BRPI0809476A2 - Bebidas de suco com bactérias probióticas - Google Patents

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Sallie Kim
Lorenzo C Nicastro
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Naked Juice Co Of Glendora Inc
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Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "BEBIDAS DE SUCO COM BACTÉRIAS PROBIÓTICAS".
CAMPO DA INVENÇÃO
A presente invenção refere-se a bebidas. Em particular, referese a bebidas probióticas.
ANTECEDENTES DA INVENÇÃO
Consumidores estão mostrando maior interesse em sua dieta como um meio de manter ou melhorar sua saúde. Estilos de vida modernos deixam menos tempo para preparar e comer alimento e isto contribui para 10 uma dieta não-saudável, por exemplo, por causa de consumo aumentado de alimentos de conveniência não-saudáveis, que se considera serem inferiores em valor nutricional como um resultado dos procedimentos envolvidos em sua preparação ou armazenagem. Consumo de alimentos processados é associado com números diminuídos de bactérias do intestino benéficas. Ou15 tros fatores conhecidos diminuir sobrevivência de bactérias benéficas no intestino incluem estresse e consumo de carne vermelha e álcool. Bactérias benéficas diminuídas permite o desenvolvimento de bactérias indesejáveis no trato gastrointestinal assim como redução da quantidade de nutrientes produzidos pelas bactérias benéficas.
Longevidade melhorada em seres humanos está resultando em
números aumentados de cidadãos mais velhos. Relativo à população como um todo, esta demografia exibe uma incidência aumentada de doenças tais como infecções do trato gastrointestinal, constipação, síndrome do intestino irritável (IBS), doença do intestino inflamatório (IBD), mal de Crohn, colite 25 ulcerativa, alergias alimentares, diarréia, doença cardiovascular e certos cânceres tais como câncer coiorretai. Evidência sugere que estas doenças podem estar associadas com níveis diminuídos de bactérias benéficas.
Em anos recentes, nesse sentido tem sido um aumento na fabricação e produção de alimentos funcionais que afetam funções do corpo de uma maneira alvejada a fim de produzir efeitos positivos na fisiologia e nutrição. O Centro Nacional para Medicina Complementar e Alternativa (NCCAM), Institutos Nacionais de Saúde (NIH) interpreta "alimentos funcionais" como "componentes da dieta usual que podem possuir componentes biologicamente ativos (por exemplo, polifenóis, fitoestrogênios, óleos de peixe, carotenoides) que podem fornecer benefícios de saúde além da nutrição básica." Vide NCCAM, "BACKGROsob: Biologically Based Practices: An Over5 view" (October, 2004). Este documento pode ser encontrado no site da Internet do Centro Nacional para Medicina Complementar e Alternativa (NCCAM).
Um mercado que sofreu expansão é alimento contendo bactérias probióticas. Bactérias probióticas são culturas bacterianas vivas usadas para suplementar dietas que beneficamente influenciam a saúde e nutrição do animal hospedeiro por melhora de seu equilíbrio microbiano intestinal, (vide Fuller, R., "Probiotics in Man and Animais," Journal of aplicada Bacteriology, 66: 365-378 (1989)). Os benefícios das bactérias probióticas incluem incidência ou duração diminuída de doenças relacionadas à diarréia, ao alívio de síndrome do intestino irritável, e sintomas reduzidos de intolerância a lactose. Benefícios adicionais incluem melhoramento nos níveis de lipídeo do sangue em pacientes de hiperlipidemia e alívio de constipação. Administração de probióticos também mostrou reduzir diarréia associada a antibiótico em criança e adultos. (Lewis SJ1 Freedman AR. Review article: the use of biotherapeutic agents in the prevenirion and treatment of gastrointestinal disease. Aliment Pharmacol Ther. 1998 Sep; 12(9):807-22.)
Prebióticos são substâncias que não são digestíveis no trato gastrointestinal humano que também estimulam preferencialmente o desenvolvimento de certas bactérias. (Schrezenmeir J, de Vrese M. Probiotics, 25 prebiotics, and synbiotics--approaching a definition. Am. J. Clin. Nutr. 2001 Feb;73(2 Suppl):361S-364S). Prebióticos conhecidos incluem: frutanos tais como inulina e fruto-oligossacarídeos (FOS); galacto-oligossacarídeos (GOS); lactulose, e maltodextrina. Fruto-oligossacarídeos não são hidrolisados no intestino delgado e ao invés disso passam por dentro do intestino 30 grosso onde eles preferencialmente suportam o desenvolvimento de cepas probióticas de Iactobacilo e bifidobacterium, aumentando colonização do cólon por estas bactérias probióticas. Em contraste, fruto-oligossacarídeos não suportam o desenvolvimento de bactérias indesejáveis tais como espécies de bacteroides, clostrídios, e fusobactérias (Vide Rao AV. J Dose-response effects of inulin and oligofrutose on intestinal bifidogenesis effects. Nutr. 1999 Jul;129 (7 Suppl):1442S-5S).
5 Produtos simbióticos contêm tanto prebióticos quanto probióticos
(Vide Rolfe RD. The role of probiotic cultures in the control of gastrointestinal health. J Nutr. 2000 Feb;130(2S Suppl):396S-402S e referências neste). O prebiótico pode promover o desenvolvimento dos probióticos. Produtos diários simbióticos são conhecidos na técnica. Certos grupos humanos, no en10 tanto, podem não consumir produtos diários. Além disso, há uma necessidade contínua por produtos diferentes que forneçam bactérias probióticas a consumidores para realçar desenvolvimento bacteriano benéfico no intestino.
Por conseguinte, há uma necessidade na técnica por bebidas de suco de fruta simbióticas que mantêm viabilidade bacteriana quando embaladas e as quais podem promover desenvolvimento bacteriano probiótico no trato gastrointestinal.
SUMÁRIO DA INVENÇÃO
Um aspecto da invenção é uma bebida contendo suco de maçã, 20 suco de banana, suco de abacaxi, suco de mirtilo, fruto-oligossacarídeos e bactérias probióticas contida em vasos possuindo um selo à prova de violação. As bactérias probióticas são selecionadas do grupo consistindo em B. animalis (Iactis) e L. rhamnosus e misturas das mesmas. Quando refrigerada durante 36 dias, a bebida de suco reterá > 108 CFU/29 ml (fl. oz) de bacté25 rias e fornecerá > 0,1 g/29 ml (fl. oz) de fruto-oligossacarídeo.
Outro aspecto da invenção é uma bebida contendo suco de laranja, suco de manga, suco de abacaxi, suco de maçã, frutooligossacarídeos e bactérias probióticas contida em vasos possuindo um selo à prova de violação. As bactérias probióticas são selecionadas do grupo 30 consistindo em B. animalis (Iactis) e L rhamnosus e misturas das mesmas. Quando refrigerada durante 36 dias, a bebida de suco reterá > 108 CFU/29 ml (fl. oz) de bactérias e fornecerá >0,1 g/29 ml (fl. oz) de frutooligossacarídeo.
Um aspecto adicional da invenção refere-se a métodos de produção de uma bebida de modo que um alto número de bactérias viáveis seja mantido. Fruto-oligossacarídeos são combinados com suco de maçã ou purê de banana e um ou mais outros sucos selecionados de maçã, banana, mirti
lo, laranja, manga, e abacaxi para formar uma mistura de suco de fruta/frutooligossacarídeos. Bactérias probióticas são combinadas com a mistura de suco de fruta/fruto-oligossacarídeos para formar a bebida de suco. As bactérias podem ser congeladas, secadas por congelamento, ou refrigeradas.
Um aspecto adicional da invenção é uma bebida contendo suco
de maçã, suco de banana, suco de abacaxi, suco de mirtilo, entre 0,10 e 0,15 g/29 ml (fl. oz) de fruto-oligossacarídeos, e entre 1,0 x 109 e 1,0 x 1012 CFU/29 ml (fl. oz) de bactérias contidas em vasos possuindo um selo à prova de violação. As bactérias probióticas são selecionadas do grupo consis15 tindo em B. animalis (Iactis) e L. rhamnosus e misturas das mesmas. Quando refrigeradas durante 36 dias, entre 1,0 x 109 e 1,0 x 1012 CFU/29 ml (fl. oz) de bactérias B. animalis (Iactis) permanecem.
Um aspecto adicional da invenção é uma bebida contendo suco de laranja, suco de manga, suco de maçã, suco de abacaxi, entre 0,10 e 20 0,15 g/29 ml (fl. oz) de fruto-oligossacarídeos, e entre 1,0 x 108 e 1,0 x 109 CFU/29 ml (fl. oz) de bactérias contidas em vasos possuindo um selo à prova de violação. As bactérias probióticas são selecionadas do grupo consistindo em B. animalis (Iactis) e L. rhamnosus e misturas das mesmas. Quando refrigeradas durante 36 dias, entre 1,0 x 108 e 1,0 x 109 CFU/29 ml (fl. oz) 25 de bactérias permanecem.
Um aspecto adicional da invenção é uma bebida contendo suco de laranja e entre 1,0 x 108 e 1,0 x 109 CFU/29 ml (fl. oz) de bactérias contidas em vasos possuindo um selo à prova de violação. As bactérias probióticas são selecionadas do grupo consistindo em B. animalis (Iaetis) e L. rham30 nosus e misturas das mesmas. Quando refrigeradas durante 36 dias, entre 1,0 x 108 e 1,0 x 109 CFU/29 ml (fl. oz) de bactérias permanecem.
BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS As Figuras 1A a 1D ilustram a sobrevivência de bactérias em várias bebidas durante o tempo. A Figura 1A mostra sobrevivência de bactérias usando bactérias congeladas com a formulação Laranja Manga Abacaxi (Tropical). A Figura 1B mostra sobrevivência de bactérias usando bactérias 5 secadas por congelamento com a formulação Laranja Manga Abacaxi (Tropical). A Figura 1C mostra sobrevivência de bactérias usando bactérias congeladas com a formulação de Baga. A Figura 1D mostra sobrevivência de bactérias usando bactérias secadas por congelamento com a formulação de Baga.
A Figura 2 compara a viabilidade bacteriana nas bebidas mos
tradas nas figuras 1A-D em 36 dias.
A Figura 3 mostra a manutenção de viabilidade bacteriana durante o tempo em bebidas possuindo diferentes combinações de sucos de fruta e bactérias. MB Bif (Baga Mista com B. animalis (Iactis)); MB Rham 15 (Baga Mista com L. rhamnosus)', OMP Bif (Laranja-Manga-Abacaxi com B. animalis (Iactis))', OMP Rham (Laranja-Manga-Abacaxi com L. rhamnosus)', SB Rham (Morango-Banana com L. rhamnosus)', SB Bif (Morango-Banana com B. animalis (Iaetis)). 4E7 e 2E8 representam os níveis de bactérias de semeadura de 4 x 107 CFU/ml e 2 x 108 CFU/ml,respectivamente, no tempo 20 zero.
A Figura 4 mostra a manutenção de viabilidade bacteriana durante o tempo em bebidas possuindo diferentes sucos de fruta simples. Rham (L. rhamnosus)', Bif (B. animalis (Iaetis)). 4E7 representa o nível de bactérias de semeadura de 4 x 107 CFU/ml.
DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO
É uma descoberta dos presentes inventores que certas bebidas probióticas podem obter uma vida de prateleira longa e manter taxas de viabilidade bacteriana alta. Estes produtos de bebida são capazes de liberação > IO8CFU de bactérias por 29 ml (fl. oz) de bebida quando consumidos até 36 dias de refrigeração pós-enchimento.
O termo 'vida de prateleira’ tal como usado aqui refere-se à duração de tempo depois que uma bebida é embalada até que ela seja consumida ou testada quanto a bactérias viáveis. As bebidas mantêm um alto número de bactérias viáveis durante sua vida de prateleira. As bebidas mantêm um alto número de bactérias viáveis durante sua vida de prateleira fornecendo ao consumidor em consumo, um nível mínimo de > IO8CFU 29 ml (fl. oz) 5 de bactérias por de bebida, > 5 x 108 CFU 29 ml (fl. oz) de bactérias por de bebida, > IO9CFU 29 ml (fl. oz) de bactérias por de bebida, > 5 x IO9CFU 29 ml (fl. oz) de bactérias por de bebida, > IO10CFU 29 ml (fl. oz) de bactérias por de bebida, > 5 x 1010 CFU 29 ml (fl. oz) de bactérias por de bebida, > 1011 CFU 29 ml (fl. oz) de bactérias por de bebida, ou > 5 x 1011 CFU 29 ml 10 (fl. oz) de bactérias por de bebida. Tempo de consumo pode ser em qualquer tempo de dia 0 e em até 20 dias, 25 dias, 26 dias, 27 dias, 28 dias, 29 dias, 30 dias, 31 dias, 32 dias, 33 dias, 34 dias, 35 dias, 36 dias, 37 dias, 38 dias, 39 dias, 40 dias, 41 dias, ou 42 dias.
Bactérias do gênero Bifidobactéria são conhecidas exercerem uma influência benéfica na saúde humana. Números de Bifidobactérias elevados resultam em níveis aumentados de ácidos láticos e acéticos, que diminui o pH no trato digestivo, inibindo o desenvolvimento de bactérias nocivas tais como Clostridium perfringens, Clostridium difficile e uma Escherichia coli. Patogênica. Espécies de Lactobacilo são também conhecidas exercerem uma influência benéfica em muitos distúrbios e doenças incluindo desequilíbrios induzidos por antibiótico em microflora gastrointestinal, hipercolesterolemia, infecções vaginais, infecção por E. coli e imunidade abaixada. Shauss AG, Method of Action, Clinicai Application and Toxicity Data, 3 J. Advancement Med. 163 (1990). Estudos in vitro mostraram que L. aeidiphoIus pode inibir desenvolvimento de bactérias patogênicas tais como Helieobaeter pylori, Staphyloeoeeus aureus, Pseudomonas aeruginosa, e Sareina lutea. Shahani KM e outros, Natural Antibiotic Activity of Laetobaeillus aeidophilus and bulgarieus, 11 Culturad Dairy Products J. 14 (1976); Rolfe RD. The role of probiotics cultures in the control of gastrointestinal health. J Nutr. 2000 Feb;130(2S Supl.):396S-402S.
Cepas bacterianas probióticas de Bifidobactéria podem ser usadas nas bebidas, particularmente as espécies B. breve, B. animalis (laetis), B. longum, B. bifidum, B. adolescentis, B. thermophilum, e B. infantis. Bactérias probióticas do gênero Lactobacilo podem também ser usadas, particularmente as espécies L. acidophiius, L. casei, L rhamnosus, L, paracasei, L. johnsonii, L. reuteri e L. piantarum, L. lactis, L. buigaricus. Algumas bebidas 5 podem conter bactérias de múltiplas espécies. Cepas adequadas estão disponíveis comercialmente tais como B. animalis (lactis) HN019, L. rhamnosus HN001 e L. acidophiius NCFM, comercializado por Danisco USA, Ine como HOWARU Bifido, HOWARU Rhamnosus, e HOWARU Acidophilus,respectivamente.
Uma ou mais espécies bacterianas podem estar presentes em
uma bebida. A relação de uma espécie bacteriana para a outra pode variar amplamente. A relação pode ser de cerca de 0,00000001 a 1, cerca de 0,0000001 a 1, cerca de 0,000001 a 1, cerca de 0,00001 a 1, cerca de 0,0001 a 1, cerca de 0,001 a 1, cerca de 0,01 a 1, cerca de 0,1 a 1, cerca de 15 1 a 1. Quando duas bactérias estão presentes em uma bebida, as bactérias podem ser, por exemplo, B. animalis (lactis) e L rhamnosus. Outras combinações podem ser usadas.
Números bacterianos viáveis são frequentemente relatados como CFU, ou unidades formadoras de colônia. Uma colônia é formada por uma bactéria viável única quando as bactérias são colocadas em uma diluição adequada para formação de colônia única. Isto é, uma técnica padrão conhecida a microbiologistas. Tipicamente, a quantidade é expressada como o número de CFU em uma medição de líquido tal como mililitros (ml) ou onças líquidas (fl. oz). Regulação dos Estados Unidos 21 CFR 101.9(b)(5)(viii) define uma onça líquida como exatamente 30 ml. Números suficientes de bactérias viável podem ser necessários para obter os efeitos benéficos das bactérias probióticas. Frequentemente bactérias são embaladas em um certo nível de bactérias viáveis; no entanto, antes do consumo, os níveis podem diminuir prevenindo o consumidor de obtenção de uma dose benéfica de bactérias. De fato, o Centro Nacional para Medicina Complementar e Alternativa (NCCAM) identificou várias emissões referindo-se à qualidade de produtos probióticos incluindo: viabilidade das bactérias no produto, tipos e títuIo de bactérias no produto, e estabilidade sob armazenagem. "BACKGROUNDER: Biologically Based Practices: An Overview," citado acima.
Tipos de prebióticos que podem opcionalmente ser usados em produtos para consumo humano incluem inulina, fruto-oligossacarídeos 5 (FOS); galacto-oligossacarídeos (GOS), lactulose, e maltodextrina. Estes podem ser naturalmente produzidos em uma planta, semissintética, sintética, recombinante, etc. Tipicamente estas serão usadas em um estado semipurificado, no qual outros componentes da fonte de planta, fruta, flor, ou vegetal, ou outros componentes da reação sintética ou semissintética são diminuídas 10 em concentração e/ou removidas.
Inulina é uma fibra solúvel de ocorrência natural composta de uma mistura de oligômeros de graus variados de polimerizações. Inulinas são principalmente compreendidas de unidades de frutose e tipicamente possuem uma glicose terminal. Inulinas de planta geralmente contêm entre 2 15 a 140 unidades de frutose. Inulina pode ser obtida de uma variedade de fontes incluindo tubérculos de alcachofra de Jerusalém, dália, cebola, alho e chicória. Maltodextrina é um polissacarídeo moderadamente doce produzido de amido de milho. Lactulose é um açúcar sintético, que não é encontrado naturalmente. A lactulose de dissacarídeo (galacto-frutose) é sintetizada de 20 Iactose (galacto-glicose) por isomerização de glicose a frutose. Galactooligossacarídeos (GOS) podem também ser sintetizados de lactose; por exemplo, por uso de enzimas de β-galactosidase purificadas de Lactobacillus reuteri L103 como um catalisador.
Fruto-oligossacarídeos podem ser preparados por quaisquer de 25 vários métodos conhecidos na técnica. Por exemplo, fruto-oligossacarídeos podem ser extraídos de substâncias naturais. Fruto-oligossacarídeos são encontrados em muitas espécies de plantas incluindo dálias, chicória, cebolas, alho, chalotas, centeio de trigo, alcachofras e tomates. Frutooligossacarídeos podem também ser produzidos enzimaticamente por meio 30 de técnicas químicas. Por exemplo, fruto-oligossacarídeos podem ser sintetizados por tratamento de sacarose com enzimas tais como frutosiltransferases (EC 2.4.1.9) e frutofuranosidases (EC 3.2.1.26). Hidaka H. e outros A fructooligosaccharides-producing enzyme from Aspergillus niger ATCC 20611. Agric. Biol. Chem. 1988;52:1181-1187. Fruto-oligossacarídeos são particularmente bem-conhecidos para uso em promoção do desenvolvimento de espécies de Bifidobactéria. (Rossi M, Corradini C, Amaretti A, Nicolini M, 5 Pompei A, Zanoni S, Matteuzzi D. Fermentation of fructooligosaccharides and inulin by bifidobactéria: a comparative study of pure and fecal cultures. Appl Environ Microbiol. 2005 Oct;71 (10):6150-8.).
Fruto-oligossacarídeos são tipicamente cadeias lineares de frutose ligadas a um terminal de glicose. Os fruto-oligossacarídeos podem ser 10 uma mistura de polímeros de cadeia curta. O comprimento da cadeia de frutose, também chamado o grau de polimerização ou DP, pode ser de cerca de 2 a cerca de 5. Tipicamente, o comprimento de cadeia de frutose varia de 2 a 4. Tais fruto-oligossacarídeos de cadeia curta podem também ser referidos como GF2 (1-cestose), GF 3 (nistose), e GF4 (nistose de 1-β15 frutofuranosila). Fruto-oligossacarídeos comercialmente disponíveis adequados podem ser usados, por exemplo, Nutraflora® por GTC Nutrition (Golden, CO 80401).
As bactérias podem ser preparadas de uma variedade de modos conhecidos na técnica, incluindo, por exemplo, desenvolvimento de meios 20 contendo caseína. Opcionalmente, as bactérias podem ser desenvolvidas sem caseína, fornecendo uma preparação bacteriana livre completamente diária. As bactérias podem ser armazenadas por refrigeração, congelamento, ou secagem por congelamento sem diminuição de viabilidade abaixo de um nível desejado. As bactérias podem ser adicionadas à bebida enquanto 25 no mesmo estado em que elas foram armazenadas, tais como enquanto congeladas, secadas por congelamento, ou refrigeradas. Opcionalmente, as bactérias podem ser descongeladas antes de adição à bebida. As bactérias podem ser congeladas depois de desenvolvimento e mantidas em um estado congelado até que elas fossem adicionadas à bebida.
Em um método para preparo da bebida de suco de fruta, os fru
to-oligossacarídeos são combinados com sucos de fruta, a mistura de frutooligossacarídeos/suco é pasteurizada, em seguida as bactérias congeladas são adicionadas à mistura de fruto-oligossacarídeos/suco. Com a condição de que as bactérias não sejam pasteurizadas, os outros ingredientes podem ser pasteurizados e combinados em qualquer ordem adequada. Os sucos de fruta podem estar em várias formas incluindo líquidos, concentrados, extra5 tos, purês, pastas, polpas, e similares. A bebida de suco é dispensada em garrafas, pacotes, ou vasos, e selada através de métodos adequados conhecidos na técnica. Os recipientes selados podem ser expedidos ou armazenados opcionalmente sob refrigeração. Temperaturas de refrigeração tipicamente possuem um limite inferior de cerca de O0C, cerca de 2°C, cerca de 10 4°C, cerca de 6°C, cerca de 8°C, ou cerca de 10°C. Temperaturas de refrigeração tipicamente possuem um limite superior de cerca de 4°C, cerca de 6°C, cerca de 8°C, ou cerca de 10°C. Frequentemente, a temperatura de refrigeração é cerca de 2°C a cerca de 6°C.
Em outro método para preparo da bebida de suco de fruta, as 15 bactérias são adicionadas a um extrato de suco de maçã em um recipiente para formar uma pasta sob condições que minimizam contaminação da pasta com outras bactérias indesejáveis. Em um recipiente separado, frutooligossacarídeos são combinados com sucos de fruta. Os sucos de fruta podem estar em várias formas incluindo concentrados, extratos, purês, pastas, 20 polpas, e similares. A pasta e a mistura de suco de fruta/frutooligossacarídeos são combinadas juntas para formar uma bebida final, que é dispensada em garrafas, pacotes, ou vasos, e selada através de métodos adequados conhecidos na técnica. Os recipientes selados podem ser expedidos ou armazenados, opcionalmente sob refrigeração. Temperaturas de 25 refrigeração tipicamente possuem um limite inferior de cerca de 0°C, cerca de 2°C, cerca de 4°C cerca de 6°C cerca de 8°C, ou cerca de 10°C. Temperaturas de refrigeração tipicamente possuem um limite superior de cerca de 4°C, cerca de 6°C, cerca de 8°C, ou cerca de 10°C. Frequentemente, a temperatura de refrigeração é de cerca de 2°C a cerca de 6°C.
Uma combinação de suco de fruta adequada para a bebida inclui
sucos de maçã, banana, laranja, manga, e abacaxi. Esta bebida é referida aqui como Laranja-Manga-Abacaxi ou OMP. Espécies bacterianas que exibem excelente sobrevivência nesta bebida incluem B. animalis (lactis). Uma segunda combinação de suco de fruta adequada denominada "baga” ou "mirtilo" inclui sucos de maçã, banana, e mirtilo. Suco de laranja foi também constatado manter excelente sobrevivência de L. Rhamnosus.
Vitaminas e minerais podem ser adicionados às bebidas de su
co. Qualquer vitamina adequada pode ser adicionada. Por exemplo, as vitaminas adicionadas podem ser uma ou mais de: Vitamina A, Vitamina B1, Vitamina B2, Vitamina B3 (niacina), Vitamina B5 (ácido pantotênico), Vitamina B6, Vitamina B7, Vitamina B9, Vitamina B12, Vitamina C, Vitamina D, Vi10 tamina E, ou Vitamina K. Qualquer mineral adequado pode ser adicionado. Por exemplo, os minerais adicionados podem ser um ou mais de cálcio, cloreto, cromo, magnésio, fósforo, potássio, sódio, súlfur, cobalto, cobre, flúor, iodo, ferro, manganês, molibdênio, níquel, selênio, vanádio, zinco. As vitaminas e minerais podem ser adicionadas em qualquer forma compatível com 15 exigências nutricionais humanas. As vitaminas e minerais podem ser adicionados a qualquer nível desejado. As quantidades na bebida podem estar em qualquer porcentagem adequada da Ingestão Diária de Referência (RDI). Por exemplo, a vitamina ou mineral pode estar presente em um limite superior de cerca de: 2%, 5%, 10%, 20%, 25%, 30%, 40%, 50%, 60%, 75%, 20 100%, 150%, 200%, 300%, 400%, ou cerca de 500% da RDI. A vitamina ou mineral pode estar presente em um limite inferior de cerca de: 1%, 2%, 5%, 10%, 20%, 25%, 30%, 40%, 50%, 60%, 75%, 100%, 150%, 200%, ou cerca de 300% do RDI. Alternativamente, a quantidade de vitamina ou mineral adicionada pode ser medida em unidades internacionais (IU) ou peso/peso 25 (p/p). Por exemplo, uma quantidade servida de bebida pode conter 100% da RDI de cada uma de Vitamina E, Vitamina B3 (niacina), Vitamina B5 (ácido pantotênico), Vitamina B6, e Vitamina B12.
Opcionalmente, ingredientes adicionais conhecidos ou esperados possuírem efeitos benéficos podem ser adicionados. Por exemplo, a bebida pode conter um ou mais dos seguintes: óleos tais como ômega-3 ou ômega-6, ervas e temperos. As ervas e ingredientes de tempero podem estar em forma extraída. Qualquer erva e tempero adequado conhecido na técnica podem ser usados como um ingrediente. Ervas e temperos exemplares que podem ser adicionados incluem Kava-Kava, Erva de São João, Palmeira Anã, e ginseng.
O estado do inóculo bacteriano pode influenciar a sobrevivência das bactérias na bebida de suco. Previamente, as bactérias foram adicionadas em forma secada por congelamento. Os inventores descobriram que adição de bactérias congeladas fomece um melhoramento inesperado em sobrevivência bacteriana na bebida. A porcentagem de bactérias adicionadas à bebida que permanece viável no fim do período de armazenagem possui um limite superior de cerca de: 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95% ou 100%. A porcentagem de bactérias adicionadas à bebida que permanece viável no fim de armazenagem possui um limite inferior de cerca de 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, ou cerca de 90%.
Os sucos podem estar presentes na bebida em várias quantidades um com relação ao outro. Quantidades iguais de cada suco podem estar presente. Cada suco pode também estar presente em maiores quantidades do que um ou mais sucos. Nesse sentido pode ser de cerca de 10 a 50% 20 mais de um suco do que outro suco, cerca de 50 a 100% mais do que outro suco, cerca de 100 a 200% mais do que outro suco, cerca de 200 a 300% mais do que outro suco, cerca de 300 a 500% mais do que outro suco, ou cerca de 500 a 1000% mais do que outro suco. Em uma mistura de suco de Baga, o suco de maçã pode estar presente em entre 40 e 80% dos sucos; o 25 suco de abacaxi pode estar presente em entre 5 e 15% dos sucos; purê de banana pode estar presente entre 10 e 25% dos sucos; e purê de mirtilo pode estar presente entre 2 e 10% dos sucos. Em uma mistura de suco Tropical, o suco de maçã pode estar presente em entre cerca de 20 e 50%,; o purê de manga (suco) pode estar presente em entre 10 e 40%, o suco de 30 laranja pode estar presente em entre 15 e 35%, o suco de abacaxi pode estar presente em entre 5 e 20%; e o purê de banana (suco) pode estar presente em entre 2 e 12%. Tais porcentagens são porcentagens de peso/peso. A quantidade de suco de maçã possui um limite inferior de cerca de 2%, cerca de 5%, cerca de 10%, cerca de 20%, cerca de 30%, ou cerca de 35%, da bebida total. A quantidade de suco de maçã possui um limite superior de cerca de 40%, cerca de 50%, cerca de 60%, ou cerca de 70%, 5 da bebida total. Tipicamente, a quantidade de suco de maçã é entre 30 e 70% da bebida total.
O Brix de um suco é equivalente à medição total dos sólidos solúveis no suco de fruta. Os sólidos solúveis principalmente compreendem açúcares (sacarose, frutose e glicose) e por esse motivo Brix é considerado 10 uma medição de açúcar presente no suco. Para referir-se ao Brix usou-se graus de Brix, que são equivalentes a porcentagens. O valor de Brix das bebidas possui um limite inferior de cerca de 13,5, cerca de 14,0, cerca de
14.5, cerca de 15,0, cerca de 15,5, ou cerca de 16,0. O valor de Brix das bebidas possui um limite superior de cerca de 14,0, cerca de 14,5, cerca de
15,0, cerca de 15,5, cerca de 16,0, cerca de 16,5, cerca de 17,0, cerca de
17.5, ou cerca de 18,0. Frequentemente os valores de Brix das bebidas de suco é na faixa de cerca de 14,0 a cerca de 15,0.
Os valores de pH das bebidas possuem um limite inferior de cerca de 3,2, cerca de 3,6, cerca de 3,8, ou cerca de 4,0. Os valores de pH das bebidas possuem um limite superior de cerca de 3,6, cerca de 3,8, cerca de 4,0, ou cerca de 4,2. Frequentemente, a faixa de pH é de cerca de 3,4 a cerca de 3,9.
Em 36 dias de refrigeração, depois de preparação da bebida, o número de bactérias contidas na bebida possui um limite inferior de cerca de 25 106 CFU/29 ml (fl. oz), cerca de 5 x 106 CFU/29 ml (fl. oz), cerca de 107 CFU/29 ml (fl. oz), cerca de 5 x 107 CFU/29 ml (fl. oz), cerca de 108 CFU/29 ml (fl. oz), cerca de 5 x 108 CFU/29 ml (fl. oz), cerca de 109 CFU/29 ml (fl. oz), ou cerca de 5 x 109 CFU/29 ml (fl. oz). Em 36 dias de refrigeração, depois da preparação da bebida, o número de bactérias contidas na bebida 30 possui um limite superior de cerca de 108 CFU/29 ml (fl. oz), cerca de 5 x 108 CFU/29 ml (fl. oz), cerca de 109 CFU/29 ml (fl. oz), cerca de 5 x 109 CFU/29 ml (fl. oz), cerca de 1010 CFU/29 ml (fl. oz), cerca de 5 x 1010 CFU/29 ml (fl. oz), cerca de 1011 CFU/29 ml (fl. oz), cerca de 5 x 1011 CFU/29 ml (fl. oz), cerca de 1012 CFU/29 ml (fl. oz), ou cerca de 5 x 1012 CFU/29 ml (fl. oz). Viabilidade pode ser avaliada em qualquer tempo conveniente pós-produção entre cerca de 30 e 36 dias.
A quantidade de fruto-oligossacarídeos presentes nas bebidas
possui um limite inferior de cerca de 0,01 g/29 ml (fl. oz), cerca de 0,05 g/29 ml (fl. oz), cerca de 0,1 g/29 ml (fl. oz), cerca de 0,13 g/29 ml (fl. oz)cerca de
0,5 g/29 ml (fl. oz), cerca de 1 g/29 ml (fl. oz), cerca de 1,5 g/29 ml (fl. oz), ou cerca de 2 g/29 ml (fl. oz). A quantidade de fruto-oligossacarídeos presentes 10 nas bebidas possui um limite superior de cerca de 0,1 g/29 ml (fl. oz), cerca de 0.5 g/29 ml (fl. oz), cerca de 1 g/29 ml (fl. oz) cerca de 1,5 g/29 ml (fl. oz), cerca de 2 g/29 ml (fl. oz), cerca de 2,5 g/29 ml (fl. oz), ou cerca de 3 g/29 ml (fl. oz).
Frequentemente, garrafas capazes de conter 29 ml (10 fl. oz) 15 são usadas como recipientes para a bebida. Tipicamente, uma bebida manufaturada de acordo com este processo reterá viabilidade bacteriana suficiente para períodos prolongados de modo que uma quantidade de 29 ml (10 fl. oz) servida fornecerá ao consumidor > 5 x 109 CFU de bactérias e > 1 g de fruto-oligossacarídeos. Frequentemente, a quantidade de 29 ml (10 fl. oz) 20 servida possuirá 5 x 109 CFU de bactérias e 1,33 g de frutooligossacarídeos.
EXEMPLO 1
Preparação de bebida de Iarania manaa abacaxi (tropical) usando bactérias congeladas
Suco de maçã, purê de banana, suco de manga, suco de laran
ja, e suco de abacaxi foram combinados com fruto-oligossacarídeos suficientes para produzir em tomo de 0,1 g/29 ml (fl. oz) de fruto-oligossacarídeos. A mistura foi brevemente pasteurizada em seguida bombeada em tanque de produto acabado. As bactérias probióticas foram adicionadas lentamente em 30 forma congelada e misturadas com a mistura de suco de fruta para formar a bebida final. Para a bebida tropical, aproximadamente 1151 x 1011 cfu foram adicionadas por 1135,62 I (300 gal) de mistura de suco I frutooligossacarídeo.
EXEMPLO 2
Preparação de bebida de baga usando bactérias congeladas
A bebida de baga foi preparada com suco de maçã, suco de abacaxi, purê de banana e purê de mirtilo combinado com frutooligossacarídeos suficientes para produzir em torno de 0,1 g/29 ml (fl. oz) de fruto-oligossacarídeos de acordo com o método do exemplo 1. Para a bebida de baga, aproximadamente 1535 DCU foram adicionadas por 1135,62 I (300 gal) de mistura de suco/fruto-oligossacarídeo. Além disso, vitaminas e minerais foram adicionados para produzir 100% da RDI das seguintes vitaminas por quantidade servida de bebida: vitamina E (30 IU), Niacina (20 mg), Ácido pantotênico (10 mg), Vitamina B12 (6 pg) e Vitamina B6 (2 mg). Ácido ascórbico foi adicionado em 0,36% de p/p. Esta combinação de ingredientes forneceu inesperadamente boa sobrevivência bacteriana. Em particular, a inclusão das vitaminas e minerais produziu viabilidade bacteriana melhorada em comparação à bebida de baga preparada sem as vitaminas e minerais. EXEMPLO 3
Preparação de suco probiótico de laranja manga abacaxi usando bactérias secadas por congelamento.
Suco de maçã foi pasteurizado e em seguida armazenado em
um tanque de 2.000 galões em um tanque de Produto limpo. O suco de maçã foi em seguida transferido em um tanque de Pasta de Inoculação Probiótica. Uma vez no tanque, agitação foi aplicada para criar um vórtice e um ou mais sachês de bactérias foram adicionados e misturados no suco de maçã para formar a pasta.
As bactérias probióticas são embaladas para prevenir contaminação. As bactérias podem ser armazenadas geladas durante períodos de cerca de três meses ou congeladas durante cerca de um ano.
Os tanques foram esterilizados antes de usar para armazenagem, ou mistura de quaisquer dos ingredientes da bebida. Esterilização pode ser desempenhada por qualquer método adequado. Por exemplo, esterilização pode ser obtida por autoclavagem, ou por uso de soluções sanitizantes. A superfície externa da embalagem contendo os probióticos também foi esterilizada antes de adição ao tanque de pasta. Estes e outros métodos são usados para minimizar a presença de organismos indesejados na bebida final.
As bactérias probióticas são adicionadas ao suco de maçã len
tamente e cuidadosamente. Quando todas as bactérias foram adicionadas, a mistura foi continuada até que as partículas secadas por congelamento dissolvessem no suco de maçã. A quantidade correta de bactérias para adicionar à bebida para reter a quantidade desejada de bactérias vivas no fim do 10 período de vida de prateleira pode facilmente ser determinada sem experimentação indevida. Por exemplo, A Figura 3 mostra dados de sobrevivência bacteriana úteis em produção da mesma determinação. Tipicamente, entre quatro e oito sachês cada um contendo de 1 a 2,5 Kg de bactérias são adicionados para obter a quantidade desejada.
Em um segundo tanque de 2000 galões, os sucos restantes fo
ram misturados com os fruto-oligossacarídeos para formar uma mistura de suco/fruto-oligossacarídeos.
Finalmente, a pasta foi transferida do Tanque de Pasta para o tanque de 2000 Galões contendo a mistura de suco/fruto-oligossacarídeos. 20 A pasta e mistura de suco/fruto-oligossacarídeos foram combinadas cuidadosamente. Durante um período de dois minutos, a mistura combinada foi recirculada por meio do tanque de Pasta. A bebida concluída foi em seguida vertida em recipientes. Bateladas adicionais podem ser criadas com apenas uma breve lavagem do tanque de Pasta com a condição de que as batela25 das adicionais sejam iniciadas dentro de 15 minutos. Uma demora mais longa do que esta requer que o tanque de pasta seja cuidadosamente limpo.
Neste exemplo, bactérias foram misturadas com 120 galões de suco de maçã no tanque de pasta. A quantidade de bactérias pode ser adaptada a fim de obter a quantidade desejada de bactérias na bebida final. Tipi30 camente, um sachê contém cerca de 2 kg de bactérias. Neste exemplo, 8 sachês foram usados. A Pasta foi adicionada a 1680 galões de mistura de suco/frutossacarídeos para produzir um volume final de 1800 galões. Estas quantidades podem ser graduadas para ajustar as quantidades finais desejadas de bebida.

Claims (24)

REIVINDICAÇÕES
1. Vaso carregado para conter uma bebida e possuindo um selo à prova de violação, a referida bebida compreendendo: (i) suco de maçã; (ii) suco de banana; (iii) suco de mirtilo; (iv) suco de abacaxi; (v) >= 0,1 g/29 ml (fl. oz) de fruto-oligossacarídeos; e (vi) >= 108 CFU/29 ml (fl. oz) de bactérias selecionadas do grupo consistindo em Bifidobacterium animalis (lactis), Lactobacillus rhamnosus, e misturas das mesmas; em que quando a referida bebida é refrigerada durante 36 dias >= 108 CFU/29 ml (fl. oz) das referidas bactérias permanecem.
2. Vaso carregado para conter uma bebida e possuindo um selo à prova de violação, a referida bebida compreendendo: (vii) suco de laranja; (viii) suco de manga; (ix) suco de abacaxi; (x) suco de maçã; (xi) >= 0,1 g/29 ml (fl. oz) de fruto-oligossacarídeos; e (xii) >= 108 CFU/29 ml (fl. oz) de bactérias selecionadas do grupo consistindo em Bifidobaeterium animalis (lactis) Lactobacillus rhamnosus, e misturas das mesmas; em que quando a referida bebida é refrigerada durante 36 dias >= 108 CFU/29 ml (fl. oz) das bactérias permanecem.
3. Bebida como definida na reivindicação 1 ou 2, que compreende >= 0,5 g/29 ml (fl. oz) de fruto-oligossacarídeos.
4. Bebida como definida na reivindicação 1 ou 2, que compreende >= 1g/29 ml (fl. oz) de fruto-oligossacarídeos.
5. Bebida como definida na reivindicação 1 ou 2, que compreende >= 5 x 108 CFU/29 ml (fl. oz) das referidas bactérias.
6. Bebida como definida na reivindicação 1 ou 2, que compreende >= 109 CFU/29 ml (fl. oz) das referidas bactérias.
7. Bebida como definida na reivindicação 1 ou 2, em que as bactérias são Bifidobacterium animalis (lactis).
8. Bebida como definida na reivindicação 1 ou 2, em que as bactérias são Lactobacillus rhamnosus.
9. Bebida como definida na reivindicação 1 ou 2, em que as bactérias são uma mistura de Bifidobacterium animalis (lactis) e Lactobacillus rhamnosus.
10. Vaso de acordo com a reivindicação 2, em que a bebida também compreende suco de banana.
11. Método de preparo de uma bebida de suco capaz de manutenção de um alto número de bactérias viáveis, compreendendo: combinação de fruto-oligossacarídeos com suco de maçã e um ou mais sucos de fruta selecionados do grupo consistindo em: sucos de fruta de banana, mirtilo, laranja, manga, e abacaxi para formar uma mistura de suco de fruta/fruto-oligossacarídeo; combinação de bactérias selecionadas do grupo consistindo em Bifidobacterium animalis (lactis), Lactobacillus rhamnosus, e misturas das mesmas, com a mistura de suco de fruta/fruto-oligossacarídeo para formar uma bebida de suco.
12. Método de acordo com a reivindicação 11, em que a referida bebida contém >= 0,1 g/29 ml (fl. oz) de fruto-oligossacarídeos.
13. Método de acordo com a reivindicação 11, em que a referida bebida contém >= 0,5 g/29 ml (fl. oz) de fruto-oligossacarídeos.
14. Método de acordo com a reivindicação 11, em que a referida bebida contém >= 1 g/29 ml (fl. oz) de fruto-oligossacarídeos.
15. Método de acordo com a reivindicação 11, também compreendendo: enchimento de vasos com a bebida de suco e selamento dos vasos carregados.
16. Método de acordo com a reivindicação 11, em que as bactérias são Bifidobacterium animalis (lactis).
17. Método de acordo com a reivindicação 11, em que as bactérias são Lactobacillus rhamnosus.
18. Método de acordo com a reivindicação 11, em que as bactérias são uma mistura de Bifidobaeterium animalis (lactis) e Lactobacillus rhamnosus.
19. Método de acordo com a reivindicação 11, também compreendendo armazenagem da bebida de suco sob refrigeração durante pelo menos 30 dias.
20. Método de acordo com a reivindicação 11, também compreendendo teste da bebida de suco para as bactérias viáveis em entre 30 e 36 dias.
21. Vaso de acordo com a reivindicação 1 ou 2, em que a referida bebida compreende: (xiii) entre 0,10 e 0,15 g/29 ml (fl. oz) de fruto-oligossacarídeos; e entre 1,0 x 108 e 1,0 x 1012 CFU/29 ml (fl. oz) de Bifidobaeterium animalis (lactis) bactérias; em que quando a bebida é refrigerada durante 36 dias, entre 1,0 x 108 e 1,0 x 1012 CFU/29 ml (fl. oz) das referidas bactérias permanecem.
22. Vaso de acordo com a reivindicação 1 ou 2, em que a referida bebida compreende: (xiv) entre 0,10 e 0,15 g/29 ml (fl. oz) de fruto-oligossacarídeos; e entre 1,0 x 108 e 1,0 x 109 CFU/29 ml (fl. oz) de Bifidobacterium animalis (lactis) bactérias; em que quando a bebida é refrigerada durante 36 dias, entre 1,0 x 108 e 1,0 x 109 CFU/29 ml (fl. oz) das referidas bactérias permanecem.
23. Vaso de acordo com a reivindicação 1 ou 2, em que a referida bebida compreende: (xv) entre 0,10 e 0,15 g/29 ml (fl. oz) de fruto-oligossacarídeos; e entre 1,0 x 109 e 1,0 x 1012 CFU/29 ml (fl. oz) de Bifidobacterium animalis (lactis) bactérias; em que quando a bebida é refrigerada durante 36 dias, entre 1,0 x 109 e 1,0 x 1012 CFU/29 ml (fl. oz) das referidas bactérias permanecem.
24. Vaso de acordo com as reivindicações de 21 a 23, em que a bebida também compreende suco de banana.
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