BRPI0714098A2 - uso de um modelador da via rho/rock/p13k/akt, composição farmacêutica e produtos - Google Patents

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Zacharie Taoufiq
Liliane Ciceron
Paco Pino
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Abstract

USO DE UM MODULADOR DA VIA RHO/ROCK/PI3K/AKT, COMPOSIçãO FARMACêUTICA E PRODUTOS A presente invenção trata do uso de um modulador da via Rho/ROCK/PI3K/Akt para a fabricação de um medicamento destinado à prevenção ou ao tratamento de patologias associadas a infecções por um parasita protozoário.

Description

"USO DE UM MODULADOR DA VIA Rho/ROCK/PI3K/Akt, COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA E PRODUTOS" Campo da Invenção
A presente invenção trata de composições farmacêuticas para o tratamento das doenças parasitárias causadas por protozoários.
Antfcedentes da Invenção
A malária e a tripanosomíase africana (doença do sono) representam as duas principais infecções tropicais transmitidas por vetor " A malária, por exemplo, permanece um grande desafio para a saúde pública com 3,2 bilhões de pessoas que vivem em 107 países atualmente em risco. Todos os anos, 300-500 milhões de casos clínicos são relatados e mais de um milhão de pessoas morrem devido às severas complicações associadas a uma infecção por Plasmodium falciparum (malária severa)1, tais como falência múltipla de órgãos (rim, fígado, pulmão, baço) ou uma sindrome neurológica aguda denominada malária cerebral (CM).
A malária cerebral afeta principalmente crianças pequenas e mulheres grávidas na África subsaariana, ao passo que a falência múltipla de órgãos é vista, sobretudo em adultos do sudeste da Ásia. Os casos de malária severa podem consequentemente evoluir rapidamente, muitas vezes em 24 horas, para o coma e a morte. Embora a CM tenha sido extensamente estudada, sua patogênese continua desconhecida e não existe meio para predizer o inicio da doença. Além disso, a sucessão de eventos que levam a complicações cerebrais e convulsões não está bem estabelecida. A CM é diagnosticada em pacientes que vivem em regiões onde a malária é endêmica ou que viajaram recentemente para essas regiões, que apresentam sintomas neurológicos agudos (desde consciência prejudicada a convulsões ou coma) e esfregaços de sangue periférico positivos para os parasitas da malária P. falciparum, quando outras causas para encefalopatia tiverem sido excluídas2. Até agora, o tratamento de emergência para a malária severa consistiu principalmente na administração intravenosa de quinina, mas pesquisas e experiências clínicas estão sendo atualmente realizadas com outras drogas antimalarianas tais como a artemisinina e derivados Apesar da grande eficácia dessas moléculas em limpar o sangue de parasitas, 15-20% de mortalidade é ainda observada e casos graves de ataxia cerebelar de inicio tardio ou outras seqüelas neurológicas cognitivas foram relatadas em pacientes tratados após a recuperação do coma Assim, os tratamentos atuais da malária severa, que repousam principalmente sobre uma estratégia antiparasitária direta, não parecem ser suficientes e outras abordagens adicionais são necessárias para melhorar os efeitos da doença.
Os membros da família Rho de GTpases pequenos são conhecidos por desempenhar um papel primordial na transmissão de sinal de vários receptores membranares. Eles atuam como comutadores moleculares que são ativos quando ligados a GTP e inativos quando ligados a GDP, e são os primeiros intermediários de cascatas de sinalização celular com efetor a jusante Rho-quinase (ROCK) 1G. Os inibidores da Rho-quinase (ROCKI) estão sendo atualmente investigados para a terapia vascular e neuroprotetora. O Fasudil é um Inibidor de Rho-quinase disponível para uso clínico. Ele foi lançado e tem sido amplamente usado no Japão desde 1995 contra os vasoespasmos cerebrais em pacientes após hemorragia subaracnoideia e mostrou recentemente ser seguro e eficaz em ensaios clínicos na fase 2 para pacientes com angina estável16 ou derrame cerebral ísquêmico 1V
Um objeto da presente invenção consiste em fornecer tratamentos para patologias associadas com uma infecção parasitária.
Descrição Resumida da Invenção A presente invenção surgiu a partir de uma revelação inesperada, por parte dos Inventores, de que o Fasudil é confiável para prevenir a morte celular induzida por Plasmodium falciparum, a disrupção do endotélio, e a ativação endoteiiai.
Assim, a presente invenção trata de um método para prevenir e/ou tratar patologias associadas com uma infecção por um parasita protozoário em um indivíduo, que compreende a administração de uma quantidade eficaz de um modulador da via Rho/ROCK/PI3K/Akt ao referido indivíduo.
Uma realização do método definido acima compreende igualmente a administração de pelo menos u m composto que possui uma atividade antiparasitária. A presente invenção trata também do uso de um modulador da
via Rho/ROCK/PI3K/Akt para a fabricação de um medicamento destinado à prevenção e/ou ao tratamento de patologias associadas a uma infecção por um parasita protozoário.
Em uma realização do uso definido acima, o medicamento compreende igualmente pelo menos um composto que possui uma atividade antiparasitária.
A presente invenção trata ainda de uma composição farmacêutica que compreende como substâncias ativas:
- pelo menos um modulador da via Rho/ROCK/PI3K/Akt, e
. pelo menos um composto que possui uma atividade
antiparasitária, em associação com um suporte farmaceuticamente aceitável.
A presente invenção também trata de produtos que contêm:
- pelo menos um modulador da via Rho/ROCK/PI3K/Akt, e
- pelo menos um composto que possui uma atividade antiparasitária,
como uma preparação combinada para uso simultâneo, separado ou seqüencial para a prevenção ou ao tratamento de patologias associadas com uma infecção por um parasita protozoário. Descrição Detalhada da Invenção Modulador da via Rho/ROCK/PI3K/Akt
De acordo com a presente invenção, a via Rho/ROCK/PI3K/Akt compreende uma Proteína Rho de Ligação a GTP1 de preferência RhoA; uma quinase Rho (ROCK), de preferência uma quinase RhoA; a fosfaditil insositol 3 quinase (PI3K); a quinase Akt: os alvos celulares da quinase Akt, tais como a oxido nitrico sintase endotelial (eNOS); e os componentes membranares celulares que são suscetíveis de ativar a proteína Rho1 interagindo com ela, tais como as moléculas de adesão presentes na membrana. Essa via é definida em particular em Wolfrum et al. (2004) Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. 24:1842-1847, Os inventores mostraram que essa via podia ser ativada em células, especialmente células endoteliais, como um conseqüência da citoaderência parasitária. Mais precisamente, a aderência das células parasitizadas ou de parasitas na superfície de cêlulas-alvo não infectadas de um organismo infectado induz, nessas células-alvo, a ativação da Rho através das moléculas de adesão presentes na membrana; a Rho ativada ativa então uma quinase-Rho que, entre diversos outros alvos, inibe a quinase PI3K e Akt. Nas células endoteliais às quais aderiram os eritrócitos infectados, por exemplo, a inibiçâo da kinase Akt pode em termos ser responsável pela inibiçâo eNOS, que em particular atenua o controle negativo que a eNOS exerce sobre a apoptose, induzindo com isso a apoptose das células endoteliais aderidas e disrupçio do endotélio.
De acordo com a presente invenção, um "modulador da via Rho/ROCK/PI3K/Ak" se refere a um composto que é suscetível de modular a atividade da via Rho/ROCK/PI3K/Akt de tal forma que o resultado da via é o oposto do que ocorre normalmente com a ativação da proteína Rho. Como se pode ver, o modulador visa modular a via Rho/ROCK/PI3K/Akt das células de um indivíduo que pode ser infectado ou que está infectado por um parasita protozoário. Em particular, o modulador da via Rho/ROCK/PI3K/Akt é suscetível (i) de inibir pelo menos uma das quinase Rho e Rho1 e/ou (ii) a ativar pelo menos um dentre PI3K. quinase Akt1 e eNOS. De preferência, o modulador Rho/ROCK/PI3K/Akt da via atua ligando com sua proteína alvo (por * 5 exemplo, Rho1 quinase Rho, PI3K, quinase Akt ou eNOS). Esses moduladores da via Rho/ROCK/PI3K/Akt são úteis, em particular, para prevenir as conseqüências negativas da citoaderência parasitária em organismos infectados.
De preferência, o modulador da via Rho/ROCK/PI3K/Akt é um inibidor da quinase Rho (ROCKI). Os ROCKIs estão descritos em particular em Tamura et al. Development of specific Inibidor de Rho-quinases and their clinicai application Biochim. Biophys. Acta 2005;1754:245-252. Outros ROCKIs estão também descritos em EP 1 256 574, EP 1 270 570, e EP 1 550 660.
Mais preferencialmente, o modulador da via Rho/ROCK/PI3K/Akt é um ROCKI escolhido a partir do grupo constituído pelos compostos com as seguintes fórmulas: F
O
O1
X u
F
O
ou seus sais farmaceuticamente aceitáveis.
Mais preferencialmente, o modulador da via Rho/ROCK/PI3K/Akt é um ROCKI escolhido no grupo constituído pelos compostos com as seguintes fórmulas:
ou seus sais farmaceuticamente aceitáveis. Esses dois últimos compostos sâo respectivamente denominados Fasudil (também conhecido como HA-1077 ou AT877) e Hydroxifasudil (também conhecido como H-4413). O hidroxifasudil é um metabólito ativo de Fasudil.
De acordo com a presente invenção, os sais farmaceuticamente aceitáveis designam os sais de adição de ácidos orgânicos e inorgânicos relativamente não-tôxicos, e os sais de adição básicos, dos compostos mencionados acima. Como exemplos de sais, podem ser citados o hidrobrometo, o hidrocloreto, o sulfato, o bissulfato, o fosfato, o nitrato, o acetato, o oxalato, o valerato, o oleato, o palmitato, o estearato, o laurato, o borato, o benzoato, o lactato, o fosfato, o tos ilato, o citrato, o maleato, o
H fumarato, o sucinato, ο tartarato, ο naftilato, ο mesilato, ο gluco-heptonato, ο lactiobionato, os sulfamatos, os malonatos, os salicilatos, os propionatos, os metileno-bis-b-hidroxinaftoatos, os gentisatos, os isetionatos, os di-p- toluoiltartaratos, os metano-sulfonatos, os etanossulfonatos, os - 5 benzenossulfonatos, os p-toluenossulfonatos, os ciclo-hexilsulfamatos, o quinateslaurilsulfonato, a amina, e os sais metálicos (por exemplo, de sódio, potássio, cálcio, bário, zinco, magnésio, ou alumínio), e similares (ver, por exemplo, Berge et al. (1977) «Pharmaceutical Salts» J. Pharm. Sc/. 66:1-19), O sal hidrocloreto de Fasudil é preferido. Patologias
De acordo com a presente invenção, "patologias associadas com uma infecçSo por um parasita protozoário" designa os distúrbios, as doenças as síndromes que sâo direta ou indiretamente conseqüência de uma infecção por um parasita protozoário. As patologias de acordo com a presente invenção decorrem de preferência, parcial ou totalmente, de apoptose induzida, ativação celular, em particular ativação endotelial, e/ou disrupção do endotélio, que podem por sua vez decorrer em particular da citoaderência parasitária.
De preferência, o parasita protozoário é escolhido no grupo constituído por Trypanosoma spp e Plasmodium spp. Em particular, o parasita protozoário pode ser escolhido no grupo constituído por Plasmodium falciparum e Trypanosoma brucei spp., tal como Trypanosoma bnicei brucei, Trypanosoma brucei gambiense, e Trypanosoma brucei rhodesiense.
As patologias são de preferência escolhidas no grupo constituído pela malária, e tripanosomíase africana (doença do sono). Mais preferencialmente, as patologias são escolhidas no grupo
constituído pela malária severa, malária cerebral, sindrome da falência múltipla de órgãos, e estágios avançados da tripanosomíase africana.
Compostos que possuem uma atividade antiparasitãria De acordo com a presente invenção, um "composto que possui uma atividade antiparasitária" designa qualquer composto que é usado durante o tratamento de infecções por um parasita protozoário ou suas conseqüências patológicas. O composto que possui uma atividade antiparasitária designa de preferência um composto usado para diminuir a carga parasitária em um organismo infectado.
Os moduladores da vias Rho/ROCK/PI3K/Akt são úteis como tratamento complementar nas doenças parasitárias. Como tal, a associação de um modulador da via Rho/ROCK/PI3K/Akt e de um composto que possui uma atividade antiparasitária é vantajosa no âmbito da presente invenção uma vez que ela destrói o próprio parasita, ao mesmo tempo em que previne e/ou trata as conseqüências da infecção parasitária, tais como ativação celular, em particular ativação endotelial, disrupção do endotélio, e a poptose, que são induzidas por citoaderência parasitária.
De preferência, o composto que possui uma atividade antiparasitária é um composto que possui uma atividade antimalariana.
De preferência, o composto que possui antimalariana uma atividade é escolhido no grupo constituído por Quinina, Quinidina, Quinina- doxicidina, Artemeter, Artemotil1 Artesunato, Arteéter, Mefloquina, Amodiaquina1 Diidroartemisinina, Piperaquina, Halofantrina, Atovaquona, Cloroquina, Dapsona, Doxiciclina, uma Ciclina, Lumefantrina, Proguanil1 Pirimetamina, Pironaridina1 Sulfadoxina, Diamidina, Ferroquina, Fluoroquinolona, Fosmidomicina, Tafenoquina, e Trioxaquina.
ADMINISTRAÇÃO
O modulador da via Rho/ROCK/PI3K/Akt, o composto que possui atividade antiparasitária, o medicamento, a composição farmacêutica, ou os produtos de acordo com a presente invenção podem ser administrados por via oral, intradérmica, intravenosa, intramuscular ou intrarretal. O modulador da via Rho/ROCK/PI3K/Akt, o composto que possui atividade antiparasitária, o medicamento, a composição farmacêutica, ou os produtos de acordo com a presente invenção podem ser administrados na forma de soluções, suspensões, comprimidos, ou cápsulas.
A escolha do "suporte farmaceuticamente aceitável" pode ser
comumente determinada pelo técnico no assunto. Ela é geralmente determinada em função da solubilidade e das propriedades químicas da substância ativa. Por exemplo, excipientes tais como lactose, citrato de sódio, carbonato de cálcio, fosfato dicálcico e agentes desintegrantes tais como amido, áci dos alginicos e certos silicatos complexos combinados com lubrificantes tais como estearato de magnésio, Iauril sulfato de sódio e talco podem ser usados para preparar os comprimidos. Para preparar uma cápsula, é vantajoso utilizar lactose e polietileno glicóis de peso molecular elevado. Quando são usadas suspensões aquosas, elas podem conter agentes emulsificantes ou agentes que facilitam a suspensão. Os diluentes, tais como sucrose, etanol, polietileno glicol, propileno glicol, glicerol e clorofórmio ou suas misturas também podem ser usados.
A dose na qual o modulador da via Rho/ROCK/PI3K/Akt, o composto que possui atividade antiparasitária, o medicamento, a composição farmacêutica, ou os produtos de acordo com a presente invenção podem ser administrados a um indivíduo que deles precise pode ser comumente determinada pelo técnico no assunto. Em particular, o composto que possui atividade antiparasitária pode ser administrado na mesma dose que quando ele não é usado em associação com o modulador da via Rho/ROCK/PI3K/Akt de acordo com a presente invenção.
Como exemplo, o Fasudil pode ser administrado em uma dosagem de 50 mg/ dia a 500 mg/dia, em particular a 240 mg/dia, com doses unitárias que variam de 50 mg a 500 mg, em particular 80 mg. Descrição das Figuras Figura 1
A Figura 1 representa a concentração citoplásmica de RhoA ([Rho-GTP] ativado, eixo vertical, unidades arbitrárias) para um extrato de célula endotelial de:
(E) células endoteliais de controle em condições de contato (coluna preta) ou sem contato (coluna branca);
(RBC) células endoteliais contatadas (coluna preta) ou não (coluna branca) pelas células sangüíneas vermelhas de controle;
(3D7) células endoteliais contatadas (coluna preta) ou não (coluna branca) pelas células sangüíneas vermelhas parasitizadas clonadas 3D7;
(F12) células endoteliais contatadas (coluna preta) ou não (coluna branca) pelas células sangüíneas vermelhas parasitizadas clonadas F12.
Os resultados foram obtidos após a medição da densidade ótica a 490nm de extratos celulares que representam [Rho-GTP], Os dados representam a média +/- SD de 3 experimentos independentes.' P<0,01. Figura 2
A Figura 2 representa a concentração citoplásmica de RhoA ([Rho-GTP] ativado, eixo vertical, unidades arbitrárias) para:
(RhoA) um controle positivo que consiste de proteína RhoA purificada fornecida no kit G-LISA™;
(tampão de lise) o tampão de extração celular G-LISA™;
(E) um extrato de célula endotelial de células endoteliais de
controle;
(RBC) um extrato de célula endotelial de células endoteliais contatadas pelas células sangüíneas vermelhas de controle;
(RBC+HF2) um extrato de célula endotelial de células endoteliais contatadas pelas células sangüíneas vermelhas de controle e com Fasudil a 30μΜ durante 24 horas a 37°C
(pRBC) um extrato de célula endotelial de células endoteliais contatadas por células sangüíneas vermelhas parasitizadas;
(pRBC+HF2) um extrato de célula endotelial de células ' 5 endoteliais contatadas por células sangüíneas vermelhas parasitizadas e com Fasudil a 30μΜ durante 24 horas a 37°C;
Os resultados foram obtidos após medição da densidade ótica a 490nm de extratos celulares que representam [Rho-GTP], Os dados representam a média +/- SD de 3 experimentos independentes. "P<0,05; P<0,01.
FlBUBA 3
A Figura 3 representa fotografias com microscópio de contraste de fase invertido de (painel A) células endoteliais não-expostas; (painel B) células endoteliais expostas às células sangüíneas vermelhas de controle; (painel C) células endoteliais expostas às células sangüíneas vermelhas parasitizadas, (painel D) células endoteliais expostas às células sangüíneas vermelhas parasitizadas e ao Fasudil a 30μΜ; na presença do corante violeta Apoppercentage que é absorvido pelas células apoptóticas. As setas indicam a absorção do corante violeta. FIOURA 4
A Figura 4 representa o número de pixels de corante violeta (Apop%, eixo vertical) para as fotografias com microscópio de contraste de fase invertido tal como descrito na Figura 3, para (E) as células endoteliais não- expostas, (RBC) as células endoteliais expostas às células sangüíneas vermelhas de controle, (pRBC) as células endoteliais expostas às células sangüíneas vermelhas parasitizadas, e incubadas com 0 μΜ (coluna preta), 1 μΜ (colunas cinza) ou 30μΜ (colunas pontilhadas) Fasudil. Os números de Pixel foram determinados com Photoshop® Adobe®. Os dados representam a média +/- SD de número de pixels de 4 fotografias de campo representativo de 3 experimentos independentes.
Figura 5
A Figura 5 representa a integridade da barreira endotelial (densidade ótica (OD) do Marcador azul de Evans a 630 nm, eixo vertical, x10- 3) para (E) células endoteliais não-expostas, (RBC) células endoteliais expostas às células sangüíneas vermelhas de controle, (pRBC) células endoteliais expostas às células sangüíneas vermelhas parasitizadas, (pRBC+z- vad 10μΜ) células endoteliais expostas às células sangüíneas vermelhas parasitizadas e incubadas com inibidor de caspase z-vad de amplo espectro a 10μΜ, (pRBC+z-vad 100μΜ) células endoteliais expostas às células sangüíneas vermelhas parasitizadas e incubadas com z-vad a 100μΜ.
Os dados representam a média +/- SD de valores de densidade ótica 10"3 de 3 experimentos independentes e 6 repetições para cada condição. **P<0,01.
Figura 6
A Figura 6 representa a integridade da barreira endotelial (densidade ótica (OD) do Marcador azul de Evans a 630 nm, eixo vertical, x103) para (E) células endoteliais nâo-expostas, (RBC) células endoteliais expostas às células sangüíneas vermelhas de controle, (pRBC) células endoteliais expostas às células sangüíneas vermelhas parasitizadas, (pRBC+HF1) células endoteliais expostas às células sangüíneas vermelhas parasitizadas e posteriormente tratadas com 1 μΜ de Fasudil durante 20 horas, (pRBC+HF2) células endoteliais expostas às células sangüíneas vermelhas parasitizadas e posteriormente tratadas com 30μΜ de Fasudil durante 20 horas.
Os dados representam a média +/- SD de valores de densidade ótica 10~3de 3 experimentos independentes e 6 repetições para cada condição. "P<0,01. Figura 7
A Figura 7 representa a integridade da barreira endoteiial (densidade ótica (OD) do Marcador azul de Evans at 630 nm, eixo vertical, x10" 3) para (E) células endoteliais não-expostas, (RBC) células endoteliais expostas às células sangüíneas vermelhas de controle, (pRBC) células endoteliais expostas às células sangüíneas vermelhas parasitizadas, (pRBC+HF2) células endoteliais expostas às células sangüíneas vermelhas parasitizadas e posteriormente tratadas com 30μΜ de Fasudil durante 20 horas, (pRBC+HF2+LY) células endoteliais expostas às células sangüíneas vermelhas parasitizadas e posteriormente tratadas com 30μΜ de Fasudil e 15 μΜ de inibidor de PI3K LY294002 durante 20 horas.
Os dados representam a média +/- SD de valores de densidade ótica 10~3 de 3 experimentos independentes e 3 repetições para cada condição. ** P<0,01.
Fioura 8
A Figura 8 representa o número de HLEC ativadas (células com migração nuclear completa, mas não parcial da coloração da subnidade P65 NF-kappaB) seja não-expostas (controle) ou expostas às células sangüíneas vermelhas não infectadas (RBC), TNFa, células sangüíneas vermelhas parasitizadas (pRBC) e células sangüíneas vermelhas parasitizadas + Fasudil a 30 μΜ (pRBC+HF2) foram contadas. Os dados representam a média +/- SD de % de células P65 nucleares positivas. " P<0,005.
Exemplos Materiais ε Métodos Cultura de células endoteliais pulmonares humanas (HLEC)
Células endoteliais primárias (HLEC) foram isoladas do pulmão humano após digestão enzimática e selecionadas por meio de um gradiente contínuo e uma técnica de purificação imunomagnética tal como descrito anteriormente 12. As células endoteliais das passagens nona a décima-egunda derivadas de um lote foram usadas para os experimentos. Antes do uso, as células foram verificadas quanto à sua expressão de ICAM-1, CD36, fator de Von Willebrand, VCAM-1, CD31, selectína E/P e CSA tal como descrito ' 5 anteriormente. As HLEC foram cultivadas em M199 meio (Gibco)1 suplementado com 10pg/ml de suplemento de crescimento celular endotelial (ECGS) (Upstate, Lake Placid, NY) e 10% de soro de bezerro fetal (Biowest, South America origin), a 37°C com 5% CO2, usando um lab-tek de 8 câmaras (Nalge Nunc International, Napervil1 111), placas com 6 poços (Becton Dickinson), ou suportes dos insertos Transwell (Corning Incorporated).
Cultura de Plasmodium falciparum Clones de P. falciparum 3D7 14 e F12 9 foram usados em nossos experimentos. Células sangüíneas vermelhas infectadas com P. falciparum (pRBCs) foram mantidas em cultura de acordo com a técnica de Trager e Jensen em uma suspensão de células sangüíneas vermelhas (RBC) em RPMI (Gibco) suplementada com 8,3 g.r1 de Hepes, 2,1 g.r1 de NaHCO, 0,1 mg.ml"' de gentamicina e 2g.t1 de dextrose e 0,4% de Albumax Il (Gibco, Invitrogen Corporation) 13. O clone 3D7 foi caracterizado para o fenótipo de adesão tal como descrito anteriormente 14 e adere a HLEC sobre ICAM-1 e CD36 a 30% e 45% respectivamente. Seu clone derivado F12 foi usado por sua baixa capacidade adesiva 9 (1 pRBC/20 HLEC no máximo, em comparação com o clone 3D7, para o qual >1 pRBC/HLEC é habitualmente observado). Para cada experimento, as culturas de parasitas foram enriquecidas em formas maduras por Plasmagel fioating ,s. Em suma, os eritrócitos foram coletados de culturas parasitizadas 5 a 10% e centrifugados por 5 minutos a 2000 rpm. As células foram suspensas novamente em Plasmion® (fresenius kabi, França) e incubadas durante 25 minutos a 37°C. A fração superior contendo os trofozoítos e esquizontos maduros foram então coletados e lavados 3 vezes em RPMI. As suspensões de células sangüíneas parasitizadas foram então ajustadas para 1% de hematócrito e 50% de parasitemia.
Reagentes
O Fasudil inibidor da quinase Rho Iiofilizado (HA-1077) foi comprado junto a Biaffin (Kassel, Alemanha) e reconstituído em PBS. O Fasudil foi usado a 1 μΜ (HF1), 30μΜ (HF2) ou 100μΜ (HF3). O LY294002 inibidor da 3-quinase fosfatidilinositol foi comprado junto a Calbiochem e solubilizado em etanol em 15mM de solução estoque antes do uso a 15μΜ (LY). 0 inibidor de caspase Z-VAD-fmk de amplo espectro foi comprado junto a Sigma. Todos os reagentes foram armazenados a -20°C.
Ensaio de integridade da barreira endotelial A fim de medir o efeito dos tratamentos sobre as células pRBCs pré-expostas, desenvolvemos um método baseado na difusão do azul de Evans através da monocamada endotelial. Em suma, as HLEC foram cultivadas em suportes permeáveis Transwell Permeable (membrana de poliéster, tamanho de poro de 3μΓη, diâmetro de 6,5mm, Corning Incorporated Life Sciences) até confluência em meio M199. As formas maduras o clone de P. falciparum 3D7 foram então coletadas da cultura e ajustadas a 1% de hematócrito e 50% de parasitemia antes de 4 horas co-incubação e 37°C 5% CO2. Após exposição pRBC, as monocamadas celulares endoteliais foram tratadas durante 20 horas com Fasudil (1 μΜ ou 30μΜ). Incubações simulares com eritrôcitos nâo infectados ou célula endotelial isolada foram realizadas como controles. Os compartimentos Transwell foram então lavados 3 vezes com um meio de adesão à base de RPMI. Os insertos Transwell foram transferidos para uma nova placa contendo PBS; uma solução de azul de Evans (ICN Biomedicals Inc.) a 0,5mg/mL foi então adicionada nos compartimentos superiores e incubada durante 5 minutos a 37°C 5% CO2. os compartimentos inferiores foram finalmente coletados para a análise de

Claims (12)

1. USO DE UM MODULADOR DA VIA Rho/ROCK/P13K/Akt, para a fabricação de um medicamento destinado à prevenção e/ou ao tratamento das infeções associadas com uma infecçâo por um parasita protozoário.
2. USO, de acordo com a reivindicação 1, em que o parasita protozoário á escolhido no grupo constituído por Trypanosoma spp. e Plasmodium spp.
3. USO, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, em que as patologias são escolhidas no grupo constituído pela malária e a tripanosomíase africana (doença do sono).
4. USO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, em que as patologias são escolhidas no grupo constituído pela malária severa, malária cerebral, sindrome da falência de órgãos múltiplos, e estágios avançados da tripanosomíase africana.
5. USO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, em que o modulador da via Rho/ROCK/P13K/Akt é um inibidor da quinase (ROCKI).
6. USO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, em que o modulador da via Rho/ROCK/P13K/Akt é um ROCKI escolhido no grupo constituído pelos componentes com as seguintes fórmulas: <formula>formula see original document page 19</formula> <formula>formula see original document page 20</formula> ou seus sais farmaceuticamente aceitáveis.
7. USO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, em que o modulador da via Rho/ROCK/PI3K/Akt é um ROCKI escolhido no grupo constituído pelos compostos com as seguintes fórmulas: ou seus sais farmaceuticamente aceitáveis.
8. USO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, em que o medicamento compreende ainda peio menos um composto que possui uma atividade antiparasitica.
9. USO, de acordo com a reivindicação 8, em que composto que possui atividade antiparasitica possui atividade antimalariana.
10. USO1 de acordo com a reivindicação 9, em que o composto que possui atividade antimalariana é escolhido no grupo constituído por Quinina1 Quinidina, Quinina-doxiciciina, Artemeter, Artemotii, Artesunato1 Arteéter, Mefloquina, Amodiaquina1 Diidroartemisinina1 Piperaquina1 Halofantrina1 Atovaquona, Cloroquina1 Dapsona, Doxiciclina1 uma Ciclina1 Lumefantrina, Proguanil, Pirimetamina, Pironaridina, Sulfadoxina1 Diamidina, Ferroquiria, Fluoroquinolona, Fosmidomicina, Tafenoquina, e Trioxaquina.
11. COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA, que compreende como substâncias ativas: - pelo menos um modulador da via Rho/ROCK/P13K/Akt tal como definido em qualquer uma das reivindicações 1 e 5 a 7, e - pelo menos um composto que possui uma atividade antiparasítica tal como definido em qualquer uma das reivindicações 8 a 10, em associação com um suporte farmacêutica mente aceitável.
12. PRODUTOS, que contêm: - pelo menos um modulador da via Rho/ROCK/P13K/Akt tal como definido em qualquer uma das reivindicações 1 e 5 a 7, e - pelo menos um composto que possui uma atividade antiparasítica tal como definido em qualquer uma das reivindicações 8 a 10, como uma preparação combinada para uso simultâneo, separado ou seqüencial para a prevenção e/ou o tratamento de patologias tais como definidas em qualquer uma das reivindicações 1 a 4.
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Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
BR112014014327A2 (pt) * 2011-12-15 2017-06-13 Novartis Ag uso de inibidores da atividade ou função de pi3k
EP2628482A1 (en) 2012-02-17 2013-08-21 Academisch Medisch Centrum Rho kinase inhiitors for use in the treatment of neuroblastoma
JPWO2017150174A1 (ja) * 2016-03-04 2019-06-13 株式会社 シンスター・ジャパン ２，４−ジアミノキナゾリン誘導体又はその塩を有効成分として含有する医薬品組成物、及び、特定の構造を有する２，４−ジアミノキナゾリン誘導体
AU2018369784B2 (en) 2017-11-14 2023-06-01 Massachusetts Eye And Ear Infirmary RUNX1 inhibition for treatment of proliferative vitreoretinopathy and conditions associated with epithelial to mesenchymal transition
CA3110661A1 (en) 2018-08-29 2020-03-05 University Of Massachusetts Inhibition of protein kinases to treat friedreich ataxia

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7217722B2 (en) * 2000-02-01 2007-05-15 Kirin Beer Kabushiki Kaisha Nitrogen-containing compounds having kinase inhibitory activity and drugs containing the same
CN1198804C (zh) * 2000-03-16 2005-04-27 三菱制药株式会社 酰胺化合物及其用途
ES2344831T3 (es) * 2000-06-23 2010-09-08 Mitsubishi Tanabe Pharma Corporation Potenciadores de un efecto antitumoral.
GB0206861D0 (en) * 2002-03-22 2002-05-01 Glaxo Group Ltd Medicaments
JPWO2004024717A1 (ja) * 2002-09-12 2006-01-05 麒麟麦酒株式会社 キナーゼ阻害活性を有するイソキノリン誘導体およびそれを含む医薬
WO2004096222A1 (en) * 2003-04-30 2004-11-11 Switch Biotech Ag Use of 1-(5-isoquinolinesulfonyl)homopiperazine, its active metabolites, isomers and salts for treating and preventing hypopigmentary disorders
EP1660454A1 (en) 2003-07-07 2006-05-31 Vernalis (R&D) Limited Azacyclic compounds as inhibitors of sensory neurone specific channels
EP1498200A1 (fr) * 2003-07-16 2005-01-19 Applitec Moutier S.A. Outil de coupe
JP4691041B2 (ja) * 2003-11-20 2011-06-01 チルドレンズ ホスピタル メディカル センター Ｇｔｐアーゼ阻害剤および使用方法
WO2005102345A1 (en) * 2004-03-30 2005-11-03 Alcon, Inc. Use of rho kinase inhibitors in the treatment of hearing loss, tinnitus and improving body balance

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