CN101018865A - 具有改良生长特性的植物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及改良植物生长特性的方法，其通过增加植物中SnRK2激酶或其同源物的活性和/或表达来实现。此类方法之一包括将SnRK2核酸分子或其功能性变体引入植物。本发明还涉及具有改良生长特性的转基因植物，该植物具有调节的SnRK2激酶编码核酸的表达。本发明还涉及可用于本发明方法中的构建体。

Description

具有改良生长特性的植物及其制备方法

本发明一般涉及分子生物学领域，并且涉及改良植物生长特性的方法。更具体的，本发明涉及通过增加SNF1相关蛋白激酶(SnRK2)或其同源物在植物中的活性来增加植物产量和/或生物量的方法。本发明还涉及具有SnRK2蛋白激酶或其同源物的编码核酸表达增加的植物，该植物相对于对应的野生型植物具有改良的生长特性。本发明还提供了可用于本发明方法的构建体。

鉴于不断增长的世界人口和农业用地面积的缩小，增加农业效率和增加园艺植物的多样性一直是农业研究的主要目标。作物和园艺改良的常规手段利用选育技术来鉴定具有期望特性的植物。然而，这种选育技术具有若干缺点，即这些技术一般是劳动密集型的，而且产生通常含有异质遗传成分的植物，这并非总是产生自亲本植物传递过来的期望性状。分子生物学的发展已经允许人类操作动物和植物的种质。植物的遗传工程需要分离和操作遗传物质(一般是DNA或RNA的形式)，随后把该遗传物质引入到植物中。此种技术导致具有多种改良的经济学、农艺学或园艺性状的植物的开发。具有特殊经济利益的性状是生长性状，例如高产量。产量通常定义为作物产生的可衡量经济价值。这可以从数量和/或质量方面定义。产量直接取决于一些因素，例如，器官的数量和尺寸，植物结构(例如，枝条的数量)，种子产量等等。根的发育、营养吸收和胁迫耐受性也是确定产量的重要因素。可以通过优化上述因素之一来提高作物产量。

据报道酵母蛋白激酶SNF1参与对葡萄糖饥饿应激的应答。假设它通过磷酸化阻抑蛋白Mig1来激活葡萄糖阻抑的基因。在其他生物中SNF1具有直系同源物，如哺乳动物中AMP-活化的蛋白激酶(AMPK)。ATP减少产生的增加的5’-AMP浓度使得AMPK被激活，所述的ATP减少由应激条件如热激或葡萄糖饥饿引起。植物也具有SNF1相关激酶，称为SnRK。植物SnRK分为3个亚组：SnRK1到SnRK3。SnRK1亚组在结构和功能上均与SNF1最紧密相关；而亚组SnRK2和SnRK3对植物是独特的。SnRK2蛋白质缺少在SNF1中发现的C端调节结构域，但是在其C端具有谷氨酸和天冬氨酸的酸性序列段。SnRK2蛋白质具有约40kDa的分子量并且由小基因家族编码：据报道拟南芥属(Arabidopsis)和稻都具有10个SnRK2基因。第一个植物SNF1相关蛋白激酶2(SnRK2)(称作PKABA1)是由Anderberg和Walker-Simmons分离的(Proc.Natl.Acad.Sci.USA 89，10183-10187，1992)。发现其是脱落酸(ABA)和脱水作用诱导的。之后，分离出了相关蛋白质，如ASK1和ASK2(Park等人，Plant Molecular Biology22，615-624，1993)。据报道这些基因在一些植物器官中表达，但是在叶中是最丰富的。SnRK2亚组的另一个成员是OST1(Mustilli等人，Plant Cell14，3089-3099，2002)。OST1在气孔保卫细胞和维管组织中表达，并且认为它在脱落酸(ABA)感受和引发气孔闭合的活性氧中间体产生之间发挥作用。在稻中，发现所有的SnRK2蛋白质被高渗胁迫激活，并且它们中的一些还被ABA激活(Kobyashi等人，Plant Cell 16，1163-1177，2004)。据报道REK(又命名为SAPK3，Kobyashi等人，2004)在叶和成熟的种子中表达，但是不在茎或根中表达。重组REK蛋白质在Ca²⁺存在时表现出增加的自磷酸化作用。

WO98/05760公开了20多个参与磷摄取和新陈代谢的蛋白质(psr蛋白质)的编码核苷酸序列。这些psr蛋白质之一是蛋白激酶psrPK——在磷酸盐饥饿时表达的SnRK2的相关蛋白质。据推测，此蛋白质及其他psr蛋白质可用于操作磷新陈代谢，但是没有实现所建议的表型(它们中的一些与增加的胁迫抗性相关)。Assmann和Li(WO01/02541)描述了另一个与SnRK2相关的蛋白激酶AAPK。据报道AAPK功能的丧失减少了对脱落酸诱导的气孔闭合的敏感性。因此建议其反过来(增加的AAPK表达或增加的活性)会使植物具有增加的干旱胁迫抗性。但是作者没有说明这确实是这种情况。至今为止，可用的SnRK2相关蛋白质的实验数据主要表明其在植物胁迫应答中的作用。

先前的本领域文献没有证实或提示相对于对应的野生型及无胁迫的植物，增加的SnRK2蛋白质表达，或增加的活性和/或表达导致产量增加。

现在令人惊讶的发现相对于对应的野生型植物，植物中SnRK2蛋白质增加的活性和/或表达使得植物具有改良的生长特性，尤其是产量。这些结果是在标准植物生长条件下得到的，并且产量增加不是由于抗胁迫性增加。

在结构上，SnRK2蛋白质是丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，其具有归为SMART数据库中的S_TKc类型(SMART登录号SM00220)的催化结构域。活性位点对应PROSITE特征，PS00108(Prosite，Swiss Institute ofBioinformatics，http://us.expasy.org)：

[LIVMFYC]-x-[HY]-x-D-[LIVMFY]-K-x(2)-N-[LIVMFYCT](3)。C端部分包含未知功能的一段聚(Glu和/或Asp)残基。

本发明的一个实施方案提供了改良植物生长特性的方法，其包括在植物中增加SnRK2多肽或其同源物的活性和/或表达，以及任选选择具有改良生长特性的植物。

有利的，实施本发明的方法得到了具有多种改良生长特性的植物，如改良的生长、改良的产量、改良的生物量、改良的构造或改良的细胞分裂，每种都是相对于对应的野生型植物。优选的，改良的生长特性至少包括比对应的野生型植物增加的产量。优选的，增加的产量是增加的生物量和/或增加的种子产量，包括下列一种或多种：增加的(饱满)种子数，增加的种子总重量、增加的千粒重和增加的收获指数。要注意的是产量增加不是由于抗胁迫性增加。

本文所定义的术语“增加的产量”意指分别相对于对应的野生型植物，如下任何一个或多个方面的增加：(i)植物的一个或多个部分增加的生物量(重量)，特别是地上(可收获)部分、增加的根生物量或任何其他可收获部分的增加的生物量；(ii)增加的总种子产量，其包括种子生物量(种子重量)的增加并且其可以是每株植物种子重量的增加或单个种子基础上的增加；(iii)增加的(饱满)种子数；(iv)增加的种子尺寸；(v)增加的种子体积；(vi)增加的单个种子面积；(vii)增加的单个种子长度；(viii)增加的收获指数，它表示为可收获部分如种子的产量对总生物量的比例；(ix)每个圆锥花序小花增加的数量，其从所计数的种子总数以及初级圆锥花序的数量推论出来；以及(x)增加的千粒重(TKW)，其从所计的饱满种子数和它们的总重量推论出来。增加的TKW可源于增加的种子尺寸(长度、宽度或其二者)和/或种子重量。增加的TKW可源于胚胎尺寸和/或胚乳尺寸的增加。

以谷类为例，产量增加可以表现为下列一种或多种：每公顷或英亩植物数量增加、每株植物穗数量的增加、畦数、每畦种子数、粒重、TKW、穗的长度/直径的增加等。以稻为例，产量增加可以表现为下列一种或多种的增加：每公顷或英亩植物数量、每株植物的圆锥花序数量、每个圆锥花序的小穗数量、每个圆锥花序花的数量，种子饱满率的增加、TKW的增加等。产量的增加还可产生改变的构造或可以作为改变的构造的结果发生。

优选的，实施本发明的方法使得植物具有增加的产量，更具体的，具有增加的生物量和/或增加的种子产量。优选的，增加的种子产量包含分别相对于对照植物，在下列一种或多种中的增加：(饱满)种子数、总种子重量、种子尺寸、千粒重和收获指数。因此，本发明提供了增加植物产量的方法，该方法包括在植物中增加SnRK2多肽或其同源物的活性和/或表达。

由于根据本发明的改良植物具有增加的产量，因此，相对于在其生活周期对应阶段的相应野生型植物的生长速度，这些植物很可能表现出增加的生长速度(至少是在其生活周期的一部分)。生长速度增加可以是对植物的一个或多个部分或细胞类型(包括种子)特异性的，或者可以基本遍布整株植物。具有增加的生长速度的植物可以具有更短的生活周期。植物的生活周期意指从干的成熟种子生长到植物产生干的成熟种子(类似于起始物质)的阶段所需的时间。此生活周期可以受到如早期活力、生长速度、开花时间和种子成熟速度等因素的影响。生长速度的增加可以发生在植物生活周期的一个或多个阶段或者基本遍布整个植物生活周期期间。在植物生活周期的早期阶段增加的生长速度反映了增强的活力。生长速度的增加可以改变植物的收获周期，这使得植物可以比可能的情形更晚播种和/或更早收获。如果生长速度充分增加，可以允许播种相同植物物种的更多种子(例如在播种和收获稻植物后，接着播种和收获更多的稻植物，所有这些都在一个常规生长期内)。类似的，如果生长速度充分增加，可以允许播种不同植物物种的更多种子(例如在播种和收获稻植物后，例如接着播种和任选收获大豆、马铃薯或任何其他适当的植物)。在一些植物的情形下，从同一根状茎收获多次也是可能的。改变植物的收获周期可以使得每英亩每年生物量的产出增加(由于任何特定植物可以生长和收获次数(指在一年中)的增加)。生长速度的增加还使得转基因植物可以比它们的野生型对应物在更广的地域栽培，这是因为生长作物的区域性限制通常决定于种植时(初期)或收获时(晚期)的不利环境条件。如果收获周期缩短，那么可以避免此类不利条件。可以通过生长实验测绘生长曲线，得到多个参数来确定生长速度，此类参数可以是：T-Mid(植物达到其最大尺寸的50％时所用的时间)以及T-90(植物达到其最大尺寸的90％时所用的时间)等。

本发明方法的实施提供了具有增加的生长速度的植物。因此，本发明提供了增加植物生长速度的方法，该方法包括在植物中增加SnRK2多肽或其同源物的活性和/或表达。

与对照植物相比，无论植物是否在无胁迫条件下或植物是否接触多种胁迫，产生产量和/或生长速度的增加。植物一般通过生长更加缓慢来应答所接触的胁迫。在严重的胁迫条件下，植物甚至完全停止生长。另一方面，本文将中等胁迫定义为植物所接触的不引起植物完全停止生长且没有能力恢复生长的任何胁迫。根据农业实践(灌溉、施肥、杀虫剂处理)的发展，在栽培的作物植物中通常不会遇到严重胁迫。因而，中等胁迫诱导的受损生长通常是农业所不希望的特征。中等胁迫是植物所接触的典型胁迫。这些胁迫可以是植物所接触的日常生物和/或非生物(环境)胁迫。典型的非生物或环境胁迫包括由反常的热或寒冷/冻结温度引起的温度胁迫；盐胁迫；水胁迫(干旱或过量的水)。非生物胁迫还可以由化学制剂引起。生物胁迫通常是那些由病原体，如细菌、病毒、真菌和昆虫引起的胁迫。

在任何植物中可以有利地改良上述生长特性。

本文所用的术语“植物”包括整株植物、植物的祖代和后代以及部分植物，包括种子、枝条、茎、叶、根(包括块茎)、花，以及组织和器官，其中前述每种包括目的基因/核酸，或在目的基因/核酸中的遗传修饰。术语“植物”还包括植物细胞、悬浮培养物、愈伤组织、胚胎、分生组织区、配子体、孢子体、花粉和小孢子，同样的，其中每种前述包含目的基因/核酸。

尤其可用于本发明方法中的植物包括藻类、蕨类植物以及属于植物界(Viridiplantae)超家族的所有植物，尤其是单子叶植物和双子叶植物，包括选自如下物种的饲料或饲料豆科植物、观赏植物、粮食作物、乔木或灌木：秋葵属物种(Abelmoschus spp.)、槭树属物种(Acer spp.)、猕猴桃属物种(Actinidia spp.)、冰草属物种(Agropyron spp.)、葱芹属物种(Allium spp.)、苋属物种(Amaranthus spp.)、凤梨(Ananas comosus)、番荔枝属物种(Annona spp.)、芹菜(Apium graveolens)、拟南芥(Arabidopsis thaliana)、落花生属物种(Arachis spp.)、木波罗属物种(Artocarpus spp.)、石刁柏(Asparagus officinalis)、燕麦(Avenasativa)、阳桃(Averrhoa carambola)、冬瓜(Benincasa hispida)、巴西栗(Bertholletia excelsea)、甜菜(Beta vulgaris)、芸苔属物种(Brassicaspp.)、Cadaba farinosa、大叶茶(Camellia sinensis)、美人蕉(Cannaindica)、辣椒属物种(Capsicum spp.)、番木瓜(Carica papaya)、大果假虎刺(Carissa macrocarpa)、红花(Carthamus tinctorius)、山核桃属物种(Carya spp.)、栗属物种(Castanea spp.)、苦苣(Cichoriumendivia)、樟属物种(Cinnamomum spp.)、西瓜(Citrullus lanatus)、柑橘属物种(Citrus spp.)、椰子属物种(Cocos spp.)、咖啡属物种(Coffeaspp.)、Cola spp.、芋(Colocasia esculenta)、榛属物种(Corylus spp.)、山楂属物种(Crataegus spp.)、香瓜属物种(Cucumis spp.)、南瓜属物种(Cucurbita spp.)、菜蓟属物种(Cynara spp.)、胡萝卜(Daucuscarota)、山马蟥属物种(Desmodium spp.)、龙眼(Dimocarpus longan)、薯蓣属物种(Dioscorea spp.)、柿树属物种(Diospyros spp.)、稗属物种(Echinochloa spp.)、穇子(Eleusine coracana)、枇杷(Eriobotryajaponica)、红仔果(Eugenia uniflora)、荞麦属物种(Fagopyrum spp.)、山毛榉属物种(Fagus spp.)、无花果(Ficus carica)、金桔属物种(Fortunella spp.)、草莓属物种(Fragaria spp.)、银杏(Ginkgo biloba)、大豆属物种(Glycine spp.)、陆地棉(Gossypium hirsutum)、向日葵属物种(Helianthus spp.)、木槿属物种(Hibiscus spp.)、大麦属物种(Hordeum spp.)、甘薯(Ipomoea batatas)、核桃属物种(Juglans spp.)、莴苣(Lactuca sativa)、山黧豆属物种(Lathyrus spp.)、浮萍属物种(Lemna spp.)、兵豆(Lens culinaris)、亚麻(Linum usitatissimum)、荔枝(Litchi chinensis)、百脉根属物种(Lotus spp.)、棱角丝瓜(Luffaacutangula)、羽扇豆属物种(Lupinus spp.)、硬皮豆属物种(Macrotylomaspp.)、西印度樱桃(Malpighia emarginata)、苹果属物种(Malus spp.)、曼密苹果(Mammea americana)、芒果(Mangifera indica)、木薯属物种(Manihot spp.)、人心果(Manilkara zapota)、紫苜蓿、草木樨属物种(Melilotus spp.)、薄荷属物种(Mentha spp.)、苦瓜属物种(Momordicaspp.)、黑桑(Morus nigra)、芭蕉属物种(Musa spp.)、烟草属物种(Nicotianum spp.)、木犀榄属物种(Olea spp.)、仙人掌属物种(Opuntiaspp.)、Ornithopus spp.、稻属物种(Oryza spp.)、稷(Panicummiliaceum)、鸡蛋果(Passiflora edulis)、欧防风(Pastinaca sativa)、鳄梨属物种(Persea spp.)、香芹(Petroselinum crispum)、菜豆属物种(Phaseolus spp.)、刺葵属物种(Phoenix spp.)、酸浆属物种(Physalisspp.)、松属物种(Pinus spp.)、阿月浑子(Pistacia vera)、豌豆属物种(Pisum spp.)、早熟禾属物种(Poa spp.)、杨属物种(Populus spp.)、牧豆树属物种(Prosopis spp.)、李属物种(Prunus spp.)、番石榴属物种(Psidium spp.)、石榴(Punica granatum)、西洋梨(Pyrus communis)、栎属物种(Quercus spp.)、萝卜(Raphanus sativus)、波叶大黄(Rheumrhabarbarum)、茶藨子属物种(Ribes spp.)、悬钩子属物种(Rubus spp.)、甘蔗属物种(Saccharum spp.)、接骨木属物种(Sambucus spp.)、黑麦(Secale cereale)、Sesamum spp.、茄属物种(Solanum spp.)、两色蜀黍(Sorghum bicolor)、菠菜属物种(Spinacia spp.)、蒲桃属物种(Syzygium spp.)、酸豆(Tamarindus indica)、可可树(Theobromacacao)、车轴草属物种(Trifolium spp.)、Triticosecale rimpaui、小麦属物种(Triticum spp.)、越桔属物种(Vaccinium spp.)、野豌豆属物种(Viciaspp.)、豇豆属物种(Vigna spp.)、葡萄属物种(Vitis spp.)、玉蜀黍(Zeamays)、北美洲野生稻(Zizania palustris)、枣属物种(Ziziphus spp.)等。

根据本发明优选的特征，植物是包含大豆、向日葵、油菜、苜蓿、油菜籽或棉花的作物植物。更优选的，本发明的植物是单子叶植物，如甘蔗。最优选的是谷类，如稻、玉米、小麦、粟、大麦、黑麦、燕麦或高粱。

可以通过增加SnRK2多肽的水平来增加SnRK2蛋白质的活性。可选的，当SnRK2水平没有变化或者甚至是当SnRK2水平减少时，活性也可以增加。当多肽的内部性质改变时，例如通过产生突变体或选择比野生型更有活性的变体，可以发生这种情况。

本文所定义的术语“SnRK2或其同源物”意指多肽，其包含：(i)功能性丝氨酸/苏氨酸激酶结构域，(ii)保守性特征序列W(F/Y)(L/M/R/T)(K/R)(N/G/R)(L/P/I)(P/L)(A/G/V/R/K/I)(D/E/V)(SEQ IDNO：6)和(iii)起始于SEQ ID NO：6的末尾残基的酸性C端结构域。“SnRK2或其同源物”与SEQ ID NO：2所代表的氨基酸具有一定的全序列同一性的多肽，所述全序列同一性按照增加的优选顺序为至少55％、56％、57％、58％、59％、60％、61％、62％、63％、64％、65％、66％、67％、68％、69％、70％、71％、72％、73％、74％、75％、76％、77％、78％、79％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％的全序列同一性。使用总体对比算法，如程序GAP(GCG Wisconsin Package，Accelrys)中的Needleman Wunsch算法，确定全序列同一性。

此外，与对应的野生型植物相比，当在稻(Oryza sativa)栽培种Nipponbare的GOS2启动子调控下表达时，此类“SnRK2或其同源物”增加地上的生物量和/或种子产量。种子产量的这种增加可以以一些方式测量，例如为千粒重的增加。

使用特型数据库可以鉴别SnRK2蛋白质中的多种结构域，所述的数据库如SMART(Schultz等人(1998)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 95，5857-5864；Letuni等人(2002)Nucleic Acids Res 30，242-244；http://smart.embl-heidelberg.de/)、InterPro(Mulder等人，(2003)Nucl.Acids.Res.31，315-318；http://www.ebi.ac.uk/interpro/)、Prosite(Bucher和Bairoch(1994)，A generalized profile syntax for biomolecular sequencesmotifs and its function in automatic sequence interpretation.(In)ISMB-94；Proceedings 2nd International Conference on Intelligent Systems forMolecular Biology.Altman R.，Brutlag D.，Karp P.，Lathrop R.，Searls D.，编著，53-61页，AAAI出版，Menlo Park；Hulo等人，Nucl.Acids.Res.32：D134-D137，(2004)，http://www.expasy.org/prosite/)或Pfam(Bateman等人，Nucleic Acids Research 30(1)：276-280(2002)，http://www.sanger.ac.uk/Software/Pfam/)。

SnRK2的激酶结构域是S_TKc类型(SMART登录号SM00221，Interpro登录号IPR002290)，并且当其具有Ser/Thr激酶活性时是有功能的。预测的活性位点(ICHRDLKLENTLL，其中D是预测的催化残基)对应着PROSITE特征PS00108。ATP结合位点(IGAGNFGVARLMKVKNSKELVAMK)对应着PROSITE特征PS00107。

优选的，SEQ ID NO：6的保守性特征序列具有序列：W(F/Y)(L/M/R)K(N/R)(L/I)P(A/G/V/R/K/I)(D/E)，SEQ ID NO：6的保守性特征序列更优选具有序列W(F/Y)LKNLP(R/K)E；SEQ ID NO：6的保守性特征序列最优选具有序列：WFLKNLPRE。

本文所用的酸性C端结构域定义为SnRK2蛋白质的C端部分，其起始于如上定义的保守性特征序列的末尾残基(SEQ ID NO：6中的D或E)，并且该C端部分具有的等电点(pI)在2.6和4.1之间，优选在3.6和3.9之间，酸性C端结构域的pI最优选是3.7。使用EMBOSS包(Rice等人，Trendsin Genetics 16，276-277，2000)计算pI值。

搜索和鉴定SnRK2同源物的方法是本领域的技术人员所熟悉了解的。此类方法包括使用本领域熟知的用于比对或比较序列的算法，如GAP(Needleman和Wunsch，J.Mol.Biol.48；443-453(1970))、BESTFIT(使用Smith和Waterman(Advances in Applied Mathematics 2；482-489(1981))的局部同源性算法)、BLAST(Altschul，S.F.，Gish，W.，Miller，W.，Myers，E.W.& Lipman，D.J.，J.Mol.Biol.215：403-410(1990))、FASTA和TFASTA(W.R.Pearson和D.J.Lipman Proc.Natl.Acad.Sci.USA 85：2444-2448(1988))，比较计算机可读形式的SEQ ID NO 1或2代表的序列和在公共数据库如MIPS(http://mips.gsf.de/)、GenBank(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/Genbank/index.html)或EMBL Nucleotide Sequence Database(http://www.ebi.ac.uk/embl/index.html)中获得的序列。进行BLAST分析的软件通过National Centre for Biotechnology Information(NCBI)公开可用。下面提到的同源物是使用BLAST默认参数(BLOSUM62矩阵，空位开放罚分为11且空位延伸罚分为1)鉴定出的，优选使用全长序列用于分析。

落入“SnRK2多肽或其同源物”定义中的实例包括拟南芥蛋白质和来自其他物种如稻、大豆和烟草的蛋白质。

同源性的两种特殊形式，直系同源和旁系同源是用来描述基因遗传关系的进化概念。术语“旁系同源”涉及某物种基因组内的一个或多个基因复制产生的同源基因。术语“直系同源”涉及根据这些基因的遗传关系在不同的生物中的同源基因。

可以通过对一组来自与查询序列相同物种的序列进行BLAST分析，可容易的鉴定SnRK2多肽的旁系同源物。例如，单子叶植物物种中的直向同源物可以通过实施所谓的交互blast搜索很容易地找到。这可以通过第一次blast完成，其包括在任何序列数据库如可在http://www.ncbi.nlm.nih.gov中找到的公众可用的NCBI数据库中，对所讨论的序列(例如SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2，来自拟南芥(Arabidopsisthaliana))进行blast。如果寻找的是稻的直系同源物，所讨论的序列将再次与例如来自NCBI上可用的稻Nipponbare的28,469的全长cDNA克隆进行blast。当起始于核苷酸时可以使用BLASTn或tBLASTX，或者当起始于蛋白质时可以使用BLASTP或TBLASTN，并使用标准缺省值。可以过滤blast结果。之后将过滤结果或未过滤结果的全长序列与所讨论的序列所来源生物(有时是拟南芥)的序列进行反向blast(第二次blast)。然后对第一次和第二次blast的结果进行比较。当第二次blast的结果与查询SnRK2核酸或SnRK2多肽具有最高相似性时，就找到了直系同源物。如果对于具体的查询序列，最符合的是SnRK2的旁系同源物，那么此类查询序列也认为是SnRK2的同源物，倘若此同源物包含如上所定义的功能性丝氨酸/苏氨酸激酶结构域、SEQ ID NO：6的保守性特征序列和酸性C端区域。在大家族的情况下，可以使用ClustalW，接着使用相邻连接树以帮助观察聚类(clustering)

本文所用的术语“同源物”还包括可用于本发明方法中的蛋白质的旁系同源物和直系同源物。来自拟南芥的旁系同源物包括下列基因文库登录号所给出的蛋白质：NP_172563、NP_849834(SEQ ID NO：8)、NP_201170(SEQ ID NO：10)、NP_196476(SEQ ID NO：12)、NP_567945(SEQ ID NO：14)、NP_179885(SEQ ID NO：16)、NP_201489(SEQ ID NO：18)、NP_974170(SEQ ID NO：20)、NP_190619(SEQ ID NO：22)、NP_195711(SEQ ID NO：24)。使用交互BLAST方法鉴定了来自稻的直系同源物和旁系同源物(包括基因文库登录号BAD17997(SEQ ID NO：26)、BAD17998(SEQ ID NO：28)、BAD17999(SEQ ID NO：30)、BAD18000(SEQ ID NO：32)、BAD18001(SEQ ID NO：34)、BAD18002(SEQ ID NO：36)、BAD18003(SEQ ID NO：38)、BAD18004(SEQ ID NO：40)、BAD18005(SEQ ID NO：42)、BAD18006(SEQ ID NO：44))、来自油菜(B.napus)的直系同源物和旁系同源物(AAA33003(SEQ ID NO：46)和AAA33004(SEQ ID NO：48))、来自大豆的直系同源物和旁系同源物(AAB68961(SEQ ID NO：50)和AAB68962(SEQ ID NO：52))和来自烟草的直系同源物和旁系同源物(AAL89456(SEQ ID NO：54))。可用于本发明的直系同源物和旁系同源物优选具有和SnRK2相同的结构和活性，并且在交互BLAST搜索中与SEQID NO：2所代表的SnRK2具有最高的相似性。

应当理解的是术语SnRK2多肽或其同源物不限于SEQ ID NO：2所代表的序列，也不限于上面列出的同源物，而是符合下列标准的任何多肽都适合用在本发明的方法中：包含如上所定义的功能性丝氨酸/苏氨酸激酶结构域，以及SEQ ID NO：6的保守性特征序列和C端酸性结构域，和/或是SnRK2的旁系同源物或直系同源物或与SEQ ID NO：2的序列具有至少55％的序列同一性。

为了确定SnRK2的激酶活性，一些测定是可用的并且在本领域中众所周知(例如Current Protocols in Molecular Biology，1和2卷，Ausubel等人(1994)，Current Protocols；或者是在线的，例如http://www.protocol-online.org)。

简要的，激酶测定通常包括(1)使激酶蛋白质接触含有待磷酸化的靶位点的底物多肽；(2)在适当的条件下，在适当的激酶缓冲液中进行靶位点的磷酸化；(3)在恰当的反应期后将磷酸化的产物从未磷酸化的底物中分离出来。激酶活性的存在或缺乏是通过磷酸化的靶标的存在或缺乏来确定的。另外，可以进行定量测量。

纯化的SnRK2蛋白质，或者含有或富含SnRK2蛋白质的细胞提取物可以用作激酶蛋白质的来源。作为底物，小肽是尤其适合的。肽在磷酸化位点基序中必须含有一个或多个丝氨酸、苏氨酸或酪氨酸残基。可以在Biochimica et Biophysica Acta 1314，191-225，(1996)中找到磷酸化位点的汇编。此外，肽底物可以优选具有净正电荷，以利于结合到磷酸纤维素滤器上(可用于将磷酸化的肽从未磷酸化的肽中分离出来并且检测磷酸化的肽)。如果不知道磷酸化位点基序，可以使用常规酪氨酸激酶底物。例如，“Src相关肽”(RRLIEDAEYAARG)是许多受体和非受体酪氨酸激酶的底物。为了确定合成肽磷酸化的动力参数，要求肽浓度的范围。对于起始反应，要使用0.7-1.5mM的肽浓度。

对于每种激酶，重要的是要确定活性的最佳缓冲液、离子强度和pH。标准5×激酶缓冲液通常含有5mg/ml BSA(防止激酶对测定管吸附的牛血清蛋白)、150mM Tris-Cl(pH7.5)、100mM MgCl₂。绝大部分酪氨酸激酶需要二价阳离子，尽管一些酪氨酸激酶(例如胰岛素-、IGF-1-和PDGF受体激酶)需要MnCl₂替代MgCl₂(或除了MgCl₂外还需要MnCl₂)。要根据经验为每种蛋白激酶确定二价阳离子的最佳浓度。

常用的磷酰基(phophoryl)基团供体是放射性标记的[γ-³²P]ATP(通常是0.2mM终浓度)。在肽中混合的³²p可以通过在闪烁计数器中的硝化纤维素干垫上测量活性来确定。

可选的，SnRK2蛋白质或其同源物的活性可以通过在稻栽培种Nipponbare中，在GOS2启动子调控下表达SnRK2蛋白质或其同源物来测定，这使得植物比相应的野生型植物具有增加的地上生物量和/或增加的种子产量。可以以一些方式测量种子产量的这种增加，例如按照千粒重的增加。

SnRK2多肽或其同源物的编码核酸可以是任何天然或合成核酸。如本文所定义的SnRK2多肽或其同源物是由SnRK2核酸分子编码的。因此本文定义的术语“SnRK2核酸分子”或“SnRK2基因”是如上所定义的SnRK2多肽或其同源物的任何编码核酸分子。SnRK2核酸分子的实例包括由SEQID NO：1所代表的那些核酸，以及编码上述同源物的那些核酸。SnRK2核酸及其功能性变体可适用于进行本发明的方法。SnRK2核酸的功能性变体包括部分SnRK2核酸分子和/或能够与SnRK2核酸分子杂交的核酸。在功能性变体的范围中，术语“功能性”指的是编码这种多肽的变体SnRK2核酸(即一部分或杂交序列)，所述的多肽包含如上所定义的功能性激酶结构域、SEQ ID NO：6的保守性特征序列和酸性C端结构域。

植物中SnRK2型激酶具有模块结构，其由激酶结构域和酸性富含E和/或D结构域组成。因此，设想以保留或改变SnRK2蛋白质活性的这种方式改造激酶和/或酸性结构域可用于实施本发明的方法。优选的变体包括结构域缺失、堆积或改组产生的那些(参见例如He等人，Science 288，2360-2363，2000，或美国专利5,811,238和6,395,547)。

本文定义的术语部分指的是一段至少包含700个核苷酸的DNA，并且该部分包含如上所定义的功能性激酶结构域、SEQ ID NO：6的保守性特征序列和酸性C端结构域。例如，可以通过对SnRK2核酸制造一个或多个缺失来制备部分。部分可以以分离的形式使用或者例如，它们可以融合到其他编码(或非编码)序列以产生组合了一些活性(它们中的一种是蛋白激酶活性)的蛋白质。当融合到其他编码序列时，由翻译产生得到的多肽要比所SnRK2片段预测的多肽大。可用于本发明方法的部分至少包含如上所定义的功能性激酶结构域、SEQ ID NO：6的保守性特征序列和酸性C端结构域。功能性部分可以是SEQ ID NO：7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51和53中任一项所代表的核酸的一部分。优选的，功能性部分是由SEQ ID NO：1所代表的核酸的一部分。

本文所定义的术语“杂交”是基本同源的互补核苷酸序列相互退火的过程。杂交过程可以完全发生在溶液中，即互补核酸都在溶液中。杂交过程还可以如此进行，即其中互补核酸之一固定于基质如磁珠、琼脂糖珠子或任何其他树脂上。此外杂交过程可还可以如此进行，即其中互补核酸之一固定于固相支持物如硝化纤维素膜或尼龙膜上，或通过例如照相平版印刷术固定到例如硅酸玻璃支持物上(后者称之为核酸阵列或微阵列，或称之为核酸芯片)。为了使得杂交发生，通常使核酸分子热变性或化学变性，以使双链解链成两条单链和/或从单链核酸中除去发夹或其他二级结构。杂交的严格性受诸如温度、盐浓度和杂交缓冲液组成等条件的影响。

在诸如Southern杂交和Northern杂交的核酸杂交实验中，“严格杂交条件”和“严格杂交洗涤条件”是序列依赖性的，并且随环境参数而不同。本领域技术人员认识到在杂交和洗涤中可以改变多种参数，并且所述变化将保持或改变严格条件。

T_m是在确定的离子强度和pH下，50％的靶标序列与完全匹配的探针杂交时的温度。T_m依赖于溶液条件、碱基组成以及探针的长度。例如，较长的序列在较高温度下特异杂交。杂交的最大速率是在T_m低于大约16℃到32℃下得到的。杂交溶液中一价阳离子的存在降低了两条核酸链之间的静电排斥，从而促进杂交体的形成；对于高达0.4M的钠浓度，这个作用是明显的。甲酰胺降低了DNA-DNA和DNA-RNA双链体的解链温度，每百分数甲酰胺降低0.6至0.7℃，加入50％的甲酰胺虽然使杂交速率降低，但使杂交在30至45℃进行。碱基对错配降低了杂交速率和双链体的热稳定性。一般对于大探针，每％碱基错配使Tm降低大约1℃。取决于杂交体的类型，T_m可以使用下列公式计算：

·DNA-DNA杂交体(Meinkoth和Wahl，Anal.Biochem.，138：267-284，1984)：

T_m＝81.5℃+16.6×log[Na⁺]^a+0.41×％[G/C^b]-500×[L^c]^-1-0.61×％甲酰胺

·DNA-RNA或RNA-RNA杂交体：

T_m＝79.8+18.5(log₁₀[Na⁺]^a)+0.58(％G/C^b)+11.8(％G/C^b)²-820/L^c

·寡-DNA或寡-RNA^d杂交体：

对于＜20个核苷酸：T_m＝2(l_n)

对于20-35个核苷酸：T_m＝22+1.46(l_n)

^a或对于其他一价阳离子，但是仅仅在0.01-0.4 M的范围精确。

^b仅仅对30％至75％范围的％GC精确。

^cL＝双链体中碱基对的长度。

^d寡，寡核苷酸；l_n，引物的有效长度＝2×(G/C数目)+(A/T数目)。

注解：对于每1％甲酰胺，T_m降低大约0.6至0.7℃，而6M尿素的存在降低T_m大约30℃。

杂交的特异性通常是后杂交洗涤的作用。为了移除非特异性杂交产生的背景，用稀释的盐溶液洗涤样品。此类洗涤的关键因素包括最终洗涤溶液的离子强度和温度：盐浓度越低以及洗涤温度越高，洗涤的严格性越高。洗涤条件通常在杂交严格性或低于杂交严格性下进行。总体上，对于核酸杂交测定或基因扩增检测方法恰当的严格条件如上述说明。也可以选择差不多的严格条件。总体上，低严格条件选择是大约比在确定的离子强度和pH下特异性序列的热解链温度(T_m)低50℃。中等严格条件是当温度比T_m低20℃时并且高严格条件时当温度比T_m低10℃时。例如，严格条件是那些至少与例如条件A-L一样严格的条件；并且减少的严格条件是至少与例如条件M-R一样严格的条件。非特异性的结合可以使用任意一种的一些已知技术(例如用含有溶液的蛋白质将膜封闭，添加异源的RNA、DNA和SDS到杂交缓冲液中，以及用RNA酶处理)来调控。

杂交和洗涤条件的实例在表1中列出：

表1：

“杂交体长度”是杂交核酸的预期长度。当已知序列的核酸杂交时，可以通过比对序列和鉴别本文所述的保守区来确定杂交体长度。

杂交和洗脱缓冲液中可以用SSPE(1×SSPE是0.15M NaCl、10mM NaH₂PO₄和1.25mM EDTA，pH7.4)代替SSC(1×SSC是0.15MNaCl和15mM柠檬酸钠)；在杂交完成后洗脱15分钟。杂交和洗脱可以另外地包括5×Denhardt试剂、0.5-1.0％ SDS、100μg/ml变性的片段化的鲑精DNA、0.5％焦磷酸钠和高速50％甲酰胺。

*Tb-Tr：对于预期长度少于50个碱基对的杂交体，杂交温度应该比杂交体的熔解温度T_m低5-10℃，根据上述公式确定T_m。

±本发明还包括用PNA或修饰的核酸取代任意一个或多个DNA或RNA杂交体配偶体。

为了定义严格性水平的目的，通常参考Sambrook等人(2001)Molecular Cloning：a laboratory manual，第3版，Cold Spring HarborLaboratory Press，CSH，New York or to Current Protocols in MolecularBiology，John Wiley & Sons，N.Y.(1989)。

例如，编码SEQ ID NO：2或其同源物的核酸可以用在杂交实验中。可选的，其片段可以用作探针。根据鉴别SnRK2蛋白质的序列原料库，可以选择不同的杂交片段。例如，当需要有限数量的与SnRK2具有高序列同一性的同源物时，可以使用保守性较低的片段用于杂交。通过比对SEQID NO：2及其同源物，可以设计可用作杂交探针的相当的核酸片段。

在杂交和洗涤后，依赖于探针标记的类型，可以通过放射自显影(当使用放射性探针时)或者通过化学发光、免疫检测、通过荧光或显色检测来检测双链体。可选的，可以进行核糖核酸酶保护试验来检测RNA:RNA杂交体。

SnRK2核酸分子或其功能性变体可以来自任何天然来源或人工来源。可以从微生物来源如细茵、酵母或真菌，或者从植物、藻类或动物(包括人)来源中分离核酸/基因或其功能性变体。可以通过严谨的人工操作在组成和/或基因组环境方面从其天然形式对核酸进行修饰。核酸优选是植物来源的，可以是来自相同的植物物种(例如来自其待引入的植物物种)或来自不同的植物物种。核酸可以分离自双子叶物种，优选的分离自十字花科(Brassicaceae)，更优选的分离自拟南芥。更优选的，分离自拟南芥的SnRK2是SEQ ID NO：1所代表的并且SnRK2氨基酸序列是SEQ ID NO：2所代表的。

SnRK2多肽或其同源物可以由SnRK2核酸分子或基因的可选的剪接变体编码。本文所用的术语“可选择的剪接变体”涵盖这样的核酸序列变体，即其中选定的内含子和/或外显子已经切除、置换或添加。这样的变体是其中上述蛋白质的生物学活性保持未受影响的那些变体，其可以通过选择性的保留蛋白质的功能片段来获得。此类剪接变体可以是天然发现的或人造的。制备此类剪接变体的方法是本领域熟知的。优选的剪接变体是来自SEQ ID NO：3所代表的核酸的所有剪接变体，如SEQ ID NO：1。更优选的剪接变体编码此类多肽，所述多肽具有如上所定义的SEQ ID NO：6的保守性特征序列侧翼的功能性激酶结构域和C端酸性结构域。

同源物也可以由SnRK2多肽或其同源物的编码核酸的等位变体编码，优选由SEQ ID NO：1所代表的核酸的等位变体编码。更优选的，由等位变体编码的多肽具有如上所定义的SEQ ID NO：6的保守性特征序列侧翼的功能性激酶结构域和C端酸性结构域。等位变体天然存在，并且包括在本发明方法中的是这些天然等位基因的用途。等位变体包括单核苷酸多态性(SNP)以及小的插入/缺失多态性(INDEL)。INDEL的大小通常小于100bp。在大多数生物天然存在的多态性品系中SNP和INDEL形成了最大的一类序列变体。

可以通过以引入遗传修饰(优选在SnRK2基因的基因座中)来增加SnRK2多肽或其同源物的活性和/或表达。如本文中所定义的基因的基因座意指包括目的基因和编码区域上游或下游10kb的基因组区域。

例如，遗传修饰可以通过以下的任何一种(或多种)方法引入：TDNA激活、TILLING、定点诱变、同源重组、定向进化或者通过在植物中引入和表达编码SnRK2多肽或其同源物的核酸。在引入遗传修饰后，接下来的步骤是选择SnRK2多肽增加的活性和/或表达，这种活性和/或表达的增加使得植物具有改良的生长特性。

T-DNA激活特征(Hayashi等人Science 258，1350-1353，1992)涉及在目标基因的基因组区域或基因编码区域上游或下游10KB中插入通常包含启动子(也可以是翻译增强子或内含子)的T-DNA，如此构型以便启动子指引靶基因表达。通常，破坏靶基因天然启动子对其的表达调控，而使该基因处于新引入的启动子的控制之下。该启动子一般嵌入到T-DNA中。例如，T-DNA通过农杆菌属感染随机插入到植物基因组中，并导致靠近该插入T-DNA的基因过量表达。由于接近引入的启动子的基因过量表达，所得的转基因植物显示出显性表型。待引入的启动子可以是能指导基因在所需的生物体(在本案中为植物)中表达的任何启动子。例如，组成型、组织偏好的、细胞类型偏好的以及诱导型启动子都适合用于T-DNA激活。

也可以使用TILLING技术(靶向诱导基因组局部损害技术)，把遗传修饰引入到SnRK2基因的基因座中。这是一种诱变技术，可用于产生和/或鉴定，并分离能显示SnRK2活性的SnRK2核酸分子的诱变变体。TILLING还能够选择携带这类突变变体的植物。这些突变变体甚至可表现出比该基因的天然形式所表现出的更高的SnRK2活性。TILLNG将高密度诱变与高通量筛选方法结合起来。TILLING一般遵循的步骤是：(a)EMS诱变(Redei和Koncz(1992)，In：C Koncz，N-H Chua，J Schell编著，Methods inArabidopsis Research.World Scientific，Singapore，16-82页；Feldmann等人，(1994)In：EM Meyerowitz，CR Somerville编著，Arabidopsis.ColdSpring Harbor Laboratory Press，Cold Spring Harbor，NY，137-172页；Lightner和Caspar(1998)，In：J Martinez-Zapater，J Salinas编著，Methodson Molecular Biology，82卷，Humana Press，Totowa，NJ，91-104页)；(b)DNA制备和个体合并；(c)目标区域的PCR扩增；(d)变性和退火以允许形成异源双链体；(e)DHPLC，其中库中异源双链体的存在检测为色谱图中额外的峰值；(f)鉴定突变个体；和(g)突变PCR产物的测序。TILLING的方法是本领域熟知的(McCallum Nature Biotechnol.18，455-457，2000，Stemple Nature Rev.Genet.5，145-150，2004)。

定点诱变可用于产生保留了活性(即蛋白激酶活性)的SnRK2核酸或其部分的变体。一些方法可用来实现定点诱变，最常用方法是基于PCR的方法(见例如Ausubel等人，Current Protocols in Molecular Biology.Wiley编著，http://www.4ulr.com/products/currentprotocols/index.html)。

定向进化也可以用来产生具有上述增加的生物学活性的SnRK2多肽或同源物或其部分的编码SnRK2核酸分子的功能性变体。定向进化由下列组成：DNA改组的重复，随后是适当的筛选和/或选择(Castle等人，(2004)Science 304(5674)：1151-4；美国专利5,811,238和6,395,547)。

TDNA激活、TILLING、定点诱变和定向进化是能够产生保留了如上所述的SnRK2功能并因此可用于本发明方法中的新的SnRK2等位基因和功能性变体的技术的实例。

同源重组能够在基因组的指定选择位置引入选定的核酸。同源重组是生物学中通常使用的标准技术，用于较低等的生物体如酵母或苔藓physcomitrella。用于在植物中进行同源重组的方法不仅已在模式植物中描述(Offringa等人(1990)EMBO J.9，3077-3084)，而且在作物植物例如稻中描述(Terada等人，(2002)Nature Biotechnol.20，1030-1034；或Iida和Terada(2004)Curr.Opin.Biotechnol.15，132-138)。例如，待靶向的核酸(其可以是如上文所定义的SnRK2核酸分子或其功能性变体)不需要靶向到SnRK2基因的基因座中，但是可以被引入到高表达的区域。待靶向的核酸可以是改良的等位基因，用于替换内源基因，或另外引入到内源基因中。

根据本发明优选的实施方案，可以通过在植物中引入和表达编码SnRK2多肽或其同源物的核酸来改良植物的生长特性。

引入遗传修饰(在本案中不需要在SnRK2基因的基因座中)的优选方法是在植物中引入和表达编码SnRK2多肽或其同源物的核酸。上述SnRK2多肽或其同源物是具有激酶活性的一类，与SEQ ID NO：2所代表的氨基酸序列具有一定的全序列同一性，所述全序列同一性按照增加的优选顺序为至少55％、56％、57％、58％、59％、60％、61％、62％、63％、64％、65％、66％、67％、68％、69％、70％、71％、72％、73％、74％、75％、76％、77％、78％、79％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％，并且另外包含如上所定义的激酶结构域，SEQ ID NO：6所代表的保守性特征序列和C端酸性结构域。

蛋白质的“同源物”涵盖相对于所讨论的未修饰蛋白质具有氨基酸取代、缺失和/或插入，且与其所衍生自的未修饰蛋白质具有相似的生物学活性和功能活性的肽、寡肽、多肽、蛋白质和酶。

同源物可以是蛋白质“取代变体”的形式，即其中氨基酸序列中的至少一个残基已经被除去，并且不同的残基插入到它的位置上。氨基酸取代一般是单残基的，但是取决于对多肽构成的功能限制可以是成串的；插入片段通常是大约1到10个氨基酸残基。优选的，氨基酸取代包括保守性氨基酸取代(表2)。为了产生此类同源物，蛋白质的氨基酸可以被其他具有相似性质(如类似的疏水性、亲水性、抗原性、形成或破坏α-螺旋结构或β-折叠结构的倾向)的氨基酸所置换。保守性替换表是本领域所熟知的(见例如Creighton(1984)Proteins.W.H.Freeman and Company)。

表2：保守性氨基酸取代的实例：

残基	保守性取代	残基	保守性取代
				Ala	Ser	Leu	Ile；Val
Arg	Lys	Lys	Arg；Gln
				Asn	Gln；His	Met	Leu；Ile
Asp	Glu	Phe	Met；Leu；Tyr
				Gln	Asn	Ser	Thr；Gly
Cys	Ser	Thr	Ser；Val
				Glu	Asp	Trp	Tyr
Gly	Pro	Tyr	Trp；Phe
				His	Asn；Gln	Val	Ile；Leu
Ile	Leu，Val

在上述氨基酸性质不是很关键的情况下，可以产生保守性较低的取代。

同源物还可以是蛋白质的“插入变体”的形式，即将其中一个或多个氨基酸残基引入到蛋白质中的预定位点。插入可包括氨基端和/或羧基端融合，以及单个或多个氨基酸的序列内插入。通常，氨基酸序列内的插入将小于氨基或羧基端的融合，约为1到10个残基的数量。氨基或羧基端融合蛋白质或肽的实例包括如用于酵母双杂交系统的转录激活因子的结合结构域或激活结构域、噬菌体外壳蛋白、(组氨酸)₆-标签、谷胱甘肽S-转移酶-标签、A蛋白、麦芽糖结合蛋白、二氢叶酸还原酶、Tag·100表位、c-myc表位、FLAG^表位、lacZ、CMP(钙调蛋白结合肽)、HA表位、C蛋白表位和VSV表位。

蛋白质“缺失变体”形式的同源物的特征在于从蛋白质除去一个或多个氨基酸。

使用本领域熟知的肽合成技术，如固相肽合成等等，或通过重组DNA操作，可以很容易的制备蛋白质的氨基酸变体。对DNA序列进行操作以产生蛋白质的取代、插入或缺失变体的方法是本领域熟知的。例如，在DNA的预定位点产生突变的技术是本领域技术人员熟知的，包括M13诱变、T7-Gen体外诱变(USB，Cleveland，OH)、快速变换的定点诱变(Stratagene，San Diego，CA)、PCR-介导的定点诱变或其他定点诱变方案。

SnRK2多肽或其同源物可以是衍生物。“衍生物”包括肽、寡肽、多肽、蛋白质和酶，与蛋白质天然存在形式的氨基酸序列相比，例如，如SEQID NO：2所示的，其可以包括天然和非天然存在氨基酸残基的取代、缺失或添加。蛋白质的“衍生物”包括肽、寡肽、多肽、蛋白质和酶，与多肽天然存在形式的氨基酸序列相比，其可以包括天然存在的改变的、糖基化的、酰基化的氨基酸残基或非天然存在的氨基酸残基。与其所衍生自的氨基酸序列相比，衍生物还可包括一个或多个非氨基酸取代基，例如与氨基酸序列共价或非共价结合的报道分子或其他配体，如结合以便于其检测的报道分子，以及相对于天然存在蛋白质的氨基酸序列而言非天然存在的氨基酸残基。

根据本发明优选的方面，希望增强或增加SnRK2核酸分子或其功能性变体的表达。得到基因或基因产物表达增强或增加的方法在本领域中详细记载并且包括例如用适当的启动子驱动的过量表达、转录增强子或翻译增强子的使用。可以将作用为启动子或增强子元件的分离的核酸引入至多核苷酸非异源形式的适当位置上(一般为上游)，从而上调SnRK2核酸或其功能性变体的表达。例如，可以通过突变、缺失和/或取代来体内改变内源启动子(参见Kmiec，美国专利5,565,350号；Zarling等人，PCT/US93/03868)，或者可以将分离的启动子以适当的方向和与本发明基因的距离引入植物细胞中，从而调控基因的表达。

如果希望多肽表达，通常需要在多核苷酸编码区的3’-端包含聚腺苷酸化作用区域。聚腺苷酸化作用区域可以来自天然基因、来自多种其他植物基因或来自T-DNA。待添加的3’端序列可以来自例如胭脂氨酸合成酶或章鱼碱合酶基因，或可选的来自其他植物基因，或较小优选的来自其他真核基因。

还可以将内含子序列添加到5’非翻译区或部分编码序列的编码序列以增加在细胞溶胶中聚集的成熟信息的量。已经表明在植物和动物表达构建体中的转录单位中包含可剪接的内含子能在mRNA和蛋白质水平上使基因表达增加达1000倍(Buchman和Berg，Mol.Cell Biol.8，4395-4405(1988)；Callis等人，Genes Dev.1，1183-1200(1987))。当将内含子置于转录单位的5’端附近时，基因表达的此类内含子增强通常是最大的。本领域已知玉米内含子Adh1-S内含子1、2和6，Bronze-1内含子的用途。总体上参见The Maize Handbook，116章，Freeling和Walbot编著，Springer，N.Y.(1994)。

本发明还提供了遗传构建体和载体，以便于引入和/或表达可用于本发明方法中的核苷酸序列。

因此，本发明提供了基因构建体，其包含：

(i)SnRK2核酸分子或其功能性变体

(ii)能驱动(i)中核酸序列表达的一个或多个调控序列；及可选的

(iii)转录终止序列。

可用于本发明方法的构建体可以使用本领域技术人员熟知的重组DNA技术构建。基因构建体可插入到载体中，该载体可以是商购的，适于转化到植物中并适于在转化的细胞中表达目的基因。

植物使用包含目的序列(即SnRK2核酸或其功能性变体)的载体转化。目的序列与一个或多个调控序列(至少与启动子)有效连接。术语“调节元件”、“调控序列”和“启动子”在文中都可以互换使用，且应当取其广义，是指能影响与它们连接的序列表达的调节核酸序列。上述术语包括来源于经典真核生物基因组基因的转录调节序列(包括精确转录起始所需的TATA框，带或不带CCAAT框序列)以及根据发育和/或外界刺激，或以组织特异性方式改变基因表达的另外的调节元件(即上游激活序列、增强子和沉默子)。该术语还包括经典原核基因的转录调节序列，在这种情况下它可以包括-35框序列和/或-10框转录调节序列。术语“调节元件”也包括合成的融合分子或衍生物，其使得核酸分子能够在细胞、组织或器官中表达，激活或增强这种表达。如本文所用的术语“有效连接”指启动子序列与目的基因之间的功能性连接，使得启动子序列能起始目的基因的转录。

有利地，可以使用任何类型的启动子来驱动核酸序列的表达。启动子可以是诱导型启动子，即对发育、化学、环境或物理刺激应答而具有诱导的或增加的转录起始。作为胁迫诱导型启动子(即当植物接触多种胁迫条件时激活的启动子)的诱导型启动子的实例是水胁迫诱导型启动子WS118。另外的或可选的，启动子可以是组织特异性启动子，即能够优选的在特定组织如叶、根、种子组织等中起始转录的这种。种子特异性启动子的实例是稻油质蛋白18kDa启动子(Wu等人(1998)J Biochem 123(3)：386-91)。

优选的，SnRK2核酸或其功能性变体有效连接到组成型启动子。本文所定义的术语“组成型”指的是在植物的至少一个组织或器官中显著性表达，以及在植物的任何生命阶段显著性表达的启动子。该启动子优选在整株植物中显著性表达。优选的，能够使核酸在整株植物中显著性表达的组成型启动子具有与GOS2启动子相当的表达模式。更优选的，组成型启动子具有与稻GOS2启动子相同的表达模式，最优选的，能有使核酸在整株植物中显著性表达的启动子是SEQ ID NO：55代表的来自稻的GOS2启动子。要明确的是本发明的适用性并不限于由SEQ ID NO：1所代表的SnRK2核酸，本发明的适用性也不限于由GOS2启动子所驱动的SnRK2核酸的表达。其他也可以用来驱动SnRK2核酸表达的组成型启动子的实例在下表3中显示。

表3：组成型启动子的实例

基因来源	表达模式	参考文献
			肌动蛋白	组成型	McElroy等人，Plant Cell，2：163-171，1990
CAMV 35S	组成型	Odell等人，Nature，313：810-812，1985
			CaMV 19S	组成型	Nilsson等人，Physiol.Plant.100：456-462，1997
GOS2	组成型	de Pater等人，Plant JNov；2(6)：837-44，1992
			泛素	组成型	Christensen等人，PlantMol.Biol.18：675-689，1992
稻亲环蛋白	组成型	Buchholz等人，Plant MolBiol.25(5)：837-43，1994
			玉米H3组蛋白	组成型	Lepetit等人，Mol.Gen.Genet.231：276-285，1992
肌动蛋白2	组成型	An等人，Plant J.10(1)；107-121，1996

任选的，一个或多个终止子序列也可引入植物的构建体中。术语“终止子”包括调控序列，其位于转录单位末端的DNA序列，标志初级转录本的3′加工和聚腺苷酸化以及转录的终止。其他调节元件可以包括转录增强子以及翻译增强子。本领域技术人员知晓适合用于实施本发明的终止子和增强子序列。此类序列是已知的，或本领域技术人员可以很容易的获得。

本发明的遗传构建体还可以包括在特定细胞类型中维持和/或复制所需要的复制原点序列。一个实例是需要遗传构建体在细菌细胞中作为附加型基因元件(如质粒或黏粒)维持的情况。优选的复制原点包括但不局限于f1-ori和colE1。

遗传构建体任选地可包含选择标记基因。如本文所用，术语“选择性标记基因”包括赋予表达该基因细胞表型，以便于鉴定和/或选择用本发明的核酸构建体转染或转化的细胞的任何基因。合适的标记可选自赋予抗生素或除草剂抗性的标记，其引入新的新陈代谢性状或允许可视选择。选择标记基因的实例包括能赋予抗生素抗性的基因(如使新霉素和卡那霉素磷酸化的nptII，或磷酸化潮霉素的hpt)、赋予除草剂抗性的基因(例如提供Basta抗性的bar；提供草甘膦抗性的aroA或gox)的基因，或提供陈代谢性状的基因(如允许植物利用甘露糖作为唯一碳源的manA)。可视标记基因导致颜色的形成(例如β-葡糖苷酸酶，GUS)、发光(如荧光素酶)或荧光(绿色荧光蛋白GFP及其衍生物)。

本发明还包括通过本发明方法获得的植物。本发明因此提供了可通过本发明方法获得的植物，该植物在其中引入了SnRK2核酸或其功能性变体，或者该植物在其中引入了遗传修饰，优选在SnRK2基因的基因座中。

本发明还提供了产生具有改良生长特性的转基因植物的方法，其包括在植物中引入和表达SnRK2核酸或其功能性变体。

更具体的，本发明提供了产生具有改良的生长特性的转基因植物的方法，该方法包括：

(i)向植物或植物细胞中引入SnRK2核酸或其功能性变体；并且

(ii)在促进植物生长和发育的条件下培养植物细胞。

核酸可以直接引入到植物细胞或植物本身(包括引入到植物的组织、器官或任何其他部分)之中。根据本发明优选的特征，核酸优选通过转化引入植物中。

本文所涉及的术语“转化”包括把外源多核苷酸向宿主细胞中的转移，而不管转移所用的方法如何。无论是通过器官发生还是胚胎发生能够随后克隆繁殖的植物组织，可以用本发明的遗传构建体转化，并从其再生出整株植物。选择的特定组织将根据可用于且最适于待转化的特定物种的克隆繁殖系统而不同。例示性的靶标组织包括叶圆盘、花粉、胚胎、子叶、下胚轴、雌配子体、胼胝体组织、已存在的分生组织(例如，顶端分生组织，腋生的芽和根分生组织)以及诱导的分生组织(例如，子叶分生组织和下胚轴分生组织)。多核苷酸可以瞬时或稳定的被引入到宿主细胞中，并可保持非整合状态，例如，作为质粒。可选择的，它可以整合到宿主基因组中。以本领域技术人员所知的方法，所得的转化植物细胞然后可用来再生转化植物。

植物物种的转化目前是一种相当常规的技术。有利的，任何转化方法都可用于将目的基因引入到合适的祖代细胞中。转化方法包括使用脂质体、电穿孔、能增加游离DNA摄入的化学品、直接注射DNA到植物中、基因枪颗粒轰击、使用病毒或花粉进行转化以及显微注射。方法可选自用于原生质体的钙/聚乙二醇方法(Krens等人，(1982)Nature 296，72-74；Negrutiu等人(1987)Plant Mol.Biol.8，363-373)；原生质体的电穿孔(Shillito等人，(1985)Bio/Technol 3，1099-1102)；显微注射到植物材料中(Crossway等人，(1986)Mol.Gen.Genet.202，179-185)；DNA或RNA包被颗粒轰击(Klein等人，(1987)Nature 327，70)；用(非整合型)病毒感染等等。优选使用任何用于稻转化的熟知方法，通过农杆菌属(Agrobacterium)介导的转化产生表达SnRK2转基因的转基因稻植物，所述的方法例如在任何以下文献中描述的方法：公开的欧洲专利申请EP 1198985 A1，Aldemita和Hodges(Planta，199，612-617，1996)；Chan等人(Plant Mol.Biol.22(3)491-506，1993)，Hiei等人(Plant J.6，271-282，1994)，其公开的内容以其全文在此引用作为参考。在谷类转化情形下，优选的方法如Ishida等人(Nature Biotechnol.14，745-50，1996)或Frame等人(Plant Physiol.129，13-22，2002)中所述，其公开的内容以其全文在此引用作为参考。

通常在转化以后，选择存在有与目的基因共转移的植物可表达基因所编码的一个或多个标记的植物细胞或细胞群，接着将转化的材料再生成整株植物。

DNA转移和再生之后，可评价推定转化植物中目的基因的存在、拷贝数和/或基因组结构，例如使用Southern分析。可选的或另外的，新引入DNA的表达水平可使用Northern和/或Western分析进行监控，两种技术都是本领域普通技术人员所熟知的。因此将转化的植物细胞培养为成熟植物包括步骤选择和/或再生和/或生长至成熟。

产生的转化植物可通过多种方法进行繁殖，如通过克隆繁殖或经典育种技术。例如，第一代(或T1)转化植物可以自花授精以产生纯合的第二代(或T2)转化体，并且T2植物可进一步通过经典的育种技术进行繁殖。

产生的转化生物可以是多种形式的。例如，它们可以是转化细胞与非转化细胞的嵌合体；克隆转化体(例如，所有的细胞都被转化以含有表达盒)；转化与未转化组织的嫁接体(例如，在植物中，转化的根茎被嫁接到未转化的接穗中)。

本发明显然延及由文中描述的任何方法产生的任何植物细胞或植物，以及所有的植物部分及其繁殖体。本发明还延及囊括由任何上述方法产生的原代转化或转染细胞、组织、器官或整株植物的后代，唯一的要求是该后代表现出与由本发明方法在亲代中产生的基因型和/或表型特征相同的基因型和/或表型特征。本发明还包括含有分离的SnRK2核酸或其功能性变体的宿主细胞。根据本发明优选的宿主细胞是植物细胞。本发明还延及本发明植物的可收获部分，例如但不限于种子、叶、果实、花、茎、根茎、块茎和鳞茎。本发明另外涉及直接来自此类植物的可收获部分的产物，如干的颗粒或粉、油、脂肪和脂肪酸、淀粉或蛋白质。

本发明还包括SnRK2核酸或其功能性变体的用途，以及SnRK2多肽或其同源物的用途。

一种此类用途涉及改良植物的生长特性，尤其是改良产量，如增加的生物量和/或增加的种子产量。种子产量可以包括下列一种或多种：增加的(饱满)种子数、增加的种子重量、增加的收获指数、增加的千粒重等。

SnRK2核酸或其变体，或SnRK2多肽或其同源物可以用在育种方案中，其中鉴定了与SnRK2基因或其变体遗传连锁的DNA标记。SnRK2或其变体，或SnRK2蛋白质或其同源物可以用来定义分子标记。之后可以将此DNA或蛋白质标记用在育种方案中以选择具有改良的生长特性的植物。例如，SnRK2基因或其变体可以是由的SEQ ID NO：1所代表的核酸，或编码任意上述同源物的核酸。

还发现SnRK2基因的等位变体在标记辅助的育种方案中的用途。此类育种方案有时需要通过植物的诱变处理引入等位变异，例如使用EMS诱变；可选的，该方案可以开始于收集无意引起的“天然”来源的等位变体。之后通过例如PCR进行等位变体的鉴定。接着是选择步骤，用于选择所讨论序列的优良等位变体，其在植物中产生改良的生长特性。通常通过监控含有所讨论序列的不同等位变体的植物的生长特性来进行选择，所述的所讨论序列的等位变体如SEQ ID NO：1的不同等位变体，或编码任意上述同源物的核酸的不同等位变体。监控生长特性可以在温室或野外进行。此外可选的步骤包括使已鉴定优良等位变体的植物与另一种植物杂交。例如，这可用于产生目标表型特征的组合。

SnRK2核酸或其变体还可用作探针，以对基因进行遗传和物理作图，这些基因是与之连锁的性状的一部分和标志。此类信息可用于植物育种，以开发具有所需表型的品系。SnRK2核酸或其变体的此类用途仅需要长度至少为10个核苷酸的核酸序列。SnRK2核酸或其变体可用作限制性片段长度多态性(RFLP)标记。限制性消化的植物基因组DNA的Southern印迹可使用SnRK2核酸或其变体进行探测。然后可以使用计算机程序如MapMaker(Lander等人(1987)Genomics 1：174-181)对所得的带型进行遗传分析，以构建遗传图谱。此外，该核酸可用于探测Southern印迹，该Southern印迹含有代表亲本和确定的遗传杂交后代的一组个体的限制酶处理的基因组DNA。记录DNA多态性的分离，并用来计算SnRK2核酸或其变体在之前使用该群体获得的遗传图谱中的位置(Botstein等人(1980)Am.J.Hum.Genet.32：314-331)。

在遗传作图中植物基因来源的探针的制备和用途在Bematzky和Tanksley(Plant Mol.Biol.Reporter 4，37-41，1986)中描述。众多出版物描述了使用上述方法或其变通形式对特定的cDNA克隆进行遗传作图。例如，F2杂交群体、回交群体、随机交配群体、近亲同基因系及其他的个体组可用于作图。这类方法是本领域技术人员熟知的。

核酸探针也可用于物理作图(即将序列置于物理图上；参见Hoheisel等人，在：Non-mammalian Genomic Analysis：A Practical Guide，Academic press 1996，第319-346页，以及其中引用的参考文献)。

在另一个实施方案中，核酸探针可用于直接荧光原位杂交(FISH)作图(Trask(1991)Trends Genet.7：149-154)。虽然现在的FISH作图方法偏向于使用大的克隆(几个到几百kb；参见Laan等人(1995)Genome Res.5：13-20)，但是灵敏度的提高允许使用较短的探针进行FISH作图。

遗传和物理作图的多种基于核酸扩增的方法可以使用所述核酸进行。实例包括等位基因特异性扩增(Kazazian(1989)J.Lab.Clin.Med 11：95-96)、PCR扩增片段的多态性(CAPS；Sheffield等人(1993)Genomics 16，325-332)、等位基因特异性连接(Landegren等人(1988)Science 241：1077-1080)、核苷酸延伸反应(Sokolov(1990)Nucleic Acid Res.18：3671)、放射杂交作图(Walter等人(1997)Nat.Genet.7：22-28)和Happy作图(Dear和Cook(1989)Nucleic Acid Res.17：6795-6807)。为实施这些方法，使用核酸序列设计和制备引物对，以用于扩增反应或引物延伸反应。此类引物的设计是本领域技术人员所熟知的。在采用基于PCR的遗传作图方法中，有必要鉴定跨越了对应于此核酸序列区域作图的亲代之间的DNA序列差异。但是，这对作图方法通常不是必要的。

在此方式中，可以实施产生、鉴定和/或分离具有改变的SnRK2活性和/或表达，表现出改良的生长特性的改良植物。

SnRK2核酸或其功能性变体，或SnRK2多肽或其同源物还可以用作生长调节剂。由于已经表明这些分子可用于改良植物的生长特性，它们也是有用的生长调节剂，如除草剂或生长刺激物。本发明因此提供了一种用作生长调节剂的组合物，其包含SnRK2核酸或其功能性变体，或SnRK2多肽或其同源物以及合适的载体、稀释剂或赋形剂。

根据本发明的方法产生如上所述的具有改良生长特性的植物。这些改良的生长特性也可与其他经济学上有利的性状组合，如进一步增产性状、对各种胁迫的耐受性、修饰各种结构特征和/或生化和/或生理学特征的性状。

附图说明

本发明现在将参考以下附图进行描述，其中：

图1给出了SnRK2的全图。五角星形代表了激酶结构域，而浅灰色的C端区域代表了富含Asp和/或Glu的酸性区域。

图2显示了二元载体，其用来在稻中转化和表达受到稻GOS2启动子(内参PRO0129)调控的拟南芥SnRK2(内参CDS0758)的。

图3详细描述了可用于进行本发明方法的序列的实例。SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2代表了用于实施例中的SnRK2的核苷酸和蛋白质序列。SEQ ID NO：3代表了SnRK2未剪接的DNA序列。SEQ ID NO：4和SEQ IDNO：5是用来分离SnRK2核酸的引物序列。SEQ ID NO：6代表了在SnRK2蛋白质中保守部分的共有序列。SEQ ID NO：7到53是SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所给出的SnRK2编码序列和蛋白质序列的同源物的核苷酸和蛋白质序列。

实施例

本发明现在将参考以下实施例进行描述，其仅仅是为了例证说明。

DNA操作：除非另外说明，否则重组DNA技术按照(Sambrook(2001)Molecular Cloning：a laboratory manual，第3版，Cold Spring HarborLaboratory Press，CSH，New York)或Ausubel等人(1994)，CurrentProtocols in Molecular Biology，Current Protocols的卷1和2(http://www.4ulr.com/products/currentprotocols/index.htmD中描述的标准方案进行。用于植物分子工作的标准材料和方法描述于R.D.D Croy的Plant Molecular Biology Labfase(1993)，由BIOS Scientific PublicationsLtd(UK)和Blackwell Scientific Publications(UK)出版。

实施例1：基因克隆

使用拟南芥幼苗cDNA文库(Invitrogen，Paisley，UK)作为模板，PCR扩增拟南芥SnRK2(内部编码CDS0758)。对从幼苗提取的RNA进行逆转录以后，把cDNA克隆到pCMV Sport6.0中。文库的平均插入大小为1.5kb，并且克隆的原始数为1.59×10⁷cfu。原始滴度确定为9.6×10⁵cfu/ml，并且在第一轮扩增以后变成6×10¹¹cfu/ml。质粒提取以后，将200ng的模板用于50μl PCR混合物。用于PCR扩增的引物prm02295(SEQ IDNO：4，正义)和prm02296(SEQ ID NO：5，反向互补)包含用于Gateway重组的AttB位点。使用Hifi Tag DNA聚合酶，在标准条件下进行PCR。同样使用标准方法扩增和纯化1130bp的PCR片段(无attB位点)。然后进行Gateway方法的第一步，即BP反应，在此期间，PCR片段与pDONR201质粒体内重组以产生“进入克隆”(entry clone)”(根据Gateway^术语)。质粒pDONR201作为Gatewaytechnology的一部分购自Invitrogen。

实施例2：载体构建和稻的转化

继之在LR反应中使用进入克隆p028和用于稻转化的目的载体p03069。该载体包含位于T-DNA边界内的以下部分作为功能性元件：植物选择性标记；可视标记表达盒；旨在与已克隆到进入克隆中的目的序列进行LR体内重组的Gateway盒。用于组成型表达的稻GOS2启动子位于该Gateway盒的上游。

LR重组步骤之后，将得到的表达载体p033(图2)转化到农杆菌属菌株LBA4404中，并且随后转化到稻植物中。使转化的稻植物生长，并且然后检验实施例3中所述的参数。

实施例3：转化体的评估：生长测量

产生了大约15到20个独立的T0转化体。将初级转化体从组织培养箱转移到温室中生长，并收获T1种子。5个事件得以保留，其中T1后代发生3∶1的转基因存在/缺乏分离。对于这些事件中的每一个，通过可视标记选择，选择了10个包含转基因的T1幼苗(杂合子和纯合子)，以及10个缺乏转基因的T1幼苗(失效合子)。将选择的T1植物转移到温室中。每个植物具有一个唯一的条形标签以将表型数据与对应植物明确联系起来。所选择的T1植物在10cm直径花盆的土壤中并在下列环境状态下生长：光周期＝11.5小时、日光强度＝30,000勒克斯或更多、日间温度＝28℃或更高、夜间温度＝22℃、相对湿度＝60-70％。转基因植物和相应的失效合子在随机位置上并排生长。从播种期到成熟期，植物几次通过数字成像箱。在每个时间点上对每株植物从至少6个不同的角度取得数字图像(2048×1536像素，1千6百万色)。

收获成熟的初级圆锥花序、装袋并贴上条码标签，然后在37℃烤箱中干燥三天。随后将圆锥花序脱粒并且收集所有的种子。使用鼓风装置将饱满外壳和空外壳分开。在分离后，使用可商购的计数仪器对两批种子进行计数。弃去空外壳。在分析天平上称重饱满的外壳并且使用数字成像测量种子的截面积。此方法得到一组下面描述的种子相关参数。

这些参数是使用图像分析软件，以自动方式从数字图像中得到并且进行统计分析的。将对不平衡设计进行修正的双因素ANOVA(方差分析)用作统计模型，用于植物表型特征的全面评估。对用本发明基因转化的所有植株的所有事件的所有测量参数进行F测验。进行F检验以检查基因对所有转化事件的效应，并检验基因的总效应，亦称之为整体基因效应。如果F检验的值显示数据具有显著性，那么结论是有“基因”效应，这意味着基因的存在或定位引起了效应。真实整体基因效应的显著性阈值设置为F测验的5％概率水平。

为了检查基因在事件中的效应，即品系特异性效应，在每一事件中使用来自转基因植物和相应无效植物的数据集进行t检验。“无效植物”或“无效分离子”或“无效合子”是以与转基因植物相同的方式处理的，但是转基因已经从中分离的植物。也可以将无效植物描述为纯合的阴性转化植物。将t检验显著性的阈值设定为10％概率水平。一些事件的结果可以高于此阈值或低于此阈值。这是基于这种假设，即基因可以仅在基因组中的某些位置中具有效应，并且此位置依赖性效应的发生不是罕见的。本文中此类基因效应也称为“基因的线性效应(line effect of the gene)”。通过比较t值和t分布得到p值，或者通过比较F值和F分布得到p值。p值给出了零假设(即没有转基因的作用)为正确的概率。

将在第一个实验中得到的数据在使用T2植物的第二个实验中来证实。选择了具有正确表达模式的3个品系用于进一步分析。通过监控标记基因表达来筛选T1中的来自阳性植物(杂合子和纯合子)的一批种子。对于每一个所选事件，随后保存几批杂合种子用于T2评估。在每批种子中，在温室中种植等量的阳性和阴性植物用于评估。

在T2代中评估了总数为120的SnRK2转化的植物，即每个事件有40个植物，其中有20个转基因阳性以及20个阴性。

由于进行了具有重叠事件的两个实验，进行组合分析。这可用于检查两个实验中效应的一致性，并且如果在这种情形下，其可用于从两个实验中收集证据从而增加结论的可信性。使用的方法是考虑到数据的多级结构(即实验-事件-分离子)的混合模型方法。通过对比卡方分布的似然比测定得到p值。

实施例4：转化体的评估：产量相关参数的测量

当对上述种子进行分析时，发明人发现用SnRK2基因构建体转化的植物比缺乏SnRK2转基因的植物具有更高的生物量(表示为总Areamax)和增加的千粒重(TKW)。在T1代中植物所得的阳性结果(增加的千粒重以及9％的生物量增加(p值为0.0309))在T2代中再次得到。在表4中，数据显示了生物量和TKW的总％增加(从T2代的单独品系的数据中计算出来)以及来自F检验的各个p值。这些T2数据在与T1代结果的组合分析中进行再次评估，并且得到的p值显示观察到的效应是显著性的。

表4

	T2代		组合分析
					％差异	p值	p值
总Areamax	+7	0.0158	0.0006
				TKW	+2	0.0107	0.0292

地上生物量：

通过计算区别于背景的来自地上植物部分的像素总数来确定植物地上面积。平均在同一时间点从不同的角度取得的图片得到此值，并且通过校准将此值转变为以平方毫米表示的物理表面值(总Areamax)。实验表明以此方式测量的地上植物面积与地上植物部分的生物量相关。在T1代中，存在地上生物量的显著性增加，并且其在T2代中得到的确认(p值分别在T1中是0.0309，T2中是0.0158)。组合分析还显示在生物量中得到的增加是高显著性的(p值0.0006)。

千粒重：

千粒重(TKW)是从所计的饱满种子数和它们的总重量推断出来的。在T1代和T2代中有TKW增加的倾向，这表明增加是可靠的总效应并且是显著性的。具体的，4个测试的T2品系中的2个表现出显著性的TKW增加。

序列表

<110>克罗普迪塞恩股份有限公司

<120>具有改良生长特性的植物及其制备方法

<130>CD-119-prio

<150>EP 04103421.6

<151>2004-07-16

<150>US 60/589,765

<151>2004-07-21

<160>55

<170>PatentIn版本3.3

<210>1

<211>1092

<212>DNA

<213>拟南芥(Arabidopsis thaliana)

<400>1

atggacaagt acgagctggt gaaagacata ggtgctggga attttggagt tgccaggctc      60

atgaaggtca aaaactctaa ggaacttgtt gccatgaagt acatcgagcg tggtcctaag     120

attgatgaga atgtggcaag agagatcatt aatcacagat cacttcgcca tccgaatata     180

atccggttca aggaggtggt gttgactcca acccatcttg ccattgccat ggaatatgct     240

gctggtggtg aactattcga gcgtatatgc agtgctggaa gatttagtga ggatgaggcg     300

agatatttct tccagcagct tatatcaggt gttagctatt gccatgctat gcaaatatgc     360

catagagatc tgaagctcga gaatacgctc ttggatggaa gtcctgctcc acgtctgaaa     420

atctgtgatt ttggttattc caagtcctct ctgctgcact ctaggcccaa atcaacagtt     480

ggaactccag catatattgc acctgaggtc ctttctcgaa gagaatatga tggcaagatg     540

gctgatgtat ggtcttgtgg tgtgactctt tatgtcatgc tggttggagc atacccattt     600

gaagaccagg aagaccccaa gaacttcagg aaaacaatac aaaaaataat ggctgtccag     660

tacaagatcc cggactacgt ccatatctca caggattgta aaaatctcct ttcccgtata     720

tttgtcgcca attcactcaa gaggatcacc attgcagaaa tcaagaaaca ttcatggttc     780

ctaaagaatt tgccaaggga actcacagag acagctcaag ctgcatattt caagaaagag     840

aacccaacct tctcccttca gaccgttgaa gagatcatga agatagtggc tgacgccaaa     900

acaccgcctc ctgtttcccg atccatcgga ggttttggct ggggaggaaa tggggatgca     960

gatggaaaag aggaagatgc agaagacgtg gaggaggaag aggaggaggt ggaagaagag    1020

gaagacgatg aggatgaata cgataagact gtaaaggaag tacacgcaag tggagaagtg    1080

agaataagtt ga                                                        1092

<210>2

<211>363

<212>PRT

<213>拟南芥

<400>2

Met Asp Lys Tyr Glu Leu Val Lys Asp Ile Gly Ala Gly Asn Phe Gly

1               5                   10                  15

Val Ala Arg Leu Met Lys Val Lys Asn Ser Lys Glu Leu Val Ala Met

            20                  25                  30

Lys Tyr Ile Glu Arg Gly Pro Lys Ile Asp Glu Asn Val Ala Arg Glu

        35                  40                  45

Ile Ile Asn His Arg Ser Leu Arg His Pro Asn Ile Ile Arg Phe Lys

    50                  55                  60

Glu Val Val Leu Thr Pro Thr His Leu Ala Ile Ala Met Glu Tyr Ala

65                  70                  75                  80

Ala Gly Gly Glu Leu Phe Glu Arg Ile Cys Ser Ala Gly Arg Phe Ser

                85                  90                  95

Glu Asp Glu Ala Arg Tyr Phe Phe Gln Gln Leu Ile Ser Gly Val Ser

            100                 105                 110

Tyr Cys His Ala Met Gln Ile Cys His Arg Asp Leu Lys Leu Glu Asn

        115                 120                 125

Thr Leu Leu Asp Gly Ser Pro Ala Pro Arg Leu Lys Ile Cys Asp Phe

    130                 135                 140

Gly Tyr Ser Lys Ser Ser Leu Leu His Ser Arg Pro Lys Ser Thr Val

145                 150                 155                 160

Gly Thr Pro Ala Tyr Ile Ala Pro Glu Val Leu Ser Arg Arg Glu Tyr

                165                 170                 175

Asp Gly Lys Met Ala Asp Val Trp Ser Cys Gly Val Thr Leu Tyr Val

            180                 185                 190

Met Leu Val Gly Ala Tyr Pro Phe Glu Asp Gln Glu Asp Pro Lys Asn

        195                 200                 205

Phe Arg Lys Thr Ile Gln Lys Ile Met Ala Val Gln Tyr Lys Ile Pro

    210                 215                 220

Asp Tyr Val His Ile Ser Gln Asp Cys Lys Asn Leu Leu Ser Arg Ile

225                 230                 235                 240

Phe Val Ala Asn Ser Leu Lys Arg Ile Thr Ile Ala Glu Ile Lys Lys

                245                 250                 255

His Ser Trp Phe Leu Lys Asn Leu Pro Arg Glu Leu Thr Glu Thr Ala

            260                 265                 270

Gln Ala Ala Tyr Phe Lys Lys Glu Asn Pro Thr Phe Ser Leu Gln Thr

        275                 280                 285

Val Glu Glu Ile Met Lys Ile Val Ala Asp Ala Lys Thr Pro Pro Pro

    290                 295                 300

Val Ser Arg Ser Ile Gly Gly Phe Gly Trp Gly Gly Asn Gly Asp Ala

305                 310                 315                 320

Asp Gly Lys Glu Glu Asp Ala Glu Asp Val Glu Glu Glu Glu Glu Glu

                325                 330                 335

Val Glu Glu Glu Glu Asp Asp Glu Asp Glu Tyr Asp Lys Thr Val Lys

            340                 345                 350

Glu Val His Ala Ser Gly Glu Val Arg Ile Ser

        355                 360

<210>3

<211>3121

<212>DNA

<213>拟南芥

<400>3

caaacatgta tggatcgcat ggaaacttgt gggtccctct ttcttttaaa aaatctcgta      60

ttaattaaat aaatggaaaa aaaaacatga tgggagtttg tttaggcagg ggagattctt     120

cttcattctc atcattattt ctctattaat ttcaccccaa aaaagaaaaa agaaaaattc     180

caacaagaaa aaaaaaagaa aaagaaagtt gattcttcgc ttaggcttga aatctctcca     240

atccaaatct caaattaacc ttccatcgtc atctctttcc cttttttttt cccactttct     300

ttgcgaatcg cgagatctcg gaatcgcatc cttgattttg ggatactgtt tttttttttt     360

ttaatcttgt ttcattttca cgtgaaattc ttagctgcta gaactggact tgaatttcaa     420

cgagaatttt ggagattttt tttttgtttg ggtttttcct ttctgttttg tgtgtttgga     480

attagggttg tcgagcgaga atggacaagt acgagctggt gaaagacata ggtgctggga     540

attttggagt tgccaggctc atgaaggtca aaaactctaa ggaacttgtt gccatgaagt     600

acatcgagcg tggtcctaag gtatattcct ctctgttttt gtgttttcat tgctctccat     660

gagctggtga tcctataccc agatatgcat aattggaatg aattgctatt aagcagaaga     720

gtcgattttt ttttgtaaat ttcttatcgt tagctgattg ggtgtttaac gtaacgttag     780

ttatcttgta gttgtaatat ttttcctgaa aagatttgta caatgagtat ttgctttgtt     840

tgtttttttt gatacagatt gatgagaatg tggcaagaga gatcattaat cacagatcac     900

ttcgccatcc gaatataatc cggttcaagg aggttagtga atttcttgtt gcttgacatg     960

ggtggtgttc ttgctatgaa aaagtttgtt gataatctct tatatctttc atcttgcatt    1020

ccttgttggg tttatggatt ttataggtgg tgttgactcc aacccatctt gccattgcca    1080

tggaatatgc tgctggtggt gaactattcg agcgtatatg cagtgctgga agatttagtg    1140

aggatgaggt gagcttgcca tttgaaaaat tgtgctgtgc ttttgcgaat atgaaattac    1200

tagtatttag gataatctgc atggtctttg gaaagattag gaggaaggga acaagagaaa    1260

acatgtgaac ctccttttat ttagtatcag gcattaaaca gttagggtct acgttctaat    1320

cctttctctc ttttccaggc gagatatttc ttccagcagc ttatatcagg tgttagctat    1380

tgccatgcta tggtaatgta gagacaatga cttaagcaaa atttacttat ccattggctg    1440

tttgaagtcg ttttttttta atcatgtgtt gactattttg ttgcagcaaa tatgccatag    1500

agatctgaag ctcgagaata cgctcttgga tggaagtcct gctccacgtc tgaaaatctg    1560

tgattttggt tattccaagg tctgacacta aaaaaaaatc caagttcccc ccttgtcgac    1620

gagatcctct tttgtgattt gttattctct tttttttagt cctctctgct gcactctagg    1680

cccaaatcaa cagttggaac tccagcatat attgcacctg aggtcctttc tcgaagagaa    1740

tatgatggca aggtaatcaa gcatcatgca caatgcaatg aacttccata aacccatgag    1800

tatttatgat attgtcatgc tctttacatt tttacttttg aatttaaaaa gtcatctttg    1860

tggaagtcgc taagatttga agcatttttt cttctttcag atggctgatg tatggtcttg    1920

tggtgtgact ctttatgtca tgctggttgg agcataccca tttgaagacc aggaagaccc    1980

caagaacttc aggaaaacaa tacaagtagg tttctttttt gaagccatgt atctgcatat    2040

ctcgctttcg ccacatccta ttcgtcaatg tgtgatcttg ttatacagaa aataatggct    2100

gtccagtaca agatcccgga ctacgtccat atctcacagg attgtaaaaa tctcctttcc    2160

cgtatatttg tcgccaattc actcaaggta tacatcaatc aactgaacta aatgttttca    2220

aagatgcctt ttgatttttc tgaacaattg agctacttgt tgtttcgtag aggatcacca    2280

ttgcagaaat caagaaacat tcatggttcc taaagaattt gccaagggaa ctcacagaga    2340

cagctcaagc tgcatatttc aagaaagaga acccaacctt ctcccttcag accgttgaag    2400

agatcatgaa gatagtggct gacgccaaaa caccgcctcc tgtttcccga tccatcggag    2460

gttttggctg gggaggaaat ggggatgcag atggaaaaga ggaagatgca gaagacgtgg    2520

aggaggaaga ggaggaggtg gaagaagagg aagacgatga ggatgaatac gataagactg    2580

taaaggaagt acacgcaagt ggagaagtga gaataagttg atattttggt ttttggtctg    2640

tgtaagaaag aagtcgtcgt tggtttgttg aaactgaaaa gtctctgttc tcgtgtttgc    2700

ctttacaatg ctttggctaa ggttttggtt ctggttttgg agatttgtaa aatttgcagt    2760

ataagatgaa caaacagaga ggttgatgat gagaatgagt cctttgctac gcatggtact    2820

atgaacattg tgacctccaa taaatatttt tgtaaattag attttatttt ccgaaaagat    2880

tcatgtattt gatttttgga tttcttattt ttattttttt tcgttcctta tcattttttt    2940

gaaaatgcaa atctataaaa tacaaatgtc aacaaaaaat caaattgaaa tgttcggaat    3000

tcaaaaataa ttgttttctt ttgttttttt gtttctgatg cgaaatgtga atatattaga    3060

gggaaaatat cccgccatta ggaaaccgga taatcttcta cggccttgag ctcaagtcgg    3120

t                                                                    3121

<210>4

<211>54

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>正向引物：prm02295

<400>4

ggggacaagt ttgtacaaaa aagcaggctt cacaatggac aagtacgagc tggt            54

<210>5

<211>51

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>反向引物：prm02296

<400>5

ggggaccact ttgtacaaga aagctgggtc gacgacttct ttcttacaca g               51

<210>6

<211>9

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>保守性特征序列

<220>

<221>混合特征

<222>(2)..(2)

<223>Xaa可以是Phe或Tyr

<220>

<221>混合特征

<222>(3)..(3)

<223>Xaa可以是Leu、Met或Thr

<220>

<221>混合特征

<222>(5)..(5)

<223>Xaa可以是Asn、Gly或Arg

<220>

<221>混合特征

<222>(6)..(6)

<223>Xaa可以是Leu、Pro或Ile

<220>

<221>混合特征

<222>(7)..(7)

<223>Xaa可以是Pro或Leu

<220>

<221>混合特征

<222>(8)..(8)

<223>Xaa可以是Ala、Gly、Val、Arg、Lys或Ile

<220>

<221>混合特征

<222>(9)..(9)

<223>Xaa可以是Asp、Glu或Val

<400>6

Trp Xaa Xaa Lys Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa

1               5

<210>7

<211>1086

<212>DNA

<213>拟南芥

<400>7

atggacaagt acgagcttgt taaagacatc ggtgctggga attttggagt ggcgaggctc      60

atgagagtca aaaactccaa ggaactcgtt gctatgaagt acatcgagcg tggacctaag     120

attgatgaga acgtggcgag agagattatt aaccacagat cacttcgtca tcccaatatt     180

atccggttta aggaggtggt tttgacacca acgcacatcg ccattgctat ggaatatgct     240

gctggcggtg agctatttga gcgtatatgt agcgctggaa gattcagtga ggatgaggca     300

agatactttt tccagcagct tatctcagga gtcagctatt gtcatgctat gcaaatatgc     360

cacagagatc tgaagcttga aaataccctc ttagatggaa gtcctgctcc acgcctgaag     420

atctgtgatt ttggttattc caagtcctca ctgttgcact ctatgcccaa atcaactgtt     480

ggaactccag catatattgc acctgaggtt ctttctcgcg gagagtatga tggcaagatg     540

gctgatgtat ggtcttgtgg tgtgactctt tatgtcatgc tggtgggagc atacccattt     600

gaagaccaag aggatcccaa aaacttcaaa aaaacaatac aaagaataat ggctgtcaag     660

tacaagatcc cggactatgt ccatatctca caagattgca aacatctoct ctcccgtata     720

tttgtcacca actcgaataa gaggattacg ataggtgaca tcaagaaaca tccatggttc     780

ctaaagaacc tgccaaggga acttacagaa atagctcaag ctgcatactt caggaaagag     840

aacccgacat tctcactcca aagcgtcgaa gagataatga agattgtgga agaggcaaaa     900

actccagctc gtgtttctcg gtcgattgga gcatttgggt ggggaggagg agaagatgcc     960

gagggcaagg aggaagatgc agaggaagaa gttgaggaag tagaagaaga agaagacgaa    1020

gaagatgagt atgataagac ggtgaagcaa gtgcatgcta gcatgggaga agtccgagtc    1080

agttaa                                                               1086

<210>8

<211>361

<212>PRT

<213>拟南芥

<400>8

Met Asp Lys Tyr Glu Leu Val Lys Asp Ile Gly Ala Gly Asn Phe Gly

1               5                   10                  15

Val Ala Arg Leu Met Arg Val Lys Asn Ser Lys Glu Leu Val Ala Met

            20                  25                  30

Lys Tyr Ile Glu Arg Gly Pro Lys Ile Asp Glu Asn Val Ala Arg Glu

        35                  40                  45

Ile Ile Asn His Arg Ser Leu Arg His Pro Asn Ile Ile Arg Phe Lys

    50                  55                  60

Glu Val Val Leu Thr Pro Thr His Ile Ala Ile Ala Met Glu Tyr Ala

65                  70                  75                  80

Ala Gly Gly Glu Leu Phe Glu Arg Ile Cys Ser Ala Gly Arg Phe Ser

                85                  90                  95

Glu Asp Glu Ala Arg Tyr Phe Phe Gln Gln Leu Ile Ser Gly Val Ser

            100                 105                 110

Tyr Cys His Ala Met Gln Ile Cys His Arg Asp Leu Lys Leu Glu Asn

        115                 120                 125

Thr Leu Leu Asp Gly Ser Pro Ala Pro Arg Leu Lys Ile Cys Asp Phe

    130                 135                 140

Gly Tyr Ser Lys Ser Ser Leu Leu His Ser Met Pro Lys Ser Thr Val

145                 150                 155                 160

Gly Thr Pro Ala Tyr Ile Ala Pro Glu Val Leu Ser Arg Gly Glu Tyr

                165                 170                 175

Asp Gly Lys Met Ala Asp Val Trp Ser Cys Gly Val Thr Leu Tyr Val

            180                 185                 190

Met Leu Val Gly Ala Tyr Pro Phe Glu Asp Gln Glu Asp Pro Lys Asn

        195                 200                 205

Phe Lys Lys Thr Ile Gln Arg Ile Met Ala Val Lys Tyr Lys Ile Pro

    210                 215                 220

Asp Tyr Val His Ile Ser Gln Asp Cys Lys His Leu Leu Ser Arg Ile

225                 230                 235                 240

Phe Val Thr Asn Ser Asn Lys Arg Ile Thr Ile Gly Asp Ile Lys Lys

                245                 250                 255

His Pro Trp Phe Leu Lys Asn Leu Pro Arg Glu Leu Thr Glu Ile Ala

            260                 265                 270

Gln Ala Ala Tyr Phe Arg Lys Glu Asn Pro Thr Phe Ser Leu Gln Ser

        275                 280                 285

Val Glu Glu Ile Met Lys Ile Val Glu Glu Ala Lys Thr Pro Ala Arg

    290                 295                 300

Val Ser Arg Ser Ile Gly Ala Phe Gly Trp Gly Gly Gly Glu Asp Ala

305                 310                 315                 320

Glu Gly Lys Glu Glu Asp Ala Glu Glu Glu Val Glu Glu Val Glu Glu

                325                 330                 335

Glu Glu Asp Glu Glu Asp Glu Tyr Asp Lys Thr Val Lys Gln Val His

            340                 345                 350

Ala Ser Met Gly Glu Val Arg Val Ser

        355                 360

<210>9

<211>1083

<212>DNA

<213>拟南芥

<400>9

atggacaagt atgaggttgt gaaggatttg ggagctggaa attttggtgt ggctcgtctt      60

cttagacaca aagagaccaa agagctcgtt gctatgaaat acattgagag aggtcgcaag     120

attgatgaga atgtggcaag agagattatc aatcatagat cacttaggca tcctaatatc     180

atcagattca aggaggtgat tctgactcca actcatcttg caattgtaat ggagtatgct     240

tctggaggag agctctttga aagaatctgt aatgctggta gattcagtga agctgaggct     300

agatacttct ttcagcagct gatttgtggc gtggattact gtcattcact gcaaatatgt     360

catagagatt tgaagcttga gaatacactg cttgatggta gtccagcccc gcttttgaaa     420

atctgtgatt ttggttactc caagtcatct ctgcttcact ctagacctaa atcaactgtt     480

ggtactccag cttatatcgc acctgaagtt ctttcccgaa gagaatatga cggaaagcat     540

gcggatgttt ggtcctgtgg tgtgactctt tatgtgatgt tagttggagg ttatccgttt     600

gaagacccgg atgatccgag aaacttcagg aaaacaatcc aacgtataat ggctgtccag     660

tacaagatcc cggattacgt tcatatatcg caggagtgca gacaccttct ctctcgcata     720

tttgtcacta attcagctaa gagaatcaca cttaaagaga tcaagaagca tccatggtac     780

ttaaagaact tgccaaagga gcttacagag cctgctcaag cggcgtacta caagagagaa     840

accccaagct tttccctcca aagcgtagag gacataatga agatcgttgg agaagccagg     900

aatccagctc cgtcttctaa tgccgtcaag ggctttgatg atgatgagga agatgtggag     960

gacgaggttg aagaagaaga agaagaagaa gaagaagagg aggaagaaga ggaagaggaa    1020

gaagatgaat acgagaagca tgttaaagag gcccattctt gtcaagagcc tcccaaagct    1080

taa                                                                  1083

<210>10

<211>360

<212>PRT

<213>拟南芥

<400>10

Met Asp Lys Tyr Glu Val Val Lys Asp Leu Gly Ala Gly Asn Phe Gly

1               5                   10                  15

Val Ala Arg Leu Leu Arg His Lys Glu Thr Lys Glu Leu Val Ala Met

            20                  25                  30

Lys Tyr Ile Glu Arg Gly Arg Lys Ile Asp Glu Asn Val Ala Arg Glu

        35                  40                  45

Ile Ile Asn His Arg Ser Leu Arg His Pro Asn Ile Ile Arg Phe Lys

    50                  55                  60

Glu Val Ile Leu Thr Pro Thr His Leu Ala Ile Val Met Glu Tyr Ala

65                  70                  75                  80

Ser Gly Gly Glu Leu Phe Glu Arg Ile Cys Asn Ala Gly Arg Phe Ser

                85                  90                  95

Glu Ala Glu Ala Arg Tyr Phe Phe Gln Gln Leu Ile Cys Gly Val Asp

            100                 105                 110

Tyr Cys His Ser Leu Gln Ile Cys His Arg Asp Leu Lys Leu Glu Asn

        115                 120                 125

Thr Leu Leu Asp Gly Ser Pro Ala Pro Leu Leu Lys Ile Cys Asp Phe

    130                 135                 140

Gly Tyr Ser Lys Ser Ser Leu Leu His Ser Arg Pro Lys Ser Thr Val

145                 150                 155                 160

Gly Thr Pro Ala Tyr Ile Ala Pro Glu Val Leu Ser Arg Arg Glu Tyr

                165                 170                 175

Asp Gly Lys His Ala Asp Val Trp Ser Cys Gly Val Thr Leu Tyr Val

            180                 185                 190

Met Leu Val Gly Gly Tyr Pro Phe Glu Asp Pro Asp Asp Pro Arg Asn

        195                 200                 205

Phe Arg Lys Thr Ile Gln Arg Ile Met Ala Val Gln Tyr Lys Ile Pro

    210                 215                 220

Asp Tyr Val His Ile Ser Gln Glu Cys Arg His Leu Leu Ser Arg Ile

225                 230                 235                 240

Phe Val Thr Asn Ser Ala Lys Arg Ile Thr Leu Lys Glu Ile Lys Lys

                245                 250                 255

His Pro Trp Tyr Leu Lys Asn Leu Pro Lys Glu Leu Thr Glu Pro Ala

            260                 265                 270

Gln Ala Ala Tyr Tyr Lys Arg Glu Thr Pro Ser Phe Ser Leu Gln Ser

        275                 280                 285

Val Glu Asp Ile Met Lys Ile Val Gly Glu Ala Arg Asn Pro Ala Pro

    290                 295                 300

Ser Ser Asn Ala Val Lys Gly Phe Asp Asp Asp Glu Glu Asp Val Glu

305                 310                 315                 320

Asp Glu Val Glu Glu Glu Glu Glu Glu Glu Glu Glu Glu Glu Glu Glu

                325                 330                 335

Glu Glu Glu Glu Glu Asp Glu Tyr Glu Lys His Val Lys Glu Ala His

            340                 345                 350

Ser Cys Gln Glu Pro Pro Lys Ala

        355                 360

<210>11

<211>1062

<212>DNA

<213>拟南芥

<400>11

atggacaagt atgacgttgt caaggatctg ggagctggaa atttcggtgt ggctcgcctt      60

ctcaggcaca aggacaccaa agagcttgtt gccatgaaat acatcgagag aggtcgcaag     120

atagatgaga acgtggcgag agagattatt aatcacagat cacttaaaca tcctaatatc     180

atccggttca aggaggtgat cctgacacct actcatcttg ctattgtgat ggagtatgct     240

tctggaggag agctctttga tcgaatctgt actgccggta gatttagtga agctgaggct     300

aggtacttct ttcaacagct gatttgtggt gttgattact gccattcctt gcaaatatgt     360

catagagacc tgaagcttga gaacacactg ctcgatggga gccctgctcc gcttttgaaa     420

atctgtgatt ttggttactc taagtcatct atactacatt ctaggcctaa atcaactgtt     480

ggaactccag cttacatagc acctgaagtt ctttcacgga gagaatatga tggcaagcac     540

gcggatgtgt ggtcatgtgg agtaaccctt tatgtgatgc tggtgggagc ttacccgttt     600

gaggacccta atgatccaaa aaacttcagg aaaacaatcc agcgcataat ggctgtacaa     660

tacaagatcc cggactatgt tcacatatct caggaatgca aacatcttct ctctcgcata     720

ttcgtcacta actctgctaa gagaatcaca cttaaggaga tcaagaatca tccgtggtac     780

ttgaagaatt tgccaaagga gctgctagag tcggctcaag cggcgtatta caagagagac     840

acaagcttct ctcttcaaag cgtagaggac ataatgaaga tagttggaga agcaaggaat     900

ccagctccat caactagtgc tgtcaaaagc tcgggctcag gagctgatga agaagaggaa     960

gaggacgttg aagctgaagt ggaagaggaa gaagatgatg aagacgaata cgagaagcat    1020

gtcaaagagg cacagtcttg tcaagagtct gacaaagctt aa                       1062

<210>12

<211>353

<212>PRT

<213>拟南芥

<400>12

Met Asp Lys Tyr Asp Val Val Lys Asp Leu Gly Ala Gly Asn Phe Gly

1               5                   10                  15

Val Ala Arg Leu Leu Arg His Lys Asp Thr Lys Glu Leu Val Ala Met

            20                  25                  30

Lys Tyr Ile Glu Arg Gly Arg Lys Ile Asp Glu Asn Val Ala Arg Glu

        35                  40                  45

Ile Ile Asn His Arg Ser Leu Lys His Pro Asn Ile Ile Arg Phe Lys

    50                  55                  60

Glu Val Ile Leu Thr Pro Thr His Leu Ala Ile Val Met Glu Tyr Ala

65                  70                  75                  80

Ser Gly Gly Glu Leu Phe Asp Arg Ile Cys Thr Ala Gly Arg Phe Ser

                85                  90                  95

Glu Ala Glu Ala Arg Tyr Phe Phe Gln Gln Leu Ile Cys Gly Val Asp

            100                 105                 110

Tyr Cys His Ser Leu Gln Ile Cys His Arg Asp Leu Lys Leu Glu Asn

        115                 120                 125

Thr Leu Leu Asp Gly Ser Pro Ala Pro Leu Leu Lys Ile Cys Asp Phe

    130                 135                 140

Gly Tyr Ser Lys Ser Ser Ile Leu His Ser Arg Pro Lys Ser Thr Val

145                 150                 155                 160

Gly Thr Pro Ala Tyr Ile Ala Pro Glu Val Leu Ser Arg Arg Glu Tyr

                165                 170                 175

Asp Gly Lys His Ala Asp Val Trp Ser Cys Gly Val Thr Leu Tyr Val

            180                 185                 190

Met Leu Val Gly Ala Tyr Pro Phe Glu Asp Pro Asn Asp Pro Lys Asn

        195                 200                 205

Phe Arg Lys Thr Ile Gln Arg Ile Met Ala Val Gln Tyr Lys Ile Pro

    210                 215                 220

Asp Tyr Val His Ile Ser Gln Glu Cys Lys His Leu Leu Ser Arg Ile

225                 230                 235                 240

Phe Val Thr Asn Ser Ala Lys Arg Ile Thr Leu Lys Glu Ile Lys Asn

                245                 250                 255

His Pro Trp Tyr Leu Lys Asn Leu Pro Lys Glu Leu Leu Glu Ser Ala

            260                 265                 270

Gln Ala Ala Tyr Tyr Lys Arg Asp Thr Ser Phe Ser Leu Gln Ser Val

        275                 280                 285

Glu Asp Ile Met Lys Ile Val Gly Glu Ala Arg Asn Pro Ala Pro Ser

    290                 295                 300

Thr Ser Ala Val Lys Ser Ser Gly Ser Gly Ala Asp Glu Glu Glu Glu

305                 310                 315                 320

Glu Asp Val Glu Ala Glu Val Glu Glu Glu Glu Asp Asp Glu Asp Glu

                325                 330                 335

Tyr Glu Lys His Val Lys Glu Ala Gln Ser Cys Gln Glu Ser Asp Lys

            340                 345                 350

Ala

<210>13

<211>1089

<212>DNA

<2l3>拟南芥

<400>13

atggatcgac cagcagtgag tggtccaatg gatttgccga ttatgcacga tagtgatagg      60

tatgaactcg tcaaggatat tggctccggt aattttggag ttgcgagatt gatgagagac     120

aagcaaagta atgagcttgt tgctgttaaa tatatcgaga gaggtgagaa gatagatgaa     180

aatgtaaaaa gggagataat caaccacagg tccttaagac atcccaatat cgttagattc     240

aaagaggtta tattaacacc aacccattta gccattgtta tggaatatgc atctggagga     300

gaacttttcg agcgaatctg caatgcaggc cgcttcagcg aagacgaggc gaggtttttc     360

ttccagcaac tcatttcagg agttagttac tgtcatgcta tgcaagtatg tcaccgagac     420

ttaaagctcg agaatacgtt attagatggt agcccggccc ctcgtctaaa gatatgtgat     480

ttcggatatt ctaagtcatc agtgttacat tcgcaaccaa aatcaactgt tggaactcct     540

gcttacatcg ctcctgaggt tttactaaag aaagaatatg atggaaaggt tgcagatgtt     600

tggtcttgtg gggttactct gtatgtcatg ctggttggag catatccttt cgaagatccc     660

gaggaaccaa agaatttcag gaaaactata catagaatcc tgaatgttca gtatgctatt     720

ccggattatg ttcacatatc tcctgaatgt cgccatttga tctccagaat atttgttgct     780

gaccctgcaa agaggatatc aattcctgaa ataaggaacc atgaatggtt tctaaagaat     840

ctaccggcag atctaatgaa cgataacacg atgaccactc agtttgatga atcggatcaa     900

ccgggccaaa gcatagaaga aattatgcag atcattgcag aagcaactgt tcctcctgca     960

ggcactcaga atctgaacca ttacctcaca ggaagcttgg acatagatga cgatatggag    1020

gaagacttag agagcgacct tgatgatctt gacatcgaca gtagcggaga gattgtgtac    1080

gcaatgtga                                                            1089

<210>14

<211>362

<212>PRT

<213>拟南芥

<400>14

Met Asp Arg pro Ala Val Ser Gly Pro Met Asp Leu Pro Ile Met His

1               5                   10                  15

Asp Ser Asp Arg Tyr Glu Leu Val Lys Asp Ile Gly Ser Gly Asn Phe

            20                  25                  30

Gly Val Ala Arg Leu Met Arg Asp Lys Gln Ser Asn Glu Leu Val Ala

        35                  40                  45

Val Lys Tyr Ile Glu Arg Gly Glu Lys Ile Asp Glu Asn Val Lys Arg

    50                  55                  60

Glu Ile Ile Asn His Arg Ser Leu Arg His Pro Asn Ile Val Arg Phe

65                  70                  75                  80

Lys Glu Val Ile Leu Thr Pro Thr His Leu Ala Ile Val Met Glu Tyr

                85                  90                  95

Ala Ser Gly Gly Glu Leu Phe Glu Arg Ile Cys Asn Ala Gly Arg Phe

            100                 105                 110

Ser Glu Asp Glu Ala Arg Phe Phe Phe Gln Gln Leu Ile Ser Gly Val

        115                 120                 125

Ser Tyr Cys His Ala Met Gln Val Cys His Arg Asp Leu Lys Leu Glu

    130                 135                 140

Asn Thr Leu Leu Asp Gly Ser Pro Ala pro Arg Leu Lys Ile Cys Asp

145                 150                 155                 160

Phe Gly Tyr Ser Lys Ser Ser Val Leu His Ser Gln Pro Lys Ser Thr

                165                 170                 175

Val Gly Thr Pro Ala Tyr Ile Ala Pro Glu Val Leu Leu Lys Lys Glu

            180                 185                 190

Tyr Asp Gly Lys Val Ala Asp Val Trp Ser Cys Gly Val Thr Leu Tyr

        195                 200                 205

Val Met Leu Val Gly Ala Tyr Pro Phe Glu Asp Pro Glu Glu Pro Lys

    210                 215                 220

Asn Phe Arg Lys Thr Ile His Arg Ile Leu Asn Val Gln Tyr Ala Ile

225                 230                 235                 240

Pro Asp Tyr Val His Ile Ser Pro Glu Cys Arg His Leu Ile Ser Arg

                245                 250                 255

Ile Phe Val Ala Asp Pro Ala Lys Arg Ile Ser Ile Pro Glu Ile Arg

            260                 265                 270

Asn His Glu Trp Phe Leu Lys Asn Leu Pro Ala Asp Leu Met Asn Asp

        275                 280                 285

Asn Thr Met Thr Thr Gln Phe Asp Glu Ser Asp Gln Pro Gly Gln Ser

    290                 295                 300

Ile Glu Glu Ile Met Gln Ile Ile Ala Glu Ala Thr Val Pro Pro Ala

305                 310                 315                 320

Gly Thr Gln Asn Leu Asn His Tyr Leu Thr Gly Ser Leu Asp Ile Asp

                325                 330                 335

Asp Asp Met Glu Glu Asp Leu Glu Ser Asp Leu Asp Asp Leu Asp Ile

            340                 345                 350

Asp Ser Ser Gly Glu Ile Val Tyr Ala Met

        355                 360

<210>15

<211>1020

<212>DNA

<213>拟南芥

<400>15

atggagaagt atgagatggt gaaggattta ggatttggta atttcggatt ggctcggctt      60

atgcgtaata agcaaacaaa cgagcttgtg gctgtcaaat tcatcgatcg aggctacaag     120

atagatgaga acgttgcaag agaaataatc aatcatagag ctctcaacca tccgaatatt     180

gttcggttta aagaggttgt tttaactccg acacatcttg gaatagtaat ggagtatgca     240

gctggaggag aactgttcga gcggatatct agcgtgggtc gatttagcga agctgaggca     300

agatatttct ttcaacaact catttgtgga gtccattact tacatgcatt gcaaatatgc     360

catagagatc tgaaattaga aaacacattg cttgatggaa gcccagcacc acgtttaaaa     420

atttgtgatt ttggctactc aaagtcttct gttctgcact ccaacccaaa atcaacggtg     480

ggaactccgg catatatagc accggaagtt ttttgtcgat cggaatacga cggaaagtca     540

gttgatgtgt ggtcttgtgg agtggccctc tatgttatgt tggtaggagc ttatccattc     600

gaagacccta aagaccctcg caatttccga aaaactgttc agaaaataat ggccgtaaac     660

tacaagattc caggatatgt tcacatatcc gaagactgca gaaagttact atctcgtata     720

tttgttgcca atccgttaca tagaagtacg cttaaagaga ttaagagtca tgcatggttc     780

ctaaagaatt tgccaagaga attaaaggag ccagcacaag caatctatta ccaaaggaat     840

gttaatctta ttaatttttc tcctcaaaga gtagaggaga ttatgaagat agttggtgag     900

gcaagaacca ttccaaacct ttctcgcccg gtcgaatcgc ttggatcaga taaaaaagat     960

gatgatgaag aagaatattt ggatgctaat gatgaagaat ggtatgatga ttacgcatag    1020

<210>16

<211>339

<212>PRT

<213>拟南芥

<400>16

Met Glu Lys Tyr Glu Met Val Lys Asp Leu Gly Phe Gly Asn Phe Gly

1               5                   10                  15

Leu Ala Arg Leu Met Arg Asn Lys Gln Thr Asn Glu Leu Val Ala Val

            20                  25                  30

Lys Phe Ile Asp Arg Gly Tyr Lys Ile Asp Glu Asn Val Ala Arg Glu

        35                  40                  45

Ile Ile Asn His Arg Ala Leu Asn His Pro Asn Ile Val Arg Phe Lys

    50                  55                  60

Glu Val Val Leu Thr Pro Thr His Leu Gly Ile Val Met Glu Tyr Ala

65                  70                  75                  80

Ala Gly Gly Glu Leu Phe Glu Arg Ile Ser Ser Val Gly Arg Phe Ser

                85                  90                  95

Glu Ala Glu Ala Arg Tyr Phe Phe Gln Gln Leu Ile Cys Gly Val His

            100                 105                 110

Tyr Leu His Ala Leu Gln Ile Cys His Arg Asp Leu Lys Leu Glu Asn

        115                 120                 125

Thr Leu Leu Asp Gly Ser pro Ala Pro Arg Leu Lys Ile Cys Asp Phe

    130                 135                 140

Gly Tyr Ser Lys Ser Ser Val Leu His Ser Asn Pro Lys Ser Thr Val

145                 150                 155                 160

Gly Thr Pro Ala Tyr Ile Ala Pro Glu Val Phe Cys Arg Ser Glu Tyr

                165                 170                 175

Asp Gly Lys Ser Val Asp Val Trp Ser Cys Gly Val Ala Leu Tyr Val

            180                 185                 190

Met Leu Val Gly Ala Tyr Pro Phe Glu Asp Pro Lys Asp Pro Arg Asn

        195                 200                 205

phe Arg Lys Thr Val Gln Lys Ile Met Ala Val Asn Tyr Lys Ile Pro

    210                 215                 220

Gly Tyr Val His Ile Ser Glu Asp Cys Arg Lys Leu Leu Ser Arg Ile

225                 230                 235                 240

Phe Val Ala Asn Pro Leu His Arg Ser Thr Leu Lys Glu Ile Lys Ser

                245                 250                 255

His Ala Trp Phe Leu Lys Asn Leu Pro Arg Glu Leu Lys Glu Pro Ala

            260                 265                 270

Gln Ala Ile Tyr Tyr Gln Arg Asn Val Asn Leu Ile Asn Phe Ser Pro

        275                 280                 285

Gln Arg Val Glu Glu Ile Met Lys Ile Val Gly Glu Ala Arg Thr Ile

    290                 295                 300

Pro Asn Leu Ser Arg Pro Val Glu Ser Leu Gly Ser Asp Lys Lys Asp

305                 310                 315                 320

Asp Asp Glu Glu Glu Tyr Leu Asp Ala Asn Asp Glu Glu Trp Tyr Asp

                325                 330                 335

Asp Tyr Ala

<210>17

<211>1086

<212>DNA

<213>拟南芥

<400>17

atggatcgag ctccggtgac cacaggaccg ttggatatgc cgattatgca cgacagtgat      60

cgatatgact tcgttaagga tattggttct ggtaatttcg gtgttgctcg tcttatgaga     120

gataaactca ctaaagagct tgttgctgtc aagtacatcg agagaggaga caagattgat     180

gaaaatgttc aaagggagat cattaaccac aggtcactaa ggcatcctaa tattgtcaga     240

tttaaagagg tcattttgac gccgactcat ctggctatca taatggaata tgcttctggc     300

ggtgaacttt acgagcggat ttgcaatgca ggacggttta gtgaagatga ggctcggttc     360

ttctttcagc agcttctatc tggagtcagt tattgtcatt cgatgcaaat ttgccatcgt     420

gacctgaagc tagagaatac attgttggat ggaagtcctg ctcctcgatt aaaaatttgt     480

gattttggat attcaaagtc ttctgttctt cattcacaac caaagtcaac tgttggtact     540

cctgcataca tcgctccaga ggtactgctt cgtcaggaat atgatggcaa gattgcagat     600

gtatggtcat gtggtgtgac cttatacgtc atgttggttg gagcgtatcc gttcgaagat     660

ccagaagagc caagagacta tcggaaaaca atacagagaa tccttagcgt taaatactca     720

atccctgatg acatacggat atcacctgaa tgctgtcatc ttatttcaag aatcttcgtg     780

gctgatcccg ctaccagaat aagcatacca gagatcaaaa cccatagttg gttcttgaag     840

aatctccctg ctgatctaat gaacgagagc aacacaggaa gccagttcca ggagcctgaa     900

caaccaatgc aaagccttga cacaatcatg caaatcatct ctgaagccac aattcccgct     960

gttcgaaacc gttgcctaga cgatttcatg actgacaatc ttgatcttga cgatgacatg    1020

gatgactttg actctgaatc tgaaatcgac attgacagta gcggagagat agtttacgct    1080

ctctaa                                                               1086

<210>18

<211>361

<212>PRT

<213>拟南芥

<400>18

Met Asp Arg Ala Pro Val Thr Thr Gly Pro Leu Asp Met Pro Ile Met

1               5                   10                  15

His Asp Ser Asp Arg Tyr Asp Phe Val Lys Asp Ile Gly Ser Gly Asn

            20                  25                  30

Phe Gly Val Ala Arg Leu Met Arg Asp Lys Leu Thr Lys Glu Leu Val

        35                  40                  45

Ala Val Lys Tyr Ile Glu Arg Gly Asp Lys Ile Asp Glu Asn Val Gln

    50                  55                  60

Arg Glu Ile Ile Asn His Arg Ser Leu Arg His Pro Asn Ile Val Arg

65                  70                  75                  80

Phe Lys Glu Val Ile Leu Thr Pro Thr His Leu Ala Ile Ile Met Glu

                85                  90                  95

Tyr Ala Ser Gly Gly Glu Leu Tyr Glu Arg Ile Cys Asn Ala Gly Arg

            100                 105                 110

Phe Ser Glu Asp Glu Ala Arg Phe Phe Phe Gln Gln Leu Leu Ser Gly

        115                 120                 125

Val Ser Tyr Cys His Ser Met Gln Ile Cys His Arg Asp Leu Lys Leu

    130                 135                 140

Glu Asn Thr Leu Leu Asp Gly Ser Pro Ala Pro Arg Leu Lys Ile Cys

145                 150                 155                 160

Asp Phe Gly Tyr Ser Lys Ser Ser Val Leu His Ser Gln Pro Lys Ser

                165                 170                 175

Thr Val Gly Thr Pro Ala Tyr Ile Ala pro Glu Val Leu Leu Arg Gln

            180                 185                 190

Glu Tyr Asp Gly Lys Ile Ala Asp Val Trp Ser Cys Gly Val Thr Leu

        195                 200                 205

Tyr Val Met Leu Val Gly Ala Tyr Pro Phe Glu Asp Pro Glu Glu Pro

    210                 215                 220

Arg Asp Tyr Arg Lys Thr Ile Gln Arg Ile Leu Ser Val Lys Tyr Ser

225                 230                 235                 240

Ile Pro Asp Asp Ile Arg Ile Ser Pro Glu Cys Cys His Leu Ile Ser

                245                 250                 255

Arg Ile Phe Val Ala Asp Pro Ala Thr Arg Ile Ser Ile Pro Glu Ile

            260                 265                 270

Lys Thr His Ser Trp Phe Leu Lys Asn Leu Pro Ala Asp Leu Met Asn

        275                 280                 285

Glu Ser Asn Thr Gly Ser Gln Phe Gln Glu Pro Glu Gln Pro Met Gln

    290                 295                 300

Ser Leu Asp Thr Ile Met Gln Ile Ile Ser Glu Ala Thr Ile Pro Ala

305                 310                 315                 320

Val Arg Asn Arg Cys Leu Asp Asp Phe Met Thr Asp Asn Leu Asp Leu

                325                 330                 335

Asp Asp Asp Met Asp Asp Phe Asp Ser Glu Ser Glu Ile Asp Ile Asp

            340                 345                 350

Ser Ser Gly Glu Ile Val Tyr Ala Leu

        355                 360

<210>19

<211>1032

<212>DNA

<213>拟南芥

<400>19

atggagaggt acgaaatagt geaggatatt gggtctggta acttcggagt agcaaagctt      60

gttcgtgaca aattttccaa agagcttttc gctgttaagt tcatcgagcg aggccaaaag     120

attgatgaac atgtacaaag agaaatcatg aaccataggt cgctgatcca tcccaatata     180

ataagattca aggaggtttt attgacggca acacatttgg cgttagtaat ggaatacgcc     240

gccggaggag aactgttcgg aagaatctgc agcgccggaa gattcagtga agacgaggca     300

aggtttttct ttcagcagct tatatcagga gttaattact gtcecagtct tcaaatatgc     360

catagagatt taaagctaga gaacacgtta cttgatggaa gcgaagcgcc acgtgtaaag     420

atttgcgact ttggatattc aaaatcagga gttcttcatt cgcaaccaaa gacaacagta     480

ggaacacctg cttacattgc acctgaagtg ctctccacga aagagtatga cggcaaaatc     540

gctgatgttt ggtcttgtgg agtcactttg tatgttatgc ttgttggtgc ttatcctttt     600

gaagatcctt ctgatcctaa agattttcgg aagacgatcg gtcggattct caaegctcag     660

tatgctattc ctgattatgt tcgagtttcg gatgaetgca gacatcttct ctctcggata     720

ttcgttgcca accctgaaea gagaataaca atagaggaga taaagaatca ttcttggttt     780

ctcaagaect tgccggtaga gatgtatgaa ggatcattga tgatgaatgg tccatcgact     840

cagacagtag aagagatagt gtggatcatt gaagaagctc ggaaacctat caccgtagct     900

actggactcg caggtgctgg tggctctggt ggaagcagta atggtgccat tggaagtagc     960

agtatggatc tcgatgactt ggacacagat ttcgacgaca tcgataccgc tgatctcctt    1020

tcccctttgt ga                                                        1032

<210>20

<211>343

<212>PRT

<213>拟南芥

<400>20

Met Glu Arg Tyr Glu Ile Val Lys Asp Ile Gly Ser Gly Asn Phe Gly

1               5                   10                  15

Val Ala Lys Leu Val Arg Asp Lys Phe Ser Lys Glu Leu Phe Ala Val

            20                  25                  30

Lys Phe Ile Glu Arg Gly Gln Lys Ile Asp Glu His Val Gln Arg Glu

        35                  40                  45

Ile Met Asn His Arg Ser Leu Ile His Pro Asn Ile Ile Arg Phe Lys

    50                  55                  60

Glu Val Leu Leu Thr Ala Thr His Leu Ala Leu Val Met Glu Tyr Ala

65                  70                  75                  80

Ala Gly Gly Glu Leu Phe Gly Arg Ile Cys Ser Ala Gly Arg Phe Ser

                85                  90                  95

Glu Asp Glu Ala Arg Phe Phe Phe Gln Gln Leu Ile Ser Gly Val Asn

            100                 105                 110

Tyr Cys His Ser Leu Gln Ile Cys His Arg Asp Leu Lys Leu Glu Asn

        115                 120                 125

Thr Leu Leu Asp Gly Ser Glu Ala Pro Arg Val Lys Ile Cys Asp Phe

    130                 135                 140

Gly Tyr Ser Lys Ser Gly Val Leu His Ser Gln Pro Lys Thr Thr Val

145                 150                 155                 160

Gly Thr Pro Ala Tyr Ile Ala Pro Glu Val Leu Ser Thr Lys Glu Tyr

                165                 170                 175

Asp Gly Lys Ile Ala Asp Val Trp Ser Cys Gly Val Thr Leu Tyr Val

            180                 185                 190

Met Leu Val Gly Ala Tyr Pro Phe Glu Asp Pro Ser Asp Pro Lys Asp

        195                 200                 205

Phe Arg Lys Thr Ile Gly Arg Ile Leu Lys Ala Gln Tyr Ala Ile Pro

    210                 215                 220

Asp Tyr Val Arg Val Ser Asp Glu Cys Arg His Leu Leu Ser Arg Ile

225                 230                 235                 240

Phe Val Ala Asn Pro Glu Lys Arg Ile Thr Ile Glu Glu Ile Lys Asn

                245                 250                 255

His Ser Trp Phe Leu Lys Asn Leu Pro Val Glu Met Tyr Glu Gly Ser

            260                 265                 270

Leu Met Met Asn Gly Pro Ser Thr Gln Thr Val Glu Glu Ile Val Trp

        275                 280                 285

Ile Ile Glu Glu Ala Arg Lys Pro Ile Thr Val Ala Thr Gly Leu Ala

    290                 295                 300

Gly Ala Gly Gly Ser Gly Gly Ser Ser Asn Gly Ala Ile Gly Ser Ser

305                 310                 315                 320

Ser Met Asp Leu Asp Asp Leu Asp Thr Asp Phe Asp Asp Ile Asp Thr

                325                 330                 335

Ala Asp Leu Leu Ser Pro Leu

            340

<210>21

<211>1089

<212>DNA

<213>拟南芥

<400>21

atggatccgg cgactaattc accgattatg ccgattgatt taccgattat gcacgacagt      60

gatcgttacg acttcgttaa agatattggc tctggtaatt tcggcgttgc tcgtctcatg     120

accgatagag tcaccaagga gcttgttgct gttaaataca tcgagagagg agaaaagatt     180

gatgaaaatg ttcagaggga gattatcaat catagatcat tgagacatcc taatattgtt     240

aggtttaaag aggtgatttt gacgccttcc catttggcta ttgttatgga atatgctgct     300

ggtggagaac tttatgagcg gatttgtaat gccggacggt ttagtgaaga tgaggctcgg     360

ttcttctttc agcagcttat atctggagtt agctattgtc atgcaatgca aatatgccat     420

cgggatctga agctggaaaa tacattgtta gatggaagtc cggcacctcg tttgaaaata     480

tgtgattttg gttattccaa gtcttctgtt cttcattccc aaccaaagtc aactgttggt     540

actcctgcat acattgcacc agagattctt cttcgacagg aatatgatgg caagcttgca     600

gatgtatggt cttgcggtgt aacattatat gtaatgttgg ttggagctta tccattcgag     660

gatccacagg agccacgaga ttatcgaaag acaatacaaa gaatccttag tgtcacatac     720

tcgatcccag aggacttaca cctctcacca gaatgtcgcc atctaatatc gaggatcttc     780

gtggctgatc cggcaacaag aatcactatt ccggagatca catccgataa atggttcttg     840

aagaatctac caggtgattt gatggatgag aaccgaatgg gaagtcagtt tcaagagcct     900

gagcagccaa tgcagagcct tgacacgatt atgcagataa tatcggaggc tacgattccg     960

actgttcgta atcgttgcct cgatgatttc atggcggata atcttgatct agacgatgac    1020

atggatgact ttgattccga atctgagatt gatgttgaca gtagtggaga gatagtttat    1080

gctctctga                                                            1089

<210>22

<211>362

<212>PRT

<213>拟南芥

<400>22

Met Asp Pro Ala Thr Asn Ser Pro Ile Met Pro Ile Asp Leu Pro Ile

1               5                   10                  15

Met His Asp Ser Asp Arg Tyr Asp Phe Val Lys Asp Ile Gly Ser Gly

            20                  25                  30

Asn Phe Gly Val Ala Arg Leu Met Thr Asp Arg Val Thr Lys Glu Leu

        35                  40                  45

Val Ala Val Lys Tyr Ile Glu Arg Gly Glu Lys Ile Asp Glu Asn Val

    50                  55                  60

Gln Arg Glu Ile Ile Asn His Arg Ser Leu Arg His Pro Asn Ile Val

65                  70                  75                  80

Arg Phe Lys Glu Val Ile Leu Thr Pro Ser His Leu Ala Ile Val Met

                85                  90                  95

Glu Tyr Ala Ala Gly Gly Glu Leu Tyr Glu Arg Ile Cys Asn Ala Gly

            100                 105                 110

Arg Phe Ser Glu Asp Glu Ala Arg Phe Phe Phe Gln Gln Leu Ile Ser

        115                 120                 125

Gly Val Ser Tyr Cys His Ala Met Gln Ile Cys His Arg Asp Leu Lys

    130                 135                 140

Leu Glu Asn Thr Leu Leu Asp Gly Ser Pro Ala pro Arg Leu Lys Ile

145                 150                 155                 160

Cys Asp Phe Gly Tyr Ser Lys Ser Ser Val Leu His Ser Gln Pro Lys

                165                 170                 175

Ser Thr Val Gly Thr Pro Ala Tyr Ile Ala Pro Glu Ile Leu Leu Arg

            180                 185                 190

Gln Glu Tyr Asp Gly Lys Leu Ala Asp Val Trp Ser Cys Gly Val Thr

        195                 200                 205

Leu Tyr Val Met Leu Val Gly Ala Tyr Pro Phe Glu Asp Pro Gln Glu

    210                 215                 220

Pro Arg Asp Tyr Arg Lys Thr Ile Gln Arg Ile Leu Ser Val Thr Tyr

225                 230                 235                 240

Ser Ile Pro Glu Asp Leu His Leu Ser Pro Glu Cys Arg His Leu Ile

                245                 250                 255

Ser Arg Ile Phe Val Ala Asp Pro Ala Thr Arg Ile Thr Ile Pro Glu

            260                 265                 270

Ile Thr Ser Asp Lys Trp Phe Leu Lys Asn Leu Pro Gly Asp Leu Met

        275                 280                 285

Asp Glu Asn Arg Met Gly Ser Gln Phe Gln Glu Pro Glu Gln Pro Met

    290                 295                 300

Gln Ser Leu Asp Thr Ile Met Gln Ile Ile Ser Glu Ala Thr Ile Pro

305                 310                 315                 320

Thr Val Arg Asn Arg Cys Leu Asp Asp Phe Met Ala Asp Asn Leu Asp

                325                 330                 335

Leu Asp Asp Asp Met Asp Asp Phe Asp Ser Glu Ser Glu Ile Asp Val

            340                 345                 350

Asp Ser Ser Gly Glu Ile Val Tyr Ala Leu

        355                 360

<210>23

<211>1053

<212>DNA

<213>拟南芥

<400>23

atggagagat acgacatctt aagagatctt ggttccggta actttggagt tgctaagctt      60

gtcagagaaa aagccaacgg agagttttac gccgttaaat acatcgaaag aggccttaag     120

attgatgaac atgttcagag agagatcata aaccacagag aettgaagca tcctaatatc     180

atcagattta aagaggtttt tgtaacacca acacatcttg ccatagtaat ggagtatgca     240

gctggtggtg aactttttga aagaatttgc aatgccggta gattcagcga agacgaagga     300

agatattatt tcaaacaact tatctcggga gttagctatt gtcacgctat gcaaatatgt     360

cacagagacc ttaagctcga gaatacactc ttagacggga gcccgtcgtc gcatcttaaa     420

atatgtgatt ttggatactc caagtcatca gttttacact ctcaaccaaa atccaccgtg     480

ggaactccgg cttacgttgc tccggaagtc ttgtcccgga aagaatataa tggaaagatt     540

gcagatgtgt ggtcgtgtgg ggtgacctta tatgtaatgt tagttggtgc ttatcccttt     600

gaagatcccg aagatccacg gaacattaga aacaccattc agaggatatt aagtgtacac     660

tacaccatac cggattacgt caggatttcc tccgagtgca agcatctctt gtctcgtatc     720

tttgtggctg aecctgataa gagaataact gtaccggaaa tcgaaaagca cccgtggttc     780

ttgaagggcc ctttggttgt gccgccggag gaagagaaat gcgataatgg agttgaagaa     840

gaagaagaag aagaagagaa gtgtcgacag agtgttgaag agatagtgaa gataatagag     900

gaagcaagaa agggagtaaa tggtacggat aataatggtg gattagggtt aatagatggg     960

agcattgatc ttgatgatat tgatgatgct gatatttatg atgatgttga tgatgatgag    1020

gagagaaatg gtgatttcgt atgtgctcta tga                                 1053

<210>24

<211>350

<212>PRT

<213>拟南芥

<400>24

Met Glu Arg Tyr Asp Ile Leu Arg Asp Leu Gly Ser Gly Asn Phe Gly

1               5                   10                  15

Val Ala Lys Leu Val Arg Glu Lys Ala Asn Gly Glu Phe Tyr Ala Val

            20                  25                  30

Lys Tyr Ile Glu Arg Gly Leu Lys Ile Asp Glu His Val Gln Arg Glu

        35                  40                  45

Ile Ile Asn His Arg Asp Leu Lys His Pro Asn Ile Ile Arg Phe Lys

    50                  55                  60

Glu Val Phe Val Thr pro Thr His Leu Ala Ile Val Met Glu Tyr Ala

65                  70                  75                  80

Ala Gly Gly Glu Leu Phe Glu Arg Ile Cys Asn Ala Gly Arg Phe Ser

                85                  90                  95

Glu Asp Glu Gly Arg Tyr Tyr Phe Lys Gln Leu Ile Ser Gly Val Ser

            100                 105                 110

Tyr Cys His Ala Met Gln Ile Cys His Arg Asp Leu Lys Leu Glu Asn

        115                 120                 125

Thr Leu Leu Asp Gly Ser Pro Ser Ser His Leu Lys Ile Cys Asp Phe

    130                 135                 140

Gly Tyr Ser Lys Ser Ser Val Leu His Ser Gln Pro Lys Ser Thr Val

145                 150                 155                 160

Gly Thr Pro Ala Tyr Val Ala Pro Glu Val Leu Ser Arg Lys Glu Tyr

                165                 170                 175

Asn Gly Lys Ile Ala Asp Val Trp Ser Cys Gly Val Thr Leu Tyr Val

            180                 185                 190

Met Leu Val Gly Ala Tyr Pro Phe Glu Asp Pro Glu Asp Pro Arg Asn

        195                 200                 205

Ile Arg Asn Thr Ile Gln Arg Ile Leu Ser Val His Tyr Thr Ile Pro

    210                 215                 220

Asp Tyr Val Arg Ile Ser Ser Glu Cys Lys His Leu Leu Ser Arg Ile

225                 230                 235                 240

Phe Val Ala Asp Pro Asp Lys Arg Ile Thr Val Pro Glu Ile Glu Lys

                245                 250                 255

His Pro Trp Phe Leu Lys Gly Pro Leu Val Val Pro Pro Glu Glu Glu

            260                 265                 270

Lys Cys Asp Asn Gly Val Glu Glu Glu Glu Glu Glu Glu Glu Lys Cys

        275                 280                 285

Arg Gln Ser Val Glu Glu Ile Val Lys Ile Ile Glu Glu Ala Arg Lys

    290                 295                 300

Gly Val Asn Gly Thr Asp Asn Asn Gly Gly Leu Gly Leu Ile Asp Gly

305                 310                 315                 320

Ser Ile Asp Leu Asp Asp Ile Asp Asp Ala Asp Ile Tyr Asp Asp Val

                325                 330                 335

Asp Asp Asp Glu Glu Arg Asn Gly Asp Phe Val Cys Ala Leu

            340                 345                 350

<210>25

<211>1029

<212>DNA

<213>稻(Oryza sativa)

<400>25

atggagcggt acgaggtgat gagggacatc gggtccggga acttcggggt ggccaagctc      60

gtccgcgacg tcgccaccaa ccacctcttc gccgtcaagt tcatcgagag gggactcaag     120

attgatgaac atgttcaaag ggagattatg aaccaccgat cactgaagca tccaaacata     180

atccggttca aggaggtcgt gctaactccc acacatttgg caatagttat ggaatatgct     240

gctggtggtg agctatttga aaggatttgc aacgcaggga gattcagtga ggatgaggca     300

aggttcttct tccaacagct gatttctgga gtgagctatt gtcattctat gcaagtatgc     360

catagagatt tgaaactcga aaatactctc ttggatggca gtgtcacacc tcggcttaag     420

atttgtgatt ttggttactc caagtcttct gtcctgcact ctcaaccgaa atcaactgtt     480

ggcacaccgg cttacattgc tccagaggtc ctctctagaa aggaatacga tggaaaggta     540

gctgatgttt ggtcatgtgg ggtaacactc tatgtgatgc ttgttggtgc gtatcctttt     600

gaggaccctg atgacccaag gaacttccgc aagacgatca ctaggatact cagtgtacag     660

tattcaattc cagactacgt tcgagtttca gcggactgca gacatctcct gtcccggatt     720

ttcgttggaa atcctgagca gaggataact atcccagaga tcaagaacca cccatggttc     780

ctgaagaacc tgcccatcga gatgaccgac gagtaccaga ggagcatgca gctggcggac     840

atgaacacgc cgtcgcagag cctggaggag gtcatggcga tcattcagga ggcccggaaa     900

ccgggcgacg ccatgaagct cgccggcgcc gggcaggtcg cctgcctggg gagcatggat     960

ctcgacgaca tcgacgatat cgacgacatt gacatcgaga acagcgggga cttcgtgtgc    1020

gccttgtga                                                            1029

<210>26

<211>342

<212>PRT

<213>稻

<400>26

Met Glu Arg Tyr Glu Val Met Arg Asp Ile Gly Ser Gly Asn Phe Gly

1               5                   10                  15

Val Ala Lys Leu Val Arg Asp Val Ala Thr Asn His Leu Phe Ala Val

            20                  25                  30

Lys Phe Ile Glu Arg Gly Leu Lys Ile Asp Glu His Val Gln Arg Glu

        35                  40                  45

Ile Met Asn His Arg Ser Leu Lys His Pro Asn Ile Ile Arg Phe Lys

    50                  55                  60

Glu Val Val Leu Thr Pro Thr His Leu Ala Ile Val Met Glu Tyr Ala

65                  70                  75                  80

Ala Gly Gly Glu Leu Phe Glu Arg Ile Cys Asn Ala Gly Arg Phe Ser

                85                  90                  95

Glu Asp Glu Ala Arg Phe Phe Phe Gln Gln Leu Ile Ser Gly Val Ser

            100                 105                 110

Tyr Cys His Ser Met Gln Val Cys His Arg Asp Leu Lys Leu Glu Asn

        115                 120                 125

Thr Leu Leu Asp Gly Ser Val Thr Pro Arg Leu Lys Ile Cys Asp Phe

    130                 135                 140

Gly Tyr Ser Lys Ser Ser Val Leu His Ser Gln Pro Lys Ser Thr Val

145                 150                 155                 160

Gly Thr Pro Ala Tyr Ile Ala Pro Glu Val Leu Ser Arg Lys Glu Tyr

                165                 170                 175

Asp Gly Lys Val Ala Asp Val Trp Ser Cys Gly Val Thr Leu Tyr Val

            180                 185                 190

Met Leu Val Gly Ala Tyr Pro Phe Glu Asp Pro Asp Asp Pro Arg Asn

        195                 200                 205

Phe Arg Lys Thr Ile Thr Arg Ile Leu Ser Val Gln Tyr Ser Ile Pro

    210                 215                 220

Asp Tyr Val Arg Val Ser Ala Asp Cys Arg His Leu Leu Ser Arg Ile

225                 230                 235                 240

Phe Val Gly Asn Pro Glu Gln Arg Ile Thr Ile Pro Glu Ile Lys Asn

                245                 250                 255

His Pro Trp Phe Leu Lys Asn Leu Pro Ile Glu Met Thr Asp Glu Tyr

            260                 265                 270

Gln Arg Ser Met Gln Leu Ala Asp Met Asn Thr Pro Ser Gln Ser Leu

        275                 280                 285

Glu Glu Val Met Ala Ile Ile Gln Glu Ala Arg Lys Pro Gly Asp Ala

    290                 295                 300

Met Lys Leu Ala Gly Ala Gly Gln Val Ala Cys Leu Gly Ser Met Asp

305                 310                 315                 320

Leu Asp Asp Ile Asp Asp Ile Asp Asp Ile Asp Ile Glu Asn Ser Gly

                325                 330                 335

Asp Phe Val Cys Ala Leu

            340

<210>27

<211>1020

<212>DNA

<213>稻

<400>27

atggagaggt acgaggtgat caaggacata gggtcgggga acttcggcgt ggccaagctt      60

gtccgggatg tgcggaccaa ggagctgttt gccgtcaagt tcatcgagag ggggcagaag     120

atcgacgaga atgtccaaag ggagattatg aaccacaggt cactgaggca tccgaacatt     180

gttagattca aggaggttgt gctaactccc acacatttgg ccatagttat ggaatatgct     240

gctggaggtg agctattcga aaggatttgc agtgctggga ggtttagcga ggatgaggca     300

aggttcttct tccagcagtt gatttcagga gttagctact gtcattccat gcaaatatgt     360

catagagatt tgaaactaga aaatactctc ttggatggga gcatagcacc tcggctcaag     420

atatgtgatt ttggttactc aaagtcctct ttgttgcact ctcaaccgaa atctactgtc     480

ggtactccag cttatatcgc tcctgaggtc cttgctagaa aagaatatga tggaaaggtt     540

gctgacgttt ggtcatgtgg agtaactcta tatgtgatgc ttgttggtgc gtaccccttt     600

gaggaccctg acgaaccaag aaacttccgc aagacaatta ctcggatact aagcgtacaa     660

tacatggttc ctgattatgt tcgagtttcg atggaatgca gacatcttct gtcccggatt     720

ttcgtggcaa acccagagca acgaattacc attcctgaga tcaagaacca cccatggttc     780

ctcaagaacc tgccgatcga gatgactgac gagtaccaga tgagcgtcca gatgaacgac     840

atcaaoaccc cgtcacaggg cctggaggag atcatggcca tcatacagga ggcgcggaag     900

ccgggtgatg gctccaaatt ctccgggcag atcccgggcc tagggagcat ggagctcgac     960

gacgttgaca ccgacgacat cgacgtcgag gacagcggcg acttcgtgtg cgcattgtga    1020

<210>28

<211>339

<212>PRT

<213>稻

<400>28

Met Glu Arg Tyr Glu Val Ile Lys Asp Ile Gly Ser Gly Asn Phe Gly

1               5                   10                  15

Val Ala Lys Leu Val Arg Asp Val Arg Thr Lys Glu Leu Phe Ala Val

            20                  25                  30

Lys Phe Ile Glu Arg Gly Gln Lys Ile Asp Glu Asn Val Gln Arg Glu

        35                  40                  45

Ile Met Asn His Arg Ser Leu Arg His Pro Asn Ile Val Arg Phe Lys

    50                  55                  60

Glu Val Val Leu Thr Pro Thr His Leu Ala Ile Val Met Glu Tyr Ala

65                  70                  75                  80

Ala Gly Gly Glu Leu Phe Glu Arg Ile Cys Ser Ala Gly Arg Phe Ser

                85                  90                  95

Glu Asp Glu Ala Arg Phe Phe Phe Gln Gln Leu Ile Ser Gly Val Ser

            100                 105                 110

Tyr Cys His Ser Met Gln Ile Cys His Arg Asp Leu Lys Leu Glu Asn

        115                 120                 125

Thr Leu Leu Asp Gly Ser Ile Ala Pro Arg Leu Lys Ile Cys Asp Phe

    130                 135                 140

Gly Tyr Ser Lys Ser Ser Leu Leu His Ser Gln pro Lys Ser Thr Val

145                 150                 155                 160

Gly Thr Pro Ala Tyr Ile Ala Pro Glu Val Leu Ala Arg Lys Glu Tyr

                165                 170                 175

Asp Gly Lys Val Ala Asp Val Trp Ser Cys Gly Val Thr Leu Tyr Val

            180                 185                 190

Met Leu Val Gly Ala Tyr Pro Phe Glu Asp Pro Asp Glu Pro Arg Asn

        195                 200                 205

Phe Arg Lys Thr Ile Thr Arg Ile Leu Ser Val Gln Tyr Met Val Pro

    210                 215                 220

Asp Tyr Val Arg Val Ser Met Glu Cys Arg His Leu Leu Ser Arg Ile

225                 230                 235                 240

phe Val Ala Asn Pro Glu Gln Arg Ile Thr Ile Pro Glu Ile Lys Asn

                245                 250                 255

His Pro Trp Phe Leu Lys Asn Leu Pro Ile Glu Met Thr Asp Glu Tyr

            260                 265                 270

Gln Met Ser Val Gln Met Asn Asp Ile Asn Thr Pro Ser Gln Gly Leu

        275                 280                 285

Glu Glu Ile Met Ala Ile Ile Gln Glu Ala Arg Lys Pro Gly Asp Gly

    290                 295                 300

Ser Lys Phe Ser Gly Gln Ile Pro Gly Leu Gly Ser Met Glu Leu Asp

305                 310                 315                 320

Asp Val Asp Thr Asp Asp Ile Asp Val Glu Asp Ser Gly Asp Phe Val

                325                 330                 335

Cys Ala Leu

<210>29

<211>1005

<212>DNA

<213>稻

<400>29

atggaggaga ggtacgaggc gttgaaggag ctcggggccg gcaacttcgg ggtggccagg      60

ctggtcaggg acaagaggag caaggagctc gtcgccgtca agtacatcga gaggggcaag     120

aagattgatg aaaatgtgca gagggagatc atcaatcata ggtcgctccg gcatcccaat     180

atcattcggt ttaaggaggt ttgtttgaca cccacacacc tagccattgt catggagtat     240

gctgctggtg gagaactctt tgaacaaatc tgcaccgcag ggcgattcag cgaagacgag     300

gcaaggtact tcttccagca gctaatatca ggtgtcagct actgtcattc tctggaaatt     360

tgccaccgtg atcttaaact tgagaacacc ctcctggatg gaagcccaac acctcgtgtg     420

aagatttgtg actttggtta ctcaaagtct gctttgctgc attcgaagcc gaagtctaca     480

gttggtactc cagcatacat agcgccagaa gttctttcaa gagaagaata tgatggcaag     540

gtagcagacg tttggtcctg tggtgtgaca ctgtacgtga tgcttgtcgg ttcatacccg     600

tttgaagatc caggtgatcc gaggaatttc cgcaaaacga tcagcagaat tcttggcgtg     660

caatactcca tcccggacta cgtgagggtg tcttccgact gcaggcgcct tctatctcaa     720

atatttgttg ccgatccttc aaagaggatc acgatccctg agataaagaa gcacacgtgg     780

tttctgaaga atctgccaaa ggagatatcg gagagggaga aggccgacta caaggacacg     840

gacgccgccc ctccgacgca ggccgtcgag gagatcatgc ggatcatcca ggaggccaag     900

gtccccggcg acatggccgc cgccgacccg gcgctgctcg cggagctcgc cgagctgaag     960

agcgacgacg aagaggaggc cgccgatgag tatgacacct actga                    1005

<210>30

<211>334

<212>PRT

<213>稻

<400>30

Met Glu Glu Arg Tyr Glu Ala Leu Lys Glu Leu Gly Ala Gly Asn Phe

1               5                   10                  15

Gly Val Ala Arg Leu Val Arg Asp Lys Arg Ser Lys Glu Leu Val Ala

            20                  25                  30

Val Lys Tyr Ile Glu Arg Gly Lys Lys Ile Asp Glu Asn Val Gln Arg

        35                  40                  45

Glu Ile Ile Asn His Arg Ser Leu Arg His Pro Asn Ile Ile Arg Phe

    50                  55                  60

Lys Glu Val Cys Leu Thr Pro Thr His Leu Ala Ile Val Met Glu Tyr

65                  70                  75                  80

Ala Ala Gly Gly Glu Leu Phe Glu Gln Ile Cys Thr Ala Gly Arg Phe

                85                  90                  95

Ser Glu Asp Glu Ala Arg Tyr Phe Phe Gln Gln Leu Ile Ser Gly Val

            100                 105                 110

Ser Tyr Cys His Ser Leu Glu Ile Cys His Arg Asp Leu Lys Leu Glu

        115                 120                 125

Asn Thr Leu Leu Asp Gly Ser Pro Thr Pro Arg Val Lys Ile Cys Asp

    130                 135                 140

Phe Gly Tyr Ser Lys Ser Ala Leu Leu His Ser Lys Pro Lys Ser Thr

145                 150                 155                 160

Val Gly Thr Pro Ala Tyr Ile Ala Pro Glu Val Leu Ser Arg Glu Glu

                165                 170                 175

Tyr Asp Gly Lys Val Ala Asp Val Trp Ser Cys Gly Val Thr Leu Tyr

            180                 185                 190

Val Met Leu Val Gly Ser Tyr Pro Phe Glu Asp Pro Gly Asp Pro Arg

        195                 200                 205

Asn Phe Arg Lys Thr Ile Ser Arg Ile Leu Gly Val Gln Tyr Ser Ile

    210                 215                 220

Pro Asp Tyr Val Arg Val Ser Ser Asp Cys Arg Arg Leu Leu Ser Gln

225                 230                 235                 240

Ile Phe Val Ala Asp Pro Ser Lys Arg Ile Thr Ile Pro Glu Ile Lys

                245                 250                 255

Lys His Thr Trp Phe Leu Lys Asn Leu Pro Lys Glu Ile Ser Glu Arg

            260                 265                 270

Glu Lys Ala Asp Tyr Lys Asp Thr Asp Ala Ala Pro Pro Thr Gln Ala

        275                 280                 285

Val Glu Glu Ile Met Arg Ile Ile Gln Glu Ala Lys Val Pro Gly Asp

    290                 295                 300

Met Ala Ala Ala Asp Pro Ala Leu Leu Ala Glu Leu Ala Glu Leu Lys

305                 310                 315                 320

Ser Asp Asp Glu Glu Glu Ala Ala Asp Glu Tyr Asp Thr Tyr

                325                 330

<210>31

<211>1083

<212>DNA

<213>稻

<400>31

atggagaagt acgaggcggt gagggacatc gggtcgggga acttcggggt ggcgcggctg      60

atgcgcaacc gcgagacccg cgagctcgtc gccgtcaagt gcatcgagcg cggccaccgg     120

atagatgaga atgtgtacag ggagatcatc aaccaccgct cgctgcgcca ccccaacatc     180

attcgcttca aggaggtgat actgacgcca acgcatctta tgattgtcat ggagttcgca     240

gcaggcgggg agctgttcga tcgaatctgt gatcgtggac ggttcagtga ggatgaggcc     300

aggtatttct ttcagcagct gatctgtgga gtgagctact gccatcacat gcaaatatgc     360

catagagatt tgaagttgga gaatgttctc ttggatggca gcccagctcc acggcttaag     420

atatgtgatt ttggctactc caagtcatca gtattgcatt caagacccaa atcagcagtg     480

gggacgccag catatatcgc accagaggtg ctatcccgcc gtgagtatga tggaaagctt     540

gcagatgtat ggtcctgtgg tgtgactctt tacgtcatgc ttgtgggagc ctacccattt     600

gaagaccagg acgaccccaa gaacattcgc aaaaccattc agagaataat gtcagtgcaa     660

tataagatac cagattacgt ccacatatct gcagaatgca aacagcttat tgcccgcatt     720

tttgtcaaca atccattgag gagaatcacg atgaaggaaa taaagagcca cccgtggttc     780

ttgaagaacc tccccaggga gctcacggag actgcgcaag ccatgtacta caggagggac     840

aactccgtgc cttccttctc agaccagacc tcagaagaga tcatgaagat tgttcaagaa     900

gcaagaacca tgccgaaatc atccaggaca ggctactgga gcgacgcggg ttcagacgag     960

gaggagaagg aagaggaaga gaggccagaa gagaacgagg aagaggagga agatgagtac    1020

gataagaggg tcaaagaggt ccatgcgagc ggggagctcc gtatgagctc actgcgcata    1080

tga                                                                  1083

<210>32

<211>360

<212>PRT

<213>稻

<400>32

Met Glu Lys Tyr Glu Ala Val Arg Asp Ile Gly Ser Gly Asn Phe Gly

1               5                   10                  15

Val Ala Arg Leu Met Arg Asn Arg Glu Thr Arg Glu Leu Val Ala Val

            20                  25                  30

Lys Cys Ile Glu Arg Gly His Arg Ile Asp Glu Asn Val Tyr Arg Glu

        35                  40                  45

Ile Ile Asn His Arg Ser Leu Arg His Pro Asn Ile Ile Arg Phe Lys

    50                  55                  60

Glu Val Ile Leu Thr pro Thr His Leu Met Ile Val Met Glu Phe Ala

65                  70                  75                  80

Ala Gly Gly Glu Leu Phe Asp Arg Ile Cys Asp Arg Gly Arg Phe Ser

                85                  90                  95

Glu Asp Glu Ala Arg Tyr phe Phe Gln Gln Leu Ile Cys Gly Val Ser

            100                 105                 110

Tyr Cys His His Met Gln Ile Cys His Arg Asp Leu Lys Leu Glu Asn

        115                 120                 125

Val Leu Leu Asp Gly Ser Pro Ala Pro Arg Leu Lys Ile Cys Asp Phe

    130                 135                 140

Gly Tyr Ser Lys Ser Ser Val Leu His Ser Arg Pro Lys Ser Ala Val

145                 150                 155                 160

Gly Thr Pro Ala Tyr Ile Ala Pro Glu Val Leu Ser Arg Arg Glu Tyr

                165                 170                 175

Asp Gly Lys Leu Ala Asp Val Trp Ser Cys Gly Val Thr Leu Tyr Val

            180                 185                 190

Met Leu Val Gly Ala Tyr Pro Phe Glu Asp Gln Asp Asp Pro Lys Asn

        195                 200                 205

Ile Arg Lys Thr Ile Gln Arg Ile Met Ser Val Gln Tyr Lys Ile Pro

    210                 215                 220

Asp Tyr Val His Ile Ser Ala Glu Cys Lys Gln Leu Ile Ala Arg Ile

225                 230                 235                 240

Phe Val Asn Asn Pro Leu Arg Arg Ile Thr Met Lys Glu Ile Lys Ser

                245                 250                 255

His Pro Trp Phe Leu Lys Asn Leu Pro Arg Glu Leu Thr Glu Thr Ala

            260                 265                 270

Gln Ala Met Tyr Tyr Arg Arg Asp Asn Ser Val Pro Ser Phe Ser Asp

        275                 280                 285

Gln Thr Ser Glu Glu Ile Met Lys Ile Val Gln Glu Ala Arg Thr Met

    290                 295                 300

Pro Lys Ser Ser Arg Thr Gly Tyr Trp Ser Asp Ala Gly Ser Asp Glu

305                 310                 315                 320

Glu Glu Lys Glu Glu Glu Glu Arg Pro Glu Glu Asn Glu Glu Glu Glu

                325                 330                 335

Glu Asp Glu Tyr Asp Lys Arg Val Lys Glu Val His Ala Ser Gly Glu

            340                 345                 350

Leu Arg Met Ser Ser Leu Arg Ile

        355                 360

<210>33

<211>1113

<212>DNA

<213>稻

<400>33

atggagaaat acgagccagt tcgggagatc ggggcgggca acttcggggt agcgaagctg      60

atgcggaaca aggagacgcg ggagctggtg gcgatgaagt tcatcgagag agggaacagg     120

atcgacgaga acgtgttccg ggagatcgtg aatcatcgtt cgctgcgtca cccgaacata     180

ataaggttca aggaggtggt ggtgacgggg aggcatctgg cgatcgtgat ggagtacgcg     240

gcgggagggg agctgttcga gaggatatgc gaggcgggga ggttccacga ggacgaggcg     300

cgctacttct tccagcagct ggtgtgcggg gtgagctact gccacgccat gcagatctgc     360

caccgcgacc tcaagctgga gaatacgctg ctggacggca gcccggcccc gcgcctcaag     420

atctgcgact tcggctactc caagtcctcc ctcctccact cccgccccaa atccaccgtc     480

ggcacccccg cctacatcgc ccccgaggtc ctctcccgcc gcgagtacga cggcaagctc     540

gccgacgtct ggtcctgcgg cgtcaccctc tacgtcatgc tcgtcggcgc ttaccctttc     600

gaggatccca aggaccccaa gaacttcaga aagaccatct cgcgcatcat gtccgtccag     660

tacaagatcc ccgagtacgt ccacgtctcc cagccctgcc gccacctcct ctcccgcatc     720

ttcgtcgcca acccctacaa gcgcatcagc atgggcgaga tcaagagcca cccctggttc     780

ctcaagaacc tgccgcgcga gctcaaggag gaggcgcagg ccgtctacta caaccgccgg     840

ggagccgatc acgcggcttc cagcgcaagt agtgcggctg ctgcagctgc cttctcgccg     900

cagagcgtgg aggacatcat gaggatcgtg caggaggcgc agaccgtccc caagcccgac     960

aagcccgtct ctggctacgg ctggggcacc gacgacgacg acgacgacca acaaccagct    1020

gaggaggagg acgaagaaga cgactacgac aggacggtgc gcgaggttca cgccagcgtc    1080

gacctcgaca tgtcaaacct ccaaatctcc tga                                 1113

<210>34

<211>370

<212>PRT

<213>稻

<400>34

Met Glu Lys Tyr Glu Pro Val Arg Glu Ile Gly Ala Gly Asn Phe Gly

1               5                   10                  15

Val Ala Lys Leu Met Arg Asn Lys Glu Thr Arg Glu Leu Val Ala Met

            20                  25                  30

Lys Phe Ile Glu Arg Gly Asn Arg Ile Asp Glu Asn Val Phe Arg Glu

        35                  40                  45

Ile Val Asn His Arg Ser Leu Arg His Pro Asn Ile Ile Arg Phe Lys

    50                  55                  60

Glu Val Val Val Thr Gly Arg His Leu Ala Ile Val Met Glu Tyr Ala

65                  70                  75                  80

Ala Gly Gly Glu Leu Phe Glu Arg Ile Cys Glu Ala Gly Arg Phe His

                85                  90                  95

Glu Asp Glu Ala Arg Tyr Phe Phe Gln Gln Leu Val Cys Gly Val Ser

            100                 105                 110

Tyr Cys His Ala Met Gln Ile Cys His Arg Asp Leu Lys Leu Glu Asn

        115                 120                 125

Thr Leu Leu Asp Gly Ser Pro Ala Pro Arg Leu Lys Ile Cys Asp Phe

    130                 135                 140

Gly Tyr Ser Lys Ser Ser Leu Leu His Ser Arg Pro Lys Ser Thr Val

145                 150                 155                 160

Gly Thr Pro Ala Tyr Ile Ala Pro Glu Val Leu Ser Arg Arg Glu Tyr

                165                 170                 175

Asp Gly Lys Leu Ala Asp Val Trp Ser Cys Gly Val Thr Leu Tyr Val

            180                 185                 190

Met Leu Val Gly Ala Tyr Pro Phe Glu Asp Pro Lys Asp Pro Lys Asn

        195                 200                 205

Phe Arg Lys Thr Ile Ser Arg Ile Met Ser Val Gln Tyr Lys Ile Pro

    210                 215                 220

Glu Tyr Val His Val Ser Gln Pro Cys Arg His Leu Leu Ser Arg Ile

225                 230                 235                 240

Phe Val Ala Asn Pro Tyr Lys Arg Ile Ser Met Gly Glu Ile Lys Ser

                245                 250                 255

His Pro Trp Phe Leu Lys Asn Leu Pro Arg Glu Leu Lys Glu Glu Ala

            260                 265                 270

Gln Ala Val Tyr Tyr Asn Arg Arg Gly Ala Asp His Ala Ala Ser Ser

        275                 280                 285

Ala Ser Ser Ala Ala Ala Ala Ala Ala Phe Ser Pro Gln Ser Val Glu

    290                 295                 300

Asp Ile Met Arg Ile Val Gln Glu Ala Gln Thr Val Pro Lys Pro Asp

305                 310                 315                 320

Lys Pro Val Ser Gly Tyr Gly Trp Gly Thr Asp Asp Asp Asp Asp Asp

                325                 330                 335

Gln Gln Pro Ala Glu Glu Glu Asp Glu Glu Asp Asp Tyr Asp Arg Thr

            340                 345                 350

Val Arg Glu Val His Ala Ser Val Asp Leu Asp Met Ser Asn Leu Gln

        355                 360                 365

Ile Ser

    370

<210>35

<211>1098

<212>DNA

<213>稻

<400>35

atggagaagt acgagctgct caaggacatc gggtcgggca acttcggtgt ggcgcggctg      60

atgcggaaca gggagaccaa ggagctcgtc gccatgaagt acataccgcg tggcctcaag     120

attgacgaga atgtggcgag ggagatcata aaccaccgct cgctgcggca cccaaacatc     180

atccggttca aggaggtcgt gctcacgcct acccacctcg cgatcgtcat ggagtacgcc     240

gccggcggcg agctgttcga ccggatctgc agcgccggga gattcagcga ggacgagtcg     300

aggtatttct tccagcaact aatttgcggc gtcagctact gccacttcat gcaaatttgc     360

caccgggatt tgaagctgga gaacacgctg ctggatggca gccctgcgcc gcgcctcaag     420

atctgcgact ttggctactc caagtcatca ctgctgcact caaagccgaa gtcgacggtc     480

gggactcccg cgtacatcgc tccggaggtg ctctctcgcc gggagtatga cggcaagatg     540

gcagatgtat ggtcttgtgg ggtgaccctt tatgtgatgc tcgtcggtgc ttaccctttt     600

gaggacccag atgatcccaa gaatttcaga aaaacaatcg ggagaatcgt atcaattcag     660

tacaaaatac cagagtacgt ccatatatcc caagattgta gacaactcct ctctcgaatc     720

tttgtcgcga atcctgcaaa gagaataaca ataagagaga tcagaaacca cccttggttt     780

atgaagaact tgccgcggga gcttacagaa gcggcgcaag cgaagtacta caagaaggac     840

aacagtgccc gtacattctc ggatcagacc gtcgacgaga tcatgaagat tgtacaagag     900

gcaaagacac cacctccatc gtcgactcca gtggccggtt tcggttggac cgaggaagaa     960

gagcaggagg acggtaagaa tcccgacgac gacgagggag acagggatga ggaggagggc    1020

gaggaaggcg atagcgagga cgagtacacc aagcaggtga agcaagccca tgccagctgt    1080

gacttgcaga agagctga                                                  1098

<210>36

<211>365

<212>PRT

<213>稻

<400>36

Met Glu Lys Tyr Glu Leu Leu Lys Asp Ile Gly Ser Gly Asn Phe Gly

1               5                   10                  15

Val Ala Arg Leu Met Arg Asn Arg Glu Thr Lys Glu Leu Val Ala Met

            20                  25                  30

Lys Tyr Ile Pro Arg Gly Leu Lys Ile Asp Glu Asn Val Ala Arg Glu

        35                  40                  45

Ile Ile Asn His Arg Ser Leu Arg His Pro Asn Ile Ile Arg Phe Lys

    50                  55                  60

Glu Val Val Leu Thr Pro Thr His Leu Ala Ile Val Met Glu Tyr Ala

65                  70                  75                  80

Ala Gly Gly Glu Leu Phe Asp Arg Ile Cys Ser Ala Gly Arg Phe Ser

                85                  90                  95

Glu Asp Glu Ser Arg Tyr Phe Phe Gln Gln Leu Ile Cys Gly Val Ser

            100                 105                 110

Tyr Cys His Phe Met Gln Ile Cys His Arg Asp Leu Lys Leu Glu Asn

        115                 120                 125

Thr Leu Leu Asp Gly Ser Pro Ala Pro Arg Leu Lys Ile Cys Asp Phe

    130                 135                 140

Gly Tyr Ser Lys Ser Ser Leu Leu His Ser Lys Pro Lys Ser Thr Val

145                 150                 155                 160

Gly Thr Pro Ala Tyr Ile Ala Pro Glu Val Leu Ser Arg Arg Glu Tyr

                165                 170                 175

Asp Gly Lys Met Ala Asp Val Trp Ser Cys Gly Val Thr Leu Tyr Val

            180                 185                 190

Met Leu Val Gly Ala Tyr Pro Phe Glu Asp Pro Asp Asp Pro Lys Asn

        195                 200                 205

Phe Arg Lys Thr Ile Gly Arg Ile Val Ser Ile Gln Tyr Lys Ile Pro

    210                 215                 220

Glu Tyr Val His Ile Ser Gln Asp Cys Arg Gln Leu Leu Ser Arg Ile

225                 230                 235                 240

Phe Val Ala Asn Pro Ala Lys Arg Ile Thr Ile Arg Glu Ile Arg Asn

                245                 250                 255

His Pro Trp Phe Met Lys Asn Leu Pro Arg Glu Leu Thr Glu Ala Ala

            260                 265                 270

Gln Ala Lys Tyr Tyr Lys Lys Asp Asn Ser Ala Arg Thr Phe Ser Asp

        275                 280                 285

Gln Thr Val Asp Glu Ile Met Lys Ile Val Gln Glu Ala Lys Thr Pro

    290                 295                 300

Pro Pro Ser Ser Thr Pro Val Ala Gly Phe Gly Trp Thr Glu Glu Glu

305                 310                 315                 320

Glu Gln Glu Asp Gly Lys Asn Pro Asp Asp Asp Glu Gly Asp Arg Asp

                325                 330                 335

Glu Glu Glu Gly Glu Glu Gly Asp Ser Glu Asp Glu Tyr Thr Lys Gln

            340                 345                 350

Val Lys Gln Ala His Ala Ser Cys Asp Leu Gln Lys Ser

        355                 360                 365

<210>37

<211>1080

<212>DNA

<213>稻

<400>37

atggagaggt acgagctgct caaggacatc ggcgccggga acttcggggt ggcgcggctg      60

atgcggaata aggagaccaa ggagctggtc gccatgaagt acatccctcg gggcctcaag     120

attgacgaga atgtggcgag ggagatcatc aaccaccggt cgctgcggca ccccaacatc     180

atccgcttca aggaggtggt ggtcacgccg acgcacctgg cgatcgtgat ggagtacgct     240

gccggcggcg agttgttcga ccggatctgc aacgccggga ggttcagcga ggacgaggcc     300

aggtatttct tccagcagct catctgcggc gtgagctact gccacttcat gcaaatttgc     360

caccgggatt tgaagctgga gaacacgctg ctggacggca gcccggcgcc ccgcctcaag     420

atctgcgact tcggttactc caagtcgtcg ctgctgcact cgaagcccaa gtcgacggtc     480

gggacgccgg cgtacatcgc gccggaggtg ctatcccgcc gggagtacga cggcaagaca     540

gccgatgtgt ggtcttgtgg agtgactctt tatgtgatgc ttgttggtgc ttaccccttt     600

gaggaccctg atgaccccaa gaatttcaga aagaccattg ggagaataat gtcaattcag     660

tacaaaatac ccgagtacgt ccatgtatcc caggactgca ggcaactcct ttctagaatt     720

tttgttgcaa accctgcaaa gagaataaca ataagggaga tcaggaacca cccatggttc     780

ctgaagaacc tgccaagaga gctcacagaa gctgcacagg caatgtacta caagaaggat     840

aacagtgccc cgacctactc cgtccagtcg gtcgaggaga tcatgaagat tgtcgaggaa     900

gcgcggacgc cgcctcggtc ctccaccccc gtggccggct ttggctggca agaggaggat     960

gagcaggagg acaacagcaa gaagccagag gaagaacagg aggaagagga agatgctgag    1020

gatgagtacg acaagcaggt gaaacaagtc catgccagtg gtgagtttca gctcagctga    1080

<210>38

<211>359

<212>PRT

<213>稻

<400>38

Met Glu Arg Tyr Glu Leu Leu Lys Asp Ile Gly Ala Gly Asn Phe Gly

1               5                   10                  15

Val Ala Arg Leu Met Arg Asn Lys Glu Thr Lys Glu Leu Val Ala Met

            20                  25                  30

Lys Tyr Ile Pro Arg Gly Leu Lys Ile Asp Glu Asn Val Ala Arg Glu

        35                  40                  45

Ile Ile Asn His Arg Ser Leu Arg His Pro Asn Ile Ile Arg Phe Lys

    50                  55                  60

Glu Val Val Val Thr Pro Thr His Leu Ala Ile Val Met Glu Tyr Ala

65                  70                  75                  80

Ala Gly Gly Glu Leu Phe Asp Arg Ile Cys Asn Ala Gly Arg Phe Ser

                85                  90                  95

Glu Asp Glu Ala Arg Tyr Phe Phe Gln Gln Leu Ile Cys Gly Val Ser

            100                 105                 110

Tyr Cys His Phe Met Gln Ile Cys His Arg Asp Leu Lys Leu Glu Asn

        115                 120                 125

Thr Leu Leu Asp Gly Ser Pro Ala Pro Arg Leu Lys Ile Cys Asp Phe

    130                 135                 140

Gly Tyr Ser Lys Ser Ser Leu Leu His Ser Lys Pro Lys Ser Thr Val

145                 150                 155                 160

Gly Thr Pro Ala Tyr Ile Ala Pro Glu Val Leu Ser Arg Arg Glu Tyr

                165                 170                 175

Asp Gly Lys Thr Ala Asp Val Trp Ser Cys Gly Val Thr Leu Tyr Val

            180                 185                 190

Met Leu Val Gly Ala Tyr Pro Phe Glu Asp Pro Asp Asp Pro Lys Asn

        195                 200                 205

Phe Arg Lys Thr Ile Gly Arg Ile Met Ser Ile Gln Tyr Lys Ile Pro

    210                 215                 220

Glu Tyr Val His Val Ser Gln Asp Cys Arg Gln Leu Leu Ser Arg Ile

225                 230                 235                 240

Phe Val Ala Asn Pro Ala Lys Arg Ile Thr Ile Arg Glu Ile Arg Asn

                245                 250                 255

His Pro Trp Phe Leu Lys Asn Leu Pro Arg Glu Leu Thr Glu Ala Ala

            260                 265                 270

Gln Ala Met Tyr Tyr Lys Lys Asp Asn Ser Ala Pro Thr Tyr Ser Val

        275                 280                 285

Gln Ser Val Glu Glu Ile Met Lys Ile Val Glu Glu Ala Arg Thr Pro

    290                 295                 300

Pro Arg Ser Ser Thr Pro Val Ala Gly Phe Gly Trp Gln Glu Glu Asp

305                 310                 315                 320

Glu Gln Glu Asp Asn Ser Lys Lys Pro Glu Glu Glu Gln Glu Glu Glu

                325                 330                 335

Glu Asp Ala Glu Asp Glu Tyr Asp Lys Gln Val Lys Gln Val His Ala

            340                 345                 350

Ser Gly Glu Phe Gln Leu Ser

        355

<210>39

<211>1116

<212>DNA

<213>稻

<400>39

atggcagcgg cgggggccgg ggcgggggcg ccggatcggg cggcgctgac ggtgggcccg      60

gggatggaca tgccgatcat gcacgacagc gaccggtacg agctcgtgcg cgacatcggc     120

tccggcaact tcggcgtcgc ccgcctcatg cgcgaccgcc gcaccatgga gctcgtcgcc     180

gtcaagtaca tcgagcgcgg cgagaagata gatgataatg tccagcgtga gattataaat     240

caccgatcgt tgaaacatcc taacattatt aggtttaagg aggttatttt aaccccaact     300

catcttgcta ttgtcatgga atatgcctct ggtggtgagc ttttcgagag aatttgtaag     360

aatgtacggt tcagtgaaga tgaggctcgc tacttcttcc agcagcttat ctcgggagtc     420

agctactgcc attcaatgca agtatgccac cgtgatttga agttggagaa tacactgctg     480

gatggaagcc ctgctccacg cttgaaaata tgtgactttg gctattctaa gtcttcagtt     540

ctccattcac aaccaaaatc cactgtagga acccctgctt atattgcacc tgaagttctg     600

ttgaagaaag aatacgatgg caagactgct gatgtatggt cctgtggtgt gactctatat     660

gttatggtag ttggtgcata tcctttcgag gatccagaag agcctaagaa cttccgtaaa     720

acaattcagc gtatcttgaa tgttcagtac tcaattccag aaaacgtgga catatctcca     780

gaatgtaggc atctaatttc gaggattttt gtcggggatc cgtctttgag gataacaatc     840

ccagaaatac ggagccatgg ctggttcttg aagaaccttc ctgcagattt gatggacgat     900

gatagtatga gcagccagta tgaggaacct gatcagccaa tgcaaaccat ggatcagatc     960

atgcaaattt taactgaggc caccatacca cctgcttgct ctcgaataaa ccacatccta    1020

actgatggac tcgacctaga cgatgacatg gatgacctcg attccgactc agatattgat    1080

gttgatagca gcggcgagat cgtctatgcg atgtaa                              1116

<210>40

<211>371

<212>PRT

<213>稻

<400>40

Met Ala Ala Ala Gly Ala Gly Ala Gly Ala Pro Asp Arg Ala Ala Leu

1               5                   10                  15

Thr Val Gly Pro Gly Met Asp Met Pro Ile Met His Asp Ser Asp Arg

            20                  25                  30

Tyr Glu Leu Val Arg Asp Ile Gly Ser Gly Asn Phe Gly Val Ala Arg

        35                  40                  45

Leu Met Arg Asp Arg Arg Thr Met Glu Leu Val Ala Val Lys Tyr Ile

    50                  55                  60

Glu Arg Gly Glu Lys Ile Asp Asp Asn Val Gln Arg Glu Ile Ile Asn

65                  70                  75                  80

His Arg Ser Leu Lys His Pro Asn Ile Ile Arg Phe Lys Glu Val Ile

                85                  90                  95

Leu Thr Pro Thr His Leu Ala Ile Val Met Glu Tyr Ala Ser Gly Gly

            100                 105                 110

Glu Leu Phe Glu Arg Ile Cys Lys Asn Val Arg Phe Ser Glu Asp Glu

        115                 120                 125

Ala Arg Tyr Phe Phe Gln Gln Leu Ile Ser Gly Val Ser Tyr Cys His

    130                 135                 140

Ser Met Gln Val Cys His Arg Asp Leu Lys Leu Glu Asn Thr Leu Leu

145                 150                 155                 160

Asp Gly Ser Pro Ala Pro Arg Leu Lys Ile Cys Asp Phe Gly Tyr Ser

                165                 170                 175

Lys Ser Ser Val Leu His Ser Gln Pro Lys Ser Thr Val Gly Thr Pro

            180                 185                 190

Ala Tyr Ile Ala Pro Glu Val Leu Leu Lys Lys Glu Tyr Asp Gly Lys

        195                 200                 205

Thr Ala Asp Val Trp Ser Cys Gly Val Thr Leu Tyr Val Met Val Val

    210                 215                 220

Gly Ala Tyr Pro Phe Glu Asp Pro Glu Glu Pro Lys Asn Phe Arg Lys

225                 230                 235                 240

Thr Ile Gln Arg Ile Leu Asn Val Gln Tyr Ser Ile Pro Glu Asn Val

                245                 250                 255

Asp Ile Ser Pro Glu Cys Arg His Leu Ile Ser Arg Ile Phe Val Gly

            260                 265                 270

Asp Pro Ser Leu Arg Ile Thr Ile Pro Glu Ile Arg Ser His Gly Trp

        275                 280                 285

Phe Leu Lys Asn Leu Pro Ala Asp Leu Met Asp Asp Asp Ser Met Ser

    290                 295                 300

Ser Gln TVr Glu Glu Pro Asp Gln Pro Met Gln Thr Met Asp Gln Ile

305                 310                 315                 320

Met Gln Ile Leu Thr Glu Ala Thr Ile Pro Pro Ala Cys Ser Arg Ile

                325                 330                 335

Asn His Ile Leu Thr Asp Gly Leu Asp Leu Asp Asp Asp Met Asp Asp

            340                 345                 350

Leu Asp Ser Asp Ser Asp Ile Asp Val Asp Ser Ser Gly Glu Ile Val

        355                 360                 365

Tyr Ala Met

    370

<210>41

<211>1086

<212>DNA

<213>稻

<400>41

atggagaggg cggcggcggg gccgctgggg atggagatgc cgataatgca cgacggtgac      60

aggtacgagc tggtgaagga gatcgggtcg gggaacttcg gcgtcgcccg cctcatgcgc     120

aaccgcgcct ccggcgacct cgtcgccgtc aagtacatcg accgcggcga gaagattgac     180

gagaacgtgc agagggagat catcaaccac aggtcgctgc gccaccccaa catcatccga     240

ttcaaggagg ttattctgac gccgacgcat ctcgcgatcg tcatggagta cgcctccggc     300

ggcgagctct tcgagcgcat ctgcagcgcc ggccgcttca gcgaggacga ggctcgtttc     360

ttcttccagc agctgatatc tggagttagc tactgccatt ccatgcaagt atgccatcgt     420

gacttaaagc tggagaacac tctgctagat ggaagtactg ctcctcgctt gaagatatgt     480

gactttggtt actcgaagtc atcggttctt cattcacaac caaaatcaac agttggaact     540

ccagcttata ttgctccaga agttttgctc aagaaagaat acgatggaaa gattgccgat     600

gtttggtcat gcggtgtgac gctctacgtg atgttggttg gcgcataccc tttcgaggat     660

cctgaagatc ccaagaactt cagaaagaca attcagaaaa tattgggtgt tcagtactca     720

attccagact atgtccacat atctccggag tgccgcgatc tcattacgag gatttttgtt     780

ggcaacccag ctagtaggat caccatgcct gagataaaga accacccatg gttcatgaag     840

aacatcccgg ctgacctcat ggatgatggc atggttagca atcagtacga ggagcctgac     900

cagccgatgc agaatatgaa cgagatcatg cagatactgg cagaagcaac aattccagca     960

gcaggcacca gtggaatcaa tcagttcttg actgacagcc ttgacctcga cgacgacatg    1020

gaggatatgg actcggacct tgaccttgac attgagagca gcggagagat cgtatatgcc    1080

atgtaa                                                               1086

<210>42

<211>361

<212>PRT

<213>稻

<400>42

Met Glu Arg Ala Ala Ala Gly Pro Leu Gly Met Glu Met Pro Ile Met

1               5                   10                  15

His Asp Gly Asp Arg Tyr Glu Leu Val Lys Glu Ile Gly Ser Gly Asn

            20                  25                  30

Phe Gly Val Ala Arg Leu Met Arg Asn Arg Ala Ser Gly Asp Leu Val

        35                  40                  45

Ala Val Lys Tyr Ile Asp Arg Gly Glu Lys Ile Asp Glu Asn Val Gln

    50                  55                  60

Arg Glu Ile Ile Asn His Arg Ser Leu Arg His Pro Asn Ile Ile Arg

65                  70                  75                  80

Phe Lys Glu Val Ile Leu Thr Pro Thr His Leu Ala Ile Val Met Glu

                85                  90                  95

Tyr Ala Ser Gly Gly Glu Leu Phe Glu Arg Ile Cys Ser Ala Gly Arg

            100                 105                 110

Phe Ser Glu Asp Glu Ala Arg Phe Phe Phe Gln Gln Leu Ile Ser Gly

        115                 120                 125

Val Ser Tyr Cys His Ser Met Gln Val Cys His Arg Asp Leu Lys Leu

    130                 135                 140

Glu Asn Thr Leu Leu Asp Gly Ser Thr Ala Pro Arg Leu Lys Ile Cys

145                 150                 155                 160

Asp Phe Gly Tyr Ser Lys Ser Ser Val Leu His Ser Gln Pro Lys Ser

                165                 170                 175

Thr Val Gly Thr Pro Ala Tyr Ile Ala Pro Glu Val Leu Leu Lys Lys

            180                 185                 190

Glu Tyr Asp Gly Lys Ile Ala Asp Val Trp Ser Cys Gly Val Thr Leu

        195                 200                 205

Tyr Val Met Leu Val Gly Ala Tyr Pro Phe Glu Asp pro Glu Asp Pro

    210                 215                 220

Lys Asn Phe Arg Lys Thr Ile Gln Lys Ile Leu Gly Val Gln Tyr Ser

225                 230                 235                 240

Ile Pro Asp Tyr Val His Ile Ser Pro Glu Cys Arg Asp Leu Ile Thr

                245                 250                 255

Arg Ile Phe Val Gly Asn Pro Ala Ser Arg Ile Thr Met Pro Glu Ile

            260                 265                 270

Lys Asn His Pro Trp Phe Met Lys Asn Ile Pro Ala Asp Leu Met Asp

        275                 280                 285

Asp Gly Met Val Ser Asn Gln Tyr Glu Glu Pro Asp Gln Pro Met Gln

    290                 295                 300

Asn Met Asn Glu Ile Met Gln Ile Leu Ala Glu Ala Thr Ile Pro Ala

305                 310                 315                 320

Ala Gly Thr Ser Gly Ile Asn Gln Phe Leu Thr Asp Ser Leu Asp Leu

                325                 330                 335

Asp Asp Asp Met Glu Asp Met Asp Ser Asp Leu Asp Leu Asp Ile Glu

            340                 345                 350

Ser Ser Gly Glu Ile Val Tyr Ala Met

        355                 360

<210>43

<211>1089

<212>DNA

<213>稻

<400>43

atggaccggg cggcgctgac ggtggggccg gggatggaca tgccgataat gcacgacggc      60

gaccggtacg agctggtgcg ggacatcggc tccggcaact tcggcgtcgc gcgcctcatg     120

cgcagccgcg ccgacggcca gctcgtcgcc gtcaagtaca tcgagcgcgg cgacaagatc     180

gacgagaacg tgcagcggga gatcatcaac caccgctcgc tgcgccaccc caacatcatc     240

cgcttcaagg aggtcatcct cacccccacc cacctcgcca tcgtcatgga gtacgcctcc     300

ggcggcgagc tcttcgagcg tatctgcaac gccggcaggt tcagcgagga cgaggcacgg     360

ttctttttcc agcaactgat ttcaggagtc agctattgcc attccatgca agtatgccat     420

cgtgacctga agctggagaa caccctgctc gacggcagca cggcgcctcg cctcaagata     480

tgcgactttg gctattcaaa gtcgtctgtt cttcattcgc aaccaaaatc tactgttgga     540

actccggcat acatcgctcc tgaggttctg ctgaagaagg aatatgatgg aaagattgct     600

gatgtgtggt cgtgtggagt aaccctctac gtaatgctgg ttggtgcata tccttttgag     660

gatccagatg agcctaagaa tttcaggaag acaattcaga gaatattggg tgtgcagtac     720

tctattccag attatgtcca catatctcca gagtgccgag atcttattgc gaggattttt     780

gtggccaacc cagccactag aatctctatc cccgagatca gaaatcatcc atggttcttg     840

aagaatctcc cagctgacct tatggatgat agcaagatga gcagccagta cgaggagccc     900

gaacagccaa tgcagagcat ggatgagatc atgcagatac tggcagaggc gaccatacca     960

gcagctgggt ctggtggaat caaccagttc ttgaatgatg gccttgacct cgatgatgac    1020

atggaggacc ttgattcaga ccccgatctt gacgtggaaa gcagtgggga gatagtatac    1080

gctatgtga                                                            1089

<210>44

<211>362

<212>PRT

<213>稻

<400>44

Met Asp Arg Ala Ala Leu Thr Val Gly Pro Gly Met Asp Met Pro Ile

1               5                   10                  15

Met His Asp Gly Asp Arg Tyr Glu Leu Val Arg Asp Ile Gly Ser Gly

            20                  25                  30

Asn Phe Gly Val Ala Arg Leu Met Arg Ser Arg Ala Asp Gly Gln Leu

        35                  40                  45

Val Ala Val Lys Tyr Ile Glu Arg Gly Asp Lys Ile Asp Glu Asn Val

    50                  55                  60

Gln Arg Glu Ile Ile Asn His Arg Ser Leu Arg His Pro Asn Ile Ile

65                  70                  75                  80

Arg Phe Lys Glu Val Ile Leu Thr Pro Thr His Leu Ala Ile Val Met

                85                  90                  95

Glu Tyr Ala Ser Gly Gly Glu Leu Phe Glu Arg Ile Cys Asn Ala Gly

            100                 105                 110

Arg Phe Ser Glu Asp Glu Ala Arg Phe Phe Phe Gln Gln Leu Ile Ser

        115                 120                 125

Gly Val Ser Tyr Cys His Ser Met Gln Val Cys His Arg Asp Leu Lys

    130                 135                 140

Leu Glu Asn Thr Leu Leu Asp Gly Ser Thr Ala Pro Arg Leu Lys Ile

145                 150                 155                 160

Cys Asp Phe Gly Tyr Ser Lys Ser Ser Val Leu His Ser Gln Pro Lys

                165                 170                 175

Ser Thr Val Gly Thr Pro Ala Tyr Ile Ala Pro Glu Val Leu Leu Lys

            180                 185                 190

Lys Glu Tyr Asp Gly Lys Ile Ala Asp Val Trp Ser Cys Gly Val Thr

        195                 200                 205

Leu Tyr Val Met Leu Val Gly Ala Tyr Pro Phe Glu Asp Pro Asp Glu

    210                 215                 220

Pro Lys Asn Phe Arg Lys Thr Ile Gln Arg Ile Leu Gly Val Gln Tyr

225                 230                 235                 240

Ser Ile Pro Asp Tyr Val His Ile Ser Pro Glu Cys Arg Asp Leu Ile

                245                 250                 255

Ala Arg Ile Phe Val Ala Asn Pro Ala Thr Arg Ile Ser Ile Pro Glu

            260                 265                 270

Ile Arg Asn His Pro Trp Phe Leu Lys Asn Leu Pro Ala Asp Leu Met

        275                 280                 285

Asp Asp Ser Lys Met Ser Ser Gln Tyr Glu Glu Pro Glu Gln Pro Met

    290                 295                 300

Gln Ser Met Asp Glu Ile Met Gln Ile Leu Ala Glu Ala Thr Ile Pro

305                 310                 315                 320

Ala Ala Gly Ser Gly Gly Ile Asn Gln Phe Leu Asn Asp Gly Leu Asp

                325                 330                 335

Leu Asp Asp Asp Met Glu Asp Leu Asp Ser Asp Pro Asp Leu Asp Val

            340                 345                 350

Glu Ser Ser Gly Glu Ile Val Tyr Ala Met

        355                 360

<210>45

<211>1080

<212>DNA

<213>油菜(Brassica napus)

<400>45

atggagaagt acgagctggt gaaagacata ggagctggga atttcggagt ggcgaggctc      60

atgaaggtca aagactctaa ggagctcgtt gccatgaagt acatcgagcg tggtcccaag     120

attgatgaga acgtggcaag agagatttat aatcacagat cgcttcgcca tcctaatatt     180

atccgcttta aggaggtggt gttgactccg actcatcttg ctattgccat ggagtatgct     240

gctggtggtg aacttttcga gcgtatatgc ggtgctggaa gattcagtga ggatgaggcg     300

agatacttct tccagcagct tatatcaggt gttagctatt gccatgctat gcaaatatgc     360

catagagatc tgaagctcga gaatacactc cttgatggaa gtcctgctcc acgtctcaaa     420

atctgtgatt ttggttattc caagtcctct ctactgcact cgaggcctaa atcaactgtt     480

ggaactccag catatattgc acctgaggtc ctctctcgga gagaatatga tggcaagatg     540

gctgatgtat ggtcctgtgg tgttactctt tatgtcatgc ttgttggagc ataccctttt     600

gaagaccagg aagaccccaa aaacttcagg aaaacaatac aaaaaatcat ggctgttcag     660

tacaagatcc cggactacgt ccacatctca caagattgca aacatctcct ttcccgtata     720

tttgtggcca actcactcaa gaggataacc attgcggaaa tcaagaaaca cccatggttc     780

acgaagaact tgccaaggga gctcacagag acagctcaag ctgcatattt caagaaagag     840

aatccaacct tctccgccca gaccgctgaa gagatcatga agatagtgga tgacgccaaa     900

acgcctccgc ctgtttcccg ttccattgga ggttttggct ggggaggaga gggagattta     960

gaggggaaag aggaagagga ggtggatgaa gaggaggttg aggaagagga agacgaagaa    1020

gatgaatatg ataagactgt aaaggaagta cacgcaagcg gagaagtgag aatcagttga    1080

<210>46

<211>359

<212>PRT

<213>油菜

<400>46

Met Glu Lys Tyr Glu Leu Val Lys Asp Ile Gly Ala Gly Asn Phe Gly

1               5                   10                  15

Val Ala Arg Leu Met Lys Val Lys Asp Ser Lys Glu Leu Val Ala Met

            20                  25                  30

Lys Tyr Ile Glu Arg Gly Pro Lys Ile Asp Glu Asn Val Ala Arg Glu

        35                  40                  45

Ile Tyr Asn His Arg Ser Leu Arg His Pro Asn Ile Ile Arg Phe Lys

    50                  55                  60

Glu Val Val Leu Thr Pro Thr His Leu Ala Ile Ala Met Glu Tyr Ala

65                  70                  75                  80

Ala Gly Gly Glu Leu Phe Glu Arg Ile Cys Gly Ala Gly Arg Phe Ser

                85                  90                  95

Glu Asp Glu Ala Arg Tyr Phe Phe Gln Gln Leu Ile Ser Gly Val Ser

            100                 105                 110

Tyr Cys His Ala Met Gln Ile Cys His Arg Asp Leu Lys Leu Glu Asn

        115                 120                 125

Thr Leu Leu Asp Gly Ser Pro Ala Pro Arg Leu Lys Ile Cys Asp Phe

    130                 135                 140

Gly Tyr Ser Lys Ser Ser Leu Leu His Ser Arg Pro Lys Ser Thr Val

145                 150                 155                 160

Gly Thr Pro Ala Tyr Ile Ala Pro Glu Val Leu Ser Arg Arg Glu Tyr

                165                 170                 175

Asp Gly Lys Met Ala Asp Val Trp Ser Cys Gly Val Thr Leu Tyr Val

            180                 185                 190

Met Leu Val Gly Ala Tyr Pro Phe Glu Asp Gln Glu Asp Pro Lys Asn

        195                 200                 205

Phe Arg Lys Thr Ile Gln Lys Ile Met Ala Val Gln Tyr Lys Ile Pro

    210                 215                 220

Asp Tyr Val His Ile Ser Gln Asp Cys Lys His Leu Leu Ser Arg Ile

225                 230                 235                 240

Phe Val Ala Asn Ser Leu Lys Arg Ile Thr Ile Ala Glu Ile Lys Lys

                245                 250                 255

His Pro Trp Phe Thr Lys Asn Leu Pro Arg Glu Leu Thr Glu Thr Ala

            260                 265                 270

Gln Ala Ala Tyr Phe Lys Lys Glu Asn Pro Thr Phe Ser Ala Gln Thr

        275                 280                 285

Ala Glu Glu Ile Met Lys Ile Val Asp Asp Ala Lys Thr Pro Pro Pro

    290                 295                 300

Val Ser Arg Ser Ile Gly Gly Phe Gly Trp Gly Gly Glu Gly Asp Leu

305                 310                 315                 320

Glu Gly Lys Glu Glu Glu Glu Val Asp Glu Glu Glu Val Glu Glu Glu

                325                 330                 335

Glu Asp Glu Glu Asp Glu Tyr Asp Lys Thr Val Lys Glu Val His Ala

            340                 345                 350

Ser Gly Glu Val Arg Ile Ser

        355

<210>47

<211>1065

<212>DNA

<213>油菜

<400>47

atggagaagt acgagctggt gaaagacata ggcgctggga atttcggagt ggcgaggctc      60

atgaaggtca aaaactctaa agagcttgtt gccatgaagt acatcgagcg tggtcccaag     120

attgatgaga atgtggcaag agagatcatt aatcacagat cgcttcgtca tcctaatatt     180

atccgtttta aggaggttgt gttgactcca actcatcttg ctattgccat ggaatatgct     240

gctggtggtg aattattcga gcgtatatgc agtgctggaa gattcagtga ggatgaggcg     300

agatacttct tccagcagct tatatcaggt gttagctatt gccatgctat gcaaatatgc     360

catagagatc tgaagctcga gaacacactc ctggatggaa gtcctgctcc acgtctcaaa     420

atctgtgatt ttggttattc caagtcctct ctactgcact cgaggcccaa atccacagtt     480

ggaactccag catatattgc acctgaggtc ctttctcgga gagagtatga tggcaagatg     540

gctgatgtat ggtcttgtgg tgtaactctt tatgtcatgc ttgttggagc ctacccattc     600

gaagaccagg aagacccaaa gaacttcagg aaaacaatac aaaaaatcat ggctgttcag     660

tacaagatcc cggactacgt ccacatctca caggattgca aacacctcct ttcccgtata     720

tttgttgcca attcactcaa gaggataacc attgcagaaa tcaagaaaca cccatggttc     780

ctgaagaacc tgccaaggga gctcacagag acagctcaag ctgcatattt caagaaagag     840

aatccaacct tctccccgca gaccgctgaa gagatcatga agatagtgga tgacgccaaa     900

acgcctccgc ctgtttccag atccattgga gggtttggct ggggaggaaa gggagacgaa     960

gaggaagaag aagtggatga agaggaggtg gtggaggaag aggaagacga agaagatgaa    1020

tatgataaga ctgtaaagga agcacacgca agtggagaag tgtga                    1065

<210>48

<211>354

<212>PRT

<213>油菜

<400>48

Met Glu Lys Tyr Glu Leu Val Lys Asp Ile Gly Ala Gly Asn Phe Gly

1               5                   10                  15

Val Ala Arg Leu Met Lys Val Lys Asn Ser Lys Glu Leu Val Ala Met

            20                  25                  30

Lys Tyr Ile Glu Arg Gly Pro Lys Ile Asp Glu Asn Val Ala Arg Glu

        35                  40                  45

Ile Ile Asn His Arg Ser Leu Arg His Pro Asn Ile Ile Arg Phe Lys

    50                  55                  60

Glu Val Val Leu Thr Pro Thr His Leu Ala Ile Ala Met Glu Tyr Ala

65                  70                  75                  80

Ala Gly Gly Glu Leu Phe Glu Arg Ile Cys Ser Ala Gly Arg Phe Ser

                85                  90                  95

Glu Asp Glu Ala Arg Tyr Phe Phe Gln Gln Leu Ile Ser Gly Val Ser

            100                 105                 110

Tyr Cys His Ala Met Gln Ile Cys His Arg Asp Leu Lys Leu Glu Asn

        115                 120                 125

Thr Leu Leu Asp Gly Ser Pro Ala Pro Arg Leu Lys Ile Cys Asp Phe

    130                 135                 140

Gly Tyr Ser Lys Ser Ser Leu Leu His Ser Arg Pro Lys Ser Thr Val

145                 150                 155                 160

Gly Thr Pro Ala Tyr Ile Ala Pro Glu Val Leu Ser Arg Arg Glu Tyr

                165                 170                 175

Asp Gly Lys Met Ala Asp Val Trp Ser Cys Gly Val Thr Leu Tyr Val

            180                 185                 190

Met Leu Val Gly Ala Tyr Pro Phe Glu Asp Gln Glu Asp Pro Lys Asn

        195                 200                 205

Phe Arg Lys Thr Ile Gln Lys Ile Met Ala Val Gln Tyr Lys Ile Pro

    210                 215                 220

Asp Tyr Val His Ile Ser Gln Asp Cys Lys His Leu Leu Ser Arg Ile

225                 230                 235                 240

Phe Val Ala Asn Ser Leu Lys Arg Ile Thr Ile Ala Glu Ile Lys Lys

                245                 250                 255

His Pro Trp Phe Leu Lys Asn Leu Pro Arg Glu Leu Thr Glu Thr Ala

            260                 265                 270

Gln Ala Ala Tyr Phe Lys Lys Glu Asn Pro Thr Phe Ser Pro Gln Thr

        275                 280                 285

Ala Glu Glu Ile Met Lys Ile Val Asp Asp Ala Lys Thr Pro Pro Pro

    290                 295                 300

Val Ser Arg Ser Ile Gly Gly Phe Gly Trp Gly Gly Lys Gly Asp Glu

305                 310                 315                 320

Glu Glu Glu Glu Val Asp Glu Glu Glu Val Val Glu Glu Glu Glu Asp

                325                 330                 335

Glu Glu Asp Glu Tyr Asp Lys Thr Val Lys Glu Ala His Ala Ser Gly

            340                 345                 350

Glu Val

<210>49

<211>1056

<212>DNA

<213>大豆(Glycine Max)

<400>49

atggataagt atgaggctgt caaggatttg ggagctggga attttggggt ggctaggctc      60

atgaggaaca aggagaccaa ggagcttgtt gccatgaaat acatcgagcg tggccaaaag     120

attgatgaga atgtggcaag agagattatc aaccacagat cccttcggca ccccaatata     180

attcgcttca aggaggtggt tttgaccccc acccatttgg ccatagtgat ggagtatgcg     240

gctggaggag agctctttga gaggatatgc aatgctggca ggttcagtga agatgaggct     300

agatatttct ttcagcagct gatttctggt gtacattact gtcatgccat gcaaatatgt     360

cacagagatt tgaagctaga aaataccctt ttagatggaa gccctgcacc ccgcctgaaa     420

atttgtgact ttggttattc caagtcatca ttacttcatt cacggccaaa atcaactgtt     480

ggaactccag cttatatagc accagaggtt ctttccagga gggagtatga tggcaagttg     540

gctgatgtat ggtcatgtgg agtgactctt tatgtcatgc tggttggagc ttatcccttt     600

gaggatcagg atgaccctag gaattttagg aaaacaattc agcgtataat ggctgttcaa     660

tacaaaatcc ctgattatgt tcacatatct caagactgca gacacctcct ttctcgtata     720

tttgtagcaa atccattaag gaggatctct cttaaggaaa ttaagagcca cccatggttt     780

ttaaagaatc ttccaagaga gctgactgaa tcagctcaag ctgtctatta ccagagaggc     840

aatccaagct tttcaattca aagtgtggag gagatcatga agattgtggg agaggcaagg     900

gaccctcctc cagtatctag acctgtcaaa ggttttggct gggatggcga agaagatgaa     960

ggggaagaag acgtggagga agaggaggac gaagaagacg agtatgacaa gagggtcaaa    1020

gaggttcatg caagtggaga atttcaaatc agttaa                              1056

<210>50

<211>351

<212>PRT

<213>大豆

<400>50

Met Asp Lys Tyr Glu Ala Val Lys Asp Leu Gly Ala Gly Asn Phe Gly

1               5                   10                  15

Val Ala Arg Leu Met Arg Asn Lys Glu Thr Lys Glu Leu Val Ala Met

            20                  25                  30

Lys Tyr Ile Glu Arg Gly Gln Lys Ile Asp Glu Asn Val Ala Arg Glu

        35                  40                  45

Ile Ile Asn His Arg Ser Leu Arg His Pro Asn Ile Ile Arg Phe Lys

    50                  55                  60

Glu Val Val Leu Thr Pro Thr His Leu Ala Ile Val Met Glu Tyr Ala

 65                 70                  75                  80

Ala Gly Gly Glu Leu Phe Glu Arg Ile Cys Asn Ala Gly Arg Phe Ser

                85                  90                  95

Glu Asp Glu Ala Arg Tyr Phe Phe Gln Gln Leu Ile Ser Gly Val His

            100                 105                 110

Tyr Cys His Ala Met Gln Ile Cys His Arg Asp Leu Lys Leu Glu Asn

        115                 120                 125

Thr Leu Leu Asp Gly Ser Pro Ala Pro Arg Leu Lys Ile Cys Asp Phe

    130                 135                 140

Gly Tyr Ser Lys Ser Ser Leu Leu His Ser Arg Pro Lys Ser Thr Val

145                 150                 155                 160

Gly Thr Pro Ala Tyr Ile Ala Pro Glu Val Leu Ser Arg Arg Glu Tyr

                165                 170                 175

Asp Gly Lys Leu Ala Asp Val Trp Ser Cys Gly Val Thr Leu Tyr Val

            180                 185                 190

Met Leu Val Gly Ala Tyr Pro Phe Glu Asp Gln Asp Asp Pro Arg Asn

        195                 200                 205

Phe Arg Lys Thr Ile Gln Arg Ile Met Ala Val Gln Tyr Lys Ile Pro

    210                 215                 220

Asp Tyr Val His Ile Ser Gln Asp Cys Arg His Leu Leu Ser Arg Ile

225                 230                 235                 240

Phe Val Ala Asn Pro Leu Arg Arg Ile Ser Leu Lys Glu Ile Lys Ser

                245                 250                 255

His Pro Trp Phe Leu Lys Asn Leu Pro Arg Glu Leu Thr Glu Ser Ala

            260                 265                 270

Gln Ala Val Tyr Tyr Gln Arg Gly Asn Pro Ser Phe Ser Ile Gln Ser

        275                 280                 285

Val Glu Glu Ile Met Lys Ile Val Gly Glu Ala Arg Asp Pro Pro Pro

    290                 295                 300

Val Ser Arg Pro Val Lys Gly Phe Gly Trp Asp Gly Glu Glu Asp Glu

305                 310                 315                 320

Gly Glu Glu Asp Val Glu Glu Glu Glu Asp Glu Glu Asp Glu Tyr Asp

                325                 330                 335

Lys Arg Val Lys Glu Val His Ala Ser Gly Glu Phe Gln Ile Ser

            340                 345                 350

<210>51

<211>1050

<212>DNA

<213>大豆

<400>51

atggataagt acgaggctgt taaggatttg ggagctggca attttggggt ggctaggctc      60

atgaggaaca aggtcaccaa ggagcttgta gccatgaaat acatcgagcg tggccccaag     120

attgatgaga acgtggcaag ggagattatg aaccacaggt cccttcggca tcccaatata     180

attcgttaca aggaggtggt tttgactccc acacatttag caatagtgat ggagtatgca     240

gcaggaggag agctctttga gaggatatgc agtgctggca ggttcagtga agatgaggct     300

agatatttct ttcagcagct gatttccggt gttcatttct gtcataccat gcaaatatgc     360

cacagagatt tgaagctaga aaataccctt ctagatggaa gtcctgcacc tcggttgaaa     420

atttgtgact tcggttattc caagtcatct ttgctgcact cacgacccaa atcaacagtt     480

ggaacaccag cttacatagc accggaagtt ctttctaggc gagagtatga cggaaagttg     540

gctgatgtat ggtcatgtgc ggtgactctt tatgtcatgc tggttggagc atatcccttt     600

gaggaccagg atgaccctag gaattttagg aaaacaattc agcgtataat ggctgttcaa     660

tacaaaatcc ctgattatgt tcacatatct caagattgta ggcacctcct ctctcgtata     720

tttgttgcaa atccattgag gagaattact attaaggaaa ttaagaatca cccatggttt     780

ttgaggaatc ttccaaggga gctaactgaa tctgctcaag ctatctatta ccagagagac     840

agcccaaact ttcaccttca aagtgtggat gagataatga aaattgtagg agaggcaaga     900

aatccacctc cagtatctag ggctctcaaa ggttttggct gggaaggtga agaagatttg     960

gatgaagaag tggaggaaga agaggatgaa gatgagtatg ataagagggt caaagaggtt    1020

catgcaagtg gcgaatttca aattagttaa                                     1050

<210>52

<211>349

<212>PRT

<213>大豆

<400>52

Met Asp Lys Tyr Glu Ala Val Lys Asp Leu Gly Ala Gly Asn Phe Gly

1               5                   10                  15

Val Ala Arg Leu Met Arg Asn Lys Val Thr Lys Glu Leu Val Ala Met

            20                  25                  30

Lys Tyr Ile Glu Arg Gly Pro Lys Ile Asp Glu Asn Val Ala Arg Glu

        35                  40                  45

Ile Met Asn His Arg Ser Leu Arg His Pro Asn Ile Ile Arg Tyr Lys

    50                  55                  60

Glu Val Val Leu Thr Pro Thr His Leu Ala Ile Val Met Glu Tyr Ala

65                  70                  75                  80

Ala Gly Gly Glu Leu Phe Glu Arg Ile Cys Ser Ala Gly Arg Phe Ser

                85                  90                  95

Glu Asp Glu Ala Arg Tyr Phe Phe Gln Gln Leu Ile Ser Gly Val His

            100                 105                 110

Phe Cys His Thr Met Gln Ile Cys His Arg Asp Leu Lys Leu Glu Asn

        115                 120                 125

Thr Leu Leu Asp Gly Ser Pro Ala Pro Arg Leu Lys Ile Cys Asp Phe

    130                 135                 140

Gly Tyr Ser Lys Ser Ser Leu Leu His Ser Arg Pro Lys Ser Thr Val

145                 150                 155                 160

Gly Thr Pro Ala Tyr Ile Ala Pro Glu Val Leu Ser Arg Arg Glu Tyr

                165                 170                 175

Asp Gly Lys Leu Ala Asp Val Trp Ser Cys Ala Val Thr Leu Tyr Val

            180                 185                 190

Met Leu Val Gly Ala Tyr Pro Phe Glu Asp Gln Asp Asp Pro Arg Asn

        195                 200                 205

Phe Arg Lys Thr Ile Gln Arg Ile Met Ala Val Gln Tyr Lys Ile Pro

    210                 215                 220

Asp Tyr Val His Ile Ser Gln Asp Cys Arg His Leu Leu Ser Arg Ile

225                 230                 235                 240

Phe Val Ala Asn Pro Leu Arg Arg Ile Thr Ile Lys Glu Ile Lys Asn

                245                 250                 255

His Pro Trp Phe Leu Arg Asn Leu Pro Arg Glu Leu Thr Glu Ser Ala

            260                 265                 270

Gln Ala Ile Tyr Tyr Gln Arg Asp Ser Pro Asn Phe His Leu Gln Ser

        275                 280                 285

Val Asp Glu Ile Met Lys Ile Val Gly Glu Ala Arg Asn Pro Pro Pro

    290                 295                 300

Val Ser Arg Ala Leu Lys Gly Phe Gly Trp Glu Gly Glu Glu Asp Leu

305                 310                 315                 320

Asp Glu Glu Val Glu Glu Glu Glu Asp Glu Asp Glu Tyr Asp Lys Arg

                325                 330                 335

Val Lys Glu Val His Ala Ser Gly Glu Phe Gln Ile Ser

            340                 345

<210>53

<211>1071

<212>DNA

<213>烟草(Nicotiana tabacum)

<400>53

atggataaat acgagcttgt gaaagatata gggtcaggga attttggtgt ggcaaggctg      60

atgaggcaca aggaaaccaa agaacttgtg gcaatgaaat acattgagag aggacataag     120

attgatgaga atgtagcaag ggagatcatt aatcatagat cgcttcggca tccaaacata     180

attcgattca aggaggtgtt agtgactccc actcatcttg ccattgttat ggaatatgca     240

gctggtggag aactgtttga gcgcatttgc aatgcaggaa ggtttagtga agatgaggct     300

aggtactttt tccagcagct tatttcagga gttcactact gtcacaacat gcaaatatgc     360

catagagatt tgaagctgga gaatacgctt cttgatggaa gtccagctcc acgcttgaag     420

atatgtgatt ttggatactc aaagtcgtcc ctgttgcatt cgaggccaaa atcaactgtt     480

gggactccag cttatattgc tcctgaggtc ctatcaagaa gagaatatga tggcaagctg     540

gctgatgttt ggtcatgcgg ggtgacactt tatgtgatgc tggttggggc atatcctttt     600

gaagatcagg aggatccgaa gaattttagg aaaactattc aacgaataat ggcggtacag     660

tacaagattc ccgactatgt tcacatatca caagattgta ggcaccttct ctctcggata     720

tttgttgcta atccagcaag gaggatcaca atcaaagaaa tcaagtctca cccatggttt     780

ttgaagaatt tgccgaggga attaacagaa gcagcacagg cagcttatta cagaagagaa     840

aacccaacat tttcacttca gagtgttgag gagatcatga aaattgtgga agaggcaaag     900

actcccgctc cagcttcccg ttcagtctca ggctttggct ggggaggaga agaagaagaa     960

gaggagaagg aaggagatgt agaagaagag gaagaggatg aagaagaaga agacgaatat    1020

gaaaagcaag tgaagcaggc acatgaaagc ggagaagttc gtctcaccta a             1071

<210>54

<211>356

<212>PRT

<213>烟草

<400>54

Met Asp Lys Tyr Glu Leu Val Lys Asp Ile Gly Ser Gly Asn Phe Gly

1               5                   10                  15

Val Ala Arg Leu Met Arg His Lys Glu Thr Lys Glu Leu Val Ala Met

            20                  25                  30

Lys Tyr Ile Glu Arg Gly His Lys Ile Asp Glu Asn Val Ala Arg Glu

        35                  40                  45

Ile Ile Asn His Arg Ser Leu Arg His Pro Asn Ile Ile Arg Phe Lys

    50                  55                  60

Glu Val Leu Val Thr Pro Thr His Leu Ala Ile Val Met Glu Tyr Ala

65                  70                  75                  80

Ala Gly Gly Glu Leu Phe Glu Arg Ile Cys Asn Ala Gly Arg Phe Ser

                85                  90                  95

Glu Asp Glu Ala Arg Tyr Phe Phe Gln Gln Leu Ile Ser Gly Val His

            100                 105                 110

Tyr Cys His Asn Met Gln Ile Cys His Arg Asp Leu Lys Leu Glu Asn

        115                 120                 125

Thr Leu Leu Asp Gly Ser Pro Ala Pro Arg Leu Lys Ile Cys Asp Phe

    130                 135                 140

Gly Tyr Ser Lys Ser Ser Leu Leu His Ser Arg Pro Lys Ser Thr Val

145                 150                 155                 160

Gly Thr Pro Ala Tyr Ile Ala Pro Glu Val Leu Ser Arg Arg Glu Tyr

                165                 170                 175

Asp Gly Lys Leu Ala Asp Val Trp Ser Cys Gly Val Thr Leu Tyr Val

            180                 185                 190

Met Leu Val Gly Ala Tyr Pro Phe Glu Asp Gln Glu Asp Pro Lys Asn

        195                 200                 205

Phe Arg Lys Thr Ile Gln Arg Ile Met Ala Val Gln Tyr Lys Ile Pro

    210                 215                 220

Asp Tyr Val His Ile Ser Gln Asp Cys Arg His Leu Leu Ser Arg Ile

225                 230                 235                 240

Phe Val Ala Asn Pro Ala Arg Arg Ile Thr Ile Lys Glu Ile Lys Ser

                245                 250                 255

His Pro Trp Phe Leu Lys Asn Leu Pro Arg Glu Leu Thr Glu Ala Ala

            260                 265                 270

Gln Ala Ala Tyr Tyr Arg Arg Glu Asn Pro Thr Phe Ser Leu Gln Ser

        275                 280                 285

Val Glu Glu Ile Met Lys Ile Val Glu Glu Ala Lys Thr Pro Ala Pro

    290                 295                 300

Ala Ser Arg Ser Val Ser Gly Phe Gly Trp Gly Gly Glu Glu Glu Glu

305                 310                 315                 320

Glu Glu Lys Glu Gly Asp Val Glu Glu Glu Glu Glu Asp Glu Glu Glu

                325                 330                 335

Glu Asp Glu Tyr Glu Lys Gln Val Lys Gln Ala His Glu Ser Gly Glu

            340                 345                 350

Val Arg Leu Thr

        355

<210>55

<211>2193

<212>DNA

<213>稻

<400>55

aatccgaaaa gtttctgcac cgttttcacc ccctaactaa caatataggg aacgtgtgct      60

aaatataaaa tgagacctta tatatgtagc gctgataact agaactatgc aagaaaaact     120

catccaccta ctttagtggc aatcgggcta aataaaaaag agtcgctaca ctagtttcgt     180

tttccttagt aattaagtgg gaaaatgaaa tcattattgc ttagaatata cgttcacatc     240

tctgtcatga agttaaatta ttcgaggtag ccataattgt catcaaactc ttcttgaata     300

aaaaaatctt tctagctgaa ctcaatgggt aaagagagag atttttttta aaaaaataga     360

atgaagatat tctgaacgta ttggcaaaga tttaaacata taattatata attttatagt     420

ttgtgcattc gtcatatcgc acatcattaa ggacatgtct tactccatcc caatttttat     480

ttagtaatta aagacaattg acttattttt attatttatc ttttttcgat tagatgcaag     540

gtacttacgc acacactttg tgctcatgtg catgtgtgag tgcacctcct caatacacgt     600

tcaactagca acacatctct aatatcactc gcctatttaa tacatttagg tagcaatatc     660

tgaattcaag cactccacca tcaccagacc acttttaata atatctaaaa tacaaaaaat     720

aattttacag aatagcatga aaagtatgaa acgaactatt taggtttttc acatacaaaa     780

aaaaaaagaa ttttgctcgt gcgcgagcgc caatctccca tattgggcac acaggcaaca     840

acagagtggc tgcccacaga acaacccaca aaaaacgatg atctaacgga ggacagcaag     900

tccgcaacaa ccttttaaca gcaggctttg cggccaggag agaggaggag aggcaaagaa     960

aaccaagcat cctcctcctc ccatctataa attcctcccc ccttttcccc tctctatata    1020

ggaggcatcc aagccaagaa gagggagagc accaaggaca cgcgactagc agaagccgag    1080

cgaccgcctt cttcgatcca tatcttccgg tcgagttctt ggtcgatctc ttccctcctc    1140

cacctcctcc tcacagggta tgtgcccttc ggttgttctt ggatttattg ttctaggttg    1200

tgtagtacgg gcgttgatgt taggaaaggg gatctgtatc tgtgatgatt cctgttcttg    1260

gatttgggat agaggggttc ttgatgttgc atgttatcgg ttcggtttga ttagtagtat    1320

ggttttcaat cgtctggaga gctctatgga aatgaaatgg tttagggtac ggaatcttgc    1380

gattttgtga gtaccttttg tttgaggtaa aatcagagca ccggtgattt tgcttggtgt    1440

aataaaagta cggttgtttg gtcctcgatt ctggtagtga tgcttctcga tttgacgaag    1500

ctatcctttg tttattccct attgaacaaa aataatccaa ctttgaagac ggtcccgttg    1560

atgagattga atgattgatt cttaagcctg tccaaaattt cgcagctggc ttgtttagat    1620

acagtagtcc ccatcacgaa attcatggaa acagttataa tcctcaggaa caggggattc    1680

cctgttcttc cgatttgctt tagtcccaga attttttttc ccaaatatct taaaaagtca    1740

ctttctggtt cagttcaatg aattgattgc tacaaataat gcttttatag cgttatccta    1800

gctgtagttc agttaatagg taatacccct atagtttagt caggagaaga acttatccga    1860

tttctgatct ccatttttaa ttatatgaaa tgaactgtag cataagcagt attcatttgg    1920

attatttttt ttattagctc tcaccccttc attattctga gctgaaagtc tggcatgaac    1980

t9tcctcaat tttgttttca aattcacatc gattatctat gcattatcct cttgtatcta    2040

cctgtagaag tttctttttg gttattcctt gactgcttga ttacagaaag aaatttatga    2100

agctgtaatc gggatagtta tactgcttgt tcttatgatt catttccttt gtgcagttct    2160

tggtgtagct tgccactttc accagcaaag ttc                                 2193

Claims (28)

1.相对于对应的野生型植物，改良植物生长特性的方法，其包括增加SnRK2多肽或其同源物的活性，和/或通过增加SnRK2编码核酸分子的表达，以及任选选择具有改良生长特性的植物。

2.权利要求1的方法，其中所述增加活性和/或增加表达通过优选在SnRK2多肽或其同源物的编码基因的基因座中引入遗传修饰来实现。

3.权利要求2的方法，其中所述遗传修饰通过定点诱变、同源重组、TILLING、定向进化和T-DNA激活中的一种来实现。

4.相对于对应的野生型植物，改良植物生长特性的方法，其包括在植物中引入和表达SnRK2核酸分子或其功能性变体。

5.权利要求4的方法，其中所述功能性变体是部分SnRK2核酸分子或能够与SnRK2核酸分子杂交的序列，其中所述功能性变体包含激酶结构域、SEQ ID NO：6的保守性序列特征以及酸性C端结构域。

6.权利要求4或5的方法，其中所述SnRK2核酸分子或其功能性变体在植物中过量表达。

7.根据权利要求4到6中任一项的方法，其中所述SnRK2核酸分子或其功能性变体是植物来源的，优选来自双子叶植物，进一步优选来自十字花科，所述核酸更优选来自拟南芥。

8.根据权利要求4到7中任一项的方法，其中所述功能性变体编码SnRK2的直系同源物或旁系同源物。

9.根据权利要求4到8中任一项的方法，其中所述SnRK2核酸分子或其功能性变体与组成型启动子有效连接。

10.根据权利要求9的方法，其中所述组成型启动子是GOS2启动子。

11.根据权利要求1到10中任一项的方法，其中所述改良的植物生长特性是增加的产量。

12.根据权利要求11的方法，其中所述增加的产量是增加的生物量和/或增加的种子产量。

13.根据权利要求12的方法，其中所述增加的种子产量选自(i)增加的种子生物量；(ii)增加的(饱满)种子数；(iii)增加的种子尺寸；(iv)增加的种子体积；(v)增加的收获指数(HI)；以及(vi)增加的千粒重(TKW)中的任一项或多项。

14.根据权利要求1到13中任一项的方法获得的植物或植物细胞。

15.构建体，其包括：

(i)SnRK2核酸分子或其功能性变体；

(ii)能够驱动(i)中核酸序列表达的一个或多个调控序列；及任选的

(iii)转录终止序列。

16.根据权利要求15的构建体，其中所述调控序列是组成型启动子。

17.根据权利要求16的构建体，其中所述组成型启动子是GOS2启动子。

18.根据权利要求15到17中任一项的构建体转化的植物或植物细胞。

19.制备具有改良生长特性的转基因植物的方法，所述方法包括：

(i)向植物中引入SnRK2核酸分子或其功能性变体；

(ii)在促进植物生长和发育的条件下培养植物细胞。

20.相对于对应的野生型植物，具有改良生长特性的转基因植物或植物细胞，所述改良生长特性由引入所述植物或植物细胞中的SnRK2核酸分子或其功能性变体产生，或由优选在SnRK2多肽或其同源物的编码基因的基因座中的遗传修饰产生。

21.根据权利要求14、18或20的转基因植物或植物细胞，其中所述植物是单子叶植物，如甘蔗，或其中植物是谷类，如稻、玉米、小麦、大麦、粟、黑麦、燕麦或高粱；或其中所述植物细胞来自单子叶植物，如甘蔗，或其中所述植物细胞来自谷类，如稻、玉米、小麦、大麦、粟、黑麦、燕麦或高粱。

22.根据权利要求14、18、20或21中任一项的植物的可收获部分，和/或直接来自其的产物。

23.根据权利要求22的可收获部分，其中所述可收获部分是种子。

24.SnRK2核酸分子或其功能性变体的用途，或者SnRK2多肽或其同源物的用途，其用于改良植物的生长特性，特别是改良产量，尤其是改良生物量和/或种子产量。

25.根据权利要求24的用途，其中所述改良的种子产量至少包括增加的千粒重。

26.SnRK2核酸分子或其功能性变体作为分子标记的用途。

27.用于改良植物的生长特性，优选用作生长调节剂的组合物，其包含SnRK2核酸分子或其功能性变体。

28.用于改良植物的生长特性，优选用作生长调节剂的组合物，其包含SnRK2蛋白质或其同源物。

Images