BRPI0901321B1 - Composição farmacêutica e seu uso - Google Patents

Abstract

composição farmacêutica, método de tratamento e/ou prevenção de distúrbios mitocondriais utilizando dita composição, uso de dita composição e processo de preparação de dita composição. a presente invenção se refere a uma composição farmacêutica compreendendo: racetam e carnitina. a composição da invenção pode, adicionalmente conter coenzima q10 e/ou um agente terapêutico associado a distúrbio mitocondrial e/ou metabólico, tal como um agente hipocolesterolêmico do grupo das estatinas, um agente hipoglicêmico, ou um agente antiepiléptico. a invenção ainda inclui um método de tratamento de distúrbios mitocondriais compreendendo a administração da composição farmacêutica da invenção.

Description

Campo da Invenção

[0001] A presente invenção refere-se a uma composição farmacêutica compreendendo: (a) uma combinação de racetam e carnitina e (b) um veiculo farmaceuticamente aceitável. Preferencialmente, a composição farmacêutica da invenção compreende: (a) uma combinação de piracetam e carnitina e (b) um veiculo farmaceuticamente aceitável. A composição da invenção pode incluir, adicionalmente, coenzima Q10, e, opcionalmente um agente terapêutico associado a distúrbio mitocondrial e/ou metabólico, por exemplo, agente hipocolesterolêmico, preferencialmente estatinas, agente antiepilético, agente hipoglicêmico, dentre outros. A invenção também diz respeito a um método para tratamento e/ou profilaxia de distúrbios mitocondriais, incluindo Mal de Alzheimer e Doença de Parkinson. A invenção ainda abrange o uso da referida associação na preparação de medicamento para o tratamento e/ou profilaxia de distúrbios mitocondriais, incluindo Mal de Alzheimer e Doença de Parkinson.

Fundamentos da Invenção

[0002] Nos últimos anos, pesquisas indicam que um amplo espectro de doenças vem sendo associado com variações na função mitocondrial, incluindo doenças hereditárias e disfunções mitocondriais associadas com o envelhecimento e com doenças neurodegenerativas relacionadas com o processo de envelhecimento, por exemplo, o Mal de Alzheimer e a Doença de Parkinson. Maiores detalhes sobre condições médicas relacionadas com disfunções mitocondriais são encontrados no trabalho de Maruszak e colaboradores (Maruszak, A., Gauweda-Walerich, K., Soltyszewski, I. e Zekanowski, C. "mitochondrial DNA in pathogenesis of Alzheimer's and Parkinson's diseases". Acta Neurobiol Exp 2006, 66:153-176) .

[0003] Também estão incluídas nas condições médicas relacionadas com disfunções mitocondriais as miopatias mitocondriais, ou seja, um grupo de doenças neuromusculares causadas por danos nas mitocôndrias. Apesar de não haver tratamento especifico para nenhuma das miopatias mitocondriais, são recomendadas, para minorar os sintomas dessas doenças, a terapia fisica e terapias com vitaminas, por exemplo, riboflavina, com coenzima Q (CoQlO) e com carnitina (ver "Mitochondrial Miopathies Information Page", disponível na Web em http://www.ninds.nih.gov/disorders/mitochondrial myopathy/mitochondrial myo pathy.htm, acessado em 18/01/08) .

[0004] Embora não esteja ainda disponível tratamento eficaz dos distúrbios mitocondriais, vêm sendo desenvolvidas algumas abordagens, essencialmente envolvendo terapia gênica e terapia metabólica. No caso desta última, a creatina apresentou resultados positivos em um estudo clinico realizado com 81 indivíduos (ver Zeviani, M. e Di Donato, S. "Mitochondrial disorders", Brain 2004 127(10):2153-2172; doi:10.1093/brain/awh259). Zeviani e Di Donato também mencionam que, embora a coenzima Q10 (CoQlO) não tenha uma ação eficaz sobre doenças mitocondriais, ela melhora os efeitos da deficiência da CoQlO. Em outras palavras, Zeviani e Donato confirmam o efeito positivo da administração de coenzima Q10 nos casos em que a deficiência dessa coenzima repercute negativamente nas condições médicas vinculadas a doenças mitocondriais.

[0005] Vale, ainda, citar a possível contribuição do dano às mitocôndrias na causa dos efeitos adversos da terapia de hipercolesteromia baseada em estatinas, uma vez que foi demonstrado que o referido fármaco promove a transição de permeabilidade mitocondrial (ver, Velho, J.A., Okanobo, H., Degasperi, G.R., Matsumoto, M.Y., Alberici, L.C., Cosso, R.G., Oliveira, H.C.F. e Vercesi, A.F. "Statins induce calciumdependent mitochondrial permeability transition". Toxicology 219 (2006) 124-132) .

[0006] A transição de permeabilidade mitocondrial (MPT - "mitochondrial permeability transition") é um processo de permeabilização não-seletivo da membrana mitocondrial mais interna e que é tipicamente promovida pelo acúmulo de quantidades excessivas de ions cálcio e por uma série de variados compostos e condições médicas. A permeabilização da membrana mitocondrial mais interna causada pela MPT resulta em perda de componentes da matriz mitocondrial, dano da funcionalidade mitocondrial e substancial intumescimento de organelas, com conseqüente ruptura da membrana mitocondrial mais externa e liberação de citocromo C.

[0007] A relação entre o excessivo acúmulo de cálcio mitocondrial e a MPT é o estresse oxidativo. A comprovação desse fato se baseia em uma grande quantidade de experimentos utilizando células intactas em que a morte celular induzida por condições envolvendo MPT pode ser evitada pelo uso de antioxidantes (ver A.J. Castilho R.F. and Vercesi A.E. Mitochondrial permeability transition and oxidative stress- Kowaltowski- FEES Letters 495 (2001) 12-15).

[0008] A MPT induzida por cálcio é aumentada por uma variedade de compostos denominados indutores, os quais incluem fosfatos inorgânicos, oxidantes de nucleotideos piridinicos, estatinas e hormônios tireoidianos. A maioria desses indutores é capaz de aumentar o estresse oxidativo mitocondrial induzido por cálcio ou reagir com grupos tiol de proteina de membrana.

[0009] Moléculas do grupo racetam são definidas como uma classe de drogas nootrópicas que possuem um núcleo de pirrolidina. O termo "drogas nootrópicas" refere-se à classe de compostos que aumentam o desempenho cognitivo no ser humano. As referidas moléculas ativam receptores tipo glutamato que são co- localizados com receptores colinérgicos, promovendo assim sua atividade no melhoramento do desempenho cognitivo humano.

[0010] O piracetam (2-oxo-pirrolidona) foi o primeiro fármaco do grupo racetam a ser identificado, em meados dos anos 1960 (ver patente GB 1039113). O referido composto é normalmente utilizado em demência causada por Alzheimer e outras doenças neuro-degenerativas e/ou associadas com o envelhecimento e redução de capacidades cognitivas e de memória.

[0011] Uma das mais importantes características do piracetam é a sua capacidade de melhorar a energia cerebral, especialmente sob condições de déficit de ATE (adenosina trifosfato).

[0012] Os resultados de experimentos em ratos realizados por Bogolepov et al (Bogolepov NN, Gusev EI, Burd GS, Buklina SB. [Ultrastructural aspects of acute cerebral ischemia during nootropil administration (experimental study)] Zh Nevropatol Psikhiatr Im S S Korsakova. 1983;83(7):984-90) sugerem a existência de uma conexão entre a capacidade de o Piracetam normalizar o metabolismo de ATP, estimular a sintese de fosfolipidios e a função ribossômica e aumentar a utilização de glicose.

[0013] Em conformidade com a lógica de Bogolepov et al, outros estudos realizados em animais mostraram que o Piracetam acelera o restabelecimento do animal a partir de um estado de hipoxia. Um estudo clinico controlado, divulgado em 1989, indicou um efeito "significativamente positivo"do Piracetam no aumento do fluxo sangüineo cerebral, da taxa metabólica de utilização de oxigênio cerebral e da taxa metabólica de glicose cerebral com relação à função cerebral humana cronicamente comprometida, como no caso de demência senil do tipo Alzheimer (vide South MA James, "Piracetam - the original nootropic", disponível na Web em http : / / www. smart-drugs . com/ ias-piracetam. htm, acessado em 18/01/08) .

[0014] Importantes também são as descobertas de Novikov et al. (Novikov VE, Kovaleva LA. [The effect of nootropic agents on brain mitochondrial function in the dynamics of craniocerebral trauma from the age aspect] Eksp Klin Farmakol. 1998 Mar- Apr; 61 (2) :65-8) e Gabryel et al. (Gabryel B, Adamek M, Pudelko A, Malecki A, Trzeciak HI, Piracetam and vinpocetine exert cytoprotective activity and prevent apoptosis of astrocytes in vitro in hypoxia and reoxygenation. NeuroToxicol (2002) 1:19- 31) . Novikov et al. mostraram que o Piracetam evita modificações mitocondriais e melhora a capacidade das mitocôndrias durante o desenvolvimento de edema traumático do cérebro. Por sua vez, Gabryel et al., em um estudo in vitrosobre uma possivel ação protetora de Piracetam e Vinpocetina contra danos de hipoxia de astrócitos, verificaram que esses fármacos reduzem significativamente o número de células apoptóticas durante condições de hipoxia. 0 efeito apoptótico desses fármacos foi corroborado pelas seguintes condições: (i) estimulo da função mitocondrial, (ii) aumento de ATP intracelular e (iii) inibição da atividade de caspase-3.

[0015] Por todas essas características benéficas, o Piracetam vem sendo sugerido para uso em diversos tratamentos de distúrbios neurais. Por exemplo, no documento US 5668117 é mencionado que o Piracetam pode ser combinado com agentes de captura de carbonila no tratamento de doenças neurológicas e sintomatologia clinica etiologicamente relacionada com tais doenças em razão da sua possivel ação sobre condições médicas de degeneração de neurônios associada ao processo de envelhecimento. Adicionalmente, no documento US 7226916 é descrito que o Piracetam é apropriadamente incluido em preparações farmacêuticas que se destinem ao tratamento de degeneração da função cerebral, preparações essas que podem incluir, também, Coenzima Q10.

[0016] Keil e colaboradores (ver Keil U., Scherping I., Hauptmann S., Schuessel K. , Eckert A., Müller W.E. "Piracetam improves mitochondrial dysfunction following oxidative stress". British Journal of Pharmacology (2006) 147, 199-208. doi:10.1038/sj.bjp.0706459; publicado online em 14 de novembro de 2005) realizaram um importante trabalho sobre os benefícios do Piracetam relativos às ações nootrópica e de redução dos sintomas neuropatológicos causados pelo envelhecimento. Nessa publicação é mencionado que esse fármaco tem a capacidade de melhorar a disfunção mitocondrial associada com o stress oxidativo e/ou com o envelhecimento.

[0017] A carnitina, também conhecida como vitamina BT, é um composto de amónio quaternário que está presente, principalmente, em músculo de animais vertebrados, sendo produzido in vivo. A carnitina está envolvida no processo de transferência de ácidos qraxos através das membranas mitocondriais. A deficiência de carnitina primária é uma condição médica que impede o corpo de usar gordura para produzir energia. A carnitina pode estar nas formas D-carnitina, L- carnitina, DL-carnitina, acetil-L-carnitina, alcanoil-L- carnitina, propinoil-L-carnitina, butiril-L-carnitina, valeril- L-carnitina e isovaleril-L-carnitina (ver "Primary carnitine deficiency", disponível na Web em http://ghr.nlm.nih.gov/condition=primarycarnitinedeficiency, e "Carnitine Information Page", disponível na Web em http : //WWW, anyvitamins ■ com/carnitine-info . htm, ambos acessados em 18/01/08, e WO 9901126) . É também conhecido o fato de que a acetil-L-carnitina tem ação sobre doenças neurodegenerativas, tais como Mal de Alzheimer e Doença de Parkinson (ver "Acetyl- L-carnitine", disponível na Web em http://www.pdrhealth.com/drugs/altmed/altmed- mono.aspx?contentFileName=ame0463.xml&contentName=Acetyl-L- carnitine&contentld=618, acessado em 18/01/08) .

[0018] Pastorino et al. (ver Pastorino JG, Snyder JW, Serroni A, Hoek JB, Farber JL.Cyclosporin and carnitine prevent the anoxic death of cultured hepatocytes by inhibiting the mitochondrial permeability transition. J Biol Chem. 1993 Jul 5;268(19):13791-8) estudaram o efeito da L-carnitina sobre o dano mitochondrial. Eles mostraram, em seu estudo, que existe uma estreita correlação entre a inibição do transporte de elétrons mitocondriais resultante do tratamento com L-carnitina e a prevenção da transição de permeabilidade em mitocôndrias isoladas de cultura de hepatócitos. A capacidade de a L-carnitina proteger hepatócitos em cultura é uma conseqüência de sua capacidade de evitar a transição de permeabilidade mitocondrial. Portanto, tanto a morte celular induzida por anoxia quanto a inibição de transporte de elétrons estão associados com as modificações mitocondriais relacionadas com mecanismo independente da manutenção do potencial da membrana e das reservas celulares de ATP.

[0019] A Coenzima Q, também denominada de co-enzima Q10 (2,3- dimetoxi-5-metil-6-decaprenil benzoquinona), CoQlO, ubiquinona, ubidecarenona e vitamina Q10, é um composto derivado das benzoquinonas encontrado na maioria dos tecidos humanos e que possui papel importante na produção de ATP. É conhecido o fato de que a CoQlO tem ação, comprovada cientificamente, em uma série de condições médicas, tais como hipertensão, Mal de Alzheimer, angina, cardiomiopatia, distrofias musculares, Doença de Parkinson, dentre outras (ver: (i) "Introduction to Coenzyme Q10", disponível na Web em http://faculty.Washington.edu/ely/coenzqlO.html, e " COenZ yme Q10 " , disponível na Web em http: //www.mayoclinic. com/health/coenzyme- glO/NS patient-coenzymeqlO, ambos acessados em 18/01/08) .

[0020] Em razão de suas ações benéficas sobre o metabolismo, a carnitina e a Coenzima Q10 vêm sendo utilizadas em terapias de condições médicas que envolvam processos neurodegenerativos ou cardiopáticos, especialmente quando o indivíduo sob tratamento precisa fazer uso de um fármaco do grupo das estatinas.

[0021] A prescrição de estatinas frequentemente visa a prevenção efetiva e a redução de risco do desenvolvimento de doenças das artérias coronarianas pela redução dos níveis sangüíneos de colesterol. Apesar de grande quantidade de testes clínicos ter revelado a eficácia e relativa segurança das estatinas, diversos efeitos adversos têm sido relatados, os quais são concernentes, principalmente, à função hepática, ao músculo esquelético e aos nervos periféricos. As miopatias são os efeitos adversos relatados com mais freqüência. De fato, a principal razão da descontinuação do tratamento de hipercolesterolemia com estatinas é, em geral, o surgimento de dores musculares.

[0022] É sabido que as estatinas causam efeitos adversos, especialmente em regime de tratamento prolongado. Chapman e Carrie (Chapman, J. e Carrie, A.; "Mechanisms of Statin-Induced Myopathy - A Role for the Ubiquitin-Proteasome Pathway?"; Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. 2005; 25; 2441-2444) fazem um relato detalhado sobre os efeitos colaterais causados pelas estatinas, especialmente aqueles relacionados com a influência da terapia de colesterol e dos distúrbios do metabolismo da ubiquinona (CoQlO) sobre o músculo esquelético humano e a função mitocondrial.

[0023] Em vista desses efeitos adversos, vêm sendo propostas associações de estatinas com fármacos com atuação no metabolismo e/ou função mitocondrial, essencialmente a CoQlO e a carnitina. Podem ser citados como exemplos de tais associações: - Coenzima Q10 e estatina - descrita em WO0243721; US2002058026; WO0185155; US5316765; EP383432; e - carnitina e estatina - descrita em W02000074675; WO9901126;

[0024] Outro exemplo representativo de efeitos adversos causados por agentes terapêuticos associados a distúrbio mitocondrial e/ou metabólico é o grupo dos fármacos antiepilépticos (anticonvulsivantes). É sabido que esses agentes terapêuticos influenciam negativamente o metabolismo ósseo em virtude de várias anormalidades bioquímicas do metabolismo ósseo, incluindo hipocalcemia, hipofosfatemia, baixos niveis de vitamina D e aumento no PTH (hormônio para tiroidiano) (ver, Valsamis, H.A., Arora, S.K., Labban, B. e McFarlane, S.I. "Antiepileptic Drugs and Metabolism". Nutrition & Metabolism 2006, 3:36) .

[0025] Como mostrado na descrição do estado da técnica, não está disponível, até agora, uma associação de fármacos que conjugue os efeitos benéficos de compostos da classe racetam (por exemplo, piracetam) com os da carnitina. Adicionalmente, não há nenhum medicamento que combine tal associação com CoQlO, ou com agentes terapêuticos relacionados a distúrbio mitocondrial e/ou metabólico, visando reduzir os efeitos adversos das terapias baseadas em agentes de tratamento de ditos distúrbios, por exemplo, agentes hiporcolesterolêmicos, hipoglicêmicos, antiepilépticos, dentre outros.

Sumário da Invenção

[0026] A presente invenção tem por objeto composições farmacêuticas e método para o tratamento e profilaxia de uma condição médica, incluindo um processo degenerativo, uma doença, um efeito adverso de uma terapia ou toxicidade de um fármaco induzido por disfunção ou distúrbio mitocondrial. Assim, a invenção visa o provimento de uma composição farmacêutica baseada no efeito sinergistico da associação de pelo menos um composto da classe racetam com a carnitina. Adicionalmente, a invenção refere-se ao provimento de uma combinação da associação de pelo menos um composto da classe racetam e carnitina com Coenzima Q10 e, adicionalmente, com um agente terapêutico associado a distúrbio mitocondrial e/ou metabólico para minimizar os efeitos adversos de dito agente. De acordo com a invenção, a associação de pelo menos um composto da classe racetam + carnitina e a CoQlO e o agente terapêutico associado a distúrbio mitocondrial e/ou metabólico podem estar na mesma forma farmacêutica ou em formas farmacêuticas separadas.

[0027] Em uma primeira concretização, é provida uma composição farmacêutica compreendendo: (a) uma quantidade terapeuticamente eficaz de pelo menos um composto da classe racetam ou seu sal farmaceuticamente aceitável ou seus isômeros; (b) uma quantidade terapeuticamente eficaz de carnitina ou seu sal farmaceuticamente aceitável ou seus isômeros e (c) um veiculo farmaceuticamente aceitável. Preferencialmente, a carnitina utilizada na composição da invenção é selecionada do grupo consistindo de L-carnitina, D-carnitina, DL-carnitina, acetil- L-carnitina, alcanoil-L-carnitina, propinoil-L-carnitina, butiril-L-carnitina, valeril-L-carnitina e isovaleril-L- carnitina. Mais preferencialmente, de acordo com a invenção, a carnitina é L-carnitina.

[0028] Em uma segunda concretização, é provida uma composição farmacêutica compreendendo: (a) uma quantidade terapeuticamente eficaz de pelo menos um composto da classe racetam ou seu sal farmaceuticamente aceitável ou seus isômeros; (b) uma quantidade terapeuticamente eficaz de carnitina ou seu sal farmaceuticamente aceitável ou seus isômeros; (c) uma quantidade terapeuticamente eficaz de Coenzima Q10 e (d) um veiculo farmaceuticamente aceitável.

[0029] Em uma terceira concretização, é provida uma composição farmacêutica compreendendo: (a) uma quantidade terapeuticamente eficaz de pelo menos um composto da classe racetam ou seu sal farmaceuticamente aceitável ou seus isômeros; (b) uma quantidade terapeuticamente eficaz de carnitina ou seu sal farmaceuticamente aceitável ou seus isômeros; (c) uma quantidade terapeuticamente eficaz de pelo menos um agente terapêutico associado a distúrbio mitocondrial e/ou metabólico; e (d) um veiculo farmaceuticamente aceitável. Nesta concretização, também, a composição pode conter, adicionalmente à associação de piracetam com carnitina, uma quantidade terapeuticamente eficaz de Coenzima Q10. Preferencialmente, o agente terapêutico associado a distúrbio mitocondrial e/ou metabólico é selecionado dentre agente hipocolesterolêmico do grupo das estatinas, agente hipoglicêmico e agente antiepiléptico.

[0030] Assim, a composição farmacêutica da invenção pode ser usada também na prevenção ou tratamento de toxicidade e/ou efeitos colaterais induzidos por um fármaco ou de condições associadas com estresse oxidativo, como por exemplo, a hipoxia, a hipoglicemia e o envelhecimento.

[0031] Uma quarta concretização da invenção diz respeito a um método de tratamento de distúrbios mitocondriais compreendendo a administração de uma composição farmacêutica como definida nas concretizações anteriores. A administração da associação de pelo menos um composto da classe racetam + carnitina, CoQlO e agente terapêutico associado a distúrbio mitocondrial e/ou metabólico pode ser uma administração de qualquer combinação de três dos fármacos ou dos quatro, presentes na mesma forma farmacêutica; ou pode ser uma co-administração da associação de pelo menos um composto da classe racetam + carnitina, da CoQlO e do agente terapêutico associado a distúrbio mitocondrial e/ou metabólico presentes em formas farmacêuticas separadas. Preferencialmente, a terapia de distúrbios mitocondriais se refere ao tratamento de neuropatologias causadas pelo processo de envelhecimento, incluindo Mal de Alzheimer e Doença de Parkinson ou ao tratamento de miopatias etiologicamente relacionadas com disfunções mitocondriais e/ou metabólicas. De preferência, a terapia de disfunções ou distúrbios metabólicos se refere ao tratamento de condição médica selecionada do grupo de hipercolesterolemia, hiperglicemia e epilepsia.

[0032] Ainda, a invenção fornece um método de tratamento e/ou prevenção de efeitos colaterais relacionados com distúrbios mitocondriais, induzidos por um fármaco, compreendendo administrar em um mamífero uma combinação de racetam e carnitina.

Breve Descrição das Figuras

[0033] Figura 1. Efeito de diferentes doses de Sinvastatina no intumescimento mitocondrial através da curva dose resposta de cálcio e sinvastatina.

[0034] Figura 2. Efeito da associação de L-carnitina e Piracetam sobre o intumecimento mitocondrial induzido por Sinvastatina.

[0035] Figura 3. Efeito da associação de L-carnitina e Piracetam sobre o intumecimento mitocondrial induzido por Pravastatina.

[0036] Figura 4. Efeito da associação de L-carnitina e Piracetam sobre o intumecimento mitocondrial induzido por Lovastatina.

[0037] Figura 5. Efeito da Coenzima Q sobre o intumecimento mitocondrial induzido por Sinvastatina.

Descrição Detalhada da Invenção

[0038] A presente invenção é dirigida para o tratamento de condições médicas envolvendo distúrbios mitocondriais, incluindo as miopatias mitocondriais, as citopatologias, os distúrbios de carnitina (deficiência do transporte de carnitina para as células), enxaqueca e encefalopatias e os distúrbios neurodegenerativos, tais como o Mal de Alzheimer e a Doença de Parkinson. Informações mais detalhadas sobre disfunções ou distúrbios mitocondriais podem ser encontradas no site da Web http://www.neuro.wustl.edu/neuromuscular/mitosyn.html.

[0039] Com a finalidade de precisar o escopo de proteção visada pela presente invenção, algumas definições de termos empregados nas reivindicações são fornecidas a seguir.

[0040] Agente terapêutico associado a distúrbio mitocondrial e/ou metabólico tem a intenção de significar um fármaco que é utilizado na terapia de minimização ou reversão de uma condição médica envolvendo uma disfunção mitocondrial ou metabólica, como, por exemplo, miopatia, neuropatia, hipercolesterolemia, hiperglicemia, epilepsia. Exemplos de agentes terapêuticos são: agentes hipocolesterolêmicos, por exemplo, estatinas; oxidantes de nucleotideos piridinicos, por exemplo, acetoacetato; hormônios tiroidianos; agentes antiepilépticos.

[0041] Quantidade terapeuticamente eficaz tem a intenção de significar a dose diária necessária para a minimização ou reversão de uma condição médica envolvendo uma disfunção mitocondrial e/ou metabólica.

[0042] Sais farmaceuticamente aceitáveis tem a intenção de significar as formas salinas dos princípios ativos da composição da invenção, incluindo, mas não estando limitados a (i) sais de adição de ácido não-tóxicos formados por ditos princípios ativos com ácidos inorgânicos, tais como, ácido clorídrico, ácido bromidrico, ácido sulfúrico e ácido fosfórico, ou com ácidos organo-carboxilicos, tal como gluconato ou com ácidos organo- sulfônicos, tais como mesilato e besilato, (ii) sais de metais, preferivelmente sais de metal alcalino não-tóxicos, incluindo sais de sódio ou potássio, formados pelos ditos princípios ativos com bases desses metais e ajuste do pH ao valor apropriado.

[0043] Veiculo farmaceuticamente aceitável tem a intenção de significar qualquer substância ou substâncias inertes usadas como veiculo ou diluente para qualquer um dos princípios ativos da composição da presente invenção.

[0044] RACETAM tem a intenção de significar drogas nootrópicas que possuem um núcleo de pirrolidina. Tais compostos incluem, mas não são restritos a Piracetam, Imuracetam, Fasoracetam, Nebracetam Rolziracetam, Nefiracetam, Levetiracetam, Etiracetam Pramiracetam, Oxiracetam, Aniracetam, Fenilpiracetam, Coluracetam, Brivaracetam, Seletracetam, Rolipram, sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos e seus isômeros.

[0045] INIBIDOR DE HMG CoAtem a intenção de significar qualquer substância adequada para uso humano e veterinário que promova o bloqueio de enzima 3-hidróxi-3-metil-glutaril-coenzima A redutase, inibindo, portanto, a conversão de gordura em colesterol. As ditas substâncias incluem, mas não estão limitadas às estatinas, as quais incluem, mas não se restringem a sinvastatina, lovastatina, atorvastatina, pravastatina, fluvastatina, dalvastatina, cerivastatina, mevastatina, pitavastatina, rosuvastatina, sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos e seus isômeros.

[0046] A composição farmacêutica da presente invenção baseia- se no sinergismo inesperado entre pelo menos um fármaco do grupo racetam e a carnitina, sinergismo esse que possibilita o tratamento de distúrbios mitocondriais concomitantemente com terapia de deficiência de CoQlO e de disfunções metabólicas, tal como a hipercolesterolemia, ou o diabetes de sindrome metabólica, e de disfunções neurodegenerativas associadas ao processo de envelhecimento.

[0047] Para comprovar o sinergismo da associação de pelo menos um principio ativo do grupo racetam com carnitina, foram realizados experimentos in vitroutilizando pequenas doses de piracetam, L-carnitina e piracetam + L-carnitina. Surpreendentemente a associação desses dois fármacos, aplicados na mesma dose usada para cada um deles quando administrados isoladamente, apresentou significativa ação protetora das mitocôndrias, por dano induzido pela sinvastatina. Como mencionado anteriormente, as estatinas têm, como efeito adverso, ação deletéria sobre as mitocôndrias por ser uma das causas da MPT, levando, inclusive, ao aparecimento de miopatias em tratamento de hipercolesterolemia de médio até longo prazo.

[0048] A concentração do pelo menos um principio ativo do grupo racetam, por exemplo, piracetam, na composição da presente invenção corresponde a uma dose diária de 100 mg a 12 g, podendo ser na forma de dose única ou multidoses em formas farmacêuticas apropriadas.

[0049] A carnitina da composição da invenção pode estar em qualquer de suas formas, incluindo, mas não estando limitados a, L-carnitina, D-carnitina, DL-carnitina, acetil-L-carnitina, alcanoil-L-carnitina, propinoil-L-carnitina, butiril-L- carnitina, valeril-L-carnitina, isovaleril-L-carnitina. A concentração da carnitina corresponde a uma dose diária de 100 mg a 6 g, podendo ser de dose única ou distribuída em multidoses.

[0050] A concentração da Coenzima Q10 na composição da invenção corresponde a uma dose diária de 5 mg a 200 mg, em dose única ou multidose.

[0051] Adicionalmente, de acordo com a inveção, a razão dos componentes da associação racetam:carnitina, por exemplo, piracetam, pode variar na faixa de 1:1 a 1:10. Razões preferidas de racetam:carnitina, por exemplo, piracetam, são 1:1; 1:1,3 ou 1:1:2 quando está presente a CoQlO.

[0052] O agente de terapia metabólica da composição da invenção pode ser qualquer fármaco dirigido para o tratamento de uma disfunção do metabolismo, tal como a hipercolesterolemia. Preferencialmente, o dito agente de terapia metabólica é selecionado do grupo das estatinas que inclui: sinvastatina, lovastatina, atorvastatina, pravastatina, fluvastatina, dalvastatina, cerivastatina, mevastatina, pitavastatina e rosuvastatina, seus sais farmaceuticamente aceitáveis ou isômeros. A concentração do agente de terapia metabólica corresponde à dose diária comumente utilizada em medicamentos antilipêmicos.

[0053] As composições farmacêuticas da invenção compreendem os ingredientes ativos (associação do pelo menos um principio ativo do grupo racetam, por exemplo, piracetam, com carnitina, podendo incluir, adicionalmente, Coenzima Q10; a associação do pelo menos um principio ativo do grupo racetam, por exemplo, piracetam + carnitina pode incluir, adicionalmente, um agente terapêutico relacionado a distúrbio mitocondrial e/ou metabólico com ou sem CoQlO) e um veiculo que além de farmaceuticamente aceitável deve ser compatível com os outros componentes da formulação, ditas composições podendo estar em qualquer forma farmacêutica.

[0054] Exemplos de tais formas farmacêuticas são (i) comprimido, opcionalmente revestido, mastigável, efervescente, multicamadas ou solúvel; (ii) pilulas; (iii) pó opcionalmente dipersivel ou efervescente; (iv) cápsulas de qualquer tipo, como por exemplo, cápsula gelatinosa dura, cápsula gelatinosa mole e amilácia; (v) pastilhas; (vi) granulados, opcionalmente na forma de microparticulas ou de microcápsulas, ou em preparações vetorizadas, como por exemplo, os lipossomos; (vii) supositórios, (viii) soluções opcionalmente oral, nasal, oftálmica; (ix) injetável (incluindo subcutânea, intradérmica, intramuscular e intravenosa); (x) suspensões; (xi) xaropes; (xii) infusão; dentre outras. As soluções, suspensões ou xaropes de administração oral podem estar, por exemplo, em apresentações farmacêuticas do tipo flaconetes, frascos, ampolas, etc. Também estão incluidas na presente invenção as composições de ação rápida, as de ação prolongada e as de liberação retardada. As formas farmacêuticas preferidas da invenção são as soluções ou suspensões de administração oral, preferencialmente na apresentação farmacêutica de flaconete, de vidro ou plástico.

[0055] No caso de a forma farmacêutica ser uma solução ou suspensão de administração oral, o veiculo farmaceuticamente aceitável, pode incluir solventes e co-solventes, tampões, conservantes, corantes, flavorizantes adoçantes, agentes de redução, agentes espessantes, agentes sequestrantes, tensoativos, componentes para o ajuste de pH (por exemplo, ácido clorídrico, hidróxido de sódio), agentes de suspensão, antioxidantes, dentre outros. Os solventes ou meios de suspensão podem ser: água purificada e/ou outros solventes hidrofilicos (por exemplo, etanol, DMSO, propileno glicol, PEG) ou hidrofóbicos (por exemplo, óleos). Os co-solventes podem ser: etanol, propileno glicol, glicerol, dentre outros. Os conservantes podem ser: fenóis, parabenos, ácido benzóico. Os agentes redutores podem ser: vitamina E, ácido ascórbico, etc. O essencial é que quaisquer desses excipientes ou aditivos estejam dentro das exigências de qualidade para uso humano e veterinário estabelecidas pelas autoridades competentes.

[0056] No caso de a forma farmacêutica da composição da invenção ser comprimido, ela pode incluir um ou mais excipientes selecionados do grupo consistindo de diluentes, desintegrantes, aglutinantes, corantes e agentes flavorizantes. O diluente pode ser um ou mais entre carbonato de cálcio, fosfato dibásico de cálcio, fosfato tribásico de cálcio, sulfato de cálcio, celulose microcristalina, celulose pulverulenta, dextratos, dextrinas, excipientes de dextrose, frutose, caulim, lactitol, lactose, manitol, sorbitol, amido, amido pré-gelatinizado, sacarose, açúcar compressivel e açúcar de confeiteiro, e em particular pode ser lactose. O aglutinante pode ser um ou mais entre metilcelulose, hidroxipropilcelulose, hidroxipropil metilcelulose, polivinilpirrolidona, gelatina, goma arábica, etilcelulose, álcool polvinilico, pululana, amido pré- gelatinizado, ágar, goma draganta, derivados de ácido alginico e propileno glicol, e alginato, e em particular pode ser polivinilpirrolidona. O desintegrante pode ser um ou mais entre hidroxipropilcelulose substituída de baixo peso molecular, carboximetil celulose, carboximetil celulose de cálcio, carboximetil celulose de sódio, croscarmelose de sódio, amido, amidoglicolato de sódio, celulose cristalina, hidroxipropil amido, e amido parcialmente pré-gelatinizado.

[0057] As composições farmacêuticas da presente invenção podem ser preparadas por processos conhecidos do estado da técnica.

[0058] A presente invenção também se refere a um método para tratamento de distúrbios mitocondriais compreendendo a administração a um indivíduo com necessidade de tratamento de uma quantidade terapeuticamente eficaz da composição da invenção.

[0059] O termo distúrbios mitocondriais tem a intenção de incluir todas as disfunções da mitocôndria susceptíveis de tratamento sistêmico, incluindo, mas não estando restritas a miopatias mitocondriais, citopatologias, distúrbios de carnitina (deficiência do transporte de carnitina para as células), deficiência de Coenzima Q10, enxaqueca e encefalopatias e distúrbios neurodegenerativos, tais como o Mal de Alzheimer e a Doença de Parkinson.

[0060] Adicionalmente, o método da invenção abrange as terapias de disfunções metabólicas que envolvem o uso de fármacos com efeitos adversos, os quais repercutem nas mitocôndrias e que geram ou ampliam as citopatologias, tais como as miopatias e os distúrbios neurodegenerativos. Um importante exemplo do método da invenção é a terapia de hipercolesterolemia com o uso da composição da invenção em que o agente terapêutico associado a distúrbio mitocondrial e/ou metabólico é uma estatina do grupo que inclui, mas não fica limitado a sinvastatina, lovastatina, atorvastatina, pravastatina, fluvastatina, dalvastatina, cerivastatina, mevastatina, pitavastatina e rosuvastatina e seus sais farmaceuticamente aceitáveis, ou seus isômeros.

[0061] O método da presente invenção compreende a administração da composição da invenção em dose única ou em multidoses correspondendo à dosagem diária necessária para atenuar ou eliminar a disfunção mitocondrial e/ou metabólica. Essa dosagem encontra-se na faixa de 100 mg a 12 g para o pelo menos um principio ativo do grupo racetam, por exemplo, piracetam; na faixa de 100 mg a 6 g para a carnitina; e na faixa de 5 mg a 200 mg para a Coenzima Q10.

[0062] Adicionalmente, é objeto da invenção, a composição compreendendo: (a) associação do pelo menos um principio ativo do grupo racetam, por exemplo, piracetam ou seus sais farmaceuticamente aceitáveis ou seus isômeros com carnitina ou seus sais farmaceuticamente aceitáveis ou seus isômeros; e (b) substâncias que interferem positivamente no metabolismo celular. Exemplos de tais substâncias são os doadores de radical metila, tais como acetil metionina, betaina e ácido fólico em doses normalmente utilizadas em preparações farmacêuticas, como, por exemplo, 400 mg (acetil metionina) , 500 mg (betaina) e 800 mg (ácido fólico) .

[0063] A seguir são fornecidos exemplos de concretizações da invenção. No entanto, deve ser entendido que tais exemplos e concretizações são providos somente para finalidade ilustrativa e que várias modificações ou mudanças, à luz das concretizações aqui reveladas, serão sugestivas aos especialistas na técnica e devem estar incluidas dentro do espirito e alcance desta descrição e escopo das reivindicações que a acompanham.

EXEMPLOS

[0064] Nos exemplos abaixo apresentados, foram realizados experimentos com mitocôndrias isoladas de figado de ratos com o objetivo de demonstrar a atividade protetora dos comopostos L- carnitina, piracetam, e combinações destes, em resposta ao intumecimento mitocondrial provocado por estatinas e outros.

[0065] Mitocôndrias foram isoladas de figado de ratos (MFR) adultos utilizando-se a técnica de centrifugação diferencial, segundo SCHNEIDER e HOGEBOOM (1951), após jejum de 12 h. O figado, retirado após a morte do animal por concussão cerebral, foi lavado em solução de sacarose 250 mM contendo tampão 10 mM de HEPES pH 7,2 e 0,5 mM de EGTA, picado com tesoura e homogeneizado em homogeneizador Potter-Elvehjem. O material foi centrifugado a 2500 x g por 10 minutos. O sobrenadante resultante foi centrifugado durante 10 minutos a 8000 x g sendo a fase lipidica superior retirada com pipeta Pasteur. O sobrenadante foi descartado e o sedimento ressuspenso em 250 mM de sacarose, 5 mM de HEPES pH 7,2 e 0,3 mM de EGTA, e novamente centrifugado como a condição anterior. A fração mitocondrial foi ressuspensa na mesma solução sendo gue isenta de EGTA, numa concentração de aproximadamente 80 mg de proteina por mililitro de suspensão mitocondrial.

[0066] Os experimentos com mitocôndrias isoladas foram realizados a 30 °C em meio de reação padrão contendo 125 mM de sacarose, 65 mM de Cloreto de potássio, 10 mM de HEPES pH 7,2, e 2 mM de fosfato. Foi utilizado como substrato 5 mM de malato, piruvato, glutamato e a-cetoglutarato. Outros reagentes adicionados estão indicados nas figuras.

[0067] O intumescimento mitocondrial foi calculado com base no decréscimo de turbidez da suspensão mitocondrial medida a 520 nm em um espectrômetro Hitachi modelo U-3000 por um periodo de tempo entre 0 e 800 segundos.

[0068] Esse procedimento de avaliação de modificação mitocondrial baseia-se no fato de que as suspensões mitocondriais são turvas e espalham a luz incidente. A luz espalhada é uma função da diferença entre o indice de refração da matriz mitocondrial e do meio, e, qualquer processo que diminua esta diferença irá diminuir a luz espalhada e aumentar a transmitância (ver Nicholls, D. G., e Âkerman, K. E. O., Mitochondrial calcium transport. Biochim. Biophys. Acta 683, 57- 88 (1982)). Assim, um aumento no volume da matriz mitocondrial, associado com a entrada de solutos permeáveis, resulta numa aproximação entre o índice de refração da matriz e do meio de reação com a conseqüente diminuição da luz espalhada. 0 acompanhamento espectrofotométrico da redução da absorbância a 540 nm (Ca2 +-dependent NAD(P)+ - induced alterations in membrane permeability of rat liver mitochondria. Integration of Mitochondrial Function, Ed. J. Lemasters, Plenum, New York, pp. 535-542) é feito em um espectrofotômetro conectado a um registrador potenciométrico. As mitocôndrias de fígado de camundongo (0,5 mg de proteina/ml) são incubadas no meio de reação, e os experimentos são realizados à temperatura de 30°C.

EXEMPLO 1 - TESTE in vitro de resposta MPT a Cálcio e Sinvastatina.

[0069] Utilizando um protocolo diferente do acima apresentado e utilizado nos demais exemplos aqui demonstrados, mitocôndrias de fígado de camundongos ou ratos foram isoladas, por centrifugação diferencial convencional (ver descrição do método em Kaplan RS, Pedersen PL. Characterization of phosphate efflux pathways in rat liver mitochondrial. Biochem J 1983;212:279-88), a partir de animais adultos deixados em jejum por 12 horas. Os fígados foram homogeneizados em um meio compreendendo sacarose 250 mM, EGTA 1 mM e tampão Hepes 10 mM (pH 7,2) . A suspensão mitocondrial foi lavada duas vezes no mesmo meio contendo EGTA 1 mM e o precipitado final foi ressuspenso em solução de sacarose 250 mM até uma concentração final de proteína de 80-100 mg/ml.

[0070] A Figura 1 ilustra uma curva dose resposta de cálcio e sinvastatina. Os resultados mostram que a sinvastatina induz a MPT. Particularmente, a sinvastatina 40 pM juntamente com 30 pM de Ca2 + induziu um grande aumento no intumescimento das mitocôndrias.

EXEMPLO 2 - Efeito da associaçao L-carnitina e Piracetam sobre o intumecimento mitocondrial induzido por estatinas

[0071] Após determinar as menores doses de Piracetam e L- carnitina que apresentaram algum efeito protetor sobre o intumecimento mitocondrial induzido por estatinas (Sinvastatina, Pravastatina e Lovastatina), foi avaliada a eficácia de sua associação (L-carnitina + Piracetam) nestas faixas de concentração encontradas. Para tanto, foi determinado que para Sinvastatina e Pravastatina fosse utilizada a associaçao L- carnitina 0,5 pg/ml + Piracetam 1,25 pg/ml, (Figuras 2 e 3 respectivamente), enquanto que para Lovastatina seria utilizada a associação L-carnitina 0,5 pg/ml + Piracetam 1,25 pg/ml (Figura 4) .

[0072] Na Figura 2, MFR (0,5 mg/ ml) foram incubadas em meio de reação padrão contendo Sinvastatina (linha b) , Sinvastatina + L-carnitina 0,5 pg/ml (linha c), Sinvastatina + Piracetam 1,25 pg/ml (linha d) e Sinvastatina + L-carnitina 0,5 pg/ml + Piracetam 1,25 pg/ml (linha e) e comparadas a mitocôndrias sem adições de Sinvastatina (controle, linha a) . Adições de L- carnitina, Piracetam e L-carnitina +Piracetam às mitocôndrias controle são descritas nos traçados f, g e h, respectivamente.

[0073] A Figura 3 mostra o perfil espectrofotométrico de MFR (0,5 mg/ ml) incubadas em meio de reação padrão contendo Pravastatina (linha b) , Pravastatina + L-carnitina 0,5 pg/ml (linha c) , Pravastatina + Piracetam 1,25 pg/ml (linha d) e Pravastatina + L-carnitina 0,5 pg/ml + Piracetam 1,25 pg/ml (linha e) e comparadas a mitocôndrias sem adições de Pravastatina (controle, linha a) . Adições de L-carnitina, Piracetam e L- carnitina +Piracetam às mitocôndrias controle são descritas nos traçados f, g e h, respectivamente.

[0074] A Figura 4 apresenta o resultado da associação de L- carnitina e Piracetam sobre o intumecimento mitocondrial induzido por Lovastatina. MFR (0,5 mg/ ml) foram incubadas em meio de reação padrão contendo Lovastatina (linha b) , Lovastatina + L-carnitina 0,5 pg/ml (linha c) , Lovastatina + Piracetam 1,25 pg/ml (linha d) e Lovastatina + L-carnitina 0,5 pg/ml + Piracetam 1,25 pg/ml (linha e) e comparadas a mitocôndrias sem adições de Lovastatina (controle, linha a) . Adições de L-carnitina, Piracetam e L-carnitina +Piracetam às mitocôndrias controle são descritas nos traçados f, g e h, respectivamente.

[0075] Portanto, é possivel fazer uso de baixas concentrações de piracetam e de L-carnitina na composição da presente invenção e, com isso, evitar os efeitos colaterais de concentrações mais elevadas desses dois fármacos e, principalmente, tratar ou evitar os efeitos adversos induzidos por estatinas, ou outros agentes terapêuticos associados a distúrbio mitocondrial e/ou metabólico ou condições relacionadas com estresse oxidativo, tais como hipoxia, hipoglicemia, envelhecimento e outros.

EXEMPLO 3 - Efeito da Coenzima Q10, per se ou associada a L- carnitina e Piracetam sobre o intumecimento mitocondrial induzido por Sinvastatina

[0076] Na figura 5, é mostrado o perfil espectrofotométrico de MFR (0,5 mg/ ml) incubadas em meio de reação padrão contendo Sinvastatina (linha b), Sinvastatina + Piracar 0.25/0.65 pg/ml (linha c), Sinvastatina + CoQ 5 pg/ml (linha d), Sinvastatina + CoQ 5 pg/ml + Piracar 0.25/0.65 pg/ml (linha e) e comparadas a mitocôndrias sem adições de Sinvastatina (controle, linha a) . Estes resultados demonstram mais uma vez, de maneira clara, o efeito sinergistico da combinação de L-carnitina e piracetam (PIRACAR), agora também em associação com a coenzima Q10 na proteção ao intumecimento mitocondrial.

EXEMPLO 4 - COMPOSIÇÃO DA INVENÇÃO NA FORMA DE COMPRIMIDO

[0077] A composição da invenção pode estar na forma de comprimidos ou de comprimidos revestidos.

[0078] Na forma de comprimidos, é feita inicialmente a mistura dos princípios ativos com o veiculo e aditivos necessários não só para obtenção de uma formulação apropriada para compressão, como para a obtenção de um medicamento com adequado tempo de prateleira. Os componentes e sua combinação, assim como as técnicas de fabricação são conhecidos dos técnicos em farmacotecnia e produção farmacêutica.

[0079] Na tabela (a), a seguir, e a titulo de exemplo, são fornecidas, a seguir, formulações da associação piracetam + carnitina de acordo com a invenção. (a) Formulação do comprimido ou do núcleo de comprimido

• mg/cpo = mg/comprimido

[0080] As formulações da tabela (a) acima podem constituir, também, o núcleo de um comprimido recoberto, sendo que a formulação do recobrimento pode ser como mostrado na tabela (b) a seguir. (b) Formulação do revestimento para produzir comprimido recoberto

EXEMPLO 5 - COMPOSIÇÃO DA INVENÇÃO NA FORMA DE CÁPSULA

[0081] A composição da invenção também pode estar na forma de cápsula, podendo dita cápsula ser dos tipos: cápsula gelatinosa dura ou cápsula gelatinosa mole. As técnicas para enchimento e manipulação das cápsulas são amplamente conhecidas do estado da arte, dispensando maior detalhamento. A composição da invenção pode ter a formulação como a seguir mostrada, para o caso de cápsula gelatinosa dura.

EXEMPLO 6 - COMPOSIÇÃO DA INVENÇÃO NA FORMA DE SUSPENSÃO INJETÁVEL

[0082] A composição da invenção pode ser preparada também em forma injetável de acordo com técnicas conhecidas do estado da arte. Os maiores cuidados nesse tipo de preparação são relativos à garantia de pureza do veiculo que precisa ser isento de componentes pirogênicos e de endotoxinas. A seguir é fornecida uma formulação desse tipo de forma da composição da invenção.

EXEMPLO 7 - COMPOSIÇÃO DA INVENÇÃO NA FORMA DE SOLUÇÃO ORAL

[0083] Uma das formas da composição da invenção, e a mais é a de solução oral que pode também ser preparada por técnicas conhecidas do estado da arte. Um exemplo não limitativo da solução oral da presente invenção é fornecido na tabela a seguir.

[0084] A solução de administração oral como a apresentada na tabela acima pode ser acondicionada em uma apresentação farmacêutica apropriada, como por exemplo, flaconete, ampola, etc, sendo a mais preferida a do tipo flaconete.

[0085] Todas as publicações e pedidos de patente mencionados na descrição são indicativos do nivel daqueles especialistas na técnica à qual a invenção se refere. Todas as publicações e pedidos de patente são aqui incorporados a titulo de referência na mesma extensão como se cada publicação individual ou cada pedido de patente fosse especificamente e individualmente indicado para ser incorporado a titulo de referência.

[0086] Apesar de a invenção precedente ter sido descrita em alguns detalhes por meio de ilustração e exemplos para finalidade de clareza e entendimento, ficará óbvio que certas mudanças e modificações podem ser praticadas dentro do escopo das reivindicações que acompanham esta descrição.

Claims (5)

1. Composição farmacêutica caracterizada pelo fato de consistir de uma combinação de: (a) uma quantidade terapeuticamente eficaz de piracetam; e (b) uma quantidade terapeuticamente eficaz de L-carnitina; em que a razão de racetam: carnitina está na faixa de 1:1 a 1:10; e um veiculo farmaceuticamente aceitável.

2. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que a razão racetam:carnitina está na faixa de 1:1 a 1:1,3.

3. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que a quantidade terapeuticamente eficaz de piracetam corresponde a uma dose diária de 100 mg a 12 g.

4. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que a quantidade terapeuticamente eficaz de L-carnitina correspondente a uma dose diária de 100 mg a 6 g.

5. Uso da composição farmacêutica conforme definida na reivindicação 1, caracterizado pelo fato de ser para a preparação de um medicamento para tratar ou evitar os efeitos adversos induzidos por estatinas.

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