CN100438864C

CN100438864C - 一种治疗真菌性角膜炎的眼药

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Publication number: CN100438864C
Application number: CNB200610007240XA
Authority: CN
Inventors: 王香兰
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2006-02-15
Filing date: 2006-02-15
Publication date: 2008-12-03
Anticipated expiration: 2026-02-15
Also published as: CN1843342A

Abstract

本发明公开了一种治疗真菌性角膜炎的眼药。该眼药是含有质量百分浓度为0.1-0.5%盐酸特比萘芬和2.0-4.0%环糊精的水溶液。本发明具有以下优点：1)加速试验和长期稳定性试验结果证明该药对光敏感，按所设计的包装在室温下保存一年有效，保质期较长；2)一般药理试验和药效试验证明眼部真菌对该药物产生敏感的有效浓度较低，疗效确切；3)治愈率高，临床验证该药物对真菌性角膜炎的治愈率为87.8%，总有效率更高达100%，且术后控制复发率高达90.63%。综上所述，本发明疗效明显，无明显毒副作用，且制备方法简单，具有工业化生产的可行性，将在医药领域发挥重要作用。

Description

一种治疗真菌性角膜炎的眼药

技术领域

本发明涉及一种眼药，特别是涉及一种治疗真菌性角膜炎的眼药。

背景技术

真菌性角膜炎是严重的致盲眼病，近年来抗生素、糖皮质类激素的滥用，免疫抑制剂的广泛应用以及自身免疫疾病病例的增加，导致该眼病的发病率较前些年急剧增高，并仍有不断增高的趋势。我国是农业大国，从事工、农业劳动的青壮年很容易在劳动过程中由角膜外伤而发病，影响生产，并且导致个人生活质量下降。

目前合成抗真菌药虽有很大发展，但是由于眼部感染真菌与其他部位感染真菌的种属不同，特别是眼部用药的特殊要求，致使抗真菌滴眼液极缺。据悉，美国仅有一种名为那特真的滴眼液获得了FDA的批准，但该药属进口药，货源缺少，因此极其昂贵，难于在患者中推广使用。国产的仅有氟康唑滴眼液(其商品名为“布芬”或“静达”)，研究表明，该药对眼部真菌的抗菌作用较差，治疗效果不佳。因此迫切需要一种疗效确切、治愈率高的针对真菌性角膜炎的眼药。

盐酸特比萘芬属烯丙胺类化合物，是一类具有新型结构的高效、广谱的抗真菌药。该药主要通过干扰真菌细胞壁的主要成份麦角固醇的早期合成发挥药效，具有抑菌和杀菌双重功效，已证明对手足体癣及皮肤真菌感染有较好的治疗效果，其中，对甲癣的治愈率达92％，微生物除菌率高达100％。

发明内容

本发明的目的是提供一种疗效确切的治疗真菌性角膜炎的眼药。

为实现上述目的，本发明采取以下设计方案：一种治疗真菌性角膜炎的眼药，是含有质量百分浓度为0.1-0.5％盐酸特比萘芬和2.0-4.0％环糊精的水溶液。

所述盐酸特比萘芬的浓度优选为0.25％。

糊精可起到较好的助溶作用，可为β-环糊精(β-CD)、α-环糊精或γ-环糊精中的任意一种，优选为β-环糊精，更优选为羟丙基β-环糊精；所述糊精的浓度优选为3.0-3.5％。

在上述眼药中还可添加质量百分浓度为0.7-0.8％的NaCl以调节渗透压；所述NaCl的浓度优选为0.75％。

为使药物的保质期更长，可在上述药物中添加防腐剂，如新洁尔灭、洁尔灭、洗必泰或尼泊金等；所述眼药中新洁尔灭(其有效成分为5％苯扎溴铵)的浓度为0.002-0.007％，优选为0.005％。

所述用于配制眼药的溶剂为注射用水。

该眼药成人用量一般每次一滴，每天4-8次，疗程为7-100天，平均为31天，根据具体病情进行调整。

本发明提供了一种治疗真菌性角膜炎的眼药。该药符合《中国药典2000版》中各项检测指标的规定，并具有以下优点：1)加速试验和长期稳定性试验结果证明该药对光敏感，按所设计的包装在室温下保存一年有效，保质期较长；2)药理试验和药效试验证明眼部真菌对该药物敏感性高，其抗真菌的最低有效浓度(MIC)最低，比其它6种常用抗真菌药的MIC小3-15倍，动物造型治疗试验结果表明该药疗效与那特真滴眼液无统计学差异，疗效确切；3)治愈率高，临床验证该药物对真菌性角膜炎的治愈率为87.8％，总有效率更高达100％，且术后控制复发率高达90.63％。综上所述，本发明疗效明显，无明显毒副作用，且制备方法简单，具有工业化生产的可行性，将在医药领域发挥重要作用。

下面结合具体实施例对本发明作进一步说明。

附图说明

图1A为治疗组给药2天后的情况

图1B为对照组给药2天后的情况

图1C为给药12天后治疗未愈的情况

图1D为给药12天后治疗痊愈的情况

图2A为给药12天后未治愈的角膜病理学切片

图2B为给药12天后对照组角膜的病理学切片

图2C为给药12天后治愈角膜的病理学切片

图3A为给药7天后裂隙灯观察结果

图3B为给药7天后裂隙灯观察结果

图4A为给药28天后外眼照片

图4B为给药28天后外眼照片

图4C为给28天后视网膜切片

图4D为给药28天后角膜切片

图5为房水的药代动力学曲线图

图6为角膜的药代动力学曲线图

图7为利用本发明药物的治疗病例之一

图8为利用本发明药物的治疗病例之二

具体实施方式

下述实施例中所用方法如无特别说明均为常规方法，所述百分浓度均为质量百分浓度。

实施例1、治疗真菌性角膜炎的眼药的制备及检测

一、制备眼药

取盐酸特比萘芬(按C₂₁H₂₅N计)2.5g、羟丙基β-环糊精35g，溶于注射用水中，然后加入5％苯扎溴铵溶液1.0mL和NaCl 8g，用0.1M氢氧化钠调pH4.0-5.5，最后加入注射用水定容至1000mL，混匀，滤过，于100℃流通蒸汽灭菌30分钟，得到透明治疗真菌性角膜炎的滴眼液，无菌分装，每瓶10mL。

特比萘芬难溶于水，且有一定刺激性，用丙酮、乙醇、DMSO、甲醇和氯仿等多种有机溶剂进行溶解试验，结果以丙酮、乙醇和DMSO溶解最好，但都不易用于眼部。在处方研究中以硼砂和硼酸的不同比例的缓冲液进行助溶，证明酸性溶媒中易溶，但溶液pH较低，且不稳定。用环糊精、甲基纤维素，聚乙烯醇和玻璃酸钠等高分子化合物进行实验，结果表明，环糊精，特别是羟丙基β-环糊精，可以包裹药物，起到助溶和减少刺激的作用，适于制备本发明的滴眼液。

二、检测

1、基本检测

根据《化学药品指导原则(修订稿)药学部分》中的基本要求对步骤一制备的其中三个批次的眼药进行质量检测，同时参照《中国药典2000版》中的方法对眼药中的氯化物进行鉴别，测定pH值，并参照附录VD中的高效液相色谱法对眼药中的有效成分盐酸特比萘芬进行纯度、含量测定。其中进行高效液相色谱检测前，先进行色谱条件与系统适用性试验，试验结果证明此色谱系统无论从专属性、准确性、灵敏度和重复性方面均能满足本品含量测定及有关物质测定的要求，且制剂中辅料对测定无干扰。高效液相色谱检测方法为：精密量取眼药，用流动相稀释制成每1mL含盐酸特比萘芬0.25mg的溶液，摇匀，精密量取10μl注入液相色谱仪，记录色谱图；另精密称取盐酸特比萘芬对照品(应符合盐酸特比萘芬质量标准[WS-204(X-159)98]项下有关的各项规定)，用流动相溶解并稀释成与供试品溶液同浓度的溶液，同法测定，按外标法以峰面积计算供试品中盐酸特比萘芬的含量。

检测结果如表1-表3所示，经高效液相色谱仪检测，三批滴眼液主峰的保留时间与盐酸特比萘芬对照品的保留时间一致，表明所含辅料无干扰。三批样品中的杂质总量在0.16-0.31％，表明药品具有较高的纯度。微生物限度的检测结果表明三批样品均符合药典附录对滴眼液微生物限度的规定，每毫升样品中的细菌数不超过10个(规定为不超过100个)，且无金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌生长。三批样品中盐酸特比萘芬含量测定结果标示量均在90-110％范围内，符合要求。

表1 第1批的检测结果

表2 第2批检测结果

表3 第3批的检测结果

2、药物的稳定性实验

参照《中国药典》2000年版附录XIX C药物稳定性试验指导，对上述三批眼药进行强光照射和高温试验。强光照射实验结果如表4所示，经强光照射后10天有光降解产物生成，主成份含量降低约7％，表明该药对光敏感。高温实验结果如表5所示，经过60℃，10天后检测证明本品对高温基本稳定。然后参照《中国药典》的要求对三批药品进行加速试验，即将三批样品按市售包装在相对湿度20±2％，25℃的条件下放置，并分别于0、1、2、3、6月末取样一次，进行检测，结果如表6所示，溶液的pH值略有下降，但仍符合规定，其他各项指标无变化，表明本品按现包装较为适宜。

表4 光照射实验结果

表5 高温实验结果

表6 加速实验结果

3、长期稳定性试验

取三批样品按市售包装，置相对湿度60±5％，温度25±2℃的贮存条件下，分别于第0、3、6、9、12月末取样检查，结果如表7所示，表明保存12个月除pH值略有下降但仍符合规定外，其它指标基本稳定。

表7 长期稳定性实验结果

上述实验结果表明本发明的眼药各项检测结果均符合规定。

实施例2、治疗真菌性角膜炎的眼药的制备

取盐酸特比萘芬(按C₂₁H₂₅N计)5g、β-环糊精25g，溶于注射用水中，用0.1M氢氧化钠调pH4.0-5.5，加入注射用水定容至1000mL，混匀，滤过，于100℃流通蒸汽灭菌30分钟，得到透明的治疗真菌性角膜炎的滴眼液，无菌分装，每瓶10mL。

用与实施例1相同的方法进行检测，检测结果表明本发明的眼药各项检测结果均符合规定。

实施例3、本发明眼药的药效、药理及毒理分析

一、药效试验

从真菌性角膜炎病人眼部分离致病真菌标本，传代鉴定后稀释为2-5×10⁶/mL的浓度，接种兔眼角膜基质层，具体方法为：选用30只1.5千克的兔，分为6组，每组5只(共10只眼)，其中三组为治疗组，分别用三种浓度特比萘芬滴眼液治疗；另外三祖为对照组，其中一组用5％那特真治疗，为阳性对照，剩余二组分别为溶剂滴眼阴性对照组和不治疗的模型对照组。治疗2天后的观察结果如图1A-图1B所示，治疗12天后的观察结果如图1C-图1D所示。疗效如表8所示，三个治疗组的角膜病变与阳性对照组无明显差异，与阴性对照组有一定的差异，与模型组有显著性差异。角膜病理学切片检查结果如图2A-图2C所示，模型对照组的角膜病变区有明显病变，而治疗愈痊的角膜未留病变和毒性。

表8 角膜病变平均值

a：与溶剂对照组相比有显著性差异(P＜0.05)

b：与模型对照组相比有显著性差异(P＜0.05)

二、药理学分析

1、药物敏感试验

取从真菌性角膜炎病人眼部分离、鉴定274株真菌，然后用纸片琼脂扩散法进行药敏试验，用实施例1的方法制备三个浓度(0.5％、0.25％、0.1％)的特比萘芬滴眼液，同时以0.5％克霉唑滴眼液为对照。眼部感染真菌类别的统计结果如表9所示，引起真菌性角膜炎的主要菌株为镰刀菌属，占59.46％(163/274)。对三种浓度特比萘芬的敏感率统计结果如表10所示，分别为70.27％、70.50％、71.88％，而对克霉唑的敏感率为17.79％，统计学处理有显著性差异(P＜0.050)。

表9 眼部感染真菌的类别(n＝274)

表10 特比萘芬对眼部感染真菌的抗菌有效率(％)

P＜0.05

2、7种抗真菌药对眼部真菌的抗菌作用比较

用微量液基稀释法(M38-P)测定盐酸特比萘芬(TBN)、两性霉素B(AmB)、酮康唑(KCZ)、咪康唑(MCZ)、伊曲康唑(ICZ)、氟康唑(FCZ)和5氟胞嘧啶(5-FC)7种抗真菌药对眼部分离真菌的最低抑菌浓度(MIC)范围和平均值(mean)。结果如表11所示，TBN对眼部真菌作用最强，对镰刀菌和曲霉菌的MIC值和平均值最小。AmB对茄病镰刀菌作用仅次于TBN，明显优于其他药。KCI、MCA和ICZ对茄病镰刀菌作用稍差，对其他菌种都有一定作用。5FC和FCZ(除黑曲霉和串珠镰刀各1例)最低抑菌浓度均＞64ug/mL的最高浓度。

表11 抗真菌药抗菌作用的比较(最低抑菌浓度范围及平均值[ug/mL])

三、毒理学研究

1、短期给药刺激性实验

根据“新药(西药)临床前研究指导原则汇编“的眼刺激试验方法，用实施例1制备的0.25％盐酸特比萘芬滴眼液进行刺激性试验，以5只新西兰白兔(10只眼)，左眼滴药，右眼滴溶媒，每日滴5次(1次/2小时)，共9天，综合各项检查评分的平均值，最后按积分值决定刺激性。根据Draize计分计算，各组反应分值均为零。按眼部刺激性评价检测计算，结果在0-3的范围内，属于无刺激性，符合滴眼剂的要求。

2、长期给药的眼部毒性试验

用实施例1制备的0.25％盐酸特比萘芬滴眼液进行眼部毒性试验，以12只兔子(24只眼)，左眼滴药，右眼滴溶媒，每日滴4次(1滴/次)，共4周，点眼时观察全身及眼部反应，每周裂隙灯检查一次，给药7、28天的观察结果如图3A-图4B所示，给药28天后的视网膜和角膜切片如图4C和图4D所示，眼部及全身未见异常，病理切片(3、4周)无病理变化，眼部及眼球切片照像结果均正常，表明本发明的眼药具有较高的安全性，无毒副作用。

另外，特比萘芬片剂已获新药批号(97)卫药准字X-129号，0.125g/片，剂量为2次/日，2片/次，病人一天口服0.5g。国产特比萘芬的临床治疗结果证明全身用药仅1.8％出现轻度副作用，因为药物不影响非特异性细胞色素P450酶系统，对内分泌和其他药物代谢无影响，且无肝毒性。由此可见滴眼液100毫升(即10瓶)的含量仅为病人一次的口服量，所用滴眼液全部吸收也不会产生全身蓄积毒性。

四、动物药代动力学试验

兔眼给药(实施例1制备的0.25％盐酸特比萘芬滴眼液，每只眼1滴)，给药后在不同时间(0.08、0.25、0.5、1、2、4小时)静脉注气处死，分别取角膜和房水，经处理后取样，用高效液相色谱法测定每只兔眼角膜和房水中的盐酸特比萘芬含量。房水的药代动力学实验结果如表12所示，绘成曲线图(图5)，药物峰浓度在0.25小时，值为0.13ug/mL，4小时药物浓度变化范围为0.03-0.13ug/mL。角膜的药代动力学实验结果如表12所示，绘成曲线图(图6)，药物峰值为0.08小时，2.47ug/g，4小时药物浓度范围为0.25-2.47ug/g。上述实验结果证明用药后4小时内房水和角膜内的药物浓度均超过药物对眼部真菌的最低有效浓度(MIC)，可以对角膜基质层和前房的感染达到治疗作用。

表12 房水中的盐酸特比萘芬含量

实施例4、临床观察

临床观察病人的入选标准为：具有患病的临床表现，以及眼部刮片真菌检查、共聚焦显微镜检查和真菌培养三者中的至少一项为阳性。目前北京无阳性滴眼液，因此用实施例1制备药物治疗前、后比较治疗效果观察药物疗效。1组为0.25％特比萘芬滴眼液治疗组，2组为角膜移植加药物治疗组。治疗方法为每次1滴，每日4-8次，急性发作期可30分钟至1小时1次，观察项目及指标为：首先按眼科检查进行一般记录，裂隙灯检查，真菌刮片镜检和真菌培养加药敏试验。疗效标准共分为三级，即治愈，有效和无效，前二项相加为总有效率。2组主要观察真菌复发率和角膜植片成活率。

用1年半时间临床验证共总结真菌性角膜炎73例(1组41例，2组32例)，临床检查如表13所示，患者男性占73.97％，年令20-60岁占82.19％，职业以农民为主，占病人的61.64％，治愈时间最短7天，最长93天，平均31天，可见角膜溃疡直径1组小于2组，1组＞6mm的患者14人(34.15％)，2组为23人(71.88％)，其它检查结果显示1组轻于2组。结果1组共41例经药物治疗后36例治愈，治愈率87.8％，5例症状好转，有效率为100％。2组32例(其中5例是手术后复发病人)经治疗后29例未见复发，治愈率90.63％，视力提高6例，3例术后用药未控制复发，其中1例同时用那他真仍未控制。治疗中病人反映有轻度刺激感，检查未见明显毒性作用。其中，二个病例的治愈情况如图7、图8所示。

表13 临床实验结果

Claims

1、一种治疗真菌性角膜炎的眼药，是含有质量百分浓度为0.25％的盐酸特比萘芬和质量百分浓度为2.0-4.0％的环糊精的水溶液；所述环糊精为β-环糊精或羟丙基β-环糊精。

2、根据权利要求1所述的眼药，其特征在于：所述环糊精的浓度为3.0-3.5％。

3、根据权利要求1所述的眼药，其特征在于：所述眼药中还添加质量百分浓度为0.7-0.8％的NaCl。

4、根据权利要求3所述的眼药，其特征在于：所述NaCl的浓度为0.75％。

5、根据权利要求1或2或3或4所述的眼药，其特征在于：所述眼药中还添加质量百分浓度为0.002-0.007％的新洁尔灭。

6、根据权利要求1或2或3或4所述的眼药，其特征在于：所述用于配制眼药的水为注射用水。