二氢吡啶基、二氢嘧啶基、二氢吡咯基、二氢喹啉基、二氢四唑基、二氢噻二唑基、二氢噻唑基、二氢噻吩基、二氢三唑基、二氢氮杂环丁烷基、亚甲二氧基苯基、四氢呋喃基和四氢噻吩基以及其N-氧化物。杂环取代基可通过碳原子或杂原子连接。
在另一个实施方案中,杂环选自2-氮杂酮、苯并咪唑基、2-二氮杂酮、咪唑基、2-咪唑烷二酮、吲哚基、异喹啉基、吗啉基、哌啶基、哌嗪基、吡啶基、吡咯烷基、2-哌啶酮、2-嘧啶酮、2-吡咯烷酮、喹啉基、四氢呋喃基、四氢异喹啉基和噻吩基。
正如本领域技术人员所意识到的那样,本文所用的“卤”或“卤素”是指包括氯、氟、溴和碘。
除非另有说明,否则烷基、链烯基、炔基、环烷基、芳基、杂芳基和杂环基取代基可以是取代或未取代的。例如(C1-C6)烷基可以被1、2或3个选自下列的取代基所取代:OH、氧原子、卤素、烷氧基、二烷基氨基,或杂环基如吗啉基、哌啶基等。在这种情况下,如果一个取代基是氧原子且另一个取代基是OH,则下列基团包括在该定义内:-(C=O)CH2CH(OH)CH3、-(C=O)OH、-CH2(OH)CH2CH(O)等。
在定义中,当在同一碳原子上的两个R7结合形成-(CH2)u-,所形成的部分由下列基团表示:
此外,这样的环状部分可任选包含杂原子。此类包含杂原子的环状部分的例子包括但不限于:
在一些情况下,R8和R9是这样定义的:它们可以与其所连接的氮一起形成单环或二环杂环,所述杂环在每个环中具有5-7个环原子,并且除了所述氮以外,还可以任选地含有一个或两个选自N、O和S的另外的杂原子,所述杂环任选地被一个或多个选自R6的取代基所取代。可由此形成的杂环的例子包括但不限于下列基团,注意所述杂环可任选地被一个或多个(在另一实施方案中为1、2或3个)选自R6的取代基所取代:
在一个实施方案中,R1选自甲基、环丙基和环丁基。
在一个实施方案中,R1选自C1-C10烷基、卤素和OH。在该实施方案的另一方面中,R2是氟。
在一个实施方案中,R3是氟。
在一个实施方案中,R4是氢。
在一个实施方案中,R6选自(C=O)aOb(C1-C10)烷基、Ob(C1-C3)全氟烷基、氧原子、OH、卤素、(C=O)aOb(C0-C6)亚烷基-芳基、(C=O)aOb(C0-C6)亚烷基-杂环基和S(O)mRa;所述烷基、芳基和杂环基任选地被一个或两个选自Rb、OH、(C1-C6)烷氧基、卤素、CO2H、CN、O(C=O)C1-C6烷基、氧原子和N(Rb)2的取代基所取代。
包括在本发明范围内的是式I化合物的游离形式以及其药学上可接受的盐和立体异构体。在本文中举例说明的一些具体化合物是胺化合物的质子化盐。术语“游离形式”是指非盐形式的胺化合物。所涵盖的药学上可接受的盐不仅包括例举的本文所描述的具体化合物的盐,还包括式I化合物的游离形式的所有常见的药学上可接受的盐。所述化合物的具体盐的游离形式可使用本领域已知的技术进行分离。例如,游离形式可通过用合适的稀的碱水溶液,如稀的氢氧化钠水溶液、碳酸钾水溶液、氨水和碳酸氢钠水溶液处理来再生。游离形式可在某些物理性质方面不同于其各自的盐形式,例如在极性溶剂中的溶解度不同,但是对于本发明目的而言,酸和碱的盐在药学上等同于其各自的游离形式。
本发明化合物的药学上可接受的盐可通过常规的化学方法由包含碱性或酸性部分的本发明的化合物来合成。通常,碱性化合物的盐是通过离子交换色谱或通过将游离碱与化学计量或过量的所需的成盐的无机酸或有机酸在适宜的溶剂或溶剂的各种组合中进行反应而制备的。类似地,酸性化合物的盐是通过与适宜的无机或有机碱进行反应而形成的。
因此,本发明化合物的药学上可接受的盐包括通过将碱性的本发明化合物与无机或有机酸反应而形成的本发明化合物的常规的无毒盐。例如,常规的无毒盐包括得自无机酸的盐,所述无机酸是例如盐酸、氢溴酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸、硝酸等,以及从有机酸制备的盐,所述有机酸是例如乙酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、硬脂酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、扑酸、马来酸、羟基马来酸、苯乙酸、谷氨酸、苯甲酸、水杨酸、对氨基苯磺酸、2-乙酰氧基-苯甲酸、富马酸、甲苯磺酸、甲磺酸、乙二磺酸、草酸、羟乙基磺酸、三氟乙酸等。
当本发明化合物是酸性时,合适的“药学上可接受的盐”是指由药学上可接受的无毒碱,包括无机碱和有机碱制备的盐。得自无机碱的盐包括铝盐、铵盐、钙盐、铜盐、三价铁盐、二价铁盐、锂盐、镁盐、锰盐、二价锰盐、钾盐、钠盐、锌盐等。铵盐、钙盐、镁盐、钾盐和钠盐是特别优选的。得自药学上可接受的无毒有机碱的盐包括下列碱的盐:伯胺、仲胺和叔胺,取代的胺,包括天然存在的取代的胺、环状胺和碱性离子交换树脂,如精氨酸、甜菜碱、咖啡因、胆碱、N,N1-二苄基乙二胺、二乙胺、2-二乙基氨基乙醇、2-二甲基氨基乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-乙基吗啉、N-乙基哌啶、葡糖胺、氨基葡糖、组氨酸、哈胺(hydrabamine)、异丙基胺、赖氨酸、甲基葡糖胺、吗啉、哌嗪、哌啶、聚胺树脂、普鲁卡因、嘌呤、可可碱、三乙胺、三甲胺、三丙胺、氨基丁三醇等。当本发明的化合物是酸性的时,术语“游离形式”是指其非盐形式的化合物,这样的酸性官能团仍然是质子化的。
上述药学上可接受的盐和其它常见的药学上可接受的盐的制备更详细地描述在Berg等人,“Pharmaceutical Salts,”J.Pharm.Sci.,1977:66:1-19中。
还应当注意,本发明化合物有可能是内盐或两性离子,因为在生理条件下,化合物中去质子化的酸性部分(例如羧基)可以是阴离子,并且该电荷可被质子化或烷基化的碱性部分(例如季氮原子)的阳离子电荷在内部平衡掉。具有内部平衡电荷,并因此不与分子间抗衡离子缔合的分离的化合物也可以被视为化合物的“游离形式”。
本发明的化合物可通过采用如下列反应方案所示的反应以及文献中已知的或实验步骤中例举的其它标准操作来制备。因此,下面举例说明的反应方案不受所列的化合物或出于举例说明目的而采用的任何具体取代基的限制。在反应方案中显示的取代基编号方式不是必须和权利要求中使用的取代基编号方式相关,并且当在上文式I的定义下允许多个取代基时,为了清楚起见,通常显示一个连接在所述化合物上的取代基。
反应方案
如反应方案A所示,适当取代的苯基异羟肟酸酯A-1与适当取代的乙炔A-2反应,得到苯甲酰基炔中间体A-3。铜介导的适当取代的苯基的偶合得到中间体A-4。然后中间体A-4可在乙酰氯存在下与肼进行反应,以得到N-酰基二氢吡唑A-5。末端羟基脱保护得到中间体A-6。氧化得到相应的羧酸A-7,接着通过掺入手性助剂而得到中间体A-8,可将A-8氟化以得到A-9。硼氢化锂还原将所述酰胺转化回羟甲基,以及羟基可随后转变为本发明的胺A-11。
反应方案B显示在支链氨基烷基侧链上引入氟。以与中间体A-6的合成类似的方式,得到中间体B-3,可将中间体B-3氧化,之后得到不饱和的氟化的酮B-4。然后可将中间体B-4氢化,接着通过还原性氨化以得到苄基保护的化合物B-5。除去所述保护基,得到本发明的化合物B-6。
反应方案A
反应方案A(续)
反应方案B
实用性
本发明的化合物可具有很多应用。本领域技术人员应当领会,可通过多种途径改变有丝分裂;也就是说,可通过提高或降低有丝分裂途径中组分的活性来影响有丝分裂。或者说,有丝分裂可通过抑制或激活一些组分将平衡打破来影响(例如中断)。类似的方法可用于改变减数分裂。
在一个实施方案中,本发明的化合物可用于调节有丝分裂纺锤体的形成,由此引起有丝分裂中延长的细胞周期停滞。此处的“调节”是指改变有丝分裂纺锤体形成,包括增强或减弱有丝分裂形成。此处的“有丝分裂纺锤体形成”是指微管组织通过有丝分裂驱动蛋白形成双极结构。本文中的“有丝分裂纺锤体功能障碍”是指有丝分裂停滞和单级纺锤体形成。
本发明的化合物可用于结合和/或调节有丝分裂驱动蛋白的活性。在一个实施方案中,有丝分裂驱动蛋白是有丝分裂驱动蛋白bimC亚族的成员(如美国专利No.6,284,480,第5栏所述)。在另一个实施方案中,有丝分裂驱动蛋白是人KSP,然而本发明化合物也可用于调节其它生物体的有丝分裂驱动蛋白的活性。在上下文中,调节是指提高或降低纺锤体极的分离,后者引起畸形,即有丝分裂纺锤体极张开,或引起有丝分裂纺锤体的形态混乱。包括在KSP定义的用于这些目的内的还有KSP的变体和/或片段。此外,本发明化合物也可以抑制其它有丝分裂驱动蛋白。
本发明的化合物可用于治疗或预防细胞增殖疾病。可通过本发明提供的方法和组合物治疗的病症包括但不限于癌症(下文进一步讨论)、自身免疫性疾病、关节炎、移植物排斥、炎性肠病,包括但不限于手术、血管成形术在内的医疗干预之后的增殖等。应当领会,在一些情况下,细胞可能处于高或低增殖状态(异常状态)并且仍然需要治疗。例如,在伤口愈合期间,细胞可以是“正常”增殖的,但可能希望提高增殖。类似地,如上所述,在农业方面,细胞可能处于“正常”状态,但是可能希望增殖调节来提高农作物产量,这是通过直接增加农作物生长或通过抑制不利地影响农作物的植物或生物体的生长来实现的。因此,在一个实施方案中,本发明包括应用于患有或最终将要患有任何一种这些病症或疾病的细胞或个体。
本发明提供的化合物、组合物和方法可特别地用于治疗和预防癌症,所述癌症包括实体瘤如皮肤癌、乳腺癌、脑癌、宫颈癌、睾丸癌等。在一个实施方案中,本发明的化合物用于治疗癌症。特别地,可用本发明的化合物、组合物和方法治疗的癌症包括但不限于:心脏:肉瘤(血管肉瘤、纤维肉瘤、横纹肌肉瘤、脂肉瘤)、粘液瘤、横纹肌瘤、纤维瘤、脂瘤和畸胎瘤;肺:支气管源性癌(鳞状细胞、未分化的小细胞、未分化的大细胞、腺癌)、肺泡(细支气管肺泡)癌、支气管腺瘤、肉瘤、淋巴瘤、软骨错构瘤、间皮瘤;胃肠:食管(鳞状细胞癌、腺癌、平滑肌肉瘤、淋巴瘤)、胃(癌、淋巴瘤、平滑肌肉瘤)、胰腺(管状腺癌、胰岛素瘤、升糖素瘤、胃泌素瘤、类癌瘤、瘤)、小肠(腺癌、淋巴瘤、类癌瘤、卡波西肉瘤、平滑肌瘤、血管瘤、脂瘤、神经纤维瘤、纤维瘤)、大肠(腺癌、管状腺癌、绒毛状腺癌、错构瘤、平滑肌瘤);泌尿生殖道:肾(腺癌、维尔姆斯瘤[成肾细胞瘤]、淋巴瘤、白血病)、膀胱和尿道(鳞状细胞癌、移行细胞癌、腺癌)、前列腺(腺癌、内瘤)、睾丸(精原细胞瘤、畸胎瘤、胚胎癌、畸胎癌、绒膜癌、肉瘤、间质细胞癌、纤维瘤、纤维腺癌、腺瘤样瘤、脂瘤);肝:肝细胞瘤(肝细胞癌)、胆管癌、成肝细胞瘤、血管肉瘤、肝细胞腺癌、血管瘤;骨:成骨肉瘤(骨肉瘤)、纤维肉瘤、恶性纤维组织细胞瘤、软骨肉瘤、Ewing’s肉瘤、恶性淋巴瘤(网状细胞肉瘤)、多发性骨髓瘤、恶性巨细胞瘤脊索瘤、骨软骨瘤(骨软骨外生骨疣)、良性软骨瘤、成软骨细胞瘤、软骨粘液样纤维瘤、骨样骨瘤和巨细胞瘤;神经系统:头颅(骨瘤、血管瘤、肉芽肿、黄瘤、畸形性骨炎)、脑膜(脑膜瘤、脑膜肉瘤、大脑胶质瘤)、脑(星形细胞瘤、成神经管细胞瘤、神经胶质瘤、室管膜瘤、生殖细胞瘤[松果体瘤]、多形性成胶质细胞瘤、少突胶原瘤、神经鞘瘤、成视网膜细胞瘤、先天性瘤)、脊髓神经纤维瘤、脑膜瘤、胶原瘤、肉瘤);妇科:子宫(子宫内膜癌)、子宫颈(子宫颈癌、肿瘤前子宫颈发育不良)、卵巢(卵巢癌[浆液性囊腺癌、粘液性囊腺癌、未分类型癌]、粒层-膜细胞癌、塞-莱细胞癌、无性细胞癌、恶性畸胎癌)、外阴(鳞状细胞癌、上皮内癌、腺癌、纤维肉瘤、黑素瘤)、阴道(明细胞癌、鳞状细胞癌、葡萄状肉瘤(胚胎性横纹肌肉瘤)、法洛皮欧管(癌));血液:血(骨髓白血病[急性和慢性]、急性成淋巴白血病、慢性淋巴细胞白血病、骨髓增生性疾病、多发性骨髓瘤、骨髓发育不良综合症)、霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤[恶性淋巴瘤];皮肤:恶性黑素瘤、基底细胞瘤、鳞状细胞癌、卡波西肉瘤、痣异常发育的痣、脂瘤、血管瘤、皮肤纤维瘤、瘢痕瘤、牛皮癣;以及肾上腺:成神经细胞瘤。因此,本文提供的术语“癌细胞”包括被任何一种上述病症影响的细胞。
本发明的化合物还可以用作抗真菌剂,这是如美国专利号6,284,480描述的通过调节binC驱动蛋白亚组的真菌成员的活性来实现的。
本发明的化合物可单独或依据标准的药学规范在药物组合物中与药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂联合给予哺乳动物,优选人。所述化合物可口服给药或肠胃外给药,包括静脉、肌内、腹膜、皮下、直肠和局部给药途径。
含有所述活性组分的药物组合物可以呈适于口服使用的形式,例如片剂、药片、锭剂、水溶液或油混悬液、分散粉剂或粒剂、乳液、硬或软胶囊、或糖浆剂或酏剂。用于口服使用的组合物可依据本领域用于制备药物组合物的任何已知方法制得,并且这样的组合物可包含一种或多种选自下列的物质:甜味剂、矫味剂、着色剂和防腐剂,以提供药学美观和适口的制剂。片剂含有活性组分以及与其混合的适于制备片剂的无毒的药学上可接受的赋形剂。这些赋形剂可以是例如惰性稀释剂,如碳酸钙、碳酸钠、乳糖、磷酸钙或磷酸钠;制粒剂和崩解剂,如微晶纤维素、羧甲基纤维素钠、玉米淀粉或海藻酸;粘合剂,如淀粉、明胶、聚乙烯吡咯烷酮或阿拉伯胶,和润滑剂,如硬脂酸镁、硬脂酸或滑石粉。片剂可以是未包衣的或可通过已知技术将其包衣以掩蔽药物的令人不愉快的味道或延迟其在胃肠道内的崩解和吸收,以及由此在更长的时间内提供持续的作用。例如,可使用水溶性味道掩蔽材料,如羟丙基-甲基纤维素或羟丙基纤维素,或者时间延迟材料,如乙基纤维素、乙酸丁酸纤维素。
用于口服使用的制剂还可以以硬明胶胶囊的形式被提供,其中活性组分与惰性固体稀释剂,例如碳酸钙、磷酸钙和高岭土混合,或以软明胶胶囊的形式被提供,其中活性成分与水溶性载体,例如聚乙二醇或油性介质,例如花生油、液体石蜡或橄榄油混合。
水混悬液含有活性物质以及与其混合的适于制备水混悬液的赋形剂。此类赋形剂是混悬剂,例如羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基-纤维素、海藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮、西黄蓍胶和阿拉伯树胶;分散剂或润湿剂可以是天然存在的磷脂例如卵磷脂,或烯化氧与脂肪酸的缩合产物例如聚氧乙烯硬脂酸酯,或烯化氧与长链脂族醇的缩合产物例如十七亚乙氧基鲸蜡醇,或者烯化氧与衍生自脂肪酸和己糖醇的偏酯的缩合产物,例如聚氧乙烯山梨糖醇单油酸酯,或者烯化氧与衍生自脂肪酸和己糖醇酸酐的偏酯的缩合产物,例如聚乙烯脱水山梨糖醇单油酸酯。水混悬液还可以含有一种或多种防腐剂例如对羟基苯甲酸乙酯或对羟基苯甲酸正丙酯,一种或多种着色剂,一种或多种矫味剂,和一种或多种甜味剂如蔗糖、糖精或天冬甜素。
油混悬液可通过将活性组分悬浮在植物油(例如花生油、橄榄油\芝麻油或椰子油)中,或者矿物油(例如液体石蜡)中来配制。油混悬液可含有增稠剂,例如蜂蜡、硬石蜡或鲸蜡醇。可加入例如上述的甜味剂以及矫味剂来提供适口的口服制剂。这些组合物可通过加入抗氧化剂(例如丁基化羟基苯甲醚或α-生育酚)来保存。
适于通过加入水来制备水混悬液的分散粉剂和粒剂提供了与分散剂或润湿剂、悬浮剂和一种或多种防腐剂混合的活性组分。合适的分散剂或润湿剂和混悬剂的例子通过上文已提到的那些来举例说明。还可以存在另外的赋形剂,例如甜味剂、矫味剂和着色剂。这些组合物可以通过加入抗氧剂(例如抗坏血酸)来保存。
本发明的药物组合物还可以呈水包油乳液的形式。油相可以是植物油例如橄榄油或花生油,或矿物油例如液体石蜡或这些油的混合物。合适的乳化剂是天然存在的磷脂,如大豆卵磷脂、和衍生自脂肪酸与己糖醇酸酐的酯或偏酯,例如脱水山梨糖醇单油酸酯,和所述偏酯与烯化氧的缩合产物,例如聚氧乙烯脱水山梨糖醇单油酸酯。乳液还可以包含甜味剂、矫味剂、防腐剂和抗氧剂。
糖浆剂和酏剂可以用甜味剂例如甘油、丙二醇、山梨糖醇或蔗糖配制。此类制剂还可包含缓和剂、防腐剂、矫味剂和着色剂以及抗氧化剂。
药物组合物可以呈无菌注射水溶液的形式。可使用的可接受的载体和溶剂是水、林格氏溶液和等渗的氯化钠溶液。
无菌注射制剂还可以是无菌注射的水包油微乳,其中活性成分被溶解在油相中。例如,可首先将活性成分溶解在大豆油与卵磷脂的混合物中。然后可将油溶液引入到水与甘油的混合物中,并加工形成微乳。
注射溶液或微乳液可通过局部快速浓注而被引入到患者血流中。或者,可能有利的是以能保持恒定的本发明化合物的循环浓度的方式施用溶液或微乳液。为了保持这样的恒定浓度,可使用连续静脉递送装置。这类装置的一个例子是Deltec CADD-PLUSTM型5400静脉内泵。
药物组合物可以呈用于肌内和皮下给药的无菌可注射水或油混悬液的形式。可根据已知方法,使用上文提到的合适的分散剂或润湿剂和混悬剂来配制该混悬液。所述无菌注射剂还可以是在无毒的胃肠外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌注射溶液或混悬液。例如在1,3-丁二醇中的溶液。此外,无菌不挥发油常用作溶剂或混悬介质。用于此目的的任何温和的不挥发油都可以被使用,其包括合成的甘油单酯或甘油二酯。此外,脂肪酸(如油酸)可用于制备可注射制剂。
式I化合物还可以以用于药物直肠给药的栓剂形式给药。这些组合物可通过将药物与合适的非刺激性赋形剂混合来制得,这样的赋形剂在常温下是固体,但是在直肠温度下是液体并在直肠中熔化而释放药物。这样的材料包括椰子油、甘油化的明胶、氢化植物油、不同分子量的聚乙二醇的混合物以及聚乙二醇的脂肪酸酯。
对于局部使用,可采用含有式I化合物的霜剂、膏剂、凝胶剂、溶液或混悬液等(对于这种应用,局部应用应当包括漱口水和含漱剂)。
本发明的化合物可以通过局部使用合适的鼻内载体和递送装置以鼻内形式给药,或者可使用本领域技术人员众所周知的透皮的皮肤贴剂的形式经透皮途径给药。为了以透皮递送系统给药,在整个给药方案期间,剂量当然应当是连续的而不是间歇的。本发明的化合物还可以作为栓剂给药,该栓剂采用的基质是例如椰子油、甘油明胶、氢化植物油、不同分子量的聚乙二醇的混合物以及聚乙二醇的脂肪酸酯。
当将本发明的化合物对人个体给药时,日剂量通常由处方医师决定,并且剂量一般随个体患者的年龄、体重、性别和反应以及患者症状的严重程度而变化。
在一个示例性应用中,将适当量的化合物给予正在接受癌症治疗的哺乳动物。给药剂量为约0.1mg/kg体重每天至约60mg/kg体重每天,优选为0.5mg/kg体重至约40mg/kg体重每天。
本发明的化合物还可以与已知的治疗剂和抗癌剂联合使用。例如,本发明的化合物可以与已知的抗癌剂联合使用。本发明化合物与其它抗癌剂或化疗剂的组合在本发明范围内。这样的活性剂的例子可见于Cancer Principles and Practice of Oncology,V.T.Devita和S.Hellman(编辑),第6版(2001年2月15日),Lippincott Williams&Wilkins Publishers。本领域技术人员能够认识到,根据药物的具体特性以及所涉及的癌症,活性剂的组合将是有用的。这样的抗癌剂包括下列:雌激素受体调节剂、雄激素受体调节剂、类视黄醇受体调节剂、细胞毒素剂/细胞生长抑制剂、抗增殖剂、异戊烯基-蛋白转移酶抑制剂、HMG-CoA还原酶抑制剂和其它血管生成抑制剂、细胞增殖和存活信号传导抑制剂、细胞凋亡诱导剂以及干扰细胞周期节点的活性剂。当与放疗联合应用时,本发明的化合物特别有用。
在一个实施方案中,本发明的化合物还可以与已知的抗癌剂联合使用,所述抗癌剂包括下列:雌激素受体调节剂、雄激素受体调节剂、类视黄醇受体调节剂、细胞毒素剂、抗增殖剂、异戊烯基-蛋白转移酶抑制剂、HMG-CoA还原酶抑制剂、HIV蛋白酶抑制剂、逆转录酶抑制剂和其它血管生成抑制剂。
“雌激素受体调节剂”是指无论采用什么机理,能干扰或抑制雌激素与受体结合的化合物。雌激素受体调节剂的例子包括但不限于他莫西芬、雷洛昔芬、艾多昔芬、LY353381、LY117081、托瑞米芬、福维司群、4-[7-(2,2-二甲基-1-氧原子丙氧基-4-甲基-2-[4-[2-(1-哌啶基)乙氧基]苯基]-2H-1-苯并吡喃-3-基]-苯基-2,2-二甲基丙酸酯、4,4’-二羟基二苯甲酮-2,4-二硝基苯基-腙和SH646。
“雄激素受体调节剂”是指无论采用什么机理,能干扰或抑制雄激素与受体结合的化合物。雌激素受体调节剂的例子包括非那雄胺(finasteride)和其它5α-还原酶抑制剂、尼鲁米特、氟他胺、比卡鲁胺、利阿唑和乙酰阿比特龙。
“类视黄醇受体调节剂”是指无论采用什么机理,能干扰或抑制类视黄醇与受体结合的化合物。这样的类视黄醇的例子包括贝沙罗汀、维甲酸、13-顺-视黄酸、9-顺-视黄酸、α-二氟甲基鸟氨酸、ILX23-7553、反-N-(4’-羟苯基)视黄酰胺和N-4-羧基苯基视黄酰胺。
“细胞毒素剂/细胞生长抑制剂”是指主要通过直接干扰细胞功能而引起细胞死亡或抑制细胞增殖,或者抑制或干扰细胞有丝分裂的化合物,包括烷基化剂、肿瘤坏死因子、嵌入剂、低氧可激活的化合物、微管抑制剂/微管稳定剂、有丝分裂驱动蛋白抑制剂、组蛋白脱乙酰酶抑制剂、与有丝分裂进程有关的激酶的抑制剂、抗代谢剂;生物反应调节剂;激素/抗激素治疗剂、造血生长因子、单克隆抗体靶向治疗剂、拓扑异构酶抑制剂、蛋白体抑制剂和遍在蛋白连接酶抑制剂。
细胞毒素剂的例子包括但不限于sertenef、恶液质素、异环磷酰胺、他索纳明、氯尼达明、卡铂、六甲蜜胺、泼尼莫司汀、二溴卫矛醇、雷莫司汀、福莫司汀、耐达铂、奥沙利铂、替莫唑胺、七铂、雌莫司汀、甲苯磺酸英丙舒凡、曲磷胺、尼莫司汀、二溴螺氯胺、嘌嘧替派、洛铂、沙铂、profiromycin、顺铂、伊罗夫文、dexifosfamide、顺-胺二氯(2-甲基-吡啶)铂、苄基鸟嘌呤、普磷酰胺、GPX100、(反式,反式,反式)-二-mu-(己烷-1,6-二胺)-mu-[二胺-铂(II)]二[二胺(氯)铂(II)]四氯化物、二吖丙啶基精氨、三氧化砷、1-(11-十二烷基氨基-10-羟基十一烷基)-3,7-二甲基黄嘌呤、佐柔比星、伊达比星、柔红霉素、比生群、米托蒽醌、吡柔比星、吡奈非特、戊柔比星、氨柔比星、抗瘤酮、3’-去氨基-3’-吗啉代-13-去氧-10-羟基去甲柔红霉素、annamycin、加柔比星、伊利奈法德、MEN10755和4-去甲氧基-3-去氨基-3-环乙亚胺基-4-甲基磺酰基-柔红霉素(参见WO00/50032)。
低氧可激活的化合物的一个例子是提拉扎明。
蛋白体抑制剂的例子包括但不限于乳胞素和bortezomib。
微管抑制剂/微管稳定剂的例子包括紫杉醇、硫酸长春地辛、3’,4’-二去氢-4’-去氧-8’-去甲长春碱、多西他塞、根霉素、多拉司他汀、羟乙磺酸米伏布林、auristatin、西马多丁、RPR109881、BMS184476、长春氨宁、cryptophycin、2,3,4,5,6-五氟-N-(3-氟-4-甲氧基苯基)苯磺酰胺、脱水长春碱、N,N-二甲基-L-缬氨酰基-L-缬氨酰基-N-甲基-L-缬氨酰基-L-脯氨酰基-L-脯氨酸-叔丁基酰胺、TDX258、大环内酯类抗肿瘤剂(epothilones)(参见美国专利No.6,284,781和6,288,237)以及BMS188797。
拓扑异构酶抑制剂的一些例子是脱泊替康、hycaptamine、伊立替康、鲁比替康、6-乙氧基丙酰基-3’,4’-O-外型-亚苄基-教酒菌素、9-甲氧-N,N-二甲基-5-硝基吡唑并[3,4,5-k1]吖啶-2-(6H)丙胺、1-氨基-9-乙基-5-氟-2,3-二氢-9-羟基-4-甲基-1H,12H-苯并[de]吡喃并[3’,4’:b,7]-吲嗪并[1,2b]喹啉-10,13(9H,15H)二酮、勒托替康、7-[2-(N-异丙基氨)乙基]-(20S)喜树碱、BNP 1350、BNPI1100、BN80915、BN80942、磷酸依托泊苷、替尼泊苷、索不佐生、2’-二甲基氨基-2’-去氧-依托泊苷、GL331、N-[2-(二甲基氨基)乙基]-9-羟基-5,6-二甲基-6H-吡啶并[4,3-b]咔唑-1-甲酰胺、asulacrine、(5a,5aB,8aa,9b)-9-[2-[N-[2-(二甲基氨基)乙基]-N-甲基氨基]乙基]-5-[4-羟基-3,5-二甲氧基苯基]-5,5a,6,8,8a,9-六氢呋喃并(3’,4’:6,7)萘并(2,3-d)-1,3-二唑-6-酮、2,3-(亚甲基二氧基)-5-甲基-7-羟基-8-甲氧基苯并[c]-菲啶、6,9-二[(2-氨基乙基)氨基]苯并[g]异喹啉-5,10-二酮、5-(3-氨基丙基氨基)-7,10-二羟基-2-(2-羟基乙基氨基甲基)-6H-吡唑并[4,5,1-de]吖啶-6-酮、N-[1-[2(二乙基氨基)乙基氨基]-7-甲氧-9-氧原子-9H-噻吨-4-基甲基]甲酰胺、N-(2-(二甲基氨基)乙基)吖啶-4-甲酰胺、6-[[2-(二甲基氨基)乙基]氨基]-3-羟基-7H-茚并[2,1-c]喹啉-7-酮和地美司钠。
有丝分裂驱动蛋白,特别是人有丝分裂驱动蛋白KSP的抑制剂的例子描述于PCT公布WO01/30768、WO01/98278、WO03/050,064、WO03/050,122、WO03/049,527、WO03/049,679、WO03/049,678和WO03/39460以及待决的PCT申请No.US03/06403(2003年3月4日申请)、US03/15861(2003年5月19日申请)、US03/15810(2003年5月19日申请)、US03/18482(2003年6月12日申请)和US03/18694(2003年6月12日申请)。在一个实施方案中,有丝分裂驱动蛋白抑制剂包括但不限于KSP抑制剂、MKLP1抑制剂、CENP-E抑制剂、MCAK抑制剂、Kif14抑制剂、Mphosph1抑制剂和Rab6-KIFL抑制剂。
“与有丝分裂进程有关的激酶的抑制剂”包括但不限于极光激酶抑制剂、Polo-样激酶(PLK)抑制剂(特别是PLK-1抑制剂)、bub-1抑制剂和bub-R1抑制剂。
“抗增殖剂”包括反义RNA和DNA寡核苷酸例如G3139、ODN698、RVASKRAS、CEM231和INX3001,和抗代谢药物例如伊诺他滨、卡莫氟、替加氟、喷丝他丁、去氧氟尿苷、三甲曲沙、氟达拉滨、卡培他滨、加洛他滨、阿糖胞苷、ocfoafate、fosteabine钠水合物、雷替曲塞、paltitrexid、乙嘧替氟、噻唑呋林、地西他滨、诺拉曲塞、培美曲赛、奈拉滨、2’-去氧-2’-亚甲基胞苷、2’-氟亚甲基-2’-去氧胞苷、N-[5-(2,3-二氢-苯并呋喃基)磺酰基]-N’-(3,4-二氯苯基)脲、N6-[4-去氧-4-[N2-[2(E),4(E)-十四碳二烯酰基]甘氨酰基氨基]-L-甘油基-B-L-甘露-吡喃庚糖基]腺嘌呤、aplidine、ecteinascidin、曲沙他宾、4-[2-氨基-4-氧原子-4,6,7,8-四氢-3H-嘧啶并[5,4-b][1,4]噻嗪-6-基-(S)-乙基]-2,5-噻吩酰基-L-谷氨酸、氨喋呤、5-氟尿嘧啶、阿拉诺新、11-乙酰基-8-(氨基甲酰氧基甲基)-4-甲酰基-6-甲氧基-14-氧杂-1,11-二氮杂四环(7.4.1.0.0)-十四碳-2,4,6-三烯-9-基乙酸酯、八氢吲嗪三醇、洛美曲索、右雷佐生、甲硫氨酸酶(methioninase)、2’-氰基-2’-去氧-N4-棕榈酰基-1-B-D-阿拉伯呋喃糖基胞嘧啶和3-氨基吡啶-2-甲醛缩氨基硫脲。
单克隆抗体靶向治疗剂的例子包括具有连接在癌细胞特异性或靶向细胞特异性单克隆抗体上的细胞毒性剂或放射性同位素的治疗剂。其实例包括Bexxar。
“HNG-CoA还原酶抑制剂”是指3-羟基-3-甲基戊二酰-CoA还原酶的抑制剂。可以使用的HMG-CoA还原酶抑制剂的例子包括但不限于洛伐他汀(MEVACOR;参见美国专利No.4,231,938、4,294,926和4,319,039)、辛伐他汀(ZOCOR;参见美国专利No.4,444,784、4,820,850和4,916,239)、普伐他汀(PRAVACHOL;参见美国专利No.4,346,227、4,537,859、4,410,629、5,030,447和5,180,589)、氟伐他汀(LESCOL;参见美国专利No.5,354,772、4,911,165、4,929,437、5,189,164、5,118,853、5,290,946和5,356,896)、阿托伐他汀(LIPITOR;参见美国专利号5,273,995、4,681,893、5,489,691和5,342,952)。在M.Yalpani,“Cholesterol Lowering Drugs”Chernistry&Industry,pp.85-89(1996年2月5日)和美国专利No.4,782,084和4,885,314中对可于用本发明方法的这些和另外的HMG-CoA还原酶抑制剂的结构式进行了描述。本文所用的术语HMG-CoA还原酶抑制剂包括具有HMG-CoA还原酶抑制活性的化合物的所有药学上可接受的内酯和开环的-酸形式(即其内酯环被打开从而形成游离酸)以及盐和酯形式,因此在本发明的范围内也包括使用该类盐、酯、开环的酸和内酯形式。
“异戊烯基-蛋白转移酶抑制剂”是指抑制任一种异戊烯基-蛋白转移酶或其任何组合的化合物,所述异戊烯基-蛋白转移酶包括法尼基-蛋白转移酶(FPTase)、I型香叶基香叶基-蛋白转移酶(GGPTase-I)和II型香叶基香叶基-蛋白转移酶(GGPTase-II,也称为Rab GGPTase)。
异戊烯基-蛋白转移酶抑制剂的例子可见于下列出版物和专利:WO96/30343、WO97/18813、WO97/21701,WO97/23478、WO97/38665、WO98/28980、WO98/29119、WO95/32987、美国专利No.5,420,245、美国专利No.5,523,430、美国专利No.5,532,359、美国专利No.5,510,510、美国专利No.5,589,485、美国专利No.5,602,098、欧洲专利公布0618221、欧洲专利公布0675112、欧洲专利公布0604181、欧洲专利公布0696593、WO94/19357、WO95/08542、WO95/11917、WO95/12612、WO95/12572、WO95/10514、美国专利No.5,661,152、WO95/10515、WO95/10516、WO95/24612、WO95/34535、WO95/25086、WO96/05529、WO96/06138、WO96/06193、WO96/16443、WO96/21701、WO96/21456、WO96/22278、WO96/24611、WO96/24612、WO96/05168、WO96/05169、WO96/00736、美国专利No.5,571,792、WO96/17861、WO96/33159、WO96/34850、WO96/34851、WO96/30017、WO96/30018、WO96/30362、WO96/30363、WO96/31111、WO96/31477、WO96/31478、WO96/31501、WO97/00252、WO97/03047、WO97/03050、WO97/04785、WO97/02920、WO97/17070、WO97/23478、WO97/26246、WO97/30053、WO97/44350、WO98/02436和美国专利No.5,532,359。异戊烯基-蛋白转移酶抑制剂对血管生成的作用的实例参见European J.of Cancer,Vol.35,No.9,pp.1394-1401(1999)。
“血管生成抑制剂”是指无论采用什么机理,能抑制新血管形成的化合物。血管生成抑制剂的例子包括但不限于酪氨酸激酶抑制剂(例如酪氨酸激酶受体Flt-1(VEGFR1)和Flk-1/KDR(VEGFR2)的抑制剂),上皮衍生、成纤维细胞衍生或血小板衍生生长因子的抑制剂,MMP(基质金属蛋白酶)抑制剂,整联蛋白阻断剂,α-干扰素,白介素-12,多硫酸戊聚糖,环加氧酶抑制剂,包括非甾体类抗炎剂(NASID)如阿司匹林和布洛芬以及选择性环加氧酶-2抑制剂如噻来考昔和罗非考昔(PNAS,Vol.89,p.7384(1992);JNCI,Vol.69,p.475(1982);Arch.Opthalmol.,Vol.108,p.573(1990);Anat.Rec.,Vol.238,p.68(1994);FEBS Letters,Vol.372,p.83(1995);Clin.Orthop.Vol.313,p.76(1995);J.Mol.Endocrinol.,Vol.16,p.107(1996);Jpn.J.Pharmacol.,Vol.75,p.105(1997);Cancer Res.,Vol.57,p.1625(1997);Cell,Vol.93,p.705(1998);Intl.J.Mol.Med.,Vol.2,p.715(1998);J.Biol.Chem.,Vol.274,p.9116(1999)),甾体类抗炎剂(例如皮质甾类、盐皮质类固醇、地塞米松、泼尼松、泼尼松龙、甲泼尼松龙、倍他米松)、羧基酰氨基三唑、考布他汀A-4、角鲨胺、6-O-氯乙酰基-羰基)-烟曲霉醇、沙力度胺、血管生长抑素、肌原蛋白-1、血管紧张素II拮抗剂(参见Fernandez等人,J.Lab.Clin.Med.105:141-145(1985))和VEGF的抗体(参见NatureBiotechnology,Vol.17,pp.963-968(1999年10月);Kim等人,Nature,362,841-844(1993);WO00/44777;和WO00/61186)。
调节或抑制血管生成并且可以与本发明化合物联合使用的其它治疗剂包括调节或抑制凝血或血纤维蛋白溶解系统的活性剂(参见Clin.Chem.La.Med.38:679-692(2000))。调节或抑制凝血或血纤维蛋白溶解路径的活性剂的例子包括但不限于肝素(参见Thromb.Haemost.80:10-23(1998))、低分子量肝素和羧肽酶U抑制剂(也称为活性凝血酶活化血纤维蛋白溶解抑制剂[TAFIa])(参见Thrombosis Res.101:329-354(2001))。TAFIa抑制剂已经描述在PCT公布WO03/013,526和U.S.系列号60/349,925(2002年1月18日申请)中。
“干扰细胞周期节点的活性剂”是指抑制转换细胞周期节点信号的蛋白激酶,由此增强癌细胞对DNA破坏剂的敏感性的化合物。这样的活性剂包括ATR、ATM、Chk1和Chk2激酶的抑制剂,以及cdk和cdc激酶抑制剂,其具体例子为7-羟基星孢素、flavopiridol、CYC202(Cyclacel)和BMS-387032。
“细胞增殖和存活信号传导路径抑制剂”是指抑制细胞表面受体信号传导和这些表面受体信号传导级联下游的化合物。这样的活性剂包括EGFR抑制剂(例如gefitinib和erlotinib)、ERB-2抑制剂(例如trastuzumab)、IGFR抑制剂、胞质分裂受体的抑制剂、MET抑制剂、PDK抑制剂(例如LY294002)、丝氨酸/苏氨酸激酶抑制剂(包括但不限于Akt的抑制剂,如在WO02/083064、WO02/083139、WO02/083140和WO02/083138中描述的那些)、Raf激酶抑制剂(例如BAY-43-9006)、MEK抑制剂(例如CI-1040和PD-098059)和mTOR抑制剂(例如WyethCCI-779)。这样的活性剂包括小分子抑制剂化合物和抗体拮抗剂。
“细胞凋亡诱导剂”包括受体家族成员(包括TRAIL受体)的活化剂。
本发明还包括与作为选择性COX-2抑制剂的NSAID的组合。对于本说明书的目的,作为选择性COX-2抑制剂的NSAID定义为具有如下特异性的NSAID:其对COX-2的抑制作用比对COX-1的抑制作用强至少100倍,这是通过细胞或微粒体测定评估的COX-2的IC50与COX-1的IC50的比例来衡量的。这样的化合物包括但不限于在以下公开的那些:美国专利5,474,995、美国专利5,861,419、美国专利6,001,843、美国专利6,020,343、美国专利5,409,944、美国专利5,436,265、美国专利5,536,752、美国专利5,550,142、美国专利5,604,260、美国专利5,698,584、美国专利5,710,140、WO94/15932、美国专利5,344,991、美国专利5,134,142、美国专利5,380,738、美国专利5,393,790、美国专利5,466,823、美国专利5,633,272和美国专利5,932,598,所有这些专利均引入本文作为参考。
可特别用于本发明治疗方法的COX-2抑制剂是:3-苯基-4-(4-(甲基磺酰基)苯基)-2-(5H)-呋喃酮;和5-氯-3-(4-甲基磺酰基)-苯基-2-(2-甲基-5-吡啶基)吡啶;或其药学上可接受的盐。
已描述为具体的COX-2抑制剂并因此可用于本发明的化合物包括但不限于:parecoxib、CELEBREX和BEXTRA或其药学上可接受的盐。
血管生成抑制剂的其它例子包括但不限于:内皮生长抑素、ukrain、豹蛙酶、IM862、5-甲氧基-4-[2-甲基-3-(3-甲基-2-丁烯基)氧杂环丁烷基]-1-氧杂螺[2,5]辛-6-基(氯乙酰基)氨基甲酸酯、乙酰基dinanaline、5-氨基-1-[[3,5-二氯-4-(4-氯苯甲酰基)苯基]甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺、CM101、角鲨胺、考布他汀、RPI4610、NX31838、硫酸化甘露戊糖磷酸酯、7,7-(羧基-二[亚氨基-N-甲基-4,2-吡咯基羰基亚氨基[N-甲基-4,2-吡咯]-羰基亚氨基]-二-(1,3-萘二磺酸酯)和3-[(2,4-二甲基吡咯-5-基)亚甲基]-2-二氢吲哚啉(SU5416)。
如上所用的“整联蛋白阻断剂”是指可以选择性拮抗、抑制或抵消生理学配体与αvβ3整联蛋白结合的化合物,可以选择性拮抗、抑制或抵消生理学配体与αvβ5整联蛋白结合化合物,可以拮抗、抑制或抵消生理学配体αvβ3整联蛋白和αvβ5整联蛋白结合化合物,以及可以拮抗、抑制或抵消在毛细管内皮细胞上表达的特定整联蛋白的活性的化合物。该术语还涉及αvβ6、αvβ8、α1β1、α2β1、α5β1、α6β1和α6β4整联蛋白的拮抗剂。该术语还涉及αvβ3、αvβ5、αvβ6、αvβ8、α1β1、α2β1、α5β1、α6β1和α6β4整联蛋白的任何组合的拮抗剂。
酪氨酸激酶抑制剂的一些具体例子包括N-(三氟甲基苯基)-5-甲基异唑-4-甲酰胺、3-[(2,4-二甲基吡咯-5-基)亚甲基]二氢吲哚-2-酮、17-(烯丙基氨基)-17-去甲氧基格尔德霉素、4-(3-氯-4-氟苯基氨基)-7-甲氧基-6-[3-(4-吗啉基)丙氧基]喹唑啉、N-(3-乙炔基苯基)-6,7-二(2-甲氧基乙氧基)-4-喹唑啉胺、BIBX1382、2,3,9,10,11,12-六氢-10-(羟基甲基)-10-羟基-9-甲基-9,12-环氧-1H-二吲哚并[1,2,3-fg:3’,2’,1’-k1]吡咯并[3,4-i][1,6]苯并二氮芳辛-1-酮、SH268、金雀异黄素、imatinib(STI571)、CEP2563、4-(3-氯苯基氨基)-5,6-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶甲磺酸盐、4-(3-溴-4-羟基苯基)氨基-6,7-二甲氧基喹唑啉、4-(4’-羟基苯基)氨基-6,7-二甲氧基喹唑啉、SU6668、STI571A、N-4-氯苯基-4-(4-吡啶基甲基)-1-酞嗪胺和EMD121974。
本发明方法还包括与其它抗癌化合物的组合。例如,本发明要求的化合物与PPAR-γ(即PPAR-gamma)激动剂和PPAR-δ(即PPAR-delta)激动剂的组合可用于某些恶性肿瘤的治疗。PPAR-γ和PPAR-δ是核过氧化物酶体增殖剂-激活的受体γ和δ。PPAR-γ在内皮细胞上的表达及其在血管生成中的参与已经在文献中报道过(参见J.Cardiovasc.Pharmacol.1998;31:909-913;J.Biol.Chem.1999;274:9116-9121;Invest.Ophthaltnol Vis.Sci.2000;41:2309-2317)。最近,已表明PPAR-γ激动剂在体外抑制对于VEGF的血管生成反应;曲格列酮和马来酸罗格列酮抑制小鼠中视网膜新血管的形成(Arch.Ophthamol.2001;119:709-717)。PPAR-γ激动剂和PPAR-γ/α激动剂的例子包括但不限于噻唑烷二酮(例如DRF2725、CS-011、曲格列酮、罗格列酮和吡格列酮)、非诺贝特、吉非贝齐、氯贝丁酯、GW2570、SB219994、AR-H039242、JTT-501、MCC-555、GW2331、GW409544、NN2344、KRP297、NP0110、DRF4158、NN622、GI262570、PNU182716、DRF552926、2-[(5,7-二丙基-3-三氟甲基-1,2-苯并异唑-6-基)氧基]-2-甲基丙酸(在USSN 09/782,856中公开)和2(R)-7-(3-(2-氯-4-(4-氟苯氧基)苯氧基)丙氧基)-2-乙基苯并二氢呋喃-2-羧酸(公开于USSN 60/235,708和60/244,697)。
本发明的另一实施方案是将本发明公开的化合物与基因疗法联合使用来治疗癌症。关于治疗癌症的起源策略的综述参见Hall等人(Am JHurn Genet 61:785-789,1997)和Kufe等人(Cancer Medicine,第5版,pp 876-889,BC Decker,Hamilton 2000)。基因疗法可用于递送任何肿瘤抑制基因。这样的基因的例子包括但不限于p53,其可经由重组病毒介导的基因传递来递送(参见例如美国专利No.6,069,134),uPA/uPAR拮抗剂(“Adenovirus-Mediated Delivery of a uPA/uPARAntagonist Suppresses Angiogenesis-Dependent Tumor Growth andDissemination in Mice,”Gene Therapy,1998年8月;5(8):1105-13),和干扰素γ(J Immunol 2000;164:217-222)。
本发明的化合物还可以与固有多药耐药性(MDR)的抑制剂,尤其是高水平的转运蛋白表达有关的MDR的抑制剂联合给药。这样的MDR抑制剂包括p-糖蛋白(P-gp)抑制剂,如LY335979、XR9576、OC144-093、R101922、VX853和PSC833(valspodar)。
本发明的化合物可以与抗呕吐剂联合使用来治疗可由于单独使用或与放疗联合使用本发明化合物而导致的恶心或呕吐,包括急性、延迟的、晚期和预计的呕吐。为了预防和治疗呕吐,本发明的化合物可以与其它抗呕吐剂,尤其是神经激肽-1受体拮抗剂、5HT3受体拮抗剂,如昂丹司琼、格拉司琼、托烷司琼和zatisetron,GABAB受体激动剂例如巴氯芬、皮质甾类例如Decadron(地塞米松)、Kenalog、Aristocort、Nasalide、Preferid、Benecorten或其它例如在美国专利No.2,789,118、2,990,401、3,048,581、3,126,375、3,929,768、3,996,359、3,928,326和3,749,712中的那些,抗多巴胺能剂例如吩噻嗪类(例如丙氯拉嗪、氟奋乃静、硫利哒嗪和美索哒嗪)、甲氧氯普胺或屈大麻酚联合使用。在一个实施方案中,将选自神经激肽-1受体拮抗剂、5HT3受体拮抗剂和皮质甾类的抗呕吐剂作为辅助药物来给予以治疗或预防由于给予本发明化合物而导致的呕吐。
用于与本发明化合物联合使用的神经激肽-1受体拮抗剂充分描述于例如美国专利No.5,162,339、5,232,929、5,242,930、5,373,003、5,387,595、5,459,270、5,494,926、5,496,833、5,637,699、5,719,147;欧洲专利公布EP 0360390、0394989、0428434、0429366、0430771、0436334、0443132、0482539、0498069、0499313、0512901、0512902、0514273、0514274、0514275、0514276、0515681、0517589、0520555、0522808、0528495、0532456、0533280、0536817、0545478、0558156、0577394、0585913、0590152、0599538、0610793、0634402、0686629、0693489、0694535、0699655、0699674、0707006、0708101、0709375、0709376、0714891、0723959、0733632和0776893;PCT国际专利公布WO90/05525、90/05729、91/09844、91/18899、92/01688、92/06079、92/12151、92/15585、92/17449、92/20661、92/20676、92/21677、92/22569、93/00330、93/00331、93/01159、93/01165、93/01169、93/01170、93/06099、93/09116、93/10073、93/14084、93/14113、93/18023、93/19064、93/21155、93/21181、93/23380、93/24465、94/00440、94/01402、94/02461、94/02595、94/03429、94/03445、94/04494、94/04496、94/05625、94/07843、94/08997、94/10165、94/10167、94/10168、94/10170,94/11368、94/13639、94/13663、94/14767、94/15903、94/19320、94/19323、94/20500、94/26735、94/26740、94/29309、95/02595、95/04040、95/04042、95/06645、95/07886、95/07908、95/08549、95/11880、95/14017、95/15311、95/16679、95/17382、95/18124、95/18129、95/19344、95/20575、95/21819、95/22525、95/23798、95/26338、95/28418、95/30674、95/30687、95/33744、96/05181、96/05193、96/05203、96/06094、96/07649、96/10562、96/16939、96/18643、96/20197、96/21661、96/29304、96/29317、96/29326、96/29328、96/31214、96/32385、96/37489、97/01553、97/01554、97/03066、97/08144、97/14671、97/17362、97/18206、97/19084、97/19942和97/21702;和英国专利公布No.2266529、2268931、2269170、2269590、2271774、2292144、2293168、2293169和2302689。这些化合物的制备充分描述于上述专利和出版物中,它们均引入本文作为参考。
在一个实施方案中,用于与本发明化合物联合使用的神经激肽-1受体拮抗剂选自:2-(R)-(1-(R)-(3,5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟苯基)-4-(3-(5-氧-1H,4H-1,2,4-三唑基)甲基)吗啉或其药学上可接受的盐,其描述在美国专利No.5,719,147中。
本发明的化合物还可以与双膦酸盐(理解为包括双膦酸盐、二膦酸盐、双膦酸和二膦酸)联合用于治疗或预防癌症,包括骨癌。双膦酸盐的例子包括但不限于:羟乙磷酸盐(Didronel)、氨羟二磷酸二钠(Aredia)、阿伦膦酸盐(Fosamax)、利塞膦酸盐(Actonel)、唑来膦酸盐(Zometa)、伊班膦酸盐(Boniva)、伊卡膦酸盐或cimadronate、氯膦酸盐、EB-1053、minodronate、neridronate、piridronate和替鲁膦酸盐,包括任何和所有药学上可接受的盐、衍生物、水合物及其混合物。
本发明化合物还可以与用于治疗贫血的治疗剂一起给予。这样的贫血治疗剂是例如连续红细胞生成受体激活剂(例如epoetin alfa)。
本发明的化合物还可以与用于治疗嗜中性白细胞减少症的治疗剂一起给予。这样的嗜中性白细胞减少症治疗剂是例如调节嗜中性白细胞产生和功能的造血生长因子例如人粒细胞集落刺激因子(G-CSF)。G-CSF的例子包括非格司亭。
本发明化合物还可以与免疫增强药物例如左旋咪唑、异丙肌苷和日达仙联合给药。
本发明的化合物还可以与双膦酸盐(理解为包括双膦酸盐、二膦酸盐、双膦酸和二膦酸)联合用于治疗或预防癌症,包括骨癌。双膦酸盐的例子包括但不限于:羟乙磷酸盐(Didronel)、氨羟二磷酸二钠(Aredia)、阿伦膦酸盐(Fosamax)、利塞膦酸盐(Actonel)、唑来膦酸盐(Zometa)、伊班膦酸盐(Boniva)、伊卡膦酸盐或cimadronate、氯磷酸盐、EB-1053、minodronate、neridronate、piridronate和替鲁膦酸盐,包括任何和所有药学上可接受的盐、衍生物、水合物及其混合物。
本发明的化合物还可以与芳香酶抑制剂联合用于治疗或预防乳腺癌。芳香酶抑制剂的例子包括但不限于:阿纳托唑、来曲唑和伊西美坦。
本发明的化合物还可以与siRNA治疗剂联合用于治疗或预防癌症。
因此,本发明的范围包括本发明要求的化合物与选自下列的第二种化合物的联合应用:雌激素受体调节剂、雄激素受体调节剂、类视黄醇受体调节剂、细胞毒素剂/细胞生长抑制剂、抗增殖剂、异戊烯基-蛋白转移酶抑制剂、HMG-CoA还原酶抑制剂、HIV蛋白酶抑制剂、逆转录酶抑制剂、血管生成抑制剂、PPAR-γ激动剂、PPAR-δ激动剂、固有多药耐药性的抑制剂、抗呕吐剂、用于治疗贫血的治疗剂、用于治疗嗜中性白细胞减少症的治疗剂、免疫增强药物、细胞增殖和存活信号传导抑制剂、细胞凋亡诱导剂、双膦酸盐、芳香酶抑制剂、siRNA治疗剂和干扰细胞周期节点的活性剂。
在涉及本发明化合物的术语“给药”以及其变型(例如“给予”化合物)是指将所述化合物或化合物的前药引入到需要进行治疗的动物的系统中。当本发明的化合物或其前药以与一种或多种其它活性剂(例如细胞毒素剂)组合的形式提供时,“给药”及其变型各自应被理解为包括该化合物或其前药以及其它药剂的同时和相继地引入。
本文所用术语“组合物”包括以指定量包含指定成分的产品以及可以直接或间接由特定量特定成分的组合所得到的任何产品。
本文所用术语“治疗有效量”是指可以在组织、系统、动物或人中引起研究者、兽医、医生或其他临床医师所寻求的生物学或医学反应的活性化合物或药学物质的量。
术语“治疗癌症”或“癌症的治疗”是指对患有癌症的哺乳动物给药,并且是指通过杀死癌细胞来减轻癌症的作用,以及导致癌症生长和/或转移被抑制的作用。
在一个实施方案中,用作第二种化合物的血管生成抑制剂选自酪氨酸激酶抑制剂、上皮衍生生长因子抑制剂、成纤维细胞衍生生长因子抑制剂、血小板衍生生长因子抑制剂、MMP(基质金属蛋白酶)抑制剂、整联蛋白阻断剂、α-干扰素、白介素-12、多硫酸戊聚糖、环加氧酶抑制剂、羧基酰胺基三唑、考布他汀A-4、角鲨胺、6-O-氯乙酰基-羰基)-烟曲霉醇(fumagillol)、沙利度胺、血管生长抑素、肌原蛋白-1或VEGF的抗体。在一个实施方案中,雌激素受体调节剂是他莫昔芬或雷洛昔芬。
权利要求的范围还包括治疗癌症的方法,所述方法包括联合给予治疗有效量的式I化合物与放疗和/或选自下列的化合物:雌激素受体调节剂、雄激素受体调节剂、类视黄醇受体调节剂、细胞毒素剂/细胞生长抑制剂、抗增殖剂、异戊烯基-蛋白转移酶抑制剂、HMG-CoA还原酶抑制剂、HIV蛋白酶抑制剂、逆转录酶抑制剂、血管生成抑制剂、PPAR-γ激动剂、PPAR-δ激动剂、固有多药耐药性的抑制剂、抗呕吐剂、用于治疗贫血的治疗剂、用于治疗嗜中性白细胞减少症的治疗剂、免疫增强药物、细胞增殖和存活信号传导抑制剂、细胞凋亡诱导剂、双膦酸盐、芳香酶抑制剂、siRNA治疗剂和干扰细胞周期节点的活性剂。
本发明的又一实施方案是治疗癌症的方法,所述方法包括联合给予治疗有效量的式I化合物与紫杉醇或曲妥单抗(trastuzumab)。
本发明还包括治疗或预防癌症的方法,所述方法包括联合给予治疗有效量的式I化合物与COX-2抑制剂。
本发明还包括可用于治疗或预防癌症的药物组合物,所述组合物包含治疗有效量的式I化合物和选自下列化合物:雌激素受体调节剂、雄激素受体调节剂、类视黄醇受体调节剂、细胞毒素剂/细胞生长抑制剂、抗增殖剂、异戊烯基-蛋白转移酶抑制剂、HMG-CoA还原酶抑制剂、HIV蛋白酶抑制剂、逆转录酶抑制剂、血管生成抑制剂、PPAR-γ激动剂、PPAR-δ激动剂、细胞增殖和存活信号传导抑制剂、双膦酸盐、芳香酶抑制剂、siRNA治疗剂和干扰细胞周期节点的活性剂。
通过本文所包含的教导,本发明的这些和其它方面都将是显而易见的。
测定
通过以下描述的试验测定在实施例中描述的本发明化合物,发现它们具有驱动蛋白抑制活性。其它测定是文献中已知的并且可以由本领域技术人员容易地进行(参见,例如PCT公布WO01/30768,2001年5月3日,第18-22页)。
I.驱动蛋白ATPase体外测定
人多组氨酸标记的KSP马达区的克隆和表达(KSP(367H))
通过PCR,使用pBluescript全长人KSP构建物(Blangy等人,Cell,vol.83,pp1159-1169,1995)作为模板来克隆用于表达人KSP马达区构建物的质粒。使用N-末端引物5’-GCAACGATTAATATGGCGTCGCAGCCAAATTCGTCTGCGAAG(SEQ.ID.NO.:1)和C-末端引物5’-GCAACGCTCGAGTCAGTGATGATGGTGGTGATGCTGATTCACTTCAGGCTTATTCAATAT(SEQ.ID.NO.:2)来扩增马达区和预连接区。将PCR产物用AseI和AhoI消化,连接到pRSETa(Invitrogen)的NdeI/XhoI消化产物内,并转化到大肠杆菌(E.coli)BL21(DE3)内。
将细胞在37℃生长至OD600为0.5。将培养物冷却至室温后,用100μm IPTG诱导KSP的表达,并继续培养过夜。通过离心将细胞沉淀,用冰冷的PBS洗涤一次。将细胞沉淀快速冷冻并在-80℃贮藏。
蛋白纯化
将细胞颗粒在冰上融化并重新混悬于具有细胞溶解作用的缓冲液(50mM K-HEPES,pH 8.0,250mM KCl,0.1%Tween,10mM咪唑,0.5mM Mg-ATP,1mM PMSF,2mM benzimidine,1×完全蛋白酶抑制剂混合物(Roche))中。将细胞混悬液与1mg/ml溶菌酶和5mM β-巯基乙醇在冰上培养10分钟,然后超声处理(3×30秒)。所有随后的操作都在4℃下进行。将溶胞产物以40,000×g离心40分钟。将上清液稀释并在缓冲液A(50mM K-HEPES,pH 6.8,1mM MgCl2,1mM EGTA,10μM Mg-ATP,1mM DTT)中装填到SP琼脂糖柱(Pharmacia,5ml筒)上,用KCl在缓冲液A中的浓度为0-750mM的缓冲液A进行梯度洗脱。合并含有KSP的馏分,与Ni-NTA树脂(Qiagen)一起培养1小时。将树脂用缓冲液B(具有细胞溶解作用的缓冲液减去PMSF和蛋白酶抑制剂混合物)洗涤3次,然后进行3次15分钟的温育,用缓冲液B洗涤。最后,将树脂温育并用缓冲液C(除了pH6.0以外与缓冲液B相同)洗涤3次,15分钟,然后将其倒入柱内。再用洗脱缓冲液(除了150mM KCl和250mM咪唑以外与缓冲液B相同)将KSP洗下来。合并含有KSP的级分,在蔗糖中稀释至10%,在-80℃贮藏。
从由牛脑分离的微管蛋白制备微管。将纯化的微管蛋白(>97%,不含MAP)以1mg/ml在37℃并且在10μm紫杉醇、1mM DTT、1mM GTP的存在下在BRB 80缓冲液(80mM K-PIPES、1mM EGTA、1mM MgCl2,pH 6.8)中聚合。通过超速离心从未聚合的微管蛋白分离得到的微管并除去上清液。然后将含有微管的颗粒轻轻地重新混悬在含有10μm紫杉醇、1mM DTT、50μg/ml氨苄青霉素和5μg/ml氯霉素的BRB 80中。
将驱动蛋白马达区与微管、1mM ATP(1∶1MgCl2∶Na-ATP)和化合物在含有80mM K-HEPES(pH 7.0)、1mM EGTA、1mM DTT、1mMMgCl2和50mM KCl的缓冲液中在23℃温育。通过用80mM HEPES和50mM EDTA的终缓冲液组合物进行2-10倍稀释来终止反应(或者,以1∶1的体积比例将反应混合物加到终止缓冲液(1.8M KCl和50mM EDTA)中)。通过加入1.5倍体积的淬灭剂C(例如向40μl反应物+40μl终止缓冲液的混合物中加入120μl淬灭剂C),经喹哪啶红/钼酸铵分析来测定由ATP水解反应所生成的游离磷酸盐。淬灭剂A含有0.1mg/ml喹哪啶红和0.14%聚乙烯醇;淬灭剂B含有在1.15M硫酸中的12.3mM钼酸铵四水合物。淬灭剂C是2∶1比例的淬灭A∶淬灭B。将该反应物在23℃培养5-10分钟,然后在540nm测定磷-钼酸盐络合物的吸收度。
将实施例中的化合物1-10至1-15和2-7以及2-8用上述方法测定,并且测得IC50≤50μM。
II.细胞增殖测定
将细胞铺在96-孔组织培养平板上,细胞的密度使得能够在24、48和72小时的时间对数生长,让其粘着过夜。在接下来的一天,向所有平板中以10.5log滴定加入化合物。每一滴定系列以一式三份进行,在整个测定期间保持0.1%的恒定DMSO浓度。还包括单独的0.1%DMSO对照。每一化合物稀释系列在不含血清的培养基中进行。在测定中,血清的终浓度在200μL体积的培养基中是5%。加入药物后,在第24、48或72小时将20微升Alamar蓝染色试剂加到滴定板上的每个样本和对照孔中,回到37℃培养。6-12小时后,在CytoFluorII平板读数计上使用530-560纳米的激发波长和590纳米的发射波长分析Alamar蓝荧光。
通过以化合物浓度作为x-轴,每一滴定点的细胞生长的平均抑制百分比作为y-轴绘制曲线来推导出细胞毒性EC50。将已经用单独的载体处理的对照孔中的细胞生长定义为用于测定的100%生长,将用化合物处理的细胞生长与该值进行比较。采用对数4-参数曲线拟合,使用内部专用软件来计算以百分比表示的细胞毒性值和拐点。
细胞毒性百分比定义为:
%细胞毒性:(荧光对照)-(荧光样品)×100×(荧光对照)-1
拐点是以细胞毒性EC50报告出来的。
III.通过FACS评价有丝分裂停滞和细胞程序死亡
通过测定处理的细胞群体中的DNA含量,使用FACS分析来评价化合物阻止细胞有丝分裂和诱导细胞程序死亡的能力。将细胞以每6cm2组织培养皿1.4×106个细胞的密度接种以粘着过夜。然后将细胞用载体(0.1%DMSO)或滴定系列的化合物处理8-16小时。处理后,在指定时间通过胰蛋白酶处理来收获细胞,并通过离心将细胞沉淀。将细胞沉淀在PBS中洗涤,在70%乙醇中固定,然后在4℃贮藏过夜或更长时间。
对于FACS分析,将至少500,000个固定的细胞沉淀,通过抽吸除去70%乙醇。然后将细胞在4℃与Rnase A(50Kunitz单位/ml)和碘化丙啶(50μg/ml)培养30分钟,然后使用Becton Dickinson FACSCaliber分析。使用Modfit细胞周期分析模型软件(Verity Inc.)分析数据(得自10,000个细胞)。
通过以化合物浓度作为x-轴,每一滴定点处于细胞周期G2/M期的细胞百分比(通过碘化丙啶荧光测定的)作为y-轴绘制曲线来推导出有丝分裂停滞的EC50。采用对数4-参数曲线拟合,使用SigmaPlot程序进行数据分析以计算拐点。拐点是以有丝分裂停滞的EC50报告出来的。使用类似方法来确定化合物对于有丝分裂的EC50。在此,将在每一滴定点的细胞程序死亡的细胞的百分比(通过碘化丙啶荧光测定的)作为y-轴绘制曲线,并如上所述进行类似分析。
IV.检测单极纺锤体的免疫荧光显微镜法
用于DNA、微管蛋白和粒周蛋白的免疫荧光染色的方法基本如Kappoor等人(2000)J.Cell Biol.150:975-988所述。对于细胞培养研究,将细胞铺在组织培养处理的玻璃室载玻片上,让其粘着过夜。然后将细胞占研究的化合物一起培养4-16小时。培养完成后,吸出介质和药物,从载玻片上除去室和垫圈。然后根据参照方案,将细胞渗透、固定、洗涤,并阻断非特异性抗体结合。在阻断之前,用二甲苯将石腊包埋的肿瘤切片脱石腊,通过乙醇系列进行再水合处理。将载玻片在第一抗体(小鼠单克隆抗-α-微管蛋白抗体,来自Sigma的克隆DM1A,1∶500稀释;来自Covance的兔多克隆抗-粒周蛋白抗体,1∶2000稀释)中于4℃培养过夜。洗涤后,将载玻片与稀释至15μg/ml的缀合的第二抗体(对于微管蛋白,FITC-缀合的驴抗-小鼠IgG;对于粒周蛋白,将得克萨斯红-缀合的驴抗-兔IgG)于室温下培养1小时。然后洗涤载玻片,用Hoechst 33342复染色以显现DNA。使用Metamorph去卷曲和成像软件,利用在Nikon落射荧光显微镜上的100×油浸物镜来观察免疫染色样本的图像。
V.体外评价P-糖蛋白底物潜能
按照先前的公开(A.H.Schinkel等人,J.Clin.Invest.,(1995)96:1698-1705;A.H.Schinkel等人,Cancer Res.,(1991)51:2628-2635;和A.H.Schinkel等人,J.Biol Chem.,(1993)268:7474-7481),得到P-gp转染的LLC-细胞(L-mdr1a,小鼠mdr1a转染的猪肾上皮细胞系;和L-MDR1,人MDR1转染的猪肾上皮细胞系)和对照细胞(LLC-PK1)。将细胞在培养基199(Invitrogen,Grand Island,NY)中培养,给该培养基补充了2mM L-谷氨酰胺、青霉素(50单位/mL)、链霉素(50μg/mL)和10%(v/v)FCS(Invitrogen)(1)。通过用胰蛋白酶-EDTA每三至四天再次培养融合的单层细胞。
采用L-MDR1、L-mdr1a和LLC-PK1细胞单层按照以下方法进行经上皮的转运研究:将L-MDR1、L-mdr1a和LLC-PK1细胞以2.0×105个细胞/0.5mL/孔的密度平铺在渗透性的24-孔(1.0μm)聚对苯二甲酸乙二醇酯过滤膜(BD BiocoatTM HTS Fibrillar Collagen MultiwellTM InsertSystem,Becton Dickinson,Franklin Lakes,NJ)或96-孔的聚碳酸酯膜(0.4μm)过滤器板(MultiScreenTM Caco-2,Millipore Corporation,Bedford,MA)上;送料盘中含有30mL培养基。第二天给细胞补充新鲜的培养基并在平皿接种后用于第四天的转运研究。在开始转运实验大约一个小时前,吸出介质并将细胞培养插片分别转移到24-孔MultiwellTM板(Becton Dickinson)或96-孔传递分析板(Millipore),然后将细胞用具有10mM Hepes的0.5mL传递缓冲液(不含血清的Hank’s平衡盐溶液(HBSS;Invitrogen)(pH 7.4))洗涤,加入到细胞培养插片(顶点;A)和贮存器(底部;B)两侧。然后通过用0.5mL有和没有试验化合物(5μM)的转运缓冲液替换各隔室中的培养基来进行转运实验。并行地进行维拉帕米(以1μM)的跨细胞转运作为阳性对照。在CO2细菌培养器中培养三小时后,从两边取出100μL等分试样并转移到96-孔板上用于LC/MS/MS定量。将50/50乙腈/水中的内标物(PCT公开号WO03/105855中描述的化合物35-2)加入到各个孔并通过LC/MS/MS马上定量。简单地说,将样品在如下条件下进行色谱分离:在InertsilODS-3柱(2.1×50mm,5um,Varian,Torrance,PA)上,用0.1%甲酸(FA)的乙腈溶液和0.1%FA的水溶液进行线性梯度洗脱,并由经Sciex加热喷雾源连接的Sciex API 3000质谱仪(Applied Biosystems,Toronto,Canada)检测。监测的前体/产物离子跃迁是m/z 455.0→165.0(对于维拉帕米)、m/z 345.0→256.9(对于内标物)并且依赖于试验化合物。用以下公式计算表观渗透性系数(Papp;以[cm/s*E-06]计):Papp=转移的量(pmol/3-小时/孔)/培养3小时后给予室和接收室中浓度的总和(nM)/表面积(0.3cm2/孔)/培养时间(10800秒)
以Papp描述结果(平均值±S.D.,n=3)。用各个Papp值计算底部到顶端(B-A)与顶端到底部(A-B)的比值(B-A/A-B)。B-A/A-B比值显著大于1.0(特别是大于3.0)表示试验化合物是P-糖蛋白底物。
实施例
提供实施例来帮助进一步理解本发明。所用的具体材料、物质和条件都是为了举例说明本发明,而不是限制本发明的合理范围。
反应方案1
步骤1:1-1的合成
在0℃,向24.9g(255mmol)N,O-二甲基羟胺盐酸盐在1.5L CH2Cl2中的悬浮液中加入71.1mL(510mmol)三乙胺,随后滴加入25.0g(141.6mmol)2,5-二氟苯甲酰氯在100mL CH2Cl2中的溶液。搅拌1小时后,将反应物用水洗涤,用1M HCl、盐水洗涤三次,经Na2SO4干燥,并浓缩以得到无色油状的1-1。1-1的数据:1HNMR(500MHz,CDCl3)δ7.2-7.0(m,3H),3.6(bs,3H),3.4(s,3H)ppm。
步骤2:1-3的合成
在-78℃,向15.0g(89.2mmol)THP-炔1-2(按照Tetrahedron,2001,57,2597-2608中的描述制备的)在750mL THF中的溶液中加入35.7mL(89.2mmol)2.5M正丁基锂的己烷溶液。在该温度下搅拌1小时后,通过注射加入17.9g(89.2mmol)1-1在35mL THF中的溶液中。将溶液搅拌过夜,同时逐渐温暖至室温。将反应物用饱和的NH4Cl水溶液淬灭并用EtOAc萃取。将有机萃取物用盐水洗涤,经Na2SO4干燥,通过旋转蒸发来浓缩,并用柱色谱(EtOAc/己烷)纯化而得到无色油状的1-3。1-3的数据:1HNMR(500MHz,CDCl3)δ7.7(m,1H),7.3(m,1H),7.15(m,1H),4.6(m,1H),3.9(m,2H),3.55(m,2H),2.65(m,2H),1.95(m,2H),1.85(m,1H),1.75(m,1H),1.6-1.5(m,4H)ppm。
步骤3:1-4的合成
在-78℃,向20.2g(98.1mmol)溴化铜(I)二甲硫醚的复合物在75mL THF中的悬浮液中加入98.1mL(196mmol)2M PhLi的二丁基醚溶液。搅拌1.5小时之后,通过套管加入25.2g(81.7mmol)炔1-3在200mL THF中的溶液,并将反应物在-78℃搅拌3小时。将反应物用饱和的NH4Cl水溶液淬灭并用EtOAc萃取两次。合并有机萃取物,用盐水洗涤,经Na2SO4干燥,通过旋转蒸发来浓缩,并用柱色谱(EtOAc/己烷)纯化而得到黄色油状的1-4,(E)和(Z)异构体的混合物。1-4的数据:HRMS(ES)M+Na C23H24F2O3的计算值:409.1586,实测值:409.1586。
步骤4:3-[1-乙酰基-3-(2,5-二氟苯基)-5-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑-5-基]
丙烷-1-醇(1-5)的合成
向16.0g(41.4mmol)1-4在150mL吡啶中的溶液中加入3.0mL(62.1mmol)水合肼,将得到的混合物在90℃加热45分钟。冷却到室温后,将反应物放置在冰浴中并滴加入14.7mL(207mmol)乙酰氯。除去冰浴并将反应物在倒入含有EtOAc和盐水的分液漏斗之前在室温下搅拌过夜。分离各层,将有机层用1M HCl洗涤两次,用盐水洗涤一次,经Na2SO4干燥并通过旋转蒸发来浓缩。将残余物再悬浮在甲苯中两次并浓缩以共沸掉任何残留的吡啶。将残余物溶于200mLMeOH并加入8.0g(42mmol)对甲苯磺酸一水合物。在室温下搅拌2小时之后,通过旋转蒸发除去大部分溶剂,将残余物在饱和的NaHCO3水溶液和EtOAc之间分配。分离各层之后,将有机层用碳酸氢盐再次洗涤,然后用盐水洗涤,经Na2SO4干燥并通过旋转蒸发来浓缩。将残余物与Et2O一起研磨并通过过滤来收集固体物,以得到白色固体状的外消旋体1-5。外消旋体1-5的数据:1HNMR(500MHz,CDCl3)δ7.7(m,1H),7.4-7.0(m,7H),3.8-3.65(m,2H),3.6(m,1H),3.5(m,1H),2.9(m,1H),2.4(s,3H),2.3(m,1H),1.7-1.5(m,2H)ppm。
步骤5:3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2,5-二氟苯基)-5-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑-5-
基]丙烷-1-醇(1-5)的手性拆分
通过制备性HPLC(10cm Chiralpak AD柱,用92%己烷(具有0.1%二乙胺)、4%MeOH和4%EtOH以150mL/分钟的速度洗脱)拆分对映异构体。洗出的第一个峰是非活性的(R)异构体,洗出的第二个峰是活性的(S)异构体。
步骤6:3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2,5-二氟苯基)-5-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑-5-
基]丙酸(1-6)
将醇1-5(7.68g,21.4mmol)在湿(0.75%)CH3CN(215mL)中的溶液冷却至0℃并用高碘酸在湿CH3CN(121mL,0.44M)中的溶液处理。搅拌过夜后,将反应物用NaH2PO4溶液(用HCl调节pH值至3-4)淬灭,用EtOAc萃取两次,用盐水、NaHSO3、盐水洗涤,经Na2SO4干燥,过滤并浓缩,以得到浅黄色泡沫状的1-6。1-6的数据:1HNMR(500MHz,CDCl3)δ7.70-7.66(m,1H),7.38-7.36(m,2H),7.35-7.25(m,3H),f.09-7.06(m,2H),3.56-3.53(m,2H),3.23-3.16(m,1H),2.64-2.58(m,1H),2.46(s,3H),2.42-2.39(m,2H)ppm。
步骤7:3-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2,5-二氟苯基)-5-苯基-4,5-二氢-1H-吡
唑-5-基]丙基}-4S-甲基-5R-苯基-1,3-唑烷-2-酮(1-7)
将酸1-6(7.98g,21.4mmol)在100mL DCM中的冷却溶液(0℃)用100mL亚硫酰氯处理。搅拌30分钟后,浓缩反应混合物,与2×100mL苯共沸并在高真空下放置1小时。
在分开的烧瓶中,将4S-甲基-5R-苯基-1,3-唑烷-2-酮(7.59g,42.8mmol)用100mL THF稀释,冷却至-78℃,并用正丁基锂(18.0mL,2.5M的己烷溶液)处理。在-78℃搅拌1小时之后,将氧化锂处理的唑烷酮的混合物用新制备的酰氯的THF(100mL)溶液处理。将该混合物搅拌1.5小时并用NH4Cl淬灭,用EtOAc萃取,用NaHCO3和盐水洗涤,经Na2SO4干燥,过滤并浓缩。通过在硅胶上梯度洗脱(0-40%EtOAc的己烷溶液)来纯化粗产物,以得到白色泡沫状的1-7。1-7的数据:HRMS m/z(M+H)实测值:532.2023,要求值:532.1970。
步骤8:3-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2,5-二氟苯基)-5-苯基-4,5-二氢-1H-吡
唑-5-基]-2-氟代丙基}-4S-甲基-5R-苯基-1,3-唑烷-2-酮(1-8)
在-78℃,将唑烷酮(8.26g,15.5mmol)在125mL THF中的溶液用NaHMDS(9.3mL,2M的THF溶液)处理并在-78℃搅拌45分钟。经套管将该混合物加入预先冷却(-78℃)的N-氟代二(苯磺酰胺)(6.37g,20.2mmol)在50mL THF中的溶液。在-78℃搅拌45分钟后,将反应混合物用NH4Cl淬灭,用EtOAc稀释,用H2O和盐水洗涤,经Na2SO4干燥,过滤并浓缩。通过在硅胶上梯度洗脱(0-40%EtOAc的己烷溶液)来纯化粗产物,得到白色泡沫状的1-8。1-8的数据:1HNMR(500MHz,CDCl3)δ7.74-7.71(m,1H),7.45-7.39(m,5H),7.35-7.26(m,5H),7.06-7.10(m,2H),6.31-6.20(m,1H),5.83(d,J=7.3Hz,1H),4.74-4.71(m,1H),4.25-4.21(m,1H),3.58-3.53(m,2H),3.04-2.95(m,1H),2.45(s,3H),0.95(d,J=7.3Hz,3H)ppm。
步骤9:(2S)-3-[(5R)-1-乙酰基-3-(2,5-二氟苯基)-5-苯基-4,5-二氢-1H-
吡唑-5-基]-2-氟代丙烷-1-醇(1-9)
将唑烷酮(6.70g,12.1mmol)在THF(120mL)中的溶液冷却至0℃并用LiBH4(0.319g,14.6mmol)处理。在0℃搅拌30分钟之后,将反应混合物用NH4Cl淬灭并用EtOAc稀释。将有机相用水洗涤,经Na2SO4干燥,过滤并浓缩。粗产物通过色谱法纯化(SiO2;1∶1Hex∶EtOAc)以得到1-9。LRMS(M+H=377)。
步骤10:(2S)-3-[(5R)-1-乙酰基-3-(2,5-二氟苯基)-5-苯基-4,5-二氢-1H-
吡唑-5-基]-2-氟代丙烷-1-胺(1-10)
将醇1-9(4.15g,11.0mmol)的DCM(100mL)溶液用三乙胺(2.78g,27.56mmol)和甲磺酰氯(3.16g,27.57mmol)处理。搅拌2小时之后,将反应混合物用饱和的NaHCO3水溶液淬灭,用EtOAc稀释,用水洗涤,经Na2SO4干燥并浓缩。通过在硅胶上梯度洗脱(0-40%EtOAc的己烷溶液)来纯化粗产物,得到2.82g甲磺酸酯衍生物。将所述甲磺酸酯(2.82g,6.20mmol)溶于DMF(60mL)并用NaN3(0.807g,12.41mmol)处理。将混合物加热到65℃并搅拌过夜。冷却后,将反应物用EtOAc稀释,用H2O洗涤三次,用盐水洗涤一次,经Na2SO4干燥,过滤并浓缩。通过在硅胶上梯度洗脱(0-30%EtOAc的己烷溶液)来纯化粗产物,得到1.73g淡黄色油状的叠氮化加成化合物。将叠氮化物(1.73g,4.31mmol)在EtOAc/EtOH(20mL/20mL)中的溶液用10wt.%Pd/C处理并在1大气压的H2(g)下搅拌。搅拌30分钟后,通过硅藻土过滤混合物并用EtOAc洗涤滤饼。浓缩滤液并用硅胶色谱纯化(10%[10∶1∶1的EtOH∶NH4OH∶H2O]的EtOAc溶液),以得到白色泡沫状的1-10。1-10的数据:1HNMR(500MHz,CDCl3)δ7.70-7.68(m,1H),7.37-7.26(m,5H),7.09-7.07(m,2H),4.76-4.65(dt,J=2,50Hz,1H),3.78-3.62(m,2H),3.09-2.85(m,3H),2.76-2.66(m,1H),2.39(s,3H)ppm。
按照以上反应方案和实施例的描述来制备下列化合物:
反应方案2
步骤1:1-(2,5-二氟苯基)-3-苯基-4-(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)丁-2-烯-1-
酮(2-1)
在-78℃,向6.0g(42.8mmol)四氢-2-(2-丙炔氧基)-2H-吡喃在300mL THF中的溶液中滴加入17.1mL(42.8mmol)2.5M正丁基锂的己烷溶液。搅拌45分钟后,加入8.6g(42.8mmol)1-1在25mL THF中的溶液并继续搅拌3小时,同时将所述溶液缓慢温暖至室温。用饱和的NH4Cl水溶液淬灭后,将混合物倒入含有EtOAc的分液漏斗,分离各层,将含水层用EtOAc萃取,将合并的有机层用盐水洗涤,经Na2SO4干燥并浓缩。用硅胶色谱(EtOAc/己烷)纯化残余物而得到26.6g黄色油状的丙炔酮中间体。将8.42g(41.0mmol)CuBr·DMS在100mLTHF中的悬浮液冷却至-78℃并滴加入41.0mL(82.0mmol)2M PhLi的nBu2O溶液。搅拌1.5小时之后,加入9.57g(34.1mmol)上述酮在15mL THF中的溶液,并将得到的混合物搅拌3小时。用饱和的NH4Cl水溶液淬灭后,将混合物倒入含有EtOAc的分液漏斗,分离各层,用EtOAc萃取水层,用盐水洗涤合并的有机层,经Na2SO4干燥并浓缩。用硅胶色谱纯化残余物而得到黄色油状的2-1,其是1∶1的(E)和(Z)-异构体的混合物。2-1的数据:LC-MS:rt=2.78min & 2.9min,m/z=359(M+1)。
步骤2:[1-乙酰基-3-(2,5-二氟苯基)-5-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑-5-基]甲
醇(2-2)
向5.8g(16.2mmol)2-1在100mL吡啶中的溶液中加入1.18mL(24.3mmol)水合肼。将反应物在90℃加热45分钟。冷却至室温,然后冷却至0℃。在加入5.75mL(80.9mmol)乙酰氯之后,除去冷却浴并将反应物搅拌7小时。将反应物倒入含有EtOAc和盐水的分液漏斗。分离各层,将有机层用1M HCl、盐水洗涤两次,经Na2SO4干燥并浓缩。将残余物溶于甲苯中两次并再次浓缩以除去任何残留吡啶。将残余物溶于100mL MeOH,加入1.5g(7.9mmol)对甲苯磺酸,并将混合物在室温下搅拌2小时。浓缩反应物,将残余物溶于EtOAc,用饱和的NaHCO3溶液、盐水洗涤两次,经Na2CO3干燥并浓缩。将残余物与Et2O一起研磨并过滤以得到白色固体状的2-2。2-2的数据:LC-MS:rt=2.20min,m/z=331(M+1)。
步骤3:[(5S)-1-乙酰基-3-(2,5-二氟苯基)-5-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑-5-
基]甲醇(2-3)
在Chiralpak AD 10cm×50cm柱上,用85%己烷(+0.1%DEA)、7.5%MeOH和7.5%EtOH以150mL/min的速度洗脱来进行对映异构体2-2的拆分。分析条件:Chiralpak AD 4×250mm,以1.0mL/min的速度用85%己烷(+0.1%DEA)、7.5%MeOH洗脱,以1mL/min的速度用7.5%EtOH洗脱,保留时间为6.9min(不希望的)和8.2min(希望的)。
步骤4:4-[(5R)-1-乙酰基-3-(2,5-二氟苯基)-5-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑-5-
基]-1-氟代丁-3-烯-2-酮(2-4)
向520mg(1.6mmol)2-3在25ml CH2Cl2中的溶液中加入802mg(1.9mmol)Dess-Martin过碘烷并将得到的混合物在室温下搅拌3小时。用各50ml的5%Na2SO4水溶液和饱和的NaHCO3水溶液淬灭后,将混合物用200mL CH2Cl2稀释并剧烈搅拌45分钟。将得到的混合物倒入分液漏斗并分离各层。有机层经MgSO4干燥并浓缩以得到中间体醛,该中间体不需要纯化可直接使用。在10分钟内,向3.15mL(3.15mmol)三氟甲磺酸二丁基硼溶液(1.0M的CH2Cl2溶液)在25mL CH2Cl2中的溶液中滴加入0.227mL(3.15mmol)氟丙酮和0.686mL(3.94mmol)二异丙基乙胺在5ml CH2Cl2中的溶液。在将517mg(1.6mmol)上述醛在5ml CH2Cl2中的溶液加入之前,将得到的混合物在室温下搅拌3小时。混合物在室温下搅拌18小时,倒入含有EtOAc和1M HCl的分液漏斗,并分离各层。有机相用盐水洗涤,经MgSO4干燥,过滤并浓缩。残余物用硅胶色谱(EtOAc/己烷)纯化,得到β-羟基酮中间体。LC-MS:rt=2.3min,m/z=405(M+1).向235mg(0.6mmol)β-羟基酮中间体在5mL吡啶中的溶液中加入0.5mL(3.6mmol)三氟乙酸酐,并将得到的混合物在室温下搅拌75分钟。加入另外的0.5mL三氟乙酸酐并用几滴三氟乙酸来酸化反应物。再搅拌165分钟后,加入几滴三氟乙酸,将反应混合物浓缩并与甲苯共沸两次。残余物通过硅胶色谱(EtOAc/己烷)纯化以得到2-4。LC-MS:rt=2.5min,m/z=387(M+1)。
步骤5:[3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2,5-二氟苯基)-5-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑-
5-基]-1-(氟甲基)丙基]苄胺(2-5)
在减压条件下,将145mg(0.38mmol)2-4在150mL EtOAc中的溶液排空,并在加入50mg 10%钯-碳之前用氮气净化三次。将得到的混合物排空并用氮气净化两次以上,然后用氢气净化三次。将反应物在室温、氢气气氛下搅拌1小时,通过硅藻土垫片过滤,并且浓缩以得到胶状的酮中间体。LC-MS:rt=2.5min,m/z=389(M+1)。向135mg(0.35mmol)上述酮在3mL二氯乙烷中的溶液中加114μL(1.04mmol)苄胺和三滴冰醋酸。将得到的混合物在室温下在密封瓶中搅拌45分钟,然后加入148mg(0.70mmol)三乙酰氧基硼氢化钠。将混合物搅拌16小时,倒入含有EtOAc的分液漏斗,用饱和的NaHCO3水溶液和盐水依次洗涤。有机层经MgSO4干燥、过滤并浓缩。通过硅胶色谱(EtOAc/己烷)纯化残余物而得到胶状的2-5。LC-MS:rt=1.9min,m/z=480(M+1)。
步骤6:[3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2,5-二氟苯基)-5-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑-
5-基]-1-(氟甲基)丙基]胺(2-6)
在减压条件下,将167mg(0.35mmol)2-5在25mL MeOH中的溶液排空,并在加入20mg 10%钯-碳之前用氮气净化三次。将得到的混合物排空并用氮气净化两次以上,然后用氢气净化三次。将反应物在室温、氢气气氛下搅拌17小时,过滤,和浓缩以得到胶状的2-6。LC-MS:峰位于rt=1.7min,m/z=390(M+1)。
步骤7:[(1R)-3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2,5-二氟苯基)-5-苯基-4,5-二氢-1H-
吡唑-5-基]-1-(氟甲基)丙基]胺和[(1S)-3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2,5-二氟苯
基)-5-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑-5-基]-1-(氟甲基)丙基]胺(2-7)和(2-8)
在Chiralpak AD 5cm×50cm柱上,用50%己烷(+0.1%DEA)和50%2-丙醇以100mL/min的速度洗脱来进行对映异构体2-6的拆分。分析条件:Chiralpak AD 4×250mm,以1.0mL/min的速度用50%己烷(+0.1%DEA)和50%2-丙醇洗脱,2-7的保留时间为4.5min,2-8为6.2min。非对映异构体2-7需要通过硅胶色谱纯化(己烷/EtOAc,随后用EtOAc/80∶10∶10CHCl3∶EtOAc∶MeOH洗脱),得到白色固体状的2-7。2-7的数据:1HNMR(500MHz,CDCl3)δ7.67(m,1H),7.35(m,2H),7.27(m,3H),7.07(m,2H),4.47-4.15(m,2H),3.62-3.45(m,2H),3.10(m,1H),2.89(m,1H),2.44(m,4H),1.37(m,2H)ppm,HRMS(ES)M+H C21H22F3N3O1的计算值:390.1788,实测值:390.1797。得到的胶状的非对映异构体2-8。2-8的数据:1HNMR(500MHz,CDCl3)δ7.67(m,1H),7.35(m,2H),7.26(m,3H),7.07(m,2H),4.45-4.25(m,2H),3.61-3.45(m,2H),3.12(m,1H),3.00(m,1H),2.44(s,3H),2.24(m,1H),1.37(m,2H)ppm,HRMS(ES)M+H C21H22F3N3O1计算值:390.1788,实测值:390.1803。没有确定非对映异构体2-7和2-8的(氟甲基)丙胺侧链的绝对立体化学,在上述化学反应方案中举例说明的侧链的立体化学归属是随机指定的。
序列表
<110>Merck&Co.,Inc.
Coleman,Paul J.
Hartman,George D.
<120>有丝分裂驱动蛋白的抑制剂
<130>21912
<150>60/669,085
<151>2005-04-07
<160>2
<170>FastSEQ for Windows Version 4.0
<210>1
<211>42
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>完全合成的核苷酸序列
<400>1
gcaacgatta atatggcgtc gcagccaaat tcgtctgcga ag 42
<210>2
<211>60
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>完全合成的核苷酸序列
<400>2
gcaacgctcg agtcagtgat gatggtggtg atgctgattc acttcaggct tattcaatat 60
Claims (13)
1.式I化合物或其药学上可接受的盐或立体异构体:
其中
a独立地是0或1;
b独立地是0或1;
m独立地是0、1或2;
n是0至3;
p是0至2;
R1选自:
1)C1-C10烷基,和
2)C3-C8环烷基,
所述烷基和环烷基任选地被一个或多个选自R6的取代基所取代;或
R2和R4独立地选自:
1)H,
2)ObC1-C10烷基,
3)C3-C8环烷基,
4)卤素,
5)CN,和
6)OH,
所述烷基和环烷基任选地被一个、两个或三个选自R6的取代基所取代;或
R3是卤素;
R5选自F和-CH2F;
R6独立地是:
1)(C=O)aObC1-C10烷基,
2)(C=O)aOb芳基,
3)C2-C10链烯基,
4)C2-C10炔基,
5)(C=O)aOb杂环基,
6)CO2H,
7)卤素,
8)CN,
9)OH,
10)ObC1-C6全氟烷基,
11)Oa(C=O)bNR8R9,
12)S(O)mRa,
13)S(O)2NR8R9,
14)氧原子,
15)CHO,
16)(N=O)R8R9,或
17)(C=O)aObC3-C8环烷基,
所述烷基、芳基、链烯基、炔基、杂环基和环烷基任选地被一个或多个选自R7的取代基所取代;
R7独立地选自:
1)(C=O)aOb(C1-C10)烷基,
2)Ob(C1-C3)全氟烷基,
3)氧原子,
4)OH,
5)卤素,
6)CN,
7)(C2-C10)链烯基,
8)(C2-C10)炔基,
9)(C=O)aOb(C3-C6)环烷基,
10)(C=O)aOb(C0-C6)亚烷基-芳基,
11)(C=O)aOb(C0-C6)亚烷基-杂环基,
12)(C=O)aOb(C0-C6)亚烷基-N(Rb)2,
13)C(O)Ra,
14)(C0-C6)亚烷基-CO2Ra,
15)C(O)H,
16)(C0-C6)亚烷基-CO2H,和
17)C(O)N(Rb)2,
18)S(O)mRa,和
19)S(O)2NR8R9;
所述烷基、链烯基、炔基、环烷基、芳基和杂环基任选地被至多三个选自Rb、OH、(C1-C6)烷氧基、卤素、CO2H、CN、O(C=O)C1-C6烷基、氧原子和N(Rb)2的取代基所取代;或
连接在同一个碳原子上的两个R7结合形成-(CH2)u-,其中u是3至6以及一个或两个碳原子任选地被选自O、S(O)m、-N(Ra)C(O)-、-N(Rb)-和-N(CORa)-的部分所替代;
R8和R9独立地选自:
1)H,
2)(C=O)ObC1-C10烷基,
3)(C=O)ObC3-C8环烷基,
4)(C=O)Ob芳基,
5)(C=O)Ob杂环基,
6)C1-C10烷基,
7)芳基,
8)C2-C10链烯基,
9)C2-C10炔基,
10)杂环基,
11)C3-C8环烷基,
12)SO2Ra,和
13)(C=O)NRb 2,
所述烷基、环烷基、芳基、杂环基、链烯基和炔基任选地被一个、两个或三个选自R6的取代基所取代;或
R8和R9可以与它们所连接的氮一起形成单环或二环杂环,所述杂环在每个环中具有5-7个环原子并且除了所述氮以外,还任选地含有一个或两个选自N、O和S的另外的杂原子,所述单环或二环杂环任选地被一个、两个或三个选自R7的取代基取代;
Ra独立地选自(C1-C6)烷基、(C3-C6)环烷基、芳基和杂环基;和
Rb独立地选自H、(C1-C6)烷基、芳基、杂环基、(C3-C6)环烷基、(C=O)OC1-C6烷基、(C=O)C1-C6烷基或S(O)2Ra。
2.根据权利要求1的式II化合物或其药学上可接受的盐或立体异构体:
其中
a独立地是0或1;
b独立地是0或1;
m独立地是0、1或2;
R1选自:
1)C1-C10烷基,和
2)C3-C8环烷基,
R2选自:
1)H,
2)C1-C4烷基,
3)卤素,和
4)OH,
所述烷基任选地被一个、两个或三个选自R6的取代基所取代;R3选自氯、氟和溴;
R5是F;
R6独立地是:
1)(C=O)aObC1-C10烷基,
2)(C=O)aOb芳基,
3)C2-C10链烯基,
4)C2-C10炔基,
5)(C=O)aOb杂环基,
6)CO2H,
7)卤素,
8)CN,
9)OH,
10)ObC1-C6全氟烷基,
11)Oa(C=O)bNR8R9,
12)S(O)mRa,
13)S(O)2NR8R9,
14)氧原子,
15)CHO,
16)(N=O)R8R9,或
17)(C=O)aObC3-C8环烷基,
所述烷基、芳基、链烯基、炔基、杂环基和环烷基任选地被一个或多个选自R6的取代基所取代;
R7独立地选自:
1)(C=O)aOb(C1-C10)烷基,其中r和s独立地是0或1,
2)Ob(C1-C3)全氟烷基,其中r是0或1,
3)氧原子,
4)OH,
5)卤素,
6)CN,
7)(C2-C10)链烯基,
8)(C2-C10)炔基,
9)(C=O)aOb(C3-C6)环烷基,
10)(C=O)aOb(C0-C6)亚烷基-芳基,
11)(C=O)aOb(C0-C6)亚烷基-杂环基,
12)(C=O)aOb(C0-C6)亚烷基-N(Rb)2,
13)C(O)Ra,
14)(C0-C6)亚烷基-CO2Ra,
15)C(O)H,
16)(C0-C6)亚烷基-CO2H,和
17)C(O)N(Rb)2,
18)S(O)mRa,和
19)S(O)2NR8R9;
所述烷基、链烯基、炔基、环烷基、芳基和杂环基任选地被至多三个选自Rb、OH、(C1-C6)烷氧基、卤素、CO2H、CN、O(C=O)C1-C6烷基、氧原子和N(Rb)2的取代基所取代;或
连接在同一个碳原子上的两个R7结合形成-(CH2)u-,其中u是3至6以及一个或两个碳原子任选地被选自O、S(O)m、-N(Ra)C(O)-、-N(Rb)-和-N(CORa)-的部分所替代;
R8和R9独立地选自:
1)H,
2)(C=O)ObC1-C10烷基,
3)(C=O)ObC3-C8环烷基,
4)(C=O)Ob芳基,
5)(C=O)Ob杂环基,
6)C1-C10烷基,
7)芳基,
8)C2-C10链烯基,
9)C2-C10炔基,
10)杂环基,
11)C3-C8环烷基,
12)SO2Ra,和
13)(C=O)NRb 2,
所述烷基、环烷基、芳基、杂环基、链烯基和炔基任选地被一个、两个或三个选自R6的取代基所取代;或
R8和R9可以与它们所连接的氮一起形成单环或二环杂环,所述杂环在每个环中具有5-7个环原子,并且除了所述氮以外,还任选地含有一个或两个选自N、O和S的另外的杂原子,所述单环或二环杂环任选地被一个、两个或三个选自R6的取代基取代;
Ra独立地选自(C1-C6)烷基、(C3-C6)环烷基、芳基和杂环基;和
Rb独立地选自H、(C1-C6)烷基、芳基、杂环基、(C3-C6)环烷基、(C=O)OC1-C6烷基、(C=O)C1-C6烷基或S(O)2Ra。
3.根据权利要求2的式III化合物或其药学上可接受的盐或立体异构体:
其中
a独立地是0或1;
b独立地是0或1;
m独立地是0、1或2;
R1选自:
1)C1-C10烷基,和
2)C3-C8环烷基,
R2选自:
1)H,
2)C1-C4烷基,
3)卤素,和
4)OH,
所述烷基任选地被一个、两个或三个选自R6的取代基所取代;
R3选自氯、氟和溴;
R5是-CH2F;
R6独立地是:
1)(C=O)aObC1-C10烷基,
2)(C=O)aOb芳基,
3)C2-C10链烯基,
4)C2-C10炔基,
5)(C=O)aOb杂环基,
6)CO2H,
7)卤素,
8)CN,
9)OH,
10)ObC1-C6全氟烷基,
11)Oa(C=O)bNR8R9,
12)S(O)mRa,
13)S(O)2NR8R9,
14)氧原子,
15)CHO,
16)(N=O)R8R9,或
17)(C=O)aObC3-C8环烷基,
所述烷基、芳基、链烯基、炔基、杂环基和环烷基任选地被一个或多个选自R6的取代基所取代;
R7独立地选自:
1)(C=O)aOb(C1-C10)烷基,其中r和s独立地是0或1,
2)Ob(C1-C3)全氟烷基,其中r是0或1,
3)氧原子,
4)OH,
5)卤素,
6)CN,
7)(C2-C10)链烯基,
8)(C2-C10)炔基,
9)(C=O)aOb(C3-C6)环烷基,
10)(C=O)aOb(C0-C6)亚烷基-芳基,
11)(C=O)aOb(C0-C6)亚烷基-杂环基,
12)(C=O)aOb(C0-C6)亚烷基-N(Rb)2,
13)C(O)Ra,
14)(C0-C6)亚烷基-CO2Ra,
15)C(O)H,
16)(C0-C6)亚烷基-CO2H,和
17)C(O)N(Rb)2,
18)S(O)mRa,和
19)S(O)2NR8R9;
所述烷基、链烯基、炔基、环烷基、芳基和杂环基任选地被至多三个选自Rb、OH、(C1-C6)烷氧基、卤素、CO2H、CN、O(C=O)C1-C6烷基、氧原子和N(Rb)2的取代基所取代;或
连接在同一个碳原子上的两个R7结合形成-(CH2)u-,其中u是3至6以及一个或两个碳原子任选地被选自O、S(O)m、-N(Ra)C(O)-、-N(Rb)-和-N(CORa)-的部分所替代;
R8和R9独立地选自:
1)H,
2)(C=O)ObC1-C10烷基,
3)(C=O)ObC3-C8环烷基,
4)(C=O)Ob芳基,
5)(C=O)Ob杂环基,
6)C1-C10烷基,
7)芳基,
8)C2-C10链烯基,
9)C2-C10炔基,
10)杂环基,
11)C3-C8环烷基,
12)SO2Ra,和
13)(C=O)NRb 2,
所述烷基、环烷基、芳基、杂环基、链烯基和炔基任选地被一个、两个或三个选自R6的取代基所取代;或
R8和R9可以与它们所连接的氮一起形成单环或二环杂环,所述杂环在每个环中具有5-7个环原子,并且除了所述氮以外,还任选地含有一个或两个选自N、O和S的另外的杂原子,所述单环或二环杂环任选地被一个、两个或三个选自R6的取代基取代;
Ra独立地选自(C1-C6)烷基、(C3-C6)环烷基、芳基和杂环基;和
Rb独立地选自H、(C1-C6)烷基、芳基、杂环基、(C3-C6)环烷基、(C=O)OC1-C6烷基、(C=O)C1-C6烷基或S(O)2Ra。
4.选自以下的化合物:
(2S)-3-[(5R)-1-乙酰基-3-(2,5-二氟苯基)-5-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑-5-基]-2-氟代丙烷-1-胺
(2R)-3-[(5R)-1-乙酰基-3-(2,5-二氟苯基)-5-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑-5-基]-2-氟代丙烷-1-胺
(2S)-3-[(5R)-1-乙酰基-3-(2-氟-5-氯代苯基)-5-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑-5-基]-2-氟代丙烷-1-胺
(2S)-3-[(5R)-1-乙酰基-3-(2-氟-5-溴代苯基)-5-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑-5-基]-2-氟代丙烷-1-胺
(2S)-3-[(5R)-1-环丙酰基-3-(2,5-二氟苯基)-5-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑-5-基]-2-氟代丙-1-胺
(2S)-3-[(5R)-1-环丁酰基-3-(2,5-二氟苯基)-5-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑-5-基]-2-氟代丙烷-1-胺
[(1R)-3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2,5-二氟苯基)-5-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑-5-基]-1-(氟代甲基)丙基]胺
[(1S)-3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2,5-二氟苯基)-5-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑-5-基]-1-(氟代甲基)丙基]胺
或其药学上可接受的盐或立体异构体。
8.药物组合物,其由根据权利要求1的化合物和药学上可接受的载体组成。
9.一种在需要治疗的哺乳动物中治疗或预防癌症的方法,所述方法由给予所述哺乳动物治疗有效量的权利要求1的化合物组成。
10.根据权利要求9的治疗癌症或预防癌症的方法,其中所述癌症选自脑癌、泌尿生殖道癌、淋巴系统癌、胃癌、喉癌和肺癌。
11.根据权利要求9的治疗或预防癌症的方法,其中所述癌症选自组织细胞淋巴瘤、肺腺癌、小细胞肺癌、胰腺癌、成胶质细胞瘤和乳腺癌。
12.利用根据权利要求1的化合物制备可用于在需要治疗的哺乳动物中治疗或预防癌症的药物的方法。
13.利用根据权利要求1的化合物制备可用于在需要治疗的哺乳动物中抑制有丝分裂驱动蛋白KSP的药物的方法。
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