BR112020005279A2

BR112020005279A2 - compostos de 4-[[(7-aminopirazolo[1,5-a]pirimidin-5-il)amino]metil]piperidin-3-ol como inibidores cdk

Info

Publication number: BR112020005279A2
Application number: BR112020005279-5A
Authority: BR
Inventors: Ash BAHL; Ed AINSCOW; Alexander BONDKE; Anthony G. M. Barrett; Mihiro Sunose; Jason John Shiers; Kamaldeep Chohan
Original assignee: Carrick Therapeutics Limited; Cancer Research Technology Limited; Ip2Ipo Innovations Limited
Priority date: 2017-09-20
Filing date: 2018-09-20
Publication date: 2020-09-24
Also published as: WO2019057825A1; IL273396A; IL273396B2; EP3684769A1; MA50161A; JP2020534346A; IL273396B; US20200345736A1; CN111566106A; CA3075461A1; GB201715194D0; US11857552B2; NZ763316A; AU2018335841B2; CA3075461C; EP3684769B1; CN111566106B; BR112020005279B1; AU2018335841A1; JP7148604B2

Abstract

A presente invenção refere-se geralmente ao campo de compostos terapêuticos. Mais especificamente, a presente invenção refere-se a certos compostos de 4-[[(7-aminopirazolo[1,5-a]pirimidin-5-il)amino]metil]piperidin-3-ol (aqui referidos como "compostos de APPAMP") que, entre outros, inibem (por exemplo, inibem seletivamente) CDK (por exemplo, CDK1, CDK2, CDK4, CDK5, CDK6, CDK7, CDK8, CDK9, CDK10, CDK11, CDK12, CDK13, etc.). A presente invenção da mesma forma refere-se a composições farmacêuticas compreendendo esses compostos e o uso de tais compostos e composições, tanto in vitro quanto in vivo, para inibir CDK; e para tratar distúrbios, incluindo: distúrbios associados à CDK; distúrbios que resultam em uma atividade inadequada de uma quinase dependente de ciclina (CDK); distúrbios associados à mutação da CDK; distúrbios associados à superexpressão de CDK; distúrbios que estão associados à ativação da CDK na trilha a montante; distúrbios que são melhorados pela inibição da CDK; distúrbios proliferativos; câncer; infecções virais (incluindo HIV); distúrbios neurodegenerativos (incluindo a doença de Alzheimer e a doença de Parkinson); isquemia; doenças renais; doença cardiovasculares (incluindo aterosclerose); e distúrbios autoimunes (incluindo artrite reumatoide). Opcionalmente, o tratamento compreende ainda tratamento (por exemplo, tratamento simultâneo ou sequencial) com um agente ativo adicional que é, por exemplo, um inibidor de aromatase, um antiestrogênio, um bloqueador de Her2, um agente quimioterapêutico citotóxico, etc.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "COM- POSTOS DE 4-[[(7-AMINOPIRAZOLO[1,5-A]PIRIMIDIN-5- IL)AMINO]METIL]PIPERIDIN-3-OL COMO INIBIDORES CDK".

PEDIDO RELACIONADO

[001] Este pedido está relacionado ao pedido de patente do Rei- no Unido número 1715194.5, depositado em 20 de setembro de 2017, os teores dos quais estão incorporados aqui por referência em sua to- talidade.

CAMPO TÉCNICO

[002] A presente invenção refere-se geralmente ao campo de compostos terapêuticos. Mais especificamente, a presente invenção refere-se a certos compostos de 4[[(7-aminopirazolo[1,5-a]pirimidin-5- il)amino]metil]piperidin-3-ol (referidos aqui como "compostos de AP- PAMP") que, entre outros, inibem (por exemplo, seletivamente inibem) CDK (por exemplo, CDK1, CDK2, CDK4, CDK5, CDK6, CDK7, CDK8, CDK9, CDK10, CDK11, CDK12, CDK13, etc.). A presente invenção da mesma forma refere-se a composições farmacêuticas compreendendo esses compostos e o uso de tais compostos e composições, tanto in vitro quanto in vivo, para inibir CDK; e tratar distúrbios, incluindo: dis- túrbios associados com CDK; distúrbios que resultam em uma ativida- de inadequada de uma quinase dependente de ciclina (CDK); distúr- bios associados à mutação da CDK; distúrbios associados à superex- pressão de CDK; distúrbios que estão associados à ativação da trilha a montante de CDK; distúrbios que são melhorados pela inibição de CDK; distúrbios proliferativos; Câncer; infecções virais (incluindo HIV); distúrbios neurodegenerativos (incluindo a doença de Alzheimer e a doença de Parkinson); isquemia; doenças renais; distúrbios cardiovas- culares (incluindo aterosclerose); e distúrbios autoimunes (incluindo artrite reumatoide). Opcionalmente, o tratamento compreende ainda tratamento (por exemplo, tratamento simultâneo ou sequencial) com um agente ativo adicional que é, por exemplo, um inibidor de aroma- tase, um antiestrogênio, um bloqueador de Her2, um agente quimiote- rapêutico citotóxico, etc.

ANTECEDENTE

[003] Várias publicações são citadas aqui para descrever e divul- gar mais completamente a invenção e o estado da técnica a que a in- venção se refere. Cada uma dessas referências está incorporada aqui por referência em sua totalidade na presente descrição, na mesma ex- tensão como se cada referência individual fosse específica e individu- almente indicada para ser incorporada por referência.

[004] Em toda esta especificação, incluindo as reivindicações a seguir, a menos que o contexto exija de outra forma, a palavra "com- preender" e variações como "compreende" e "compreendendo" serão entendidas como implicando a inclusão de um número inteiro declara- do, etapa ou grupo de números inteiros ou etapas, porém não a exclu- são de qualquer outro número inteiro ou etapa ou grupo de números inteiros ou etapas.

[005] Deve-se notar que, quando usadas na especificação e nas reivindicações anexas, as formas singulares “um”, “uma” e “o” incluem referentes plurais, a menos que o contexto indique claramente o con- trário. Desse modo, por exemplo, a referência a "um veículo farmacêu- tico" inclui misturas de dois ou mais desses veículos e similares.

[006] As faixas são frequentemente expressas aqui como de "cerca de" um valor particular e / ou a "cerca de" outro valor particular. Quando uma tal faixa é expressa, outra modalidade inclui de um valor particular e / ou a outro valor particular. Similarmente, quando os valo- res são expressos como aproximações, pelo uso do antecedente "cer- ca de", será entendido que o valor particular forma outra modalidade.

[007] Esta descrição inclui informações que podem ser úteis no entendimento da presente invenção. Não se admite que nenhuma das informações aqui fornecidas seja técnica anterior ou relevante para a invenção atualmente reivindicada, ou que qualquer publicação especi- ficamente ou implicitamente referenciada seja técnica anterior. Proteína Quinase Dependente de Ciclina (CDK)

[008] As proteínas quinases dependentes de ciclina (CDK) são as subunidades catalíticas de uma família de 21 proteínas quinases seri- na / treonina (veja, por exemplo, Malumbres e outro, 2009), algumas das quais controlam a progressão da célula através dos estágios de crescimento, replicação de DNA e mitose (veja, por exemplo, Pines, 1995; Morgan, 1995). A ativação de CDKs específicas é necessária para a progressão apropriada pelos diferentes estágios do ciclo celular e a entrada no próximo estágio do ciclo celular. CDK4 e CDK6 são ne- cessárias para a progressão na fase de crescimento (G1), CDK2 na síntese de DNA (fase S) e CDK1 para mitose e divisão celular (fase M). A regulação da atividade das CDKs de ciclo celular é essencial pa- ra o tempo correto de progressão da célula através dos estágios do ciclo celular e suas atividades são reguladas em vários níveis, incluin- do a formação de complexos com ciclinas específicas (ciclinas de classes A, B, D e E; essas ciclinas são sintetizadas e degradadas pe- los estágios do ciclo celular), inibidores de CDK (CDKI), em particular CIP / KIP E CDKIS do tipo INK (veja, por exemplo, Sherr e outro, 1995), bem como fosforilação e desfosforilação em resíduos específi- cos. O estado de fosforilação de um resíduo de treonina específico na alça de ativação, a chamada alça T, é uma modificação importante pa- ra a atividade de CDKs do ciclo celular (veja, por exemplo, Fisher e outro, 1994).

[009] A desregulação da atividade de CDK é um componente im- portante de muitos estados de doença, geralmente através de ativação elevada e / ou inadequada, uma vez que as próprias CDKs são fre- quentemente mutadas. Exemplos raros de mutações em CDKs do ci-

clo celular incluem famílias de CDK4 com melanoma hereditário que resultam em insensibilidade aos CDKIs de INK4 (veja, por exemplo, Zuo e outro, 1996). Mutações de inativação no gene de CDKN2A, que codifica para CDKls de p16INK4 e p14ARF, são mais comuns no me- lanoma hereditário (veja, por exemplo, Hansson, 2010), essas muta- ções da mesma forma sendo associadas a maior incidência de câncer de mama e pancreático nas famílias afetadas (veja, por exemplo, Borg e outro, 2000). CDK4 e CDK6 podem ser amplificados e / ou superex- pressos no câncer, seus efetores de ciclina, ciclinas do tipo D são da mesma forma frequentemente amplificados e / ou superexpressos, en- quanto os inibidores de CDK4 / CDK6 (genes INK4) são frequente- mente excluídos em muitos tipos de câncer e / ou sofrer silenciamento epigenético (veja, por exemplo, Ortega e outro, 2002). As ciclinas do tipo E interagem com a CDK2 por sua atividade e são frequentemente superexpressas no câncer, enquanto as proteínas inibidoras de p21 e p27 que atuam em CDK2, bem como em CDK1, são epigeneticamente silenciadas no câncer (veja, por exemplo, Malumbres e outro, 2001; Jones e outro, 2007). A regulação das atividades das CDKs do ciclo celular é, portanto, essencial para o desenvolvimento e progressão do câncer.

[0010] CDK7, outro membro da família de CDK, cujos complexos com ciclina H e MAT1, fosforila as CDKs do ciclo celular na ativação da alça T, para promover suas atividades (veja, por exemplo, Fisher e outro, 1994). Como tal, foi proposto que a inibição de CDK7 forneceria um meio potente de inibir a progressão do ciclo celular, o que pode ser especialmente relevante, uma vez que existem evidências convincen- tes de estudos de gene nocaute em camundongos por falta de um re- quisito absoluto para CDK2, CDK4 e CDK6 para o ciclo celular, pelo menos na maioria dos tipos de células (veja, por exemplo, Malumbres e outro, 2009), embora diferentes tumores pareçam exigir alguns, po-

rém sejam independentes de outras CDKs de interfase (CDK2, CDK4, CDK6). Estudos genéticos e bioquímicos recentes confirmaram a im- portância da CDK7 para a progressão do ciclo celular (veja, por exem- plo, Larochelle e outro, 2007; Ganuza e outro, 2012).

[0011] Além de seu papel como quinase de ativação de CDK (CAK), CDK7/ciclina H/MAT1, em complexo com o fator de transcrição basal TFIIH, fosforila RNA polimerase II (PolII) em seu domínio C- terminal (CTD) (veja, por exemplo, Lu e outro, 1995; Serizawa e outro, 1995). CDK9, outro membro da família, é da mesma forma requerido para a fosforilação de PolII CTD. O PolII CTD é compreendido por uma repetição de sete aminoácidos tendo a sequência Tirosina-Serina- Prolina-Treonina-Serina-Prolina-Serina (YSPTSPS), 52 repetições do heptad 52 YSPTSPS presentes no mamífero PolII CTD. A fosforilação de serina-2 (S2) e serina-5 (S5) por CDK7 e CDK9 é requerida para a liberação de PolII do promotor de gene no início da transcrição. CDK7 parece atuar a montante de CDK9, fosforilação de fosforilação de S5 por CDK7 precendendo fosforilação de S2 por CDK9 (veja, por exem- plo, Larochelle e outro, 2012). Inibidores transcricionais, tais como fla- vopiridol, bem como inibidores de CDK que inibem CDK7 e CDK9 de- monstram a utilidade potencial da inibição de CDK7 e CDK9 no câncer (veja, por exemplo, Wang e outro, 2008). Além de sua ação na fosfori- lação do PolII CTD, CDK7 e CDK9 foram implicados na regulação das atividades de vários fatores de transcrição, incluindo o receptor de es- trogênio (ER) associado ao câncer de mama (veja, por exemplo, Chen e outro, 2000), receptores retinóides (veja, por exemplo, Rochette-Egly e outro, 1997; Bastien e outro, 2000), receptores de androgênio (veja, por exemplo, Chymkowitch e outro, 2011; Gordon e outro, 2010), bem como supressor de tumor p53 (Lu e outro, 1997; Ko e outro, 1997; Radhakrishnan e outro, 2006; Claudio e outro, 2006). CDK8, um com- ponente do complexo mediador que regula a transcrição de gene, por meio de um mecanismo que envolve a interação entre os fatores de transcrição e o mecanismo de transcrição basal PolII, da mesma forma fosforila os fatores de transcrição para regular suas atividades (veja, por exemplo, Alarcon e outro, 2009). O CDK8 da mesma forma parece ser importante para regular a reinicialização da transcrição. A impor- tância da CDK8 no câncer é destacada pela constatação de que o ge- ne de CDK8 é amplificado em 40 a 60% dos cânceres colorretais, en- quanto o seu parceiro de ciclina, ciclina c, é aumentado em vários ti- pos de câncer, enquanto estudos funcionais apoiam um papel onco- gênico CDK8 no câncer (veja, por exemplo, Xu e outro, 2011). Um pa- pel potencial para CDK11 na regulação da atividade do mediador, indi- cando um papel para CDK11 na regulação da transcrição (veja, por exemplo, Drogat e outro, 2012), enquanto sua capacidade de fosforilar S2 o PolII CTD da mesma forma implica CDK12 e CDK13 na transcri- ção; CDK12 é da mesma forma implicada na manutenção da estabili- dade do genoma (veja, por exemplo, Bartkowiak e outro, 2010; Blazek e outro, 2011; Cheng e outro, 2012).

[0012] Além da grande quantidade de evidências que envolvem as CDKs acima e outras (por exemplo, CDK10; veja, por exemplo, Lorns e outro, 2008; Yu e outro, 2012) em câncer, CDKs são da mesma for- ma importantes em infecções virais, incluindo HIV (veja, por exemplo, Knockeart e outro, 2002), distúrbios neurodegenerativos, incluindo do- ença de Alzheimer e Parkinson (nota especial aqui é CDK5, veja, por exemplo, Monaco e outro, 2005; Faterna e outro, 2008), isquemia, dis- túrbios proliferativos, incluindo doenças renais (veja, por exemplo, Marshall e outro, 2006) e distúrbios cardiovasculares, incluindo ateros- clerose e distúrbios autoimunes, incluindo artrite reumatoide. De fato, foi monstrado que a inibição de CDK7 suprime a inflamação da artrite reumatoide por meio de bloqueio da ativação de NF-κB e secreção de IL-1β / IL-6 (veja, por exemplo, Hong e outro, 2018). Além disso, a ca-

pacidade da inibição de CDK7 de impedir pontos de trilha de sinaliza- ção de NF-κB para uma capacidade potencialmente mais ampla para os inibidores de CDK7 de tratar uma série de doenças autoimunes (ve- ja, por exemplo, Bacher e outro, 2004).

[0013] O desenvolvimento de inibidores de CDK de moléculas pe- quenas fornece uma abordagem potencialmente poderosa no trata- mento de muitas doenças humanas, em particular o câncer. Desse modo, a inibição da progressão do ciclo celular pode ser alcançada através do desenvolvimento de inibidores seletivos de CDK1 (como a CDK1 parece ser indispensável para o ciclo celular) ou inibidores sele- tivos de CDK7 (pois CDK7 regula as CDKs do ciclo celular) ou com inibidores com atividade contra todos os CDKs do ciclo celular. Algu- mas evidências indicam que os inibidores seletivos de CDK4 / CDK6 ou CDK2 podem ter utilidade para condições específicas (por exemplo, CDK4 / CDK6 em doenças malignas hematológicas e CDK2 em glioblastomas ou osteossarcomas) e, portanto, o desenvolvimento de inibidores seletivos para essas CDKs pode ser útil, a seletividade tal- vez ajudando em questões de toxicidade. Compostos conhecidos

[0014] Bondke e outro, 2015, descreve certos compostos de pira- zolo[1,5-a]pirimidina-5,7-diamina como inibidores de CDK, incluindo, por exemplo, o seguinte composto (aqui referido como PPDA-001): Novos compostos com propriedades melhoradas

[0015] Os compostos de APPAMP descritos aqui são surpreen- dentemente e inesperadamente melhores do que compostos estrutu-

ralmente similares conhecidos, por exemplo, como mostrado em Bon- dke e outro, 2015.

[0016] Por exemplo, os compostos de APPAMP descritos aqui for- necem melhorias substanciais em relação a uma ou mais propriedades importantes e vantajosas, incluindo: potência de CDK7 aprimorada; seletividade aprimorada para CDK7 vs. CDK2; fração livre melhorada no plasma humano; e efluxo reduzido de MDCK-MDR1 e / ou MDCK- BCRP.

[0017] Sem pretender estar ligado a nenhuma teoria particular, os inventores acreditam que as combinações particulares de substituintes e suas posições dão origem às propriedades extraordinárias dos com- postos reivindicados.

SUMARIO DA INVENÇÃO

[0018] Um aspecto da invenção refere-se a certos compostos de 4[[(7-aminopirazolo[1,5-a]pirimidin-5-il)amino]metil]piperidin-3-ol (aqui referidos como "compostos de APPAMP"), como aqui descrito.

[0019] Outro aspecto da invenção refere-se a uma composição (por exemplo, uma composição farmacêutica) compreendendo um composto de APPAMP, como aqui descrito, e um veículo ou diluente farmaceuticamente aceitável.

[0020] Outro aspecto da invenção refere-se a um método de pre- paração de uma composição (por exemplo, uma composição farma- cêutica) compreendendo a etapa de mistura de um composto de AP- PAMP, como aqui descrito, e um veículo ou diluente farmaceuticamen- te aceitável.

[0021] Outro aspecto da presente invenção refere-se a um método de inibição da função CDK (por exemplo, CDK1, CDK2, CDK4, CDK5, CDK6, CDK7, CDK8, CDK9, CDK10, CDK11, CDK12, CDK13, etc.) (por exemplo, em uma célula), in vitro ou in vivo, compreendendo o contato da célula com uma quantidade eficaz de um composto de AP-

PAMP, como aqui descrito.

[0022] Outro aspecto da presente invenção refere-se a um método de regular (por exemplo, inibir) a proliferação celular (por exemplo, proliferação de uma célula), inibir a progressão do ciclo celular, pro- mover apoptose ou uma combinação de um ou mais destes, in vitro ou in vivo, compreendendo o contato de uma célula com uma quantidade eficaz de um composto de APPAMP, como aqui descrito.

[0023] Outro aspecto da presente invenção refere-se a um com- posto de APPAMP como descrito aqui para uso em um método de tra- tamento do corpo humano ou animal por terapia, por exemplo, para usar um método de tratamento de um distúrbio (por exemplo, uma do- ença) como descrito aqui.

[0024] Outro aspecto da presente invenção refere-se à utilização de um composto de APPAMP, como aqui descrito, na fabricação de um medicamento, por exemplo, para uso em um método de tratamen- to, por exemplo, para utilização de um método de tratamento de um distúrbio (por exemplo, uma doença) como aqui descrito.

[0025] Outro aspecto da presente invenção refere-se a um método de tratamento, por exemplo, um método de tratamento de um distúrbio (por exemplo, uma doença) como aqui descrito, compreendendo a administração a um indivíduo em necessidade de tratamento de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de APPAMP, como aqui descrito, de preferência na forma de uma composição far- macêutica.

[0026] Em uma modalidade, o tratamento também compreende tratamento (por exemplo, tratamento simultâneo ou sequencial) com um agente ativo adicional que é, por exemplo, um inibidor de aroma- tase, um antiestrogênio, um bloqueador de Her2, um agente quimiote- rapêutico citotóxico, etc., como aqui descrito.

[0027] Outro aspecto da presente invenção refere-se a um kit compreendendo (a) um composto de APPAMP, como aqui descrito, de preferência fornecido como uma composição farmacêutica e em um recipiente adequado e / ou com embalagem adequada; e (b) instru- ções de uso, por exemplo, instruções escritas sobre como administrar o composto.

[0028] Outro aspecto da presente invenção refere-se a um com- posto de APPAMP obtido por um método de síntese como aqui des- crito, ou um método compreendendo um método de síntese como aqui descrito.

[0029] Outro aspecto da presente invenção refere-se a um com- posto de APPAMP obtido por um método de síntese como aqui des- crito, ou um método compreendendo um método de síntese como aqui descrito.

[0030] Outro aspecto da presente invenção refere-se a novos in- termediários, como descritos aqui, que são adequados para uso nos métodos de síntese descritos aqui.

[0031] Outro aspecto da presente invenção refere-se ao uso de tais novos intermediários, como aqui descrito, nos métodos de síntese descritos aqui.

[0032] Como será apreciado por um especialista na técnica, carac- terísticas e modalidades preferidas de um aspecto da invenção da mesma forma pertencerão a outros aspectos da invenção.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO Compostos

[0033] Um aspecto da presente invenção refere-se a certos com- postos que estão relacionados a pirazolo[1,5-a]pirimidina-5,7-diamina: 1 7 6 2 5 3 4

[0034] Mais especificamente, os compostos estão relacionados a 4-[[(7-aminopirazolo[1,5-a]pirimidin-5-il)amino]metil]piperidin-3-ol:

[0035] Ainda mais especificamente, os compostos são certos compostos substituídos de 4-[[(7-aminopirazolo[1,5-a]pirimidin-5- il)amino]metil]piperidin-3-ol que têm a seguinte fórmula estrutural, em que R3, R6 e R7 são como aqui definidos: .

[0036] Desse modo, um aspecto da presente invenção é um com- posto selecionado a partir de compostos das fórmulas a seguir, ou um sal, hidrato ou solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo (por conveniência, aqui referido coletivamente como compostos de "4[[(7- aminopirazolo[1,5-a]pirimidin-5-il)amino]metil]piperidin-3-ol”e “compos- tos de APPAMP”): Código da Nome Estrutura Patente (3R,4R)-4-(((3-etil-7-((2- APPAMP- fluorobenzil)amino)pirazolo[1,5- 001 a]pirimidin-5- il)amino)metil)piperidin-3-ol

Código da Nome Estrutura Patente (3R,4R)-4-(((7-(benzilamino)-3- APPAMP- ciclopropilpirazolo[1,5-a]pirimidin- 002 5-il)amino)metil)piperidin-3-ol 3-(((3-etil-5-((((3R,4R)-3- hidroxipiperidin-4- APPAMP- il)metil)amino)pirazolo[1,5- 003 a]pirimidin-7- il)amino)metil)benzonitrila 3-(((6-cloro-3-etil-5-((((3R,4R)-3- hidroxipiperidin-4- APPAMP- il)metil)amino)pirazolo[1,5- 004 a]pirimidin-7- il)amino)metil)benzonitrila Formas substancialmente purificadas

[0037] Um aspecto da presente invenção refere-se aos compostos de APPAMP, como aqui descrito, na forma substancialmente purifica- da e / ou em uma forma substancialmente livre de contaminantes.

[0038] Em uma modalidade, a forma substancialmente purificada é de pelo menos 50% em peso, por exemplo, pelo menos 60% em peso, por exemplo, pelo menos 70% em peso, por exemplo, pelo menos 80% em peso, por exemplo, pelo menos 90% em peso, por exemplo, pelo menos 95% em peso, por exemplo, pelo menos 97% em peso, por exemplo, pelo menos 98% em peso, por exemplo, pelo menos 99% em peso.

[0039] A menos que de outra maneira especificado, a forma subs- tancialmente purificada refere-se ao composto em qualquer forma es- tereoisomérica ou enantiomérica. Por exemplo, em uma modalidade, a forma substancialmente purificada refere-se a uma mistura de estere- oisômeros, isto é, purificada em relação a outros compostos. Em uma modalidade, a forma substancialmente purificada refere-se a um este- reoisômero, por exemplo, estereoisômero opticamente puro. Em uma modalidade, a forma substancialmente purificada refere-se a uma mis- tura de enantiômeros. Em uma modalidade, a forma substancialmente purificada refere-se a uma mistura equimolar de enantiômeros (isto é, uma mistura racêmica, um racemato). Em uma modalidade, a forma substancialmente purificada refere-se a um enantiômero, por exemplo, enantiômero opticamente puro.

[0040] Em uma modalidade, os contaminantes representam não mais do que 50% em peso, por exemplo, não mais do que 40% em peso, por exemplo, não mais do que 30% em peso, por exemplo, não mais do que 20% em peso, por exemplo, não mais do que 10% em peso, por exemplo, não mais do que 5% em peso, por exemplo, não mais do que 3% em peso, por exemplo, não mais do que 2% em peso, por exemplo, não mais do que 1% em peso.

[0041] A menos que especificado, os contaminantes se referem a outros compostos, ou seja, diferentes de estereoisômeros ou enantiô- meros. Em uma modalidade, os contaminantes se referem a outros compostos e outros estereoisômeros. Em uma modalidade, os conta- minantes se referem a outros compostos e ao outro enantiômero.

[0042] Em uma modalidade, a forma substancialmente purificada é pelo menos 60% opticamente pura (ou seja, 60% do composto, em uma base molar, é o estereoisômero ou enantiômero desejado e 40% é o estereoisômero ou enantiômero indesejado), por exemplo, pelo menos 70% opticamente puro, por exemplo, pelo menos 80% optica- mente puro, por exemplo, pelo menos 90% opticamente puro, por exemplo, pelo menos 95% opticamente puro, por exemplo, pelo menos 97% opticamente puro, por exemplo, pelo menos 98% opticamente puro, por exemplo, pelo menos 99% opticamente puro. Isômeros

[0043] Certos compostos podem existir em uma ou mais formas geométricas, ópticas, enantioméricas, diastereoisoméricas, epiméri- cas, atrópicas, estereoisoméricas, tautoméricas, conformacionais ou anoméricas, incluindo, porém não limitados a, formas cis e trans; For- mas E e Z; formas c, t e r; formas endo- e exo-; formas R, S e meso-; Formas D e L; formas d e l; formas (+) e (-); formas ceto, enol e enola- to; formas syn e anti; formas sinclinal e anticlinal; formas α e β; formas axial e equatorial; formas de barco, cadeira, torção, envelope e meia- cadeira; e combinações dos mesmos, a seguir coletivamente referidos como "isômeros" (ou "formas isoméricas").

[0044] Uma referência a uma classe de estruturas pode muito bem incluir formas estruturalmente isoméricas que se enquadram nessa classe (por exemplo, C1-7 alquila inclui n-propila e isopropila; butila in- clui n, iso, sec e terc butila; metoxifenila inclui orto, meta e para- metoxifenila) Entretanto, a referência a um grupo específico ou padrão de substituição não é pretendida incluir outros isômeros estruturais (ou constitucionais) que diferem com relação às conexões entre átomos e não pelas posições no espaço. Por exemplo, uma referência a um grupo metóxi, -OCH3, não deve ser interpretada como uma referência ao seu isômero estrutural, um grupo hidroximetila, -CH2OH. Similar- mente, uma referência específica ao orto-clorofenila não deve ser in- terpretada como uma referência ao seu isômero estrutural, a metaclo- rofenila.

[0045] A exclusão acima não se refere a formas tautoméricas, por exemplo, formas ceto, enol e enolato, como, por exemplo, os seguin- tes pares tautoméricos: ceto / enol (ilustrado abaixo), imina / enamina, amida / álcool imino, amidina / amidina, nitroso / oxima, tio-cetona / enetiol, N nitroso / hidroxazo e nitro / aci-nitro. Uma referência aqui a um tautômero pretende abranger ambos os tautômeros.

H -H + -

O OH O

C C C C C C +

H ceto keto enol enolato enolate

[0046] Observe que especificamente incluídos no termo "isômero" são compostos com uma ou mais substituições isotópicas. Por exem- plo, H pode estar em qualquer forma isotópica, incluindo 1H, 2H (D) e 3 12 13 H (T); C pode estar em qualquer forma isotópica, incluindo C, Ce 14 16 18 C; O pode estar em qualquer forma isotópica, incluindo Oe O; e similar.

[0047] A menos que de outra maneira especificado, uma referên- cia a um composto específico inclui todas essas formas isoméricas, incluindo misturas (por exemplo, misturas racêmicas). Métodos para a preparação (por exemplo, síntese assimétrica) e separação (por exem- plo, cristalização fracionada e meios cromatográficos) de tais formas isoméricas são conhecidos na técnica ou são facilmente obtidos atra- vés da adaptação dos métodos aqui ensinados, ou métodos conheci- dos, de uma maneira conhecida. Sais

[0048] Pode ser conveniente ou desejável preparar, purificar e / ou manusear um sal correspondente do composto, por exemplo, um sal farmaceuticamente aceitável. Exemplos de sais farmaceuticamente aceitáveis são discutidos em Berge e outro, 1977, "Pharmaceutically Acceptable Salts", J. Pharm. Sci. Vol. 66, pp. 1-19.

[0049] Por exemplo, se o composto é aniônico ou possui um grupo funcional, que pode ser aniônico (por exemplo, -COOH pode ser - COO), em seguida um sal pode ser formado com um cátion adequado. Exemplos de cátions inorgânicos adequados incluem, porém não são limitados a, íons de metais alcalinos, tal como Na+ e K+, cátions alcali- nos terrosos tal como Ca2+ e Mg2+, e outros cátions tais como Al3+, bem como o íon amônio (ou seja, NH4+). Exemplos de cátions orgâni-

cos adequados incluem, porém não são limitados a, íons de amônio substituídos (por exemplo, NH3R+, NH2R2+, NHR3+, NR4+), por exem- plo, onde cada R é independentemente C1-18 alquila saturada linear ou ramificada, C3-8 cicloalquila, C3-8cicloalquil-C1-6 alquila e fenil-C1- 6alquila, em que o grupo fenila é opcionalmente substituído. Exemplos de alguns íons de amônio substituído adequados são aqueles deriva- dos de: etilamina, dietilamina, dicicloexilamina, trietilamina, butilamina, etilenodiamina, etanolamina, dietanolamina, piperazina, benzilamina, fenilbenzilamina, colina, meglumina e trometamina, bem como amino- ácidos, como lisina e arginina. Um exemplo de um íon de amônio qua- ternário comum é N (CH3)4+.

[0050] Se o composto é catiônico ou possui um grupo funcional, que sob protonação pode se tornar catiônico (por exemplo, -NH2 pode se tornar -NH3+), em seguida um sal pode ser formado com um ânion adequado.

[0051] Por exemplo, se uma estrutura parental contém um grupo catiônico (por exemplo, -NMe2+) ou tem um grupo funcional, que sob protonação pode se tornar catiônico (por exemplo, -NH2 pode se tornar NH3+), em seguida um sal pode ser formado com um ânion adequado. No caso de um composto de amônio quaternário, um contra-ânion está geralmente sempre presente para equilibrar a carga positiva. Se, além de um grupo catiônico (por exemplo, -NMe2+, NH3+), o composto da mesma forma contém um grupo capaz de formar um ânion (por exem- plo, -COOH), em seguida um sal interno (da mesma forma conhecido como zwiteríon) pode ser formado.

[0052] Exemplos de ânions inorgânicos adequados incluem, po- rém não são limitados a, aqueles derivados dos seguintes ácidos inor- gânicos: clorídrico, bromídrico, iodídrico, sulfúrico, sulfuroso, nítrico, nitroso, fosfórico e fosforoso.

[0053] Exemplos de ânions orgânicos adequados incluem, entre outros, os derivados dos seguintes ácidos orgânicos: 2- acetiloxibenzóico, acético, trifluoroacético, ascórbico, aspártico, ben- zóico, canforossulfônico, cinâmico, cítrico, edético, 1,2- etanodissulfônico, etanossulfônico, fumárico, glucoeptônico, glucônico, glutâmico, glicólico, hidroxmaleico, hidroxinaftaleno carboxílico, isetô- nico, lático, lactobiônico, láurico, maleico, málico, metanossulfônico, mucoso, oleico, oxálico, palmítico, pamênico, pantotênico, fenilacético, salila, esteárico, sucínico, sulfanílico, tartárico, toluenossulfônico e va- lérico. Exemplos de ânions orgânicos poliméricos adequados incluem, porém não são limitados a, aqueles derivados dos seguintes ácidos poliméricos: ácido tânico, carboximetil celulose.

[0054] A menos que de outra maneira especificado, uma referên- cia a um composto particular da mesma forma inclui suas formas de sal. Solvatos e Hidratos

[0055] Pode ser conveniente ou desejável preparar, purificar e / ou manusear um solvato correspondente do composto. O termo "solvato" é usado aqui no sentido convencional para se referir a um complexo de soluto (por exemplo, composto, sal de composto) e solvente. Se o solvente for água, o solvato pode ser convenientemente referido como um hidrato, por exemplo, um monoidrato, um di-hidrato, um tri-hidrato, etc.

[0056] A menos que de outra maneira especificado, uma referên- cia a um composto particular da mesma forma inclui suas formas de solvato e hidrato. Formas quimicamente protegidas

[0057] Pode ser conveniente ou desejável preparar, purificar e / ou manusear o composto em uma forma quimicamente protegida. O ter- mo "forma quimicamente protegida" é usado aqui no sentido químico convencional e refere-se a um composto em que um ou mais grupos funcionais reativos são protegidos de reações químicas indesejáveis sob condições especificadas (por exemplo, pH, temperatura, radiação, solvente e similar). Na prática, métodos químicos bem conhecidos são empregados para tornar reversivelmente não reativo um grupo funcio- nal, que de outra forma seria reativo, sob condições especificadas. Em uma forma quimicamente protegida, um ou mais grupos funcionais reativos estão na forma de um grupo protegido ou protetor (alternati- vamente como um grupo mascarado ou de mascaramento ou um gru- po bloqueado ou bloqueador). Ao proteger um grupo funcional reativo, as reações que envolvem outros grupos funcionais reativos não prote- gidos podem ser realizados sem afetar o grupo protegido; o grupo pro- tetor pode ser removido ou o grupo de mascaramento transformado, usualmente em uma etapa subsequente, sem substancialmente afetar o restante da molécula. Veja, por exemplo, Protective Groups in Orga- nic Synthesis (T. Green e P. Wuts; 4ª Edição; John Wiley e Sons, 2006).

[0058] Uma ampla variedade desses métodos de "proteção", "blo- queio" ou "mascaramento" é amplamente utilizada e bem conhecida na síntese orgânica. Por exemplo, um composto que possui dois gru- pos funcionais reativos não equivalentes, os quais seriam reativos sob condições especificadas, pode ser derivado para tornar um dos grupos funcionais "protegido" e, portanto, não reativo, sob as condições espe- cificadas; desse modo protegido, o composto pode ser utilizado como um reagente que tem efetivamente apenas um grupo funcional reativo. Após a reação desejada (envolvendo o outro grupo funcional) ser con- cluída, o grupo protegido pode ser "desprotegido" para retornar à sua funcionalidade original.

[0059] Por exemplo, um grupo hidróxi pode ser protegido como éter (-OR) ou éster (-OC(=O)R), por exemplo, como: um éter t-butílico; um éter benzílico, benzidrílico (difenilmetila) ou tritílico (trifenilmetila);

um éter trimetilsilílico ou t butildimetilsilílico; ou um éster acetílico (- OC(=O)CH3, -OAc).

[0060] Por exemplo, um grupo amina pode ser protegido, por exemplo, como uma amida (-NRCO-R) ou um uretano (-NRCO-OR), por exemplo, como: uma acetamida (-NHCO-CH3); um benzilóxi amida (-NHCO-OCH2C6H5, -NH-Cbz); como um t-butoxiamida (-NHCO- OC(CH3)3, -NH-Boc); um 2-bifenil-2-propoxi amida (NHCO- OC(CH3)2C6H4C6H5, -NH-Bpoc), como um 9-fluorenilmetóxi amida (- NH-Fmoc), como um 6-nitroveratrilóxi amida (-NH-Nvoc), como um 2- trimetilsililetilóxi amida (-NH-Teoc), como um 2,2,2-tricloroetilóxi amida (-NH-Troc), como um alilóxi amida (-NH-Alloc), como um 2(- fenilsulfonil)etilóxi amida (-NH Psec); ou, em casos adequados (por exemplo, aminas cíclicas), como um radical nitróxido (>N-O●). Pró-Fármacos

[0061] Pode ser conveniente ou desejável preparar, purificar e / ou manusear o composto na forma de um pró-fármaco. O termo "pró- fármaco", quando aqui utilizado, refere-se a um composto, que produz o composto ativo desejado in vivo. Tipicamente, o pró-fármaco é inati- vo ou menos ativo que o composto ativo desejado, porém pode forne- cer propriedades de manipulação, administração ou metabólicas van- tajosas.

[0062] Por exemplo, alguns pró-fármacos são ésteres do compos- to ativo (por exemplo, um éster metabolicamente lábil fisiologicamente aceitável). Durante o metabolismo, o grupo éster (-C(=O)OR) é clivado para produzir o fármaco ativo. Tais ésteres podem ser formados por esterificação, por exemplo, de qualquer um dos grupos ácido carboxí- lico (-C(=O)OH) no composto original, com, quando apropriado, prote- ção prévia de qualquer outro grupo reativo presente no composto ori- ginal, seguido por desproteção se requerido.

[0063] Além disso, alguns pró-fármacos são ativados enzimatica-

mente para produzir o composto ativo, ou um composto que, após re- ação química adicional, produz o composto ativo (por exemplo, como na terapia de pró-fármaco enzimática dirigida a anticorpos (ADEPT), terapia de pró-fármaco enzimática direcionada a genes (GDEPT), te- rapia pró-fármaco enzimática dirigida a lipídios (LIDEPT), etc.). Por exemplo, o pró-fármaco pode ser um derivado de açúcar ou outro con- jugado de glicosídeo, ou pode ser um derivado de éster de aminoáci- do. Composições

[0064] Um aspecto da presente invenção refere-se a uma compo- sição (por exemplo, uma composição farmacêutica) compreendendo um composto de APPAMP, como aqui descrito, e um veículo, diluente ou excipiente farmaceuticamente aceitável.

[0065] Outro aspecto da presente invenção refere-se a um método de preparação de uma composição (por exemplo, uma composição farmacêutica) compreendendo a mistura de um composto de AP- PAMP, como aqui descrito, e um veículo, diluente ou excipiente farma- ceuticamente aceitável. Usos

[0066] Os compostos de APPAMP descritos aqui são úteis no tra- tamento de, por exemplo, distúrbios proliferativos (como "agentes anti- proliferativos"), câncer (como "agentes anticancerígenos"), infecções virais (como "agentes antivirais"), doenças neurodegenerativas (como "agentes antineurodegenerativos"), etc. Uso em métodos de inibição de CDK

[0067] Um aspecto da presente invenção refere-se a um método de inibição da função CDK (por exemplo, CDK1, CDK2, CDK4, CDK5, CDK6, CDK7, CDK8, CDK9, CDK10, CDK11, CDK12, CDK13, etc.) (por exemplo, em uma célula), in vitro ou in vivo, compreendendo o contato da célula com uma quantidade eficaz de um composto de AP-

PAMP, como aqui descrito.

[0068] Alguém versado na técnica é facilmente capaz de determi- nar se um composto candidato inibe ou não CDK (por exemplo, CDK1, CDK2, CDK4, CDK5, CDK6, CDK7, CDK8, CDK9, CDK10, CDK11, CDK12, CDK13, etc.). Por exemplo, ensaios adequados são descritos aqui ou são conhecidos na técnica.

[0069] Em uma modalidade, o método é realizado in vitro.

[0070] Em uma modalidade, o método é realizado in vivo.

[0071] Em uma modalidade, o composto de APPAMP é fornecido na forma de uma composição farmaceuticamente aceitável.

[0072] Qualquer tipo de célula pode ser tratada, incluindo adiposa, pulmão, gastrointestinal (incluindo, por exemplo, intestino, cólon), ma- ma (mamária), ovário, próstata, fígado (hepática), rim (renal), bexiga, pâncreas, cérebro e pele.

[0073] Por exemplo, uma amostra de células pode ser cultivada in vitro e um composto colocado em contato com as referidas células, e o efeito do composto nessas células é observado. Como um exemplo de "efeito", o estado morfológico das células (por exemplo, vivo ou morto, etc.) pode ser determinado. Onde o composto é constatado exercer influência nas células, isso pode ser usado como um marcador prog- nóstico ou diagnóstico da eficácia do composto em métodos de tratar um paciente carregando células do mesmo tipo celular. Uso em Métodos de Inibir Proliferação Celular, etc.

[0074] Os compostos de APPAMP descritos aqui, por exemplo, (a) regulam (por exemplo, inibem) proliferação celular; (b) inibir a progres- são do ciclo celular; (c) promover apoptose; ou (d) uma combinação de um ou mais deles.

[0075] Um aspecto da presente invenção refere-se a um método de regular (por exemplo, inibir) a proliferação celular (por exemplo, proliferação de uma célula), inibir a progressão do ciclo celular, pro-

mover apoptose ou uma combinação de uma ou mais dessas substân- cias, in vitro ou in vivo, compreendendo contatar uma célula com uma quantidade eficaz de um composto de APPAMP, como aqui descrito.

[0076] Em uma modalidade, o método é um método de regulação (por exemplo, inibição) da proliferação celular (por exemplo, prolifera- ção de uma célula), in vitro ou in vivo, compreendendo contatar uma célula com uma quantidade eficaz de um composto de APPAMP, co- mo aqui descrito.

[0077] Em uma modalidade, o método é realizado in vitro.

[0078] Em uma modalidade, o método é realizado in vivo.

[0079] Em uma modalidade, o composto de APPAMP é fornecido na forma de uma composição farmaceuticamente aceitável.

[0080] Qualquer tipo de célula pode ser tratado, incluindo pulmão, gastrointestinal (incluindo, por exemplo, intestino, cólon), mama (ma- mária), ovário, próstata, fígado (hepático), rim (renal), bexiga, pân- creas, cérebro e pele.

[0081] Alguém versado na técnica é facilmente capaz de determi- nar se um composto candidato regula ou não (por exemplo, inibe) a proliferação celular, etc. Por exemplo, ensaios que podem ser conve- nientemente usados para avaliar a atividade oferecida por um compos- to em particular são descritos aqui.

[0082] Por exemplo, uma amostra de células (por exemplo, de um tumor) pode ser cultivada in vitro e um composto colocado em contato com as referidas células, e o efeito do composto nessas células é ob- servado. Como exemplo de "efeito", o estado morfológico das células (por exemplo, vivo ou morto, etc.) pode ser determinado. Onde o com- posto é constatado exercer influência nas células, isso pode ser usado como um marcador prognóstico ou diagnóstico da eficácia do compos- to nos métodos de tratar um paciente carregando células do mesmo tipo celular.

Uso em Métodos de Terapia

[0083] Outro aspecto da presente invenção refere-se a um com- posto de APPAMP, como aqui descrito, para uso em um método de tratamento do corpo humano ou animal por terapia, por exemplo, para usar um método de tratamento de um distúrbio (por exemplo, uma do- ença) como aqui descrito. Uso na Fabricação de Medicamentos

[0084] Outro aspecto da presente invenção refere-se à utilização de um composto de APPAMP, como aqui descrito, na fabricação de um medicamento, por exemplo, para uso em um método de tratamen- to, por exemplo, para utilização de um método de tratamento de um distúrbio (por exemplo, uma doença) como aqui descrito.

[0085] Em uma modalidade, o medicamento compreende o com- posto de APPAMP. Métodos de Tratamento

[0086] Outro aspecto da presente invenção refere-se a um método de tratamento, por exemplo, um método de tratamento de um distúrbio (por exemplo, uma doença) como aqui descrito, compreendendo a administração a um indivíduo em necessidade de tratamento de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de APPAMP, como aqui descrito, de preferência na forma de uma composição far- macêutica. Distúrbios tratados

[0087] Em uma modalidade (por exemplo, para uso em métodos de terapia, de uso na fabricação de medicamentos, de métodos de tra- tamento), o tratamento é o tratamento de: um distúrbio (por exemplo, uma doença) que está associado à CDK; um distúrbio (por exemplo, uma doença) resultante de uma atividade inadequada de uma CDK; um distúrbio (por exemplo, uma doença) que está associado à muta- ção de CDK; um distúrbio (por exemplo, uma doença) que está asso-

ciado à superexpressão de CDK; um distúrbio (por exemplo, uma do- ença) que está associado à ativação da trilha a montante de CDK; um distúrbio (por exemplo, uma doença) que é melhorado pela inibição (por exemplo, inibição seletiva) de CDK.

[0088] Em uma modalidade (por exemplo, para uso em métodos de terapia, de uso na fabricação de medicamentos, de métodos de tra- tamento), o tratamento é o tratamento de: um distúrbio proliferativo; câncer; uma infecção viral (por exemplo, HIV); um distúrbio neurode- generativo (por exemplo, doença de Alzheimer, doença de Parkinson); isquemia; uma doença renal; um distúrbio cardiovascular (por exem- plo, aterosclerose); ou um distúrbio autoimune (por exemplo, artrite reumatoide). Distúrbios Tratados - Distúrbios Associados com CDK

[0089] Em uma modalidade (por exemplo, para uso em métodos de terapia, de uso na fabricação de medicamentos, de métodos de tra- tamento), o tratamento é o tratamento de um distúrbio (por exemplo, uma doença) associado à CDK (por exemplo, CDK1, CDK2, CDK4, CDK5, CDK6, CDK7, CDK8, CDK9, CDK10, CDK11, CDK12, CDK13, etc.), especialmente CDK7.

[0090] Em uma modalidade, o tratamento é o tratamento de: um distúrbio (por exemplo, uma doença) resultante de uma atividade ina- dequada de uma CDK (por exemplo, CDK1, CDK2, CDK4, CDK5, CDK6, CDK7, CDK8, CDK9, CDK10, CDK11, CDK12, CDK13 etc.), especialmente CDK7.

[0091] Em uma modalidade, o tratamento é o tratamento de: um distúrbio (por exemplo, uma doença) que está associado à mutação de CDK; superexpressão de CDK (por exemplo, em comparação com as células normais correspondentes; por exemplo, em que a superex- pressão é por um fator de 1,5, 2, 3, 5, 10, 20 ou 50); ou trilha de ativa- ção a montante de CDK.

[0092] Em uma modalidade, o tratamento é o tratamento de um distúrbio (por exemplo, uma doença) que é melhorado pela inibição (por exemplo, inibição seletiva) de CDK (por exemplo, CDK1, CDK2, CDK4, CDK5, CDK6, CDK7, CDK8, CDK9, CDK10, CDK11, CDK12, CDK13, etc.), especialmente CDK7. Distúrbios Tratados - Distúrbios Proliferativos

[0093] Em uma modalidade (por exemplo, para uso em métodos de terapia, de uso na fabricação de medicamentos, de métodos de tra- tamento), o tratamento é o tratamento de um distúrbio proliferativo.

[0094] O termo "distúrbio proliferativo", quando aqui utilizado, refe- re-se a uma proliferação celular indesejada ou não controlada de célu- las excessivas ou anormais indesejadas, como crescimento neoplásico ou hiperplásico.

[0095] Em uma modalidade, o tratamento é o tratamento de: um distúrbio proliferativo caracterizado por proliferação celular benigna, pré-maligna ou maligna.

[0096] Em uma modalidade, o tratamento é o tratamento de: hi- perplasia; uma neoplasia; um tumor (por exemplo, um histocitoma, um glioma, um astrocoma, um osteoma); câncer; psoríase; uma doença óssea; um distúrbio fibroproliferativo (por exemplo, de tecidos conjunti- vos); fibrose pulmonar; aterosclerose; ou proliferação de células mus- culares lisas nos vasos sanguíneos (por exemplo, estenose ou reeste- nose após angioplastia). Distúrbios Tratados - Câncer

[0097] Em uma modalidade (por exemplo, de uso em métodos de terapia, de uso na fabricação de medicamentos, de métodos de trata- mento), o tratamento é o tratamento de câncer.

[0098] Em uma modalidade, o tratamento é o tratamento de me- tástase de câncer.

[0099] Entre os cânceres estão incluídos:

(1) Carcinomas, incluindo tumores derivados de epitélios es- camosos estratificados (carcinomas de células escamosas) e tumoress surgindo dentro de órgãos ou glândulas (adenocarcinomas). Exemplos incluem mama, cólon, pulmão, próstata, ovário. (2) Sarcomas, incluindo: osteossarcoma e sarcoma osteogêni- co (osso); condrossarcoma (cartilagem); leiomiossarcoma (músculo liso); rabdomiossarcoma (músculo esquelético); sarcoma mesotelial e mesotelioma (revestimento membranoso das cavidades do corpo); fi- brossarcoma (tecido fibroso); angiossarcoma e hemangioendotelioma (vasos sanguíneos); lipossarcoma (tecido adiposo); glioma e astroci- toma (tecido conjuntivo neurogênico encontrado no cérebro); mixos- sarcoma (tecido conjuntivo embrionário primitivo); tumor mesodérmico e mesodérmico misto (tipos mistos de tecido conjuntivo). (3) Mieloma. (4) Tumores hematopoiéticos, incluindo: leucemia mielóide e granulocítica (malignidade das séries de células brancas do sangue mielóides e granulocíticas); leucemia linfática, linfocítica e linfoblástica (malignidade das séries de células sanguíneas linfóides e linfocíticas); policitemia vera (malignidade de vários produtos de células sanguí- neas, porém com predominância de glóbulos vermelhos). (5) Linfomas, incluindo: linfomas de Hodgkin e não Hodgkin. (6) Tipos mistos, incluindo, por exemplo, carcinoma adenoes- camoso; tumor mesodérmico misto; carcinossarcoma; teratocarcino- ma.

[00100] Por exemplo, em uma modalidade, o tratamento é o trata- mento de câncer de mama.

[00101] Em uma modalidade, o câncer é caracterizado por, ou ain- da caracterizado por, células-tronco cancerígenas.

[00102] Em uma modalidade, o câncer está associado a CDK (por exemplo, CDK1, CDK2, CDK4, CDK5, CDK6, CDK7, CDK8, CDK9,

CDK10, CDK11, CDK12, CDK13, etc.), especialmente CDK7.

[00103] Em uma modalidade, o câncer é caracterizado por, ou ain- da caracterizado por, atividade inadequada de CDK (por exemplo, CDK1, CDK2, CDK4, CDK5, CDK6, CDK7, CDK8, CDK9, CDK10, CDK11, CDK12, CDK13, etc.), especialmente CDK7.

[00104] Em uma modalidade, o câncer é caracterizado por, ou ain- da caracterizado por superexpressão de CDK (por exemplo, CDK1, CDK2, CDK4, CDK5, CDK6, CDK7, CDK8, CDK9, CDK10, CDK11, CDK12, CDK13, etc.), especialmente CDK7.

[00105] O efeito anticâncer pode surgir através de um ou mais me- canismos, incluindo, entre outros, a regulação da proliferação celular, a inibição da progressão do ciclo celular, a inibição da angiogênese (a formação de novos vasos sanguíneos), a inibição de metástases (a disseminação de um tumor desde sua origem), inibição da migração celular (disseminação de células cancerígenas para outras partes do corpo), inibição da invasão (disseminação de células tumorais em es- truturas normais vizinhas), promoção da apoptose (morte celular pro- gramada), morte por necrose ou indução de morte por autofagia. Os compostos descritos aqui podem ser utilizados no tratamento dos cân- ceres descritos aqui, independentemente dos mecanismos discutidos aqui. Distúrbios Tratados - Infecção Viral

[00106] Em uma modalidade (por exemplo, para uso em métodos de terapia, de uso na fabricação de medicamentos, de métodos de tra- tamento), o tratamento é o tratamento de uma infecção viral.

[00107] Em uma modalidade, o tratamento é o tratamento de uma infecção viral por: (Grupo I:) um vírus dsDNA, por exemplo, um adenovírus, um herpesví- rus, um poxvírus; (Grupo II:) um vírus ssDNA, por exemplo, um parvovírus;

(Grupo III:) um vírus dsRNA, por exemplo, um reovírus; (Grupo IV:) um vírus (+)ssRNA, por exemplo, um picornavírus, um to- gavírus; (Grupo V:) um vírus (-)ssRNA, por exemplo, um ortomixovírus, um ra- bdovírus; (Grupo VI:) um vírus ssRNA-RT, por exemplo, um retrovírus; ou (Grupo VII:) um vírus dsDNA-RT, por exemplo, um hepadnavírus.

[00108] Como usado acima: ds: filamento duplo; ss: +filamento; (+)ssRNA: + RNA do filamento; (-)ssRNA: RNA do filamento; ssRNA- RT: RNA (filamento) com DNA intermediário no ciclo de vida.

[00109] Em uma modalidade, o tratamento é o tratamento de: vírus da imunodeficiência humana (HIV); vírus da hepatite B (HBV); vírus da hepatite C (HCV); vírus do papiloma humano (HPV); citomegalovírus (CMV); ou vírus Epstein Barr (EBV); herpesvírus humano 8 (HHV) as- sociado ao sarcoma de Kaposi; Coxsackievirus B3; Vírus Borna; vírus influenza. Distúrbios Tratados - Distúrbios Autoimunes

[00110] Em uma modalidade (por exemplo, para uso em métodos de terapia, de uso na fabricação de medicamentos, de métodos de tra- tamento), o tratamento é o tratamento de um distúrbio autoimune.

[00111] Em uma modalidade, o tratamento é o tratamento de: um distúrbio auto-imune associado ao tecido conjuntivo, articulações, pele ou olho.

[00112] Em uma modalidade, o tratamento é o tratamento de: artrite reumatoide, lúpus eritematoso sistêmico, psoríase ou síndrome de Sjogren. Tratamento

[00113] O termo "tratamento", quando aqui utilizado no contexto de tratamento de um distúrbio, refere-se geralmente ao tratamento de um humano ou animal (por exemplo, em aplicações veterinárias), em que algum efeito terapêutico desejado é alcançado, por exemplo, a inibição do progresso do distúrbio e inclui uma redução na taxa de progresso, uma interrupção na taxa de progresso, alívio dos sintomas do distúr- bio, melhoria do distúrbio e cura do distúrbio. O tratamento como uma medida profilática (isto é, profilaxia) está da mesma forma incluído. Por exemplo, uso com pacientes que ainda não desenvolveu o distúrbio, porém que correm o risco de desenvolvê-lo, é abrangido pelo termo "tratamento".

[00114] Por exemplo, o tratamento inclui a profilaxia do câncer, re- duzindo a incidência do câncer, aliviando os sintomas do câncer, etc.

[00115] O termo "quantidade terapeuticamente eficaz", quando aqui utilizado, refere-se à quantidade de um composto, ou um material, composição ou forma de dosagem que compreende um composto, que é eficaz para produzir algum efeito terapêutico desejado, proporci- onal a um benefício / risco razoável quando administrado de acordo com o regime de tratamento desejado. Terapias de Combinação

[00116] O termo "tratamento" inclui tratamentos e terapias de com- binação, em que dois ou mais tratamentos ou terapias são combina- dos, por exemplo, sequencialmente ou simultaneamente. Por exemplo, os compostos descritos aqui podem da mesma forma ser utilizados em terapias de combinação, por exemplo, em conjunto com outros agen- tes. Exemplos de tratamentos e terapias incluem quimioterapia (admi- nistração de agentes ativos, incluindo, por exemplo, fármacos, anticor- pos (por exemplo, como em imunoterapia), pró-fármacos (por exem- plo, como em terapia fotodinâmica, GDEPT, ADEPT, etc.); cirurgia; terapia por radiação, terapia fotodinâmica, terapia gênica e dietas con- troladas.

[00117] Um aspecto da presente invenção refere-se a um composto como aqui descrito, em combinação com um ou mais (por exemplo, 1,

2, 3, 4, etc.) agentes terapêuticos adicionais, como descrito abaixo.

[00118] A combinação específica fica a critério do médico, que se- leciona as dosagens usando seu conhecimento geral comum e regi- mes de dosagem conhecidos por um especialista.

[00119] Os agentes (isto é, o composto aqui descrito, mais um ou mais outros agentes) podem ser administrados simultaneamente ou sequencialmente e podem ser administrados em esquemas de doses variados individualmente e por diferentes rotinas. Por exemplo, quando administrados sequencialmente, os agentes podem ser administrados em intervalos bem espaçados (por exemplo, durante um período de 5 a 10 minutos) ou em intervalos mais longos (por exemplo, 1, 2, 3, 4 ou mais horas de intervalo, ou até mais) períodos separados quando re- querido), o regime de dosagem preciso sendo proporcional com as propriedades do(s) agente(s) terapêutico(s).

[00120] Os agentes (isto é, o composto descrito aqui, mais um ou mais outros agentes) podem ser formulados juntos em uma forma de dosagem única ou, alternativamente, os agentes individuais podem ser formulados separadamente e apresentados juntos na forma de um kit, opcionalmente com instruções para seu uso.

[00121] Exemplos de agentes / terapias adicionais que podem ser co-administrados / combinados com o tratamento com os compostos de APPAMP descritos aqui incluem o seguinte: um inibidor de aromatase, por exemplo, exemestano (da mesma forma conhecido como Aromasin), letrozol (da mesma forma conhecido como Femara), anastrozol (da mesma forma conhecido como Arimidex), etc .; um antiestrogênio, por exemplo, faslodex (da mesma forma conhecido como Fulvestrant e ICI182780), tamoxifeno (da mesma for- ma conhecido como Nolvadex), hidroxitamoxifeno, etc.; um bloqueador de Her2, por exemplo, herceptina, pertuzu-

mabe, lapatinibe, etc .; um agente quimioterápico citotóxico, por exemplo, um taxa- no (por exemplo, paclitaxel da mesma forma conhecido como Taxol; docetaxel da mesma forma conhecido como Taxotere), ciclofosfamida, um antimetabolito (por exemplo, carboplatina, capecitabina, gencitabi- na, doxorrubicina, epirubicina, 5-fluorouracila, etc.) etc.

[00122] Desse modo, em uma modalidade, o tratamento compreen- de ainda o tratamento (por exemplo, tratamento simultâneo ou se- quencial) com um agente ativo adicional que é, por exemplo, um inibi- dor de aromatase, um antiestrogênio, um bloqueador de Her2, um agente quimioterapêutico citotóxico, etc. Terapia de Combinação com um Inibidor de Aromatase e / ou um Anti- estrogênio

[00123] O receptor de estrogênio α (ERα) é expresso em 70% dos tumores de mama e é reconhecido como o principal fator de desenvol- vimento e progressão do câncer de mama nesses casos. Consequen- temente, ERα é o alvo predominante para terapias adjuvantes no cân- cer de mama positivo em ERα. A inibição de sua atividade com anties- trogênio e por inibição da biossíntese de estrogênio (por exemplo, usando inibidores da aromatase) reduz a recaída e melhora a sobrevi- da do paciente (veja, por exemplo, Osborne, 1998; Cuzick e outro, 2010). O tamoxifeno (Nolvadex) é um antiestrogênio que atua compe- tindo com o estrogênio pela ligação ao receptor de estrogênio, para inibir a atividade do ERα. É importante ressaltar que muitos pacientes com câncer de mama positivo para ERα recaem sobre essas terapias hormonais, os tumores resistentes permanecem principalmente positi- vos para ERα (veja, por exemplo, Ali e outro, 2002; Johnston e outro, 2003; Ali e outro, 2011; Osborne e outro, 2011).

[00124] O tamoxifeno é um exemplo da classe de antiestrogênio, conhecida como moduladores seletivos de receptores de estrogênio

(SERMs), que são anti-estrogênicos na mama, porém geralmente têm atividades semelhantes ao estrogênio em outros tecidos, como o sis- tema cardiovascular e os ossos. O tamoxifeno tem sido amplamente utilizado como agente adjuvante de primeira linha para o tratamento de câncer de mama ERα positivo em mulheres na pré e pós-menopausa. O fulvestrant (Faslodex) é um antiestrogênio que compete com o es- trogênio pela ligação ao ERα para impedir sua ativação, porém da mesma forma promoves regulação negativa da proteína ERα. Como tal, o fulvestrant é um exemplo da classe de antiestrogênios, conheci- dos como reguladores negativos de recepção seletiva de estrogênio (SERD). O fulvestrant é utilizado principalmente no tratamento de pa- cientes com câncer de mama ERα positivo que apresentam recorrên- cia após o tratamento com agentes adjuvantes de primeira linha, como o tamoxifeno.

[00125] A aromatase é uma enzima do citocromo P450 que catalisa a etapa limitante da conversão de andrógenos em estrógenos. Clini- camente, o anastrozol (Arimidex) e o letrozol (Femara) são inibidores competitivos do complexo de aromatase, enquanto o exemestano (Aromasin) é um inibidor irreversível da aromatase. Os inibidores de aromatase atuam inibindo a biossíntese de estrogênios e, desse mo- do, os níveis de estrogênios circulantes e, consequentemente, limitan- do a disponibilidade de estrogênio, impedem a ativação do ERα.

[00126] A ligação do estrogênio à proteína ERα ocorre no domínio de ligação ao ligante (hormônio) (LBD), que é C terminal ao domínio de ligação ao DNA (DBD), para promover a dimerização do ERα, loca- lização nuclear e ligação ao DNA nas regiões reguladoras dos genes alvo, para regular a expressão dos referidos genes alvo. A fosforilação de ERα fornece um mecanismo chave para regular a atividade de ERα, incluindo a ligação ao DNA e a ativação da transcrição. Em parti- cular, a fosforilação de ERα na serina 118 em uma região N terminal ao DBD que é importante para a ativação da transcrição por ERα (co- nhecida como função de ativação da transcrição 1 (AF-1)) é um dos primeiros eventos na ativação do ERα. A fosforilação da serina 118 é mediada pelo recrutamento estimulado por estrogênio do complexo do fator de transcrição, TFIIH, que inclui CDK7.O recrutamento de TFIIH estimulado por estrogênio no LBD ligado ao estrogênio permite a fos- forilação da serina 118 mediada por CDK7, para promover a atividade de ERα. condições de baixos níveis de estrogênio, como gerados por inibidores de aromatase, e levam à ativação do ERα ligado ao tamoxi- feno (veja, por exemplo, Ali e outro, 1993; Chen e outro, 2000; Chen e outro, 2002).

[00127] Estas constatações fornecem a base para o uso de um composto de APPAMP, como descrito aqui, em combinação com um inibidor de aromatase ou um antiestrogênio, para o tratamento de pa- cientes com câncer de mama. Tal terapia combinada seria especial- mente útil no tratamento de pacientes com câncer de mama após o surgimento de resistência ao inibidor de aromatase ou antiestrogênio. Tal terapia combinada da mesma forma permitiria o uso de quantida- des reduzidas e / ou concentrações do composto de APPAMP, o anti- estrogênio e / ou o inibidor de aromatase, a fim de reduzir a toxicidade.

[00128] Estudos demonstrando os efeitos sinérgicos da combinação de um determinado composto pirazolo[1,5-a]pirimidina-5,7-diamina (PPDA-001, da mesma forma conhecido como ICEC0942) com um antiestrogênio (4-hidroxitamoxifeno ou Faslodex) na linhagem celular de câncer de mama MCF-7 ERα-positiva responsivo a estrogênio é descrita em Bondke e outro, 2015. Os agentes atuam cooperativamen- te para inibir o crescimento de células de câncer de mama.

[00129] Desse modo, em uma modalidade, o tratamento compreen- de ainda o tratamento (por exemplo, tratamento simultâneo ou se- quencial) com um agente ativo adicional que é um inibidor de aroma-

tase, por exemplo, exemestano (da mesma forma conhecido como Aromasina), letrozol (da mesma forma conhecido como Femara) ou anastrozol (da mesma forma conhecido como Arimidex). Em uma mo- dalidade, o distúrbio é o câncer de mama (por exemplo, câncer de mama que é resistente ao referido inibidor de aromatase).

[00130] Da mesma forma, em uma modalidade, o tratamento com- preende ainda o tratamento (por exemplo, tratamento simultâneo ou sequencial) com um agente ativo adicional que é um antiestrogênio, por exemplo, faslodex (da mesma forma conhecido como Fulvestrant e ICI182780), tamoxifeno (da mesma forma conhecido como Nolvadex) ou hidroxitamoxifeno. Em uma modalidade, o distúrbio é câncer de mama (por exemplo, câncer de mama que é resistente ao referido an- tiestrogênio). Outros usos

[00131] Os compostos de APPAMP descritos aqui podem da mes- ma forma ser usados como aditivos de cultura de células para inibir CDK (por exemplo, CDK1, CDK2, CDK4, CDK5, CDK6, CDK7, CDK8, CDK9, CDK10, CDK11, CDK12, CDK13, etc.).

[00132] Os compostos de APPAMP descritos aqui podem da mes- ma forma ser utilizados como parte de um ensaio in vitro, por exemplo, para determinar se é provável que um hospedeiro candidato se benefi- cie do tratamento com o composto em questão.

[00133] Os compostos de APPAMP descritos aqui podem da mes- ma forma ser usados como padrão, por exemplo, em um ensaio, a fim de identificar outros compostos ativos, outras CDK (por exemplo, CDK1, CDK2, CDK4, CDK5, CDK6, CDK7, CDK8, CDK9, CDK10, CDK11, CDK12, CDK13, etc.) inibidores, etc. Kits

[00134] Um aspecto da invenção refere-se a um kit compreendendo (a) um composto de APPAMP como aqui descrito, ou uma composição compreendendo um composto de APPAMP como aqui descrito, por exemplo, de preferência fornecido em um recipiente adequado e / ou com embalagem adequada; e (b) instruções de uso, por exemplo, ins- truções escritas sobre como administrar o composto ou composição.

[00135] As instruções escritas podem da mesma forma incluir uma lista de indicações para as quais o ingrediente ativo é um tratamento adequado. Rotinas de Administração

[00136] O composto de APPAMP ou composição farmacêutica compreendendo o composto de APPAMP pode ser administrado a um indivíduo por qualquer rotina conveniente de administração, seja sis- temática / periférica ou tópica (isto é, no local da ação desejada).

[00137] Exemplos de rotinas de administração incluem oral (por exemplo, por ingestão); bucal; sublingual; transdérmica (incluindo, por exemplo, um adesivo, gesso, etc.); transmucosal (incluindo, por exem- plo, um adesivo, gesso, etc.); intranasal (por exemplo, por spray na- sal); ocular (por exemplo, por colírios); pulmonar (por exemplo, por ina- lação ou terapia de insuflação usando, por exemplo, via aerossol, por exemplo, através da boca ou nariz); retal (por exemplo, por supositório ou enema); vaginal (por exemplo, por pessário); parenteral, por exem- plo, por injeção, incluindo subcutânea, intradérmica, intramuscular, in- travenosa, intra-arterial, intracardíaca, intratecal, intra-espinhal, intra- capsular, subcapsular, intraorbital, intraperitoneal, intratraqueal, subcu- ticular, intra-articular, subaracnóidea e intraesternal; por implante de um depósito ou reservatório, por exemplo, por via subcutânea ou in- tramuscular. O Indivíduo/Paciente

[00138] O indivíduo/paciente pode ser um cordado, um vertebrado, um mamífero, um mamífero placentário, um marsupial (por exemplo, canguru, vombate), um roedor (por exemplo, um porquinho da índia,

um hamster, um rato, um camundongo), murino (por exemplo, um ca- mundongo), um lagomorfo (por exemplo, um coelho), aves (por exem- plo, um pássaro), canino (por exemplo, um cachorro), felino (por exemplo, um gato), equino (por exemplo, um cavalo), porcino (por exemplo, um porco), ovino (por exemplo, uma ovelha), bovino (por exemplo, uma vaca), um primata, símio (por exemplo, um macaco ou símio), um macaco (por exemplo, sagui, babuíno), um símio (por exemplo, gorila , chimpanzé, orangotango, gibão) ou um ser humano.

[00139] Além disso, o indivíduo/paciente pode ser qualquer uma de suas formas de desenvolvimento, por exemplo, um feto.

[00140] Em uma modalidade preferida, o indivíduo/paciente é um humano. Formulações

[00141] Embora seja possível administrar um composto de AP- PAMP sozinho, é preferível apresentá-lo como uma formulação farma- cêutica (por exemplo, composição, preparação, medicamento) com- preendendo pelo menos um composto de APPAMP, como descrito aqui, juntamente com um ou mais outros medicamentos farmaceuti- camente ingredientes aceitáveis bem conhecidos dos especialistas na técnica, incluindo veículos, diluentes, excipientes, adjuvantes, cargas, tampões, conservantes, anti-oxidantes, lubrificantes, estabilizantes farmaceuticamente aceitáveis, solubilizadores, tensoativos (por exem- plo, agentes umectantes), agentes de mascaramento, agentes colo- rantes, agentes aromatizantes e adoçantes. A formulação pode tam- bém compreender outros agentes ativos, por exemplo, outros agentes terapêuticos ou profiláticos.

[00142] Desse modo, a presente invenção também fornece compo- sições farmacêuticas, como definidas acima, e métodos para fabricar uma composição farmacêutica compreendendo misturar pelo menos um composto de APPAMP, como descrito aqui, juntamente com um ou mais outros ingredientes farmaceuticamente aceitáveis bem conheci- dos dos especialistas na técnica, por exemplo, veículos, diluentes, ex- cipientes, etc. Se formulados como unidades discretas (por exemplo, comprimidos, etc.), cada unidade contém uma quantidade predetermi- nada (dosagem) do composto.

[00143] O termo "farmaceuticamente aceitável", quando aqui utili- zado, refere-se a compostos, ingredientes, materiais, composições, formas de dosagem, etc., que estão, dentro do escopo de um julga- mento médico sólido, adequado para uso em contato com os tecidos do indivíduo em questão (por exemplo, humano) sem toxicidade ex- cessiva, irritação, resposta alérgica ou outro problema ou complicação, proporcional a uma relação benefício / risco razoável. Cada veículo, diluente, excipiente, etc. deve da mesma forma ser "aceitável" no sen- tido de ser compatível com os outros ingredientes da formulação.

[00144] Veículos adequados, diluentes, excipientes, etc. podem ser encontrados em textos farmacêuticos padrões, por exemplo, Reming- ton's Pharmaceutical Sciences, 18ª edição, Mack Publishing Company, Easton, Pa., 1990; e Handbook of Pharmaceutical Excipients, 5ª edi- ção, 2005.

[00145] As formulações podem ser preparadas por quaisquer méto- dos bem conhecidos na técnica de farmácia. Tais métodos incluem a etapa de associar o composto a um veículo, que constitui um ou mais ingredientes acessórios. Em geral, as formulações são preparadas as- sociando uniformemente e intimamente o composto a veículos (por exemplo, veículos líquidos, veículo sólido finamente dividido, etc.) e depois moldando o produto, se necessário.

[00146] A formulação pode ser preparada para proporcionar libera- ção rápida ou lenta; liberação imediata, atrasada, cronometrada ou prolongada; ou uma combinação dos mesmos.

[00147] As formulações podem estar adequadamente na forma de líquidos, soluções (por exemplo, aquosas, não aquosas), suspensões (por exemplo, aquosas, não aquosas), emulsões (por exemplo, óleo em água, água em óleo), elixires xaropes, electuários, antissépticos bucais, gotas, comprimidos (incluindo, por exemplo, comprimidos re- vestidos), grânulos, pós, trociscos, pastilhas, cápsulas (incluindo, por exemplo, cápsulas de gelatina dura e mole), cachimbos, pílulas, ampo- las, bolo, supositórios, pessários, tinturas, géis, pastas, unguentos, cremes, loções, óleos, espumas, sprays, névoas ou aerossóis.

[00148] As formulações podem ser adequadamente fornecidas co- mo um emplastro, emplastro adesivo, bandagem, curativo ou similar que é impregnado com um ou mais compostos e, opcionalmente, um ou mais outros ingredientes farmaceuticamente aceitáveis, incluindo, por exemplo, realçadores de penetração, permeação e absorção. As formulações podem da mesma forma ser adequadamente fornecidas na forma de um depósito ou reservatório.

[00149] O composto pode ser dissolvido, suspenso ou misturado com um ou mais outros ingredientes farmaceuticamente aceitáveis. O composto pode ser apresentado em um lipossoma ou outro microparti- culado que é projetado para atingir o composto, por exemplo, para componentes do sangue ou um ou mais órgãos.

[00150] As formulações adequadas para administração oral (por exemplo, por ingestão) incluem líquidos, soluções (por exemplo, aquo- sas, não aquosas), suspensões (por exemplo, aquosas, não aquosas), emulsões (por exemplo, óleo em água, água em óleo), elixires, xaro- pes, electuários, comprimidos, grânulos, pós, cápsulas, selos, pílulas, ampolas, bolo.

[00151] As formulações adequadas para administração bucal inclu- em antissépticos bucais, trociscos, pastilhas, bem como emplastros, emplastros adesivos, depósitos e reservatórios. Perdas tipicamente compreendem o composto em uma base aromatizada, geralmente sa-

carose e acácia ou tragacanto. As pastilhas compreendem tipicamente o composto em uma matriz inerte, como gelatina e glicerina, ou saca- rose e acácia. Antissépticos bucais compreendem tipicamente o com- posto em um veículo líquido adequado.

[00152] As formulações adequadas para administração sublingual incluem comprimidos, trociscos, pastilhas, cápsulas e pílulas.

[00153] As formulações adequadas para administração transmuco- sal oral incluem líquidos, soluções (por exemplo, aquosas, não aquo- sas), suspensões (por exemplo, aquosas, não aquosas), emulsões (por exemplo, óleo em água, água em óleo), antissépticos bucais, tro- ciscos, pastilhas, bem como emplastros, emplastros adesivos, depósi- tos e reservatórios.

[00154] As formulações adequadas para administração transmuco- sal não oral incluem líquidos, soluções (por exemplo, aquosas, não aquosas), suspensões (por exemplo, aquosas, não aquosas), emul- sões (por exemplo, óleo em água, água em óleo), supositórios, pessá- rios, géis, pastas, unguentos, cremes, loções, óleos, bem como em- plastros, emplastros adesivos, depósitos e reservatórios.

[00155] As formulações adequadas para administração transdérmi- ca incluem géis, pastas, unguentos, cremes, loções e óleos, bem co- mo adesivos, emplastros adesivos, ataduras, pensos, depósitos e re- servatórios.

[00156] Os comprimidos podem ser feitos por meios convencionais, por exemplo, compressão ou moldagem, opcionalmente com um ou mais ingredientes acessórios. Os comprimidos comprimidos podem ser preparados comprimindo em uma máquina adequada o composto em uma forma de fluxo livre, como um pó ou grânulos, opcionalmente mis- turado com um ou mais ligantes (por exemplo, povidona, gelatina, acácia, sorbitol, tragacanto, hidroxipropilmetil celulose); cargas ou di- luentes (por exemplo, lactose, celulose microcristalina, hidrogenofosfa-

to de cálcio); lubrificantes (por exemplo, estearato de magnésio, talco, sílica); desintegrantes (por exemplo, glicolato de amido de sódio, povi- dona reticulada, carboximetilcelulose sódica reticulada); agentes ten- soativos ou dispersantes ou umectantes (por exemplo, lauril sulfato de sódio); conservantes (por exemplo, p-hidroxibenzoato de metila, p- hidroxibenzoato de propila, ácido sórbico); aromatizantes, agentes in- tensificadores de sabor e adoçantes. Os comprimidos podem ser feitos moldando em uma máquina adequada uma mistura do composto em pó umedecido com um diluente líquido inerte. Os comprimidos podem opcionalmente ser revestidos ou marcados e podem ser formulados de modo a proporcionar uma liberação lenta ou controlada do composto, utilizando, por exemplo, hidroxipropilmetil celulose em proporções va- riáveis para fornecer o perfil de liberação desejado. Os comprimidos podem opcionalmente ser fornecidos com um revestimento, por exem- plo, para afetar a liberação, por exemplo, um revestimento entérico, para proporcionar liberação em outras partes do intestino que não o estômago.

[00157] Os unguentos são tipicamente preparados a partir do com- posto e de uma base de unguento parafínico ou miscível em água.

[00158] Os cremes são tipicamente preparados a partir do compos- to e de uma base de creme de óleo em água. Se desejado, a fase aquosa da base de creme pode incluir, por exemplo, pelo menos cerca de 30% p / p de um álcool poli-hídrico, isto é, um álcool com dois ou mais grupos hidroxila, como propilenoglicol, butano-1,3-diol, manitol, sorbitol, glicerol e polietileno glicol e suas misturas. As formulações tópicas podem desejavelmente incluir um composto que melhora a ab- sorção ou penetração do composto através da pele ou outras áreas afetadas. Exemplos de tais intensificadores de penetração dérmica incluem dimetilsulfóxido e análogos relacionados.

[00159] As emulsões são tipicamente preparadas a partir do com-

posto e de uma fase oleosa, que pode opcionalmente compreender apenas um emulsificante (da mesma forma conhecido como emulgen- te), ou pode compreender uma mistura de pelo menos um emulsifican- te com uma gordura ou um óleo ou com uma gordura e um óleo. De preferência, um emulsificante hidrofílico é incluído juntamente com um emulsificante lipofílico que atua como um estabilizador. É da mesma forma preferido incluir igualmente óleo e gordura. Juntos, o(s) emulsifi- cante(s) com ou sem estabilizador(es) compõe a denominada cera emulsificante, e a cera juntamente com o óleo e / ou a gordura formam a denominada base de unguento emulsificante que forma a fase ole- osa dispersa das formulações de creme.

[00160] Emulgentes e estabilizadores de emulsão adequados inclu- em Tween 60, Span 80, álcool cetostearílico, álcool miristílico, mo- noestearato de glicerila e lauril sulfato de sódio. A escolha de óleos ou gorduras adequados para a formulação baseia-se na obtenção das propriedades cosméticas desejadas, uma vez que a solubilidade do composto na maioria dos óleos susceptíveis de serem utilizados em formulações de emulsão farmacêutica pode ser muito baixa. Desse modo, o creme deve preferencialmente ser um produto não oleoso, não manchado e lavável com consistência adequada para evitar va- zamentos de tubos ou outros recipientes. Ésteres alquílicos mono ou dibásicos de cadeia linear ou ramificada, tal como di-isoadipato, estea- rato de isocetila, diéster de propileno glicol de ácidos graxos de coco, miristato de isopropila, oleato de decila, palmitato de isopropila, estea- rato de butila, palmitato de 2-etilexila ou uma mistura de ésteres de cadeia ramificada conhecido como Crodamol CAP pode ser utilizado, sendo os três últimos ésteres preferidos. Estes podem ser usados sozinhos ou em combinação, dependendo das propriedades necessá- rias. Alternativamente, lípidos com alto ponto de fusão, tal como para- fina branca macia e / ou parafina líquida ou outros óleos minerais po-

dem ser utilizados.

[00161] As formulações adequadas para administração intranasal, em que o veículo é um líquido, incluem, por exemplo, spray nasal, go- tas nasais ou por administração de aerossol por nebulizador, incluem soluções aquosas ou oleosas do composto.

[00162] As formulações adequadas para administração intranasal, em que o veículo é um sólido, incluem, por exemplo, aquelas apresen- tadas como um pó grosso com um tamanho de partícula, por exemplo, na faixa de cerca de 20 a cerca de 500 mícrones, que é administrado da maneira em que o rapé é tomado, ou seja, por inalação rápida atra- vés da passagem nasal de um recipiente do pó mantido próximo ao nariz.

[00163] As formulações adequadas para administração pulmonar (por exemplo, por terapia de inalação ou insuflação) incluem aquelas apresentadas como spray aerossol de uma embalagem pressurizada, com o uso de um propelente adequado, tal como diclorodifluorometa- no, triclorofluorometano, diclorotetrafluoroetano, dióxido de carbono ou outros gases adequados.

[00164] As formulações adequadas para administração ocular in- cluem colírios em que o composto é dissolvido ou suspenso em um veículo adequado, especialmente um solvente aquoso para o compos- to.

[00165] As formulações adequadas para administração retal podem ser apresentadas como um supositório com uma base adequada com- preendendo, por exemplo, óleos naturais ou endurecidos, ceras, gor- duras, polióis semi-líquidos ou líquidos, por exemplo, manteiga de ca- cau ou um salicilato; ou como uma solução ou suspensão para trata- mento por enema.

[00166] As formulações adequadas para administração vaginal po- dem ser apresentadas como pessários, tampões, cremes, géis, pas-

tas, espumas ou formulações para pulverização contendo, além do composto, os veículos que são conhecidos na técnica como apropria- dos.

[00167] As formulações adequadas para administração parenteral (por exemplo, por injeção) incluem líquidos aquosos ou não aquosos, isotônicos, isentos de pirogênio e estéreis (por exemplo, soluções, suspensões), em que o composto é dissolvido, suspenso ou fornecido de outra forma (por exemplo, em um lipossoma ou outro microparticu- lado). Esses líquidos podem adicionalmente conter outros ingredientes farmaceuticamente aceitáveis, tais como antioxidantes, tampões, con- servantes, estabilizantes, bacteriostáticos, agentes de suspensão, es- pessantes e solutos, que tornam a formulação isotônica com o sangue (ou outro fluido corporal relevante) do recipiente pretendido. Exemplos de excipientes incluem, por exemplo, água, álcoois, polióis, glicerol, óleos vegetais e similares. Exemplos de veículos isotônicos adequa- dos para uso em tais formulações incluem injeção de cloreto de sódio, solução de Ringer ou injeção de Ringer com lactato. Tipicamente, a concentração do composto no líquido é de cerca de 1 ng / mL a cerca de 10 µg / mL, por exemplo, de cerca de 10 ng / mL a cerca de 1 µg / mL. As formulações podem ser apresentadas em recipientes selados para doses unitárias ou múltiplas, por exemplo, ampolas e frascos, e podem ser armazenados em uma condição seca por congelamento (liofilizada), requerendo apenas a adição do veículo líquido estéril, por exemplo água para injeções, imediatamente antes do uso. Soluções e suspensões extemporâneas de injeção podem ser preparadas a partir de pós, grânulos e comprimidos estéreis. Dosagem

[00168] Será entendido por um especialista na técnica que as do- sagens apropriadas dos compostos de APPAMP, e composições com- preendendo os compostos de APPAMP, podem variar de paciente pa-

ra paciente. A determinação da dosagem ideal geralmente envolverá o equilíbrio do nível de benefício terapêutico contra qualquer risco ou efeitos colaterais danosos. O nível de dosagem selecionado depende- rá de uma variedade de fatores, incluindo a atividade do composto de APPAMP em particular, a rotina de administração, o tempo de admi- nistração, a taxa de excreção do composto de APPAMP, a duração do tratamento, outros medicamentos, compostos e / ou materiais utiliza- dos em combinação, a gravidade do distúrbio e as espécies, sexo, idade, peso, condição, estado geral de saúde e histórico médico prévio do paciente. A quantidade de composto de APPAMP e a rotina de ad- ministração ficarão a critério do médico, veterinário ou clínico, embora geralmente a dosagem seja selecionada para atingir concentrações locais no sítio da ação que atinjam o efeito desejado sem causar da- nos substanciais ou prejudiciais ou efeitos colaterais danosos.

[00169] A administração pode ser efetuada em uma dose, contínua ou intermitentemente (por exemplo, em doses divididas em intervalos apropriados) ao longo do curso do tratamento. Os métodos para de- terminar os meios e a dosagem de administração mais eficazes são bem conhecidos dos especialistas na técnica e variarão com a formu- lação utilizada para a terapia, o objetivo da terapia, a(s) célula(s) al- vo(s) sendo tratado(s) e o indivíduo sendo tratado. Administrações úni- cas ou múltiplas podem ser realizadas com o nível e o padrão da dose selecionados pelo médico, veterinário ou clínico responsável pelo tra- tamento.

[00170] Em geral, uma dose adequada do composto de APPAMP está na faixa de cerca de 10 µg a cerca de 250 mg (mais tipicamente cerca de 100 µg a cerca de 25 mg) por quilograma de peso corporal do indivíduo por dia. Quando o composto é um sal, um éster, uma amida, um pró-fármaco ou similar, a quantidade administrada é calculada com base no composto original e, desse modo, o peso real a ser usado é aumentado proporcionalmente. Síntese Química

[00171] Os métodos para a síntese química dos compostos de AP- PAMP são descritos aqui. Estes e/ou outros métodos bem conhecidos podem ser modificados e / ou adaptados de maneiras conhecidas, a fim de fornecer métodos alternativos ou melhorados de síntese dos compostos de APPAMP. Abreviações aq: aquoso; Boc: terc-butoxicarbonila; Boc2O: dicarbonato de di-terc-butila; br: amplo; ca .: aproximadamente; d: dupleto; t BuXPhos-Pd-G3: [(2-di-terc-butilfosfino-2′,4′,6′-tri-isopropil-1,1′-bifenil)- 2-(2′-amino-1,1′-bifenil)]metanossulfonato de paládio (II); DCM: diclorometano; dioxano: 1,4-dioxano; DIPEA: di-isopropiletilamina; EtOAc: acetato de etila; EtOH: etanol; h: horas; HPLC: cromatografia líquida de alto desempenho; LCMS: cromatografia líquida - espectrometria de massa; LiHMDS: hexametildisilazida de lítio; m: multipleto; M: molar, íon molecular; MeCN: actetonitrila; MeOH: metanol; min: minutos;

MS: espectrometria de massa; NCS: N-clorossucinimida; NIS: N-iodossucinimida; RMN: ressonância magnética nuclear; PdCl2(dppf)·DCM: [1,1′-Bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaládio(II), complexo com diclorometano; q: quarteto; RT: temperatura ambiente (aproximadamente 20°C); RT: tempo de retenção; s: singuleto, sólido; SCX: troca catiônica forte; t: tripleto; TFA: ácido trifluoroacético; THF: tetra-hidrofurano.

[00172] Outras abreviações são pretendidas abranger seu significa- do geralmente aceito.

[00173] A nomenclatura das estruturas foi gerada usando a conver- são ‘Estrutura a nome’ de ChemDraw® Professional 15 (PerkinElmer). Síntese geral

[00174] Os compostos de APPAMP podem ser preparados, por exemplo, por um método ilustrado no seguinte esquema químico. A formilação de nitrila (I-1) utilizando formato de etila, seguido de con- densação do α-formilnitrila resultante com hidrazina produz aminopi- arazol (I2). A condensação com malonato de dietila, seguida de clora- ção com oxicloreto de fósforo, produz pirazolopirimidina I-3. A substi- tuição aromática nucleofílica com uma amina, seguida pela proteção de Boc, produz 5-aminopirazolopirimidina I-4, que é subsequentemen- te convertida no intermediário I-5 usando uma reação de acoplamento cruzado de Buchwald-Hartwig. A desproteção de Boc do intermediário I-5, por exemplo usando TFA, produz o composto I-6. Opcionalmente,

I-6 é clorado usando NCS para fornecer o análogo de 6-cloro I-7. Esquema 1

[00175] As condições de reação no esquema acima são as seguin- tes: (a) nBuLi, iPr2NH, EtOCHO, THF, 78°C em RT; (b) N2H4 (aq), AcOH, EtOH, 90°C; (c) Na(s), EtOH, malonato de dietila, refluxo; (d) POCl3, PhNMe2, 60-90°C; (e) R2CH2NH2, DIPEA, EtOH, refluxo; (f) Boc2O, DMAP, DCM, RT; (g) tBuXPhos-Pd-G3, LiHMDS, THF, 60°C; (h) TFA, DCM, RT; (i) NCS, DCM, RT.

[00176] Alternativamente, como ilustrado no esquema químico a seguir, o I-5 pode ser preparado por iodação de 5,7- dicloropirazolo[1,5-a]pirimidina, seguido de substituição aromática nu- cleofílica por uma proteção de amina e Boc para fornecer o iodoetero- ciclo I-8, que pode ser convertido para I-5 usando uma reação de aco- plamento Suzuki-Miyaura. Esquema 2

[00177] As condições de reação no esquema acima são as seguin- tes: (a)NIS, MeCN, refluxo; (b) R2CH2NH2, DIPEA, EtOH, refluxo; (c) Boc2O, DMAP, DCM, RT; (d) PdCl2 (dppf) · DCM, K3PO4, PhMe, H2O, 100°C. Exemplos de Síntese Química

[00178] Os exemplos a seguir são fornecidos apenas para ilustrar a presente invenção e não são pretendidos limitar o escopo da invenção, como daqui escritos. Condições experimentais gerais

[00179] Todos os materiais de partida e solventes foram obtidos de fontes comerciais ou preparados de acordo com a citação da literatura. As misturas de reação foram agitadas magneticamente, a menos que de outra maneira indicado.

[00180] A cromatografia de coluna foi realizada em um sistema de cromatografia flash automatizada, como um sistema CombiFlash Rf, usando cartuchos de sílica pré-embalada Grace™ (40 μm), a menos que de outra maneira indicado.

[00181] Os espectros de 1H RMN foram registrados usando um es- pectrômetro Bruker Avance III (400 MHz). Os desvios químicos são expressos em partes por milhão, usando os picos centrais do solvente prótico residual ou um padrão interno de tetrametilsilano como refe- rências. Os espectros foram registados em temperatura ambiente, a menos que de outra maneira indicado.

[00182] As experiências analíticas de LCMS para determinar os tempos de retenção e os íons de massa associados foram realizadas usando um sistema de HPLC da série Agilent 1200 acoplado a um es- pectrômetro de massa com quatro quadrupolos Agilent série 6110 ou 6120, executando o Método 1 ou o Método 2 descrito abaixo.

[00183] As purificações de HPLC preparativas foram realizadas usando uma coluna Waters X-Bridge BEH C18, 5 µm, 19x50 mm, utili-

zando um gradiente de MeCN e bicarbonato de amônio 10 mM (aq). As frações foram coletadas após a detecção por UV em um único comprimento de onda medido por um detector de comprimento de on- da variável.

[00184] A resina SCX foi adquirida de Sigma Aldrich ou Silicycle e lavada com MeOH antes do uso. Métodos analíticos Método 1 - Método ácido de 4 min: Coluna: Waters X-Select CSH C18, 2,5 µm, 4,6x30 mm Detecção: UV a 254 nm, a menos que de outra maneira indicado Ionização MS: Eletrovaporização Solvente A: Água / 0,1% de ácido fórmico Solvente B: MeCN / 0,1% de ácido fórmico Método 1 - Gradiente Tempo %A %B Taxa de fluxo (ml/min) 0,0 95,0 5,0 2,5 3,0 5,0 95,0 2,5 3,01 5,0 95,0 4,5 3,6 5,0 95,0 4,5 3,7 95,0 5,0 2,5 4,0 95,0 5,0 2,5 Método 2 - Método básico de 4 min: Coluna: Waters X-Bridge BEH C18, 2,5 µm, 4,6x30 mm Solvente A: Água / 10 mM de bicarbonato de amônio Solvente B: MeCN (outros parâmetros são os mesmos do método 1) Síntese 1 (3R,4R)-4-(((7-(benzilamino)-3-ciclopropilpirazolo[1,5-a]pirimidin-5- il)amino)metil)piperidin-3-ol (Composto APPAMP-002)

Etapa 1: 5,7-dicloro-3-iodopirazolo[1,5-a]pirimidina

[00185] Uma mistura de 5,7-dicloropirazolo[1,5-a]pirimidina (6,1 g, 32,4 mmol) e NIS (8,03 g, 35,7 mmol) em MeCN (20 ml) foi aquecida sob refluxo por 1 hora. A mistura foi concentrada em vácuo e o resíduo foi dissolvido em DCM (200 ml) e lavado com água (200 ml). A fase orgânica foi secada em Na2SO4(s), filtrada e concentrada em vácuo. A purificação por cromatografia de coluna (cartucho de 220 g, DCM) produziu o composto título (9,1 g, 28,4 mmol, 98% de pureza) como um sólido amarelo cristalino. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6)  8,48 (s, 1H), 7,73 (s, 1H). Etapa 2: (5-cloro-3-iodopirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)carbamato de terc- butilbenzila

[00186] Uma mistura do produto da Etapa 1 acima (2,00 g, 6,24 mmols, 98% de pureza), benzilamina (765 µl, 7,01 mmol) e DIPEA (2,23 ml, 12,7 mmol) em dioxano (20 ml) foi aquecida a 80°C por 2 ho- ras. A mistura foi concentrada em vácuo e o resíduo foi dissolvido em THF (20 ml). Boc2O (2,09 g, 9,58 mmol) e DMAP (78 mg, 0,637 mmol) foram adicionados a esta solução e a mistura resultante foi aquecida a 40°C por 2 horas. A mistura reacional foi concentrada em vácuo e o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (cartucho de 120 g, 0-50% EtOAc / isoexanos) para fornecer o composto título (710 mg, 1,44 mmol, 98% de pureza) como um sólido amarelo. LCMS (Método 2): RT 1,73 min, sem ionização. Etapa 3: (5-cloro-3-ciclopropilpirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)carbamato de terc-butilbenzila

[00187] Uma mistura de ácido ciclopropilborônico (70,9 mg, 0,825 mmol), fosfato de potássio (350 mg, 1,65 mmol), o produto da Etapa 2 acima (400 mg, 0,809 mmol, 98% de pureza) e PdCl2 (dppf) · DCM (13,5 mg , 0,017 mmol) em uma mistura de tolueno (8 ml) e água (1 ml) foi aquecida a 100°C por 5 horas. A mistura foi concentrada em vácuo e o resíduo purificado por cromatografia de coluna (cartucho de 40 g, 0-100% DCM / isoexano) para proporcionar o composto título (225 mg, 0,553 mmol, 98% de pureza) como uma goma amarela es- pessa. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6)  8,10 (s, 1H), 7,34 - 7,18 (m, 5H), 7,12 (s, 1H), 5,00 (s, 2H), 1,97 (tt, J = 8,4, 5,1) Hz, 1H), 1,28 (s, 9H), 0,99 - 0,89 (m, 2H), 0,81 - 0,75 (m, 2H). Etapa 4: (3R,4R)-4-(((7-(benzilamino)-3-ciclopropilpirazolo[1,5- a]pirimidin-5-il)amino)metil)piperidin-3-ol

[00188] Uma solução do produto da Etapa 3 acima (220 mg, 0,541 mmol, 98% de pureza), (3R,4R)4-(aminometil)-3-hidroxipiperidina-1- carboxilato de (3R,4R)-terc-butila (152 mg, 0,682 mmol) e tBu- BrettPhos-Pd-G3 (23,6 mg, 0,028 mmol) em THF (5 ml) foi desgaseifi- cado com N2 por 5 minutos. LiHMDS (1 M em THF) foi adicionado (607 µL, 0,607 mmol) e a mistura foi desgaseificada por mais 5 minutos. A mistura reacional foi aquecida a 60°C por 0,5 hora. A mistura reacional foi deixada resfriar em RT e foi derramada em EtOAc (50 ml). A fase orgânica foi lavada com água (2 x 20 ml), secada em Na2SO4(s), filtra- da e concentrada em vácuo para produzir uma goma marrom. Este material foi dissolvido em HCl 4 M em dioxano (5 ml) e deixado repou- sar durante 1 h. A mistura foi concentrada em vácuo e o resíduo foi carregado em uma coluna de resina SCX (10 g) em MeOH. A coluna foi lavada com MeOH e depois o produto foi eluído com amônia 7 M em MeOH. A fração contendo o produto foi concentrada em vácuo e o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (cartucho de 12 g, 0- 10% (amônia 0,7 M em MeOH) / DCM) para proporcionar o composto título (137 mg, 0,346 mmol, 99% pureza) como um sólido branco.

LCMS (Método 2): m / z 393 (M + H) +, 391 (M-H)- em 1,71 min. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,83 (t, J = 6,5 Hz, 1H), 7,52 (s, 1H), 7,41 - 7,30 (m, 4H), 7,30 - 7,19 (m, 1H), 6,70 ( t, J = 6,1 Hz, 1H), 5,30 (s, 1H), 5,17 (s, 1H), 4,44 (d, J = 6,4 Hz, 2H), 3,61 - 3,41 (m, 1H), 3,25 - 3,13 (m , 1H), 3,03 (tt, J = 9,6, 4,5 Hz, 1H), 2,91 (dd, J = 11,6, 4,5 Hz, 1H), 2,83 - 2,72 (m, 1H), 2,30 (td, J = 12,1, 2,6 Hz, 1H), 2,16 (dd, J = 11,6, 9,9 Hz, 1H), 1,97 (s, 1H), 1,71 (tt, J = 8,4, 5,2 Hz, 1H), 1,61 - 1,49 (m, 1H), 1,40 - 1,26 (m, 1H), 1,22 - 1,05 (m, 1H), 0,82 - 0,70 (m, 2H), 0,71 - 0,56 (m, 2H). Síntese 2 (3R,4R)-4-(((3-etil-7-((2-fluorobenzil)amino)pirazolo[1,5-a]pirimidin-5- il)amino)metil)piperidin-3-ol (Composto APPAMP-001) Etapa 1: (5-cloro-3-etilpirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)(2-fluorobenzil) car- bamato de terc-butila

[00189] Uma mistura de 5,7-dicloro-3-etilpirazolo[1,5-a]pirimidina (95 mg, 0,440 mmol), DIPEA (154 µl, 0,879 mmol) e 2- fluorobenzilamina (60,5 mg, 0,484 mmol) em dioxano ( 5 ml) foi aque- cida a 90°C por 2 horas. A mistura reacional foi extraída em DCM (20 ml) e lavada com água (10 ml). A fase orgânica foi separada e concen- trada em vácuo. O resíduo foi dissolvido em THF (4 ml) e tratado com Boc2O (123 µl, 0,528 mmol), seguido por DMAP (2,69 mg, 0,022 mmol). A mistura resultante foi agitada em RT durante 1 h. A mistura foi concentrada em vácuo e o resíduo purificado por cromatografia de coluna (cartucho de 12 g, 0-50% de EtOAc / isoexano) para proporcio- nar o composto título (219 mg) como uma goma incolor transparente. LCMS (Método 1): m / z 405 (M + H)+ a 2,94 min. Etapa 2: (3R,4R)-4-(((3-etil-7-((2-fluorobenzil)amino)pirazolo[1,5- a]pirimidin-5-il)amino)metil)piperidin-3-ol

[00190] O produto da Etapa 1 acima (140 mg) foi reagido com 4- (aminometil)-3-hidroxipiperidina-1-carboxilato de (3R,4R)-terc-butila

(96 mg, 0,415 mmol), tBuBrettPhos-Pd-G3 (14,8 mg, 0,017 mmol) e LiHMDS (1 M em THF) (346 µl, 0,346 mmol), seguido de HCl 4 M em dioxano (5 ml), usando o procedimento na Síntese 1 Etapa 4 para pro- porcionar o composto título (40 mg, 0,099 mmol, 99% de pureza) como um sólido creme. LCMS (Método 1): m / z 399 (M + H)+ a 0,98 min. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,79 (t, J = 6,4 Hz, 1H), 7,66 (s, 1H), 7,40 - 7,28 (m, 2H), 7,28 - 7,09 (m, 2H), 6,86 - 6,69 (m, 1H), 5,44 (s, 1H), 5,16 (s, 1H), 4,51 (d, J = 6,4 Hz, 2H), 3,63 - 3,47 (m, 1H), 3,23 - 3,13 (m, 1H) , 3,03 (tt, J = 9,5, 4,4 Hz, 1H), 2,92 (dd, J = 11,5, 4,6 Hz, 1H), 2,87 - 2,77 (m, 1H), 2,49 (q, J = 7,5 Hz, 2H), 2,40 - 2,29 (m, 1H), 2,25 - 2,11 (m, 1H), 1,65 - 1,50 (m, 1H), 1,39 - 1,27 (m, 1H), 1,23 - 1,12 (m, 1H), 1,18 (t, J = 7,5 Hz, 3H). Síntese 3 3-(((3-etil-5-((((3R,4R)-3-hidroxipiperidin-4-il)metil)amino)pirazolo[1,5- a]pirimidin-7-il)amino)metil)))benzonitrila (Composto APPAMP-003) Etapa 1: (5-cloro-3-etilpirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)(3-cianobenzil) car- bamato de terc-butila

[00191] Uma mistura de 5,7-dicloro-3-etilpirazolo[1,5-a]pirimidina (136 mg, 0,631 mmol), 3-(aminometil)benzonitrila (100 mg, 0,757 mmol) e DIPEA (220 µl, 1,26 mmol) em dioxano (5 ml) foi aquecida a 90°C por 4 h. A mistura reacional foi concentrada em vácuo e o resí- duo foi dissolvido em DCM (10 ml) e lavado com água (5 ml). A fase orgânica foi secada em Na2SO4, filtrada e concentrada em vácuo. O resíduo foi dissolvido em DCM (5 ml) e tratado com Boc2O (165 mg, 0,757 mmol), seguido por DMAP (3,85 mg, 0,032 mmol). A mistura re-

sultante foi agitada em RT durante 3 h, depois concentrada em vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (coluna de 12 g, 0-50% de EtOAc / isoexano) para proporcionar o composto título (258 mg, 0,583 mmol, 93% de pureza). LCMS (Método 1): m / z 434 (M + Na)+, 356 (M+H-C4H8)+ a 2,87 min. Etapa 2: 3-(((3-etil-5-((((3R,4R)-3-hidroxipiperidin-4-il)metil)amino)pi- razolo[1,5-a]pirimidin-7-il)amino))metil)benzonitrila

[00192] O produto da Etapa 1 acima (258 mg, 0,583 mmol, 93% de pureza) foi reagido com 4-(aminometil)-3-hidroxipiperidina-1-carboxi- lato de (3R,4R)-terc-butila (171 mg, 0,742 mmol), tBuBrettPhos-Pd-G3 (26,4 mg, 0,031 mmol) e LiHMDS (1M em THF) (0,680 ml, 0,680 mmol), seguido por HCl 4 M em dioxano (2 ml), usando o procedimen- to descrito na Etapa 1 da síntese 1, exceto a cromatografia de coluna não foi realizada e, em vez disso, o produto foi purificado por HPLC preparativa (15-35% de MeCN em 10 mM de bicarbonato de amônio (aq)) para fornecer o composto título (31 mg, 0,076 mmol, 99% de pu- reza). LCMS (Método 2): m / z 409 (M + H)+ a 1,59 min. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,96 (t, J = 6,5 Hz, 1H), 7,84 - 7,79 (m, 1H), 7,77 - 7,72 (m, 1H), 7,72 - 7,68 (m, 1H), 7,66 (s, 1H), 7,57 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 6,71 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 5,36 (s, 1H), 5,15 (s, 1H), 4,50 (d, J = 6,5 Hz, 2H), 3,61 - 3,43 (m, 1H), 3,25 - 3,11 (m, 2H), 3,00 (tt, J = 9,5, 4,3 Hz, 1H), 2,90 (dd, J = 11,6, 4,6 Hz, 1H), 2,85 - 2,74 (m, 1H), 2,48 (q, J = 7,5 Hz, 2H), 2,37 - 2,23 (m, 1H), 2,22 - 2,08 (m, 1H), 1,60 - 1,49 (m, 1H), 1,40 - 1,23 (m, 1H), 1,17 (t, J = 7,5 Hz, 3H). Síntese 4 3-(((6-cloro-3-etil-5-((((3R,4R)-3-hidroxipiperidin-4- il)metil)amino)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)))amino)metil)benzonitrila (Composto APPAMP-004)

[00193] Uma solução de 3-(((3-etil-5-((((3R,4R)-3-hidroxipiperidin-4- il)metil)amino)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)amino)))metil)benzonitrila (Composto APPAMP-003) (Síntese 3) (122 mg, 0,301 mmol) em DCM (3 ml) foi tratada com NCS (40,2 mg, 0,301 mmol). A mistura reacional foi agitada em temperatura ambiente por 1 h.

A mistura reacional foi concentrada em vácuo e o resíduo foi purificado por HPLC preparativa (20-50% de MeCN em bicarbonato de amônio 10 mM (aq)) para forne- cer o composto título (17 mg, 0,038 mmol, 98% de pureza) como um pó amarelo.

LCMS (Método 2): m / z 440 (M + H)+ a 1,90 min. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,84 - 7,74 (m, 2H), 7,72 (s, 1H), 7,72 - 7,67 (m, 1H), 7,66 - 7,59 (m, 1H), 7,53 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 6,87 - 6,77 (m, 1H), 5,17 (d, J = 4,4 Hz, 1H), 5,13 (d, J = 7,1 Hz, 2H), 3,66 - 3,50 (m, 1H), 3,30 - 3,20 (m, 1H), 3,19 - 3,06 (m, 1H), 2,92 (dd, J = 11,6, 4,6 Hz, 1H), 2,84 - 2,75 (m, 1H), 2,50 (q, J = 7,6 Hz, 2H ), 2,38-2,26 (m, 1H), 2,23-2,11 (m, 1H), 1,66-1,53 (m, 1H), 1,54-1,41 (m, 1H), 1,18 (t, J = 7,5 Hz, 3H), 1,18 - 1,04 (m, 1H). Métodos e dados biológicos Métodos biológicos Método 1: CDK2 IC50 Materiais e soluções: - HEPES (Sigma, H3375). - Ortovanadato de sódio (Sigma, 450243). - DTT (Sigma). - MgCl2 (Sigma, M1028).

- PEG-20000 (Sigma, 95172). - ADP-Glo (Promega, V9102, inclui ATP). - CDK2 / cycE1 humano (ProQinase, 0050-0055-1). - Histona H1 (Merck Millipore, 14-155). Procedimento de ensaio:

[00194] Uma mistura reacional (6 µL) contendo os seguintes com- ponentes foi preparada: HEPES 60 mM (60 mM, pH 7,5), ortovanadato de sódio (3 µM), PEG-20000 (50 µg / mL), DTT (1,2 mM), MgCl2 ( 3 mM), CDK2/cycE1 humano purificado (4 µg / mL), histona H1 (50 µg / mL), ATP (20 µM) e composto de teste na concentração apropriada, de modo que a concentração final de DMSO fosse de 1% p / p . A mis- tura reacional foi incubada a 30°C por 75 min e depois parada pela adição de Reagente ADP-Glo (6 µL). A reação foi incubada a 25°C por 1 h para esgotar o ATP restante. Subsequentemente, o Reagente de Detecção de Quinase (12 µL) foi adicionado e a reação foi deixada prosseguir por 1 h a 25°C antes da análise por medição de lumines- cência usando uma Leitora de Placas Envision (PerkinElmer). Método 2: CDK7 IC50 Materiais e soluções:

[00195] Além dos mencionados acima para o Método 1: - CDK7 / cycH / MAT1 (ProQinase, 0366-0360-4). - MnCl2 (Sigma, M1787). - CDKtide (SignalChem, C06-58). Procedimento de ensaio:

[00196] Uma mistura reacional (6 µL) contendo os seguintes com- ponentes foi preparada: HEPES 60 mM (60 mM, pH 7,5), ortovanadato de sódio (3 µM), PEG-20000 (50 µg / mL), DTT (1,2 mM), MgCl2 ( 3 mM), MnCl2 (3 mM), CDK7/cycH / MAT1 humano purificado (4 µg / mL), CDKtide (10 µM), ATP (8 µM) e composto de teste na concentra- ção apropriada, de modo que a concentração final de DMSO fosse 1%

p / p. A mistura reacional foi incubada a 30°C por 30 min e depois pa- rada pela adição de Reagente ADP-Glo (6 µL). A reação foi incubada a 25°C por 1 h para esgotar o ATP restante. Subsequentemente, o Rea- gente de Detecção de Quinase (12 µL) foi adicionado e a reação foi deixada prosseguir por 1 h a 25°C antes da análise por medição de luminescência usando uma Leitora de Placas Envision (PerkinElmer). Método 3: CDK9 IC50 Materiais e soluções:

[00197] Além dos mencionados acima para o Método 1: - CDK9 / cycK humano (Promega, V4104). - CDKtide (SignalChem, C06-58). Procedimento de ensaio:

[00198] Uma mistura reacional (6 µL) contendo os seguintes com- ponentes foi preparada: HEPES 60 mM (60 mM, pH 7,5), ortovanadato de sódio (3 µM), PEG-20000 (50 µg / mL), DTT (1,2 mM), MgCl2 ( 3 mM), CDK9 / cycK humano purificado (2,5 µg / mL), CDKtide (35 µM), ATP (8 µM) e composto de teste na concentração apropriada, de modo que a concentração final de DMSO fosse de 1% p / p. A mistura reaci- onal foi incubada a 30°C por 60 min e depois parada pela adição de Reagente ADP-Glo (6 µL). A reação foi incubada a 25°C por 1 h para esgotar o ATP restante. Subsequentemente, o Reagente de Detecção de Quinase (12 µL) foi adicionado e a reação foi deixada prosseguir por 1 h a 25°C antes da análise por medição de luminescência usando uma Leitora de Placas Envision (PerkinElmer). Método 4: Ligação às proteínas plasmáticas humanas (PPB) Materiais e soluções: - Plasma humano (Sera Labs, HMHPLLIHP). - Cloridrato de bupropiona (Sigma, B102). - DPBS (Sigma, D8537). - Ácido fórmico (Sigma, F0507).

- Dispositivo único para uso em RED (Life Technologies, 90006). - Preparação da solução padrão interna: Uma solução de cloridrato de bupropiona (50 µL, 10 mM em DMSO) foi combinada com ácido fórmi- co a 0,1% (1 mL) em acetonitrila (1000 mL). Procedimento de ensaio:

[00199] Uma vez que o plasma congelado foi descongelado e ajus- tado para pH 7,4 usando solução de ácido lático 1 M e uma porção desta mistura (792 µL) combinada com cada solução de composto de teste (8 µL, 0,5 mM em DMSO). Porções do plasma perfurado resul- tante (200 µL) foram adicionadas aos compartimentos de amostras do dispositivo RED. DBPS (350 µL) foi adicionado a cada compartimento de tampão correspondente. Uma amostra inicial (50 µL) foi coletada e, em seguida, a placa RED foi selada e incubada a 37°C por 240 min em um agitador orbital (200 rpm) em uma atmosfera umidificada de CO2 (5%), ao lado de amostras de plasma e DBPS. Cada cavidade de amostra foi tratada com solução padrão interna (300 µL). Alíquotas (50 µL) foram removidas de cada cavidade de tampão e amostra e substi- tuídas por plasma incubado (50 µL) ou DPBS incubado (50 µL), res- pectivamente. A placa foi selada e centrifugada (3500 rpm, 15 min). Alíquotas do sobrenadante (100 µL) foram combinadas com água (50 µL) para análise utilizando um Espectrômetro de Massa Waters TQS. Método 5: taxa de efluxo MDCK-MDR1 Materiais e soluções: - Placa de célula MDCK / MDR1 Ready ™ (Readycell). - Meio de cultura de células com alto nível de glicose (Sigma, D5671) suplementado com: 10% de FBS, 1% de glutamina 200 mM, 1% de penicilina (10.000 U / mL) - estreptomicina (10 mg / mL). - Tampão HBSS (Gibco, 14065-049). - Padrão interno: Bupropiona 0,5 µM em acetonitrila / ácido fórmico a 0,1% (aq) (1: 1 v / v).

Procedimento de ensaio:

[00200] O tampão de ensaio HBSS foi preparado em pH 7,4 e aquecido a 37°C. O meio de cultura de células foi removido da placa Readycell. As células basais foram lavadas com tampão HBSS (3 x 225 µL) e as células Apicais foram lavadas com tampão de HBSS (3 x 75 µL). As células foram aquecidas a 37°C em uma atmosfera de CO2 umidificada (5%) e agitadas a 250 rpm por 30 min. As soluções pa- drões e do composto foram preparadas diluindo cada composto (10 µL, 1 mM em DMSO) com HBSS (990 µL). O tampão foi cuidadosa- mente removido da placa celular Basal, seguido pela placa celular Api- cal. Tampão de HBSS (225 µL) e solução de composto (250 µL) foram adicionados à placa de células basais. Uma alíquota (25 µL) das solu- ções foi combinada com o padrão interno (75 µL) e refrigerada para uso como a amostra t = 0 h. Tampão de HBSS (75 µL) e solução de composto (100 µL) foram adicionados à placa de células Apical. Uma alíquota (25 µL) foi empregada e processada da mesma maneira que para a placa de células basais. As células foram aquecidas a 37°C em uma atmosfera de CO2 umidificada (5%) e agitadas a 250 rpm por 2 horas. Após a incubação, uma alíquota (25 µL) de cada solução basal e apical foi combinada com o padrão interno (75 µL), selada e centrifu- gada (3500 rpm, 15 min). Alíquotas do sobrenadante (50 µL) foram combinadas com água (50 µL) para análise, juntamente com as amos- tras t = 0 h, utilizando um espectrômetro de massa Waters TQS. Método 6: Taxa de efluxo MDCK-BCRP

[00201] Essencialmente o mesmo que o Método 5, porém usando placas de células MDCK / BCRP Ready ™ (Readycell) no lugar das placas MDCK / MDR1. Dados Biológicos

[00202] Os compostos de APPAMP foram avaliados utilizando os métodos biológicos descritos acima.

[00203] O seguinte composto de referência (REF-001) foi da mes- ma forma avaliado, para fins de comparação. REF-001 (3R,4R)-4-(((7-(benzilamino)- 3-isopropilpirazolo[1,5- Bondke e ou- a]pirimidin-5- tro, 2015 il)amino)metil)piperidin-3-ol (PPDA-001)

[00204] Os dados resultantes estão resumidos nas tabelas a seguir. Tabela 1 Dados do Ensaio Bioquímico CDK2 CDK7 CDK9 Composto No. IC50 (nM) IC50 (nM) IC50 (nM) REF-001 660 34 320 APPAMP-001 640 13 200 APPAMP-002 770 33 210 APPAMP-003 190 8,9 22 APPAMP-004 2400 4,2 130 Tabela 2 Dados do Ensaio Adicional Humano MDCK-MDR1 MDCK-BCRP Composto No. PPB (%) Razão de Efluxo (1) Razão de Efluxo (1) REF-001 93 33 32 APPAMP-001 85 2 5 APPAMP-002 83 5,7 2 APPAMP-003 ND ND ND APPAMP-004 ND ND ND Notas para a Tabela 2: (1) Taxa de efluxo corrigida versus MDCK-WT Comparações

[00205] CDK7 é um alvo principal. A potência para esse objetivo principal é altamente desejável.

[00206] Os compostos têm potência bioquímica CDK7 semelhante ou melhor ou substancialmente melhor, em comparação com REF- 001: Tabela 3 Potência CDK7: Comparação com REF-001 CDK7 Melhoria Composto No. IC50 (nM) vs. REF-001 (dobra) REF-001 34 APPAMP-004 4,2 8,10 APPAMP-003 8,9 3,82 APPAMP-001 13 2,62 APPAMP-002 33 1,03

[00207] Os compostos com maior seletividade para CDK7 vs. CDK2 são esperados fornecer um índice terapêutico mais alto e / ou mostrar maior seletividade em relação às células no estado da doença em comparação com o tecido normal. A seletividade aprimorada para CDK7 vs. CDK2 é altamente desejável.

[00208] Os compostos têm seletividade melhor ou substancialmente melhor para CDK7 vs. CDK2, em comparação com REF-001: Tabela 4 Seletividade de CDK2/CDK7: Comparação com REF-001 Melhoria CDK2 CDK7 Razão Composto No. vs. REF-001 IC50 (nM) IC50 (nM) CDK2/CDK7 (dobra) REF-001 660 34 19 APPAMP-004 2400 4,2 571 29,4 APPAMP-001 640 13 49 2,54 APPAMP-002 770 33 23 1,20 APPAMP-003 190 8,9 21 1,10

[00209] Se um composto tem uma fração livre mais alta, em segui- da mais do composto está disponível para interagir com um alvo, em vez de estar ligado às proteínas plasmáticas. Uma fração livre mais alta deve resultar em aumento da potência in vivo e deve permitir que uma dose mais baixa atinja a atividade farmacológica. Uma fração livre mais alta é altamente desejável.

[00210] Os compostos têm fração livre substancialmente mais alta no plasma humano (ou seja, 1 PPB humano), em comparação com o REF-001: Tabela 5 Fração Livre: Comparação com REF-001 Humano Fração Melhoria Composto No. PPB (%) Livre vs. REF-001 (dobra) REF-001 93 0,07 APPAMP-002 83 0,17 2,43 APPAMP-001 85 0,15 2,14 APPAMP-003 ND ND ND APPAMP-004 ND ND ND

[00211] Os transportadores de efluxo estão implicados nos meca- nismos de resistência aos medicamentos contra o câncer. Menor sus- cetibilidade aos transportadores de efluxo é reconhecida como uma vantagem na terapia do câncer. Uma baixa taxa de efluxo é altamente desejável.

[00212] Os compostos têm uma taxa de efluxo substancialmente mais baixa nas células MDCK-MDR1 e MDCK BCRP, em comparação com REF-001:

Tabela 6 MDCK-MDR1 Razão de Efluxo: Comparação com REF-001 MDCK-MDR1 Melhoria Composto No. Razão de Efluxo vs. REF-001 (dobra) REF-001 33 APPAMP-001 2 16,50 APPAMP-002 5,7 5,79 APPAMP-003 ND ND APPAMP-004 ND ND Tabela 7 MDCK-BCRP Razão de Efluxo: Comparação com REF-001 MDCK-BCRP Melhoria Composto No. Razão de Efluxo vs. REF-001 (dobra) REF-001 32 APPAMP-002 2 16,00 APPAMP-001 5 6,40 APPAMP-004 ND ND APPAMP-003 ND ND

[00213] Como ilustrado na tabela a seguir, cada um dos compostos é substancialmente melhor que o REF 001 em pelo menos um aspec- to, e frequentemente em vários aspectos. Tabela 8 Sumário: Melhoria vs. REF-001 (dobra) APPAMP- APPAMP- APPAMP- APPAMP- 001 002 003 004 Potência de 2,62 1,03 3,82 8,10 CDK7 Razão 2,54 1,20 1,10 29,4 CDK2/CDK7

Tabela 8 Sumário: Melhoria vs. REF-001 (dobra) APPAMP- APPAMP- APPAMP- APPAMP- 001 002 003 004 Fração 2,14 2,43 ND ND Livre MDCK-MDR1 Razão de 16,50 5,79 ND ND Efluxo MDCK-BCRP Razão de 16,00 6,40 ND ND Efluxo

[00214] O anterior descreveu os princípios, modalidades preferidas e modos de operação da presente invenção. Entretanto, a invenção não deve ser interpretada como limitada às modalidades particulares discutidas. Em vez disso, as modalidades descritas acima devem ser consideradas como ilustrativas e não restritivas. Deverá ser apreciado que variações podem ser feitas nessas modalidades por trabalhadores versados na técnica sem se afastar do escopo da presente invenção.

REFERÊNCIAS

[00215] Várias publicações são citadas aqui para descrever e divul- gar mais completamente a invenção e o estado da técnica a que a in- venção se refere. Citações completas para essas referências são for- necidas abaixo.

[00216] Cada uma dessas referências é incorporada aqui por refe- rência em sua totalidade na presente descrição, na mesma extensão como se cada referência individual fosse específica e individualmente indicada para ser incorporada por referência. Alarcon e outro, 2009, Cell, Vol. 139, pp. 757-769. Ali et al, 2011, Annu. Rev. Med., Vol. 62, pp. 217-232.

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Claims

REIVINDICAÇÕES

1. Composto caracterizado pelo fato de que é selecionado a partir de compostos das seguintes fórmulas ou um sal, hidrato ou sol- vato farmaceuticamente aceitável do mesmo: (APPAMP-001), (APPAMP-002), (APPAMP-003), e (APPAMP-004).

2. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracteriza- do pelo fato de que é um composto da fórmula a seguir, ou um sal, hi- drato ou solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo:

(APPAMP-001).

3. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracteriza- do pelo fato de que é um composto da fórmula a seguir, ou um sal, hi- drato ou solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo: (APPAMP-002).

4. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracteriza- do pelo fato de que é um composto da fórmula a seguir, ou um sal, hi- drato ou solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo: (APPAMP-003).

5. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracteriza- do pelo fato de que é um composto da fórmula a seguir, ou um sal, hi- drato ou solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo: (APPAMP-004).

6. Composição, caracterizada pelo fato de que compreende um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a

5, e um veículo ou diluente farmaceuticamente aceitável.

7. Método para preparar uma composição caracterizado pelo fato de que compreende a etapa de mistura de um composto co- mo definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 5, e um veículo ou diluente farmaceuticamente aceitável.

8. Método para inibir a função de CDK em uma célula, in vitro ou in vivo, caracterizado pelo fato de que compreende contatar a célula com uma quantidade eficaz de um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 5.

9. Método para regular (por exemplo, inibir) a proliferação celular (por exemplo, proliferação de uma célula), inibir a progressão do ciclo celular, promover apoptose ou uma combinação de um ou mais destes, in vitro ou in vivo, caracterizado pelo fato de que compre- ende contatar uma célula com uma quantidade eficaz de um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 5.

10. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 1 a 5, caracterizado pelo fato de que é para uso em um método de tratamento do corpo humano ou animal por terapia.

11. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 1 a 5, caracterizado pelo fato de que é para uso em um método de tratamento de um distúrbio.

12. Uso de um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 5, caracterizado pelo fato de que é usado na fabricação de um medicamento para utilização no método de trata- mento de um distúrbio.

13. Método de tratamento de um distúrbio, caracterizado pelo fato de que compreende administrar a um indivíduo em necessi- dade de tratamento uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 5.

14. Composto para uso de acordo com a reivindicação 11,

uso de acordo com a reivindicação 12, ou um método de acordo com a reivindicação 13, caracterizado pelo fato de que o distúrbio é: um dis- túrbio que está associado à CDK; um distúrbio resultante de uma ativi- dade inadequada de uma quinase dependente de ciclina (CDK); um distúrbio associado à mutação da CDK; um distúrbio associado à su- perexpressão de CDK; um distúrbio que está associado à ativação da CDK na trilha a montante; ou um distúrbio que é melhorado pela inibi- ção da CDK.

15. Composto para uso de acordo com a reivindicação 11, uso de acordo com a reivindicação 12, ou um método de acordo com a reivindicação 13, caracterizado pelo fato de que o distúrbio é: um dis- túrbio proliferativo; câncer; uma infecção viral (por exemplo, HIV); um distúrbio neurodegenerativo (por exemplo, doença de Alzheimer, do- ença de Parkinson); isquemia; uma doença renal; um distúrbio cardio- vascular (por exemplo, aterosclerose); ou um distúrbio autoimune (por exemplo, artrite reumatoide, lúpus eritematoso sistêmico, psoríase, síndrome de Sjogren).

16. Composto para uso de acordo com a reivindicação 11, uso de acordo com a reivindicação 12, ou um método de acordo com a reivindicação 13, caracterizado pelo fato de que o distúrbio é: um dis- túrbio proliferativo.

17. Composto para uso de acordo com a reivindicação 11, uso de acordo com a reivindicação 12, ou um método de acordo com a reivindicação 13, caracterizado pelo fato de que o distúrbio é: câncer.

18. Composto para uso de acordo com qualquer uma das reivindicações 11 e 14 a 17, uso de acordo com qualquer uma das rei- vindicações 12 e 14 a 17, ou um método de acordo com qualquer uma das reivindicações 13 a 17, caracterizado pelo fato de que o tratamen- to compreende ainda tratamento (por exemplo, tratamento simultâneo ou sequencial) com um agente ativo adicional que é um inibidor de aromatase.

19. Composto para uso de acordo com a reivindicação 18, uso de acordo com a reivindicação 18, ou um método de acordo com a reivindicação 18, caracterizado pelo fato de que o inibidor de aroma- tase é exemestano (da mesma forma conhecido como Aromasin), le- trozol (da mesma forma conhecido como Femara) ou anastrozol (da mesma forma conhecido como Arimidex).

20. Composto para uso de acordo com a reivindicação 18 ou 19, uso de acordo com 18 ou 19, ou um método de acordo com a reivindicação 18 ou 19, caracterizado pelo fato de que o distúrbio é câncer de mama (por exemplo, câncer de mama que é resistente ao referido inibidor de aromatase).

21. Composto para uso de acordo com qualquer uma das reivindicações 11 e 14 a 17, uso de acordo com qualquer uma das rei- vindicações 12 e 14 a 17, ou um método de acordo com qualquer uma das reivindicações 13 a 17, caracterizado pelo fato de que o tratamen- to compreende ainda tratamento (por exemplo, tratamento simultâneo ou sequencial) com um agente ativo adicional que é um antiestrogênio.

22. Composto para uso de acordo com a reivindicação 21, uso de acordo com a reivindicação 21, ou um método de acordo com a reivindicação 21, caracterizado pelo fato de que o antiestrogênio é fas- lodex (da mesma forma conhecido como Fulvestrant e ICI182780), ta- moxifeno (da mesma forma conhecido como Nolvadex) ou hidroxita- moxifeno.

23. Composto para uso de acordo com a reivindicação 21 ou 22, uso de acordo com a reivindicação 21 ou 22, ou um método de acordo com a reivindicação 21 ou 22, caracterizado pelo fato de que o distúrbio é câncer de mama (por exemplo, câncer de mama que é re- sistente ao referido antiestrogênio).

24. Composto para uso de acordo com qualquer uma das reivindicações 11 e 14 a 17, uso de acordo com qualquer uma das rei- vindicações 12 e 14 a 17, ou um método de acordo com qualquer uma das reivindicações 13 a 17, caracterizado pelo fato de que o tratamen- to compreende ainda tratamento (por exemplo, tratamento simultâneo ou sequencial) com um agente ativo adicional que é um bloqueador de Her2.

25. Composto para uso de acordo com a reivindicação 24, uso de acordo com a reivindicação 24, ou um método de acordo com a reivindicação 24, caracterizado pelo fato de que o bloqueador de Her2 é herceptina, pertuzumabe ou lapatinibe.

26. Composto para uso de acordo com qualquer uma das reivindicações 11 e 14 a 17, uso de acordo com qualquer uma das rei- vindicações 12 e 14 a 17, ou um método de acordo com qualquer uma das reivindicações 13 a 17, caracterizado pelo fato de que o tratamen- to compreende ainda tratamento (por exemplo, tratamento simultâneo ou sequencial) com um agente quimioterapêutico citotóxico adicional.

27. Composto para uso de acordo com a reivindicação 26, uso de acordo com a reivindicação 26 ou um método de acordo com a reivindicação 26, caracterizado pelo fato de que o agente quimioterá- pico citotóxico é um taxano (por exemplo, paclitaxel da mesma forma conhecido como Taxol; docetaxel da mesma forma conhecido como Taxotere), ciclofosfamida ou um antimetabólito (por exemplo, carbopla- tina, capecitabina, gencitabina, doxorrubicina, epirubicina, 5- fluorouracila, etc.).