CN100391475C - 一种紫睛制剂眼素肽注射液及其在制备治疗近视眼药物中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种用于治疗人体近视眼的药物制剂——眼素肽注射液，其特征在于为紫睛提纯活性物质灭菌水溶液，紫睛为脊椎动物，牛科、紫阳健康牛鲜全眼球，或马、驴、骡健康鲜全眼球，紫睛经过生物化学分析，含有各种微量元素，多种氨基酸、蛋白质、多酶、多肽、核苷酸、维生素等物质，微量元素、维生素、氨基酸营养素这三大元素，是动物紫阳牛眼结构功能代谢的物质基础，也是近视眼必需治疗补充的物质基础，牛眼这个生物化工厂的产品及活性物质直接参与人眼的组织代谢，可补脏气，滋养营血，养心健脾、壮眼肌、缓痉挛、平甘熄火、清肝明目、黑花消退、降瘀除障、阻止眼阻止退行病变，神光炯炯有神，光华发越于远处，视远视近自如，视力恢复如初。

Description

一种紫睛制剂眼素肽注射液及其在制备治疗近视眼药物中的应用

技术领域

本发明涉及一种紫睛制剂眼素肽注射液及其在制备治疗近视眼药物中的应用。

技术背景

在科学技术高速发展的今天，近视眼的研究迟迟不前，我们认为关键是在于病因学悬而未决，原因不明，难以施治。重点在研究方法上出了问题。病因病机是诊断之本，治则之根，辨证施治之源。

西方医学和国内的西医均将病因学限制在遗传问题上了，如单纯近视眼是多因子遗传而高度近视是常染色体隐性遗传，《近视的遗传控制论》阻止近视研究的发展。学术状态一直停留在实验研究阶段，尽管认识不断深入，成果甚微，理论概念仍就模糊不清，目前大医院只能配镜矫正视力或手术矫治。对于学生，戴上近视镜也控制不住学生的病情发展，随年级不断增长，近视度数也不断加大，对于学生，手术矫治又不是适应症，近视眼治疗攻克前景依然渺茫。

而目前在我国学生眼病-近视眼的医疗问题，对于新药的发现与发明，不但要看医疗质量，还要看接受医疗人群的经济能力。中国目前还是发展中国家，人民群众、工薪阶层大，普遍收入少，是温饱型的特点，让广大人民群众能接受的新药必须考虑造价低、品质高的产品，才能是广大学生全面接受治疗的药物。

中医理论是整体医学的先导，整体观是中医观人识病的理论的精髓，从古至今依然认为外因与内因相结合认证，先天不足，后天补。据考证，我国近视记载在2000年前的《史记》中有：“视如望羊”记载。公元610年，隋·巢元方《诸病源候论·目病诸候》中记有：“目不能远视，劳伤腑脏，肝气不足”。公元625年唐·孙思邈的《防治眼病16条》中有10条与近视有关。明末·傅仁宇《审视瑶函》指出：“肝经不足，肾经病”、“禀受生成近觑”、“久视伤睛成近觑”等等都说明“近视病因病机”是环境影响和先天不足交叉干扰所致。现今我国26年的学生体质、健康调研发现：原发性近视均发生于儿童和青少年的生长发育期，成人后很少发病。这完全与人体眼结构正视化倾向的生理特点有关，原发性近视有62.5％没有近视家族史；只有37.5％有近视家族史；杂合子发病占17.5％；高度近视人数占总人口数的1-5％。因此我们在人类基因组的大环境影响下进行“环境与基因”、“基因与环境”的深层次研究中建立了《环境基因组学》，完全否定《绝对遗传控制论》。判定中国学生近视是“可治人群”。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种紫睛制剂眼素肽注射液及其治疗近视眼的应用，提供了一种治疗效果好、治疗费用低、可广泛普及应用的治疗近视眼的制剂。

本发明提出的技术方案为：一种紫睛制剂眼素肽注射液，其特征在于采用紫睛以如下循环回流提取方法和中药小容量水针剂工艺流程提纯活性物质制成的用于治疗近视眼的灭菌水溶液：(1)配方：紫睛60g，苯甲醇2ml，吐温803滴，制成注射液100ml；(2)操作方法：原药紫睛取出，去除外包灯芯草，用水洗净，称重60g，将紫睛原药放绞刀中绞成浆液状，加注射用水100ml浸泡1小时，在水浴上浸煮五次，每次浸煮30分钟，过滤后，除渣，过滤液浓缩致1/2，在搅拌中逐渐加入95％乙醇100毫升，放置，过滤、滤液回收乙醇，同法用95％乙醇反复处理，致无沉淀为止，过滤回收乙醇，加苯甲醇、吐温80，在加入100ml注射用水，搅匀、过滤、分装、灭菌、样品检测、装瓶、封口、备用，肌肉注射或穴位注射用；

所述的紫睛为脊椎动物，牛科、陕西紫阳健康牛鲜全眼球。

上述紫睛制剂眼素肽注射液在制备治疗近视眼药物中的应用，所述的紫睛为脊椎动物，牛科、陕西紫阳健康牛鲜全眼球。

上述紫睛制剂眼素肽注射液，其特征在于紫睛四季均可采集，宰牛时将鲜活眼球摘出，洗去血渍，去净周围脂类杂物，盐渍后用灯芯草包裹、阴干，低温冷冻保鲜储藏，忌用火烘、日晒、风吹以防破裂变质，色鲜完整无破裂者为佳品，属眼科用药。

根据中医药名称传统命名法，用产地和药用部位对新药规范命名，紫阳牛眼，简称：紫睛。产地：陕西紫阳、安徽石台、湖北恩施等地。

紫睛为脊椎动物，牛科、紫阳健康牛鲜全眼球，或马、驴、骡健康鲜全眼球。

紫睛为球形或不规则圆球形，直径2-3厘米，重量60-80g，色鲜，完整，眼球前六分之一有半圆形胞睑、睑裂、睫毛，眼裂内有黑睛、曈神、白膜，后六分之一体壁较软，柔韧、表面呈乳白色，光滑有弹性，气微膻，有咸味。

紫睛四季均可采集，宰牛时将鲜活眼球摘出，洗去血渍，去净周围脂类杂物，盐渍后用灯芯草包裹、阴干，低温冷冻保鲜储藏。忌用火烘、日晒、风吹以防破裂变质，色鲜完整无破裂者为佳品。属眼科用药。

紫睛性味归经：甘平、咸、微寒；心、肝、肾、脾。

紫睛药物功能：具有补益脏气、滋养营血、平肝熄风、清肝明目、活血化瘀、通经活络、近视变症、通达复明。

本发明紫睛药剂剂型-眼素肽注射液：

注射剂：应当符合《中国药典》2000年版二部附录1B的规定

[适用范围]：各类各期近视、发育性眼病、远视、散光、斜视、弱视、眼疲劳、眼外伤、近视并发症、视神经萎缩、非化脓性角膜炎、红膜睫状体炎、波动体混浊、中心性视网膜脉络膜炎、近视性青光眼、近视性白内障等近视变证，紫睛为近视各症治疗配方的主味药。

本发明积极效果可以通过以下测定数据及临床结论得到说明。

一、本发明紫睛的含量测定方法：

1.测定设备：

(1)SB--01原子吸收光谱仪AAS.SOLAAR-M6 Tbermo jarrellashco.(USA)

(2)SB--23液相色谱仪HPLC.LC-10A shimadzn(JAPAN)

(3)SB--24电感耦合等离子体贸潽仪ICP-MSX7 Tbermo jarrellashco.(USA)

(4)SB--31日立8350氨基酸自动分析仪

2.测定标准

(1)GB/T5009.13-2003   (2)GB/T5009.14-2003 (3)GB/T5009.82-2003

(4)GB/T5009.84-2003   (5)GB/T5009.86-2003 (6)GB/T5009.90-2003

(7)GB/T5009.91-2003   (8)GB/T5009.92-2003 (9)GB/T5009.93-2003

(10)GB/T5009.123-2003 (11)GB/T5009.124-2003

3.测定结果

一、本品为陕西紫阳牛眼(简称-紫睛)，紫睛鲜品单味新药计量认证检测结果如下：

提供1、北京谱尼理化分析测试中心《检验报告》

检测：紫睛

(1)微量元素：

1)钙(Ca)：269.5mg/kg     2)铁(Fe)：45.8mg/kg      3)铜(Cu)：3.60mg/kg

4)铬(Cr)：1.30mg/kg      5)锰(Mn)：＜0.002mg/kg   6)镁(Mg)：67.1mg/kg

7)钠(Na)：7.56×10mg/kg  8)钾(K)：391.9mg/kg      9)锌(Zn)：5.81mg/kg

10)硒(Se)0.020mg/kg

(2)氨基酸：

1)天门冬氨酸(Asn)  1.12g/100g       2)苏氨酸    (Thr)   0.41g/100g

3)丝氨酸(Ser)      0.65g/100g       4)谷氨酸    (Glu)   1.80g/100g

5)甘氨酸(Gly)      3.24g/100g       6)丙氨酸    (Ala)   1.24g/100g

7)缬氨酸(Val)      0.41g/100g       8)蛋氨酸    (Met)   0.19g/100g

9)异亮氨酸(Ile)    0.39g/100g       10)亮氨酸   (Leu)   0.73g/100g

11)酪氨酸(Tyr)     0.31g/100g       12)苯丙氨酸 (Phe)   0.52g/100g

13)赖氨酸(Lys)     0.72g/100g       14)组氨酸   (His)   0.20g/100g

15)精氨酸    (Arg) 1.34g/100g  16)脯氨酸   (Pro)  1.75g/100g

17)色氨酸    (Trp) 0.19g/100g  18)胱氨酸   (Cys)  0.16g/100g

19)氨        (An)  0.22g/100g  20)氨基酸总和      15.59g/100g

(3)维生素

1)维生素A  1.85×10mg/100g    2)维生素B1   2.16×10mg/100g

3)维生素B2 7.13×10mg/100g    4)维生素B12  0.84μg/100g

5)维生素E  1.68×10mg/100g

二、提供2、北京谱尼理化分析测试中心《检验报告》

检测：眼素肽注射液

检验项目：

(1)微量元素

硒(Se)：0.020μg/g  钙(Ca)：9.2μg/g    锌(Zn)：0.047μg/g

铜(Cu)：0.023μg/g  铬(Cr)：0.021μg/g  锰(Mn)：0.042μg/g

(2)维生素

维生素B₁：0.14μg/g    维生素B₂：0.20μg/g

维生素B₁₂：0.0015μg/g

(3)氨基酸

苏氨酸：0.019mg/g    谷氨酸：0.243mg/g  甘氨酸：0.101mg/g

丙氨酸：0.098mg/g    缬氨酸：0.039mg/g  亮氨酸：0.044mg/g

苯丙氨酸：0.027mg/g  赖氨酸：0.030mg/g

三、提供3、北京谱尼理化分析测试中心《检验报告》

检测：鲜牛眼球

检验项目：

(1)微量元素

钙(Ca)120.6μg/g     锌(Zn)4.3μg/g     铜(Cu)1.0μg/g

铁(Fe)24.4μg/g      钾(K)717.8μg/g    镁(Mg)46.5μg/g

钠(Na)2337.2μg/g    锰(Mn)0.45μg/g    镍(Ni)5.9μg/g

铬(Cr)1.9μg/g

(2)氨基酸

天门冬氨酸：0.80g/100g   苏氨酸(Thr)：0.28g/100g    丝氨酸：0.48g/100g

谷氨酸(Gln)：1.27g/100g  甘氨酸(Gly)：1.62g/100g    丙氨酸(Ala)：0.73g/100g

缬氨酸(Val)：0.45g/100g  蛋氨酸(Met)：0.15g/100g    异亮氨酸(Ile)：0.31g/100g

亮氨酸(Len)：0.58g/100g  酪氨酸(Tyr)0.31g/100g      苯丙氨酸(Phe)：0.41g/100g

赖氨酸(Lys)：0.40g/100g  氮(An)：0.12g/100g         组氨酸(His)：0.16g/100g

精氨酸(Arg)：0.74g/100g  脯氨酸(Pro)：0.97g/100g    色氨酸(Trp)：0.16g/100g

胱氨酸(Cys)：0.08g/100g  氨基酸总和：10.02g/100g

注明：附检验报告计量认证(2002)量认(京)字(Z0407)

(3)维生素：

维生素A：51.9μg/g  维生素B12：0.25μg/g  粗脂肪：1.40g/100g

注明：附检验报告计量认证(2002)量认(京)字(Z0407)

[药品鉴别]

四、眼素肽注射液的无机成分--微量元素治疗近视眼的生理及药理作用分析

1.微量元素的药理分析：

中药成分与药效接轨分析药物作用，这是一种以分子药物学、生理学、病理学、细胞组织学的一个创新。微量元素是相对宏观常量元素而言的人体细胞功能的物质基础，微量元素虽然只为人体重量的0.05％，但与人体的生理功能关系密切，经实验证明，研究生长发育期的儿童、青少年近视眼的发生、发展、转归过程都与微量元素密切相关，如硒、锌、铬、铜、锰、钙的缺乏相关，所以在防治上必须注意微量元素的药物成分，以紫睛中微量元素明显高于其它产地牛眼中的硒为例分析如下：

(1)硒：是促进眼内多种代谢活动物质基础，成人体内含硒总量为14-21mg，以肝、胰、肾含量较多。硒是人眼中不可缺少的生理功能物质：硒在人体中主要以有机硒化合物形式存在有两种：一是含硒氨基酸，另一种是含硒蛋白质。硒化氨基酸主要是硒化胱氨酸(Se-Cys)和硒代蛋氨酸(Se-Met)；含硒蛋白质中最主要的是谷胱甘肽过氧化物酶(HSH-Px)。硒以两种形式在于蛋白质中，一种离解因素，另一种是特定位点发挥。

①、硒“视敏度”的基础物质：直接参与眼中光感受器的功能，参与光子转换成电信号的能量转换过程，从而保证视力正常功能，是视敏度的基础物质。鹰眼“视敏度”高就是因为含硒量高，膺眼视网膜中含硒700-800微克，正常人眼含7微克，近视眼发生、发展、转归过程中视网膜硒量不断减少，以致造成失明。经实验报告提示近视眼病理与微量元素密切相关。

②、硒促进眼内多种代谢活动的基础物质：硒代半胱氨酸是多种酶辅基的必需成分，特别是谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)是对抗体内氧化过程产生的过氧化氨对细胞的破坏作用。是保证细胞内代谢功能正常运行重要的物质。硒对α酮戊二酸脱氢酶系有明显激活作用。促进辅酶A、辅酶Q的生物合成，故与三羧酸循环和呼吸链的电子传递有关。三羧酸循环是物质代谢枢纽、是糖、肪肪、氨基酸三大营养物质分解的最后共同通道，是三大物质氨化分解获得能量最多的阶段，直接影响视力传导功能，具有很重要的眼生理作用。

③、硒具有抗细胞衰老，阻止眼结构的退行病变：自由基是人类细胞衰老的主要原因之一，其主要机制是脂质过氧化，即在氧存在下，自由基是诱发剂，可诱发细胞内外多种生化成分过氧化，使细胞膜、细胞内部结构和功能的损伤，引起生理、生化反应紊乱，表现出退行病变。因此，凡能消除自由基或抗氧化物，即可阻止抗衰老功能。硒正是通过抗氧化和清除自由基，减少或延迟脂褐素的形成，从而达到抗细胞衰老和凋亡的目地。在眼结构中，谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-P_X)是抗过氧化的重要的酶，其主要功能是阻止过氧化物和自由基的形成，而硒则是GSH-P_X的重要组成部分，每个酶分子中有4个硒原子。含有硒的GSH-P_X具有极强的抗氧化作用，能使过氧化物(ROOH)或H₂O₂还原成无毒的醇和水，正是由于含硒的GSH-P_X能崔化H₂O₂还原，使活性氧减少，才使得氧化不饱和脂肪酸以及脂类的机会减少，自由基的产生才不会过量，维持细胞正常旺盛的生理代谢功能，达到抗细胞衰老的目的。

④、硒在眼结构中对组织细胞修复作用：硒是眼代谢中肽和酶的主要成分，具有抗氧化清除自由基的作用，硒的抗氧化的功能物质是谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-P_X)的主要成分，硒代半胱氨酸为该酶提供活性中心的必须集团，谷胱甘肽过氧化物酶的重要成分，催化还原型谷胱甘肽变成氧化型谷胱甘肽，利用谷胱甘肽(GSH)使有毒性的过氧化物还原为无害的羟基化合物，使氧化物分解、清除自由基，而保护细胞膜结构与功能，阻止退行病变。对阻止近视眼的进展，促进修复起重要作用，修复分子损伤部位。硒是眼肌的正常成分，在缺硒时会使眼肌肉挛痉和萎缩，肌细胞致密性变，脂类增加，钙质沉着，致成肌力退变，硒能加速退变的结构细胞修复，对睫状肌细胞具有保护作用，明显抑制眼肌非酶促脂质过氧化，稳定变性区域内细胞和亚细胞膜减轻肌损伤、缩小变性细胞范围，因此达到对退行病的眼组织细胞，达到阻止退变和起到修复的目的。

⑤、硒的抗炎作用：硒是抗氧化剂也是抗炎剂，硒在抗氧化过程中特别是GP_X可减少过氧化氢脂质和磷脂过氧化氢，从而能减少自由基及活性氧类的集聚。在环氧化酶和脂氧合酶途径中，GP_X可以减少氢氧化物的中间产物，从而抑制引起炎症的前列环素和白三烯的产生。另外GP_X还能通过除去过氧化氢和减少超氧化物的产生而调节呼吸爆发。与氧化反应增加和炎症有关的疾病，都受到硒水平的影响。实验证明：利用两个细菌培养基中菌落(金黄色葡萄球菌和大肠杆菌)滴入含硒高的自然泪液中提纯物即是纯的“溶菌酶”滴至菌落3小时后菌落溶解消失。在这次实验中发现：用人眼泪液中提纯一种“溶菌酶”，成分即是谷胱甘肽过氧化物酶含量较高溶液，眼泪中的溶菌酶和其他溶菌酶比较形态较小，非常活跃，可以吸附到细菌细胞壁的夹缝里，“溶菌酶”的“酶钳”直接钳住细菌糖蛋白中两个糖环的氧，从而降低键能，使糖键很快破裂，于是细菌死亡而溶解达到抗炎目的。谷胱甘肽过氧化物酶不但具有抗氧化特性，还有抗菌消炎的作用。

⑥、硒与免疫功能：无论从流行病学研究，还是动物实验都已证明硒对近视眼的发生、发展都有着重要的关系。硒对生物体液免疫功能的影响，也日益引起人们的重视。此已证实在人类胚胎发育的早期硒已成为必需元素，它除了作为GSH-Px的成分，在清除自由基、保护细胞膜、核酸、蛋白质的正常结构与功能外，还能拮抗重金属(汞、铅、砷、镉、铊)的毒性，具有解毒作用。据实验证明：利用人外周血淋巴细胞与10^-9～10^-6M的硒一起培养，发现硒能促进干扰素的产生，并且在体外可以增加r-干扰素的活性，增强人NK细胞的细胞毒作用。我们也发现在亚硒酸钠存在下，ConA诱导的鼠脾细胞分泌1L-2活性增强非常显著，为对照组的2～3倍；经硒预处理可自发分泌1L-2的产生。硒还能显著增加巨噬细胞的分泌1L-1在LPS存在的条件下，加入亚硒酸纳的1L-1其活性在不同的稀释条件下的显著高于对照组。人外周淋巴细胞及小鼠脾细胞经低浓度的硒预处理后PHA和ConA诱导1L-Z活性水平明显升高；并发现亚硒酸钠浓度为3×10^-7M时，其促进作用最强，1L-2活性水平为对照组的2倍。

实验证明：硒还能增加免疫球蛋白的分泌，增加白细胞吞噬和杀菌能力以及使脾脏粘附细胞的抗原提高能力，虽然亚硒酸钠本身无直接活化巨噬细胞的作用，也不能促使淋巴细胞产生巨噬细胞激活因子(MAF)，但与MAF有协同激活巨噬细胞而增强抗癌活性，同时能除低巨噬细胞对淋巴细胞的抑制作用。我们从硒对淋巴细胞诱导的细胞毒细胞(LICC)调节的研究中，发现硒可活化腹腔巨噬细胞，其产生的细胞毒分化因子(CCDF)可与1L-2协同激活LICC的活性；同时还发现应用体内能活化巨噬细胞并能促进其吞噬功能的硒剂量在体外实验时无显著的促LICC的细胞毒活性作用，而高剂量的硒对LICC有可逆性的抑制作用。

在进行硒对人NK细胞活性的体外影响及其机制的研究后得出如下结论：

1)浓度为100-500ng/ml的亚硒酸钠可以明显增强NK细胞的细胞毒活性；

2)效靶比值愈高，增强作用愈显著；

3)硒并不损伤靶细胞膜，也未见激活外周血单个核细胞释放出更多的自然杀伤细胞毒因子(NKCF)。认为硒可能是通过激活NK细胞和靶细胞膜表面的某些结构促进两者结合，从而增强NK杀伤活性。此外也观察到硒在体可以扩大重组r-干扰素(HnINF-r)对NK细胞的增殖作用。微量元素对机体免疫具有显著促进作用。

五、中药的微量元素研究：

微量元素研究是穿插在药材、加工制剂、临床应用等各方面的研究项目。过去中药有效成份研究大多偏重于有机物，而对其中无机物的研究较少。80年代以来，随着人们对微量元素作用认识上的提高，中药的微量元素研究也迅速展开，主要表现在下列几方面：

①单味药微量元素测定：如紫睛的成分测量时发现成分中含有锌、硒、铜、铬、锰、钙等多种微量元素和钠、钾、镁等常量元素，决定它在治疗中的地位。又如何首乌的含铁量测定高于其它的微量元素，人参的微量元素测定中，还发现含有对人体有害的镉、锑、铋、铅等有害物质，因此长期服用要注意适度。

②同一种中药不同产地的微量元素研究：如紫睛必须是紫阳牛眼含量有治疗价值，其他地区牛眼的含量极低的不能入药治疗疾病。又如天麻中铷和锰的含量最高，但不同产地、含微量元素的量不同。特别是铷、锰、钻、锂、钼等，认为此可作为评价天麻质量的物质基础之一，兼评价药味质量。见紫睛不同产地含量元素分析表：

不同产地鲜牛眼球微量元素含量对比表

注：紫阳地区牛眼明显高于上海地区牛眼的含量，而对眼功能起干拢作用的锰倒低于上海，为我们研究近视眼治疗对药源采集起到提示作用。

③与临床有关的功效应用研究：如有人用原子吸收光谱法对当归等40种调经药中锌、铜、铁的含量进行测定表明：巴戟天、当归等含铁高；黄精等含锌高；五味子等含铜高。提示了中药补肾、养血、活血、补气药的物质基础以及锌、铜、铁与人体内分泌功能之间的关系密切。

④同种中药不同部位的微量元素研究：如当归的身、头、尾，临床功用不同，其微量元素也不同。有人用能量色散X射线分析法，分别测定了当归头、身、尾中的多种金属含量，发现秦当归头中钙、铜、锰含量最高，为归身或归尾的1.5-6.8倍；归尾中钾、铁含量最高，为归头或归身的1.5-2倍。川当归也如此。紫阳牛体中的各器官含微量元素均较高，但是只有紫阳牛眼含量适合含治疗人眼近视眼的各种有机化学成分。

⑤栽培与野生：包括人工合成与天然药物之间微量元素的研究。如野生动物与训养动物，野生植物与栽培植物之间所含微量元素存在差异。大部分元素含量与产地土壤中元素含量(特别是活性部分)成正相益性。所以，可以考虑通过微量元素的补给措施来提高人工栽培或人工饲养的质量。(微量元素锌、铜、铬、钙、锰等详见近视基础研究与应用研究紫睛、眼素肽、紫睛组方、中药新药项目总结报告书)

六、紫睛的有机成分：氨基酸、多肽、蛋白、酶在近视修复中的药理作用分析

1.氨基酸与蛋白质：氨基酸组成蛋白质的基本单位人类摄食蛋白质的最终目标，是取得机体所需要的各种氨基酸。

2.构成蛋白质的第一步是每个氨基酸必须与下一个氨基酸相连，在一个氨基酸的氨基和另一个氨基酸的羧基间间形成一种称做肽键(peptide bond)的化学键。侧链从碳骨架中伸出，决定蛋白质特定的性质。

3.一切蛋白质都是因氨基酸组成的，而氨基酸可分解组成肽和酶，与微量元素结合可形成微量元素代氨基酸或蛋白质，组成特殊的蛋白质，完成生命活动中的特殊功能，因此蛋白质和一切生命活动总是连在一起的，可以说没有蛋白质及其相联的核糖核酸，就没有生命的存在。照目前所知，人体必需六大类营养物质：即蛋白质、脂类、碳水化物、维生素、矿物质及水。其中至少包括40种以上的营养素，每一种都不能缺乏，每一种都重要，但是在六大类营养物质中，起着特殊而又中心性作用的是蛋白质，蛋白质的功能众多，在此只能阐述一些代表性的部分，不过也可以说明蛋白质在体内作用的多样性，独特性和重要性。蛋白质被称为生命的首要物质，其主要的作用：

①机体及机体一切细胞的基本构成物质。

②构成机体差不多所有的生命活性物质，包括酶类、激素类、抗体及免疫物质类，以及形成机体的渗透压，引发机体的各种活动及氨基酸的特殊作用：蛋氨酸可供甲基形成胆碱、乙酸胆碱。如色氨酸是尼克酸和5-释色胺的前体物；蛋氨酸可供甲基形成胆碱、乙酸胆碱。甘氨酸可是形成叶林、嘌呤、嘧啶的重要成分等等。

③蛋白质是体内很多重要的代谢物质、营养素的载体，例如多种脂类、维生素、矿物质与微量元素都需要蛋白质，或专一性蛋白质携带和运转。

④人体内数以千计的各种各类蛋白质由不同的氨基酸组成，这是六大营养物质中特有的，是生命活动的需求物质。

⑤支持机体生长发育和组织更新：

蛋白质是所有的生命细胞和体液的重要成份，是构成机体的肌肉、内脏和内分泌系统的主要成分，是机体生长发育和组织修复更新的物质基础。新生组织蛋白质的合成需要氨基酸的连续供应。这些心组织可位于胚胎中，正在发育的幼儿、儿童和青少年中烧伤、出血或术后需要补充新鲜血液中，伤口愈合的疤组织中或是新生的头发和指甲中。更不为人注意的是我们每个人每时每刻体内新陈代谢过程中的蛋白质的作用。红血细胞的寿命只有3-4个月，到一定时间就会被骨髓产生的新细胞所代替。消化倒闭的细胞只能存活3天，他们在不停的脱落和更新。皮肤细胞会死亡脱落，而新的细胞由从下面生成。几乎所有的细胞都要经历这种生成、生存和死亡的过程。细胞活动中，自身的蛋白质叶在不断的被合成和分解。食物中的氨基酸可以支持所有的这些机体生长和组织构件维护更新的过程。

⑥合成酶、激素和其他化合物：

酶是细胞中作重要的蛋白质之一。单个细胞中就有成千上万的酶，每一个都是一种催化剂，可使某个特定的化学反应顺利进行。

酶是催化剂：可使本可以发生但进行速度又很慢的反应速度加快。酶可使两个化合物A和B处于合适的位置，从而使两者之间特别容易发生反应。化合物A和B被吸收到酶的活性部位并安置在使反映最容易发生的最佳位置处。生成新的化合物AB后离开。

单个酶分子可以在一秒钟内完成几百次类似的合成反映，有一些酶可将化合物分解为两个或更多的产物或将一个化合物的原子进行重排生成另外一个化合物。体内由很多激素(hormone)是信号分子，其中有一些来自于氨基酸。也有一些激素来自于脂类。多种腺体根据体内环境的变化分泌相应的激素，然后激素诱导必要的反映以使环境恢复正常。甲状腺激素是由氨基酸构成的激素，用于调节机体代谢。胰岛素和胰高血糖素是一对作用相反的激素，用于维持血液中葡萄糖的水平。体内还有很多其他的激素在参与调节机体中各种同样重要的功能。有多少氨基酸按照一定原则连接形成人体的胰岛素，以及某些侧链是如何互相吸引左中形成具有正常功能的胰岛素分子的。

除了作为合成蛋白质的原料外，氨基酸本身在体内也有作用。例如，酪氨酸是化学信使肾上腺素和去肾上腺素的组成部分，这些信使可以传递全身各处的神经信号。身体还使用酪氨酸合成黑色素，黑色素是皮肤、头发和眼睛颜色的来源。酪氨酸也可以转化成甲状腺素以调节机体的代谢速率。色氨酸是神经递质血清素和维生素烟酸的合成原料。

⑦合成抗体：

在生物体所有种类的蛋白质中，抗体(antibodies)最能够说明蛋白质的生物特异性。抗体能够识别属于自身的蛋白质和侵入人体的外源微粒(通常为蛋白质)，而且只会与后者发生作用。外源蛋白质可能是细菌、病毒或毒素的组成部分，或是食物中引起过敏的某种成分。机体识别出入侵的蛋白质，就会产生专门用来抑制这种蛋白质的抗体。

每一种抗体只能用来摧毁一种特定的入侵者。一种抗体能够有效抵御某种流感病毒，而对感染了另一种流感病的病人来说则会毫无效果。一旦机体产生某种特定的抗体，就会对此产生记忆性。下次同样的入侵者来犯时，他就可以更为迅速的进行抵抗。换句话说，即人体对该入侵者产生了免疫力。这种分子记忆就是免疫接种的原理，免疫接种即给人们注射死亡的或失活的微生物或其产物来激活人体的免疫防御系统。有些免疫力是终生的，而对于其他的一些比如破伤风，则需要一定时期接种一次。

⑧提供能量：

氨基酸的各种功能只有蛋白质能够实现，蛋白质在必要的时候也能够提供能量。人体时刻离不开能量，一次获得能量是最为首要的。

1)当氨基酸被分解产生能量时，氨基将被除去，用于别的用途或被肝脏吸收转化为尿素(urea)，运送到肾脏以尿的形式排除。剩下的部分与糖和脂肪一样，都是由  碳氢和氧组成，可以被用来合成糖和脂肪或者与氨基酸的碳架在人体内可能转化生糖氨基酸，及而转化成葡萄糖被利用，或以糖原的形式贮存起来，氨基酸也可转化生酮氨基酸，进而转化脂肪而被利用。

2)氨基酸不仅能提供能量，而且很多氨基酸可以转化为葡萄糖，这一点脂肪则不行。因此在必要的条件下，蛋白质能够帮助维持稳定的血糖水平，满足大脑对葡萄糖的需要。

3)三种提供能量的物质的相似之处和区别现在应该很清楚了，糖提供能量，脂肪提供高能量，而蛋白质在需要的情况下提供能量及氮。

4)只有糖和脂肪提供的能量足以满足细胞的需要时氨基酸才能会都用来进行蛋白质的合成。人体可以产生由糖和脂肪贮存能量的化合物，其中葡萄糖以糖原的形式贮存，而脂肪以三酰甘油的形式贮存。而蛋白质只是以组织的结构成分和功能分子的形式存在。当情况紧急时，人体就不得不分解组织蛋白质得到氨基酸来获得能量。每种蛋白质的调用都有一定的次序：首先是血液和肝脏中的小蛋白质，其次才是肌肉和其他器官的蛋白质。因此能量不足(饥饿)则会同是导致脂肪和机体非脂肪组织的消耗。

5)人体无法储存过量的氨基酸，这时只有将其氨基脱去，并将剩下的碳骨架转化为贮能物资肝糖原和脂肪。

⑨保持体液和电解质平衡：

蛋白质可以通过调节体内各部分液体的量来帮助保持体液和电解液的平衡(fluid and electrolyte balance)。活细胞中必须保持一定量的液体，过多的液体可能导致细胞胀破，而过少则可能使细胞丧失功能。尽管水能够自由的进出细胞，可蛋白质不行；而蛋白质又是具有亲水性，所以细胞可以通过保持胞内的蛋白质和其他一些矿物质的储存量，来维持它们所需的液体。细胞还能够通过分泌出蛋白质和抗物质来保持细胞间恒定的液体体积，这样就可以保持内外合适的平衡。假如这套系统失常，细胞外就会积累大量的体液造成水肿(edema)。

除了体液的量，体液的组成也对生命具有极其重要的意义。细胞膜上的运输蛋白通过不断地将各种物资运出或运进细胞来维持体液组成。比如，钠在细胞外的浓度较高。这种平衡如果受到破坏将会损害心脏、肺和大脑的功能，导致严重的急性病。细胞中的蛋白质抑制在兢兢业业地使液体和电解质维持在合适的比例，避免这种灾难性情况发生。

⑩维持酸碱平衡：

正常情况下身体不断产生酸(acids)和碱(bases)，必须由血液运送到排泄器官。血液必须在不影响自身酸碱平衡(acid-base balance)的前提下来完成这项工作。这就是血液中蛋白质的另一项功能，他能够作为保持血液正常PH值的缓冲物质(buffers)，它能够收集过多的氢离子(酸)，并可以在氢离子太少的时候将其释放出去。其机制就在于氨基酸的侧链带负电，在必要的时候能够容纳另一个带正电的氢离子。

血液PH值使体内受到严格控制的条件之一。假如PH值变化过大，将会导致危险的酸中毒(acidosis)或相反的碱中毒(alkalosis)，造成昏迷甚至死亡。这种情况之所以危险在于它们会对蛋白质产生影响。当蛋白质的缓冲能力已经达到饱和时，即接收的氢原子已经达到了他们能够接受的最大限度时，过多的酸将使他们变性，从而使身体很多过程受到破坏。概括并补充了我们前面讨论的蛋白质的各种功能。见表：

表  蛋白质功能的概括表

总而言之，细胞中的氨基酸可以被用来：1.合成蛋白质；2.转化为其他小的含氮化合物，如烟酸；3.转化为其他氨基酸。因此紫睛在近视眼治疗中的作用起到营养、再生、修复的功能。(详见近视基础研究与应用研究紫睛、眼素肽、紫睛组方、中药新药项目总结报告书)

七、紫睛的维生素在近视人体中生理、药理作用分析：

维生素是维持人体正常生命活动所必需的一类有机化合物，在体内其含量极微，但在机体的代谢、生长、发育等过程中起重要作用。它们的化学结构与性质虽不相近，但有共同特点：①均以维生素本身，或可被机体利用的前体化合物(又名维生素质)的形式存在于天然食物中；②非机体结构成份，也不提供热能，但担负着特殊的代谢功能；③一般不能在体内合成，或合成量太少(维生素D例外)，必须由食物提供或药物补充；④人体只需极少量即可满足，但绝不能缺少。缺乏某种维生素至一定程度，可引起维生素缺乏症。近视眼发生发展过程中就显现出多种维生素缺乏特征，眼素肽注射液的发现正是眼结构大量需要多种维生素补充的药。

本发明的积极效果是显而易见的，紫睛经过生物化学分析，含有各种微量元素，多种氨基酸、蛋白质、多酶、多肽、核苷酸、维生素等物质，微量元素、维生素、氨基酸营养素这三大元素，是动物紫阳牛眼结构功能代谢的物质基础，也是近视眼必需治疗补充的物质基础，牛眼这个生物化工厂的产品及活性物质直接参与人眼的组织代谢，可补脏气，滋养营血，养心健脾、壮眼肌、缓痉挛、平甘熄火、清肝明目、黑花消退、降瘀除障、阻止眼阻止退行病变，神光炯炯有神，光华发越于远处，视远视近自如，视力恢复如初。(详见近视基础研究与应用研究紫睛、眼素肽、紫睛组方、中药新药项目总结报告书)

八、紫睛提纯液--眼区穴注眼素肽注射液治疗近视眼

近视治愈后睫状体的动态观察报告

我们于2002年采用了UBM对68例眼区穴注眼素肽(眼明)治疗近视眼治愈病历停药三年后进行眼的视近、视远的调节动态观察，视近、视远不同的自发调节状态下睫状体形状位置的动态变化作详尽观察，旨在间接了解近视眼治愈后活体人眼调节时悬韧带的活动方式。并评估中药紫睛组方及紫睛提纯液眼素肽(眼明——注射液治疗后的眼组织结构、肌力、肌群在治愈眼恢复的变化状况报告如下：

一、临床资料

2000年1月至2004年4月眼区穴注眼明注射液临床共治近视患者1328例，共2608只眼，(内含48只单近视眼)，其中单纯近视眼1172例，2296只眼，病变性近视156例，312只眼。男性608例，1184只眼，女性720例，1424只眼。年龄7-22周岁，病程最短5个月，最长12年。2001年至2003年进行对停治的患者随机取样追踪检查192例，384只眼。在各型各期近视眼治愈患者中随机取样68例(68只眼)，其中男性30例，女性38例。右眼屈光度数为-4.50-0.00D，平均(-1.47±1.39)D：左眼-3.00-0.00D，平均(-1.28±1.20)D。均取左眼进行观察，其中治愈的28只正视眼，40只经治疗后，尚有低度近视，矫正视力远视力1.0以上的近视眼。被观察人员必须排除现患其他眼疾，各类眼表炎症、散光、弱视、远视、角膜疾患、青光眼、白内障和虹膜睫状体炎等，并禁止使用睫状肌调节药物如阿托品、毛果芸香碱等的个体。

二、观察方法

1、仪器：采用美国Paradigm^NIUBM P40型超声生物显微镜，换能器频率50MH²，探头侧向和轴向分辨率均为50m，探察深度和宽度约5mm，监视器显示范围5mm×5mm，(864像素×432像素)。

2、检查方法：充足照明下，受检对象右眼用0.4％丁卡因表面麻醉，仰卧平躺，右眼结膜囊内置合适眼杯(直径20mm或22mm)，其内注适量0.9％生理盐水接触剂，调整探头与眼球垂直。分别以边长4cm和0.4cm的白底黑“E”作为视远、视近的注视目标。瞩受检者头不能动、双眼左转，用左眼注视与眼位平齐左上方斜角约45°及5m远处(理论无限远点)远视标，(最小)调节状态下用UBM摄取右眼9点钟方位睫状体横断面图像2张(视远1图既视远2图)；再瞩受检者注视相同角度自身近点处近视标，同法摄取近(最大)调节状态下睫状体横断面图像2张(视近3图及视近4图)。所有检查均由笔者独立完成。

a)测量方法：所在图像由热磁打印机打印，AGFA SnapScan e20扫描仪以光学分辨率300dpi图像放大200％扫描，以3D-DOCTOR3.5.011019影象分析软件对其进行多个二维变量的测量，每个变量测3次取平均值。所有测量均由笔者独立完成。测量内容包括18个参数(图1)

三、统计学方法

结果输入SPSS10.0for windows统计软件包，进行调节前后各变量间单因素方差分析、多因变量线性模型方差分析及二元变量相关分析中的偏相关分析。

图例说明：CBT1：睫状体厚度1[4]，巩膜突后1.0mm垂直于巩膜内表面的睫状体厚度。CBT2：睫状体厚度2[4]，巩膜突后2.0mm垂直于巩膜内表面的睫状体厚度。CBT3：睫状体厚度3，巩膜突后3.0mm垂直于巩膜内表面的睫状体厚度。CBT4：睫状体厚度4，巩膜突后4.0mm垂直于巩膜内表面的睫状体厚度。CPD′：睫状突长度，巩膜突后1.5处到睫状突内尖的距离。SC：巩膜突睫状突距离，巩膜突到CPD′的垂直距离。CT：睫状突宽度，过睫状突虹膜移行点作垂直CPD′的直线与睫状突另一缘相交于一点，两点间距离。TCPD′：小梁睫状突(内尖)距离[3]，巩膜突前500到内尖与虹膜长轴平行线的垂直距离。ICPD′：虹膜睫状突(内尖)距离，TCPD′：线上虹膜与睫状突内尖的距离。AOD500：500房角开放距离。巩膜突前500m垂直于角巩膜缘内表面一直线于虹膜相交于一点，两点间距离.θ1：小梁虹膜夹角[3]，虹膜隐窝与AOD500两点分别连线间的夹角，θ4：巩膜睫状突夹角[3]巩膜外表面切线与睫状突夹角。θ3：巩膜虹膜夹角[3]，巩膜外表面切线与虹膜移行点分别连线间夹角[3]。θ5：虹膜睫状突夹角，虹膜长轴与睫状突夹角。θC：睫状突内尖成角与皱褶部平坦部交界点，睫状突虹膜移行点分别连线夹角。AE：巩膜突后4mm之间睫状体横截面积。Ar：环形肌面积。

由睫状突虹膜移行点平行于巩膜内表面到皱褶部平坦部交界点一线以内的睫状突面积。A1纵行肌面积，为上两者之差。

四、观察结果

1、治后眼视远、视近调节时睫状体区UBM影像(图2)

由UBM图像可见，治后眼视远时睫状体皱褶部较平坦，厚度与平坦部无异，睫状突较短较宽，其内尖较钝，与虹膜距离较远，前房角较宽：视近时睫状体皱褶部明显向眼中轴隆起，高于平坦部，睫状突变长变窄，内尖变成直角甚至锐角，并旋前靠近虹膜，前房角开放程度略有变小。视近及视远时，虹膜、巩膜均无明显变化。

2、眼视远、视近调节时睫状体区各参数变化(表1)

表1  治疗后眼睫状体在视远和视近状态下形态位置参数(x±s)

注：*为视远1图，2为视远2图，3为视近3图，4为视近4图

(1)睫状体形态位置的改变(表2)：

注：*示视远、视近时差异有统计学意义。1、2、3、4分别表示视远、视近各2图，1-2、3-4等分别为两图间参数作比较**Tamhane及SNK检验均为SPSS统计软件中单因素方差分析的常用方法，前者用于方差非齐性者，后者用于方差齐性的数据。

在68只眼视远1、2图及视近3、4图间，进行各组间睫状体的形态参数CBT1、CBT2、CBT3、CBT4、CPD′、CT、θC、Ae、Ar和AL的ANOVA分析。结果表明：(一)、受检眼CBT1视近比视远有明显增大，而CBT1视近比视远有明显增大，而CBT2、CBT3、CBT4却无明显改变，睫状体调节时主要是巩膜突后1mm处即皱褶部前份增厚，而2、3和4mm处即平坦部却无明显变厚。(二)受检眼视近与视远相比，CPD′明显增加。CT和θC明显减小，即调节时睫状突变得尖锐且长而窄。(三)受检眼Ae和Ar在视近比视远明显增大，A1却变化不大，说明调节时4mm前睫状体横截面积增大，尤其是睫状突部，即环形成肌所在，而纵行纤维则无明显改变。4组间68例治疗后眼睫状位置参数SC、TCPD′、ICPD′、θ4、θ3和θ5的ANOVA分析表明，视近和视远比较，除θ3外，其余均变小，即睫状突与巩膜突、小梁网(巩膜突前500m)、虹膜的距离，与巩膜和虹膜夹角均显著减小，说明调节时睫状突内尖明显前移前旋。而巩膜虹膜夹角无明显改变，虹膜未见明显位移。比较4组间前房角参数AOD500和θ1的变化。视近比视远时AOD500减小，θ1则无明显变化，即500m房角开放距离已有减小，而小梁虹膜夹角尚无明显改变，说明近调节时前房轻微变浅，房角开放程度略下降。视远、视近调节间进行多因变量线性模型方差分析比较，得出上述相同结果。

(2)睫状体形态位置相关分析研究：对睫状体各形态位置参数作相关分析，结果表明：(一)视近调节时，睫状体内间向前靠近虹膜的位移与睫状体前部厚度及睫状突长度的增加无显著相关性，而与各位置参数改变的程度高度相关，各位置参数变化高度一致(表3)。

表3  睫状体TCPD′改变相关因素分析

注：*示差异有显著意义

(二)睫状突内尖变尖程度与睫状体前部厚度、睫状突长度的增长，与其到巩膜突距离和巩膜夹角的减小高度正相关，并随着面积增加的程度而增大；但其与睫状突宽度、到小梁的距离无明显相关性(表4)

表4治疗后眼睫状突成角θc相关因素分析

注：*示差异有显著意义

(三)睫状体前部越厚、睫状突越长而尖，其环形肌部面积增加越多；但睫状突越窄，此面积增加越少；其与睫状突内尖的前旋没有明显关系(表5)

表5治疗后眼睫状体面积Ar相关因素分析

注：*示差异有显著意义

(四)调节时前房角的变浅程度与CBT1和CPD′的变厚、TCPD′和θ4的减小呈高度正相关(表6)，说明调节时前房角的变化与睫状体形态和位置的改变有关。

表6治疗后前房角调节时改变(AOD500)的相关因素分析

注：*示差有显著意义

第五观察小结

一、试验对治后人眼在有限距离内视远、视近的自发调节进行了初步研究，我们还可进一步了解调节时巩膜、虹膜、眼轴长度^[5]的作用以及前房的改变^[6]；直接观测睫状体、晶状体、悬韧带系统^[3]的微妙联系。和验证治疗后眼结构的恢复程度。另外，调节前后睫状区颞侧和鼻侧各参数及其变化是有明显区别的^[7]，进一步研究调节与集合的关系。几百年来，眼调节机制一直是研究争论的热点而争论的焦点，主要集中在调节时悬韧带松驰还是紧张这一问题上。超声生物显微镜的发明弥补了普通A、B超成像的清晰度差的不足。可在活体人眼上用低倍变显微镜无创观察效果。三维超声活体显微镜显示像检查的开发^[8]，提高了空间关系可视化程度，亦为眼前节解剖结构和调节机制的进一步研究提供了新路径，也为眼结构活体动态观察打下基础。

本试验用UBM观测和分析治疗后人眼自发视远视近调节时，睫状区结构多个参数的变化，结果表明，在视近调节时睫状体各部肌纤维协调收缩，主要是环形肌收缩，使其向前向内位移，睫状突变尖前旋，靠近晶状体，从而悬韧带松驰，前房角变窄。本研究结果支持Helmholtz的调节松驰学说。这是近视眼治疗学研究又进一大步。也是对治疗抗疲劳的“紫睛的药理作用”与“屈度调节说”的提供理论依据。

二、调节时睫状体形态位置的改变

治愈后的人眼与正常人眼对比看治愈后人眼从视远变为视近时，屈光介质需要增加屈光度数来增大对进入光线的折射与会聚，使发散光线清晰聚焦于视网膜。灵长目动物，如恒河猴和人类，这一过程主要通过睫状体-悬韧带-晶状体系统的变化来完成：视近时睫状肌的收缩，改变了悬韧带对晶状体牵拉的张力，由于晶状体自身囊膜的弹性和基质的可塑性使其前后径增大，前表面明显前突，曲率半径减小，屈光度数因此增加：视远时睫状肌舒张，逆行上述改变，屈光度数变小。

由于睫状突底部(2mm)占整个睫状体长度1/3，巩膜突后1mm处相当于睫状体皱褶部中央最突出的地方，而2、3、4mm处相当于其平坦部。视远时，皱褶部较平，睫状突短而宽，内尖较钝，类似一以巩膜为底边、内尖为顶角的钝角三角形；视近时皱褶部向内突出，睫状突变的长而窄，内尖也变成直角甚至锐角，像一个以睫状体靠近虹膜的前缘为底边，巩膜为对边的直角三角形，睫状突越突出，其内尖也越尖。

视远时，睫状突距离各标志点，如巩膜突、巩膜突前500m的小梁网以及虹膜均较远。视线由远及近，睫状突明显靠近上述标志，甚至紧贴虹膜，与虹膜的距离消失，与巩膜外表面切线的夹角也明显变小，充分说明近调节时，睫状突尤其是其内尖的确在前旋前移。睫状肌收缩时，由于巩膜内表面凹面向内，同时前止点巩膜突顺应性小于后止点锯齿缘顺应性，因此睫状体整体即沿内表面弯曲的幅度向前位移，其结果必然是向内(眼轴)向前的移动。睫状肌收缩越强，睫状突越长而尖，也越靠近虹膜和巩膜突。

由于睫状体的向前、向内移动，又由于睫状体收缩时内尖明显向内突出，不论晶状体赤道部直径如何，两者之间的距离明显缩小，连于两者间的悬韧带松驰，放松了悬韧带对晶状体赤道部的向外牵拉力，进一步完成调节的功能，这也是完全符合Helmhotz松驰学说的理论。治疗后眼的调节完全与正常眼功能调节具有相关一致性。

试验中我们还观察到，视近时前房角开放程度略有缩小，而小梁虹膜夹角尚未变窄，不足以引起类似闭角型青光眼那样明显的房角变窄或关闭。这一微小变化与睫状突的变长和前移前旋有一定相关性，可能是因为睫状体的收缩牵拉巩膜突有向后位移趋势所致。

三、调节时睫状肌的收缩

近调节时，睫状体前部(CBT1)明显变厚，这正是3组肌纤维最集中的地方，睫状突明显增长变尖，恰是环形纤维所在：睫状体后部(CBT2、CBT3、CBT4)却无明显变化，而这一段主要分布纵行纤维，已没有环形纤维。另外，睫状体横截面积在视近时比视远明显增大，增大的部分主要是皱褶部向内突出的部分，也就是环形肌纤维之所在，其增大的幅度也与上述改变高度正相关；而纵行纤维部分却无明显改变，同时环形肌收缩的改变与睫状突的前移前旋似乎也没关系。由此可见，各部肌纤维在视近调节中主角是环形纤维，收缩时肌纤维环像弹性圈般向中心缩小，半径减小，与晶状体距离缩小而松驰悬韧带，收缩越强烈，睫状突内尖越锐利，产生的调节越强；纵行纤维可能主司连接前后止点的作用，并由于前上点顺应性的不同而使睫状体位移。两者各司其职，互相没有明显的影响，这就为观察近视眼治疗后和治疗前对比研究组织结构提供了依据。

四、通过以上睫状体的动态观察完全证实了《中药紫睛组方》及紫睛提纯液一眼素肽注射液，《眼区穴注眼素肽注射液治疗近视眼》医疗新方法治疗近视眼的治愈效果提供组织学的依据，由于经过治疗的眼组织结构、肌力、肌群纤维的恢复促使远视力的恢复，眼生理功能的恢复，视远、视近调节的完全恢复达到超前组织结构和功能水平，因此在临床上有治愈患者依然在治疗前同等的环境下生活、学习，眼睛不但不再发生近视，这就说明强化抗疲劳的效果。完全达到《全息免疫平衡疗法》的目的。临床观察眼组织结构的恢复的患者中有经过3年到13年时间考验、具有健壮、灵敏的调节力不变，均可达到远、近视力的调节达到正常水平，这对于近视眼治疗后远期的疗效的评估具有重要意义。今将典型病例32例后附门诊统计表壹份。

附图说明

附图1眼前节结构参数测量示意图

附图2治疗后人眼睫状体区UBM影像

附图3为本发明循环回流提纯方法流程图

附图4为本发明中药小容量水针剂工艺流程图

实施例1：

[提纯药液]

眼素肽注射液为紫睛以循环回流提取方法及工艺提纯活性物质灭菌水溶液，本品为无色或微黄色澄清液体。为紫睛代表鉴定药液。每1ml相当于鲜品紫睛1g或2.5g，含量：1ml：1g；1ml：2.5g；2ml：2g；2ml：5g.检测结果每1g中含量：

(1)微量元素：

硒(Se)：0.020μg    锌(Zn)：0.047μg    铜(Cu)：0.023μg

铬(Gr)：0.021μg    钙(Ca)：9.20μg     锰(Mn)：0.042μg

注明：附检验报告计量认证(2002)量认(京)字(Z0407)

(2)氨基酸

苏氨酸(Thr)：0.019mg  谷氨酸(Gln)：0.243mg甘氨酸(Gly)：0.101mg

丙氨酸(Ala)：0.098mg  缬氨(Val)：0.039mg亮氨(Len)：0.044mg

苯丙氨酸(Phe)：0.027mg赖氨酸(Lys)：0.030mg

注明：附检验报告计量认证(2002)量认(京)字(Z0407)

(3)维生素：

B1：0.14mg  B2：0.20mg  B12：0.0015mg

注明：附检验报告计量认证(2002)量认(京)字(Z0407)

[药品鉴别]

1.在含量测定项下，本品的水溶液显钠盐和氢化物的鉴别但应符合《中国药典》2000年版二部附录3。

2.在含量测定项下纪录的色谱中各氨基酸色谱峰的保留时间应与相应对照品溶液色谱峰的保留时间一致。

[药品检查]本品的检查法符合《中国药典》2000年版二部附录1B的规定。

1.PH值：6.59符合《中国药典》2000年版二部附录VIH的规定。

2.蛋白质：取本品1ml加入20％磺基水物质溶液1ml不得发生混浊。

3.热源：取本品按《中国药典2000年版二部附录XID》的规定进行检查，剂量按家兔每1kg注射0.2ml符合规定。

4.细菌内毒素：按细菌内毒素检查法项下的方法《中国药典2000年版二部附录XIE》检查符合规定。

5.无菌：按照无菌检查法项下方法《中国药典2000年版二部附录XIH》检查符合规定。

6.澄明度：按照《澄明度检查细则80判断标准》的规定检查符合规定。

7.装量：按《中国药典2000年版二部附录1B》规定标准执行。

8.其他：(1)溶剂(2)附加剂(3)容器(4)配剂(5)罐装(6)熔封(7)装量(8)检漏(9)贮存。均按《中国药典2000年版二部附录1B》规定标准要求符合规定。

[药物用量]：眼素肽1ml：1g；1ml：2.5g；2ml：2g；2ml：5g；

[适用范围]：各类各期近视、发育性眼病、远视、散光、斜视、弱视、眼疲劳、眼外伤、近视并发症、视神经萎缩、非化脓性角膜炎、虹膜睫状体炎、玻璃体浑浊、中心性视网膜脉络膜炎、近视性青光眼、白内障等眼病，紫睛是近视治疗的配方主味药。

实施例2：

眼素肽注射液的制剂方法及工艺流程

提纯方法：循环回流提纯方法

制剂方法：中药小容量水针剂工艺流程

一、配方：紫睛  60g

苯甲醇      2ml

吐温80      3滴

制成注射液  100ml

二、操作方法：

原药紫睛取出，去除外包灯芯草，用水洗净，称重60g，将紫睛原药放绞刀中绞成浆液状，加注射用水100ml浸泡1小时，在水浴上浸煮五次，每次浸煮30分钟，过滤后，除渣，过滤液浓缩致1/2，在搅拌中逐渐加入95％乙醇100毫升，放置，过滤、滤液回收乙醇。同法用95％乙醇反复处理，致无沉淀为止，过滤回收乙醇，加苯甲醇、吐温80，在加入100ml注射用水，搅匀、过滤、分装、灭菌、样品检测、装瓶、封口、备用，肌肉注射或穴位注射用。

Claims (3)

1.一种紫睛制剂眼素肽注射液，其特征在于采用紫睛以如下循环回流提取方法和中药小容量水针剂工艺流程提纯活性物质制成的用于治疗近视眼的灭菌

水溶液：(1)配方：紫睛       60g，

                 苯甲醇     2ml，

                 吐温80     3滴，

                 制成注射液 100ml；

(2)操作方法：

原药紫睛取出，去除外包灯芯草，用水洗净，称重60g，将紫睛原药放绞刀中绞成浆液状，加注射用水100ml浸泡1小时，在水浴上浸煮五次，每次浸煮30分钟，过滤后，除渣，过滤液浓缩致1/2，在搅拌中逐渐加入95％乙醇100毫升，放置，过滤、滤液回收乙醇，同法用95％乙醇反复处理，致无沉淀为止，过滤回收乙醇，加苯甲醇、吐温80，在加入100ml注射用水，搅匀、过滤、分装、灭菌、样品检测、装瓶、封口、备用，肌肉注射或穴位注射用；

所述的紫睛为脊椎动物，牛科、陕西紫阳健康牛鲜全眼球。

2.一种根据权利要求1所述的紫睛制剂眼素肽注射液在制备治疗近视眼药物中的应用，所述的紫睛为脊椎动物，牛科、陕西紫阳健康牛鲜全眼球。

3.根据权利要求1所述的一种紫睛制剂眼素肽注射液，其特征在于紫睛四季均可采集，宰牛时将鲜活眼球摘出，洗去血渍，去净周围脂类杂物，盐渍后用灯芯草包裹、阴干，低温冷冻保鲜储藏，忌用火烘、日晒、风吹以防破裂变质，色鲜完整无破裂者为佳品，属眼科用药。

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