BRPI0617220A2 - método automatizado para a preparação de uma composição radiofarmacêutica estéril de 99mtc, cassete descartável, usos de aparelho sintetizador automatizado, e de um kit não-radioativo, estéril, e, suprimento esterilizado de molibdato-99mo - Google Patents

Abstract

MéTODO AUTOMATIZADO PARA A PREPARAçãO DE UMA COMPOSIçãO RADIOFARMACêUTICA ESTéRIL ^ 99M^TC, CASSETE DESCARTáVEL, USOS DE APARELHO SINTETIZADOR AUTOMATIZADO, E DE UM KIT NãO-RADIOATIVO, ESTéRIL, E, SUPRIMENTO ESTERILIZADO DE MOLIBDATO-^ 99^MO. A presente invenção proporciona um método automatizado para a preparação de composições radiofarmacêuticas de ^ 99m^Tc, juntamente com cassetes descartáveis para uso no método. O uso de um aparelho sintetizador automatizado na preparação de radiofármacos de ^ 99m^Tc também é descrito. Também é descrito o uso de kits para a preparação de radiofármacos de ^ 99m^Tc no método e cassetes descartáveis da presente invenção.

Description

"MÉTODO AUTOMATIZADO PARA A PREPARAÇÃO DE UMACOMPOSIÇÃO RADIOFARMACÊUTICA ESTÉRIL DE 99mTC5 CASSETEDESCARTÁVEL, USOS DE APARELHO SINTETIZADORAUTOMATIZADO, E DE UM KIT NÃO-RADIOATIVO, ESTÉRIL, E,SUPRIMENTO ESTERILIZADO DE MOLIBDATO-99MO"

Campo da Invenção.

A presente invenção proporciona um método automatizadopara a preparação de composições radiofarmacêuticas de 99mTc, juntamentecom descartáveis para uso no método. O uso de um aparelho sintetizadorautomatizado na preparação de radiofármacos de 99mTc também é descrito.Também são descritos o uso de kits para a preparação de radiofármacos de99mTc no método e cassetes descartáveis da presente invenção.

Fundamentos da Invenção.

Métodos automatizados para a preparação de radiofármacosque compreendem um radioisótopo emissor de pósitron para tomografia deemissão de pósitron (PET) estão bem estabelecidos [D.Alexoff, em"Handbook of Radiofármacos", MJ.Welch & C.S.Redvanly (Eds.), páginas283-305 Wiley (2003)].

WO 02/051447 descreve um aparelho sintetizadorautomatizado para a preparação de radiofármacos, que incorpora um módulodescartável contendo quantidades pré-dosadas de reagentes químicos. Écitado que o dispositivo é particularmente útil para os radioisótopos emissoresde pósitron de meia-vida curta 11C, 13N, 15Oe 18F.

Para radiofármacos de 99mTc, a ciência convencionaldesenvolvida no decorrer de muitos anos é que o usuário obtém umsuprimento estéril de 99mTc como pertecnetato-99mTc em solução salina de umgerador de radioisótopos 99Mo/"mTc, e usa aquele eluato de radioisótopo parareconstituir kits não-radioativos, liofilizados para gerar o radiofármacodesejado diretamente em uma forma pronta-para-injetar. Estas etapas sãotipicamente realizadas manualmente, embora esforços tenham sido feitos parainvestigar dispensador de radiofármaco automatizado (APD) [Solanki,Hosp.Pharmaa, 7(4), 94-98 (2000)]. Eluição automatizada de geradores deradioisótopos 99Mo/99mTc é descrita em US 4.625.118 e US 5.580.541.

Fisco et al. [Lab.Robot.Automat, 6(4), 159-165 (1994)]descreveram o uso de um sistema robótico para a reconstituição automatizadade kit e o controle de qualidade de radiofármaco de 99mTc Cardiotec™. Ensing[Dev.Nucl.Med., 22, 49-54 (1992)] reviu esforços para automatizarpreparações de kit radiofarmacêutico em radiofarmácias de hospital, incluindoreconstituição automatizada de kits não-radioativos.

Abordagens da arte anterior têm portanto focalizado areconstituição automatizada quer de geradores de 99mTc quer de kits de 99mTc,sempre com o kit convencional como a base para a química envolvida. Istoapresenta a desvantagem de que, se doses múltiplas são requeridas em umabase regular, a única opção é processar números grandes de kits, com cada kitrequerendo uma checagem de QC separada sobre a pureza radioquímica(RCP). Isto significa que pode ser necessário que as mesmas etapas deprocesso sejam replicadas muitas vezes, o que é ineficiente, e que o volume eo número de recipientes e aparelho tornados radioativos como um resultadodas operações são relativamente altos. Embora a automatização sejareconhecida como tendo o potencial de reduzir a dose de radiação para ooperador, também tem sido relatado que os processos automatizados da arteanterior são muito mais lentos do que a sua contra-parte manual, o que ostorna menos atrativos [Solanki, Hosp.Pharmac, 7(4), 94-98 (2000)]. Portantohá uma necessidade de uma abordagem automatizada que seja rápida, maisflexível, menos restringida pela química de kit existente, e que possa gerartamanhos de batelada maiores em uma maneira mais eficiente.

A Presente Invenção.

A presente invenção proporciona um método automatizadopara a preparação de composições radiofarmacêuticas de 99mTc5 juntamentecom cassetes descartáveis para uso no método. O método é particularmenteadequado para uso conjuntamente com aparelho "sintetizador automatizado"que estão comercialmente disponíveis, mas correntemente usadosprimariamente para a preparação de radiofármacos de PET de vida curta. Ométodo é particularmente útil onde números grandes de doses unitárias depaciente são requeridas em uma base regular, tal como em radiofarmáciaservindo quer múltiplos hospitais quer um único hospital grande. Isto permiteuma determinação única de RCP.

A presente invenção também permite a preparação deradiofármacos estéreis de 99mTc que não são trataveis para preparação via aabordagem de kit convencional, devido e.g. à necessidade de usar solventesnão-aquosos ou onde impurezas não-biocompatíveis indesejáveis não podemser facilmente removidas dentro do âmbito da abordagem de kit.

O método pode ser prontamente adaptado molibdato-99Mo emsolução como a fonte de pertecnetato-99mTc, em oposição ao geradorconvencional de 99Mo/99mTc. O uso de um material inicial radioativo emsolução torna a automatização dos processos envolvidos mais direta, e assimevita as complexidades da arte anterior necessárias para automatizar a eluiçãode gerador.

Os cassetes da presente invenção contêm agentes químicosnão-radioativos necessários para uma dada preparação radiofarmacêutica de99mTc, e opcionalmente incluem os agentes químicos precursores radioativosnecessários. Estes cassetes tornam o presente método mais flexível do que asabordagens da arte anterior. O uso dos cassetes na preparação deradiofármacos de 99mTc também é descrito.

A presente invenção também proporciona o uso de aparelhosintetizador automatizado para preparação radiofarmacêutica de 99mTc, mais ouso de kits não-radioativos, estéreis no presente método de preparaçãoreivindicado.

Descrição Detalhada da Invenção.

Em um primeiro aspecto, a presente invenção proporciona ummétodo automatizado para a preparação de uma composiçãoradiofarmacêutica estéril de 99mTc que compreende um complexo de metal de99mTc em um meio carreador biocompatível, na qual o citado métodocompreende:

(i) provisão de um precursor que compreende uma solução depertecnetato-99mTc;

(ii) provisão de um suprimento de um ligante não-radioativo,no qual o citado ligante forma um complexo de metal com 99mTc;

(iii) provisão de um suprimento de um agente redutor capaz dereduzir tecnécio do estado de oxidação de Tc(VII) para um estado deoxidação inferior de tecnécio;

(iv) complexação do ligante com 99mTc por transferênciacontrolada por microprocessador de alíquotas separadas de citados precursor eligante para um vaso de reação e misturação no mesmo, com aquecimentoopcional, e opcionalmente na presença de uma quantidade de citado agenteredutor efetiva para reduzir a citada alíquota de precursor de pertecnetato-99mTc;

(v) quando o produto de complexo de 99mTc de etapa (iv) jáestiver em um meio carreador biocompatível ele é usado diretamente emetapa (vi), de outro modo o produto de etapa (iv) é quer dissolvido em ummeio carreador biocompatível quer o solvente usado em etapa (iv) é removidoe o resíduo redissolvido em um meio carreador biocompatível;

(vi) opcionalmente realização de um ou mais dos seguintesprocessos adicionais: purificação; ajuste de pH; remoção de solvente eredissolução em um solvente biocompatível para dar a composiçãoradiofarmacêutica de 99mTc desejada;(vii) quer manutenção de esterilidade durante etapas (i) a (vi)de modo que o complexo de metal de 99mTc de etapa (vi) já esteja estéril, quersujeição do complexo de metal de 99mTc de etapa (vi) quer à esterilizaçãoterminal quer à filtração estéril para dar o radiofármaco de 99mTc desejado.

O "meio carreador biocompatível" é um fluido, especialmenteum líquido, no qual o complexo de metal de 99mTc é suspenso ou dissolvido,de meio carreador a composição seja fisiologicamente tolerável, ie. possa seradministrada a um corpo de mamífero sem toxicidade ou desconfortoindevido. O meio carreador biocompatível é adequadamente um líquidocarreador injetável tal como água estéril, livre de pirogênio para injeção; umasolução aquosa tal como solução salina (que pode estar vantajosamenteequilibrada de modo que o produto final para injeção seja quer isotônico quernão-hipotônico); uma solução aquosa de uma ou mais substâncias ajustadorasde tonicidade (eg. sais de cátions de plasma com contra-íons biocompatíveis),açúcares (e.g. glicose ou sacarose), alcoóis de açúcar (eg. sorbitol ou manitol),glicóis (eg. glicerol), ou outros materiais de poliol não-iônico (eg.poli(etileno-glicóis), propileno-glicóis e semelhantes). O meio carreadorbiocompatível também pode compreender solventes orgânicos biocompatíveistal como etanol. Tais solventes orgânicos são úteis para solubilizarformulações ou composições mais lipofílicas. Preferivelmente o meiocarreador biocompatível é água livre de pirogênio para injeção, solução salinaisotônica ou uma solução aquosa etanólica. Como indicado acima, o pH domeio carreador biocompatível para injeção intravenosa está adequadamentedentro da faixa de 4,0 a 10,5.

O termo "controlado por microprocessador" possui seusignificado convencional. Assim, o termo "microprocessador" como aquiusado, refere-se a um processador de computador contido em um chip decircuito integrado, um tal processador também pode incluir memória ecircuitos associados. O microprocessador é projetado para realizar operaçõesaritméticas e lógicas usando circuito lógico que responde às e processa asinstruções básicas que acionam um computador. O microprocessador tambémpode incluir instruções programadas para executar ou controlar funçõesselecionadas, métodos computacionais, comutação, etc. Microprocessadores edispositivos associados estão comercialmente disponíveis em numerosasfontes, incluindo, mas não limitadas a: Cypress Semiconductor Corporation,San Jose, Califórnia; IBM Corporation; Applied Microsystems Corporation,Redmond, Washington, USA; Intel Corporation and National Semiconductor,Santa Clara, Califórnia. Com relação à presente invenção, o microprocessadorproporciona uma série programável de etapas reproduzíveis envolvendo eg.transferências de agentes químicos, aquecimento, filtração etc. Omicroprocessador da presente invenção preferivelmente também grava osdados de produção de batelada (eg. reagentes usados, condições de reação,materiais radioativos etc). Estes dados gravados são úteis para demonstrar aconformidade de GMP para manufatura radiofarmacêutica. Omicroprocessador também está preferivelmente ligado em uma leitora decódigo de barras para permitir a seleção fácil de condições de reação parauma dada corrida de produção, como descrito abaixo.

O termo "estado de oxidação" possui seu significadoconvencional em química inorgânica. O termo "estado de oxidação inferior detecnécio" significa Tc(-I) a Tc(VI). Estados de oxidação preferidos para ocomplexo de metal ligante com 99mTc estão na faixa de Tc(O) a Tc(V), e sãomais preferivelmente escolhidos de Tc(I), Tc(IV) e Tc(V). Complexos detecnécio de ligantes em um estado de oxidação de Tc(VII) são, contudo,conhecidos. Para tais complexos um agente redutor pode não ser necessário.

Para complexos de tecnécio de estado de oxidação de Tc(-I) a Tc(VI), éesperado que o agente redutor seja uma característica essencial do método dapresente invenção.

O estado de oxidação do tecnécio em pertecnetato-99mTc éTc(VII). O "agente redutor" da presente invenção é adequado para a reduçãode pertecnetato-Tc(VII) a estados de oxidação inferiores de tecnécio, ie. oestado de oxidação de tecnécio no complexo de metal de 99mTc com o ligante.Tais agentes redutores adequados são conhecidos na arte [Clarke, Coord Chem. Rev., 78, 253-331 (1987) e referências no mesmo]. Também éconsiderado que a redução poderia ser realizada usando uma célulaeletrolítica, que poderia formar uma característica adicional do cassete dapresente invenção. Tais células eletrolíticas possuem a vantagem deproporcionarem condições de redução controladas, com a necessidade de adicionar agentes redutores químicos. O agente redutor da presente invençãonão tem que ser biocompatível, porque a flexibilidade do método significaque agentes redutores não-biocompatíveis podem ser subseqüentementeremovidos. Agentes redutores biocompatíveis são, contudo, preferidos. Otermo "agente redutor biocompatível" significa um agente redutor adequado para redução de pertecnetato-Tc(VII) para estados de oxidação inferiores detecnécio, que é não-tóxico na dosagem requerida e como conseqüênciaadequado para administração a corpo de mamífero, especialmente a corpo dehumano. Tais agentes redutores adequados incluem: ditionito de sódio,bissulfito de sódio, ácido ascórbico, formamidina, ácido sulfínico, íon estanoso, Fe(II) ou Cu(I). O agente redutor biocompatível é preferivelmenteum sal estanoso tal como cloreto estanoso ou tartarato estanoso.

O agente redutor da presente invenção pode ser fornecido naforma sólida (por exemplo: liofilizada) ou na forma de solução. Quando usadona forma sólida, uma quantidade conhecida de agente redutor éadequadamente proporcionada em um frasco ou recipiente, e dissolvida emum solvente adequado antes do uso, como parte do método automatizado.Quando usado na forma de solução, esta possui a vantagem de que aconcentração de agente reduzir é conhecida e como conseqüência a liberaçãocontrolada por microprocessador da quantidade correta de agente redutorsimplifica a liberação de um volume ou de uma alíquota específica de soluçãode agente redutor. A solução de agente redutor está preferivelmente em ummeio carreador biocompatível, como definido acima. É esperado que soluçõesestéreis estanosas em meio carreador biocompatível sejam suficientementeestáveis na ausência de ar em um recipiente adequado para ter uma vida deprateleira útil para uso no cassete da presente invenção.

O termo "ligante" como aqui usado possui seu significadoconvencional em química inorgânica, ie. um composto que forma umcomplexo com um metal, neste caso tecnécio. O termo "complexo de metal"significa um complexo de coordenação de íon de metal com um ou maisligantes. É fortemente preferido que o complexo de metal de tecnécio seja"resistente à transquelação", ie. não sofra prontamente troca de ligante comoutros ligantes potencialmente competidores pelos sítios de coordenação de99mTc. Ligantes potencialmente competidores incluem outros excipientes napreparação in vitro (eg. radioprotetores, conservantes antimicrobianos ouagentes esterilizantes tais como alcoóis usados na preparação), ou compostosendógenos in vivo (eg. glutationa, transferrina ou proteínas de plasma).Ligantes adequados para uso na presente invenção que formam complexos detecnécio resistentes à transquelação incluem: agentes quelantes, onde 2-6,preferivelmente 2-4, átomos doadores de metal estão de modo que os anéisquelantes resultem (por terem uma estrutura base não-coordenadora quer deátomos de carbono quer de heteroátomos não-coordenadores ligando osátomos doadores de metal), preferivelmente anéis de quelato de 5 ou 6membros; ou ligantes monodentados que compreendem átomos doadores quese ligam fortemente no tecnécio, tais como monóxido de carbono (CO),isonitrilas, fosfinas, tióis ou diazenidas.

Exemplos de tipos de átomo doador que se ligam bem emtecnécio como parte dos agentes quelantes são: aminas, tióis, amidas, oximase fosfinas. Fosfinas formam tais complexos fortes de metal que até mesmofosfinas monodentadas ou bidentadas formam complexos de tecnécioadequados. A geometria linear de isonitrilas e diazenidas é tal que elas não seprestam prontamente para a incorporação em agentes quelantes, e sãoconseqüentemente tipicamente usadas como ligantes monodentados.

Exemplos de isonitrilas adequadas incluem alquil-isonitrilas simples tal comoterc-butil-isonitrila, e isonitrilas éter-substituídas tal como mibi (i.e. 1-isociano-2-metóxi-2-metil-propano). Exemplos de fosfinas adequadasincluem Tetrofosmina, e fosfinas monodentadas tal como tris{3-metóxi-propil)-fosfina. Exemplos de diazenidas adequadas incluem a série HYNIC deligantes i.e. nicotinamidas ou piridinas hidrazina-substituídas.

Exemplos de agentes quelantes adequados para tecnécio queformam complexos de metal resistentes à transquelação incluem, mas não sãolimitados a:

(i) diamina-dioximas de fórmula:

<formula>formula see original document page 10</formula>

na qual E1 -E6 são cada um independentemente um grupo R';cada R' é H ou Cmo alquila, C3.10 alquil-arila, C2-10 alcóxi-alquila, Ci.10hidróxi-alquila, Cmo fluoroalquila, C2-10 cabóxi-alquila ou Cmo amino-alquila, ou dois ou mais grupos R' juntos com os átomos nos quais sãoligados formam um anel carbocíclico, heterocíclico, saturado ou insaturado; eQ é um grupo formador de ponte de formula -(J)f-;

onde f é 3, 4 ou 5 e cada J é independentemente -O-, -NR'-ou -C(Rs)2- desde que -(J)r possa conter um máximo de um grupo J que é -O- ou -NR'-.

Grupos Q preferidos são como segue:Q = -(CH2)(CHRi)(CH2)- ie. derivados de propileno-amina-oxima ou PnAO;

Q = -(CH2MCHR')(CH2)2-ie. derivados de pentileno-amina-oxima ou PentAO;

Q = -(CH2)2NR' (CH2)2-.

E1 a E6 são preferivelmente escolhidos de: C1-3 alquila, alquil-aril-alcóxi-alquila, hidróxi-alquila, fluoro-alquila, cabóxi-alquila ou amino-alquila. Mais preferivelmente, cada um dos grupos E1 a E6 é CH3.

Q é preferivelmente -(CH2)(CHRi)(CH2)-,(CH2)2(CHR')(CH2)2- ou -(CH2)2NR'(CH2)2-, mais preferivelmente -(CH2)2(CHR')(CH2)2-. Um agente quelante de diamina-dioxima bifiincionalespecialmente preferido possui a Fórmula:

<formula>formula see original document page 11</formula>

na qual o grupo amina primária cabeça de ponte pode serconjugado em uma variedade de moléculas alvo biológicas, como é conhecidona arte.

(ii) ligantes N3S possuindo um conjunto doador de tiol-triamida tal como MAG3 (mercapto-acetil-triglicina) e ligantes relacionados;ou possuindo um conjunto doador de diamida-piridina-tiol tal como Pica;

(iii) ligantes N2S2 possuindo um conjunto doador de diamina-ditiol tal como BAT ou ECD (i.e. dímero de etil-cisteinato), ou um conjuntodoador de amida-amina-ditiol tal como MAMA;

(iv) ligantes N4 que são ligantes macrocíclicos ou de cadeiaaberta possuindo um conjunto doador de tetramina, amida-triamina oudiamida-diamina, tal como cyclam, monoxocyclam ou dioxocyclam;

(v) ligantes N2O2 possuindo um conjunto doador de diamina-difenol-.

Os ligantes acima descritos e sua complexação com tecnéciosão descritos mais completamente por Jurisson et al. [Chem.Rev., 99, 2205-2218 (1999)].

Ligantes preferidos da presente invenção são escolhidos de:fosfinas; isonitrilas e agentes quelantes que são tetradentados. Tais agentesquelantes tetradentados preferidos incluem: diamina-dioximas; agentesquelantes N4 possuindo um conjunto doador de tetramina, amida-triamina oudiamida-diamina; agentes quelantes N3S possuindo um doador de tiol-triamida ou conjunto doador de diamida-piridina-tiol; ou agentes quelantesN2S2 possuindo um conjunto doador de diamina-ditiol tal como BAT ou umconjunto doador de amida-amina-ditiol tal como MAMA. Tais ligantespreferidos incluem: os agentes quelantes N4, N3S e N2S2 descritos acima, maispreferivelmente agentes quelantes de tetramina N4, diamina-dioxima ediamina-ditiol ou diamida-ditiol N2S2, especialmente o agente quelante dediamina-ditiol N2S2 conhecido como ΒΑΤ, ou suas variantes sem os gruposgem-dimetila:

<formula>formula see original document page 12</formula>

O ligante da presente invenção pode ser opcionalmenteconjugado nas moléculas alvo biológicas como é conhecido na arte [Banerjeeet al., Semin.Nucl.Med., 31(4), 260-277 (2001)].

O método da presente invenção pode ser realizado sobcondições de manufatura asséptica para dar o produto radiofarmacêutico não-pirogênico, estéril desejado, como descrito em eg. US PharmacopoeiaGuidelines. As etapas iniciais (i) a (vi) também podem ser realizadas sobcondições não-estéreis, seguidas por esterilização quer por filtração estérilquer por esterilização terminal usando e.g. irradiação gama, autoclavagem,tratamento químico (e.g. com óxido de etileno) ou térmico a seco.Preferivelmente, esterilidade é mantida durante etapas (i) a (vi) de modo que aetapa de esterilização terminal adicional seja necessária.

Os precursor, ligante, agente redutor e vaso de reação são cadaum fornecidos em frascos ou vasos adequados que compreendem umrecipiente vedado que permite a manutenção da integridade estéril / segurançaradioativa, mais opcionalmente um gás inerte de espaço de confinante (eg.nitrogênio ou argônio), enquanto permite adição e remoção de soluções porseringa ou cânula. Um tal recipiente preferido é um frasco vedado com septo,no qual a tampa estanque a gás é enrugada com uma sobrevedação(tipicamente de alumínio). A tampa é adequada para perfuração única oumúltipla com uma agulha hipodérmica (e.g. uma tampa de vedação de septopor enrugamento) enquanto mantém integridade estéril. Tais recipientespossuem a vantagem adicional de que a tampa pode suportar vácuo sedesejado (eg. para trocar o gás de espaço confinante ou para degaseificarsoluções), e suportar mudanças de pressão tais como reduções em pressãosem permitir o ingresso de gases atmosféricos externos, tais como oxigênio ouvapor de água.

Os produtos de composição radiofarmacêutica de 99mTc dométodo da presente invenção são adequadamente fornecidos em um recipientevedado como descrito acima, que podem conter doses únicas ou múltiplaspara paciente. Doses únicas para paciente ou "doses únicas" assim podem serretiradas para dentro de seringas de grau clínico em vários intervalos detempo durante o tempo de vida viável da preparação para adequar à situaçãoclínica. Recipientes de doses múltiplas preferidos compreendem um únicofrasco volumoso (e.g. de volume de 10 a 30 cm3) que contém radioatividadesuficiente para doses múltiplas para paciente. Seringas de dose unitária sãoplanejadas para serem usadas com apenas um único paciente, e são portantopreferivelmente descartáveis e adequadas para injeção de humano. Asseringas de dose unitária cheias podem ser opcionalmente proporcionadascom uma blindagem de seringa para proteger o operador da dose radioativa.Tais blindagens de seringa radiofarmacêutica adequadas são conhecidas naarte e preferivelmente compreendem quer chumbo quer tungstênio.

O termo "kit" possui seu significado convencional em químicafarmacêutica de 99mTc e refere-se a uma formulação não-radioativa, contendoos reagentes necessários em uma forma química conveniente de modo que apreparação do radiofármaco possa ser realizada em uma maneira direta. Taiskits são planejados para darem produtos radiofarmacêuticos estéreisadequados para administração a humano, e.g. via injeção direta na correntesangüínea. O kit é preferivelmente liofilizado e é planejado para serreconstituído com pertecnetato-99mTc (TcO4") estéril para dar uma soluçãopara administração a humano sem manipulação adicional. Kits adequadoscompreendem um recipiente vedado, como descrito acima, contendo o ligantena forma quer de base livre quer de sal de ácido. Preferivelmente, o kitadicionalmente compreende um "agente redutor biocompatível" comodefinido acima, também em forma liofilizada, estéril. Alternativamente, o kitopcionalmente pode conter um complexo de metal não-radioativo do liganteque, sob adição de 99mTc, sofre transmetalação (i.e. troca de metal) dando oproduto de complexo de metal de 99mTc desejado. Um exemplo disto é ocomplexo de cobre-isonitrila usado em kits para a preparação de complexosde 99mTc-isonitrila.

Os kits não-radioativos opcionalmente podem adicionalmentecompreender componentes adicionais tais como um transquelante,radioprotetor, conservante antimicrobiano, agente ajustador de pH ou carga. O"transquelante" é um composto que reage rapidamente para formar umcomplexo fraco o radiometal, então é substituído pelo ligante. Para tecnécio,isto minimiza o risco de formação de tecnécio hidrolisado reduzido (RHT)devido à redução rápida de pertecnetato competindo com complexação detecnécio. Tais transquelantes adequados são sais de um ácido orgânico fraco,ie. um ácido orgânico possuindo um pKa dentro da faixa de 3 a 7, com umcátion biocompatível. Tais ácidos orgânicos fracos adequados são ácidoacético, ácido cítrico, ácido tartárico, ácido glicônico, ácido glico-heptônico,ácido benzóico, fenóis ou ácidos fosfônicos. Conseqüentemente, os saisadequados são acetatos, tartaratos, gliconatos, glico-heptanoatos, benzoatos,fenolatos ou fosfonatos. Tais sais preferidos são tartaratos, gliconatos, glico-heptanoatos, benzoatos, ou fosfonatos, mais preferivelmente fosfonatos, maisespecialmente difosfonatos. O termo "cátion biocompatível", significa umcontra-íon positivamente carregado que forma um sal com um gruponegativamente carregado, ionizado, onde o citado contra-íon positivamentecarregado também é não-tóxico e como conseqüência adequado paraadministração ao corpo de mamífero, especialmente ao corpo de humano.

Exemplos de cátions biocompatíveis adequados incluem: os metais alcalinossódio e potássio; os metais alcalino-terrosos cálcio e magnésio; e o íonamônio. Os cátions biocompatíveis preferidos são sódio e potássio, maispreferivelmente sódio. Um transquelante preferido é um sal de MDP, ie. ácidometileno-difosfônico, com um cátion biocompatível.

O termo "radioprotetor" significa um composto que inibe asreações de degradação, tais como processos redox, pelo aprisionamento deradicais livres elevadamente reativos, tais como radicais livres contendooxigênio decorrentes da radiólise de água. Os radioprotetores da presenteinvenção são adequadamente escolhidos de: ácido ascórbico, ácido para-amino-benzóico (ie. ácido 4-amino-benzóico), ácido gentísico (ie. ácido 2,5-di-hidróxi-benzóico) e seus sais com um cátion biocompatível como descritoacima.

O termo "conservante antimicrobiano" significa um agente queinibe o crescimento de microorganismos potencialmente nocivos tais comobactérias, leveduras ou bolores. O conservante antimicrobiano também podeexibir algumas propriedades bactericidas, dependendo da dose. O papelprincipal do(s) conservante(s) antimicrobiano(s) da presente invenção é inibiro crescimento de quaisquer tal microorganismo na composiçãoradiofarmacêutica após a reconstituição, ie. no próprio produto diagnósticoradioativo. O conservante antimicrobiano contudo também pode seropcionalmente usado para inibir o crescimento de microorganismospotencialmente nocivos em um ou mais componentes do kit não-radioativo dapresente invenção antes da reconstituição. Conservante(s) antimicrobiano(s)adequado(s) inclui(em): os parabenos, ie. metil, etil, propil ou butil parabenosou suas misturas; benzil-álcool; fenol; cresol; cetrimida e tiomersal.Conservante(s) antimicrobiano(s) preferido(s) são os parabenos.

O termo "agente ajustador de pH" significa um composto ouuma mistura de compostos útil para garanti que um pH do kit reconstituídoesteja dentro de limites aceitáveis (aproximadamente pH 4,0 a 10,5) paraadministração a humano ou mamífero. Tais agentes de ajuste de pHadequados incluem tampões farmaceuticamente aceitáveis, tais como tricina,fosfato ou TRIS [ie. tris(hidróxi-metil)-amino-metano], e basesfarmaceuticamente aceitáveis tais como carbonato de sódio, bicarbonato desódio ou suas misturas. O agente ajustador de pH pode opcionalmente serproporcionado em um frasco ou recipiente separado, de modo que o usuáriodo kit pode ajustar o pH como parte de um procedimento de multi-etapas.

O termo "carga" significa um agente encorpantefarmaceuticamente aceitável que pode facilitar o manuseio do materialdurante produção e liofilização. Cargas adequadas incluem sais inorgânicostal como cloreto de sódio, e açúcares ou alcoóis de açúcar solúveis em águatais como sacarose, maltose, manitol ou trealose.

Kits preferidos para uso na presente invenção compreendemum ligante escolhido de: fosfina, isonitrila, diamina-dioxima, bis(amino-tiol)ou mercapto-acetil-triglicina (MAG3). Kits especialmente preferidos para usona presente invenção são aqueles que compreendem os ligantes: tetrofosmina,mibi, exametazima, bicisato (ECD), ECD diácido ou mercapto-acetil-triglicina (MAG3), MDP e Agente Quelante 1 (como definido acima).

Quando a etapa (vi) da presente invenção inclui uma etapa depurificação, esta poderia incluir uma ou mais das seguintes:

(i) filtração para remover particulados ou matéria insolúvelindesejada;

(ii) cromatografia;

(iii) purificação de cartucho e.g. Sep-pak.

A cromatografia pode envolver metodologia de fase normal oude fase reversa convencional, ou métodos de troca iônica. Em algumassituações o produto desejado está essencialmente imobilizado no topo de umamatriz de coluna por causa da afinidade muito mais alta pela fase estacionáriacomparada com a fase móvel. As impurezas podem ser eluídas em uma fasemóvel para a qual possuem afinidade mais alta do que para a fase estacionáriaem um recipiente de resíduos adequadamente blindado. Após lavagem, oproduto purificado pode ser subseqüentemente simplesmente eluído usandoum sistema de eluente alternativo para o qual o produto exibe afinidade maisalta do que para a fase estacionária. Uma tal cromatografia é preferivelmenterealizada usando colunas descartáveis, de modo que não haja o risco de quepreparações subseqüentes sejam contaminadas com o material daspreparações prévias. Tais colunas descartáveis estão comercialmentedisponíveis.

Quando a etapa (vi) da presente invenção inclui uma etapa deajuste de pH, esta pode ser realizada usando um agente ajustador de pH comodescrito acima.

Quando a etapa (v) ou etapa (vi) da presente invenção inclui asetapas de remoção de solvente e redissolução, o solvente pode ser removidopor várias técnicas:

(i) cromatografia;

(ii) aplicação de pressão reduzida ou vácuo;

(iv) evaporação devido ao aquecimento ou borbulhamento degás através ou sobre a solução;

(v) purificação de cartucho e.g. Sep-pak.

A técnica de cromatografia aplica imobilização como descritoacima, e é um método preferido. Tais técnicas de remoção de solvente sãoimportantes porque permitem a preparação de complexos de 99mTc pela reaçãoem solventes orgânicos, mas o radiofármaco final é ainda fornecido em ummeio carreador biocompatível. Isto é particularmente útil para ligantes ouintermediários que quer são fracamente solúveis em meios aquosos quer sãotalvez suscetíveis à hidrólise na forma de ligante livre, mas estáveis como ocomplexo de metal 99mTc-Iigante. Exemplos dos primeiros são ligantescontendo areno e ciclo-pentadienila. Exemplos dos últimos são imina oubases de Schiff, algumas das quais também são fracamente solúveis em água.Conseqüentemente, quando o ligante é fracamente solúvel ou suscetível àhidrólise em meios aquosos, o solvente usado para a solução de etapa (ii) épreferivelmente um solvente orgânico, mais preferivelmente um solventeorgânico miscível com água tal como acetonitrila, etanol, dimetil-formamida,dimetil-sulfóxido ou acetona. Tais solventes preferidos são acetonitrila, etanole dimetil-sulfóxido.

Um outro exemplo importante de uma classe de complexosque possuem propriedades biológicas interessantes mas que não sãosuscetíveis à tecnologia de kit convencional são os complexos de tecnécio-tricarbonila, ie. complexos do tipo 99mTc(CO)3(Iigante). Embora um kit para apreparação de [99mTc(CO)3(H2O)3]+ tenha sido descrito, ele nao e para usohumano (ie. apenas para propósitos de pesquisa in vitro) [Schibli,Eur.J.Nucl.Med., 29(11), 1529-1542 (2002)]. O método da presente invençãoé particularmente útil para a preparação de tais complexos de99mTc(CO)3(Iigante).

O método de purificação também pode envolver a remoção deligante não-radioativo em excesso do complexo de tecnécio-ligante. Isto éparticularmente importante quando o ligante não complexado também ébiologicamente ativo (eg. um peptídeo com afinidade por um dado receptor invivo), visto que remove qualquer possibilidade de o ligante não complexadocompetir com o complexo de metal 99mTc-Iigante pelo sítio alvo biológico deinteresse in vivo. Ligante em excesso pode ser removido quer durante a etapade purificação como descrito acima quer pelo uso de uma abordagem de fasesólida. Cromatografia é o método de separação preferido. Em casos onde asolubilidade do complexo de 99mTc é muito diferente da do material nãocomplexado em um dado solvente, precipitação e filtração do ligante livretambém são possíveis. Quando métodos cromatográficos são usados, umsistema de cartucho de disposição é preferido, mas um sistema de HPLCpreparativa também é adequado.

A solução de precursor de pertecnetato-99mTc épreferivelmente estéril, e fornecida por eluição de um gerador de radioisótopo99mTc adequado. A eluição pode já ter sido realizada de meio carreador comouma característica adicional, o presente processo adicionalmente inclui aeluição automatizada do gerador de 99mTc.

Em uma modalidade preferida, o presente métodoadicionalmente compreende uma solução estéril de reservatório de molibdato-99Mo em um solvente adequado, na qual o precursor de pertecnetato-99mTc deetapa (i) é proporcionado por decaimento radioativo in situ de citado 99Mo a99mTc, e citado pertecnetato-99mTc é separado do molibdato- 99Mo como partedo mesmo processo automatizado sob controle de microprocessador. Taismétodos de separação são conhecidos na arte e incluem: cromatografia,sublimação e extração por solvente. Um tal método preferido é cromatografia.Tem que ser concedida permissão para decorrer um tempoadequado para permitir que o decaimento radioativo de 99Mo gere umaquantidade adequada de 99mTc (meia-vida de 99Mo é de 66 horas).Preferivelmente o solvente para o molibdato-99Mo compreende um meiocarreador biocompatível, como definido acima, mais preferivelmente soluçãosalina. Isto tem a vantagem de que a eluição de um gerador convencional de99mTc não é necessário para uso nesta modalidade preferida do presentemétodo. Em vez disso, o cliente é fornecido com suprimento estéril, livre depirogênio de molibdato-99Mo que pode compreender componentes químicosadicionais tais como agentes oxidantes, como é descrito na sexta modalidade abaixo.

Alíquotas de reservatório de molibdato-99Mo são dispensadassob o controle de microprocessador sobre uma coluna de cromatografiaadequada para a separação de pertecnetato de molibdato. Materiais adequadospara a coluna de separação que dão separação elevadamente eficiente sãoconhecidos na arte e incluem alumina e zircônia, e são revistos por Molinski[Int.J.Appl.Rad.Isot., 33, 811-819 (1982). A coluna de separação pode serprojetada para uso único ou para uso múltiplo, ie. eluição única ou eluiçãomúltipla com cada eluição dando pertecnetato-99mTc para uso no método dapresente invenção. Para colunas de uso múltiplo, o molibdato-99Mo pode sercarregado sobre uma coluna adequada e mantido in situ, eluindo pertecnetato-99mTc quando requerido. Alternativamente, após cada eluição o molibdato-99Mo poderia ser eluído da coluna e retornado para o reservatório. A meia-vida de 99Mo é, contudo, tal que armazenagem prolongada antes da disposiçãoseria necessária para permitir o decaimento radioativo antes da disposição decolunas de uso único. Este uso e o uso mais eficiente do radioisótopo 99Mo,significa que colunas de uso múltiplo são preferidas. O método da presenteinvenção pode ser realizado usando robótica de laboratório ou um sintetizadorautomatizado. O termo "sintetizador automatizado" significa um móduloautomatizado sobre o princípio de operações unitárias como descrito porSatyamurthy et al. [Clin.Positr.Imag., 2(5), 233-253 (1999)]. O termo'operações unitárias' significa que processos complexos são reduzidos a umasérie de operações ou reações simples, que podem ser aplicados a umavariedade de materiais. Tais sintetizadores automatizados são preferidos parao método da presente invenção, e estão comercialmente disponíveis em umavariedade de fornecedores [Satyamurthy et al., acima], incluindo CTI Inc, GEHealthcare and Ion Beam Applications S.A.(Chemin du Cyclotron 3, B-1348Louvain-La-Neuve, Bélgica). Sintetizadores automatizados comerciaistambém estão projetados quer para proporcionarem blindagem de radiaçãoadequada, quer para estarem não-blindados mas localizados em uma célulaquente blindada (ie. uma célula de manufatura especialmente projetada pararealizar radioquímica) para proteger o operador da dose de radiação potencial.Tais sintetizadores comerciais também compreendem recipientes adequadospara o resíduo radioativo líquido gerado como um resultado da preparaçãoradiofarmacêutica.

Os sintetizadores automatizados preferidos são aqueles quecompreendem um cassete de uso único ou descartável que compreende todosos reagentes não-radioativos, vasos e aparelho de reação necessários pararealizar a preparação de uma dada batelada de radiofármaco de 99mTc. Taiscassetes são descritos na segunda modalidade abaixo. O cassete significa queo sintetizador automatizado possui a flexibilidade de ser capaz de prepararuma variedade de radiofármacos de 99mTc diferentes com risco mínimo decontaminação cruzada, por simples troca do cassete.

É considerado que o processo da presente invenção pode serusado para produzir uma batelada de um dado radiofármaco marcado com99mTc que compreende radioatividade suficiente para quase qualquer númerode doses unitárias para paciente. A única restrição sobre o limite superior dedoses é o volume do vaso de reação e a concentração radioativa que pode seralcançada. O número de doses unitárias para paciente por batelada épreferivelmente 1 a 200, preferivelmente 3 a 100, mais preferivelmente 5 a50. O aparelho sintetizador automatizado comercial inclui um detector para amedição automatizada do conteúdo radioativo e da concentração de reagentese produtos, de modo que o conteúdo radioativo pode ser medidoautomaticamente. A batelada pode ser então subdispensada para dentro demúltiplos recipientes adequados de doses unitárias ou seringas de grau clínicocomo uma característica adicional do presente método, ou a batelada de váriasdoses pode ser subdispensada como um exercício separado quer manualmentequer usando um método automatizado separado, tal como enchimentoautomatizado de frasco. A capacidade para produzir doses múltiplas nestamaneira significa que o presente método é particularmente útil em umaradiofarmácia servindo uma população de pacientes na qual muitas doses demesmo radiofármaco de 99mTc são necessárias no mesmo dia.

Em um segundo aspecto, a presente invenção proporciona umcassete descartável para uso no método da primeira modalidade, quecompreende o vaso de reação e os meios para realizar a transferência e amisturação de etapa (iv) da primeira modalidade, mais meios para realizar amanipulações de etapa (v) mais meios para realizar o(s) processo(s)adicional(ais) opcional(ais) de etapa (vi) do método da primeira modalidade.

O termo "cassete" significa uma peça do aparelho planejadapara encaixar removível e intercambiavelmente em um aparelho sintetizadorautomatizado (como definido acima), em um meio carreador movimentomecânico de partes móveis do sintetizador controla a operação do cassete defora do cassete, ie. externamente. Cassetes adequados compreendem umarranjo linear de válvulas, cada um ligado a uma porta onde reagentes oufrascos podem ser acoplados, quer por punção de agulha de um frasco vedadopor septo, quer por juntas macho-fêmea, estanques a gás. Cada válvula possuiuma junta macho-fêmea que forma interface com um braço móvelcorrespondente do sintetizador automatizado. Rotação externa do braço assimcontrola a abertura ou o fechamento da válvula quando o cassete é acopladono sintetizador automatizado. Partes móveis adicionais do sintetizadorautomatizado são projetadas para engatar em pontas de êmbolo de seringa, eassim aumenta ou diminuem os volumes de seringa.

O cassete é versátil, tipicamente possuindo várias posiçõesonde reagentes podem ser acoplados, e vários adequados para acoplamento defrascos de seringa de reagentes. O cassete sempre compreende um vaso dereação. Tais vasos de reação são preferivelmente 1 a 10 cm3, maispreferivelmente 2 a 5 cm em volume e estão configurados de modo que 3 oumais portas do cassete sejam conectadas no mesmo, para permitir atransferência de reagentes ou solventes de várias portas do cassete.Preferivelmente o cassete possui 15 a 40 válvulas em um arranjo linear, mais

preferivelmente 20 a 30, com 25 sendo especialmente preferido. As válvulasdo cassete são preferivelmente idênticas, e mais preferivelmente são válvulasde 3 vias. Os cassetes da presente invenção são projetados para seremadequados para manufatura radiofarmacêutica e são portanto manufaturadosde materiais que são de grau farmacêutico e idealmente também sãoresistentes à radiólise.

Os cassetes compreendem os vários reagentes e agentesquímicos não-radioativos necessários para a preparação de um dado complexode ligante-metal 99mTc. Os cassetes são projetados para serem descartáveis,mas também para serem intercambiáveis. Isto significa que, tendo investidoem um aparelho sintetizador automatizado relativamente caro, o usuário podesimplesmente então comprar os cassetes como acessórios consumíveis. Éplanejado que uma variedade de cassetes possuindo cada um ligantesdiferentes nos mesmos para gerar diferentes radiofármacos de 99mTcespecíficos seria usada conjuntamente com uma dado aparelho sintetizadorautomatizado.O cassete preferivelmente adicionalmente compreende umsuprimento de agente redutor que pode estar na forma liofilizada, de soluçãoou sólida. Aspectos preferidos do agente redutor são como descritos para aprimeira modalidade acima. O agente redutor do cassete está preferivelmenteem solução em um meio carreador biocompatível, como definido acima. Umatal solução mais preferida é uma solução estéril estanosa em um meiocarreador biocompatível na ausência de ar em um recipiente adequado.

O cassete preferivelmente adicionalmente compreende umsuprimento de ligante. Aspectos preferidos do ligante são como descritos paraa primeira modalidade acima. Mais preferivelmente, o ligante é fornecido naforma de kit como descrito para a primeira modalidade acima.

O cassete opcionalmente pode adicionalmente incluir umsuprimento de materiais radioativos necessários para preparar o desejadoradiofármaco de 99mTc, ie. quer a solução de precursor de 99mTc quer o aspectopreferido da mesma de molibdato- 99Mo, como descrito para a primeiramodalidade acima. Quando tais materiais radioativos são incluídos com ocassete, blindagem radioativa apropriada também é considerada. Contudo, épreferido que o cassete seja não-radioativo.

Os frascos e recipientes de reagentes do cassete podem estaropcionalmente codificados com cores de meio carreador seja mais fácil para ooperador identificar os materiais presentes. Os vários recipientes do cassetetambém podem ser opcionalmente identificados distintamente em um formatolegível por computador (por exemplo: código de barras) para permitir controlede microprocessador mais fácil e garantia de qualidade. Em uma modalidadepreferida, todo o cassete é identificado distintamente em um formato legívelpor computador (e.g. código de barras) de modo que o sintetizadorautomatizado possa automaticamente checar se o cassete correto está no lugarpara o radiofármaco a ser preparado.

É preferido que os ligante, agente redutor e componentes docassete estejam na forma estéril, apirogênica. Métodos de esterilização sãocomo descrito acima.

Em um terceiro aspecto, a presente invenção proporciona ouso de um aparelho sintetizador automatizado para a preparação de umradiofármaco de 99mTc. O "sintetizador automatizado" é como definido para aprimeira modalidade acima. Enquanto que tais sintetizadores tenham sidousados extensivamente para radiofármacos de PET, é crido que o seu uso para99mTc é novo. Esta modalidade efetivamente refere-se a um método novo deuso de tais sintetizadores automatizados.

Este sintetizador automatizado é preferivelmente usado pararealizar o método da primeira modalidade, incluindo suas modalidadespreferidas.

O sintetizador automatizado usado nesta modalidadepreferivelmente compreende o cassete descartável da segunda modalidade.

Em um quarto aspecto, a presente invenção proporciona o usode um kit não-radioativo, estéril para a preparação de um radiofármaco de99mTc no método automatizado da primeira modalidade ou no cassete dasegunda modalidade. Isto representa um método novo de uso de kits de 99mTcconvencionais.

Tais kits, e suas modalidades preferidas são como descritos naprimeira modalidade acima. Nesta quarta modalidade, os kits são projetadospara serem reconstituídos com um meio carreador biocompatível não-radioativo, como definido acima, então a solução resultante é usada nométodo automatizado da primeira modalidade. Isto é para ser contrastado coma arte anterior, onde a reconstituição de kit é com pertecnetato-99mTcradioativo, seguida por aquecimento opcional para dar o radiofármaco dentrodo mesmo frasco ou recipiente.

Em um quinto aspecto, a presente invenção proporciona o usodo cassete da segunda modalidade na preparação de um radiofármaco de99mTc. Preferivelmente, o cassete é usado no processo descrito na primeiramodalidade.

Em um sexto aspecto, a presente invenção proporciona umsuprimento esterilizado de molibdato-99Mo em um recipiente adequado parauso farmacêutico. Neste contexto, "esterilizado" é como descrito acima, esignifica que etapas adicionais têm sido realizadas para esterilizar omolibdato-99Mo para proporcioná-lo na forma estéril, livre de pirogênio.Métodos de esterilização adequados são descritos acima, e esterilizaçãoterminal (eg. por filtração estéril, irradiação gama ou autoclavagem épreferida). Embora molibdato-99Mo seja conhecido na arte anterior, aradioatividade sozinha não pode ser assumida para dar o grau de esterilizaçãopara remover pirogênios. Nesta modalidade, etapas de esterilização adicionaissão uma características essencial.

O recipiente adequado para uso farmacêutico, e seus aspectospreferido, são como descritos para a primeira modalidade acima.

O suprimento esterilizado de molibdato-99Mo épreferivelmente proporcionado quer na forma de solução aquosa quer naforma sólida. Preferivelmente a solução aquosa de molibdato-99Mo é alcalino,mais preferivelmente solução diluída de NaOH. Um ou mais agentesoxidantes tal como solução de hipoclorito de sódio podem ser adicionados nasolução durante o processamento, e tais soluções são preferivelmentearmazenado sob ar, porque ajuda a manter o estado de oxidação alto domolibdênio. Fosfato pode ser opcionalmente adicionado para produzirsoluções de fosfomolibdato. A dose de radiação de molibdato- 99Mo significaque blindagem adequada tem que ser usada, preferivelmente de tungstênio oude chumbo.

A invenção é ilustrada por meio dos seguintes Exemplos não-limitantes. Exemplo 1 demonstra que um sintetizador automatizadomodificado comercial pode ser usado com sucesso para preparar umradiofármaco de 99mTc. Exemplo 2 mostra como o método da presenteinvenção é útil para preparar os radiofármacos de 99mTc adequados paraadministração a humano que não são prontamente tratáveis para a preparaçãovia os kits convencionais. Exemplo 3 mostra como o método da presente invenção pode ser usado para remover ligante não-radioativo em excesso, quepotencialmente poderia competir com o fármaco de 99mTc pelo sítio alvo ativoin vivo.

Exemplo 1: Preparação de Complexo de Tecnécio de TRODAT.

O agente quelante TRODAT foi preparado pelo método de preparação em uma maneira análoga a Meegalla et ai. [J.Med.Chem., 40, 9-17(1997)]. O kit liofilizado foi preparado em uma maneira análoga a Kung et al.[Nucl.Med.Biol., 26, 461-466 (1999)]. Eluato de gerador de 99mTc decaído, ie.contendo primariamente pertecnetato-99Tc foi usado para este estudo..

Um kit liofilizado para a preparação de Injeção de 99mTc-

TRODAT contendo:

TRODAT-I 10 μ§*

SnCl2.2H20 38 μ§

Glico-heptonato de Na 0

Gliconato de Na IOmg

Na2EDTA.2H20 840 mg

Aseorbato de Na 500 μ8

Formulado como sal de ácido trifluoro-acético

foi acoplado em um sintetizador automatizado GE HealthcareLtd FASTlab™. As seguintes etapas foram então realizadas automaticamentesob o controle de programa de computador de sintetizador:

(i) eluato de gerador decaído (2,5 mL) foi transferido doreservatório para dentro de uma seringa e dela injetado no kit;

(ii) a solução resultante foi transferida para o vaso de reaçãoonde ela foi aquecida a 100 0C por 20 minutos;

(iii) a solução aquecida foi então dispensada para um frasco receptor e após esfriamento foi manualmente transferida para um frasco deauto-amostrador para análise por HPLC e teste de pH.Resultados.

O perfil químico do produto foi comparado com um frasco dekit TRODAT equivalente reconstituído manualmente com eluato de geradordecaído (2,5 mL) usando HPLC em fase reversa. A amostra produzida usandoFASTlab™ deu picos devido aos dois diastereômeros do complexo-Tc emtempos de retenção relativos de 19,5 e 21,0 minutos enquanto que o kitmanualmente reconstituído deu picos equivalentes a 20,6 e 21,7 minutos(medidos em uma máquina separada). O pH da amostra FASTlab™ foi 4,6que é normal para kits TRODAT reconstituídos.

Exemplo 2 Preparação de Complexos contendo 99mTc(CO)2.

Este é um Exemplo profético de como tais complexospoderiam ser preparados usando o método da presente invenção:

Etapa (a): Preparação de r99mTc(CO)2H2Q)2r

Este seria análogo ao método da literatura [Alberto et al.,J.Am.Chem.Soc, 123, 3135-3136 (2001)], exceto que o método e o cassete dapresente invenção seriam empregados. Assim, na primeira etapa, pertecnetatoseria introduzido em um aparelho sintetizador automatizado, e então seriatransferido para um vaso reator onde bórax e boranocarbonato seriamadicionados. O reator seria aquecido no tampão borato a 95°C por 20 minutospara produzir [Tc(C0)3(H20)3]+. Após esfriamento a solução serianeutralizada com HCl e tamponada com fosfato.

Etapa (b): Preparação de Complexos de Ligante Contendo99mTc(CO)3.

A solução tamponada de [Tc(CO)3(H2O)3]+ de etapa (a) seriaentão aquecida com o ligante (opcionalmente ligado em um cartucho deresina de fase sólida para facilitar a separação) por 30 minutos a 82°C, paraformar o complexo de 99mTc desejado. Ligante em excesso seria entãoremovido, quer por ligação em fase sólida como mencionada acima quer pelouso de HPLC ou de cartuchos de tipo Sep-pak, e a preparação analisada.Finalmente, a solução seria passada através de cartuchos de limpeza pararemover pertecnetato não reagido e borato tóxico e reformulada como prontarequerida para injeção em humano.

Exemplo 3 Preparação de Complexo de Metal 99mTc de umLigante Biologicamente Ativo usando uma Abordagem de Kit.

Este é um Exemplo profético de como complexos de metal deligantes que poderiam potencialmente competir com o radiofármaco pelo sítiobiológico in vivo poderiam ser preparados usando o método da presenteinvenção e um aparelho sintetizador automatizado:

O seguinte procedimento de 10 etapas seria usado:

(i) água seria bombeada para dentro de um kit seco porcongelamento;

(ii) o ligante seria reconstituído não-radioativamente no frasco;

(iii) solução de pertecnetato-99mTc seria transferida para oreator do sintetizador automatizado;

(iv) então solução de ligante contendo aditivos tais comoSnCl2, tampões e estabilizadores opcionais (eg. pABA) seria transferida parao reator;

(v) radiomarcação ocorreria no reator com um excessoquímico de ligante presente sobre o tecnécio;

(vi) após completitude da radiomarcação a mistura reacionalseria aplicada em eg. uma coluna RP-18 Sep Pak SPE de fase reversa;

(vii) sais e pertecnetato não reagido seriam removidos porlavagem da SPE com água;

(viii) o complexo desejado de 99mTc-Iigante seria eluído dacoluna com etanol, então a solução seria transferida de volta para o reator;

(ix) o etanol seria evaporado sob pressão reduzida;

(χ) o complexo de metal 99mTc-Iigante seria reconstituído comuma solução aquosa para formulação como um radiofármaco.Em adição ao reservatório de água 5 posições seriamrequeridas no sintetizador automatizado para esta preparação:

(a) solução de pertecnetato;

(b) kit seco por congelamento;

(c) EtOH;

(d) coluna de fase reversa (SPE);

(e) solução de reconstituição.

Claims (28)

1. Método automatizado para a preparação de uma composiçãoradiofarmacêutica estéril de 99mTc que compreende um complexo de metal de99mTc em um meio carreador biocompatível, caracterizado pelo fato decompreender:(i) provisão de um precursor que compreende uma solução depertecnetato-99mTc;(ii) provisão de um suprimento de um ligante não-radioativo,no qual o citado ligante forma um complexo de metal com 99mTc;(iii) provisão de um suprimento de um agente redutor capaz dereduzir tecnécio do estado de oxidação de Tc(VII) para um estado deoxidação inferior de tecnécio;(iv) complexação do ligante com 99mTc por transferênciacontrolada por microprocessador de alíquotas separadas de citados precursor eligante para um vaso de reação e misturação no mesmo, com aquecimentoopcional, e opcionalmente na presença de uma quantidade de citado agenteredutor efetiva para reduzir a citada alíquota de precursor de pertecnetato-99mTc;(v) quando o produto de complexo de 99mTc de etapa (iv) jáestiver em um meio carreador biocompatível ele é usado diretamente emetapa (vi), de outro modo o produto de etapa (iv) é quer dissolvido em ummeio carreador biocompatível quer o solvente usado em etapa (iv) é removidoe o resíduo redissolvido em um meio carreador biocompatível;(vi) opcionalmente realização de um ou mais dos seguintesprocessos adicionais: purificação; ajuste de pH; remoção de solvente eredissolução em um solvente biocompatível para dar a composiçãoradiofarmacêutica de 99mTc desejada;(vii) quer manutenção de esterilidade durante etapas (i) a (vi)de modo que o complexo de metal de 99mTc de etapa (vi) já esteja estéril, quersujeição do complexo de metal de 99mTc de etapa (vi) quer à esterilizaçãoterminal quer à filtração estéril para dar o radiofármaco de 99mTc desejado.

2. Método de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelofato de que a esterilidade é mantida durante as etapas (i) a (vi) de meiocarreador não seja necessária etapa de esterilização terminal adicional.

3. Método de acordo com a reivindicação 2, caracterizado pelofato de adicionalmente compreender provisão do ligante em solução estérilpor reconstituição automatizada com um solvente não-radioativo adequado deum kit contendo o ligante liofilizado.

4. Método de acordo com a reivindicação 3, caracterizado pelofato de que o kit adicionalmente compreende o agente redutor de modo que oligante e o agente redutor sejam proporcionados como uma misturaliofilizada.

5. Método de acordo com a reivindicação 4, caracterizado pelofato de que a mistura liofilizada de ligante e agente redutor é proporcionadapor um kit não-radioativo, estéril para a preparação de um radiofármaco de99mTc.

6. Método de acordo com a reivindicação 5, caracterizado pelofato de que o ligante é escolhido de: uma fosfina, isonitrila, diamina-dioxima,bis(amino-tiol) ou mercapto-acetil-triglicina (MAG3).

7. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a-6, caracterizado pelo fato de que um a etapa (vi) adicional de processo depurificação é incluída, que compreende a remoção de ligante não marcadopara dar uma composição radiofarmacêutica de 99mTc livre de ligante.

8. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a-7, caracterizado pelo fato de que o agente redutor é biocompatível.

9. Método de acordo com a reivindicação 8, caracterizado pelofato de que o agente redutor biocompatível compreende composto estanoso.

10. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1a 9, caracterizado pelo fato de que o processo é realizado usando um aparelhosintetizador automatizado.

11. Método de acordo com a reivindicação 10, caracterizadopelo fato de que a aparelho sintetizador automatizado compreende um cassetedescartável que compreende o vaso de reação e os meios para realizar atransferência e a misturação de etapa (iv) mais meios para realizar asmanipulações de etapa (v) e o(s) processo(s) adicional(ais) opcional(ais) deetapa (vi).

12. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1ali, caracterizado pelo fato de adicionalmente compreender uma soluçãoestéril de reservatório de molibdato-99Mo no qual o precursor de pertecnetato-- 99mTc de etapa (i) é proporcionado por decaimento radioativo in situ de citado- 99Mo a 99mTc, e citado pertecnetato-99mTc é separado do molibdato -99Mocomo parte do mesmo processo automatizado sob controle demicroprocessador.

13. Cassete descartável adequado para uso em método comodefinido nas reivindicações 1 a 12, caracterizado pelo fato de compreender ovaso de reação e os meios para realizar a transferência e a mistura de etapa(iv) mais meios para realizar as manipulações de etapa (v) e meios pararealizar o(s) processo(s) adicional(ais) opcional(ais) de etapa (vi).

14. Cassete de acordo com a reivindicação 13, caracterizadopelo fato de adicionalmente compreender um suprimento de agente redutor deetapa (iii) como definido na reivindicação 1.

15. Cassete de acordo com as reivindicações 13 ou 14,caracterizado pelo fato de adicionalmente compreender um suprimento deligante de etapa (ii) como definido na reivindicação 1.

16. Cassete de acordo com a reivindicação 15, caracterizadopelo fato de que o ligante é fornecido em um kit como definido emreivindicações 3 a 6.

17. Cassete de acordo com qualquer uma das reivindicações 13a 16, caracterizado pelo fato de adicionalmente compreender um suprimentoquer de precursor de pertecnetato-99mTc ou molibdato-99Mo.

18. Cassete de acordo com qualquer uma das reivindicações 13a 17, caracterizado pelo fato de que o agente redutor, ligante e oscomponentes de cassete estão na forma estéril, apirogênica.

19. Uso de aparelho sintetizador automatizado, caracterizadopelo fato de ser para a preparação de um radiofármaco de 99mTc.

20. Uso de acordo com a reivindicação 19, caracterizado pelofato de que a preparação é realizada pelo método como definido nasreivindicações 1 a 12.

21. Uso de acordo com as reivindicações 19 ou 20,caracterizado pelo fato de que o aparelho sintetizador automatizadocompreende o cassete descartável como definido nas reivindicações 13 a 18.

22. Uso de um kit não-radioativo, estéril, caracterizado pelofato de ser para a preparação de um radiofármaco de 99mTc em método comodefinido nas reivindicações 1 a 12 ou o cassete das reivindicações 13 a 18.

23. Uso de acordo com a reivindicação 22, caracterizado pelofato de que o kit é como definido nas reivindicações 3 a 6.

24. Uso do cassete de acordo com as reivindicações 13 a 18,caracterizado pelo fato de ser na preparação de um radiofármaco de 99mTc.

25. Uso de acordo com a reivindicação 24, caracterizado pelofato de que a preparação é realizada pelo método como definido nasreivindicações 1 a 12.

26. Suprimento esterilizado de molibdato-99Mo, caracterizadopelo fato de ser em um recipiente adequado para uso farmacêutico.

27. Suprimento esterilizado de acordo com a reivindicação 26,caracterizado pelo fato de que o molibdato-99Mo está em um meio carreadorbiocompatível.

28. Suprimento esterilizado de acordo com a reivindicação 26,caracterizado pelo fato de que o molibdato-99Mo está na forma sólida.