CN100569246C - 含有丁苯酞的组合物 - Google Patents

Abstract

本发明涉及丁苯酞、丹参和降香的组合物，具体的说是丁苯酞、丹参提取物或者是丁苯酞、丹参提取物、降香提取物的复方制剂，在预防和治疗脑缺血疾病中的应用。该组合物的药效实验显示具有协同或者相加作用。

Description

含有丁苯酞的组合物

技术领域

本发明涉及丁苯酞、丹参和降香的组合物，具体的说是丁苯酞、丹参和降香提取物用于预防和治疗脑缺血疾病的复方制剂。

背景技术

经在整体动物、细胞和分子生物学等水平深入研究，证明丁苯酞具有以下药理活性：缩小局部脑缺血大鼠脑梗塞面积和改善神经功能缺失；改善局部脑血流量，改善脑微循环；抗血栓的形成和抗血小板的凝聚作用；减轻局部脑缺血大鼠脑水肿；对损伤的神经细胞有保护作用；改善小鼠全脑缺血能量代谢耗竭；改善局部脑缺血大鼠的记忆障碍等，临床上用于治疗急性缺血性脑卒中。

丹参中主要含有脂溶性成分二萜醌类化合物(丹参酮I、丹参酮IIA、丹参酮IIB、隐丹参酮等)及水溶性成分丹参素等酚酸类化合物(丹参素、丹参酚、丹参酸、原儿茶醛等)。这些有效成分能够行气开窍、活血化瘀、疏通阻塞血管，又有较强的钙通道阻滞及β受体拮抗的作用，能促进神经细胞突起再生，可使血管扩张、红细胞变形性增强。降香主要化学成份为挥发油类和黄酮体化合物。降香挥发油灌胃可明显抑制大鼠实验性血栓形成；明显提高孵育兔血小板cAMP的水平，对兔血浆纤溶酶活性有显著促进作用，提示有抗血栓作用。临床上二者常合用于冠心病、心绞痛、心肌梗塞，高血压性脑出血及缺血性心脑血管疾病。

脑血管疾病是目前严重危害人类健康的主要疾病之一，缺血性脑血管病占脑血管病的大多数。随着我国老龄化人口增加，缺血性脑血管病发病率也在不断提高，因此对脑缺血疾病的防治为全社会所关注。近年来，国内外市场对脑缺血疾病的用药虽然各有特点，起到一定作用，但是这些药物治疗脑缺血疾病不够理想。

发明内容

本发明的目的是提供一种含有丁苯酞的组合物，用丹参或降香与之配伍，以及该组合物的合适剂型。

本发明的另一目的是该药物组合物用于预防和治疗脑缺血疾病。

本发明由丁苯酞、丹参提取物组成，所述的丁苯酞、丹参提取物的重量比为1∶1～3。

丹参提取物的制备：丹参加水煎煮三次，第一次加8倍量水，煎煮2小时；第二、三次各加6倍量、5倍量水，每次煎煮1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩；加入乙醇使含醇量达75％，静置40小时，滤过，滤液回收乙醇，浓缩；再加入乙醇使含醇量达85％，静置40小时，滤过，滤液回收乙醇，浓缩；加入水，静置16小时，滤过，滤液浓缩；加乙醇使含醇量达80％，静置24小时，滤过，滤液浓缩至浸膏。

将丁苯酞、丹参提取物加入可药用的赋形剂，制得相应剂型。

将丹参浸膏在搅拌下加入油溶性稀释剂，与丁苯酞相混合，得内容物。

考虑囊重因素，每粒囊重一般以小于500mg为宜，含活性成分丁苯酞50mg，丹参提取物80～120mg，用常规方法制备囊材，加工成软胶囊。

本发明还可以在含有丁苯酞、丹参提取物提取物的基础上，添加降香提取物，丁苯酞、丹参提取物、降香提取物的重量比为1∶1～3∶1～3。

其中丁苯酞选自其消旋体、左旋体或右旋体。

丹参提取物的制备同上。

降香提取物的制备：降香加水浸润，进行水蒸气蒸馏，收集蒸馏液，冷藏24小时，分取油层备用，水溶液浓缩至浸膏。

将丁苯酞、丹参提取物、降香提取物加入可药用的赋形剂，制得相应剂型。

将上述降香浸膏和丹参浸膏在搅拌下加入油溶性稀释剂，与丁苯酞相混合，得内容物。

油溶性稀释剂选自植物油。

考虑囊重因素，每粒囊重一般以500mg为宜，含活性成分丁苯酞50mg，丹参提取物80～120mg，降香提取物80～120mg，用常规方法制备囊材，加工成软胶囊。

经过发明人反复研究，并通过动物实验证实，丹参、降香提取物和丁苯酞合用能改善脑缺血大鼠的神经功能评分和减少脑梗死范围，推断丹参和降香提取物与丁苯酞合用具有相加或者协同作用。

具体实施方式

实施例1、分别制备丹参、降香提取物

降香1000g加水浸润，进行水蒸气蒸馏，收集蒸馏液约500ml，冷藏24小时，分取油层备用，水溶液浓缩至浸膏，得降香提取物。

丹参1000g加水煎煮三次，第一次加8倍量水，煎煮2小时；第二、三次各加6倍量、5倍量水，每次煎煮1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至至670～760ml；加入乙醇使含醇量达75％，静置40小时，滤过，滤液回收乙醇，浓缩至330ml，再加入乙醇使含醇量达85％，静置40小时，滤过，滤液回收乙醇，浓缩至200～300ml，阿加入注射用水1000～1650ml，静置16小时，滤过，滤液浓缩至330ml，加乙醇使含醇量达80％，静置24小时，滤过，滤液浓缩至浸膏，得丹参提取物。

实施例2、制备含有丁苯酞、丹参提取物、降香提取物的软胶囊

分别取实施例1中的降香提取物浸膏200g、丹参提取物浸膏200g，搅拌下加入大豆油500g，混匀，加入丁苯酞100g，继续搅拌至全部混匀得内容物；配制囊壳液，压制软胶囊。

实施例3：制备含有丁苯酞、丹参提取物的软胶囊

取实施例1中的丹参提取物浸膏400g，搅拌下加入大豆油600g，混匀，加入丁苯酞200g，继续搅拌至全部混匀得内容物；配制囊壳液，压制软胶囊。

实施例4：本发明对永久性脑缺血大鼠的神经功能和脑梗塞范围的影响

实验药物：同实施例2

实验动物：雄性wistar大鼠

实验方法：Wistar大鼠，腹腔注射12％水合氯醛350mg/kg麻醉，侧卧位固定。于外耳道与眼眦连线中点切开皮肤，逐层分离肌肉，暴露颧弓和颞骨鳞部，铰断颧弓，在手术显微镜下，于颧弓和颞骨鳞部前连接处的前下方约2mm处，用牙科钻开2mm直径小颅窗，暴露大脑中动脉，将一小块滤纸敷于中动脉处，将10μl的50％ FeCl₃滴于滤纸片上，30min后将滤纸片取出，并用生理盐水清洗干净，局部滴加2～3滴青霉素液(1.6×10⁵U/mL)，以防伤口感染，逐层缝合。

实验分组：术后2h进行行为障碍程度评分，依据分值高低均匀分组，造型动物设6组，每组10只，评分结束后口服给药，模型对照组给予生理盐水，丁苯酞(50mg/kg)(简称A组)，丁苯酞(50mg/kg)和丹参、降香提取物(100mg)(简称B组)，丁苯酞(50mg/kg)和丹参、降香提取物(200mg/kg)(简称C组)，丁苯酞(50mg/kg)和丹参、降香提取物(300mg)(简称D组)分别按所写剂量给药，另设假手术组，手术操作与其它组相同，但中动脉未进行阻断。

实验结果：

(1)对神经功能的影响

假手术组动物行为无明显改变，模型对照组动物与假手术组动物的评分比较有明显差异(P＜0.01)。大鼠给予分别按照A、B、C、D各组所示剂量给药后，神经功能障碍评分有不同程度改善，与模型对照组比较，给药后24h，A组、B组、C组、D组评分分别减少了19.5％、25.7％、32.9％、28.1％。

(2)对脑梗死范围的影响

模型组动物与假手术组动物比较梗塞范围明显增加(P＜0.01)。A组有减小脑梗死范围的趋势，但无显著性差异。与模型对照组相比，B组、C组、D组脑梗死范围分别缩小了32.9％、46.2％、40.1％。

从以上结果可知，丁苯酞和复方制剂对永久性缺血大鼠的神经功能评分和脑梗死范围方面确有作用，推断丹参、降香提取物与丁苯酞合用具有协同或者相加作用，从以上数据可以说明丁苯酞(50mg/kg)和丹参、降香提取物(200mg/kg)的配合最优，效果最为理想。

实施例5、本发明对脑缺血再灌注大鼠的神经功能和脑梗死范围的影响

实验动物：同实施例2

实验仪器：同实施例4

实验方法：大鼠麻醉，侧卧位固定，在手术显微镜下，沿颈正中线切开皮肤，暴露左侧颈总动脉，小心去除颈总动脉分叉至颅底部的血管周围的神经及筋膜，依次分离颈外动脉分支枕动脉、甲状腺上动脉、舌动脉和上颚上颌动脉，结扎，剪断；分离颈内动脉，并小心与迷走神经分离，从根部结扎翼颚动脉。从颈外动脉游离端刺入带有3^#尼龙线(直径0.285mm)的6^#注射针头，将尼龙线导入血管，并小心抽出针头，从颈外动脉远心端将尼龙线导入到颈内动脉，插至Willis环处，以有效阻断大脑中动脉，根据动物体重，所插入的尼龙线长度距颈总动脉分叉处18～20mm。然后将颈外动脉游离端连同腔内尼龙线一并结扎，以防出血。逐层缝合肌肉和皮肤，局部滴加青霉素防止感染。为更有效阻断大脑中动脉，尼龙丝线在使用前，其尖端在火焰边烧圆钝，并用0.1％多聚L-赖氨酸包裹，在60℃烤箱中烘烤1h，由于多聚L-赖氨酸能促使细胞和蛋白粘附到塑料表面，并能使带负电荷的尼龙线表面变成带正电荷，从而吸引内皮细胞的阴离子部位，使尼龙线与内皮表面紧密粘附，以防血流从丝线周围漏流。假手术组动物仅分离出颈内动脉。MCAO1h后，右侧上肢未见明显偏瘫的大鼠以及随后死亡者均从试验中剔除。MCAO开始后1.5h，小心抽出颈内动脉血管腔内的尼龙线，使颈内动脉再灌注。动物回笼饲养。

实验分组：丁苯酞(50mg/kg)为A组、丁苯酞(50mg/kg)和丹参(50mg/kg)为B组、丁苯酞(50mg/kg)和丹参(100mg/kg)为C组、丁苯酞(50mg/kg)和丹参(150mg/kg)为D组，分别予以所写剂量给药。

实验结果：

1.对神经功能的影响

假手术组动物行为无明显改变，模型对照组动物与假手术组动物的评分比较有明显差异(P＜0.01)。大鼠口服给予四个剂量后，受损的神经功能障碍评分有不同程度改善，丁苯酞的作用强度无明显差别。B组、C组、D组作用较明显(P＜0.05)。

2.对脑梗死范围的影响

模型组动物与假手术组动物比较梗塞范围明显增加。口服给予A组、B组、C组、D组苯酞均可明显缩小脑缺血再灌注大鼠脑梗死范围(P＜0.05)。与模型对照组相比，A组、B组、C组、D组四个剂量组的脑梗死范围分别缩小了22.9％、30.1％、43.2％、35.5％。

从以上结果可知，丁苯酞和丹参提取物对缺血再灌注大鼠的神经功能评分和脑梗死范围方面确有作用，推断丹参提取物与丁苯酞合用具有协同或者相加作用。综合以上数据可以说明丁苯酞(50mg/kg)和丹参、降香提取物(100mg/kg)的配合最优，效果较为理想。

Claims (7)

1、一种含有丁苯酞的组合物，由丁苯酞和丹参提取物组成，丁苯酞、丹参提取物的重量比为1∶1～3，其中丹参提取物的制备方法为：丹参加水煎煮三次，第一次加8倍量水，煎煮2小时；第二、三次各加6倍量、5倍量水，每次煎煮1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩；加入乙醇使含醇量达75％，静置40小时，滤过，滤液回收乙醇，浓缩；再加入乙醇使含醇量达85％，静置40小时，滤过，滤液回收乙醇，浓缩；加入水，静置16小时，滤过，滤液浓缩；加乙醇使含醇量达80％，静置24小时，滤过，滤液浓缩至浸膏。

2、一种含有丁苯酞的组合物，由丁苯酞、丹参和降香提取物组成，丁苯酞、丹参和降香提取物的重量比为1∶1～3∶1～3，其中丹参提取物的制备方法为：丹参加水煎煮三次，第一次加8倍量水，煎煮2小时；第二、三次各加6倍量、5倍量水，每次煎煮1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩；加入乙醇使含醇量达75％，静置40小时，滤过，滤液回收乙醇，浓缩；再加入乙醇使含醇量达85％，静置40小时，滤过，滤液回收乙醇，浓缩；加入水，静置16小时，滤过，滤液浓缩；加乙醇使含醇量达80％，静置24小时，滤过，滤液浓缩至浸膏；降香提取物的制备方法为：加水浸润，进行水蒸气蒸馏，收集蒸馏液，冷藏24小时，分取油层备用，水溶液浓缩至浸膏。

3、根据权利要求1或2所述含有丁苯酞的组合物，其特征是丁苯酞选自其消旋体、左旋体或右旋体。

4、根据权利要求1或2所述含有丁苯酞的组合物，其特征是加入可药用赋形剂，制得相应剂型。

5、根据权利要求4所述含有丁苯酞的组合物，其特征是软胶囊剂型。

6、根据权利要求5所述含有丁苯酞的组合物，其特征是软胶囊内容物含有稀释剂。

7、根据权利要求6所述含有丁苯酞的组合物，其特征是稀释剂选自植物油。