BR112021006658A2

BR112021006658A2 - Composições fotoprotetoras contendo compostos derivados de malassezia e/ou análogos químicos das mesmas

Info

Publication number: BR112021006658A2
Application number: BR112021006658-6A
Authority: BR
Inventors: Michael Einziger; Ann Marie Simpson
Original assignee: Michael EINZIGER; Ann Marie Simpson
Priority date: 2018-10-08
Filing date: 2019-10-08
Publication date: 2021-08-31
Also published as: CA3115647A1; EA202092655A1; EP3864019A1; SG11202103599YA; KR20210072062A; EA202190044A1; MX2021004033A; EA202190566A1; TW202034913A; EA202190887A1; AU2019357469A1; US20200276100A1; WO2020076857A1; IL282196A; CN113195495A; PH12021550746A1; JP2022508655A; EA202092467A1

Abstract

composições fotoprotetoras contendo compostos derivados de malassezia e/ou análogos químicos das mesmas. compostos, composições e métodos para modular a pigmentação da pele e tratar ou prevenir danos à pele induzidos por uv, eritema, envelhecimento da pele, queimaduras solares e hiperpigmentação em um indivíduo. compostos derivados de malassezia e/ou análogos químicos dos mesmos, composições que compreendem tais compostos e métodos de tratamento por administração dos compostos e das composições, incluindo métodos de indução da apoptose de melanócitos e modulação da atividade do receptor de hidrocarboneto de arila (ahr), melanogênese e concentração de melanina.

Description

COMPOSIÇÕES FOTOPROTETORAS CONTENDO COMPOSTOS DERIVADOS DE MALASSEZIA E/OU ANÁLOGOS QUÍMICOS DAS MESMAS REFERÊNCIA CRUZADA PARA PEDIDOS RELACIONADOS

[001] A presente invenção reivindica o benefício do pedido provisório U.S. N° 62/742.657, depositado em 8 de outubro de 2018. Todo o conteúdo do pedido acima mencionado é incorporado por referência. Adicionalmente, todo o conteúdo do pedido provisório US nº 62/306.468, depositado em 10 de março de 2016, pedido provisório US nº 62/656.769, depositado em 12 de abril de 2018, pedido provisório U.S. nº 62/668.007, depositado em 7 de maio de 2018, pedido provisório U.S. nº 62/685.800, depositado em 15 de junho de 2018, pedido provisório U.S. nº 62/686.912, depositado em 19 de junho de 2018, pedido provisório U.S. nº 62/722.412, depositado em 24 de agosto de 2018, pedido de patente U.S. nº de série 15/455.932, depositado em 10 de março de 2017, agora Patente U.S. nº 10.131.631, pedido de patente U.S. nº de série 16/382.891, depositado em 12 de abril de 2019, pedido de patente U.S. nº de série 16/405,127, depositado em 7 de maio de 2019, e o pedido de patente U.S. nº de série 16/441.522, depositado em 14 de junho de 2019 são aqui incorporados por referência.

CAMPO DA INVENÇÃO

[002] A presente invenção se refere a compostos e composições tendo, entre outras propriedades benéficas, propriedades fotoprotetoras. Os compostos e as composições da presente invenção geralmente envolvem compostos derivados de Malassezia e/ou análogos químicos dos mesmos. Os compostos e as composições da presente invenção e métodos de uso dos compostos e das composições da presente invenção também são contemplados.

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO

[003] Indivíduos em todo o mundo usam agentes de iluminação da pele para atingir uma série de objetivos cosméticos, incluindo a produção de um efeito antienvelhecimento, corrigindo os danos do sol e atendendo a certos padrões culturais de beleza. Muitos produtos iluminadores de pele disponíveis no mercado, embora eficazes em vários graus, contêm ingredientes prejudiciais, alguns dos quais têm sido associados ao câncer. Assim, existe uma necessidade de novos agentes de iluminação da pele e formulações que exibam níveis mais elevados de segurança e/ou eficácia do que os agentes atualmente no mercado.

[004] Malassezia é um gênero de levedura lipofílica comumente encontrada na flora normal da pele humana. A Malassezia é responsável por uma série de doenças de pele, incluindo tinha versicolor (pitiríase versicolor), dermatite seborreica e dermatite atópica.

[005] O habitat natural para M. furfur é a epiderme superior. No entanto, a exposição à luz ultravioleta destrói o organismo em seu habitat natural. Portanto, agentes de filtragem de UV podem ser necessários para a sobrevivência do organismo. Dois desses indóis de filtragem de UV produzidos pelo organismo foram identificados: pitriacitrina e pitirialactona. A pitriacitrina, descrita pela primeira vez em Mayser et al., 2002, é sintetizada por M. furfur. É um composto lipofílico amarelo estável apresentando ampla absorção no espectro UVA, UVB e UVC. Um composto similar do gênero Paracoccus foi isolado e patenteado como agente protetor de UV. (Zhang et al., 2018; US 2006/0067897).

[006] Gambichler et al., 2007 investigaram o efeito protetor UV da pitriacitrina em humanos usando métodos de teste in vitro e in vivo. A espectrofotometria de creme de pitriacitrina e veículo foi realizada na faixa de comprimento de onda de 290-400 nm. A transmissão de UV e o fator de proteção solar (“FPS”) foram avaliados para diferentes formulações de creme. Usando colorimetria, os autores avaliaram o eritema e a pigmentação após a irradiação de pele protegida e não protegida por creme de indivíduos saudáveis. A transmissão de UVB e UVA diminuiu com o aumento das concentrações de pitriacitrina. Um aumento da concentração de pitriacitrina de 1,25; 2,5 e 5% foi associado a um ligeiro aumento dos FPS de 1,4; 1,5 e 1,7; respectivamente. Os testes in vivo confirmaram a validade do FPS do creme de pitriacitrina a 5% determinado in vitro. Em geral, o efeito protetor de UV da pitriacitrina foi muito fraco, sugerindo que a pitriacitrina provavelmente é apenas um cofator inferior no desenvolvimento de hipopigmentação em lesões por pitiríase versicolor alba após exposição ao sol.

[007] Outros estudos dos efeitos de filtragem de UV da pitriacitrina foram realizados na microflora da pele humana. (Machowinski et al., 2006). Os autores determinaram que a pitriacitrina tem efeito protetor de UV sobre Candida albicans e estafilococos, sem toxicidade nas faixas testadas. As propriedades de proteção de UV da pitirialactona também foram confirmadas em um modelo de levedura. (Mayser et al., 2003). A pitirialactona parece ser responsável pela fluorescência amarela de Tinea Versicolor sob o exame de Luz de Wood.

[008] Tinea versicolor é uma doença de pele não contagiosa causada por crescimento excessivo de Malassezia que altera localmente os níveis de pigmentação. Leveduras Malassezia têm duas vias metabólicas para sintetizar melanina e pigmentos indol derivados de triptofano. Malassezina e Indirrubina são metabólitos de triptofano de Malassezia que podem contribuir para a despigmentação característica do supercrescimento de Malassezia.

[009] A invenção revelada nesse documento utiliza compostos produzidos por, ou derivados da, levedura Malassezia, incluindo Malassezina, indirrubina e análogos químicos dos mesmos, como base para composições de iluminação e escurecimento da pele seguras e eficazes. Composições fotoprotetoras compreendendo Malassezina, Indirrubina e análogos químicos das mesmas também são revelados nesse documento.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO

[0010] Uma modalidade da presente invenção é um composto para iluminar a pele. O composto tem uma estrutura da seguinte fórmula: ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou um sal farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável do mesmo.

[0011] Outra modalidade da presente invenção é um composto para induzir a apoptose de melanócitos. O composto tem uma estrutura da seguinte fórmula:

ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou um sal farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável do mesmo.

[0012] Uma modalidade adicional da presente invenção é um composto para modular a atividade do receptor de hidrocarboneto de arila (AhR). O composto tem uma estrutura da seguinte fórmula: ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou um sal farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável do mesmo.

[0013] Uma outra modalidade da presente invenção é um composto para modular a melanogênese. O composto tem uma estrutura da seguinte fórmula:

[0014] Outra modalidade da presente invenção é um composto para modular a concentração de melanina. O composto tem uma estrutura da seguinte fórmula: ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou um sal farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável do mesmo.

[0015] Uma modalidade adicional da presente invenção é uma composição que compreende um composto. O composto tem uma estrutura da seguinte fórmula: ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou um sal farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável do mesmo.

[0016] Uma outra modalidade da presente invenção é um método para iluminar a pele de um indivíduo. O método compreende o contato do indivíduo com um composto, o composto tendo a estrutura da seguinte fórmula: ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou um sal farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável do mesmo.

[0017] Outra modalidade da presente invenção é um método para induzir a apoptose de melanócitos em um indivíduo. O método compreende o contato do indivíduo com um composto, o composto tendo a estrutura da seguinte fórmula: ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou um sal farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável do mesmo.

[0018] Uma modalidade adicional da presente invenção é um método para modular a atividade do receptor de hidrocarboneto de arila (AhR) em um indivíduo. O método compreende o contato do indivíduo com um composto, o composto tendo a estrutura da seguinte fórmula:

[0019] Uma outra modalidade da presente invenção é um método para modular a melanogênese em um indivíduo. O método compreende o contato do indivíduo com um composto, o composto tendo a estrutura da seguinte fórmula: ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou um sal farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável do mesmo.

[0020] Outra modalidade da presente invenção é um método para modular a concentração de melanina em um indivíduo. O método compreende o contato do indivíduo com um composto, o composto tendo a estrutura da seguinte fórmula:

[0021] Uma modalidade adicional da presente invenção é uma composição. A composição compreende um ou mais dos compostos listados na Tabela 1 ou na Fig. 3, ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou sal farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável dos mesmos.

[0022] Uma outra modalidade da presente invenção é um método para iluminar a pele de um indivíduo. O método compreende o contato do indivíduo com um ou mais dos compostos listados na Tabela 1 ou na Fig. 3, ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou sal farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável dos mesmos.

[0023] Outra modalidade da presente invenção é um método para induzir a apoptose de melanócitos em um indivíduo. O método compreende o contato do indivíduo com um ou mais dos compostos listados na Tabela 1 ou na Fig. 3, ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou sal farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável dos mesmos.

[0024] Uma modalidade adicional da presente invenção é um método para modular a atividade do receptor de hidrocarboneto de arila (AhR) em um indivíduo. O método compreende o contato do indivíduo com um ou mais dos compostos listados na Tabela 1 ou na Fig. 3, ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou sal farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável dos mesmos.

[0025] Uma outra modalidade da presente invenção é um método para modular a melanogênese em um indivíduo. O método compreende o contato do indivíduo com um ou mais dos compostos listados na Tabela 1 ou na Fig. 3, ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou sal farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável dos mesmos.

[0026] Outra modalidade da presente invenção é um método para modular a concentração de melanina em um indivíduo. O método compreende o contato do indivíduo com um ou mais dos compostos listados na Tabela 1 ou na Fig. 3, ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou sal farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável dos mesmos.

[0027] Uma modalidade adicional da presente invenção é uma composição. A composição compreende um ou mais dos compostos listados na Tabela 1 ou na Fig. 3, ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou sal farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável dos mesmos.

[0028] Uma outra modalidade da presente invenção é uma composição para iluminar a pele. A composição compreende um ou mais dos compostos listados na Tabela 1 ou na Fig. 3, ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou sal farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável dos mesmos.

[0029] Outra modalidade da presente invenção é uma composição para induzir a apoptose de melanócitos. A composição compreende um ou mais dos compostos listados na Tabela 1 ou na Fig. 3, ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou sal farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável dos mesmos.

[0030] Uma modalidade adicional da presente invenção é uma composição para modular a atividade do receptor de hidrocarboneto de arila (AhR). A composição compreende um ou mais dos compostos listados na Tabela 1 ou na Fig. 3, ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou sal farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável dos mesmos.

[0031] Uma outra modalidade da presente invenção é uma composição para modular a melanogênese. A composição compreende um ou mais dos compostos listados na Tabela 1 ou na Fig. 3, ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou sal farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável dos mesmos.

[0032] Outra modalidade da presente invenção é uma composição para modular a concentração de melanina. A composição compreende um ou mais dos compostos listados na Tabela 1 ou na Fig. 3, ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou sal farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável dos mesmos.

[0033] Uma modalidade adicional da presente invenção é um método para iluminar a pele de um indivíduo. O método compreende o contato do indivíduo com uma composição, a composição compreendendo um ou mais dos compostos listados na Tabela 1 ou na Fig. 3, ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou sal farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável dos mesmos.

[0034] Uma outra modalidade da presente invenção é um método para induzir a apoptose de melanócitos em um indivíduo. O método compreende o contato do indivíduo com uma composição, a composição compreendendo um ou mais dos compostos listados na Tabela 1 ou na Fig. 3, ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou sal farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável dos mesmos.

[0035] Outra modalidade da presente invenção é um método para modular a atividade do receptor de hidrocarboneto de arila (AhR) em um indivíduo. O método compreende o contato do indivíduo com uma composição, a composição compreendendo um ou mais dos compostos listados na Tabela 1 ou na Fig. 3, ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou sal farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável dos mesmos.

[0036] Uma modalidade adicional da presente invenção é um método para modular a melanogênese em um indivíduo. O método compreende o contato do indivíduo com uma composição, a composição compreendendo um ou mais dos compostos listados na Tabela 1 ou na Fig. 3, ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou sal farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável dos mesmos.

[0037] Uma outra modalidade da presente invenção é um método para modular a concentração de melanina em um indivíduo. O método compreende o contato do indivíduo com uma composição, a composição compreendendo um ou mais dos compostos listados na Tabela 1 ou na Fig. 3, ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou sal farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável dos mesmos.

[0038] Outra modalidade da presente invenção é uma composição. A composição compreende uma levedura Malassezia e um veículo, diluente ou carreador cosmeticamente ou farmaceuticamente aceitável.

[0039] Uma modalidade adicional da presente invenção é uma composição. A composição compreende um composto tendo a estrutura da seguinte fórmula:

em que: X é selecionado do grupo que consiste em NR14 e O; Y é uma ligação covalente, CR5R6, O ou NR15; R1, R2, R3, R4, R7, R8, R9, R10 e R11 são independentemente selecionados do grupo que consiste em hidrogênio, halogênio, CN, hidroxila, R16 ou OR16; R13, R14 e R15 são independentemente hidrogênio ou R16; R5 e R6 são independentemente selecionados do grupo que consiste em hidrogênio, hidroxila, OR16, R16 e cicloalquila C3-6, ou R5 e R6 combinam-se para formar um grupo oxo (=O) ou um cicloalquila C3-6; R12 é selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, –CORa e R16; cada R16 é independentemente formila, alquila C1-9, alquenila C2-9 ou alquinila C2-9; e Ra é selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, hidroxila e OR16; ou um(a) forma cristalina, hidrato ou sal cosmeticamente ou farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um veículo, diluente ou carreador cosmeticamente ou farmaceuticamente aceitável.

[0040] Uma outra modalidade da presente invenção é uma composição. A composição compreende um composto tendo a estrutura da seguinte fórmula: em que: R1, R4, R5, R6, R9 e R10 são independentemente selecionados do grupo que consiste em hidrogênio, hidroxila, halogênio,

CN, R13, OR13, OCOR13 e -CHO; R2 e R3 são independentemente selecionados do grupo que consiste em hidrogênio, hidroxila, halogênio, CN, R13, OR13, OCOR13 e CHO, ou R2 e R3 combinam-se para formar um heterociclila de 5 ou 6 membros; R7 e R8 são independentemente selecionados do grupo que consiste em hidrogênio, hidroxila, halogênio, CN, R13, OR13, OCOR13 e CHO, ou R7 e R8 combinam-se para formar um heterociclila de 5 ou 6 membros; R11 e R12 são independentemente hidrogênio ou R13; e, cada R13 é independentemente alquila C1-9, alquenila C2-9 ou alquinila C2-9; ou um(a) forma cristalina, hidrato ou sal cosmeticamente ou farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um veículo, diluente ou carreador cosmeticamente ou farmaceuticamente aceitável.

[0041] Outra modalidade da presente invenção é uma composição. A composição compreende um composto listado na Tabela 1 ou na Fig. 3, ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou sal cosmeticamente ou farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um veículo, diluente ou carreador cosmeticamente ou farmaceuticamente aceitável.

[0042] Uma modalidade adicional da presente invenção é um método de tratamento ou prevenção de danos à pele induzidos por UV em um indivíduo. O método compreende contactar o indivíduo com qualquer uma das composições reveladas nesse documento.

[0043] Uma outra modalidade da presente invenção é um método de tratamento ou prevenção de eritema induzido por UV em um indivíduo. O método compreende contactar o indivíduo com qualquer uma das composições reveladas nesse documento.

[0044] Outra modalidade da presente invenção é um método de tratamento ou prevenção do envelhecimento da pele induzido por UV em um indivíduo. O método compreende contactar o indivíduo com qualquer uma das composições reveladas nesse documento.

[0045] Uma modalidade adicional da presente invenção é um método de tratamento ou prevenção de queimaduras solares em um indivíduo. O método compreende contactar o indivíduo com qualquer uma das composições reveladas nesse documento.

[0046] Uma outra modalidade da presente invenção é um método para tratar ou prevenir a hiperpigmentação induzida por UV em um indivíduo. O método compreende contactar o indivíduo com qualquer uma das composições reveladas nesse documento.

[0047] Outra modalidade da presente invenção é um método para iluminar a pele de um indivíduo. O método compreende contactar o indivíduo com qualquer uma das composições reveladas nesse documento.

[0048] Uma modalidade adicional da presente invenção é um método para induzir a apoptose de melanócitos em um indivíduo. O método compreende contactar o indivíduo com qualquer uma das composições reveladas nesse documento.

[0049] Uma outra modalidade da presente invenção é um método para modular a atividade do receptor de hidrocarboneto de arila (AhR) em um indivíduo. O método compreende contactar o indivíduo com qualquer uma das composições reveladas nesse documento.

[0050] Outra modalidade da presente invenção é um método para modular a melanogênese em um indivíduo. O método compreende contactar o indivíduo com qualquer uma das composições reveladas nesse documento.

[0051] Uma modalidade adicional da presente invenção é um método para modular a concentração de melanina em um indivíduo. O método compreende contactar o indivíduo com qualquer uma das composições reveladas nesse documento.

BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS

[0052] As Figs. 1-2 são tabelas que mostram a viabilidade média do tecido e os dados de concentração de melanina determinados a partir de experimentos separados com substratos MelanoDerm tratados com concentrações variáveis dos artigos de teste mostrados.

[0053] A Fig. 3 mostra compostos produzidos por Malassezia.

[0054] As Figs. 4-5 são tabelas que mostram a viabilidade média do tecido e os dados de concentração de melanina determinados a partir de experimentos separados com substratos MelanoDerm tratados com concentrações variáveis dos artigos de teste/composições de teste mostrados.

[0055] As Figs. 6A-6B mostram esquemas de síntese para AB17590 (Fig. 6A) e AB17653, AB17654, AB17655, AB17656, AB17657 e AB17658 (Fig. 6B).

[0056] A Fig. 7 é um esquema que mostra um modelo de tratamento de pele para pacientes do Tipo de Pele IV. Os valores indicam a dose de UV para uma determinada área em mJ/cm2.

[0057] A Fig. 8 é uma tabela que mostra uma escala Dualight para os Tipos de Pele I-VI.

[0058] A Fig. 9 é uma tabela que mostra medições do Mexameter MX 16 de melanina e eritema no Dia 8 após a irradiação do Dia 7.

[0059] A Fig. 10 é uma tabela que mostra as medições do

Mexameter MX 16 de melanina e eritema no Dia 15 após a irradiação do Dia 14.

[0060] A Fig. 11 é uma tabela que mostra uma escala de eritema de valores numéricos associados a vários graus de eritema.

[0061] A Fig. 12 é uma fotografia que mostra a pele de um indivíduo 24 horas após a irradiação com vários níveis de UV de acordo com o modelo de tratamento de pele mostrado na Fig. 7. A dose mínima de eritema (“MED”) foi 120 mJ UVB 24 horas após irradiação.

[0062] A Fig. 13 é uma fotografia que mostra locais de teste na pele de um indivíduo no Dia 7.

[0063] A Fig. 14 é uma fotografia que mostra locais de teste na pele de um indivíduo no Dia 8, 24 horas após a irradiação com 120 mJ de UVB.

[0064] A Fig. 15 é uma fotografia que mostra locais de teste na pele de um indivíduo no Dia 14 após uma semana adicional de terapia com Malassezina. As áreas de tratamento foram dosadas com 120 mJ de UVB.

[0065] A Fig. 16 é uma fotografia que mostra locais de teste na pele de um indivíduo no Dia 15, 24 horas após a irradiação com 120 mJ de UVB. Observe o eritema no local do veículo para os dias 7 e 9. Observe também o eritema mínimo a leve nos locais tratados com Malassezina a 1% para os dias 14, 10 e 8, com traços de eritema nos dias 1 e 3.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

[0066] Uma modalidade da presente invenção é um composto para iluminar a pele. O composto tem uma estrutura da seguinte fórmula:

[0067] Outra modalidade da presente invenção é um composto para induzir a apoptose de melanócitos. O composto tem uma estrutura da seguinte fórmula: ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou um sal farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável do mesmo.

[0068] Uma modalidade adicional da presente invenção é um composto para modular a atividade do receptor de hidrocarboneto de arila (AhR). O composto tem uma estrutura da seguinte fórmula:

[0069] Uma outra modalidade da presente invenção é um composto para modular a melanogênese. O composto tem uma estrutura da seguinte fórmula: ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou um sal farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável do mesmo.

[0070] Outra modalidade da presente invenção é um composto para modular a concentração de melanina. O composto tem uma estrutura da seguinte fórmula: ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou um sal farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável do mesmo.

[0071] Uma modalidade adicional da presente invenção é uma composição que compreende um composto. O composto tem uma estrutura da seguinte fórmula: ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou um sal farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável do mesmo.

[0072] Uma outra modalidade da presente invenção é um método para iluminar a pele de um indivíduo. O método compreende o contato do indivíduo com um composto, o composto tendo a estrutura da seguinte fórmula: ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou um sal farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável do mesmo.

[0073] Outra modalidade da presente invenção é um método para induzir a apoptose de melanócitos em um indivíduo. O método compreende o contato do indivíduo com um composto, o composto tendo a estrutura da seguinte fórmula:

[0074] Uma modalidade adicional da presente invenção é um método para modular a atividade do receptor de hidrocarboneto de arila (AhR) em um indivíduo. O método compreende o contato do indivíduo com um composto, o composto tendo a estrutura da seguinte fórmula: ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou um sal farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável do mesmo.

[0075] Uma outra modalidade da presente invenção é um método para modular a melanogênese em um indivíduo. O método compreende o contato do indivíduo com um composto, o composto tendo a estrutura da seguinte fórmula:

[0076] Outra modalidade da presente invenção é um método para modular a concentração de melanina em um indivíduo. O método compreende o contato do indivíduo com um composto, o composto tendo a estrutura da seguinte fórmula: ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou um sal farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável do mesmo.

[0077] Uma modalidade adicional da presente invenção é uma composição. A composição compreende um ou mais dos compostos listados na Tabela 1 ou na Fig. 3, ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou sal farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável dos mesmos.

[0078] Em um aspecto dessa modalidade, a composição compreende um primeiro composto tendo a estrutura da seguinte fórmula:

ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou sal farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável do mesmo; e, um segundo composto tendo a estrutura da seguinte fórmula: ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou um sal farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável do mesmo.

[0079] Uma outra modalidade da presente invenção é um método para iluminar a pele de um indivíduo. O método compreende o contato do indivíduo com um ou mais dos compostos listados na Tabela 1 ou na Fig. 3, ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou sal farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável dos mesmos.

[0080] Em um aspecto dessa modalidade, o indivíduo é contactado com um primeiro composto tendo a estrutura da seguinte fórmula: ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou sal farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável do mesmo; e, um segundo composto tendo a estrutura da seguinte fórmula:

[0081] Outra modalidade da presente invenção é um método para induzir a apoptose de melanócitos em um indivíduo. O método compreende o contato do indivíduo com um ou mais dos compostos listados na Tabela 1 ou na Fig. 3, ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou sal farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável dos mesmos.

[0082] Em um aspecto dessa modalidade, o indivíduo é contactado com um primeiro composto tendo a estrutura da seguinte fórmula: ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou sal farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável do mesmo; e, um segundo composto tendo a estrutura da seguinte fórmula:

[0083] Uma modalidade adicional da presente invenção é um método para modular a atividade do receptor de hidrocarboneto de arila (AhR) em um indivíduo. O método compreende o contato do indivíduo com um ou mais dos compostos listados na Tabela 1 ou na Fig. 3, ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou sal farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável dos mesmos.

[0084] Em um aspecto dessa modalidade, o indivíduo é contactado com um primeiro composto tendo a estrutura da seguinte fórmula: ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou sal farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável do mesmo; e, um segundo composto tendo a estrutura da seguinte fórmula: ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou um sal farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável do mesmo.

[0085] Uma outra modalidade da presente invenção é um método para modular a melanogênese em um indivíduo. O método compreende o contato do indivíduo com um ou mais dos compostos listados na Tabela 1 ou na Fig. 3, ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou sal farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável dos mesmos.

[0086] Em um aspecto desta modalidade, o indivíduo é contactado com um primeiro composto tendo a estrutura da seguinte fórmula: ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou um sal farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável do mesmo; e um segundo composto tendo a estrutura da seguinte fórmula: ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou um sal farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável do mesmo.

[0087] Outra modalidade da presente invenção é um método para modular a concentração de melanina em um indivíduo. O método compreende o contato do indivíduo com um ou mais dos compostos listados na Tabela 1 ou na Fig. 3, ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou sal farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável dos mesmos.

[0088] Em um aspecto dessa modalidade, o indivíduo é contactado com um primeiro composto tendo a estrutura da seguinte fórmula: ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou sal farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável do mesmo; e, um segundo composto tendo a estrutura da seguinte fórmula: ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou um sal farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável do mesmo.

[0089] Uma modalidade adicional da presente invenção é uma composição. A composição compreende um ou mais dos compostos listados na Tabela 1 ou na Fig. 3, ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou sal farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável dos mesmos.

[0090] Uma outra modalidade da presente invenção é uma composição para iluminar a pele. A composição compreende um ou mais dos compostos listados na Tabela 1 ou na Fig. 3, ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou sal farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável dos mesmos.

[0091] Outra modalidade da presente invenção é uma composição para induzir a apoptose de melanócitos. A composição compreende um ou mais dos compostos listados na Tabela 1 ou na Fig. 3, ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou sal farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável dos mesmos.

[0092] Uma modalidade adicional da presente invenção é uma composição para modular a atividade do receptor de hidrocarboneto de arila (AhR). A composição compreende um ou mais dos compostos listados na Tabela 1 ou na Fig. 3, ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou sal farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável dos mesmos.

[0093] Uma outra modalidade da presente invenção é uma composição para modular a melanogênese. A composição compreende um ou mais dos compostos listados na Tabela 1 ou na Fig. 3, ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou sal farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável dos mesmos.

[0094] Outra modalidade da presente invenção é uma composição para modular a concentração de melanina. A composição compreende um ou mais dos compostos listados na Tabela 1 ou na Fig. 3, ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou sal farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável dos mesmos.

[0095] Uma modalidade adicional da presente invenção é um método para iluminar a pele de um indivíduo. O método compreende o contato do indivíduo com uma composição, a composição compreendendo um ou mais dos compostos listados na Tabela 1 ou na Fig. 3, ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou sal farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável dos mesmos.

[0096] Uma outra modalidade da presente invenção é um método para induzir a apoptose de melanócitos em um indivíduo. O método compreende o contato do indivíduo com uma composição, a composição compreendendo um ou mais dos compostos listados na Tabela 1 ou na Fig. 3, ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou sal farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável dos mesmos.

[0097] Outra modalidade da presente invenção é um método para modular a atividade do receptor de hidrocarboneto de arila (AhR) em um indivíduo. O método compreende o contato do indivíduo com uma composição, a composição compreendendo um ou mais dos compostos listados na Tabela 1 ou na Fig. 3, ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou sal farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável dos mesmos.

[0098] Uma modalidade adicional da presente invenção é um método para modular a melanogênese em um indivíduo. O método compreende o contato do indivíduo com uma composição, a composição compreendendo um ou mais dos compostos listados na Tabela 1 ou na Fig. 3, ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou sal farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável dos mesmos.

[0099] Uma outra modalidade da presente invenção é um método para modular a concentração de melanina em um indivíduo. O método compreende o contato do indivíduo com uma composição, a composição compreendendo um ou mais dos compostos listados na Tabela 1 ou na Fig. 3, ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou sal farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável dos mesmos.

[00100] Nas modalidades preferidas, as composições da presente invenção compreendem os compostos listados na

Tabela 3.

[00101] Em outras modalidades preferidas, as composições da presente invenção compreendem os compostos listados na Tabela 4.

[00102] Nas modalidades preferidas adicionais, as composições da presente invenção compreendem os compostos listados na Tabela 5.

[00103] Em outras modalidades preferidas, as composições da presente invenção compreendem os compostos listados na Tabela 6.

[00104] Em outras modalidades preferidas, as composições da presente invenção compreendem os compostos listados na Tabela 7.

[00105] Nas modalidades preferidas adicionais, os métodos da presente invenção compreendem o contato de um indivíduo com uma composição que compreende os compostos listados na Tabela 3.

[00106] Em outras modalidades preferidas, os métodos da presente invenção compreendem o contato de um indivíduo com uma composição que compreende os compostos listados na Tabela

4.

[00107] Em outras modalidades preferidas, os métodos da presente invenção compreendem o contato de um indivíduo com uma composição que compreende os compostos listados na Tabela

5.

[00108] Nas modalidades preferidas adicionais, os métodos da presente invenção compreendem o contato de um indivíduo com uma composição que compreende os compostos listados na Tabela 6.

[00109] Em outras modalidades preferidas, os métodos da presente invenção compreendem o contato de um indivíduo com uma composição que compreende os compostos listados na Tabela

7.

[00110] Outra modalidade da presente invenção é uma composição. A composição compreende uma levedura Malassezia e um veículo, diluente ou carreador cosmeticamente ou farmaceuticamente aceitável.

[00111] Uma modalidade adicional da presente invenção é uma composição. A composição compreende um composto tendo a estrutura da seguinte fórmula: em que: X é selecionado do grupo que consiste em NR14 e O; Y é uma ligação covalente, CR5R6, O ou NR15; R1, R2, R3, R4, R7, R8, R9, R10 e R11 são independentemente selecionados do grupo que consiste em hidrogênio, halogênio, CN, hidroxila, R16 ou OR16; R13, R14 e R15 são independentemente hidrogênio ou R16; R5 e R6 são independentemente selecionados do grupo que consiste em hidrogênio, hidroxila, OR16, R16 e cicloalquila C3-6, ou R5 e R6 combinam-se para formar um grupo oxo (= O) ou um cicloalquila C3-6; R12 é selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, –CORa e R16; cada R16 é independentemente alquila C1-9, alquenila C2-9 ou alquinila C2- 9; e Ra é selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, hidroxila e OR16;

ou um(a) forma cristalina, hidrato ou sal cosmeticamente ou farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um veículo, diluente ou carreador cosmeticamente ou farmaceuticamente aceitável.

[00112] Uma outra modalidade da presente invenção é uma composição. A composição compreende um composto tendo a estrutura da seguinte fórmula: em que: R1, R4, R5, R6, R9 e R10 são independentemente selecionados do grupo que consiste em hidrogênio, hidroxila, halogênio, CN, R13, OR13, OCOR13 e -CHO; R2 e R3 são independentemente selecionados do grupo que consiste em hidrogênio, hidroxila, halogênio, CN, R13, OR13, OCOR13 e CHO, ou R2 e R3 combinam-se para formar um heterociclila de 5 ou 6 membros; R7 e R8 são independentemente selecionados do grupo que consiste em hidrogênio, hidroxila, halogênio, CN, R13, OR13, OCOR13 e CHO, ou R7 e R8 combinam-se para formar um heterociclila de 5 ou 6 membros; R11 e R12 são independentemente hidrogênio ou R13; e, cada R13 é independentemente alquila C1-9, alquenila C2-9 ou alquinila C2-9; ou um(a) forma cristalina, hidrato ou sal cosmeticamente ou farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um veículo, diluente ou carreador cosmeticamente ou farmaceuticamente aceitável.

[00113] Outra modalidade da presente invenção é uma composição. A composição compreende um composto listado na Tabela 1 ou na Fig. 3, ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou sal cosmeticamente ou farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um veículo, diluente ou carreador cosmeticamente ou farmaceuticamente aceitável.

[00114] Nas modalidades preferidas, qualquer uma das composições da presente invenção previne eritema induzido por UV em um indivíduo.

[00115] Nas modalidades preferidas, qualquer uma das composições da presente invenção reduz a melanina epidérmica em um indivíduo.

[00116] Nas modalidades preferidas, qualquer uma das composições da presente invenção produz um efeito fotoprotetor ou protetor de UV em um indivíduo.

[00117] Nas modalidades preferidas, qualquer uma das composições da presente invenção filtra, absorve ou reflete UV.

[00118] Nas modalidades preferidas, qualquer uma das composições da presente invenção previne a hiperpigmentação e/ou promove a hipopigmentação.

[00119] Nas modalidades preferidas, qualquer uma das composições da presente invenção é um agente de proteção solar, um agente fotoprotetor e/ou um agente protetor de UV.

[00120] Uma modalidade adicional da presente invenção é um método de tratamento ou prevenção de danos à pele induzidos por UV em um indivíduo. O método compreende contactar o indivíduo com qualquer uma das composições reveladas nesse documento.

[00121] Uma outra modalidade da presente invenção é um método de tratamento ou prevenção de eritema induzido por UV em um indivíduo. O método compreende contactar o indivíduo com qualquer uma das composições reveladas nesse documento.

[00122] Outra modalidade da presente invenção é um método de tratamento ou prevenção do envelhecimento da pele induzido por UV em um indivíduo. O método compreende contactar o indivíduo com qualquer uma das composições reveladas nesse documento.

[00123] Uma modalidade adicional da presente invenção é um método de tratamento ou prevenção de queimaduras solares em um indivíduo. O método compreende contactar o indivíduo com qualquer uma das composições reveladas nesse documento.

[00124] Uma outra modalidade da presente invenção é um método de tratamento ou prevenção de hiperpigmentação induzida por UV em um indivíduo. O método compreende contactar o indivíduo com qualquer uma das composições reveladas nesse documento.

[00125] Outra modalidade da presente invenção é um método para iluminar a pele de um indivíduo. O método compreende contactar o indivíduo com qualquer uma das composições reveladas nesse documento.

[00126] Uma modalidade adicional da presente invenção é um método para induzir a apoptose de melanócitos em um indivíduo. O método compreende contactar o indivíduo com qualquer uma das composições reveladas nesse documento.

[00127] Uma outra modalidade da presente invenção é um método para modular a atividade do receptor de hidrocarboneto de arila (AhR) em um indivíduo. O método compreende contactar o indivíduo com qualquer uma das composições reveladas nesse documento.

[00128] Outra modalidade da presente invenção é um método para modular a melanogênese em um indivíduo. O método compreende contactar o indivíduo com qualquer uma das composições reveladas nesse documento.

[00129] Uma modalidade adicional da presente invenção é um método para modular a concentração de melanina em um indivíduo. O método compreende contactar o indivíduo com qualquer uma das composições reveladas nesse documento. Definições

[00130] Como usado nesse documento, o termo “composto” refere-se a dois ou mais átomos que estão conectados por uma ou mais ligações químicas. Na presente invenção, as ligações químicas incluem, mas não estão limitadas a, ligações covalentes, ligações iônicas, ligações de hidrogênio e interações de van der Waals. As ligações covalentes da presente invenção incluem ligações simples, duplas e triplas. Os compostos da presente invenção incluem, mas não estão limitados a, moléculas orgânicas.

[00131] O(a)s compostos/moléculas orgânicos da presente invenção incluem hidrocarbonetos lineares, ramificados e cíclicos com ou sem grupos funcionais. O termo “Cx-y”, quando usado em conjunto com uma porção química, tais como, alquila, alquenila, alquinila ou alcoxi, pretende incluir grupos que contêm de x a y carbonos na cadeia. Por exemplo, o termo “alquila Cx-y” significa grupos de hidrocarbonetos saturados substituídos ou não substituídos, incluindo grupos alquila de cadeia linear e alquila de cadeia ramificada que contêm de x a y carbonos na cadeia, incluindo grupos haloalquila, tais como, trifluorometila e 2,2,2-trifluoroetila e semelhantes. Os termos “alquenila Cx-y” e “alquinila Cx-y”

referem-se a grupos alifáticos insaturados substituídos ou não substituídos análogos em comprimento e possível substituição a alquilas descritos acima, mas contendo pelo menos uma ligação dupla ou tripla, respectivamente.

[00132] O termo “alifático”, como usado nesse documento, significa um grupo composto por átomos de carbono e hidrogênio que não contém anéis aromáticos. Consequentemente, os grupos alifáticos incluem grupos alquila, alquenila, alquinila e carbociclila.

[00133] Como usado nesse documento, o termo “alquila” significa grupos de hidrocarbonetos acíclicos lineares e ramificados, por exemplo, “alquila C1-C20” refere-se a grupos alquila tendo 1-20 carbonos. Um grupo alquila pode ser linear ou ramificado. Exemplos de grupos alquila incluem, mas não estão limitados a, metila, etila, n-propila, isopropila, butila, isobutila, sec-butila, terc-butila, pentila, isopentila, terc-pentil-hexila, isohexila e semelhantes. Outros grupos alquila serão prontamente evidentes para aqueles habilitados na técnica, dado o benefício da presente revelação. Um grupo alquila pode ser não substituído ou substituído com um ou mais de grupos substituintes como descrito nesse documento. Por exemplo, um grupo alquila pode ser substituído por um ou mais (por exemplo, 1, 2, 3, 4, 5 ou 6 substituintes selecionados independentemente) de halogênio, -CO2R’, -COOH, -CN, -OH, -OR’, -NH2, -NHR’, - N(R’)2, -SR’ ou -SO2R’, em que cada caso de R’ é independentemente alquila C1-C3. Nas modalidades, o alquila não é substituído. Nas modalidades, o alquila é substituído (por exemplo, com 1, 2, 3, 4, 5 ou 6 grupos substituintes como descrito nesse documento). Por exemplo, o termo

“hidroxialquila” refere-se a um grupo alquila, como descrito nesse documento, que compreende um substituinte hidroxila (- OH) e inclui grupos tal como -CH2OH.

[00134] Como usado nesse documento, “alquenila” significa qualquer cadeia de hidrocarboneto linear ou ramificada tendo uma ou mais ligações duplas carbono-carbono insaturadas que podem ocorrer em qualquer ponto estável ao longo da cadeia, por exemplo, “alquenila C2-C20” refere-se a um grupo alquenila tendo 2-20 carbonos. Por exemplo, um grupo alquenila inclui prop-2-enila, but-2-enila, but-3-enila, 2- metilprop-2-enila, hex-2-enila, hex-5-enila, 2,3- dimetilbut-2-enila e semelhantes. Nas modalidades, o alquenila compreende 1, 2 ou 3 ligações duplas carbono- carbono. Nas modalidades, o alquenila compreende uma única ligação dupla carbono-carbono. Nas modalidades, múltiplas ligações duplas (por exemplo, 2 ou 3) são conjugadas. Um grupo alquenila pode ser não substituído ou substituído com um ou mais de grupos substituintes como descrito nesse documento. Por exemplo, um grupo alquenila pode ser substituído com um ou mais (por exemplo, 1, 2, 3, 4, 5 ou 6 substituintes selecionados independentemente) de halogênio, -CO2R’, -CN, -OH, -OR’, - NH2, -NHR’, -N(R’)2, -SR’ ou -SO2R’, em que cada caso de R’ é independentemente alquila C1-C3. Nas modalidades, o alquenila não é substituído. Nas modalidades, o alquenila é substituído (por exemplo, com 1, 2, 3, 4, 5 ou 6 grupos substituintes como descrito nesse documento).

[00135] Como usado nesse documento, “alquinila” significa qualquer cadeia de hidrocarboneto de configuração linear ou ramificada, tendo uma ou mais de ligações triplas carbono-carbono ocorrendo em qualquer ponto estável ao longo da cadeia, por exemplo, “alquinila C2-C20” refere-se a um grupo alquinila tendo 2-20 carbonos. Exemplos de um grupo alquinila incluem prop-2-inila, but-2-inila, but-3-inila, pent-2-inila, 3-metilpent-4-inila, hex-2-inila, hex-5- inila, e similares. Nas modalidades, um alquinila compreende uma ligação tripla carbono-carbono. Um grupo alquinila pode ser não substituído ou substituído com um ou mais de grupos substituintes como descrito nesse documento. Por exemplo, um grupo alquinila pode ser substituído por um ou mais (por exemplo, 1, 2, 3, 4, 5 ou 6 substituintes selecionados independentemente) de halogênio, -CO2R’, -CN, -OH, -OR’, - NH2, -NHR’, -N(R’)2, -SR’ ou -SO2R’, em que cada caso de R’ é independentemente alquila C1-C3. Nas modalidades, o alquinila não é substituído. Nas modalidades, o alquinila é substituído (por exemplo, com 1, 2, 3, 4, 5 ou 6 grupos substituintes como descrito nesse documento).

[00136] Como usado nesse documento, o termo “cicloalquila” significa um grupo não aromático, saturado, cíclico, por exemplo, “cicloalquila C3-C10”. Nas modalidades, um cicloalquila é monocíclico. Nas modalidades, um cicloalquila é policíclico (por exemplo, bicíclico ou tricíclico). Em grupos cicloalquila policíclicos, os anéis individuais podem ser fundidos, ligados em ponte ou espirocíclicos. Exemplos de um grupo cicloalquila incluem ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, ciclo-hexila, norbornanila, biciclo[3.2.1]octanila, octa-hidro- pentalenila e espiro[4.5]decanila e semelhantes. O termo “cicloalquila” pode ser usado alternadamente com o termo “carbociclo”. Um grupo cicloalquila pode ser não substituído ou substituído com um ou mais de grupos substituintes como descrito nesse documento. Por exemplo, um grupo cicloalquila pode ser substituído por um ou mais (por exemplo, 1, 2, 3, 4, 5 ou 6 substituintes selecionados independentemente) de halogênio, -CO2R’, -CN, -OH, -OR’, -NH2, -NHR’, -N(R’)2, -SR’ ou -SO2R’, em que cada caso de R’ é independentemente alquila C1-C3. Nas modalidades, o cicloalquila não é substituído. Nas modalidades, o cicloalquila é substituído (por exemplo, com 1, 2, 3, 4, 5 ou 6 grupos substituintes como descrito nesse documento).

[00137] Como usado nesse documento, o termo “halogênio” significa flúor, cloro, bromo ou iodo.

[00138] Como usado nesse documento, um “composto aromático”, “aromático” ou composto contendo um “anel aromático” é um arila ou um composto heteroarila. O termo “arila”, como usado nesse documento, inclui grupos aromáticos de anel único substituídos ou não substituídos em que cada átomo do anel é carbono. De preferência, o anel é um anel de 3 a 8 membros, mais de preferência um anel de 6 membros. O termo “arila” também inclui sistemas de anéis policíclicos tendo dois ou mais anéis cíclicos nos quais dois ou mais carbonos são comuns a dois anéis adjacentes em que pelo menos um dos anéis é aromático, por exemplo, os outros anéis cíclicos podem ser cicloalquilas, cicloalquenilas, cicloalquinilas, arilas, heteroarilas e/ou heterociclilas. Os grupos arila incluem benzeno, naftaleno, fenantreno, fenol, anilina e semelhantes. O termo “heteroarila” inclui estruturas de anel único aromáticas substituídas ou não substituídas, de preferência anéis de 3 a 8 membros, mais de preferência anéis de 5 a 7 membros, ainda mais de preferência anéis de 5 a 6 membros, cujas estruturas de anel incluem pelo menos um heteroátomo, de preferência um a quatro heteroátomo(s), mais de preferência um ou dois heteroátomo(s). O termo “heteroarila” também inclui sistemas de anéis policíclicos tendo dois ou mais anéis cíclicos nos quais dois ou mais carbonos são comuns a dois anéis adjacentes, em que pelo menos um dos anéis é heteroaromático, por exemplo, os outros anéis cíclicos podem ser cicloalquilas, cicloalquenilas, cicloalquinilas, arilas, heteroarilas e/ou heterociclilas. Os grupos heteroarila incluem, por exemplo, pirrol, furano, tiofeno, indol, imidazol, oxazol, tiazol, pirazol, piridina, pirazina, piridazina e pirimidina e semelhantes. De preferência, certos compostos da presente invenção incluem pelo menos um, de preferência dois, grupo(s) indol, bem como pelo menos um grupo aldeído.

[00139] O termo “substituído” significa porções tendo pelo menos um substituinte que substitui um átomo de hidrogênio em um ou mais carbonos da estrutura principal. Será entendido que “substituição” ou “substituído por” inclui a condição implícita de que tal substituição está de acordo com a valência permitida do átomo substituído e do substituinte, e que a substituição resulta em um composto estável, por exemplo, que não sofrem transformações espontaneamente, como por rearranjo, ciclização, eliminação e semelhantes. Os substituintes permitidos podem ser um ou mais e iguais ou diferentes para compostos orgânicos apropriados.

[00140] Como aqui usado, o termo “heterociclo” ou “heterocíclico” significa um sistema de anel monocíclico, bicíclico ou tricíclico contendo pelo menos um heteroátomo.

Os heteroátomos incluem, mas não estão limitados a, oxigênio, nitrogênio e enxofre.

[00141] Um anel monocíclico heterocíclico consiste, por exemplo, em um anel de 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 ou 10 membros contendo pelo menos um heteroátomo. Exemplos representativos de anéis heterocíclicos monocíclicos incluem, mas não estão limitados a, azetidinila, azepanila, aziridinila, diazepanila, 1,3-dioxanila, 1,3-dioxolanila, 1,3- ditiolanila, 1,3-ditianila, imidazolinila, imidazolidinila, isotiazolinila, isotiazolidinila, isoxazolinila, isoxazolidinila, morfolinila, oxadiazolinila, oxadiazolidinila, oxazolinila, oxazolidinila, piperazinila, piperidinila, piranila, pirazolinila, pirazolidinila, pirrolinila, pirrolidinila, tetra-hidrofuranila, tetra- hidrotienila, tiadiazolinila, tiadiazolidinila, tiazolinila, tiazolidinila, tiomorfolinila, 1,1- dioxidotiomorfolinila (tiomorfolinossulfona), tiopiranila e tritianila.

[00142] Um anel heterocíclico bicíclico é, por exemplo não limitativo, um anel monocíclico heterocíclico fundido a um anel arila distal ou o anel monocíclico heterocíclico fundido a um anel cicloalquila distal ou o anel monocíclico heterocíclico fundido a um anel cicloalquenilas distal ou o anel monocíclico heterocíclico fundido a um anel monocíclico heterocíclico distal, ou o anel monocíclico heterocíclico fundido a um anel heteroarila monocíclico distal. Exemplos representativos de anéis heterocíclicos bicíclicos incluem, mas não estão limitados a, 1,3-benzodioxolila, 1,3- benzoditiolila, 2,3-di-hidro-1,4-benzodioxinila, 2,3-di- hidro-1-benzofuranila, 2,3-di-hidro-1-benzotienila, 2,3-di-

hidro-1H-indolila e 1,2,3,4-tetra-hidroquinolinila.

[00143] Um anel heterocíclico tricíclico é, por exemplo não limitativo, um anel heterocíclico bicíclico fundido a um grupo fenila ou o anel bicíclico heterocíclico fundido a um grupo cicloalquila ou o anel bicíclico heterocíclico fundido a um grupo cicloalquenila ou o anel bicíclico heterocíclico fundido a outro anel monocíclico heterocíclico. Exemplos representativos de anéis tricíclicos heterocíclicos incluem, mas não estão limitados a, 2,3,4,4a,9,9a-hexa-hidro-1H- carbazolila, 5a,6,7,8,9,9a-hexa-hidrodibenzo[b,d]furanila e 5a,6,7,8,9,9a-hexahidrodibenzo[b,d]tienila.

[00144] Os heterociclos da presente invenção podem ser substituídos por substituintes independentemente selecionados de, por exemplo não limitativo, alquenila, alcoxi, alcoxialquila, alcoxialquinila, alcoxicarbonila, alcoxicarbonilalquila, alcoxi-NH═C(alquila)-, alquila, alquilcarbonila, alquilcarbonilalquila, alquilcarboniloxi, alquilssulfonila, alquiltio, alquinila, arila, arilalcoxi, arilalquila, arilcarbonila, ariloxi, carboxi, carboxialquila, ciano, cianoalquila, cicloalquila, carbonila, cicloalquilalquila, formila, halogênio, haloalquila, hidroxi, hidroxialquila, hidroxicicloalquila, mercapto, nitro, oxo e fenila.

[00145] Como usado nesse documento, “modulação da pigmentação da pele” e variações gramaticais da mesma referem-se geralmente ao brilho da pele, bem como aos efeitos de escurecimento da pele dos compostos e composições da presente invenção.

[00146] Como usado nesse documento, “brilho da pele” e variações gramaticais dos mesmos referem-se geralmente a qualquer redução real ou percebida na pigmentação da pele. Métodos de iluminação da pele têm sido usados para reduzir a pigmentação de áreas hiperpigmentadas da pele resultante da idade, da exposição ao sol ou de um distúrbio de hiperpigmentação. A aplicação dos compostos e das composições da presente invenção, por exemplo, na pele de um indivíduo, pode reduzir a pigmentação de modo que a pele pareça mais clara ou mais branca do que antes da referida aplicação. A pigmentação da pele pode ser avaliada de várias maneiras, incluindo, mas não se limitando a, avaliações visuais usando, por exemplo, a escala cromática de von Luschan, o teste de tipagem cutânea de Fitzpatrick (Fitzpatrick et al., 1988) e a escala de hiperpigmentação de Taylor (Taylor et al., 2005) e métodos de espectrofotometria de refletância (Zonios, et al., 2001). Por exemplo, o teste de tipagem cutânea Fitzpatrick inclui seis tipos de pele (I- VI), e a pele Tipo VI que se torna Tipo V ou menos foi “iluminada” conforme o termo é usado nesse documento. Como discutido mais abaixo, o brilho da pele pode resultar devido a uma série de fenômenos, incluindo, mas não se limitando a, modulação da atividade dos melanócitos, indução da apoptose dos melanócitos ou modulação da atividade do receptor de hidrocarboneto de arila (AhR), melanogênese, biogênese dos melanossomas, transferência de melanossomas, ou concentração de melanina.

[00147] Da mesma forma, como usado nesse documento, “escurecimento da pele” e variações gramaticais do mesmo referem-se geralmente a qualquer aumento real ou percebido na pigmentação da pele. Os métodos de escurecimento da pele têm sido usados para aumentar a pigmentação de áreas hipopigmentadas da pele resultantes de, por exemplo, um distúrbio de hipopigmentação. A aplicação dos compostos e das composições da presente invenção, por exemplo, na pele de um indivíduo, pode aumentar a pigmentação de modo que a pele pareça mais escura do que antes da referida aplicação.

[00148] Certos compostos da presente invenção são produzidos por, derivados de, isolados de, ou isoláveis de uma levedura Malassezia. As leveduras Malassezia são leveduras do gênero Malassezia e incluem, mas não estão limitadas a, Malassezia globosa, Malassezia restricta, Malassezia furfur, Malassezia sympodialis, Malassezia slooffiae, Malassezia obtusa, Malassezia pachydermatis, Malassezia dermatis, Malassezia japonica, Malassezia nana, Malassezia yamatoensis, Malassezia equine, Malassezia caprae, e Malassezia cuniculi. (Guého, et al., 1996; Gaitanis, et al., 2013). A levedura Malassezia faz parte da flora cutânea humana normal e tipicamente não produz efeitos patogênicos. No entanto, a levedura Malassezia pode causar uma série de doenças, incluindo, mas não se limitando a pitiríase versicolor (ambas as variedades hiperpigmentada e hipopigmentada), dermatite seborreica, caspa, dermatite atópica, foliculite por Malassezia, psoríase e papilomatose confluente e reticulada. (Gaitanis, et al., 2013).

[00149] Como usado nesse documento, o termo “análogo químico” refere-se a um composto que está estruturalmente relacionado a um composto precursor e contém diferentes grupos funcionais ou substituintes. Por exemplo, um composto precursor da presente invenção é indirrubina, e análogos químicos de indirrubina contêm certos grupos funcionais e substituintes que são distintos de indirrubina. Os análogos químicos da presente invenção podem ter vantagens significativas sobre um determinado composto precursor, incluindo um perfil farmacocinético adequado para uso cosmético ou farmacêutico. Em algumas modalidades, um análogo químico é gerado a partir de uma molécula precursora por uma ou mais de reações químicas. Em outras modalidades, esquemas de síntese alternativos que não se originam com um composto precursor podem ser usados para gerar análogos químicos da presente invenção.

[00150] Um composto da presente invenção é produzido por uma levedura Malassezia se, ao longo do seu ciclo de vida, uma levedura Malassezia fosse sintetizar, secretar, acumular ou de outra forma gerar o composto sob condições de crescimento apropriadas. A levedura Malassezia secreta diferentes compostos, dependendo de como seu meio de crescimento é suplementado. (Nazzaro-Porro, et al., 1978). A presente invenção inclui qualquer composto produzido por uma levedura Malassezia sob qualquer condição de crescimento, mas os compostos preferidos incluem, por exemplo, Malassezina, indirrubina e análogos químicos dos mesmos.

[00151] Um composto da presente invenção é derivado de uma levedura Malassezia se, a qualquer momento ao longo do ciclo de vida da levedura, o composto existiu na levedura.

[00152] A indirrubina é um exemplo de um composto produzido por uma levedura Malassezia da presente invenção. A indirrubina é um metabólito isolado da Malassezia furfur. A indirrubina é um conhecido agonista do receptor de hidrocarboneto de arila (AhR), um receptor implicado no crescimento celular, diferenciação e expressão gênica.

[00153] Como usado nesse documento, o termo “melanócito” refere-se a uma célula dendrítica da epiderme que normalmente sintetiza tirosinase e, dentro dos melanossomas, o pigmento melanina. Os melanócitos da presente invenção exibem regulação positiva de certos genes, incluindo, mas não se limitando a, um ou mais dos seguintes: tirosinase (albinismo oculocutâneo IA), fator de transcrição associado à microftalmia, alfa-2-macroglobulina, proteína relacionada à tirosinase 1, família carreadora de soluto 16, proteína GS3955, sarcoma felino v-kit Hardy-Zuckerman 4, albinismo ocular 1, proteína Rag D, glicogenina 2, receptor acoplado à proteína G, família C, albinismo oculocutâneo II, deletado em câncer de esôfago 1, melan-A, SRY-box 10, ATPase, Classe V, tipo 10C, metaloproteinase de matriz 1, fator de crescimento de transformação latente beta b, cassete de ligação de ATP, subfamília C, hidroxiprostaglandina desidrogenase 15, membro da superfamília transmembranar 7, glutaminil-peptídeo ciclotransferase e outros genes identificados por Lee e colegas. (Lee, et al., 2013).

[00154] Os melanócitos, como muitos outros tipos de células, sofrem morte celular programada ou apoptose. As vias de apoptose de melanócitos são conhecidas por aqueles habilitados na técnica (Wang, et al., 2014), e as vias de apoptose geralmente foram revisadas por Elmore (Elmore, 2007). Um(a) composto ou composição da presente invenção “induz” a apoptose de melanócitos, por exemplo, causando a ativação de certas vias de transdução de sinal pró- apoptóticas ou causando a repressão de certas vias anti- apoptóticas em um melanócito. Prevê-se que os compostos ou as composições da presente invenção podem ativar/reprimir diretamente uma via relacionada à apoptose interagindo diretamente com uma molécula de sinalização da via ou indiretamente interagindo com uma molécula da via por meio de interação direta com uma ou mais de moléculas intermediárias que normalmente não funcionam dentro da via.

[00155] A atividade de melanócitos pode ser modulada de várias maneiras contempladas na presente invenção, incluindo, mas não se limitando a, induzir a apoptose de melanócitos ou alterar a expressão do gene de melanócitos, motilidade celular, crescimento celular, produção de melanina, biogênese de melanossoma ou transferência de melanossoma.

[00156] Como usado nesse documento, os termos “modular”, “modulando” e variações gramaticais dos mesmos se referem a um ajuste de uma atividade ou um fenômeno biológica(o) a um nível desejado. Prevê-se que a “modulação” da presente invenção inclui ajustes que aumentam ou diminuem os níveis da atividade ou fenômeno biológica(o).

[00157] Como usado nesse documento, os termos “agonista”, “agonizante” e variações gramaticais dos mesmos se referem a uma molécula que desencadeia (por exemplo, inicia ou promove), parcialmente ou totalmente aumenta, estimula ou ativa uma ou mais das atividades biológicas. Os agonistas da presente invenção podem interagir e ativar um receptor, iniciando assim uma resposta fisiológica ou farmacológica característica desse receptor. Os agonistas da presente invenção incluem substâncias que ocorrem naturalmente, bem como substâncias sintéticas.

[00158] Como usado nesse documento, os termos “antagonista”, “antagonizar” e variações gramaticais dos mesmos referem-se a uma molécula que suprime, inibe ou desativa parcialmente ou totalmente uma ou mais das atividades biológicas. Os antagonistas da presente invenção podem ligar-se competitivamente a um receptor no mesmo local que um agonista, mas não ativa a resposta intracelular iniciada pela forma ativa do receptor. Os antagonistas da presente invenção podem inibir as respostas intracelulares de um agonista ou agonista parcial.

[00159] Um receptor de hidrocarboneto de arila (AhR) da presente invenção é qualquer receptor de hidrocarboneto de arila que existe naturalmente em um indivíduo como descrito nesse documento. Os receptores de hidrocarboneto de arila são conhecidos dos habilitados na técnica (Noakes, 2015). Os agonistas dos receptores de hidrocarboneto de arila incluem, mas não estão limitados a, compostos relacionados a triptofano, tais como quinurenina, ácido quinurênico, ácido cinabarínico e 6-formilindol[3,2-b]carbazol (FICZ).

[00160] Como usado nesse documento, os compostos, composições e métodos da presente invenção podem ser usados para melhorar a hiperpigmentação causada por um distúrbio de hiperpigmentação, por exemplo, reduzindo o nível de hiperpigmentação em áreas afetadas por um distúrbio de hiperpigmentação, reduzindo ainda mais a hiperpigmentação, ou prevenindo a ocorrência de mais hiperpigmentação. No entanto, porque cada indivíduo pode não responder a um determinado protocolo de dosagem, regime ou processo, melhorando a hiperpigmentação causada por um distúrbio de hiperpigmentação não requer que a resposta ou o resultado fisiológica(o) desejada(o) seja alcançada(o) em cada indivíduo ou população de indivíduos. Consequentemente,

um(a) determinado indivíduo ou população de indivíduos pode falhar em responder ou responder inadequadamente à dosagem, mas outro(a)s indivíduos ou populações de indivíduos podem responder e, portanto, vivenciar melhora em seu distúrbio de hiperpigmentação.

[00161] A melanina é um pigmento produzido naturalmente que dá cor à pele e ao cabelo. A melanina é produzida pelos melanócitos em organelas conhecidas como melanossomas por um processo conhecido como melanogênese. Um(a) composto ou composição da presente invenção modula a produção de melanina (melanogênese a/k/a) em um indivíduo, por exemplo, modulando a biogênese de melanossoma e inibindo direta ou indiretamente a síntese de melanina no nível enzimático.

[00162] A biogênese dos melanossomas ocorre por meio de quatro estágios: O estágio I é caracterizado por pré- melanossomas, que são essencialmente vacúolos não pigmentados. No estágio II, os pré-melanossomas desenvolvem estrias nas quais a melanina é depositada no estágio III. O estágio IV resulta em melanossomas maduros que são ricos em conteúdo de melanina. O(a)s compostos e composições da presente invenção modulam a biogênese dos melanossomas, inibindo ou atenuando os processos biológicos que normalmente promovem qualquer uma ou todas essas etapa(s) (Wasmeier, et al., 2008).

[00163] A síntese de melanina envolve principalmente três enzimas: tirosinase, proteína-1 relacionada à tirosinase e dopacromo tautomerase. Fatores adicionais que afetam o tráfego intracelular dessas enzimas incluem, mas não estão limitados a, BLOC-1, OA1 e SLC45A2. O(a)s compostos e composições da presente invenção podem modular a produção de melanina, por exemplo, inibindo ou atenuando a atividade de qualquer uma dessa(e)s enzimas ou fatores (Yamaguchi, et al., 2014).

[00164] Uma vez que os melanossomas se formaram e a melanina foi sintetizada, os melanossomas precisam ser transferidos dos melanócitos epidérmicos para os queratinócitos da pele e do cabelo. Os melanossomas se originam próximo ao núcleo dos melanócitos e são transportados para a periferia dos melanócitos ao longo de microtúbulos e filamentos de actina. O(a)s compostos e composições da presente invenção modula(m) a transferência de melanossomas interferindo com qualquer um dos processos biológicos que resultam no transporte de melanossomas da região perinuclear para a periferia dos melanócitos e para os queratinócitos adjacentes.

[00165] A concentração de melanina pode ser modulada, por exemplo, aumentando ou diminuindo a melanogênese ou promovendo a degradação da melanina em, ou eliminação de, um indivíduo.

[00166] Como usado nesse documento, o termo “melanina epidérmica” refere-se à melanina que é produzida, transportada ou de outra forma encontrada na epiderme.

[00167] Como usado nesse documento, o termo “reduzir” e variações gramaticais do mesmo significam causar uma diminuição no nível de um(a) determinado(a) fenômeno ou espécie biológico(a). Por exemplo, os compostos e composições da presente invenção reduzem a melanina epidérmica em um indivíduo, o que significa que os compostos e as composições da presente invenção induzem uma diminuição no nível de melanina epidérmica no indivíduo. O termo

“reduzir” e variações gramaticais do mesmo podem significar, por exemplo, diminuir o nível de um determinado fenômeno ou espécie em pelo menos 5%, 10%, 25%, 50%, 75% ou 100%.

[00168] Como usado nesse documento, o termo “contactar” e variações gramaticais do mesmo se referem a trazer dois ou mais materiais em proximidade suficiente para que eles possam interagir. Assim, apenas para finalidades ilustrativas, um composto da presente invenção pode contactar um melanócito, por exemplo, interagindo com um receptor na superfície do melanócito. De forma similar, uma composição da presente invenção pode contactar um indivíduo humano, por exemplo, sendo aplicada diretamente na pele do indivíduo.

[00169] Como usado nesse documento, um “indivíduo” significa um(a) célula, tecido, organismo de mamífero ou populações dos mesmos. Os indivíduos da presente invenção são de preferência humanos, incluindo células, tecidos e seres humanos, mas de outra forma incluem primatas, animais de pecuária, animais domésticos, animais de laboratório e semelhantes. Alguns exemplos de animais agrícolas incluem vacas, porcos, cavalos, cabras e semelhantes. Alguns exemplos de animais domésticos incluem cães, gatos e semelhantes. Alguns exemplos de animais de laboratório incluem primatas, ratos, camundongos, coelhos, porquinhos- da-índia e semelhantes.

[00170] Como usado nesse documento, um indivíduo “em necessidade” de melhora na hiperpigmentação causada por um distúrbio de hiperpigmentação inclui indivíduos com uma necessidade real ou percebida de melhora.

[00171] Como usado nesse documento, os termos “tratar”, “tratando”, “tratamento” e variações gramaticais dos mesmos significam submeter um indivíduo a um protocolo, regime, processo ou remédio, no qual se deseja obter um(a) resposta ou resultado fisiológica(o) naquele indivíduo, por exemplo, um paciente. Em particular, os métodos e composições da presente invenção podem ser usados para retardar o desenvolvimento dos sintomas da doença ou atrasar o início da doença ou condição, ou parar a progressão do desenvolvimento da doença. No entanto, porque cada indivíduo tratado pode não responder a um determinado protocolo, regime, processo de tratamento ou remédio, o tratamento não requer que a(o) resposta ou resultado fisiológica(o) desejada(o) seja alcançada(o) em cada indivíduo ou população de indivíduos, por exemplo, população de pacientes. Consequentemente, um determinado indivíduo ou uma população de indivíduos, por exemplo, a população de pacientes pode não responder ou responder inadequadamente ao tratamento.

[00172] Como usado nesse documento, os termos “prevenir”, “prevenindo”, “prevenção” e variações gramaticais dos mesmos significam que os compostos da presente invenção são úteis quando administrados a um paciente que não foi diagnosticado como tendo o distúrbio ou a doença no momento da administração, mas de quem normalmente se espera que desenvolva o distúrbio ou a doença ou esteja em risco aumentado para o distúrbio ou a doença. O(a)s compostos e composições da invenção, por exemplo, retardam o desenvolvimento dos sintomas do distúrbio ou da doença, atrasam o início do distúrbio ou a doença ou previnam que o indivíduo desenvolva o distúrbio ou a doença. A prevenção também inclui a administração dos compostos da invenção àqueles indivíduos considerados predispostos ao distúrbio ou a doença devido à(ao)(s) idade, histórico familiar, anormalidades genéticas ou cromossômicas e/ou devido à presença de um ou mais marcadores biológicos para o distúrbio ou a doença.

[00173] Como usado nesse documento, o termo “promover” e variações gramaticais do mesmo significam permitir, intensificar, permitir, facilitar, promover, encorajar, induzir ou de outra forma ajudar a realizar.

[00174] Como usado nesse documento, o termo “produzir” e variações gramaticais do mesmo significam fazer com que um determinado resultado aconteça, ocorra ou venha a existir. Por exemplo não limitativo, o(a)s compostos e composições da presente invenção produzem um efeito fotoprotetor ou protetor de UV em um indivíduo.

[00175] Como usado nesse documento, o termo “eritema” refere-se à vermelhidão da pele. O eritema pode ser causado por dilatação e/ou irritação dos capilares superficiais. O termo “eritema induzido por UV” refere-se à vermelhidão da pele que se desenvolve como resultado da exposição aos raios UV. Como usado nesse documento, “queimadura de sol” e variações gramaticais do mesmo referem-se a eritema induzido por UV causado pela exposição à luz do sol ou fontes de UV artificiais (por exemplo, camas de bronzeamento).

[00176] Como usado nesse documento, o termo “hiperpigmentação” refere-se geralmente a uma área da pele em que a pigmentação é maior do que a de uma área adjacente da pele (por exemplo, uma mancha de pigmento, mancha de idade, verruga e semelhantes). A hiperpigmentação da presente invenção inclui, mas não está limitada a, hiperpigmentação regional por hiperatividade melanocítica,

outra hiperpigmentação localizada por hiperatividade e proliferação melanocítica benigna, hiperpigmentação relacionada à doença e hiperpigmentações acidentais, tais como aquelas devido à fotossensibilização, composição genética, ingestão química ou outra exposição (por exemplo, exposição a UV), idade e cicatrizes pós-lesionais. Como usado nesse documento, “hiperpigmentação induzida por UV” refere- se a qualquer hiperpigmentação causada pela exposição a UV natural ou artificial.

[00177] Como usado nesse documento, o termo “hipopigmentação” refere-se geralmente a uma área da pele em que a pigmentação é menor do que a de uma área adjacente da pele. A hipopigmentação da presente invenção inclui, mas não está limitada a, vitiligo, despigmentação, pitiríase alba, hipopigmentação focal, hipopigmentação pós-inflamatória, piebaldismo, albinismo, tínea versicolor, fotossensibilidade, leucismo, hipomelanose, dermatite atópica, psoríase e semelhantes.

[00178] Como usado nesse documento, “dano à pele induzido por UV” significa dano à pele resultante da exposição a UV, incluindo UVA, UVB e UVC. O dano à pele induzido por UV da presente invenção inclui, mas não está limitado a, rugas, hiperpigmentação, displasias, ceratose actínica e cânceres de pele.

[00179] Como usado nesse documento, “envelhecimento da pele induzido por UV” significa envelhecimento da pele resultante da exposição a UV, incluindo UVA, UVB e UVC. O envelhecimento da pele induzido por UV da presente invenção se manifesta como, por exemplo, rugas, linhas finas, manchas senis, pintas, secura, finura ou elasticidade reduzida da pele, tom de pele irregular e outras reduções em brilho, textura, resiliência, firmeza, flacidez e clareza da pele causadas, no todo ou em parte, pela exposição a UV.

[00180] Como usado nesse documento, o termo “fotoprotetor” e variações gramaticais do mesmo, quando usado para descrever os efeitos dos compostos e composições da presente invenção, significa que o composto e as composições descritos nesse documento previnem e/ou mitigam os danos causados pela luz, particularmente a luz do sol. Da mesma forma, “agentes fotoprotetores” da presente invenção são aqueles compostos e composições descritos nesse documento que previnem e/ou mitigam os danos causados pela luz, particularmente luz do sol.

[00181] Como usado nesse documento, o termo “protetor de UV” e variações gramaticais do mesmo, quando usado para descrever os efeitos dos compostos e composições da presente invenção, significam que o composto e as composições descritos nesse documento previnem e/ou mitigam os danos causados por luz ultravioleta (“UV”). Da mesma forma, “agentes de proteção de UV” da presente invenção são aqueles compostos e composições descritos nesse documento que previnem e/ou mitigam os danos causados por UV. A luz ultravioleta da presente invenção inclui, por exemplo, UVA (320-240 nm), UVB (290-320 nm) e UVC (200-290 nm).

[00182] Como usado nesse documento, o termo “filtro” e variações gramaticais do mesmo significam bloquear, refletir, absorver ou espalhar UV. “Agentes de proteção solar” da presente invenção incluem todos os compostos e composições da presente invenção que bloqueiam, refletem, absorvem ou espalham UV.

[00183] Como usado nesse documento, o termo “absorver” e variações gramaticais do mesmo significam receber UV ou converter UV em energia térmica. Por exemplo não limitativo, os compostos e composições da presente invenção podem absorver UV e, como resultado, irradiar energia térmica em seus arredores.

[00184] Como usado nesse documento, o termo “refletir” e variações gramaticais do mesmo, quando usados no contexto de UV, significam lançar ou devolver UV sem absorvê-lo.

[00185] Como usado nesse documento, o termo “composição” significa uma entidade que compreende um ou mais composto(s) da presente invenção, bem como qualquer entidade que resulte, direta ou indiretamente, de combinações de um ou mais composto(s) da presente invenção com outros ingredientes. As composições da presente invenção podem ser usadas como, por exemplo, reagentes de pesquisa in vitro ou in vivo. As composições da presente invenção também podem ser aplicadas diretamente na pele de um indivíduo humano ou não humano para um efeito cosmético ou farmacêutico. Adicionalmente, as composições da presente invenção compreendem um ou mais dos compostos listados na Tabela 1 ou na Fig. 3, ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou sal farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável dos mesmos.

[00186] Uma composição da presente invenção pode ser administrada de qualquer maneira desejada e eficaz para aplicações in vitro e in vivo: para ingestão oral ou para administração parenteral ou outra de qualquer maneira apropriada, tais como, intraperitoneal, subcutânea, tópica, intradérmica, por inalação, intrapulmonar, retal, vaginal, sublingual, intramuscular, intravenosa, intra-arterial,

intratecal ou intralinfática. Além disso, uma composição da presente invenção pode ser administrada em conjunto com outras composições. Uma composição da presente invenção pode ser encapsulada ou de outro modo protegida contra secreções gástricas ou outras secreções, se desejado.

[00187] As composições da invenção compreendem um ou mais ingrediente(s) ativo(s) em mistura com um ou mais carreador(es) cosmeticamente ou farmaceuticamente aceitável(eis) e, opcionalmente, um ou mais outros compostos, ingredientes e/ou materiais. Independentemente da via de administração selecionada, os compostos e composições da presente invenção são formulados em formas de dosagem cosmeticamente ou farmaceuticamente aceitáveis por métodos convencionais conhecidos pelos habilitados na técnica.

[00188] Veículos, diluentes e carreadores cosmeticamente ou farmaceuticamente aceitáveis são bem conhecidos na técnica e incluem materiais adequados para contato com os tecidos de humanos e não humanos sem toxicidade, incompatibilidade, instabilidade, irritação, resposta alérgica indevidas e semelhantes. Os veículos, diluentes e carreadores cosmeticamente ou farmaceuticamente aceitáveis incluem qualquer substância substancialmente não tóxica convencionalmente utilizável, por exemplo, para administração tópica, oral, peritoneal ou subcutânea de cosméticos ou produtos farmacêuticos em que os compostos e as composições da presente invenção permanecerão estáveis e biodisponíveis quando aplicados, ingeridos, injetados ou de outra forma administrados a um indivíduo humano ou não humano. Os carreadores cosmeticamente ou farmaceuticamente aceitáveis adequados para aplicação tópica são conhecidos pelos habilitados na técnica e incluem líquidos, cremes, óleos, loções, pomadas, géis ou sólidos cosmeticamente ou farmaceuticamente aceitáveis, tais como cremes noturnos cosméticos convencionais, cremes de base, loções bronzeadoras, protetores solares, loções para as mãos, maquiagens e bases de maquiagens, máscaras e semelhantes. Os carreadores adequados para uma forma de dosagem selecionada e a via de administração pretendida são bem conhecidos na técnica, e os carreadores aceitáveis para uma forma de dosagem e um método de administração escolhidos podem ser determinados usando um habilitado comum na técnica.

[00189] As composições da presente invenção podem conter outros ingredientes convencionais em cosméticos, incluindo perfumes, estrogênio, vitaminas A, C e E, alfa-hidroxi ou alfa-cetoácidos, tais como, ácido pirúvico, lático ou glicólico, lanolina, vaselina, aloe vera, metil ou propil parabeno, pigmentos e semelhantes. Os veículos, diluentes e carreadores cosmeticamente ou farmaceuticamente aceitáveis não limitativos da presente invenção incluem açúcares (por exemplo, lactose, sacarose, manitol e sorbitol), amidos, preparações de celulose, fosfatos de cálcio (por exemplo, fosfato dicálcico, fosfato tricálcico e hidrogenofosfato de cálcio), citrato de sódio, água, soluções aquosas (por exemplo, solução salina, injeção de cloreto de sódio, injeção de Ringer, injeção de dextrose, injeção de dextrose e cloreto de sódio, injeção de Ringer com lactato), álcoois (por exemplo, álcool etílico, álcool propílico e álcool benzílico), polióis (por exemplo, glicerol, propilenoglicol e polietilenoglicol), ésteres orgânicos (por exemplo, oleato de etila e triglicerídeos), polímeros biodegradáveis (por exemplo, polilactídeo-poliglicolídeo, poli(ortoésteres) e poli(anidridos)), matrizes elastoméricas, lipossomas, microesferas, óleos (por exemplo, de milho, de germem, de azeitona, de mamona, de gergelim, de semente de algodão e de amendoim moído), manteiga de cacau, ceras (por exemplo, ceras de supositório), parafinas, silicones, talco, silicilato e semelhantes.

[00190] As composições da invenção podem, opcionalmente, conter ingredientes e/ou materiais adicionais comumente usados em composições cosméticas. Esses ingredientes e materiais são bem conhecidos na técnica e incluem, por exemplo, (1) cargas ou diluentes, tais como, amidos, lactose, sacarose, glicose, manitol e ácido silícico; (2) aglutinantes, tais como, carboximetilcelulose, alginatos, gelatina, polivinilpirrolidona, hidroxipropilmetilcelulose, sacarose e acácia; (3) umectantes, tal como glicerol; (4) agentes desintegrantes, tais como, ágar-ágar, carbonato de cálcio, amido de batata ou tapioca, ácido algínico, certos silicatos, amidoglicolato de sódio, carboximetilcelulose de sódio reticulada e carbonato de sódio; (5) agentes retardadores de solução, tal como parafina; (6) aceleradores de absorção, tais como compostos de amônio quaternário; (7) agentes umectantes, tais como, álcool cetílico e monoestearato de glicerol; (8) absorventes, tais como, caulim e argila bentonítica; (9) lubrificantes, tais como, talco, estearato de cálcio, estearato de magnésio, polietilenoglicóis sólidos e laurilssulfato de sódio; (10) agentes de suspensão, tais como, álcoois isoestearílicos etoxilados, polioxietileno sorbitol e ésteres de sorbitano, celulose microcristalina, meta-hidróxido de alumínio,

bentonita, ágar-ágar e tragacanto; (11) agentes tamponantes; (12) excipientes, tais como, lactose, açúcares de leite, polietilenoglicóis, gorduras animais e vegetais, óleos, ceras, parafinas, manteiga de cacau, amidos, tragacanto, derivados de celulose, polietilenoglicol, siliconas, bentonitas, ácido silícico, talco, salicilato, óxido de zinco, hidróxido de alumínio, silicatos de cálcio e pó de poliamida; (13) diluentes inertes, tais como água ou outros solventes; (14) conservantes; (15) agentes tensoativos; (16) agentes dispersantes; (17) agentes de liberação de controle ou retardantes de absorção, tais como, hidroxipropilmetilcelulose, outras matrizes poliméricas, polímeros biodegradáveis, lipossomas, microesferas, monoestearato de alumínio, gelatina e ceras; (18) agentes opacificantes; (19) adjuvantes; (20) agentes umectantes; (21) agentes emulsificantes e de suspensão; (22), agentes solubilizantes e emulsificantes, tais como, álcool etílico, álcool isopropílico, carbonato de etila, acetato de etila, álcool benzílico, benzoato de benzila, propilenoglicol, 1,3- butilenoglicol, óleos (em particular, óleos de semente de algodão, amendoim moído, milho, gérmen, azeitona, rícino e gergelim), glicerol, álcool tetra-hidrofurílico, polietilenoglicóis e ésteres de ácido graxo de sorbitano; (23) propelentes, tais como clorofluoro-hidrocarbonetos e hidrocarbonetos não substituídos voláteis, tais como butano e propano; (24) antioxidantes; (25) agentes que tornam a formulação isotônica com o sangue do receptor pretendido, tais como, açúcares e cloreto de sódio; (26) agentes espessantes; (27) materiais de revestimento, tal como lecitina; e (28) agentes edulcorantes, aromatizantes,

colorantes, perfumantes e conservantes. Cada um desses ingredientes ou materiais deve ser “aceitável” no sentido de ser compatível com os outros ingredientes da formulação e não prejudicial ao indivíduo. Ingredientes e materiais adequados para uma forma de dosagem selecionada e via de administração pretendida são bem conhecidos na técnica, e ingredientes e materiais aceitáveis para uma forma de dosagem e um método de administração escolhidos podem ser determinados usando um habilitado na técnica.

[00191] As composições da presente invenção adequadas para administração oral podem estar na forma de cápsulas, tabletes, pílulas, comprimidos, pós, grânulos, uma solução ou uma suspensão em um líquido aquoso ou não aquoso, uma emulsão líquida de óleo em água ou de água em óleo, um(a) elixir ou xarope, uma pastilha, um bolus, um eletuário ou uma pasta. Essas formulações podem ser preparadas por métodos conhecidos na técnica, por exemplo, por meio de processos convencionais de revestimento em panela, mistura, granulação ou liofilização.

[00192] As formas de dosagem sólidas para administração oral (cápsulas, comprimidos, pílulas, drágeas, pós, grânulos e semelhantes) podem ser preparadas, por exemplo, misturando o(s) ingrediente(s) ativo(s) com um ou mais carreador(es) cosmeticamente ou farmaceuticamente aceitável(eis) e, opcionalmente, um ou mais de cargas, diluentes, aglutinantes, umectantes, agentes desintegrantes, agentes retardadores de solução, aceleradores de absorção, agentes umectantes, absorventes, lubrificantes e/ou agentes colorantes. As composições sólidas de um tipo similar podem ser empregadas como cargas em cápsulas de gelatina mole e dura usando um excipiente adequado. Um comprimido pode ser feito por compressão ou moldagem, opcionalmente com um ou mais de ingredientes acessórios. Os comprimidos prensados podem ser preparados usando um aglutinante, lubrificante, diluente inerte, conservante, desintegrante, tensoativo ou agente dispersante adequado. Os comprimidos moldados podem ser feitos por moldagem em uma máquina adequada. Os comprimidos e outras formas de dosagem sólidas, tais como, cápsulas, pílulas e grânulos, podem opcionalmente ser ranhurados ou preparados com revestimentos e invólucros, tais como revestimentos entéricos e outros revestimentos bem conhecidos na técnica de formulação cosmética. Eles também podem ser formulados de modo a fornecer liberação lenta ou controlada do ingrediente ativo nos mesmos. Eles podem ser esterilizados, por exemplo, por filtração através de um filtro retentor de bactérias. Essas composições também podem conter opcionalmente agentes opacificantes e podem ser de uma composição de modo que liberem o ingrediente ativo apenas, ou de preferência, em uma determinada porção do trato gastrointestinal, opcionalmente, de maneira retardada. O ingrediente ativo também pode estar na forma microencapsulada.

[00193] As formas de dosagem líquidas para administração oral incluem emulsões, microemulsões, soluções, suspensões, xaropes e elixires cosmeticamente ou farmaceuticamente aceitáveis. As formas de dosagem líquidas podem conter diluentes inertes adequados comumente usados na técnica. Além dos diluentes inertes, as composições orais também podem incluir adjuvantes, tais como, agentes umectantes, agentes emulsificantes e de suspensão, edulcorantes, aromatizantes,

colorantes, perfumantes e conservantes. As suspensões podem conter agentes de suspensão.

[00194] As composições da presente invenção para administração retal ou vaginal podem ser apresentadas como um supositório, que pode ser preparado pela mistura de um ou mais ingrediente(s) ativo(s) com um ou mais carreador(es) não irritante(s) adequado(s) que é(são) sólido(s) em temperatura ambiente, mas líquidos na temperatura corporal e, portanto, derreterá no reto ou na cavidade vaginal e liberará o composto ativo. As composições da presente invenção que são adequadas para administração vaginal também incluem pessários, tampões, cremes, géis, pastas, espumas ou formulações em spray contendo tais carreadores cosmeticamente ou farmaceuticamente aceitáveis que são conhecidos na técnica como apropriados.

[00195] As formas de dosagem para administração tópica ou transdérmica incluem pós, sprays, pomadas, pastas, cremes, loções, géis, soluções, adesivos, gotas, emulsões, suspensões, aerossóis e inalantes. Quaisquer veículos, auxiliares e opcionalmente outros ingredientes ativos convencionais desejados podem ser adicionados à formulação.

[00196] Os auxiliares preferidos são originários do grupo que compreende conservantes, antioxidantes, estabilizantes, solubilizantes, vitaminas, colorantes, melhoradores de odores, formadores de filme, espessantes e umectantes.

[00197] Soluções e emulsões podem compreender os veículos convencionais, tais como, solventes, solubilizantes e emulsificantes, por exemplo, água, etanol, isopropanol, carbonato de etila, acetato de etila, álcool benzílico, benzoato de benzila, propileno glicol, 1,3-butil glicol,

óleos, em particular óleo de semente de algodão, óleo de amendoim moído, óleo de milho, azeite, óleo de rícino e óleo de gergelim, ésteres de glicerol e ácidos graxos, polietilenoglicóis e ésteres de ácidos graxos de sorbitano, ou misturas dessas substâncias.

[00198] As emulsões podem existir em várias formas. Assim, eles podem ser, por exemplo, uma emulsão ou microemulsão do tipo água-em-óleo (A/O) ou do tipo óleo-em- água (O/A), ou uma emulsão múltipla, por exemplo do tipo água-em-óleo-em-água (W/O/W).

[00199] As composições de acordo com a invenção podem também apresentar-se na forma de preparações dispersas sem emulsificante. Elas podem ser, por exemplo, hidrodispersões ou emulsões de Pickering.

[00200] As suspensões podem compreender veículos convencionais, tais como diluentes líquidos, por exemplo, água, etanol ou propilenoglicol, meios de suspensão, por exemplo, álcoois isoestearílicos etoxilados, ésteres de polioxietileno sorbitol e ésteres de polioxietileno sorbitano, celulose microcristalina, meta-hidróxido de alumínio, bentonita, ágar-ágar e tragacanto, ou misturas dessas substâncias.

[00201] Pastas, pomadas, géis e cremes podem compreender veículos convencionais, por exemplo, gorduras animais e vegetais, ceras, parafinas, amido, tragacanto, derivados de celulose, polietilenoglicóis, siliconas, bentonitas, ácido silícico, talco e óxido de zinco, ou misturas dessas substâncias.

[00202] Os óleos faciais e corporais podem compreender os veículos convencionais, tais como óleos sintéticos, tais como ésteres de ácidos graxos, álcoois graxos, óleos de silicone, óleos naturais, tais como óleos vegetais e extratos de plantas oleosos, óleos de parafina, óleos de lanolina ou misturas dessas substâncias.

[00203] Sprays podem compreender os propelentes convencionais, por exemplo, clorofluorocarbonetos, propano/butano ou éter dimetílico.

[00204] As composições da presente invenção adequadas para administrações parenterais compreendem um ou mais composto(s) em combinação com uma ou mais de soluções, dispersões, suspensões ou emulsões estéreis isotônicas ou não aquosas, cosmeticamente ou farmaceuticamente aceitáveis, ou pós estéreis que podem ser reconstituídos em soluções ou dispersões injetáveis estéreis imediatamente antes do uso, que podem conter antioxidantes, tampões, solutos adequados que tornam a formulação isotônica com o sangue do receptor pretendido, ou agentes de suspensão ou espessantes. A fluidez adequada pode ser mantida, por exemplo, pelo uso de materiais de revestimento, pela manutenção do tamanho de partícula necessário no caso de dispersões e pelo uso de tensoativos. Essas composições também podem conter adjuvantes adequados, tais como agentes umectantes, agentes emulsificantes e agentes dispersantes. Também pode ser desejável incluir agentes isotônicos. Além disso, a absorção prolongada da forma cosmética injetável pode ser provocada pela inclusão de agentes que retardam a absorção.

[00205] Em alguns casos, a fim de prolongar o efeito, é desejável retardar sua absorção por injeção subcutânea ou intramuscular. Isto pode ser conseguido pelo uso de uma suspensão líquida de material cristalino ou amorfo tendo baixa solubilidade em água.

[00206] A taxa de absorção do agente ativo/fármaco depende, então, de sua taxa de dissolução que, por sua vez, pode depender do tamanho do cristal e da forma cristalina. Alternativamente, a absorção retardada de uma composição administrada por via parenteral pode ser realizada por dissolução ou suspensão da composição ativa em um veículo oleoso. As formas de depot injetáveis podem ser feitas formando matrizes de microencapsulação do ingrediente ativo em polímeros biodegradáveis. Dependendo da razão do ingrediente ativo para o polímero, e da natureza do polímero particular empregado, a taxa de liberação do ingrediente ativo pode ser controlada. As formulações injetáveis de depot também são preparadas aprisionando o fármaco em lipossomas ou microemulsões que são compatíveis com o tecido corporal. Os materiais injetáveis podem ser esterilizados, por exemplo, por filtração através de um filtro de retenção de bactérias.

[00207] As composições da presente invenção podem ser apresentadas em recipientes vedados de dose unitária ou de multidoses, por exemplo, ampolas e frascos, e podem ser armazenadas em uma condição liofilizada exigindo apenas a adição do carreador líquido estéril, por exemplo água para injeção, imediatamente antes do uso. As soluções e suspensões de injeção extemporâneas podem ser preparadas a partir de pós, grânulos e comprimidos estéreis do tipo descrito acima.

[00208] Certas modalidades da composição da invenção incluem composições tópicas, tais como, mas não se limitando a, loções, cremes, géis, pomadas, soros e unguentos. Em várias modalidades, a composição da invenção pode ser uma composição de emulsão de óleo em água ou de uma emulsão de água em óleo, ou de uma não emulsão à base de óleo.

Em várias modalidades, tal composição tópica compreende, opcionalmente em conjunto com outros ingredientes, malassezina ou um análogo de malassezina, tal como qualquer um dos análogos de malassezina descritos nesse documento, ou compreende qualquer composto listado na Tabela 1 ou Fig. 3, em uma concentração em p/p de 0,01% a 3%, de preferência de 0,1% a 2%, tal como 0,1%, 0,5%, 1%, 1,5% ou 2%, ou uma faixa entre quaisquer duas dessas concentrações.

A composição pode compreender adicionalmente um ou ambos de um solvente adequado, tal como dimetil isossorbida, a uma concentração em p/p de 5% a 30%, de preferência de 10% a 20%, tais como 5%, 10%, 15%, ou 20%, ou uma faixa entre quaisquer duas dessas concentrações, e um penetrante de pele adequado, como pentilenoglicol, em concentração em p/p de 0,25% a 2%, de preferência de 0,5% a 2%, tais como 0,5%, 1%, 1,5% ou 2%, ou uma faixa entre quaisquer duas dessas concentrações.

As composições tópicas da invenção, opcionalmente, compreendem adicionalmente outros ingredientes convencionais, tais como excipientes farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitáveis, conhecidos pela pessoa de habilidade comum na técnica, tais como, mas não se limitando a, um ou mais de agente emulsificante, emoliente, umectante, solvente (por exemplo, água), estabilizante de emulsão, penetrante para a pele, conservante e agente quelante.

Em várias modalidades, a composição da invenção opcionalmente compreende adicionalmente mais de um item de uma ou mais dessas categorias, tais como dois ou mais emolientes diferentes, dois ou mais agentes emulsificantes, etc.

As composições da invenção opcionalmente compreendem adicionalmente outros ingredientes que protegem ou promovem ou potencializam a saúde e/ou aparência da pele, tais como, mas não se limitando a, um ou mais de agentes de proteção solar (por exemplo, dióxido de titânio, óxido de zinco, avobenzona) e/ou um ou mais de agentes esfoliantes (por exemplo, alfa ou beta- hidroxiácido, vitamina C), tais como os agentes convencionais conhecidos da pessoa de habilidade comum na técnica.

[00209] Nas composições da invenção descritas acima, a malassezina, análogo da malassezina ou composto listado na Tabela 1 ou Fig. 3, pode ser fornecida(o), por exemplo, na forma de um sal, hidrato, ou solvato do composto farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável. Sais, hidratos e solvatos são descritos adicionalmente abaixo.

[00210] A invenção fornece ainda métodos que compreendem a etapa de administração da composição descrita acima. O método da invenção pode compreender a administração da composição mais de uma vez, tal como em uma programação regular, tal como uma ou mais vezes ao dia, ou uma ou mais vezes por semana. Assim, a invenção fornece métodos para proteger ou promover ou de outra forma potencializar a saúde e/ou aparência da pele, tais como qualquer um dos objetivos de saúde e aparência descritos em outro lugar nesse documento. A pessoa de habilidade comum na técnica pode determinar a dosagem e o regime de administração apropriados por meios convencionais com base na concentração do ingrediente ativo ou de ingredientes ativos na composição e na condição do indivíduo a ser tratado. A invenção fornece assim, por exemplo, um método de redução de linhas finas e rugas na pele de um indivíduo humano, compreendendo a administração ao indivíduo humano de uma composição da invenção, como descrito acima, por exemplo. A invenção fornece adicionalmente, por exemplo, um método para promover pele lisa a um indivíduo humano, compreendendo a administração ao submetido humano de uma composição da invenção, como descrito acima, por exemplo. A invenção fornece adicionalmente, por exemplo, um método para promover o brilho da pele em um submetido humano, compreendendo a administração ao indivíduo humano de uma composição da invenção, como descrito acima, por exemplo.

[00211] A invenção fornece adicionalmente composições para uso na prevenção ou no tratamento das condições descritas nesse documento, tal como para uso em um método de redução de linhas finas e rugas na pele de um indivíduo humano, promovendo uma pele lisa em um indivíduo humano e promovendo brilho na pele em um indivíduo humano, em que o método compreende a administração da composição como descrita acima ao indivíduo, como por meio da aplicação da composição na pele do indivíduo.

[00212] Na presente invenção, o termo “forma cristalina” significa a estrutura cristalina de um composto. Um composto pode existir em uma ou mais forma(s) cristalina(s), que pode(m) ter diferentes características estruturais, físicas, farmacológicas ou químicas. Diferentes formas cristalinas podem ser obtidas usando variações na nucleação, cinética de crescimento, aglomeração e degradação. A nucleação ocorre quando a barreira de energia de transição de fase é superada, permitindo assim que uma partícula se forme a partir de uma solução superssaturada. O crescimento do cristal é o aumento das partículas de cristal causado pela deposição do composto químico em uma superfície existente do cristal. A taxa relativa de nucleação e crescimento determina a distribuição de tamanho dos cristais que são formados. A força motriz termodinâmica para nucleação e crescimento é a superssaturação, que é definida como o desvio do equilíbrio termodinâmico. Aglomeração é a formação de partículas maiores através de duas ou mais partículas (por exemplo, cristais) aderindo umas às outras e formando uma estrutura cristalina maior.

[00213] O termo “hidrato”, como usado nesse documento, significa uma forma sólida ou semissólida de um composto químico contendo água em um complexo molecular. A água é geralmente em uma quantidade estequiométrica em relação ao composto químico.

[00214] Como usado nesse documento, “sal cosmeticamente ou farmaceuticamente aceitável” refere-se a um derivado dos compostos revelados nesse documento em que os compostos são modificados pela preparação de sais de ácido ou base dos mesmos. Exemplos de sais cosmeticamente ou farmaceuticamente aceitáveis incluem, mas não estão limitados a, sais de ácidos minerais ou orgânicos de resíduos básicos, tais como aminas; sais alcalinos ou orgânicos de resíduos ácidos, tais como ácidos carboxílicos; e semelhantes. Por exemplo, tais sais incluem sais de amônia, L-arginina, betaína, benetamina, benzatina, hidróxido de cálcio, colina, deanol, dietanolamina (2,2’-iminobis(etanol)), dietilamina, 2- (dietilamino)-etanol, 2-aminoetanol, etilenodiamina, N- etil-glucamina, hidrabamina, 1H-imidazol, lisina, hidróxido de magnésio, 4-(2-hidroxietil)-morfolina, piperazina,

hidróxido de potássio, 1-(2-hidroxi-etil)-pirrolidina, hidróxido de sódio, trietanolamina (2,2’,2”- nitrilotris(etanol)), trometamina, hidróxido de zinco, ácido acético, ácido 2,2-dicloro-acético, ácido adípico, ácido algínico, ácido ascórbico, ácido L-aspártico, ácido benzenossulfônico, ácido benzoico, ácido 2,5-di- hidroxibenzoico, ácido 4-acetamido-benzoico, (+)-ácido canfórico, ácido (+)-cânfora-10- sulfônico, ácido carbônico, ácido cinâmico, ácido cítrico, ácido ciclâmico, ácido decanóico, ácido dodecilssulfúrico, ácido etano-1,2- dissulfônico, ácido etanossulfônico, ácido 2-hidroxi- etanossulfônico, ácido etilenodiamonotetra-acético, ácido fórmico, ácido fumárico, ácido galacárico, ácido gentísico, ácido D-gluco-heptônico, ácido D-glucônico, ácido D- glucurônico, ácido glutâmico, ácido glutântico, ácido glutárico, ácido 2-oxo-glutárico, ácido glicero-fosfórico, glicina, ácido glicólico, ácido hexanóico, ácido hipúrico, ácido bromídrico, ácido clorídrico, ácido isobutírico, ácido DL-láctico, ácido lactobiônico, ácido láurico, lisina, ácido maleico, ácido (-)-L-málico, ácido malônico, ácido DL- mandélico, ácido metanossulfônico, ácido galactárico, ácido naftaleno-1,5-dissulfônico, ácido naftaleno-2-sulfônico, ácido 1-hidroxi-2-naftóico, ácido nicotínico, ácido nítrico, ácido octanóico, ácido oleico, ácido orótico, ácido oxálico, ácido palmítico, ácido pamóico (ácido embônico), ácido fosfórico, ácido propiônico, ácido (-)-L-piroglutâmico, ácido salicílico, ácido 4-amino-salicílico, ácido sebácico, ácido esteárico, ácido succínico, ácido sulfúrico, ácido tânico, ácido (+)- L-tartárico, ácido tiociânico, ácido p- toluenossulfônico e ácido undecilênico.

Outros sais cosmeticamente ou farmaceuticamente aceitáveis podem ser formados com cátions de metais, tais como, alumínio, cálcio, lítio, magnésio, potássio, sódio, zinco e semelhantes.

[00215] Os sais cosmeticamente ou farmaceuticamente aceitáveis da presente invenção podem ser sintetizados a partir de um composto revelado nesse documento que contém uma porção básica ou ácida por métodos químicos convencionais. Geralmente, tais sais podem ser preparados pela reação do ácido livre ou formas básicas desses compostos com uma quantidade suficiente da base ou ácido apropriado em água ou em um diluente orgânico, tais como, éter, acetato de etila, etanol, isopropanol ou acetonitrila, ou uma mistura dos mesmos.

[00216] Prevê-se que os compostos e composições da presente invenção podem ser incluídos em composições cosméticas ou farmacêuticas para aplicações in vitro e in vivo.

[00217] Prevê-se que os compostos e composições da presente invenção, incluindo um ou mais composto(s) listados na Tabela 1 ou na Fig. 3, ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou sal farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável do(a) mesmo(a), podem ser coadministrados a um indivíduo para efetuar os objetivos de modulação da pigmentação da pele da presente invenção.

[00218] Também se prevê que as composições da presente invenção podem compreender um ou mais composto(s) listados na Tabela 1 ou na Fig. 3, ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou sal farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável do mesmo. Por exemplo, uma composição da presente invenção pode compreender indirrubina ou análogos químicos do mesmo em combinação com Malassezina ou análogos químicos do mesmo.

[00219] Adicionalmente, prevê-se que os compostos da presente invenção incluem compostos produzidos por Malassezia, ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou um sal farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável dos mesmos. Além disso, prevê-se que as composições e os métodos da presente invenção podem envolver um ou mais composto(s) produzidos por Malassezia, ou um(a) análogo químico, forma cristalina, hidrato ou sal farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável do(s) mesmo(s). Por exemplo, os compostos produzidos por, ou derivados de, Malassezia incluem, mas não estão limitados a, os compostos mostrados na Fig. 3.

[00220] É ainda considerado que os métodos da presente invenção podem envolver a coadministração de dois(duas) ou mais compostos e/ou composições da presente invenção para realizar as finalidades de modulação da pigmentação da pele descritos nesse documento.

[00221] O(a)s compostos e composições coadministrados da presente invenção podem, por exemplo, contactar um indivíduo substancialmente ao mesmo tempo ou um após o outro.

[00222] As composições da presente invenção contendo um ou mais composto(s) derivado(s) de Malassezia ou análogos químicos do(s) mesmo(s) podem demonstrar efeitos sinérgicos sobre os compostos componentes isoladamente em vários critérios de eficácia, incluindo, mas não se limitando a, viabilidade média do tecido, concentração de melanina, brilho da pele, escurecimento da pele, indução de apoptose de melanócitos e modulação da atividade de hidrocarboneto de arila (AhR), melanogênese ou concentração de melanina.

[00223] A terminologia usada nesse documento tem a finalidade de descrever modalidades particulares apenas e não se destina a ser limitante. Como usado no relatório descritivo e nas reivindicações anexas, as formas singulares “um”, “uma” e “o/a” incluem referentes plurais, a menos que o contexto dite claramente o contrário.

[00224] Para citação de faixas numéricas nesse documento, cada número intermediário entre com o mesmo grau de precisão é explicitamente contemplado. Por exemplo, para a faixa de 6-9, os números 7 e 8 são contemplados além de 6 e 9, e para a faixa de 6,0-7,0; os números 6,0; 6,1; 6,2; 6,3; 6,4; 6,5; 6,6; 6,7; 6,8; 6,9 e 7,0 são explicitamente contemplados.

[00225] Os seguintes exemplos são fornecidos para adicionalmente ilustrar os métodos da presente invenção. Esses exemplos são apenas ilustrativos e não pretendem de forma alguma limitar o escopo da invenção.

EXEMPLOS Exemplo 1 Designações dos Compostos

[00226] A Tabela 1 abaixo mostra estruturas e nomes para compostos da presente invenção. Tabela 1 Código do Nome do Composto Estrutura Composto CV-8684 Malassezina

Código do Nome do Composto Estrutura Composto

Precursor de N/A Malassezina

Indol[3,2-b] CV-8685 carbazol

CV-8686 Composto I

CV-8687 Composto IV

CV-8688 Composto II

CV-8802 Composto C

Código do Nome do Composto Estrutura Composto

CV-8803 Composto K

CV-8804 Composto A

AB12508 Composto E

CV-8819 Composto A5

AB12509 Composto H

Código do Nome do Composto Estrutura Composto CV-8877 Composto B N/A Composto B10 AB11644 N/A NH

N

H AB12976 O52

Código do Nome do Composto Estrutura Composto Indol A de AB17011 Malassezia AB17014 Pitiriacitrina AB17151 N/A

H

N AB17225 Composto VI

N

H Ácido lático de AB17227 Malassezia

Código do Nome do Composto Estrutura Composto

AB12507 N/A

AB17219 Composto V

N/A FICZ

AB17220 Composto VIII

AB17221 Composto VII

Código do Nome do Composto Estrutura Composto

N/A Indirrubina

AB17590 N/A

AB17653 N/A

AB17654 N/A

Código do Nome do Composto Estrutura Composto

F

O AB17655 N/A

NH N H

O AB17656 N/A AB17657 N/A O 2N

HO

N AB17658 N/A Br

NH N H

O Exemplo 2 Atividade de Indução de Apoptose de Composições Contendo Compostos Derivados de Malassezia e/ou Análogos Químicos dos Mesmos Reagentes

[00227] Kit de Apoptose de Anexina V Alexa Fluor 488/ Células Mortas, Soro Fetal Bovino (FBS), Tripsina-EDTA 0,25%

(1x), Ensaio Caspase-Glo 3/7, Meio RPMI 1640, Meio Eagle Modificado por Dulbecco e Solução Antimicótica Antibiótica (100x).

[00228] As linhas celulares MeWo (ATCC® HTB-65™), WM115 (ATCC CRL-1675) e B16F1 (ATCC CRL-6323) são mantidas nos seguintes meios de cultura: meio de cultura para MeWo e B16F1: DMEM suplementado com 10% de FBS; meio de cultura para WM115: RPMI 1640 suplementado com FBS a 10%. Métodos experimentais

[00229] As células são colhidas e o número de células determinado usando um contador de células Countess. As células são diluídas com meio de cultura até a densidade desejada. A densidade celular final pode ser, por exemplo,

4.000 células/poço para tratamento de 6 horas e 24 horas, e

2.000 células/poço para tratamento de 48 horas e 72 horas. Para o ensaio de Anexina V, placas de fundo claro de 384 poços (Corning 3712) são empregadas, enquanto placas de fundo branco sólido de 384 poços (Corning 3570) são usadas para os ensaios de Caspase-Glo. Todas as placas são cobertas com uma tampa e colocadas a 37 °C e CO2 a 5% durante a noite para fixação das células.

[00230] Os compostos de teste são dissolvidos em DMSO até carga de 30 mM. Diluições de 10 vezes são realizadas para gerar concentrações de 3 mM e 0,3 mM. Estaurosporina 0,9 mM é empregada como controle positivo, e DMSO é empregado como controle negativo (NC). 132,5 nL de compostos são transferidos da placa de origem do composto para placa(s) de cultura de células de 384 poços usando o manipulador de líquidos Echo550. Após o tempo de incubação indicado, as placas são removidas da incubadora para detecção.

[00231] As composições de teste são dissolvidas em DMSO, EPI-100-LLMM ou qualquer solvente apropriado e podem ser preparadas de acordo com as instruções nas Tabelas 2-7 abaixo. Os solventes apropriados são bem conhecidos dos habilitados na técnica.

[00232] Para o ensaio de Anexina V, as placas são removidas da incubadora e o meio de cultura é removido. As células são lavadas duas vezes com 40 µL de PBS e 15 µL de Anexina V-FITC pré-misturada e solução de trabalho corante Hoechst 33342 são adicionados por poço. As placas são incubadas em temperatura ambiente por 20 minutos, vedadas e centrifugadas por 1 minuto a 1.000 rpm para remover as bolhas. As placas são lidas usando ImageXpress Nano.

[00233] Para o ensaio Caspase-Glo, as placas são removidas da incubadora e equilibradas em temperatura ambiente por 15 minutos. Os reagentes Caspase-Glo 3/7 também são descongelados e equilibrados em temperatura ambiente antes do experimento. O reagente Caspase-Glo é adicionado aos poços necessários na razão de 1:1 para o meio de cultura. As placas são incubadas em temperatura ambiente por 15 minutos e lidas usando o leitor de placas EnSpire. A quantidade de vezes de alteração é calculada de acordo com a seguinte fórmula: Quantidade de vezes de alteração = LumAmostra/LumNC. Resultados do Ensaio de Anexina V e do Ensaio de Caspase 3/7

[00234] Espera-se que os compostos e composições da presente invenção, incluindo indirrubina e análogos químicos dos mesmos, induzam a morte celular. Espera-se que os análogos químicos da indirrubina exibam, por exemplo, atividade indutora de apoptose mais potente em comparação com a indirrubina. Da mesma forma, espera-se que certos análogos químicos de indirrubina demonstrem, por exemplo, atividade indutora de apoptose menos eficaz em comparação com a indirrubina. Esses compostos podem ter perfis de toxicidade mais favoráveis em comparação com compostos mais potentes. Exemplo 3 Viabilidade celular Após Exposição a Composições Contendo Compostos Derivados de Malassezia e/ou Análogos Químicos dos Mesmos Reagentes

[00235] Ensaio CellTiter-Glo® 2.0. Métodos experimentais

[00236] Para o ensaio CellTiter-Glo, os compostos de teste são preparados em solução de DMSO 10 mM. Os compostos são diluídos em série em 12 concentrações. 40 uL de células de uma suspensão de 100.000 células/mL são dispensados em cada poço de uma placa de 384 poços (Corning 3570). As placas são incubadas durante a noite a 37 °C, CO2 a 5% e 95% de umidade. Os compostos de teste são adicionados, com DMSO como controle do veículo. As placas são incubadas a 37 °C, CO2 a 5% e 95% de umidade por 6, 24 ou 48 horas, e 40 uL de reagente CellTiter-Glo são adicionados aos poços para avaliar a viabilidade celular.

[00237] As composições de teste são dissolvidas em DMSO, EPI-100-LLMM ou qualquer solvente apropriado e podem ser preparadas de acordo com as instruções nas Tabelas 2-7 abaixo. Os solventes apropriados são bem conhecidos dos habilitados na técnica. Resultados

[00238] Espera-se que os compostos e composições da presente invenção, incluindo indirrubina e análogos químicos dos mesmos, induzam a morte celular. Espera-se que os análogos químicos da indirrubina exibam, por exemplo, atividade indutora de apoptose mais potente em comparação com a indirrubina. Da mesma forma, espera-se que certos análogos químicos de indirrubina demonstrem, por exemplo, atividade indutora de apoptose menos eficaz em comparação com a indirrubina. Esses compostos podem ter perfis de toxicidade mais favoráveis em comparação com compostos mais potentes. Exemplo 4 Potencial de Ativação do Receptor de Hidrocarboneto de Arila de Composições Contendo Compostos Derivados de Malassezia e/ou Análogos Químicos dos Mesmos Procedimentos de Ensaio

[00239] O meio de cultura para células HepG2 transfectadas de forma estável é preparado por suplementação de DMEM com alto teor de glicose e L-glutamina, bem como FBS a 10%.

[00240] Células HepG2-AhR-Luc são cultivadas em frascos T-75 a 37 °C, CO2 a 5% e 95% de umidade relativa. As células podem atingir 80-90% de confluência antes do desprendimento e divisão.

[00241] As células cultivadas são rinsadas com 5 mL de PBS. O PBS é aspirado, 1,5 mL de tripsina é adicionado ao frasco e as células são incubadas a 37 °C por aproximadamente 5 minutos ou até que as células se desprendam e flutuem. A tripsina é inativada pela adição de meio contendo soro em excesso.

[00242] A suspensão de células é transferida para um tubo cônico e centrifugada a 120 g por 10 minutos para sedimentar as células. As células são recolocadas em suspensão em meio de semeadura em uma densidade adequada. 40 µL de células são transferidos para uma placa de cultura de 384 poços (5 x 103 células/poço). As placas são colocadas na incubadora a 37 °C por 24 horas.

[00243] Posteriormente, são preparadas soluções padrão de compostos de teste e controle positivo de omeprazol. As soluções de compostos são transferidas para a placa de ensaio usando Echo550. A placa é então colocada de volta na incubadora para o tratamento do composto.

[00244] Mais tarde, após 24 horas de tratamento, a placa é removida da incubadora e deixada resfriar em temperatura ambiente. 30 µL de reagente One-Glo igual ao do meio de cultura são adicionados em cada poço. As células são lisadas por pelo menos 3 minutos e depois medidas em um luminômetro.

[00245] As respostas à dose são representadas graficamente usando a análise de regressão não linear em XLfit, e os valores de EC50 também são calculados. Resultados

[00246] Espera-se que os compostos e composições da presente invenção, incluindo as Composições # 1-5, modulem a atividade do AhR. Espera-se que as composições da presente invenção exibam, por exemplo, atividade agonista de AhR mais potente em comparação com pelo menos um composto componente sozinho. Da mesma forma, espera-se que as composições da presente invenção demonstrem, por exemplo, atividade agonista de AhR menos eficaz em comparação com pelo menos um composto componente sozinho. Também se espera que as composições da presente invenção exibam, por exemplo, atividade antagonista de AhR mais potente em comparação com pelo menos um composto componente sozinho. Da mesma forma, também se espera que as composições da presente invenção demonstrem, por exemplo,

atividade antagonista de AhR menos eficaz em comparação com pelo menos um composto componente sozinho. Exemplo 5 Ensaios com MelanoDerm

[00247] A finalidade desse estudo foi avaliar a ação potencial dos artigos de teste como um modulador da melanogênese da pele no Modelo de Pele MelanoDerm após exposições repetidas do artigo de teste. Secundariamente, a finalidade desse estudo foi avaliar a potencial irritação dérmica do artigo de teste ao Modelo de Pele MelanoDerm após exposições repetidas. A toxicidade foi determinada medindo a conversão relativa de MTT (brometo de 3-[4,5- dimetiltiazol-2-il]-2,5-difeniltetrazólio) nos tecidos tratados com artigo de teste em comparação com os tecidos tratados com controle negativo/com solvente . O impacto potencial na produção de melanina foi determinado medindo a concentração de melanina produzida pelos tecidos tratados com artigo de teste em comparação com os tecidos tratados com controle negativo/com solvente. Identificação de Substâncias De Teste e Controles De Ensaio Tabela 2 Artigos de teste testados na forma diluída Designação do Designação do Concentração Instruções de Preparação Artigo de Teste Responsável da Dosagem 18AH47 DMSO 0,5 % (v/v) O controle com solvente foi diluído (controle com (v/v) com EPI-100-LLMM para uma solvente) concentração final de 0,5%; o controle com solvente diluído foi agitado por vórtice por pelo menos 1 minuto e dosado nos tecidos usando um volume de dosagem de 25μL. Um volume total de até 0,5 mL foi preparado para cada tratamento de tecido. 17AJ41 Malassezina 500 μM A partir da concentração padrão (CV-8684) fornecida pelo Responsável/

Designação do Designação do Concentração Instruções de Preparação Artigo de Teste Responsável da Dosagem (Controle preparada a partir do material positivo) sólido fornecido pelo Responsável, 17AJ55 O52 650 μM o artigo de teste/controle foi 18AA21 Indol A de 650 μM diluído (v/v) com EPI-100-LLMM Malassezia para a concentração de dosagem 18AF50 AB17151 300 μM listada. A diluição do artigo de 18AH15 AB17590 300 μM teste foi agitada por vórtice por 18AH21 AB11644 650 μM pelo menos 1 minuto, aquecida a 18AH38 Indol-3- 500 μM 37°±1 °C (em banho-maria) por 15 carbaldeído minutos, agitada por vórtice 18AH39 Ácido D- 500 μM novamente por pelo menos 1 minuto indol-3- e dosada nos tecidos usando um lático volume de dosagem de 25 μL. Um volume total de até ~ 0,5 mL foi preparado para cada tratamento de tecido.

Tabela 3 Composição #1 Designação do Designação do Instruções de Concentração de Instruções de Artigo de Teste Responsável Preparação para Dosagem Preparação para Soluções Padrão Diluições de Trabalho Usadas para Dosagem dos Tecidos 17AD42 Indol-carbazol Uma solução A concentração Cinquenta (50) (ICZ) padrão de de dosagem de μL de cada trabalho de 360 cada um dos solução padrão μM foi preparada componentes foi de trabalho a partir da de 18 μM. foram solução padrão transferidos superior em DMSO para um novo como a seguir: A frasco (volume solução padrão combinado de foi descongelada 700 μL) e em temperatura misturados com ambiente e 300 μL de EPI- agitada por 100-LLMM para vórtice por ~ 1 render um minuto. O volume volume total de apropriado 1000 μL. A necessário para diluição foi preparar até agitada por ~0,5 mL/1,0 mL vórtice por de solução pelo menos 1 padrão de minuto antes de trabalho foi ser aplicada transferido para nos tecidos. um novo frasco e diluído com EPI- 100-LLMM para 360 μM. A diluição foi agitada por vórtice por pelo

Designação do Designação do Instruções de Concentração de Instruções de Artigo de Teste Responsável Preparação para Dosagem Preparação para Soluções Padrão Diluições de Trabalho Usadas para Dosagem dos Tecidos menos 1 minuto, aquecida a 37°±1 °C (em banho- maria) por 15 minutos e agitada novamente por vórtice por pelo menos 1 minuto antes de ser subsequentemente diluída.

Tabela 4 Composição #2 Designa- Designação Instruções de Concen- Volume Instruções de ção do do Preparação para tração de Necessário Preparação para Artigo Responsável Soluções Padrão Dosagem (µL) Diluições de Teste de Trabalho Usadas para Dosagem dos Tecidos 17AD42 Indol- Uma solução 12,6 µM 35 O volume da carbazol padrão de concentração de (ICZ) trabalho de 360 dosagem listado 17AJ41 Malassezina μM foi preparada 50,4 µM 140 para cada (CV-8684) a partir da componente foi (Controle solução padrão transferido positivo) superior em DMSO para um novo 17AJ47 Composto A5 como a seguir: A 10,1 µM 28 frasco e (também solução padrão misturado com conhecido foi descongelada 297 μL de EPI- como ceto- em temperatura 100-LLMM. A Malassezina ambiente e diluição foi ) agitada em agitada por 17AJ55 O52 vórtice por ~1 10,1 µM 28 vórtice por 18AA21 Indol A de minuto. O volume 10,1 µM 28 pelo menos 1 Malassezia apropriado minuto antes de 18AA22 Pitiriaci- necessário para 50,4 µM 140 ser aplicada trina preparar até nos tecidos. 18AA24 FICZ ~0,5 mL/1,0 mL 10,1 µM 28 18AD42 Indirrubina de solução 24,5 µM 68 18AH16 Triptantri- padrão de 24,5 µM 68 na trabalho foi transferido para 18AH20 Ácido 10,1 µM 28 um novo frasco e lático de diluído com EPI- Malassezia 100-LLMM para 18AH24 2-hidroxi- 10,1 µM 28 360 μM. A 1-(1H- diluição foi indol-3-

Designa- Designação Instruções de Concen- Volume Instruções de ção do do Preparação para tração de Necessário Preparação para Artigo Responsável Soluções Padrão Dosagem (µL) Diluições de Teste de Trabalho Usadas para Dosagem dos Tecidos il)etanona agitada por 18AH38 Indol-3- vórtice por pelo 10,1 µM 28 carbaldeído menos 1 minuto, 18AH39 Ácido D- aquecida a 37°±1 10,1 µM 28 Indol-3- °C (em banho- lático maria) por 15 18AH44 Ácido minutos e 10,1 µM 28 (indol-3- agitada il)pirúvico novamente por vórtice por pelo menos 1 minuto antes de ser subsequentemente diluída.

Tabela 5 Composição #3 Designa- Designa- Instruções de Concentração Volume Instruções de ção do ção do Preparação para de Dosagem Necessá- Preparação para Artigo de Responsá- Soluções Padrão rio (µL) Diluições Usadas Teste vel de Trabalho para Dosagem dos Tecidos 17AJ41 Malassezi- Uma solução 50,4 140 O volume da na (CV- padrão de concentração de 8684) trabalho de 360 dosagem listado (Controle μM foi preparada para cada positivo) a partir da componente foi 17AD46 Composto solução padrão 10,1 28 transferido para um A5 (CV- superior em DMSO novo frasco e 8819) como a seguir: A misturado com 568 (também solução padrão μL de EPI-100-LLMM. conhecido foi descongelada A diluição foi como ceto- em temperatura agitada por vórtice Malassezin ambiente e por pelo menos 1 a) agitada por minuto antes de ser 17AJ55 O52 vórtice por ~1 10,1 28 aplicada nos (AB12976) minuto. O volume tecidos. 18AA21 Indol A de apropriado 10,1 28 Malassezia necessário para (AB17011) preparar até 18AD42 Indirrubin ~0,5 mL/1,0 mL 24,5 68 a de solução 18AH20 AB17227 padrão de 10,1 28 (também trabalho foi conhecido transferido para como Ácido um novo frasco e

Designa- Designa- Instruções de Concentração Volume Instruções de ção do ção do Preparação para de Dosagem Necessá- Preparação para Artigo de Responsá- Soluções Padrão rio (µL) Diluições Usadas Teste vel de Trabalho para Dosagem dos Tecidos lático de diluído com EPI- Malassezia 100-LLMM para ) 360 μM. A 18AH24 2-hidroxi- diluição foi 10,1 28 1-(1H- agitada por indol-3- vórtice por pelo il)etanona menos 1 minuto, 18AH38 Indol-3- aquecida a 37°±1 10,1 28 carbaldeíd °C (em banho- o maria) por 15 18AH39 Ácido D- minutos e 10,1 28 Indol-3- agitada lático novamente por 18AH44 Ácido vórtice por pelo 10,1 28 (indol-3- menos 1 minuto il)pirúvic antes de ser o subsequentemente diluída.

Tabela 6 Composição #4 Designação Designação do Instruções de Concentração Volume Instruções de do Artigo de Responsável Preparação para de Dosagem Necessário Preparação Teste Soluções Padrão (µL) para de Trabalho Diluições Usadas para Dosagem dos Tecidos 17AD42 CV-8685 Uma solução 12,6 35 O volume da (também padrão de concentração conhecido trabalho de 360 de dosagem como Indol- μM foi preparada listada para carbazol ou a partir da cada ICZ) solução padrão componente 17AJ41 Malassezina superior em DMSO 50,4 140 foi (CV-8684) como a seguir: A transferido (Controle solução padrão para um novo positivo) foi descongelada frasco e 17AD46 Composto A5 em temperatura 10,1 28 misturado com (CV-8819) ambiente e 505 μL de (também agitada por EPI-100-LLMM. conhecido vórtice por ~1 A diluição como ceto- minuto. O volume foi agitada Malassezina) apropriado por vórtice 17AJ55 O52 (AB12976) necessário para 10,1 28 por pelo 18AA21 Indol A de preparar até 10,1 28 menos 1 Malassezia ~0,5 mL/1,0 mL minuto antes

Designação Designação do Instruções de Concentração Volume Instruções de do Artigo de Responsável Preparação para de Dosagem Necessário Preparação Teste Soluções Padrão (µL) para de Trabalho Diluições Usadas para Dosagem dos Tecidos (AB17011) de solução de ser 18AA24 FICZ padrão de 10,1 28 aplicada nos 18AD42 Indirrubina trabalho foi 24,5 68 tecidos. 18AH20 AB17227 transferido para 10,1 28 (também um novo frasco e conhecido diluído com EPI- como Ácido 100-LLMM para lático de 360 μM. A Malassezia) diluição foi 18AH24 2-hidroxi-1- agitada por 10,1 28 (1H-indol-3- vórtice por pelo il)etanona menos 1 minuto, 18AH38 Indol-3- aquecida a 37°±1 10,1 28 carbaldeído °C (em banho- 18AH39 Ácido D- maria) por 15 10,1 28 Indol-3- minutos e lático agitada 18AH44 Ácido (indol- novamente por 10,1 28 3-il)pirúvico vórtice por pelo menos 1 minuto antes de ser subsequentemente diluída.

Tabela 7 Composição #5 Designação Designação do Instruções de Concentração Volume Instruções de do Artigo Responsável Preparação para de Dosagem Necessário Preparação de Teste Soluções Padrão (µL) para de Trabalho Diluições Usadas para Dosagem dos Tecidos 17AD42 CV-8685 Uma solução 74,9 208 O volume da (também padrão de concentração conhecido como trabalho de 360 de dosagem Indol-carbazol μM foi preparada listada para ou ICZ) a partir da cada 17AJ41 Malassezina solução padrão 10,1 28 componente (CV-8684) superior em DMSO foi (Controle como a seguir: A transferido positivo) solução padrão para um novo foi descongelada frasco e em temperatura misturado com ambiente e 306 μL de agitada por EPI-100-LLMM.

Designação Designação do Instruções de Concentração Volume Instruções de do Artigo Responsável Preparação para de Dosagem Necessário Preparação de Teste Soluções Padrão (µL) para de Trabalho Diluições Usadas para Dosagem dos Tecidos vórtice por ~1 A diluição minuto. O volume foi agitada apropriado por vórtice necessário para por pelo preparar até menos 1 ~0,5 mL/1,0 mL minuto antes de solução de ser padrão de aplicada nos trabalho foi tecidos. transferido para um novo frasco e diluído com EPI- 100-LLMM para 360 μM. A diluição foi agitada por vórtice por pelo menos 1 minuto, aquecida a 37°±1 °C (em banho- maria) por 15 minutos e agitada novamente por vórtice por pelo menos 1 minuto antes de ser subsequentemente diluída.

[00248] Os controles de ensaio incluem: controle positivo - Malassezina (CV-8684) (500 µM) (17AJ41) e controle com solvente - DMSO (dimetilssulfóxido) preparado em EPI-100- LLMM.

[00249] Adicionalmente, o artigo de teste e os controles foram aplicados a grupos de 4 tecidos, dos quais 2 foram usados para o ponto terminal de Viabilidade de Tecido (MTT) e 2 para o ponto terminal de Melanina, respectivamente. Sistema de Teste

[00250] O modelo de pele MelanoDerm fornecido por MatTek

Corporation (Ashland, MA) foi usado nesse estudo. O tecido MelanoDerm consiste em queratinócitos epidérmicos de origem humana (NHEK) e melanócitos (NHM) normais, que foram cultivados para formar um modelo de múltiplas camadas altamente diferenciado da epiderme humana. Os NHMs dentro das coculturas sofrem melanogênese espontânea levando a tecidos de vários níveis de pigmentação. As culturas foram cultivadas em inserções de cultura de células na interface ar-líquido, permitindo a aplicação tópica de moduladores de pele. O modelo MelanoDerm exibe características morfológicas e ultraestruturais semelhantes a in vivo. NHM localizados na camada de células basais do tecido MelanoDerm são dendríticos e produzem espontaneamente grânulos de melanina que povoam progressivamente as camadas do tecido. Assim, o sistema de teste é usado para triar materiais que podem inibir ou estimular a produção de melanina em relação aos controles negativos. Projeto e Metodologia Experimental

[00251] O projeto experimental desse estudo consistiu na determinação do pH do artigo de teste puro, se possível (e/ou solução de dosagem como apropriado) e um ensaio definitivo para determinar a viabilidade relativa do tecido e a ação potencial do artigo de teste como um modulador da melanogênese da pele para o modelo de pele MelanoDerm após exposições repetidas. Os artigos de teste foram expostos ao Modelo de Pele MelanoDerm por um total no Dia 7. Os artigos de teste foram aplicados topicamente ao Modelo de Pele MelanoDerm a cada 48 horas (dentro de um período de 48±2 horas do tratamento anterior). A toxicidade dos artigos de teste foi determinada pela redução da enzima microssômica dependente de NAD(P)H de MTT (e, em menor extensão, pela redução da succinato desidrogenase de MTT) em tecidos de controle e tratados com artigos de teste. Os dados foram apresentados na forma de sobrevivência relativa (conversão de MTT em relação ao controle negativo/com solvente). O impacto potencial na produção de melanina foi avaliado pela determinação da concentração de melanina produzida nos tecidos tratados com artigo de teste em comparação com os tecidos tratados com controle negativo/com solvente. Os dados foram apresentados na forma de concentração de melanina produzida pelos tecidos tratados com artigo de teste, determinada usando uma curva padrão de melanina. Alternativamente, os dados podem ser apresentados como alteração percentual na concentração de melanina em relação aos tecidos tratados com controle negativo/com solvente.

[00252] Os métodos usados são uma modificação dos procedimentos fornecidos pela MatTek Corporation. Meios e Reagentes

[00253] O meio de manutenção MelanoDerm (EPI-100-LLMM) foi adquirido da MatTek Corporation. O modelo de pele MelanoDerm (MEL-300-A) foi adquirido da MatTek Corporation. O ácido kójico a 1% (preparado em água deionizada estéril) foi adquirido na Sigma. MTT (brometo de 3-[4,5-dimetiltiazol-2-il]-2,5-difeniltetrazólio) foi adquirido na Sigma. O meio de Eagle modificado por Dulbecco (DMEM) contendo L-glutamina 2 mM (Meio de Adição de MTT) foi adquirido na Quality Biological. O solvente de extração (isopropanol) foi adquirido da Aldrich. A solução salina tamponada com fosfato de Dulbecco livre de Ca++ e Mg++ estéril (CMF-DPBS) foi adquirida da Invitrogen. A melanina foi adquirida da Sigma. Água deionizada estéril foi adquirida da Quality Biological. O Solvable foi adquirido da Perkin Elmer. Preparação e Dispensação do Artigo de Teste

[00254] A menos que especificado de outra forma nesse protocolo, vinte e cinco microlitros de cada artigo de teste foram aplicados diretamente no tecido de modo a cobrir a superfície superior. Dependendo da natureza do artigo de teste (líquidos, géis, cremes, espumas e semelhantes), o uso de um dispositivo de dosagem, malha ou outro auxílio para permitir o espalhamento uniforme do artigo de teste sobre a superfície do tecido pode ter sido necessário. Via de administração

[00255] Os artigos de teste foram aplicados topicamente ao tecido MelanoDerm a cada 48 horas (dentro de um período de 48+2 horas do tratamento anterior) durante um ensaio no Dia 7. Vinte e cinco microlitros de cada artigo de teste foram aplicados a cada tecido. Vinte e cinco microlitros dos controles positivo e negativo/com solvente, respectivamente, foram aplicados a cada tecido. Determinação de pH

[00256] O pH do artigo de teste líquido puro (e/ou solução de dosagem como apropriado) foi determinado, se possível. O pH foi determinado usando papel de pH (por exemplo, com uma faixa de pH de 0 a 14 para estimar e/ou uma faixa de pH de 5 - 10 para determinar um valor mais preciso). Os incrementos de pH típicos no papel de pH de faixa mais estreita foram de aproximadamente 0,3 a 0,5 unidades de pH. O incremento máximo no papel de pH foi de 1,0 unidade de pH. Controles

[00257] O ensaio definitivo incluiu um controle negativo, um controle positivo e um controle com solvente (DMSO) ou um controle positivo e um controle com solvente (DMSO). Os tecidos MelanoDerm designados para o controle negativo/com solvente do ensaio foram tratados com 25 μL de água esterilizada deionizada ou DMSO. Os tecidos designados para o controle positivo do ensaio foram tratados com 25 μL de ácido kójico a 1%, Malassezina (CV-8684) (17AJ41) 500 μM ou Composição #2. O ácido Kójico a 1% foi armazenado em um tubo coberto com papel alumínio até ser usado dentro de 2 horas após a preparação. Os tempos de exposição de controle negativo/com solvente e positivo foram idênticos aos usados para os artigos de teste. Tecidos não tratados também foram usados como controle. Avaliação da Redução de Artigo De Teste Direto de MTT

[00258] Foi necessário avaliar a capacidade de cada artigo de teste para reduzir diretamente o MTT. Uma solução de MTT de 1,0 mg/mL foi preparada em Meio de Adição de MTT. Aproximadamente 25 μL do artigo de teste foram adicionados a 1 mL da solução de MTT e a mistura foi incubada no escuro a 37±1ºC por uma a três horas. Um controle negativo, 25 μL de água deionizada estéril ou um controle com solvente, 25 μL de DMSO foi testado simultaneamente. Se a cor da solução de MTT ficou azul/roxa, o artigo de teste foi considerado como tendo reduzido o MTT. Os materiais de teste insolúveis em água podem ter mostrado redução direta (escurecimento) apenas na interface entre o artigo de teste e o meio. Recebimento de MelanoDerm

[00259] Após o recebimento do kit de Pele MelanoDerm, as soluções foram armazenadas conforme indicado pelo fabricante. Os tecidos MelanoDerm foram armazenados a 2- 8ºC até o uso.

[00260] No dia do recebimento (um dia antes da dosagem), um volume apropriado de Meio de Manutenção MelanoDerm (EPI- 100-LLMM) foi removido e aquecido a 37±1ºC. Nove décimos (0,9) mL de EPI-100-LLMM/poço foram divididos em alíquotas nos poços apropriados de placas de 6 poços. Cada tecido MelanoDerm foi inspecionado quanto a bolhas de ar entre o gel de agarose e a inserção de cultura de células antes de abrir a embalagem vedada. Tecidos com bolhas de ar maiores que 50% da área de inserção da cultura celular não foram usados. Os recipientes de transporte de 24 poços foram removidos do saco plástico e a superfície desinfetada com etanol 70%. Um número apropriado de tecidos MelanoDerm foi transferido assepticamente dos recipientes de transporte de 24 poços para as placas de 6 poços. Os tecidos MelanoDerm foram incubados a 37±1ºC em uma atmosfera umidificada de 5±1% de CO2 em ar (condições de cultura padrão) durante a noite (pelo menos 16 horas) para aclimatar os tecidos. Após a abertura do saco, quaisquer tecidos não utilizados remanescentes no ágar de transporte no momento da transferência do tecido foram brevemente gaseificados com uma atmosfera de 5% de CO2/95% de ar, e o saco foi vedado e armazenado a 2-8ºC para uso subsequente. Ensaio Definitivo

[00261] Exposição do tecido: pelo menos 16 horas após o início das culturas, cinco tecidos MelanoDerm (considerados não tratados no Dia 0) foram fotografados usando uma câmera digital para auxiliar na avaliação visual do grau de pigmentação dos tecidos no tempo zero do ensaio. Dois tecidos

MelanoDerm foram rinsados com CMF-DPBS, enxutos com papel absorvente estéril e o excesso de líquido foi eliminado. Os tecidos MelanoDerm foram transferidos para os poços contendo MTT apropriados após a rinsagem e processados no ensaio de MTT. Dois ou três tecidos MelanoDerm foram rinsados com CMF-DPBS, enxutos com papel absorvente estéril e o excesso de líquido foi eliminado. Os tecidos MelanoDerm foram removidos da inserção de cultura de células usando bisturis estéreis, colocados em um tubo de microcentrífuga rotulado de 1,5 mL e armazenados a <-60ºC para subsequente análise de melanina.

[00262] Pelo menos 16 horas após o início das culturas, o resto dos tecidos foram transferidos para uma nova placa de 6 poços contendo 0,9 mL/poço de EPI-100-LLMM pré-aquecido fresco. O ensaio foi conduzido ao longo de um período no Dia

7. Quatro ou cinco tecidos foram tratados topicamente no primeiro dia e a cada 48 horas (em um período de 48+2 horas do tratamento anterior) com 25 μL, de cada artigo de teste. O meio foi renovado diariamente (dentro de um período de 24+2 horas da realimentação anterior); os tecidos foram transferidos para uma nova placa de 6 poços contendo 0,9 mL/poço de EPI-100-LLMM fresco pré-aquecido.

[00263] Quatro ou cinco tecidos foram tratados topicamente no primeiro dia e a cada 48 horas (em um período de 48+2 horas do tratamento anterior) com 25 μL de controles positivos e negativos/com solvente, respectivamente. O meio foi renovado diariamente (dentro de um período de 24+2 horas da realimentação anterior); os tecidos foram transferidos para uma nova placa de 6 poços contendo 0,9 mL/poço de EPI- 100-LLMM fresco e pré-aquecido. Os tecidos foram incubados a 37±1ºC em atmosfera umidificada de 5±1% de CO2 em ar (condições de cultura padrão) pelos tempos de exposição apropriados.

[00264] Nos dias da dosagem, o tecido MelanoDerm foi primeiro rinsado suavemente três vezes usando ~500 μL de CMF-DPBS por rinsagem para remover qualquer artigo de teste residual. O CMF-DPBS foi pipetado suavemente para o poço e depois retirado com um aspirador estéril. Os tecidos foram transferidos para uma nova placa de 6 poços contendo 0,9 mL de EPI-100-LLMM pré-aquecido fresco e dosado com o artigo de teste apropriado, negativo/com solvente ou controle positivo. Os tecidos foram incubados a 37±1ºC em atmosfera umidificada de 5±1% de CO2 em ar (condições de cultura padrão) pelos tempos de exposição apropriados.

[00265] No final do ensaio no Dia 7, os tecidos MelanoDerm tratados com o controle negativo/com solvente ou positivo, e com cada artigo de teste foram fotografados usando uma câmera digital para auxiliar na avaliação visual do grau de pigmentação de os tecidos no final do ensaio (Dia 7). Em seguida, a viabilidade de dois tecidos tratados com o controle positivo e negativo, respectivamente, e com cada artigo de teste, foi determinada pela redução de MTT. No final do ensaio no Dia 7, foi determinada a melanina produzida por três tecidos tratados com cada artigo de teste, o controle positivo e negativo/com solvente, respectivamente.

[00266] Ensaio de MTT: Uma carga 10X de MTT preparada em PBS (filtrada no momento da preparação do lote) foi descongelada e diluída em Meio de Adição de MTT quente para produzir a solução de 1,0 mg/mL não mais do que duas horas antes do uso. Trezentos μL da solução de MTT foram adicionados a cada poço designado de uma placa de 24 poços pré-rotulada.

[00267] Após o tempo de exposição, cada tecido MelanoDerm designado para o ensaio MTT foi rinsado com CMF- DPBS (uso de frasco em spray aceitável para essa etapa), enxuto em papel absorvente estéril e o excesso de líquido foi eliminado. Os tecidos MelanoDerm foram transferidos para os poços contendo MTT apropriado após a rinsagem. As placas de 24 poços foram incubadas em condições padrão durante 3±0,1 horas.

[00268] Após 3±0,1 horas, os tecidos MelanoDerm foram enxutos em papel absorvente estéril, o excesso de líquido foi eliminado e transferidos para uma placa pré-rotulada de 24 poços contendo 2,0 mL de isopropanol em cada poço designado. As placas foram cobertas com parafilme e armazenadas no refrigerador (2-8ºC) até a colheita da última exposição. Se necessário, as placas foram armazenadas durante a noite (ou até 24 horas após o último tempo de exposição ser colhido) no refrigerador antes de extrair o MTT. Em seguida, as placas foram agitadas por pelo menos 2 horas em temperatura ambiente. No final do período de extração, o líquido dentro das inserções de cultura de células foi decantado para o poço do qual a inserção de cultura de células foi retirada. A solução de extrato foi misturada e 200 μL transferidos para os poços apropriados da placa de 96 poços. Duzentos μL de isopropanol foram adicionados aos poços designados como brancos. A absorbância a 550 nm (DO550) de cada poço foi medida com um leitor de placas Molecular Devices Vmax.

[00269] Ensaio de melanina: No final dos tempos de exposição apropriados, os tecidos MelanoDerm designados para o ensaio de melanina foram cuidadosamente rinsados pelo menos três vezes usando ~500 μL de CMF-DPBS por rinsagem para remover qualquer artigo de teste residual ou excesso de vermelho de fenol do meio de cultura, enxuto em papel absorvente estéril e o excesso de líquido foi eliminado. Os tecidos MelanoDerm foram fotografados com uma câmera digital no final do ensaio. Os tecidos MelanoDerm foram removidos da inserção de cultura de células usando bisturis estéreis ou punção(ões) esterilizado(s), colocados em um tubo de microcentrífuga rotulado de 1,5 mL e armazenados a <-60ºC para análise de melanina subsequente.

[00270] No dia do ensaio de extração de melanina, os tecidos excisados foram descongelados em temperatura ambiente por aproximadamente 10 minutos. 250 μL de Solvable foram adicionados a cada tubo de microcentrífuga e os tubos foram incubados por pelo menos 16 horas a 60+2ºC. Uma solução padrão de melanina a 1 mg/mL foi preparada dissolvendo a melanina em Solvable. Uma série de padrões de melanina foi preparada a partir da carga de 1 mg/mL variando de 0 mg/mL a 0,33 mg/mL. A série padrão foi preparada adicionando 0,6 mL da solução padrão de melanina 1 mg/mL a 1,2 mL de Solvable e, em seguida, fazendo uma série de mais cinco diluições (fator de diluição de 3). Solvable foi usado como o padrão zero. A série de padrões de Melanina e o Solvable foram incubados por pelo menos 16 horas a 60+2ºC.

[00271] Pelo menos 16 horas após o início da extração de melanina, os tubos contendo as amostras (representando a melanina extraída dos tecidos MelanoDerm) e os padrões foram resfriados em temperatura ambiente e centrifugados a

13.000 rpm por 5 minutos em temperatura ambiente. 200 μL de amostras (poços únicos) ou padrões (poços duplicados) foram transferidos para os poços apropriados de uma placa de 96 poços. Duzentos μL de Solvable foram adicionados aos poços designados como brancos em poços duplicados. A absorbância a 490 nm (OD490) de cada poço foi medida com um leitor de placas Molecular Devices Vmax (com a função Automix selecionada). Controles mortos para Avaliação da Redução do artigo de teste residual de MTT

[00272] Para demonstrar que o possível artigo de teste residual não estava agindo para reduzir diretamente o MTT, uma verificação funcional foi realizada no ensaio definitivo para mostrar que o material de teste não estava se ligando ao tecido e levando a um falso sinal de redução de MTT.

[00273] Para determinar se o artigo de teste residual estava agindo para reduzir diretamente o MTT, um tecido de controle morto por congelamento foi usado. O tecido morto por congelamento foi preparado colocando tecidos MelanoDerm/EpiDerm (Melanoderm sem melanócitos) não tratados no congelador a -20ºC pelo menos durante a noite, descongelando em temperatura ambiente e, em seguida, recongelando. Uma vez morto, o tecido pode ser armazenado indefinidamente no congelador. Tecidos mortos por congelamento podem ser recebidos já preparados da MatTek Corporation e armazenados no congelador -20ºC até o uso. Para testar a redução do artigo de teste residual, os tecidos mortos foram tratados com artigo de teste da maneira normal. Todos os procedimentos de ensaio foram realizados da mesma maneira que para o tecido viável. Pelo menos um controle morto tratado com água deionizada estéril (controle morto negativo) foi testado em paralelo, uma vez que uma pequena quantidade de redução de MTT é esperada do NADH residual e enzimas associadas dentro do tecido morto.

[00274] Se pouca ou nenhuma redução de MTT foi observada no controle morto tratado com artigo de teste, a redução de MTT observada no tecido viável tratado com artigo de teste pode ser atribuída às células viáveis. Se houve redução apreciável de MTT no controle morto tratado (em relação à quantidade no tecido viável tratado), etapas adicionais devem ser tomadas para levar em consideração a redução química ou o artigo de teste pode ser considerado não testável nesse sistema. Análise de dados

[00275] O valor de OD550 médio dos poços em branco foi calculado. O valor de OD550 médio corrigido do(s) controle(s) negativo/com solvente foi determinado subtraindo o valor de OD550 médio dos poços em branco de seus valores de OD550 médio. Os valores de OD550 corrigidos das exposições individuais do artigo de teste e as exposições de controle positivo foram determinados subtraindo de cada um do valor de OD550 médio para os poços em branco. Todos os cálculos foram realizados em planilha Excel. Embora os algoritmos discutidos sejam executados para calcular a análise de ponto terminal final no nível do grupo de tratamento, os mesmos cálculos podem ser aplicados às réplicas individuais; OD550 da exposição do artigo de teste Corr. = OD550 da exposição do artigo de teste - OD550 médio em branco.

[00276] Se controles mortos (KC) foram usados, os seguintes cálculos adicionais foram realizados para corrigir a quantidade de MTT reduzida diretamente pelos resíduos do artigo de teste. O valor de OD550 bruto para o controle negativo morto foi subtraído dos valores de OD550 brutos para cada um dos controles mortos tratados com artigo de teste, para determinar os valores de OD550 líquidos dos controles mortos tratados com artigo de teste; D550 líquido para cada KC com artigo de teste = OD550 bruto para KC com artigo de teste - OD550 bruto para KC de controle negativo/com solvente.

[00277] Os valores de OD550 líquidos representam a quantidade de MTT reduzido devido à redução direta por resíduos do artigo de teste em tempos de exposição específicos. Em geral, se o valor de OD550 líquido for maior que 0,150; a quantidade líquida de redução de MTT será subtraída dos valores de OD550 corrigidos dos tecidos tratados viáveis para obter um valor de OD550 corrigido final. Esses valores OD550 corrigidos finais serão então usados para determinar a % de viabilidades de controle; OD550 corrigido final = OD550 de artigo de teste corrigido (viável) - OD550 líquido para artigo de teste (KC).

[00278] Finalmente, os seguintes cálculos de % de controle serão feitos: % De Viabilidade = [(OD550 corrigido final do Artigo de Teste ou Controle Positivo)/(OD550 médio corrigido do(s) Controle(s) Negativo/com Solvente)] x 100.

[00279] Análise da melanina: Os dados brutos de absorbância foram capturados, salvos como um arquivo de impressão e importados para uma planilha Excel. O valor de OD490 de cada amostra de teste (representando a melanina extraída de tecidos MelanoDerm não tratados no Dia 0, tecidos MelanoDerm tratados com cada artigo de teste, controles negativos/com solvente ou positivos no Dia 7) e dos padrões de melanina foram determinados. O valor de OD490 corrigido para as amostras de teste e cada padrão de melanina foi determinado subtraindo o valor de OD490 médio dos poços em branco. A curva padrão foi traçada como a concentração dos padrões em mg/mL (eixo y) versus a absorbância corrigida correspondente. A quantidade de melanina em cada tecido individual foi interpolada a partir da curva padrão (linear). Finalmente, a média da concentração de melanina para cada artigo de teste ou grupos de tratamento de controle, respectivamente, foi calculada. Resultados

[00280] A Fig. 1 resume a viabilidade média do tecido e os resultados da concentração de melanina para os artigos de teste, controle positivo e tecidos não tratados. Os resultados preliminares sugerem que certas formulações aplicadas aos compostos de carbazol da presente invenção podem exibir independentemente efeitos moderados de brilho da pele que amortecem a atividade de escurecimento da pele dos carbazóis.

[00281] A Fig. 2 resume a viabilidade média do tecido e os resultados da concentração de melanina para os artigos de teste e tecidos não tratados observados em um experimento separado. Os tratamentos combinados compreendendo, por exemplo, malassezina e indirrubina, exibiram efeitos de brilho da pele mais eficazes do que qualquer um dos compostos isoladamente.

[00282] A Fig. 4 resume a viabilidade média do tecido e os resultados da concentração de melanina para os artigos de teste, composições de teste, controle positivo e controle com solvente. Os compostos que compreendem as composições #1 e #2 demonstraram efeitos sinergísticos quando combinados em uma única composição.

[00283] A Fig. 5 resume a viabilidade média do tecido e os resultados da concentração de melanina para os artigos de teste, composições de teste, controle positivo e controle com solvente. Os compostos que compreendem as composições #2, #3, #4 e #5 demonstraram efeitos sinergísticos quando combinados em uma única composição. Exemplo 6 Potencial de Melanogênese de Composições contendo Compostos Derivados de Malassezia e/ou Análogos Químicos dos Mesmos

[00284] A finalidade desse estudo é observar e relatar a melanogênese e a viabilidade de melanócitos B16 expostos a composições contendo compostos derivados de Malassezia e/ou análogos químicos dos mesmos. Materiais e Reagentes

[00285] Os meios de divisão em placas incluirão DMEM sem L-glutamina, FBS, penicilina/estreptomicina e L-glutamina. O meio de ensaio incluirá DMEM sem vermelho de fenol e L- glutamina, FBS, penicilina/estreptomicina, L-glutamina e aMSH. Outros reagentes incluirão ácido kójico, DMSO e MTT. As células testadas serão células B16 (ATCC CRL-6475). Protocolo

[00286] Os melanócitos B16 são cultivados até 70% confluentes e colhidos. As células são semeadas em placas de 96 poços a uma densidade de 4000 células/poço e podem se afixar durante a noite. No dia seguinte, os artigos de teste,

as composições de teste e os controles são diluídos em meio de ensaio B16. Os Meios durante a noite são aspirados e 200 ul de artigos de teste e controles são aplicados. As células são incubadas a 37 °C e CO2 a 10% por 72 horas. Após 72 horas de incubação, a absorbância é lida a 540 nm. O meio é removido e substituído por 100 µl de meio de divisão em placas contendo 1 mg/mL de MTT e incubado por 2 horas a 37 °C e CO2 a 10%. O meio de MTT é removido e substituído por 200 ul de Etanol a 95%/Isopropanol a 5% e deixado agitar por 15 minutos. A absorbância do MTT é então lida a 570 nm. Resultados

[00287] Espera-se que os compostos e as composições da presente invenção, incluindo as Composições #1-5, inibam a melanogênese. Espera-se que as composições da presente invenção exibam, por exemplo, atividade inibidora da melanogênese mais potente em comparação com pelo menos um composto componente. Da mesma forma, espera-se que certas composições demonstrem, por exemplo, atividade inibidora da melanogênese menos eficaz em comparação com pelo menos um composto componente. Exemplo 7 Eficácia In Vitro

[00288] Espera-se que os compostos e composições da presente invenção induzam a apoptose dos melanócitos e modulem a atividade dos melanócitos, a produção de melanina, a concentração de melanina, a biogênese dos melanossomas e/ou a transferência dos melanócitos. É também contemplado que alguns dos compostos e composições da presente invenção afetarão esses processos biológicos de forma menos potente. Esses compostos e composições podem ter perfis de toxicidade mais favoráveis em comparação com espécies mais potentes. Exemplo 8 Eficácia In Vivo

[00289] Espera-se que os compostos e composições da presente invenção modulem a pigmentação da pele, incluindo o brilho da pele e melhorando a hiperpigmentação/hipopigmentação causada por vários distúrbios. Espera-se ainda que os compostos e composições da presente invenção exibam perfis farmacocinéticos favoráveis em termos de, por exemplo, meia-vida e absorção. Certos compostos exibirão uma meia-vida mais longa, enquanto outros exibirão uma meia-vida mais curta. De forma similar, certos compostos exibirão perfis de absorção diferentes, com alguns compostos demorando mais para serem totalmente absorvidos e outros levando menos tempo para serem totalmente absorvidos. Exemplo 9 Síntese de Análogos Químicos de Malassezina e Indirrubina Síntese de AB17590

[00290] Como mostrado na Fig. 6A, a uma solução do composto 1a (25,0 g, 0,357 mol, 1,0 eq) em tetra-hidrofurano (250 mL) foi adicionado brometo de etinilmagnésio (0,5 M em THF, 1,07 L, 0,535 mol, 1,5 eq) a 0 °C e a mistura reacional foi aquecida até a temperatura ambiente e agitada por 2 h. Em seguida, a mistura foi extinta com solução aquosa saturada de cloreto de amônio e extraída com acetato de etila. A camada orgânica foi seca em Na2SO4 anidro e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em gel de sílica (acetato de etila a 0-10% em éter de petróleo) para resultar no composto 1b (9,5 g, 27%). TLC:

PE:EA = 20:1, 254 nm; Rf (Composto 1a) = 0,3; Rf (Composto 1b) = 0,7.

[00291] A uma mistura do composto 1b (9,5 g, 98,96 mmol, 1,0 eq) em tetra-hidrofurano (100 mL) foi adicionada uma solução de hidreto de sódio a 60% (4,7 g, 0,119 mol, 1,2 eq) em dimetilformamida (50 mL) a 0 °C sob atmosfera de nitrogênio. Após 30 minutos, foi adicionado sulfato de dimetila (22,4 g, 0,178 mol, 1,8 eq) a 0 °C. Após a adição, a mistura reacional foi deixada aquecer até a temperatura ambiente e agitada em temperatura ambiente durante 30 min e, em seguida, foi adicionado lentamente ácido acético (1 mL). O produto foi destilado diretamente da mistura reacional. Foi assim obtido o composto 1c (10,0 g, 91% de rendimento).

[00292] A uma solução do composto 1 (8,0 g, 24,02 mmol, 1,0 eq) e composto 1c (2,9 g, 26,43 mmol, 1,1 eq) em trietilamina (80 mL) foi adicionado iodeto cuproso (456 mg, 2,40 mmol, 0,1 eq) e Pd(PPh3)2Cl2 (337 mg, 0,480 mmol, 0,02 eq) em temperatura ambiente sob atmosfera de nitrogênio. A mistura foi agitada em temperatura ambiente por 2 h. O progresso da mistura reacional foi monitorado por TLC. A mistura reacional foi diluída com água e extraída com acetato de etila. A camada orgânica foi seca em sulfato de sódio anidro e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em gel de sílica (0~10% de acetato de etil em éter de petróleo) para resultar no composto 2 (7,0 g, 92%). TLC: PE:EA = 10:1, 254 nm; Rf (composto 1) = 0,8; Rf (composto 2) = 0,6.

[00293] A um frasco seco em estufa foi adicionada uma mistura de dicloreto de platina (694 mg, 2,06 mmol, 0,1 eq), carbonato de sódio (3,3 g, 30,95 mmol, 1,5 eq),

tris(pentafluorofenil)fosfina (2,2 g, 4,13 mmol, 0,2 eq), 6- metil indol (4,8 g, 41,27 mmol, 2,0 eq) e composto 2 (6,5 g, 20,63 mmol, 1,0 eq) em dioxano (650 mL). O frasco foi desgaseificado com nitrogênio, vedado e aquecido a 100 °C por 16 h. O progresso da mistura reacional foi monitorado por TLC. O solvente foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi diluído com acetato de etila e extraído com água, salmoura saturada. A camada orgânica foi seca em sulfato de sódio anidro e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em gel de sílica (acetato de etila a 0~10% em éter de petróleo) para resultar no composto 3 (3,0 g, 36%). TLC: PE:EA = 10:1, 254 nm; Rf (composto 2) = 0,6; Rf (composto 3) = 0,2.

[00294] A uma solução do composto 3 (3,0 g, 7,50 mmol, 1,0 eq) em tetra-hidrofurano (30 mL) foi adicionado metanolato de sódio (5 M em MeOH, 6,0 mL, 29,98 mmol, 4,0 eq) a 0 °C. A mistura reacional foi deixada aquecer até a temperatura ambiente e agitada por 2 h. O progresso da mistura reacional foi monitorado por TLC. A mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em gel de sílica (acetato de etila de 0~10% em éter de petróleo) para resultar no composto 4 (1,5 g, 66%). TLC: PE: EA = 5:1, 254 nm; Rf (composto 3) = 0,7; Rf (composto 4) = 0,4.

[00295] A um balão de fundo redondo de três gargalos de 500 mL seco sob argônio a 0 °C, foi adicionada dimetilformamida (10 mL). Em seguida, oxicloreto de fósforo (1,2 g, 7,60 mmol, 1,2 eq) foi adicionado lentamente enquanto se mantinha a temperatura interna abaixo de 5 °C ao longo de 10 min. Após agitação a 0 °C por 30 min, uma solução do composto 4 (1,9 g, 6,33 mmol, 1,0 eq) em dimetilformamida (20 mL) foi adicionada lentamente enquanto se mantinha a temperatura interna abaixo de 5 °C ao longo de 10 min. A mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente por 16 h. Após a reação estar completa (monitorada por TLC usando acetato de etila a 20% em hexanos), a mistura reacional foi vertida em bicarbonato de sódio aquoso saturado (50 mL) e agitada por 1 h. A mistura resultante foi extraída com acetato de etila (2 x 100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água, salmoura saturada e secas em sulfato de sódio. O solvente foi filtrado e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em gel de sílica (acetato de etila a 10-50% em éter de petróleo) para obter o composto 5 (1,8 g, 89%). TLC: PE: EA = 1:1, 254 nm; Rf (composto 4) = 0,8; Rf (composto 5) = 0,5.

[00296] A uma solução do composto 5 (1,8 g, 5,49 mmol, 1,0 eq) em tetra-hidrofurano (20 mL) foi adicionado dicarbonato de di-terc-butila (3,0 g, 13,72 mmol, 2,5 eq) e 4-Dimetilaminopiridina (1,4 g, 11,25 mol, 2,05 eq) a 0 °C. A mistura reacional foi aquecida em temperatura ambiente e agitada por 3 h. O progresso da mistura reacional foi monitorado por TLC. A mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida e o resíduo foi diluído com acetato de etila e lavado com ácido clorídrico 1 N, bicarbonato de sódio aquoso saturado (300 mL) e salmoura (300 mL). As camadas orgânicas foram separadas e secas em sulfato de sódio anidro, filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia em gel de sílica (acetato de etila a 0-10% em éter de petróleo) para obter o composto 6 (2,4 g, 82%). TLC:

PE: EA = 10:1, 254 nm; Rf (composto 5) = 0,1; Rf (composto 6) = 0,5.

[00297] A uma solução do composto 6 (2,4 g, 4,55 mmol, 1,0 eq) em terc-Butanol (60 mL) foi adicionado 2-metil-2- buteno (30 mL) seguido pela adição de clorito de sódio (8,2 g, 90,91 mmol, 20,0 eq), fosfato de sódio monobásico (14,2 g, 90,91 mmol, 20,0 eq) e água (60 mL) a 0 °C. A mistura foi aquecida lentamente até a temperatura ambiente e agitada em temperatura ambiente por 15 h. O progresso da mistura reacional foi monitorado por TLC. A mistura reacional foi diluída com diclorometano (100 mL) e separada. A camada orgânica foi lavada com água (80 mL), salmoura (80 mL), seca em sulfato de sódio anidro e concentrada sob pressão reduzida para obter o composto 7 em bruto (2,5 g, 99%). TLC: PE: EA = 2:1, 254 nm; Rf (composto 6) = 0,7; Rf (composto 7) = 0,3.

[00298] A uma solução do composto 7 (2,5 g, 4,60 mmol, 1,0 eq) em dimetilformamida (30 mL) foram adicionados carbonato de potássio (952 mg, 6,89 mmol, 1,5 eq) e iodeto de metila (978 mg, 6,89 mmol, 1,5 eq) a 0 °C. A mistura reacional foi aquecida em temperatura ambiente e agitada por 2 h. O progresso da mistura reacional foi monitorado por TLC. A mistura reacional foi diluída com acetato de etila (100 mL) e lavada com água (100 mL) e salmoura (100 mL). A camada orgânica foi seca em sulfato de sódio anidro e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em gel de sílica (acetato de etila a 5-17% em éter de petróleo) para obter o composto 8 (2,3 g, 89%). TLC: PE: EA = 5:1, 254 nm; Rf (composto 7) = 0,1; Rf (composto 8) = 0,6.

[00299] Uma mistura do composto 8 (1,3 g, 2,33 mmol, 1,0 eq) em ácido clorídrico (3 M em EA, 30 mL) foi agitada em temperatura ambiente por 16 h. A reação foi monitorada por TLC. Em seguida, a mistura foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em gel de sílica (acetato de etila a 10-25% em éter de petróleo) para gerar o composto AB17590 (502 mg, 61%) como um sólido amarelo. TLC: PE: EA = 3:1, 254 nm; Rf (composto 8) = 0,8; Rf (composto AB17590) = 0,5; LC-MS: 359 (M+1)+; RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 8.12 (d, J = 19.7 Hz, 2H), 7.94 (s, 1H), 7.42 (s, 1H), 7.35 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.13 (t, J = 7.8 Hz, 1H),

7.04 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.93 (dd, J = 15.7, 8.6 Hz, 2H),

5.04 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 3.95 (s, 3H), 2.45 (s, 3H), 1.42 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 0.78 – 0.68 (m, 1H), 0.62 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 0.54 – 0.41 (m, 2H). Síntese de AB17653

[00300] Como mostrado na Fig. 6B, uma mistura de composto 1 (721 mg, 3,20 mmol, 1,0 eq), composto 1a (560 mg, 3,20 mmol, 1,0 eq) e carbonato de sódio (866 mg, 8,17 mmol, 2,55 eq) em metanol (10 mL) foi agitada em temperatura ambiente por 3 h sob atmosfera de nitrogênio. O progresso da mistura reacional foi monitorado por TLC. Após a conclusão da reação, a mistura foi filtrada e a torta de filtro foi lavada com metanol e água para proporcionar o composto AB17653 (979 mg, 89%) como um sólido vermelho. TLC: PE/EA = 3/1, 254 nm; Rf (Composto 1) = 0.6; Rf (Composto AB17653) = 0.4; LC-MS:

338.95 (M-1)-; RMN 1H (400 MHz, d6-DMSO) δ11.01 (d, J = 21.5 Hz, 2H), 8.64 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.62 (d, J = 7.7 Hz, 1H),

7.55 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.39 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.18 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.00 (dd, J = 8.8, 4.6 Hz, 2H). Síntese de AB17654

[00301] Como mostrado na Fig. 6B, uma mistura de composto

AB17653 (979 mg, 2,88 mmol, 1,0 eq) e cloridrato de hidroxilamina (520 mg, 7,49 mmol, 2,6 eq) em piridina (30 mL) foi agitada a 120 °C por 2 h sob atmosfera de nitrogênio. O progresso da mistura reacional foi monitorado por LCMS. Após a conclusão da reação, a mistura foi concentrada sob pressão reduzida e foi adicionado HCl 1 N até o sólido aparecer. A mistura foi filtrada e a torta de filtro foi dissolvida em NaOH 1 N. Em seguida, foi adicionado HCl 3 N para ajustar o pH = 5 e filtrado. A torta de filtro foi lavada com HCl 1 N para resultar no composto AB17654 (500 mg, 48%) como um sólido vermelho. LC-MS: 357.95 (M+1)+; RMN 1H (400 MHz, d6-DMSO) δ 13.59 (s, 1H), 11.71 (s, 1H), 10.82 (s, 1H), 8.53 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.19 (d, J = 7.7 Hz, 1H),

7.42 – 7.35 (m, 2H), 7.11 – 6.96 (m, 3H). Síntese de AB17655

[00302] Como mostrado na Fig. 6B, uma mistura de composto 2 (637 mg, 3,86 mmol, 1,0 eq), composto 1a (676 mg, 3,86 mmol, 1,0 eq) e carbonato de sódio (1044 mg, 9,84 mmol, 2,55 eq) em metanol (10 mL) foi agitada em temperatura ambiente por 3 h sob atmosfera de nitrogênio. O progresso da mistura reacional foi monitorado por TLC. Após a conclusão da reação, a mistura foi filtrada e a torta de filtro foi lavada com metanol e água para obter o composto AB17655 (1027 mg, 95%) como um sólido vermelho. LC-MS: 281.05 (M+1)+; RMN 1H (400 MHz, d6-DMSO) δ11.06 (s, 1H), 10.86 (s, 1H), 8.54 (dd, J =

10.5, 2.7 Hz, 1H), 7.67 – 7.53 (m, 2H), 7.41 – 7.38 (m, 1H),

7.09 – 6.98 (m, 2H), 6.85 (dd, J = 8.5, 4.8 Hz, 1H). Síntese de AB17656

[00303] Como mostrado na Fig. 6B, uma mistura de composto AB17655 (1027 mg, 3,67 mmol, 1,0 eq) e cloridrato de hidroxilamina (663 mg, 9,54 mmol, 2,6 eq) em piridina (30 mL) foi agitada a 110 °C por 2 h sob atmosfera de nitrogênio. O progresso da mistura reacional foi monitorado por LCMS. Após a conclusão da reação, a mistura foi concentrada sob pressão reduzida e adicionado HCl 1 N até o sólido aparecer. A mistura foi filtrada e a torta de filtro foi dissolvida em NaOH 1 N. Em seguida, foi adicionado HCl 3 N para ajustar o pH = 5 e filtrado. A torta de filtro foi lavada com HCl 1 N para obter o composto AB17656 (500 mg, 48%) como um sólido vermelho. LC-MS: 296.00 (M+1)+; RMN 1H (400 MHz, d6-DMSO) δ13.60 (s, 1H), 11.77 (s, 1H), 10.69 (s, 1H), 8.43 (s, 1H),

8.20 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 7.39 (d, J = 5.7 Hz, 2H), 7.02 (s, 1H), 6.91 (s, 1H), 6.83 (d, J = 4.9 Hz, 1H). Síntese de AB17657

[00304] Como mostrado na Fig. 6B, uma mistura do composto 3 (362 mg, 2,46 mmol, 1,0 eq), composto 1a (431 mg, 2,46 mmol, 1,0 eq) e carbonato de sódio (666 mg, 6,28 mmol, 2,55 eq) em metanol (10 mL) foi agitada em temperatura ambiente por 3 h sob atmosfera de nitrogênio. O progresso da mistura reacional foi monitorado por TLC. Após a conclusão da reação, a mistura foi filtrada e a torta de filtro foi lavada com metanol e água para obter o composto 4 (606 mg, 93%). TLC: PE/EA = 1/1, 254 nm; Rf (Composto 3) = 0,7; Rf (Composto 4) = 0,5.

[00305] Uma mistura de composto 4 (606 mg, 2,31 mmol, 1,0 eq) e cloridrato de hidroxilamina (418 mg, 6,01 mmol, 2,6 eq) em piridina (20 mL) foi agitada a 120 °C por 2 h sob atmosfera de nitrogênio. O progresso da mistura reacional foi monitorado por TLC. Após a conclusão da reação, a mistura foi concentrada sob pressão reduzida e foi adicionado HCl 1 N até o sólido aparecer. A mistura foi filtrada e a torta de filtro foi dissolvida em NaOH 1 N. Em seguida, foi adicionado HCl 3 N para ajustar o pH = 5 e filtrado. A torta de filtro foi lavada com HCl 1 N para obter o composto AB17657 (500 mg, 78%) como um sido castanho. TLC: PE/EA = 1/1, 254 nm; Rf (Composto 4) = 0,5; Rf (Composto AB17657) = 0,4; LC-MS: 278.10 (M+1)+; RMN 1H (400 MHz, d6-DMSO) δ13.60 (s, 1H), 11.77 (s, 1H), 10.69 (s, 1H), 8.43 (s, 1H), 8.20 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 7.39 (d, J = 5.7 Hz, 2H), 7.02 (s, 1H), 6.91 (s, 1H), 6.83 (d, J = 4.9 Hz, 1H). Síntese de AB17658

[00306] Como mostrado na Fig. 6B, uma mistura de composto 5a (337 mg, 1,73 mmol, 1,0 eq), composto 5b (554 mg, 1,73 mmol, 1,0 eq) e hidróxido de potássio (1114 mg, 3,46 mmol, 2,0 eq) em acetonitrila (10 mL) foi agitada a 35 °C por 1,5 h sob atmosfera de nitrogênio. O progresso da mistura reacional foi monitorado por TLC. Após a conclusão da reação, a mistura foi concentrada sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromatografia em gel de sílica para obter o composto 5c (436 mg, 99%). TLC: PE/EA = 1/1, 254 nm; Rf (Composto 5a) = 0,8; Rf (Composto 5c) = 0,5.

[00307] Uma mistura de composto 5 (330 mg, 1,72 mmol, 1,0 eq), composto 5c (436 mg, 1,72 mmol, 1,0 eq) e carbonato de sódio (465 mg, 4,38 mmol, 2,55 eq) em metanol (10 mL) foi agitadaa em temperatura ambiente por 3 h sob atmosfera de nitrogênio. O progresso da mistura reacional foi monitorado por TLC. Após a conclusão da reação, a mistura foi filtrada e a torta de filtro foi lavada com metanol e água para obter o composto 6 (617 mg, 93%). TLC: PE/EA = 1/1, 254 nm; Rf (Composto 5) = 0,5; Rf (Composto 6) = 0,4.

[00308] Uma mistura de composto 6 (617 mg, 1,60 mmol, 1,0 eq) e cloridrato de hidroxilamina (290 mg, 4,17 mmol, 2,6 eq) em piridina (20 mL) foi agitada a 110 °C por 2 h sob atmosfera de nitrogênio. O progresso da mistura reacional foi monitorado por TLC. Após a conclusão da reação, a mistura foi concentrada sob pressão reduzida e foi adicionado HCl 1 N até o sólido aparecer. A mistura foi filtrada e a torta de filtro foi dissolvida em NaOH 1 N. Em seguida, foi adicionado HCl 3 N para ajustar o pH = 5 e filtrado. A torta de filtro foi lavada com HCl 1 N para obter o composto AB17658 (500 mg, 78%) como um sólido vermelho. TLC: PE/EA = 1/1, 254 nm; Rf (Composto 6) = 0,4; Rf (Composto AB17658) = 0,3; LC-MS:

402.95 (M+1)+; RMN 1H (400 MHz, d6-DMSO) δ11.86 (s, 1H), 11.39 (s, 1H), 9.40 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 8.33 (d, J = 1.8 Hz, 1H),

8.06 (dd, J = 8.6, 2.4 Hz, 1H), 7.59 (dd, J = 8.4, 2.0 Hz, 1H), 7.43 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.02 (d, J = 8.6 Hz, 1H). Exemplo 10 Avaliação In Vivo das Propriedades Fotoprotetoras de Malassezina, Outros Compostos Derivados de Malassezia e Análogos químicos dos mesmos Formulação de Malassezina a 1%

[00309] A formulação de Malassezina a 1% usada nesse estudo continha os seguintes ingredientes: Água (aqua) - 65,939%; Dimetil isossorbida - 20.000%; Ésteres de glicereth-8 de azeite - 3.000%; Glicerina - 2,991%; Alcanos de coco - 2.700%; Copolímero de acrilato de hidroxietila/taurato de acriloildimetil de sódio - 1,700%; Malassezina - 1.000%; Pentilenoglicol - 1.000%; Fenoxietanol - 0,640%; Coco-Caprilato/Caprato - 0,300%; Caprililglicol - 0,200%; Clorfenesina - 0,160%; Isoestearato de Sorbitano - 0,140%; Tocoferol - 0,100%; Polissorbato 60 - 0,080%; e EDTA dissódico - 0,050%.

Projeto experimental

[00310] Uma mulher de Tipo de Pele IV de 39 anos foi incluída nesse estudo de Prova de Conceito.

[00311] No Dia 1 do experimento, o indivíduo foi avaliado para determinar a Dosagem Mínima de Eritema (“MED”) usando um dispositivo UVB Dualight de banda larga direcionado. Um molde de 6 quadrados foi colocado na parte inferior esquerda das costas (1,5 cm x 1,5 cm) do indivíduo de teste. Ver a Fig. 7.

[00312] As doses de teste de foto MED para o tipo de pele do indivíduo estão listadas na Fig. 8 em unidades de mJ/cm2. Vinte e quatro horas após a irradiação, o indivíduo retornou para avaliação MED. Como mostrado na Fig. 12, a MED do indivíduo era de 120 mJ.

[00313] Subsequentemente, o indivíduo aplicou Malassezina a 1% no quadrado de teste superior da parte traseira direita duas vezes ao dia por 7 dias. Um segundo quadrado inferior direito foi tratado duas vezes ao dia do dia 4 ao dia 7, e um terceiro quadrado medial para uma aplicação no dia 7. O veículo do produto foi aplicado por 7 dias duas vezes ao dia na parte traseira esquerda. Ver a Fig. 13. O indivíduo retornou ao centro de pesquisa para irradiação no dia 7. Ver a Fig. 9. Cada local de teste foi irradiado com 120 mJ de exposição a UVB. O indivíduo retornou em 24 horas para avaliação de fototoxicidade/fotoproteção. Ver a Fig. 14.

[00314] O indivíduo continuou o experimento, recebendo Malassezina a 1% por um total de 14 dias. As Figs. 15-16 mostram regiões da pele do indivíduo expostas aos seguintes tratamentos: no local 14, Malassezina a 1% foi aplicado duas vezes ao dia por 14 dias; no local 10, Malassezina a 1% foi aplicado duas vezes ao dia por 11 dias; no local 8, Malassezina a 1% foi aplicado duas vezes ao dia por 8 dias; no local 3, Malassezina a 1% foi aplicado duas vezes ao dia por 3 dias; no local 1, Malassezina a 1% foi aplicado uma vez; e, nos locais dos veículos, o veículo foi aplicado duas vezes ao dia durante 7 e 9 dias, respectivamente. Resultados

[00315] Como mostrado na Fig. 14, 24 horas após a exposição aos UVB, o indivíduo exibiu 1 mais a 2 mais eritema no local de teste do veículo. Ver a Fig. 11 para ver a escala do eritema. Em contraste, houve menos eritema (leve) observado no local de tratamento no Dia 7 Malassezina a 1%. A avaliação dos locais tratados por 3 dias mostrou eritema mínimo e nenhum para o local da aplicação no Dia 1. As medições de colorimetria foram feitas em cada local usando o Mexameter MX16 e as observações clínicas comprovadas. Leituras máximas de eritema foram observadas no local do veículo, seguido pelo local tratado com Malassezina no Dia

7. Os valores mais baixos foram observados para o local com Malassezina no dia 3 e no dia 1, respectivamente. Ver a Fig.

9.

[00316] O indivíduo continuou o experimento e voltou para uma irradiação de UVB repetida em 14 dias com interpretação no dia 15. Ver Fig. 15. A avaliação clínica no Dia 15 revelou eritema moderado no local do veículo para o dia 7 e significativamente menos no dia 9. Ver Fig. 16. Foi observado menos eritema (leve) nos locais tratados com Malassezina a 1%, incluindo os locais no dia 14, no dia 10 e no dia 8. Eritema mínimo foi observado nos locais de Malassezina a 1%

para os dias 1 e 3. As leituras de colorimetria foram feitas em cada local para medir o eritema e o índice de melanina. Os resultados apoiaram as observações clínicas de menos eritema nos locais tratados com Malassezina a 1%. Ver a Fig.

10.

[00317] As biópsias foram retiradas do local do veículo em 9 dias e os locais tratados com Malassezina a 1% para os dias 1 e 3. As amostras foram analisadas para Hematoxilina e Eosina, coloração de Fontana Masson e MART I para quantificação de melanócitos e estudos de afimetrix. As seguintes avaliações qualitativas foram feitas: Diagnóstico: (A) Pele – Tratado no Dia 1 (Malassezina a 1%): Estrato córneo entrelaçado, melanócitos de aparência normal (confirmado por coloração de imunoperoxidase com Mart-1) e melanina epidérmica (confirmado por coloração de imunoperoxidase com Fontana Masson); Diagnóstico: (B) Pele – Tratado no Dia 3 (Malassezina a 1%): Estrato córneo entrelaçado, menos melanócitos dendríticos (confirmado por coloração de imunoperoxidase com MART-1/Melan A) quando comparado com C e D, e com um ligeira diminuição da melanina epidérmica, como áreas de salto (confirmadas por coloração de imunoperoxidase com Fontana Masson); Diagnóstico: (C) Pele - Veículo: Melanócitos epidérmicos de aparência normal (confirmados por coloração de imunoperoxidase com Mart-1) e melanina epidérmica (confirmada por coloração de imunoperoxidase com Fontana Masson); Diagnóstico: (D) Pele – Normal: Melanócitos epidérmicos de aparência normal (confirmado por coloração de imunoperoxidase com Mart-1) e melanina epidérmica (confirmado por coloração de imunoperoxidase com Fontana Masson). Conclusões

[00318] Os resultados desse estudo de Prova de Conceito demonstram as propriedades de proteção de UV do Malassezina. Exemplo 11 Avaliação do Efeito de Malassezina em Linhas Finas e Rugas por Análise de Expressão Gênica

[00319] Os efeitos de Malassezina na expressão de enzimas envolvidas na formação de procolágeno e na degradação de elastina foram investigados. Os genes envolvidos com o aumento do colágeno e a diminuição da degradação da elastina foram significativamente alterados após o tratamento de indivíduos humanos com compostos de teste, como detalhado abaixo.

[00320] O colágeno é uma proteína que funciona, em conjunto com a elastina, para formar as proteínas estruturais da matriz extracelular da pele. O colágeno é sintetizado pelos fibroblastos como moléculas precursoras chamadas procolágeno. O procolágeno é então secretado pela célula; fora da célula, ele é formado em fibrilas de colágeno. A síntese de colágeno é controlada pelo Fator de Crescimento Transformador Beta (TGFbeta). O colágeno é decomposto na pele pelas metaloproteinases da matriz (MMPs). A elastina é formada de maneira similar ao colágeno da molécula precursora tropoelastina. A elastina diminui naturalmente com a idade e é decomposta de forma similar pelas MMPs.

[00321] Os níveis de colágeno podem ser diminuídos de duas maneiras: inibição da formação de procolágeno e degradação por metaloproteinases de matriz (MMPs). A inibição da formação de procolágeno é realizada pela inibição de TGFbeta. Fatores ambientais tais como UV e estresse oxidativo podem ativar as MMPs, aumentando assim a degradação do colágeno. Um regulador da via de degradação do colágeno, o Inibidor Tecidual de Metaloproteinases (TIMPs), inibe as MMPs, diminuindo assim a degradação do colágeno.

[00322] Por outro lado, o colágeno pode ser aumentado de várias maneiras através da pele. Primeiro, o TGFbeta pode ser aumentado, permitindo que uma quantidade maior de procolágeno seja sintetizada. Em segundo lugar, os MMPs podem ser inibidos por meio dos TIMPs, permitindo uma diminuição na degradação do colágeno. As situações não precisam ocorrer juntas para aumentar o colágeno. No entanto, se ocorrerem juntos, o aumento do colágeno é maior. Os resultados estão tabulados abaixo.

[00323] A análise de expressão diferencial de gene foi usada para analisar Malassezina e o composto AB17151. As biópsias de seres humanos foram feitas após 6 semanas de aplicação dos compostos. Dois participantes aplicaram AB17151 e um participante aplicou Malassezina. As biópsias foram feitas da pele tratada e, como controle e para comparação, da pele não tratada. As biópsias foram testadas quanto a alteração na expressão de RNA dos genes indicados na tabela abaixo. Tabela 8. Efeito de Malassezina na formação e na degradação do colágeno Gene treatado medido com: Malassezin: AB17151: AB17151:

PG CR ME COL1A1 Colágeno, tipo 1, alfa 1 (1,27) 5,61 (1,27)

COL1A2 Colágeno, tipo 1, alfa 2 (1,37) 6,97 1,99 COL3A1 Colágeno, tipo III, alfa 1 1,7 6,26 2,59 COL5A1 Colágeno, tipo V, alfa 1 (-1,15) 6,1 (1,41) COL5A2 Colágeno, tipo V, alfa 2 (1,24) 2,23 (-1,03) PCOLCE2 Intensificador de procolágeno=C 2,93 1,5 1,57 endopeptidase 2 MMP7 Metaloproteinase matriz 7 -2,81 (1,02) 1,79 MMP12 Metaloproteinase matriz 12 (1,25) -21,44 (-1,01)

[00324] Na Tabela, os números entre parênteses indicam mudanças que não são estatisticamente significativas. Todos os números indicam alteração na expressão. Valores negativos indicam diminuições na atividade. Uma alteração de menos 3 vezes na atividade, por exemplo, significa que o valor mudou em menos 3 vezes, o que significa que mudou para 1/3 de seu valor original.

[00325] A malassezina induziu um aumento no Intensificador de procolágeno=C endopeptidase 2 (PCOLCE2) que está envolvido na formação de procolágeno, o bloco de construção do colágeno. Os genes do colágeno foram aumentados em ambas as amostras AB17151, com alguns genes sendo alterados em até 7 vezes. Uma amostra de AB17151 também diminuiu muito a Metaloproteinase matriz 12 (MMP12), que está envolvida na degradação da elastina. A malassezina inibiu a Metalopeptidase Matriz 7 (MMP7), também envolvida na degradação da elastina.

[00326] Esses dados indicam que os efeitos de Malassezina em linhas finas e rugas (discutidos no exemplo a seguir) podem surgir da formação de pró-colágeno de promoção de Malassezina, potencializando os genes de colágeno/pró- colágeno como indicado acima e/ou inibindo a degradação de elastina por, por exemplo, metaloproteinase de matriz 7. Exemplo 12 Avaliação In Vivo do Efeito de Malassezina em Linhas Finas e Rugas

[00327] As formulações de Malassezina foram avaliadas quanto ao seu efeito em linhas finas e rugas. Nesse estudo, indivíduos humanos com pele contendo áreas de hiperpigmentação foram randomizados para um de 3 grupos. Os grupos de uso do produto incluíram Malassezina 0,05%, 0,1% e 1,0%. Um mL do produto (formulações detalhadas abaixo) foi aplicado no rosto dos indivíduos duas vezes ao dia. Cinco minutos após a aplicação matinal, um protetor solar FPS 50 foi aplicado para proteger do sol as áreas tratadas. Cada indivíduo teve avaliações na referência, 2, 4, 8, 14, 18 e 22 semanas. O tratamento foi interrompido em 14 semanas. As observações da semana 18 e da semana 22 foram para determinar qualquer retorno à referência.

[00328] Onze indivíduos usando o ingrediente de teste completaram a semana 14. A seguinte análise foi compilada com base nesses dados. Um doutor em medicina dermatologista com experiência na avaliação de linhas finas e rugas realizou avaliações nos indivíduos nesse estudo e obteve as medidas em tabelas abaixo. A avaliação, a classificação e a avaliação das rugas foram realizadas como descrito em G. Lemperle et al., A classificação of facial wrinkles, Plast. Reconstr. Surg. 108: 1735 (2001), incorporado por referência nesse documento em sua totalidade. Os seguintes dados foram obtidos. Para cada indivíduo, a porcentagem da formulação de Malassezina é indicada. Tabela 9. Dados de linhas finas/rugas. Indivíduo Semana 0 Semana 2 Semana 4 Semana 8 Semana 14 VT01 (0,5%) 3 2 2 2 2 VT02 (0,1%) 2 3 3 3 3 VT03 (0,5%) 3 3 3 3 3

VT04 (1,0%) 3 3 2 2 2 VT05 (0,1%) 2 0 0 0 0 VT06 (0,5%) 3 2 2 2 2 VT07 (1,0%) 3 2 2 2 2 VT08 (0,1%) 2 1 1 1 1 VT09 (0,5%) 2 0 0 0 0 VT10 (1,0%) 2 1 1 1 1 VT11 (0,1%) 3 3 3 3 3 Média 2,55 1,82 1,73 1,73 1,73 Valor P (Teste T de Student) 0,024 0,011 0,011 0,011

[00329] Uma autoavaliação do indivíduo foi concluída em cada visita. Um número total de onze (11) indivíduos foi solicitado a responder às perguntas sobre a melhora (se houver) em suas linhas e rugas e a textura, o tom e a firmeza da pele relacionados. Cada resposta foi graduada de 6 a 1, com cada uma tendo o significado: 6 - Concordo totalmente, 5 - Concordo, 4- Concordo parcialmente, 3 - Discordo parcialmente, 2 - Discordo e 1 - Discordo totalmente. A porcentagem de indivíduos que responderam com pontuação 6 ou 5 foi calculada e é apresentada nos dados a seguir. Tabela 10. Autoavaliação do indivíduo. Número Pergunta/Declaração Semana 2 Semana 4 Semana 8 Semana 14 Minhas linhas e rugas 1 são menos visíveis 36,36% 54,55% 63,64% 90,91% Eu tenho uma textura de 2 pele mais lisa 45,45% 63,64% 81,82% 90,91% A textura da minha pele 3 é menos áspera 54,55% 63,64% 72,73% 100,00% Minha pele tem um tom 4 mais brilhante 45,45% 63,64% 72,73% 81,82% A firmeza da minha pele 5 melhorou 36,36% 63,64% 63,64% 72,73% Minha pele parece mais 6 jovem e saudável 45,45% 63,64% 81,82% 72,73% A textura geral da pele 7 é melhorada 54,55% 63,64% 81,82% 90,91% O tom geral da pele é 8 melhorado 54,55% 63,64% 72,73% 81,82% Tabela 11. Legenda da tabela anterior. Legenda para Pontuação do Questionário

Pontuação Significado 6 Concordo totalmente Caixa de Topo 5 Concordo 2 4 Concordo Parcialmente 3 Descordo Parcialmente 2 Descordo 1 Descordo Totalmente

[00330] As seguintes formulações foram aplicadas conforme descrito acima e são exemplos de composições da invenção: Tabela 12. Formulação de Malassezina a 1% Ingrediente Percentagem Uso Água (Aqua) 65,94% Solvente Dimetil Isossorbida 20,00% Solvente, penetrante de pele Ésteres de Azeite glicereth-8 3,00% Agente emulsificante, emoliente Glicerina 2,99% Umectante, solvente Alcanos de coco 2,70% Emoliente, solvente Copolímero de Acrilato de 1,70% Estabilizante de emulsão Hidroxietila/Acriloildimetil Taurato de Sódio Malassezina 1,00% Ingrediente sob estudo; abrilhantador para pele Pentileno Glicol 1,00% Penetrante de pele Fenoxietanol 0,64% Conservante Coco-Caprilato/Caprato 0,30% Emoliente Caprilil Glicol 0,20% Emoliente Clorfenesina 0,16% Conservante Isostearato de Sorbitano 0,14% Agente emulsificante Tocoferol 0,10% Antioxidante Polissorbato 60 0,08% Agente emulsificante EDTA Dissódico 0,05% Agente Quelante Total: 100,00% Tabela 13. Formulação de Malassezina a 0,5% Ingrediente Percentagem Uso Água (Aqua) 66,44% Solvente Dimetil Isossorbida 20,00% Solvente, penetrante de pele Ésteres de Azeite glicereth-8 3,00% Agente emulsificante, emoliente

Glicerina 2,99% Umectante, solvente

Alcanos de coco 2,70% Emoliente, solvente

Copolímero de Acrilato de 1,70% Estabilizante de emulsão Hidroxietila/Acriloildimetil Taurato de Sódio Pentileno Glicol 1,00% Penetrante de pele

Fenoxietanol 0,64% Conservante

Malassezina 0,50% Ingrediente sob estudo; abrilhantador para pele Coco-Caprilato/Caprato 0,30% Emoliente

Caprilil Glicol 0,20% Emoliente

Clorfenesina 0,16% Conservante

Isostearato de Sorbitano 0,14% Agente emulsificante

Tocoferol 0,10% Antioxidante

Polissorbato 60 0,08% Agente emulsificante

EDTA Dissódico 0,05% Agente Quelante

Total: 100,00%

Tabela 14. Formulação de Malassezina a 0,1% Ingrediente Percentagem Uso

Água (Aqua) 66,84% Solvente

Dimetil Isossorbida 20,00% Solvente, penetrante de pele

Ésteres de Azeite glicereth-8 3,00% Agente emulsificante, emoliente

Glicerina 2,99% Umectante, solvente

Alcanos de coco 2,70% Emoliente, solvente Copolímero de Acrilato de Hidroxietila/Acriloildimetil Taurato de Sódio 1,70% Estabilizante de emulsão

Pentileno Glicol 1,00% Penetrante de pele

Fenoxietanol 0,64% Conservante

Coco-Caprilato/Caprato 0,30% Emoliente

Caprilil Glicol 0,20% Emoliente

Clorfenesina 0,16% Conservante

Isostearato de Sorbitano 0,14% Agente emulsificante Ingrediente sob estudo; Malassezina 0,10% abrilhantador para pele

Tocoferol 0,10% Antioxidante

Polissorbato 60 0,08% Agente emulsificante

EDTA Dissódico 0,05% Agente Quelante

100,00%

Exemplo 13 Avaliação In Vivo do Efeito da Malassezina no Brilho da

Pele

[00331] No estudo do exemplo imediatamente anterior, os dados relativos ao brilho da pele também foram coletados dos indivíduos tratados. Cada submetido tinha hiperpigmentação de melasma ou de hiperpigmentação pós-inflamatória. Como usado na tabela abaixo, “Env”, uma abreviatura de “envolvido”, refere-se à área da face que apresentou hiperpigmentação. O “Não env”, abreviatura de “não envolvido”, refere-se à área da face que não apresentava pele hiperpigmentada. Ambas as áreas Env e Não env foram tratadas.

[00332] Avaliação: As medições de colorimetria usando o Mexameter MX 18 foram usadas na referência e nas semanas 2, 4, 8, 14, 18 e 22. Avaliações clínicas de despigmentação foram realizadas na área tratada. As avaliações foram realizadas na referência e nas semanas 2, 4, 8, 14, 18 e 22. As avaliações de brilho incluíram o brilho da pele normal e/ou gravidade da discromia, se presente (ver escala). A melhoria global foi medida nos mesmos intervalos de tempo. Em todas as visitas, quaisquer eventos adversos (EA) deveriam ser registrados, incluindo coceira, queimação, eritema, edema, ressecamento, descamação ou descamação da pele (ver escalas de avaliação). Nenhum EA foi registrado. Nos dados reportados abaixo, percentagens negativas indicam pigmentação reduzida, o que indica brilho. Porcentagens positivas indicam pigmentação aumentada, o que indica escurecimento. “Conc.” indica a concentração de Malassezina na formulação administrada ao indivíduo. Tabela 15. Dados de brilho da pele. Indivíduo Conc. Diagnóstico VT01 0,5% Fotolesão

VT02 0,1% Fotolesão VT03 0,5% Fotolesão VT04 1,0% Fotolesão VT05 0,1% Fotolesão VT06 0,5% Melasma VT07 1,0% Melasma VT08 0,1% Melasma VT09 0,5% Melasma VT10 1,0% Melasma VT11 0,1% Fotolesão

Tabela 15 (continuação). Dados de brilho da pele.

Semana 0 Semana 2 Semana 4 Semana 8 Semana 14 Indivíduo Env Env Env Env Env VT01 0,00% -1,35% -3,73% -7,76% -12,42% VT02 0,00% -1,65% -1,75% -2,16% -2,37% VT03 0,00% -3,64% -4,85% -5,83% -8,37% VT04 0,00% -0,72% -1,30% -2,75% -5,51% VT05 0,00% 0,00% -0,17% -5,39% -7,65% VT06 0,00% 0,27% -0,99% -1,08% -7,48% VT07 0,00% -0,61% -3,65% -4,82% -4,41% VT08 0,00% 0,33% -0,66% -3,70% -4,61% VT09 0,00% 0,17% -0,83% -0,99% -8,44% VT10 0,00% -9,78% -16,44% -16,58% -18,48% VT11 0,00% -6,73% -7,14% -7,96% -7,35%

Média para 1,0% 0,00% -3,71% -7,13% -8,05% -9,47% Média para 0,5% 0,00% -1,14% -2,60% -3,92% -9,18% Média para 0,1% 0,00% -2,01% -2,43% -4,80% -5,49%

Tabela 15 (continuação). Dados de brilho da pele.

Semana 0 Não Semana 2 Semana 4 Não Semana 8 Não Semana 14 Env Não Env Env Env Não Env Indivíduo VT01 0,00% -2,71% -5,65% -6,44% -8,93%

VT02 0,00% -3,91% -6,19% -7,82% -7,71%

VT03 0,00% 3,12% 1,22% 0,00% -1,22%

VT04 0,00% -0,60% -3,19% -3,59% -7,37%

VT05 0,00% -0,45% -8,56% -8,78% -12,39%

VT06 0,00% -5,25% -6,97% -7,82% -11,25%

VT07 0,00% -0,52% -6,90% -9,08% 9,17%

VT08 0,00% 1,33% 0,76% 1,04% 0,28%

VT09 0,00% 1,17% 1,75% 1,56% 2,34%

VT10 0,00% -5,56% -7,54% 3,97% -2,38%

VT11 0,00% -7,75% -9,39% -14,55% -12,91%

Média 0,00% -2,23% -5,88% -2,90% -0,19% para 1,0% Média 0,00% -0,92% -2,41% -3,18% -4,77% para 0,5% Média 0,00% -2,69% -5,84% -7,53% -8,18% para 0,1% Exemplo 14 Formulação de Exemplo

[00333] Uma outra formulação de exemplo da Invenção é apresentada na tabela abaixo. Tabela 16. Formulação de Exemplo. INGREDIENTE %(p/p) PM Conc (µM) Uso Água (Aqua) 77,3720% Solvente Capríico/Cáprico Solvente, Triglicerídeo 4,0000% Emoliente Umectante, Glicerina 2,9910% solvente Manteiga de Butyrospermum Parkii (karité) 2,0000% Emoliente Heptil Undecilenato 2,0000% Emoliente Estabilizante Cetearil Olivato 1,8000% de emulsão Estabilizante de emulsão, Agente Álcool cetílico 1,8000% emulsificantes Protetor para Dimeticona 1,5000% pele, oclusivo Sorbitano Agente Olivato 1,2000% emulsificante Dimetil Isossorbida 1,0000% Solvente Solvente, penetrante de Pentileno Glicol 1,0000% pele Esqualano 1,0000% Oclusivo Fenoxietanol 0,5000% Conservante Goma Esclerótica 0,5000% Estabilizador

INGREDIENTE %(p/p) PM Conc (µM) Uso de Emulsão, agente de aumento de viscosidade Caprilil Glicol 0,2500% Emoliente Goma Xantana 0,2000% Emu Etilenodiamina Disuccinato Agente Trissódico 0,0370% Quelante Etil- hexilglicerina 0,1250% Conservante Hexileno Glicol 0,1250% Conservante Agente Glicirrizato calmente para dipotássico 0,1000% pele Malassezina Componente de (AB12977) 0,1705% 273,314 62,38 Soup Cetomalassezina (Composto A5, Componente de CV-8819) 0,0360% 288,305 12,49 Soup Ácido Lático Componente de para Malassezia 0,0417% 334,373 12,47 Soup Componente de O52 (ABI12976) 0,0360% 288,348 12,48 Soup Indirrubina Componente de (AB17656) 0,0818% 262,267 31,19 Soup Indol A de Malassezia Componente de (AB17011) 0,0430% 344,392 12,49 Soup Indolol(3,2-b) Componente de Carbazol 0,0181% 254,285 7,12 Soup dl-Indol-3- Componente de Lático 0,0256% 205,212 12,47 Soup 2-hidroxil-1- (1H-indol-3-il) Componente de etanona 0,0219% 175,186 12,50 Soup Ácido indol-3 Componente de pirúvico 0,0254% 203,196 12,50 Soup

INGREDIENTE %(p/p) PM Conc (µM) Uso TOTAL: 100 %

DOCUMENTOS

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[00367] Todos os documentos citados nesse pedido são incorporados por meio desse pedido por referência, como se citados na íntegra nesse documento.

[00368] Embora modalidades ilustrativas da presente invenção tenham sido descritas nesse documento, deve ser entendido que a invenção não está limitada àquelas descritas e que várias outras alterações ou modificações podem ser feitas por um habilitado na técnica sem se afastar do escopo ou espírito da invenção.

Claims

REIVINDICAÇÕES

1. Método de tratamento ou prevenção de danos à pele induzidos por UV em um indivíduo, caracterizado pelo fato de que compreende: contactar o indivíduo com uma composição compreendendo um composto tendo a estrutura da seguinte fórmula: em que: X é selecionado do grupo que consiste em NR14 e O; Y é uma ligação covalente, CR5R6, O ou NR15; R1, R2, R3, R4, R7, R8, R9, R10 e R11 são independentemente selecionados do grupo que consiste em hidrogênio, halogênio, CN, hidroxila, R16 ou OR16; R13, R14 e R15 são independentemente hidrogênio ou R16; R5 e R6 são independentemente selecionados do grupo que consiste em hidrogênio, hidroxila, OR16, R16 e cicloalquila C3-6, ou R5 e R6 combinam-se para formar um grupo oxo (=O) ou um cicloalquila C3-6; R12 é selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, – CORa e R16; cada R16 é independentemente formila, alquila C1-9, alquenila C2-9 ou alquinila C2-9; e, Ra é selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, hidroxila e OR16;

em que: se Ra for hidrogênio, Y é CR5R6, e R13 e R14 são ambos hidrogênio, pelo menos um de R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8, R9, R10 e R11 é R16; ou, R5 é selecionado do grupo que consiste em hidroxila, OR16, R16 e cicloalquila C3-6, ou R5 e R6 combinam-se para formar um grupo oxo (=O) ou um cicloalquila C3-6; ou um sal cosmeticamente ou farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um veículo, diluente ou carreador cosmeticamente ou farmaceuticamente aceitável.

2. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o composto tem a seguinte estrutura: ou um sal cosmeticamente aceitável do mesmo.

3. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que: Y é CR5R6; R5 é hidrogênio e R6 é hidrogênio, alquila C1-4, cicloalquila C3-6 ou O-(alquila C1-4); ou R5 e R6 combinam-se para formar um grupo oxo (=O).

4. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que pelo menos um de R1, R2, R3, R4, R7, R8, R9,

R10 e R11 é alquila C1-4.

5. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que cada um de R1, R2, R3, R4, R7, R8, R9, R10 e R11 é hidrogênio.

6. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que R12 é –CORa ou hidroxialquila C1-4; e Ra é hidrogênio ou alquila C1-4.

7. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que: X é NH; Y é CR5R6; cada um de R1, R3, R4, R7, R8, R9, R10, R11 e R13 é hidrogênio; R2 é hidrogênio ou alquila C1-4; R5 é hidrogênio e R6 é hidrogênio, alquila C1-4, cicloalquila C3-6 ou O-(alquila C1-4); ou R5 e R6 combinam-se para formar um grupo oxo (=O); R12 é –CORa ou hidroxialquila C1-4; e Ra é hidrogênio ou alquila C1-4.

8. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o composto é selecionado do grupo que consiste em:

ou um sal cosmeticamente ou farmaceuticamente aceitável do mesmo.

9. Método de tratamento ou prevenção do envelhecimento da pele induzido por UV em um indivíduo, caracterizado pelo fato de que compreende: contactar o indivíduo com uma composição compreendendo um composto tendo a estrutura da seguinte fórmula: em que: X é selecionado do grupo que consiste em NR14 e O; Y é uma ligação covalente, CR5R6, O ou NR15; R1, R2, R3, R4, R7, R8, R9, R10 e R11 são independentemente selecionados do grupo que consiste em hidrogênio, halogênio, CN, hidroxila, R16 ou OR16; R13, R14 e R15 são independentemente hidrogênio ou R16; R5 e R6 são independentemente selecionados do grupo que consiste em hidrogênio, hidroxila, OR16, R16 e C3-6 cicloalquila, ou R5 e R6 combinam-se para formar um grupo oxo (=O) ou um cicloalquila C3-6; R12 é selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, – CORa e R16; cada R16 é independentemente formila, alquila C1-9, alquenila C2-9 ou alquinila C2-9; e, Ra é selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, hidroxila e OR16; em que:

se Ra for hidrogênio, Y é CR5R6, e R13 e R14 são ambos hidrogênio, pelo menos um de R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8, R9, R10 e R11 é R16; ou, R5 é selecionado do grupo que consiste em hidroxila, OR16, R16 e cicloalquila C3-6, ou R5 e R6 combinam-se para formar um grupo oxo (=O) ou um cicloalquila C3-6; ou um sal cosmeticamente ou farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um veículo, diluente ou carreador cosmeticamente ou farmaceuticamente aceitável.

10. Método, de acordo com a reivindicação 9, caracterizado pelo fato de que o composto tem a seguinte estrutura: ou um sal cosmeticamente aceitável do mesmo.

11. Método, de acordo com a reivindicação 9, caracterizado pelo fato de que: Y é CR5R6; R5 é hidrogênio e R6 é hidrogênio, alquila C1-4, cicloalquila C3-6 ou O-(alquila C1-4); ou R5 e R6 combinam-se para formar um grupo oxo (=O).

12. Método, de acordo com a reivindicação 9, caracterizado pelo fato de que pelo menos um de R1, R2, R3, R4, R7, R8, R9, R10 e R11 é alquila C1-4.

13. Método, de acordo com a reivindicação 9, caracterizado pelo fato de que cada um de R1, R2, R3, R4, R7, R8, R9, R10 e R11 é hidrogênio.

14. Método, de acordo com a reivindicação 9, caracterizado pelo fato de que R12 é –CORa ou hidroxialquila C1-4; e Ra é hidrogênio ou alquila C1-4.

15. Método, de acordo com a reivindicação 9, caracterizado pelo fato de que: X é NH; Y é CR5R6; cada um de R1, R3, R4, R7, R8, R9, R10, R11 e R13 é hidrogênio; R2 é hidrogênio ou alquila C1-4; R5 é hidrogênio e R6 é hidrogênio, alquila C1-4, cicloalquila C3-6 ou O-(alquila C1-4); ou R5 e R6 combinam-se para formar um grupo oxo (=O); R12 é –CORa ou hidroxialquila C1-4; e Ra é hidrogênio ou alquila C1-4.

16. Método, de acordo com a reivindicação 9, caracterizado pelo fato de que o composto é selecionado do grupo que consiste em:

ou um sal cosmeticamente ou farmaceuticamente aceitável do mesmo.