BR112020016002A2

BR112020016002A2 - Método para amostragem de um ovo

Info

Publication number: BR112020016002A2
Application number: BR112020016002-4A
Authority: BR
Inventors: Tjitze Meter
Original assignee: Seleggt Gmbh
Priority date: 2018-02-07
Filing date: 2018-02-07
Publication date: 2020-12-15
Also published as: CA3089384A1; AU2018408302A1; CN111698903B; US20200359606A1; US11980167B2; WO2019154493A1; EP3751998A1; CN111698903A

Abstract

a presente invenção refere-se a um método para amostragem de um ovo, o método compreendendo: a) acoplar com fluido um interior do ovo a uma fonte de pressão, b) controlar a pressão no interior do ovo pela fonte de pressão, c) expelir uma quantidade de fluido, e d) coletar pelo menos uma porção da quantidade de fluido na superfície exterior do ovo.

Description

“MÉTODO PARA AMOSTRAGEM DE UM OVO” Campo da invenção

[0001] A presente invenção refere-se a um método para amostragem de um ovo, em particular à amostragem de um ovo para determinar o sexo de um embrião no ovo. Técnica antecedente

[0002] A determinação do sexo do embrião de galinha no ovo baseada na presença de um composto específico de sexo na amostra de fluido alantóico, é conhecida por si. Por exemplo, WO9814781A1 se refere a um método de determinar o sexo de uma ave em ovo e compreende detectar a presença ou ausência de um nível elevado de um hormônio relacionado a sexo no fluido alantóico do ovo da ave, e então determinar o sexo da ave no ovo a partir da presença de um nível elevado de um hormônio relacionado a sexto no mesmo. O hormônio relacionado a sexo é um estrogênio. O método é realizado em ovos de galinha entre a postura e incubação.

[0003] Os métodos conhecidos de determinar o sexo de aves in ovo são considerados demasiadamente lentos, são muito impraticáveis e/ou não confiáveis para fins de industrialização, e efetivamente causam perda em demasia. Em particular, os métodos de determinar o sexo de aves em ovo, que envolvem a entrada de uma agulha no interior de um ovo resulta em um risco de poluição e perda do embrião. Sumário da invenção

[0004] O objetivo da invenção é aperfeiçoar um método de determinar o sexo de aves em ovo em que o risco de poluição do interior de um ovo que é submetido ao método, seja reduzido.

[0005] Um objetivo adicional da invenção é melhorar um método de determinar o sexo de aves em ovo em que um problema com métodos conhecidos é pelo menos parcialmente resolvido.

[0006] Outro objetivo da invenção é fornecer um método alternativo de determinar o sexo de aves em ovo.

[0007] A invenção provê, portanto, um método para amostragem de um ovo, o método compreendendo: a) acoplar por fluido um interior do ovo a uma fonte de pressão; b) controlar a pressão no interior do ovo pela fonte de pressão; c) expelir uma quantidade de fluido, em particular, fluido alantóico, a partir do interior do ovo para o exterior do ovo como resultado da pressão no interior do ovo; e d) coletar pelo menos uma porção da quantidade de fluido na superfície exterior do ovo.

[0008] O acoplamento de um interior do ovo a uma fonte de pressão permite evitar entrada de poluição no interior do ovo. O acoplamento por fluido de um interior do ovo a uma fonte de pressão sem fazer um furo na casca do ovo evita ainda mais a entrada de poluição no interior do ovo.

[0009] A fonte de pressão é capaz de aplicar qualquer pressão adequada ao interior do ovo, como sobrepressão ou subpressão em comparação com a pressão no exterior do ovo que é normalmente a pressão atmosférica padrão.

[00010] O fluido no “acoplamento de fluido” pode ser um fluido gasoso ou um fluido líquido ou uma combinação dos mesmos. Por exemplo, acoplamento por fluido a uma célula de ar do ovo é um acoplamento gasoso entre ar no copo e ar na célula de ar. A célula de ar de um ovo funciona como um recipiente de expansão para o ovo. Portanto, a membrana da célula de ar é flexível.

[00011] O controle da pressão no interior do ovo pela fonte de pressão pode envolver um ou mais entre manter uma pressão constante em tempo, variar a pressão em tempo e variar periodicamente a pressão em tempo. O controle da pressão no interior do ovo pode envolver controlar a pressão em qualquer compartimento adequado no ovo como em particular a célula de ar, entretanto, a albumina e a cavidade alantóica são, por exemplo, também concebíveis. Um ovo é compartimentalizado e os compartimentos são definidos pela casca do ovo e membranas, como a célula de ar pela membrana de célula de ar. O objetivo de controlar a pressão no interior do ovo pela fonte de pressão é expelir uma quantidade de fluido a partir do interior do ovo para o exterior do ovo.

[00012] Será evidente que amostragem aqui significa coleta de matéria a partir do ovo para auxiliar no processo de um diagnóstico e/ou avaliação, por exemplo, do sexo de um embrião de galinha.

[00013] Verificou-se que, como resultado de aplicar uma sobrepressão no interior do ovo, uma quantidade de fluido alantóico é expelida em uma posição de amostragem a partir do interior do ovo para o exterior do ovo. Isso é possível devido à porosidade da casca do ovo. A casca do ovo adjacente à célula de ar tem uma porosidade que permite a aplicação de uma sobrepressão no interior do ovo através da célula de ar.

[00014] A expulsão da quantidade de fluido alantóico na posição de amostragem pode ser adicionalmente melhorada por aplicar sucção na posição de amostragem.

[00015] A posição de amostragem está na cavidade alantóica, também alantoide. A posição de amostragem está além da membrana de célula, como visto a partir da célula de ar.

[00016] Em uma modalidade, o método compreende ainda determinar uma posição de amostragem na superfície exterior do ovo; e a etapa d) compreende coletar a porção da quantidade de fluido na posição de amostragem. Isso facilita a coleta da porção da quantidade de fluido na superfície exterior do ovo. A determinação da posição de amostra pode envolver qualquer modo adequado de detectar o ovo, como imageamento, termo-imageamento, medição de espessuras de casca. Os dados de imagem podem, por exemplo, ser usados para evitar dano à célula de ar, um vaso sanguíneo etc. Em geral, a posição de amostragem está na casca de ovo entre a célula de ar e o centro do ovo.

[00017] Em uma modalidade, o método compreende ainda criar uma passagem de amostra em uma casca de ovo para comunicação de fluido entre um interior do ovo e um exterior do ovo; e a etapa d) compreende coletar a porção da quantidade de fluido na passagem de amostra. A passagem de amostra facilita a coleta da porção da quantidade de fluido uma vez que a expulsão da quantidade de fluido para o exterior do ovo é mais fácil bem como a posição de amostragem é mais previsível. A passagem de amostra pode ter qualquer área em seção transversal adequada. De preferência, a passagem de amostra tem uma dimensão, como um diâmetro menor que 1 mm, em particular menor que 600 m, como, por exemplo, um diâmetro de aproximadamente 100 m. Quanto menor a área em seção transversal da passagem de amostra, menos chance de entrada de poluição no interior do ovo.

[00018] Em uma modalidade do método, a criação de uma passagem de amostra em uma casca de ovo para comunicação de fluido entre um interior do ovo e um exterior do ovo compreende fornecer um número de passagens, em que o número de passagens é preferivelmente disposto em um padrão tendo um formato triangular, e em que de preferência o número de passagens é disposto em uma superfície de 4 mm2 até 100 mm2. A provisão de um número de passagens torna o método de amostragem mais redundante e mais previsível em termos de quantidade expelida de fluido. O número de passagens também pode ser disposto em um formato circular.

[00019] Em uma modalidade do método, a passagem de amostra tem um formato afilado como um formato cônico que afila em direção ao exterior do ovo. Isso facilita expelir a quantidade de fluido e evita entrada de poluição.

[00020] Em uma modalidade do método, a criação da passagem de amostra compreende uma ou mais etapas de processamento de processamento a laser, punção, corte, laminação e perfuração. O processamento a laser é vantajoso porque é um método rápido e flexível que não envolve a entrada de nenhum elemento no interior do ovo.

[00021] Em uma modalidade do método, a criação da passagem de amostra compreende desinfetar a casca do ovo próxima á passagem de amostra, em que de preferência a desinfecção compreende processamento a laser da casca de ovo próxima à passagem de amostra. A desinfecção da casca do ovo próxima á passagem de amostra, evita ainda mais a entrada de poluição no interior do ovo. A desinfecção compreendendo processamento a laser facilmente combinável com o processamento a laser da passagem de amostra. Também é concebível marcar o ovo por processamento a laser, como adicionando uma identificação do ovo ou qualquer texto ou imagem desejado à casca de ovo. De preferência, a mesma unidade laser é usada para criação da passagem de amostra, desinfecção e marcação.

[00022] Em uma modalidade do método, o acoplamento por fluido de um interior do ovo a uma fonte de pressão compreende acoplar a fonte de pressão a uma célula de ar do ovo. A fonte de pressão pode ser acoplada a qualquer compartimento no ovo, entretanto, a célula de ar é, em particular, adequada para acoplar por fluido porque a permeabilidade da casca de ovo na célula de ar é muito melhor em comparação com o restante da casca de ovo. A fonte de pressão pode ser qualquer bomba adequada de recipiente de pressão. Entretanto, é concebível usar uma fonte de calor como uma fonte de microondas para aquecer o ovo ou pelo menos uma porção do ovo. O aumento da temperatura aumenta a pressão no interior do ovo.

[00023] Em uma modalidade do método, o acoplamento por fluido de um interior do ovo a uma fonte de pressão compreende criar um percurso de fluxo através da casca do ovo para fornecer uma conexão de pressão entre a fonte de pressão e o interior do ovo. O percurso de fluxo é uma alternativa a um número de poros paralelos na casca do ovo que formam tecnicamente um percurso de fluxo. O percurso de fluido feito através da casca do ovo é, entretanto, mais previsível em termos de características de fluxo. O acoplamento por fluido inclui um acoplamento a gás, entretanto, um acoplamento líquido também é concebível.

[00024] Em uma modalidade do método, a criação de uma passagem de amostra e/ou criação de um percurso de fluxo compreende processar uma casca externa de ovo e camadas intermediárias entre a casca externa de ovo e o interior do ovo com etapas de processamento diferentes. Os exemplos de tais camadas intermediárias são: membrana externa, membrana média, membrana mais profunda. Uma casca de ovo externa e camadas intermediárias processadas com etapas de processamento diferentes permite otimizar ainda mais a permeabilidade do ovo no percurso de fluxo e/ou passagem de amostra.

[00025] Em uma modalidade do método, o controle da pressão no interior do ovo pela fonte de pressão compreende aplicar uma diferença de pressão entre o interior e o exterior do ovo.

[00026] Em uma modalidade do método, a diferença de pressão é variável ao longo do tempo e de preferência a diferença de pressão é ajustada em uma pressão neutra por um período de tempo neutro e em uma pressão ativa por um período de tempo ativo. A pressão neutra no estágio neutro assegura que não haja transporte de ar ou líquido entre o interior e o exterior do ovo. A sobrepressão durante um período de tempo ativo é um estágio de saída que permite transporte a partir do interior para o exterior do ovo. A subpressão durante um período ativo de tempo é um estágio de entrada que permite transporte a partir do exterior para o interior do ovo.

[00027] Em uma modalidade do método, o acoplamento por fluido do interior do ovo a uma fonte de pressão compreende engatar uma área de contato da casca do ovo, de preferência uma área de contato na célula de ar. A área de contato tem uma área de superfície que é adequada para cobrir diversos poros. De preferência, a área de contato se estende sobre a célula de ar inteira de um ovo. Desse modo, o acoplamento por fluido envolve substancialmente todos os poros na célula de ar. O diâmetro de um poro é 1 a 10 micrômetros. A casca do ovo pode ter facilmente 200 poros por cm quadrado e muito mais na célula de ar uma vez que a densidade de poro é muito mais alta na célula de ar.

[00028] Em uma modalidade, o método compreendendo ainda detectar pelo menos uma porção do ovo para obter dados de sensor e criar a passagem de amostra dependendo dos dados de sensor, em particular determinar uma posição da passagem de amostra dependendo dos dados de sensor, em que a detecção do ovo compreende pelo menos um ou mais de imageamento pelo menos uma porção do ovo e medição de uma posição do ovo. Isso facilitará expelir uma quantidade de fluido a partir do interior do ovo para o exterior do ovo uma vez que a passagem de amostra pode ser feita nas proximidades do fluido alvo como o fluido alantóico.

[00029] Em uma modalidade, o método compreende ainda dispor um elemento de admissão de fluido na posição de amostra; e a etapa d) compreende coletar a porção da quantidade de fluido com o elemento de admissão de fluido. O elemento de admissão de fluido facilita a coleta de pelo menos uma porção da quantidade de fluido na superfície exterior do ovo.

[00030] Em uma modalidade do método, o elemento de admissão de fluido é disposto no exterior do ovo pelo menos antes do término da incubação, como antes do início da incubação e é usado durante incubação. O elemento de admissão de fluido pode ser disposto no exterior do ovo independente de uma passagem de amostra ser feita ou não na posição de amostra. Normalmente, o elemento de admissão de fluido é disposto no exterior do ovo em ou antes do ovo ser amostrado.

[00031] Em uma modalidade do método, o elemento de admissão de fluido compreende um órgão de absorção e a admissão na porção da quantidade de fluido é baseada na absorvência entre o órgão de absorção e a porção da quantidade de fluido. O órgão de absorção pode ser qualquer lenço de papel ou papel mata-borrão adequado. O órgão de absorção facilita não somente a coleta da porção da quantidade de fluido, mas também mantém a porção na posição de amostra.

[00032] Em uma modalidade do método, o elemento de admissão de fluido compreende um tubo capilar e a admissão da porção da quantidade de fluido se baseia na ação capilar entre o tubo capilar e a porção da quantidade de fluido.

[00033] Em uma modalidade, o método compreende pressurizar o interior do ovo enquanto a passagem de amostra estiver aberta para comunicação de fluido entre o interior do ovo e o exterior do ovo. Isso evita ainda mais entrada de poluição no interior do ovo.

[00034] Em uma modalidade, o método compreende monitorar a quantidade de fluido de amostra expelido para obter dados de quantidade de fluido de amostra e comparar os dados de quantidade de fluido com um dado de quantidade mínima definido e dependendo da etapa de comparação, repetir, intensificar ou manter pelo menos a etapa c) ou fechar a passagem da amostra. Isso assegura controle com relação á quantidade de fluido de amostra. A intensificação pode envolver um aumento de pressão aplicada. Como opção, é concebível que outra passagem de amostra seja feita para acelerar a etapa c). Como opção adicional, é concebível que outra passagem de amostra seja feita para tentar novamente ou repetir a etapa c).

[00035] Em uma modalidade, o método compreende fechar a passagem de amostra para parar comunicação de fluido entre o interior do ovo e o exterior do ovo. Isso evita ainda mais a entrada de poluição no interior do ovo.

[00036] Em uma modalidade do método, o fechamento da passagem de amostra compreende colocar a passagem de amostra em contato com um elemento de fechamento e o método compreende despressurizar o interior do ovo após colocar a passagem de amostra em contato com o elemento de fechamento para aumentar um contato de fechamento entre o elemento de fechamento e a passagem de amostra. O elemento de fechamento evita ainda mais a entrada de poluição no interior do ovo. É concebível aplicar subpressão no interior do ovo para aspirar firmemente o elemento de fechamento dentro, contra ou para a passagem de amostra.

[00037] Em uma modalidade do método, o fechamento da passagem de amostra compreende manipular um ovo para forçar uma camada intermediária entre a casca externa do ovo e o interior do ovo, em direção à passagem de amostra. A camada intermediária pode suportar fechamento da passagem de amostra, desse modo evitando ainda mais a entrada de poluição no interior do ovo.

[00038] Em uma modalidade, o método compreende manter o ovo em uma posição predeterminada durante um tempo de assentamento antes de expelir a quantidade de fluido a partir do interior do ovo para o exterior do ovo. Isso torna a localização da posição de amostra mais previsível e facilita expulsão da quantidade de fluido uma vez que o fluido se acumulou.

[00039] A invenção também provê um dispositivo de amostragem de ovo configurado para executar o método de acordo com uma reivindicação anterior.

[00040] A invenção se refere adicionalmente a um dispositivo compreendendo um ou mais dos aspectos de caracterização descritos na descrição e/ou mostrados nos desenhos em anexo.

[00041] A invenção se refere ainda a um método compreendendo um ou mais dos aspectos de caracterização descritos na descrição e/ou mostrados nos desenhos em anexo.

[00042] Modificações e implementações alternativas de algumas partes ou elementos são possíveis, e estão incluídas no escopo de proteção como definido nas reivindicações apensas.

[00043] Os vários aspectos discutidos nessa patente podem ser combinados para fornecer vantagens adicionais. Descrição dos desenhos

[00044] A invenção será adicionalmente elucidada com referência aos desenhos esquemáticos mostrados em:

[00045] As figuras 1A-G em vista lateral um número de modalidades do método para amostragem de um ovo de acordo com a invenção;

[00046] As figuras 2A, 2B, 3A, 3B mostram um detalhe de um ovo e exemplos de elementos de admissão de fluido que coletam uma quantidade de fluido;

[00047] A figura 4A em vista lateral etapas de processamento para criação de uma passagem de amostra na casca do ovo;

[00048] A figura 4B mostra um detalhe de um ovo após a etapa de processamento das etapas da figura 4A;

[00049] As figuras 5A, 5B mostram modalidades de uma etapa de detecção de um ovo;

[00050] As figuras 6A-D mostram exemplos diferentes de gráficos de pressão versus tempo de pressão no interior do ovo;

[00051] As figuras 7A e 7B mostram uma modalidade de um processo de fechar a passagem de amostra;

[00052] A figura 8 mostra outra modalidade de um processo de fechar a passagem de amostra;

[00053] As figuras 9A e 9B mostram uma modalidade adicional de um processo de fechar a passagem de amostra; e

[00054] As figuras 10A e 10B mostram uma modalidade ainda adicional de um processo de fechamento da passagem de amostra 10. Descrição detalhada das modalidades

[00055] As figuras 1A-E mostram modalidades do método para amostragem de um ovo de acordo com a invenção.

[00056] A figura 1A mostra um copo 1 que é projetado para acoplar por fluido com a casca 2 de um ovo

3. O copo 1 é acoplado por fluido com uma fonte de pressão (não mostrada aqui). Como resultado, um interior 4 do ovo 3 é acoplado por fluido à fonte de pressão através do copo 1 e por causa da porosidade da casca de ovo 2. Uma casca de ovo 2 tem poros (não mostrados) para troca de gás entre o interior 4 de um ovo 3 e o exterior 6. Esses poros têm um diâmetro entre 1 e 10 microns.

[00057] Assim que o interior 4 do ovo 3 é acoplado por fluido à fonte de pressão, a pressão no interior 4 do ovo 3 pode ser controlada pela fonte de pressão. A quantidade de fluido 7 é expelida a partir do interior 4 do ovo 3 para o exterior 6 do ovo 3 como resultado de sobrepressão aplicada ao copo 1. Em outras palavras, o copo 1 é empurrado sobre o ovo 3 e uma sobrepressão é aplicada ao copo de sucção 1.

[00058] Uma diferença de pressão entre o interior 4 de um ovo 3 e o exterior 6 resulta em transporte de fluido através da casca de ovo 2. Aqui, a pressão no interior 4 excede a pressão atmosférica no exterior 6 e como resultado uma quantidade de fluido 7 é expelida do interior 4 do ovo 3 para o exterior 6 do ovo. Nesse caso, a quantidade expelida de fluido 7 é fluido alantóico.

[00059] A jusante no processo do método, uma porção da quantidade de fluido 7 é coletada na superfície exterior 2 do ovo 3, como mostrado melhor nas figuras 2, 3.

[00060] Após a amostragem do ovo, quaisquer análises desejadas podem ser executadas com a porção coletada da quantidade de fluido 7, como determinação do sexo do embrião situado no ovo 3.

[00061] O método de acordo com uma reivindicação anterior, em que o controle da pressão no interior do ovo pela fonte de pressão compreende aplicar uma diferença de pressão entre o interior e o exterior do ovo.

[00062] O método de acordo com a reivindicação #, em que o acoplamento por fluido do interior do ovo a uma fonte de pressão compreende engatar uma área de contato da casca do ovo, de preferência uma área de contato na célula de ar.

[00063] As figuras 1B-G mostram modalidades diferentes do método para amostragem de um ovo de acordo com a invenção. Em geral, somente diferenças em comparação com a figura 1A são descritas.

[00064] A figura 1B mostra o copo 1 acoplado por fluido com a casca 2 de um ovo 3. Na casca do ovo, um percurso de fluxo 9 é feito por ação de máquina na casca de ovo 2. O copo 1 é posicionado sobre o percurso de fluxo 9 para acoplar por fluido o interior 4 do ovo 3 à fonte de pressão. O percurso de fluxo 9 trabalha em paralelo com os poros que estão presentes na casca de ovo 2. O percurso de fluxo 9 é feito na célula de ar 5 do ovo 3. A célula de ar 5 é uma posição conveniente para violar a proteção que a casca de ovo 2 oferece a um embrião no interior 4 do ovo 3. Um motivo para isso é uma membrana 8 que separa a célula de ar 5 a partir do restante do interior 4 do ovo 3. A membrana 8 é flexível então, portanto, o interior 4 do ovo pode ser pressurizado através da célula de ar 5.

[00065] A figura 1C mostra o copo 1 acoplado por fluido com a casca 2 de um ovo 3. Na casca de ovo uma passagem de amostra 10 é feita por ação de máquina na casca de ovo 2. A passagem de amostra 10 facilita a comunicação de fluido entre o interior 4 do ovo e um exterior 6 do ovo

3. A passagem de amostra 10 trabalha em paralelo aos poros que estão presentes na casca de ovo 2. A passagem de amostra 10 pode ter um diâmetro menor que 1 mm, em particular menor que 600 m que é uma passagem grande comparada com poros que têm um diâmetro de 1 a 10 microns. A porção da quantidade de fluido 7 é coletada na passagem de amostra 10. A passagem de amostra 10 é provida perto da célula de ar 5, porém, entretanto, além da membrana 8 como visto a partir da célula de ar 5. A membrana 8 separa a célula de ar 5 e a passagem de amostra 10. A passagem de amostra 10 é, portanto, posicionada na localidade onde o fluido alantóico se acumula.

[00066] A passagem de amostra 10 pode ter um formato cilíndrico; entretanto, um formato cônico que se afila em direção ao exterior 6 do ovo 3 é concebível também.

[00067] Onde uma passagem de amostra é mostrada, será concebível que um número de passagens pode ser fornecido. Esse número de passagens pode ser disposto em um padrão. No caso de três ou mais passagens, o padrão pode ter um formato triangular ou formato circular. O número de passagens é disposto em uma superfície de 4 mm2 até 100 mm2 para facilitar a coleta de uma porção da quantidade de fluido 7.

[00068] A figura 1D mostra o copo 1 acoplado por fluido com a casca 2 de um ovo 3. Na casca de ovo 2 uma passagem de amostra 10 é feita bem como o percurso de fluxo

9.

[00069] A figura 1E mostra o copo 1 acoplado por fluido com a casca 2 de um ovo 3. O copo 1 é posicionado próximo à célula de ar 5, porém entretanto além da membrana 8. O copo 1 é, portanto, posicionado na localidade onde o fluido alantóico se acumula. Nesse caso, a expulsão da quantidade de fluido 7 a partir do interior 4 do ovo 3 para o exterior 6 do ovo 3 como resultado de subpressão aplicada ao copo 1. Em outras palavras, o copo 1 opera como um copo de sucção 1. A quantidade de fluido 7 é expelida no interior do copo 1. Embora não mostrado, será evidente que nesse caso a passagem de amostra 10 pode ser feita na casca de ovo 2 também, se desejado.

[00070] A figura 1F é similar á figura 1A ou 1E. Nesse caso, a expulsão da quantidade de fluido 7 a partir do interior 4 do ovo 3 para o exterior 6 do ovo 3 é causada por um aumento em temperatura do ovo 3 que é mostrado com um temper. A temperatura do interior 4 do ovo 3 pode ser aumentada por qualquer meio adequado como baseado em ação de microondas. Além disso, o copo 1 pode ser aplicado ao ovo 3 também para fechar os poros na casca de ovo na célula de ar e/ou para facilitar a expulsão da quantidade de fluido 7 a partir do interior 4 do ovo 3 para o exterior 6 do ovo 3.

[00071] A figura 1G é similar à figura 1C. o ovo 3 é girado ao longo de seu eixo geométrico longitudinal

12. Nesse caso, o ovo 3 é girado em aproximadamente 180º, entretanto, qualquer posição angular servirá desde que a gravidade ajude a expelir fluido alantóico através da passagem de amostra 10. Como resultado a passagem de amostra 10 está voltada para baixo. Isso facilita a comunicação de fluido entre o interior 4 do ovo 3 e um exterior 6 do ovo 3. O motivo para isso é que o conteúdo do ovo ajuda a expelir fluido alantóico através da passagem de amostra 10 devido á gravidade. Desse modo, primeiramente o fluido alantóico se acumula durante um tempo de assentamento em que o ovo é mantido em uma posição predeterminada mostrada na figura 1A. Então, o ovo é girado como mostrado e a quantidade de fluido 7 é expelida do exterior 4 do ovo 3 para o exterior 6 do ovo 3.

[00072] As figuras 2A, 2B, 3A, 3B mostram um detalhe de um ovo 3 e exemplos de elementos de admissão de fluido 13, 14 que coletam uma porção 15 da quantidade de fluido 7.

[00073] Na figura 2A e 2B um elemento de admissão de fluido 13 tem a forma de um lenço de papel que funciona como um órgão de absorção. O elemento de admissão de fluido 13 é fixado na casca de ovo 2 do ovo 3. O elemento de admissão de fluido 13 pode ser disposto no exterior do ovo 3 pelo menos antes do término da incubação e ser usado durante incubação. O elemento de admissão de fluido 13 pode ser disposto no exterior do ovo 3 durante amostragem do ovo 3. O elemento de admissão de fluido 13 pode ser disposto no exterior do ovo 3 no início da incubação e ser usado durante incubação. Como opção, o elemento de admissão de fluido 13 pode ser removido antes de incubação. O elemento de admissão de fluido 13 é fixado no ovo 3 além da membrana 8 como visto a partir da célula de ar 5. Nesse caso, o elemento de admissão de fluido 13 é fixado no ovo 3 perto da célula de ar 5 além da membrana 8. A posição mostrada do elemento de admissão de fluido 13 perto da célula de ar 5 também é mencionada como a posição de amostra. O elemento de admissão de fluido 13 é, portanto, posicionado na localidade onde o fluido alantóico 11 se acumula no ovo 3. Uma porção ou toda a quantidade de fluido 7 é coletada com o elemento de admissão de fluido 13 por absorção. A figura 2B difere da figura 2A em que uma passagem de amostra 10 é provida na casca de ovo 2. O elemento de admissão de fluido 13 cobre a passagem de amostra 10. Nesse caso, o elemento de admissão de fluido 13 cobre a passagem de amostra inteira 10.

[00074] Na figura 3A e 3B um elemento de admissão de fluido 14 tem a forma de um tubo capilar. O elemento de admissão de fluido 14 é fixado na casca de ovo 2 do ovo 3. O elemento de admissão de fluido 14 se aproxima do ovo 3 perto da célula de ar 5, porém, entretanto, além da membrana 8. A posição mostrada do elemento de admissão de fluido 14 perto da célula de ar 5 também é mencionada como a posição de amostra. O elemento de admissão de fluido

14 é, portanto, posicionado na localidade onde o fluido alantóico 11 se acumula no ovo 3. A figura 3B difere da figura 3A em que uma passagem de amostra 10 é provida na casca de ovo 2. Uma porção 15 da quantidade de fluido 7 é coletada com o elemento de admissão de fluido 14 por ação capilar.

[00075] A figura 4A mostra em vista lateral etapas de processamento para criar uma passagem de amostra 10 na casca de ovo 2. A criação da passagem de amostra 10 compreende processamento a laser em uma unidade de processamento a laser 16, e/ou processamento em uma unidade de usinagem 17 como uma unidade de punção, corte, laminação ou perfuração. O ovo 3 é transportado em uma direção de fluxo de processo 18 ao longo da unidade de processamento a laser 16 e/ou processamento em uma unidade de usinagem 17. Será evidente que as etapas de processamento também podem se aplicar à criação do percurso de fluxo 9. Como opção, a criação da passagem de amostra 10 pode compreender desinfetar a casca de ovo próxima à passagem de amostra 10. A desinfecção pode compreender processamento a laser da casca de ovo 2 próxima à passagem de amostra 10 usando a unidade de processamento a laser 16.

[00076] Ao criar uma passagem de amostra 10 e/ou criar um percurso de fluxo 9, é possível que uma casca externa de ovo 2 e camadas intermediárias necessitem ser cruzadas. É concebível que a casca externa de ovo 2 e camadas intermediárias, como, por exemplo e se necessário a membrana 8, sejam processadas com etapas de processamento diferentes.

[00077] A figura 4B mostra um detalhe de um ovo

3 após as etapas de processamento para criar uma passagem de amostra 10 na casca de ovo 2. Duas configurações possíveis de passagens de amostra afiladas 29, 30 são mostradas em vista lateral em seção transversal. A passagem de amostra 29 se afila para fora em direção ao interior 4 do ovo 3. Isso minimiza a área da passagem de amostra 29 na superfície externa da casca de ovo 2 que evita entrada de poluição. Além disso, a passagem de amostra 29 não é facilmente obstruída pela membrana de casca (não mostrada) que pode se deslocar um pouco com relação à casca 2. A configuração da passagem 29 é em particular permitida pela unidade de processamento a laser 16.

[00078] A passagem de amostra 30 se afila para dentro em direção ao interior 4 da casca 3. Isso minimiza a área da passagem de amostra 29 na superfície interna da casca de ovo 2 que reduz o risco de danificar o conteúdo do ovo 3 como vasos sanguíneos importantes.

[00079] As figuras 5A, 5B mostram modalidades de uma etapa de detecção do ovo 3. Uma unidade de sensor 19 é provida para detectar o ovo 3. A unidade de sensor 19 é configurada para pesquisar um ovo e/ou para monitorar a quantidade de fluido de amostra expelido. A unidade de sensor 19 pode compreender qualquer meio de detecção adequado como um dispositivo de captura de imagem como uma câmera. A unidade de sensor 19 é acoplada de modo operacional a uma fonte de pressão 20, nesse caso uma fonte controlável de pressão 20.

[00080] Em um modo de pesquisa de ovo, as seguintes etapas são executadas; determinar uma posição de amostragem na superfície exterior 2 do ovo 3; e coletar a porção da quantidade de fluido na posição de amostragem. A unidade de sensor 19 mapeia o ovo 3 em relação a itens como fluido alantóico, o embrião, vasos sanguíneos etc. A posição de amostragem se baseia, então, em dados de sensor de ovo e está normalmente próxima ao fluido alantóico acumulado no ovo 3.

[00081] Em um modo de criação de passagem de amostra, as seguintes etapas são executadas; detectar pelo menos uma porção do ovo 3 para obter dados de sensor e criar a passagem de amostra 10 dependendo dos dados de sensor, em particular determinar uma posição da passagem de amostra dependendo dos dados de sensor. Aqui, a detecção do ovo 3 pode compreender imagear pelo menos uma porção do ovo 3 e medir uma posição do ovo 3.

[00082] Em um modo de monitoramento de amostra, as seguintes etapas são executadas; monitorar a quantidade de fluido de amostra expelido 7 para obter dados de quantidade de fluido de amostra e comparar os dados de quantidade de fluido com um dado de quantidade mínima definido e dependendo da etapa de comparação, repetir ou manter expulsão do fluido alantóico a partir do interior 4 do ovo 3 para o exterior 6 do ovo 3 como resultado da pressão no interior 4 do ovo 4. Se quantidade suficiente de fluido for expelida, a passagem de amostra 10 pode ser fechada ou parar a comunicação de fluido através da passagem de amostra 10. No modo de monitoramento de amostra, a unidade de sensor 19 pode ser orientada em direção ao tubo capilar 14 para monitorar diretamente a porção 15 da quantidade de fluido 7 no tubo capilar 14.

[00083] As figuras 6A-D mostram exemplos diferentes de gráficos de pressão versus tempo de pressão no interior do ovo 3. Em todos os gráficos, a pressão atmosférica é mencionada com referência ao número 21. Todas as figuras 6A-D mostram que a diferença de pressão é variável ao longo do tempo.

[00084] A figura 6A mostra dois períodos subsequentes 20 de sobrepressão no interior 4 do ovo 3.

[00085] A figura 6B mostra dois períodos subsequentes 22, 23 de sobrepressão no interior 4 do ovo 3. A pressão é aumentada no segundo período de tempo 23 em comparação com o primeiro período de tempo 22. A figura 6B é um exemplo de pressurização do interior 4 do ovo 3 em uma sobrepressão enquanto a passagem de amostra 10 é aberta para comunicação de fluido entre o interior 4 do ovo 3 e o exterior 6 do ovo 3. Após a passagem de amostra 10 ser fechada, a pressão pode ser liberada para a pressão atmosférica.

[00087] A figura 6C mostra um período ativo consecutivo 24 onde a sobrepressão é aplicada, um período neutro 25 onde uma pressão neutra é aplicada e outro período ativo 26 onde subpressão é aplicada ao interior do ovo. A pressão neutra é normalmente pressão atmosférica que prevalece no exterior 6 do ovo 3.

[00088] A figura 6D mostra um período 27 de subpressão no copo 1 que pode ser aplicada à passagem de amostra 10.

[00089] As figuras 7A e 7B mostram uma modalidade de um processo de fechar a passagem de amostra

10. A passagem de amostra 10 é fechada após expelir a quantidade de fluido 7 a partir do interior 4 do ovo 3 para o exterior 6 do ovo 3 como resultado de diferença de pressão. O fechamento da passagem de amostra 10 para a comunicação de fluido entre o interior 4 do ovo 3 e o exterior do ovo 3. A passagem de amostra 10 é fechada para evitar entrada de poluição através da passagem de amostra

10. O fechamento da passagem de amostra 10 compreende colocar a passagem de amostra 10 em contato com um elemento de fechamento 28. O elemento de fechamento 29 é aqui uma micro conta 28. Um número de micro contas 28 é disposto na quantidade de fluido 7. Quando a quantidade de fluido 7 é retirada de volta para o interior 4 do ovo 3, as contas 10 são tiradas com a quantidade de fluido 7 em direção à passagem de amostra 10. Pelo menos uma micro conta 28 fechará a passagem de amostra 10. A micro conta 10 é configurada para fechar uma passagem de amostra 10. A quantidade de fluido 7 pode ser retirada de volta para o interior 4 do ovo 3 por aplicar uma diferença de pressão adequada. Por exemplo, uma subpressão pode ser aplicada ao interior 4 do ovo 3 ou uma sobrepressão pode ser aplicada na passagem de amostra 10. A diferença de pressão entre o interior 4 e o exterior 6 do ovo 3 aumenta o contato de fechamento entre a micro conta 28 e a passagem de amostra

10.

[00090] A figura 8 mostra outra modalidade de um processo de fechar a passagem de amostra 10. O fechamento da passagem de amostra 10 compreende colocar a passagem de amostra 10 em contato com um elemento de fechamento 28. O elemento de fechamento 31 é aqui um elemento adesivo, nesse caso um adesivo 31. O adesivo 31 cobre a passagem de amostra 10 e está em contato de vedação com a casca de ovo 2 em torno da passagem de amostra. Como opção, os elementos de admissão de fluido 13 são integrados com o adesivo 31. O adesivo 31 pode ser transparente, ou pelo menos ter uma porção transparente para permitir linha de visão para o elemento de admissão de fluido 13.

[00091] As figuras 9A e 9B mostram uma modalidade adicional de um processo de fechamento da passagem de amostra 10. O elemento de fechamento 34 é aqui um elemento de válvula 34. O elemento de válvula 34 é móvel entre uma posição aberta da passagem de amostra mostrada na figura 9A e uma posição de fechamento da passagem de amostra mostrada na figura 9B. o elemento de válvula 24 é preferivelmente um tipo de elemento de válvula normalmente fechado. O elemento de válvula 34 faz parte de um dispositivo de válvula 32. O dispositivo de válvula 32 tem um suporte de válvula 33. O suporte de válvula 33 acopla com a casca de ovo 2. O suporte de válvula 33 mantém o elemento de válvula 34 na passagem de amostra 10. O elemento de válvula 34 é acoplado de modo móvel com o suporte de válvula 33. Aqui, o elemento de válvula 34 é acoplado de modo móvel com o suporte de válvula 33 através de uma construção de dobradiça viva. O elemento de válvula 34 é como a micro conta 28, operada por diferença de pressão. A diferença de pressão entre o interior 4 e o exterior 6 do ovo 3 aumenta o contato de fechamento entre o elemento de válvula 34 e a passagem de amostra 10. Como opção, os elementos de admissão de fluido 13 são integrados ao dispositivo de válvula 32.

[00092] As figuras 10A e 10B mostram uma modalidade ainda adicional de um processo de fechar a passagem de amostra 10. Aqui, o fechamento da passagem de amostra 10 compreende manipular um ovo para forçar uma camada intermediária 35 entre a casca de ovo externa 2 e o interior do ovo, em direção à passagem de amostra 10. A manipulação do ovo 3 pode incluir mover, agitar, rodar, etc., para fazer com que o conteúdo do ovo se mova com relação à casca de ovo 2. A camada intermediaria 35 é membrana da casca de ovo que fecha a passagem de amostra 10 como mostrado na figura 10B.

Claims

REIVINDICAÇÕES

1. Método para amostragem de um ovo, o método compreendendo: a) Acoplar com fluido um interior do ovo a uma fonte de pressão, b) Controlar a pressão no interior do ovo pela fonte de pressão, c) Expelir uma quantidade de fluido, em particular fluido alantóico, a partir do interior do ovo para o exterior do ovo como resultado da pressão no interior do ovo e d) Coletar pelo menos uma porção da quantidade de fluido na superfície exterior do ovo.

2. Método, de acordo com a reivindicação 1, em que o método compreende ainda determinar uma posição de amostragem na superfície exterior do ovo; e a etapa d) compreende coletar a porção da quantidade de fluido na posição de amostragem.

3. Método, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, em que o método compreende ainda fazer uma passagem de amostra em uma casca de ovo para comunicação de fluido entre um interior do ovo e um exterior do ovo; e a etapa d) compreende coletar a porção da quantidade de fluido na passagem de amostra.

4. Método, de acordo com a reivindicação 3, em que a passagem de amostra tem uma dimensão menor que 1 mm, em particular menor que 600 m.

5. Método, de acordo com a reivindicação 3 ou 4, em que a criação de uma passagem de amostra em uma casca de ovo para comunicação de fluído entre um interior do ovo e um exterior do ovo compreende fornecer diversas passagens, em que o número de passagens é disposto de preferência em um padrão tendo um formato triangular ou circular, e em que de preferência o número de passagens é disposto em uma superfície de 4 mm2 até 100 mm2.

6. Método, de acordo com qualquer das reivindicações anteriores 3-5, em que a passagem de amostra tem um formato afilado, como um formato cônico, que se afila em direção ao exterior do ovo.

7. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores 3-6, em que a criação da passagem de amostra compreende uma ou mais etapas de processamento de processamento laser, punção, corte, laminação e perfuração.

8. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores 3-7, em que a criação da passagem de amostra compreende desinfetar a casca do ovo próximo à passagem de amostra, em que de preferência a desinfecção compreende processamento a laser da casca de ovo próxima à passagem de amostra.

9. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores 1-8, compreendendo a marcação da casca de ovo por processamento a laser.

10. Método, de acordo com uma reivindicação anterior, em que o acoplamento por fluido de um interior do ovo a uma fonte de pressão compreende acoplar a fonte de pressão a uma célula de ar do ovo.

11. Método, de acordo com uma reivindicação anterior, em que o acoplamento por fluido de um interior do ovo a uma fonte de pressão compreende criar um percurso de fluxo através da casca de ovo para fornecer uma conexão de pressão entre a fonte de pressão e o interior do ovo.

12. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores 3-11, em que a criação de uma passagem de amostra e/ou a criação de um percurso de fluxo compreende processar uma casca externa de ovo e camadas intermediárias, entre a casca externa de ovo e um interior do ovo com etapas de processamento diferentes.

13. Método, de acordo com uma reivindicação anterior, em que o controle da pressão no interior do ovo pela fonte de pressão compreende aplicar uma diferença de pressão entre o interior e o exterior do ovo.

14. Método, de acordo com uma reivindicação anterior, em que a diferença de pressão é variável ao longo do tempo e preferivelmente a diferença de pressão é definida em uma pressão neutra por um período de tempo neutro e em uma pressão ativa por um período de tempo ativo.

15. Método de acordo com a reivindicação, em que o acoplamento por fluido do interior do ovo a uma fonte de pressão compreende engatar uma área de contato da casca de ovo, de preferência uma área de contato na célula de ar.

16. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores 3-15, o método compreendendo ainda detectar pelo menos uma porção do ovo para obter dados de sensor e criar a passagem de amostra dependendo dos dados de sensor, em particular determinar uma posição da passagem de amostra dependendo dos dados de sensor, em que a detecção do ovo compreende pelo menos uma ou mais de imageamento de pelo menos uma porção do ovo e medição de uma posição do ovo.

17. Método, de acordo com uma reivindicação anterior, e compreendendo ainda dispor um elemento de admissão de fluido na posição de amostra; e a etapa d) compreende coletar a porção da quantidade de fluido com o elemento de admissão de fluido.

18. Método, de acordo com a reivindicação 17, em que o elemento de admissão de fluido é disposto no exterior do ovo pelo menos antes do término da incubação e é usado durante incubação.

19. Método, de acordo com a reivindicação 17 ou 18, em que o elemento de admissão de fluído compreende um órgão de absorção e a admissão da porção da quantidade de fluido se baseia em ação capilar entre o órgão de absorção e a porção da quantidade de fluido.

20. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores 3-19, compreendendo pressurizar o interior do ovo durante o tempo em que a passagem de amostra está aberta para comunicação de fluido entre o interior do ovo e o exterior do ovo.

21. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, compreendendo monitorar a quantidade de fluido de amostra expelido para obter dados de quantidade de fluido de amostra e comparar os dados de quantidade de fluido com um dado de quantidade mínima definida e dependendo da etapa de comparação, repetir, intensificar ou manter pelo menos a etapa c) ou fechar a passagem de amostra.

22. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores 3-21, compreendendo fechar a passagem de amostra para parar a comunicação de fluido entre o interior do ovo e o exterior do ovo.

23. Método, de acordo com a reivindicação 22, em que o fechamento da passagem de amostra compreende colocar a passagem de amostra em contato com um elemento de fechamento e o método compreende despressurizar o interior do ovo após colocar a passagem de amostra em contato com o elemento de fechamento para aumentar um contato de fechamento entre o elemento de fechamento e a passagem de amostra.

24. Método, de acordo com uma reivindicação anterior 22 ou 23, em que o fechamento da passagem de amostra compreende manipular um ovo para forçar uma camada intermediária entre a casca externa do ovo e o interior do ovo em direção à passagem de amostra.

25. Método, de acordo com uma reivindicação anterior, compreendendo manter o ovo em uma posição predeterminada durante um tempo de assentamento antes de expelir a quantidade de fluido a partir do interior do ovo para o exterior do ovo.

26. Dispositivo de amostragem de ovo configurado para executar o método de acordo com uma reivindicação anterior.