BR112021022596B1 - Métodos para aumentar a taxa de germinação de um esporo de fungo, para controlar um patógeno de planta, para aumentar a eficácia de um agente biológico, para fabricar uma composição e uso - Google Patents
Métodos para aumentar a taxa de germinação de um esporo de fungo, para controlar um patógeno de planta, para aumentar a eficácia de um agente biológico, para fabricar uma composição e uso Download PDFInfo
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Classifications
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- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
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- A01N37/44—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic compounds containing a carbon atom having three bonds to hetero atoms with at the most two bonds to halogen, e.g. carboxylic acids containing at least one carboxylic group or a thio analogue, or a derivative thereof, and a nitrogen atom attached to the same carbon skeleton by a single or double bond, this nitrogen atom not being a member of a derivative or of a thio analogue of a carboxylic group, e.g. amino-carboxylic acids
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Abstract
MÉTODOS PARA AUMENTAR A TAXA DE GERMINAÇÃO DE UM ESPORO MICROBIANO, PARA CONTROLAR UM PATÓGENO DE PLANTA, PARA AUMENTAR A EFICÁCIA DE UM AGENTE BIOLÓGICO, PARA FABRICAR UMA COMPOSIÇÃO, COMPOSIÇÃO E USO. A presente invenção se refere a composições e métodos para melhorar a capacidade de uma população de agentes biológicos ou agentes de controle biológico para competir e sobreviver em um campo. Ao melhorar a população de agentes biológicos, a população de agentes é capaz de crescer, competir com outras cepas microbianas e fungos, e fornecer uma maior proteção contra patógenos.
Description
[001] A presente invenção se refere a composições e métodos para melhorar a capacidade de uma população de agentes biológicos ou agentes de controle biológico para competir e sobreviver em um campo.
[002] O uso de organismos naturais como bactérias, vírus e fungos para o controle de pragas e doenças é de grande interesse. Em particular, os fungos são organismos com grande potencial como agentes de controle biológico por possuírem uma capacidade reprodutiva extremamente alta, um curto tempo de geração, e às vezes são muito específicos em sua ação, atacando apenas o hospedeiro com o qual co-evoluíram. Além disso, os fungos apresentam fases saprofíticas nas quais podem sobreviver sem o hospedeiro e permanecer no ambiente até que o hospedeiro apareça novamente.
[003] Soluções biológicas têm sido usadas, entre outras coisas, para promover o crescimento das plantas, combater os patógenos das plantas, reduzir o uso de produtos químicos para fertilização do solo e controle de pragas e para aumentar a disponibilidade e absorção de nutrientes pela planta. É reconhecido que o uso desses agentes químicos sintéticos está associado a problemas como efeitos não direcionados, poluição ambiental, problemas de saúde humana, além dos elevados custos econômicos envolvidos. No entanto, tais agentes químicos continuam a ser amplamente utilizados devido à sua forte atividade contra doenças fúngicas importantes e disponibilidade limitada de alternativas ambientalmente mais seguras e eficazes. Com a crescente consciência dos efeitos nocivos de muitos pesticidas químicos sintéticos no meio ambiente como um todo, houve uma mudança na atenção para a pesquisa e o desenvolvimento de métodos mais ecológicos de controle de pragas e doenças. Infelizmente, as soluções biológicas às vezes podem ser limitadas, por exemplo, em sua capacidade de colonizar o tecido da planta ou sobreviver em condições de campo. Portanto, os esforços para aplicar certos organismos biológicos vivos foram limitados pela capacidade insuficiente desses microrganismos biológicos para germinar em substratos de fonte de carbono mínimo (por exemplo, um tecido de planta após a aplicação de um organismo de controle biológico). Ao permanecer no estado de esporo dormente, esses microrganismos biológicos são incapazes de realizar seus modos de ação benéficos. Uma maior germinação de tais esporos ou conídios permitiria aos organismos recuperar a atividade metabólica e, assim, aumentar a eficácia dessas soluções biológicas pela colonização do tecido vegetal. Essa maior taxa de germinação também pode prevenir a inativação ou redução por fatores abióticos. Portanto, há uma necessidade no estado da técnica de desenvolver uma solução alternativa ambientalmente segura e eficaz para aumentar a eficácia global de um agente de controle biológico. Esta continua a ser uma necessidade de longa data na indústria agrícola em comparação com os produtos químicos perigosos atualmente em uso.
[004] A presente invenção é útil para aumentar a competitividade de agentes biológicos ou agentes de controle biológico, particularmente em relação a outros agentes microbianos. Portanto, a proteção contra agentes causadores de doenças ou pragas (por exemplo, pragas de insetos ou ácaros) é aumentada.
[005] A presente invenção se refere a combinações, composições e métodos para melhorar a capacidade de uma população de agentes biológicos ou agentes de controle biológico para competir e sobreviver em um campo. Ao melhorar a população de agentes biológicos ou agentes de controle biológico, a população de agentes é capaz de crescer, competir com outras cepas microbianas e fungos, e fornecer uma maior proteção para patógenos ou pragas, tal como, por exemplo, fitopatógenos ou insetos.
[006] A presente invenção também se refere a uma composição compreendendo um ou mais microrganismos e germinantes, bem como métodos compreendendo a aplicação da composição para promover a germinação de esporos mais rápida de um ou mais microrganismos em um substrato ou hospedeiro não ideal para o crescimento microbiano e, assim, fornecer uma maior proteção contra patógenos ou pragas, tal como, por exemplo, fitopatógenos ou insetos.
[007] Assim, a presente invenção fornece um método para aumentar a taxa de germinação de um esporo microbiano compreendendo o contato com um hospedeiro: (a) o um ou mais esporos microbianos de um agente biológico ou um agente de controle biológico e (b) um ou mais germinantes, em que o referido um ou mais germinantes compreendem glicina betaína, um extrato de levedura, um derivado de levedura ou uma combinação dos mesmos. Após o contato de um ou mais esporos microbianos e de um ou mais germinantes com o hospedeiro, o um ou mais esporos microbianos do agente biológico ou do agente de controle biológico podem exibir uma germinação aumentada de esporos em comparação com o contato de um ou mais esporos microbianos com o hospedeiro sem o um ou mais germinantes. O hospedeiro pode ser o solo, uma praga, uma planta ou uma parte da planta, opcionalmente em que a parte da planta compreende ou consiste em uma semente.
[008] A presente invenção também fornece um método para controlar um patógeno de planta ou uma praga ou proteger uma planta de um patógeno de planta, uma praga ou melhorar o crescimento, desenvolvimento e/ou produtividade de uma planta, o referido método caracterizado por compreender contatar o solo, uma praga, uma planta ou uma parte da planta com (a) o um ou mais esporos microbianos de um agente biológico ou um agente de controle biológico e (b) um ou mais germinantes, em que os referidos um ou mais germinantes compreendem glicina betaína, um extrato de levedura, um derivado de levedura ou uma combinação dos mesmos. A presente invenção fornece ainda um método para aumentar a eficácia de um agente biológico ou um agente de controle biológico, o referido método caracterizado por compreender contatar o solo, uma praga, uma planta ou uma parte da planta com (a) o um ou mais esporos microbianos de um agente biológico ou agente de controle biológico e (b) um ou mais germinantes, em que os referidos um ou mais germinantes compreendem glicina betaína, um extrato de levedura, um derivado de levedura ou uma combinação dos mesmos. Após o contato de um ou mais esporos microbianos e um ou mais germinantes com o solo, a praga, a planta ou a parte da planta, o um ou mais esporos microbianos do agente de controle biológico podem exibir uma eficácia melhorada na inibição de patógenos de plantas ou exibir um controle de pragas aumentado em comparação com o contato de um ou mais esporos microbianos com o hospedeiro sem um ou mais germinantes ou um ou mais esporos microbianos do agente biológico exibe eficácia melhorada na melhoria do crescimento, desenvolvimento e/ou produtividade da planta. A melhoria do crescimento, desenvolvimento e/ou produtividade de uma planta pode compreender a melhoria de pelo menos um dos seguintes: o grau de micorrização, o enraizamento da planta, o crescimento da planta, a altura da planta, a floração da planta, a biomassa fresca da planta, a biomassa seca da planta, o rendimento da planta, a nutrição da planta, a resistência da planta a estresses abióticos e combinações dos mesmos. A parte da planta pode compreender ou consistir em uma semente. O contato pode compreender a aplicação foliar na planta ou na parte da planta do um ou mais esporos microbianos de um agente de controle biológico e um ou mais germinantes.
[009] Ainda é fornecido pela presente invenção um método para fabricar uma composição que compreende a mistura de (a) o um ou mais esporos microbianos de um agente biológico ou um agente de controle biológico e (b) um ou mais germinantes para obter uma composição compreendendo (a) um ou mais esporos microbianos de um agente biológico ou um agente de controle biológico e (b) um ou mais germinantes, em que o referido um ou mais germinantes compreende glicina betaína, um extrato de levedura, um derivado de levedura ou uma combinação dos mesmos. O referido método pode compreender ainda a mistura de (a) o um ou mais esporos microbianos de um agente biológico ou um agente de controle biológico e (b) um ou mais germinantes com (c) um veículo para obter uma composição compreendendo (a) um ou mais esporos de um agente biológico ou um agente de controle biológico, (b) um ou mais germinantes e (c) o veículo. A referida composição pode ser para controlar um patógeno de planta ou uma praga ou melhorar o crescimento, desenvolvimento e/ou produtividade de uma planta.
[010] A presente invenção fornece adicionalmente uma composição para controlar um patógeno de planta ou uma praga ou melhorar o crescimento, desenvolvimento e/ou produtividade de uma planta, em que a composição compreende (a) o um ou mais esporos microbianos de um agente biológico ou um agente de controle biológico e (b) um ou mais germinantes, em que os referidos um ou mais germinantes compreendem glicina betaína, um extrato de levedura, um derivado de levedura ou uma combinação dos mesmos. A composição pode compreender ainda (c) um veículo.
[011] A presente invenção fornece ainda o uso de uma quantidade eficaz de (a) o um ou mais esporos microbianos de um agente biológico ou um agente de controle biológico e (b) um ou mais germinantes para aumentar a taxa de germinação do um ou mais esporos microbianos de um agente biológico ou um agente de controle biológico, em que o referido um ou mais germinantes compreende glicina betaína, um extrato de levedura, um derivado de levedura ou uma combinação dos mesmos. O uso pode aumentar a taxa de germinação do um ou mais esporos microbianos de um agente biológico ou um agente de controle biológico, controlando assim um patógeno de planta ou praga ou melhorando o crescimento e o desenvolvimento e/ou produtividade de uma planta. O uso pode aumentar a taxa de germinação e atividade antimicrobiana ou atividade pesticida de um ou mais esporos microbianos do agente de controle biológico em comparação com a taxa de germinação e atividade antimicrobiana ou atividade pesticida de um ou mais esporos microbianos de um agente de controle biológico quando usado sem o um ou mais germinantes. O uso pode aumentar a taxa de germinação e a eficácia em melhorar o crescimento, desenvolvimento e/ou produtividade da planta do um ou mais esporos microbianos do agente biológico em comparação com a taxa de germinação e a eficácia em melhorar o crescimento, desenvolvimento e/ou produtividade da planta do um ou mais esporos microbianos do agente de controle biológico quando usado sem o um ou mais germinantes.
[012] Em qualquer um dos métodos, composições ou usos acima descritos da presente invenção, o um ou mais germinantes podem compreender glicina betaína. Em qualquer um dos métodos, composições ou usos acima descritos da presente invenção, o um ou mais germinantes podem compreender um extrato de levedura ou um derivado de levedura. De preferência, o um ou mais germinantes compreende um extrato de levedura. Em qualquer um dos métodos, composições ou usos acima descritos da presente invenção, o um ou mais germinantes podem compreender uma combinação de glicina betaína e um extrato de levedura. De preferência, o um ou mais germinantes compreendem uma combinação de glicina betaína e um extrato de levedura.
[013] Em qualquer um dos métodos, composições ou usos acima descritos da presente invenção, um ou mais esporos microbianos de um agente biológico ou um agente de controle biológico podem ser um ou mais esporos de fungos. Os um ou mais esporos de fungos podem ser um ou mais esporos de fungos pertencente ao gênero Chlonostachys, Aureobasidium, Ampelomyces, Beauveria, Metarhizium, Metschnikowia, Myrothecium, Nomuraea, Lecanicillium, Chaetomium, Cordyceps, Coniothyrium, Dactylella, Aspergillis, Paecilomyces, Pasteuria, Nomuraea, Pochonia, Rhizophagus, Serendipita, Trichoderma, Pisolithus, Isaria, Crytococcus ou Glomus, e combinações dos mesmos. Os um ou mais esporos de fungos podem ser um ou mais esporos de fungos de Chlonostachys rosea var. catenulatum, Beauveria bassiana, Cordyceps javanica, Trichoderma asperellum ou combinações dos mesmos. Os um ou mais esporos de fungos podem ser um ou mais esporos de fungos entomopatogênicos. Os um ou mais esporos de fungos entomopatogênicos podem ser um ou mais esporos de fungos entomopatogênicos de Beauveria bassiana, Cordyceps javanica ou combinações dos mesmos. Os um ou mais esporos de fungos podem ser um ou mais conídios ou clamidósporos. Os um ou mais esporos de fungos podem ser um ou mais esporos de fungos de Chlonostachys rosea var. catenulatum. De preferência, o Chlonostachys rosea var. catenulatum é C. rosea f. catenulate. De forma mais preferencial, a C. rosea f. catenulate é C. rosea f. catenulate de cepa J1446, que foi depositada em 19 de maio de 1994 de acordo com o Tratado de Budapeste sob o número de acesso DSM 9212 no DSM Leibniz Institute DSMZ - Coleção Alemã de Microrganismos e Culturas de Células (Inhoffenstr. 7B, D38124 Braunschweig, Alemanha).
[014] Em formas de realização específicas de qualquer um dos métodos, composições ou usos acima descritos da presente invenção: (i) o um ou mais esporos microbianos de um agente de controle biológico serem um ou mais esporos de C. rosea f. catenulata e o um ou mais germinantes compreende glicina betaína, opcionalmente a C. rosea f. catenulata é a cepa J1446; (ii) o um ou mais esporos microbianos de um agente de controle biológico serem um ou mais esporos de C. rosea f. catenulata e o um ou mais germinantes compreendem um extrato de levedura ou um derivado de levedura, de preferência o um ou mais germinantes compreendem um extrato de levedura e, opcionalmente o C. rosea f. catenulata é a cepa J1446; (iii) o um ou mais esporos microbianos de um agente de controle biológico serem um ou mais esporos de C. rosea f. catenulata e o um ou mais germinantes compreendem uma combinação de glicina betaína e um extrato de levedura ou um derivado de levedura, de preferência o um ou mais germinantes compreendem uma combinação de glicina betaína e um extrato de levedura e, opcionalmente C. rosea f. catenulata é a cepa J1446; (iv) o um ou mais esporos microbianos de um agente de controle biológico serem um ou mais esporos de Beauveria bassiana e um ou mais germinantes compreendem glicina betaína; (v) o um ou mais esporos microbianos de um agente de controle biológico serem um ou mais esporos de Beauveria bassiana e o um ou mais germinantes compreendem um extrato de levedura ou um derivado de levedura, de preferência o um ou mais germinantes compreendem um extrato de levedura; (vi) o um ou mais esporos microbianos de um agente de controle biológico serem um ou mais esporos de Beauveria bassiana e um ou mais germinantes compreendem uma combinação de glicina betaína e um extrato de levedura ou um derivado de levedura, de preferência um ou mais germinantes compreendem uma combinação de glicina betaína e um extrato de levedura; (vii) o um ou mais esporos microbianos de um agente de controle biológico serem um ou mais esporos de Cordyceps javanica e um ou mais germinantes compreendem glicina betaína; (viii) o um ou mais esporos microbianos de um agente de controle biológico serem um ou mais esporos de Cordyceps javanica e o um ou mais germinantes compreendem um extrato de levedura ou um derivado de levedura, de preferência o um ou mais germinantes compreendem um extrato de levedura; (ix) o um ou mais esporos microbianos de um agente de controle biológico serem um ou mais esporos de Cordyceps javanica e o um ou mais germinantes compreendem uma combinação de glicina betaína e um extrato de levedura ou um derivado de levedura, de preferência o um ou mais germinantes compreendem uma combinação de glicina betaína e um extrato de levedura; (x) o um ou mais esporos microbianos de um agente biológico serem um ou mais esporos de Trichoderma asperellum e um ou mais germinantes compreendem glicina betaína; (xi) o um ou mais esporos microbianos de um agente biológico serem um ou mais esporos de Trichoderma asperellum e o um ou mais germinantes compreendem um extrato de levedura ou um derivado de levedura, de preferência o um ou mais germinantes compreendem um extrato de levedura; ou (xii) o um ou mais esporos microbianos de um agente biológico serem um ou mais esporos de Trichoderma asperellum e o um ou mais germinantes compreendem uma combinação de glicina betaína e um extrato de levedura ou um derivado de levedura, de preferência o um ou mais germinantes compreendem uma combinação de glicina betaína e um extrato de levedura.
[015] Em qualquer um dos métodos, composições ou usos acima descritos da presente invenção, o patógeno de planta pode ser um fungo ou um oomicote. Em qualquer um dos métodos, composições ou usos acima descritos da presente invenção, o patógeno de planta pertence ao gênero Botrytis, Erysiphe, Rhizoctonia, Venturia, Didymella, Pythium, Phytophthora, Fusarium, Pseudoidium, Podosphaera e combinações dos mesmos. O patógeno de planta pode pertencer ao gênero Botrytis, de preferência em que o patógeno de planta é Botrytis cinerea. O patógeno de planta pode pertencer ao gênero Erysiphe, de preferência em que o patógeno de planta é Erysiphe necator. O patógeno de planta pode pertencer ao gênero Rhizoctonia, de preferência em que o patógeno de planta é Rhizoctonia solani, Rhizoctonia bataticola; Rhizoctonia fragariae; Rhizoctonia leguminicola ou Rhizoctonia oryzae, de preferência em que o patógeno de planta é Rhizoctonia solani. O patógeno de planta pode pertencer ao gênero Venturia, de preferência em que o patógeno de planta é Venturia inaequalis. O patógeno de planta pode pertencer ao gênero Pseudoidium, de forma preferencial em que o patógeno de planta é Pseudoidium neolycopersici. O patógeno de planta pertence ao gênero Podosphaera, de preferência em que o patógeno de planta é Podosphaera xanthii.
[016] Em qualquer um dos métodos, composições ou usos acima descritos da presente invenção, o patógeno de planta pode ser uma praga de inseto ou uma praga de ácaro. A praga de inseto pode pertencer à espécie Diuraphis noxia, Bemisia argentifolii, Bemisia tabaci, Trialeurodes vaporariorum, Aleyrodes lonicerae, Diaphorina citri, Euphyllura olivine, Aphis gossypii, Myzus persicae, Macrosiphum euphorbiae, Aulacorthum solani, Heliothrips haemorrhoidalis, Frankliniella occidentalis, Frankliniella schulzei, Thrips tabaci, Scirtothrips dorsalis, Hercinothrips femoralis, Dalbulus maidis, Phenacoccus solenopsis, Pseudococcus longispinus, Paracoccus marginatus, Mahanarva fimbriolata, Deois flavopicta, Zulia entreriana, Notozulia entreriana, Hypothenemus hampei, Hedypathes betulinus, Cosmopolites sordidus, Gonipterus scutellatus, Agriotes spp., Plutella xyllostella, Helicoverpa armigera, Otiorhyncus sultacus, Fungus gnats, Exomala orientalis, Sciaridae, Otiorhynchus sulcatus, Strophosoma melanogrammum, S. capitatum, Phyllopertha horticola, Amphimallon solstitialis, Daktulosphaira vitifoliae, Diabrotica virgifera, Spodoptera spp., Oligonychus ilicis, Planococcus citri, Anthonomus grandis, Brevicoryne brassicae ou Sphenophorus levis. A praga do ácaro pode pertencer à espécie Tetranychus urticae, Tetranychus cinnabarinus, Brevipalpus phoenicis, Panonychus ulmi, Byrobia rubrioculus, Aculus schlectendali, Aculops lycopersici, Ixodes scapularis ou Ixodes pacificus.
[017] Em qualquer um dos métodos, composições ou usos acima descritos da presente invenção, a praga pode pertencer à espécie Bemisia tabaci, Bemisia tabaci, Bemisia argentifolii, Trialeurodes vaporariorum, Hypothenemus hampei, Cosmopolites sordidus, Sphenophorus levis, Tetranychus urticae, Anthonomus grandis, Diaphorina citri, Helicoverpa armigera, Frankliniella occidentalis, Frankliniella schulzei, Thrips tabaci, Aphis gossypii, Myzus persicae, Oligonychus ilicis, Planococcus citri, Mahanarva fimbriolata, Agriotes spp., Diabrotica spp. Ou Dalbulus maidis. De preferência, a praga é Bemisia tabaci, de forma mais preferencial a praga é Bemisia tabaci (Gennadius) (Hemiptera: Aleyrodidae).
[018] Em qualquer um dos métodos, composições ou usos acima descritos da presente invenção, os referidos (a) o um ou mais esporos microbianos de um agente biológico ou um agente de controle biológico e (b) um ou mais germinantes podem ser usados simultaneamente, separadamente ou sequencialmente. De preferência, o referido (a) o um ou mais esporos microbianos de um agente biológico ou um agente de controle biológico e (b) um ou mais germinantes são usados simultaneamente.
[019] Em formas de realização específicas de qualquer um dos métodos ou usos acima descritos da presente invenção: (i) o um ou mais germinantes compreendem ou consistem em glicina betaína, e glicina betaína é aplicada no solo ou no hospedeiro, planta ou parte da planta em uma concentração de pelo menos 0,001%, 0,002%, 0,003%, 0,004%, 0,005%, 0,006%, 0,007%, 0,008%, 0,009%, 0,01%, 0,02%, 0,03%, 0,04%, 0,05%, 0,06%, 0,07%, 0,08%, 0,09%, 0,1%, 0,2%, 0,3%, 0,4%, 0,5%, 0,6%, 0,7%, 0,8%, 0,9%, 1%, 1,5%, 2%, 2,5%, 3%, 3,5%, 4%, 4,5% ou 5%; (ii) o um ou mais germinantes compreendem ou consistem em um extrato de levedura ou um derivado de levedura, e o extrato de levedura ou o derivado de levedura é aplicado no solo ou no hospedeiro, planta ou parte da planta a uma concentração de pelo menos 0,001%, 0,002%, 0,003%, 0,004%, 0,005%, 0,006%, 0,007%, 0,008%, 0,009%, 0,01%, 0,02%, 0,03%, 0,04%, 0,05%, 0,06%, 0,07%, 0,08%, 0,09%, 0,1%, 0,2%, 0,3%, 0,4%, 0,5%, 0,6%, 0,7%, 0,8%, 0,9%, 1%, 1,5%, 2%, 2,5%, 3%, 3,5%, 4%, 4,5% ou 5%; e/ou (iii) o um ou mais esporos microbianos de um agente biológico ou um agente de controle biológico são aplicados no solo ou no hospedeiro, planta ou parte da planta ou um ou mais esporos microbianos de um agente biológico ou um agente de controle biológico a uma concentração de pelo menos cerca de 1x106, cerca de 1x107, cerca de 1x108, cerca de 1x109, cerca de 1x1010, cerca de 1x1011 ou cerca de 1x1012 CFU/g.
[020] Em formas de realização específicas de qualquer uma das composições acima descritas da presente invenção: (i) o um ou mais germinantes compreendem ou consistem em glicina betaína, e a glicina betaína está presente na composição em uma concentração de pelo menos 0,001%, 0,002%, 0,003%, 0,004%, 0,005%, 0,006%, 0,007%, 0,008%, 0,009%, 0,01%, 0,02%, 0,03%, 0,04%, 0,05%, 0,06%, 0,07%, 0,08%, 0,09%, 0,1%, 0,2%, 0,3%, 0,4%, 0,5%, 0,6%, 0,7%, 0,8%, 0,9%, 1%, 1,5%, 2%, 2,5%, 3%, 3,5%, 4%, 4,5% ou 5%; (ii) o um ou mais germinantes compreendem ou consistem em um extrato de levedura ou um derivado de levedura, e o extrato de levedura ou o derivado de levedura está presente na composição em uma concentração de pelo menos cerca de 0,001%, 0,002%, 0,003%, 0,004%, 0,005%, 0,006%, 0,007%, 0,008%, 0,009%, 0,01%, 0,02%, 0,03%, 0,04%, 0,05%, 0,06%, 0,07%, 0,08%, 0,09%, 0,1%, 0,2%, 0,3%, 0,4%, 0,5%, 0,6%, 0,7%, 0,8%, 0,9%, 1%, 1,5%, 2%, 2,5%, 3%, 3,5%, 4%, 4,5% ou 5%; e/ou (iii) o um ou mais esporos microbianos de um agente biológico ou um agente de controle biológico estão presentes na composição a uma concentração de pelo menos cerca de 1x106, cerca de 1x107, cerca de 1x108, cerca de 1x109, cerca de 1x1010, cerca de 1x1011 ou cerca de 1x1012 CFU/g.
[021] Em qualquer um dos métodos, composições ou usos acima descritos da presente invenção, a planta ou parte da planta pode ser cereais, milho, arroz, gramíneas, cana-de-açúcar, plantas leguminosas, forrageiras, plantas ricas em óleo e proteínas, plantações de hortaliças, árvores frutíferas, plantações de viticultura, plantações urbanas ou plantações ornamentais.
[022] Em qualquer um dos métodos, composições ou usos acima descritos da presente invenção, o um ou mais germinantes podem compreender ou consistir em um extrato de levedura, e o extrato de levedura pode ser um extrato de levedura solúvel.
[023] Em qualquer um dos métodos, composições ou usos acima descritos da presente invenção, o um ou mais germinantes podem compreender ou consistir em um derivado de levedura. O derivado de levedura pode ser selecionado a partir de levedura inativa, paredes celulares de levedura e combinações das mesmas. As paredes celulares de levedura podem ser uma fração da parede celular de levedura, um produto de parede celular de levedura ou uma combinação dos mesmos.
[024] Tendo assim descrito genericamente a natureza da invenção, será feita agora referência aos desenhos anexos, mostrando a título de ilustração, uma forma de realização preferencial da mesma, e na qual:
[025] A Figura 1 mostra a taxa de germinação percentual de Prestop® 0,025% (esporos de C. rosea f. catenulata J1446) em combinação com glicina betaína (0,06% e 0,6%) ou extrato de levedura (0,04% e 0,2%) em discos de folhas ao longo de período de 24 horas em comparação com a aplicação única de Prestop® 0,025%.
[026] A Figura 2 mostra as medições de diâmetros de crescimento final de C. rosea f. catenulata J1446 de discos de folhas cortados após (a) 1 dia, (b) 2 dias (c) 3 dias ou (d) 6 dias após a inoculação na estufa e mais 6 dias de incubação nas placas. Prestop® foi aplicado na concentração de 0,025%, glicina betaína na concentração de 0,06% e 0,6% ou extrato de levedura na concentração de 0,04% e 0,2%.
[027] A Figura 3 mostra a eficácia da combinação de Prestop® (C. rosea f. catenulata J1446) a uma concentração de 0,003% e glicina betaína a uma concentração de 0,05% e 0,2% no controle de Botrytis cinerea em comparação com tratamentos apenas com Prestop® e apenas glicina betaína.
[028] A Figura 4 mostra a eficácia de uma taxa de dose mais baixa de Prestop® (C. rosea f. catenulata J1446) a uma concentração de 0,001% em combinação com a glicina betaína (a uma concentração de 0,06% ou 0,08%) no controle de Botrytis cinerea em comparação com a aplicação única de Pretop® e glicina betaína.
[029] A Figura 5 mostra a eficácia de Prestop® (C. rosea f. catenulata J1446) a uma concentração de 0,7 g/L em combinação com glicina betaína a uma concentração de 0,5 g/L no desenvolvimento de oídio em estacas de videira em comparação com a aplicação de água ou aplicação única de Prestop® e glicina betaína.
[030] A presente invenção permite o aumento da germinação de esporos de agentes biológicos ou agentes de controle biológico e, assim, melhorar a capacidade dos agentes biológicos ou agentes de controle biológico para competir e sobreviver em um ambiente de campo. Ao estimular ou melhorar a população de agentes biológicos ou agentes de controle biológico, a população é capaz de crescer, competir com outros organismos microbianos e fornecer uma melhor proteção para patógenos como, por exemplo, fitopatógenos ou pragas.
[031] Como a germinação de esporos constitui a primeira etapa do processo de colonização fúngica, uma ativação mais rápida e maior da germinação levará a uma maior colonização (e também a uma maior esporulação e produção de conídios) e estabelecimento de fungos benéficos.
[032] Como é conhecido no estado da técnica, os fungos podem ser usados como agentes biológicos ou agentes de controle biológico. De fato, os esporos são o principal mecanismo de inoculação desses fungos e, portanto, o aumento da germinação de esporos de agentes de controle biológico fúngico permite, entre outros, um maior ou mais rápido crescimento e colonização do tecido vegetal. Na verdade, solo, praga, partes de plantas ou plantas nem sempre são um substrato ou hospedeiro ideal para o crescimento microbiano. Além disso, os resultados dos presentes estudos permitiram ligar o aumento (ou uma maior) taxa de germinação de esporos microbianos de um agente biológico ou um agente de controle biológico com atividade biológica melhorada, aumentada ou aumentada ou atividade de controle biológico.
[033] A presente invenção é direcionada a um método para controlar um patógeno de planta ou uma praga ou proteger uma planta ou parte da planta contra um patógeno de planta ou uma praga que compreende o contato de uma planta ou parte da planta com (a) o um ou mais esporos microbianos de um agente biológico ou um agente de controle biológico e (b) um ou mais germinantes. Curiosamente, o uso de um ou mais germinantes da presente invenção torna possível reduzir a concentração do agente biológico ou do agente de controle biológico (ou seja, reduzir a concentração de um ou mais esporos microbianos) enquanto demonstra um efeito comparável ou superior a aquela observada quando doses normais de agente biológico ou agente de controle biológico são usadas.
[034] A presente invenção também se refere a um método para aumentar a germinação de um esporo microbiano de um agente biológico ou um agente de controle biológico compreendendo o contato de um ou mais esporos microbianos de um agente biológico ou um agente de controle biológico e um ou mais germinantes para um hospedeiro, em que após contato de um ou mais esporos microbianos e um ou mais germinantes para um hospedeiro, o um ou mais esporos microbianos do agente biológico ou o agente de controle biológico exibem germinação aumentada de esporos no hospedeiro na presença de um ou mais germinantes comparados para contatar um ou mais esporos microbianos do agente biológico ou do agente de controle biológico em uma planta ou parte da planta sem o um ou mais germinantes. Conforme usado neste documento, o termo “hospedeiro” significa um material vegetal, solo, pragas, insetos ou nematoides. Em uma forma de realização, o hospedeiro é um inseto, um ácaro, uma planta ou uma parte da planta.
[035] Em ainda outro aspecto, um método para induzir a germinação de um esporo microbiano é descrito neste documento. Em uma forma de realização, o método compreende induzir a germinação de um microrganismo compreendendo a aplicação foliar ou o contato de um ou mais esporos microbianos e um ou mais germinantes a uma planta ou parte da planta, em que após a aplicação foliar de um ou mais esporos microbianos e o um ou mais germinantes para uma planta ou parte da planta, um ou mais esporos microbianos exibem germinação aumentada na planta ou na parte da planta na presença de um ou mais germinantes em comparação com a aplicação foliar de um ou mais esporos microbianos sozinhos (ou seja, sem um ou mais germinantes) em uma planta ou parte da planta.
[036] Em outra forma de realização, a presente invenção fornece uma combinação de componentes ou uma composição compreendendo (a) o um ou mais esporos microbianos de um agente biológico ou um agente de controle biológico e (b) um ou mais germinantes, em que a referida composição controla um patógeno de planta ou uma praga. O (a) um ou mais esporos microbianos de um agente biológico ou um agente de controle biológico e (b) um ou mais germinantes estão presentes em uma forma que pode ser entregue simultaneamente, sequencialmente ou separadamente um do outro para uma planta ou parte da planta ou uma praga. Pelo termo “combinação”, tal como aqui utilizado, este termo significa duas ou mais substâncias próximas uma da outra e/ou usadas em conjunto, independentemente de se um veículo está incluído. A composição compreendendo (a) o um ou mais esporos microbianos de um agente biológico ou um agente de controle biológico e (b) um ou mais germinantes podem ser considerados uma combinação. Conforme usado neste documento, o termo “entrega simultaneamente” significa que (a) o um ou mais esporos microbianos de um agente biológico ou um agente de controle biológico e (b) um ou mais germinantes são entregues a uma planta ou parte da planta ou uma praga ao mesmo tempo ou substancialmente ao mesmo tempo através do mesmo modo de aplicação. Conforme usado neste documento, o termo “entrega separadamente” significa que (a) o um ou mais esporos microbianos de um agente biológico ou um agente de controle biológico e (b) um ou mais germinantes são entregues a uma planta ou parte da planta ou uma praga ao mesmo tempo ou substancialmente ao mesmo tempo por meio de um modo de aplicação diferente. Conforme usado neste documento, o termo “distribuição sequencial” significa que (a) o um ou mais esporos microbianos de um agente biológico ou um agente de controle biológico e (b) um ou mais germinantes são entregues a uma planta ou parte da planta ou uma praga em momentos diferentes (isto é, (a) pode ser antes ou depois de (b)), o modo de aplicação sendo idêntico ou diferente.
[037] De forma alternativa, a combinação de esporos microbianos de um agente biológico ou um agente de controle biológico e germinantes da presente invenção pode ser usada para reduzir significativamente doenças ou pragas. Mais particularmente, a presente invenção fornece o uso de uma quantidade eficaz de (a) o um ou mais esporos microbianos; e (b) um ou mais germinantes para aumentar a germinação de um esporo microbiano e, assim, controlar um patógeno de planta ou uma praga.
[038] Tal como aqui utilizado, o termo “agentes biológicos”, “agente (s) de controle biológico” são todos usados indistintamente e significam quaisquer organismos biológicos que tenham uma atividade biológica em uma semente, uma planta ou uma parte da planta ou contra uma praga e/ou capaz de ter uma ou mais propriedades benéficas para uma planta ou parte da planta (por exemplo, capaz de promover o crescimento da planta, capaz de ter atividade fungicida, capaz de ter atividade pesticida etc.). “Agentes biológicos” ou “agentes de controle biológico” da presente invenção incluem microrganismos (por exemplo, fungos) que controlam patógenos ou pragas vegetais causadores de doenças (ou seja, insetos, ácaros ou nematoides) e/ou promovem a saúde, o crescimento e o rendimento das plantas. Exemplos não limitativos de “atividade biológica” incluem fixação de N2, solubilização de fosfato, aumento do crescimento da planta, atividade pesticida, atividade biopesticida (por exemplo, bioinseticida ou bionematicida), atividade biofungicida etc.
[039] Conforme usado neste documento, os termos “controle” ou “controlar” referem-se à redução no número de patógenos ou pragas de plantas, particularmente insetos ou pragas de ácaros, realizada usando a composição da presente invenção. Com relação controle de patógenos de plantas, a composição ou método da presente invenção é útil para conferir proteção às plantas contra patógenos de plantas, para modular, reduzir, prevenir ou melhorar uma infecção causada por um patógeno de planta. No que diz respeito à redução de pragas (por exemplo, insetos, ácaros ou nematoides), é de forma geral compreendido que é a redução no número ou erradicação de pragas ou inibição de sua taxa de reprodução.
[040] Tal como aqui utilizado, o termo “atividade de controle biológico (ou eficiência) ou atividade fungicida (ou eficiência) melhorada, aumentada ou aumentada significa que há uma eficácia melhorada ou aumentada na inibição de fungos patogênicos de plantas (ou esporos de fungos) ou pragas. Essa inibição melhorada inclui, mas não está limitada, a uma diminuição do crescimento dos referidos fungos patogênicos, micélio e/ou produção de seus esporos ou uma redução de pragas como mencionado acima. Tal como aqui utilizado, “atividade ou eficácia de controle biológico melhorada, aumentada ou aumentada” significa que há uma eficácia geral melhorada, aumentada, aumentada ou superior em biocontrole ou controle biológico, tal como no contexto com uma aplicação de controle biológico em plantas ou contra pragas comparada à eficácia de controle biológico do agente de controle biológico sem a presença de um ou mais germinantes.
[041] No contexto da presente invenção, o termo “atividade biológica aprimorada, aumentada ou aprimorada (ou aprimorar uma atividade de biofertilização)” significa aumento do rendimento da planta ou aumento do crescimento das plantas, altura das plantas (por exemplo, aumento da biomassa (a biomassa fresca e/ou a biomassa seca), a floração, aumento do número de frutos, aumento de cápsulas, aumento do número ou tamanho da semente ou uma combinação dos mesmos, conforme medido por quaisquer métodos conhecidos no estado da técnica), aumento do número de raízes, aumento da massa da raiz, aumento do volume da raiz, aumento da área foliar, aumento do estande da planta, aumento do vigor da planta, emergência de plântulas mais rápida (ou seja, emergência aprimorada), germinação mais rápida (ou seja, germinação aprimorada), aumentou o grau de micorrização, a nutrição, a resistência ao estresse abiótico ou combinações disso. Fungos micorrízicos e, por exemplo, o fungo Trichoderma (por exemplo, T. asperellum (um exemplo é o produto Quality®, Lallemand) têm essa capacidade de promover ou estimular o crescimento, o desenvolvimento ou a saúde das plantas.
[042] Em uma forma de realização, o agente de controle biológico é um agente de controle biológico fúngico. Qualquer agente de controle biológico fúngico ou de produção de esporos pode ser usado no contexto da presente invenção. Microrganismos fúngicos particulares de interesse incluem, por exemplo, mas não estão limitados, a cepas de Chlonostachys, Aureobasidium, Ampelomyces, Beauveria, Metarhizium, Metschnikowia, Myrothecium, Nomuraea, Lecanicillium, Chaetomium, Cordyceps, Coniothyrium, Dactylella, Aspergillus, Paecilomyces, Pasteuria, Pochonia, Rhizophagus, Serendipita, Trichoderma, Pisolithus, Isaria, Crytococcus ou Glomus. Outros exemplos de fungos que podem ser usados no contexto da presente invenção são Endomicorriza incluindo, mas não se limitando a, fungos micorrízicos arbusculares (Glomeraceae, Claroideglomeraceae, Gigasporaceae, Acaulosporaceae, Diversisporaceae, Sacculosporaceae, Pacisporaceae, Ambisporaceae, Archaeosporaceae, Paraglomeraceae) e Sebacinoid mycorrhiza (Sebacinaceae endofítica intra-radical). Ectomicorriza (incluindo basidiomicetos formadores de rede de Hartig intra-radicais, ascomicetes e zigomicetos) e Ericoid mycorrhiza (basidiomicetos endofíticos intra-radicais, ascomicetes e zigomicetos de plantas Ericaceae) também podem ser usados.
[043] No contexto da presente invenção, o agente de controle biológico pode ser o fungo C. rosea. Qualquer espécie ou cepa de C. rosea pode ser usada. De fato, muitos isolados de C. rosea são antagonistas altamente eficientes contra vários fungos patogênicos de plantas. O agente de controle biológico C. rosea é um patógeno fúngico de planta antagonista que está amplamente presente no solo e pode produzir uma série de metabólitos antibacterianos. Em uma forma de realização, C. rosea é C. rosea f. catenulata. Em uma outra forma de realização, o fungo é C. rosea f. catenulata J1446. Esta cepa foi depositada em 19 de maio de 1994 de acordo com o Tratado de Budapeste para o depositário DSM (DSM Leibniz Institute DSMZ - Coleção Alemã de Microrganismos e Culturas Celulares (Inhoffenstr. 7B, D-38124 Braunschweig, Alemanha) sob o número de acesso DSM 9212. C. rosea f. catenulata J1446 está comercialmente disponível sob a marca registrada PRESTOP® ou LALSTOP G46 (Lallemand (Verdera, Finlândia)). Em uma forma de realização, um ou mais esporos microbianos são esporos de fungos entomopatogênicos. Em outra forma de realização particular, um ou mais esporos de fungos entomopatogênicos (por exemplo, conídios) são um ou mais esporos de fungos entomopatogênicos de Beauveria (por exemplo, B. bassiana (um exemplo é o produto Granada® de Lallemand) ou Cordyceps (por exemplo, C. javanica) também podem ser usados no contexto da presente invenção.
[044] Tal como aqui utilizado, os termos “esporo” ou “esporo microbiano” têm o seu significado normal, que é bem conhecido e compreendido pelos técnicos no assunto. Conforme usado neste documento, os termos “esporo” e “esporo microbiano” significam um microrganismo em seu estado dormente protegido. No contexto da presente invenção, o termo “um ou mais esporos microbianos” refere-se a “um ou mais esporos microbianos” de um agente de controle biológico. Em uma forma de realização preferencial, o termo “um ou mais esporos microbianos” refere-se a um ou mais esporos de fungos. Em uma forma de realização particular, os esporos de fungos incluem esporos formados sexualmente (por exemplo, oósporos, zigósporos ou ascósporos) e assexuadamente (por exemplo, conídios, clamidósporos, blastosporos, uredosporos, teleutosporos e ustosporos). Os “esporos de fungos” também incluem micélio ou fragmentos de micélio. Em uma forma de realização particular, os esporos de fungos são conídios. Em uma forma de realização particular, os esporos de fungos são clamidósporos.
[045] Tal como aqui utilizado, o termo “germinante (s)” ou “indutor (es)” significa qualquer substância ou composto que induz aumentos ou aumenta a taxa de germinação de esporos microbianos de agentes biológicos ou agente de controle biológico, por exemplo, uma substância ou composto que induz a germinação de um esporo microbiano de agentes biológicos ou agente de controle biológico, como um esporo de fungo e permite uma maior colonização e eficácia dos agentes biológicos ou agentes de controle biológico. Em uma forma de realização, o (s) “germinante (s)” ou “indutor (es)” da presente invenção também podem aumentar a esporulação. O (s) “germinante (s)” ou “indutor (es)” da presente invenção podem ser vistos como tendo uma atividade prebiótica. Os prebióticos são definidos como substâncias que estimulam de forma seletiva os microrganismos proporcionando um efeito benéfico à saúde do hospedeiro e vantagem competitiva. Esta definição pode ser estendida tanto para uso na saúde humana, na indústria alimentícia quanto para aplicação na agricultura, uma vez que se trata de um grupo de compostos à base de vitaminas, minerais, aminoácidos e proteínas que podem atuar estimulando o crescimento e a atividade de microrganismos.
[046] No contexto da presente invenção, exemplos de germinantes de agente de controle biológico fúngico são glicina betaína, extratos de levedura ou uma combinação dos mesmos.
[047] Em uma forma de realização, o germinante usado no contexto da presente invenção é glicina betaína. A glicina betaína extraída da beterraba sacarina está comercialmente disponível, por exemplo, sob a marca comercial de IntraCell®, Greenstim®, Bluestim®, Osmopro® ou LALSTIM Osmo® (Lallemand). Outros produtos de betaína, tais como mono-hidrato de betaína, cloridrato de betaína e líquidos de betaína bruta, também estão disponíveis comercialmente e podem ser usados para os fins da presente invenção.
[048] Todos os tipos de extrato de levedura ou derivados de levedura disponíveis comercialmente podem ser usados no contexto da presente invenção. O termo “fração de levedura” abrange substâncias obtidas pela separação das paredes celulares (por exemplo, as cascas) do resto da célula de levedura. O termo “parede celular de levedura” corresponde às cascas das células de levedura com a exclusão do conteúdo das células de levedura. O “extrato de levedura” corresponde ao conteúdo das células de levedura com a exclusão das paredes celulares (por exemplo, as cascas). Mais particularmente, o termo “extrato de levedura” refere-se ao conteúdo das células de levedura, sendo o referido conteúdo obtido por qualquer método de extração adequado conhecido pelos versados no estado da técnica. Assim, mais particularmente, o termo “extrato de levedura” abrange os componentes solúveis em água da célula de levedura. De forma geral, os extratos de levedura são produzidos (a) submetendo uma levedura a autolistato; (b) submeter o autolisado a separação sólido/líquido; e (c) recuperar a fração líquida, isto é, um extrato de levedura solúvel. De preferência, o extrato de levedura utilizado no contexto da presente invenção é um extrato de levedura solúvel. O termo “levedura inativa” abrange as leveduras que foram mortas por qualquer processo físico, químico ou físico- químico. Mais comumente, as leveduras são mortas por choque térmico no final do processo de produção e depois secas. O termo “derivados de levedura” abrange leveduras inativas, fração da parede celular de levedura ou produtos da parede celular de levedura. O extrato de levedura ou o derivado de levedura (por exemplo, as paredes celulares de levedura ou a levedura inativa) usados na presente invenção podem ser de qualquer espécie de levedura, de preferência uma espécie de levedura do gênero Saccharomyces, Kluyveromyces, Candida ou Torula. Em formas de realização preferidas de qualquer um dos métodos, composições ou usos da presente invenção, o extrato de levedura é um extrato de levedura solúvel e é de S. cerevisiae.
[049] Tal como aqui utilizado, os termos “germinação aumentada”, “taxa de germinação aumentada”, “germinação aumentada” e variações dos mesmos, pretendem significar: um aumento na proporção de esporos aplicados que germinam na presença de um germinante em comparação com o proporção de esporos aplicados que germinam na ausência de um germinante; e/ou um aumento na velocidade com que os esporos aplicados germinam na presença de um germinante quando comparada à velocidade com que os esporos aplicados germinam na ausência de um germinante.
[050] Tal como aqui utilizado, os termos “planta (s)” e “parte (s) da planta” significam todas as plantas e populações de plantas, tais como plantas selvagens ou plantas de cultivo desejadas e indesejadas (incluindo plantas de cultivo de ocorrência natural). As partes da planta devem ser entendidas como significando todas as partes e órgãos das plantas acima e abaixo do solo, como broto, folha, flor e raiz, exemplos que podem ser mencionados sendo folhas, agulhas, caules, caules, flores, corpos frutíferos, sementes, raízes, tubérculos e rizomas. As partes da planta também incluem material colhido e material de propagação vegetativa e generativa (por exemplo, estacas, tubérculos, rizomas, brotos e sementes etc.). A combinação da presente invenção pode ser aplicada a qualquer tipo de planta (isto é, a ambas as plantas leguminosas ou não leguminosas). Exemplos de plantas incluem, mas não estão limitados a, cereais (como trigo, cevada, aveia, centeio, triticale), milho, arroz, gramíneas, cana-de- açúcar, algodão, plantas leguminosas (como alfafa, trevo, sanfeno, etc.), cultura forrageira (como azevém, festuca, pé de galo, festulolium, ervilhaca, nabos forrageiros, rabanetes forrageiros, etc.), plantas ricas em óleo e proteínas (como soja, colza, ervilha, favas, tremoço branco, girassol, etc.), plantações de hortaliças (como tomate, alface, pepino, pimentão, berinjela, abobrinha, etc.), árvores frutíferas ou arbustos de fruta (como morangos, mirtilos, framboesas, etc.), viticultura (vinho e mesa uvas) ou árvores e plantações urbanas e ornamentais (como produção de flores, grama, viveiros, etc.).
[051] Tal como aqui utilizado, os termos “controlar um patógeno de planta”, “controlar uma praga”, “controlar uma praga de inseto”, “proteger uma planta de um patógeno (como um patógeno de planta, uma praga ou uma praga de inseto)” referem-se a um ou mais de inibir ou reduzir o crescimento, germinação, reprodução e/ou proliferação de um patógeno (por exemplo, um patógeno de planta ou uma praga de inseto) de interesse; e/ou matar, remover, destruir ou de outra forma diminuir a ocorrência e/ou atividade de um patógeno de interesse. Conforme descrito em mais detalhes neste documento, em formas de realização específicas, o agente de controle biológico controla um ou mais fungos patogênicos, como, por exemplo, Botrytis spp. (por exemplo, B. cinerea), Didymella spp., Pythium spp., Phytophthora spp., Fusarium spp., Rhizoctonia spp. (por exemplo, Rhizoctonia solani, Rhizoctonia bataticola; Rhizoctonia fragariae, Rhizoctonia leguminicola ou Rhizoctonia oryzae), Verticiliium spp., Cladosporium spp., Verticiliium spp., Podosphaera spp., Cladosporium spp., Sclerotinia spp. (por exemplo, S. sclerotiorum), Alternaria spp., Monilia spp., Monilinia spp., Colletotrichum spp., Cladosporium spp., Oidium spp. Didymella spp., Microdochium spp., Mycosphaerella spp., Puccinia spp., Septoria spp., Phaeosphaeria spp., Tapesia spp., Gaeumannomyces spp., Cochliobolus spp. Stagonospora spp., ou Pseudoidium spp.. Os seguintes patógenos também podem ser abrangidos pela presente invenção: Oidium anacardii, Oidium lycopersici, Erysiphe betae, Oidium ericinum, Leveillula taurica, Golovinomyces cichoracearum, Podosphaera fusca, Leveillula taurica, Podosphaera myrtillina, Podosphaera spiraeae, Oidium neolycopersici, Sphaerotheca verbenae, Erysiphe necator (Uncinula necator), Erysiphe viburni, Erysiphe hedwigii, Podosphaera tridactyla, Microsphaera penicillata, Podosphaera clandestina, Podosphaera euphorbiae, Oidium heveae, Microsphaera polonica, Oidium dianthii, Neoerysiphe galeopsidis, Oidium tingitaninum, Microsphaera berberidis, Golovinomyces cynoglossi, Blumeria graminis, Erysiphe lonicerae, Erysiphe cruciferarum, Golovinomyces orontii, Leveillula cucurbitacearum, Podosphaera fusca (syn. Sphaerotheca fuliginea), Microsphaera begoniae, Plasmapora viticole, Phytophtora infentans Venturia inaequalis, Pseudoidium neolycopersici ou Podosphaera xanthii.
[052] Em outra forma de realização, a composição, combinação ou método da presente invenção pode controlar pragas, como pragas de insetos ou pragas de ácaros. Exemplos de pragas de insetos ou pragas de ácaros são ácaros, pragas hemípteras, homotéricas, pragas tisanópteras, pragas isópteras, pragas lepidópteras, pragas coleópteras, pragas ortópteras, pragas himenópteras ou dípteras etc.
[053] Os esporos de fungos entomopatogênicos da presente invenção podem controlar, por exemplo, praga de inseto pertencente à espécie Diuraphis noxia, Bemisia argentifolii, Bemisia tabaci, Trialeurodes vaporariorum, Aleyrodes lonicerae, Diuraphis noxia, Bemisia argentifolii, Bemisia tabaci, Trialeurodes vaporariorum, Aleyrodes lonicerae, Diaphorina citri, Euphyllura olivine, Aphis gossypii, Myzus persicae, Macrosiphum euphorbiae, Aulacorthum solani, Heliothrips haemorrhoidalis, Frankliniella occidentalis, Frankliniella schulzei, Thrips tabaci, Scirtothrips dorsalis, Hercinothrips femoralis, Dalbulus maidis, Phenacoccus solenopsis, Pseudococcus longispinus, Paracoccus marginatus, Mahanarva fimbriolata, Deois flavopicta, Zulia entreriana, Notozulia entreriana, Hypothenemus hampei, Hedypathes betulinus, Cosmopolites sordidus, Gonipterus scutellatus, Agriotes spp., Plutella xyllostella, Helicoverpa armigera, Otiorhyncus sultacus, Fungus gnats, Exomala orientalis, Sciaridae, Otiorhynchus sulcatus, Strophosoma melanogrammum, S. capitatum, Phyllopertha horticola, Amphimallon solstitialis, Daktulosphaira vitifoliae, Diabrotica virgifera, Spodoptera spp., Oligonychus ilicis, Planococcus citri, Anthonomus grandis, Brevicoryne brassicae ou Sphenophorus levis. Em uma forma de realização, as pragas pertencem à espécie Bemisia tabaci (Gennadius) (Hemiptera: Aleyrodidae), Bemisia argentifolii, Trialeurodes vaporariorum, Hypothenemus hampei, Cosmopolites sordidus, Sphenophorus levis, Tetranychus urticae, Anthonomus grandis, Diaphorina citri, Helicoverpa armigera, Frankliniella occidentalis, Frankliniella schulzei, Thrips tabaci, Aphis gossypii, Myzus persicae, Oligonychus ilicis, Planococcus citri, Mahanarva fimbriolata, Agriotes spp., Diabrotica spp. ou Dalbulus maidis.
[054] Em outra forma de realização, os esporos de fungos entomopatogênicos da presente invenção podem controlar, por exemplo, praga de ácaro pertencentes às espécies Tetranychus urticae, Tetranychus cinnabarinus, Brevipalpus phoenicis, Panonychus ulmi, Byrobia rubrioculus, Aculus schlectendali, Aculops lycopersici, Ixodes scapularis ou Ixodes pacificus.
[055] A combinação ou composição de acordo com a presente invenção pode ser aplicada por contato da planta, parte da planta, solo ou uma praga por qualquer meio conhecido pelos versados no estado da técnica. O termo “contato”, tal como aqui utilizado, significa fazer com que uma planta, parte da planta, solo ou uma praga fique em proximidade com uma forma líquida ou sólida exógena (como um pó) de uma combinação ou composição de acordo com a invenção. Exemplos de tais métodos incluem, mas não estão limitados a métodos de aplicação por imersão, imersão, pulverização, nebulização, nebulização, revestimento, pulverização ou imersão. As formas e métodos de aplicação dependem inteiramente dos fins pretendidos, a fim de garantir a distribuição mais fina e uniforme de um ou mais esporos microbianos de um agente biológico ou um agente de controle biológico e um ou mais germinantes na planta ou na parte da planta, solo ou pragas. Em uma forma de realização, a aplicação ou etapa de contato é repetida mais de uma (ou seja, a etapa de contato pode ser repetida duas, três vezes, quatro vezes, cinco vezes, seis vezes etc.).
[056] Em uma forma de realização mais particular, o método para induzir a germinação de um esporo microbiano compreende a aplicação foliar de um ou mais esporos e um ou mais germinantes à folhagem da planta. Em ainda outra forma de realização, o método para induzir a germinação de um esporo microbiano compreende a aplicação foliar de uma ou mais composições aqui descritas.
[057] O método pode compreender ainda submeter a planta ou parte da planta a um ou mais ingredientes benéficos para a agricultura, aplicados simultaneamente ou sequencialmente com um ou mais esporos microbianos ou um ou mais germinantes. Em uma forma de realização, um ou mais ingredientes benéficos para a agricultura são aplicados simultaneamente ou sequencialmente com um ou mais esporos microbianos. Em outra forma de realização, um ou mais ingredientes benéficos para a agricultura são aplicados simultaneamente ou sequencialmente com um ou mais germinantes.
[058] Em outra forma de realização, um método para tratar o solo também é descrito neste documento. Em uma forma de realização, o método compreende o contato de um solo com um ou mais esporos microbianos e um ou mais germinantes. Em outra forma de realização, o método compreende o contato de um solo com um ou mais esporos microbianos e um ou mais germinantes e o cultivo de uma planta ou parte da planta no solo tratado. Em ainda outra forma de realização, o método compreende o contato de um solo com uma ou mais das composições aqui descritas e o cultivo de uma planta ou parte da planta no solo tratado. Em uma forma de realização, a etapa de contato pode ser realizada por qualquer método conhecido no estado da técnica. Exemplos não limitativos de contato com o solo incluem pulverizar o solo, encharcar o solo, gotejar no solo, aspersão, pulverizações no sulco, pelotas, microgrânulos e/ou pulverização do solo. Em uma forma de realização, a etapa de contato é repetida (por exemplo, mais de uma vez, como na etapa de contato é repetida duas, três vezes, quatro vezes, cinco vezes, seis vezes etc.). Em uma forma de realização, a etapa de contato compreende contatar o solo com um ou mais esporos microbianos sequencialmente com um ou mais germinantes. Em outra forma de realização, a etapa de contato compreende contatar o solo com um ou mais esporos ou conídios microbianos simultaneamente com um ou mais germinantes. Em uma forma de realização particular, a etapa de contato compreende a introdução de uma ou mais das composições aqui descritas no solo.
[059] A etapa de contato pode ocorrer a qualquer momento durante o crescimento da planta ou parte da planta. Em uma forma de realização, a etapa de contato ocorre antes da planta ou parte da planta começar a crescer. Em outra forma de realização, a etapa de contato ocorre após a planta ou parte da planta começar a crescer. Em outra forma de realização, a etapa de contato com pragas (por exemplo, insetos, ácaros ou nematoides) pode ocorrer em qualquer estágio de seu desenvolvimento. Por exemplo, estágios de desenvolvimento como, por exemplo, ovos, ninfas, larvas, pupas e adultos podem ser direcionados em níveis de infestação baixo, médio e alto.
[060] Em outra forma de realização, o método compreende ainda a etapa de plantar uma planta ou parte da planta. A etapa de plantio pode ocorrer antes, depois ou durante a etapa de contato. Em uma forma de realização, a etapa de plantio ocorre antes da etapa de contato. Em outra forma de realização, a etapa de plantio ocorre durante a etapa de contato (por exemplo, a etapa de plantio ocorre simultaneamente com a etapa de contato, a etapa de plantio ocorre substancialmente em simultâneo com a etapa de contato etc.). Em ainda outra forma de realização, a etapa de plantio ocorre após a etapa de contato.
[061] Em outro aspecto, as sementes podem ser tratadas com um ou mais esporos microbianos e um ou mais germinantes de acordo com qualquer método conhecido no estado da técnica. Em uma forma de realização particular, as sementes podem ser tratadas com uma ou mais das composições aqui descritas. Em ainda outra forma de realização, as composições aqui descritas são formuladas (por exemplo, misturadas, adicionadas etc.) com uma qualquer mistura de tratamento de sementes. O revestimento da semente pode ocorrer, por exemplo, por pulverização ou gotejamento.
[062] A combinação da presente invenção é aplicada em um valor eficaz. Uma quantidade eficaz de um ou mais esporos microbianos de um agente de controle biológico e um ou mais germinantes é uma quantidade suficiente para controlar ou inibir os patógenos. Em outras formas de realização, a quantidade eficaz de um ou mais esporos microbianos e um ou mais germinantes é uma quantidade suficiente para induzir a germinação de esporos de um ou mais microrganismos (isto é, de um ou mais esporos microbianos do agente de controle biológico). A dosagem efetiva real em valor absoluto depende de fatores incluindo, mas não se limitando a, interações sinérgicas ou antagônicas entre os outros ingredientes ativos ou inertes que podem aumentar ou reduzir os efeitos de germinação de um ou mais germinantes, e a estabilidade de um ou mais germinantes em composições e/ou como tratamentos de plantas ou partes de plantas. A taxa de aplicação de um ou mais esporos microbianos de um agente de controle biológico e um ou mais germinantes pode variar de acordo com o patógeno a ser visado, a cultura a ser protegida, a gravidade da doença, as condições climáticas e semelhantes. Em alguns casos, a combinação dos esporos microbianos de um agente de controle biológico e os germinantes pode mostrar atividade sinérgica, onde a combinação dos dois excede o esperado de seu efeito aditivo simples.
[063] Por exemplo, um ou mais esporos microbianos de um agente biológico ou um agente de controle biológico (por exemplo, C. rosea, B. bassiana, C. javanica ou T. asperellum) da presente invenção são formulados como uma suspensão líquida ou em um pó seco de acordo com quaisquer métodos adequados conhecidos no estado da técnica. A cultura, suspensão ou formulação biologicamente pura (compreendendo, mas não se limitando a, conídios, fragmentos de micélio e esporos) é aplicada ao solo, praga, planta ou parte da planta em uma concentração entre cerca de 103 a 1012 cfu (“unidade formadora de colônia “)/Ml, cerca de 104 a 1011 cfu/ml, cerca de 105 a 1010 cfu/ml ou cerca de 106 a 109 cfu/ml. O um ou mais esporos microbianos de um agente de controle biológico (por exemplo, C. rosea B. bassiana, C. javanica ou T. asperellum) é aplicado ao solo, praga, planta ou parte da planta em uma suspensão líquida ou está presente em uma composição ou combinação a uma concentração de cerca de 1x104, cerca de 1x105, cerca de 1x106, cerca de 1x107, cerca de 1x108, cerca de 1x109, cerca de 1x1010, cerca de 1x1011, cerca de 1x1012, cerca de 1x1013 cfu/ml ou superior a 1x1013 cfu/ml. Os um ou mais esporos microbianos de um agente biológico ou um agente de controle biológico (por exemplo, C. rosea, B. bassiana, C. javanica ou T. asperellum) também podem ser aplicados ao solo, praga, planta ou parte da planta em uma formulação seca (compreendendo, mas não se limitando a, conídios, fragmentos de micélio e esporos) a uma concentração de entre cerca de 103 a 1012 CFU/g, cerca de 104 a 1011 CFU/g, cerca de 105 a 1010 CFU/g ou entre 106 a 109 CFU/g. Os um ou mais esporos microbianos de um agente biológico ou um agente de controle biológico (por exemplo, C. rosea, B. bassiana, C. javanica ou T. asperellum) também podem ser aplicados ao solo, praga, planta ou parte da planta em uma formulação seca a uma concentração de cerca de 1x104, cerca de 1x105, cerca de 1x106, cerca de 1x107, cerca de 1x108, cerca de 1x109, cerca de 1x1010, cerca de 1x1011, cerca de 1x1012, cerca de 1x1013 cfu/ml ou superior a 1x1013 CFU/g. A quantidade ideal pode variar dependendo das espécies de cultivo, patógenos de plantas ou pragas e pode ser prontamente determinada pelos técnicos no assunto.
[064] Em uma forma de realização, a glicina betaína é aplicada a uma planta ou parte da planta ou a quantidade de glicina betaína na composição ou combinação está a uma concentração de pelo menos 0,001%, 0,005%, 0,01%, 0,015%, 0,02%, 0,025%, 0,03%, 0,035%, 0,04%, 0,045%, 0,05%, 0,055%, 0,06%, 0,065%, 0,07%, 0,075%, 0,08%, 0,085%, 0,09%, 0,095%, 0,1%, 0,2%, 0,3%, 0,4%, 0,5%, 0,6%, 0,7%, 0,8%, 0,9%, 1%, 1,5%, 2%, 2,5%, 3%, 3,5%, 4%, 4,5% ou mais de 5%, 5,5%, 6%, 6,5%, 7%, 7,5%, 8%, 8,5%, 9%, 9,5% ou mais de 10%. Em uma forma de realização preferida, a glicina betaína é aplicada a uma concentração de pelo menos 0,05%, 0,06%, 0,07%, 0,08%, 0,09%, 0,1%, 0,2%, 0,3%, 0,4%, 0,5%, 0,6%, 0,7%, 0,8%, 0,9%, 1%, 1,5%.
[065] Em uma forma de realização, o extrato de levedura é aplicado a uma planta ou parte da planta ou a quantidade de extrato de levedura na composição ou combinação está a uma concentração de pelo menos 0,001%, 0,005%, 0,01%, 0,015%, 0,02%, 0,025%, 0,03%, 0,035%, 0,04%, 0,045%, 0,05%, 0,055%, 0,06%, 0,065%, 0,07%, 0,075%, 0,08%, 0,085%, 0,09%, 0,095%, 0,1%, 0,2%, 0,3%, 0,4%, 0,5%, 0,6%, 0,7%, 0,8%, 0,9%, 1%, 1,5%, 2%, 2,5%, 3%, 3,5%, 4%, 4,5% ou mais de 5%, 5,5%, 6%, 6,5%, 7%, 7,5%, 8%, 8,5%, 9%, 9,5%, ou mais de 10%. Em uma forma de realização preferida, o extrato de levedura é aplicado a uma concentração de pelo menos 0,05%, 0,06%, 0,07%, 0,08%, 0,09%, 0,1%, 0,2%, 0,3%, 0,4%, 0,5%, 0,6%, 0,7%, 0,8%, 0,9% ou 1%.
[066] Em algumas formas de realização, a fórmula de Colby é aplicada para determinar se o uso de (a) e (b) em combinação mostra um efeito sinérgico: S. R. Colby, Calculating Synergistic and Antagonistic Responses of Herbicide Combinations, WEEDS 15, p. 20-22 (1967).
[067] A seguinte equação é usada para calcular a atividade esperada de misturas contendo dois ingredientes ativos, A e B: Esperado = A + B - (A x B/100) em que A = eficácia observada do componente ativo A (por exemplo, um ou mais esporos microbianos de um agente de controle biológico e mais particularmente, um ou mais esporos de C. rosea f. catenulatum) na mesma concentração usada na mistura; B = eficácia observada do componente ativo B (por exemplo, glicina betaína e/ou extrato de levedura) na mesma concentração usada na mistura; E = efeito esperado (em porcentagem,%) de (a) + (b) nas taxas de aplicação a e b.
[068] Na equação de Colby, o valor E corresponde ao efeito (dano ou lesão à planta) que é esperado se a atividade dos compostos individuais for aditiva. Se o efeito observado for superior ao valor E calculado de acordo com a equação de Colby, então um efeito sinérgico está presente de acordo com a equação de Colby.
[069] Em algumas formas de realização, as combinações, composições e métodos divulgados neste documento são sinérgicos, conforme definido pela equação de Colby. Em algumas formas de realização, a ação conjunta de C. rosea f. catenulata J1446 (ou seja, os esporos microbianos do agente de controle biológico) e glicina betaína (ou seja, os germinantes) ou extrato de levedura resulta em atividade aumentada (via sinergismo) contra um patógeno de planta (como, por exemplo, contra Botrytis, Rhizoctonia, Erysiphe ou Venturia) Em uma forma de realização, as combinações, composições e métodos da presente invenção mostram uma atividade antimicrobiana aumentada (ou, por exemplo, antifúngica) ou pesticida em comparação com a atividade antimicrobiana (ou, por exemplo, antifúngica) ou pesticida dos componentes quando aplicados individualmente. Em uma outra forma de realização, as combinações, composições e métodos da presente invenção mostram uma atividade antimicrobiana (ou, por exemplo, antifúngica) ou pesticida sinergicamente aprimorada em comparação com a atividade antimicrobiana ou pesticida (ou, por exemplo, antifúngica) dos componentes ativos quando aplicado individualmente. Mais particularmente, foi demonstrado que o uso da combinação de C. rosea f. catenulata J1446 (ou seja, os esporos microbianos do agente de controle biológico) e glicina betaína (ou seja, os germinantes) mostram uma atividade antifúngica aumentada em comparação com a atividade antifúngica dos componentes quando aplicados individualmente. Mais particularmente, foi demonstrado que o uso da combinação de C. rosea f. catenulata J1446 (ou seja, os esporos microbianos do agente de controle biológico) e glicina betaína (ou seja, os germinantes) mostram uma atividade aumentada contra Botrytis em comparação com a atividade de C. rosea f. catenulata J1446 ou glicina betaína quando aplicados individualmente. A combinação de C. rosea f. catenulata J1446 (ou seja, os esporos microbianos do agente de controle biológico) e glicina betaína (ou seja, os germinantes) aumentam a eficácia da proteção contra o ataque de patógenos de plantas, aumentando a germinação dos esporos e, portanto, aumentando o crescimento e colonização do fungo da planta ou parte da planta. Em outras palavras, a presente invenção demonstra uma eficácia aprimorada de C. rosea f. catenulata J1446 no controle biológico (ou atividade fungicida) de fungos patogênicos (por exemplo, contra Botrytis, Rhizoctonia, Erysiphe ou Venturia) aumentando a taxa de germinação de esporos do fungo usando um germinante. Em uma forma de realização, e conforme demonstrado no exemplo, a combinação da presente invenção fornece atividade sinérgica no controle do referido patógeno de planta ou praga.
[070] Em algumas formas de realização, as combinações, composições e métodos divulgados neste documento podem, com base nos componentes individuais, ser usados em taxas de aplicação mais baixas para atingir um efeito fungicida comparável ao efeito produzido pelos componentes individuais em taxas de aplicação normais.
[071] Em uma forma de realização, o uso das combinações, composição ou método da presente invenção também pode ser eficaz para controlar pragas, ácaros ou insetos e/ou para aumentar a eficácia da proteção contra pragas ou insetos. Por exemplo, neste caso, um ou mais esporos microbianos de um agente de controle biológico serem selecionados por sua capacidade contra insetos como, por exemplo, os seguintes controles de agente biológico: Beauveria bassiana sensu lato (Bals.) VuilL, B. brongniartii (Sacc.) Petch, Isaria fumosorosea Wise (anteriormente Paecilomyces fumosoroseus), Isaria javanica (Cordyceps javanica), Lecanicillium longisporum and L. muscarium (Petch) R. Zare andW. Gams (anteriormente Verticillium lecanii), Nomuraea rileyi (Farl.) Samson ou Metarhizium anisopliae sensu lato (Metsch.) Sorokin. Por exemplo, os resultados na presente invenção demonstram que glicina betaína, extrato de levedura ou uma combinação dos mesmos com B. bassiana ou C. javanica apresentam uma atividade entomopatogênica aumentada ou superior em comparação com a eficácia do agente de controle biológico sem o germinante (ou glicina betaína, extrato de levedura ou uma combinação dos mesmos).
[072] A combinação ou composição da presente invenção pode incluir um veículo e/ou diluente adequado e pode ser fornecida na forma de um sólido, um pó, uma solução, dispersão, uma suspensão, uma pasta, um aerossol ou um spray, em que o os ingredientes ativos da presente invenção são formulados de uma maneira que se adequa à aplicação específica. Exemplos não limitativos de formulações adequadas são: concentrados de emulsão, concentrados de suspensão, grânulos dispersíveis em água e pós molháveis. O veículo ou diluente, que é um veículo ou diluente agricolamente aceitável, pode ser qualquer um ou mais de uma série de veículos que conferem uma variedade de propriedades, tais como estabilidade aumentada, molhabilidade, dispersibilidade etc. Veículos adequados podem incluir, mas são não se limitando a água ou outras soluções aquosas, lamas, sólidos (por exemplo, turfa, trigo, farelo, vermiculita, solo pasteurizado etc.) ou pós secos. A composição ou formulação pode incluir aditivos adicionais, incluindo, mas não se limitando a, óleos, agentes tamponantes, surfactantes, adjuvantes ou agentes de revestimento. A combinação ou composição também pode compreender, por exemplo, um agente de biocontrole adicional, como um agente antifúngico ou pesticida (inseticida, fungicida, nematicida, bactericida ou herbicida). A combinação de um ou mais esporos microbianos de um agente de controle biológico e um ou mais germinantes pode ser aplicada como uma exposição de dose única ou em doses múltiplas ou exposições em momentos diferentes.
[073] A palavra “compreendendo” nas reivindicações pode ser substituída por “consistindo essencialmente em” ou “consistindo em”, de acordo com a prática padrão na lei de patentes.
[074] O exemplo a seguir serve para descrever e definir melhor a invenção e não se destina a limitar a invenção de nenhuma forma.
[075] Plantas jovens de morango (Fragaria X ananassa; variedade “Merced”) foram permitidas a crescer pelo menos uma semana antes de as plantas serem selecionadas para experimentos por aparência saudável e com folhas grandes voltadas para cima. Contagens de esporos para C. rosea f. catenulata J1446 no pacote de Prestop WG usado foram calculados via hemocitômetro como 1,4x1010 esporos/g e a viabilidade dos esporos foi verificada usando o método MPN (mais provavelmente número) e C. rosea f. catenulata J1446 foi calculado para ser 3x109 CFU/g. Os tratamentos foram preparados usando 0,025% de Prestop® WG em Tween 0,02% com 0,04% de Folwin, 0,2% de Folwin, 0,06% de glicina betaína (Intracell®, Lallemand) e 0,6% de glicina betaína (Intracell®, Lallemand), bem como 0,025% Prestop WG sozinho como um controle. Para pulverizar as plantas de morango, 10ml de cada tratamento foram carregados em um Mastercraft Air Brush Kit com o mini compressor ajustado em aproximadamente 15 psi. Para cada grupo de tratamento, 17 plantas foram pulverizadas em um movimento circular por 10s. Em média, 0,5ml de tratamento foi calculado para ser aplicado por planta. Cada lamela (e a folha à qual foi fixada) foi removida de cada planta após a pulverização e a lamela foi colocada em um tubo contendo 1 ml de uma suspensão de Tween a 0,02% junto com três contas de vidro de 3 mm. Para garantir a homogeneização da mistura, os tubos foram agitados em vórtex por 30s, presos ao agitador (220 rpm por 10min) e, em seguida, agitados novamente em vórtex por 10s imediatamente antes de serem carregados em um hemocitômetro para contagem de esporos. O número de esporos obtidos de cada deslizamento foi contado usando um hemocitômetro para determinar a taxa de deposição. As plantas foram mantidas na estufa (temperatura média 24 °C, alta 41 °C, baixa 15 °C, média UR 60%) ou em câmaras ambientais (temperatura média 28,8 °C, alta 30,9 °C, baixa 25,2 °C, UR médio 75%) para a duração do experimento que está sendo realizado. As plantas para estudos de germinação foram mantidas nessas temperaturas por 6, 7, 8 ou 24h após serem pulverizadas antes do corte dos discos foliares. As plantas usadas para estudos de crescimento de hifas foram mantidas nessas temperaturas por 1, 2, 3 ou 6 dias para permitir C. rosea f. catenulata J1446 mais tempo para colonizar a superfície da folha antes que os discos da folha fossem cortados. As plantas utilizadas para visualizar a colonização foram mantidas nessas temperaturas por 3 e 6 dias após a pulverização, antes do corte dos discos foliares. As plantas foram regadas a cada dois dias com aproximadamente 250ml (1 xícara) de água por vaso. Todas as plantas foram removidas da estufa dentro de 14 dias do início do experimento; cortar discos de folhas em alguns casos causou danos irreparáveis à planta.
[076] No mesmo dia, após a pulverização, dois discos de folhas de 6 mm foram cortados usando um furador de grampos esterilizados de duas folhas diferentes por planta de cinco plantas de morango pulverizadas por grupo de tratamento por período de tempo (6, 7, 8 e 24h) e depois tingidas com 5ul de lactofenol algodão azul. Discos de folhas manchados foram então observados sob um microscópio composto com ampliação de 200x. Três áreas de visualização foram escolhidas aleatoriamente em cada disco de folha e 100 esporos foram contados: o número que germinou (tubos germinativos visíveis com o dobro do comprimento do esporo) desses 100 foi registrado. As porcentagens médias de germinação foram analisadas por grupo de tratamento e por período de tempo.
[077] Dois discos de folhas de 6 mm foram cortados usando um furador de grampos esterilizados de duas folhas diferentes por planta de cinco plantas pulverizadas por tratamento por período de tempo (1, 2, 3 e 6 dias após a pulverização) e colocados com o lado adaxial para baixo em ágar paraquat- cloranfenicol (PCA) meio (0,1mL de paraquat, 200mg de cloranfenicol e 12g de ágar por litro de água). Placas de PCA contendo discos de folhas foram incubadas à temperatura ambiente (± 23 °C) de cabeça para baixo à direita em luz parcial e verificadas diariamente quanto ao crescimento. Após o segundo dia, as placas foram viradas para minimizar a condensação. O crescimento ao redor do disco foliar foi medido com uma régua e registrado como diâmetro médio de crescimento por dia. Se os tratamentos foram bem-sucedidos em aumentar o crescimento do fungo e a colonização no disco da folha, então seria esperado que anéis de crescimento maiores do fungo crescessem dos discos da folha para as placas também. Foram analisadas as médias dos tratamentos.
[078] Os dados de deposição eram normais quando a distribuição foi analisada para estudos de estufa e de câmara ambiental. Os conjuntos de dados para ambas as condições de crescimento foram analisados usando uma ANOVA de um fator e comparações múltiplas da média (alfa = 0,05) foram analisadas usando um teste post hoc de Tukey.
[079] Os dados para os ensaios de porcentagem de germinação em folhas de morango foram normais quando a distribuição foi analisada para estudos em casa de vegetação e em câmara ambiental. Portanto, os conjuntos de dados para ambas as condições de crescimento foram analisados usando uma ANOVA de um fator e comparações múltiplas da média (alfa = 0,05) foram analisadas usando um teste post hoc de Tukey.
[080] Os dados para os bioensaios de crescimento de 1, 2, 3 e 6 dias de incubação em estufa foram todos normais quando a distribuição foi analisada. Os dados para os bioensaios de crescimento de 1, 3 e 6 dias de incubação na câmara ambiental também foram normais quando a distribuição foi analisada. Portanto, os conjuntos de dados de todos os períodos de incubação e condições de crescimento foram analisados usando um modelo completo fatorial de medidas repetidas com os seguintes parâmetros do modelo: tempo, tratamento e sua interação. As comparações múltiplas da média (alfa = 0,05) foram analisadas por meio de um teste post hoc de Tukey.
[081] Porcentagem de germinação de C. rosea f. catenulata J1446 em discos de folhas.
[082] A porcentagem de germinação ao longo do tempo (Figura 1) foi estatisticamente significativa F (3.695) = 78,01; p < 0,0001, pois observamos uma tendência geral de que a germinação aumentou com o aumento do tempo. A porcentagem de germinação de esporos de C. rosea J1446 após 24h foi aumentada pela adição de glicina betaína ou extrato de levedura. iv. Estudos de estufa
[083] Os discos foram cortados após as plantas serem incubadas na estufa por diferentes períodos de tempo (1 dia, 2 dias, 3 dias, 6 dias) e, em seguida, o crescimento foi monitorado na placa por 6 dias (Figura 2). A colonização dos discos foliares por C. rosea J1446 foi significativamente aumentada pela adição de glicina betaína ou extrato de levedura.
[084] Botrytis cinerea foi cultivada em caldo de dextrose de batata durante 1 a 2 semanas sem agitação. O micélio e os esporos resultantes foram recuperados para produzir um inóculo líquido.
[085] Plantas de tomate, variedade Admiro (estágio: 3 folhas), foram pulverizadas com o inóculo de B. cinerea (5000 sp/ml) e depois deixadas a secar. Em seguida, os tratamentos foram aplicados por pulverização nas plantas de tomateiro inoculadas.
[086] Foram testados os seguintes tratamentos (9 repetições): (T1) Prestop® (C. rosea f. catenulatum J1446) 0,003%; (T2) Prestop® (C. rosea f. catenulatum J1446) 0,003% + glicina betaína (Intracell®, Lallemand) 0,05%; (T3) Prestop® (C. rosea f. catenulatum J1446) 0,003% + glicina betaína (Intracell®, Lallemand) 0,2%; (T4) glicina betaína (Intracell®, Lallemand) 0,2% e (T5) água.
[087] As plantas foram colocadas em estufa (temperatura média 24 °C, alta 41 °C, baixa 15 °C, UR média 60%) e incubadas 5 dias. O desenvolvimento dos sintomas foi avaliado medindo o tamanho da área necrótica (medição da largura).
[088] Conforme mostrado na Figura 3, a eficácia de Prestop® para controlar B. cinerea foi aumentada pela combinação com glicina betaína.
[089] A equação de Colby foi usada para determinar os efeitos esperados dos componentes, conforme descrito acima. Os resultados foram medidos 5 dias após a aplicação dos componentes. Como mostrado acima, as amostras demonstraram efeito anti-Botrytis sinérgico, com maior controle medido do que seria previsto pela equação de Colby (observado 91 > esperado 84,79).
[090] O objetivo do estudo foi avaliar a eficiência de proteção de taxas de dose mais baixas de C. rosea f. catenulata J1446 em combinação com glicina betaína contra Botrytis cinerea.
[091] O ensaio foi realizado em mudas jovens de tomate (variedade Admiro), suscetíveis ao mofo cinzento. As plantas foram criadas em estufa por 3 semanas (até o estágio de 2 folhas) antes de serem usadas para o ensaio.
[092] O inóculo de Botrytis cinerea (fungo patógeno que causa o bolor cinzento do tomate) foi obtido por multiplicação em meio de crescimento PDA (Potatoes Dextrose Agar - Agar Dextrose de Batatas).
[093] Depois de atingirem o estágio de duas folhas, as plantas foram tratadas com pulverizador de vidro (pulverização foliar). Produtos (ou água para o controle) foram pulverizados até o escoamento.
[094] O desenvolvimento do sintoma do bolor cinzento do tomate foi avaliado medindo o tamanho da área necrótica (medição da largura).
[095] O ensaio foi organizado em 10 repetições independentes de uma planta por forma de realização.
[096] As diferentes formas de realização foram comparadas a um controle negativo tratado com água.
[097] Os seguintes tratamentos foram testados: (T1) água; (T2) Prestop® (C. rosea f. catenulatum J1446) 0,001%; (T3) Prestop® (C. rosea f. catenulatum J1446) 0,001% + glicina betaína (Intracell®, Lallemand) 0,08%; (T4) Prestop® (C. rosea f. catenulatum J1446) 0,001% + glicina betaína (Intracell®, Lallemand) 0,06%; (T5) glicina betaína (Intracell®, Lallemand) 0,08%; e (6) glicina betaína (Intracell®, Lallemand) 0,06%.
[098] Os tratamentos foram realizados no dia 1, a inoculação de Botrytis cinerea no dia 0 e a avaliação dos sintomas no dia + 5. As plantas foram colocadas em estufa (temperatura média 24 °C, alta 41 °C, baixa 15 °C, média UR 60%). O desenvolvimento dos sintomas foi avaliado medindo o tamanho da área necrótica (medida da largura em mm).
[099] A Figura 4 mostra a eficiência de proteção dos diferentes tratamentos em comparação com o controle negativo. Nas duas doses testadas, a eficiência de proteção da combinação de Prestop® e glicina betaína foi significativamente maior do que Prestop® ou glicina betaína isoladamente. Além disso, os valores observados e preditos calculados pela equação de Colby: para 0,08% de glicina betaína: observado se 55,2 e o esperado é 34,2; para 0,06% de glicina betaína: o observado é 51,4 e o esperado é 29,06.
[0100] Os ensaios foram realizados em estacas herbáceas de videiras com quatro a cinco folhas adultas cultivadas em estufas (variedade de uva Marselan) a uma taxa de dez plantas por forma de realização. O estudo consistiu em tratar as estacas de videira com os diferentes tratamentos, quatro dias antes da inoculação e dois dias após a inoculação. Os tratamentos foram aplicados por pulverização nas duas faces das folhas até o ponto de escoamento.
[0101] A inoculação foi realizada pulverizando-se uma suspensão de 105 conídios de oídio/mL na superfície superior das folhas. As estacas tratadas e inoculadas foram colocadas em casa de vegetação. A incubação foi conduzida nas condições: 25 °C durante o dia e 18 °C à noite com fotoperíodo de 18 horas até o final da experimentação.
[0102] A eficácia dos diferentes tratamentos foi avaliada 18 dias após a inoculação por pontuação (estimativa visual) da área infectada de folhas nas “linhas” 1, 2 e 3 (primeiras três folhas “adultas” do ápice) em relação a uma folha não tratada controle: 0 = Sem infecção; 1 = alguns pontos; 2 = alguns pequenos pontos não contíguos; e 3 = manchas grandes, contíguas ou não.
[0103] Os resultados foram analisados usando uma análise de variância (alfa = 0,05) e comparações múltiplas da média foram analisadas usando um teste lSD Fisher.
[0104] Os seguintes tratamentos foram testados: (T1) água; (T2) glicina betaína (Intracell®, Lallemand) 0,5 g/L; (T3) Prestop® (C. rosea f. catenulatum J1446) 0,7 g/L + glicina betaína 0,5 g/L; e (T4) Prestop® (C. rosea f. catenulatum J1446) 0,7 g/L.
[0105] Os resultados são apresentados na Figura 5. Foi demonstrado que a combinação de Prestop® e glicina betaína conferiu um efeito protetor no desenvolvimento do oídio cujo efeito protetor é estatisticamente significativo em comparação com os outros tratamentos. Conclui-se que a glicina betaína aumenta a eficácia de Prestop® (C. rosea f. catenulatum J1446). Um efeito sistêmico parcial também foi observado, já que as folhas pós-tratamento formaram folhas e as folhas antecipadas desenvolvidas após os tratamentos foram quase assintomáticas.
[0106] O ensaio foi realizado em alface (variedade météore). As alfaces foram cultivadas em casa de vegetação naturalmente contaminada por Rhizoctonia e Botrytis sp. com quatro repetições para cada tratamento. Cada lote (40 alfaces por lote) incluía quatro fiadas com 5 m de comprimento e 1,32 m de largura.
[0107] Os seguintes tratamentos foram testados: (T1) água; (T2) Prestop® (C. rosea f. catenulatum J1446) 0,025%; e (T3) Prestop® (C. rosea f. catenulatum J1446) 0,025% + glicina betaína (Intracell®) 0,6%. A primeira aplicação foi feita embebendo a alface nas soluções durante 20 segundos. As três aplicações subsequentes dos tratamentos na alface foram realizadas por pulverização a uma taxa de 500 L/ha nas folhas em três aplicações subsequentes.
[0108] A evolução da frequência da doença foi avaliada três vezes durante o desenvolvimento da cultura (transplante +10; + 20; +30 dias) e na colheita. A pontuação foi realizada pela presença/ausência da doença em 40 plantas das quatro linhas. A intensidade e severidade da doença foram avaliadas na colheita em 20 plantas das quatro linhas seguindo a escala dada: Grau 1: alface saudável; Grau 2: ataque baixo, colo e folhas basais infestadas; Grau 3: ataque forte, numerosas folhas infestadas; e Grau 4: ataque muito forte, alfaces não comercializáveis. As alfaces comercializáveis são aquelas encontradas com uma pontuação de 1 e 2.
[0109] Os resultados (comparação média na frequência e produção da doença) foram analisados usando uma análise de variância (alfa = 0,05). Um teste de Khi2 foi realizado na intensidade e severidade de Botrytis sp. e Rhizoctonia na colheita.
[0110] Os escores de fitotoxicidade foram realizados três e sete dias após cada aplicação. Nenhum sintoma de fitotoxicidade nem efeitos em organismos não visados foram encontrados neste ensaio.
[0111] De acordo com o protocolo, a pontuação de frequência em 40 alfaces por parcela começou 10 dias após o plantio e 20 dias, mas nenhum sintoma foi observado. Botrytis sp. ataques apareceram na terceira notação (plantio + 27 dias). Duas pontuações foram feitas depois.
[0112] Os resultados indicaram que o ataque de Rhizoctonia e Botrytis foi forte no ensaio com cerca de 100% das alfaces infestadas no controle não tratado (grau 2-4). O controle apresenta significativamente menos alface saudável e mais alface não comercializável de grau 4 (resultados de Khi2 estão abaixo).
[0113] Conforme indicado na Tabela 1, os tratamentos com Prestop em combinação com glicina betaína aumentam significativamente o número de alface saudável.
[0114] Os testes Khi2 realizados em apodrecimento do colar de pontuação de intensidade na colheita podem ser entendidos de acordo com estes códigos: (+): número de funcionários observado maior do que o número teórico (-): número de funcionários observado menor do que o número teórico NS: Khi2 não significativo no limiar de 0,100 * : teste Khi2 significativo no limiar de 0,100 * *: teste Khi2 significativo no limiar de 0,05 * **: teste Khi2 significativo no limiar de 0,010 TABELA 1: TESTE DE KHI2 NA INTENSIDADE DA “PODRIDÃO DO COLO” NA COLHEITA.
[0115]O ensaio foi realizado em vasos de árvores da variedade Gala. Seis árvores por tratamento foram reservadas para este teste.
[0116]Os seguintes tratamentos foram testados: (T1) água; (T2) Prestop® (C. rosea f. catenulatum J1446) 250 g/ha + Silwet L-77 0,25 ml/l; (T3) Prestop® (C. rosea f. catenulatum J1446) 250 g/ha + glicina betaína (Intracell®, Lallemand) 300 g/ha; e (T4) glicina betaína (Intracell®, Lallemand) 300 g/ha. Duas estratégias de aplicação foram testadas: (a) uma aplicação quatro dias antes da inoculação do patógeno; e (b) uma primeira aplicação quatro dias antes da inoculação do patógeno e uma segunda aplicação após a inoculação do patógeno quando um cumulativo de 300 °C/hora foi alcançado após a inoculação.
[0117]Uma solução de conídios de V. inaequalis foi preparada a partir de 2018 folhas com crostas armazenadas no freezer. As árvores foram mantidas sob neblina por pelo menos uma hora antes da contaminação e pelo menos 12 horas depois. A duração foi adaptada de acordo com a temperatura e umidade ambiente. O volume de pulverização foi definido após um teste em branco para cobrir vegetação suficiente sem atingir o ponto de escoamento (entre 30 e 50 mL/árvore). Os tratamentos foram aplicados com pulverizador manual e conduzidos quatro dias antes da inoculação com o patógeno (estratégias (a) e (b)) e dentro de 300 °C/H após a inoculação apenas para a estratégia (2).
[0118]Observou-se a frequência e intensidade dos sintomas foliares de sarna. A observação foi realizada quatro a cinco dias após o início dos primeiros pontos, usando uma escala de 0 a 4 pontos. As árvores foram pontuadas individualmente e feitas em todas as folhas de cada árvore.
[0119]Os resultados são mostrados na Tabela 2 e o tratamento «Prestop® + glicina betaína» (uma aplicação antes da inoculação ou uma aplicação antes e uma a 300° H depois) diminuiu o número médio de folhas com crosta em 8 a 9% em comparação com o controle tratada com água. Nesta experiência, Silwet é incluído como um adjuvante. TABELA 2: FREQUÊNCIA DE OCORRÊNCIA DE SINTOMAS FOLIARES DE SARNA.
[0120] Uma cepa de B. bassiana (Granada, Lallemand) foi usada no estudo.
[0121] Conídios de B. bassiana foram diluídos em água destilada estéril contendo Tween 80 (0,05%). A concentração dos tratamentos aplicados foi de 1x106 UFC/ml.
[0122] Glicina betaína (Intracell®, Lallemand; 0,2% em 100L/ha de mistura para pulverização) (T2), extrato de levedura (FNI, Lallemand; 0,2% em 100L/ha de mistura para pulverização) (T3) e uma combinação de glicina betaína (Intracell ®, Lallemand; 0,2% em 100L/ha de mistura spray) e extrato de levedura (FNI, Lallemand; 0,2% em 100L/ha de mistura spray) (T4) foram testados para estimular a germinação de conídios de B. beauveria.
[0123] Os conídios de B. bassiana foram pareados com os três tratamentos mencionados acima na proporção de 1: 1. A suspensão de apenas conídios de B. bassiana em água destilada estéril semeada em ágar água foi usada como controle negativo (T1). Seis repetições foram feitas por tratamento.
[0124] Cem μL de suspensão por combinação (seis repetições) foram colocados em placas de Petri contendo ágar água (15 g/L). As placas foram incubadas a 25 °C no escuro. A avaliação das taxas de germinação e do alongamento do tubo germinativo foi realizada em microscópio de luz (aumento de 40x) após quatro, oito, 12 e 16 horas de incubação.
[0125] Os dados foram submetidos aos testes de normalidade e homogeneidade (teste de Shapiro-Wilk e Bartlett). Uma vez atendidos os princípios, foi submetida à análise estatística ANOVA de variância e as médias comparadas pelo teste de Tukey (p < 0,05). Foi utilizado o software estatístico R Studio versão 1.2.1335.
[0126] Conforme mostrado na Tabela 3, a adição de glicina betaína, extrato de levedura ou uma combinação dos mesmos aumentou significativamente a taxa de germinação de conídios de B. bassiana. TABELA 3: NÚMERO DE CONÍDIOS DE B. BASSIANA GERMINADOS EM SUSPENSÕES CONTENDO MISTURAS DE CONÍDIOS COM AS SUBSTÂNCIAS TESTADAS QUE FORAM INCUBADAS JUNTAS POR 16 HORAS A 25 °C NS: não significativo * Médias seguidas pela mesma letra não diferem significativamente entre si de acordo com o teste de Tukey (P > 0,05).
[0127]Um bioensaio foi realizado para avaliar a eficácia da combinação de B. bassiana com glicina betaína, extrato de levedura ou a combinação de glicina betaína com extrato de levedura no controle de mosca-branca (Bemisia tabaci (Gennadius) (Hemiptera: Aleyrodidae).
[0128]Os tratamentos testados foram os seguintes: (T1) Tween 80 0,05% (controle negativo); (T2) B. bassiana (Granada, Lallemand) (controle positivo); (T3) B. bassiana + glicina betaína 0,2% (Intracell®, Lallemand); (T4) B. bassiana + extrato de levedura 0,2% (FNI, Lallemand); e (T5) B. bassiana em combinação com glicina betaína 0,2% (Intracell®, Lallemand) e extrato de levedura 0,2% (FNI, Lallemand). Sete repetições foram feitas por tratamento.
[0129]Conídios de B. bassiana foram diluídos em água destilada estéril contendo Tween 80 (0,05%). A concentração dos tratamentos aplicados foi de 2x107 UFC/ml. Os conídios de B. bassiana foram pareados com os tratamentos mencionados acima na proporção de 1: 1.
[0130]Plantas de feijão (estágio de duas folhas) foram infestadas por moscas brancas adultas. Após a oviposição das plantas por um período de 24 horas, os adultos foram retirados e as plantas transferidas para uma sala separada para o desenvolvimento das ninfas até o segundo ínstar. Em seguida, a superfície abaxial das folhas de feijão foi pulverizada com os diferentes tratamentos com auxílio de aerógrafo. As plantas foram mantidas em casa de vegetação (temperatura variando de 14 °C a 30 °C) e a mortalidade avaliada.
[0131]Os dados foram submetidos aos testes de normalidade e homogeneidade (teste de Shapiro-Wilk e Bartlett), foi realizada análise de desvio e as médias comparadas pelo teste de Tukey (p < 0,05). Foi utilizado o software estatístico R Studio versão 1.2.1335.
[0132]Conforme mostrado na Tabela 4, os resultados indicam que há uma atividade entomopatogênica superior quando B. bassiana é combinada com glicina betaína, extrato de levedura ou uma combinação de glicina betaína com extrato de levedura em comparação com os controles. TABELA 4: MÉDIA DE MORTALIDADE DE NINFAS (EM %) 10 DIAS APÓS A APLICAÇÃO DOS TRATAMENTOS * Médias seguidas pela mesma letra não diferem significativamente entre si de acordo com o teste de Tukey (P > 0,05).
[0133] Conídios de C. javanica foram diluídos em água destilada estéril contendo Tween 80 (0,05%). A concentração dos tratamentos aplicados foi de 1x106 UFC/ml.
[0134] Glicina betaína (Intracell®, Lallemand; 0,2% em 100L/ha de mistura para pulverização) (T2), extrato de levedura (FNI, Lallemand; 0,2% em 100L/ha de mistura para pulverização) (T3) e uma combinação de glicina betaína (Intracell ®, Lallemand; 0,2% em 100L/ha de mistura spray) e extrato de levedura (FNI, Lallemand; 0,2% em 100L/ha de mistura spray) (T4) foram testados para estimular a germinação de conídios de C. javanica.
[0135] Os conídios de C. javanica foram pareados com os três tratamentos mencionados acima na proporção de 1: 1. A suspensão de apenas conídios de C. javanica em água destilada estéril banhada em ágar água foi usada como controle negativo (T1).
[0136] Cem μL de suspensão por combinação (seis repetições) foram colocados em placas de Petri contendo ágar água (15 g/L). As placas foram incubadas a 25 °C no escuro. A avaliação das taxas de germinação e do alongamento do tubo germinativo foi realizada em microscópio de luz (aumento de 40x) após quatro, oito e 12 horas de incubação.
[0137] Os dados foram submetidos aos testes de normalidade e homogeneidade (teste de Shapiro-Wilk e Bartlett). Uma vez atendidos os princípios, foi submetida à análise estatística ANOVA de variância e as médias comparadas pelo teste de Tukey (p < 0,05). Foi utilizado o software estatístico R Studio versão 1.2.1335.
[0138] Conforme mostrado na Tabela 5, a adição de glicina betaína, extrato de levedura ou uma combinação dos mesmos aumentou a taxa de germinação de conídios de C. javanica. Os resultados indicaram que a germinação dos conídios foi estimulada mais fortemente pelo extrato de levedura e pela combinação de glicina betaína e extrato de levedura. TABELA 5: NÚMERO DE CONÍDIOS DE C. JAVANICA GERMINADOS EM SUSPENSÕES CONTENDO MISTURAS DE CONÍDIOS COM AS SUBSTÂNCIAS TESTADAS QUE FORAM INCUBADAS JUNTAS POR 12 HORAS A 25 °C NS: não significativo * Médias seguidas pela mesma letra não diferem significativamente entre si de acordo com o teste de Tukey (P > 0,05).
[0139] Um bioensaio foi realizado para avaliar a eficácia da combinação de C. javanica com extrato de levedura ou da combinação de glicina betaína com extrato de levedura no controle de mosca-branca (Bemisia tabaci (Gennadius) (Hemiptera: Aleyrodidae).
[0140] Os tratamentos testados foram os seguintes: (T1) Tween 80 0,05% (controle negativo); (T2) C. javanica (controle positivo); (T3) C. javanica + extrato de levedura 0,2% (FNI, Lallemand); e (T4) C. javanica + glicina betaína 0,2% (Intracell®, Lallemand) + extrato de levedura 0,2% (FNI, Lallemand). Sete repetições foram feitas por tratamento.
[0141] Conídios de C. javanica foram diluídos em água destilada estéril contendo Tween 80 (0,05%). A concentração dos tratamentos aplicados foi de 2x107 UFC/ml. Os conídios de C. javanica foram pareados com os tratamentos mencionados acima na proporção de 1: 1.
[0142] Plantas de feijão (estágio de duas folhas) foram infestadas por moscas brancas adultas. Após oviposição nas plantas por um período de 24 horas, as plantas foram transferidas para uma sala separada para o desenvolvimento das ninfas até o segundo ínstar. Em seguida, a superfície abaxial das folhas de feijão foi pulverizada com os diferentes tratamentos com auxílio de aerógrafo. As plantas foram mantidas em casa de vegetação (temperatura variando de 14 °C a 30 °C) e a mortalidade avaliada.
[0143] Os dados foram submetidos aos testes de normalidade e homogeneidade (teste de Shapiro-Wilk e Bartlett), análise de desvio e médias comparadas pelo teste de Tukey (p < 0,05). Foi utilizado o software estatístico R Studio versão 1.2.1335.
[0144] Conforme mostrado na Tabela 6, os resultados indicam que há uma atividade entomopatogênica superior quando C. javanica é combinada com extrato de levedura ou extrato de levedura em combinação com glicina betaína em comparação com os controles. TABELA 6: MÉDIA DE MORTALIDADE DE NINFAS (EM %) 7 DIAS APÓS A APLICAÇÃO DOS TRATAMENTOS * Médias seguidas pela mesma letra não diferem significativamente entre si de acordo com o teste de Tukey (P > 0,05).
[0145] Um ensaio de laboratório foi realizado. Os seguintes tratamentos foram avaliados (incluindo três repetições): (T1) T. asperellum (Quality, Lalemand) sozinho 1 g/kg de sementes; e (T2) T. asperellum 1 g/kg de sementes + extrato de levedura (FNI, Lallemand) 1 g/kg de sementes que corresponde a uma concentração de 0,001%.
[0146] Sementes de soja foram pesadas e 500 g de sementes foram utilizadas como tratamento. Os produtos foram diluídos em água destilada e as sementes inoculadas por pulverização. Após os tratamentos, as sementes foram armazenadas em ambiente fresco e ventilado.
[0147] Após a inoculação das sementes, avaliou-se a porcentagem de germinação dos conídios viáveis. Duas amostras de 100 g (16,67 g em média) de sementes inoculadas foram pesadas e distribuídas em dois Erlenmeyers com solução de diluição estéril (NaCl 0,9% - Tween 0,1%), formando a diluição 0. Os frascos foram agitados por 20-30 minutos a 240 rpm. As diluições foram feitas em série, as soluções em placas em PDA e as placas de Petri incubadas a 25 °C por 7 dias.
[0148] Para avaliação da viabilidade dos conídios (em %), as sementes foram lavadas com solução n isotônica e a solução resultante homogeneizada em vórtice por 10-20 segundos. A suspensão foi diluída conforme necessário e semeada em placas de Petri contendo meio BDA acidificado 1/5. Esta etapa foi repetida cinco vezes para cada momento: 0h, 3h, 6h, 12h, 16h, 20h horas após a incubação. As placas foram incubadas a 25 °C.
[0149] A avaliação da viabilidade foi feita em microscópio óptico. Os esporos considerados viáveis são aqueles que têm um tubo germinativo igual ou maior que o esporo; esporos ativos, mas não germinados, são aqueles que incham, mas não formam um tubo germinativo; e esporos inviáveis são aqueles que não incham, não se coram com a solução corante ou têm uma cor muito pobre em comparação com os inchados.
[0150] Os esporos que germinaram foram calculados usando a seguinte fórmula: Viabilidade (%) = média de conídios viáveis/(média de conídios inativos + média de conídios viáveis) X 100
[0151] Os dados gerados foram submetidos aos testes de normalidade e homogeneidade (teste de Shapiro-Wilk e Bartlett). Uma vez atendidos esses princípios, os mesmos foram submetidos à análise estatística de variância ANOVA e teste de Tukey (P < 0,05). Para os dados que não atendiam aos princípios, foram submetidos a um teste de análise de deviance e as médias comparadas pelo teste de Tukey (P < 0,05). Foi utilizado o software estatístico R Studio versão 1.2.1335.
[0152] Conforme mostrado na Tabela 7, a porcentagem de germinação de conídios de T. asperellum foi significativamente aumentada pela adição de extrato de levedura. TABELA 7: PORCENTAGEM DE CONÍDIOS DE T. ASPERELLUM GERMINADOS EM SUSPENSÕES CONTENDO MISTURAS DE CONÍDIOS COM AS SUBSTÂNCIAS TESTADAS QUE FORAM INCUBADAS JUNTAS POR 20 HORAS A 25 °C.
[0153] Médias seguidas da mesma letra não diferem estatisticamente entre si pelo teste de Tukey a 5% de significância.
[0154] Um ensaio em casa de vegetação foi conduzido para avaliar se a presença de extrato de levedura também aumentaria o efeito de bioestimulação de T. asperellum.
[0155] As sementes de soja foram tratadas conforme mencionado acima. A semeadura foi realizada no mesmo dia do tratamento das sementes, permitindo aproximar-se da realidade do campo e oferecer condições favoráveis para a sobrevivência dos microrganismos. Cada unidade experimental foi composta por dois vasos de quatro L contendo areia. Em cada vaso foi semeada uma semente de soja com profundidade de dois cm (recomendada para cultivo).
[0156] A porcentagem do número de mudas emergidas foi realizada diariamente até dez dias de avaliação e o índice de velocidade de germinação calculado de acordo com Maguire (1962).
[0157] O experimento foi conduzido até que as plantas atingissem o ciclo vegetativo V2 (25 dias). Ao final desse período, as plantas foram coletadas e lavadas em água corrente para minimizar a perda de raízes finas. O volume da raiz, comprimento da parte aérea, parte aérea fresca e massa de raiz e massa aérea seca e massa de raiz foram feitos de acordo com métodos conhecidos no estado da técnica.
[0158] Uma ANOVA foi conduzida seguida por um teste de Tukey para comprimento da parte aérea, massa fresca da parte aérea, massa fresca da raiz e massa seca da parte aérea. Análises de Deviance (distribuição Gamma) seguidas do teste de Tukey para Índice de Velocidade de Emergência, Volume de Raiz (ml) e Massa Seca de Raiz (cm) também foram realizadas. O Software R Studio versão 1.2.1335 foi usado para todas as análises estatísticas.
[0159] Os resultados demonstraram que as sementes revestidas com T. asperellum e extrato de levedura proporcionaram a maior massa seca de raiz em comparação com as sementes de soja tratadas apenas com T. asperellum (Tabela 8). Isso demonstrou que a presença de extrato de levedura aumenta o efeito de bioestimulação de T. asperellum. TABELA 8: EFEITO DE BIOESTIMULAÇÃO DE T. ASPERELLUM NA SOJA
[0160] Médias com as mesmas letras não diferem pelo teste de Tukey (P ≤0,05)
[0161] Embora a invenção tenha sido descrita em conexão com formas de realização específicas da mesma, será entendido que o escopo das reivindicações não deve ser limitado pelas formas de realização preferidas estabelecidas nos exemplos, mas deve ser dada a interpretação mais ampla consistente com a descrição como um todo. OUTROS ASPECTOS DA INVENÇÃO: 1. Método para controlar um patógeno de planta ou proteger uma planta de um patógeno de planta, o referido método caracterizado por compreender o contato de uma planta ou parte da planta com (a) o um ou mais esporos microbianos de um agente de controle biológico e (b) um ou mais germinantes, em que o referido um ou mais germinantes é glicina betaína, um extrato de levedura ou uma combinação dos mesmos. 2. Método para aumentar a taxa de germinação de um esporo microbiano, caracterizado por compreender o contato de (a) o um ou mais esporos microbianos de um agente de controle biológico e (b) um ou mais germinantes, em que o referido um ou mais germinantes é glicina betaína, um extrato de levedura ou uma combinação dos mesmos com um hospedeiro, em que após o contato de um ou mais esporos microbianos e um ou mais germinantes com o hospedeiro, o um ou mais esporos microbianos do agente de controle biológico exibem taxa de germinação de esporos aumentada no hospedeiro na presença de um ou mais germinantes em comparação com o contato de um ou mais esporos microbianos no hospedeiro sem o um ou mais germinantes. 3. Uma composição que compreende (a) o um ou mais esporos microbianos de um agente de controle biológico e (b) um ou mais germinantes, em que o referido um ou mais germinantes é glicina betaína, um extrato de levedura ou uma combinação dos mesmos, e em que a referida composição controla um patógeno de planta. 4. Uso de uma quantidade eficaz de (a) o um ou mais esporos microbianos de um agente de controle biológico e (b) um ou mais germinantes, em que o referido um ou mais germinantes é glicina betaína, extrato de levedura ou uma combinação para aumentar a taxa de germinação do um ou mais esporos microbianos de um agente de controle biológico e, assim, controlar um patógeno de planta em que o uso de uma combinação de um ou mais esporos microbianos e um ou mais germinantes mostra uma taxa de germinação aumentada e atividade antimicrobiana em comparação com a taxa de germinação e atividade antimicrobiana de um ou mais esporos microbianos de um agente de controle biológico quando aplicado individualmente sem o um ou mais germinantes. 5. O método do parágrafo 2, em que o referido hospedeiro é uma planta ou parte da planta. 6. O método do parágrafo 1, 2 ou 5, em que o contato compreende a aplicação foliar de uma planta ou parte da planta do um ou mais esporos microbianos de um agente de controle biológico e um ou mais germinantes. 7. O método de 1, 2, 5 ou 6, a composição do parágrafo 3 ou o uso do parágrafo 4, em que o um ou mais germinantes é glicina betaína. 8. O método de 1, 2, 5 a 7, a composição do parágrafo 3 ou o uso do parágrafo 4 ou 7, em que o um ou mais germinantes é uma combinação de glicina betaína e extrato de levedura. 9. O método de qualquer um dos parágrafos 1, 2 e 5 a 8, a composição do parágrafo 3 ou o uso dos parágrafos 4, 7 ou 8, em que um ou mais esporos microbianos de um agente de controle biológico serem um ou mais fungos esporos microbianos. 10. O método de qualquer um dos parágrafos 1, 2 e 5 a 9, a composição do parágrafo 3 ou 9, ou o uso de qualquer um dos parágrafos 5 e 7 a 9, em que um ou mais esporos microbianos fúngicos são um ou mais esporos de fungos de Chlonostachys rosea var. catenulatum. 11. O método de qualquer um dos parágrafos 1, 2 e 5 a 10, a composição do parágrafo 3, 9 ou 10 ou o uso dos parágrafos 4, 5, 7 a 10, em que Chlonostachys rosea var. catenulatum é C. rosea f. catenulata J1446.12. A composição do parágrafo de qualquer um dos parágrafos 3 e 9 a 11, em que a composição compreende ainda um veículo. 13. O método de qualquer um dos parágrafos 1, 2 e 5 a 11, a composição de qualquer um dos parágrafos 3 e 9 a 12 ou o uso de qualquer um dos parágrafos 5 e 7 a 11, em que o patógeno de planta pertence ao gênero Botrytis, Didymella, Pythium, Phytophthora, Fusarium ou Rhizoctonnia. 14. O método de qualquer um dos parágrafos 1, 2, 5 a 11 e 13, a composição de qualquer um dos parágrafos 3 e 9 a 13, ou o uso de qualquer um dos parágrafos 5, 7 a 11 e 13, em que o patógeno de planta pertence ao gênero Botrytis. 15. O método de qualquer um dos parágrafos 1, 2, 5 a 11, 13 e 14, a composição de qualquer um dos parágrafos das reivindicações 3 e 9 a 14 ou o uso de qualquer um dos parágrafos 5, 7 a 11, 13 e 14, em que o patógeno de planta é Botrytis cinerea. 16. O método de qualquer um dos parágrafos 1, 2, 5 a 11 e 13 a 15, ou o uso de qualquer um dos parágrafos 5, 7 a 11 e 13 a 15, em que o referido (a) o um ou mais esporos microbianos de um agente de controle biológico e (b) um ou mais germinantes são usados simultaneamente, separadamente ou sequencialmente. 17. O método de qualquer um dos parágrafos 1, 2, 5 a 11, 13 a 16, ou o uso de qualquer um dos parágrafos 5, 9 a 11 e 13 a 16, em que o referido (a) o um ou mais esporos microbianos de um agente de controle biológico e (b) um ou mais germinantes são usados simultaneamente. 18. O método de qualquer um dos parágrafos 1, 2, 5 a 11, 13 e 17, a composição de qualquer um dos parágrafos 3 e 9 a 15 ou o uso de qualquer um dos parágrafos 5, 9 a 11 e 13 a 17, em que a glicina betaína é aplicada à planta ou parte da planta a uma concentração de pelo menos 0,05%, 0,06%, 0,07%, 0,08%, 0,09%, 0,1%, 0,2%, 0,3%, 0,4%, 0,5%, 0,6%, 0,7%, 0,8%, 0,9%, 1%, 1,5%, 2%, 2,5%, 3%, 3,5%, 4%, 4,5% ou 5%. 19. O método de qualquer um dos parágrafos 1, 2, 5 a 11, 13 e 18, a composição de qualquer um dos parágrafos 3, 9 a 15 e 18 ou o uso de qualquer um dos parágrafos 5, 9 a 11 e 13 a 18, em que um ou mais esporos microbianos de um agente de controle biológico serem aplicados à planta ou parte da planta a uma concentração de pelo menos cerca de 1x106, cerca de 1x107, cerca de 1x108, cerca de 1x109, cerca de 1x1010, cerca de 1x1011 ou cerca de 1x1012 CFU/g. 20. O método de qualquer um dos parágrafos 1, 2, 5 a 11, 13 e 19, a composição de qualquer um dos parágrafos 3, 9 a 15 e 19 ou o uso de qualquer um dos parágrafos 5, 9 a 11 e 13 a 19, em que a planta ou parte da planta são cereais, milho, arroz, gramíneas, cana-de-açúcar, plantas leguminosas, forrageiras, plantas ricas em óleo e proteínas, plantações de hortaliças, árvores frutíferas, plantações de viticultura, plantações urbanas ou plantações ornamentais.
Claims (12)
1. MÉTODO PARA AUMENTAR A TAXA DE GERMINAÇÃO DE UM ESPORO DE FUNGO, caracterizado por compreender colocar em contato com um hospedeiro: (a) um ou mais esporos de fungos de um agente biológico ou um agente de controle biológico, em que o um ou mais esporos de fungos são um ou mais esporos de fungos de Chlonostachys rosea var. catenulatum, e (b) um ou mais germinantes, em que o referido um ou mais germinantes compreendem glicina betaína, um extrato de levedura, uma levedura inativa, paredes celulares de levedura, uma fração de parede celular de levedura, ou um produto de parede celular de levedura, ou uma combinação dos mesmos.
2. MÉTODO, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por: (i) o hospedeiro ser o solo, uma praga, uma planta ou uma parte da planta, opcionalmente em que a parte da planta compreende ou consiste em uma semente; e/ou (ii) o hospedeiro ser uma planta, ou parte da planta, que opcionalmente compreende ou consiste em uma semente, e pelo contato compreender a aplicação foliar na planta ou na parte da planta do um ou mais esporos de fungos de um agente de controle biológico e do um ou mais germinantes.
3. MÉTODO PARA CONTROLAR UM PATÓGENO DE PLANTA ou uma praga, ou proteger uma planta de um patógeno de planta, uma praga, ou melhorar o crescimento, desenvolvimento e/ou produtividade de uma planta, caracterizado por compreender contatar o solo, uma praga, uma planta ou uma parte da planta com (a) um ou mais esporos de fungos de um agente biológico ou um agente de controle biológico, em que o um ou mais esporos de fungos são um ou mais esporos de fungos de Chlonostachys rosea var. catenulatum, e (b) um ou mais germinantes, em que os referidos um ou mais germinantes compreendem glicina betaína, um extrato de levedura, uma levedura inativa, paredes celulares de levedura, uma fração de parede celular de levedura, ou um produto de parede celular de levedura, ou uma combinação dos mesmos.
4. MÉTODO PARA AUMENTAR A EFICÁCIA DE UM AGENTE BIOLÓGICO ou um agente de controle biológico, caracterizado por compreender contatar o solo, uma praga, uma planta ou uma parte da planta com (a) um ou mais esporos de fungos de um agente biológico ou um agente de controle biológico, em que o um ou mais esporos de fungos são um ou mais esporos de fungos de Chlonostachys rosea var. catenulatum, e (b) um ou mais germinantes, em que os referidos um ou mais germinantes compreendem glicina betaína, um extrato de levedura, uma levedura inativa, paredes celulares de levedura, uma fração de parede celular de levedura, ou um produto de parede celular de levedura, ou uma combinação dos mesmos.
5. MÉTODO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 3 a 4, caracterizado por: (i) a melhoria do crescimento, desenvolvimento e/ou produtividade de uma planta compreende melhorar pelo menos um dos seguintes: o grau de micorrização, o enraizamento da planta, o crescimento da planta, a altura da planta, o florescimento da planta, a biomassa fresca da planta, a biomassa seca da planta, o rendimento da planta, a nutrição da planta, a resistência da planta a estresses abióticos e combinações dos mesmos; e/ou (ii) a parte da planta compreende ou consiste em uma semente; e/ou (iii) o contato compreende a aplicação foliar na planta ou na parte da planta do um ou mais esporos de fungos de um agente de controle biológico e do um ou mais germinantes.
6. MÉTODO PARA FABRICAR UMA COMPOSIÇÃO, caracterizado por compreender a mistura de (a) um ou mais esporos de fungos de um agente biológico ou um agente de controle biológico, em que o um ou mais esporos de fungos são um ou mais esporos de fungos de Chlonostachys rosea var. catenulatum, (b) um ou mais germinantes para obter uma composição compreendendo (a) o um ou mais esporos de fungos de um agente biológico ou um agente de controle biológico e (b) o um ou mais germinantes, em que os referidos um ou mais germinantes compreendem glicina betaína, um extrato de levedura, uma levedura inativa, paredes celulares de levedura, uma fração de parede celular de levedura, ou um produto de parede celular de levedura, ou uma combinação dos mesmos, opcionalmente em que: (i) o método compreende ainda misturar (a) um ou mais esporos de fungos de um agente biológico ou um agente de controle biológico e (b) um ou mais germinantes com (c) um veículo para obter uma composição compreendendo (a) o um ou mais esporos de fungos de um agente biológico ou um agente de controle biológico, (b) o um ou mais germinantes e (c) o veículo; e/ou (ii) a referida composição é para controlar um patógeno de planta ou uma praga ou melhorar o crescimento, desenvolvimento e/ou produtividade de uma planta.
7. USO, caracterizado por compreender uma quantidade eficaz de (a) um ou mais esporos de fungos de um agente biológico ou um agente de controle biológico, em que o um ou mais esporos de fungos são um ou mais esporos de fungos de Chlonostachys rosea var. catenulatum, (b) um ou mais germinantes, para aumentar a taxa de germinação do um ou mais esporos de fungos de um agente biológico ou um agente de controle biológico, em que os referidos um ou mais germinantes compreendem glicina betaína, um extrato de levedura, uma levedura inativa, paredes celulares de levedura, uma fração de parede celular de levedura, ou um produto de parede celular de levedura, ou uma combinação dos mesmos, opcionalmente em que o uso: (i) aumenta a taxa de germinação do um ou mais esporos de fungos de um agente biológico ou um agente de controle biológico, controlando assim um patógeno de planta ou praga ou melhorando o crescimento e o desenvolvimento e/ou produtividade de uma planta; (ii) aumenta a taxa de germinação e atividade antimicrobiana ou atividade pesticida do um ou mais esporos de fungos do agente de controle biológico em comparação com a taxa de germinação e atividade antimicrobiana ou atividade pesticida do um ou mais esporos de fungos de um agente de controle biológico quando usado sem o um ou mais germinantes; e/ou (iii) aumenta a taxa de germinação e a eficácia em melhorar o crescimento, desenvolvimento e/ou produtividade da planta do um ou mais esporos de fungos do agente biológico em comparação com a taxa de germinação e a eficácia em melhorar o crescimento, desenvolvimento e/ou produtividade da planta do um ou mais esporos de fungos do agente de controle biológico quando usado sem o um ou mais germinantes.
8. MÉTODO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6 ou uso, de acordo com a reivindicação 7, caracterizado pelo um ou mais germinantes compreenderem: (i) glicina betaína; (ii) um extrato de levedura ou uma levedura inativa, paredes celulares de levedura, uma fração de parede celular de levedura, ou um produto de parede celular de levedura, ou uma combinação dos mesmos, de preferência em que o um ou mais germinantes compreendem um extrato de levedura; ou (iii) uma combinação de glicina betaína e um extrato de levedura ou uma levedura inativa, paredes celulares de levedura, uma fração de parede celular de levedura, ou um produto de parede celular de levedura, ou uma combinação dos mesmos, de preferência em que o um ou mais germinantes compreendem uma combinação de glicina betaína e um extrato de levedura.
9. MÉTODO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6 ou 8, uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 7 a 8, caracterizado por um ou mais esporos de fungos serem: (a) (i) um ou mais esporos de fungos entomopatogênicos; e/ou (ii) um ou mais conídios ou clamidósporos; ou (iii) um ou mais esporos de fungos de C. rosea f. catenulata, opcionalmente em que C. rosea f. catenulata é a cepa J1446; e/ou (b) o um ou mais esporos de fungos de um agente de controle biológico serem um ou mais esporos de C. rosea f. catenulata e o um ou mais germinantes compreenderem glicina betaína, opcionalmente em que C. rosea f. catenulata é a cepa J1446; (c) o um ou mais esporos de fungos de um agente de controle biológico serem um ou mais esporos de C. rosea f. catenulata e o um ou mais germinantes compreenderem um extrato de levedura ou uma levedura inativa, paredes celulares de levedura, uma fração de parede celular de levedura, ou um produto de parede celular de levedura, ou uma combinação dos mesmos, de preferência em que o um ou mais germinantes compreendem um extrato de levedura e, opcionalmente em que C. rosea f. catenulata é a cepa J1446; (d) o um ou mais esporos de fungos de um agente de controle biológico serem um ou mais esporos de C. rosea f. catenulata e o um ou mais germinantes compreenderem uma combinação de glicina betaína e um extrato de levedura ou uma levedura inativa, paredes celulares de levedura, uma fração de parede celular de levedura, ou um produto de parede celular de levedura, ou uma combinação dos mesmos, de preferência em que o um ou mais germinantes compreendem uma combinação de glicina betaína e um extrato de levedura e, opcionalmente em que C. rosea f. catenulata é a cepa J1446.
10. MÉTODO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6 ou 8 a 9, ou uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 7 a 9, caracterizado por: (A) o patógeno de planta ser um fungo ou um oomycota; e/ou pertencer ao gênero Botrytis, Erysiphe, Rhizoctonia, Venturia, Didymella, Pythium, Phytophthora, Fusarium, Pseudoidium, Podosphaera e combinações dos mesmos, opcionalmente em que: (i) o patógeno de planta pertence ao gênero Botrytis, de preferência em que o patógeno de planta é Botrytis cinerea; (ii) o patógeno de planta pertence ao gênero Erysiphe, de preferência em que o patógeno de planta é Erysiphe necator; (iii) o patógeno de planta pertence ao gênero Rhizoctonia, de preferência em que o patógeno de planta é Rhizoctonia solani, Rhizoctonia bataticola; Rhizoctonia fragariae; Rhizoctonia leguminicola ou Rhizoctonia oryzae, de preferência em que o patógeno de planta é Rhizoctonia solani; (iv) o patógeno de planta pertence ao gênero Venturia, de preferência em que o patógeno de planta é Venturia inaequalis; (v) o patógeno de planta pertence ao gênero Pseudoidium, de preferência em que o patógeno de planta é Pseudoidium neolycopersici; ou (vi) o patógeno de planta pertence ao gênero Podosphaera, de preferência em que o patógeno de planta é Podosphaera xanthii; ou (B) a praga ser uma praga de inseto ou uma praga de ácaro, opcionalmente em que: (i) a praga é uma praga de inseto, pertencendo às espécies Diuraphis noxia, Bemisia argentifolii, Bemisia tabaci, Trialeurodes vaporariorum, Aleyrodes lonicerae, Diaphorina citri, Euphyllura olivine, Aphis gossypii, Myzus persicae, Macrosiphum euphorbiae, Aulacorthum solani, Heliothrips haemorrhoidalis, Frankliniella occidentalis, Frankliniella schulzei, Thrips tabaci, Scirtothrips dorsalis, Hercinothrips femoralis, Dalbulus maidis, Phenacoccus solenopsis, Pseudococcus longispinus, Paracoccus marginatus, Mahanarva fimbriolata, Deois flavopicta, Zulia entreriana, Notozulia entreriana, Hypothenemus hampei, Hedypathes betulinus, Cosmopolites sordidus, Gonipterus scutellatus, Agriotes spp., Plutella xyllostella, Helicoverpa armigera, Otiorhyncus sultacus, Fungus gnats, Exomala orientalis, Sciaridae, Otiorhynchus sulcatus, Strophosoma melanogrammum, S. capitatum, Phyllopertha horticola, Amphimallon solstitialis, Daktulosphaira vitifoliae, Diabrotica virgifera Spodoptera spp., Oligonychus ilicis, Planococcus citri, Anthonomus grandis, Brevicoryne brassicae ou Sphenophorus levis; ou (ii) a praga é uma praga de ácaro, pertencendo às espécies Tetranychus urticae, Tetranychus cinnabarinus, Brevipalpus phoenicis, Panonychus ulmi, Byrobia rubrioculus, Aculus schlectendali, Aculops lycopersici, Ixodes scapularis ou Ixodes pacificus; ou (C) praga pertencer às espécies Bemisia tabaci, Bemisia argentifolii, Trialeurodes vaporariorum, Hypothenemus hampei, Cosmopolites sordidus, Sphenophorus levis, Tetranychus urticae, Anthonomus grandis, Diaphorina citri, Helicoverpa armigera, Frankliniella occidentalis, Frankliniella schulzei, Thrips tabaci, Aphis gossypii, Myzus persicae, Oligonychus ilicis, Planococcus citri, Mahanarva fimbriolata, Agriotes spp., Diabrotica spp. ou Dalbulus maidis, opcionalmente em que a praga é Bemisia tabaci, de preferência em que a praga é Bemisia tabaci (Gennadius) (Hemiptera: Aleyrodidae).
11. MÉTODO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6 ou 8 a 10, ou uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 7 a 10, caracterizado pelo referido (a) um ou mais esporos de fungos de um agente biológico ou um agente de controle biológico e (b) um ou mais germinantes serem usados simultaneamente, separadamente ou sequencialmente, opcionalmente em que: (i) o referido (a) um ou mais esporos de fungos de um agente biológico ou um agente de controle biológico; e (b) um ou mais germinantes são usados simultaneamente; e/ou (ii) o um ou mais germinantes compreendem ou consistem em glicina betaína, e em que a glicina betaína é aplicada no solo ou no hospedeiro, planta ou parte da planta, ou está presente na composição a uma concentração de pelo menos 0,001%, 0,002%, 0,003%, 0,004%, 0,005%, 0,006%, 0,007%, 0,008%, 0,009%, 0,01%, 0,02%, 0,03%, 0,04%, 0,05%, 0,06%, 0,07%, 0,08%, 0,09%, 0,1%, 0,2%, 0,3%, 0,4%, 0,5%, 0,6%, 0,7%, 0,8%, 0,9%, 1%, 1,5%, 2%, 2,5%, 3%, 3,5%, 4%, 4,5% ou 5%; (iii) o um ou mais germinantes compreendem ou consistem em um extrato de levedura ou um derivado de levedura, e em que o extrato de levedura ou a levedura inativa, paredes celulares de levedura, uma fração de parede celular de levedura, ou um produto de parede celular de levedura, ou uma combinação dos mesmos são aplicados no solo ou no hospedeiro, planta ou parte da planta, ou estão presentes na composição a uma concentração de pelo menos 0,001%, 0,002%, 0,003%, 0,004%, 0,005%, 0,006%, 0,007%, 0,008%, 0,009%, 0,01%, 0,02%, 0,03%, 0,04%, 0,05%, 0,06%, 0,07%, 0,08%, 0,09%, 0,1%, 0,2%, 0,3%, 0,4%, 0,5%, 0,6%, 0,7%, 0,8%, 0,9%, 1%, 1,5%, 2%, 2,5%, 3%, 3,5%, 4%, 4,5% ou 5%; e/ou (iv) o um ou mais esporos de fungos de um agente biológico ou um agente de controle biológico são aplicados no solo ou no hospedeiro, planta ou parte da planta ou estão presentes na composição em uma concentração de pelo menos 1x106, 1x107, 1x108, 1x109, 1x1010, 1x1011 ou 1x1012 CFU/g.
12. MÉTODO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6 ou 8 a 11, ou uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 7 a 11, caracterizado por: (i) a planta ou parte da planta serem cereais, milho, arroz, gramíneas, cana-de-açúcar, plantas leguminosas, forrageiras, plantas ricas em óleo e proteínas, plantações de hortaliças, árvores frutíferas, plantações de viticultura, plantações urbanas ou plantações ornamentais; (ii) o um ou mais germinantes compreenderem ou consistirem em um extrato de levedura, e em que o extrato de levedura é um extrato de levedura solúvel; e/ou (iii) o um ou mais germinantes compreenderem ou consistirem em levedura inativa, paredes celulares de levedura, uma fração de parede celular de levedura, ou um produto de parede celular de levedura, ou uma combinação dos mesmos.
Applications Claiming Priority (3)
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|---|---|---|---|
| EP19176596 | 2019-05-24 | ||
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