Verfahren zur Reinigung synthetischer Polsäure. Von Waller et a1,, J. A. C. S. 70, 19-2S (1948), wurden mehrere Verfahren zur Syn these des L. caseilFaktors, der auch unter dem Namen Polsäure oder Pteroylglutamin- säure bekannt ist, beschrieben. Bei allen be kannten Verfahren zur Synthese von Pol säure, die auf der Kondensation verschiedener relativ komplizierter Säuren und. komplizierter Amine beruhen, werden Produkte erhalten,
die schwankende Mengen von verschiedenen unerwünschten Stellungsisomeren, Oxydations produkten, nicht umgesetzten Zwischenpro dukten, von Kondensations-, Polymerisations-, llydrolysen- und Zersetzungsprodukten ent halten. Viele dieser Nebenprodukte sind mit. der biologisch aktiven Fblsäure nahe verwandt und besitzen, wie zu erwarten ist, ähnliche physikalische und chemische Eigenschaften, sind jedoch grösstenteils biologisch inaktiv. Die Polsäure kann von vielen ihrer natürlichen Nebenprodukte abgetrennt werden.
Es hält jedoch schwer, die Polsäure von jenen sie begleitenden Pterinen, die in den bei che inischen Synthesen erhaltenen Gemischen auf treten, abzutrennen.
Es sind zahlreiche Methoden zur Reini gung von Polsäure beschrieben worden, bei spielsweise die von J. J. Pfiffner et a1., J. A. C. 'S. 69, 1476 (194'l), beschriebene Methode, die auf der Adsorption an Ionenaustausch- ha.rzen beruht. Gemäss weiteren Methoden wird das Synthesenprodukt in Alkali gelöst, worauf die Pteroylglixtaminsäitre bei einem pu von etwa 3 bis 4 daraus ausgefällt wird.
Die Reinigung kann auch durch Auflösen in einer starken Säure mit anschliessender Verdün nung mit Wasser zwecks Ausfällung der ge lösten Polsäure erfolgen.
Während die bisher bekannten Verfahren zur Reinigung von synthetischer Polsäure für die Herstellung eines Materials mit einem Ge- halt von bis zu etwa 80 % Polsäure geeignet sind, sind sie für die grosstechnische Herstel- hing von Polsäure für pharmazeutische Zwecke nicht sehr befriedigend,
- da sie mehrmals durchgeführt werden müssen, um die nahe verwandten Pterine zu entfernen. Es ist ge wöhnlich auch erwünscht, die Polsäure schliesslich aus Wasesr zu kristallisieren. Sie ist jedoch in heissem Wasser nur in einer Menge von etwa 0,5 g pro Liter löslich, so dass sehr grosse Volumina Wasser benötigt werden, was unbequem und mit hohen. Kosten verbunden ist. Ausserdem muss gewöhnlich aktivierte Kohle verwendet werden, um uner wünschte Färbungen zu beseitigen. Dabei ge hen jedoch beträchtliche Mengen'FolsäLire ver loren, da diese sich in erheblichem Ausmass an aktivierte Kohle adsorbiert.
Es wurde gefunden, dass Polsäure von pharmazeutisch annehmbarer Reinheit selbst aus einem Material, das nur 65 % Polsäure enthält, erhalten werden kann, wenn man die rohe Polsäure in wässerigem Alkali löst, die wässerige alkalische Lösung der rohen Pol säure (die mit verwandten Pterinen. verun- reinigt ist) mit einem fein zerteilten, festen Oxyd,
Hydroxyd oder Carbonat eines Metalles der zweiten Gruppe des periodischen 'Systems mit einer Ordnungszahl von 12 bis 5,6, wie zum Beispiel Cäluiiunhydroxyd, in innige Be rührung bringt, das feste Material davon ab trennt und die Folsäure aus der geklärten alkalischen Lösung isoliert.
Calciumhydroxyd wird zwar bevorzugt, es können jedoch auch andere feste, feinzerteilte Oxyde, Hydroxyde und Carbonate, zum Bei spiel diejenigen des -.LUagnesiiuns, Calciums, Zinks, Strontiums, Cadmiums und Bariums, verwendet werden.
Die folgenden sind beson ders geeignet: Caloiumhydroxyd, Calcium- carbonat, Magnesiumhydroxyd, Magnesiiim- carbonat, Zinkcarbonat, Magnesiumoxyd, Zink hydroxyd, Calciumoxyd, Zinkoxyd und Cad- miiuncarbonat.
Überraschenderweise wird Polsäure durch diese Stoffe aus einer alkalischen Lösung nicht adsorbiert, während die die Folsäure beglei tenden Pterine und andere färbende Substan zen durch die Partikel der :Metalloxyde, -hydroxyde oder -carbonate stark adsorbiert werden.
Die meisten der unerwünschten Pterine können, auf diese Weise entfernt wer den. 90 bis- 98 /o der anfänglich in der 'Lö sung vorhandenen Folsäure kann in gereinig ter Form zurückgewonnen werden, indem man einfach die geklärte Lösung auf etwa 90 C erhitzt, das pH der Lösung auf etwa 3,0 ein stellt und die Folsäure daraus auskristalli sieren lässt.
Da überschüssiges Alkali neutralisiert wer den muss, um die gereinigte Folsäur e auszu fällen, ist es zweckmässig, nur gerade so viel Alkali zu verwenden, als zur Auflösung der rohen Folsäure und der sie begleitenden gene tischen Verunreinigungen erforderlich ist. Man verwendet am besten etwa 3 Moläquiva- lente Alkali pro Mol Polsäure.
Zur Auflösung der rohen Folsäure können verschiedene Alka- lien verwendet werden, wie zum Beispiel Am- moniumhydroxyd und Alkalimetallhydroxyde, vorzugsweise Natriumhydroxyd.
Es kommen zum Beispiel Lösungen mit einem Gehalt von etwa 3 bis 10 g Folsäure pro Liter, vorzugsweise solche, die auf etwa 8 g pro Liter konzentriert sind, in Betracht. Die rohe Folsäure kann direkt im erforder lichen Volumen an verdünntem Alkali oder zweckmässiger in einem kleinen Volumen einer 1n-Alkallilösung gelöst werden, die dann auf eine für die anschliessende Behandlung ge eignete Folsäurekonzentration verdünnt wird.
Da die Folsäure durch die Oxyde, Hydro- xyde und Carbonate der Metalle der zweiten Gruppe nicht adsorbiert wird, während die Verunreinigungen der Folsäure mit Leichtig keit adsorbiert werden, kann die Menge des zerkleinerten festen Metalloxyds, -hydroxy ds oder -carbonats innerhalb weiter Grenzen schwanken. Aus wirtschaftlichen Gründen ist.
es jedoch gewöhnlich zweckmässig, ein Ver hältnis von etwa 1 g der zerkleinerten festen Metalloxyde, -hydroxyde oder -carbonate pro g Folsäure anzuwenden. Calciumhydroxyd, das vorzugsweise für die Durchführung des er findungsgemässen Verfahrens verwendet wird, ist in Wasser etwas löslich, und zwar lös licher in kaltem als in heissem Wasser (etwa 0.,13 g CaO pro 100 ems bei 0 C und etwa 0,06 g CaO pro 100 cm3 bei 100 C).
Um die gewünschte Adsorption zu erzielen, muss deshalb dafür gesorgt werden, dass eine ge nügende Menge Calciumhydroxyd in Form fester Partikel in der Suspension vorhanden ist. Ähnliches gilt auch für die andern genann ten Metalloxyde, -hydroxyde und -carbonate. Das Gemisch wird gewöhnlich während etwa 11/2 Stunden bei Raumtemperatur kräftig ge rührt.
Wenn gewünscht, kann die alkalische Folsäurelösung mehrmals mit dem Metalloxyd, -hydroxyd oder -carbonat behandelt oder auf einanderfolgenden Behandlungen mit ver schiedenen Metalloxyden, -hydroxyden und -carbonaten unterworfen werden, in wel chem Fall die erforderliche Gesamtmenge kleiner sein kann als die für eine einzige Behandlung erforderliche Menge und eine grössere Menge Folsäure mit. einem höheren Reinheitsgrad erhalten werden kann als bei einer einzigen Behandlung.
An Stelle von Calciumhydroxyd (gelösch tem Kalk), das eines der -bevorzugten festen Adsorptionsmittel darstellt, kann man äqui valente Mengen gebrannten Kalk (Calcium- oxyd) verwenden. Normalerweise spielt die Reinheit des Kalkes keine Rolle, so dass ge= wöhnlich technische Produkte verwendet wer den können. Zur Erzielung einer maximalen Adsorptionswirkung sollte der Kalk in gepul- verter Form verwendet werden.
Das Metalloxyd, -hydroxyd oder -carbonat und die daran adsorbierten Verunreinigungen können auf verschiedene Arten von der Alkali lösung der Polsäure abgetrennt werden, bei spielsweise durch Filtrieren oder Zentrifugie ren. Die Lösung kann, wenn gewünscht, direkt filtriert werden, zweckmässigerweise jedoch unter Verwendung eines Filtrierhilfsmittels, wie zum Beispiel Diatomeenerde.
Gemäss einer bevorzugten Ausführungs form des erfindungsgemässen Verfahrens wird die Polsäure aus der gereinigten Alkalilösung isoliert, indem das p$ der Lösung auf etwa 3,0 eingestellt wird, wobei die Polsäure aus fällt. Um Polsäure in kristallisierter, leicht, filtrierbarer Form zu erhalten, arbeitet man vorzugsweise so, dass man die Alkalilösnng der gereinigten Polsäure auf eine Konzentra tion von etwa 3 g Polsäure pro Liter ver dünnt, die Lösung auf etwa 90 bis 98 C er hitzt und dann das pg der heissen Lösung mit verdünnter Salzsäure auf etwa 3;0 ein stellt.
Die Polsäure kristallisiert dann lang- lam aus der Lösung aus.
<I>Beispiel 1:</I> Eine Alkalilösung von roher Polsäure, die durch Auflösen von 2'6,2 g roher Polsäure mit einem Gehalt von 17,2 g Polsäure (65,6 /o) in 137 cm3 1n-Natriiunhydroxydlösung und Verdünnen der Lösung mit. 1890 cm3 Wasser hergestellt worden war, wurde mit 17,2 g Calciumhydroxyd vermischt und bei Raum temperatur während etwa 11/2 Stunden ge rührt. Nachdem die erhaltene Suspension sich gesetzt hatte, wurde die Flüssigkeit. abdekan- tiert. Die Flüssigkeit wurde filtriert. Der feste Rückstand wurde mit 58,5 cms Wasser ge waschen.
Das Filtrat und das Waschwasser wurden vereinigt und auf 5,74 Liter verdünnt. Das px der verdünnten Alkalilösung der ge reinigten Polsäure wurde mit ln-'Salzsäure auf 8,0 bis 10,0 eingestellt, worauf die Lö sung auf etwa 90 bis 95 C erhitzt und deren p$ durch Zugabe von ln-Salzsäure unter fort währendem Rühren auf etwa 3,0 eingestellt wurde. Der erhaltene Schlamm wurde wäh rend zwei 'Tagen in einem Eiskasten gekühlt. und dann filtriert.
Der Filterkuchen wurde durch Wiederaufschlämmung mit 650 cm3 an gesäuertem "#Vasser vom pg 3,0 gewaschen und filtriert. Der Filterkuchen wurde dann ein gefroren und getrocknet, wobei 16,99 g Pol- säure erhalten wurden, die 7,4 % Feuchtig- keit enthielt und einen Gehalt von 94,10/9 Polsäure, bezogen auf den Trockenzustand, aufwies.' <I>Beispiel 2:
</I> Eine Lösung von roher Polsäure, herge stellt durch Auflösen, von 564 g roher Pol säure mit einem Gehalt von 489g Polsäure in 3 Litern ln-Natriluuhydroxydlösung lind Verdünnen mit 56,4 Litern Wasser, wurde mit 489 g Caleiumhydroxyd während 1n/2 Stunden gerührt und dann durch ein Bett von Dia- tomeenerde filtriert. Die geklärte Alkalilösung von Polsäure wurde hierauf auf etwa 90- bis 9,5 C erhitzt und mit In-Salzsäure versetzt, um deren pl, auf etwa 3,0 einzustellen.
Der erhaltene Schlamm wurde über Nacht gekühlt und dann filtriert. Es wurden 485 g kristalli siertes Material mit einem Gehalt von 90,3 /o Polsäure erhalten, das sich ohne weitere Rei nigung für die therapeutische Verwendung eignete.
Beispiel <I>3:</I> 2,3 g rohe Polsäure mit einem Gehalt von 2 g Polsäure wurden in 15 cms ln-Ammonium- hydroxydlösung gelöst. Die Lösung wurde mit 250 eins Wasser verdünnt. 100 cm3 dieser Lösung wurden mit 800' mg Calciumhydroxyd vermischt und während 11/2 Stunden gründ lich gerührt.
Die Suspension wurde filtriert, worauf die erhaltene geklärte Alkalilösung von Polsäure mit 150 em3 Wasser verdünnt und deren pa mit ln-Salzsäure auf etwa 3,0 eingestellt wurde. Nachdem die angesäuerte Lösung während 24 Stunden in einem Eis- kasten stehen gelassen worden war, wurde die kristallisierte Polsäure abfiltriert und getrock net.
Es wurden 680 mg eines Materials erhal- ten, das einen Gehalt von 89,6 % Polsäure und- eine gute Farbe aufwies.
<I>Beispiel 4:</I> Eine wässerige Aufschlämmung von roher Polsäure wurde in einer minimalen Menge wässeriger 5n-NatriumhydroxydlösLing gelöst. Die Lösung wurde mit Wasser auf eine Kon zentration von 5,11 g Polsäure pro Liter ver dünnt.
Zu 100 cm3 dieser Lösung wurden 510 mg Magnesiumhydroxyd gegeben. Die erhaltene Suspension wurde während 90 Minuten ge rührt, dann mit 100 mg F'iltriersubstanz ver setzt und durch ein Bett. der Filtriersubstanz filtriert. Der Filterleichen wurde mit 2'5 cm3 Wasser gewaschen.
Das Filtrat und das Waschwasser wurden vereinigt und auf 200 em3 verdünnt. 190 cms der Lösung wur den auf etwa 95 C erhitzt und das p.H im Verlaufe von etwa 15 Minuten auf 3y0 einge stellt. Nachdem die angesäuerte Lösung über Nacht in einem Kühlschrank stehen gelassen worden war, wurde der Niederschlag abfil- triert und in gefrorenem Zustand getrocknet.
Es wurden 542 mg eines Materials erhalten, das einen Gehalt von 93,4 % Polsäure, bezogen auf den Trockenzustand (91% Ausbeute), aufwies.
<I>Beispiel 5:</I> Ein zweiter, 100 em3 betragender Teil der im Beispiel 4 genannten Folsäurelösung wurde in der im Beispiel 4 beschriebenen Weise mit 510 mg Zinkcarbonat behandelt. Es wurden 552 mg eines Materials erhalten, das einen Gehalt von 95 % Polsäure (95,3 % Ausbeute), bezogen auf den Trockenzustand aufwies.
Beispiel <I>6:</I> Chromatographieren von Polsäure.
Durch Eintragen eines Schlammes aus 0,5 g gelöschtem Kalk und 1 g Filtriersub- stanz und Wasser in ein Glasrohr und<B>Ab-</B> tropf enlassen des Wassers wurde eine Kolonne hergestellt. Nachdem der Wasserspiegel knapp über dem obern Ende der Kolonne lag, wur den 40 cm3 einer Lösung, hergestellt durch Auflösen von 0,5 g eines etwa 82 0/0 Polsäure enthaltenden Materials in etwa 3 cm-3 wässe riger, 2,5n Natriumhydroxydlösung und Ver dünnen auf 100 cms, auf das obere Ende der Kolonne gegeben, wobei der Abfluss gesammelt. wurde. In der Kolonne entwickelte sieh ein dunkelbraunes Band.
Der Abfluss war hell gelb gefärbt. Die Polsäure wurde in der im Beispiel 1 beschriebenen Weise aus der gelben alkalischen Flüssigkeit isoliert. Durch Ana- lyse wurde festgestellt, dass 94 % der anfäng- lich vorhandenen Polsäure in gereinigter Form erhalten worden waren.
Process for purifying synthetic polyacid. Waller et al., J.A.C. p. 70, 19-2S (1948), described several processes for the synthesis of the L. caseil factor, which is also known under the name of polyic acid or pteroylglutamic acid. In all known processes for the synthesis of poly acid, based on the condensation of various relatively complex acids and. complex amines are based, products are obtained,
the fluctuating amounts of various undesirable positional isomers, oxidation products, unreacted intermediate products, condensation, polymerization, llydrolysis and decomposition products ent hold. Many of these by-products are having. closely related to biologically active fatty acid and, as is to be expected, have similar physical and chemical properties, but are for the most part biologically inactive. The poly acid can be separated from many of its natural by-products.
However, it is difficult to separate the polyacid from the pterins which accompany it and which occur in the mixtures obtained in chemical syntheses.
Numerous methods for cleaning poly acid have been described, for example those of J. J. Pfiffner et al., J. A. C. 'S. 69, 1476 (1941), described method, which is based on adsorption on ion exchange resins. According to further methods, the synthesis product is dissolved in alkali, whereupon the pteroylglixtamic acid is precipitated therefrom at a pu of about 3 to 4.
The cleaning can also be done by dissolving in a strong acid with subsequent dilution with water for the purpose of precipitating the dissolved poly acid.
While the previously known processes for purifying synthetic polyacid are suitable for the production of a material with a polyacid content of up to about 80%, they are not very satisfactory for the large-scale production of polyacid for pharmaceutical purposes.
- as they have to be done several times to remove the closely related pterins. It is usually also desirable to finally crystallize the polyacid from water. However, it is only soluble in hot water in an amount of about 0.5 g per liter, so that very large volumes of water are required, which is inconvenient and high. Cost is associated. In addition, activated charcoal usually has to be used to remove unwanted coloration. In the process, however, considerable amounts of foliage are lost, as these are adsorbed to a considerable extent on activated carbon.
It has been found that poly acid of pharmaceutically acceptable purity can be obtained even from a material containing only 65% poly acid by dissolving the crude poly acid in aqueous alkali, the aqueous alkaline solution of the crude poly acid (those with related pterins. is contaminated) with a finely divided, solid oxide,
Hydroxide or carbonate of a metal of the second group of the periodic system with an atomic number from 12 to 5.6, such as Cäluiiunhydroxyd, brings into intimate contact, separates the solid material from it and isolates the folic acid from the clarified alkaline solution.
Calcium hydroxide is preferred, but other solid, finely divided oxides, hydroxides and carbonates, for example those of -.Luagnesiiuns, calcium, zinc, strontium, cadmium and barium, can be used.
The following are particularly suitable: potassium hydroxide, calcium carbonate, magnesium hydroxide, magnesium im carbonate, zinc carbonate, magnesium oxide, zinc hydroxide, calcium oxide, zinc oxide and cadminium carbonate.
Surprisingly, poly acid is not adsorbed from an alkaline solution by these substances, while the pterins and other coloring substances accompanying the folic acid are strongly adsorbed by the particles of metal oxides, hydroxides or carbonates.
Most of the unwanted pterins can be removed in this way. 90 to 98 / o of the folic acid initially present in the 'solution can be recovered in purified form by simply heating the clarified solution to about 90 ° C., adjusting the pH of the solution to about 3.0 and the folic acid from it crystallizes out.
Since excess alkali has to be neutralized in order to precipitate the purified folic acid, it is advisable to use just as much alkali as is required to dissolve the crude folic acid and the accompanying genetic contaminants. It is best to use about 3 molar equivalents of alkali per mol of poly acid.
Various alkalis can be used to dissolve the crude folic acid, such as ammonium hydroxide and alkali metal hydroxides, preferably sodium hydroxide.
For example, solutions with a content of about 3 to 10 g folic acid per liter, preferably those which are concentrated to about 8 g per liter, are suitable. The crude folic acid can be dissolved directly in the required volume of dilute alkali or, more conveniently, in a small volume of a 1N alkali solution, which is then diluted to a folic acid concentration suitable for the subsequent treatment.
Since the folic acid is not adsorbed by the oxides, hydroxides and carbonates of the metals of the second group, while the impurities of the folic acid are easily adsorbed, the amount of the crushed solid metal oxide, hydroxide or carbonate can vary within wide limits . For economic reasons it is.
however, it is usually expedient to use a ratio of about 1 g of the comminuted solid metal oxides, hydroxides or carbonates per g of folic acid. Calcium hydroxide, which is preferably used for carrying out the process according to the invention, is somewhat soluble in water, and more specifically in cold water than in hot water (about 0.13 g CaO per 100 ems at 0 C and about 0.06 g CaO per 100 cm3 at 100 C).
In order to achieve the desired adsorption, it must therefore be ensured that there is a sufficient amount of calcium hydroxide in the form of solid particles in the suspension. The same applies to the other metal oxides, hydroxides and carbonates mentioned. The mixture is usually stirred vigorously for about one and a half hours at room temperature.
If desired, the alkaline folic acid solution can be treated several times with the metal oxide, hydroxide or carbonate or be subjected to successive treatments with various metal oxides, hydroxides and carbonates, in which case the total amount required may be less than that for a single one Treatment required amount and a larger amount of folic acid with. a higher degree of purity can be obtained than with a single treatment.
Instead of calcium hydroxide (slaked lime), which is one of the preferred solid adsorbents, you can use equivalent amounts of quicklime (calcium oxide). Normally the purity of the lime does not matter, so that usually technical products can be used. To achieve maximum adsorption, the lime should be used in powdered form.
The metal oxide, hydroxide or carbonate and the impurities adsorbed thereon can be separated from the alkali solution of the poly acid in various ways, for example by filtration or centrifugation. The solution can, if desired, be filtered directly, but conveniently using a Filter aid, such as diatomaceous earth.
According to a preferred embodiment of the process according to the invention, the poly acid is isolated from the purified alkali solution by adjusting the p $ of the solution to about 3.0, the poly acid precipitating out. In order to obtain poly acid in crystallized, easily filterable form, one preferably works in such a way that the alkali solution of the purified poly acid is diluted to a concentration of about 3 g poly acid per liter, the solution is heated to about 90 to 98 ° C. and then adjust the pg of the hot solution to about 3.0 with dilute hydrochloric acid.
The poly acid then slowly crystallizes out of the solution.
<I> Example 1: </I> An alkali solution of crude poly acid, which is obtained by dissolving 2,6.2 g of crude poly acid with a content of 17.2 g of poly acid (65.6 / o) in 137 cm3 of 1N sodium hydroxide solution and diluting the solution with. 1890 cm3 of water had been produced, was mixed with 17.2 g of calcium hydroxide and stirred at room temperature for about 11/2 hours. After the resulting suspension settled, it became the liquid. decanted. The liquid was filtered. The solid residue was washed with 58.5 cms of water.
The filtrate and wash water were combined and diluted to 5.74 liters. The pH of the dilute alkali solution of the purified poly acid was adjusted to 8.0 to 10.0 with ln hydrochloric acid, whereupon the solution was heated to about 90 to 95 ° C. and its value was adjusted by adding ln hydrochloric acid while stirring was set to about 3.0. The resulting sludge was chilled in an ice box for two days. and then filtered.
The filter cake was washed by reslurrying with 650 cm3 of acidified water of pg 3.0 and filtered. The filter cake was then frozen and dried to give 16.99 g of polar acid with 7.4% moisture and a content of 94.10 / 9 poly acid, based on the dry state. ' <I> Example 2:
</I> A solution of crude poly acid, prepared by dissolving 564 g of crude poly acid with a content of 489 g of poly acid in 3 liters of sodium hydroxide solution and diluting with 56.4 liters of water, was mixed with 489 g of calcium hydroxide during 1n Stirred for 2 hours and then filtered through a bed of diatomaceous earth. The clarified alkali solution of poly acid was then heated to about 90-9.5 ° C. and In hydrochloric acid was added to adjust its pI to about 3.0.
The resulting sludge was cooled overnight and then filtered. 485 g of crystallized material with a content of 90.3 / o poly acid were obtained, which was suitable for therapeutic use without further purification.
Example <I> 3: </I> 2.3 g of crude poly acid with a content of 2 g of poly acid were dissolved in 15 cms of ln ammonium hydroxide solution. The solution was diluted with 250 liters of water. 100 cm3 of this solution were mixed with 800 mg calcium hydroxide and stirred thoroughly for 11/2 hours.
The suspension was filtered, whereupon the resulting clarified alkali solution of poly acid was diluted with 150 cubic meters of water and its pa was adjusted to about 3.0 with 1N hydrochloric acid. After the acidified solution had been left to stand for 24 hours in an ice box, the crystallized poly acid was filtered off and dried.
680 mg of a material were obtained which had a poly acid content of 89.6% and a good color.
<I> Example 4: </I> An aqueous slurry of crude poly acid was dissolved in a minimal amount of aqueous 5N sodium hydroxide solute. The solution was diluted with water to a concentration of 5.11 g of poly acid per liter.
510 mg of magnesium hydroxide were added to 100 cm3 of this solution. The suspension obtained was stirred for 90 minutes, then 100 mg of filter substance were added and passed through a bed. the filter substance is filtered. The filter corpse was washed with 2.5 cm3 of water.
The filtrate and wash water were combined and diluted to 200 cubic meters. 190 cms of the solution was heated to about 95 ° C. and the pH was adjusted to 3y0 in the course of about 15 minutes. After the acidified solution was left to stand in a refrigerator overnight, the precipitate was filtered off and dried in a frozen state.
542 mg of a material were obtained which had a content of 93.4% polyic acid, based on the dry state (91% yield).
<I> Example 5: </I> A second 100 em3 portion of the folic acid solution mentioned in example 4 was treated in the manner described in example 4 with 510 mg of zinc carbonate. 552 mg of a material were obtained which had a content of 95% poly acid (95.3% yield), based on the dry state.
Example <I> 6: </I> Chromatography of Poly Acid.
A column was produced by introducing a slurry of 0.5 g of slaked lime and 1 g of filter substance and water into a glass tube and allowing the water to drip off. After the water level was just above the top of the column, the 40 cm3 of a solution prepared by dissolving 0.5 g of a material containing about 82% polyacid in about 3 cm-3 of aqueous, 2.5N sodium hydroxide solution and Dilute to 100 cms, added to the top of the column, with the effluent collected. has been. A dark brown band developed in the column.
The drain was colored bright yellow. The poly acid was isolated from the yellow alkaline liquid in the manner described in Example 1. It was determined by analysis that 94% of the initially present poly acid had been obtained in purified form.