CH669731A5

CH669731A5 -

Info

Publication number: CH669731A5
Application number: CH3378/86A
Authority: CH
Inventors: Abdul Gaffar
Original assignee: Colgate Palmolive Co
Priority date: 1985-08-22
Filing date: 1986-08-22
Publication date: 1989-04-14
Also published as: GB2179255A; IT8648388A0; FR2586350A1; SE468625B; DE3628190A1; DK164443B; SE8603485D0; IT1196586B; FR2586350B1; NL8602139A; GB8620481D0; BE905318A; DK164443C; GB2179255B; HK1293A; DK401986A; DK401986D0; SE8603485L

Description

BESCHREIBUNG Die Erfindung betrifft pharmazeutische Zusammensetzungen zur Behandlung und Inhibierung von Knochenresorption und Demineralisierung, verursacht durch exzessive Sekretion von Parathyreoid-Hormon (PTH). Derartige Knochenresorption und Demineralisierung bewirken Hypo-calcaemie, welche toxische Effekte im Weichgewebe auslöst. DESCRIPTION The invention relates to pharmaceutical compositions for the treatment and inhibition of bone resorption and demineralization caused by excessive secretion of parathyroid hormone (PTH). Such bone resorption and demineralization cause hypo-calcemia, which triggers toxic effects in soft tissue.

Knochenresorption oder Demineralisierung können direkt oder indirekt als Folge von Veränderungen des Calcium- und Phosphatgehaltes in den Körperflüssigkeiten warmblütiger Tiere auftreten. Bone resorption or demineralization can occur directly or indirectly as a result of changes in the calcium and phosphate content in the body fluids of warm-blooded animals.

Normalerweise wird PTH in den erforderlichen physiologischen Mengen sekretiert, die zu unterschiedlichen Zeiten je nach Bedarf des Körpers variieren. Es nimmt dabei an der Regulierung der metabolischen Aktivitäten von Knochen, Nieren und der intestinalen Absorption von Calcium bei Warmblütern wie Menschen teil. Es kann jedoch zu einer exzessiven Synthese von PTH kommen, beispielsweise bei primärem Hyperparathyreoidismus, wobei pathologische Knochenresorption und Demineralisierung induziert wird. Die als Folge auftretende Hypocalcaemie hat toxische Effekte im Weichgewebe. PTH is usually secreted in the required physiological amounts, which vary at different times depending on the body's needs. It participates in the regulation of the metabolic activities of bones, kidneys and the intestinal absorption of calcium in warm-blooded animals like humans. However, excessive synthesis of PTH can occur, for example in primary hyperparathyroidism, with pathological bone resorption and demineralization being induced. The resulting hypocalcaemia has toxic effects in the soft tissue.

Ein besonders wichtiger Zustand, bei dem PTH beschleunigte Knochendémineralisierung auslöst, ist Osteoporose, die gewöhnlich bei Frauen in der Postmenopause auftritt (Calcium Tissuelntl. 35, Seiten 708—711 /1983)). A particularly important condition in which PTH triggers accelerated bone demineralization is osteoporosis, which usually occurs in postmenopausal women (Calcium Tissuelntl. 35, pages 708-711 / 1983).

5 Es ist Aufgabe der vorliegenden Erfindung, ein therapeutisches Mittel zu schaffen, mit Hilfe dessen die durch PTH induzierte Knochenresorption inhibiert werden kann. 5 It is an object of the present invention to provide a therapeutic agent with the aid of which bone resorption induced by PTH can be inhibited.

Die vorliegende Erfindung betrifft demgemäss eine pharmazeutische Zusammensetzung zur Behandlung von Para-io thyreoid-Hormon induzierter Knochenresorption, die dadurch gekennzeichnet ist, dass sie als Wirkstoff, insbesondere zur oralen Behandlung eines warmblütigen Säugers mit Parathyreoid-Hormon-Übersekretion eine Dosismenge von etwa 0,1—6 g/kg Körpergewicht und zur systemischen Be-ls handlung eine Dosismenge von 0,1 —2 g/kg Körpergewicht, eine nicht-toxische, wasserlösliche, pharmazeutisch akzeptable Peroxydiphosphat-Verbindung enthält. The present invention accordingly relates to a pharmaceutical composition for the treatment of para-thyroid hormone-induced bone resorption, which is characterized in that it is a dose amount of approximately 0.1 as an active ingredient, in particular for the oral treatment of a warm-blooded mammal with parathyroid hormone oversecretion - 6 g / kg body weight and for systemic treatment a dose of 0.1-2 g / kg body weight, containing a non-toxic, water-soluble, pharmaceutically acceptable peroxydiphosphate compound.

PTH und seine Wirkungen sind in «The Role of Calcium in Biological Systems», Band II, Anghileri, CRC Press, Boca 20 Raton, Florida, 1982, Kapitel II, Seiten 204—212 beschrieben. PTH ist ein einkettiges Protein, das 84 Aminosäuren enthält. Es kann als PTH (1 — 84) charakterisiert werden. PTH wird im Körper aus einer Vorstufe synthetisiert, die als Pro-PTH bezeichnet wird un 90 Aminosäuren enthält. Pro-25 PTH ist selbst ein Zwischenprodukt, das aus einem Protein mit 115 Aminosäuren synthetisiert wird und als Prä-Pro-PTH bezeichnet wird. Typischerweise wird bei Warmblütern PTH enzymatisch auf einem Syntheseweg aus seinen Vorstufen gebildet, und das PTH wird dann in den für den Körper 30 erforderlichen Mengen in den Kreislauf sekretiert. PTH schützt den Organismus vor schwerer Hypocalcaemie. Demgemäss ist dann, wenn die zirkulierende Konzentration von ionisiertem Calcium im Kreislauf niedrig ist, die Sekretionsrate von PTH stimuliert. PTH and its effects are described in "The Role of Calcium in Biological Systems", Volume II, Anghileri, CRC Press, Boca 20 Raton, Florida, 1982, Chapter II, pages 204-212. PTH is a single chain protein that contains 84 amino acids. It can be characterized as PTH (1-84). PTH is synthesized in the body from a precursor called Pro-PTH that contains 90 amino acids. Pro-25 PTH is itself an intermediate, which is synthesized from a protein with 115 amino acids and is referred to as pre-Pro-PTH. Typically in warm-blooded animals, PTH is formed enzymatically from its precursors on a synthetic route, and the PTH is then secreted into the circulation in the amounts required for the body 30. PTH protects the organism from severe hypocalcaemia. Accordingly, when the circulating concentration of ionized calcium in the circulation is low, the secretion rate of PTH is stimulated.

35 Die metabolische Aktivität von Knochen, Niere und In-testinalorganen wird direkt oder indirekt durch PTH beein-flusst, um die Calciumresorption und Phosphatausscheidung zu steigern. Insbesondere Knochen wird durch PTH in einer Weise beeinflusst, die sowohl zeit- als auch dosisabhängig 40 ist. Hohe PTH-Dosen steigern zunächst die Knochenresorptionsrate gefolgt von einem Anstieg der Knochenbildungsrate. Im frühen Stadium tritt ferner eine Steigerung der Nettoabgabe von Calcium ein, die von der Knochenresorption unabhängig ist. 35 The metabolic activity of bones, kidneys and in-testinal organs is influenced directly or indirectly by PTH in order to increase calcium absorption and phosphate excretion. Bone in particular is affected by PTH in a way that is both time and dose dependent 40. High doses of PTH initially increase the rate of bone resorption followed by an increase in the rate of bone formation. In the early stages, there is also an increase in net calcium delivery, which is independent of bone resorption.

45 Wird PTH exzessiv und nicht in Übereinstimmung mit der normalen Dosis/Zeit-Relation als Reaktion auf die metabolischen Erfordernisse sekretiert, so tritt übermässige Knochenresorption und Demineralisierung ein, die zu Hypocalcaemie und toxischen Effekten in den Weichteilen so führt. 45 If PTH is secreted excessively and not in accordance with the normal dose / time relationship in response to metabolic requirements, excessive bone resorption and demineralization occur, leading to hypocalcaemia and toxic effects in the soft tissues.

Es ist bekannt, dass Wasserstoffperoxid Methioningrup-pen oxidiert. Man könnte vermuten, dass eine derartige Reaktion die PTH-Aktivität reduziert. Überraschenderweise ist jedoch die Reduktion der PTH-Aktivität, die durch Wasser-55 stoffperoxid bewirkt wird, erheblich niedriger als diejenige, die erfindungsgemäß bei Verwendung einer Peroxydiphos-phat-Verbindung erreicht wird. Darüber hinaus wirkt Per-oxydiphosphat in Warmblütern sicher, kompatibel und effizient, da es enzymatisch durch alkalische und saure Phos-60 phatasen nach der folgenden Gleichung abgebaut wird: Hydrogen peroxide is known to oxidize methionine groups. One might suspect that such a reaction reduces PTH activity. Surprisingly, however, the reduction in PTH activity which is brought about by hydrogen peroxide is considerably lower than that which is achieved according to the invention when a peroxydiphosphate compound is used. In addition, per-oxydiphosphate acts safely, compatible and efficiently in warm-blooded animals, since it is broken down enzymatically by alkaline and acidic Phos-60 phatases according to the following equation:

0 0

H H

O O

ti ti

-\ - \

-O-P-O-O-P-O- -O-P-O-O-P-O-

I I I I

Phosphatase " > -O-O-P-O- Phosphatase "> -O-O-P-O-

I I.

O- O-

h20 h20

■> H2°2+P04 ■> H2 ° 2 + P04

3 3rd

669 731 669 731

in der X ein nicht-toxisches, pharmazeutisch akzeptables Kation oder ein Rest einer organischen Estergruppe ist. Per-oxydiphosphat abbauende Phosphatasen sind sowohl im Speichel als auch im Plasma, der Intestinalflüssigkeit und den weissen Blutkörperchen vorhanden. in which X is a non-toxic, pharmaceutically acceptable cation or a residue of an organic ester group. Per-oxydiphosphate-degrading phosphatases are present in both saliva, plasma, intestinal fluid and white blood cells.

Anscheinend ist die langsame Sauerstofffreisetzung zum Inhibieren der übermässigen PTH-Sekretion besonders wirksam und reduziert damit die unerwünschten und toxischen Effekte der übermässigen PTH-Sekretion. Apparently, the slow release of oxygen is particularly effective in inhibiting excessive PTH secretion, thereby reducing the undesirable and toxic effects of excessive PTH secretion.

Die Peroxydiphosphat-Verbindung (PDP) liegt als nichttoxische, pharmazeutisch akzeptable Verbindung vor, die über die in der US-PS 4 041 149 beschriebenen Salze hinausgeht. The peroxydiphosphate compound (PDP) is a non-toxic, pharmaceutically acceptable compound that goes beyond the salts described in U.S. Patent 4,041,149.

Die Verbindungen schliessen Alkalimetallsalze, wie beispielsweise Lithium-, Natrium- und Kaliumsalze, Erdalkalimetallsalze, wie beispielsweise Magnesium-, Calcium- und Strontiumsalze sowie Zink-, Zinnsalze und quaternäre Ammoniumsalze und ferner organische Ci_i2-Alkyl-, Adenylyl-, Guanylyl-, Cytosylyl- und Thymylylester von Peroxydiphos-phat und dergleichen ein. Alkalimetalle, insbesondere das Kaliumsalz ist unter den anorganischen Kationen bevorzugt. Das Tetrakaliumperoxydiphosphat ist ein stabiler, geruchloser, feinteiliger, freifliessender, weisser und nicht-hygrosko-pischer kristalliner Feststoff mit einem Molekulargewicht von 346,35 und einem Gehalt an aktiven Sauerstoff von 4,6%. The compounds include alkali metal salts such as lithium, sodium and potassium salts, alkaline earth metal salts such as magnesium, calcium and strontium salts as well as zinc, tin salts and quaternary ammonium salts and also organic Ci_i2-alkyl, adenylyl, guanylyl, cytosylyl and thymyl esters of peroxydiphosphate and the like. Alkali metals, especially the potassium salt, are preferred among the inorganic cations. The tetrapotassium peroxydiphosphate is a stable, odorless, finely divided, free-flowing, white and non-hygroscopic crystalline solid with a molecular weight of 346.35 and an active oxygen content of 4.6%.

Tetrakaliumperoxydiphosphat ist bei 0—61 °C zu 47—51 % wasserlöslich, jedoch unlöslich in üblichen Lösungsmitteln wie Acetonitril, Alkoholen, Ethern, Ketonen, Dimethylformamid, Dimethylsulfoxid und dergleichen. Eine 2%-ige wässrige Lösung hat einen pH-Wert von etwa 9,6 und eine gesättigte Lösung besitzt einen pH-Wert von etwa 10,9. Eine 10%-ige Lösung in Wasser bei 25 °C zeigte nach 4 Monaten keinen Verlust an aktivem Sauerstoff; bei 50 °C zeigte eine 10%-ige Lösung nach 6 Monaten einen Verlust an aktivem Sauerstoff von 3%. Tetra potassium peroxydiphosphate is 47-51% water soluble at 0-61 ° C, but insoluble in common solvents such as acetonitrile, alcohols, ethers, ketones, dimethylformamide, dimethyl sulfoxide and the like. A 2% aqueous solution has a pH of about 9.6 and a saturated solution has a pH of about 10.9. A 10% solution in water at 25 ° C showed no loss of active oxygen after 4 months; at 50 ° C, a 10% solution showed a 3% loss of active oxygen after 6 months.

Unter den organischen Verbindungen sind solche bevorzugt, die hydrophobe Eigenschaften aufweisen, wie beispielsweise die Ci_i2-Alkylradikale sowie solche, die die schnelle Aufnahme des Peroxydiphosphatrests durch die Zelle erleichtern, wie Adenylyl-, Guanylyl-, Cytosylyl- und Thymylylester. Preferred organic compounds are those which have hydrophobic properties, such as, for example, the Ci_i2-alkyl radicals, and those which facilitate the rapid uptake of the peroxydiphosphate residue by the cell, such as adenylyl, guanylyl, cytosylyl and thymylyl esters.

Die Peroxydiphosphat-Verbindung kann oral oder systemisch verabreicht werden, um die übermässige PTH-Sekre-tion zu inhibieren. The peroxydiphosphate compound can be administered orally or systemically to inhibit excessive PTH secretion.

Geeignete pharmazeutische Träger für die orale Aufnahme sind beschichtete Tabletten, die aus einem Material gebildet sind, das beständig gegenüber Magensäuren bei den im Magen herrschenden pH-Werten ist (etwa 1—3), da das Per-oxydiphosphat durch diese Magensäuren inaktiviert werden würden. Die Carrier mit dem darin eingeschlossenen festen Material aus tablettierten Granula des Peroxydiphosphor-säuresalzes werden demgegenüber von der Intestinalflüssigkeit aufgelöst, die einen höheren pH-Wert von etwa 5,5 bis 10 aufweist und die das Peroxydiphosphat nicht inaktiviert und es damit der enzymatischen Einwirkung der Phosphatase überlässt, die in Menschen oder anderen warmblütigen Tieren vorhanden ist. Eine geeignete Lösung zum Überziehen von Tabletten ist aus typischerweise etwa 40 — 50 und vorzugsweise etwa 45 Gewichtsteilen, eines Fettsäureesters wie N-Butylstearat, typischerweise etwa 15—25 und vorzugsweise etwa 20 Gewichtsteilen, eines Wachses wie Carnu-bawachs, typischerweise etwa 20 — 30 und vorzugsweise 25 Gewichtsteilen, einer Fettsäure wie Stearinsäure, und typischerweise etwa 5 — 15 und vorzugsweise etwa 10 Gewichts-teilen eines Celluloseesters wie Celluloseacetatphthalat, und typischerweise etwa 400—900 Gewichtsteilen eines organischen Lösungsmittels zusammengesetzt. Weitere geeignete Suitable pharmaceutical carriers for oral ingestion are coated tablets which are formed from a material which is resistant to gastric acids at the pH values in the stomach (about 1-3), since the peroxydiphosphate would be inactivated by these stomach acids. In contrast, the carriers with the solid material of tableted granules of the peroxydiphosphoric acid salt enclosed therein are dissolved by the intestinal fluid, which has a higher pH value of about 5.5 to 10 and which does not inactivate the peroxydiphosphate and thus the enzymatic action of the phosphatase leaves that is present in humans or other warm-blooded animals. A suitable solution for coating tablets is typically about 40-50 and preferably about 45 parts by weight of a fatty acid ester such as N-butyl stearate, typically about 15-25 and preferably about 20 parts by weight of a wax such as Carnu-wax, typically about 20-30 and preferably 25 parts by weight of a fatty acid such as stearic acid, and typically about 5-15 and preferably about 10 parts by weight of a cellulose ester such as cellulose acetate phthalate, and typically about 400-900 parts by weight of an organic solvent. More suitable

Überzugsmaterialien schliessen Schellack und Copolymere von Maleinsäureanhydrid und ethylenischen Verbindungen wie Polyvinylmethylether ein. Derartige Überzüge sind verschieden von Tabletten, die in der Mundhöhle abgebaut werden und bei denen das Tablettenmaterial im typischen Falle etwa 80—90 Gewichtsteile Mannit und etwa 30—40 Gewichtsteile Magnesiumstearat enthält. Coating materials include shellac and copolymers of maleic anhydride and ethylenic compounds such as polyvinyl methyl ether. Such coatings are different from tablets that are broken down in the oral cavity and in which the tablet material typically contains about 80-90 parts by weight of mannitol and about 30-40 parts by weight of magnesium stearate.

Tablettierte Granula des Peroxydiphosphatsalzes werden durch Mischen von etwa 30—50 Gewichtsteilen des Peroxydiphosphatsalzes mit etwa 45—65 Gewichtsteilen eines festen Polyhydroxyzuckers wie Mannit und Befeuchten mit etwa 20—35 Gewichtsteilen einer flüssigen Polyhydroxyzuk-ker-Lösung wie Sorbit, Sieben zum Dimensionieren, Vermischen mit etwa 20—35 Gewichtsteilen eines Bindemittels wie Magnesiumstearat und Verpressen der Granula zu Tabletten auf einer Tablettiermaschine hergestellt. Die tablettierten Granula werden durch Aufsprühen eines Schaums einer Lösung des Überzugmaterials beschichtet und zum Entfernen des Lösungsmittels getrocknet. Derartige Tabletten sind verschieden sich von Dentaltabletten, die normalerweise aus tablettierten Granula ohne einen speziellen Schutzüberzug bestehen. Tableted granules of the peroxydiphosphate salt are made by mixing about 30-50 parts by weight of the peroxydiphosphate salt with about 45-65 parts by weight of a solid polyhydroxy sugar such as mannitol and moistening with about 20-35 parts by weight of a liquid polyhydroxy sugar solution such as sorbitol, sizing to size, mixing with made about 20-35 parts by weight of a binder such as magnesium stearate and compressing the granules into tablets on a tableting machine. The tableted granules are coated by spraying a foam of a solution of the coating material and dried to remove the solvent. Such tablets are different from dental tablets, which usually consist of tableted granules without a special protective coating.

Eine wirksame Verabreichungsdosis von Peroxydiphosphat mit vorgeschriebenem Einnahmeschema beträgt bei oraler Applikation etwa 0,1—6 g/kg Körpergewicht täglich; bei systemischer Applikation wie intramuskulärer, intraperitonealer oder intravenöser Injektion beträgt die Dosis etwa 0,1—2 g/kg Körpergewicht täglich. An effective administration dose of peroxydiphosphate with prescribed regimen is approximately 0.1-6 g / kg body weight per day with oral administration; with systemic administration such as intramuscular, intraperitoneal or intravenous injection, the dose is approximately 0.1-2 g / kg body weight daily.

Physiologisch akzeptable, pyrogenfreie Lösungsmittel sind geeignete Träger zur systemischen Verabreichung in an sich bekannter Weise. Salzlösung, mit Phosphat auf einen physiologischen pH-Wert von etwa 7 — 7,4 gepuffert, ist der bevorzugte Träger für die systemische Verabreichung. Derartige Lösungsmittel sind verschieden von Wasser-Netzmittel-Vehikeln die typischerweise in Zahnpflegemitteln verwendet werden. Eine derartige Lösung wird typischerweise hergestellt, indem man entionisiertes, destilliertes Wasser sterilisiert, es unter Verwendung des Limulus-Amebocyt-Lysat-(LAL)-Tests, beschrieben von Tsuji et al in «Pharmaceutical Manufacturing», Seiten 35—41 (1984) auf fehlende Pyroge-nität untersucht, anschliessend einen Phosphatpuffer mit einem pH-Wert von beispielsweise etwa 8,5 —10, hergestellt aus pyrogenfreiem sterilen Wasser, 1 —100 mg Peroxydi-phosphat-Derivat und Natriumchlorid bis zu einer Konzentration von etwa 0,5 — 1,5 Gew.% hinzufügt. Die Lösung kann zur Verwendung in Ampullen abgefüllt werden, nachdem sie durch Passage durch einen Mikroporenfilter resterilisiert wurde. Physiologically acceptable, pyrogen-free solvents are suitable carriers for systemic administration in a manner known per se. Saline, buffered with phosphate to a physiological pH of about 7-7.4, is the preferred vehicle for systemic administration. Such solvents are different from water wetting agents typically used in dentifrices. Such a solution is typically prepared by sterilizing deionized, distilled water using the Limulus Amebocyte Lysate (LAL) test described by Tsuji et al in "Pharmaceutical Manufacturing", pp. 35-41 (1984) missing pyrogensity examined, then a phosphate buffer with a pH of, for example, about 8.5-10, prepared from pyrogen-free sterile water, 1-100 mg peroxydi-phosphate derivative and sodium chloride to a concentration of about 0.5 - 1.5% by weight added. The solution can be filled into ampoules for use after being resterilized by passage through a micropore filter.

Alternativ können Lösungen wie Ringer-Lösung mit einem Gehalt an 0,86 Gew.% Natriumchlorid, 0,03 Gew.% Kaliumchlorid und 0,033 Gew.% Calciumchlorid verwendet werden. Alternatively, solutions such as Ringer's solution containing 0.86% by weight sodium chloride, 0.03% by weight potassium chloride and 0.033% by weight calcium chloride can be used.

Das nachfolgende Beispiel zeigt, dass Peroxydiphosphat-Verbindungen (PDP) die Freisetzung von Calcium aus Knochen aufgrund von PTH-Sekretion inhibieren können. The following example shows that peroxydiphosphate compounds (PDP) can inhibit the release of calcium from bones due to PTH secretion.

Beispiel example

Wirkung von PDP auf PTH induzierte Knochenresorption in Knochenkultursystemen Der Test, bei dem aus Rinderparathyreoiddrüsen isoliertes PTH (erhalten von Böhringer-Mannheim) die Resorption von Knochen in einem Knochenkultursystem induziert, wurde verwendet, um festzustellen, ob PDP die PTH-Aktivi-tät bei der Knochenresorption desaktiviert. Effect of PDP on PTH-induced bone resorption in bone culture systems The test in which PTH isolated from bovine parathyroid glands (obtained from Böhringer-Mannheim) induces bone resorption in a bone culture system was used to determine whether PDP was responsible for PTH activity in the Bone resorption deactivated.

Knochenkulturen von Rattenföten wurden wie von Raisz, in J. Clin. Invest. 44, Seiten 103 — 116 (1965) beschrieben, hergestellt, indem man Ratten am 18. Tag der Trächtig5 Bone cultures of rat fetuses were as described by Raisz in J. Clin. Invest. 44, pages 103-116 (1965), produced by rats on the 18th day of pregnancy 5

10 10th

15 15

20 20th

25 25th

30 30th

35 35

40 40

45 45

50 50

55 55

60 60

65 65

669 731 669 731

4 4th

keit 45CaCl2 injizierte. Die Ratten wurden am 19. Tag getötet und Radii und Ulnae der Embryonen mit Knorpelenden entnommen und zum Kultivieren in BGJ-Medium (Gibco, Buffalo, NY) bei 37 °C mit 5% CO2 gebracht. Das Medium wurde mit 5% erwärmtem (3 Stunden lang bei 57 °C) fötalem Kalbsserum ergänzt. Jeweils 4 Knochen wurden in eine Vertiefung eines Tabletts mit 24 Vertiefungen (Nunc, Gibco) eingebracht, wobei jede Vertiefung 0,5 ml Medium enthielt. Die Freisetzung von 45Ca in das Kulturmedium aus Knochen, die in Gegenwart einer Testsubstanz inkubiert waren, wurde verglichen mit der Freisetzung aus Knochen, die in 45CaCl2 injected. The rats were sacrificed on day 19 and the radii and ulnas of the embryos with cartilage ends removed and brought to culture in BGJ medium (Gibco, Buffalo, NY) at 37 ° C. with 5% CO2. The medium was supplemented with 5% warmed fetal calf serum (3 hours at 57 ° C). Four bones each were placed in one well of a 24-well tray (Nunc, Gibco), each well containing 0.5 ml of medium. The release of 45Ca into the culture medium from bones incubated in the presence of a test substance was compared with the release from bones that were in

Behandlung treatment

1. Kontrolle (Rinderserumalbumin) 6 1. Control (bovine serum albumin) 6

2. 1 |ig(mcg)/ml PTH 6 3.1 ng/ml PTH 2. 1 | ig (mcg) / ml PTH 6 3.1 ng / ml PTH

+1000 ng/ml PDP 6 4. 1 ng/ml PTH + +1000 ng / ml PDP 6 4. 1 ng / ml PTH +

150 ng/ml H2O2 6 150 ng / ml H2O2 6

Die in der Tabelle wiedergegebenen Daten zeigen, dass PTH verglichen mit der Kontrolle (Rinderserumalbumin) die Knochenresorption induziert, vgl. Nr. 1 gegenüber Nr. 2. Wird PTH mit PDP behandelt, so wird die Knochenresorption signifikant gesenkt, vgl. Nr. 2 gegenüber Nr. 3. Darüber hinaus ist Wasserstoffperoxid in einer Menge, die eine äquivalente Menge Sauerstoff liefert wie PDP bei der Senkung der durch PTH verursachten Knochenresorption weniger wirksam als PDP, vgl. Nr. 3 gegenüber Nr. 4. The data shown in the table show that PTH induces bone resorption compared to the control (bovine serum albumin), cf. No. 1 compared to No. 2. If PTH is treated with PDP, bone resorption is significantly reduced, cf. No. 2 versus No. 3. In addition, hydrogen peroxide in an amount that provides an equivalent amount of oxygen as PDP is less effective than PDP in lowering bone resorption caused by PTH, cf. No. 3 versus No. 4.

Kontrollmedium inkubiert waren; die Ergebnisse der Knochenresorption wurden als Relation ausgedrückt. Control medium were incubated; the results of bone resorption were expressed as a relation.

PTH wurde mit steriler Rinderserumalbuminlösung verdünnt. PTH wurde bei 37 °C mit verschiedenen Konzentra-5 tionen von PDP als Tetrakaliumsalz behandelt. Das überschüssige PDP wurde durch Membrandialyse (maximales Molekulargewicht 3500) entfernt. Dabei kann das nicht-umgesetzte PDP nach aussen diffundieren während das PTH mit einem Molekulargewicht von mehr als 3500 innerhalb 10 des Beutels zurückgehalten wird. Die erhaltenen Daten sind in der nachfolgenden Tabelle wiedergegeben. PTH was diluted with sterile bovine serum albumin solution. PTH was treated at 37 ° C with various concentrations of PDP as the tetrapotassium salt. The excess PDP was removed by membrane dialysis (maximum molecular weight 3500). The unreacted PDP can diffuse outwards while the PTH with a molecular weight of more than 3500 is retained within 10 of the bag. The data obtained are shown in the table below.

10,63 ±0,7 10.63 ± 0.7

22,03 + 3,89 2,07+0,37 22.03 + 3.89 2.07 + 0.37

9,03 + 2,09 0,41+0,09 95% 9.03 + 2.09 0.41 + 0.09 95%

13,68+0,98 0,62 + 0,04 95% 13.68 + 0.98 0.62 + 0.04 95%

25 25th

Die obigen Ergebnisse sind repräsentativ für die Wirkung des PDP-Tetrakaliumsalzes und anderer nicht-toxi-scher wasserlöslicher, pharmazeutisch akzeptabler PDP-Salze wie anderer Alkalimetallsalze, Erdalkalimetallsalze, 30 des Zink- und Zinnsalzes sowie der Ci _ 12-Alkyl PDP-Salze und anderer organischer PDP-Verbindungen, insbesondere einschliesslich der Adenylyl-, Guanylyl-, Cytosylyl- und Thymylylester und quaternärer Ammonium-PDP-Salze zur Inhibierung der PTH-Sekretion bei Ratten und Säugern im 35 allgemeinen. The above results are representative of the effect of the PDP tetrapotassium salt and other non-toxic water-soluble, pharmaceutically acceptable PDP salts such as other alkali metal salts, alkaline earth metal salts, 30 of the zinc and tin salts as well as the Ci _ 12-alkyl PDP salts and others Organic PDP compounds, particularly including the adenylyl, guanylyl, cytosylyl and thymylyl esters, and quaternary ammonium PDP salts to inhibit PTH secretion in rats and mammals in general.

Tabelle table

Anzahl der % 45Ca Wiederge- Test/Kontrolle Sig. Ratten winnung+S.D. Number of% 45Ca re-test / control Sig. Rat winnung + S.D.

45 45

50 50

55 55

60 60

S S

Claims

669 731

PATENT CLAIMS

1. Pharmaceutical composition for the treatment of parathyroid hormone-induced bone resorption, characterized in that it contains a non-toxic, water-soluble, pharmaceutically acceptable peroxydiphosphate compound as active ingredient.

2. Composition according to claim 1, characterized in that the peroxydiphosphate compound is present in an amount of about 0.1 to 7% in a pharmaceutical carrier.

3. Composition according to one of claims 1 and 2, characterized in that the peroxydiphosphate compound is in the form of tableted granules which are provided with a coating which is not degraded during passage through the stomach of the warm-blooded animal and which Intestinal fluid with a pH of 5 to 10 is dissolved.

4. Composition according to one of claims 1 and 2, characterized in that the peroxydiphosphate compound is present in a solution of non-pyrogenic distilled water and phosphate-buffered sodium chloride.

5. Composition according to one of claims 1 to 4, characterized in that the peroxydiphosphate compound as a salt of an alkali metal, zinc, tin or quaternary ammonium or as Ci_i2-alkyl, adenylyl, guanylyl, cytosylyl or thymylyl ester is present.

6. The composition according to claim 5, characterized in that the peroxydiphosphate compound is present as the potassium salt.

7. The composition according to claim 5, characterized in that the peroxydiphosphate compound is present as Ci_i2 ester.

8. The composition according to claim 5, characterized in that the peroxydiphosphate compound is present as adenylyl, guanylyl, cytosylyl or thymylyl ester.