BRPI0311934B1 - Composição, solução, e uso de uma composição para tratar estresse em uma ave - Google Patents

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Description

“COMPOSIÇÃO, SOLUÇÃO, E USO DE UMA COMPOSIÇÃO PARA TRATAR ESTRESSE EM UMA AVE” A presente invenção refere-se a uma composição, que compreende uma mistura de ácidos graxos ou derivados dos mesmos, derivados a partir de secreções de glândulas uropigiais de aves. Esta composição, denominada um feromônio que acalma aves, pode ser usada para diminuir o estresse, a ansiedade e a agressividade em aves.
TÉCNICA ANTECEDENTE O estresse é, por definição, a reação de um corpo animal a forças de natureza deletéria, infeções e outros estados anormais, que tendem a perturbar e homeostase.
Os animais expostos ao estresse respondem com alterações na atividade dos sistemas autonômicos e neuroendócrinos e no comportamento. A ativação destes sistemas biológicos é um pré-requisito para que o animal lide com o estresse e, deste modo, o principal precursor que irá proporcionar uma defesa biológica adequada contra uma ameaça que desafia a homeostase do animal. Moberg, G. P, Animal Stgress, pag. 27-49 (1985); Vogei, W. H. Neuropsychology, 13, pág. 1290 (1985). O estresse está associado a uma agressão objetiva e as consequências aparecem na alteração de diferentes sistemas, tais que os sistemas humoral, metabólico, imunológico e/ou comportamental. A resposta hormonal é tradicionalmente determinada por uma liberação de cortisol, um decréscimo na secreção do hormônio do crescimento e um aumento nos hormônios da tireóide e também dos esteróides sexuais. O estresse também desempenha uma função de modo a diminuir, seja diretamente ou indiretamente, a quantidade de consumo, que constitui um problema principal no caso dos criadores de animais. Este decréscimo na quantidade de consumo em animais pode ser causado, seja por um aumento no metabolismo ou um decréscimo no consumo de alimento devido ao estresse.
De modo mais específico, o estresse pode ser observado pelo exame de vários elementos clínicos no sangue. É conhecido que, em uma condição estressada, ocorre um aumento na razão de H/L (heterófilos/ linfócitos. Heterófilos compreendendo todas as células sangüíneas brancas que não são linfócitos em aves) e um aumento no nível de hormônios, tais que T4 circulante (tiroxina), cortisol e prolactina. Davis and Siopas, Poultry Science,66, pag. 54-43 (1987). O aumento de T4 em aves resulta na alteração de diferentes condições fisiológicas bem conhecidas, tais como um aumento no nível de catabolismo de carboidrato, uma desregulação de termorregulação, um aumento no batimento cardíaco e um aumento no cálcio fecal e urinário. Idelman, Col. Grenoble Science PUG (1990).
Agentes causadores de estresse fisiológicos podem também resultar em uma secreção de corticosterona anormalmente elevada. Campo J. L., S. G., Davilla, Poult. Sei. 81: 1637-1639 (2002); Moberg G. P., em: The Biology of animal stress (Moberg & Mench Ed.) CABI, 1-23 (2000).
Além de testes fisiológicos, testes comportamentais podem ser também efetuados para avaliar o estresse e/ou medo em aves. Um dos testes comportamentais mais utilizados é o teste de Imobilidade Tônica (TI), conforme descrito pr Campo J.L., S.G. Davila, Poult. Sei. 81: 1637- 1639 (2002).
Pode ser apreciado que a alteração nas condições fisiológicas devido ao estresse em aves pode resultar, em alguns casos, em efeitos terríveis, tais que a mortalidade e, em muitos casos, a perda de peso. Além disso, o estresse pode provocar alterações de comportamento, o que resulta em agressividade, tal como, bicar outras aves, canibalismo, e pode causar dano à pele em ninhadas de aves. O estresse constitui um prejuízo real para o aviculturista, pois ele resulta em perda de produção do aviário.
Portanto, uma redução do estresse em aves e em especial na criação de aves conduziría a menos mortalidade, maior ganho de peso e produção de qualidade mais alta, resultando em maior ganho financeiro para o aviculturista.
As vantagens que resultam de uma redução de estresse em aves são extremamente benéficas para aqueles aviculturístas, que usam o alojamento em confinamento. No alojamento em confinamento um grande número de aves são criadas em gaiolas em galinheiros e existe um grande número de aves por gaiola. Como as aves são confinadas em uma pequena área junto com outras aves, os níveis de estresse são mais elevados em comparação com aquelas aves que são criadas em um sistema de faixa livre. O estresse em aves em sistemas de alojamento em confinamento conduz, deste modo, a uma grande perda de rendimento (Craig, J. V. e W. M. Muir, Poult. Sei. 75: 294-302 (1996) devido ao comportamento de bicar penas (Kjaer J. B., e P. Sorensen, Br. Poult. Sei. 38: 333- 341 (1997) razão de alimentação para ganho mais alta (Buitenhuis A. J. et al. 7* WCGALP, Montpellier - France, communication n° 14-06) mortalidde mais elevada (Buitenhuis A. J., et WCGALP, Montpellier - France, communication n° 14-06) ou/ e baixa qualidade da carne (carcaça) (Tankston J. D. et al., Poult. Sei. 80: 1384-1389 (2001).
Em um sistema de alojamento em confinamento, as aves permanecem no interior do recinto e são providas com luz durante vinte e quatro horas por dia para encorajar o consumo de alimentos. A palha é geralmente espalhada sobre o piso os galinheiros, agindo para a absorção da umidade, diluir o esterco, e proporcionar amortecimento e isolamento para as aves. Na indústria convencional, a palha é espalhada em de 2 a 4 polegadas (5,08 a 10,16 cm) de profundidade e é mantida em um teor de umidade de 20% a 30%. Existe geralmente um período de descanso de cerca de uma semana entre as ninhadas, quando os galinheiros são limpos ou desobstruídos.
Por definição, os feromônios são substâncias liberadas pelo corpo, que causam uma reação previsível por outro indivíduo da mesma espécie. É conhecido que uma quantidade de diferentes glândulas produzem feromônio em mamíferos machos, tais que as glândulas salivares submaxilares, as glândulas paratireóides e as glândulas sebáceas.
Os feromônios que são secretados em glândulas salivares submaxilares e paratireóides em machos, são usados para marcar as fêmeas durante a corte. Em javalis, a secreção destas glândulas resulta em comportamento agnóstico. É conhecido que estas secreções contêm uma mistura de androstenol e andosterona. É conhecido na técnica que os feromônios em mamíferos podem ser usados para reduzir o estresse, a ansiedade e a agressividade conforme demonstrado nas Patentes U.S. 6.077. 87,6. 054. 481 e 6. 169. 113. Estes feromônios foram derivados a partir de secreções de glândulas mamárias de mamíferos. No entanto, as glândulas mamárias não existem em aves. Além disso, existem algumas dúvidas entre os especialistas acerca da presença de feromônios em aves, pois não existe órgão vomeronasal, que é um órgão sensórío que consiste no próprio trajeto para o cérebro.
As glândulas uropigeais em aves consistem m um glândula holócrina bilobulada com secreções que desempenham várias funções em aves. Estas funções incluem as penas à prova d’água, a manufatura de precursores da vitamina D, a manutenção do bico, pele e penas flexíveis e a prevenção da infeção bacteriana. As secreções da glândula uropigeal se espalham geralmente sobre as penas durante o ato de ajeitar as penas com o bico e, deste modo, toma as penas à prova d’água.
Bohnet et al. No Journal of Biochemistry vol. 226, N° 15, pag.. 9795-9804 (1991) descrevem a produção em patos selvagens fêmeas de feromônios sexuais, diésteres de ácidos 3-hidróxi graxos em suas glândulas uropigeais durante a estação de acasalamento. Fora da estação de acasalamento, a glândula uropigeal produziu apenas uma cera de monoéster usual. Não é conhecido como a glândula uropigeal ativa os seus processos biológicos de modo a produzir os feromônios sexuais apenas durante a estação de acasalamento.
Os feromônios sexuais são descritos por Bohner et al., supra e conhecidos como sendo produzidos em vários pássaros apenas durante a estação de acasalamento, agem como atrativos ou estimulantes sexuais e não podem ser usados como feromônios calmantes, que atuam de modo a acalmar, abrandar ou abrandar a ansiedade devido ao estresse como na presente invenção. Além disso, a composição química dos feromônios sexuais é diferente daquela dos feromônios que acalmam aves da presente invenção.
Deste modo, um aspecto da presente invenção consiste em prover um feromônio que acalma aves derivado a partir da glândula uropigeal de uma ave.
Em outro aspecto, a presente invenção provê uma composição, que compreende um feromônio que acalma aves, que compreende ácido láurico, ácido palmítico, ácido linoléico e ácido oléico e/ou derivados dos mesmos e/ou isômeros dos mesmos, assim como misturas de um ou mais destes ácidos graxos com um ou mais de seus derivados e/ou um ou mais de seus isômeros.
Em ainda um outro aspecto, a presente invenção provê uma composição, que compreende um feromônio que acalma aves, que compreende uma mistura de cerca de 12,3 a 13,7 (% em peso / % em peso) de ácido láurico, cerca de 38,0 a 42,0 (% em peso / % em peso) de ácido palmítico, cerca de 32,3 a 35,7 (% em peso / % em peso) de ácido linoléico e de cerca de 12,0 a 14,0 (% em peso / % em peso) de ácido oléico e/ou derivados dos mesmos e/ou isômeros dos mesmos, assim como misturas de um ou mais destes ácidos graxos com um ou mais de seus derivados e/ou um ou mais de seus isômeros.
Em ainda um outro aspecto, a presente invenção provê um processo para tratar o estresse em uma ave, cujo processo compreende administrar a uma ave, que esteja em necessidade de um tal tratamento, um feromônio que acalma aves, derivado a partir de secreções em tomo da glândula uropigeal de uma ave.
Em ainda um outro aspecto, a presente invenção refere-se a um processo de tratamento de perda de peso em uma ave, cujo processo compreende administrar a uma ave, que esteja em necessidade de um tal tratamento, uma composição ferormonal que acalma aves, derivada a partir de secreções em tomo da glândula uropigeal de uma ave.
Em ainda um outro aspecto, a presente invenção provê um processo para o tratamento de uma ave doméstica durante o transporte de modo a eliminar a sua ansiedade, o referido processo compreendendo administrar a uma ave, que esteja em necessidade de um tal tratamento, uma composição ferormonal que acalma aves, derivada a partir de secreções em tomo da glândula uropigeal de uma ave.
Em outro aspecto, a presente invenção provê um processo para aperfeiçoar a conversão de alimento em uma ave, que compreende administrar a uma ave, que esteja em necessidade de um tal tratamento, uma composição ferormonal que acalma aves, derivada a partir de secreções em tomo da glândula uropigeal de uma ave.
Estes e outros objetos são alcançados pela presente invenção, conforme evidenciados pelo sumário da invenção, descrição das modalidades preferidas e reivindicações.
SUMÁRIO DA INVENÇÃO A presente invenção provê uma composição, que compreende um feromônio que acalma aves, derivado a partir do em tomo da glândula uropigeal de uma ave.
Em um aspecto da invenção, a presente invenção expõe uma composição, que compreende um feromônio que acalma aves, que compreende ácido láurico, ácido palmítico, ácido linoléico e ácido oléico e/ou derivados dos mesmos e/ou isômeros dos mesmos, assim como misturas de um ou mais destes ácidos graxos com um ou mais de seus derivados e/ou um ou mais de seus isômeros.
Em outro aspecto, a presente invenção provê uma composição, que compreende um feromônio que acalma aves, que compreende de cerca de 12,3 a 13,7 (% em peso / % em peso) de ácido láurico, de cerca de 39,0 a 42,0 (% em peso / % em peso) de ácido palmítico, de cerca de 32,3 a 35,7 (% em peso / % em peso) de ácido linoléico e de cerca de 12,0 a 14,0 (% em peso / % em peso) de ácido oléico e/ou derivados dos mesmos e/ou isômeros dos mesmos, assim como misturas de um ou mais destes ácidos graxos com um ou mais de seus derivados e/ou um ou mais de seus isômeros.
Os derivados da presente invenção incluem ésteres, tais como ésteres metílicos, sais, álcoois, cetonas, éteres, aldeídos, esteróis e amidas de ácido láurico, ácido palmítico, ácido linoléico e ácido oléico.
Soluções contendo as composições acima são também contempladas pela presente invenção.
Em outro aspecto, a presente invenção provê um processo para o tratamento de estresse em uma ave, cujo processo compreende administrar a uma ave, que esteja em necessidade de um tal tratamento, um feromônio derivado a partir de secreções em tomo da glândula uropigeal de uma ave.
Em ainda um outro aspecto, a presente invenção expõe um processo para o tratamento de perda de peso em uma ave, o referido processo compreendendo administrar a uma ave, que esteja em necessidade de um tal tratamento, uma composição ferormonal que acalma aves, derivada a partir de secreções em tomo da glândulo uropigeal de uma ave.
Em mais um outro aspecto, a presente invenção provê um processo para o tratamento de uma ave doméstica durante o transporte de modo a eliminar a sua ansiedade, o referido processo compreendendo administrar a uma ave, que esteja em necessidade de um tal tratamento, uma composição ferormonal que acalma aves, derivada a partir de secreções em tomo da glândula uropigeal de uma ave.
Em ainda um outro aspecto, a presente invenção expõe um processo para aperfeiçoar a conversão de alimento em uma ave, que compreende administrar a uma ave, que esteja em necessidade de um tal tratamento, uma composição ferormonal que acalma aves, derivada a partir de secreções em otmo da glândula uropigeal de uma ave.
BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS A figura 1 consiste em perfis de espectro de cromatografia de gás / espectroscopia de massa de galinhas, que não foram seguidas por seus pintos e de galinhas que foram seguidas por seus pintos. A figura 2 consiste em perfis de espectro de cromatografia de gás / espectroscopia de massa de galinhas, que foram seguidas por seus pintos nos dias 4,8 e 12. A figura 3 é um gráfico de barras, que mostra o ganho em peso de pintos jovens. ^ indica que os pintos foram tratados com um feromônio que acalma aves, enquanto que Á indica as galinhas que foram tratadas com um placebo. A figura 4 consiste em um gráfico que mostra o aumento em ganho de peso em pintos jovens, quando é administrado um feromônio que acalma aves (linha de topo) em comparação com um placebo (linha de base). A figura 5 consiste em um gráfico de barras, que mostra os níveis de cortisol em galinhas (fêmeas) e em galos (machos) e machos + fêmeas combinados (M + F). A figura 6 consiste em um gráfico de barras, que mostra os níveis de T4 em galinhas (fêmeas) e em galos (machos) e em machos + fêmeas combinados (M + F). A Figura 7 consiste em um gráfico de barras, que mostra os níveis de cortisol em galinhas sob diferentes condições de alojamento. ^ indica que as galinhas foram tratadas com feromônio que acalma aves, enquanto que Λ indica que as galinhas foram tratadas com um placebo. A figura 8 consiste em um gráfico de barras, que mostra os níveis de T4 em galinhas sob diferentes condições de alojamento. ^ indica que as galinhas foram tratadas com um feromônio que acalma aves, enquanto que Λ indica que as galinhas foram tratadas com um placebo. A figura 9 consiste em um gráfico de barras, que mostra o ganho de peso em galinhas sob diferentes condições de alojamento. indica que as galinhas foram tratadas com um feromônio que acalma aves, enquanto que Λ indica que as galinhas foram tratadas com um placebo. À figura 10 consiste em um gráfico de barras, que mostra os níveis de cortisol totais sob diferentes condições de alojamento. A figura 11 consiste em um gráfico de barras, que mostra a razão de H/L em galinhas em diferentes datas no mesmo ano de 2002.
DESCRIÇÃO DAS MODALIDADES PREFERIDAS
Como aqui usado, o termo “pássaro” e “ave” (ou aves) são usados de modo intercambiável e abrangem qualquer animal de sangue quente com penas e asas, que ponha ovos, e que seja usual mente capaz de voar. Exemplos de pássaros incluem, mas não estão limitados a pintos, frangos, galinhas da guiné, papagaios, perus, galinhas, patos, gansos e os similares.
Como aqui usada, a palavra “estresse” compreende a reação de um corpo de animal a forças e natureza deletéria, infcção e vários estados anormais, que tendem a perturbar a homeostase. Esta reação pode ser uma reação física ou uma reação emocional, incluindo a ansiedade.
Por “ansiedade” é compreendida uma apreensão de irritação e medo, acompanhados por inquietação, tensão e os similares, o que constituí um estado reacional caracterizado por uma alta probabilidade para fornecer respostas comportamentais e emocionais de pavor. Em termos neurofísicos, o estado de ansiedade é acompanhado por uma hiperatividade dos sistemas noradrenérgico e de serotonina.
Por “feromônio” é compreendida uma substância liberada pelo corpo de uma espécie particular, que causa uma reação previsível por outro indivíduo da mesma espécie, cuja substância pode servir, por exemplo, como um atrativo específico, um comunicador, um estimulante sexual e os similares.
Por “feromônio calmante” é compreendido um feromônio que acalma, suaviza ou abranda o estresse, ansiedade e agressividade. Feromônios calmantes poderíam ser distinguidos a partir de feromônios sexuais, os últimos agindo ou como estimulantes sexuais ou como atrativos.
Por “doenças associadas ao estresse” é compreendida qualquer doença, cujos sintomas aumentem devido ao estresse.
Por “conversão de alimento aperfeiçoada” é compreendida a redução da razão no consumo de alimento/ peso ganho.
Pelo termo “solução” é compreendido um sólido, que é dispersado através de um líquido, seja pela sua dissolução ou pela sua suspensão.
Por “efeito calmante” é compreendida uma redução do medo, apreensão, ansiedade, assim como das conseqüências físicas e comportamentais associadas ao estresse. As conseqüências comportamentais associadas ao estresse incluem tremor, vocalização, arroubos, agressão, atividades de deslocamento e os similares. As conseqüências físicas associadas com o estresse incluem alterações no batimento cardíaco, alterações nos níveis de epinefrina, norepinefrina, ACTH, cortisol glicose e os similares. Em aves usadas como uma fonte de alimento, esta definição inclui parâmetros de cultivo agrícola, tais como peso de crescimento, eficiência de conversão em alimento, qualidade da carne, qualidade bacteriana dos produtos, tais como a ausência de Salmonela, e a quantidade de ovos produzidos. Também inclui a qualidade das penas produzidas por pássaros e a qualidade de “goose down”.
Por “composição reforçadora” é compreendida uma composição ferormonal ativa, que é específica espécie- espécie em pássaros e que pode ser usada para reforçar ou agir de modo sinérgico com a composição ferormonal básica, de modo a aumentar a eficácia na espécie específica da composição.
Por “heterófilo” são compreendidas todas as células brancas, que não são linfócitos e que são encontradas em aves.
Como aqui usado, o termo “isômeros” inclui isomerismo estrutural e isomerismo espacial e refere-se a isômeros dos ácidos graxos de ácido láurico, ácido palmítico, ácido linoléico e ácido oléico, assim como a seus derivados.
Com referência a misturas de um ou mais ácidos graxos da presente invenção com um ou mais de seus derivados e/ou um ou mais de seus isômeros é compreendido que a composição pode incluir, apenas a título exemplificativo, ácido láurico, um derivado de ácido palmítico, um isômero de ácido linoléico e um isômero de um derivado de ácido oléico. Será apreciado que as composições da presente invenção abrangem todas as permutações (e não apenas aquelas acima especificadas) de misturas dos ácidos graxos expostos com seus derivados e/ou isômeros dos mesmos. Além disso, os derivados e isômeros aqui referidos possuem os mesmos percentuais em peso que as suas contrapartes de ácido graxo. Por exemplo, um derivado, isômero ou derivado de um isômero para ácido láurico deve ter uma concentração de entre 12,3 a 13,7 (% em peso / % em peso).
De modo mais específico, a presente invenção refere-se à identificação de uma composição ferormonal que acalma aves, que é derivada a partir de secreções em tomo da glândula uropigeal de pássaros.
As composições da presente invenção são calmantes e de origem ferormonal e são compostas de moléculas voláteis, os componentes essenciais destas moléculas sendo aminas e ácidos graxos de derivados indólicos, assim como os ésteres destas aminas e ácidos graxos. A composição da presente invenção compreende uma mistura de ácido láurico, ácido palmítico, ácido linoléico e ácido oléico e/ou derivados dos mesmos e/ou isômeros dos mesmos, assim como misturas de um ou mais destes ácidos graxos com um ou mais de seus derivados e/ou um ou mais de seus isômeros.
De modo mais específico, a composição básica da presente invenção compreende uma msitura de cerca de 12,3 a 13,7 (% em peso / % em peso) de ácido láurico, cerca de 38,0 a 42,0 (% em peso / % em peso) de ácido palmítico, cerca de 32,3 a 35,7 (% em peso / % em peso) de ácido linoléico e cerca de 12,0 a 14,0 (% em peso / % em peso) de ácido oléico e/ou derivados do mesmo e/ou isômeros do mesmo, assim como misturas de um ou mais destes ácidos graxos com um ou mais de seus derivados e/ um ou mais de seus isômeros. A composição pode ser também ligada a um veículo químico, contanto que a estrutura bioativa dos ácidos graxos seja preservada. Tais moléculas de veículo incluem, mas não estão limitadas a, resinas lipossomos, compostos coroa, proteínas veiculares, polímeros e os similares.
Os ácidos graxos podem ser usados em sua forma pura, isto é, como um ácido graxo livre, assim como em sua forma derivada, tal como ésteres ou ácidos graxos ou sais de ácidos graxos, assim como álcoois de ácidos graxos, cetonas de ácidos graxos, éteres de ácidos graxos e amidas de ácidos graxos. Estes derivados de ácido graxo podem substituir um ou mais ou todos os ácidos graxos nas composições da presente invenção e têm os mesmos efeitos. Os derivados dos ácidos graxos podem ser encontrados nas composições ou em soluções da presente invenção.
Foi verificado que a composição possui um efeito calmante em aves e que pode ser usada para aliviar o estresse, a ansiedade, reduzir o comportamento agressivo, aumentar o ganho de peso e aumentar a produção de ovos.
Uma composição reforçadora contendo entre 5 % a 35% (% em peso / % em peso) pode ser também adicionada à composição de feromônio que acalma aves, se desejado. Esta composição reforçadora compreende compostos orgânicos voláteis e misturas dos mesmos. Esta composição reforçadora pode ser de natureza específica para a espécie e pode variar de acordo com a espécie de ave selecionada para o uso na presente invenção.
Os compostos que podem ser usados na composição reforçadora, incluem, mas não estão limitados a, aminas e ácidos graxos a partir de derivados indólicos, ésteres destas aminas e ácidos graxos, cetonas, tais como acetona, álcoois, esteróis e os similares.
Cargas não-tóxicas podem ser também adicionadas à composição, que inclui ácidos graxos, álcoois, aminas, esqualeno e glicerol.
Em outro aspecto, a presente invenção compreende a composição ferormonal que acalma aves em solução. A presente invenção provê deste modo uma solução de ácido láurico, ácido palmítico, ácido bnoléico e ácido oléico e/ou derivados dos mesmos e/ou isômeros dos mesmos, assim como misturas de um ou mais destes ácidos graxos com um ou mais de seus derivados e/ou um ou mais de seus isômeros.
Deste modo, em outro aspecto, a presente invenção provê em solução cerca de 12,3 a 13,7 (% em peso / % em peso) de ácido láurico, cerca de 38,0 a 42,0 (% em peso / % em peso) de ácido palmítico, cerca de 32,5 a 35,7% (% em peso / % em peso) de ácido bnoléico e cerca de 12,0 a 14,0 (% em peso / % em peso) de ácido oléico e/ou derivados do mesmo e/ou isômeros do mesmo, assim como misturas de um ou mais destes ácidos graxos com um ou mais de seus derivados e/ou um ou mais de seus isômeros. A composição pode ser apresentada sob a forma de uma solução, pulverização, aerossol, gel, matriz de liberação lenta, xampu e os similares. A composição pode ser também colocada em lipossomos, em um difusor, em polímeros, estar em um difusor elétrico e pode ser microencapsulada. A concentração dos ácidos graxos acima mencionados pode variar dependendo da forma final de uso. No entanto, as concentrações dos ácidos graxos específicos, que são utilizados e a sua concentração pode ser determinada e testada de acordo com os métodos expostos na presente invenção.
Os ácidos graxos, que são em geral sólidos em natureza, podem ser diluídos em um solvente não-aquoso para formar a solução da presente invenção. Solventes, tais como propileno glicol, álcool, éter, clorofórmio, etanol, benzeno, dissulfeto de carbono, polisorbato, álcool propüico, isopropanol, 2-propanol, óleos fixos e voláteis e os similares. Combinações destes solventes podem ser também usadas.
Deste modo, uma combinação de propileno glicol e etanol absoluto pode ser usada como um solvente na presente invenção. De 90% a 98% de propileno glicol e de 2% a 10% de etanol absoluto são expostos como um exemplo. De 5% a 40% de isopropanol e de 60% a 95% de propileno glicol podem ser também usados.
Os ácidos graxos estão comercialmente disponíveis a partir de várias companhias químicas em forma sólida. No entanto, como é difícil solubilizar tais ácidos graxos, o ácido graxo é geralmente adicionado ao solvente sob agitação constante e em uma temperatura de entre 37°C a cerca de 38°C. 37,5°C pode também ser usado.
Uma vez obtidas, as composições da presente invenção podem ser testadas quanto à sua eficácia para evitar o estresse em uma ave. Agentes de estresse bem documentados são» por exemplo, o desmame das aves, o transporte das aves, e os similares. A aplicação das presentes composições da invenção sob a forma de urna pulverização, aerossol, e os similares na área circundante aos eventos que provocam o estresse, resulta na diminuição do estresse, conforme indicado por uma variedades de fatores, tais como o ganho de peso, o comportamento social com relação a outras aves, feridas no corpo, cortisol salivar e os similares.
Deste modo, as composições da presente invenção podem ser diluídas e aplicadas a vários objetos que os pássaros estão em contato, tais como paredes, gaiolas, no ar e em brinquedos. Além disso, as presentes composições sob a forma de soluções podem ser também aplicadas diretamente sobre as aves.
As composições acima descritas foram descobertas após a análise detalhada da composições química de secreções obtidas a partir da glândula uropigeal em pássaros, que tinham os seus filhotes seguindo-os.
De modo mais particular, este procedimento envolve a esfregação em torno das glândulas uropigeais de pássaros, que tinham os seus filhotes seguindo-os com uma compressa estéril e a análise da composição química de secreções através de cro malogra fia /espectro scopia de massa. Este procedimento é descrito em mais detalhe nos exemplos que se seguem.
De modo a ilustrar adicional mente a presente invenção e as vantagens da mesma, são fornecidos os exemplos específicos que se seguem, sendo entendido que os mesmos têm apenas escopo ilustrativo e que não são limitativos sob nenhum modo.
EXEMPLOS
Exemplo 1 Isolamento e análise para identificar feromônios a partir de galinhas Galinhas fêmeas, que foram seguidas por seus filhotes ou que não foram seguidas por seus filhotes foram usadas neste exemplo. As amostras foram obtidas em galinhas fêmeas seguidas por seus filhotes em um período do dia 4, dia 8, dia 12 e dia 35 após a saída do ovo. Outro conjunto de amostras foi tomado a partir de galinhas que não foram seguidas por seus filhotes.
As galinhas foram esfregadas cm torno da área da glândula uropigeal ou glândula caudal com compressas esterilizadas várias vezes. A compressa foi imediata mente colocada em um frasco contendo 10 ml de diclorometano, A compressa foi então desabsorvida em diclorometano pela agitação do frasco várias vezes. Cinco ml da amostra foram tomados e submetidos à evaporação até 1 ml usando ar.
As amostras foram então submetidas à cromatografia /espectroscopia de massa (CG/ MS) usando um espectômetro Turbo Mass produzido por Perkin Elmer. A detecção foi efetuada mediante impacto usando (EI +) em uma energia de 70 e V a 180°C. Uma coluna JW do tipo DB 5 MS tendo um comprimento de 30 m (diâmetro interno = 0, 25 mm; filme = 0,25 pme uma abertura de 1/20 e uma abertura/ fechamento de 45 segundos foi usada. 2,0 μΐ de cada amostra foram injetados. Os resultados espectrográficos a partir de CG/ MS são apresentados na Figuras 1 e na Figura 2.
Para confirmar as estruturas de certas moléculas obtidas a partir da análise de CG/MS foi entãoe executada a ionização química positiva (Cl +) para visualizar o pico molecular (Massa Molecular). Este método é conhecido na técnica.
Os resultados foram analisados usando uma base de dados para Exemplo 2 Efeito do Feromônio que acalma aves sobre o peso em pintos iovens Foi executado o exemplo que se segue, sob as seguintes condições de criação: Tipo de criação: alojamento semi- aberto Alimentação: à vontade para alimento e água com a ração comumente usada por todos os criadores para a alimentação de pintos jovens.
Dois lotes separados de pintos jovens foram divididos. O lote A recebeu uma dosagem de 2% do Feromônio que Acalma Aves, a obtenção dos espectros mais prováveis. As bases de dados contendo tais dados são bem conhecidas na técnica. A Tabela 1 abaixo apresenta os resultados obtidos a partir deste exemplo.
Após uma análise completa dos cromatógrafos, foi verificado que o feromônio que acalma aves era constituído da seguinte composição na Tabela 2. compreendendo 13% de ácido láurico (% em peso / % em peso), 40% de ácido palmítico (% em peso / % em peso),54%: de ácido linoléico (% em peso / % em peso) e 13% de ácido oléico (% em peso / % em peso) que foi colocado em um difusor eletrônico e colocado acima dos pintos jovens em seu alojamento. O lote B recebeu um tratamento com um placebo.
Antes da administração do feromônio que acalma aves ou do placebo, os pintos jovens foram também agrupados e acordo com o seu peso: isto é, no dia 0.
Os resultados são apresentados nas Figuras 3 e 4, em que os agrupamentos de pintos jovens no dia 0 foram os mesmos. A partir destas figuras, foi verificado que, no caso do Lote A tratado houve um ganho de peso importante em comparação com o placebo do Lote B. O ganho de peso é portanto mais rápido quando o feromônio que acalma aves é administrado.
Exemplo 3 O efeito do feromônio que acalma aves no estresse crônico provocado por galinhas e galos, Este exemplo mediu a influência do feromônio que acalma aves em galinhas e galos submetidos a estresse forte e crônico.
As condições de estresse, às quais as galinhas e galos foram submetidos incluem luzes fortes, ruídos metálicos e choque elétrico. Dois tipos de agentes causadores de estresse foram provocados a cada dia, durante um período de 15 minutos, em um modo aleatório, que foram idênticos para os dois lotes, O lote A foi tratado com o feromônio que acalma aves (AAP), compreendendo 13% de ácido láurico (% em peso / % em peso), 40% de ácido pal mítico (% em peso / % em peso),54% de ácido linoléico (% em peso / % em peso) e 13% de ácido oléico (% em peso / % em peso). Ao lote B foi fornecido um placebo. Vários fatores foram então testados, tais como se as galinhas ou galos ganharam peso, as alterações nos níveis de cortisol e as alterações nos níveis de T4 usando testes padrões para o cortisol e T4,8 dias após o término do experimento. Não foi observada uma diferença significativa no peso. Isto poderia ser atribuído ao fato de que os agentes causadores de estresse eram muito violentos e que o feromônio poderia não evitar este tipo de estresse violento.
Os resultados endócrinos demonstraram uma tendência calmante nos animais individuais, que haviam recebido o feromônio que acalma aves (A, B para cortisol - Figura 5; p = 14).
Idelman (1990), acima, demonstrou que a fase de resistência ao estresse libera hormônios conectados com a secreção de ACTH, que estimula cortisol, cujo cortisol é o hormônio que é mais elevado durante o estresse, A Figura 5 ilustra que as fêmeas são mais sensíveis ao estresse do que os machos (p = 0,12 para as fêmeas). Além disso, as fêmeas apresentam uma ação mais sensível ao feromônio que acalma aves; um decréscimo de cerca de 50% do nível de cortisol antes e após o estresse.
Isto foi também confirmado pelo nível de T4 nas fêmeas, exposto na Figura 6. Além disso, estes resultados provam que existe uma diferença significativa entre as fêmeas tratadas e não-tratadas, o que não é o caso para os machos (Figura 6; p = 0,08).
Exemplo 4 Feromônio que acalma aves e o efeito do alojamento das galinhas Este exemplo foi executado de modo a determinar se o alojamento das galinhas teve qualquer efeito sobre os resultados no teste duplo cego. Nem a pessoa responsável pelo projeto, nem o criador conheciam o tipo de tratamento em cada alojamento.
As galinhas foram alojadas em dois Lotes separados de 2 x 13.000 galinhas em uma densidade de 18/m2 para cada Lote. O Lote 1 representa o primeiro teste, o Lote 2 o segundo teste, Os tratamentos A e B foram como se segue: Lote 1: Al (foi administrado o feromônio que acalma as aves) contra o Lote BI (placebo).
Lote 2: A2 (foi administrado o feromônio que acalma as aves) contra o Lote B2 (placebo). O feromônio que acalma as aves, que foi administrado, compreendeu 13% de ácido láurico (% em peso / % em peso), 40% de ácido palmítico (% em peso / % em peso),54% de ácido linoléico (% em peso / % em peso) e 13% de ácido oléico (% em peso / % em peso).
Uma solução do feromônio que acalma aves titulada a 2% foi a dosagem usada neste Exemplo. Esta dosagem foi difundida com um difusor eletrônico em uma taxa de 1/ 50 m2.
Ganho de peso, níveis de cortisol, ganho de peso e níveis de indicação de consumo e níveis de T4 foram medidos usando testes convencionais para níveis de cortisol e de T4 após 40 dias após o final do experimento.
Foi ainda observado que a taxa de mortalidade média foi mais elevada em um dos dois alojamentos de galinhas em relação ao outro. Esta observação significa que existe um possível “cruzamento” quando o placebo e o tratamento são testados em apenas um alojamento.
Os níveis de cortisol, os níveis de T4, e o peso foram testados cerca de 40 dias após o teste inicial.
Os resultados deste exemplo são os que se seguem. O nível de cortisol de BI foi significativamente elevado em comparação com Al (Figura 7; p= 0,04). Isto indicou que o estado médio do estresse foi mais pronunciado nos pássaros que não foram tratados com o feromônio que acalma aves. É observada uma diferença significativa a favor do lote B2, em comparação com A2 (Figura 7 = 0,002). Não houve uma diferença significativa entre os lotes Al e BI no nível de T4. B2 teve um nível significativamente mais alto do que A2 com relação ao nível de T4 (Figura 8; p= 0,006), Para o lote 1, não houve diferença de peso significativa entre o peso vivo (PV) ou o peso morto (PC). Os animais no lote A2 estavam significaiivamente mais pesados do que aqueles em B2 (Figura 9; p = 0,03 e p = 0,06, respectivamente, para o peso vivo e o peso morto). O ganho de peso e a indicação dos níveis de consumo foram equivalentes (1,9 para a indicação de consumo) para os 4 lotes diferentes.
Os resultados foram também interpretados com relação aos efeitos de diferentes alojamentos das galinhas, que foram testados. São encontrados indivíduos no mesmo alojamento com um nível de cortisol mais elevado (Figura 10; p = 0,003). Não há diferença entre A e B. Não houve diferença significativa entre A e B ou no alojamento 1 ou 2. Não houve diferença significativa entre A e B, seja no peso vivo ou no peso morto.
Portanto, as conclusões extraídas foram de que não houve influência com relação ao alojamnto das galinhas neste exemplo.
Exemplo 5 Este exemplo testa a influência do feromônio que acalma aves sobre as galinhas em postura. As técnica de criação para as galinhas em postura são freqüentemente estressantes e causam uma perda de ovos que foram postos e também disputas entre as galinhas individuais, Foram executados vários testes neste exemplo incluindo técnicas zoológicas, marcadores biológicos e sensibilidade e ácaros nas galinhas em postura com ou sem a administração de um feromônio que acalma aves. A seguir, é apresentado um calendário de eventos específicos que ocorreram neste exemplo: Nascimento dos pintos: maio do ano 1 Ninhada inicial: 4 meses após o nascimento (ano 1) Início de bicada de penas: 8 meses após o nascimento (ano 2) Tratamento quanto a ácaros (Dermanyssus ou Omithonyssus): 9 meses após o nascimento (ano 2) Amostragem quanto a ácaros: 10 meses após o nascimento (ano 2) Amostragem de sangue: 10 meses após o nascimento (ano 2) e 11 meses após o nascimento (ano 2) Colocação dos difusores com o feromônio que acalma aves: 10 meses após o nascimento (ano 2) e 11 meses após o nascimento (ano 2) Colocação de óculos de vidro nas galinhas: 10 meses após o nascimento (ano 2) A tecnologia zoológica foi registrada ao longo de todo o calendário de eventos acima descrito usando os seguintes critérios técnicos: a taxa de galinhas fora de seus ninhos; a taxa de galinhas em massa; a taxa de mortalidade; e o consumo alimentar para aquelas galinhas que haviam recebido o feromônio que acalma aves e para aquelas que não haviam recebido o feromônio que acalma aves (controle). Não houve diferenças significativas entre os dois grupos. Os resultados foram equivalentes com ou sem o feromônio que acalma aves. Os óculos de vidro não tiveram qualquer efeito sobre as galinhas; as galinhas fora de seus ninhos eram menos numerosas e houve um número menor de ovos desclassificados.
Foi também testado quanto a ácaros durante o curso deste exemplo. No dia 0, os primeiros difusores do feromônio que acalma aves foram colocados e a amostragem de ácaros foi efetuada. Para as 12 amostras que foram tomadas,5 amostras permitiram a identificação da espécie de ácaros na criação; 3 foram utilizadas e colocadas em uma cultura de ácaros e recuperadas no final do experimento interno; e 4 serviram para testar a sensibilidade dos parasitas aos ácaros usados.
Nas 5 amostras efetuadas, 117 amostras de parasitas foram identificadas. 76 % (n= 86) foram identificadas como Dermanyssus gallinae (ácaros de galinha) e 24% (n= 28) eram Omithonyssus sylviarum (ácaros de aves setentrionais). A quantidade de ácaros encontrados nas galinhas sustenta uma infestação importante para o criador, com uma amostra interna de 2, foi estimada uma infestação entre 5 e 6 para um nível de 8. (Vide, Devaney and Agutin (1987), que descreve a escala do número de Ominthonyssus sobre a pele, justo sob a asa). As duas últimas infestações não puderam ser obtidas sob as condições experimentais usadas. É observado que as amostras tomadas foram efetuadas apenas dois dias após um tratamento quanto a ácaros. O criador também sabia que havia uma forte infestação de ácaros e especialmente de Dermanyssus gallinae (DG). As amostras tomadas apresentaram uma infestação global geral fina de 5/8. Esta taxa resultou em uma amostra de um tamanho “profissional” (1), que é considerada de 30 DG/cm2 para uma taxa máxima de 8. A taxa de 8/8 representa um estágio de exsanguinação com uma taxa de mortalidade próxima a 100%. 5/8 representa um nível de 3 a 5 DG/ cm2 de infestação, que é um estágio intermediário, no qual o tratamento é obrigatório para evitar um aumento na infestação de ácaros. Não foram encontrados ácaros de poeira, o que significa que o tratamento realizado foi eficiente para os ácaros de poeira. No entanto, houve uma grande presença de ácaros parasíticos justo após o tratamento contra ácaros, o que significa que os ácaros parasíticos muito provavelmente perderam a sua sensibilidade ao tratamento contra ácaros que foi usado, que foi testado abaixo. O teste quanto á sensibilidade dos ácaros foi conduzido a seguir. Este teste foi executado na população de ácaros com um sistema in vitro que verifica a sensibilidade do tratamento contra ácaros utilizado (Carbamato), Os parasitas foram assim expostos a uma variedade de concentrações de acaricida. A dosagem foi determinada pelo valor da bula de recomendação de dosagem do produto. Neste dosagem, não é obtido o LD 50 (50% de ácaros expostos durante um período de 24 horas são mortos, nem o LD 100 (100% de ácaros são exterminados em um período de 24 horas). O LD 50 foi obtido com uma dose que era 8 vezes superior àquela recomendada. O LD 100 não foi obtido com uma dose que era 32 vezes superior àquela prescrita.
Sob condições experimentais, 2 lotes (TI e T2) foram submetidos a teste, O lote T12 correspondeu a um teste universal, que não é autorizado cm criação, porque foi usado Ivcrmcctina. O lote 2 correspondeu a um teste efetuado com Amitraz. Para TI e T2 foi obtido um LD de 100, com as doses prescritas nas bulas dos produtos, em circunstâncias correspondendo às condições de criação. Os resultados são apresentados na Tabela 3 abaixo: pd: dose prescrita Foi assim recomendado que o material ativo para o tratamento contra ácaros fosse trocado, devido à sensibilidade, como acima mostrado.
Os testes de sangue foram executados como indicado no calendário de ventos acima. Os diferentes marcadores de estresse foram observados através da análise efetuada com uma amostra de sangue. É observada urna elevação com relação a heterófilos/ linfócitos (5) e também a A média fisiológica normal para um hematócrito é de 55%. Como pode ser observado a partir dos resultados acima, existe uma diminuição nos hematócritos, o que significa que existe um decréscimo nas células vermelhas do sangue no animal. Este decréscimo indica que os animais foram prejudicados de algum modo. Esta perda de sangue se deve provavelmente à bicada de penas na área da cauda, o que causa uma má escarificação e pode conduzir a manchas de sangue nos ovos. A análise de células brancas do sangue demonstrou uma forte presença de granulócitos, o que está correlacionado a uma infestação de parasitas. variação em certos hormônios, tais como T4 circulante, cortisol e prolactina.
Foi usada a seguinte metodologia. O sangue foi extraído a partir dos animais nas datas indicadas na tabela 4 abaixo em dois diferentes tipos de tubos; um sem conservante (tampa vermelha) e um com um conservante EDTA (tampa azul).
Foram realizados os seguintes testes fisiológicos; hematócrito, contagens de células vermelhas e heterófilos/ linfócitos. O soro, após a coleta, foi conservado a -20°C até que todas as amostras fossem coletadas. Os últimos foram enviados a um laboratório clínico para a análise quanto a taxas de hormônios de estresse. O hematócrito foi extraído em um tubo contendo o conservante EDTA e os resutlados obtidos são expostos na Tabela 5.
Como pode sei observado a partir dos resultados acima, este estudo mostra um valor médio Of de 2, 49 para o primeiro conjunto de amostras de sangue extraídas e uma queda de 60% para a segunda e terceira amostras de sangue que foram extraídas. A análise estatística indicada na Tabela 6 acima mostra uma diferença entre as primeiras amostras extraídas e as segundas amostras extraídas e entre as primeiras amostras extraídas e as terceiras amostras extraídas, mas não uma diferença estatística entre a segunda e a terceira amostras que foram extraídas. A média para os criadores é de 0,42 + 0, 13(3).
Os resultados são apresentados graficamente na Figura 11.
Conclusões O feromônio que acalma as aves diminui o estresse nas aves. No entanto, certas condições precisam ser mantidas, de tal modo que ele funcione eficaz mente. O feromônio que acalma aves deve ser usado em pintos j ove tis í medi atamente após a sua saída do ovo.
As observações aqui mostradas ilustram que, mesmo com um estresse importante, tal como o parasitismo intensivo por ácaros de galinha, o feromônio é capaz de diminuir o estresse induzido. Portanto, a composição de feromônio da presente invenção é eficaz mesmo quando a causa do estresse persiste.
Exemplo 6 Animais e condições de criação Foi efetuada uma contagem de leucócitos nas amostras de sangue coletadas e os resultados foram apresentados usando uma razão de heterófilos / lintocitos. Os resultados estão apresentados na Tabela 4 abaixo: Dois prédios iguais de 1200 m2 cada qual foram utilizados para este exemplo. Em cada prédio, 24.000 galinhas “ROSS 308”, divididas em 2/3 de machos - 1/3 de fêmeas, foram criadas. Os galos e galinhas foram separadas devido a razões práticas. Os galos foram alojadas por um tempo mais longo do que as galinhas fêmeas, pois os machos ganham mais peso nos últimos 10 dias de produção antes do abate e, deste modo, é economicamente mais benéfico para o aviculturista alojar os galos durante um período de tempo mais longo do que as galinhas fêmeas. No dia da saída das galinhas fêmeas, os machos irão ocupar 100% da área, e estarão, deste modo, livres para vagar pelo galinheiro. Os machos geralmente são vendidos esvaziados, diferentemente das fêmeas, que são vendidas em sua totalidade. Em cada um dos prédios, as condições de criações foram mantidas estritamente de um modo similar; isto é, o solo no galinheiro foi constituído de aparas de madeira (conhecidas como palha) distribuídas ao longo de ambos os prédios, as galinhas foram alimentadas à vontade (água e ração) e o programa de luz foi o mesmo em ambos os prédios. Luz diurna natural foi usada ao longo do dia e luz artificial foi usada à noite. Seis horas antes da saída para o abatedouro, a alimentação sólidas das galinhas foi interrompida.
Tratamento P010, um feromônio calmante de aves que compreende uma mistura de 13% de éster metílico de ácido laurüico (% em peso / % em peso), 40% de éster metílico de ácido palmítico (% em peso / % em peso),54,0% de éster metílico de ácido linoléico (% em peso / % em peso) e 13,0 % de éster metílico de ácido oléico (% em peso / % em peso) foi fabricado como um bloco de liberação lenta através de métodos conhecidos na técnica, que foi protegido por um envoltório plástico perfurado com orifícios. O tratamento consistiu de uma difusão passiva de P010 na atmosfera local.
Cada bloco pesava 150 g e 18 blocos contendo uma concentração de 2% do feromônio que acalma aves acima foram colocados no prédio tratado (ou POIO ou um placebo). O tratamento foi iniciado no dia anterior à chegada das galinhas (registrado como DO ou Dia 0). No dia 29, (D29), os blocos contendo P010 foram substituídos por novos. Neste ensaio, o prédio 01 lbi tratado com o placebo e o prédio 02 com P010. O prédio tratado será referido a seguir como “P010” e o outro como “controle” (placebo). O ensaio foi executado em um modo duplo cego.
Transporte para o Abatedouro O transporte das galinhas para o abatedouro foi efetuado em pequenos caminhões e as galinhas foram transportadas à meia-noite em recipientes com gavetas contendo 50 kg de animais em peso vivo cada uma. A saída das galinhas para o abatedouro ocorreu à meia noite no mesmo dia para cada prédio; isto é, no Dia 52 para os galos e no Dia 40 para as galinhas fêmeas. Estes dados são comparáveis aos resultados National (N° 1) relatado em 1TAVI, (2001) Les Syntheses economiques - performances techniques et couts de production (The Economic Synthesis - performance techniques et couts de production), que são Dia 49 para galos contra Dia 39 para galinhas fêmeas.
Dados Coletados Dados coletados antes do transporte das galinhas para o abatedouro Testes fisiológicos foram realizados em amostras de sangue tomadas a partir das galinhas do dia de saída para o abatedouro. Um total de 200 destes testes foram realizados (50 machos e 50 fêmeas foram testados para cada prédio). O sangue foi extraído a partir das galinhas em. tubos contendo EDTA e em tubos regulares não contendo quaisquer conservantes químicos. O sangue foi coletado na veia da asa das galinhas. A razão de hematócrito/ linfócito (H/L), hematócritos, nível de glicose e nível de corticosterona foram medidos. H/L foi calculado usando células Mallacez, sobre as quais foram espalhados 2 x 500 μΐ sobre 50 quadrados (1 cm3). O cálculo foi computado usado a técnica de cruzamento. A população de linfócitos totais foi então contada e a razão foi computada. O hematócrito foi medido após a centrifugação a 9000 ml s‘2 (3.500 rpm durante 2 minutos) e expresso como a razão de (sangue total)/ (fase celular). O nível de glicose foi medido usando um Glucotrend®.
Um teste comportamental (BT) foi também executado no dia em que as amostras de sangue foram tomadas. O teste comportamental (BT) que foi usado é um derivado do teste de Imobilidade Tônica (TI) que é indicativo da reação de das galinhas quando submetidas a uma situação que simula uma agressão predatória. O teste comportamental foi efetuado como se segue: Cada galinha foi capturada e colocada de dorso em um pequena maca durante no máximo 60 segundos. Uma vez que a galinha esteja de dorso, ela é suavemente restrita pela colocação do toque de uma mão em seu peito durante 10 segundos e então liberada, sendo olhada fixamente por outra pessoa, nos olhos, posicionada a 1 metro de distância, olho no olho.
Cada um dos resultados fisiológico e comportamental foi obtido usando as mesmas galinhas. Cada galinha foi capturada, o Teste Comportamental foi efetuado, e o sangue foi extraído para os testes de sangue acima descritos. Os níveis de glicose foram computados imediatamente após o Teste Comportamental.
Dados coletados no abatedouro No abatedouro, foram realizados vários testes referentes ao rendimento da galinha. Em primeiro lugar, o Peso Vivo (LW), o Peso Morto (DW), Razão de Alimento para Ganho (FGR) e índice de Desepenho (PI) foram medidos. O Peso Vivo (LW) foi obtido pela adição do peso total das galinhas dividido pelo número de galinhas que foram entregues pelo criador.
As medições foram registradas separadamente para os galos e galinhas fêmeas. O Peso Morto (DW) foi a medição tomada do peso de cada galinha individualmente. O peso foi então classificado em classes de 100 g. A Razão de Alimentação para Ganho (FDG) foi a medição tomada para a quantidade total de alimento consumido pelas galinhas em cada prédio, para ambos os galos e galinhas. O índice de Desempenho (PI) é o principal índice que os criadores levam em consideração para avaliar o desempenho. O PI foi calculado como se segue: (Ganho de Peso Diário)/ Razão de Alimentação pada ganho (FGR).
Os resultados de galinhas classificadas abaixo do normal, que foram sufocadas, arranhadas e/ou marcadas em suas pernas foi também levado em conta na análise. Este critério foi calculado em percentual das galinhas fornecidas totais ao abatedouro, excluindo o percentual de Peso Morto (DW) para a classificação abaixo do normal geral.
Um procedimento denominado “Rendimento de Tabela” (TY) foi também executado em galinhas padrão (n= 10 por sexo, para a mesma classe de Peso Morto (DW): 1, 9 kg para machos e 1,2 kg para fêmeas). O Procedimento de Rendimento de Tabela avalia o rendimento do animal, isto é: gordura, filé, pernas (carne), razão de Pele/ Peso Vivo e Rendimento Global: (Pele + Perna)/ Peso Vivo.
Finalmente, os dados referentes à lucratividade foram sumariados no teste de eficiência econômica de P010 (Gross Margin ou GM).
Análise Estatística A análise estatística foi efetuada usando o software Statview F- 4. 5®. Os dados foram analisados por comparação de médias e variações usando o teste t e o teste U de Mann-Whitney, quando apropriado. Alguns dados não puderam ser estatisticamente analisados, porque a falta de dados e portanto a significação estatística não foi calculada. Contudo, alguns dos resultados não analisados estatisticamente foram apresentados devido à sua relação com outros dados. Médias dentro de uma fileira com sobrescrito diferente diferem significativamente (p< 0,0001, teste t).
Valores P: p* < 0,05, **p<0,01,***p< 0,001 (teste t)/ up< 0,05, ““ p< 0,01,uuu p < 0,001 (Teste U) Análise dos Resultados A diferença entre o controle e P010 foi significativa para o Peso Morto (DW) para ambas os galos e fêmeas. As galinhas de controle eram mais leves, comparadas às galinhas tratadas com P010 (p < 0,0001, (vide, Tabela 7, acima). O Peso Vivo Final (LW) foi mais baixo no grupo de controle comparado a P010 para ambas os galos e fêmea (uma média de 2,84 kg (controle) contra 3, 08 kg (tratado) e 1,60 (controle) contra 1,69 kg (tratado), respectivamente). Os galos P010 eram mais pesadas, comparadas àquelas encontras nos resultados National (N° 1) (2,85 kg). A Razão de Alimento para ganho (FGR) era ligeiramente mais alta no prédio P010 (1,96 (tratada) contra 1,90 (controle) respectivamente, o que representa a média National como descrito em Le Douarin P. Enquete Technico economique. Reusssir Aviculture 83: 24-24 (2003)). No entanto, o índice de Desempenho (PI) foi mais alto para as galinhas tratadas com P010, comparado às galinhas de controle (2,49 (tratadas) contra 2,40 (controle), o que significa que o Ganho de Peso Diário (DWG) foi mais alto para as galinhas P010.
Embora alguns destes dados não tenham sido estatisticamente comparados, eles são úteis para a compreensão das diferenças em Peso Morto (DW).O valor dos resultados National (N° 2) para o Peso Vii vo (LW) é de 2,35 kg, como exposto no Le Douarin P (2003), supra. Os resultados aqui obtidos para o Peso Vivo das galinhas foi de 2,58 kg para P010 e 2,20 kg para as galinhas de controle. Observa-se que o controle está ligeiramente abaixo do valor de resultados National 2, o que não é o caso para P010. Esta observação pode ser considerada para a diferença mostrada em Peso Morto (DW), pois pode ser considerado que existe uma correlação entre o Peso Morto (DW) e o Peso Vivo (LW) (Feddes J.J.R., E. J. Emmanuel, M. J. Zuidhof, Poult. Sei. 81: 774-779 (2002).
Além disso, é lógico que um Ganho de Peso Diário mais elevado (DWG) conduz a um peso final aumentado, sem considerar a Razão de Alimentação para Ganho (FGR). Isto fornece uma justificativa para a maior importância dada ao índice de Desempenho (PI).
Os galos P010 classificados abaixo do normal (vide, Tabela 8, acima) representaram 0,78% do Peso Morto (DW) comparado a 0,57% para as galinhas de controle classificadas abaixo do normal (p < 0,01). Isto é devido ao nível mais alto de pernas marcadas para as galinhas tratadas com P010 (47% contra 12%, p < 0,001). No entanto, o percentual de ambas as galinhas sufocadas e arranhadas é mais baixo nas galinhas tratadas com P010, conforme evidenciado pelos valores de 1,56% (macho tratado) contra 1,11% dos controles machos para a sufocação e 8% (machos tratados) contra 22% (controle macho) (p< 0,001) para galinhas arranhadas.
Os resultados referentes às galinhas fêmeas são comparáveis àqueles dos galos (vide, Tabela 9, acima). Os resultados demonstraram um número significativamente mais elevado de pernas marcadas para galinhas fêmeas tratadas com P010 (8% (tratado) contra 4% (controle) p < 0,001), mas um número menor de galinhas fêmeas tratadas com P010 sufocadas (3,25 % (tratadas) contra 6,56% (controle)< p < 0,001) para o grupo P010.
Contudo, não foi encontrada diferença significativa para o Peso Morto (DW) classificado abaixo do normal para as galinhas neste ensaio. O total de galinhas tratadas com P010 classificadas abaixo do normal estava abaixo do valor de 0,96% dos resultados National 2, conforme exposto em Le Dourarin P (2003), supra.
Embora o ensaio tenha sido efetuado em prédios limpos, alguns abatedouros utilizam um sistema de classificação de pernas marcadas, que está correlacionado com palha muito úmida no piso do galinheiro (LEJAS I., La France Agricole (Fev. (Feb) 2003)). Por exemplo, o limite de 40% de pernas de galinhas marcadas é uma indicação de que a ninhada é afetada e 80% é uma indicação de que a ninhada está sobreafetada. Neste ensaio, galos P010 podem ser consideradas como afetadas. Isto está correlacionado com o fato de que as amostras de palha apresentaram um nível de umidade mais alto em um dos prédios, comparado ao controle.
Embora a quantidade total de água utilizada pelas galinhas para cada prédio não tenha sido subestimada, pode ser assumido que as galinhas tratadas com P010 consumiram mais água comparadas às galinhas de controle não-tratadas, o que está de acordo com a diferença na Razão de Alimentação para Ganho (FGR). Como os galos permaneceram mais tempo no galinheiro antes do abate, é lógico que elas estejam mais afetadas pela qualidade da palha. Finalmente, deve-se ao fato de que as galinhas classificadas abaixo do normal são representadas no cálculo de todos estes critérios que os resultados parecem ser mais baixos, mesmo se todos os outros critérios (exceto as pernas marcadas) estiverem bons).
No que se refere ao Rendimento da Tabela (TY), nenhum dos resultados observados foram estatisticamente diferentes para ambas as galinhas fêmeas e os galos. No entanto, foi observado que as galinhas P010 pareceram ter mais carne comparadas às galinhas de controle.
Os dois grupos observados apresentaram diferenças entre os sexos quanto aos resultados fisiológicos (vide Tabela 4 e Tabela 5, acima). De fato, a razão H/L foi significativamente mais baixa para as galinhas P010 (p < 0,01) e é o único parâmetro que apresentou uma diferença para as galinhas fêmeas entre os grupos. No que se refere à galos, o nível de corticosterona foi mais elevado para o controle (p < 0,05), mas o nível de glicose foi mais baixo (Ρ < 0,01) para este mesmo grupo de controle. É interessante observar que estes resultados tendem a mostrar que os galos possuem um nível de estresse que é diferente entre os grupos. O caso é menor para as galinhas fêmeas, exceto no que se refere à razão H/L, que tende a representar um estresse social (Campo J.L., Davila S. G, Poult. Sei. 81: 1637- 1639 (2002). Novamente, o fato de que a saída dos machos ocorre 12 dias após a das fêmeas pode ser uma explicação.
No que se refere ao hematócrito, os grupos são comparáveis, e os dados estão de acordo com a literatura (Fischer T. M Blood Cells. 4: 453-461 (1978)). Os dados a partir dos resultados fisiológicos poderíam ser observados em paralelo com aqueles da tabela de Rendimento (TY). De fato, as aves expostas a um agente causador de estresse tendem a armazenar gordura e, reste modo, são mais finas; isto é elas possuem menos carne (Leclerd B., Guy, G. Rideaux, F. Reprod. Nutr. Dev., 28: 931-937 (1988)). A elevação dos níveis de corticosterona parede diminuir a capacidade do metabolismo de proteína (Grizard J., et al., Nutr. Research Ver. 8: 67- 91 (1995)). As contagens de glicose das aves machos parecem ser ambíguas, mesmo se elas forem similares àquelas na literatura (Padilla J. F.C. Influence od heat on energy metabolism and ists regulation on broilers. French Thesis for PhD. Tours University, 205 páginas, 1995). De fato, pode ser argumentado que as galinhas P010 eram “muito reativas”, o que podería também explicar as diferenças em gordura, pois existe uma captura mais baixa de glicose pelos músculos, o que tende a conduzir a uma taxa de armazenamento de lipídeos mais elevada (Bray G. A., York, D. A. Physiol. Reviews. 59: 719-809 (1979). Deste modo, pode ser concluído que o estresse conduz a uma baixa qualidade de carcaça devido a uma elevação da produção de ácido láctico que gera uma carne de baixo pH (Alvarado C. Z., Sams A. R. Poult. Sei. 81: 1365- 1370 (2002)). Não foram demonstradas diferenças entre grupos ou sexos usando o Teste Comportamental (BT). Este teste forneceu uma média de 39,6 segundos para aves machos e 41,2 segundos para aves fêmeas. Comparado a um teste de referência (Riesdra B., Groothuis, N. Appl. Anim. Behav. Sei. 77: 127- 138 (2002)), podería ser argumentado que este teste não foi realizado durante um período de tempo suficientemente longo para que fosse observada uma diferença real entre as aves. O Teste Comportamental (BT) foi efetuado neste ensaio, de tal modo que um resultado rápido pudesse ser obtido pelo criador de modo a que fosse obtido o nível de estresse da ninhada.
Finalmente, foi computado o Gross Margin (GM) para cada prédio e foi encontrado que a margem galinha/ alimento era mais elevada para o prédio P010 em 4,8%.
Em conclusão, o produto P010 reduz o estresse em galinhas e é economicamente benéfico para o aviculturísta, conforme evidenciado pelos resultados acima.
Embora a invenção tenha sido descrita em termos de várias modalidades preferidas, aquele versado na técnica irá apreciar que várias modificações, substituições, omissões e alterações podem ser introduzidas sem que haja afastamento do escopo da mesma. Deste modo, é intencionado que o escopo da presente invenção esteja limitado pelo escopo das reivindicações apenas, incluindo equivalentes das mesmas.

Claims (11)

1. Composição para o tratamento de estresse em uma ave, caracterizada pelo fato de que compreende uma composição de feromônio que acalma aves que compreende 12,3 a 13,7% (% em peso / % em peso) de ácido lãurico, 38,0 a 42,0 (% em peso / % em peso) de ácido palmítico, 32,3 a 35,7 (% em peso / % em peso) de ácido linoléico e 12,0 a 14,0 (% em peso / % em peso) de ácido oleico e/ou derivados dos mesmos e/ou isômeros dos mesmos, assim como misturas de um ou mais destes ácidos graxos com um ou mais de seus derivados e/ou um ou mais de seus isômeros e um excipiente sólido.
2. Composição de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que os referidos derivados são ésteres, sais, álcoois, cetonas, éteres, aldeídos, esteróis e amidas de ácido láurico, ácido palmítico, ácido linoléico e ácido oleico.
3. Composição de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato dc que compreende ainda uma carga não-tóxica
4. Composição de acordo com a reivindicação 3, caracterizada pelo fato de que a referida carga não-tóxica é selecionada do grupo de ácidos graxos, álcoois, aminas, esqualeno e glícerol.
5. Solução compreendendo uma composição de feromônio que acalma aves, caracterizada pelo fato de que a composição compreende 12,3 a 13,7% (% em peso / % em peso) de ácido láurico, 38,0 a 42,0 % (% em peso / % em peso) de ácido palmítico, 32,3 a 35,7 (% em peso / % em peso) de ácido linoléico e 12,0 a 14,0 (% em peso / % em peso) de ácido oleico e/ou derivados dos mesmos e/ou isômeros dos mesmos, assim como misturas de um ou mais destes ácidos graxos com um ou mais de seus derivados e/ou um ou mais de seus isômeros e um solvente não aquoso.
6. Solução de acordo com a reivindicação 5, caracterizada pelo fato de que o referido solvente é álcool e propileno glicol.
7. Solução de acordo com a reivindicação 6, caracterizada pelo fato de que a referida solução está sob a forma de uma pulverização, um xampu, um aerossol, está microencapsulada, está em uma matriz de liberação lenta, em um polímero, ou em um difusor.
8. Solução de acordo com a reivindicação 7, caracterizada pelo fato de que o referido difusor é um difusor elétrico.
9. Solução de acordo com a reivindicação 5, caracterizada pelo fato de que a referida solução e é administrada pela aplicação da referida solução às paredes, sobre as penas ou pele de uma ave, no ar ou em brinquedos.
10. Uso de uma composição de feromônio que acalma aves, que compreende 12,3 a 13,7 (% em peso / % em peso) de ácido láurico, 38,0 a 42,0 (% em peso I % cm peso) de ácido palmítico, 32,3 a 35,7 (% em peso / % em peso) de ácido linoleico e 12,0 a 14,0 (% em peso I % cm peso) de ácido oleico e/ou de derivados dos mesmos e/ou isômeros espaciais dos mesmos, assim como misturas de um ou mais destes ácidos graxos com um ou mais de seus derivados e/ou um ou mais de seus isômeros, caracterizado pelo fato de ser para a manufatura de um medicamento para tratar estresse em uma ave.
11. Uso de acordo com a reivindicação 10, caracterizado pelo fato de que a referida composição está em solução e é administrada pela aplicação da referida solução às paredes, sobre as penas ou pele de uma ave, no ar ou em brinquedos.
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