CN100352339C - 一种经济绿藻育苗的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种经济绿藻育苗的方法，包括下列步骤：(1)筛选绿藻种菜并清洗，用搅拌机把绿藻种菜打碎成0.1～5毫米，洗去破碎的细胞浆；(2)配制1～1.5mol/l的葡萄糖溶液，加入0.5～3%酶，配制成酶液，按1∶2～4的比例将酶液加入打碎的绿藻种菜中，在15～25℃的条件下，酶解处理1～3个小时；(3)将酶解的绿藻种菜用海水清洗，将洗出液加入海水沉淀，弃去上清液后将绿藻种菜细胞加入海水培养；(4)把干净的网帘放入，采苗3～10分钟，在育苗池中将已经采好苗的苗网培养3～10天，下海养成，优点是不需要生殖细胞就可以育苗并将种菜培养至成熟，可以将育苗的时间从几个月减少到数天，并且育苗不受季节的限制，可以满足规模化生产的需要，提高栽培的效益。

Description

一种经济绿藻育苗的方法
技术领域
本发明涉及一种经济绿藻培育方法，尤其是涉及一种经济绿藻育苗的方法，主要用于培育经济绿藻的种苗，作为海区养殖所需的苗种。
背景技术
现有的经济绿藻在我国还没有进入规模化养殖的阶段，我国自然分布经济绿藻的种类，包括袋礁膜(Monostroma angecava Kjellm)、礁膜(M.nitidum)、石莼(Ulva lactuca)、孔石莼(U.pertusa)、条浒苔(Enteromorpha clathrete)、肠浒苔(E.intestinalis)管浒苔(E.tubulosa)等种类，它含有丰富的蛋白质及各种氨基酸，维生素，膳食纤维、微量元素，还具有抗高血压，抗癌等多种疾病的作用，礁膜等经济绿藻比海带、紫菜更接近高等植物，没有腥味，是很好的膳食纤维，深受日本及东南亚一些国家欢迎。但是由于自然资源受到破坏，收获的野生的经济绿藻的产量出现了萎缩。因此，如何通过人工的方法来培育海藻幼苗，保证有多种多样的绿藻的栽培类型以弥补目前海藻栽培种类的单一和产量、面积的的不稳定现象已经是当务之急，目前一般采用的是生殖细胞进行育苗，而存在的主要问题是没有适合于规模化生产的育苗方法，导致栽培的效益难以体现。
目前对紫菜育苗方法的研究已经有一定的进展，如申请号为85104059中国发明专利公开的“酶法解离紫菜营养细胞育苗方法”和申请号为96116039.X的中国发明专利“酶法解离紫菜叶状体细胞育苗方法”及申请号为200410023922.0的中国发明专利“酶法解离紫菜的育苗工艺”等，在生产应用中均取得了良好的结果。但是由于紫菜和绿藻的细胞壁的组成有差异，在经济绿藻的育苗过程中不能完全采用紫菜的方法。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是针对上述现有技术现状而提供一种经济绿藻育苗的方法，可以满足规模化生产的需要，提高栽培的效益。
本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为：一种经济绿藻育苗的方法，包括下列步骤：(1)筛选绿藻种菜并清洗，在黑暗中保存24小时后再用搅拌机把绿藻种菜打碎成0.1～5毫米，洗去破碎的细胞浆；(2)配制1～1.5mol/L的葡萄糖溶液，再按0.5～3％的比例加入海螺酶或蜗牛酶的至少一种配制成酶液，按1∶2～4的比例将酶液加入打碎的绿藻种菜中，在15～25℃的条件下，酶解处理1～3个小时；(3)将酶解的绿藻种菜用海水清洗，将洗出液加入海水沉淀，弃去上清液后将绿藻种菜细胞加入海水培养；(4)把干净的网帘放入，采苗3～10分钟，在育苗池中将已经采好苗的苗网培养3～10天，下海养成。
在步骤(1)中用搅拌机把绿藻种菜打碎后，可以用筛绢包住绿藻种菜的碎片，在海水中洗去破坏了的细胞组分。
所述的筛绢是60～200目的双层筛绢。
酶解处理是在控制光照的条件下进行的，光的幅照度是在0～20μEM-2S-1。
步骤(3)的具体方法是将酶解处理的绿藻种菜完全包在80～150目的筛绢中，在海水中清洗3～5次，弃去残渣，将洗出液在黑暗的条件下，加入到8～20倍的海水中，沉淀0.5～1个小时，将上清液倒去，就获得绿藻种菜酶解后细胞，
所述的绿藻种菜是石莼、孔石莼、礁膜、条浒苔、浒苔、肠浒苔中的一种。
本发明的优点是不需要生殖细胞就可以育苗并将种菜培养至成熟，节约了大量的物力与时间，将育苗的时间从几个月减少到数天，并且育苗不受季节的限制，可以在育苗厂里长年进行，本来一年只能进行一次育苗一次养成，现在可以进行任意多次；可以将不同的经济绿藻种类经过搭配进行育苗和养成，避免了在海区进行的靠自然的现象，提高了经济效益与海区的利用率，可以满足规模化生产的需要，提高栽培的效益；控制酶解处理的温度非常重要，超过25℃的处理条件，酶解后的细胞活力降低；低于15℃，不利于酶对细胞壁的分解，酶解的时间要延长，形成的单细胞或者细胞团活力低；在筛选绿藻种菜并清洗后，在黑暗中保存24小时后再用搅拌机把绿藻种菜打碎，可以减少细胞壁合成。
具体实施方式
以下结合实施例对本发明作进一步详细描述。
实施例一：一种经济绿藻育苗的方法，包括下列步骤：(1)选择健康的绿色鲜艳的孔石莼(U.pertusa)种菜，去除杂物，在海水中洗干净，在黑暗中保存24小时后，用食物捣碎机把孔石莼种菜打碎2次，每次15秒，把孔石莼种菜打碎成5毫米左右，用60目的双层筛绢筛绢包住孔石莼种菜的碎片，在海水中清洗2次，洗去破坏了的细胞组分；(2)配制1mol/L的葡萄糖溶液，加入0.5％海螺酶，配制成酶液，按1∶2的比例将酶液加入打碎的孔石莼种菜中，在温度为15℃、光的幅照度为20μEM-2S-1的条件下，酶解处理1个小时；(3)将酶解处理的孔石莼种菜完全包在80目的筛绢中，在海水中清洗3次，弃去残渣，将洗出液在黑暗的条件下，加入到8倍的海水中，浸泡10分钟，沉淀1个小时，将上清液倒去，将获得的孔石莼种菜酶解后细胞加入海水培养；(4)把干净的网帘放入，采苗10分钟，在育苗池中将已经采好苗的苗网培养10天，下海养成。
实施例二：一种经济绿藻育苗的方法，包括下列步骤：(1)选择健康的绿色鲜艳的袋礁膜(Monostroma angecava Kjellm)种菜，去除杂物，在海水中洗干净，在黑暗中保存24小时后，用食物捣碎机把袋礁膜种菜打碎4次，每次30秒，把袋礁膜种菜打碎成0.1毫米左右，用200目的双层筛绢筛绢包住袋礁膜种菜的碎片，在海水中清洗4次，洗去破坏了的细胞组分；(2)配制1.5mol/L的葡萄糖溶液，加入3％蜗牛酶和纤维素酶的混合物，配制成酶液，按1∶4的比例将酶液加入打碎的袋礁膜种菜中，在温度为25℃、光的幅照度为10μEM-2S-1的条件下，酶解处理3个小时；(3)将酶解处理的袋礁膜种菜完全包在150目的筛绢中，在海水中清洗5次，弃去残渣，将洗出液在黑暗的条件下，加入到20倍的海水中，浸泡3分钟，沉淀0.5个小时，将上清液倒去，将获得的袋礁膜种菜酶解后细胞加入海水培养；(4)把干净的网帘放入，采苗3分钟，在育苗池中将已经采好苗的苗网培养3天，下海养成。
实施例三：一种经济绿藻育苗的方法，包括下列步骤：(1)选择健康的绿色鲜艳的条浒苔(Enteromorpha clathrete)种菜，去除杂物，在海水中洗干净，在黑暗中保存24小时后，用食物捣碎机把条浒苔种菜打碎3次，每次25秒，把条浒苔种菜打碎成2毫米左右，用130目的双层筛绢筛绢包住条浒苔种菜的碎片，在海水中清洗3次，洗去破坏了的细胞组分；(2)配制1.3mol/L的葡萄糖溶液，加入2％纤维素酶、半纤维素酶和果胶酶的混合物，配制成酶液，按1∶3的比例将酶液加入打碎的条浒苔种菜中，在温度为20℃、光的幅照度为15μ EM-2S-1的条件下，酶解处理2个小时；(3)将酶解处理的条浒苔种菜完全包在120目的筛绢中，在海水中清洗4次，弃去残渣，将洗出液在黑暗的条件下，加入到8～20倍的海水中，浸泡3～10分钟，沉淀0.8个小时，将上清液倒去，将获得的条浒苔种菜酶解后细胞加入海水培养；(4)把干净的网帘放入，采苗7分钟，在育苗池中将已经采好苗的苗网培养7天，下海养成。
上述实施例中，酶可以是海螺酶、蜗牛酶、纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶中的至少一种或者数种的混合物。绿藻种菜是石莼(Ulva lactuca)、孔石莼(U.pertusa)、袋礁膜(Monostroma angecava Kjellm)、礁膜(M.nitidum)、条浒苔(Enteromorphaclathrete)、肠浒苔(E.intestinalis)、管浒苔(E.tubulosa)中的任意一种。种菜酶解后细胞可以直接采苗，或者在有光照的条件下培养，或者是在光生物反应器中培养，或者培育出游孢子再采苗。完成了把细胞附着在网帘的过程，或者凉干，或者直接培养。

Claims (6)

1、一种经济绿藻育苗的方法，其特征在于它包括下列步骤：(1)筛选绿藻种菜并清洗，在黑暗中保存24小时后再用搅拌机把绿藻种菜打碎成0.1～5毫米，洗去破碎的细胞浆；(2)配制1～1.5mol/L的葡萄糖溶液，再按0.5～3％的比例加入海螺酶或蜗牛酶的至少一种配制成酶液，按1∶2～4的比例将酶液加入打碎的绿藻种菜中，在15～25℃的条件下，酶解处理1～3个小时；(3)将酶解的绿藻种菜用海水清洗，将洗出液加入海水沉淀，弃去上清液后将绿藻种菜细胞加入海水培养；(4)把干净的网帘放入，采苗3～10分钟，在育苗池中将已经采好苗的苗网培养3～10天，下海养成。
2、如权利要求1所述的一种经济绿藻育苗的方法，其特征在于在步骤(1)中用搅拌机把绿藻种菜打碎后，用筛绢包住绿藻种菜的碎片，在海水中洗去破坏了的细胞组分。
3、如权利要求2所述的一种经济绿藻育苗的方法，其特征在于所述的筛绢是60～200目的双层筛绢。
4、如权利要求1所述的一种经济绿藻育苗的方法，其特征在于酶解处理是在控制光照的条件下进行的，光的幅照度是在0～20μ EM-2S-1。
5、如权利要求1所述的一种经济绿藻育苗的方法，其特征在于步骤(3)的具体方法是将酶解处理的绿藻种菜完全包在80～150目的筛绢中，在海水中清洗3～5次，将酶解的细胞洗出，弃去残渣，将洗出液在黑暗的条件下，加入到8～20倍的海水中，沉淀0.5～1个小时，将上清液倒去，就获得酶解后细胞，
6、如权利要求1所述的一种经济绿藻育苗的方法，其特征在于所述的绿藻种菜是石莼、孔石莼、礁膜、条浒苔、浒苔、肠浒苔中的一种。
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