CA1131235A

CA1131235A - Process for the preparation of novel cyclic amino acids and products thereof

Info

Publication number: CA1131235A
Application number: CA311,281A
Authority: CA
Inventors: Michel Vincent; Georges Remond; Jacques Bure
Original assignee: Science Union et Cie
Current assignee: Science Union et Cie
Priority date: 1978-09-14
Filing date: 1978-09-14
Publication date: 1982-09-07

Abstract

D E L A D I V U L G A T I O N L'invention a pour objet des procédés de préparation d'amino-acides cycliques de formule générale I I dans laquelle R est de l'hydrogène ou un radical alcoyle inférieur R' est de l'hydrogène, un radical alcoyle inférieur, un radical alcoyle inférieur dont la chaîne alcoyle est substituée par un ou deux hydroxyles, acyloxy inférieur, alcoxy inférieur, alcoylamino inférieur, dialcoylamine inférieur, un radical aryle, un radical phényl alcoyle inférieur dont le noyau benzénique est substitué ou non substitué, un radical benzhydryle, un radical triphénylméthyle ou un radical alcényle inférieur. X est un hydroxy, un alcoxy inférieur, un alcoxy inférieur dont la chaîne alcoyle est mono ou disubstituée, un radical hydroxy amino, un radical amino ou un radical alcoylamino et n est égal à zéro ou un nombre entier variant de 1 à 3. L'invention a également pour objet l'obtention des sels des composés de formule générale I avec un acide minéral ou organique ou une base minérale ou organique, de préférence thérapeutiquement compatibles. L'invention concerne aussi l'obtention des diastéréoisomères érythro et thréo des composés de formule générale I ainsi que celle des isomères optiques de ces composés. Les composés selon l'invention se caractérisent par des propriétés pharmacologiques intéressantes notamment comme immunodépresseurs et comme agent protecteur du collagène soluble.DELADIVULGATION The subject of the invention is processes for preparing cyclic amino acids of general formula II in which R is hydrogen or a lower alkyl radical R 'is hydrogen, a lower alkyl radical, an alkyl radical lower, the alkyl chain of which is substituted by one or two hydroxyls, lower acyloxy, lower alkoxy, lower alkylamino, lower dialkoylamine, an aryl radical, a phenyl lower alkyl radical in which the benzene ring is substituted or unsubstituted, a benzhydryl radical, a radical triphenylmethyl or a lower alkenyl radical. X is a hydroxy, a lower alkoxy, a lower alkoxy whose alkyl chain is mono or disubstituted, a hydroxy amino radical, an amino radical or an alkylamino radical and n is equal to zero or an integer varying from 1 to 3. L A subject of the invention is also the production of the salts of the compounds of general formula I with a mineral or organic acid or a mineral or organic base, preferably therapeutically compatible. The invention also relates to obtaining the erythro and threo diastereoisomers of the compounds of general formula I as well as that of the optical isomers of these compounds. The compounds according to the invention are characterized by interesting pharmacological properties, in particular as immunosuppressants and as a protective agent for soluble collagen.

Description

~3~L235 La présente invention a pour objet un procede d'obtention de nouveaux amino-acides cycliques. Elle a plus particulièrement pour objet un procede d'obtention des amino-acides dont la cha~ne alcoylène est substituee par un radical thio. Elle a specifiquement pour ob;et la preparation des amino-acides cycliques ~-substitues de formule I
A ,~OX
(CH ~ ~I) dans laquelle R est de l'hydrogène ou un radical alcoyle inférieur R' est de l'hydrogène, un radical alcoyle inferieur, un radical alcoyle inferieur dont la cha~ne alcoyle est substituee par un ou deux hydroxyles, acyloxy, alcoxy inferieur, alcoylamino, dialcoylamino; un radical aryle, un radieal phenylalcoyle inferieur, un radical phenylalcoyle inferieur dont le radical phenyle ese substitue, un benzhydryle, un triphenyl methyle ou un radical alcényle inférieur, ~ est un hydroxyle, un radical alcoxy infé-rieur, un radical alcoxy inférieur substitué, un radical amino, un radical hydroxyamino ou un radical alcoylamino, et n varie de 0 a 3.
caractérise en ce que l'on soumet une cycloalcanone de formule II

,~

~L~3~:23~i `

(CH~ ~ (II) \R

dans laquelle R et n ont les significations antérieures à l'action d'un agent d'halogénation pour former une ~-halogéno cétone de formule III

(C~ ~ - (III) R/ al dans laquelle Hal est un halogène autre que le fluor et R et n ont les signifi&ations anté-rieures, que l'on fait réaglr avec un mercaptan de formule RlSH
dsns laquelle Rl est un radical alcoyle inférieur, un .
radical aryle ou un radical benzyle pour former le derivé thio de formule IV

(C~ ~ - (IV) R

dans laquelle les substituants R, Rl et n sont définis comme précédemment fait réagir ce dernier avec un cyanure de métal alcalin et un sel d'ammonium dans les conditions de la Réaction de Strecker pour former une spiro hydanto~ne de formule Y

: ~. .. : , ~3~23~;

V) ~ N

dans laquelle R, Rl et n ont les significations anté-rieures, puis hydrolyse cette dernière en milieu alcalin pour fournir un amino acide de formule VI

~ Rl 2 (VI) dans laquelle les substituants R, Rl et n sont definis comme précedemment que l'on soumet, le cas écheant lorsque Rl est un radical benzyle, ~ une débenzylation pour former un dérivé thio de formule VII

~ ~2 (VII) qu'il est possible dans un stade ulterieur d'alcoyler, d'alcenyler, d'aryler ou d'aralcoyler par action d'un agent ~

. ~ .

, . ' ~

- 4 - ~

d'alcoylation, d'alcénylation~ d'arylation ou d'aralcoylation, pour obtenir un amino~a~ide de formule VIII

OOH
(VIII~

R SR' dans laquelle R et n ont les significations fournies an-térieurement et R' est un radical alcoyle inférieur, un radical alcoyle inférieur substitué, un radical aryle, un radical phé-nylalcoyle inférieur, substitué ou non, triphénylméthyle ou alcényle.
Pour obtenir les composés pour lesquels X n'est pas un hydroxyle, un composé de formule VI
COO~
NH2 (VI) R

dans laquelle les substituants R, Rl et n sont définis comme précédemment -est soumis à l'action d'un agent de bloquage labile de la fonction amine puis transformé en dérivé fonctionnel de la fonction carboxylique que l'on condense avec un alcanol, une amine ou l'hydro-xylamine pour former un ester d'alcoyle, un amide ou un hydroxamate -, .' ~

. .
, et lib~re par hydrolyse ménagee la fonction amine pour obtenir un compose de formule IX

~ ~/OX ~ 3 ~ L235 The subject of the present invention is a process for obtaining new cyclic amino acids. She has more particularly subject for a process for obtaining amino acids which chain ~
alkylene is substituted by a thio radical. She specifically for ob; and the preparation of cyclic amino acids ~ -substituted formula I
A, ~ OX
(CH ~ ~ I) in which R is hydrogen or an alkyl radical inferior R 'is hydrogen, an alkyl radical lower, a lower alkyl radical of which the alkyl chain is substituted by one or two hydroxyls, acyloxy, lower alkoxy, alkyllamino, dialcoylamino; an aryl radical, a phenylalkyl radieal lower, a lower phenylalkyl radical including the phenyl radical ese substituted, a benzhydryl, a triphenyl methyl or a radical lower alkenyl, ~ is a hydroxyl, an inferior alkoxy radical laughing, a substituted lower alkoxy radical, an amino radical, a hydroxyamino radical or an alkylamino radical, and n varies from 0 to 3.
characterized in that a cycloalkanone of formula II

, ~

~ L ~ 3 ~: 23 ~ i `

(CH ~ ~ (II) \ R

in which R and n have the previous meanings to the action of a halogenating agent to form a ~ -halo ketone of formula III

(C ~ ~ - (III) R / al in which Hal is a halogen other than fluorine and R and n have the previous meanings that we react with a mercaptan of formula RlSH
in which Rl is a lower alkyl radical, one.
aryl radical or a benzyl radical to form the thio derivative of formula IV

(C ~ ~ - (IV) R

in which the substituents R, Rl and n are defined like before reacts the latter with an alkali metal cyanide and an ammonium salt under the conditions of the Strecker Reaction to form a hydanto ~ ne spiro of formula Y

: ~. ..:, ~ 3 ~ 23 ~;

V) ~ N

in which R, Rl and n have the previous meanings laughs, then hydrolyzes the latter in an alkaline medium to provide an amino acid of formula VI

~ Rl 2 (VI) in which the substituents R, Rl and n are defined like before that we submit, the case falling when Rl is a radical benzyl, ~ debenzylation to form a thio derivative of formula VII

~ ~ 2 (VII) that it is possible in a later stage to alkylate, alkenyler, aryler or aralkyler by action of an agent ~

. ~.

,. '~

- 4 - ~

alkylation, alkenylation ~ arylation or aralkoylation, for get an amino ~ a ~ ide of formula VIII

OOH
(VIII ~

R SR ' in which R and n have the meanings provided an-later and R 'is a lower alkyl radical, a substituted lower alkyl radical, aryl radical, phe-substituted or unsubstituted lower alkyl, triphenylmethyl or alkenyl.
To obtain the compounds for which X is not a hydroxyl, a compound of formula VI
COO ~
NH2 (VI) R

in which the substituents R, Rl and n are defined like before -is subjected to the action of a labile blocking agent of the amine function then transformed into functional derivative of the function carboxylic which is condensed with an alkanol, an amine or hydro-xylamine to form an alkyl ester, an amide or a hydroxamate -,. ' ~

. .
, and released by hydrolysis protects the amine function to obtain a composed of formula IX

~ ~ / OX

2 ~ H (IX) dans laquelle X est un radical alcoyle substitue ou non, un radical amino, un radical alcoylamino ou un radical hydroxyamino.
Les composes de formule generale I peuvent être con~ertis en sels d'addition avec un acide ou avec une base Lorsque X est un hydroxyle, les composes sont amphotères et peuvent être salifies soit par un acide mineral ou organique soit par une base minerale ou organique.
Lorsque X est un radical amino ou alcoylamino les compo~
ses peuvent être salifiés par un acide mineral ou organique.
Lorsque X est un radical hydroxyamino, les composes peuvent être salifies soit par un acide mineral ou organique soit par une base forte.
Parmi les acides ou les bases convenant pour la salifi-cation9 on citera plus particulièrement les acides ou les bases mine-rales ou organlques, physiologiquement compatibles. Parmi les acides on citera notamment l'acide chlorhydrique, l'acide bromhydrique, l'a-cide sulfurique, l'acide nitrique, l'acide phosphorique; l'acide ~ .~

: - ; : ::
. ,; : -, formique, l'acide acétique, l'acide butyrique, llacide nicotinique, l'acide glycyrrhit~que? l'acide embonique~ l'acide méthane sulfoni-que, l'acide iséthionique, l'acide benzene sulfonique ou l'acide glucose l-phosphorique, Parmi les bases on citera notamment l'hydroxyde de sodium, de potassium, de lithium, de calcium, de strontium, l'ammoniaque, la magnésie, l'alumine, l'hydroxyde ferreux; une amine inférieure comme la méthylamine ou la diéthylamine; un amino alcanol comme la diétha-nol amine ou l'éthanolamine; une amina arylaliphatique ln~érieure co~me la phénylethylamine, la benzylamine, la (trifluoromethyl phenyl) methylamine; une base pyridique comme la ~-pyridylethylamine; une base aromatique comme la naphtylamine ou la dinaphtyléthylène diamine;
un amino sucre comme la glucosamine, la N-mPthyl glucamine ou la mannosanine. On peut également salifier les composés de formule I
par un acide ou une base qui ne conviennent pas pour la thérapeuti-que. Les sels en résultant conviennent pour l'identification, la purification ou la séparation des composés de formule I comme par exemple le perchlorate, le pé~iodate, le dinitrotoluate, le ferricyanu-re, un sel de baryum ou encore un sel de quinine.
Les composés selon l'invention possèdent deux atomes de carbone asymetrique et il est possible de separer les diastéréoi-somères érythro et thréo. Chacun de ces diastéreoisomères peut aussi être dédoublé en ses énantiomères optiquement actifs. La séparation des diastereoisomères est effectuee de préference à l'aid~ de metho-des physiques comme la chromatographie en phase liquide preparative ou la chromatographie en phase gazeuse.

.~

', ' ~13~

Le dédoublement en isomeres optiques est effectue par un réactif chiral comme par exemple un acide ou un~ base optiquement active tel que le réactif de Mosher, la brucine, la strychnine, l'é-pnédrine, la pseudoephedrine, l'acide dibenzoyl d-tartrique ou l'a-cide N~diethyl d-tartramique.
Le procede selon l'invention peut encore être defini par les modes d'exécution suivants, actuellement préférés:
1) l'halogénation de la cycloalcanone de formule II est effectuée à l'aide d'un agent d'halogénation comme par exemple le chlore ou le brome, un N-halogeno amide, un N-halogenoimide, un hy-pochlorite d'alcoyle ou un perhalogenure de pyridinium.
Des exemples plus specifiques sont notamment ~-chlorosuc-cinimide, la N-bromo succinimide, la N-bromo acitamide, la N-iodo-acetamide, la N-bromobenzamide, la N-bromophtalimide; la 5,5-di-chlorodiphenylhydanto~ne; l'hypochlorite de terbutyle; le perbromure de pyridinium.
2) l'halogenation est effectuee dans un solvant inerte, de preference polaire comme le dioxane, la pyridine, le dimethyla-cetamide, le d~ethylacétamide, le diméthyl sulfoxyde, l'hexamethyl-phosphorotriamide ou l'acide acetique. 2 ~ H (IX) in which X is a substituted or unsubstituted alkyl radical, an amino radical, an alkylamino radical or a hydroxyamino radical.
The compounds of general formula I can be con ~ ertis in salts addition with an acid or with a base When X is a hydroxyl, the compounds are amphoteric and can be salified with either a mineral or organic acid or by a mineral or organic base.
When X is an amino or alkylamino radical, they are composed ~
its can be salified with a mineral or organic acid.
When X is a hydroxyamino radical, the compounds can be salified with either a mineral or organic acid or by a strong base.
Among the acids or bases suitable for salification cation9, more particularly, the acids or the bases mine-physiologically compatible, organic or organic. Among the acids include hydrochloric acid, hydrobromic acid, a-sulfuric acid, nitric acid, phosphoric acid; acid ~. ~

: -; : ::
. ,; : -, formic, acetic acid, butyric acid, nicotinic acid, glycyrrhit acid ~ what? embonic acid ~ methane sulfonic acid-that, isethionic acid, benzene sulfonic acid or acid l-phosphoric glucose, Among the bases, there may be mentioned in particular sodium hydroxide, potassium, lithium, calcium, strontium, ammonia, magnesia, alumina, ferrous hydroxide; a lower amine like methylamine or diethylamine; an amino alkanol such as dietha-nol amine or ethanolamine; an arylaliphatic amina ln ~ érieure co ~ me phenylethylamine, benzylamine, (trifluoromethyl phenyl) methylamine; a pyridic base such as ~ -pyridylethylamine; a aromatic base such as naphthylamine or dinaphthylethylene diamine;
an amino sugar such as glucosamine, N-mPthyl glucamine or mannosanine. The compounds of formula I can also be salified with an acid or base that is unsuitable for therapeutic than. The resulting salts are suitable for the identification, purification or separation of the compounds of formula I as by example perchlorate, pe ~ iodate, dinitrotoluate, ferricyanu-re, a barium salt or a quinine salt.
The compounds according to the invention have two atoms of asymmetric carbon and it is possible to separate the diastereoi-erythro and threo somers. Each of these diastereoisomers can also be split into its optically active enantiomers. The separation diastereoisomers is carried out preferably with the help of metho-physics like preparative liquid chromatography or gas chromatography.

. ~

',' ~ 13 ~

The splitting into optical isomers is carried out by a chiral reagent such as for example an acid or a base optically active such as Mosher's reagent, brucine, strychnine, e-pnedrine, pseudoephedrine, dibenzoyl d-tartaric acid or a-cide N ~ diethyl d-tartramic.
The method according to the invention can also be defined by the following preferred modes of execution:
1) the halogenation of the cycloalcanone of formula II is carried out using a halogenating agent such as for example chlorine or bromine, an N-halogeno amide, an N-halogenoimide, a hy-alkyl pochlorite or a pyridinium perhalogenide.
More specific examples are in particular ~ -chlorosuc-cinimide, N-bromo succinimide, N-bromo acitamide, N-iodo-acetamide, N-bromobenzamide, N-bromophthalimide; the 5,5-di-chlorodiphenylhydanto ~ ne; terbutyl hypochlorite; perbromide of pyridinium.
2) the halogenation is carried out in an inert solvent, preferably polar such as dioxane, pyridine, dimethyla-cetamide, d ~ ethylacetamide, dimethyl sulfoxide, hexamethyl-phosphorotriamide or acetic acid.

3) la condensation de ~-halogéno alcanone de formule III et le mercaptan de formule RlSH est effectuee soit en milleu ba-sique soit après avoir converti le mercaptan en derive metallique comme le mercaptide de sodium, de potassium ou de lithium.

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. . .

. . ' .

~3~3~ 3) the condensation of ~ -halo alkanone of formula III and the mercaptan of formula RlSH is carried out either in milleu ba-either after converting the mercaptan to a metal derivative such as sodium, potassium or lithium mercaptide.

: ..:
. . .

. . '.

~ 3 ~ 3 ~

4) la condensation de ~-thiocetone de formule IV et le cyanure de metal alcalin est eEfectuée en presence de carbonate d'ammonium comme source d'ammoniac. 4) the condensation of ~ -thiocetone of formula IV and the alkali metal cyanide is produced in the presence of carbonate ammonium as a source of ammonia.

5) l'hydrolyse de la spirohydanto~ne de formule V est effectuee a l'aide d'un agent alcalin modere comme le carbonate de sodium, le carbonate de lithium ou l'hydroxyde de baryum.
On peut egalement effectuer la condensation de la thioce-tone IV avec le cyanure alcalin et l'hydrolyse en une seule etape sans isoler l'hydanto~ne intermediaire. 5) the hydrolysis of spirohydanto ~ ne of formula V is carried out using a moderate alkaline agent such as carbonate sodium, lithium carbonate or barium hydroxide.
It is also possible to carry out the condensation of thioce-tone IV with alkaline cyanide and hydrolysis in one step without isolating the intermediate hydanto ~ ne.

6) la debenzylation du ~-ben~ylthio amino-acide de for-mule VI est effectuee par hydrogenolyse en presence d'un catalyseur de la famille du platine ou par reduction à l'aide d'un metal alcalin comme le sodium, le potassium ou le lithium dans l'ammoniac liquide. 6) the debenzylation of ~ -ben ~ ylthio amino acid for-mule VI is carried out by hydrogenolysis in the presence of a catalyst of the platinum family or by reduction using an alkali metal such as sodium, potassium or lithium in liquid ammonia.

7) la reaction d'alcoylation du thiol de formule VII est effectuee à l'aide d'un agent d'alcoylation comme un halogénure d'al-coyle, un sulfate d'alcoyle, un époxyalcane en milieu basique.
L'emploi d'un époxyalcane comme l'oxyde d'éthylène ou ltoxyde de propylène conduit à un thio éther (hydroxy alcoylé) que l'on peut, si desiré, ethérifier ou estérifier au moyen d'un agent acylant dérivé d'un acide carboxylique ou sulfonique. Les esters d'acides aryl ou alcoylsulfoniques peuvent ensuite etre transformés en dérives am$nes ou (alcoyl inferieur) amine par échange de fonction. 7) the alkylation reaction of the thiol of formula VII is carried out using an alkylating agent such as an alkyl halide coyle, alkyl sulfate, epoxyalkane in basic medium.
The use of an epoxyalkane such as ethylene oxide or propylene oxide leads to a thio ether (alkylated hydroxy) that one can, if desired, etherify or esterify by means of an acylating agent derived from a carboxylic or sulfonic acid. Esters of acids aryl or alkyl sulfonics can then be transformed into derivatives am $ nes or (lower alkyl) amine by function exchange.

8) l'arylation du derive thio de formule VIII est effec-tuee à l'aide d'un agent arylant comme par exemple un derive brome ou iode en so~vant polaire comme la pyridine ou le dimethyl formamide.

",,~

- . i .

.~
:: ,' .: ~

~L3~3~i 8) the arylation of the thio derivative of formula VIII is effected killed using an arylating agent such as for example a bromine derivative or polar iodine iodine such as pyridine or dimethyl formamide.

",, ~

-. i .

. ~
::, '.: ~

~ L3 ~ 3 ~ i

9~ l'aralcoylation du dérive thio de formule VII est effectuée à l'aide d'un halogénure ou d'un ester sulfonique d'aral-coyle en présence d'un accepteur de protons comme par exemple une trialcoylamine telle que la triéthylamine, une aryl dialcoylamine telle que la NN dimethylamiline, une base pyridique telle que la pyridine, la collidine, ou la lutidine; un dialcoyl al~oylcarbo-xamide tel que le diméthyl formamide ou le diéthyl acetamide, ou un reactif basique tel qu'un carbonate de metal alcalin ou alcalino terreux, le phosphate de magnesium ou la magnesie.
Les composes obtenus selon les procédes de l'invention sont doués de proprietés pharmacologiques interessantes qui les rendent aptes à servir de principes actifs de medicament. Ils mani-festent en particulier des propriétés immunodepressives. Ils mani-festent également un effet favorable sur la resistance mécanique du derme et un effet protecteur sur le collagène soluble.
C'est ainsi que sur des lots de souris CBA ils entra~-nent une diminution sensible de l'hypersensibilite de contact retar-dee après badigeonnage avec une solution d'oxazolone.
Les composés de formule I ainsi que leurs sels d'addition obtenus selon les procedes de l'invention sont administrés en medeci-ne humaine ou vetérinaire sous forme de compositions pharmaceutiques appropriees pour l'administration par voie parenterale, orale, rectale ou sublinguale.
Les compositions pharmaceutiques peuvent renfermer en outre un autre principe actif d'action similaire ou complémentaire : : :: : : : . : :;

~3~23S

ou synergétique comme par exemple un p.aminophenyl sulfamide tel que le sulfamétoxazole ou la sulfapyridazine. La posologie journa-lière varie de 100 mg à 2 g selon la voie d'administration, l'âge du patient et l'indication thérapeutique.
En tant qu'agents immunodépressants ils trouvent un emplo~
dans le traitement du rhumatisme, dans les greffes d'organe comme par exemple les transplantations du coeur, du foie, des reins ou du pancréas.
Parmi les composés de formule générale I on distinguera les sous-groupes suivants:
l? les composes de formule IA

CO - X
(CH ~ NH2 ,R2 (I~) dans laquelle Rl, X et n sont définis comme précédem~ent R2 et R3 sont chacun de l'hydrogène, un radical alcoyle ou un radical alcoyle substitué ou un radical phenyle R4 est de l'hydrogène ou, lorsque R2 et R3 sont un radical phényle, un radical phényle 2) les composes de formule IB

(Cl ~ COH2 X ( B) R ~ Ar .: :-.. - : :

, ~' : - . ~.

~L3~ 35 dans laquelle X, R et n ont les significations fournies antérieurement et Ar représente un radical aromatique non substitué ou substitue choisi dans le groupe constitue par phényl, phényl substitué, thényl, furyl, thiazolyl, oxadiazolyl et pyridyl 3) les composes de formule I
X (Ic) (D)~

dans laquelle X, R et n sont definis comme ci-dessus D est un halogène, un trifluoromethyle, un amino, un (alcoyl inferieur) amino ou wn (acyl inferieur) amino et n est un nombre variant de O à 3 4) les composes de formule I

(CH2~X2 (ID) R H

dans laquelle X, R et n ont les significations fournies anterieurement.
Parmi les composés de formule I on considerera comme deri~es du cyclohexane ceux pour lesquels n est egal à 1, du cyclohep-tane ceux pour lesquels n est egal à 2 et du cyclooctane ceux pour . ., ..:

. ' ' ~

~L3~23~

lesquels n est égal a 3.
On préfère néanmoins les composés pour lesquels n est égal à O ou l.
On pourra citer à ti~re d'exemples de composés preferés:
- l'acide 2-méthyl 2-benzylthio l-amino cyclohexyl -1-carboxylique et ses diastéréoisomères.
- l'acide l-amino 2-benzylthio cyclohexyl -l-carboxylique - l'acide 2-méthyl 2-méthylthio l-amino cyclahexyl l~carboxylique - l'acide 2-benzylthio l-amino cyclopentyl l-carboxylique et ses diastéreoisomères - l'acide 2-(p.chlorophénylthio) l-amino cyclohexyl l-carboxylique et ses diastéréoisomères - l'acide 2-méthyl 2-benzylthio l-amino cyclopentyl l-carboxylique - l'acide 2-mercapto l-amin.o cyclohexyl l-carboxylique - l'acide 2-mercapto l-amino cyclopentyl -l-carboxylique - l'acide 2-(thiényl-thio) l-amino cyclohexyl -l-carboxy-lique - l'acide 2-benzylthio l-amino cyclopentyl l-carboxylique.
Chaque fois qu'ils sont obtenus selon les procédés con-formement à l'invention.
L'invention comprend aussi à titre de produits intermé-diaires, les spirohydanto~nes de formule V

: ^ '~ '' ' ' ' : ~, , ~

. , ' .: ; ^ .' : :: ~,, 3~

,~ ~ H

S

dans laquelle R, Rl et n ont les définitions fournies précédemment.
Pour autant que la présente invention est concernée, le terme "alcoyle inférieur" désigne des radicaux hydrocarbones ayant de 1 à 6 atomes de carbone comme par exemple méthyle, éthyle, iso propyle, sec butyle, neo pentyle, terbutyle ou n-hexyle.
Le terme sryle désigne un radical ~ caractère aromatique ayant 5 à 6 cha~nons et pouvant comporter 1 ou 2 hétéroa~omes. En outre ce cycle peut porter un ou deux substituants choisis dans le groupe constitué par les halog~nes, un alcoxy inférieur, un trifluo-rométhyle, un alcoylthio inférieur, un méthylene dioxy, un hydroxy et un alcoyle inférieur.
Le terme alcényle inférieur designe une chalne hydrocar-bonée mono ou polyethylenique ayant de 2 à 10 atomes de carbone comme par exemple propenyle-2-S allyle, me~hallyle, 3,3-dimethyl allyle, but-2 enyle, penta 2,4-dienyle ou triallyl methyle.
Les exemples suivants illustrent l'invention. Ils ne la limitent en aucune façon.

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~l3~23 S

Exemple I
dl acide l-amino 2-methyl 2-ben~ylthiocyclohexyl -1 carboxylique (mélange des isomères ~ et ~) Stade A 2-méthyl 2-chloro cyclohexanone _______ Après avoir dissout 112 g de 2-methyl cyclohexanone dans 500 ml de tétrachlorure de carbone on ajoute goutte à goutte une solution de 90 ml de chlorure de thionyle dans 150 ml de tétrachlo-rure de carbone. L'addition dure 60 mn et s'e~fectue sous forte agi-tation en maintenant la température du milieu réactionnel à 15 environ à l'aide d'un bain dleau. L'agitation est ensuite maintenue pendant une période supplémentaire de deux heures. Le mélange ré-actionnel est alors lavé à trois reprises avec l'acide chlorhydrique dilué, puis à deux reprises avec une solution saturée de bicarbonate de sodium et enfin avec une solution saturée de chlorure de sodium.
La phase organique est séparée, séchée sur sulfate de sodium, filtrée puis évaporée à sec sous pression réduite. On obtient un résidu sec pesant 180 g environ que l'on purifié par distillation fractionnee.
La fraction principale distille à 85-90~ sous 20 mm Hg.

nD - 1,4672 Stade B 2-méthyl 2-benzythio cyclohexanone On dissout 126,5 g de 2-méthyl 2-bromo cyclohexanone ob~
tenue au stade précédent dans 70 ml d'éthanol. On y a~oute un mélange de 82 g de benzylmercaptan et de 26,4 g de soude en solution dans 330 ml d'éthanol. Le mélange est porté au reflux pendant 15 mn. Il ' ~3L3~235 appara~t alors une coloration rose. On laisse ensuite revenir le mélange à la température ordinaire et on évapore l'éthanol. Le résidu huileux est repris dans 400 ml d'eau et on épuise la suspension avec 3 fois 25 ml de chlorure de méthylène. Les phases organiques sont réunies, lavées à l'eau jusqu'a neutralité puis séchées, filtrées et évaporées à sec. Le résidu est purifié par distillation fractionnee.
On obtient ainsi 120 g de 2-méthyl 2-benzylthio cyclohexanone qui distille à 142-144 (Rendement 78%).
Stade C 2-methyl 2-benzylthiocyclohexyl l-spirohydanto~ne Dans une fiole à bouchage hermetique on introduit suc-cessivement 2,5 g de cyanure de potassium préalablement dissout dans 15 ml d'eau puis un melange de 11,7 g de 2-methyl 2-benzylthio cyclohe-~anone, 0,6 g de carbonate d'a~monium et 40 ml d'ethanol à 60%.
L'addition dure environ 15 mn. Le mélange est placé dans un bain thermostatique à 50 environ et maintenu à cette temperature pendant 45 heures sous agitation. Après ce laps de temps le solvant de la reac~ion est evapore et le résidu sec est mis en suspension dans un mélange de 180 ml d'eau et 100 ml d'éther. On agit vigoureusement et on isole le precipite par filtration. On le lave à l'eau et on le sèche à 50. On isole ainsi 2,5 g de spirohydanto~ne fondant à
210. La concentration des eaux mères pPrmet d'isoler un second jet pesant 0,9 g. Le rendement global est d'environ 20%.

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~L~3~;23S

Stade D Acide dl 2-methyl 2-ben7ylthio l-amino cyclohexyl l-carboxylique On prepare une solution de 63,1 g d'hydroxyde de baryum dans 500 ml d'eau a chaud. On filtre l'insoluble après retour à la tempreature ordinaire. On ajoute le filtrat à une suspension de 30,5 g de la spirohydanto~ne obtenue au stade C dans 150 ml d'eau. On com-plète ensuite le volume à lOOO ml. Le recipient est hermetiquement ferme et chauffe à 140 pendant 65 h. On laisse ensuite revenir la température intérieure à 90 et on transvase le liquide dans une fiole conique. Les parois du récipient hermetique sont rincées à deux re-prises avec une solution N d'acide chlorhydrique. Les solutions acides sont a~outees au melange reactionnel. On acidifie alors l'en-senble des liqueurs à pH l par addition d'acide chlorhydrique.
On neutralise, ensuite, par addition de bicarbonate de sodium ~usqu'à un pH de 6,3. Il appara~t un insoluble et le melange est laisse repose une nuit en glacière. On epuise la suspension au chloroforme. On separe les phases chloroformiques que l'on filtre et evapore à sec~ Le residu cristallin es~ repris dans de l'acide chlorhydrique N et chromatographié sur une colonne garnie de résine carbo~ylique échangeuse d'ions (DOWE~ XW8)*. Après écoulement du solvant, on elue l'amino acide par une solution aqueuse de triethyla-mine ~usqu'à disparition de la réaction coloree à la ninhydrine.

* Marque de commerce .
~ ff, , Après évaporation des éluats sous pression réduite, on obtient 7 g d'acide 2-benzylthio 2-méthyl l-amino cyclohexyl l-carbo-xylique (rendement 25%). Le produit est recristallise pour l'ana-lyse de l'acétone. Son point de fusion est de 215 Analyse; C H N02S = 279,40 C H N S%
Calculé 64,48 7,57 5,01 11,47 Trouvé 64,20 7,20 5,00 11,32 Ce composé retlent l'eau très énergiquement et la déshy-dratation necessite un chauffage à 150 pendant une heure.
Spectre IR : en accord avec la structure globalement, pas de bande sp8cifique.
Spectre RMN : en accord avec la structure l'intégration des champs magnétiques s'avère correcte.
Exemple II
Acide dl l-amino 2-benzylthio cyclohexyl l-carboxylique En utilisar.t le mode opératoire de l'exemple I au départ de la cyclo-hexanone, on obtient successivement :
- la 2-benzylthiocyclohexanone bo 07 = 128-132 (Rende-ment 7270) - la 2-ben~ylthiocyclohexyl l-spirohydanto~ne F = 216 - l'acide dl l-amino 2-benzylthio cyclohexyl -1 carboxy-lique (melange d'isomeres) F = 220 (recrist. de l'eau) .;~

: .'' ,: ,. . ~

.:.~ : . ...

~13:~L235 Analyse; C14 H19 N02S ~ 265,377 C H N S ~
Calcule63,40 7,35 5,29 12,0g Trouvé 62,93 7,03 5,22 11,92 Ce compose est soluble dans l'acide chlorhydrique dilue.
L'évaporation de la solution fournit le chlorhydrate. ~`
Exemple III
Acide dl l-amino 2-thio cyclohexyl l-carboxylique (mélange d'isomères) ~près avoir condense 100 ml d'ammoniac liquide dans de la neige car-bonique et de l'acetone, on laisse le liquide revenir vers -30C et on ajoute alors 3,2 g de sodium fra~chement coupe en lamelles, par pe-tites portions jusqu'à ce que le melange prenne une coloration bleue stable. On ajoute alors 6 g d'acide l-amino 2-benzylthiocyclohexyl l-carboxylique obtenu à l'exemple II. Le melange est maintenu sous agitation pendant une heure et garde sa coloration bleue. L'excès de reactif est decomposé par addition menagee de chlorure d'ammonium.
On laisse ensuite l'ammonlac s'evaporer à temperature ordinaire. On evapore ensuite l'acetone sous pression reduite. Le residu sec est repris par quelques ml d'eau et la suspension est rendue acide par addition d'acide chlorhydrique ~l (jusqu'à pH 2). On evapore ensuite a sec. Le residu est lave à l'acetone puis recristallisé de l'iso-propanol. On obtient ainsi 3 g de chlorhydrate retenant encore de petites quantités de sels mineraux. On le purifie par retour en milieu basique puis transformation en chlorhydrate. Le chlorhydrate pur fond au dessus de 250.

. ~ .

- 19 - ~
~L~3~3~

S % = 13,98 (~héorie 14,20) Spectre RMN Massif de 2,6 à 3,1 ppm (1 proton) (D20) Signaux de 1,6 à 2,6 ppm correspondant a 10 protons dont 2 singulets.
Exemple IV
Acide dl l-amino 2-(p.chlorophénylthio) cyclohexyl l-carboxylique (mélange d'isomères) En utilisant le mode operatoire de l'exemple I au depart de la cyclohexanone et en remplacant le benzylmercaptan par le p.chlorophenylthiol on obtient l'acide dl l-amino 2-(p.chlorophe-nylthio) cyclohexyl l-carboxylique (melange d'isomères). Il fond au dessus de 250 (avec dec.) Analyse C13 H16 Cl N2S a 285~8 C H N Cl S %
Calcule 54,64 5,644,90 12,41 11,22 Trouve 54,26 5,494,89 12,50 11,40 Exemple V
Acide dl l-amino 2-benzylthiocyclopentyl l-carboxylique (melange d'isomères) En operant selon le mode operatoire de l'exemple I au depart de la cyclopentanone, on obtient l'acide dl l--amino 2-benzylthio-cyclopentyl l-carboxylique sous forme de mono hydrate.
Le point de fusion de ce produit ne peut être determine avec certi-tude. L'acide dl l-amino 2-benzylthiocyclopentyl l-carboxylique est .~`h~

', :' ~', ' :

. !

' 1~3:1~3S

soluble dans l'acide méthane sulfonique dilué par chauffage a 40.
Après évaporation du solvant on récupère le méthane sulfonate.
Analyse de l'hydrate:C13 H17 02NS.H20 = 269 C H N S %
Calculé57,97 7,10 5,20 11,90 Trouvé58,69 7,05 5,20 12,46 Exemple VI
Acide dl 2-méthyl 2-benzylthio l-amino cyclopentyl l-carboxylique Au départ du 2-oxocyclopentyl l-carboxylate d'éthyle, on forme la 2-méthylcyclopentanone par méthylation au moyen d'iodure de méthyle en presence d'une basè forte comme l'hydrure de sodium.
La 2-methylcyclopentanone est--conver~ie en acide dl 2-methyl 2-benxylthio l-amino cyclopentyl l-carboxylique en opérant selon le mode opératoire de l'exemple I. Il fond au dessus de 250 (avec dec.). Cet amino-acide est soluble dans les solutions aqueuses diluees d'acide chlorhydrique mais insoluble dan les solution aqueuses d'hydroxydes de metaux alcalins.
Analyse: C14 Hlg N02S = 265,38 C H N %
Calculé63,36 7,22 5,28 Trouvé63,34 7,07 ` 5,~8 D'une manière similaire au départ du 2-oxocyclopentyl -ou cyclohexyl - ou cycloheptyl - ou cyclooctyl carboxylate d'éthyle et de l'agent d'alcoylation approprié, on peut préparer les 2-méthyl, , ~ ` ' ~l~3:~23~

2-isopropyl ou 2-butyl cycloalcanones, matières premières necessaires à l'obtention des acides l-amino 2-alcoyl 2-thiocycloalcoyl l-carbo-xyliques.
Exemple VII
Acide dl l-amino 2-(thienylthio) cyclohexyl-l carboxylique ~n utilisant le mode operatoire de l'exemple I au depart de 2-chlorocyclohexanone et de tthienyl-2~thiol, on obtient l'acide dl l-amino 2-(thienylthio)cyclohexyl l-carboxylique sous forme d'un melange de diastereoisomères.
Ce compose fond au dessus de 250. Il est très soluble dans la potasse aqueuse.
AnalyseCll H15 N2S ' 257~378 C H N S %
Calculé 51,33 5,87 5,44 24,91 Trouvé 51,42 6,04 5,70 24,81 Exemple VIII
Acide dl l-amino 2-thlocyclopentyl l-carboxylique On condense 900 ml d'a~moniac dans un mélange refrigerant acétone~carboglace à -70. On ajoute 20 g d'acide dl 1 amino 2-benzylthio cyclopentyl l-carboxylique en une fois puis par petites fractions environ 8 g de fragments de sodium fra~chement decoupes.
Le melange prend une coloration bleu fonce. On laisse reposer le tout pendant une heure puis on decolore le melange reactionnel par addition menagee de chlorure d'ammoniumO On laisse ensuite l'ammoniac ' :~`

~ . . ~ .. ., . ; . - ,: :-.' ' ~, '' ' ' ' ' - 22 - ~

Z3~

s'évaporer à température ordinaire. La solution acétonique est di-luée à l'eau et acidifiée par de l'acide chlorhydrique jusqu'à une valeur du pH de 2, La solution acide est chromatographiée sur une colonne de résine échangeuse d'ions DONEX 50W8 préalablement traitée ~ l'acide chlorhydrique et lavée à l'eau. Après passage de l'effluent, on élue l'acide l-amino 2-thiocyclopentyl -l-carboxylique par une solution aqueuse de triéthylamino à 50 g/litre. On recuei~le les éluats en 16 fractions de 25 ml. Après évaporation de chaque fraction on recueille le thiol dans les fractions 9 à 16. Le thiol est lavé
à l'éther puis à l'éthanol. On obtient ainsi 4,3 g d'acide dl l-amino 2-thiocyclopentyl l-carboxylique (rendement 27%). Il est soluble dans l'eau donnant une solution de pH 6,4.
Analyse: C6 Hll N02S ~ 16:L,32 C H N S %
Calcule44,67 6,B7 8,68 l9,B7 Trouvé44,52 7,02 8,55 19,57 Par réaction avec le chlorure de triphénylméthyle, on peut bloquer à la fois la fonction amine et la fonction thiol. Le groupe carboxylique peut ensuite etre transforme en derives fonctionnels9 puis esterifie ou amidifie. On débloque ensuite les groupes amino et thiol par hydrolyse acétique.
Exemple IX
Séparation des diastéréoisomères de l'acide l-amino 2-benzylthiocy-clopentyl l-carboxylique.

, ::.,. . . , , . ::

~13~Z~5 On met 3,5 g d'acide l-amino 2-benzylthio cycloheptyl l-carboxylique en solution dans un melange de chloroforme et de methanol. On injecte la 801utio~ dans un chromatographe haute pres-sion en phase liquide equipe d'une colonne garnie de 1,5 kg de silice (10-40 ~) en suspension dans de la cyclohexanone.
On elue les deux diastereoisomères successivement. Les produits retiennent encore des sels mineraux. Ils sont encore purifies par chromatographie en phase liquide preparative (colonne de silice 5,20 ~ RP8~ et elution au methanol. On recristallise chaque diasté~
reoisomère d'~m melange chloroforme/methanol/ester.
On recueille le premier isomère en deux ~ets pesant au total 2 g (isomère ~). Le second isomère est également obtenu en 2 ~ets (poids to~al 0,9 g isomère ~).
Isomère ~: point de fusion au dessus de 250, soluble dans les so-lutions aqueuses N/10 d'acide methane sulfonique.
Analyse; C13 H17 N2S = 251~35 + 2~5% eau C H ~ %
Calcule 62,12 6,82 5,57 12,76 Trouve 62,00 6,72 5,68 13,18 Isomère ~ point de fusion au dessus de 250 AnalyseC13 ~17 N2S = 251~35 C H N S %
Calcule62,126,82 5,57 12,76 Trouve62,017,17 5,60 12,73 D

~ 3L3~;235 Exemple X
Séparation des deux diastéréoisomères de llacide l-amino 2-méthyl 2-6enzylthio cyclohexyl l-carboxylique.
On separe les deux diastéréoisomères par chromatographie en phase liquide haute pression à l'aide d'un appareil HPLC de la firme Jobin et Yvon garni avec une colonne chargée avec 1,5 kg de silice (10-40 ~) en suspension dans la cyclohexanone. On injecte une solu-tion de 3 g d'acide l-amino 2-méthyl 2-benzylthio cyclohPxyl l-carboxy-lique dans 100 ml de mélange chloroforme-méthanol. Les deux isomères sont obtenus successivement et les éluats sont amenés à sec. On obtient le premier diastéreoisomère en deux jets (poids tatal 1,87 g).
On ob~ient le deuxième diastereoisomère par recristallisation et à
partir des liqueurs-mères (poids total 0,4 g). Le rapport ponderal entre les deux diastereoisomères dans le. melange initial est d'environ 75 pour llisomère ~ -/25 pour l'isomère ~.
Isomère ~: point de fusion 262 (avec clecomposition) soluble dans la soude N/10 -~Y 15 21 2 C H N S %
Calcule 64,48 7,58 5,01 11,48 Trouvé 64,39 7,39 5,14 11,82 Isomère ~: point de fusion: 260 (avec décomposition) soluble dans la soude N/10 ~13~35 Analyse C15 H21 N2S ~ 279~40 C H N S %
Calcule 64,48 7,58 5sO1 11,48 Trouve64,39 7,41 5,15 11,62 Exe~
Séparation des diastéréoisomères de l'acide l-amino 2-p chlorophényl-thio cyclohexyi l-carboxylique.
Au départ de 5 g de mélange de diastéréoisomères et en utilisant la tec~niquF~ de l'exemple IX, on sépare 3 g d'un des isomères (isomères ~).
Dansles liqueurs-mères on récup~ere en outre 1 g de cet isomère a d'une pureté moins grande et 0,5 g d'un mélange renfermant le second diastéréoisomère contaminé par des selc; minéraux. Le dias~éréoisomère a fond au dessus de 250 (avec dec~) F;on chlorhydrate est très solu-ble dans l'eau.
Analyse du chlorhydrate: C13 H16 CL N02S, ClH ~ 322,27 C H N S Cl total ionique Calculé48,45 5,32 4,35 9,95 22,00 11,00 Trouvé48,30 5,37 4,67 9,91 22,65 11,45 Exemple XII
Acide dl l-amino 2-méthylthlo 2-méthyl cyclohexyl ~1 carboxylique (mélange de diastéréoisomères).
Au départ de la 2-methylcyclohexanone et du m~thylmercap-tan, on obtient selon le mode operatoire de l'exemple I l'acide l-amino 2-méthyl 2-methylthiocyclohexyl l-carboxylique.
F au dessus de 225 sans fusion nette. Il est tres soluble dans l'eau.

- 26 - ~
~L~L3~23~i Analyse Cg H17 N02S = 203,31 C H N S ~
Calcule53,17 8,43 6,89 15,77 Trouve53,24 8,59 6,97 15,93 L'acide l-amino 2-methylthio 2-methyl cyclohexyl l-carboxy-lique peut egalement être obtenu a partir de l'acide 1 amino 2-ben-zylthio 2-methylcyclohexyl l-carboxylique par bloquage du groupement amine sous forme de derive triphenylmethyl amino, debenzylation par hydrogenolyse, methylation du groupe thio puis detritylation par l'aci-de acetique aqueux.
Exemple XIII
Comprimes renfermant 250 mg d'acide 2-methyl 2-benzylthio l-aminocY-clohexyl l-carboxylique (melange de dias~téreoisomères).
Acide 2-methyl 2-benzylthio l-amino cyclohexyl l-carboxylique 2,500 kg amidon de ma~s ~.............................................. 0,250 k8 amidon de blé ................................................ 0,250 kg éthyl cellulose .............................................. 0,040 kg silicate de magnésium ........................................ 0,150 kg talc ......................................................... 0,100 kg caséine formolee ................. ~........................... 0,025 kg lactose ...................................................... 0,200 kg pour 10,000 comprimés d'un poids moyen de 0,35 g Exem~le XIV
Etude pharmacologique des composés selon l'invention.
Les produits selon l'invention sont des acides ~-amines ~-thiol ou thioester qui ont e~e synthetises et testes dans la . ~ .

~ 3~;235 perspective de produits actifs sur le tissu conjonctif: sur la polymerisation du collag_ e par un mecanisme analogue à la D-pe-nicillamine selon les descriptions de JAFFE et NIMMI et sur 1'action _munodepressive de la D-penicillamine, par un mecanisme different de celui des corticoYdes, des agents alcoylants ou des antimetabo-lites.
Les composes selon l'invention ont été testés principale-ment dans ces deux directions. Dans cette série on a trouvé des produits d'activité imm~modépressive: leur mode d'action se rapproche soi~ de la D-~pénicillamine soit des antimétaboli~es, dtautres pro-duits actifs sur le tissu con~onctif et également immunodépresseurs.
TECHNIQUE
Immunodépression: le test d'hypersensibilité retardée de contact à l'oxazolone décrit par Phanuphak et Coll.~J. of Immunol 1974, 112-115) a été modifié de manière à obtenir une réponse cellulaire T pra-tiquement pure. En bref, la sensibilisation des souris ~CD ~ 25-27 g~
s'effectue par application percutanee dorsale avec une solution oleoacetonique (1/4) à 3% d'oxazolone; le challenge a lieu 5 jours après, egalement par contact au niveau de l'oreille, avec une solution a 3% d'oxa~olone dans le même solvant. La reaction est lue 24 et 48 h après. L~epaisseur de l'infiltration est mesuree, le nombre d'animaux repondeurs au-dessous d1un seuil~ est note. Les animaux sont traites soit 3 ~ois: 2 jours avant le jour de la sensibilisa-tion soit à dose unique, 2 ~ours apres la sensibilisation.

,~ .

- 28 - ~
~L~L3~Z3S

Synthèse et polymérisat on du collagene elles sont étudiées glo-balement par la résistance physique à l'élongation des tissus, me-surée par jauge selon la technique de JAFFE et Coll.(Science 1968, 161, 1016). La résistance du conjonctif néoformé post-cicatriciel est mesuré 8 jours après la lésion, le traitement ayant lieu du 5e au 7e jour; la résistance du derme natif est mesurée après 9 jours de traitement.
RESULTATS
Activite im unodepressive: pour les produits de référence l'acti-vite est retrouvee à dose elevee, mais nous avons affaire à des trai~
tements par dose unique (j + 2) ou relativement courts (; - 2, - 17 O) alors que ces produits nécessitent une certaine imprégnation pour manifester leurs effets. Deux types d'activité sont retrouvés:
1) En cours de sensibilisation, pour les antimétabolites, les agents alcoylants et les corticoYdes.
2) Avant sensibilisation pour la D pénicillamine et la cycloleucine.
Les composés selon l'invention aux doses de 50 à 200 mg/kg possèdent une action soit en cours de sensibilisation soit avant sensibilisation.
Activité sur le tissu conjectif;
On peut etablir l'activite de la D-penicillamine sur ce test comme substance de reférence à la dose de 250 mg/kg. Les cor-t1soniques possèdent egalement une efficacite. Par contre les autres ~, , 1 : ' `, : .

- 2~ - , ~3~'~35 métabolites et les agents alcoylants sont sans effet car dejà trop toxiques.
Les composés selon l'invention et notamment l'acide l-amino 2-ben7ylthio 2-méthylcyclohexyl l-carboxylique sont plus actifs sur le collag~ne natif que sur le collagène néoformé. Ils agissent à partir de la dose de 250 mg/kg per os.
Détermlnation de la toxicité aiguë:
Les composés selon l'invention ont été administrés par voie buccale à doses croissantes à des lots de 10 souris tsouche CD) pesant 20 g environ. Les animaux sont placés en observation pendant 8 ~ours et les morts, s'il y en a, sont dénombrés. La dose lethale moyenne est déterminée graphiquement. Selon les produits elle varie entre 1 et plus de 2 g. A titre de comparaison la DL50 de la D-pénlcillamine est de 8 g environ per os. 9 ~ the arcoylation of the thio derivative of formula VII is performed using a halide or an aromatic sulfonic ester coyle in the presence of a proton acceptor such as for example a trialcoylamine such as triethylamine, an aryl dialcoylamine such as NN dimethylamiline, a pyridic base such as pyridine, collidine, or lutidine; a dialcoyl al ~ oylcarbo-xamide such as dimethyl formamide or diethyl acetamide, or a basic reagent such as an alkali or alkali metal carbonate earthy, magnesium phosphate or magnesia.
The compounds obtained according to the methods of the invention are endowed with interesting pharmacological properties which make them suitable for use as active pharmaceutical ingredients. They handle especially immunosuppressive properties. They handle also have a favorable effect on the mechanical strength of the dermis and a protective effect on soluble collagen.
This is how on lots of CBA mice they entered ~ -a significant decrease in delayed contact hypersensitivity dee after painting with an oxazolone solution.
The compounds of formula I and their addition salts obtained according to the methods of the invention are administered in medi human or veterinary in the form of pharmaceutical compositions suitable for parenteral, oral, rectal administration or sublingual.
Pharmaceutical compositions may include in addition to another active principle of similar or complementary action :: :::::. ::;

~ 3 ~ 23S

or synergetic such as for example a p.aminophenyl sulfonamide such than sulfametoxazole or sulfapyridazine. The daily dosage lière varies from 100 mg to 2 g depending on the route of administration, the age of patient and the therapeutic indication.
As immunosuppressive agents they find a job ~
in the treatment of rheumatism, in organ transplants like for example, heart, liver, kidney or kidney transplants pancreas.
Among the compounds of general formula I, a distinction will be made the following subgroups:
l? the compounds of formula IA

CO - X
(CH ~ NH2, R2 (I ~) in which Rl, X and n are defined as above R2 and R3 are each hydrogen, one an alkyl radical or a substituted alkyl radical or a phenyl radical R4 is hydrogen or, when R2 and R3 are a phenyl radical, a phenyl radical 2) the compounds of formula IB

(Cl ~ COH2 X (B) R ~ Ar .:: - .. -::

, ~ ': -. ~.

~ L3 ~ 35 in which X, R and n have the meanings provided previously and Ar represents an aromatic radical not substituted or substituted selected from the group consisting of phenyl, substituted phenyl, thényl, furyl, thiazolyl, oxadiazolyl and pyridyl 3) the compounds of formula I
X (Ic) (D) ~

where X, R and n are defined as above D is a halogen, a trifluoromethyl, a amino, amino (lower alkyl) or wn (lower acyl) amino and n is a number varying from O to 3 4) the compounds of formula I

(CH2 ~ X2 (ID) RH

in which X, R and n have the meanings provided previously.
Among the compounds of formula I we will consider as deri ~ es of cyclohexane those for which n is equal to 1, of cyclohep-tane those for which n is equal to 2 and cyclooctane those for . ., ..:

. '' ~

~ L3 ~ 23 ~

which n is equal to 3.
However, the compounds for which n is equal to O or l.
Mention may be made of three examples of preferred compounds:
- 2-methyl 2-benzylthio l-amino cyclohexyl -1-carboxylic and its diastereoisomers.
- l-amino 2-benzylthio cyclohexyl -l-carboxylic acid - 2-methyl 2-methylthio l-amino cyclahexyl acid carboxylic - 2-benzylthio l-amino cyclopentyl l-carboxylic acid and its diastereoisomers - 2- (p.chlorophenylthio) l-amino cyclohexyl acid l-carboxylic acid and its diastereoisomers - 2-methyl 2-benzylthio l-amino cyclopentyl acid l-carboxylic - 2-mercapto l-amin.o cyclohexyl l-carboxylic acid - 2-mercapto l-amino cyclopentyl -l-carboxylic acid - 2- (thienyl-thio) l-amino cyclohexyl -l-carboxy- acid lique - 2-benzylthio l-amino cyclopentyl l-carboxylic acid.
Whenever they are obtained according to the processes con-formally to the invention.
The invention also includes, as intermediate products diaries, the spirohydanto ~ nes of formula V

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, ~ ~ H

S

where R, Rl and n have the definitions provided previously.
As far as the present invention is concerned, the term "lower alkyl" means hydrocarbon radicals having from 1 to 6 carbon atoms such as for example methyl, ethyl, iso propyl, dry butyl, neo pentyl, terbutyl or n-hexyl.
The term sryl designates a radical ~ aromatic character having 5 to 6 cha ~ nons and may include 1 or 2 hetero ~ omes. In besides this cycle can carry one or two substituents chosen from the group consisting of halog ~ nes, lower alkoxy, trifluo-romethyl, lower alkylthio, methylene dioxy, hydroxy and a lower alkyl.
The term lower alkenyl designates a hydrocarbon chain mono or polyethylenic bonée having 2 to 10 carbon atoms such as propenyle-2-S allyle, me ~ hallyle, 3,3-dimethyl allyl, but-2 enyl, penta 2,4-dienyl or triallyl methyl.
The following examples illustrate the invention. They don't limit it in any way.

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~ l3 ~ 23 S

Example I
dl acid 2-amino 2-methyl 2-ben ~ ylthiocyclohexyl -1 carboxylic (mixture of ~ and ~ isomers) Stage A 2-methyl 2-chloro cyclohexanone _______ After dissolving 112 g of 2-methyl cyclohexanone in 500 ml of carbon tetrachloride is added dropwise solution of 90 ml of thionyl chloride in 150 ml of tetrachlo carbon rure. The addition lasts 60 min and is carried out under strong agitation.

maintaining the temperature of the reaction medium at 15 approximately using a water bath. Agitation is then continued for an additional two hours. The mixture re-actionional is then washed three times with hydrochloric acid diluted, then twice with saturated bicarbonate solution of sodium and finally with a saturated solution of sodium chloride.
The organic phase is separated, dried over sodium sulfate, filtered then evaporated to dryness under reduced pressure. We get a dry residue weighing approximately 180 g which is purified by fractional distillation.
The main fraction distills at 85-90 ~ under 20 mm Hg.

nD - 1.4672 Stage B 2-methyl 2-benzythio cyclohexanone 126.5 g of 2-methyl 2-bromo cyclohexanone ob are dissolved.
held at the previous stage in 70 ml of ethanol. There is ~ a mix 82 g of benzylmercaptan and 26.4 g of sodium hydroxide in solution in 330 ml of ethanol. The mixture is brought to reflux for 15 min. he '' ~ 3L3 ~ 235 a pink color then appears. Then let the mixture at room temperature and the ethanol is evaporated. The residue oily is taken up in 400 ml of water and the suspension is exhausted with 3 times 25 ml of methylene chloride. The organic phases are combined, washed with water until neutral then dried, filtered and evaporated to dryness. The residue is purified by fractional distillation.
120 g of 2-methyl 2-benzylthio cyclohexanone are thus obtained, which distills at 142-144 (78% yield).
Stage C 2-methyl 2-benzylthiocyclohexyl l-spirohydanto ~ ne In an airtight stopper flask, introduce 2.5 g of potassium cyanide previously dissolved in 15 ml of water then a mixture of 11.7 g of 2-methyl 2-benzylthio cyclohe-~ custard apple, 0.6 g of a ~ monium carbonate and 40 ml of 60% ethanol.
The addition lasts about 15 minutes. The mixture is placed in a bath thermostatic at around 50 and maintained at this temperature for 45 hours with stirring. After this time the solvent in the reac ~ ion is evaporated and the dry residue is suspended in a mixture of 180 ml of water and 100 ml of ether. We act vigorously and the precipitate is isolated by filtration. We wash it with water and dries it to 50. This isolates 2.5 g of spirohydanto ~ not melting at 210. Concentration of mother liquors allows isolation of a second stream weighing 0.9 g. The overall yield is around 20%.

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,. : ::.:.,,,:.

~ L ~ 3 ~; 23S

Stage D Acid dl 2-methyl 2-ben7ylthio l-amino cyclohexyl l-carboxylic A solution of 63.1 g of barium hydroxide is prepared in 500 ml of hot water. The insoluble material is filtered after returning to the ordinary tempreature. The filtrate is added to a 30.5 g suspension of spirohydanto ~ only obtained in stage C in 150 ml of water. We understand then add the volume to 100 ml. The container is hermetically sealed closes and heats at 140 for 65 h. We then let the internal temperature at 90 and the liquid is poured into a flask conical. The walls of the airtight container are rinsed twice taken with a solution N of hydrochloric acid. The solutions acids are ~ outées to the reaction mixture. We then acidify the senble liquors at pH l by addition of hydrochloric acid.
Then neutralized by adding bicarbonate of sodium ~ up to a pH of 6.3. It appears ~ an insoluble and the mixture is left to rest overnight in a cooler. We exhaust the suspension at chloroform. We separate the chloroform phases which we filter and evaporates to dryness ~ The crystalline residue is ~ taken up in acid hydrochloric N and chromatographed on a column packed with resin carbo ~ ylique ion exchange (DOWE ~ XW8) *. After the solvent, the amino acid is eluted with an aqueous solution of triethyla-mine ~ until disappearance of the colored reaction to ninhydrin.

* Trademark .
~ ff, , After evaporation of the eluates under reduced pressure, we obtains 7 g of 2-benzylthio 2-methyl l-amino cyclohexyl l-carbo- acid xylic (25% yield). The product is recrystallized for analysis.
lysis of acetone. Its melting point is 215 Analysis; CH N02S = 279.40 CHNS%
Calculated 64.48 7.57 5.01 11.47 Found 64.20 7.20 5.00 11.32 This compound retains water very energetically and dehydrates it.
dratation requires heating to 150 for one hour.
IR spectrum: in agreement with the structure overall, no band specific.
NMR spectrum: in accordance with the structure, the integration of the fields magnetic is correct.
Example II
Dl l-amino 2-benzylthio cyclohexyl l-carboxylic acid Using the procedure of Example I at the start of the cyclo-hexanone, we successively obtain:
- 2-benzylthiocyclohexanone bo 07 = 128-132 (Rende-7270) - 2-ben ~ ylthiocyclohexyl l-spirohydanto ~ ne F = 216 - dl l-amino acid 2-benzylthio cyclohexyl -1 carboxy-lique (mixture of isomers) F = 220 (water recrystall) .; ~

:. '',:,. . ~

.:. ~:. ...

~ 13: ~ L235 Analysis; C14 H19 N02S ~ 265,377 CHNS ~
Calculate 63.40 7.35 5.29 12.0g Found 62.93 7.03 5.22 11.92 This compound is soluble in dilute hydrochloric acid.
Evaporation of the solution provides the hydrochloride. ~ `
Example III
Dl l-amino 2-thio cyclohexyl l-carboxylic acid (mixture of isomers) ~ after having condensed 100 ml of liquid ammonia in snow because bonique and acetone, the liquid is allowed to return to -30C and 3.2 g of sodium are then added freshly ~ cut in strips, by pe-keep portions until the mixture turns blue stable. 6 g of l-amino 2-benzylthiocyclohexyl acid are then added.
l-carboxylic obtained in Example II. The mixture is kept under shake for an hour and keep its blue color. The excess of reagent is decomposed by household addition of ammonium chloride.
The ammonlac is then allowed to evaporate at ordinary temperature. We then evaporates the acetone under reduced pressure. The dry residue is taken up in a few ml of water and the suspension is made acidic by addition of hydrochloric acid ~ l (up to pH 2). We then evaporate dried up. The residue is washed with acetone and then recrystallized from iso-propanol. 3 g of hydrochloride are thus obtained, still retaining small amounts of mineral salts. We purify it by returning in basic medium then transformation into hydrochloride. Hydrochloride pure bottom above 250.

. ~.

- 19 - ~
~ L ~ 3 ~ 3 ~

S% = 13.98 (~ theory 14.20) Solid NMR spectrum from 2.6 to 3.1 ppm (1 proton) (D20) Signals from 1.6 to 2.6 ppm corresponding to 10 protons including 2 singlets.
Example IV
Dl l-amino 2- (p.chlorophenylthio) cyclohexyl l-carboxylic acid (mixture of isomers) Using the operating mode of example I at the start cyclohexanone and replacing benzylmercaptan with p.chlorophenylthiol is obtained dl l-amino 2- acid (p.chlorophe-nylthio) cyclohexyl l-carboxylic (mixture of isomers). He melts above 250 (with dec.) Analysis C13 H16 Cl N2S a 285 ~ 8 CHN Cl S%
Calculate 54.64 5.644.90 12.41 11.22 Found 54.26 5.494.89 12.50 11.40 Example V
Dl l-amino 2-benzylthiocyclopentyl l-carboxylic acid (mixture isomers) By operating according to the operating mode of example I in departure from cyclopentanone, we obtain the acid dl l - amino 2-benzylthio-cyclopentyl l-carboxylic as a mono hydrate.
The melting point of this product cannot be determined with certainty.
study. Dl l-amino 2-benzylthiocyclopentyl l-carboxylic acid is . ~ `h ~

',:' ~ ',':

. !

'' 1 ~ 3: 1 ~ 3S

soluble in methane sulfonic acid diluted by heating to 40.
After evaporation of the solvent, the methane sulfonate is recovered.
Hydrate analysis: C13 H17 02NS.H20 = 269 CHNS%
Calculated 57.97 7.10 5.20 11.90 Found 58.69 7.05 5.20 12.46 Example VI
Dl 2-methyl 2-benzylthio l-amino cyclopentyl l-carboxylic acid Starting from ethyl 2-oxocyclopentyl l-carboxylate, the 2-methylcyclopentanone by methylation with methyl iodide in the presence of a strong base such as sodium hydride.
2-methylcyclopentanone is - conver ~ ie into dl acid 2-methyl 2-benxylthio l-amino cyclopentyl l-carboxylic by operating according to the procedure of Example I. It melts above 250 (with dec.). This amino acid is soluble in aqueous solutions diluted hydrochloric acid but insoluble in solutions aqueous alkali metal hydroxides.
Analysis: C14 Hlg N02S = 265.38 CHN%
Calculated 63.36 7.22 5.28 Found 63.34 7.07 to 5, ~ 8 In a similar way from 2-oxocyclopentyl -or cyclohexyl - or cycloheptyl - or ethyl cyclooctyl carboxylate and the appropriate alkylating agent, 2-methyl can be prepared, , ~ `' ~ l ~ 3: ~ 23 ~

2-isopropyl or 2-butyl cycloalcanones, necessary raw materials in obtaining l-amino acids 2-alkyl 2-thiocycloalkyl l-carbo-xylics.
Example VII
Dl l-amino 2- (thienylthio) cyclohexyl-l carboxylic acid ~ n using the operating mode of example I at the start 2-chlorocyclohexanone and tthienyl-2 ~ thiol, the acid is obtained dl l-amino 2- (thienylthio) cyclohexyl l-carboxylic acid as mixture of diastereoisomers.
This compound melts above 250. It is very soluble in aqueous potash.
AnalysisCll H15 N2S '257 ~ 378 CHNS%
Calculated 51.33 5.87 5.44 24.91 Found 51.42 6.04 5.70 24.81 Example VIII
Dl l-amino acid 2-thlocyclopentyl l-carboxylic acid Condense 900 ml of a ~ moniac in a cooling mixture acetone ~ dry ice at -70. 20 g of dl 1 amino 2- acid are added benzylthio cyclopentyl l-carboxylic at once then in small approximately 8 g fractions of freshly cut sodium fragments.
The mixture takes on a dark blue color. Let the everything for one hour then the reaction mixture is discolored by household addition of ammonium chlorideO Then the ammonia is left ': ~ `

~. . ~ ...,. ; . -,:: -. ''~, '''''' - 22 - ~

Z3 ~

evaporate at room temperature. The acetone solution is di-read with water and acidified with hydrochloric acid to a pH value of 2, The acid solution is chromatographed on a column of ion exchange resin DONEX 50W8 previously treated ~ hydrochloric acid and washed with water. After the effluent has passed, 1-amino 2-thiocyclopentyl-1-carboxylic acid is eluted with a aqueous triethylamino solution at 50 g / liter. We collect the eluates in 16 fractions of 25 ml. After evaporation of each fraction the thiol is collected in fractions 9 to 16. The thiol is washed with ether and then with ethanol. This gives 4.3 g of dl l-amino acid.
2-thiocyclopentyl l-carboxylic (yield 27%). It is soluble in water giving a solution of pH 6.4.
Analysis: C6 Hll N02S ~ 16: L, 32 CHNS%
Calculate 44.67 6, B7 8.68 l9, B7 Found 44.52 7.02 8.55 19.57 By reaction with triphenylmethyl chloride, one can block both the amine function and the thiol function. The group carboxylic can then be transformed into functional derivatives9 then esterifies or starches. We then unblock the amino groups and thiol by acetic hydrolysis.
Example IX
Separation of diastereoisomers of l-amino 2-benzylthiocy- acid clopentyl l-carboxylic.

, ::.,. . . ,,. ::

~ 13 ~ Z ~ 5 3.5 g of l-amino 2-benzylthio cycloheptyl acid l-carboxylic in solution in a mixture of chloroform and methanol. 801utio ~ is injected into a high pres-liquid phase ion equipped with a column packed with 1.5 kg of silica (10-40 ~) suspended in cyclohexanone.
The two diastereoisomers are elected successively. The products still retain mineral salts. They are still purified by preparative liquid chromatography (silica column 5.20 ~ RP8 ~ and elution with methanol. We recrystallize each diasté ~
reoisomer of ~ m chloroform / methanol / ester mixture.
The first isomer is collected in two ~ ets weighing at total 2 g (isomer ~). The second isomer is also obtained in 2 ~ ets (weight to ~ al 0.9 g isomer ~).
Isomer ~: melting point above 250, soluble in so-N / 10 aqueous methane sulfonic acid solutions.
Analysis; C13 H17 N2S = 251 ~ 35 + 2 ~ 5% water CH ~%
Calculates 62.12 6.82 5.57 12.76 Found 62.00 6.72 5.68 13.18 Isomer ~ melting point above 250 Analysis C13 ~ 17 N2S = 251 ~ 35 CHNS%
Calculate 62.126.82 5.57 12.76 Find 62,017.17 5.60 12.73 D

~ 3L3 ~; 235 Example X
Separation of the two diastereoisomers of l-amino 2-methyl acid 2-6enzylthio cyclohexyl l-carboxylic.
The two diastereoisomers are separated by phase chromatography high pressure liquid using a HPLC device from the firm Jobin and Yvon packed with a column loaded with 1.5 kg of silica (10-40 ~) suspended in cyclohexanone. We inject a solution 3 g of l-amino 2-methyl 2-benzylthio cyclohPxyl l-carboxy- acid lique in 100 ml of chloroform-methanol mixture. The two isomers are obtained successively and the eluates are brought to dryness. We obtains the first diastereoisomer in two jets (tatal weight 1.87 g).
The second diastereoisomer is obtained by recrystallization and at from the mother liquors (total weight 0.4 g). The weight report between the two diastereoisomers in the. initial mixture is approximately 75 for the isomer ~ - / 25 for the isomer ~.
Isomer ~: melting point 262 (with composition) soluble in soda N / 10 - ~ Y 15 21 2 CHNS%
Calculate 64.48 7.58 5.01 11.48 Found 64.39 7.39 5.14 11.82 Isomer ~: melting point: 260 (with decomposition) soluble in soda N / 10 ~ 13 ~ 35 Analysis C15 H21 N2S ~ 279 ~ 40 CHNS%
Calculate 64.48 7.58 5sO1 11.48 Found64.39 7.41 5.15 11.62 Exe ~
Separation of diastereoisomers of 1-amino 2-p chlorophenyl- acid thio cyclohexyi l-carboxylic.
Starting from 5 g of mixture of diastereoisomers and using the tec ~ niquF ~ of Example IX, 3 g of one of the isomers (isomers ~) are separated.
Dansles mother liquors we recover ~ ere in addition 1 g of this isomer of lower purity and 0.5 g of a mixture containing the second diastereoisomer contaminated with selc; minerals. The dias ~ ereoisomer thoroughly above 250 (with dec ~) F; on hydrochloride is very solu-ble in water.
Analysis of the hydrochloride: C13 H16 CL N02S, ClH ~ 322.27 CHNS Cl total ionic Calculated 48.45 5.32 4.35 9.95 22.00 11.00 Found 48.30 5.37 4.67 9.91 22.65 11.45 Example XII
Dl l-amino acid 2-methylthlo 2-methyl cyclohexyl ~ 1 carboxylic acid (mixture of diastereoisomers).
From 2-methylcyclohexanone and m ~ thylmercap-tan, we obtain according to the procedure of Example I the acid l-amino 2-methyl 2-methylthiocyclohexyl l-carboxylic.
F above 225 without net merger. It is very soluble in water.

- 26 - ~
~ L ~ L3 ~ 23 ~ i Analysis Cg H17 N02S = 203.31 CHNS ~
Calculate 53.17 8.43 6.89 15.77 Found53.24 8.59 6.97 15.93 L-amino acid 2-methylthio 2-methyl cyclohexyl l-carboxy-lique can also be obtained from 1 amino acid 2-ben-zylthio 2-methylcyclohexyl l-carboxylic by blocking the group amine as a triphenylmethyl amino derivative, debenzylation by hydrogenolysis, methylation of the thio group then detritylation by acid of aqueous acetate.
Example XIII
Tablets containing 250 mg of 2-methyl 2-benzylthio l-aminocY- acid clohexyl l-carboxylic (mixture of dias ~ tereoisomers).
2-methyl 2-benzylthio l-amino cyclohexyl l-carboxylic acid 2,500 kg starch from my ~ s ~ ............................................ .. 0.250 k8 wheat starch ............................................... 0.250 kg ethyl cellulose .............................................. 0.040 kg magnesium silicate ........................................ 0.150 kg talc ................................................. ........ 0.100 kg formulated casein ................. ~ ........................... 0.025 kg lactose ................................................. ..... 0.200 kg per 10,000 tablets with an average weight of 0.35 g Example XIV
Pharmacological study of the compounds according to the invention.
The products according to the invention are amino acids ~ -thiol or thioester which have been synthesized and tested in the . ~.

~ 3 ~; 235 perspective of active products on the connective tissue: on the polymerization of collagen by a mechanism analogous to D-pe-nicillamine according to the descriptions of JAFFE and NIMMI and on the action _D-penicillamine immunosuppressive, by a different mechanism that of corticoYdes, alkylating agents or antimetabo-lites.
The compounds according to the invention were tested mainly-lie in these two directions. In this series we found products of imm ~ modepressive activity: their mode of action is approaching se ~ of D- ~ penicillamine or antimetaboli ~ es, other pro active duits on con ~ onctive tissue and also immunosuppressants.
TECHNICAL
Immunosuppression: the delayed contact hypersensitivity test to oxazolone described by Phanuphak et al. ~ J. of Immunol 1974, 112-115) has been modified to obtain a T cell response purely pure. In short, awareness of mice ~ CD ~ 25-27 g ~
is done by percutaneous dorsal application with a solution oleoacetonic (1/4) with 3% oxazolone; the challenge takes place 5 days afterwards, also by contact at the level of the ear, with a solution has 3% oxa ~ olone in the same solvent. The reaction is read 24 and 48 hours later. The thickness of the infiltration is measured, the number of responder animals below a threshold ~ is noted. Animals are treated either 3 ~ i: 2 days before the day of sensitization tion either single dose, 2 ~ bear after awareness.

, ~.

- 28 - ~
~ L ~ L3 ~ Z3S

Synthesis and polymerization of collagen they are studied globally balancing by physical resistance to tissue elongation, me-measured by gauge according to the technique of JAFFE et al. (Science 1968, 161, 1016). The resistance of the newly formed post-scar connective tissue is measured 8 days after the injury, the treatment taking place from 5th to 7th day; the resistance of the native dermis is measured after 9 days of treatment.
RESULTS
Unimpressive activity: for reference products the activity quickly is found at high dose, but we are dealing with trai ~
tements per single dose (d + 2) or relatively short (; - 2, - 17 O) while these products require a certain impregnation to manifest their effects. Two types of activity are found:
1) During awareness-raising, for antimetabolites, alkylating agents and corticosteroids.
2) Before sensitization for D penicillamine and cycloleucine.
The compounds according to the invention at doses of 50 to 200 mg / kg have an action either during awareness-raising or before sensitization.
Activity on the conjective tissue;
We can establish the activity of D-penicillamine on this test as reference substance at a dose of 250 mg / kg. The cor-Sonic also have an efficiency. On the other hand ~,, 1 : '',:.

- 2 ~ -, ~ 3 ~ '~ 35 metabolites and alkylating agents have no effect because already too toxic.
The compounds according to the invention and in particular the acid l-amino 2-ben7ylthio 2-methylcyclohexyl l-carboxylic are more active on native collag ~ only on newly formed collagen. They act from the dose of 250 mg / kg per os.
Determination of acute toxicity:
The compounds according to the invention were administered by oral route at increasing doses to batches of 10 CD tsouche mice) weighing approximately 20 g. The animals are placed under observation for 8 ~ bears and the dead, if any, are counted. Lethale dose mean is determined graphically. Depending on the product it varies between 1 and more than 2 g. For comparison, the LD50 of the D-penlcillamine is approximately 8 g per os.

Claims

The embodiments of the invention about which a exclusive property right or lien is claimed are defined as follows:

1) A process for obtaining the compounds of formula I

(I) in which R is hydrogen or an alkyl radical inferior, R 'is hydrogen, an alkyl radical unsubstituted lower radical, a lower phenylalkyl radical, a phenyl radical substituted by a halogen, a thienyl radical.
X is hydroxy, and n varies from 0 or 1 characterized in that a cycloalkanone of formula II

(II) in which R and n have the previous meanings to the action of a halogenating agent to form an .alpha.-halogenoketone of formula III
(III) in which Hal is a halogen other than fluorine and R and n have the meanings before which are reacted with a mercaptan of formula in which R1 is a lower alkyl radical, a aryl radical or a benzyl radical to form the thio derivative of formula IV

(IV) in which the substituents R, R1 and n are defined like before, reacts the latter with an alkali metal cyanide and an ammonium salt under the conditions of the Strecker Reaction for form a hydantoin spiro of formula V

(V) in which R, R1 and n have the previous meanings then hydrolyzes the latter in an alkaline medium to provide an amino acid of formula VI

(VI) in which the substituents R, R1 and n are defined like before that we submit, if necessary when R1 is a radical benzyl, to debenzylation to form a thio derivative of formula VII

(VII) that it is possible in a later stage to alkylate, alkenyl, aryl or aralkyl by the action of an al-coylation, alkenylation, arylation or aralkoylation, for obtain an amino acid of formula VIII

(VIII) in which R and n have the meanings four-previously denied and R 'is hydrogen, a radical unsubstituted lower alkyl, a lower phenylalkyl radical, a phenyl radical substituted by a halogen, a thienyl radical.
2) A method according to claim 1 in which the compound of formula I is converted to a salt by addition of an acid mineral or organic or a mineral or organic base.
3) A method according to claim 1 wherein separates diastereoisomers or optical isomers from compounds of formula I by condensation with a chemical reagent or by a physical method.
4) A method according to claim 1 wherein the halogenation of the cycloalcanone of formula II is carried out at using a halogenating agent, chlorine.

5) A method according to claim 4 wherein the agent of halogenation is chosen from bromine, an N-halogeno amide, an N-haloimide, an alkyl hypochlorite or a perhaloge-pyridium nure.

6) A method according to claim 1 wherein the halo-generation is carried out in an inert solvent, preferably polar.

7) A method according to claim 6 wherein the solvent inert, preferably polar, is chosen from dioxane, pyridine, dimethylacetamide, diethylacetamide, dimethylsulfoxide, hexamethylphosphorotriamide or acetic acid.

8) A method according to claim 1 wherein the method densification of the alpha.-Halogeno alkanone of formula III and the mercaptan of formula R, SH is carried out either in basic medium or after having converts mercaptan to a metal derivative.

9) A method according to claim 1 wherein the conden-sation of the alpha.-thioketone of formula IV and the alkali metal cyanide is carried out in the presence of ammonium carbonate as a source of ammonia niac.

10) A method according to claim 1 wherein the hydro-lysis of the spirohydantoin of formula V is carried out using a moderate alkaline agent.

11) A method according to claim 10 wherein the agent moderate alkaline is chosen from sodium carbonate, carbonate lithium or barium hydroxide.

12) A method according to claim 1 wherein the deben-zylation of the .alpha.-benzylthio amino acid of formula VI is carried out by hydrogenolysis in the presence of a platinum family catalyst or by reduction using an alkali metal.

13) A method according to claim 1 wherein the re-alkylation action of the thiol of formula VII is carried out using an alkylating agent.

14) A method according to claim 13 wherein the agent alkylation is chosen from an alkyl halide, a sulfate alkyl, an epoxyalkane in basic medium.

15) A method according to claim 1 in which prepare 2-methyl 2-benzylthio 1-amino cyclohexyl 1-car- acid boxylic acid and its diastereoisomers by subjecting 2-methyl cyclo-hexanone to the action of a brominating agent to form 2-methyl 2-bromocyclohexanone, condenses it with benxylmercaptan into basic medium, obtains the 2-methyl 2-benzyl cyclohexanone which is reacts with potassium cyanide and ammonium carbonate, obtains a 1-spirohydantoin which is hydrolyzed by the barite to get 1-amino 2-methyl 2-benxylthio cyclo hexane 1-carbo-xylic which is split if desired into its diastereoisomers.

16) A method according to claim 3 in which one prepare 2-methyl 2-benzylthio 1-amino cyclohexyl 1-car- acid boxylic acid and its diastereoisomers by subjecting 2-methyl cyclo-hexanone to the action of a brominating agent to form 2-methyl 2-bromocyclohexanone, condenses it with benxylmercaptan into basic medium, obtains the 2-methyl 2-benzyl cyclohexanone which is reacts with potassium cyanide and ammonium carbonate, obtains a 1-spirohydantoin which is hydrolyzed by the barite to get 1-amino 2-methyl 2-benxylthio cyclo hexane 1-carbo-xylic which is split if desired into its diastereoisomers.

17) A method according to claim 1 wherein part of cyclohexanone to obtain 1-amino 2-benzylthio acid 1-carboxylic cyclohexyl which, if desired, is converted into its hydrochloride.

18) A method according to claim 2 wherein part of cyclohexanone to obtain 1-amino 2-benzylthio acid 1-carboxylic cyclohexyl which, if desired, is converted into its hydrochloride.

19) A method according to claim 1 wherein part of 2-methyl cyclohexanone to obtain 1-amino acid 2-methyl 2-methylthio cyclohexyl 1-carboxylic 20) A method according to claim 1 wherein part of cyclopentanone to obtain 1-amino 2-benzylthio acid 1-carboxylic cyclopentyl which can, if desired, be split into its diastereoisomers.

21. A method according to claim 3 in which part of cyclopentanone to obtain 1-amino 2-benzylthio acid 1-carboxylic cyclopentyl which can, if desired, be split into its diastereoisomers.

22) A method according to claim 1 wherein at departure of cyclohexanone and p.chlorophenylthiol we obtain 1-amino2- (p.chlorophenylthio) cyclohexyl 1-carboxylic acid as one can, if desired, split into its diastereoisomers.

23) A method according to claim 3 wherein in departure of cyclohexanone and p.chlorophenylthiol we obtain 1-amino2- (p.chlorophenylthio) cyclohexyl 1-carboxylic acid as one can, if desired, split into its diastereoisomers.

24) A method according to claim 1 in which we start 2-methyl cyclopentanone to obtain 1-amino 2-benzyl- acid thio 2-methyl cyclopentyl 1-carboxylic.

25) A method according to claim 12 in which we start from 2-benzylthiocyclohexanone to obtain 1-amino 2-mercapto cyclohexyl 1-carboxylic acid.

26) A method according to claim 12 in which we start from 2-benzylthiocyclopentanone to obtain 1-amino 2-mercapto cyclopentyl 1-carboxylic acid.

27) A method according to claim 1 wherein at departure of cyclohexanone and (thienyl-2) thio the acid is prepared 1-amino 2- (thienylthio) cyclohexylcarboxylic.

28) A method according to claim 1 wherein at departure from cyclopentanone, 1-amino 2-benxylthio acid is obtained 1-carboxylic cyclopentyl.

29) Cyclic amino acids of formula I

(I) in which R is hydrogen or an alkyl radical inferior Is hydrogen, an alkyl radical lower, an unsubstituted lower alkyl radical; a radical lower phenylalkyl, a halogen-substituted phenyl radical and a thienyl radical X is a hydroxyl, and n varies from 0 or 1.
Whenever they are obtained by the process of claim 1 one of their equivalents obvious chemicals.

30) The salts of the compounds of formula I according to the claim tion 1, with a mineral or organic acid, or with a base mineral or organic, preferably therapeutically compatible, each time they are obtained according to the method of claim 2 or one of its obvious chemical equivalents.

31) The erythro and threo diastereoisomers of the compounds of formula I according to claim 1 as well as their optically-active, each time they are obtained according to the resale process dication 3 or one of its obvious chemical equivalents.

_ 32) A compound according to claim 29, namely the acid 1-amino 2-benzylthio Cyclopentyl 1-carboxylic, as long as it is obtained according to the process of claim 20 or one of its obvious chemical equivalents.

33) A compound according to claim 29, namely the acid 1-amino 2-mercapto cyclohexyl 1-carboxylic acid or its hydrochloride.
Whenever they are obtained according to the method of claim 25 or one of its obvious chemical equivalents.

34) A compound according to claim 29, namely the acid 2-methyl 2-benzylthio 1-aminocyclopentyl 1-carboxylic, each time that it is obtained according to the method of claim 24 or one of its obvious chemical equivalents.

35) A compound according to claim 29, namely, the acid

1-amino 2-benzylthio cyclohexyl 1-carboxylic acid or its hydrochloride each time they are obtained according to the method of claim 17 or one of its obvious chemical equivalents.

36) A method according to claim 29, namely the acid 2-methyl 2-methylthio 1-aminocyclohexyl 1-carboxylic each time that it is obtained according to the process of claim 19 or one of its obvious chemical equivalents.

37) A compound according to claim 29, namely the acid 2- (p.chlorophenylthio) 1-amino cyclohexyl 1-carboxylic and its dias-tereoisomers each time they are obtained by the method of claim 22 or one of its obvious chemical equivalents.

38) A compound according to claim 29, namely the acid 2-mercapto 1-amino cyclopentyl 1-carboxylic whenever it is obtained according to the process of claim 26 or one of its equivalents slow.

39) A compound according to claim 29, namely the acid 2- (thienyl-thio) 1-aminocycloexyl 1-carboxylic whenever it is obtained according to the process of claim 27 or one of its equivalents obvious chemical valents.

40) A compound according to claim 29, namely the acid 2-benzylthio 1-amino cyclopentyl 1-carboxylic whenever it is obtained according to the method of claim 28.

41) A compound according to claim 29, namely the acid 2-methyl 2-benzylthio 1-amino cyclohexyl 1-carboxylic and its dias-tereoisomers each time they are obtained by the method of claim 15 or one of its obvious chemical equivalents.

42) A compound according to claim 29, namely the acid

2-methyl 2-methylthio 1-aminocyclohexyl 1-carboxylic each time that it is obtained according to the process of claim 19 or one of its obvious chemical equivalents.