CA3198747A1 - Composes radiomarques pour le diagnostic de maladies neurodegeneratives cholinergiques - Google Patents

Abstract

La présente invention concerne le composé radiomarqué de l'énantiomère (R,R) du 5-fluoro-3-4(-phénylpipéridin-1-yl)-1,2,3,4-tétrahydronaphthalèn-2-ol, ainsi que ce composé pour son utilisation dans une méthode de diagnostic in vivo, notamment d'une maladie neurodégénérative cholinergique, par exemple choisie dans le groupe constitué de la maladie d'Alzheimer, de la dysmnésie, du trouble d'apprentissage, de la schizophrénie, du dysfonctionnement cognitif, du trouble d'hyperactivité, de la névrose d'angoisse, de la dépression, de l'analgésie et de la maladie de Parkinson.

Description

COMPOSÉS RADIOMARQUES POUR LE DIAGNOSTIC DE MALADIES
NEURODÉGÉNÉRATIVES CHOLINERGIQUES
La présente invention a pour objet de nouveaux composés radiomarqués au fluor-18, leur procédé de préparation ainsi que leurs utilisations, notamment pour le diagnostic de maladies neurodégénératives cholinergiques.
Les systèmes cholinergiques sont impliqués dans de multiples fonctions, et de nombreuses informations ont été obtenues ces dernières années sur les mécanismes -113 de la synthèse, du stockage, de la dégradation et des effets de l'acétylcholine sur les nombreux sous-types de récepteurs muscariniques et cholinergiques. Dans ce contexte, le transporteur vésiculaire de l'acétylcholine (VAChT) joue un rôle majeur qui, associé à sa localisation dans les terminaisons des neurones cholinergiques, en fait une cible de choix pour l'étude du fonctionnement et de l'intégrité des systèmes cholinergiques. Au niveau central ces systèmes sont particulièrement impliqués dans les processus cognitifs, et l'exploration in vivo du VAChT a un intérêt à la fois pour le diagnostic et le suivi des affections neurodégénératives associées à des altérations de ces processus. C'est le cas de la maladie d'Alzheimer (MA), qui est la cause de démence la plus fréquente, touche actuellement 900 000 personnes en France, et constitue un problème de santé publique de plus en plus aigu en raison du vieillissement de la population. De plus, des dysfonctionnements des systèmes cholinergiques se traduisant par des modifications de l'expression du VAChT
ont été
décrits dans d'autres affections neurodégénératives telles que la démence Parkinsonienne (Kotagal et al. Neurosci Lett. 2012 Apr 18;514(2):169-72. doi:
10.1016/j.neulet.2012.02.083, Kuhl et al Ann Neurol. 1996 Sep;40(3):399-410.
doi:
10.1002/ana.410400309), la paralysie supranucléaire progressive (Mazère et al.

Radiology. 2012 Nov;265(2):537-43. doi: 10.1148/radio1.12112650), l'atrophie multisystématisée (Mazère et al. Neuroimage Clin. 2013 Aug 8;3:212-7. doi:
10.1016/j.nic1.2013.07.012), la démence à corps de Lewy (Mazère et al. J Nucl Med.
2017 Jan;58(1):123-128. doi: 10.2967/jnumed.116.176180 ; Nejad-Davarani et al.
Mol Psychiatry. 2019 Mar;24(3):322-327. doi: 10.1038/s41380-018-0130-5), ou dans des affections périphériques telles que le cancer (Stokholm et al. Eur J Nucl Med Mol Imaging. 2016 May;43(5):906-910. doi: 10.1007/s00259-015-3143-1) ou les affections cardiaques (Durand et al. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 2015 Aug 15;309(4):H655-62. doi: 10.1152/ajpheart.00114.2015).

2 La méthode la plus pertinente pour l'exploration du VAChT in vivo est la tomographie par émission de positrons (TEP), qui impose de disposer de traceurs émetteurs de rayonnement beta+, en particulier le fluor-18 (18F), spécifique de la cible moléculaire d'intérêt.
L'exploration du VAChT a un intérêt à la fois pour le diagnostic et le suivi des affections neurodégénératives citées plus haut. Elle peut être considérée comme complémentaire de l'imagerie des protéines anormales caractéristiques de ces maladies. Par exemple, une présence de plaques beta-amyloïdes détectée par imagerie n'est pas toujours corrélée à l'intensité des scores cliniques au cours de la io maladie d'Alzheimer (e.g. Stephen et al. J Alzheimers Dis. 2017;59(2):695-705.
doi:
10.3233/JAD-170092). En revanche, une altération des systèmes cholinergiques est obligatoirement liée à des symptômes neuropsychiatriques (e.g. Sultzer et al.
Brain.
2018 Mar 1;141(3):626-628. doi: 10.1093/brain/awy040). Dans ce contexte, une étude très récente vient de démontrer que l'exploration in vivo du VAChT
permet de mettre en évidence, au cours de la maladie d'Alzheimer, une dénervation cholinergique qui est plus sensible et mieux corrélée aux symptômes cognitifs que l'exploration des plaques 3-amyloïdes ou du métabolisme cérébral (Aghourian et al.
Mol Psychiatry. 2017 Nov;22(11):1531-1538. doi: 10.1038/mp.2017.183.).
Seul le iodobenzovésamicol marqué à l'iode-123 ([1231]IBVM) a été qualifié à
ce jour comme marqueur d'imagerie utile dans la quantification de la densité en VAChT
dans le cerveau (Mazère et al. Neuroimage. 2008 Mar 1;40(1):280-8. doi:
10.1016/j.neuroimage.2007.11.028). Cependant cette molécule a montré des liaisons non spécifiques, en particulier une liaison aux récepteurs sigma. Par ailleurs ce traceur, marqué à l'iode-123, n'est utilisable qu'en tomographie d'émission monophotonique (SPECT), méthode d'imagerie moléculaire moins adaptée à la quantification in vivo que la TEP. Ces deux points limitent donc l'emploi de l'IBVM
comme traceur en clinique.
La présente invention a donc pour but de fournir un nouveau composé
radiomarqué permettant le diagnostic de maladies neurodégénératives cholinergiques.
La présente invention a également pour but de fournir un composé pour le diagnostic de maladies neurodégénératives cholinergiques, adapté à la tomographie par émission de positrons (TEP).
La présente invention a également pour but de fournir un traceur TEP efficace in vivo avec un très bon passage de la barrière hémato-encéphalique et une

3 accumulation spécifique dans les régions cérébrales où sont localisés les VAChT, et présentant une bonne stabilité in vivo.
Ainsi, la présente invention concerne le composé répondant à la formule (I) suivante :
OH

(I) Le composé de formule (I) selon l'invention est un composé radiomarqué et correspond à l'énantiomère radiomarqué (R,R) du 5-fluoro-3-4(-phénylpipéridin-1-yI)-1,2,3,4-tétrahydronaphthalèn-2-ol (FBVM).
Ce composé est également nommé (-)-(R,R)-5418-,ri_ FBVM.
Le composé de formule (I) selon l'invention est optiquement pur.
La présente invention concerne également le composé de formule (I) telle que définie ci-dessus, pour utilisation dans une méthode de diagnostic in vivo.
La présente invention concerne également le composé de formule (I) telle que définie ci-dessus, pour son utilisation dans une méthode de diagnostic in vivo d'une maladie neurodégénérative cholinergique.
Selon un mode de réalisation, la maladie neurodégénérative cholinergique est choisie dans le groupe constitué de la maladie d'Alzheimer, de la dysmnésie, du trouble d'apprentissage, de la schizophrénie, du dysfonctionnement cognitif, du trouble d'hyperactivité, de la névrose d'angoisse, de la dépression, de l'analgésie et de la maladie de Parkinson.
Ainsi, l'invention permet de lever le verrou du diagnostic précoce, c'est-à-dire avant l'apparition de signes cliniques, d'affections neurodégénératives telles que la maladie d'Alzheimer, grâce à l'imagerie quantitative in vivo du VAChT dont la diminution est un index sensible de la perte des neurones cholinergiques associée à

4 l'apparition ultérieure, à partir d'un certain seuil de perte en neurones cholinergiques, des troubles cognitifs caractéristiques de la maladie. Cette détection précoce est un enjeu majeur car les traitements, très activement recherchés, seront d'autant plus efficaces s'ils sont administrés dans les premiers stades de la maladie, les phases asymptomatiques.
En comparaison, par exemple, le 5(-)418FWEOBV (5-fluoroéthoxybenzovésamicol) a été décrit comme traceur TEP ciblant le VAChT
(Mulholland et al. 1998). Cependant les inventeurs ont montré un meilleur potentiel du composé de l'invention par rapport à ce produit qui semble être métabolisé
plus rapidement, ceci entraînant la dissémination de la radioactivité. De plus l'accumulation dans le cerveau du composé selon l'invention est certes qualitativement similaire à celle du FEOBV mais est quantitativement plus importante.
De par sa structure d'arylfluoré, le (-)-(R,R)-5-[18F]FBVM selon l'invention n'est pas ou très peu susceptible de perdre son fluor radioactif contrairement au 5-[18F]FEOBV qui est lui radiomarqué en position aliphatique.
La molécule radiomarquée au fluor-18 optiquement pure selon l'invention, à
savoir le composé de formule (I), se lie spécifiquement au VAChT. Comme montré

plus loin, la présente invention, basée sur la structure de molécules de type (benzo)vesamicol, permet d'atteindre un bon niveau de spécificité in vitro, et le premier radioligand a déjà démontré son potentiel comme traceur TEP in vivo chez le rat au regard de son excellent passage de la barrière hémato-encéphalique, de son accumulation spécifique dans les régions cérébrales où sont localisés les VAChT et de sa bonne stabilité in vivo.
Le composé de formule (I) selon l'invention peut donc également être utilisé
comme traceur pour la quantification en TEP du VAChT.
Le composé de formule (I) selon l'invention peut également être utilisé comme réactif pour la cartographie de VAChT (indicateur radioactif) ou similaire, qui peut être utilisé pour la tomographie par émission de positons (TEP).
Le composé de l'invention peut également être utilisé pour surveiller et contrôler la progression des maladies susmentionnées ou pour suivre l'efficacité du traitement de ces maladies.
La présente invention concerne également un procédé de préparation du composé de formule (I) telle que définie ci-dessus, comprenant une étape (a) de préparation d'un mélange réactionnel par l'addition d'un composé de formule (III) suivante :
OH
(III)

5 avec des ions fluor réactifs 18F, suivie d'une étape (b) de séparation chirale dudit mélange réactionnel obtenu à
l'issue de l'étape (a).
Selon un mode de réalisation, l'étape (a) est effectuée en présence de Cu(0Tf)2.
De préférence, l'étape (a) est effectuée dans un mélange de DMF et de pyridine à titre de solvant.
Selon un mode de réalisation, l'étape (a) du procédé de l'invention est effectuée en présence de Cu(0Tf)2 dans un mélange de DMF et de pyridine.
Selon un mode de réalisation, l'étape (a) comprend une étape de chauffage du mélange réactionnel, à une température comprise de 90 C à 120 C, de préférence égale à 100 C.
Selon un mode de réalisation, ce chauffage est effectué pendant une durée comprise de 2 minutes à 30 minutes, de préférence égale à 10 minutes.
De préférence, l'étape de chauffage susmentionnée est suivie d'une étape de refroidissement à une température comprise de 25 C à 40 C, de préférence égale à
C.
Selon un mode de réalisation, l'étape (a) du procédé de l'invention comprend 25 une étape de chauffage du mélange réactionnel, à une température comprise de 90 C
à 120 C, de préférence égale à 100 C, pendant une durée comprise de 2 minutes à
30 minutes, de préférence égale à 10 minutes, ladite étape de chauffage étant de préférence suivie d'une étape de refroidissement à une température comprise de 25 C à 40 C, de préférence égale à 30 C.

6 Selon un mode de réalisation, l'étape (b) de séparation chirale est effectuée par chargement du mélange réactionnel obtenu à l'issue de l'étape (a) sur une colonne chirale semi-préparative dont la phase stationnaire est chirale, notamment Chiral pak IA, Daicel 10*250 mm.
A titre de phase mobile chirale, on utilise de préférence une phase mobile comprenant un mélange d'acétonitrile, d'acétate d'ammonium et de méthanol.
De préférence, la phase mobile comprend de 50% à 90% en volume d'acétonitrile, de 0% à 20% en volume d'acétate d'ammonium et de 0% à 40% en volume de méthanol, les pourcentages étant calculés par rapport au volume total de ladite phase mobile.
Une phase mobile préférée selon l'invention comprend 70% en volume d'acétonitrile, 10% en volume d'acétate d'ammonium et 20% en volume de méthanol, les pourcentages étant calculés par rapport au volume total de ladite phase mobile.
Selon un mode de réalisation, le composé de formule (III) est obtenu par une réaction de diazotation d'un composé de formule (IV) suivante :
OH

(IV) suivie d'une réaction de substitution par un halogène, tel que l'iode, sur le composé diazo obtenu à l'issue de la réaction de diazotation susmentionnée,

7 pour obtenir un composé de formule (V) suivante :
OH
(V) et - la transformation du composé de formule (V) par borylation de Miyaura pour obtenir un composé de formule (III).
Selon un mode de réalisation, le composé de formule (III) est obtenu selon un procédé comprenant les étapes suivantes :
- la réaction du composé de formule (IV) suivante :
OH

(IV) avec du nitrite de sodium, notamment en présence de l'APTS mono-hydraté, suivie de l'addition d'iodure de potassium, pour obtenir un composé de formule (V) suivante :
OH
(V) et - la transformation du composé de formule (V) par borylation de Miyaura pour obtenir un composé de formule (III).

8 L'étape de réaction de diazotation susmentionnée est effectué dans un solvant adapté pour cette réaction. A titre d'exemple, on peut citer le toluène, le dioxane, en présence ou non d'éthanol et d'eau.
L'étape de réaction susmentionnée est effectuée de préférence dans de l'acétonitrile, en particulier à température ambiante.
De préférence, cette étape de réaction est effectuée pendant 4 heures.
L'étape de transformation du composé de formule (V) est effectuée de préférence en présence d'acétate de potassium dans des solvants de type amide, comme par exemple le DMA ou le DMF, et préférentiellement le DMF.
L'étape de réaction susmentionnée est effectuée de préférence à une température comprise de 80 C à 110 C, de préférence égale à 90 C, jusqu'à
disparition du produit de départ, et notamment pendant 1 heure.
La présente invention concerne également le composé de formule (II) suivante :

(Il) Le composé de formule (II) selon l'invention est un composé radiomarqué et correspond à l'énantiomère radiomarqué (S,S) du 5-fluoro-3-4(-phénylpipéridin-1-yI)-1,2,3,4-tétrahydronaphthalèn-2-ol (FBVM).
Ce composé est également nommé (+)-(S,S)-5418.-rj -._ FBVM.
Ce composé peut être obtenu selon le procédé décrit plus haut pour le composé
de formule (I).

9 La présente invention concerne également le composé répondant à la formule (III) suivante :
OH
* N
===., (III) EXEMPLES
Synthèse des composés rac (+/-)-5-FBVM trans, (R,R)-(-)-5-FBVM et (S,S)-5 (+)-5-FBVM et détermination de leur stéréochimie absolue Le rac (+/-)-5-FBVM a été synthétisé en suivant la voie de synthèse décrite sur les schémas 1 et 2. Le 1-aminonaphtalène 1 est réduit en 5,8-dihydronaphtalène en utilisant les conditions de Birch puis la fonction amine est protégée avec -113 l'anhydride trifluoroacétique en présence de la triéthylamine pour conduire au composé 3 avec un rendement de 89%. Ce dernier est ensuite engagé dans une réaction d'époxydation pour donner le composé 4 avec un rendement de 85%.
L'ouverture de l'époxyde en présence par la 4-phenylpipéridine commerciale et la triéthylamine dans le reflux de l'éthanol puis la déprotection de la fonction amine en milieu basique conduit aux deux régioisomères 5-R1 trans et 5-R2 trans avec un rendement global de 60%. Les deux régioisomères 5-R1 trans et 5-R2 trans ont été
séparés puis caractérisés.
Ph ri** OH
Na, tBuOH, 1 1 F3C 0 CF3 mCPBA, NH2 NO,ph leoTHF Et3N, DCM tel DCM gje 0 Et,N, Et0H, reflux, 48h trans (31%L
t.a, 4h 0 C, 2h 0 C à ta, 18h puis NH2 85% NH2 89% HNTCF3 85% HN CF NaOH, H20, Me0H, t.a 20h N112 0 60%
OH
1 2 3 4 1** NO
Ph 5-R2 trans (29%) Schéma 1: Synthèse du précurseur du (rac)- (+/-)-5-FBVM trans = 5,8-Dihydronaphthalen-1-amine (2) Dans un ballon à fond rond, le composé 1 (16,0 g, 112 mmol) a été solubilisé
dans du THF anhydre (180 mL) sous atmosphère d'argon, puis du sodium (6,4 g, mmol, 2,5 équivalents) a été ajouté par portions pendant 15 minutes. Après agitation à température ambiante pendant 10 min, une solution de tert-BuOH (26,8 ml, 279 mmol, 2,5 équiv.) dans du THF anhydre (70 mL) a été ajoutée goutte à goutte pendant min (réaction exothermique). La réaction a été laissée sous agitation à la température ambiante pendant 4h. Le mélange réactionnel a été filtré sous vide afin de recueillir le sodium n'ayant pas réagi pour le détruire dans de l'isopropanol à 000.
30 Le filtrat a ensuite été concentré pour sécher sous pression réduite.
Le brut résiduel a été dissous dans de l'Et20 (120 mL) à 0 C, puis de l'eau (120 mL) a été
ajoutée lentement. Le mélange a été transféré dans une ampoule à décanter, puis la phase organique a été séparée. La phase aqueuse a été extraite avec de l'Et20 (3 x

10 mL) puis les phases organiques ont été combinées, séchées sur du MgSO4, filtrées et concentrées pour sous pression réduite. Le brut résiduel a été purifié par chromatographie flash sur colonne de gel de silice (EP/AcOEt : 95/5) pour obtenir le produit 2 souhaité sous forme de sirop brun foncé (13,8 g, 85%). Mp : 236-237 C
IR: 3441, 3372, 3024, 2903, 2841, 2815, 2607, 2591, 1584, 1584, 1567, 1536, 1465, 1430, 1343, 1301, 1246, 1141, 1068, 1005, 769, 700, 668.1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) O 1 0.32 (brs, 2H, NH2), 7.34 (d, J= 7.7 Hz, 1H, H-Ar), 7.24 (t, J=
7.7 Hz, 1H, H-Ar), 7.16 (d, J= 7.7 Hz, 1H, H-Ar), 5.88 (s, 2H, 2 =CH), 3.53 ¨ 3.32 (m, 4H, 2 CH2).13C NMR (101 MHz, DMSO-d6) O 135.6 (Cq), 130.3 (Cq), 128.2 (CH), 128.1 (Cq), 126.7 (CH), 124.0 (CH), 122.9 (CH), 120.9 (CH), 28.8 (CH2), 24.6 (CH2).
= N-(5,8-Dihydronaphthalen-1-y1)-2,2,2-trifluoroacetamide (3) HN IrCF3 Dans un ballon à fond rond, le composé 2 (13,0 g, 89,7 mmol) a été solubilisé
dans du DCM (500 mL). On a ajouté de l'Et3N (25,0 ml, 179,4 mmol, 2.0 équivalents), puis le mélange réactionnel a été refroidi à 0 C. L'anhydride trifluoroacétique (17,6 ml, 134,6 mmol, 1,5 équiv.) a été ajouté goutte à goutte et le mélange réactionnel a été laissé sous agitation à 0 C pendant 2h. La réaction a été arrêtée par une lente addition d'eau (250 mL). Le mélange a été transféré dans une ampoule à
décanter puis la couche organique a été séparée et lavée avec de la saumure (100 mL) puis une solution saturée de NaHCO3 (100 mL), séchée sur MgSO4, filtrée et concentrée pour séchage sous pression réduite. Le brut a été purifié par chromatographie flash sur colonne de gel de silice en utilisant EP/AcOEt (80/20) comme éluant pour obtenir le produit souhaité 3 sous forme de solide rose (19,3 g, 89 %).
IR: 3277, 3034, 2930, 2900, 2815, 1703, 1610, 1586, 1550, 1467, 1347, 1291, 1256, 1185, 1151, 1068, 915, 782, 767, 700.1H NMR (250 MHz, 0DCI3) O 7.69 (brs, 1H, NH), 7.59 (dd, J= 8.2, 1.3 Hz, 1H, H-Ar), 7.21 (d, J= 7.9 Hz, 1H, H-Ar), 7.10 -7.04 (m, 1H, H-Ar), 5.90 (ddddt, J= 13.5, 12.0, 8.2, 3.4, 1.7 Hz, 2H, 2 =CH), 3.49 ¨
3.38 (m, 2H, CH2), 3.23 (tt, J= 6.5, 2.4 Hz, 2H, CH2). 13C NMR (63 MHz, 0D013) 155.2 (q, J= 36.8 Hz, Cq), 135.7 (Cq), 132.1 (Cq), 127.7(CH), 126.9 (Cq), 126.9(CH), 116.1 (q, J= 288.9 Hz, 0F3), 29.8 (0H2), 25.2 (0H2). 19F NMR (235 MHz, 0D013) -75.58 (d, J= 1.3 Hz).
= 2,2 ,2-Trifluoro- N-(1a,2, 7,7a-tetrahydr0naphtho[2,3-bloxi ren-3-yl)acetamide H N .y.CF3 4 (mzH358) Dans un ballon à fond rond, le composé 3 (10,0 g, 41,5 mmol) a été solubilisé
dans du DCM (80 mL) et de l'Et20 (20 mL) sous atmosphère d'argon. Le mélange a été refroidi à 0 C, puis du mCPBA (8,585 g, 49,8 mmol, 1,2 équivalents) a été
ajouté
en une seule fois. Le mélange réactionnel est agité à température ambiante pendant 20h. La réaction a été arrêtée par l'ajout d'une solution aqueuse saturée de NaHCO3 (60 mL). Les phases organiques et aqueuses ont été séparées et la phase aqueuse a été extraite par du DCM (3 x 60 mL). Les phases organiques ont ensuite été
combinées, séchées sur du MgSO4 et filtrées. Après avoir éliminé les substances volatiles sous pression réduite, le brut résultant a été solubilisé dans une quantité
minimale de DCM. L'ajout d'Et20 a permis de former un solide blanc qui a ensuite été
recueilli par filtration, lavé avec de l'Et20 et séché sous vide pour obtenir l'époxyde 4 souhaité sous forme de solide blanc (8,4 g, 79 A)).
Mp : 102-103 C. IR :3241, 3143, 3067, 3020, 2918, 2899, 2824, 1723, 1608, 1587, 1545, 1471, 1454, 1423, 1334, 1266, 1155, 1069, 998, 982, 922, 890, 860, 821, 787, 764, 741.1H NMR (400 MHz, CD0I3) O 8.15 (brs, 1H, NH), 7.28 ¨7.15 (m, 2H, H-Ar), 7.05 (d, J = 7.3 Hz, 1H, H-Ar), 3.57 ¨ 3.49 (m, 2H, CH2), 3.44 ¨ 3.18 (m, 2H, 0H2), 2.93 (m, 2H, 2 CH).13C NMR (101 MHz, CDCI3) O 155.4 (q, J= 37.1 Hz, Cq), 133.2 (Cq), 132.4 (Cq), 129.2 (CH), 127.2 (CH), 126.8 (Cq), 123.6 (CH), 116.1 (q, J
= 288.9 Hz, CF3), 52.3 (CH), 51.5 (CH), 30.1 (0H2), 25.1 (0H2).
= Synthèse des composés 5-R1 et 5-R2:
Dans un flacon à fond rond, l'époxyde 4 (3,282 g, 12,8 mmol) a été solubilisé
dans de l'Et0H (80 mL) sous argon. La 4-phénylpipéridine (2,059 g, 12,8 mmol, 1.0 équivalent) et la triéthylamine (3,558 ml, 25,5 mmol, 2.0 équivalents) ont été
ajoutées puis le mélange réactionnel a été mis au reflux pendant 48 heures. L'Et0H a été

éliminé sous pression réduite puis le brut résultant a été solubilisé dans du Me0H (70 mL). Une solution aqueuse de NaOH (6,128 g dans 50 ml d'eau, 12.0 équivalents) a été ajoutée et le mélange réactionnel a été laissé sous agitation à
température ambiante pendant 20h. A la fin de la réaction, un précipité brun s'est formé.
Celui-ci a ensuite été recueilli par filtration puis solubilisé dans du DCM pour être purifié par chromatographie flash sur colonne de gel de silice en utilisant du DCM/Me0H
(100/0 à 99,5/ 0,5 puis 99/1 à 95/5) comme phase mobile pour obtenir les produits souhaités 5-R1 (1,249 g, 31%) et 5-R2 (1,189 g, 29%) comme solides beiges.
= 5-Ami no-3-(4-phenylpiperidin-1-yI)-1,2,3,4-tetrahydronaphthalen-2-ol (5-R1):
Mp : 165-166 C. IR :3453, 3372, 3061, 3023, 3005, 2929, 2903, 2846, 2846, 2814, 1618, 1586, 1494, 1466, 1439, 1409, 1374, 1331, 1300, 1250, 1141, 1068, 1005, 783, 765. HRMS (ESI+) : calc. pour C211-127N20 [M+1-1] : 323.21179 trouvé :
323.21168. 1H NMR (400 MHz, 0DCI3) O 7.36 ¨ 7.29 (m, 2H, H-Ar), 7.28 ¨ 7.19 (m, 3H, 3H-Ar), 6.99 (t, J = 7.7 Hz, 1H, H-Ar), 6.65 ¨ 6.50 (m, 2H, 2 H-Ar), 4.19 (brs, 1H, OH), 3.87 (td, J= 10.5, 5.5 Hz, 1H, CH), 3.60 (brs, 2H, NH2), 3.25 (dd, J=
15.9, 5.5 Hz, 1H, H de CH2), 2.99 (dt, J = 11.2, 3.4 Hz, 1H, H of CH2), 2.93 ¨ 2.76 (m, 4H, CH
and H of 2 CH2 et CH2), 2.71 (dd, J = 15.5, 5.6 Hz, 1H, H of CH2), 2.62 ¨ 2.40 (m, 3H, 2 H of 2 CH2 et CH), 1.99 ¨ 1.82 (m, 3H, CH2 et 1H of CH2), 1.76 (qd, J =
12.4, 3.8 Hz, 1H, H de CH2).13C NMR (101 MHz, CDCI3) 5 146.2 (Cq), 144.6 (Cq), 135.1 (Cq), 128.6 (20H), 127.1 (CH), 127.0 (20H), 126.4 (CH), 119.9 (CH), 119.9 (Cq), 112.8 (CH), 66.8 (CH), 65.4 (CH), 53.69 (CH2), 45.1 (CI-12), 43.1 (CH), 38.3 (CH2), 34.5 (CH2), 34.0 (CH2), 21.0 (CH2). 19F NMR (376 MHz, CDCI3) O -75.3.
= 8-Ami no-3-(4-phenylpiperidin-1-yI)-1,2,3,4-tetrahydronaphthalen-2-ol (5-R2) :
Mp :210-211 C. IR :3441, 3374, 3067, 3023, 2929, 2904, 2846, 2813, 1618, 1587, 1494, 1466, 1439, 1410, 1375, 1331, 1299, 1250, 1129, 1068, 1005, 983, 783, 765, 700. HRMS (ESI+) : calc. pour 021H27N20 [M+1-1]+: 323.21179 trouvé :
323.21146.
NMR (400 MHz, 0DCI3) 57.33 (t, J= 7.5 Hz, 2H, 2H-Ar), 7.28 ¨ 7.19 (m, 3H, 3H-Ar), 6.98 (t, J = 7.7 Hz, 1H, H-Ar), 6.56 (t, J = 7.2 Hz, 2H, H-Ar), 4.34 (brs, 1H, OH), 3.93 (td, J= 9.8, 6.1 Hz, 1H, CH), 3.62 (brs, 2H, NH2), 3.13 (dd, J= 15.6, 6.3 Hz, 1H, 1H of CH2), 3.00 (d, J = 11.2 Hz, 1H, CH2), 2.93 ¨ 2.73 (m, 5H, CH et 2 CH2), 2.57 (tt, J= 12.0,4.1 Hz, 1H, CH), 2.47 ¨ 2.32 (m, 2H, 2 H de 2 CH2), 1.98 ¨ 1.82 (m, 3H, CH2 et H de CH2), 1.75 (qd, J = 12.3,3.8 Hz, 1H, 1H de CH2).13C NMR (101 MHz, CDCI3) 146.2 (Cq), 144.6 (Cq), 136.1 (Cq), 128.6(2CH), 127.0 (CH), 127.0 (2CH), 126.4 (CH), 119.5 (CH), 118.9 (Cq), 112.7 (CH), 66.2 (CH), 66.1 (CH), 53.8 (CH2), 45.2 (CH2), 43.1 (CH), 34.4 (CH2), 34.0 (CH2), 33.3 (CH2), 26.6 (CH2).
Le régioisomère d'intérêt 5-R1 trans a été ensuite engagé dans une réaction de Balz-Schiemann pour donner le produit (rac)-5-FBVM Trans avec un rendement de 59%. Afin de séparer les deux énantiomères du (rac)- (+/-)-5-FBVM Trans, ce dernier a été transformé en ester de Mosher par le biais de (R)-(+)-acide a-méthoxy-a-trifluorométhylphénylacétique commercial utilisé comme copule chirale. En utilisant les conditions de Steglich, les deux diastéréoisomères 6-D, et 6-02 ont été
obtenus et séparés avec un rendement global de 60%.

otOMe Ph EP/AcOEt = 9:1 HO,Ce*,F3 Ph .-"OMe OH tertBuON0,13F.0Et, OH
N 1,2-dichlorobenzene,3 0 C,2 15 min (R)-(4)-Acide de Mosher lb 6-131 Ph PUIS PIDA, 40 C, 36h DCC, DMAP CF, NH, 59% DCM, t.e, 24h InIÇOMe Ph 5-R1 tram ______________________________ roc ( 60%./-)-5-FBVM Trans sle Ph Rendements lete Di:26%
D2 : 34% F LJ.Ph Schéma 2: Synthèse de l'ester de Mosher et séparation des diastéréoisomères.
Plaque CCM montrant la séparation de ces produits.
= 5-Fluoro-3-(4-phenylpiperidin-1-yI)-1,2,3,4-tetrahydronaphthalen-2-ol ((rac)-(+/-)-5-FBVM) :
Dans un réacteur tubulaire séché au four équipé d'un agitateur et d'un bouchon à vis en téflon, le composé 5-R1 (849 mg, 2,6 mmol), le BF3.Et20 (818 I, 6,6 mmol, 2,5 équivalents) et le 1,2-dichlorobenzène (9 mL) ont été ajoutés. Le mélange a été
refroidi à 0 C, puis du tert-BuONO (629 pl, 4,7 mmol, 1,8 équiv.) a été ajouté
à l'aide d'une seringue sous atmosphère d'argon et à 0 C. Le mélange a été agité à 0 C
pendant 15 min puis une solution de PIDA (170 mg, 0,5 mmol, 0,2 équiv.) dans du 1,2-dichlorobenzène (2 mL) a été ajoutée. Le réacteur a été scellé et chauffé
à 40 C
pendant 36h. Après refroidissement, le mélange a été évaporé sous vide. Le brut a été solubilisé dans du DCM (30 mL) et lavé avec une solution aqueuse saturée de NaHCO3 (30 mL) séchée sur du MgSO4, puis filtré sous pression réduite. Le brut obtenu a été purifié par chromatographie flash en utilisant EF/AcOEt (10/0 à
1/1) comme éluant pour obtenir le (rac)-5-FBVM (500 mg, 59%) souhaité sous forme de solide beige pâle. Mp : 147-148 C.
IR (y cm-1) : 3434, 3079, 3048, 3025, 2931, 2910, 2870, 2840, 2813, 1579, 1492, 1462, 1411, 1376, 1278, 1238, 1141, 1124, 1072, 1003, 981, 782, 769, 711, 5 696. HRMS (ESI+) : calc. pour C21H25FN0 [M+H]t 326. 19146 trouvé
:326.19131. 1H
NMR (250 MHz, 0D013) 6 7.37 ¨ 7.17 (m, 5H, 5H-Ar), 7.11 (td, J = 7.9, 5.7 Hz, 1H, H-Ar), 6.95 ¨ 6.80 (m, 2H, 2 H-Ar), 4.34 (brs, 1H, OH), 3.87 (td, J = 10.2, 5.6 Hz, 1H, CH), 3.33 (dd, J 16.2, 5.7 Hz, 1H, H de 0H2), 3.15 ¨3.02 (m, 1H, H de 0H2), 3.02 ¨ 2.84 (m, 3H, CH de CH2 et CH2), 2.83 ¨ 2.50 (m, 4H, 2H de CH2 et 2 CH), 2.44 113 (td, J= 11.5, 2.5 Hz, 1H, H de CH2), 2.01 ¨ 1.86 (m, 3H, CH et H de CH2), 1.85 ¨ 1.62 (m, 1H, H de CH2). 13C NMR (63 MHz, 0D013) Ei 161.1 (d, J = 243.9 Hz, Cq), 146.2(Cq), 136.8 (d, J = 4.3 Hz, Cq), 128.6 (20H), 127.4 (d, J = 8.7 Hz, CH), 127.0(2CH), 126.4 (CH), 124.7 (d, J = 3.3 Hz, CH), 122.7 (d, J = 17.6 Hz, Cq), 112.4 (d, J= 21.9 Hz, CH), 66.2 (CH), 65.4(CH), 53.8(CH2), 45.1(CH2), 43.0 (CH), 37.9 (d, 15 J= 2.2 Hz, 0H2), 34.5 (0H2), 34.0 (CH2), 19.2 (d, J= 3.3 Hz, CH2).
19F NMR (235 MHz, CDC13) Ei -117.3 (dd, J= 9.9, 5.5 Hz).
= Synthèse des esters de Mosher 6-D1 et 6-D2:

opµOMe oplç.%0Me Ph Ph FL F3Ph Dans un ballon à fond rond séché au four, le rac-(+/-)-5-FBVM (650 mg, 2.0 mmol) a été solubilisé dans du DOM (5 mL). La DCC (515 mg, 2,5 mmol, 1,25 équiv.), le DMAP (5 mg, 0,4 mmol, 0,2 équiv.) et l'acide de Mosher (561 mg, 2,4 mmol, 1,2 équiv.) ont été ajoutés respectivement sous atmosphère d'argon. Le mélange réactionnel a été laissé sous agitation à température ambiante pendant 24 heures.
La réaction a été arrêtée en ajoutant une solution aqueuse saturée de NaHCO3 (30 mL), puis transférée dans une ampoule à décanter. La couche organique a été
recueillie et la couche aqueuse a été extraite avec du DCM (2 x 30 mL).
Ensuite, les couches organiques ont été combinées ensemble, séchées sur du MgSO4 et filtrées.
Le solvant a été éliminé sous pression réduite. Le brut obtenu a été purifié
par chromatographie flash sur colonne de gel de silice en utilisant le mélange EP/AcOEt (100/0 à 95:5) comme éluant pour obtenir les produits souhaités 6-D1 (276 mg, 26%) et 6-D2 (369 mg, 34%) sous forme de solides amorphes blancs.
(R)-(2R,3R)-5-Fluoro-3-(4-phenylpiperidin-1-yI)-1 ,2,3,4-tetrahydro naphthalen-2-yI3,3,3-trifluoro-2-methoxy-2-phenylpropanoate (6-D,):
HRMS (ESI-E) : calc. pour 031 H32F4 NO3 [M+1-1]+: 542.23128 trouvé :
542.23097.
IR (v cm-1): 3060.5, 3002.6, 2975.1, 2947.0, 2889.8, 2850.1, 2353.1, 1738.2, 1588.1, 1496.7, 1474.7, 1452.4, 1405.2, 1384.4, 1258.2, 1197.8, 1187.1, 1170.0, 1112.5, 1079.8, 1054.2, 1015.7, 995.1, 969.9, 952.5, 88.8, 793.5, 763.0, 745.8, 736.7, 720.8, 704.0, 661.8. 'H NMR (250 MHz, CDCI3) 57.80 (dd, J= 6.5, 3.1 Hz, 2H, 2H-Ar), 7.54 - 7.44 (m, 3H, 3 H-Ar), 7.41 - 7.31 (m, 2H, 2H-Ar), 7.31 - 7.21 (m, 3H, 3 H-Ar), 7.21 - 7.09 (m, 1H, 1 H-Ar), 7.02 - 6.80 (m, 2H, 2 H-Ar), 5.63 (td, J= 9.5, 5.9 Hz, 1H, CH), 3.78 (s, 3H, OMe), 3.32 - 3.09 (m, 4H, CH et 3 H de 30H2), 3.07 - 2.76 (m, 4H,2H of 20H2 et CH2), 2.64 - 2.40 (m, 2H, CH et 1H de 0H2), 2.02 - 1.62 (m, 4H, 2 CH2). 13C
NMR (63 MHz, 0D013) 5 166.0 (Cq), 160.7 (d, J= 244.5 Hz, Cq), 146.5 (Cq), 135.7 (d, J= 4.4 Hz, Cq), 132.6 (Cq), 129.8 (CH), 128.6 (40H), 127.8 (20H), 127.5 (d, J=
8.6 Hz, CH), 126.9 (2CH), 126.3 (CH), 124.0 (d, J= 3.3 Hz, CH), 123.5 (q, J=
288.9, 0F3),122.5 (d, J= 17.7 Hz, Cq), 112.9 (d, J= 21.8 Hz, CH), 85.0 (q, J= 27.4 Hz, Cq), 71.2 (CH), 63.2 (CH), 55.70 (d, J = 1.5 Hz, CH3), 52.8 (CH2), 46.8 (CH2), 42.9 (CH), 34.8 (d, J= 2.1 Hz, 0H2), 34.5 (0H2), 33.2 (CH2), 19.9 (d, J= 2.9 Hz, 0H2).

(235 MHz, CDCI3) 6 -71.1, -117.8 (dd, J = 9.4, 5.7 Hz).
= (R)-(2S,3S)-5-Fluoro-3-(4-phenylpiperidin-1-y1)-1,2,3,4-tetrahydronaphthalen-2-y13,3,3-trifluoro-2-methoxy-2-phenylpropanoate (6-D2) :
HRMS (ES11: calc. pour C311132F4NO3 [M+H]: 542.23128 trouvé : 542.23125.
IR (v cm-1): 3025.6, 2978.2, 2943.6, 2911.9, 2849.8, 2794.8, 2737.6, 2621.6, 2603.5, 2497.9, 1746.9, 1619.3, 1584.5, 1493.1, 1465.6, 1450.7, 1397.5, 1385.3, 1325.9, 1293.4, 1243.5, 1187.3, 1166.1, 1122.5, 1108.9, 1079.6, 1012.2, 966.5, 786.5, 762.8, 734.5, 719.2, 699.7.1H NMR (250 MHz, 0D013) O 7.74 - 7.61 (m, 2H, 2H-Ar), 7.47 -7.38 (m, 3H, 3H-Ar), 7.34 - 7.26 (m, 2H, 2H-Ar), 7.23 - 7.06 (m, 4H, 4H-Ar), 6.94 -6.83 (m, 2H, 2H-Ar), 5.51 (td, J= 8.6, 5.5 Hz, 1H, CH), 3.63 (q, J= 1.2 Hz, 3H, OMe), 3.34 (dd, J= 16.2, 5.6 Hz, 1H, H de 0H2), 3.15- 2.73 (m, 6H, CH2, 3H de 30H2 et CH), 2.51 (td, J = 11.3, 2.7 Hz, 1H, H de 0H2), 2.42 - 2.22 (m, 2H, H of 0H2 and CH), 1.67 (dtq, J= 28.9, 12.2, 4.0 Hz, 4H, 20H2). 13C NMR (63 MHz, 0D013) O 166.0 (Cq), 160.7 (d, J= 244.8 Hz, Cq), 146.5 (Cq), 135.6 (d, J= 4.4 Hz, Cq), 132.4 (Cq), 129.7 (CH), 128.5 (20H), 128.5 (2CH), 127.8 (20H), 127.5 (d, J = 8.6 Hz, CH), 126.9 (20H), 126.2 (CH), 124.0 (d, J= 3.4 Hz, CH),123.5 (q, J= 288.6 Hz, 0F3), 122.7 (d, J=
17.7 Hz, Cq), 113.0 (d, J= 21.7 Hz, CH), 84.7(q, J= 27.5 Hz, Cq), 72.3 (CH), 62.6 (CH2), 55.7 (CH), 51.3 (0H2), 48.7 (0H2), 42.8 (CH), 34.7 (d, J = 2.2 Hz, CH2), 34.2 (CH), 33.6 (CH2), 21.3 (d, J= 3.1 Hz, CH2).19F NMR (235 MHz, CD0I3) O -71.84, -118.06 (dd, J= 9.5, 5.7 Hz).
= 1-((2R,3R)-8-Fluoro-3-(((R)-3,3,3-trifluoro-2-methoxy-2-ph enylpropanovfloxy)-1 ,2,3,4-tetrahydronaphthalen-2-yI)-4-phenylpiperidi n-1-ium chloride (6-Dl .HCI) opl%CoMe Ph *IL 171 9'1 N
F Cl Ph 6-D1 .HCI
Dans un ballon à fond rond, le composé 6-D1 (250 mg, 0,46 mmol) a été
solubilisé dans un dioxane (3 ml) puis refroidi à 0 C. Une solution de HCI 4N
dans le dioxane (173 L, 0,69 mmol, 1,5 équivalent) a été ajoutée goutte à goutte et laissée sous agitation à t.r. pendant 24 heures. Le solvant et l'excès de HCI ont été
éliminés à la pression atmosphérique pour obtenir des cristaux. Le brut était ensuite trituré
avec de l'Et20 pour obtenir un solide blanc, qui était recueilli par filtration puis séché
sous vide pour obtenir du 6-D1-HCI en rendement quantitatif. Certains cristaux ont été collectés pour l'analyse aux rayons X. Mp : 168-169 C. IR (v cm-1) :
3028.3, 3006.8, 2951.6, 2853.6, 2359.9, 1748.3, 1590.4, 1470.3, 1446.9, 1245.0, 1163.4, 1118.8, 1078.9, 1014.8, 963.9, 845.0, 750.2, 721.3, 700.1, 664.1, 552.4.1H NMR
(250 MHz, DMSO-d6) O 11.62 (bs, 1H, NH), 7.48 (s, 5H, 5H-Ar), 7.40 - 7.30 (m, 2H, Ar), 7.29 - 7.12 (m, 4H, 4 H-Ar), 7.10 - 6.92 (m, 2H, 2H-Ar), 5.95(d, J= 4.9 Hz, 1H, CH), 3.99 - 3.83 (m, 1H, CH), 3.79 - 2.90 (m, 11H, 4CH2 et OMe), 2.88 - 2.67 (m, 1H, CH), 2.27 (d, J = 14.0 Hz, 2H, 2H of 2 CH2), 2.07 - 1.86 (m, 2H, 2H de 2 CH2).
13C NMR (63 MHz, DMSO-d6) O 164.7 (Cq), 159.1 (d, J= 244.2 Hz, Cq), 144.1 (Cq), 135.5 (d, J= 2.9 Hz, Cq), 130.7 (Cq), 130.0 (CH), 128.8 (20H), 128.6 (20H), 128.2 (d, J= 8.2 Hz, CH), 127.2 (20H), 126.6 (3CH), 124.2 (CH),123.1 (q, J= 290.4 Hz, 0F3) 119.7 (d, J = 16.5 Hz, Cq), 113.4 (d, J = 20.9 Hz, CH), 84.2 (q, J =
27.2, 26.6 Hz, Cq), 71.9 (CH), 63.14 (CH), 55.6 (0H3), 50,6 (CH2), 49.3 (CH2), 39.2 (CH), 32.6 CH2, 29.8 (CH2), 29.6 (CH2), 20.7 (CH2).19F NMR (235 MHz, DMSO-d6) 5 -70.9, -119.9 (dd, J= 9.1, 5.8 Hz).
La cristallisation des esters de Mosher 6-D1 et 6-D2 dans divers solvants et combinaison de solvants a échoué. Toutefois, la solubilisation de 6-D1 dans une solution de HCI (4N) dans le dioxane suivi de l'évaporation lente du solvant à

température ambiante a permis d'obtenir des cristaux du sel 6-D1 .HCI.
L'analyse de ces derniers par diffraction des rayons X a montré que les trois centres asymétriques de 6-D1 possèdent comme stéréochimie absolue (R, R, R).
lo Les cristaux ont donc été ensuite engagés dans une réaction d'hydrolyse de l'ester en milieu basique pour donner le (R,R)-5-FBVM avec un rendement de 80%.
Finalement, le (R,R)-5-FBVM a été analysé par polarimétrie afin de déterminer le sens de déviation de la lumière polarisée. Cette analyse a montré un pouvoir rotatoire de [aD]200c = -82.0 (10 mg dans lml de Chloroforme). Le (-)-(R,R)-5-FBVM est donc obtenu (Schéma 3).

opif0Me Ph 0111., NaOH e OH
1110",,, H20/1 ,4-dioxane Ph Ph 6-D1 (R,R)-(-)-5-FBVM
Schéma 3 Obtention de (-)-(R,R)-5-FBVM par hydrolyse de l'ester de Mosher 6-D1.
= (2R,3R)-5-Fluoro-3-(4-phenylpiperidin-1-y1)-1,2,3,4-tetrahydronaphthalen-2-01 ((R,R)-(+5-FBVM) Dans un ballon à fond rond, le composé 6-D-1 (96 mg, 0,14 mmol) a été
solubilisé dans du 1,4-dioxane (3 mL), puis une solution aqueuse 1M de NaOH (3 mL) a été ajoutée et le mélange réactionnel a été laissé sous agitation à 50 C
pendant 18 heures. Les solvants ont été éliminés sous pression réduite, puis le brut obtenu a été solubilisé dans l'eau et extrait avec de l'AcOEt (3 x 5 mL). Les phases organiques ont été combinées et séchées sur du MgSO4. Le solvant a été éliminé sous pression réduite pour obtenir le produit souhaité (R,R)-(-)-5-FBVM sous forme de solide beige pâle (48 mg, 83%). [ap]2lyc = -82.0 (10 mg in 1 mL of Chloroform). Mp: 148-149 C.
IR (v cm-1): 3379, 3062, 3027, 2937, 2919, 2848, 2798, 2771, 1618, 1601, 1578, 1493, 1464, 1453, 1443, 1413, 1392, 1374, 1337, 1325, 1309, 1285, 1238, 1218, 1161, 1137, 1074, 1052, 1022, 1003, 977, 804, 791, 771, 758, 710, 701. HRMS
calc.
pour C21H25FN0 [M+H]: 326. 19146 trouvé : 326.19131.1H NMR (250 MHz, CDCI3) 7.37 ¨ 7.17 (m, 5H, 5H-Ar), 7.11 (td, J= 7.9, 5.7 Hz, 1H, H-Ar), 6.95 ¨ 6.80 (m, 2H, 2 H-Ar), 4.34 (brs, 1H, OH), 3.87 (td, J= 10.2, 5.6 Hz, 1H, CH), 3.33 (dd, J=
16.2, 5.7 Hz, 1H, H of CH2), 3.15 ¨ 3.02 (m, 1H, H de CH2), 3.02 ¨ 2.84 (m, 3H, CH
de CH2 et CH2), 2.83 ¨ 2.50 (m, 4H, 2H de CH2 et 2 CH), 2.44 (td, J= 11.5, 2.5 Hz, 1H, H of CH2), 2.01 ¨ 1.86 (m, 3H, CH et H of CH2), 1.85 ¨ 1.62 (m, 1H, H de CH2). 13C
NMR
(63 MHz, CDCI3) O 161.1 (d, J= 243.9 Hz, Cq), 146.2(Cq), 136.8 (d, J= 4.3 Hz, Cq), 128.6 (2CH), 127.4 (d, J= 8.7 Hz, CH), 127.0(2CH), 126.4 (CH), 124.7(d, J= 3.3 Hz, CH), 122.7 (d, J= 17.6 Hz, Cq), 112.4 (d, J= 21.9 Hz, CH), 66.2 (CH), 65.4(CH), 53.8(CH2), 45.1(CH2), 43.0 (CH), 37.9 (d, J= 2.2 Hz, CH2), 34.5 (CH2), 34.0 (CH2), 19.2 (d, J= 3.3 Hz, CH2). 19F NMR (235 MHz, CDCI3) O -117.3 (dd, J= 9.9, 5.5 Hz).
L'analyse de ce dernier par HPLC chirale montre qu'il s'agit effectivement d'un seul énantiomère.
De la même manière l'ester de Mosher 6-D2a été hydrolysé pour donner le (+)-(S,S)-5-FBVM avec un rendement de 89%. Celui-ci a été a été analysé par polarimétrie et possède un pouvoir rotatoire de c([ D]2o-c _ + 82.8 (10 mg dans 1mL de Chloroforme). Son analyse HPLC chirale dans les mêmes conditions montre qu'il s'agit un seul énantiomère avec un temps de rétention plus long.
= (2S,3S)-5-Fluoro-3-(4-phenylpiperidin-1-y1)-1,2,3,4-tetrahydronaphthalen-2-01 ((S,S)-(+)-5-FBVM) Dans un ballon à fond rond, le composé 6-D2 (100 mg, 0,17 mmol) a été
solubilisé dans du 1,4-dioxane (3 mL), puis une solution aqueuse 1M de NaOH (3 mL) a été ajoutée et le mélange réactionnel a été laissé sous agitation à 50 C
pendant 18 heures. Les solvants ont été éliminés sous pression réduite, puis le brut obtenu a été solubilisé dans l'eau et extrait avec de l' AcOEt (3 x 5 ml). Les phases organiques ont été combinées et séchées sur du MgSO4. Le solvant a été éliminé sous pression réduite pour obtenir le produit souhaité (S,S)-(+)-5-FBVM sous forme de solide beige pâle (56 mg, 99%). [aD]20 C = +82.8 (10 mg dans 1 mL de chloroforme).
Mp :148-149 C. IR (y cm-1): 3379, 3064, 3027, 2937, 2926, 2849, 2798, 2771, 1619, 1601, 1578, 1492, 1463, 1453, 1443,1413, 1392, 1374, 1337, 1325, 1309, 1285, 1238, 1218, 1161, 1137, 1073, 1052, 1022, 1003, 791, 772, 758, 711, 701.
HRMS (ESI4) : calc. pour C21H25FNO [M+H]: 326. 19146 trouvé : 326.19131.1H NMR

(250 MHz, CDCI3) 7.37 ¨ 7.17 (m, 5H, 5H-Ar), 7.11 (td, J= 7.9, 5.7 Hz, 1H, H-Ar), 6.95 ¨ 6.80 (m, 2H, 2 H-Ar), 4.34 (brs, 1H, OH), 3.87 (td, J = 10.2, 5.6 Hz, 1H, CH), 3.33 (dd, J= 16.2, 5.7 Hz, 1H, H of CH2), 3.15 ¨ 3.02 (m, 1H, H of 0H2), 3.02 ¨ 2.84 (m, 3H, CH of CH2 and CH2), 2.83 ¨ 2.50 (m, 4H, 2H of CH2 and 2 CH), 2.44 (td, J
5 = 11.5, 2.5 Hz, 1H, H of CH2), 2.01 ¨ 1.86 (m, 3H, CH and H of 0H2), 1.85 ¨ 1.62 (m, 1H, H of CH2). 13C NMR (63 MHz, CDCI3) 5 161.1 (d, J= 243.9 Hz, Cq), 146.2(Cq), 136.8 (d, J= 4.3 Hz, Cq), 128.6 (20H), 127.4 (d, J= 8.7 Hz, CH), 127.0(2CH), 126.4 (CH), 124.7 (d, J= 3.3 Hz, CH), 122.7 (d, J= 17.6 Hz, Cq), 112.4 (d, J= 21.9 Hz, CH), 66.2 (CH), 65.4(CH), 53.8(CH2), 45.1(CH2), 43.0 (CH), 37.9 (d, J= 2.2 Hz, 0H2), 10 34.5 (0H2), 34.0 (0H2), 19.2 (d, J= 3.3 Hz, 0H2). 18F NMR (235 MHz, CDCI3) 5-117.3 (dd, J= 9.9, 5.5 Hz).
Synthèse de l'ester boronique 8 (précurseur pour le radiomarquaqe 18F) Afin de réaliser le radiomarquage au 18F, l'ester boronique 8 a été utilisé
comme 15 précurseur (correspondant au composé de formule (III) susmentionnée).
Celui-ci a été synthétisé en suivant la voie de synthèse décrite dans le schéma 4. Le composé
5-R1 Trans a été transformé in-situ en sel de diazonium correspondant par action de NaNO2 en présence de l'APTS mono-hydraté. Ce dernier conduit à l'intermédiaire iodé 7 Trans sous l'action de l'iodure de potassium présent dans le milieu réactionnel 20 avec un rendement de 50%. Les conditions de borylation de Miyaura ont permis par la suite de transformer l'intermédiaire 7 Trans en composé 8 Trans désiré avec un rendement de 44%.
NaNO2 (2.0 éq.) Diboron (1.5 éq.) KI (2.5 éq) OH
OH APTS,120 (3.0 &I.) OH KOAc (3.0 éq.) Pd(dppf)C12,DCM (0.1 éq.) 5- go NH2 900,1h 0 50%
44% ) R1 Trans 7 Trans 8 Trans Schéma 4 Synthèse du précurseur 8 Trans = 5- lodo-3-(4-phenylpiperidin-1-yI)-1,2,3,4-tetrahyd ronaphthalen-2-ol (7) Dans un ballon à fond rond, le composé 5-R1 (1,00 g, 3,10 mmol) a été
solubilisé dans du CH3CN (18 ml), puis du PTSA.H20 (1,80 g, 9,32 mmol, 3,0 équivalents) a été ajouté en une seule fois. Le mélange a été refroidi à 0 C, puis une solution de NaNO2 (428 mg, 6,2 mmol, 2,0 équivalents) et de KI (1,20 g, 7,75 mmol, 2,5 équivalents) dans de l'eau (5 mL) a été ajoutée. Après avoir été agité à 0 C
pendant 15 minutes, le mélange réactionnel a été chauffé à r.t. et laissé sous agitation pendant 4h. De l'eau (17 mL) et une solution saturée de NaHCO3 (35 mL) ont été

successivement ajoutées. La couche aqueuse a été extraite avec AcOEt (3 x 25 ml) et les phases organiques combinées ont été séchées sur du MgSO4, filtrées puis séchées sous pression réduite. Le résidu a été purifié par chromatographie flash sur colonne de gel de silice (PE/AcOEt : 85/15) pour obtenir le produit souhaité 7 sous forme de solide jaunâtre (587 mg, 50%).
: 0.43. 1H NMR (250 MHz, CDCI3) ppm: 7.70 (d, J= 7.8 Hz, 1H, 1 H-Ar), 7.39 ¨ 7.16 (m, 6H, 6 H-Ar), 7.10 (d, J 7.7 Hz, 1H, 1 H-Ar), 6.83 (t, J 7.7 Hz, 1H, OH), 3.83 (td, J= 10.2, 5.6 Hz, 1H, CH), 3.24 -2.33 (m, 12H, 6 CH2).
= 3-(4-Phenylpiperidin-1-y1)-5-(4,4,5,5-tetramethy1-1,3,2-dioxaborolan-2-y1)-1,2,3,4-tetrahydronaphthalen-2-ol (8) :
Dans un tube séché au four, le composé 7 (100 mg, 0,23 mmol) a été solubilisé
dans du DMF anhydre dégazé (2 mL), puis le B2Pin2 (88 mg, 0,35 mmol, 1,5 équivalent), le KOAc (68 mg, 0,69 mmol, 3,0 équivalents) et le Pd(dppf)C12.DCM
(19 mg, 0,02 mmol, 0,1 équivalent) ont été ajoutés respectivement. Le tube a été
scellé
sous argon et chauffé à 160 C pendant 1h30. Le mélange réactionnel a été
refroidi à
température ambiante puis le DMF a été séché sous pression réduite. Le résidu a été
lavé avec de la saumure (20 ml) et filtré sur un tampon de célite. Le filtrat a été extrait par AcOEt (3 x 10 mL). Les phases organiques ont été combinées ensemble et séchées sur du MgSO4. Après élimination du solvant sous pression réduite, le résidu a été purifié par chromatographie flash sur colonne de gel de silice (PE/AcOEt : 85/15 et 5% d'Et3N) pour obtenir le produit souhaité 8 sous forme de solide blanc (50 mg, 44 /0).Ri : 0.27.1H NMR (250 MHz, DMSO) ppm: 7.48 ¨ 7.43 (m, 1H, H-Ar), 7.33 -7.23 (m, 4H, 4 H-Ar), 7.22 ¨ 7.15 (m, 3H, 3 H-Ar), 4.49 (s, 1H, OH), 3.83 (d, J = 7.8 Hz, 1H, CH), 2.99 (ddd, J= 32.1, 20.4, 8.7 Hz, 4H, 2 CH2), 1.81 ¨ 1.63 (m, 4H, 2 CH2), 1.32 (s, 12H, 4 CH3).
Radiochimie Précédemment la radiochimie avait permis la préparation du rac (+/-)-5-FBVM
Trans marqués au Fluor 18 et la séparation chirale à chaud des deux isomères qu'il contient. Il s'agit des 2 énantiomères marqués au 18F et nommés 18F El et 18F

(Schéma 5).
Comme toutes les analyses HPLC chirales par détection UV (chimie froide) et radio (chimie chaude) ont été réalisées sur le même support chiralpak IA, nous pouvons donc affirmer par combinaison de ces résultats que l'isomère chaud 18F
El correspond à l'isomère froid (-)-(R,R)-5 FBVM et le "F E2 au (+)-(S,S)-5-FBVM.

D'après l'analyse HPLC radio analytique chirale, le temps de rétention pour (-)-(R,R)-5-[18F]FBVM = 18F El est 16 minutes et le temps de rétention pour (+)-(S,S)-5418FWBVM= 18F E2 est 21 minutes.
Par effet rebond, on peut conclure qu'il y a 3 molécules marquées au 18F:
- la plus active et utilisable comme traceur 18F qui est le dérivé chaud (-)-(R,R)-5418FWBVM = 18F El (correspondant au composé de formule (I) susmentionnée), - l'autre diastéréoiomère (+)-(S,S)-5-[18F]FBVM = 18F E2 (correspondant au composé de formule (II) susmentionnée) et - le mélange des 2 le (+/-)-5-[18F]FBVM Trans.
µõOH
isF
OH
1) [18F1(F / eluant Mossine N (+)S)-5418FWBVM = E2 ,B, DMF / 10 Min. / 100 C

2) Séparation chirale =
(R) (R
8 Trans (-)-(R,R)-5-[18F]FBVM = El crIIII OH
OFI
[18Fp(F / eluent Mossine * N
6, DMF / 10 Min. / 100 C

-) 18F
8 Trans (+/-)-5418MFBVM Trans Schéma 5 Radiomarquage du dérivé 8 Trans au 18F. Obtention des Traceurs racémiques et des traceurs énantiopurs 18F El et 18F E2 identifiés respectivement comme les (-)-(R,R)-5-r8fIFBVM et (+)-(S,S)-5-r8FIFBVM.

Radiosynthèse des rac-18F-5-FBVM, (R, R)-(-)- 18F-5-FBVM et (S,S)-(+)-Production des radiotraceurs Production du (+1-) [18F]-5-FBVM
Les ions fluorures [18F] sont produits à l'aide d'un cyclotron (PET trace, GE
Healthcare) par irradiation d'une cible d'eau enrichie en oxygène 18 par un faisceau de protons au moyen de la réaction nucléaire 180(-, n)18F. Les ions fluorures [18F]
produits sont transférés dans un automate modifié TRACERIab FX-FN Pro (GE), passés sur une cartouche échangeuse d'anions (Waters Sep-Pak Accell Light QMA
conditionnée à l'aide d'une solution de carbonate de potassium). Les ions fluorures [18F] piégés rj piégés sont élués de la cartouche par 550 pL d'une solution contenant du KOTf (5 mg) et du K2CO3 (50 g). Une distillation azéotropique est ensuite réalisé
par ajout de 1 mL d'acétonitrile. L'évaporation de l'eau est réalisée à 90 C sous flux d'hélium et en dépression et cette opération est répétée par deux fois avant de réaliser la substitution nucléophile. Le précurseur 8 (2 mg) avec du Cu(0Tf)2 (3.6 mg) dissous dans du DMF (960 L) et de la pyridine (40 L) sont ajoutés aux ions fluorures [18F].
Le mélange est porté à 100 C pendant 10 min puis refroidie à 30 C et diluée avec de l'eau (8 mL). Le mélange réactionnel est passé sur une cartouche tC18 plus (Waters) puis rincée avec de l'eau (4 mL) pour piégé le produit d'intérêt et éliminer la majeure partie des composés polaires. Le (+/-) [18F]-5-FBVM est élué de la cartouche par de l'acétonitrile (2 mL) et la solution diluée avec de l'acétate d'ammonium 0,1 M
(1 mL).
La solution obtenue est chargée dans la boucle d'injection HPLC de l'automate et purifiée sur une colonne semi-préparative (PhenylHexyl ¨ Phenomenex, 10 x 250 mm) avec comme phase mobile un mélange ACN/ acétate d'ammonium 0,1M 70/30 à un débit de 4 mL.min 1. Dans ces conditions le (+/-) [18F]-5-FBVM a été
collecté avec un temps de rétention de l'ordre de 11 min. La fraction collectée a été diluée avec de l'eau (30 mL) puis passée sur une cartouche a tC18 light (Waters) puis la cartouche a été rincée avec de l'eau (5 mL). Le (+/-) [18F]-5-FBVM est élué de la cartouche par de l'éthanol injectable (0,8 mL) et la formulation est complétée par l'ajout de 7,2 mL
de NaCI (0,9 /0).
Production du (-) [18F]-5-FBVM et (+) [18F]-5-FBVM
La production des énantiomères isolés (+) [18F]-5-FBVM et (-) [18F]-5-FBVM se déroule en suivant le procédé de fabrication du (+/-) [18F]-5-FBVM en y ajoutant une purification chirale HPLC.

La fraction pure collectée de (+/-) [18F]_5_FBVM est chargée dans la boucle HPLC de l'automate pour réaliser une nouvelle purification HPLC, cette fois ci sur une colonne semi-préparative chirale (Chriralpak IA , Daicel, 10x250 mm). La phase mobile utilisée se compose d'acétonitrile/ acétate d'ammonium : 0.1M 85/15 et la purification est effectuée à 4 mL.min-1. Dans ces conditions le (-) [18F]-5-FBVM est collecté avec un temps de rétention de 18 min environ quand le (+) [18F]-5-FBVM
présente un temps de rétention d'environ 22 min. Par cette méthode, chaque énantiomère pur peut être produit séparément. La fraction énantiomériquement pure collectée, le (-) ou (+) [18F]-5-FBV, est diluée avec de l'eau (30 mL) puis passée sur une cartouche a tC18 light (Waters). Lla cartouche est rincée avec de l'eau (5 mL).
Le (-) [18F]-5-FBVM ou (+) [18F]-5-FBVM est élue de la cartouche par de l'éthanol injectable (0,8 mL) et la formulation est complétée par l'ajout de 7,2 mL de NaCI (0,9 0/0).
Production du (-)-(R,R)-[18F1-5-FBVM avec une seule purification HPLC
Comme le composé le plus actif identifié est le (-)-(R,R)-[18F]-5-FBVM et qu'il correspond au premier composé élué lors de la purification chirale HPLC, le procédé
de fabrication a été modifiée de manière à n'avoir qu'une seule purification HPLC.
Le procédé reprend celui décrit plus haut jusqu'à l'étape de purification. La solution brute de (+/-) [18F]-5-FBVM est chargée dans la boucle HPLC et injectée sur la colonne chirale (Chiralpak IA , Daicel, 10x250 mm). La purification est réalisée en utilisant une mélange acétonitrile/méthanol/ acétate d'ammonium 0,1 M :

comme phase mobile et à un débit de 4 mL/min. Dans ces conditions le temps de rétention du (-)-(R,R)-[18F]-5-FBVM de l'ordre de 14,5 min. La formulation reprend les procédés présentés ci-dessus.
Contrôle qualité des radiotraceurs Les radiotraceurs ont été contrôlés par HPLC analytique équipée d'un détecteur UV et radio. La pureté (+/-) [18F]-5-FBVM a été vérifiée à l'aide d'une colonne analytique (Phenomenex Luna 5j.t Phenyl Hexyl 4,6x250 mm ) utilisant de l'ACN/Ac Am 0,1M 70/30 comme phase mobile et un débit de 1 mL/min. Dans ces conditions, le temps de rétention est de 9 min.
Dans le cas d'une purification énantiomérique, en plus du contrôle précédent et d'un contrôle CLHP utilisant une colonne chirale (Chiralpak IA 4,6 x 250 mm 5 ), on peut évaluer la pureté énantiomérique de (+) [18F]-5-FBVM ou (-) [18F]-5-FBVM.

Pour ce contrôle, l'ACN/Ac Am 0,1M 85/15 a été utilisé comme phase mobile à un débit de 1 ml/min. Dans ces conditions, le temps de rétention de (-) [18F]-5-FBVM ou (+) [18F]-5-FBVM était respectivement de 16,2 et 21,1 min.

Pour tous les composés, la pureté radiochimique était supérieure à 99 %, l'activité molaire supérieure à 100 GBq/ mole et aucune dégradation n'a été
observée dans les milieux de formulation comme dans le sérum pendant au moins 4h.
10 Biologie Biologie in vitro La mesure de l'affinité des différents composés pour le VAChT a été réalisée par méthode de radioliaison sur preparation memebranaire de cerveau de rat selon la méthode décrite dans Scheunemann et al. (Bioorg Med Chem 2004;12:1459-65).

Le L-(-)-vesamicol provenait de Sigma Aldrich (Saint-Quentin-Fallavier, France) et le [31-I]vesamicol (activité spécifique 1705.7 GBq/mmol) de Perkin-Elmer (Courtaboeuf, France). Les valeurs d'I050 ont été déterminées graphiquement pour chaque composé et le Ki (constante d'inhibition) a été calculé selon la méthode de Cheng &
Prussoff (Biochemical pharmacology 1973;22:3099-108). Les résultats sont exprimés en moyenne des Ki écart type à la moyenne à partir de 3 expériences indépendantes.
Par complémentarité les valeurs des affinités des trois produits fluorés froids ont été assignées :
25 rac (+/-)-5-FBVM Trans : Ki 1.3 +/-0.2 nM
(-)-(R,R)-5-FBVM El: Ki = 0.9 +/- 0.3 nM
(+)-(S,S)-5-FBVM. E2: Ki = 35 +/- 5 nM
En comparaison le Ki du (-)-FEOBV est de Ki= 61 2.8 nM selon les mêmes conditions expérimentales.
Biologie in vivo Démonstrations expérimentales réalisées La présente invention basée sur la structure de molécules de type (benzo)vesamicol permet d'atteindre un bon niveau de spécificité in vitro, et le premier radioligand (rac (+/-)-5-FBVM Trans) a démontré son potentiel comme traceur TEP in vivo chez le rat au regard de son excellent passage de la barrière hémato-encéphalique, de son accumulation spécifique dans les régions cérébrales où
sont localisés les VAChT et de sa bonne stabilité in vivo.
De plus, les 2 isomères du [18F]FBVM racémique ont été séparés, obtenant ainsi le (-)-(R,R)-5-FBVM 18F El et le ( )-(S,S)-5-r8F.IFBVM 18F E2. Il a été
montré
que le (-)-(R,R)-5-FBVM 18F El est supérieur en termes de passage de la barrière hémato-encéphalique et de liaison au VAChT que le racémique et l'autre isomère.
En effet dans le striatum, région cérébrale connue pour être la plus dense en VAChT, le pourcentage de dose de traceur injecté par gramme de tissu (%Dl/g) est le plus élevé pour le (-)-(R,R)-5-FBVM 18F El (Tableau 1). Les valeurs obtenues pour les rapports d'accumulation entre le striatum et le cervelet, connu comme zone de référence pour la fixation non-spécifique car dépourvu de VAChT, démontrent également la supériorité du (+)-(S,S)-5-/-18FiFBVM 18F E2 par rapport à
l'autre isomère, (-)-(R,R)-5-FBVM 18F El, et le racémique [18F]FBVM.
Tableau 1 : Accumulation cérébrale des traceurs chez le rat Cervelet Striatum Striatum/cervelet [18F]FBVM 0,185 0,003 0,721 0,011 3,90 (-)-(R?)-5-FBVM
0,232 0,017 1,356 0,069 5,84 18F El [18FIFBVM 18F E2 0,215 0,011 0,327 0,015 1,52 Les résultats sont exprimés en pourcentage de la dose injectée/g de tissu cérébral ( /0DI/g) SEM, 2 heures après injection i.v. des traceurs ; n=6/groupe.
Il a également été montré que la fixation cérébrale du (-)-(R,R)-5-FBVM 18F El est bien spécifique du VAChT, puisqu'elle est fortement inhibée chez les animaux dont ces sites ont été occupés par l'administration d'un ligand connu du VAChT. En effet, dans le striatum, l'accumulation du (-)-(R,R)-5-FBVM 18F El est diminuée de 46% chez les animaux ayant reçu une dose de 0.5 mole/kg de (-)vesamicol 5 minutes avant injection du traceur.
Dans une seconde étape, les inventeurs ont comparé, dans le même protocole expérimental chez le rat, le (-)-(R,R)-5-FBVM 18F El avec le traceur décrit dans la littérature, le [18F]FEOBV, dont le radiomarquage a été réalisé sur site.
Les résultats (Tableau 2) démontrent une plus forte accumulation du (-)-(R,R)-5-FBVM 18F El comparé au [18F]FEOBV dans le striatum, avec un ratio signal/bruit (= striatum/cervelet) supérieur pour le (-)-(R,R)-5-FBVM El que pour le [18F]FEOBV.

Tableau 2 :Accumulation cérébrale du (-)-(R,R)-5-FBVM El et du [18F]FEOBV
Cervelet Striatum Striatum/cervelet FBVM 18F El 0,232 0,017 1,356 0,069 5,84 [18F]FEOBV 0,844 0,025 0,235 0,011 3,59 Les résultats sont exprimés en pourcentage de la dose injectée/g de tissu cérébral ( /01:11/g) SEM, 2 heures après injection i.v. des traceurs ;
n=6/groupe.
Modes opératoires in vivo des rac-5-FBVM, (R,R)-(-)-5FBVM et (S,S)-(+)-Animaux : Les expériences ont été réalisées chez des rat mâles de souche Wistar pesant 250-300 g (Centre d'Elevage R. Janvier, Le Genest St Isle, France).
io Toutes les procédures ont été réalisées dans le respect de la réglementation Européenne concernant l'expérimentation animale (2010/63/EU) avec l'autorisation du Comité Régional d'Ethique en Expérimentation Animale.
Etudes de biodistribution: Les rats du groupe témoin ont reçu une injection i.v. de traceur (4-6 MBq dans 0.3 mL) sous anesthésie gazeuse à l'isofurane (n=
6/groupe). Dans le groupe VES (n=6/groupe), l'injection du traceur a été
précédée (5 min) d'une injection i.v. de vesamicol (0.5 pmol/kg). Les rats ont été
sacrifiés par décapitation à 2 h post injection du traceur. Le cerveau entier est prélevé
puis disséqué en différentes zones : cortex, striatum, hippocampus, thalamus et cerebellum. Des fractions sanguine et osseuse sont également prélevées. Les échantillons biologiques sont ensuite pesés et leur radioactivité est mesurée avec un compteur y (2480 Gamma counter Wizard, Perkin Elmer), elle pourcentage de dose injectée/ g de tissu (/oID/g) est calculé..
Imagerie TEP: Les rats ont reçu une injection i.v. de 37 MBq du traceur. Les acquisitions ont été réalisées avec un système d'imagerie microPET eXplore VISTA-CT system (GE Healthcare, France) sous anesthésie à l'isoflurane (Baxter, France), à 4-5% dans oxygène pour l'induction puis 1.5-2% pendant l'enregistrement.
Chaque acquisition a duré 91 minutes et les images ont été séquencées en list-mode en séquence de 1 min suivie de 9 séquences de s of 10 min. Après correction d'atténuation, les images ont été reconstruites selon un algorithme 2-D OSEM
(GE
Healthcare, France) en voxels de 0.3875 x 0.3875 x 0.775 mm3.

Claims (10)

REVENDICATIONS

1. Composé répondant à la formule (I) suivante :

2. Composé de formule (I) selon la revendication 1 , pour utilisation dans une méthode de diagnostic in vivo.

3. Composé de formule (I) selon la revendication 1 , pour utilisation dans une méthode de diagnostic in vivo d'une maladie neurodégénérative cholinergique.

4. Composé de formule (I) pour son utilisation selon la revendication 3, dans laquelle la maladie neurodégénérative cholinergique est choisie dans le groupe constitué de la maladie d'Alzheimer, de la dysmnésie, du trouble d'apprentissage, de la schizophrénie, du dysfonctionnement cognitif, du trouble d'hyperactivité, de la névrose d'angoisse, de la dépression, de l'analgésie et de la maladie de Parkinson.

5. Procédé de préparation du composé de formule (I) selon la revendication 1 , comprenant une étape (a) de préparation d'un mélange réactionnel par l'addition d'un composé de formule (III) suivante :
avec des ions fluor réactifs "F, suivie d'une étape (b) de séparation chirale dudit mélange réactionnel obtenu à
l'issue de l'étape (a).

6. Procédé selon la revendication 5, dans lequel l'étape (b) de séparation chirale est effectuée par chargement du mélange réactionnel obtenu à l'issue de l'étape (a) sur une colonne chirale semi-préparative en utilisant une phase mobile chirale comprenant un mélange d'acétonitrile, d'acétate d'ammonium et de méthanol.

7. Procédé selon la revendication 6, dans lequel la phase mobile comprend de 50% à 90% en volume d'acétonitrile, de 0% à 20% en volume d'acétate d'ammonium et de 0% à 40% en volume de méthanol, par rapport au volume total de ladite phase mobile, de préférence 70% en volume d'acétonitrile, 10% en volume d'acétate d'ammonium et 20% en volume de méthanol, par rapport au volume total de ladite phase mobile.

8. Procédé selon l'une quelconque des revendications 5 à 7, dans lequel le composé de formule (III) est obtenu selon un procédé comprenant les étapes suivantes :
- la réaction de diazotation d'un composé de formule (IV) suivante :
suivie d'une réaction de substitution par un halogène, tel que l'iode, sur le composé diazo obtenu à l'issue de la réaction de diazotation susmentionnée, ladite étape étant de préférence une étape de réaction du composés de formule (IV) avec du nitrite de sodium, notamment en présence de l'APTS mono-hydraté, suivie de l'addition d'iodure de potassium, pour obtenir un composé de formule (V) suivante :
et - la transformation du composé de formule (V) par borylation de Miyaura pour obtenir un composé de formule (III).

9. Composé répondant à la formule (II) suivante :

10. Composé répondant à la formule (III) suivante :