BR112021009320A2 - uso de derivados de guar em composições biofungicidas - Google Patents

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Abstract

USO DE DERIVADOS DE GUAR EM COMPOSIÇÕES BIOFUNGICIDAS. A presente invenção refere-se a uma composição fungicida que compreende um biofungicida e um derivado de guar contendo pelo menos um grupo hidroxialquila.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para “USO DE DERIVADOS DE GUAR EM COMPOSIÇÕES BIOFUNGICIDAS”.
[001] Este pedido reivindica prioridade à USPA No. 62/772828 de- positada em 29 de novembro de 2018, sendo todo o conteúdo deste pedido incorporado no presente documento por referência para todos os fins.
[002] A presente invenção diz respeito ao uso de derivados de guar em composições biofungicidas, especialmente o uso de derivados de guar para o crescimento de micro-organismos, em particular de mi- cro-organismos supressores.
[003] As doenças causadas por espécies fúngicas são considera- das entre as mais difundidas e nocivas das plantas em todo o mundo. Atualmente, o controle de doenças fúngicas de plantas depende em grande parte da aplicação de certos produtos químicos. Embora alguns desses produtos químicos sejam conhecidos por terem problemas am- bientais e de saúde humana negativos, no entanto, tais agentes quími- cos continuam a ser amplamente utilizados devido à sua forte atividade contra importantes doenças fúngicas, e à disponibilidade limitada de al- ternativas ambientalmente mais seguras e eficazes.
[004] Geralmente, o controle biológico de doenças que geralmente infectam as plantas na zona radicular (rizosfera) e na zona foliar (filo- plano) é preferido em relação às metodologias mais tradicionais de con- trole de produtos químicos sintéticos. Tais agentes biocontroladores ge- ralmente causam pouco ou nenhum dano ao hospedeiro da planta ou ao meio ambiente, e alguns podem até favorecer o desenvolvimento normal das plantas. Entretanto, a maioria desses organismos biocontro- ladores são tipicamente muito limitados no escopo de sua eficácia con- tra doenças fúngicas, ou em sua capacidade de sobreviver e manter a atividade sob condições de formulação, condições de armazenamento,
aplicação sob condições práticas de campo e durante aplicações de tra- tamento.
[005] Tentativas foram feitas para controlar doenças fúngicas de plantas utilizando certos micro-organismos.
[006] Os micro-organismos utilizados na agricultura são geral- mente bactérias, leveduras, bolores, micorrizas.
[007] Existe, portanto, a necessidade de encontrar meios para manter ou mesmo melhorar a atividade e a eficiência dos micro-orga- nismos alvo.
[008] Há também a necessidade de encontrar meios de manter ou melhorar especificamente o crescimento de um micro-organismo alvo em um determinado meio.
[009] De modo mais geral, há uma necessidade de fornecer for- mulações úteis para melhorar seletivamente o crescimento de um micro- organismo alvo em um determinado meio.
[0010] Há também a necessidade de fornecer formulações úteis para estimular seletivamente um micro-organismo alvo em um determi- nado meio.
[0011] Os inventores descobriram que um derivado específico de guar foi útil para atender a essas necessidades.
[0012] Portanto, a presente invenção está relacionada à composi- ção fungicida que compreende um biofungicida e um derivado de guar contendo pelo menos um grupo hidroxialquila.
[0013] De acordo com a invenção, o derivado de guar da invenção pode aumentar a taxa de crescimento do biofungicida.
[0014] A taxa de crescimento de micro-organismos, em particular de micro-organismos supressivos, pode ser medida pelo seguinte mé- todo: Os micro-organismos são incubados em um meio de cultura na presença do guar. A amostragem é realizada em diferentes momen- tos a fim de determinar o número de unidades formadoras de colônias (CFU) usando o método de espalhamento. Com esta metodologia, ob- tém-se a evolução do número de células bacterianas (expressas como UFC) em função do tempo. O crescimento do micro-organismo segue uma lei exponencial: Nt=N0e(µt) com µ a taxa de crescimento dos micro- organismos. O valor da taxa de crescimento dos micro-organismos µ é obtido encaixando os dados experimentais em escala logarítmica, cor- responde à inclinação da evolução do ln(Nt) em função do tempo (grá- fico linear : ln(Nt)=ln(N0) + µt).
[0015] De acordo com uma forma de realização, a presente inven- ção diz respeito ao método para manter ou aumentar a taxa de cresci- mento de micro-organismos, em particular de micro-organismos supres- sores, compreendendo uma etapa de contato do referido micro-orga- nismo com um derivado de guar da invenção.
[0016] A presente invenção é baseada no uso de um derivado de guar da invenção que permite manter e conservar constante ao longo do tempo o efeito biofungicida dos micro-organismos, em particular do micro-organismo supressor, e em outras palavras, manter a taxa de crescimento dos micro-organismos, e em particular manter a taxa de crescimento bacteriano.
[0017] Vantajosamente, o uso do referido derivado de guar permite aumentar a atividade biofungicida de micro-organismos, em particular de micro-organismos supressores, em outras palavras, a atividade bio- fungicida de um micro-organismo é significativamente ou substancial- mente maior quando aplicado em associação ou combinação com um derivado de guar da invenção do que aquele obtido sem o uso do refe- rido derivado de guar.
[0018] Preferivelmente, de acordo com a invenção, ao usar o deri- vado de guar, como definido acima, a taxa de crescimento dos micro-
organismos é aumentada de pelo menos 5%, preferivelmente de pelo menos 10%, em comparação com a taxa de crescimento dos micro-or- ganismos quando nenhum derivado de guar é usado.
[0019] A presente invenção também refere-se ao uso de um micro- organismo, em particular de um micro-organismo supressor, e de um derivado de guar contendo pelo menos um grupo hidroxialquila, como biofungicida.
[0020] A presente invenção também refere-se a um kit que compre- ende pelo menos um micro-organismo, em particular um micro-orga- nismo supressivo, e pelo menos um derivado de guar contendo pelo menos um grupo hidroxialquila, bem como ao uso do referido kit como biofungicida.
[0021] De acordo com uma forma de realização, a presente inven- ção refere-se a um método de controle de organismo fúngico que inclui a aplicação de uma composição fungicida, conforme descrito preceden- temente.
[0022] A presente invenção também refere-se a um método de con- trole ou prevenção da infecção de uma planta por fungos fitopatogêni- cos, compreendendo a etapa de aplicação a essa planta de uma com- posição fungicida, conforme descrito precedentemente.
[0023] De acordo com uma forma de realização, o derivado de guar como mencionado acima é usado em uma planta, em uma semente ou no solo.
[0024] Ao longo da descrição, incluindo as reivindicações, o termo "compreendendo um" ou "compreendendo uma" deve ser entendido como sendo sinônimo do termo "compreendendo pelo menos um", a menos que especificado de outra forma, "entre" e "de... até..." deve ser entendido como sendo inclusivo dos limites.
[0025] Quando no presente documento usado, "porcentagem em peso", "% em peso", "porcentagem em peso", "% em peso" e suas vari- ações referem-se à concentração de uma substância como o peso dessa substância dividido pelo peso total da composição e multiplicado por 100.
[0026] Caso a descrição de quaisquer patentes, pedidos de patente e publicações no presente documento incorporadas por referência en- trem em conflito com a descrição do presente pedido, na medida em que possa tornar um termo pouco claro, a presente descrição terá pre- cedência. Guars
[0027] Os guars são polissacarídeos compostos pelos açúcares ga- lactose e manose. A cadeia principal é uma cadeia linear de resíduos de manose β 1,4-ligados cujos resíduos de galactose são 1,6-ligados a cada segunda manose em média, formando unidades laterais curtas.
[0028] O derivado de guar da invenção contém pelo menos um grupo hidroxialquila.
[0029] De acordo com uma das modalidades da invenção, o grupo hidroxialquila é um grupo C1-C6 hidroxialquila, por exemplo, escolhido do grupo que consiste em: um grupo hidroximetila, um grupo hidroxietila, um grupo hidroxipropila e um grupo hidroxibutila.
[0030] De acordo com uma das modalidades da invenção, o grupo hidroxialquila é um grupo hidroxipropila.
[0031] De acordo com qualquer uma das modalidades da invenção, o grau de hidroxialquilação (substituição molar ou MS) do derivado de guar da invenção significa o número de moléculas de óxido de alquileno consumidas pelo número de funções livres de hidroxila presentes no polissacarídeo.
[0032] De acordo com qualquer uma das modalidades da invenção, o derivado de guar da invenção tem um grau de hidroxialquilação (MS) maior ou igual a cerca de 0,1, por exemplo, maior ou igual a cerca de
0,2.
[0033] De acordo com qualquer uma das modalidades da invenção, o derivado de guar da invenção tem um grau de hidroxialquilação (MS) menor ou igual a cerca de 3,0, por exemplo, menor ou igual a cerca de 2,0.
[0034] De acordo com qualquer uma das modalidades da invenção, o derivado de guar da invenção tem um grau de hidroxialquilação (MS) compreendido entre cerca de 0,1 e cerca de 3,0, por exemplo, entre cerca de 0,1 e cerca de 2,0.
[0035] Um derivado de guar da invenção contendo pelo menos um grupo hidroxialquila pode ser preparado, por exemplo, reagindo os óxi- dos de alqueno correspondentes (como, por exemplo, óxidos de propi- leno) com o guar de modo a obter um derivado de guar que foi modifi- cado com o grupo hidroxialquila (por exemplo, grupos hidroxipropila).
[0036] Pela expressão "peso molecular médio" do derivado de guar da invenção, entende-se a massa molecular média do referido derivado de guar.
[0037] O peso molecular médio de um derivado de guar pode ser medido por SEC-MALS (Cromatografia por Exclusão de Tamanho com detecção por Multi-Angle Light-Scattering). Um valor de 0,140 para dn/dc é usado para as medidas de peso molecular. Um detector Wyatt MALS é calibrado usando um padrão de polietileno glicol 22,5 KDa. To- dos os cálculos das distribuições de peso molecular são realizados uti- lizando o software ASTRA de Wyatt. As amostras são preparadas como soluções 0,05% na fase móvel (100 mM de Na2NO3, 200 ppm de NaN3, 20 ppm de pDADMAC) e filtradas através de filtros PVDF de 0,45 µm antes da análise. Os pesos moleculares médios são expressos por peso.
[0038] De acordo com qualquer uma das modalidades da invenção, o peso molecular médio do derivado de guar da invenção é superior a cerca de 100.000 g/mol, por exemplo, superior a cerca de 150.000 g/mol, por exemplo, superior a cerca de 200.000 g/mol.
[0039] De acordo com qualquer uma das modalidades da invenção, o peso molecular médio do derivado de guar da invenção é inferior a cerca de 3.000.000 g/mol.
[0040] De acordo com uma das modalidades da invenção, o peso molecular médio do derivado de guar é compreendido entre cerca de
100.000 g/mol e cerca de 3.000.000 g/mol, por exemplo, entre cerca de
150.000 g/mol e cerca de 3.000.000 g/mol, por exemplo, entre cerca de
200.000 g/mol e 3.000.000 g/mol.
[0041] De acordo com qualquer uma das modalidades da invenção, o derivado de guar da invenção pode conter ainda pelo menos um grupo catiônico.
[0042] Quando no presente documento usado, o termo "catiônico" abrange não somente grupos com carga positiva, porém, também gru- pos que podem se tornar positivamente carregados dependendo do pH.
[0043] Um derivado catiônico de guar da invenção é um guar que foi modificado quimicamente para fornecer a esse polissacarídeo uma carga positiva permanente líquida em um meio aquoso de pH neutro. Aqueles que não são permanentemente carregados, por exemplo, deri- vados de guar que podem ser catiônicos abaixo de um determinado pH e neutros acima desse pH também se enquadram no escopo da pre- sente invenção.
[0044] De acordo com qualquer uma das modalidades da invenção, os termos "agentes catiônicos", "grupos catiônicos" e "porções catiôni- cas" incluem amoníacos (que têm uma carga positiva) mas também ami- nas primárias, secundárias e terciárias e seus precursores (que podem levar a compostos com carga positiva).
[0045] De acordo com a invenção, o derivado de guar pode ser de- rivatizado ou modificado de forma a conter um grupo catiônico.
[0046] De acordo com uma das modalidades da invenção, o deri- vado de guar da invenção pode resultar da reação de qualquer guar, com um agente catiônico.
[0047] Os agentes catiônicos da presente invenção são definidos como compostos que, por reação com os grupos hidroxila do derivado de guar, podem levar a um derivado de guar compreendendo pelo me- nos um grupo catiônico, de acordo com a invenção.
[0048] Os agentes catiônicos da presente invenção são definidos como compostos que contêm pelo menos um grupo catiônico. Os agen- tes catiônicos compreendem os agentes que podem levar a guars catiô- nicos modificados.
[0049] Um grupo de reagentes derivatizantes adequados normal- mente contém um grupo funcional reativo, tal como um grupo epóxi, um grupo haleto, um grupo éster, um grupo anidrido ou um grupo etilenica- mente insaturado, e pelo menos uma porção catiônica ou um precursor de tal porção catiônica.
[0050] Quando no presente documento usado, o termo "agente de- rivatizante" significa um agente que contém pelo menos uma porção ca- tiônica que é enxertada a um guar. O termo "agente derivatizante" en- globa os termos "agente catiônico" e "agente enxertante".
[0051] Em uma modalidade da invenção, as porções catiônicas po- dem ser ligadas ao grupo funcional reativo do agente derivatizante por um grupo de ligação bivalente, como um grupo alquileno ou oxialqui- leno. As porções catiônicas adequadas incluem grupos de aminoácidos primários, secundários ou terciários ou grupos quaternários de amônio, sulfônio ou fosfínio.
[0052] O agente derivatizante pode incluir uma porção catiônica, ou um precursor de uma porção catiônica, que contém uma porção catiô- nica de nitrogênio, mais tipicamente, uma porção quaternária de amô-
nio. As porções típicas de amônio quaternário são porções trialquilamô- nio, como as porções trimetilamônio, trimetilamônio, ou porções de tri- butilamônio, porções de arildialquilamônio, como as porções de benzil- dimetilamônio, e porções de amônio nas quais o átomo de nitrogênio é membro de uma estrutura em forma de anel, como porções de piridínio e porções de imidazolina, cada uma em combinação com um contraíon, normalmente um contraíon de cloreto, brometo ou iodeto.
[0053] De acordo com uma das modalidades da invenção, exem- plos de agentes catiônicos, que levam a derivados catiônicos de guar da invenção são:  epóxidos catiônicos, como cloreto de 2,3-epoxipropiltrimetilamônio, brometo de 2,3-epoxipropiltrimetilamônio, iodeto de 2,3-epoxipropiltri- metilamônio;  compostos de nitrogênio catiônico funcionais de cloroidrina, como o cloreto de 3-halogeno-2-hidroxipropilatrimetilamônio, por exemplo, clo- reto de 3-cloro-2-hidroxipropil trimetilamônio,  monômeros catiônicos etilenicamente insaturados ou seus precurso- res, como os precursores de sal de cloreto de trimetilamoniopropil me- tacrilamida, sal de metilsulfato de trimetilamoniopropil metacrilamida, cloreto de dialil dimetil amônio, cloreto de vinil benzil trimetilamônio, di- metilaminopropil metacrilamida (amina terciária) de monômeros catiôni- cos, como N-vinil formamida, N-vinil acetamida (cujas unidades podem ser hidrolisadas após a polimerização ou enxertadas em unidades de aminas vinílicas).
[0054] Em uma modalidade da invenção, os agentes catiônicos, que levam aos derivados catiônicos de guar da invenção são os epóxidos catiônicos, como cloreto de 2,3-epoxipropiltrimetilamônio, brometo de 2,3-epoxipropiltrimetilamônio e iodeto de 2,3-epoxipropiltrimetilamônio.
[0055] De acordo com a invenção, os grupos catiônicos podem ser introduzidos em um guar reagindo o material de partida de guar com um agente derivatizante que compreende um grupo funcional reativo e pelo menos uma porção catiônica (ou um precursor da porção catiônica).
[0056] De acordo com a invenção, os grupos catiônicos presentes no derivado de guar são incorporados ao material de partida de guar por reação dos grupos hidroxila do referido guar com um agente catiônico.
[0057] Os grupos catiônicos preferidos são escolhidos a partir do grupo que consiste em: grupos de aminoácidos primários, secundários ou terciários, grupos de amônio quaternário, sulfônio ou fosfínio, e suas misturas. Em uma modalidade preferida particular, o grupo catiônico é escolhido entre os grupos trialquilamônio, tais como grupos trimetilamô- nio, grupos trimetilamônio, grupos tributilamônio, grupos arildialquilamô- nio, como grupos benzildimetilamônio, e grupos amônio nos quais o átomo de nitrogênio é membro de uma estrutura de anel, tais como gru- pos piridínio e grupos imidazolina, cada um em combinação com um contraíon, tipicamente um contraíon de cloreto, brometo ou iodeto. Pre- ferivelmente, cada grupo catiônico contém pelo menos uma carga catiô- nica.
[0058] A cationicidade do derivado de guar pode ser expressa em termos de grau de substituição.
[0059] Quando no presente documento usado, a expressão "grau catiônico de substituição" (DScat) significa o número médio de moles de grupos catiônicos por mol de unidade de açúcar. O (DScat) pode ser medido por meio de 1H-NMR (solvente : D2O).
[0060] Uma vez obtido o espectro 1H NMR, a integração do multi- pleto de picos correspondentes ao próton anomérico em todas as uni- dades guar, geralmente entre 3,2-4,3 ppm, é normalizada para unidade. O pico de interesse, aquele correspondente aos prótons metílicos do grupo amônio quaternário nas unidades guar, é centralizado em torno de 1,8 ppm. Este pico é integrado para 9 prótons dado que existem 3 grupos metila na função de amônio. Portanto, o cálculo do (DScationic)
para o caso do agente catiônico, cloreto de 2,3-epoxipropiltrimetilamô- nio é o seguinte: INTEGRAL _ N ( Me ) 3 DS  /9 INTEGRAL _ anomeric anomérico _ proton próton
[0061] De acordo com uma das modalidades da invenção, o deri- vado de guar da invenção tem um grau catiônico de substituição (DScat) igual a zero.
[0062] De acordo com outra das modalidades da invenção, o deri- vado de guar da invenção tem um grau catiônico de substituição (DScat) maior ou igual a cerca de 0,02, por exemplo, maior ou igual a cerca de 0,05, por exemplo, maior ou igual a cerca de 0,08, por exemplo, maior ou igual a cerca de 0,09, por exemplo, maior ou igual a cerca de 0,10.
[0063] De acordo com qualquer uma das modalidades da invenção, o derivado de guar da invenção tem um grau catiônico de substituição (DScat) menor ou igual a cerca de 3,0.
[0064] De acordo com uma modalidade específica, o derivado de guar da invenção pode ser um cloreto de hidroxipropil guar hidroxipro- piltrimônio.
[0065] O grau de hidroxialquilação (substituição molar ou MS) do derivado de guar contendo pelo menos um grupo hidroxialquila, ou seja, o número de moléculas de óxido de alquileno consumidas pelo número de funções livres de hidroxila presentes no guar, pode ser compreendido entre 0 e 3, preferivelmente entre 0 e 1,7. Como exemplo, um MS de 1 pode representar uma unidade de óxido de etileno por unidade de mo- nossacarídeo.
[0066] De acordo com uma forma de realização, o Grau de Substi- tuição (DS) dos derivados de guar, ou seja, o número médio de grupos hidroxila substituídos por unidade de açúcar, é compreendido entre 0,005 e 3. O DS pode ser determinado, notavelmente, por titulação. O derivado de guar da presente invenção pode ter um DS entre 0,005 e 2. Preferivelmente, o derivado de guar da presente invenção tem um DS entre 0,005 e 1. Mais preferivelmente, o derivado de guar da presente invenção tem um DS entre 0,12 e 0,5.
[0067] A Densidade de Carga (CD) dos derivados de guar pode ser compreendida entre 0,01 e 4,9 meq/g, preferivelmente entre 0,4 e 2,1 meq/g. A densidade de carga refere-se à relação do número de cargas positivas por grama de polímero. Por exemplo, CD=1 meq/g significa que há 0,001 carga por grama de polímero. A densidade de carga mul- tiplicada pelo peso molecular do polímero determina o número de sítios positivamente carregados em uma determinada cadeia de polímeros.
[0068] De acordo com a presente invenção, o derivado de guar pode ter um peso molecular médio (Mw) entre cerca de 2.000 Daltons e
90.000 Daltons, preferivelmente, o derivado de guar tem um peso mo- lecular médio entre cerca de 5.000 Daltons e 90.000 Daltons, mais pre- ferivelmente, o derivado de guar tem um peso molecular médio entre cerca de 10.000 Daltons e 60.000 Daltons, ainda mais preferivelmente, o derivado de guar tem um peso molecular médio entre cerca de 10.000 Daltons e 50.000 Daltons.
[0069] O derivado de guar de acordo com a presente invenção pode ser preparado despolimerizando os guars cationicamente modificados que têm alto peso molecular, de forma a "dividir" os polímeros de guar nos tamanhos desejados. É apreciado que o derivado de guar da pre- sente invenção também pode ser preparado por despolimerização de guars naturais, seguido por reações de cationização para fornecer os polímeros com a funcionalidade catiônica. Vários métodos de despoli- merização são bem conhecidos na técnica e podem ser usados para a presente invenção, tal como o tratamento usando peroxo (por exemplo, peróxido de hidrogênio) e a irradiação. Exemplos de tais métodos são descritos em Patente Norte-americana No. 4,547,571, Patente Norte- americana No. 6,383,344 e Patente Norte-americana No. 7,259,192.
[0070] A cationização de guars pode ser feita facilmente por uma pessoa versada, usando métodos comumente conhecidos na técnica. Vários métodos para fornecer gomas guar com funcionalidade catiônica são conhecidos na técnica, por exemplo, como descrito na Pub. De Pa- tente Norte-americana No. 2008/0112907. Vários métodos de reticula- ção de guars com e sem modificação catiônica de guars também são conhecidos, veja, por exemplo, a Patente Norte-americana No.
5.532.350 e Patente Norte-americana No. 5.801.116. Alternativamente, os guars de baixo peso molecular podem ser obtidos através da colheita de feijões de guar que ainda estão em um estágio inicial de desenvolvi- mento, de modo que os feijões de guar colhidos contenham gomas guar naturais de baixo peso molecular. Então, as gomas guar podem ser sub- metidas à cationização para proporcionar-lhes funcionalidade catiônica.
[0071] Os derivados de guar, como definidos acima, podem ser uti- lizados em uma composição.
[0072] A composição que contém o derivado de guar pode ser uma composição sólida ou líquida. No caso em que a composição é sólida, a composição pode ser na forma de um pó, uma partícula, um aglome- rado, um floco, um grânulo, uma pélete, uma pastilha, um tijolo, uma pasta, um bloco como um bloco moldado, uma dose unitária, ou outra forma sólida conhecida por aqueles versados na técnica. Preferivel- mente, a composição sólida é na forma de um pó ou um grânulo.
[0073] Em alguns aspectos, a composição contendo a guar tem a forma de um grânulo. Os grânulos contendo o derivado de guar podem ser preparados em um procedimento de três etapas: granulação úmida seguida de secagem e peneiramento. A etapa de granulação úmida en- volve notavelmente a introdução e mistura de pós derivados de guar e um transportador, e opcionalmente outros ingredientes, em equipamen- tos de granulação (como um granulador de mistura). A mistura é condu- zida com pulverização de água para a mistura. A etapa de granulação úmida produzirá grânulos úmidos contendo os derivados de guar. A re- lação em peso entre o transportador e o derivado de guar que devem ser misturados pode estar entre 20:1 a 1:1, preferivelmente, entre 20:1 a 10:1. O teor de água introduzido pode ser compreendido entre 10 % em peso a 50 % em peso com base no peso total dos grânulos úmidos. O transportador pode ser dióxido de silício, sílica amorfa, sílica precipi- tada, sílica amorfa hidratada, sílica precipitada, silicato de cálcio sinté- tico amorfo hidratado, sílica precipitada hidrofobizada, sílica gel, silicato de alumínio sódico, argila, zeólito, bentonita, silicato em camadas, cau- lim, carbonato de sódio, bicarbonato de sódio, sulfato de sódio, tripoli- fosfato de sódio, cloreto de sódio, silicato de sódio (copo de água), clo- reto de magnésio, cloreto de cálcio, cloreto de amônio, sulfato de mag- nésio, carbonato de cálcio, óxido de cálcio e/ou sulfato de cálcio, ou uma mistura dos mesmos. Notavelmente, o transportador é selecionado a partir de cloreto de cálcio e carbonato de cálcio. A etapa de secagem envolve notavelmente a secagem dos grânulos úmidos, utilizando o fluxo de ar quente. Esta etapa geralmente pode ser conduzida em um leito de fluido equipado com uma entrada de ar e uma saída de ar. A etapa de peneiramento pode ser conduzida com o uso de uma placa vibratória.
[0074] Os grânulos podem ter um diâmetro de 0,1 a 6 mm. Geral- mente, os grânulos normais têm um diâmetro de 2-6 mm e os microgrâ- nulos têm um diâmetro de 0,1-2 mm. Preferivelmente, microgrânulos tendo um diâmetro de 0,5-1,6 mm são usados.
[0075] Alternativamente, os grânulos contendo o derivado de guar podem ser preparados usando métodos de extrusão bem conhecidos por uma pessoa versada na técnica. Os métodos de extrusão são des- critos na Patente Norte-americana US6146570. Por exemplo, o deri- vado de guar e o transportador, e opcionalmente outros ingredientes, podem ser misturados com aquecimento. A relação em peso entre o transportador e o derivado de guar pode estar entre 20:1 e 1:1. Em se- guida, um aglutinante pode ser fundido e introduzido na mistura do de- rivado de guar e do transportador. Então, uma etapa de extrusão pode ser realizada com a temperatura do extrusor mantida entre 55°C e 65°C. Os grânulos macios e quentes podem ser formados e posteriormente resfriados abaixo do ponto de solidificação do aglutinante fundido (à temperatura ambiente, por exemplo), a fim de obter grânulos sólidos.
[0076] Caso a composição (composição de tratamento de semente ou composição para aplicação foliar) seja líquida, a composição líquida pode ser uma suspensão, uma dispersão, uma lama, uma solução em um transportador líquido selecionado a partir de água, óleos solventes orgânicos ou uma mistura dos mesmos. A composição líquida pode ser preparada misturando os derivados de guars como descrito acima com o transportador de líquido, opcionalmente com outros componentes, usando métodos convencionais. Preferivelmente, a composição líquida é na forma de uma solução aquosa. A composição pode compreender de 1 % em peso a 60 % em peso do derivado de guar com base no peso total da composição. Preferivelmente, a composição compreende de 5 % em peso a 35 % em peso do derivado de guar com base no peso total da composição. Em alguns aspectos, a composição compreende de 20 % em peso a 30 % em peso do derivado de guar com base no peso total da composição. Ao realizar o tratamento de sementes em escala indus- trial, é preferível que a composição líquida utilizada para o tratamento de sementes contenha alta concentração do derivado de guar, de modo que seja necessário menos volume da composição líquida seja reque- rida para atingir a dosagem desejada para o tratamento (ou seja, a re- lação em peso do derivado de guar para as sementes a serem tratadas). O uso de um pequeno volume da composição líquida pode economizar custos e é menos entediante. Entretanto, quando a concentração do de- rivado de guar na composição líquida aumenta, a fluidez da composição líquida diminuirá significativamente. Como resultado, a composição lí- quida pode se tornar muito "espessa" para ser aplicada efetivamente à semente ou ao solo, e tem pouca capacidade de se espalhar na super- fície da semente ou também no solo. Por exemplo, uma composição aquosa que compreende 3 % em peso de um derivado de guar de alto peso molecular pode já ser muito espessa e, portanto, ter baixa fluidez. Uma vantagem da presente invenção é que o derivado de guar de acordo com a presente invenção tem peso molecular relativamente baixo. Neste caso, a composição líquida resultante pode manter exce- lente fluidez mesmo que o derivado de guar esteja presente em altas concentrações e, portanto, tal composição líquida pode ser convenien- temente utilizada para tratar as sementes ou o solo. Em uma forma de realização, o método da presente invenção compreende uma etapa na qual a semente é revestida com a composição como descrita acima. Então, a semente revestida pode ser aplicada sobre ou no solo, notada- mente, a fim de colocar em contato a semente revestida com o solo.
[0077] Técnicas de revestimento adequadas podem ser utilizadas para revestir a semente ou aglomeração das sementes com a composi- ção de acordo com a presente invenção. Os equipamentos que podem ser utilizados para revestimento podem incluir, porém, não estão limita- dos a revestidores de tambores, revestidores rotativos, tambores de tur- bilhonamento, leitos fluidizados e leitos de jorro. É apreciado que qual- quer equipamento ou técnica adequada conhecida por uma pessoa ver- sada na técnica pode ser usado. A semente pode ser revestida através de um processo de revestimento contínuo ou em bateladas. A semente pode ser revestida com a composição de acordo com a presente inven- ção, que é tanto na forma sólida como líquida. Preferivelmente, uma dispersão ou solução aquosa é utilizada.
[0078] As sementes podem ser separadas antes da etapa de reves-
timento. Em uma forma de realização, meios mecânicos, como uma pe- neira, podem ser usados para a separação das sementes. As sementes separadas podem, então, ser introduzidas em uma máquina de revesti- mento tendo um reservatório de sementes. Em uma forma de realiza- ção, as sementes são combinadas com a composição no presente do- cumento descrita, opcionalmente com um ligante e/ou adesivo, em um recipiente de mistura.
[0079] Em alguns aspectos, uma ou mais camadas de revestimento que compreende a composição de acordo com a presente invenção po- dem ser adicionadas às sementes ou à aglomeração das mesmas. As camadas externas podem ser introduzidas sequencialmente através do revestimento das sementes ou da aglomeração das mesmas em um tambor rotativo.
[0080] Aglomeradores ou dispositivos de aglomerador também po- dem ser utilizados. O revestimento pode ser realizado dentro de um re- vestimento rotativo, colocando as sementes dentro de uma câmara ro- tativa, que empurra as sementes contra a parede interna da câmara. As forças centrífugas e as barras misturadoras colocadas dentro do reves- tidor permitem que as sementes girem e se misturem com uma camada de revestimento que compreende a composição de acordo com a pre- sente invenção. O ligante ou outros materiais de revestimento podem ser bombeados para o centro próximo do revestidor em um disco atomi- zador que gira junto com a câmara de revestimento. Ao bater no disco do atomizador, o adesivo líquido é, então, direcionado para fora em pe- quenas gotas sobre as sementes.
[0081] As técnicas de revestimento de sementes também incluem, por exemplo, a colocação das sementes em uma panela ou tambor ro- tativo. As sementes são, então, misturadas com água ou outro líquido e, em seguida gradualmente, um pó inerte fino, por exemplo, terra dia-
tomácea, é adicionado à panela de revestimento. Cada semente em né- voa se torna o centro de uma massa de pó, camadas ou revestimentos que gradualmente aumentam de tamanho. A massa é, então, arredon- dada e suavizada pela ação do turbilhonamento na panela, semelhante a seixos na praia. As camadas de revestimento são compactadas por compressão a partir do peso do material na panela. Os ligantes são fre- quentemente incorporados perto do final do processo de revestimento para endurecer a camada externa da massa. Os ligantes também po- dem reduzir a quantidade de poeira produzida pelo produto acabado no manuseio, expedição e semeadura. Técnicas de peneiramento, como o peneiramento manual frequente, são muitas vezes utilizadas para elimi- nar espaços em branco ou duplos, e para garantir o tamanho uniforme. Por exemplo, a tolerância para as composições de revestimento de se- mentes no presente documento descritas pode ser de +/-1/64 polegadas (0,4mm), que é o padrão americano para o comércio de sementes para dimensionamento, estabelecido muito antes da introdução de revesti- mentos. Por exemplo, a semente de alface revestida é semeada com mais frequência com uma plantadora de correia através de buracos re- dondos de 3,2 mm (8/64 polegadas) de diâmetro na correia. Este tama- nho de buraco requer que as sementes de alface revestidas com a com- posição de acordo com a presente invenção possam ser dimensionadas sobre uma tela de 7,5/64 polegadas (3,0 mm) e através de uma tela de 8,5/64 polegadas (3,4 mm).
[0082] Em uma modalidade da presente invenção, a semente pode ser contatada com a composição usando um processo de "revestimento in situ", notadamente implantando em um buraco ou sulco no solo uma semente de uma planta, e então aplicando a composição de acordo com a presente invenção para cercar ou parcialmente cercar, ou para ser adjacente à semente, de modo que a semente entre em contato com a composição, notadamente com o derivado de guar. De acordo com a invenção, o buraco pode ser notavelmente um buraco, uma cavidade ou uma área oca. A semente pode ser aquela que não tenha sido tratada por nenhum agente, ou uma semente que tenha sido tratada com um agroquímico (como fungicida e inseticida) e que não tenha sido tratada com a composição da presente invenção. Preferivelmente, a composi- ção é depositada no transportador para fornecer um grânulo ou um mi- crogrânulo antes de ser aplicada. O grânulo ou o microgrânulo contendo o derivado de guar pode ser preparado usando os métodos descritos acima.
[0083] Ainda em outra forma de realização, o derivado de guar de acordo com a presente invenção (ou a composição contendo o referido derivado de guar) é administrado a um solo no qual uma planta é culti- vada. Em seguida, as sementes da planta podem ser aplicadas no solo para que as sementes entrem em contato com a composição, notada- mente com o derivado de guar. Notavelmente, a composição em forma líquida, como na forma de solução/dispersão aquosa, ou a composição em forma sólida, como em pó ou grânulo, pode ser utilizada.
[0084] Preferivelmente, a aplicação da semente e a aplicação da composição de acordo com a presente invenção são realizadas meca- nicamente. Aprecia-se que uma ou ambas as aplicações referenciadas também possam ser realizadas manualmente.
[0085] De acordo com uma modalidade preferida, o derivado de guar, como definido acima, é utilizado na forma líquida.
[0086] Em uma modalidade da presente invenção, o derivado de guar é usado em uma quantidade que varia de 50 a 500 g / semente quintal. Biofungicida
[0087] O termo "biofungicida" quando no presente documento usado significa um componente que controla ou elimina a atividade fún- gica por meios biológicos, como o uso de um micro-organismo como a bactéria, em oposição ao uso de um agente químico sintético.
[0088] Por "micro-organismo" entende-se no presente documento um organismo microscópico, que pode existir em sua forma unicelular ou como uma colônia de células. Em uma modalidade particular, esse micro-organismo é unicelular.
[0089] A presente invenção refere-se mais particularmente aos mi- cro-organismos do solo, também conhecidos como micróbios do solo.
[0090] De acordo com uma forma de realização, os micro-organis- mos são fungos, em particular fungos unicelulares, ou bactérias. Em uma modalidade particular, os micro-organismos são bactérias.
[0091] De acordo com uma forma de realização, o biofungicida da invenção é um micro-organismo supressivo, ou seja, um micro-orga- nismo tendo uma ação supressiva sobre fungos patogênicos.
[0092] "Micro-organismo supressivo" quando no presente docu- mento usado significa qualquer micro-organismo que possa matar ou inibir o crescimento de fungos por qualquer meio. Micro-organismos su- pressores, por exemplo, bactérias supressoras, podem ser seleciona- dos, os quais inibem ou matam fungos patogênicos de inúmeras manei- ras, incluindo a mudança do pH do microambiente para um que inibe ou mata os fungos, e produção de subprodutos prejudiciais como cianeto de hidrogênio, substâncias antifúngicas, enzimas degradantes da pa- rede celular (líticas) e compostos quelantes de ferro chamados sideró- foros.
[0093] De acordo com uma forma de realização, as bactérias de acordo com a invenção são escolhidas entre as bactérias Gram-positi- vas.
[0094] Quando no presente documento usado, o termo "bactérias gram-positivas" refere-se às células bacterianas que coram violeta (po- sitiva) no ensaio de coloração de Gram-positiva. A coloração Gram aglu- tina peptidoglicano que é abundante na parede celular das bactérias gram-positivas. Em contraste, a parede celular das "bactérias gram-ne- gativas” tem uma fina camada de peptidoglicano, portanto as bactérias gram-negativas não retêm a coloração e permitem a absorção da con- tracoloração no ensaio de coloração de Gram.
[0095] As bactérias Gram-positivas são bem conhecidas pela pes- soa versada e incluem bactérias dos gêneros Actinobaculum, Actino- myces, Arthrobacter, Bifidobacterium, Frankia, Gardnerella, Lysinibaci- llus, Microbacterium, Micrococcus, Micromonospora, Mycobacterium, Nocardia, Rhodococcus, Streptomyces, Bacillus, Clostridium, Listeria, Enterococcus, Lactobacillus, Leuconostoc, Mycoplasma, Ureaplasma, Lactococcus, Paenibacillus, Pediococcus, Acetobacterium, Eubacte- rium, Heliobacterium, Heliospirillum e Sporomusa.
[0096] Em uma modalidade particular, as bactérias Gram-positivas são selecionadas a partir do grupo que consiste em bactérias dos gêne- ros Streptomyces e Bacillus.
[0097] Em uma modalidade particular, as bactérias Gram-positivas são bactérias do gênero Bacillus, em particular bactérias selecionadas a partir do grupo que consiste em Bacillus pumilus (como cepa de B. pumilus GB34 (YieldShield; Bayer), cepa de B. pumilus QST2808 (So- nata; Bayer) e cepa de B. pumilus BU F-33), Bacillus firmus (como cepa de B. firmus 1-1582 (Votivo e Nortica; Bayer)), Bacillus subtilis (como cepas de B. subtilis GB03 (Kodiak; Bayer), MBI 600 (Subtilex; Becker Underwood) e QST 713 (Serenade; Bayer), cepa de B. subtilis GB122 plus, cepa de B. subtilis EB120, cepa de B. subtilis J-P13, B. subtilis FB17, cepas de B. subtilis QST30002 e QST3004 (NRRL B-50421 e NRRLB-50455), cepas de B. subtilis QST30002 e QST3004 (NRRL B- 50421 e NRRLB-50455) mutantes sandpaper, cepa de B. subtilis QST 713, cepa de B. subtilis DSM 17231, cepa de B. subtilis KAS-001, cepa de B. subtilis KAS-006, cepa de B. subtilis KAS-009, cepa de B. subtilis KAS-010, cepa de B. subtilis KAS-011 e cepa de B. subtilis CCT0089),
Bacillus thuringiensis (como cepa de B. thuringiensis galleriae SDS-502, cepa de B. thuringiensis kurstaki VBTS 2546, de B. thuringiensis subsp. kurstaki SA 11, cepa de B. thuringiensis subsp. kurstaki SA 12, cepa de B. thuringiensis subsp. kurstaki ABTS 351, cepa de B. thuringiensis subsp. kurstaki EG 2348, mutantes deficientes de enterotoxina quádru- plos da cepa de B. thuringiensis subsp. kurstaki VBTS 2477, cepa de B. thuringiensis subsp. aizawai GC 91, e B. thuringiensis subsp. tenebrio- nis), ou bactérias do gênero Streptomyces, em particular bactérias da espécie Streptomyces K61.
[0098] Em uma modalidade mais particular, as bactérias Gram-po- sitivas são bactérias da espécie B. subtilis, B. thuringiensis ou B. mega- terium. Em ainda uma modalidade particular, as bactérias Gram-positi- vas são B. subtilis CCT 0089, B. thuringiensis CCT 2335 ou B. megate- rium CCT 0536.
[0099] De acordo com uma forma de realização, as bactérias de acordo com a invenção são escolhidas dentre as bactérias Gram-nega- tivas.
[00100] Bactérias Gram-negativas são bem conhecidas pela pessoa versada e incluem bactérias dos gêneros Acetobacter, Achromobacter, Actinobacillus, Agrobacterium, Allorhizobium, Azospirillum, Azotobacter, Bordetella, Bradyrhizobium, Brucella, Burkholderia, Campylobacter, Carbophilus, Chelatobacter, Chryseobacterium, Citrobacter, Delftia, En- terobacter, Erwinia, Escherichia, Flavobacterium, Francisella, Frateuria, Gluconobacter, Helicobacter, Haemophilus, Kalstia, Klebsiella, Legio- nella, Mesorhizobium, Moraxella, Neisseria, Pantoea, Pasteurella, Phyllobacterium, Proteus, Pseudomonas, Rhizobium, Salmonella, Ser- ratia, Shigella, Sinorhizobium, Treponema, Vibrio, Xanthomonas e Yer- sinia.
[00101] Em uma modalidade particular, as bactérias Gram-negativas são selecionadas a partir do grupo que consiste em bactérias do gênero
Pseudomonas.
[00102] Em uma modalidade particular, as bactérias Gram-negativas são bactérias do gênero Acetobacter, em particular bactérias do gênero Pseudomonas, em particular bactérias selecionadas a partir do grupo que consiste em Pseudomonas putida, Pseudomonas fluorescens, Pseudomonas protegens, Pseudomonas chlororaphis (como cepa de Pseudomonas chlororaphis MA342) , Pseudomonas aurantiaca, Pseu- domonas mendocina e Pseudomonas rathonis.
[00103] Em modalidades mais particulares, as bactérias Gram-nega- tivas são bactérias da espécie B. japonicum ou P. putida. Ainda em uma modalidade particular, as bactérias Gram-negativas são cepa de B. ja- ponicum CCT 4065 ou P. putida CCT 5357.
[00104] De acordo com qualquer uma das modalidades da invenção, o micro-organismo pode ser, por exemplo, uma bactéria escolhida entre as espécies B. subtilis, B. megaterium, B. thuringiensis, B. japonicum ou P. putida.
[00105] De acordo com uma forma de realização, os micro-organis- mos de acordo com a invenção são fungos, em particular os fungos uni- celulares.
[00106] Os fungos são bem conhecidos pela pessoa versada e in- cluem Ascomycetes, Glomeromycetes e Basidiomycetes. Em uma mo- dalidade particular, os referidos fungos são selecionados dentre As- comycetes phylum, em particular a partir do grupo que consiste nos gê- neros Trichoderma, Metarhizium, Beauveria, Lecanicillium, Purpureocil- lium, Gliocladium, Isaria, Fusarium, Arthrobotrys, Penicillium, Asper- gillus, Ampelomyces, Coniothyrium, Aureobasidium e Candida; dentre Glomeromycetes phylum, em particular a partir do grupo que consiste nos gêneros Glomus e Rhizophagus; e/ou dentre Basidiomycetes phylum, em particular dentre grupo que consiste nos gêneros Phlebio- psis e Rhizoctonia.
[00107] Em uma modalidade particular, os referidos fungos são fun- gos dos gêneros Trichoderma, em particular fungos selecionados a par- tir do grupo que consiste em Trichoderma viride, Trichoderma atroviride (como cepa de Trichoderma atroviride I-1237, cepa de Trichoderma atroviride SC1, cepa de Trichoderma atroviride, Trichoderma harzianum (como, cepa de Trichoderma harzianum Rifai T-22 e ITEM-908), Tricho- derma asperellum (como cepa de Trichoderma asperellum ICC012 T25 e TV1, cepa de Trichoderma asperellum T34); fungos do gênero Me- tarhizium, em particular fungos selecionados a partir do grupo que con- siste em Metarhizium anisopliae, como Metarhizium anisopliae var. anisopliae BIPESCO 5/F52; fungos do gênero Beauveria, em particular fungos da espécie Beauveria bassiana (como cepa de Beauveria bassi- ana ATCC 74040, cepa de Beauveria bassiana GHA, cepa de Beauveria bassiana NPP111B005, e cepa de Beauveria bassiana 147); fungos do gênero Lecanicillium, em particular fungos selecionados dentre a espé- cie Lecanicillium muscarium, como cepa de Lecanicillium muscarium Ve6 ; fungos do gênero Gliocladium, em particular fungos da espécie Gliocladium catenulatum, como cepa de Gliocladium catenulatum J1446; fungos do gênero Isaria, em particular fungos da espécie Isaria fumosorosea, como cepa de Isaria fumosorosea Apopka 97; fungos do gênero Ampelomyces, em particular fungos da espécie Ampelomyces quisqualis; fungos do gênero Candida, em particular fungos da espécie Candida oleophila; fungos do gênero Phlebiopsis, em particular fungos da espécie Phlebiopsis gigantea.
[00108] Em modalidades mais particulares, os fungos são fungos da espécie Trichoderma harzianum. Ainda em uma modalidade particular, os fungos são Trichoderma harzianum CCT 4790.
[00109] De acordo com qualquer uma das modalidades da invenção, os micro-organismos podem ser, por exemplo, bactérias escolhidas en- tre as espécies B. subtilis, B. megaterium, B. thuringiensis, B. japonicum ou P. putida ou fungos das espécies T. harzianum, como os descritos precedentemente.
[00110] A quantidade de micro-organismo a ser utilizada pode variar de um micro-organismo para outro e também pode depender da se- mente a ser tratada. Em uma modalidade da presente invenção, o mi- cro-organismo é utilizado em uma quantidade que varia de 1,104 a 1,1015 CFU / semente quintal.
[00111] A presente invenção também refere-se a um método para manter ou aumentar a taxa de crescimento e/ou atividade biofungicida de tais micro-organismos, em particular de micro-organismos supresso- res, compreendendo uma etapa de contato de pelo menos uma semente com um derivado de guar, como definido acima.
[00112] De acordo com uma modalidade preferida, este método é re- alizado em meio líquido. Portanto, preferivelmente, este método com- preende uma etapa de contato de pelo menos uma semente com um derivado de guar, como definido acima, na forma líquida ou com uma composição líquida compreendendo um derivado de guar, como defi- nido acima.
[00113] A presente invenção também refere-se ao uso de um micro- organismo, em particular um micro-organismo supressor, e de um deri- vado de guar, como definido acima, como biofungicida.
[00114] Portanto, a presente invenção refere-se ao uso combinado de tal micro-organismo, em particular um micro-organismo supressivo, e de um derivado de guar. Foi demonstrado que a combinação do refe- rido micro-organismo, em particular o micro-organismo supressivo, e o derivado de guar produz uma atividade biofungicida.
[00115] A presente invenção também refere-se a uma composição biofungicida que compreende pelo menos um micro-organismo, em par- ticular um micro-organismo supressor, e pelo menos um derivado de guar, como definido acima.
[00116] De acordo com qualquer uma das modalidades da invenção, o micro-organismo e o derivado de guar são combinados em uma rela- ção micro-organismo:derivado de guar variando de 1,104 a 1,1015, por exemplo, variando de 1,104 a 1,1012, por exemplo, variando de 1,104 a 1,1011 CFU/g, por exemplo, variando de 1,104 a 5,1010 CFU/g, por exem- plo, variando de 1,105 a 1,1010 CFU/g. Por exemplo, o micro-organismo e o derivado de guar podem ser combinados em uma relação micro- organismo:derivado de guar variando de 1,108 a 1,1012.
[00117] Preferivelmente, esta composição biofungicida é na forma lí- quida.
[00118] A presente invenção também refere-se a um kit que compre- ende pelo menos um micro-organismo, em particular um micro-orga- nismo supressor, e pelo menos um derivado de guar como definido acima, sendo este kit preferivelmente utilizado como biofungicida.
[00119] Assim, a presente invenção também refere-se ao uso do kit acima mencionado como biofungicida.
[00120] A presente invenção também refere-se a uma semente re- vestida com a composição de biofungicida, conforme definido acima.
[00121] Em uma forma de realização, a semente é da cultura ou es- pécie de planta incluindo, porém, não se limitando ao milho (Zea mays), Brassica sp. (por exemplo, B. napus, B. rapa, B. juncea), alfafa (Medi- cago sativa), arroz (Oryza sativa), centeio (Secale cereale), sorgo (Sorghum bicolor, Sorghum vulgare), milheto (por exemplo milheto pé- rola (Pennisetum glaucum), milheto proso (Panicum miliaceum), milheto foxtail (Setaria italica), milheto finger (Eleusine coracana)), girassol (He- lianthus animus), açafroa (Carthamus tinctorius), trigo (Triticum aesti- vum), soja (Glycine max), tabaco (Nicotiana tabacum), batata (Solanum tuberosum), amendoim (Arachis hypogaea), algodão (Gossypium bar- badense, Gossypium hirsutum), batata doce (Ipomoea batatus), mandi- oca (Manihot esculenta), café (Cofea spp.), coqueiro (Cocos nucifera),
abacaxi (Ananas comosus), cítricos (Citrus spp.), cacau (Theobroma ca- cao), chá (Camellia sinensis), banana (Musa spp.), abacate (Persea americana), figo (Ficus casica), goiaba (Psidium guajava), manga (Man- gifera indica), azeitona (Olea europaea), mamão (Carica papaya), caju (Anacardium occidentale), macadâmia (Macadamia integrifolia), amên- doa (Prunus amygdalus), beterraba (Beta vulgaris), cana-de-açúcar (Saccharum spp.), aveia, cevada, vegetais, ornamentais, plantas lenho- sas como árvores coníferas e decíduas, abóbora, jerimum, cânhamo, abobrinha, maçã, pêra, marmelo, melão, ameixa, cereja, pêssego, nec- tarina, damasco, morango, uva, framboesa, amora, soja, sorgo, cana- de-açúcar, colza, trevo, cenoura e Arabidopsis thaliana.
[00122] Em uma forma de realização, a semente é de qualquer es- pécie de vegetal, incluindo, porém, não se limitando ao tomate (Lyco- persicon esculentum), alface (por exemplo, Lactuca sativa), feijão verde (Phaseolus vulgaris), feijão lima (Phaseolus limensis), ervilhas (Lathyrus spp.), couve-flor, brócolis, nabo, rabanete, espinafre, aspargo, cebola, alho, pimenta, aipo e membros do gênero Cucumis como pepino (C. sativus), melão (C. cantalupensis) e melão almiscarado (C. melo).
[00123] Em uma forma de realização, a semente é de qualquer es- pécie ornamental, incluindo, porém, não limitada a, hortênsia (Ma- crophylla hydrangea), hibiscus (Hibiscus rosasanensis), petúnias (Petu- nia hybrida), rosas (Rosa spp.), azaleas (Rhododendron spp.), tulipas (Tulipa spp.), narcisos (Narcissus spp.), cravo (Dianthus caryophyllus), poinsétia (Euphorbia pulchenima) e crisântemo.
[00124] Em uma forma de realização, a semente é de qualquer es- pécie de coníferas, incluindo porém, não se limitando a pinheiros coní- feros como pinheiro loblolly (Pinus taeda), pinheiro slash (Pinus elliotii), pinheiro ponderosa (Pinus ponderosa), pinheiro lodgepole (Pinus con- torta), e pinheiro Monterey (Pinus radiata), Douglas-fir (Pseudotsuga menziesii); cicuta Ocidental (Tsuga canadensis); abeto Sitka (Picea glauca); madeira vermelha (Sequoia sempervirens); abetos verdadeiros como o abeto prateado (Abies amabilis) e o abeto bálsamo (Abies bal- samea); e cedros como o cedro vermelho Ocidental (Thuja plicata) e o cedro amarelo do Alasca (Chamaecyparis nootkatensis).
[00125] Em uma forma de realização, a semente é de qualquer es- pécie de planta leguminosa, incluindo, porém, não limitada a, feijões e ervilhas. Os feijões incluem guar, alfarroba, feno-grego, soja, feijão de jardim, feijão-frade, feijão-mungo, feijão-lima, fava, lentilhas, grão-de- bico, ervilha, feijão-da- mariposa, fava, feijão comum, lentilha, feijão seco, etc. As leguminosas incluem, porém, não estão limitadas a Ara- chis, por exemplo, amendoim, Vicia, por exemplo, ervilhaca coroa, ervi- lhaca peluda, feijão adzuki, feijão mung, e grão-de-bico, Lupinus, por exemplo, tremoço, trifolium, Phaseolus, por exemplo, feijão comum e feijão lima, Pisum, por exemplo, feijão do campo, Melilotus, por exem- plo, trevo, Medicago, por exemplo, alfafa, Lotus, por exemplo, trefoila, lentes, por exemplo, lentilhas e índigo falso. As forragens e gramíneas típicas para uso nos métodos no presente documento descritos incluem, porém, não estão limitadas à alfafa, erva de pomar, festuca alta, azevém perene, erva rasteira, lucerna, trepadeira, trepadeira, trevo, espécies de stylosanthes, lotononis bainessii, sanfeno e redtop. Outras espécies de gramíneas incluem cevada, trigo, aveia, centeio, erva de pomar, erva- da-índia, sorgo ou gramíneas.
[00126] Em outra forma de realização, a semente é selecionada en- tre as seguintes culturas ou vegetais: milho, trigo, sorgo, soja, tomate, couve-flor, rabanete, repolho, canola, alface, centeio, capim, arroz, al- godão, girassol e similares. Em outra forma de realização, a semente é selecionada dentre milho, trigo, cevada, arroz, ervilha, aveia, soja, gi- rassol, alfafa, sorgo, colza, beterraba, algodão, tabaco, culturas forra- geiras, linhaça, cânhamo, capim, vegetais, sementes de frutas e flores.
[00127] Entende-se que o termo "semente" ou "muda" não está limi- tado a um tipo específico ou particular de espécie ou semente. O termo "semente" ou "muda" pode se referir a sementes de uma única espécie de planta, uma mistura de sementes de várias espécies de planta, ou uma mistura de sementes de várias cepas dentro de uma espécie de planta. Em uma forma de realização, as sementes de culturas incluem, porém, não estão limitadas a, sementes de arroz, milho, trigo, cevada, aveia, soja, algodão, girassol, alfafa, sorgo, colza, beterraba, tomate, feijão, cenoura, tabaco ou flores.
[00128] Um aspecto da invenção inclui métodos de uso da composi- ção biofungicida da invenção para controlar, prevenir ou reduzir as in- festações por fungos patogênicos nas plantas em crescimento, nas se- mentes e nas culturas colhidas. Uma composição biofungicida da inven- ção pode ser usada para tratar plantas, sementes, plantas, folhas, mu- das e meios de planta e para tratamento pós-colheita das culturas.
[00129] Como mencionado precedentemente, a presente invenção também refere-se a uma composição biofungicida que compreende pelo menos um micro-organismo, em particular um micro-organismo supres- sor, e pelo menos um derivado de guar, como definido acima.
[00130] De acordo com uma modalidade preferida, a composição é aplicada no sistema foliar da planta. Tal aplicação é realizada preferivel- mente por pulverização de uma composição conforme descrito acima sobre as folhas da planta. Por exemplo, a composição pode ser pulveri- zada em um campo usando meios apropriados e bem conhecidos na agricultura.
[00131] Por exemplo, uma composição biofungicida da presente in- venção pode ser diluída o suficiente para ser facilmente pulverizada usando equipamento de pulverização agrícola padrão. A aplicação da composição à folhagem pode ser realizada por pulverização, utilizando qualquer meio convencional para pulverização de líquidos, tais como bicos pulverizadores, atomizadores ou similares. A composição da in- venção pode ser usada em técnicas agrícolas de precisão, nas quais são usados aparelhos para variar a quantidade de pesticida aplicada em diferentes partes de um campo, dependendo de variáveis como as es- pécies de planta particulares presentes, composição do solo, etc. Em uma modalidade de tais técnicas, um sistema de posicionamento global operado com o aparelho de pulverização pode ser usado para aplicar a quantidade desejada da composição em diferentes partes de um campo. A seleção das taxas de aplicação que são efetivas para uma composição da invenção está dentro da habilidade do cientista agrícola comum.
[00132] De acordo com uma modalidade preferida, a presente inven- ção refere-se a um método de tratamento de uma planta na qual uma composição como definida precedentemente é aplicada em pelo menos uma parte da referida planta.
[00133] A composição pode ser aplicada diretamente sobre a planta, ou pode ser diluída imediatamente antes da aplicação com um diluente líquido contendo água ou uma mistura de água e solvente orgânico, ou pode ser misturada imediatamente antes da aplicação com outra com- posição agroquímica.
[00134] Em uma forma de realização, a composição pode ser apli- cada no sistema foliar da planta, preferivelmente por pulverização da referida composição sobre as folhas da planta.
[00135] A presente invenção não se limita às composições biofungi- cidas, porém, também se relaciona a qualquer micro-organismo útil em aplicações agrícolas, tais como biopesticidas e similares.
[00136] Os exemplos a seguir são incluídos para ilustrar as modali- dades da invenção, porém, não se limitam aos exemplos descritos.
EXEMPLOS Exemplo 1:
[00137] Os seguintes materiais são usados nos experimentos:
[00138] Guar: um cloreto de guar hidroxipropiltrimônio tendo um peso molecular médio entre 5.000 e 25.000 Daltons, um DS de 0,2, e um MS entre 0,2 e 1,0, disponível de Solvay (fornecido como um pó)
[00139] As cepas de bactérias foram adquiridas da Coleção de Cul- tura Tropical da Fundação André Tosello - Brasil.  Bacillus subtilis CCT 0089  Bacillus megaterium CCT 0536  Bradyrhizobium japonicum CCT 4065
[00140] Todas as cepas foram armazenadas a -80°C nos meios de cultura apropriados, contendo 15% de glicerol.
[00141] Dois meios de cultura diferentes foram utilizados nos experi- mentos:  Meios de cultura NA contendo por litro: 3g de extrato de carne, 5g de peptona e 15g de ágar (somente para meios sólidos)  Meios YMA contendo por litro: 0,5g de fosfato monobásico de potássio, 0,2g de sulfato de magnésio; 0,1g de cloreto de sódio; 0,5g de extrato de levedura; 10g de manitol (somente para inóculo e meios sólidos); 5mL de uma solução azul de 5% de bromotimol e 15g de ágar (somente meios sólidos).
[00142] Para cepas Bacillus subtilis e Bacillus megaterium, foi utili- zado o meio NA. Para a cepa Bradyrhyzobium japonicum, foi utilizado o meio YMA. Estes meios foram selecionados de acordo com o fornece- dor das cepas.
[00143] Um frasco de agitação de 250 mL contendo 100mL de meios de cultura NA ou YMA, foi inoculado com 1mL de cultura de matéria- prima e incubado a 30°C, 150 rpm por 72 horas.
[00144] Para cada cepa, 10 mL de meios de reativação foram, então, transferidos para um frasco de agitação de 250 mL contendo 100mL do mesmo meio, com a adição de guar em pó (a 1 % em peso no meio de incubação); e incubado a 30ºC, 150 rpm, por 96 horas. Um experimento sem adição de guar em pó também é realizado para cada cepa como um controle.
[00145] 100µL de amostras de cada experimento foram colhidas após 0h, 24h, 48h, 72h e 96h de incubação. Estas amostras foram dilu- ídas (as diluições foram variáveis de acordo com o crescimento da cepa, sendo de 1x10-5 até 1x10-15) e as diluições foram semeadas em meio sólido NA ou YMA. As placas foram incubadas a 30°C até o apareci- mento das colônias. Após a incubação, o número de colônias presentes em cada diluição era contado e utilizado para avaliar o crescimento bac- teriano.
[00146] Para a determinação da taxa de crescimento bacteriano, um gráfico do log10 (número de colônias) versus o tempo de incubação foi construído. A linha reta neste gráfico representa a fase exponencial do crescimento bacteriano e o coeficiente angular representa a taxa de crescimento de bactérias (µ).
[00147] O valor de µ foi usado para comparar todas as experiências e para avaliar a influência da adição de guar no crescimento bacteriano.
[00148] Para este conjunto de experimentos, a relação micro-orga- nismos e guar é igual a 3,50 x 104 CFU/g. A taxa de crescimento de bactérias (µ) obtida para os diferentes experimentos está resumida na Tabela 1: Composição Taxa de crescimento de bactérias (h-1) Bacillus subtilis CCT 0089 0,0647 Bacillus subtilis CCT 0089 + guar 0,0739 Bacillus megaterium CCT 0536 0,0605 Bacillus megaterium CCT 0536 + guar 0,0690 Bradyrhyzobium japonicum CCT 4065 0,0891 Bradyrhyzobium japonicum CCT 4065 + guar 0,0880 Tabela 1
[00149] Para as três cepas, um valor comparável ou superior de taxa de crescimento de bactérias é obtido na presença de guar. A adição de guar permite manter ou aumentar a taxa de crescimento dessas diferen- tes cepas de bactérias. Na Tabela 2 é relatado o aumento ou diminuição relativa da taxa de crescimento de bactérias com a adição de guar em comparação ao controle para cada cepa. Um aumento da taxa de cres- cimento de bactérias de +14% é observado para as duas bactérias gram positivas (Bacillus subtilis e Bacillus megaterium), enquanto um valor nulo é observado para a Bradyrhyzobium japonicum, que corresponde a uma taxa de crescimento comparável de bactérias com e sem guar. Cepa Aumento relativo da taxa de crescimento de bactérias com adição de guar Bacillus subtilis CCT 0089 14% Bacillus megaterium CCT 0536 14% Bradyrhyzobium japonicum CCT 4065 0% Tabela 2
[00150] Um experimento similar foi conduzido em uma relação bac- térias / guar igual a 7,00 x 105 na mesma espécie bacteriana, um valor comparável ou superior de crescimento de bactérias é obtido na pre- sença de guar. Exemplo 2:
[00151] Os seguintes materiais são usados nos experimentos:
[00152] Guar: um cloreto de guar hidroxipropiltrimônio tendo um peso molecular médio entre 5.000 e 25.000 Daltons, um DS de 0,2, e um MS entre 0,2 e 1,0, disponível de Solvay (fornecido como um pó)
[00153] Formulação líquida de guar: uma formulação aquosa de guar em pó a 25% de Solvay
[00154] As cepas de bactérias foram adquiridas da Coleção de Cul- tura Tropical da Fundação André Tosello - Brasil.  Bacillus subtilis CCT 0089  Bacillus megaterium CCT 0536  Bradyrhizobium japonicum CCT 4065
[00155] Todas as cepas foram armazenadas a -80°C nos meios de cultura apropriados, contendo 15% de glicerol.
[00156] Dois meios de cultura diferentes foram utilizados nos experi- mentos:  Meios NA contendo por litro: 3g de extrato de carne, 5g de peptona e 15g de ágar (somente para meios sólidos)  Meios YMA contendo por litro: 0,5g de fosfato monobásico de potássio, 0,2g de sulfato de magnésio; 0,1g de cloreto de sódio; 0,5g de extrato de levedura; 10g de manitol (somente para inóculo e meios sólidos); 5mL de uma solução azul de 5% de bromotimol e 15g de ágar (somente meios sólidos).
[00157] Para cepas Bacillus subtilis e Bacillus megaterium, foi utili- zado o meio NA. Para as cepas Bradyrhyzobium japonicum, foi utilizado o meio YMA. Estes meios foram selecionados de acordo com o forne- cedor das cepas.
[00158] Um frasco de agitação de 250 mL contendo 100mL de meios de cultura NA ou YMA, foi inoculado com 1mL de cultura de matéria- prima e incubado a 30°C, 150 rpm por 72 horas.
[00159] Para cada cepa, 10 mL de meios de reativação foram, então, transferidos para um frasco de agitação de 250 mL contendo 100mL do mesmo meio, com a adição de guar em pó ou formulação líquida de guar; e incubado a 30ºC, 150 rpm, por 96 horas. Um experimento sem adição de guar em pó também é realizado para cada cepa como um controle.
[00160] 100µL de amostras de cada experimento foram coletadas após 0h, 24h, 48h, 72h e 96h de incubação. Estas amostras foram dilu- ídas (as diluições foram variáveis de acordo com o crescimento da cepa, sendo de 1x10-5 até 1x10-15) e as diluições foram semeadas em meio sólido NA ou YMA. As placas foram incubadas a 30°C até o apareci- mento das colônias. Após a incubação, o número de colônias presentes em cada diluição era contado e utilizado para avaliar o crescimento bac- teriano.
[00161] Para a determinação da taxa de crescimento bacteriano, um gráfico do log10 (número de colônias) versus o tempo de incubação foi construído. A linha reta neste gráfico representa a fase exponencial do crescimento bacteriano e o coeficiente angular representa a taxa de crescimento de bactérias (µ).
[00162] O valor de µ foi usado para comparar todos os experimentos e para avaliar a influência da adição de dois guars no crescimento bac- teriano. Para este conjunto de experimentos, a relação micro-organis- mos e guar foi fixada em 1,0 x 1010 CFU/g. A taxa de crescimento de bactérias (µ) obtida para os diferentes experimentos está resumida na Tabela 3: Composição Taxa de crescimento de bactérias (h-1) Bacillus subtilis CCT 0089 0,0862 Bacillus subtilis CCT 0089 + guar em pó 0,0931 Bacillus subtilis CCT 0089 + formulação de guar líquido 0,0975 Bacillus megaterium CCT 0536 0,0834 Bacillus megaterium CCT 0536 + guar em pó 0,1018 Bacillus megaterium CCT 0536 + formulação de guar líquido 0,0958 Bradyrhyzobium japonicum CCT 4065 0,0915 Bradyrhyzobium japonicum CCT 4065 + guar em pó 0,0936 Bradyrhyzobium japonicum CCT 4065 + formulação de guar líquido 0,0913 Tabela 3
[00163] Para as três cepas, um valor comparável ou superior de taxa de crescimento de bactérias é obtido na presença de guar sob a forma de pó e de guar em formulação aquosa. A adição de guar permite man- ter ou aumentar a taxa de crescimento dessas diferentes cepas de bac- térias. Na Tabela 4 é relatado o aumento ou diminuição relativa da taxa de crescimento de bactérias com a adição dos dois graus de guar em comparação ao controle para cada cepa. Um aumento da taxa de cres- cimento de bactérias variando de 8% a 22% é observado para as duas bactérias gram positivas (Bacillus subtilis e Bacillus megaterium), en- quanto um valor nulo ou de 2% é observado para Bradyrhyzobium japo- nicum, que corresponde a uma taxa de crescimento comparável de bac- térias com e sem guar. Cepa Aumento relativo da taxa de crescimento de bactérias com adição de guar Bacillus subtilis CCT 0089 + guar em pó 8% Bacillus subtilis CCT 0089 + formulação de guar líquido 13% Bacillus megaterium CCT 0536 + guar em pó 22% Bacillus megaterium CCT 0536 + formulação de guar líquido 15% Bradyrhyzobium japonicum CCT 4065 + guar em pó 2% Bradyrhyzobium japonicum CCT 4065 + formulação de guar líquido 0% Tabela 4 Exemplo 3:
[00164] Os seguintes materiais são usados nos experimentos:
[00165] Guar: um cloreto de guar hidroxipropiltrimônio tendo um peso molecular médio entre 5.000 e 25.000 Daltons, um DS de 0,2, e um MS entre 0,2 e 1,0, disponível de Solvay (fornecido como um pó)
[00166] As cepas de bactérias foram adquiridas da Coleção de Cul- tura Tropical da Fundação André Tosello - Brasil:  Bacillus thuringiensis CCT 2335  Pseudomonas putida CCT 2357
[00167] Todas as cepas foram armazenadas a -80°C nos meios de cultura apropriados, contendo 15% de glicerol.
[00168] Apenas um meio de cultura foi utilizado para ambas as cepas  Meios NA contendo por litro: 3g de extrato de carne, 5g de peptona e 15g de ágar (somente para meios sólidos)
[00169] Um frasco de agitação de 250 mL contendo 100mL de meios de cultura NA ou YMA, foi inoculado com 1mL de cultura de matéria- prima e incubado a 30°C, 150 rpm durante 72 horas.
[00170] Para cada cepa, 10 mL de meios de reativação foram, então, transferidos para um frasco de agitação de 250 mL contendo 100mL do mesmo meio, com a adição de guar em pó ou formulação líquida de guar; e incubado a 30ºC, 150 rpm, por 96 horas. Um experimento sem adição de guar em pó também é realizado para cada cepa como um controle.
[00171] 100µL de amostras de cada experimento foram coletadas após 0h, 24h, 48h, 72h e 96h de incubação. Estas amostras foram dilu- ídas (as diluições foram variáveis de acordo com o crescimento da cepa, sendo de 1x10-5 até 1x10-15) e as diluições foram semeadas em meio NA sólido. As placas foram incubadas a 30°C até o aparecimento das colônias. Após a incubação, o número de colônias presentes em cada diluição foi contado e utilizado para avaliar o crescimento bacteriano.
[00172] Para a determinação da taxa de crescimento bacteriano, um gráfico do log10 (número de colônias) versus o tempo de incubação foi construído. A linha reta neste gráfico representa a fase exponencial do crescimento bacteriano e o coeficiente angular representa a taxa de crescimento de bactérias (µ).
[00173] O valor de µ foi usado para comparar todos os experimentos e para avaliar a influência da adição de dois guars no crescimento bac- teriano. Para este conjunto de experimentos, a relação micro-organis- mos e guar foi fixada em 1,0 x 105 CFU/g. A taxa de crescimento de bactérias (µ) obtida para os diferentes experimentos está resumida na Tabela 5: Composição Taxa de crescimento de bactérias (h-1) Bacillus thuringiensis CCT 2335 0,0898 Bacillus thuringiensis CCT 2335 + guar 0,1028
Pseudomonas putida CCT 5357 0,1133 Pseudomonas putida CCT 5357 + guar 0,1282 Tabela 5
[00174] Para as duas cepas, um valor superior da taxa de cresci- mento de bactérias é obtido na presença de guar do que sem adição de guar. A adição de guar permite aumentar a taxa de crescimento dessas diferentes cepas de bactérias. Na Tabela 6 é relatado o aumento relativo da taxa de crescimento de bactérias com a adição de guar em compa- ração ao controle para cada cepa. Um aumento da taxa de crescimento de bactérias variando de 13% a 14% é observado para as duas cepas de bactérias. Cepa Aumento relativo da taxa de crescimento de bactérias com adição de guar Bacillus thuringiensis CCT 2335 14% Pseudomonas putida CCT 5357 13% Tabela 6 Exemplo 4:
[00175] Os seguintes materiais são usados nos experimentos:
[00176] Guar: um cloreto de guar hidroxipropiltrimônio tendo um peso molecular médio entre 5.000 e 25.000 Daltons, um DS de 0,2, e um MS entre 0,2 e 1,0, disponível de Solvay (fornecido como um pó)
[00177] Formulação líquida de guar: uma formulação aquosa de guar em pó a 25% de Solvay
[00178] Todas as cepas de micro-organismos foram adquiridas da Coleção de Cultura Tropical da Fundação André Tosello - Brasil, algu- mas delas têm referência na Coleção de Cultura Tipo Americana (ATCC).  Trichoderma harzianum CCT 4790
[00179] Todas as cepas foram armazenadas a -80°C nos meios de cultura apropriados, contendo 20% de glicerol.
[00180] Meios de cultura usados nos experimentos:
 Caldo de nutriente (NA) contendo por litro: 3g de extrato de carne, 5g de peptona e 15g de ágar (somente para meios sólidos)  Ágar de farinha de aveia (OA) contendo por litro: 25g de flocos de aveia ou farinha e 15g de ágar
[00181] Os meios OA foram utilizados para reativação da cepa T. harzianum de acordo com a recomendação do fornecedor.
[00182] Para os experimentos com guar, somente os meios NA fo- ram utilizados. Reativação de micro-organismos:
[00183] Uma placa de Petri contendo 20mL de meio OA foi usada para a reativação da cepa T. harzianum.
[00184] A cultura de matéria-prima foi utilizada para inocular os meios sólidos para a cepa T. harzianum e as placas de Petri foram in- cubadas a 25ºC até o crescimento completo. Incubação com guar:
[00185] A partir do meio de reativação da placa de petri, os esporos de fungos foram recuperados e uma solução de esporos foi preparada.
[00186] 500µL da solução de esporos (aproximadamente 1x1010 CFU/mL) foram transferidos para frascos Erlenmeyer contendo 50mL de meios (controles e meios NA com guar) e incubados a 25ºC. As amos- tras foram colhidas às 48h, 120h e 168h, filtradas em papel filtro e incu- badas a 60°C antes da pesagem. * Meios de controle = NA sem adição de guar Avaliação do crescimento:
[00187] A recuperação da biomassa seca após cada amostra foi plo- tada em um gráfico biomassa seca versus tempo e a curva de cresci- mento pôde ser obtida.
[00188] A taxa de crescimento (µ) foi calculada considerando apenas a fase exponencial do crescimento e comparada com o controle.
[00189] O valor de µ foi usado para comparar todas as experiências e para avaliar a influência da adição de guar no crescimento de fungos. A taxa de crescimento de micro-organismos (µ) obtida para os diferen- tes experimentos está resumida na Tabela 7: Composição Taxa de crescimento de fungos (h-1) Trichoderma harzianum CCT 4790 0,0009 Trichoderma harzianum CCT 4790 + guar em pó 0,0013 Trichoderma harzianum CCT 4790 + formulação de guar líquido 0,0015 Tabela 7
[00190] Um valor superior da taxa de crescimento é obtido em pre- sença de guar sob a forma de pó e o guar em formulação aquosa em comparação ao controle. Assim, a adição de guar permite aumentar a taxa de crescimento desta cepa de fungos. Na Tabela 8 é relatado o aumento relativo da taxa de crescimento com a adição dos dois graus de guar em comparação ao controle. Um aumento da taxa de cresci- mento de bactérias variando de 44% a 67% é observado para esta cepa de fungos. Cepa Aumento relativo da taxa de crescimento de fungos com adição de guar Trichoderma harzianum CCT 4790 + guar em pó 44% Trichoderma harzianum CCT 4790 + formulação de guar líquido 67% Tabela 8

Claims (14)

REIVINDICAÇÕES
1. Composição fungicida, caracterizada pelo fato de que compreende um biofungicida e um derivado de guar contendo pelo me- nos um grupo hidroxialquila.
2. Composição fungicida de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que o biofungicida é um micro-organismo, por exemplo, selecionado a partir de fungos ou bactérias.
3. Composição fungicida de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizada pelo fato de que o derivado de guar contém pelo menos um grupo catiônico.
4. Método para manter ou aumentar a taxa de crescimento de micro-organismos, em particular de micro-organismos supressivos, caracterizado pelo fato de que compreende uma etapa de contato do referido micro-organismo com um derivado de guar contendo pelo me- nos um grupo hidroxialquila.
5. Método de acordo com a reivindicação 4, caracterizado pelo fato de que o derivado de guar contém ainda pelo menos um grupo catiônico.
6. Uso de um micro-organismo, em particular, de um micro- organismo supressor, e de um derivado de guar, caracterizado pelo fato de que contém pelo menos um grupo hidroxialquila, como biofungicida.
7. Uso de acordo com a reivindicação 6, caracterizado pelo fato de que o derivado de guar contém ainda pelo menos um grupo ca- tiônico.
8. Kit, caracterizado pelo fato de que contém pelo menos um micro-organismo, em particular um micro-organismo supressor, e pelo menos um derivado de guar contendo pelo menos um grupo hidroxial- quila.
9. Kit de acordo com a reivindicação 8, caracterizado pelo fato de que o derivado de guar contém ainda pelo menos um grupo ca- tiônico.
10. Uso do kit, caracterizado pelo fato de ser como definido na reivindicação 8 ou 9, como biofungicida.
11. Método para controlar o organismo fúngico, caracteri- zado pelo fato de que consiste em aplicar uma composição fungicida como definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 3.
12. Método para controlar ou prevenir infecção de uma planta por fungos fitopatogênicos, caracterizado pelo fato de que com- preende a etapa de aplicação a essa planta de uma composição fungi- cida como definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 3.
13. Método para tratar uma planta, caracterizado pelo fato de que uma composição como definida em qualquer uma das reivindica- ções 1 a 3 é aplicada em pelo menos uma parte da referida planta.
14. Método de acordo com a reivindicação 13, caracterizado pelo fato de que a composição é aplicada no sistema foliar da planta, preferivelmente por pulverização da referida composição nas folhas da planta.
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