BR112020007538A2 - forma sólida, processo para preparar a forma sólida, composição farmacêutica, processo para preparar a composição farmacêutica, método para tratar câncer em um paciente e método para tratar traumatismo craniano em um paciente - Google Patents

Abstract

A presente divulgação refere-se a formas sólidas de 3-(5-flúor-benzofuran-3-il)-4-(5-metil-5H-[1,3]dioxol[4,5-f] indol-7-il) pirrol-2,5-diona, a processos para prepara-las, a composições farmacêuticas das mesmas e a usos das mesmas no tratamento de doença.

Description

“FORMA SÓLIDA, PROCESSO PARA PREPARAR A FORMA SÓLIDA, COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA, PROCESSO PARA PREPARAR A COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA, MÉTODO PARA TRATAR CÂNCER EM UM PACIENTE E MÉTODO PARA TRATAR TRAUMATISMO CRANIANO EM UM PACIENTE” Campo da divulgação

[0001] A presente divulgação refere-se a formas sólidas de 3- (S-flúor-benzofuran-3-il)-4-(5-metil-5H-[1,3]dioxol[4,5-f] indol-7-il) pirrol-2,5-diona, a processos para prepara-las, a composições farmacêuticas das mesmas e a usos das mesmas no tratamento de doença. Histórico da divulgação

[0002] O composto 3-(5-flúor-benzofuran-3-il)-4-(5-metil- 5H-[1,3]dioxol [4,5-f] indol-7-il)pirrol-2,5-diona (“9-ING-41”) tem a seguinte estrutura química: o. ú o o. F

OS O N o bs

[0003] O composto 9-ING-41 foi relatado como sendo útil para o tratamento de cânceres incluindo cânceres de cérebro, pulmão, mama, ovário, bexiga, neuroblastoma, rim e pâncreas, bem como para o tratamento de traumatismo craniano.

[0004] A estrutura, propriedades e/ou atividade biológica de 9-ING-41 estão mostradas na patente U.S. nº 8.207.216; Gaisina et al., “Fron a Natural Product Lead to the Identification of Potent and Selective Benzofuran-3-yl- (indol-3-yl)maleimides as Glycogen Synthase Kinase 36 Inhibitors That Suppress Proliferation and Survival of

Pancreatic Cancer Cells”, J. Med. Chem. 2009, 52, 1853-1863; e Hilliard, et al., “Glycogen synthase kinase 3B inhibitors induce apoptosis in ovarian cancer cells and inhibit in-vivo tumor growth", Anti-Cancer Drugs 2011, 22:978-985.

[0005] Há necessidade de novas formas sólidas (incluindo polimorfos e solvatos) de 9-ING-41. Sumário da divulgação

[0006] A presente divulgação refere-se a formas sólidas de 9-ING-41, a processos para preparar formas sólidas de 9-ING- 41, a composições farmacêuticas compreendendo formas sólidas de 9-ING-41 e a métodos de tratamento compreendendo administrar formas sólidas de 9-ING-41.

[0007] Em alguns aspectos, a presente divulgação refere-se a uma forma sólida que é a Forma II cristalina de 3-(5-flúor- benzofuran-3-il)-4-(5-metil-5H-[1,3] dioxol[4,5-f]indol-7-il) pirrol-2,5-diona (“9-ING-41”).

[0008] A presente divulgação provê também processos para preparar formas sólidas de 9-ING-41.

[0009] A presente divulgação provê também composições farmacêuticas compreendendo as formas sólidas de 9-ING-41.

[0010] A presente divulgação provê também métodos para tratar doença compreendendo administrar a um paciente necessitando da mesma uma quantidade terapeuticamente eficaz de uma forma sólida divulgada de 9-ING-41. Breve descrição das figuras

[0011] A Figura 1 mostra um difratograma de pó de raios-X (XRPD) da Forma II de 9-ING-41.

[0012] A Figura 2 mostra um difratograma de pó de raios-X (XRPD) da Forma II de 9-ING-41.

[0013] A Figura 3 mostra um perfil de calorimetria diferencial de varredura (DSC) da Forma II de 9-ING-41.

[0014] A Figura 4 mostra um perfil de análise termogravimétrica (TGA) da Forma II de 9-ING-41. Descrição detalhada da invenção

[0015] A presente divulgação refere-se a formas sólidas de 9-ING-41, a processos para a preparação das mesmas e a composições farmacêuticas compreendendo as formas em estado sólido. A divulgação refere-se também à conversão das formas em estado sólido descritas de 9-ING-41 para outras formas em estado sólido de 9-ING-41, sais de 9-ING-41 e suas formas em estado sólido.

[0016] O nome “9-ING-41” é um outro nome para 3-(5-flúor- benzofuran-3-il)-4-(5-metil-5H-[1,3] dioxol [4,5-f] indol-7- il)pirrol-2,5-diona, e os dois nomes são usados aqui de modo a permitir troca e/ou substituição.

[0017] As formas em estado sólido de 9-ING-41 de acordo com a presente divulgação podem ter propriedades vantajosas selecionadas de pelo menos uma de: pureza polimórfica ou química, fluidez, solubilidade, taxa de dissolução, biodisponibilidade, morfologia ou hábito de cristal, estabilidade - tal como estabilidade química bem como estabilidade térmica e mecânica com respeito à conversão polimórfica, estabilidade à desidratação e/ou estabilidade de armazenamento, um grau menor de higroscopicidade, baixo teor de solventes residuais e características vantajosas de processamento e manuseio tal como compressibilidade ou densidade aparente.

[0018] Uma forma cristalina pode ser aqui referida como sendo caracterizada por dados gráficos “como mostrado em” ou “como caracterizado por” uma Figura. Tais dados incluem, por exemplo, difratogramas de raios-X de pó (XRPD), termogramas de calorimetria diferencial de varredura (DSC), perfis de análise termogravimétrica (TGA) e perfis de sorção diferencial de vapor (DVS). Como é bem conhecido na técnica, os dados gráficos provêm potencialmente informações técnicas adicionais para definir ainda a respectiva forma em estado sólido que não pode necessariamente ser descrita por referência a valores em uméricos ou posições de pico sozinhos. Assim, o termo “tal como substancialmente mostrado em” quando se refere aqui a um dado gráfico em uma Figura significa um padrão que não é necessariamente idêntico àqueles aqui descritos, mas que cai dentro dos limites de erro experimental e desvios, quando considerados por um especialista na técnica. O especialista na técnica seria capaz de comparar prontamente os dados gráficos nas Figuras com os dados gráficos gerados para uma forma cristalina desconhecida e confirmar ser os dois conjuntos de dados gráficos estão caracterizando a mesma forma cristalina ou duas formas cristalinas diferentes.

[0019] Uma forma cristalina sólida pode ser aqui referida como “polimorficamente pura” ou como “substancialmente livre de quaisquer outras formas”. Quando aqui usada neste contexto, a expressão “substancialmente livre de quaisquer outras formas” significará que a forma sólida contém cerca de 20% ou menos, cerca de 10% ou menos, cerca de 5% ou menos, cerca de 2% ou menos, cerca de 1% ou menos ou 0% de quaisquer outras formas do composto alvo medido, por exemplo, por XRPD. Assim, uma forma sólida de 9-ING41 aqui descrita como substancialmente livre de quaisquer outras formas sólidas seria entendida como contendo mais que cerca de 80%

(peso/peso), mais que cerca de 90% (peso/peso), mais que cerca de 95% (peso/peso), mais que cerca de 98% (peso/peso), mais que cerca de 99% (peso/peso) ou cerca de 100% (peso/peso) da forma sólida alvo de 9-ING-41. Portanto, em algumas incorporações da divulgação, as formas sólidas descritas de 9-ING-41 podem conter de cerca de 1% a cerca de 20% (peso/peso), de cerca de 5% a cerca de 20% (peso/peso) ou de cerca de 5% a cerca de 10% (peso/peso) de uma ou mais outras formas sólidas de 9-ING-41.

[0020] Quando usados aqui, a menos que indicado de outra forma, os picos de XRPD aqui relatados são medidos usando radiação CuK,, À = 1,5419 À.

[0021] O modificador “cerca de” deve ser considerado como divulgando a faixa definida pelos valores absolutos dos dois pontos extremos. Por exemplo, a expressão “de cerca de 2 a cerca de 4” divulga também a faixa “de 2 a 4”. Quando usado para modificar um único número, o termo “cerca de” refere-se a mais ou menos 10% do número indicado e inclui o número indicado. Por exemplo, “cerca de 10%” indica uma faixa de 9% a 11%, e “cerca de 1” significa de 0,9 a 1,1.

[0022] Quando usado aqui e salvo se indicado diferentemente, o termo “solvato” refere-se a uma forma cristalina que incorpora um solvente na estrutura cristalina. Quando o solvente é água, o solvente é frequentemente referido como um “hidrato”. O solvente em um solvato pode estar presente em uma quantidade estequiométrica ou em uma quantidade não estequiométrica.

[0023] Em alguns aspectos, a presente divulgação refere-se a formas sólidas de 9-ING-41.

[0024] Em alguns aspectos da presente divulgação, a forma sólida de 9-ING41 é a Forma II cristalina de 9-ING41. Em outros aspectos, a forma sólida é a Forma II cristalina de 9- ING-41 substancialmente livre de quaisquer outras formas sólidas de 9-ING-41. A Forma II cristalina de 9-ING41 exibe um XRPD substancialmente como mostrado na Figura 1.

[0025] O XRPD da Forma II cristalina de 9-ING-41 mostrado na Figura 1 compreende ângulos de reflexão (2-teta graustoO,2 2-teta graus) tal como mostrado na Tabela 1: Tabela 1. Dados de XRPD para Forma II Ângulo (2-teta graust0,2 2-teta graus) 7,840 10,208 12,882 14,028 14,327 15,310 15,839 16,117 18,078 18,902 19,268 19,533 19,810 20,382 20,653 22,084 22,740 23,345 24,666 25,118 25,838 26,335 26,976 28,027 28,479 29,345 31,188 31,925

[0026] Em algumas incorporações da presente divulgação, a Forma II cristalina de 9-ING-41 caracteriza-se por um padrão de XRPD compreendendo um pico em um dos ângulos listados na Tabela 1. Em outros aspectos, a Forma II cristalina de 9-ING- 41 caracteriza-se por um padrão de XRPD compreendendo mais que um pico em um dos ângulos listados na Tabela 1 acima.

Em outros aspectos, a Forma II cristalina de 9-ING-41 caracteriza-se por um padrão de XRPD compreendendo dois picos selecionados dos ângulos listados na Tabela l1. Em outros aspectos, a Forma II cristalina de 9-ING-41 caracteriza-se por um padrão de XRPD compreendendo três picos selecionados dos ângulos listados na Tabela 1. Em outros aspectos, a Forma II cristalina de 9-ING 41 caracteriza-se por um padrão de XRPD compreendendo quatro picos selecionados dos ângulos listados na Tabela 1. Em outros aspectos, a Forma II cristalina de 9-ING-41 caracteriza-se por um padrão de XRPD compreendendo cinco picos selecionados dos ângulos listados na Tabela 1. Em outros aspectos, a Forma II cristalina de 9- ING-41 caracteriza-se por um padrão de XRPD compreendendo seis picos selecionados dos ângulos listados na Tabela 1. Em outros aspectos, a Forma II cristalina de 9-ING-41 caracteriza-se por um padrão de XRPD compreendendo sete picos selecionados dos ângulos listados na Tabela l.

Em outros aspectos, a Forma II cristalina de 9-ING41 caracteriza-se por um padrão de XRPD compreendendo oito picos selecionados dos ângulos listados na Tabela 1. Em outros aspectos, a Forma II cristalina de 9-ING-41 caracteriza-se por um padrão de XRPD compreendendo nove picos selecionados dos ângulos listados na Tabela 1. Em outros aspectos, a Forma II cristalina de 9-ING41 caracteriza-se por um padrão de XRPD compreendendo dez picos selecionados dos ângulos listados na Tabela 1. Em outros aspectos, a Forma II cristalina de 9-ING-

41 caracteriza-se por um padrão de XRPD compreendendo mais que dez picos selecionados dos ângulos listados na Tabela 1.

[0027] Em algumas incorporações, a Forma II cristalina de 9-ING-41 caracteriza-se por um padrão de XRPD compreendendo um pico em 7,8 graustO,2 grau 2-teta. Em outras incorporações, a Forma II cristalina de 9-ING-41 caracteriza- se por um padrão de XRPD compreendendo picos em 7,8, 12,9, 15,8 e 18,9 graust0,2 grau 2-teta. Em outras incorporações, a Forma II cristalina de 9-ING-41 caracteriza-se por um padrão de XRPD compreendendo picos em 12,9, 18,1, 28,0 e 28,5 graustO0,2 grau 2-teta.

[0028] Em algumas incorporações da presente divulgação, a Forma II cristalina de 9-ING-41 caracteriza-se por um padrão de XRPD compreendendo picos em três ou mais de 7,8, 12,9, 15,8, 18,1, 18,9, 22,1, 22,7, 28,0 e 28,5 graust0,2 grau 2- teta. Em algumas incorporações da presente divulgação, a Forma II cristalina de 9-ING-41 caracteriza-se por um padrão de XRPD compreendendo picos em quatro ou mais de 7,8, 12,9, 15,8, 18,1, 18,9, 22,1, 22,7, 28,0 e 28,5 graust0,2 grau 2- teta. Em algumas incorporações da presente divulgação, a Forma II cristalina de 9-ING-41 caracteriza-se por um padrão de XRPD compreendendo picos em cinco ou mais de 7,8, 12,9, 15,8, 18,1, 18,9, 22,1, 22,7, 28,0 e 28,5 graust0,2 grau 2- teta. Em algumas incorporações da presente divulgação, a Forma II cristalina de 9-ING-41 caracteriza-se por um padrão de XRPD compreendendo picos em seis ou mais de 7,8, 12,9, 15,8, 18,1, 18,9, 22,1, 22,7, 28,0 e 28,5 graust0,2 grau 2- teta. Em algumas incorporações da presente divulgação, a Forma II cristalina de 9-ING-41 caracteriza-se por um padrão de XRPD compreendendo picos em sete ou mais de 7,8, 12,9,

15,8, 18,1, 18,9, 22,1, 22,7, 28,0 e 28,5 graust0,2 grau 2- teta.

[0029] Em algumas incorporações, a Forma II cristalina de 9-ING-41 exibe um padrão de XRPD substancialmente como mostrado na Figura 2.

[0030] A Forma II cristalina de 9-ING-41 pode ser caracterizada por um termograma de DSC substancialmente como mostrado na Figura 3. Como mostra a Figura 3, a Forma II cristalina de 9-ING41 produziu um pico endotérmico em 218,03ºC, com uma temperatura de início de pico de 216,14ºC e uma entalpia de fusão de 53,441 J/g, quando aquecida em uma taxa de 10ºC/min. Em algumas incorporações da presente divulgação, a Forma II cristalina de 9-ING-41 caracteriza-se por um termograma de DSC compreendendo um pico endotérmico em cerca de 218ºC. Em outras incorporações da presente divulgação, a Forma II cristalina de 9-ING-41 caracteriza-se por uma entalpia de fusão por DSC de cerca de 53 J/g.

[0031] A Forma II cristalina de 9-INGA41 pode ser caracterizada por um perfil de TGA substancialmente como mostrado na Figura 4 quando aquecida em uma taxa de 10ºC/min. Como mostra a Figura 4, a Forma II cristalina de 9-ING-41 perdeu cerca de 0,352l1% de seu peso em resposta ao aquecimento entre cerca de 150ºC e cerca de 250ºC quando aquecida em uma taxa de 10ºC/min.

[0032] Em algumas incorporações da presente divulgação, a Forma II cristalina de 9-ING-41 caracteriza-se por um padrão de XRPD compreendendo picos em 7,8, 12,9, 15,8, 18,1, 18,9, 22,1, 22,7, 28,0 e 28,5 graust0,2 grau 2-teta e um termograma de DSC compreendendo um pico endotérmico em carca de 218ºC quando aquecida em uma taxa de 10ºC/min.

[0033] Em alguns aspectos, a presente divulgação refere-se a processos para preparar formas sólidas de 9-ING 41. Em alguns aspectos, o processo compreende concentras uma solução de 9-ING 41 dissolvido em um solvente ou mistura de solventes.

[0034] Em alguns aspectos, a presente divulgação refere-se a processos para preparar a Forma II cristalina de 9-ING-41. Em algumas incorporações, Oo processo compreende a etapa de concentrar (por exemplo, a vácuo ou via evaporação) uma solução de 9-ING-41 dissolvido em uma mistura de 3-metil- butanol/acetona em uma razão volumétrica de cerca de 1:1. Em outras incorporações, o processo compreende a etapa de resfriar uma solução aquecida (isto é, maior que 25ºC) de 9- ING-41 dissolvido em uma mistura de álcool isoamílico/acetonitrila em uma razão volumétrica de cerca de 10:1.

[0035] Em outro aspecto, a presente divulgação abrange composições farmacêuticas compreendendo uma forma sólida de 9-ING-41 da presente divulgação e pelo menos um excipiente farmaceuticamente aceitável. Os excipientes farmaceuticamente aceitáveis são bem conhecidos dos especialistas na técnica. As composições farmacêuticas podem ser administradas em qualquer forma de dosagem conveniente. Formas de dosagem representativas incluem comprimidos, cápsulas, drágeas, pós reconstituíveis, elixires, líquidos, suspensões coloidais e outros tipos de suspensões, emulsões, contas, grânulos, micropartículas, nano partículas e combinações dos mesmos. A quantidade de composição administrada dependerá do indivíduo a ser tratado, do peso do indivíduo, da gravidade da condição a ser tratada, da maneira de administração e do julgamento do médico prescritor. Em algumas incorporações, a composição farmacêutica compreende a Forma II cristalina de 9-ING41 e pelo menos um excipiente farmaceuticamente aceitável.

[0036] A presente divulgação abrange também formulações de 9-ING-41 em solução orgânica ou aquosa estéril, nas quais a formulação é preparada a partir de uma forma sólida de 9-ING- 41 da presente divulgação. Assim, em alguns aspectos, a presente divulgação compreende um processo para preparar uma composição farmacêutica que é uma solução compreendendo 9- ING-41. Em algumas incorporações, o método para preparar uma composição farmacêutica compreendendo uma solução de 9-ING-41 compreende dissolver uma forma sólida de 9-ING-41 da presente divulgação em um solvente ou mistura de solventes. Em algumas incorporações, o método compreende dissolver a Forma II cristalina de 9-ING41 em um solvente aquoso, em um solvente não aquoso ou em uma mistura de solventes aquosos e/ou não aquosos. Em determinadas incorporações, o solvente aquoso, solvente não aquoso ou mistura de solventes aquosos e/ou não aquosos pode conter outros ingredientes dissolvidos, tais como, por exemplo, poli (glicóis etilênicos), álcool benzílico, polissorbatos, succinatos de tocoferil poli(glicol etilênico), bem como outros tensoativos, solubilizantes ou outros excipientes farmaceuticamente aceitáveis. Em outras incorporações, o processo compreende dissolver a Forma II cristalina de 9-ING-41 em um solvente aquoso.

[0037] As formas em estado sólido de 9-ING-41 aqui definidas, bem como as formulações e composições farmacêuticas das mesmas, podem ser usadas como medicamentos, particularmente para o tratamento de câncer, incluindo cânceres de cérebro, pulmão, mama, ovário, bexiga,

neuroblastoma, rim ou pâncreas, bem como para o tratamento de traumatismo craniano.

[0038] Tendo descrito a divulgação com referência a determinadas incorporações preferidas, outras incorporações tornar-se-ão evidentes para o especialista na técnica a partir da consideração do relatório descritivo. Ilustra-se ainda a divulgação por referência aos exemplos seguintes. Tornar-se-á evidente para os especialistas na técnica que muitas modificações tanto de materiais como de métodos podem ser praticadas sem se afastar da abrangência da divulgação. Métodos analíticos Análise por XRPD

[0039] As análises por XRPD foram executadas usando um difratômetro de raios-X (Bruker D8 advance) equipado com detector LynxEye. Os parâmetros do instrumento estão listados abaixo. Varredura: 3º (20) a 40º (20) Incremento: 0,02º (209) Velocidade de varredura: 0,3 s/etapa Voltagem: 40 kV Corrente: 40 mA Rotação: ativada Retenção de amostra: suporte de amostra com fundo zero

[0040] O difratômetro de potência para raios-X phaser D2 (Bruker) de amostras foram varridos de 3 a 40º 20, em uma etapa de 0,02º 20. A voltagem e corrente do tubo foram, respectivamente, de 30 kV e 10 mA. Análise por TGA

[0041] As análises por TGA foram executadas em um TGA Q500 de TA Instruments ou em um TGA 55 Discovery (TA Instruments,

EUA). As amostras foram colocadas em uma panela de alumínio aberta alcatroada e aquecidas da temperatura ambiente até a temperatura final a uma taxa de 10ºC/min. Análise por DSC

[0042] A análise por DSC foi executada com DSC 0200 ou DSC 250 Discovery (TA Instruments, EUA). Uma amostra pesada foi colocada em uma panela porosa de DSC, e o peso foi precisamente registrado. Aqueceu-se a amostra em uma taxa de aquecimento de 10ºC/min até a temperatura final. Análise por DVS

[0043] Executou-se a análise por DVS em um IGAsorp (HidenIsochema Ltd.). Para um teste isotérmica, a temperatura da câmara pode ser mantida por um banho de água a 25,0+1,0ºC constante. Microscópio de luz polarizada (PLM)

[0044] Executou-se a análise por PLM com um microscópio de luz polarizada ECLIPSE LV100POL (Nikon, Japão). Análise por HPLC

[0045] Instrumento: Agilent 1260 Infinity Series

[0046] Diluente: Acetonitrila

[0047] Taxa de fluxo: 1,5 mL/min

[0048] Fase móvel: A: 0,05% de TFA em água; B: 0,05% de TFA em acetonitrila

[0049] Volume de injeção: 1 UL

[0050] Coluna: XDB-C18, 4,6*50 mm, 1,8 um

[0051] Temperatura da coluna: 40ºC

[0052] Detecção: 220 nm

[0053] Tempo de execução: 8 minutos (atraso de 2 minutos para a próxima injeção)

[0054] Gradiente (T/B%): 0,0/30, 6,0/100, 8,0/100.

Exemplos Exemplo 1: Preparação de 9-ING-41

[0055] Pode-se obter 9-ING-41 bruto pelos métodos gerais descritos na patente U.S. nº 8.207.216 e em Gaisina et al., “From a Natural Product Lead to the Identification of Potent and Selective Benzofuran-3-yl-(indol-3-yl)maleimides as Glycogen Synthase Kinase 38 Inhibitors That Suppress Proliferation and Survival of Pancreatic Cancer Cells”, js. Med. Chem. 2009, 52, 1853-1863. Exemplo 2: Preparação de Forma I cristalina de 9-ING-41

[0056] A Forma I cristalina de 9-ING41 também pode ser preparada da seguinte forma. Síntese do Intermediário 1 AO CH;áNO, O RW NO, >> Aro o NO, NH,OAc, HOAC, refluxo O NO, 1

[0057] Em um balão de fundo redondo de 3 L com 4 gargalos, purgado e mantido com uma atmosfera inerte de nitrogênio colocou-se 6-nitro-2H-1,3-benzodioxol-5-carbaldeído (200 g9g, 1,02 mol, 1,00 equiv.), acetato de amônio (200 g, 2,59 mol, 2,53 equiv.), ácido acético (2 L), e nitrometano (313 g, 5,13 mol, 5,00 equiv.). A solução foi agitada por 12 horas a 100ºC. Repetiu-se três vezes a reação. As soluções foram combinadas e diluídas com 20 L de água. A solução resultante foi extraída com 3x10 L de acetato de etila e as camadas orgânicas foram combinadas. A mistura foi lavada com 3x10 L de salmoura, secada em sulfato de sódio anidro e concentrada a vácuo. Isto resultou em 450 g (bruto) de 5-nitro-6-[(E)-2- nitro-etenil]-2H-1,3-benzodioxol (1) como um sólido verde escuro.

Síntese do Intermediário 2 AI Fe/HOAc CASO > SS NO, sílica get tolueno, Oo N 1 refluxo 2

[0058] Adicionou-se Fe (120 g, 2,14 mol, 17,01 equiv.) lentamente em porções em uma suspensão de 5-nitro-6-[(2)-2- nitro-etenil]-2H-1,3-benzodioxol (30 g, 125,97 mmol, 1,00 equiv.), sílica gel (120 g) em ácido acético (300 mL), tolueno (200 mL), e ciclo-hexano (400 mL) a 80ºC em atmosfera de nitrogênio. A mistura preta resultante foi agitada por 8 horas a 80ºC. Repetiu-se a reação por dez vezes. As misturas reagentes foram combinadas. Os sólidos foram separados por filtração. O filtrado foi concentrado a vácuo e o resíduo foi aplicado sobre uma coluna de sílica gel com acetato de etila/éter de petróleo (1/5). As frações coletadas foram combinadas e concentradas a vácuo para dar 67,3 g (33%) de 2H, 5H-[1, 3]dioxol[4, 5-flindol (2) como um sólido cor de marfim.

Síntese do Intermediário 3 CI reune AT o N DMF o N 2 3

[0059] Adicionou-se hidreto de sódio (19,9 g, 497,50 mmol, 1,18 equiv., 60%) em porções em uma solução de 2H,3H,5H- furo[2,3-f]indol (67,3 g, 422,78 mmol, 1,00 equiv.) em N,N- dimetilformamida (1,3 L) a 0ºC em atmosfera de nitrogênio. A mistura foi agitada e se adicionou gota a gota CH;I (70,9 g, 499,51 mmol, 1,18 equiv.). A solução foi resfriada rapidamente pela adição de 1 L de gelo/água. A solução resultante foi extraída com 3xl L de acetato de etila e as camadas orgânicas foram combinadas. A mistura foi lavada 3x1 L de salmoura, secada em sulfato de sódio anidro e concentrada a vácuo. O resíduo foi aplicado sobre uma coluna de sílica gel com acetato de etila/éter de petróleo (1/10). As frações coletadas foram combinadas em concentradas a vácuo para dar 71 g (97%) de 5-metil-2H,3H,5H-furo[2,3-f]lindol (3 como um sólido amarelo claro. Síntese do Intermediário 4 o PN o ANO o o

E OS o N 0ºC- temperatura o N 3 ambiente 1

[0060] Adicionou-se, gota a gota, 2-cloro-2-oxo-acetato de etila (70,4 g, 406,44 mmol, 1,00 equiv.) em éter etílico (1,6 L) a 0ºC em atmosfera de nitrogênio. A solução resultante foi aquecida até temperatura ambiente e agitada durante 4 horas. A solução foi resfriada lentamente pela adição de 2 L de gelo/água e o valor de pH da solução resultante foi ajustado para 9 por Na;CO;. A mistura resultante foi extraída com 3x1,5 L de acetato de etila. As camadas orgânicas foram combinadas e secadas em sulfato de sódio anidro e concentradas a vácuo para dar 92,8 g (84%) de 2-[5-metil- 2H, 3H, 5H-furo[2,3-f] indol-7-il]-2-oxo0acetato de etila (4) como um sólido amarelo claro.

[0061] NMR de '*H (300 MHz, DMSO-d6): 5 8,28 (s, 4H), 7,56 (s, 4H), 7,27 (s, 4H), 6,17 (s, 1H), 6,08 (s, 8H), 4,35 (q, OI = 7,1 Hz, 7H), 3,85 (s, 11H), 3,35 (s, 2H), 1,35 (t, J= 7,1

Hz, 11H), 1,25 (s, 2H). Síntese do Intermediário 5 Br BA Br o [O J LISO > F K2CO3, DMF F

[0062] Em um balão de fundo redondo de 10 L com 4 gargalos colocou-se 2-bromo-4-flúor-fenol (500 g, 2,62 mol, 1,00 equiv.), N,N-dimetilformamida (5 L), carbonato de potássio (1253 g, 9,07 mol, 3,46 equiv.), (2E)-4-bromo-but-2-enoato de etila (1010 g, 5,23 mol, 2,00 equiv.). A solução resultante foi agitada por 12 horas em temperatura ambiente. Os sólidos foram coletados por filtração. A solução foi então resfriada pela adição de 15 L de água e extraída com 3x10 L de acetato de etila. As camadas orgânicas foram combinadas e lavadas com 4x20 L de salmoura. A mistura foi secada em sulfato de sódio anidro e concentrada a vácuo. O resíduo foi aplicado sobre uma coluna de sílica com acetato de etila/éter de petróleo (1/20). As frações coletadas foram combinadas e concentradas a vácuo para dar 500 g (63%) de (2E)-4-(2-bromo-4-flúor- fenoxi)but-2-enoato de etila (5) como um sólido branco. Síntese do Intermediário 6 (rr o Br o * cr ST ds "OS O F HCOONa: 2H2O, Pd(OAc)2, NazCOz S 5 6

[0063] Em um balão de fundo redondo de 2 L com 3 gargalos, purgado e mantido com uma atmosfera inerte de nitrogênio, colocou-se (2E) -4- (2-bromo-4-flúor-fenoxi)but-2-enoato de etila (125 g, 412,37 mmol, 1,00 equiv.), cloreto de benzil- trietil-azânio (99 g, 434,64 mmol, 1,05 equiv.), formato de sódio diidratado (45,1 g), Pd(OAc), (2,9 g, 12,92 mmol, 0,03 equiv.), carbonato de sódio (92 g, 868,01 mmol, 2,10 equiv.), e N,N-dimetilformamida (1,25 L). A solução resultante foi agitada por 12 horas a 80ºC. A reação foi repetida por quatro vezes. As misturas reagentes foram combinadas e os sólidos foram separados por filtração. O filtrado foi diluído com 10 L de salmoura e extraído com 3x5 L de acetato de etila. As camadas orgânicas foram combinadas e lavadas com 4x6 L de salmoura. A mistura foi secada em sulfato de sódio anidro e concentrada a vácuo. O resíduo foi aplicado sobre uma coluna de sílica gel com acetato de etila/éter de petróleo (1/20). As frações coletadas foram combinadas e concentradas a vácuo. Isto resultou em 258 g (bruto) de 2-(5-flúor-l-benzofuran-3- il)acetato de etila (6) como um óleo amarelo claro.

Síntese do Intermediário 7

O O ES LioH OS ” o MeOH, THF, HO o 6 7

[0064] Em um balão de fundo redondo de 5 L colocou-se 2-(5- flúor-l-benzofuran-3-il)acetato de etila (147 g, 661,53 mmol, 1,00 equiv.), metanol (1 L), tetraidrofurano (1 L), água (1 L), e LioOH (47,7 g, 1,99 mol, 3,01 equiv.). A solução resultante foi agitada por 3 horas em temperatura ambiente. Repetiu-se a reação por duas vezes. A mistura foi concentrada a vácuo e depois extraída com 1 L de diclorometano. A camada aquosa foi coletada e o pH da camada foi ajustado para 1-3 com cloreto de hidrogênio (1 mol/L). A solução resultante foi extraída com 3x1 L de acetato de etila e as camadas orgânicas combinadas foram secadas em sulfato de sódio anidro e concentradas a vácuo. Isto resultou em 160 g (62%) de ácido 2- (5-flúor-l-benzofuran-3-il) acético (7) como um sólido branco. Síntese do Intermediário 8 O Oo No Ta HATU, DIEA OS"

NL Y o DMF oO 7 8

[0065] Em um balão de fundo redondo de 10 L colocou-se ácido 2-(5-flúor-l-benzofuran-3-il)acético (160 g, 824,1 mmol, 1,00 equiv.), NH.Cl (436 g, 8,16 mol, 9,89 equiv.), N,N-dimetilformamida (6L), DIEA (1064 g, 8,24 mol, 9,99 equiv.), e HATU (376 g, 988,88 mmol, 1,20 equiv.). A solução resultante foi agitada por 12 horas em temperatura ambiente. A solução resultante foi diluída com 10 L de água. Os sólidos foram coletados por filtração para dar 126 g (78%) de 2-(5- flúor-l-benzofuran-3-il)acetamida (8) como um sólido branco. Síntese de 9-ING-41 na Forma I cristalina QE Ho F o o tt SOS: ses E F. NH> o N < NY o o t-BuOK, THF À 8 9-ING-41

[0066] Adicionou-se, gota a gota, t-BuOK (1200 mL, 1 mol/L em THF) em uma solução de 2-[5-metil-2H,3H,5H-furo[2,3- f]indol-7-il]-2-oxo-acetato de etila (100 g, 365,9 mmol, 1,00 equiv.), 2-(5-flúor-l-benzofuran-3-il)acetamida (72 g, 372,7 mmol, 1,02 equiv.) em tetraidrofurano (3 L) a 0ºC em atmosfera de nitrogênio. A reação foi agitada por 2 horas em temperatura ambiente. A reação foi resfriada até 0ºC e vertida em 2 L de NH,CL (solução saturada em água) e extraída com 4x2 L de diclorometano. As camadas orgânicas foram combinadas, secadas em sulfato de sódio anidro e concentradas a vácuo. O resíduo foi aplicado sobre uma coluna de sílica gel com acetato de etila/diclorometano/éter de petróleo (1/1/5). As frações coletadas foram combinadas e concentradas a vácuo para dar 107,9 g (74%) de 3-(5-flúor-l-benzofuran-3- il) -4- [5-metil-2H,5H-[1,3]dioxol[4,5-f]indol-7-il]-2,5- diidro-lH-pirrol-2,5-diona como um sólido vermelho. Este sólido vermelho é a Forma I cristalina de 9-ING-41. MS-ESI: [M+H] = 405. Exemplo 2: Preparação da Forma II cristalina de 9-ING-41

[0067] Preparou-se a Forma II cristalina de 9-ING-41 por evaporação lenta de 9-ING41 do seguinte modo. Pesou-se 29,12 mg de 9-ING-41 (Forma I) em um pequeno frasco de vidro e se adicionou 3 mL de 3-metil-butanol. Pesou-se 80,43 g de 9-ING- 41 (Forma LI) em um pequeno frasco de vidro separado e se adicionou 3 mL de acetona. As suspensões resultantes foram filtradas e se misturou 100 UL de cada filtrado em uma cavidade de uma placa de 96 cavidades. A mistura foi evaporada em uma capela de laboratório em condições ambientais, resultando na Forma II cristalina sólida de 9- ING-41. Este material produziu o XRPD mostrado na Figura 1. Exemplo 4: Preparação da Forma II cristalina de 9-ING-41

[0068] Pesou-se cerca de 100 mg da Forma I de 9-ING-41 em um recipiente. Adicionou-se ao recipiente 7 mL de uma mistura a 10:1 (volume/volume) de álcool isoamílico/acetonitrila. Aqueceu-se a mistura a 80ºC para dar uma solução que foi subsequentemente filtrada e semeada com a Forma II de 9-ING-

41. A mistura foi agitada durante resfriamento até temperatura ambiente, resultando em cristalização. XRPD mostrou o sólido resultante como sendo a Forma II. Exemplo 4: Preparação da Forma II cristalina de 9-ING-41

[0069] Pesou-se carca de 2,0 gq da Forma I em um recipiente. Adicionou-se ao recipiente uma mistura a 10:1 (volume/volume) de álcool isoamílico/acetonitrila. Aqueceu-se a mistura a 80ºC para dar uma solução que foi subsequentemente filtrada e semeada com a Forma II de 9-ING41. A mistura foi agitada durante resfriamento até temperatura ambiente, resultando em cristalização. XRPD mostrou que o sólido resultante está na Forma II. Exemplo 5: Preparação da Forma II cristalina de 9-ING-41

[0070] Pesou-se cerca de 2,0 g da Forma I num pequeno frasco. Ao pequeno frasco foram adicionados 150 ml de uma mistura 10:1 (v/v) de álcool isoamílico:acetonitrila. A mistura foi aquecida a 90ºC para dar uma solução que foi subsequentemente filtrada e semeada com a Forma II de 9-ING-

41. A mistura foi agitada durante resfriamento até a temperatura ambiente, resultando em cristalização. O sólido cristalino (1,46 g) foi caracterizado por PLM, XRPD, DSC e TGA. PLM mostrou que o sólido cristalino é formado por cristais irregulares. XRPD (vide Figura 2) mostrou que o sólido cristalino está na Forma II. DSC mostrou uma primeira endoterma com uma temperatura inicial de 216ºC, que é atribuída à fusão da Forma II, seguida por uma exoterma que é atribuída à cristalização da Forma I, seguida por uma segunda endoterma com uma temperatura inicial de 228ºC, vide Figura 3, que á atribuída à fusão da Forma I. TGA mostrou que a forma perdeu cerca de 0,4% em peso antes de 250ºC. Vide Figura 4. Exemplo 6: Efeito mecânico e efeito de pressão

[0071] 10,0 mg da Forma II foram pesados em um almofariz e moídos por 5 min. O sólido restante foi coletado e analisado por XRPD. O sólido moído permaneceu na Forma II de 9-ING-41.

[0072] 4,50 mg da Forma II foram comprimidos em um comprimido. O comprimido foi então moído em pó e analisado por XRPD. A compressão não teve nenhum efeito sobre a forma cristalina. Exemplo 7. Tratamento térmico - Preparação de 9-ING-41 amorfo

[0073] Aqueceu-se por DSC a Forma II de 9-INGÃH1 até a temperatura final de 260ºC na taxa de 10ºC/min. O produto fundido foi colocado imediatamente em um banho de gelo e mantido por 15 minutos. O resíduo foi analisado por XRPD, que mostrou que o material era amorfo.

[0074] A Forma II de 9-ING-41 foi aquecida até a temperatura final de 260ºC na taxa de 10ºC/min, depois resfriada até -40ºC e reaquecida até 260ºC na mesma taxa de aquecimento, e depois resfriada até 40ºC. O resíduo foi analisado por XRPD, que mostrou que o material era amorfo. Exemplo 8. Estudo de solubilidade - 24 horas

[0075] 9-ING-41, quer na Forma I ou na Forma III, foi adicionado a 1 mL de cada um de 10 solventes diferentes em um recipiente para preparar uma suspensão. As amostras foram agitadas em 2000 rpm em um agitador em temperatura ambiente por 24 horas. As misturas foram examinadas visualmente para garantir a saturação. Após 24 horas, filtrou-se 1 mL de suspensão através de uma membrana de microfiltração de náilon de 0,45 Um para outro recipiente de vidro transparente limpo. O filtrado foi analisado por HPLC e os sólidos restantes foram analisados usando XRPD. Os resultados de solubilidade estão mostrados na Tabela 2 abaixo.

Tabela 2. Solubilidade de formas sólidas de 9-ING-41 Meio | Forma I (mg/ml) | Forma II (mg/mL) Não detectada | Não detectada EtoOH 1,273 0,903 PEG 400 96,522 [a] LABRASOL 60,501 68,455 Benzoato de benzila 52,970 73,265 [6 | DimetiTacetamida Álcool benzílico 24,049 30,553 [8 | 6160 de gergelim | < [q o 2 PEG400/TWENN80/EtOH 78,815 90,418 (75/8/17) PEG300/BzOH/água 5,087 9,410 (65/10/25)

[0076] Os sólidos restantes nos experimentos em que a Forma I foi o material de partida permaneceram na Forma [I.

[0077] Os sólidos restantes nos experimentos em que a Forma II foi o material de partida, mudaram de forma com exceção nos experimentos da água e do óleo de gergelim. Nos experimentos com água e com óleo de gergelim, os sólidos restantes foram de Forma II. No experimento com etanol, os sólidos restantes foram um solvato. Nos outros experimentos, os sólidos pareceram estar na Forma [. Exemplo 9. Estudo de solubilidade - 1 hora

[0078] Etapa 1: Adicionou-se uma quantidade suficiente de Forma I em 1 mL de solvente (EtOH, LABRASOL, benzoato de benzila, álcool benzílico, PEG400/Tween80/EtOH (75/8/17) e PEG300/BzOH/água (65/10/25)) para preparar uma suspensão. As amostras foram agitadas em 2000 rpm em um agitador em temperatura ambiente por 24 horas.

[0079] Etapa 2: Os frascos foram examinados visualmente para garantir saturação. Após 24 horas, filtrou-se 1 mL de suspensão através de uma membrana de microfiltração de náilon de 0,45 Um para outro recipiente de vidro transparente limpo. O filtrado foi analisado por HPLC.

[0080] Etapa 3: Adicionou-se um excesso de Forma II aos seis filtrados residuais da Etapa 2 para preparar uma suspensão. As amostras foram agitadas em 2000 rpm em um agitador por 1 hora. As suspensões foram filtradas após 1 hora através de uma membrana de microfiltração de náilon de 0,45 Um para outro recipiente de vidro transparente limpo. O filtrado foi analisado por HPLC e os sólidos restantes foram analisados usando XRPD.

Tabela 3. Solubilidade de formas sólidas de 9-ING-41 Ex] Wo Format (ma/mD) Forma 11 (mg/mD) EtoH 1,257 2,547 LABRASOL 61,370 86,953 Benzoato de benzila 48,313 71,808 |4| Álcool benzílico 22,308 36,869 PEG400/Tween80/EtOH 73,421 106,140 (75/8/17) PEG300/BzOH/água 4,959 10,238 (65/10/25)

[0081] Os sólidos restantes em LABRASOL, benzoato de benzila, álcool benzílico e PEG400/Tween80/EtOH (75/8/17 foram da Forma I, mostrando que a Forma II sólida rapidamente converte-se na Forma I. A forma cristalina de sólidos restantes não mudou em EtoOH e em PEG400/Tween80/EtOH (65/10/25). Exemplo 10. Solubilidade em óleo de gergelim

[0082] A solubilidade de 9-ING-41 em óleo de gergelim não pode ser medida por HPLC. A solubilidade foi estimada adicionando porções pesadas da Forma I (ou da Forma II) em óleo de gergelim.

As amostras foram agitadas por 24 horas em temperatura ambiente e os frascos foram examinados visualmente para garantir dissolução.

Adicionou-se sólido desta maneira até o sólido adicionado não se dissolver em 24 horas.

Os resultados estão mostrados na Tabela 4 abaixo.

Tabela 4. Resultados de solubilidade em óleo de gergelim EXP | Matéria- | Peso Peso de óleo der Resultado Solubilidade prima (mg) | gergelim (mg) visual estimada 1 Forma I 1,0 3464,12 Dissolução incompleta 0,167-0,289 5997, 92 ng/ma 1214, 50 Forma II 1,0 2638,01 Dissolução 0,741-1,21 incompleta ug/mg

Claims (7)

REIVINDICAÇÕES

1. Forma sólida, caracterizada pelo fato de ser a Forma II cristalina de 3- (5-flúor-benzofuran-3-il)-4-(5-metil-5H- [1,3] dioxol [4,5-f] indol-7-il)pirrol-2,5-diona.

2. Forma sólida, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de ter um padrão de difração raios-X de pó substancialmente como mostrado na Figura 1.

3. Forma sólida, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de ter um padrão de difração raios-X de pó compreendendo um pico 2-teta de 7,8+0,2 graus, na escala 2-teta com lambda = 1,54 Angstroms (CuKa).

4, Forma sólida, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de ter um padrão de difração raios-X de pó compreendendo picos 2-teta de 12,9, 15,8 e 18,9+0,2 graus, na escala 2-teta com lambda = 1,54 Angstroms (CuKa).

5. Forma sólida, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de ter um padrão de difração raios-X de pó compreendendo picos 2-teta de 12,9, 18,1, 28,0 e 28,5+0,2 graus, na escala 2-teta com lambda = 1,54 Angstroms (CuKa) .

6. Forma sólida, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de ter um padrão de difração raios-X de pó compreendendo picos 2-teta de 7,8, 12,9, 15,8, 18,1, 18,9, 19,5, 22,1, 28,0 e 28,5+0,2 graus, na escala 2-teta com lambda = 1,54 Angstroms (CuKa).

7. Processo para preparar a forma sólida, conforme definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado pelo fato de compreender (1) dissolver 3-(5-flúor-benzofuran-3- il) -4- (5-metil-5H-[1,3]dioxol[4,5-f] indol-7-il)pirrol-2,5- diona em um solvente para formar uma solução; e (II)

concentrar a solução.

8. Processo, de acordo com a reivindicação 7, caracterizado pelo fato de o solvente compreender 3-metil-butanol/acetona em uma razão volumétrica de cerca de 1:1.

9. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de compreender a forma sólida, conforme definida em qualquer uma das reivindicações de 1 a 6, e um excipiente farmaceuticamente aceitável.

10. Processo para preparar a composição farmacêutica, conforme definida pela reivindicação 9, caracterizado pelo fato de compreender a forma sólida em um solvente aquoso, em um solvente não aquoso ou em uma mistura de solvente aquoso e/ou solvente não aquoso ou misturar a forma sólida com um excipiente farmaceuticamente aceitável.

11. Método para tratar câncer em um paciente, caracterizado pelo fato de compreender administrar a um paciente necessitando da mesma uma quantidade terapeuticamente eficaz da forma sólida, conforme definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 6.

12. Método, de acordo com a reivindicação 11, caracterizado pelo fato de o câncer ser câncer de cérebro, pulmão, mama, ovário, bexiga, neuroblastoma, rim ou pâncreas.

13. Método para tratar traumatismo craniano em um paciente, caracterizado pelo fato de compreender administrar a um paciente necessitando da mesma uma quantidade terapeuticamente eficaz da forma sólida, conforme definida em qualquer uma das reivindicações de 1 a 6.

14. Processo para preparar a forma sólida, conforme definida em qualquer uma das reivindicações de 1 a 6, caracterizado pelo fato de compreender (I) dissolver 3- (5-flúor-benzofuran-

3-il)-4- (5S-metil-5H-[1,3]dioxol[4,5-f]indol-7-il)pirrol-2,5- diona em um solvente quente para formar uma solução; e (II) resfriar a solução.

15. Processo, de acordo com a reivindicação 14, caracterizado pelo fato de o solvente compreender álcool isoamílico/acetonitrila em uma razão volumétrica de cerca de 1:1.

16. Forma sólida, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 6, caracterizada pelo fato de ser usada no tratamento de câncer.

17. Forma sólida, de acordo com a reivindicação 16 caracterizada pelo fato de o câncer ser câncer de cérebro, pulmão, mama, ovário, bexiga, neuroblastoma, rim ou pâncreas.

18. Forma sólida, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 6, caracterizada pelo fato de ser usada no tratamento de traumatismo craniano.

19. Forma sólida, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 6, caracterizada pelo fato de ter um termograma de calorimetria diferencial de varredura (DCS) compreendendo um pico endotérmico em cerca de 218ºC quando aquecida em uma taxa de 10 ºC/min.

20. Forma sólida, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 6, caracterizada pelo fato de ter um termograma de calorimetria diferencial de varredura (DCS) tal como substancialmente mostrado na Figura 3 quando aquecida em uma taxa de 10 ºC/min.

21. Forma sólida, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de ter um padrão de difração raios-X de pó substancialmente como mostrado na Figura 2.

22. Forma sólida, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 6, caracterizada pelo fato de ter um perfil de análise termogravimétrica tal como substancialmente mostrado na Figura 4 quando aquecida em uma taxa de 10 ºC/min.

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