CN100435788C - 围术期血糖值上升抑制剂 - Google Patents

Abstract

本发明提供了围术期血糖值上升抑制剂，其特征在于包含支链氨基酸、可以体内转变成支链氨基酸的化合物、或从支链氨基酸转移氨基的化合物。该围术期血糖值上升抑制剂可用作药物，该药物对活体是安全的，抑制由麻醉、手术等引起的血糖值的异常升高，并且对围术期患者给药时能够适当控制血糖。

Description

围术期血糖值上升抑制剂

技术领域

本发明涉及抑制由围术期麻醉、手术等应激引起的血糖值上升的药物，其特征为包含支链氨基酸。

背景技术

已知当包括患者的活体接受影响活体内动态平衡的因素例如麻醉、手术等产生的侵袭应激时，活体分泌多种胰岛素拮抗激素(儿茶酚胺、胰高血糖素、类皮质激素等)，促进肝脏中糖新生和糖分解，并通过自主神经系统/内分泌系统存进血液葡萄糖(在下文中，也称为血糖)上升，以便维持活细胞的功能(例如，参见MAYUMI等，″IGAKU NOAYUMI″，168卷、418-423页，1994年)。

特别地，由于患有糖代谢异常疾患如围术期中糖尿病的患者中明显的高血糖症或渗压性利尿，可能发生脱水，因为由麻醉或手术等引起的接近禁食条件或麻醉或手术等侵袭应力等产生胰岛素作用不充分。如果这些状态持续，因为糖利用严重不充分，在患者中有时可能出现若干种严重的并发症例如代谢异常、昏迷和多器官功能衰竭。在这些患者情况下，当处于围术期的患者没有给予糖时，出现体蛋白和脂肪分解，血中游离脂肪酸和酮体增加，导致酮酸中毒。这不仅可以出现具有糖代谢异常的患者中，而且类似地出现在经历需要较长手术时间的高侵袭度手术的患者中，或出现在以ICU集中治疗的患有重症的患者中，等。

因此，控制围术期的血糖值是控制全身麻醉的重要课题。已知控制围术期中血糖值在合适的范围内不仅缩短术后治疗需要的周期，并且增加手术后患者的存活概率。

目前，通过补充糖类、通常为葡萄糖，在高血糖症情况下用胰岛素给药方法控制围术期中血糖值。胰岛素给药方法是使用输液泵连续静脉内给药胰岛素，同时如果需要，在手术后监测患者血糖值和患者的血中胰岛素浓度的方法，以便保持手术时血糖水平在合适的范围内。

然而，连续地控制患者所用的正确的胰岛素剂量需要先进技术。当过度错误地给予胰岛素时，患者变得血糖过低并具有导致昏迷或中枢神经系统的几种严重破坏的风险。在正常手术中为了保持体蛋白和脂肪并防止酮酸中毒，输液例如糖类给患者，该胰岛素剂量取决于这些供应的糖类，从而需要更先进的控制。另外，对于胰岛素敏感性降低的患者，在年长或超重人中常常观察到非胰岛素依赖性糖尿病，用上述胰岛素给药对血糖值降低的影响有时预期不够。

因此，通过胰岛素给药控制血糖值的技术对于患者不是必然安全的方法，并且难以控制/管理。

因此，正如本发明的血糖值上升抑制剂，血糖值上升抑制剂对于患者是安全的并且现在还未知包含支链氨基酸的构成成分这一点。另外，可以说本发明是优异的发明，因为不同于胰岛素给药方法，本发明不必要严格控制胰岛素的剂量，并可以容易地在围术期中补充糖。

发明公开

本发明目的是提供抑制在围术期中观察到的血糖值上升的药物，更具体地说是提供血糖值上升抑制剂，其对于包括人类患者的活体是安全的，并通过在麻醉下对患者给药，抑制在围术期中观察到的异常血糖值上升。

本发明人把注意力集中在作为影响活体内动态平衡并对于活体是安全的化合物的氨基酸上。为了解决上述问题，本发明的发明人通过研究与非麻醉相比在麻醉下影响体内动态平衡的氨基酸的生理机能，已经发现了本发明。具体地，本发明人已经发现当在麻醉下对动手术的大鼠给予包含必需、准必需和非必需氨基酸的氨基酸输液时，麻醉下大鼠的血糖值低于非麻醉下大鼠的血糖值。另外，本发明人已经深入研究并发现在氨基酸输液中包含的这些氨基酸中，具有抑制上述活体中血糖值上升效果的支链氨基酸，并且在围术期中，特别是在麻醉下，抑制效果增加，即，发挥作用的氨基酸的有效剂量也低于非麻醉下的。发明人已经发现当葡萄糖和这些氨基酸在麻醉药剂下同时给药时，比非麻醉下更加促进胰岛素分泌。本发明人通过基于这些发现的广泛研究完成本发明。

也就是说，本发明涉及：

(1)围术期血糖值上升抑制剂，其特征为包含支链氨基酸、可以体内转变成支链氨基酸的化合物、或从支链氨基酸转移氨基的化合物，

(2)上述(1)的血糖值上升抑制剂，其中支链氨基酸是亮氨酸和/或异亮氨酸，

(3)上述(1)或(2)的血糖值上升抑制剂，其中可以体内转变成支链氨基酸的化合物是支链氨基酸的盐、酯、或酰胺，或包含支链氨基酸的寡肽，

(4)上述(1)的血糖值上升抑制剂，其中从支链氨基酸转移氨基的化合物是α-酮异己酸或α-酮-β-甲基戊酸，

(5)上述(1)-(4)中任何一项的血糖值上升抑制剂，其包含0.25至2.5克/分升亮氨酸和/或0.25至3.5克/分升异亮氨酸，

(6)上述(1)-(4)中任何一项的血糖值上升抑制剂，其包含1至10克/分升葡萄糖和0.25至2.5克/分升亮氨酸和/或0.25至3.5克/分升异亮氨酸，

(7)上述(1)-(6)中任何一项的血糖值上升抑制剂，其中血糖值上升由麻醉药引起，

(8)上述(1)-(6)中任何一项的血糖值上升抑制剂，其用于治疗和/或预防麻醉下的血糖值上升，

(9)上述(1)-(6)中任何一项的血糖值上升抑制剂，其用于与麻醉药并用，

(10)血糖值上升的抑制方法，其包括对围术期的患者给药上述(1)-(6)中任何一项的血糖值上升抑制剂，

(11)麻醉方法，其包括将麻醉药与上述(1)-(6)中任何一项的血糖值上升抑制剂并用，

(12)支链氨基酸、可以体内转变成支链氨基酸的化合物、或从支链氨基酸转移氨基的化合物在制备用于抑制围术期患者的血糖值上升的药物中的应用，

(13)支链氨基酸、可以体内转变成支链氨基酸的化合物、或从支链氨基酸转移氨基的化合物在制备用于抑制由麻醉药引起的血糖值上升的药物中的应用。

在本发明中，″围术期″是指手术之前，由手术/麻醉引起的手术侵袭条件下的术中时、和手术后的时期。

附图简述

图1展示出通过对非麻醉下或麻醉下大鼠平行给药的氨基酸对血糖值影响的试验结果。

图2展示出对血糖值上升具有抑制效果的氨基酸的种类的鉴定检测结果。

图3展示出BCAA(3种混合物，Leu+Ile+Val)对血糖值上升抑制效果的确认试验结果。

图4展示出对血糖值上升具有抑制效果的BCAA的种类的鉴定检测结果。

图5展示出在平行给药糖液的情况下，BCAA(3种混合物，Leu+Ile+Val)对血糖值上升的抑制效果的试验结果。

图6展示出麻醉下连续输入葡萄糖的支链氨基酸效果。

图7展示出非麻醉下和麻醉下亮氨酸对血糖值的效果。

图8展示出耐糖性时异亮氨酸对AUC的影响。

实施本发明的最佳方式

上述氨基酸(在下文中，缩写为BCAA)没有特别限制，只要它们满足日本药典中描述的标准，包括任何氨基酸例如L-氨基酸、D-氨基酸、L-氨基酸、α-氨基酸、β-氨基酸、γ-氨基酸、天然氨基酸、合成氨基酸等，优选天然的L-氨基酸或α-氨基酸。另外，可以通过借助于蛋白酶水解得自植物或得自动物的蛋白质，或用微生物发酵法制备上述氨基酸，或可以通过向有机酸中引入氨基等制备的合成氨基酸。

BCAA优选是亮氨酸、异亮氨酸或缬氨酸。

这些氨基酸可以单独使用或并用。具体地，实例为(a)单独的亮氨酸、(b)单独的异亮氨酸、(c)亮氨酸和异亮氨酸的混合物、(d)亮氨酸和缬氨酸的混合物、(e)异亮氨酸和缬氨酸的混合物、或(f)亮氨酸、异亮氨酸和缬氨酸的混合物。

能体内转变为上述BCAA的化合物可以是其和酸或碱的药学可接受盐，具体地，BCAA的酸加成盐或碱加成盐(例如钠盐、钾盐、盐酸盐、乙酸盐等)、其酯(例如甲酯、乙酯、丙酯等)、或其酰胺(例如酰胺、单甲基酰胺、单乙基酰胺、二甲基酰胺、二乙基酰胺等)。

另外，能体内转变为上述BCAA的化合物可以是BCAA的类似物，其是BCAA的前体，例如包括BCAA作为构成要素的寡肽等。至于该寡肽，例如，实例是二肽例如L-异亮氨酰-L-亮氨酸、L-亮氨酰-L-丙氨酸等。这些类似物可单独使用或以其混合物形式使用。

从BCAA转移氨基的化合物可以是用转氨酶转移BCAA的氨基至氨基受体例如α-酮戊二酸(2-酮戊二酸)制备的化合物。例如，从每个亮氨酸、异亮氨酸或缬氨酸转移氨基的化合物分别是例如、α-酮异己酸、α-酮-β-甲基戊酸或α-酮异戊酸。

BCAA、可以体内转化成为BCAA的化合物、和从BCAA转移氨基的化合物可以是结晶的或可以是非结晶的。

包含在血糖值上升抑制剂中的BCAA或可以体内转化成为BCAA的化合物的混合量没有特殊的限制，只要上述抑制剂保持稳定没有晶体沉淀，甚至在长期储存情况下，优选在下列范围内。

例如，当上述抑制剂是液体药剂并且只包含BCAA，例如，在(a)单独的亮氨酸或(b)单独的异亮氨酸情况下时，每个BCAA浓度优选是约0.5至4.0克/分升，更加优选约0.7至3.0克/分升。当上述抑制剂中包含的BCAA是混合物时，例如(c)亮氨酸和异亮氨酸的混合物、(d)亮氨酸和缬氨酸的混合物、(e)异亮氨酸和缬氨酸的混合物、或(f)亮氨酸、异亮氨酸和缬氨酸的混合物，每个混合重量比是(c)亮氨酸∶异亮氨酸＝约1∶约0.25至4，(d)或(e)亮氨酸或异亮氨酸∶缬氨酸＝约1∶约0.25至4，或(f)亮氨酸∶异亮氨酸∶缬氨酸＝约1∶约0.25至4∶约0.25至1，优选每个BCAA浓度在上述范围内。

因为优选在围术期中通过静脉内点滴等直接静脉内和连续输液本发明的血糖值上升抑制剂给药至活体(患者)，其剂型优选是液体药剂例如用于静脉内点滴的可注射溶液，并可以是使用时通过将其溶解在注射用蒸馏水等中给药使用的冷冻干燥产品的颗粒制剂或粉末制剂。另外，可以在手术前口服制剂，并且效果持续直到患者在麻醉下的手术过程中。

制备方法可以是已知的制备氨基酸输液或氨基酸制剂的技术。完成该制备通常通过将上述组成成分溶解并混合在注射用蒸馏水中，如果需要、向其中加入添加剂等。然后，用过滤器等或在加热下灭菌等从得到的水溶液除菌，并配制成为液体药剂。

根据需要，本发明的血糖值上升抑制剂可以根据需要与多种添加剂混合，以稳定上述抑制剂等。该添加剂的具体实例包括pH调节剂例如盐酸、乙酸、苹果酸、柠檬酸、氢氧化钠和氢氧化钾，渗透压调节剂例如Conclyte-钠以调整上述抑制剂的渗透压。

本发明的血糖值上升抑制剂可以包含已知通常加入到并与氨基酸输液混合的其它成分等，包括例如游离氨基酸例如碱性氨基酸(例如赖氨酸、精氨酸等)和不同于BCAA的芳香氨基酸(例如色氨酸、苯丙氨酸等)、或其盐、脂类、维生素类、电解质、微量元素等。本发明目的范围内这些成分的加入量没有限制。

当本发明的血糖值上升抑制剂给药给围术期活体(患者)时，可以避免在围术期中观察到的血糖值上升，从而补充通常需要平行使用胰岛素的糖，同时抑制血糖值的异常上升。

围术期活体(患者)通常处在麻醉下，可以有利地在全身麻醉和局部麻醉下使用本发明的血糖值上升抑制剂。用于麻醉状态下的患者的麻醉方法通常是用于医疗领域中的方法。例如，该方法是吸入麻醉、静脉内麻醉、脊椎麻醉、硬膜外麻醉等。另外，对在血糖值上升抑制剂使用中可以使用的麻醉药没有特殊的限制，吸入麻醉药的实例是笑气、麻醉醚、异氟烷、安氟醚、七氟醚和氟烷等；静脉内麻醉药剂的实例是异戊巴比妥钠、硫戊巴比妥钠、硫喷妥钠、戊巴比妥钙、丙泊酚、苯二氮安定、咪达唑仑、羟嗪、达哌啶醇、氟马西尼、氯胺酮等；局部麻醉药的实例是盐酸地布卡因、盐酸甲哌卡因、盐酸普鲁卡因、盐酸罗哌卡因、苯佐卡因、氨基苯甲酸乙酯、利多卡因、奥昔卡因、盐酸丁卡因、盐酸奥布卡因、盐酸丁哌卡因等(参考日本药典中描述的治疗剂类目，第十四版，等)

优选在液体药剂的情况下和在冷冻干燥产品的情况下，当使用时溶于无菌蒸馏水后连续地静脉内给药本发明的血糖值上升抑制剂给活体(患者)。对于给药速率，通过考虑给药活体(患者)的体重和上述抑制剂中BCAA的浓度等在各情况下采纳最佳速率，另外优选手术周期中由医生监测血糖值来及时地调节速率，以致不必适当建议速率。通常，总的BCAA量为约2至200毫克/体重-千克/时间，优选5至500毫克/体重-千克/时间。在口服药剂情况下，给药麻醉药剂之前口头给药5至300毫克/体重-千克。

实施例

在本发明中，如下举例说明优选制备例和试验实施例，然而本发明不限于下列制备例等。

在本说明书和附图等中举例说明的每个缩写如下所述。另外，除非另有具体说明，当有光学异构体时氨基酸被认为是L-氨基酸。

BCAA：支链氨基酸

EAA：必需和准必需的氨基酸

Leu：亮氨酸

Ile：异亮氨酸

Val：缬氨酸

Lys：赖氨酸

Thr：苏氨酸

Trp：色氨酸

Met：蛋氨酸

Phe：苯丙氨酸

Cys：半胱氨酸

Tyr：酪氨酸

Arg：精氨酸

His：组氨酸

Ala：丙氨酸

Pro：脯氨酸

Ser：丝氨酸

Asp：天冬氨酸

Glu：谷氨酸

Glucose：葡萄糖

参考例

制备参考例2至6中所述氨基酸水溶液(参考表1)。另外，参考例1涉及氨基酸输液″Amiparen″(10％的普通氨基酸输液)，由OTSUKAPHARMACEUTICAL FACTORY，Inc.制造。参考例2涉及仅包含参考例1氨基酸中的必需和准必需氨基酸(EAA)的氨基酸溶液。参考例3、4、5或6涉及包含分别除去BCAA、碱性氨基酸、芳香氨基酸或其它氨基酸的残留氨基酸的氨基酸溶液。

至于每一氨基酸，使用冷冻干燥的产品(由AJINOMOTO Co.Ltd.、KYOWA HAKKO KOGYO Co.Ltd.等制造)。加入每一氨基酸至450mL注射用蒸馏水至表1所述浓度，并用搅拌器搅拌溶解。另外，当生理盐水的渗透压比低于1时，加入Conclyte-钠以校正渗透压，使得溶液与血液等渗压。用冰醋酸调节溶液的pH在6.5至7.4范围内，测量水溶液500mL，溶液通过加热灭菌(106℃，32分钟)，以制备参考例2至6中的每一氨基酸溶液。

表1

(g/100ml)

制备例

以类似参考例的方法制备表2中的制备例1至5中的氨基酸溶液。

表2

试验例1

对非麻醉或麻醉下大鼠给药氨基酸对血糖值的影响

在试验的前一天，在乙醚麻醉下切开大鼠颈部，在右外颈静脉内保持麻醉药剂给药用和氨基酸水溶液给药用的每个导液管。将大鼠固定在装具后，皮下穿引导液管的另一个端从大鼠背部露出，并经过固定装具连接到旋转轴承上。连续地以1毫升/小时/身体的速率经由用于氨基酸水溶液给药的导液管给药生理盐水(Saline)直到恰好试验之前。其后，在禁食状态下饲喂大鼠，容许大鼠自由地饮用水。

在试验的当天，转移大鼠至隔音和防电室中。然后，经过分支接头连接每个导液管至多种波动记录仪的电缆和用于给药麻醉药剂或用于给药氨基酸水溶液的注射泵(麻醉药剂：微型注射器泵型号EP32，由EICOM Corp.制造，氨基酸水溶液：JMS注射泵型号SP 100s)。预先确定大鼠生物电位(EEG、EMG、体温、生物振动)稳定1小时后，进一步记录30分钟生物电位直到恰好麻醉开始之前。该方法至今被认为是预处理，并进行下列试验例。

静脉内给药15毫克/千克丙泊酚(Diprivan 1％，Zeneca S.p.A.，Italy)丸剂给麻醉药给药组(n＝16)，并连续静脉内给药30分钟45毫克/千克/小时(i.v.)丙泊酚，然后连续地静脉内给药22.5毫克/千克/小时丙泊酚(i.v.)2.5小时。

静脉内给药1.5毫升/千克(i.v.)Intralipos(静脉注射用脂肪乳剂，由OTSUKA PHARMACEUTICAL FACTORY，Inc制造)的丸剂给麻醉药非给药组(n＝16)，然后类似于麻醉药给药组连续地静脉内给药Intralipos总计3小时。

以14毫升/千克/小时的速率经由与丙泊酚给药或Intralipos给药平行的氨基酸水溶液给药导液管，连续地静脉内给药表1中描述的参考例1″Amiparen″(n＝8)(由OTSUKA PHARMACEUTICAL FACTORY，Inc.制造)给两组大鼠。

在给药参考例1的溶液终了之后，经由用于氨基酸水溶液给药组的导液管对两组大鼠给药麻醉药剂戊巴比妥钠(50毫克/千克)，从腹主动脉收集血液。用酶促法(Glucose-DH方法)测定血糖值。另外，通过在进行差双向分析(t检验)后测量生理盐水给药组和氨基酸水溶液给药组之间的差异，对比两组。

试验例1的结果列于图1。对于麻醉药给药组，观察到Amiparen(参考例1)中血糖值明显低于并行给药组，说明在麻醉下，氨基酸给药有效抑制手术侵袭应激引起的血糖值上升。

试验例2

具有血糖值上升抑制效果的氨基酸的种类的鉴定

对具有血糖值上升抑制效果的氨基酸进行试验，氨基酸为试验例1中使用的参考例(Amiparen)中包含的氨基酸。

对以类似于试验例1的方式进行预处理的大鼠静脉内给药15毫克/千克丙泊酚小球剂(bolus)，然后按照试验例1连续地静脉内给药丙泊酚3小时。以14毫升/千克/小时的速率静脉内给药参考例2至6(每个给药组n＝8)或生理盐水(对照组n＝8)的每个氨基酸水溶液给上述大鼠，并行于丙泊酚给药。给药结束后，按照试验例1从腹主动脉收集血液，然后测定血糖值和血中胰岛素值。

用ELISA法(由Mevcodia Co.制造)测定血中胰岛素值。

试验例2的结果列于图2。结果，对于参考例4至6的氨基酸水溶液给药组，(A)观察到血糖值明显低于生理盐水给药(对照组)，各自水平类似于包含必需和准必需氨基酸的氨基酸水溶液的给药组(参考例2)。相比之下，不包含BCAA的氨基酸水溶液给药组(参考例3)显示出类似于对照组的高血糖值。该结果表明BCAA有效抑制血糖值上升。

此外，对于参考例2给药组，(B)观察到胰岛素水平上升、血糖值减少，对于参考例4至6给药组，其中类似地显示出血糖值减少，胰岛素水平增加一点。相比之下，对于参考例3给药组，胰岛素水平显示出类似于参考例4至6给药组的低水平。

试验例3

BCAA(3种混合物，Leu+Ile+Val)对血糖值上升抑制效果的确认试验

根据试验例2得到的结果，对由BCAA带来的血糖值上升的抑制效果进行确认试验。

静脉内给药15毫克/千克丙泊酚小球剂给类似于试验例1进行预处理的大鼠，然后连续地静脉内给药丙泊酚3小时。以45毫克/千克/小时的速率连续地静脉内给药(i.v.)丙泊酚1小时，然后以22.5毫克/千克/小时的速率给药(i.v.)2小时。以14毫升/千克/小时的速率静脉内给药制备例1的氨基酸水溶液或生理盐水给上述大鼠。给药结束后，按照试验例1从腹主动脉收集血液，然后测定血糖值和血中胰岛素值。

试验例3的结果显示于图3。对于给药包含3种氨基酸Leu、Ile和Val的氨基酸水溶液(制备例1)的组，与对照组相比较明显地抑制血糖值。根据该结果可知，证明了BCAA给药有效抑制麻醉下的血糖值上升。

试验例4

具有抑制血糖值上升效果的BCAA的种类的鉴定

另外，对具有血糖值上升抑制效果的BCAA中的氨基酸进行了研究。

类似于试验例1预处理大鼠，除了导液管保持在右外侧尾静脉之外。代替先前试验中所用的丙泊酚，给药戊巴比妥钠(30毫克/千克，i.v.，Somnopentyl)后，类似地以25毫升/千克/小时的恒定速率经过静脉内途径连续给药戊巴比妥钠3小时。以14毫升/千克/小时的速率静脉内给药制备例2至4每个氨基酸性水溶液(每个给药组n＝5)或生理盐水(对照组n＝5)。给药结束后，从腹主动脉收集血液，并测定血糖值。

试验例4的结果显示于图4。对于每个单独的Leu或单独的Ile氨基酸水溶液(制备例2或3)组、或Leu和Ile(制备例4)混合物，血糖值明显低于生理盐水给药组(对照组)，该水平接近等于接受试验例3中的3种BCAA的组。该结果说明麻醉下单独的Leu或单独的Ile、或Leu和Ile的混合物给药也得到显著的血糖值上升抑制效果。此外，因为戊巴比妥钠在该试验例4中用作麻醉药剂，说明在使用任何麻醉药的场合下明显地得到BCAA的血糖值上升抑制效果。

试验例5

在并行给药糖液的场合下，试验BCAA(3种的混合物，Leu+Ile+Val)的血糖值上升抑制效果

通过静脉内给药葡萄糖给活体制造血糖值上升模型，和在上述模型中检查并行给药BCAA的效果。

静脉内给药丙泊酚至以类似于试验例1进行预处理的大鼠，按照试验例1连续地给药3小时。以14毫升/千克/小时的速率静脉内给药比为1∶9的50wt％葡萄糖和3种BCAA的混合溶液(5wt％葡萄糖+2.7wt％BCAA给药组n＝6)或单独给药5wt％葡萄糖水溶液(对照组n＝6)给每个上述大鼠。开始给药之前、开始给药之后30分钟、90分钟和180分钟分别经由用于氨基酸水溶液导液管收集(100μL)血液。然后，按照试验例1测定血糖值。

试验例5的结果显示于图5。在两组中，与开始给药之前比较，开始给药之后30分钟血糖值明显增加，两组之间的水平没有差异。然而，在那之后，在给药5％葡萄糖水溶液的对照组中，血糖值持续保持在高水平(约280毫克/分升)。相比之下，在给药5％葡萄糖水溶液和3种BCAA的混合溶液的并行给药组中，给药之后90分钟血糖值降低(约210毫克/分升)，之后其与对照组相比变至明显低的水平。该结果说明了，在围术期中由于补充葡萄糖而一旦上升的血糖值通过浓度随给药后时间的增加而增加的BCAA被控制在适当的血糖值范围内，得到了血糖值上升抑制效果。

试验例6

支链氨基酸对由于葡萄糖引起的血糖值上升模型的效果

通过静脉内给药葡萄糖给活体产生血糖值上升模型，并通过在上述模型中平行给药亮氨酸、异亮氨酸和缬氨酸检查效果。

以类似试验例4的方式预处理大鼠，通过以类似试验例4的方式静脉内连续给药戊巴比妥，维持大鼠在麻醉状态3小时。以14毫升/千克/小时的速率静脉内给药比为1∶9(5wt％葡萄糖-1.8wt％每个氨基酸；n＝5)的50wt％葡萄糖和制备例2、3或5的水溶液的混合溶液，或5wt％葡萄糖水溶液(n＝5)给每个上述大鼠，并行给药戊巴比妥。开始给药之前、开始给药之后30分钟、90分钟和180分钟分别经由用于氨基酸水溶液导液管收集(100μL)血液。然后，按照试验例1测定血糖值和血中胰岛素值。

试验例6的结果显示于图6。开始试验后30分钟全部组的血糖值大约是300毫克/分升。在测定过程中葡萄糖给药组的血糖值连续地增加。试验开始后30分钟并行亮氨酸给药组的血糖值达到最大值，之后水平降低，与试验开始后90和180分钟葡萄糖给药组相比较，其水平明显变低。试验开始后30分钟并行异亮氨酸给药组的血糖值也达到峰值，没有见到血糖值连续升高，与开始试验后180分钟葡萄糖给药组相比较水平具有明显差异。

试验例6中的并行给药亮氨酸(葡萄糖+亮氨酸)组的血中胰岛素值显示于表3。

表3

每个值以平均值±标准误差表示。

观察到在维持麻醉状态下，在麻醉下并行给药亮氨酸组的血中胰岛素值随时间增加，与非麻醉下并行给药亮氨酸组比较，血中胰岛素值在30分钟增加1.7倍，在90分钟增加9.9倍，在180分钟增加16.2倍。

该结果说明了当给药葡萄糖时观察到支链氨基酸给药对血糖值上升具有抑制效果，与非麻醉下状态相比增强了胰岛素的分泌促进。

试验例7

口服亮氨酸对血糖值降低的效果-麻醉状态和非麻醉状态的比较-

试验方法

非麻醉组：在整夜禁食状态下根据体重将大鼠分组，并从尾部静脉收集血液(Pre值)。之后不久，口服10毫升/千克蒸馏水给对照组，0.3克/10毫升/千克亮氨酸悬浮液给样品液组。在给药蒸馏水和样品溶液后90分钟从尾静脉收集血液(90分钟值)。

麻醉组：在整夜禁食条件下根据体重将大鼠分组，并从尾静脉收集血液(Pre值)。收集血液后，口服10毫升/千克蒸馏水给对照组，0.3克/10毫升/千克亮氨酸悬浮液给样品液组。给药样品液后30分钟保持Saflow留置针留置在尾静脉中。之后，通过快速静脉内给药30毫克/千克戊巴比妥钠诱导麻醉。其后，通过延伸管将微型注射器泵中放置的气密注射器与留置针连接，通过连续静脉内给药30毫克/千克/小时保持麻醉。从与引入麻醉后留置针晶保持60分钟的对侧尾静脉收集血液(90分钟值)。

另外，在血细胞容量计测定用管中收集血液。离心收集血液后，回收血浆部分并根据试验例1测定血糖值。

通过从每个鼠血浆90分钟值减去每个鼠血浆的Pre值计算血糖值的改变值。

试验例7的结果显示于图7。与开始给药之前相比，非麻醉和麻醉两组之间的对照组在给药后30分钟没有观察到血糖明显上升。相对于非麻醉和麻醉两组之间的样品液组，在两个组中都观察到血糖值降低，麻醉组中血糖值的降低程度是非麻醉组的2.7倍。在麻醉下，即在围术期中，表明了支链氨基酸与非麻醉状态相比更能降低血糖值。

试验例8

耐糖期间口服异亮氨酸的血糖值上升抑止效果-非麻醉和麻醉的比较-

试验方法

非麻醉组：在禁食整夜条件下根据体重将大鼠分组，并从尾静脉收集血液(Pre值)。对对照组和样品液组分别口服0.5克/10毫升/千克OTSUKA蒸馏水(注射用水；由OTSUKA PHAMACEUTICALFACTORY，INC.生产)和0.5克/10毫升/千克的异亮氨酸水溶液。口服50％OTSUKA糖液(葡萄糖注射液(葡萄糖100克/200毫升)；由OTSUKAPHAMACEUTICAL FACTORY，INC.生产；在下文中仅称为糖液)，使得样品溶液给药后30分钟为3克葡萄糖/千克。开始给药糖液后30分钟、60分钟、90分钟和120分钟从尾静脉收集血液，并测量血糖值。在非麻醉组中每个血糖值分别被认为是30分钟值、60分钟值、90分钟值和120分钟值。

麻醉组：在禁食整夜条件下根据体重将大鼠分组，并从尾静脉收集血液(Pre值)。对对照组和异亮氨酸给药组分别口服0.5克/10毫升/千克OTSUKA蒸馏水和0.5克/10毫升/千克的异亮氨酸水溶液。口服50％OTSU KA糖液，使得样品溶液给药后30分钟为3克葡萄糖/千克。给药糖液后10分钟从腹腔腹膜内给药0.5克/1毫升/千克戊巴比妥钠给麻醉组。开始给约糖液后30分钟、60分钟、90分钟和120分钟测量采自尾静脉的血液的血糖值。

此外，在血细胞容量计测定用管中收集血液。离心收集血液以回收血浆。分级后的血浆用于测定血糖值。通过在0分钟值(其是Pre值)、30分钟、60分钟值、90分钟值和120分钟值的5点下对时间(分钟)和血糖值(毫克/分升)曲线积分得到血糖值曲线下面积(0-120分钟；在下文中缩写为AUC)。

试验例8的结果显示于图8。关于对照组，麻醉组的AUC与非麻醉组相比明显增加。关于异亮氨酸给药组，非麻醉组和麻醉组的AUC与对照组相比都降低，麻醉组中降低明显。该结果说明由耐糖引起的血糖值上升明显增加，由于麻醉药和异亮氨酸之间的明显相互作用，口服异亮氨酸对血糖值上升的抑止效果明显增强。

工业实用性

本发明的血糖值上升抑制剂通过对患者给药可以抑制由手术和麻醉引起的血糖值上升。此外，通过使患者在麻醉下可以增强抑止效果。关于上述的抑制剂，其构成成分是支链氨基酸，该抑制剂不导致低血糖症的风险，该风险是围术期中用于控制血糖值的常规胰岛素给药方法所担心的。此外，在手术时容易补充糖给遭受糖代谢异常的患者，并且该抑制剂对包括人的活体是安全的。

Claims (5)

1.支链氨基酸或可以体内转变成支链氨基酸的化合物在制备用于抑制围术期患者的血糖值上升的药物中的应用，其中支链氨基酸是亮氨酸和/或异亮氨酸。

2.支链氨基酸或可以体内转变成支链氨基酸的化合物在制备用于抑制由麻醉药引起的血糖值上升的药物中的应用，其中支链氨基酸是亮氨酸和/或异亮氨酸。

3.权利要求1或2的应用，其中可以体内转变成支链氨基酸的化合物是支链氨基酸的盐、酯、或酰胺，或包含支链氨基酸的寡肽。

4.权利要求1或2的应用，其中的药物包含0.25至2.5克/分升亮氨酸和/或0.25至3.5克/分升异亮氨酸。

5.权利要求1或2的应用，其中的药物包含1至10克/分升葡萄糖和0.25至2.5克/分升亮氨酸和/或0.25至3.5克/分升异亮氨酸。

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