CN101119755A - 接触镜片护理组合物 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及含有米替福新(miltefosine)的眼科组合物，例如接触镜片护理溶液。本发明进一步涉及含有与其它活性抗微生物物质或蛋白酶结合的米替福新的眼科组合物或接触镜片护理体系。此外，本发明涉及使用该组合物从接触镜片上去除和杀灭原生动物寄生物，例如棘阿米巴原虫(Acanthamoeba)。

Description

接触镜片护理组合物
技术领域
本发明涉及对棘阿米巴原虫(Acanthamoeba)具有增强的抗微生物效力的组合物。
背景技术
棘阿米巴角膜炎是主要与接触镜片佩戴有关的角膜病。自1990年来，与接触镜片佩戴者的数量提高有关，棘阿米巴角膜炎的发生率上升。在全世界已经报道了大约3000例棘阿米巴角膜炎。该疾病通常进展缓慢，但在多数情况下以暴发性感染终结，极常造成视力的严重损失，有时甚至造成受扰眼睛的摘除。同时，棘阿米巴原虫是除假单胞菌外接触镜片相关性角膜炎的最常见病原体。据估计，棘阿米巴角膜炎在美国的年发病率为1∶250,000个居民。在欧洲，多数案例经文件证明在UK(大约400例)。
受污染的接触镜片、镜片盒或接触镜片护理体系通常是棘阿米巴角膜炎发病机理中的第一步。通过从取自浴室水龙头的水和从脸盆附近的灰尘中分离棘阿米巴原虫，反映了容易发生人类感染的迹象。由于棘阿米巴原虫物种在环境中普遍存在，镜片护理体系甚至可能被空气中的灰尘污染。接触镜片盒和源自自来水或其它地方的溶液中细菌的存在容易引起眼部棘阿米巴原虫感染。变形虫以细菌为食并繁殖，结果可能存在大量潜在变形虫培养液。
一些研究已经表明，棘阿米巴原虫消毒剂的作用不足并在不同菌株之间变动。耐药性和amoebostatic而非amoebicidic效应的发展是现有药物的禁忌症(counter indicator)。由此，仍然需要抑制眼睛护理产品(例如接触镜片、接触镜片溶液和接触镜片盒)中的原生动物(例如棘阿米巴原虫)生长的组合物，从而降低由原生动物的存在引起的棘阿米巴角膜炎和其它眼科病状的发生率。棘阿米巴角膜炎病例中施用的现有药物包括羟乙磺酸丙氧苯脒(propamidine isethionate)、葡萄糖酸氯己定和聚六亚甲基双胍(Schuster等人，Cur.Treatm.Opt.Inf.Dis.5：273-282，2003)。
普通消毒性接触镜片护理组合物是现有技术状况中已知的并例如在WO 04/058930A1中公开。这类普通消毒剂经测试(参见实施例)和证实对接触镜片上的棘阿米巴原虫污染无效。
WO 2004/030710A1描述了包含抗微生物多阳离子材料的用作滴眼液或接触镜片清洗液的眼科组合物。这类多阳离子材料是例如具有多价阳离子螯合部分，例如季氨基的阳离子纤维素衍生物，它们有效抑制了原生动物细胞功能，特别是细胞生长。
GB 2 329 126A描述了含有聚六亚甲基双胍的消毒剂溶液。
Silvany等人(Ophthalmology 97(3)286-90(摘要)，1990)分析了对抗棘阿米巴原虫的接触镜片消毒剂。研究中的最有效化合物是氯己定。
GB 2 333 609A描述了抑制棘阿米巴原虫粘附到接触镜片上的水杨酸钠溶液。
此外，潜在的眼药或保存剂必须满足某些标准，例如必须避免对泪膜稳定性的有害作用。泪膜是由脂质、水相和粘蛋白相构成的7微米厚的三层流体(Holly等人，Exp.Eye Res.15：515-525，1973)。角膜上的这种泪膜的任何不连续性和不稳定性可能导致被称为干眼症的眼睛不润湿泪液失调。通过包括破裂时间试验、Schirmer试验、荧光素和玫瑰红染色和活组织显微镜检查法在内的不同临床试验评估泪液失调(Stulting等人，在Leibowitz，Corneal Disorders，Clinical Diagnosis andManagement，W.B.Saunders，Philadelphia，PA，pp.445-468，1984中)。表面活性剂尤其可能溶解泪膜的脂质层，这会导致泪膜破裂(Furrer等人，Eu.J.Pharm.Bioph.，53：262-280，2002)。
在最近的研究中，已经显示，米替福新(miltefosine)(1-十六烷基磷酰胆碱，也称作十六烷基磷酸胆碱，也称作HePC)对具有不同病原性的棘阿米巴原虫的三种菌株的滋养体和包囊表现出高的amoebicidal活性。用米替福新处理导致液泡化、细胞变圆并立起不再贴壁(rounding up)、起泡(blebbing)和在不到30分钟后细胞的最终完全裂解。(Walochnik等人，Antimicrob.Agents Chemother.46：695-701，2002)。但是，市售多用途溶液仅对滋养体表现出(微小)反应性，而对包囊没有表现出反应性(Hiti等人，Br J Ophthalmol.86：144-6，2002)。
米替福新是具有离子和亲脂特性的去污剂类药物。其是磷酰胆碱和十六烷醇的酯并因此类似膜活性烷基磷脂。其是CTP磷酸胆碱胞苷酰转移酶(cytidylyl transferase)的抑制剂并具有抗转移性能。此外，其是非常有效的对抗内脏利什曼虫感染的药物。利什曼虫具有高的醚-脂质水平且米替福新被认为作用于参与醚脂质代谢的关键酶(More等人，J.Postgrad.Med.49：101-103，2003)。利什曼病是非常恶性的热带病并通过白蛉传播。内脏利什曼病的症状包括发热、脾和肝肿大、血虚、粘膜出血和严重的体重减轻。皮肤利什曼病，尽管不是致死的，但却是严重毁容的症状。米替福新(Impavido)在多数州被准许用于利什曼病的口服治疗。
发明内容
本发明的基础的技术问题是提供能够有效预防原生动物眼部感染的手段和方法，尤其是在接触镜片护理领域中。本发明的特别目标是提供通过接触镜片佩戴传播的棘阿米巴原虫感染的预防手段。
其基础是：使用十六烷基磷酸胆碱在棘阿米巴原虫能够造成任何伤害之前精确地在其进入人眼的主要路径上清除棘阿米巴原虫。这有助于通过进行预防而非治疗来节省健康护理成本。
尽管米替福新对棘阿米巴原虫的效力是现有技术中已知的，但这种化合物的实际应用此前仅限于利什曼病的口服治疗。米替福新的亲酯性和表面活性之类的因素似乎是在本文所列的组合物所用的禁忌症。
令人惊讶地，本发明的组合物没有表现出负作用，这使其能够以对原生动物病菌(例如棘阿米巴原虫)的惊人效力用在眼科组合物或镜片护理体系中。
本发明提供了含有将接触镜片有效消毒的量的米替福新作为抗微生物剂的接触镜片护理组合物。米替福新在此是主要amoebicidal物质，优选用于从接触镜片上杀灭棘阿米巴原虫和原生动物生物体。优选地，棘阿米巴原虫株属于念珠菌(A.castellani)、A.hachetti和A.polyphaga。
与眼睛和随后放在眼中的接触镜片相关使用的组合物需要例如避免不舒适性和对眼睛的伤害。目前使用的某些抗菌组合物使用在与亲水软接触镜片一起使用时可以被吸收和富集在镜片中的抗菌药。这种镜片如果放在眼中，可以释放出造成眼睛发炎的浓溶液。因此，眼科组合物由可以介导所用特定抗微生物物质的作用或改变其溶度的物质构成。眼科组合物中常用的附加物质是缓冲剂、表面活性剂、增粘组分、张力组分和螯合剂。
本发明可以与所有接触镜片，例如传统的硬、软、硬质和软质透气镜片一起使用，但本发明在软镜片盒系统中的应用尤其有利。本发明的组合物可以是水性或非水性的。水溶液是优选的。本发明的组合物也可以压制成药片形式。在使用之前，可以将药片溶解在水或接触镜片护理体系所用的任何其它溶液中。如果组合物以固体形式提供，本发明的说明书和权利要求中给出的所有浓度均是指该组合物的化合物在适当溶剂化后具有的浓度。
在本发明的组合物的优选实施方案中，米替福新的浓度为5至500μM，更优选10至300μM，再优选20至200μM。
本发明的组合物的优选实施方案进一步包括缓冲组分(磷酸盐或其它缓冲盐，例如TRIS)，其量能够使溶液的pH值保持在生理可接受范围内，优选为6至8的pH值。
该组合物也可以包含有效清洗接触镜片的量的表面活性剂。表面活性剂的例子是poloxamines、泊洛沙姆(poloxamers)、乙氧基化烷基酯、乙氧基化烷基苯酯或本领域已知的其它非离子型、阴离子型和偶极离子型表面活性剂。
本发明的组合物的另一实施方案还包括增粘组分，优选选自纤维素衍生物、多元醇、含聚环氧乙烷(PEO)的聚合物、聚乙烯醇和聚乙烯基吡咯烷酮。纤维素衍生物是，例如，阳离子型纤维素聚合物、羟丙基甲基纤维素、羟乙基纤维素和甲基纤维素。多元醇的一个例子是聚乙二醇。
本发明的组合物还优选包含张力组分，优选为盐，例如氯化钠、氯化钾和氯化钙，或非离子型张力剂，优选丙二醇或丙三醇。实用张力在200-600mOsm的优选范围内，和250-450mOsm的更优选范围内。
本发明的组合物的另一实施方案还包括螯合组分，优选乙二胺四乙酸、乙二胺四乙酸的碱金属盐或其混合物。
本发明的组合物的另一实施方案还包括蛋白酶。蛋白酶(酶促清洁剂)尤其可用于对高含量的蛋白沉积物敏感的接触镜片佩戴者。
本发明的组合物的另一实施方案还包括其它消毒剂。除米替福新外的其它消毒剂可作为功能保存剂使用，但其也可用于控制(potentate)、补充或增宽另一杀菌剂的杀微生物活性谱。合适的抗微生物组分是通常用于眼科用途的那些，包括但不限于，用于眼科用的季铵盐，例如聚[二甲基亚氨基-2-丁烯-1，4-二基]氯化物、α-[4-三(2-羟乙基)铵]-二氯化物、卤化苯甲烃铵(benzalkonium halides)、和双胍，(例如双胍啶的盐、无双胍啶的碱、氯己定的盐、六亚甲基双胍及其聚合物、和它们的盐)、抗微生物的多肽、二氧化氯前体，和类似物和它们的混合物。通常，六亚甲基双胍聚合物(PHMB)，也称作聚氨基丙基双胍(PAPB)是优选的。
如上所述，本发明的组合物可以以固态提供。因此，本发明提供了以药片形式压制的用于清洗接触镜片的含米替福新的组合物。
本发明包括含有米替福新的组合物用于清洗、化学消毒、储存或漂洗接触镜片的用途。
本发明的组合物的另一用途涉及从接触镜片上清除原生动物生物体。
优选地，本发明的组合物用于从接触镜片上清除棘阿米巴原虫。
本发明还包括本接触镜片护理组合物的用途，其中接触镜片选自硬、软、硬质或软质透气镜片，优选为软镜片。
本发明的组合物可用作接触镜片的储存溶液以防止棘阿米巴原虫和其它原生动物生物体的污染。因此，本发明包括接触镜片的净化方法，其中接触镜片在本发明的组合物中储存至少1分钟。
本发明的优选实施方案是含有本发明的组合物的“多用途溶液”。术语“多用途溶液”是指溶液可以每天或定期用于清洗，化学消毒、储存和漂洗接触镜片。
本发明还包括包含本发明的组合物以及漂洗溶液和/或液滴输送工具，优选吸移管的“多用途溶液体系”或“多用途溶液套装”或“药盒”。漂洗溶液可以是适当的已灭菌缓冲溶液或人工泪液。这种药盒可以含有用于日常使用的成套的本发明组合物(药片或溶液套装)。
作为本发明的例证，下面提供一些实施例。这些实施例仅用于进一步例证本发明的各方面而不应该被视为限制本发明。
测试各种多用途接触镜片溶液(在不磨损镜片的同时用于清洗、漂洗、储存和消毒接触镜片)对念珠菌(A.castellani)的包囊的活性。
具体实施方式
实施例1：米替福新和接触镜片溶液
测试的接触镜片消毒溶液(表1)购自当地零售店。在H2O2基体系的情况下，根据制造商的指示通过位于接触镜片储盒内的催化铂盘在6小时内实现3％过氧化氢的中和。将米替福新溶于5％乙醇(2mM储液)并以80μM在棘阿米巴原虫培养基(PYG)中或在接触镜片消毒介质中测试。
实施例2：用于敏感试验的棘阿米巴原虫包囊制造
从患有严重棘阿米巴角膜炎的患者中分离出念珠菌。将角膜上皮细胞接种到被48小时大的大肠杆菌培养物覆盖的非营养性琼脂平板上，由此实现分离。通过将单个包囊转移到带有显微操纵器的干净平板上，克隆分离菌。从平行培养物中收取包囊并将它们在3％HCl中培养过夜以清除共存的细菌，由此实现无菌化培养(axenisation)。然后将包囊转移到无菌的滤过PYG((月示)蛋白胨-酵母提取物-葡萄糖)中，其作为无菌培养基继续使用。通过没有添加新鲜培养基的长期储存，实现变形虫的同步成囊。每天通过相差显微镜观察成囊过程，包括包囊壁的形态变化。在14天后，两个菌株的包囊均处于其成熟期。通过离心收取包囊(500g/7分钟)，再悬浮在无菌0.9％NaCl中并在Burker-Turk血球计中计数。每一菌株制备两种悬浮液，分别为一种104个包囊/毫升，一种108个包囊/毫升。
实施例3：棘阿米巴原虫包囊的敏感试验的表现
在15毫升离心管中进行试验。每管添加100微升各自的包囊悬浮液(103个细胞)和8毫升各自的接触镜片溶液。所有溶液均根据制造商的指示使用。在8小时浸泡时间后，将各个管的碎片(在500g/7分钟离心后)接种到被一层大肠杆菌覆盖的非营养性琼脂平板上。将平板培养物密封并在30℃培养14天。每天通过相差显微镜观察变形虫生长。一式三份进行所有实验。对照组用无菌0.9％NaCl进行。
表1：在分别用包含H2O2(1，2)聚六亚甲基双胍(3)、山梨糖醇(4)和Bactofongus(5)的四种市售接触镜片溶液、米替福新和包含米替福新的接触镜片溶液培养后，在8小时后在非营养性琼脂平板上检测的活细胞(+，活细胞；-，无活细胞)。
  用市售消毒剂消毒后的活棘阿米巴原虫细胞  用包含80μM米替福新的市售消毒剂消毒后的活棘阿米巴原虫细胞
  1   +  -
  2   +  -
  3   +  -
  4   +  -
  5   +  -
  米替福新   -
  9％NaCl   +  -

Claims (19)

1.含有将接触镜片有效消毒的量的米替福新作为抗微生物剂的接触镜片护理组合物。
2.根据权利要求1的组合物，其中米替福新的量为5-500μM。
3.根据权利要求1或2的组合物，其中米替福新的量为20-200μM。
4.根据权利要求1至3任一项的组合物，其包含缓冲剂组分，优选包含磷酸盐缓冲剂组分。
5.根据权利要求1至4任一项的组合物，其中溶液的pH值为6-8。
6.根据权利要求1至5任一项的组合物，其还包含表面活性剂。
7.根据权利要求1至6任一项的组合物，其还包含增粘组分，优选选自纤维素衍生物、多元醇、含聚环氧乙烷(PEO)的聚合物、聚乙烯醇或聚乙烯基吡咯烷酮。
8.根据权利要求1至7任一项的组合物，其包含张力组分，优选为盐，例如氯化钠、氯化钾和氯化钙，或非离子型张力剂，优选丙二醇或丙三醇。
9.根据权利要求1至8任一项的组合物，其包含螯合组分，优选乙二胺四乙酸、乙二胺四乙酸的碱金属盐或其混合物。
10.根据权利要求1至9任一项的组合物，其还包含蛋白酶。
11.根据权利要求1至10任一项的组合物，其还包含其它消毒剂。
12.根据权利要求1至11任一项的组合物，其以药片形式压制。
13.根据权利要求1至12任一项的组合物用于清洗、化学消毒、储存和/或漂洗接触镜片的用途。
14.根据权利要求1至12任一项的组合物用于从接触镜片上清除原生动物生物体的用途。
15.根据权利要求1至12任一项的组合物用于从接触镜片上清除棘阿米巴原虫的用途。
16.根据权利要求13至15任一项的用途，其中接触镜片选自硬、软、硬质或软质透气镜片，优选软镜片。
17.接触镜片的净化方法，其中将接触镜片在根据权利要求1至12任一项的组合物中储存至少1分钟。
18.含有根据权利要求1至12任一项的组合物的多用途溶液。
19.含有根据权利要求1至12任一项的组合物、漂洗溶液和/或液滴输送工具，优选吸移管的药盒。
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