CN101055270A - 精子活力快速检测试剂盒及其制备和使用方法 - Google Patents

精子活力快速检测试剂盒及其制备和使用方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种精子活力快速检测试剂盒及其制备和使用方法,本试剂盒包括精液收集盒、曲拉通X100溶液、碘化丙啶溶液、标准色卡和试验板,所述的精液收集盒由塑料收集盒和精液液化剂组成,所述的试验板包括外壳、基板,外壳中央有两个试验孔,所述基板上有吸水纸、过滤膜,标准色卡的颜色为经显微镜计数确认的不同浓度精子样品分别加入浓度为0.05-0.2%的曲拉通溶液和浓度为0.01-0.5%碘化丙啶溶液试验结果的颜色。本发明的优点:能够快速准确地检测出有活力的精子的数量,从而诊断出男性是否能够生育后代,比以往传统的诊断方法节省很多时间,使用简单,在药店购买、家庭使用即可,使使用者没有羞涩感。

Description

精子活力快速检测试剂盒及其制备和使用方法
技术领域
本发明涉及一种体外诊断类医疗器械,具体是一种适用于男性精子活力的快速检测试剂盒。
背景技术
生育专家报道,世界上大约15%的夫妇在一年内(无避孕措施)不能怀孕,这些病例中的40%是由于男性因素引起。还有男性科专家报道,男性不育的发病率大约为6-12%。上述报道,说明男性不育的人群是相当大的一个人群。
目前诊断男性不育的主要方法是精液的显微镜下诊断,即精子形态学检测,这也是男性不育诊断的金标准。但是这个方法存在许多缺点,比如:由于中国人的传统观念,不好意思去医院诊治男性不育方面的疾病,因而延误了治疗。即使去了医院,由于取精子的条件有限,受到环境、方法、时间的限制,不易取得样品。去医院看病比较繁琐,必须经过挂号、开处方等一系列的程序,还有一种是检测精子活力的试剂盒,只能检测所有精子的数量,即有活力和没有活力的精子的总数,不能检测出活的精子的数量,对诊断结果具有的参考意义有限。
发明内容
本发明的目的是为了克服现有技术的缺点,提供一种可以在家里即可操作、快速、使用方便、价格便宜,并且能诊断出有活力的精子的数量的精子活力快速检测试剂盒。
本发明的第二个目的是提供一种精子活力快速检测试剂盒的制备和使用方法。
为达到上述目的,本发明包括精液收集盒、曲拉通X100溶液、碘化丙啶溶液、标准色卡和试验板,所述的精液收集盒由塑料收集盒和精液液化剂组成,所述的试验板包括外壳、基板,外壳和基板是长方形的PVC塑料制成,外壳中央有两个试验孔,所述基板上有吸水纸、过滤膜,吸水纸和过滤膜位于基板上方,外壳的两个试验孔下方;吸水纸位于过滤膜下方;标准色卡的颜色为经显微镜计数确认的不同活力精子样品分别加入活力为0.05-0.2%的曲拉通溶液和活力为0.01-0.5%碘化丙啶溶液试验结果的颜色。
本发明的原理是:只有没有活力的精子才会被碘化丙啶溶液染色,所以在试验孔一被染色的精子全部为没有活力的精子,而试验孔二的精子经过细胞表面活性剂曲拉通X-100溶液破坏后,全部变成没有活力的精子,所以在试验孔二被染色的精子为精子的总数量,把试验孔一和试验孔二的试验结果分别与比色卡对比,得出没有活力的精子的数量和精子的总数量,用精子的总数量减去没有活力的精子的数量,即可得出有活力的精子的数量。
一种精子活力快速检测试剂盒的制备方法,包括如下步骤:
制备浓度为0.05-0.2%的曲拉通溶液:把曲拉通加入磷酸缓冲液充分溶解,过滤后置室温保存;
制备浓度为0.01-0.5%碘化丙啶溶液:把碘化丙啶加入磷酸缓冲液充分溶解,过滤后置室温避光保存;
制备标准色卡:用经过显微镜计数确认的500万、1000万、2000万、3000万、4000万、5000万、6000万、7000万、8000万、9000万、10000万个/毫升精子样品分别加入浓度为0.05-0.2%的曲拉通溶液和浓度为0.01-0.5%碘化丙啶溶液,根据试验结果的颜色,制备出标准色卡;
将过滤膜和吸水纸依次置于基板上方,试验孔下方。
本发明的优点:能够快速准确地检测出精子的活力,即有活力的精子的数量,从而诊断出男性是否能够生育后代,比以往传统的诊断方法节省很多时间,使用简单,在药店购买、家庭使用即可,不用去医院就诊,使使用者没有羞涩感,使夫妻可以提前知道自己的潜在的生育问题,使用本试剂盒还可以对男子绝育手术后效果进行检测,也可用于精子库对精子质量进行筛选。
附图说明
下面结合附图对本发明做进一步详细的说明。
图1是本发明试验板的结构示意图。
图中1.基板 2.外壳 3.试验孔一 4.试验孔二 5.过滤膜 6.吸水纸
具体实施方式
本发明的试验板包括精液收集盒、曲拉通X-100溶液、碘化丙啶溶液、标准色卡和试验板,所述的精液收集盒由塑料收集盒和精液液化剂组成,所述的试验板包括外壳2、基板1,外壳2和基板1是长方形的PVC塑料制成,外壳2中央有两个试验孔,所述基板上有吸水纸6、过滤膜5,吸水纸6和过滤膜5位于基板1上方,外壳2的两个试验孔下方;吸水纸3位于过滤膜5下方;标准色卡的颜色为经显微镜计数确认的不同浓度精子样品分别加入浓度为0.05-0.2%的曲拉通溶液和浓度为0.01-0.5%碘化丙啶溶液试验结果的颜色。所述的过滤膜为玻璃纤维膜,孔径范围1-30微米,大小尺寸为约10毫米×10毫米;所述的吸水纸大小尺寸和过滤膜一致。所述的精液液化剂可以是酶制剂如菠萝蛋白酶,链霉蛋白酶或糜蛋白酶,非酶制剂如二硫苏糖醇,使用浓度均为1-5mg/ml。所述的标准色卡上分为由深至浅的11个区域,每个区域中央都具有1个判读孔,每个区域代表浓度分别为500万、1000万、2000万、3000万、4000万、5000万、6000万、7000万、8000万、9000万、10000万个/毫升的精子样品加入浓度为0.05-0.2%的曲拉通溶液和浓度为0.01-0.5%碘化丙啶溶液试验结果的颜色。
一种制备精子活力快速检测试剂盒的方法:
制备浓度为0.05-0.2%的曲拉通溶液:把曲拉通加入磷酸缓冲液充分溶解,过滤后置室温保存;
制备浓度为0.01-0.5%碘化丙啶溶液:把碘化丙啶加入磷酸缓冲液充分溶解,过滤后置室温避光保存;
制备标准色卡:用经过显微镜计数确认的500万、1000万、2000万、3000万、4000万、5000万、6000万、7000万、8000万、9000万、10000万个/毫升精子样品分别加入浓度为0.05-0.2%的曲拉通溶液和浓度为0.01-0.5%碘化丙啶溶液,根据试验结果的颜色,制备出标准色卡;
将过滤膜和吸水纸依次置于基板上方,试验孔下方。
一种精子活力快速检测试剂盒的使用方法如下:
收集精液样本于精液收集盒内;
精液液化,让精液在精液收集盒中液化,一般时间为15到30分钟,测定在精液收集后12小时内完成;
加样,用小塑料吸管在试验孔一和试验孔二中分别加入一滴精液,要让试验孔内过滤膜充分浸湿1分钟并让吸水纸吸干膜上的水份;
在试验孔一和试验孔二中分别加入两滴生理盐水,让试验孔内过滤膜充分浸湿1分钟并让吸水纸吸干膜上的水份;
在试验孔一中加入曲拉通溶液两滴,让试验孔内过滤膜充分侵湿1分钟;
用小塑料吸管在试验孔一和试验孔二中分别加入两滴碘化丙啶溶液,让试验孔内过滤膜充分浸湿1分钟并让吸水纸吸干膜上的水份;
在试验孔一和试验孔二中分别加入两滴生理盐水,让试验孔内过滤膜充分浸湿1分钟并让吸水纸吸干膜上的水份,要在4分钟内读取结果,超过4分钟后读取结果可能不准确;
观察试验孔一和试验孔二的颜色,并与标准色卡上的颜色对比,确定最接近的颜色,判读结果,用试验孔一的结果减去试验孔二的结果,得出的数字为该样本有活力的精子的数量。
第二次试验:每两次试验必须间隔一周以上。
两次试验结果有活力的精子均<2000万的被试验者请到医院进一步诊断治疗。

Claims (8)

1、一种精子活力快速检测试剂盒,其特征在于:包括精液收集盒、曲拉通X-100溶液、碘化丙啶溶液、标准色卡和试验板,所述的精液收集盒由塑料收集盒和精液液化剂组成,所述的试验板包括外壳、基板、吸水纸和过滤膜,外壳中央有两个试验孔,标准色卡的颜色为经显微镜计数确认的不同浓度精子样品分别加入浓度为0.05-0.2%的曲拉通溶液和浓度为0.01-0.5%碘化丙啶溶液试验结果的颜色。
2、根据权利要求1所述的一种精子活力快速检测试剂盒,其特征在于:所述试验板的外壳和基板是长方形的PVC塑料制成,吸水纸和过滤膜位于基板上方,外壳的两个试验孔下方;吸水纸位于过滤膜下方。
3、根据权利要求1所述的一种精子活力快速检测试剂盒,其特征在于:所述的过滤膜为玻璃纤维膜,孔径范围1-30微米,大小尺寸为约10毫米×10毫米;所述的吸水纸大小尺寸和过滤膜一致。
4、根据权利要求1所述的一种精子活力快速检测试剂盒,其特征在于:所述的精液液化剂可以是酶制剂如菠萝蛋白酶,链霉蛋白酶或糜蛋白酶,非酶制剂如二硫苏糖醇,使用浓度均为1-5mg/ml。
5、根据权利要求1所述的一种精子活力快速检测试剂盒,其特征在于:所述的标准色卡上分为由深至浅的11个区域,每个区域中央都具有1个判读孔,每个区域代表浓度分别为500万、1000万、2000万、3000万、4000万、5000万、6000万、7000万、8000万、9000万、10000万个/毫升的精子样品加入浓度为0.05-0.2%的曲拉通溶液和浓度为0.01-0.5%碘化丙啶溶液试验结果的颜色。
6、一种制备权利要求1-5任一项所述的精子活力快速检测试剂盒的方法,其中包括如下步骤:
制备浓度为0.05-0.2%的曲拉通溶液:把曲拉通加入磷酸缓冲液充分溶解,过滤后置室温保存;
制备浓度为0.01-0.5%碘化丙啶溶液:把碘化丙啶加入磷酸缓冲液充分溶解,过滤后置室温避光保存;
制备标准色卡:用经过显微镜计数确认的500万、1000万、2000万、3000万、4000万、5000万、6000万、7000万、8000万、9000万、10000万个/毫升精子样品分别加入浓度为0.05-0.2%的曲拉通溶液和浓度为0.01-0.5%碘化丙啶溶液,根据试验结果的颜色,制备出标准色卡;
将过滤膜和吸水纸依次置于基板上方,试验孔下方。
7、一种使用权利要求1-5任一项所述的精子活力快速检测试剂盒的方法:其中包括如下步骤:
收集精液样本于精液收集盒内;
精液液化,让精液在精液收集盒中液化,一般时间为15到30分钟,测定在精液收集后12小时内完成;
加样,用小塑料吸管在试验孔一和试验孔二中分别加入一滴精液,要让试验孔内过滤膜充分浸湿1分钟并让吸水纸吸干膜上的水份;
在试验孔一和试验孔二中分别加入两滴生理盐水,让试验孔内过滤膜充分浸湿1分钟并让吸水纸吸干膜上的水份;
在试验孔一中加入曲拉通溶液两滴,让试验孔内过滤膜充分侵湿1分钟;
用小塑料吸管在试验孔一和试验孔二中分别加入两滴碘化丙啶溶液,让试验孔内过滤膜充分浸湿1分钟并让吸水纸吸干膜上的水份;
在试验孔一和试验孔二中分别加入两滴生理盐水,让试验孔内过滤膜充分浸湿1分钟并让吸水纸吸干膜上的水份,要在4分钟内读取结果,超过4分钟后读取结果可能不准确;
观察试验孔一和试验孔二的颜色,并与标准色卡上的颜色对比,确定最接近的颜色,判读结果,用试验孔一的结果减去试验孔二的结果,得出的数字为该样本有活力的精子的数量;
第二次试验:每两次试验必须间隔一周以上;
两次试验结果有活力的精子均<2000万的被试验者请到医院进一步诊断治疗。
8、根据权利要求6所述的方法,其特征在于:所述的生理盐水也可以是纯净水或含有低浓度醋酸等酸性物质的脱色液或含有有机物质的洗液。
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