CN101004420A - 一种多肽标志物在大肠肿瘤检测和术后监测的应用 - Google Patents
一种多肽标志物在大肠肿瘤检测和术后监测的应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN101004420A CN101004420A CN 200710066792 CN200710066792A CN101004420A CN 101004420 A CN101004420 A CN 101004420A CN 200710066792 CN200710066792 CN 200710066792 CN 200710066792 A CN200710066792 A CN 200710066792A CN 101004420 A CN101004420 A CN 101004420A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- colorectal cancer
- serum
- large bowel
- related polypeptide
- postoperative
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Images
Landscapes
- Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)
Abstract
本发明公开了一种命名为大肠癌相关多肽1的标志物在大肠肿瘤检测和术后监测的应用，以及利用这种多肽标志物的检测方法。大肠癌相关多肽1具有以下特征：存在与人血清中，是纤维蛋白原α链(fibrinogen αchain)的一个片断；含有以下两段氨基酸序列：gsesgiftntk和qftsstsynrgdstfesk；精确分子量为5903道尔顿。大肠癌和大肠癌术后复发或转移中该大肠癌相关多肽1在血清标本中表达明显升高。用表面加强激光解吸电离－飞行时间质谱仪或其他方法测定大肠肿瘤患者或健康人的血清大肠癌相关多肽的含量，以此来检测大肠肿瘤，测定大肠肿瘤患者术后血清标本以预测大肠癌患者是否术后复发或转移。
Description
技术领域
本发明属于生物技术领域，涉及一种多肽标志物的应用，具体为一种可用于大肠肿瘤进行早期检测，手术后监测和预后评估的多肽标志物的应用。
背景技术
大肠癌是人类复杂疾病之一，是我国常见的九大恶性肿瘤之一。据全国肿瘤防治办公室最近发表的统计结果，大肠癌调整死亡率列为第5位主要恶性肿瘤，在大城市的发病率男性为第三位，女性为第二位。尽管近年来大肠癌的诊断、治疗有了长足的进展，但大肠癌的总体疗效并无明显改善，手术后5年生存率仍徘徊在50％左右。而早期大肠癌患者预后较好，5年生存率达90％～100％。若能提高早期大肠癌的诊断率，即可明显提高大肠癌的总体治疗效果。但由于多种原因，目前到医院就诊的患者中，2/3为中晚期癌，大肠癌术后的复发转移严重影响着患者的生存率，因此若能对大肠癌的预后进行准确的估计、对术后的辅助治疗进行合理选择，以及对复发和转移进行早期检测将是解决这一问题的关键，从而提高大肠癌患者的总体生存率。
就目前而言，在大肠癌的早期诊断、预后估计、复发或转移的早期检测中均存在着不同的困难。如大肠癌早期诊断和筛检的方法很多，但存在特异性与敏感性之间的矛盾；Dukes分期或TNM分期在预后的估计尚存在很多的缺陷，以无淋巴结转移的Dukes’B期的患者为例，也有近30％的患者在5年内死于肿瘤复发或远处转移；大肠癌70％的复发或转移病人在2年内出现，通过症状、常规体检发现肿瘤复发转移时已失去治疗时机，而影像学、相关癌基因或肿瘤标记物的检测仍存在假阳性率及假阴性率高的问题。
表面加强激光解吸电离-飞行时间质谱(Surface Enhanced Laser Desorption/Ionization-Timeof Flight-Mass Spectrometry SELDI-TOF-MS)技术是最近几年才发展起来的一种新的蛋白质组学研究方法，其根本的原理是通过使用特异的探针表面俘获蛋白质来增强亲合力。SELDI可以克服二维凝胶电泳存在的内在问题，包括疏水性问题、强酸性、强碱性的蛋白质的分离、膜蛋白的分离问题、低分子量检测的灵敏性、低丰度蛋白质的灵敏性问题。蛋白质只要与SELDI蛋白质芯片结合，就可通过质谱仪按蛋白质质量、电荷比(m/z)的不同及量的多寡用位置、强弱不同的峰直观的表现出来，进而形成相应图谱，用于分析、判别。
由于SELDI蛋白质芯片技术的高灵敏度及能高通量的反映被检样本中蛋白质的全貌进而同时找到多个蛋白质标志物，国外学者已将其用于血清、尿液、胰液、乳头溢液等的检测来分别诊断卵巢癌、前列腺癌、膀胱癌、胰腺癌、乳腺癌等恶性肿瘤，筛选新的肿瘤标志物，均得到了较为理想的结果。纵观这些研究可以发现，虽然找到了众多候选标志物进而建立了针对某一肿瘤的蛋白质指纹图谱诊断模型，模型的诊断灵敏度、特异度也均较高，但对具体各标志蛋白质实质的探究则较为困难。目前国内外报道的肿瘤蛋白质标志物的鉴定方法主要是将样本通过色谱纯化，SDS-PAGE凝胶电泳再用胰酶消化，再用MALDI分析肽谱或MS/MS检测出部分序列，然后通过网上比对鉴定蛋白质。如Jingzhong Guo等05年从子宫内膜癌中鉴定两个标志物Calgranulin A和chaperonin 10；Zhen Zhang等从卵巢癌中鉴定三个标志物：载脂蛋白A1，去顶端的transthyretin，inter-α-trypsin inhibitor重链H4的一个碎片。
用SELDI质谱法发现的绝大多数新候选标志物到底为何种蛋白质、其在肿瘤发生发展过程中的作用目前尚不清楚，存在的研究空间很大。如何纯化、分析和鉴定这些标志物也成为肿瘤蛋白质组学的一个重要课题。
发明内容
本发明的目的是提供一种可用于大肠肿瘤早期检测，手术后监测和预后评估的多肽标志物，以及利用这种多肽标志物的检测方法。
利用LC-MS/MS技术鉴定大肠肿瘤样本在5.9kDa位置蛋白为纤维蛋白原α链(fibrinogenα chain)的一个片断，本发明将该片断命名为：大肠癌相关多肽1。大肠癌相关多肽1具有以下特征：存在与人血清中，是纤维蛋白原α链(fibrinogen α chain)的一个片断；含有以下两段氨基酸序列：SEQID NO.1 gsesgiftntk和SEQID NO.2 qftsstsynrgdstfesk；精确分子量为5903道尔顿。大肠癌和大肠癌术后复发或转移中该大肠癌相关多肽1在血清标本中表达明显升高。
大肠癌相关多肽1在大肠肿瘤检测和大肠肿瘤手术后监测的应用方法为：用表面加强激光解吸电离-飞行时间质谱仪或其他方法测定大肠肿瘤患者或健康人的血清大肠癌相关多肽的含量，以此来检测大肠肿瘤；用表面加强激光解吸电离-飞行时间质谱仪或其他方法测定大肠肿瘤患者术后随访的血清中大肠癌相关多肽1的含量，以预测大肠癌患者是否术后复发或转移。
利用这种多肽标志物对大肠癌的检测具体通过以下方案实现：
(1)用表面加强激光解吸电离-飞行时间质谱(SELDI)仪测定大肠肿瘤患者与健康人血清标本的5.9kDa位置蛋白的差异图谱；
(2)用表面加强激光解吸电离-飞行时间质谱(SELDI)仪检测大肠肿瘤患者术前和术后3月、6月、12月和18月的血清标本的5.9kDa位置蛋白表达变化；
(3)利用LC-MS/MS技术鉴定5.9kDa位置蛋白为纤维蛋白原α链(fibrinogen α chain)的一个片断，即大肠癌相关多肽1；
(4)用相应的抗体验证5.9kDa位置蛋白为大肠癌相关多肽1。
本发明采用疏水结合表面(H4)芯片和弱阳离子交换芯片(cm10)(Ciphergen)检测大肠肿瘤术前样本和术后样本及健康对照样本。发现大肠肿瘤样本在5.9kDa位置表达显著高于健康对照样本。进一步对一组大肠肿瘤患者术前和术后3月、6月、12月和18月的5.9kDa位置蛋白表达变化进行检测，发现同一病人术后3个月5.9kDa位置蛋白表达均降低，术后6月、12月和18月再次升高的病人中有66.7％出现了复发或转移。进一步鉴定5.9kDa位置蛋白如下：大肠癌患者血清先用SPE柱(反相，乙腈梯度)初步分离(用SELDI-TOF-MS监测目标蛋白所在的洗提组分)，用冰冻干燥仪富集。重新溶解后用高效液相色谱-质谱联用仪(HPLC-MS)分离纯化(用MALDI-TOF-MS监测目标蛋白所在的洗提组分)，将目标洗提组分进一步用胰酶消化，用LC/MS/MS将其中几个片断测序，确定氨基酸序列并到MASCOT上比对以确定目标蛋白质峰的来源。确定蛋白质一级序列后购买相应的抗体，并用抗体与高表达样本结合，将相应的蛋白质结合掉再用质谱检测以验证5.9kDa位置蛋白为纤维蛋白原α链(fibrinogen α chain)的一个片断(命名为大肠癌相关多肽1)。
对大肠癌患者的进行术后监测，并指导术后治疗是影响生存率的关键因素之一。本发明发现纤维蛋白原α链(fibrinogen α chain)的一个片断(命名为大肠癌相关多肽1)可用于大肠肿瘤的早期检测，并且通过血清中大肠癌相关多肽1的监测，可预测大肠癌术后复发与转移的潜能，严密随访高危病人，对进一步提高目前大肠癌的诊治水平和术后生存率具有一定的意义。大肠癌相关多肽1具有以下特征：存在与人血清中，是纤维蛋白原α链(fibrinogen αchain)的一个片断；含有以下两段氨基酸序列gsesgiftntk和qftsstsynrgdstfesk；精确分子量为5903道尔顿。本定义下的大肠癌相关多肽1可用于制备各种检测试剂或用质谱等其他方法用检测其在人血清中的含量，以用于大肠癌的早期检测，手术后监测和预后评估。
本发明应用SELDI质谱仪，LC/MS/MS分离鉴定技术等，首次发现大肠癌相关多肽1可用于大肠肿瘤早期检测，手术后监测和预后评估。本发明为肿瘤的早期发现、早期检测提供了新的标志物，并且通过大肠癌相关多肽1的检测可预测大肠癌术后复发与转移的潜能，严密随访高危病人，对进一步提高目前大肠癌的诊治水平和术后生存率具有一定的意义。
附图说明
图1：肿瘤样本与相应抗体结合反应：1为未与相应抗体反应的血清，2为与相应抗体反应过后的血清。
图2：大肠癌相关多肽1蛋白质在大肠癌中高表达：下为肿瘤。
图3：6例患者不同时期血清大肠癌相关多肽1的相对强度的变化趋势：其中C4、C5、C8、C10在术后12月-18月后出现复发或转移(影像学或病理明确)，C1和C10尚在随访中。横坐标中1、2、3、4、5各代表术前、术后3、术后6、术后12、术后18月时的血清标本。
具体实施方式
本发明将结合具体实施例作进一步说明，这些实例仅用于说明目的，而不用于限制本发明范围。
实施例一 大肠癌相关蛋白质的鉴定
分离用的样本为1ml大肠癌患者血清标本。血清先用SPE柱(反相，乙腈梯度)初步分离(用SELDI-TOF-MS监测目标蛋白所在的洗提组分)，用冰冻干燥仪富集。重新溶解后用高效液相色谱-质谱联用仪(HPLC-MS)分离纯化(用MALDI-TOF-MS监测目标蛋白所在的洗提组分)，将目标洗提组分进一步用胰酶消化，用LC/MS/MS将其中几个片段测序，确定氨基酸序列并到MASCOT(MatrixScience，
www.matrixscience.com)上比对以确定目标蛋白质峰的来源。确定蛋白质一级序列后购买相应的抗体，并用抗体与高表达样本结合(在PBS溶液中常温孵育过夜)，将相应的蛋白质结合掉再用质谱检测以验证结果。
纯化的组分经胰酶消化选取分子量为2040.8、1189.5和1139.5的3个峰进入LC/MS/MS测序，测序的结果如下：
分子量2040.8：
qftsstsyn rgdstfesk
分子量1189.5：
qftsstsyn r
分子量1139.5：
gse sgiftntk
用这3个分子量片断的氨基酸序列分别在网上比对，均与一个纤维蛋白的片断相匹配，其完整序列如序列表中SEQID NO.3所示。
用相应的羊抗人抗体与人大肠癌血清样本反应过夜后经SELDI检测5.9kDa这个峰明显消失(见图1)。
本部分研究建立了鉴定血清蛋白质质谱筛选的低丰度小分子量蛋白质或多肽的方法。用SPE柱富集蛋白质，LC-MS分离并确定蛋白，将分离的组分用胰蛋白酶消化，再将其用MS-MS测序，对一个在大肠癌中表达显著升高的蛋白质做了鉴定，鉴定的结果为纤维蛋白原α链(fibrinogen α chain)的一个片断，命名为大肠癌相关多肽1。并用抗体结合验证了其为目标蛋白质峰。
实施例二 大肠癌相关多肽1在大肠癌和对照样本中的差异表达
55例大肠癌，92例健康人的血清标本用H4芯片结合并用SELDI质谱仪检测。进一步用CM10芯片检测大肠癌样本124例，健康对照46验证大肠癌相关多肽1的差异性
1芯片的预处理
l芯片装入96孔蛋白质芯片工作支架Bio-processor中，记下芯片号。
l每孔中加入200μl与芯片相对应的Binding Buffer：
H4：20mM HEPES(pH＝7.4)
CM10：50mM乙酸钠(pH＝4.0)
l摇床上振荡(600rpm，室温)5分钟使充分平衡后去除液体，重复平衡一次。
2血清的预处理
l冰浴上缓慢融解血清(30～60分钟)，10000rpm离心5分钟(4℃)。
l10μl U9血清处理液中加入血清5μL，摇床上振荡使充分混合(600rpm，4℃，30分钟)。
l用Binding Buffer将U9处理后的血清稀释至200μl用于上样，摇床上振荡使充分混合(600rpm，4℃，2分钟)。至此血清被稀释约40倍。
3蛋白质与芯片结合
l取上述经U9处理并稀释过的血清100μl加到芯片上，仔细检查并去除每个孔中的气泡以免其影响蛋白质与芯片的结合。
l芯片与血清充分反应1小时(600rpm摇床上振荡，4℃)后去除样品。
4结合后冲洗
l每孔加入200μl相应的Binding Buffer，摇床上振荡5分钟(600rpm，室温)后除去液体。重复该过程2次。
l用水(纯度HPLC级)200μl快速清洗每个孔1次，用力甩干并将Bio-processor倒扣在清洁的吸水纸上轻拍以去除多余的水。
l将芯片从Bio-processor中取出，自然干燥。
5点加能量吸收分子(EAM)
每孔点加50％饱和的SPA溶液1μl，待其自然干燥后重复点加1次。自然干燥即可上机检测。
6 SELDI质谱仪参数设置及原始数据采集和输出
首先用已知分子量的标准蛋白质芯片All-in-One将SELDI质谱系统的分子量误差校正到＜0.1％，再将结合好蛋白质的芯片放入质谱仪中进行检测。原始数据由Proteinchip Software 3.2软件采集，设置激光强度为185，检测灵敏度7，检测上限100,000m/z，优化收集数据范围2000～20000m/z，信号收集位置从20～80，每个样本取144个点所收集信号的平均值。用biomarkerwizard聚类并统计差异。
结果如下：
表1大肠癌相关多肽1在大肠癌患者和健康人中的差异表达：
| 健康人 大肠癌 | 统计检验(P) | ||||
| Mean | SD | Mean | SD | ||
| H4芯片 | 0.823603 | 0.50377 | 2.745013 | 1.736805 | 1.2×10-10 |
| CM10芯片 | 34.13483 | 13.95056 | 44.47655 | 15.60364 | 9.37×10-5 |
结果显示大肠癌相关多肽1在大肠癌中表达显著高于健康人(P＜0.01)(见图2)。说明大肠癌相关多肽1在大肠癌的早期诊断中有一定的意义。
实施例三 大肠癌相关多肽1在大肠癌术后检测和预后估计中的应用
1.材料和方法
1.1材料
10例大肠癌患者术前、术后3月、术后6月、术后12月、术后18月的血清标本。
蛋白质芯片选择：H4疏水表面芯片。
1.2实验方法
1.2.1根据大肠癌诊治规范对患者术前和术后3月，6月，12月，18月，24月测定血清CEA，肝胆彩超或CT，骨ECT，胸片，电子肠镜复查。建立基于ACCESS的大肠癌临床与病理资料及术后治疗、随访资料的数据库。
1.2.2实施例二部分的血清蛋白质质谱的实验步骤，测定10例患者不同时期的血清标本的大肠癌相关多肽1表达，比较术前与术后的不同时期差异。
1.3统计方法：
采用SPSS11.0统计软件包
2结果
2.110例大肠癌患者随访检测的结果
对10例大肠癌患者按大肠癌诊治规范术前和术后3月，6月，12月，18月，24月测定血清CEA，肝胆彩超或CT，骨ECT，胸片，电子肠镜复查。复发与转移的确定以影像学发现肿块或病理诊断为准。共有4例病人在术后1年～1年半时出现了复发或转移。6例病
人2年内无瘤生存。见表6.1
表210例大肠癌患者随访检测的结果
| 病例号 | 复发或转移情况 | ||||
| 术后3月 | 术后6月 | 术后12月 | 术后18月 | 术后24月 | |
| C1C2C3 | 无无无 | 无无无 | 无无无 | 无无无 | 无无无 |
| C4C5C6C7C8C9C10 | 无无无无无无无 | 无无无无无无无 | 无无无无复发(盆腔)CT、B超检查无转移至肺部胸片、CT检查 | 转移至肝脏CT、B超检查会阴部肿块，病理明确无无无 | 死亡无无无 |
2.310例大肠癌病人不同时期血清蛋白质指纹图谱的变化
2.3.1术前与术后3月血清标本的大肠癌相关多肽1的变化
10例标本中术前与术后3月的血清蛋白质质谱进行比较研究发现大肠癌相关多肽1明显下降见图3，而其他蛋白无明显的区别，两组之间大肠癌相关多肽1的相对强度的比较有显著的统计学差别。见表3。
表3同一病人术后3月与术前血清中大肠癌相关多肽1的比较
| 术后3月 术前 | |||||
| Mean | SD | Mean | SD | ||
| 大肠癌相关多肽1 | 0.931655 | 0.639674 | 3.943257 | 2.348634 | 0.00121 |
2.3.2术后3月与术后6月、术后12月血清蛋白质指纹图谱的变化
10例标本中术后3月与术后6月、术后12月、术后18月的血清蛋白质质谱进行比较研究发现6例患者的血清标本在术后6月时、术后12月时大肠癌相关多肽1出现上升的趋势(见图3)。6例中有4例病人在术后1年到1年半时间里出现了复发或转移(影像学或病理活检证实)，另2例患者(与术前、术后3月、术后12月的蛋白质指纹图谱比较(见图3)在术后不同时期进行常规的检查(血CEA、螺旋CT、电子肠镜)仍未发现有转移或复发的迹象。在大肠癌相关多肽1升高的样本中有66.7％出现了复发或转移。
以上结果进一步结合临床表型对已建立的患者个体大肠癌相关多肽1检测，可能提提供转移复发预后的可能的信息，对患者个体是一个很有意义的检测指标。
序列表
SEQID NO.1 gsesgiftnt k
SEQID NO.2 qftsstsynr gdstfesk
SEQID NO.3
mfsmrivclv lsvvgtawta dsgegdflae gggvrgprvv erhqsackds dwpfcsdedw
nykcpsgcrm kglidevnqd ftnrinklkn slfeyqknnk dshslttnim eilrgdfssa
nnrdntynrv sedlrsriev lkrkviekvq hiqllqknvr aqlvdmkrle vdidikirsc
rgscsralar evdlkdyedq qkqleqviak dllpsrdrqh lplikmkpvp dlvpgnfksq
lqkvppewka ltdmpqmrme lerpggneit rggstsygtg setesprnps sagswnsgss
gpgstgnrnp gssgtggtat wkpgssgpgs tgswnsgssg tgstgnqnpg sprpgstgtw
npgssergsa ghwtsessvs gstgqwhses gsfrpdspgs gnarpnnpdw gtfeevsgnv
spgtrreyht eklvtskgdk elrtgkekvt sgsttttrrs csktvtktvi gpdghkevtk
evvtsedgsd cpeamdlgtl sgigtldgfr hrhpdeaaff dtastgktfp gffspmlgef
vsetesr
gse sgiftntkes sshhpgiaef psrgksssys kqftsstsyn rgdstfesks
ykmadeagse adhegthstk rghaksrpvr dcddvlqthp sgtqsgifni klpgsskifs
vycdqetslg gwlliqqrmd gslnfnrtwq dykrgfgsln degegefwlg ndylhlltqr
gsvlrveled wagneayaey hfrvgseaeg yalqvssyeg tagdaliegs veegaeytsh
nnmqfstfdr dadqweenca evygggwwyn ncqaanlngi yypggsydpr nnspyeieng
vvwvsfrgad yslravrmki rplvtq
Claims (3)
1、大肠癌相关多肽1在大肠肿瘤检测和大肠肿瘤手术后监测的应用。
2、按权利要求1所述大肠癌相关多肽1，其特征在于：它存在与人的血清中，是纤维蛋白原α链(fibrinogen α chain)的一个片断；含有以下两段氨基酸序列：gsesgiftntk和qftsstsynrgdstfesk；精确分子量为5903道尔顿；大肠癌和大肠癌术后复发或转移中该大肠癌相关多肽1在血清标本中表达明显升高。
3、按权利要求1所述大肠癌相关多肽1在大肠肿瘤检测和大肠肿瘤手术后监测的应用方法为：用表面加强激光解吸电离-飞行时间质谱仪或其他方法测定大肠肿瘤患者或健康人的血清大肠癌相关多肽的含量，以此来检测大肠肿瘤；用表面加强激光解吸电离-飞行时间质谱仪或其他方法测定大肠肿瘤患者术后随访的血清中大肠癌相关多肽1的含量，以预测大肠癌患者是否术后复发或转移。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 200710066792 CN101004420A (zh) | 2007-01-22 | 2007-01-22 | 一种多肽标志物在大肠肿瘤检测和术后监测的应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 200710066792 CN101004420A (zh) | 2007-01-22 | 2007-01-22 | 一种多肽标志物在大肠肿瘤检测和术后监测的应用 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN101004420A true CN101004420A (zh) | 2007-07-25 |
Family
ID=38703699
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN 200710066792 Pending CN101004420A (zh) | 2007-01-22 | 2007-01-22 | 一种多肽标志物在大肠肿瘤检测和术后监测的应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN101004420A (zh) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101839890A (zh) * | 2009-03-20 | 2010-09-22 | 眭维国 | 用于肾移植排斥反应血清多肽检测方法 |
| CN110799841A (zh) * | 2017-06-30 | 2020-02-14 | 国立研究开发法人医药基盘·健康·营养研究所 | 用于检测大肠癌的生物标志物 |
-
2007
- 2007-01-22 CN CN 200710066792 patent/CN101004420A/zh active Pending
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101839890A (zh) * | 2009-03-20 | 2010-09-22 | 眭维国 | 用于肾移植排斥反应血清多肽检测方法 |
| CN101839890B (zh) * | 2009-03-20 | 2012-12-19 | 眭维国 | 用于肾移植排斥反应血清多肽检测方法 |
| CN110799841A (zh) * | 2017-06-30 | 2020-02-14 | 国立研究开发法人医药基盘·健康·营养研究所 | 用于检测大肠癌的生物标志物 |
| CN110799841B (zh) * | 2017-06-30 | 2024-02-02 | 国立研究开发法人医药基盘·健康·营养研究所 | 用于检测大肠癌的生物标志物 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Bhattacharyya et al. | Diagnosis of pancreatic cancer using serum proteomic profiling | |
| US20170248608A1 (en) | Epidermal Growth Factor Receptor (EGFR) Protein SRM Assay | |
| US20120083011A1 (en) | Sensitive Methods for Detecting The Presence of Cancer | |
| JP5384672B2 (ja) | 癌のマーカーとしてのｓ−ＥｒｂＢ−３の使用 | |
| Yang et al. | Identification of candidate biomarkers for the early detection of nasopharyngeal carcinoma by quantitative proteomic analysis | |
| Uemura et al. | Current advances in esophageal cancer proteomics | |
| CN110196329A (zh) | 一种食管癌早期联合检测试剂盒 | |
| EP2525227A1 (en) | A method for detecting pancreatic cancer using the serological marker ULBP2 | |
| CN105092627B (zh) | 用于检测胃癌相关代谢小分子的核磁共振模型及制备方法 | |
| Anjo et al. | A translational view of cells' secretome analysis-from untargeted proteomics to potential circulating biomarkers | |
| JP2008502890A (ja) | 結腸直腸癌のマーカーとしてのｃｂｐ２の使用 | |
| CN105624166B (zh) | 一种检测人膀胱移行细胞癌细胞的核酸适配体及其在制备检测制剂中的应用 | |
| CN101451975A (zh) | 一种检测胃癌预后与分期血清蛋白质的方法 | |
| CN116879558B (zh) | 卵巢癌诊断标志物、检测试剂及检测试剂盒 | |
| US20050202485A1 (en) | Method and compositions for detection of liver cancer | |
| CN101004420A (zh) | 一种多肽标志物在大肠肿瘤检测和术后监测的应用 | |
| Chen et al. | SELDI protein chip technology for the detection of serum biomarkers for liver disease | |
| CN105116000B (zh) | 用于检测胃癌相关代谢小分子的核磁共振模型及制备方法 | |
| CN107942074A (zh) | 一种建立肝癌与正常人诊断模型及肝癌与慢性肝病的诊断模型 | |
| US20050158745A1 (en) | Methods and compositions for detection of nasopharyngeal carcinoma | |
| CN107266567A (zh) | Lcrmp4单克隆抗体及其制备方法与应用 | |
| Zhu et al. | Predicting metachronous liver metastasis from colorectal cancer using serum proteomic fingerprinting | |
| CN103323518A (zh) | 一种结直肠癌晚期蛋白质指纹图谱建模分析方法及试剂盒 | |
| Rong et al. | Increased level of Hsp90-beta in bronchoalveolar lavage fluid correlates with lymphatic invasion and advanced stage of lung cancer patients | |
| Jin et al. | 2‐D DIGE and MALDI‐TOF‐MS analysis of the serum proteome in human osteosarcoma |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C12 | Rejection of a patent application after its publication | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Open date: 20070725 |