CN100425120C - 一种抗条纹叶枯病水稻品种的鉴定方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种鉴定水稻品种对水稻条纹叶枯病抗性的新方法。本发明的实质是根据禾本科植物分蘖的特性，将分蘖剥离，在可控条件下进行抗性鉴定，并根据分蘖的抗性表现，对整个植株的抗性进行评价。本发明较原有的鉴定方法具有更适用于水稻条纹叶枯病抗性品种的选育工作，鉴定结果的精确性和准确性更高，拓宽了进行抗性鉴定的时间，更适于遗传学的研究的特点。
Description
技术领域
本发明是鉴定水稻品种对水稻条纹叶枯病抗性的一种新方法，属于植物病害抗性鉴定技术。
背景技术
水稻条纹病毒(RSV)引起的水稻条纹叶枯病最早于1897年在日本关东发现，后在朝鲜、乌克兰和中国均有发生。我国自1962年在江浙发现该病毒以来，已经在全国16个省、市、自治区发生，目前以江苏省为主的长江下游稻区仍处于流行期。据不完全统计，仅2004年江苏省水稻条纹叶枯病发生面积就达2700万亩，占江苏省水稻面积的79％，专家预计2006后的五年内水稻条纹叶枯病仍将呈偏重发生趋势，预防工作刻不容缓。
水稻条纹叶枯病是一种由灰飞虱传播的植物病毒病，一旦发病为害后便基本无药可治，目前生产上多采用治虫防病、调整播栽期等措施，但是在虫量大，灰飞虱带毒率高，若、成虫峰期长的病害大发生年份，两者的控害效果都不理想。国外的防治经验表明，针对这一病害最为经济有效的方法是选育抗病品种应用于生产。目前在抗病育种的过程使用的鉴定方法虽然有多种，但多是采用苗期接种鉴定的方法，由于水稻条纹病毒危害方式的特殊性，其结果往往导致被抗性较差的鉴定株死苗，因此育种工作者常常通过鉴定第二代的抗性来推测当代材料的抗性，这不仅延缓了抗病育种的工作进程，而且加大了抗病品种选育的工作量。因而建立一种能对育种材料进行当代鉴定同时又不会影响到植株的生长发育的抗性鉴定方法就显得尤其的重要。另外，该方法还可以应用于水稻品种对条纹叶枯病抗性遗传分析和抗性转基因等科研领域。
发明内容
本发明的目的是提供一种鉴定水稻品种对水稻条纹叶枯病抗性的新方法。
本发明所提供的鉴定水稻对水稻条纹叶枯病抗性的方法，是根据禾本科植物分蘖的特性，将分蘖剥离，在可控条件下进行抗性鉴定，并根据分蘖的抗性表现，对整个植株的抗性进行评价。
在上述鉴定方法中，接种体采用的是带毒率在60％以上的灰飞虱群体，接种比率是2-5头/苗，接种时间是2-3天，可根据灰飞虱群体带毒率的高低和苗势的强弱进行选择。
所述用于鉴定的水稻在单分蘖鉴定之前应在相对隔离的条件下进行培养，待分蘖后采集分蘖进行鉴定。分蘖可以是同一植株上任一分蘖，要求该分蘖的生理年龄相对一致(一般为三叶期)。将分蘖在相对隔离的条件下进行接种(可采用试管接种或网罩接种)，接种后移栽，于水稻可正常生长发育的光、温湿度条件下培育至植株显症。
培养过程中定期观察植株的发病情况，逐个材料或逐株(枝)详细记载发病期和严重度，将发病严重度分为5级(周彤，程兆榜，周益军，等。水稻品种淮优粳1号和盐粳5号对条纹叶枯病抗性的遗传分析。江苏农业学报，2005，21(3)：241-242)：
0级，无症状；
1级，有轻微黄绿色斑驳症状，病叶不卷曲，植株生长正常；
2级，病叶上褪绿扩展相连成不规则黄白色或黄绿色条斑，病叶不卷曲或略有卷曲，生长基本正常；
3级，病叶严重褪绿，病叶卷曲呈捻转状，少数病叶出现黄化枯萎症状；
4级，大部分病叶卷曲呈捻转状，叶片黄化枯死，植株呈假枯心状或整株枯死。
凡有2、3、4级症状的直接记为发病，1级症状的则在随后跟踪记载中待发展为2、3、4级再记为发病，以发病高峰期且最能反映抗(感)病性差异的调查记载数据为依据作出抗病性评价。
本发明提供了一种水稻品种对条纹叶枯病抗性鉴定的新方法，取名为“水稻条纹叶枯病单分蘖鉴定法”。该方法较传统的苗期抗性鉴定方法等具有以下优点：①更适用于水稻条纹叶枯病抗性品种的选育工作。由于采用了剥分蘖鉴定抗性的方法，主蘖和其它分蘖得以保存，因此可进行当代选择，大大加快了品种选育的进程，也减少育种的工作量。②鉴定结果的精确性和准确性更高。由于采用剥分蘖的鉴定方法，可以每一单株取多个分蘖进行重复试验，提高了鉴定结果的精确性，而当某一材料因其它因素导致未能鉴定出结果时，也可通过再次剥取分蘖重新进行鉴定，提高了鉴定结果的准确性。③拓宽了抗性鉴定的时间。对同一材料在一个生长季节中可以多次剥取分蘖进行抗性鉴定，较苗期接种鉴定的一次性鉴定增加了鉴定的次数，拓宽了抗性鉴定的时间。④更适于遗传学的研究。遗传学研究需要充分分析抗病材料与感病材料间存在的差异，而进行抗性鉴定的感病单株往往很快就出现死苗，既无法获得后代种子，也不利于采集叶片进行核酸分析，而本方法则可以很好的解决这些问题。
附图说明
图1为水稻条纹病毒高亲和性灰飞虱群体筛选示意图
图2为RSV接种体灰飞虱群体的培养示意图(a为光温培养室中灰飞虱整体培养情况，b为单灰飞虱群体在烧杯中培养情况)
具体实施方式
下面实施例中所用方法如无特别说明均为常规方法。
实施例1、武育粳3号和镇稻88的接种鉴定
供试接种体：
按图1所示方法筛选获得的水稻条纹病毒高亲和性灰飞虱群体Q群体，以RSV斑点免疫法检测带毒率为73％。
供试植物材料：
水稻条纹叶枯病感病品种武育粳3号，由江苏省武进稻麦育种场提供原种，水稻条纹叶枯病抗病品种镇稻88，由江苏省农业科学院丘陵地区农科所提供原种。
抗性鉴定方法如下：
一、RSV接种体的培养及准备
灰飞虱Q群体在光温培养室中进行培养，温度控制在15～25℃，按图2所示方法进行饲养，待灰飞虱生长至3～5龄时即可作为RSV的接种体使用。
二、接种水稻材料的准备
将供试水稻品种单独播种于玻璃杯中，隔离培养避免其被带毒灰飞虱取食传毒，待其生长至三叶期(播种后15天左右)进行苗期接种。单分蘖接种时先将水稻在隔离灰飞虱的条件下进行培养，待水稻的次分蘖的叶龄也达到三叶左右，剥离叶龄为三叶左右的单个小分蘖进行单分蘖接种。
三、接种鉴定
按每苗2头虫的比例以灰飞虱Q群体对准备好的水稻材料进行接种，接种2天后移走灰飞虱，将秧苗移栽到大田培养显症，7天后开始调查植株发病情况(病级划分标准参照发明内容)，随后每隔3～6天调查一次，以发病高峰期且最能反映抗(感)病性差异的调查记载数据为依据作出抗病性评价，要求显症期间平均气温不低于20℃，最低气温不低于15℃。
四、苗期接种鉴定和单分蘖接种鉴定结果的比较
试验结果表明对水稻条纹叶枯病有不同抗感反应的水稻品种在秧苗鉴定和单分蘖鉴定时抗性表现基本一致，表明该项方法可用于评价品种的水稻条纹叶枯病抗性。结果如表1所示。
表1
本发明主要服务于针对水稻条纹叶枯病开展抗病品种选育的基层单位，可对抗水稻条纹叶枯病材料进行当代选择，有利于加快抗病品种的选育。同时该项技术还可在植物抗病性的遗传学和抗水稻条纹病毒转基因的研究工作中作为生物学检测方法应用，将能够大大加快研究的进程。
上述实施不以任何形式限定本发明。
Claims (1)
1、一种鉴定水稻品种对水稻条纹叶枯病抗性的方法，其特征在于：将单个水稻分蘖用于抗性接种鉴定，在可控条件下定期观察发病情况，作出抗性评价；其关键在于：(一)接种体采用的是带毒率在60％以上的灰飞虱群体，接种比率是2-5头/苗，接种时间是2-3天，可根据灰飞虱群体带毒率的高低和苗势的强弱进行选择；(二)所述用于鉴定的水稻在单分蘖鉴定之前应在相对隔离的条件下进行培养，待分蘖后采集分蘖进行鉴定；(三)分蘖是同一植株上任一分蘖，要求该分蘖的生理年龄相对一致；(四)将分蘖在相对隔离的条件下进行接种，接种后移栽，于水稻可正常生长发育的光、温湿度条件下培育至植株显症；(五)培养过程中定期观察植株的发病情况，按常用方法逐个材料详细记载发病期和严重度，以发病高峰期且最能反映抗病性差异的调查记载数据为依据作出抗病性评价。
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