BR112019022072A2

BR112019022072A2 - Inseticida microbiano para o controle de tripes da amoreira

Info

Publication number: BR112019022072A2
Application number: BR112019022072-0A
Authority: BR
Inventors: Shin Taek-Su; Kim Tae-Hoon; Park Tae-Hyun; Ha Pan-Jung; Myung Eul-Jai; Lee Han-Young; Kim Jae-Su; Lee Se-Jin; Kim Jong-Cheol; Kim Si-Hyeon; Lee Mi-Rong
Original assignee: Farmhannong Co., Ltd.; Industrial Cooperation Foundation Chonbuk National University
Priority date: 2017-04-21
Filing date: 2017-04-21
Publication date: 2020-05-12
Also published as: CA3059692A1; AU2017410234B2; WO2018194199A1; US20200100505A1; AU2017410234A1; MX2019012503A

Abstract

a presente invenção refere-se a um inseticida microbiano para o controle de tripes da amoreira, compreendendo uma cepa erl 836 de beauveria bassiana (kccm11506p) ou um seu esporo. o inseticida da presente invenção mostra uma atividade inseticida tão potente quanto os inseticidas químicos preexistentes contra os tripes da amoreira e é ecológico e fácil de manusear e produzir, encontrando, assim, excelentes aplicações comerciais.

Description

INSETICIDA MICROBIANO E MÉTODO PARA O CONTROLE DE TRIPES

[Campo Técnico]

[001 ]A presente invenção refere-se a um inseticida microbiano para o controle de tripés.

[Técnica Antecedente]

[002]O Thrips spp. é um inseto que pertence à ordem Thysanoptera e é uma praga de insetos de tamanho pequeno que aparece durante todo o ano, causando grandes danos em todas as culturas cujas flores florescem, tais como as plantas de horticultura e os angiospermas. Em particular, os tripés das flores ocidentais e os tripes do melão são pragas de insetos invasivas não nativas que atualmente estão se espalhando por toda a nação, causando sérios danos a várias culturas agrícolas. E alguns vírus, tais como o vira-cabeça-do-tomateiro (TSWV), são mediados por essas pragas de insetos. Portanto, o controle dessas espécies é especialmente necessário.

[003]Por outro lado, os tripés são altamente proliferativos e mostram rápido desenvolvimento de resistência aos inseticidas químicos, em comparação com as outras pragas de insetos.

[004]Dentro de um mês após os tripés afetarem qualquer instalação, os tripés passam uma geração e têm uma variedade de estágios de vida mistos, tais como ovos, larvas, pupas, adultos e similares.

[005]Portanto, os tripés são considerados serem uma praga de insetos que é relativamente difícil de controlar usando um inseticida.

[006]Para o controle de tripes, têm sido usados até o momento aproximadamente 220 inseticidas químicos, tais como o piriproxifeno, o espinetoram e similares. No entanto, os tripés têm resistência à maioria desses inseticidas químicos e têm também resistência aos inseticidas químicos recentemente estudados e desenvolvidos, tais como o spinosad, o acetamiprid, o dinotefurano e similares. Os inseticidas à base de carbamato (bendiocarb, carbosulfano, metiocarb e similares), os

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2/16 inseticidas à base de organofosfato (metomil, clorpirifós, diazino e similares), os inseticidas sintéticos à base de piretroide (acrinatrina, bifentrina, cialotrina e similares), os inseticidas à base de neonicotinoide plantas (imidacloprid, acetaprid, dinotefurano e similares), os agentes bioquímicos derivados de microrganismos (spinosad), os inseticidas à base de mectina (abamectina, milbemectina e similares) e similares foram relatados como inseticidas químicos representativos aos quais os tripes têm resistência.

[007]Como recentemente tem havido um interesse crescente em efeitos colaterais, tais como poluição ambiental, o advento de pragas de insetos resistentes de acordo com o uso e o abuso contínuos de inseticidas químicos e similares, o uso de inseticidas químicos tem sido gradualmente limitado. Tem sido ativamente estudado um método de controle biológico que possa substituir tais inseticidas químicos e seja ambientalmente seguro. Por exemplo, o método de controle biológico é um método de controle que usa os inimigos naturais, tais como o Orius sp., os ácaros predadores e similares, ou que usa os fungos entomopatogênicos que infectam as pragas de insetos. Aproximadamente 750 ou mais fungos entomopatogênicos são conhecidos até o momento. Entre estes, o Beauveria bassiana, o Metarhizium anisopliae, o Nomuraea rileyi e similares foram tipicamente desenvolvidos como os inseticidas microbianos e usados para controlar várias pragas de insetos.

[008]No que diz respeito à cepa de Beauveria bassiana, a KR 10-20160000537 divulga a atividade inseticida contra uma larva de lagarta-da-beterraba por uma cepa de Beauveria bassiana FG274, a KR 10-2016-0139521 divulga a atividade inseticida contra um ácaro rajado ou pulgão-verde-do-pessegueiro por uma cepa de Beauveria bassiana SD15, a KR 10-2016-0084968 divulga a atividade inseticida contra um Riptortus clavatus por uma cepa de Beauveria bassiana JEF007, a KR 102011-0011239 divulga a atividade inseticida contra um Monochamus alternatus ou um Moechotypa diphysis por uma cepa de Beauveria bassiana MaW1, a KR 10-2011

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0094749 divulga a atividade inseticida contra um Monochamus saltuarius por uma cepa de Beauveria bassiana MsW1 eaKR 10-2015-0113255 divulga a atividade inseticida contra as pragas de insetos do arrozal, tais como o Laodelphax striatellus (Fallen) ou o Issorhoptrus oryzophilus Kuschel, por uma cepa de Beauveria bassiana ERL836.

[009]No entanto, para controlar os tripes, ainda existe uma necessidade por novos inseticidas microbianos altamente ativos que possam ser fortemente controlados, ecológicos e fáceis de manusear e usar, no mesmo nível que os inseticidas químicos.

[Documentos da Técnica Anterior]

[Documentos de Patentes]

KR 10-2016-0000537

KR 10-2016-0139521

KR 10-2016-0084968

KR 10-2011-0011239

KR 10-2011-0094749

KR 10-2015-0113255

[Divulgação]

[Problema Técnico]

[010]Durante a pesquisa de um potente inseticida microbiano contra os tripés, os presentes inventores descobriram um novo microrganismo, chamado cepa de Beauveria bassiana ERL386, que mostra uma atividade inseticida contra os tripes no mesmo nível que os inseticidas químicos. Portanto, a presente invenção foi concluída com base nesses fatos.

[011]Além disso, um objetivo da presente invenção é proporcionar um inseticida microbiano ecológico que mostre uma excelente atividade inseticida contra

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4/16 os tripes no mesmo nível que os inseticidas químicos convencionais e seja também fácil de manusear e usar.

[Solução Técnica]

[012]Para resolver os problemas acima, de acordo com um aspecto da presente invenção, é proporcionado um inseticida microbiano para controle de tripés, que inclui uma cepa de Beauveria bassiana ERL836 ou um seu esporo tendo entomopatogenicidade.

[013]De acordo com outro aspecto da presente invenção, é proporcionado um método de controle contra os tripés, aplicando o inseticida microbiano da presente invenção a um habitat, uma planta a ser protegida da praga de insetos ou ao solo.

[Efeitos Vantajosos]

[014]O inseticida microbiano incluindo uma cepa de Beauveria bassiana ERL836 ou um seu esporo de acordo com a presente invenção mostra uma atividade inseticida potente contra os tripes no mesmo nível que os inseticidas químicos convencionais.

[015]Além disso, o inseticida microbiano da presente invenção mostra especialmente uma atividade inseticida potente contra as pupas dos tripes no solo.

[016]Também, o inseticida microbiano da presente invenção é ecológico e fácil de manusear e produzir, proporcionando assim excelente aplicabilidade comercial.

[Descrição dos Desenhos]

[017]A FIG. 1 mostra uma preparação granular de um inseticida microbiano de acordo com a presente invenção.

[018]A FIG. 2 mostra as colônias de uma cepa de Beauveria bassiana ERL836 da presente invenção, que são formadas no solo, após 7 dias, quando o solo é tratado com o inseticida microbiano da presente invenção.

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[019]A FIG. 3 é uma imagem mostrando que as pupas de tripes no solo entram em contato ativo com as colônias da cepa de Beauveria bassiana ERL836 da presente invenção.

[020]A FIG. 4 mostra a comparação das densidades de tripes entre um grupo tratado com o inseticida microbiano da presente invenção (Grupo de Tratamento), um grupo tratado com um inseticida químico (i.e., clotianidina) (Grupo de Comparação) e um grupo que não é tratado com qualquer inseticida (Grupo de Controle) (a: após 20 dias, b: após 40 dias).

[021JA FIG. 5 mostra a comparação das densidades de tripés entre um grupo tratado com o inseticida microbiano da presente invenção (Grupo Tratado), um grupo tratado com um inseticida químico (i.e., espinetoram) (Grupo de Comparação) e um grupo que não é tratado com qualquer inseticida (Grupo de Controle).

[022]A FIG. 6 mostra a comparação das densidades de tripes entre um grupo tratado com o inseticida microbiano da presente invenção (Grupo Tratado), um grupo tratado com um inseticida microbiano conhecido (i.e., uma cepa de Beauveria bassiana GHA) (Grupo de Comparação) e um grupo que não é tratado com qualquer inseticida (Grupo de Controle).

[Melhor Modo]

[023]A cepa de Beauveria bassiana ERL836 (KCCM11506P) da presente invenção é isolada pelos presentes inventores. Ou seja, uma cepa de Beauveria bassiana que mostra um efeito inseticida notável contra as pragas de insetos do arrozal, tais como Laodelphax striatellus (Fallen), Nilaparvata lugens, Sogatella furcifera, Issorhoptrus oryzophilus Kuschel, é isolada por um teste de ensaio biológico. A cepa isolada é identificada morfologicamente e analisada por um sequenciamento de DNA genômico. Uma vez que a cepa isolada desta invenção mostra aproximadamente 98 % de homologia com a cepa da Beauveria bassiana GHA conhecida na técnica relacionada, a cepa isolada é identificada como uma cepa de

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Beauveria bassiana. A cepa isolada é denominada 'ERL836' e depositada no Korean Culture Center of Microorganisms (KCCM) em 22 de janeiro de 2014 (Número de Acesso: KCCM11506P).

[024]A cepa de Beauveria bassiana ERL836 da presente invenção é divulgada em detalhes na KR 10-2015-0113255, cuja divulgação é incorporada neste documento por referência na sua totalidade. A cepa de Beauveria bassiana ERL836 da presente invenção pode estar disponível do KCCM.

[025]A cepa de Beauveria bassiana ERL836 forma colônias brancas, tem capacidade de formação de esporos e estabilidade de armazenamento de esporos excelentes. Isto é, a cepa de Beauveria bassiana ERL836 desta invenção mostra uma capacidade de formação de esporos mais do que 2 a 3 vezes e uma estabilidade de armazenamento de esporos mais do que 4 a 6 vezes do que a cepa de Beauveria bassiana GHA conhecida.

[026]Quando a cepa de Beauveria bassiana ERL836 da presente invenção estiver ligada a uma casca de um inseto hospedeiro (i.e., tripés) para germinar, o microrganismo desta invenção produz quitinases, proteases, lipases e/ou esterases para penetrarem uma camada cuticular de tripés, de modo que o microrganismo desta invenção invada uma praga de insetos e produza substâncias tóxicas, enquanto cresce na praga de insetos, pelo que impedindo uma resposta imune da praga de insetos e matando a praga de insetos hospedeira.

[027]De modo surpreendente, foi confirmado na presente invenção que a cepa de Beauveria bassiana ERL836 tem uma atividade inseticida altamente excelente contra os tripés. Assim, a cepa de Beauveria bassiana ERL836 pode ser útil no controle de vários tipos de tripés, como os tripés das flores ocidentais, os tripes do melão, Frankliniella intonsa ou Thrips tabaci Lindeman.

[028]Conforme descrito acima, sabe-se que a cepa de Beauveria bassiana ERL836 da presente invenção mata efetivamente as pragas de insetos do arrozal,

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7/16 tais como o Laodelphax striatellus (Fallen) e similares. Os tripés são uma praga de insetos que em geral crescem em angiospermas ou árvores frutíferas, cujas flores florescem e tem características completamente diferentes das pragas de insetos do arrozal, como o Laodelphax striatellus (Fallen) e similares. Portanto, é muito surpreendente para aqueles versados na técnica que a cepa de Beauveria bassiana ERL836 da presente invenção mostre um efeito inseticida contra os tripes, e o efeito inseticida não seja facilmente predito a partir do efeito inseticida contra as pragas de insetos do arrozal convencionais.

[029]Na presente invenção, foi confirmado que a cepa de Beauveria bassiana ERL836 tem um potente efeito inseticida contra os tripes. A cepa de Beauveria bassiana ERL836 mostra um efeito inseticida equivalente ou superior, em comparação com os inseticidas químicos tais como a clotianidina ou o espinetoram, que são conhecidos por mostrarem eficácia inseticida potente contra os tripes (ver os Exemplos 4 e 5). Além disso, a cepa de Beauveria bassiana ERL836 mostra um efeito inseticida altamente superior, em comparação com uma cepa de Beauveria bassiana GHA anteriormente conhecida, relatada ter uma atividade inseticida contra os tripés (ver o Exemplo 6).

[030]Os esporos da cepa de Beauveria bassiana ERL836 de acordo com a presente invenção podem ser produzidos incubando a cepa de Beauveria bassiana ERL836 em um meio de cultura sólido.

[031 ]O inseticida microbiano da presente invenção pode ser proporcionado na forma de uma preparação granular, uma preparação em fase líquida ou composto.

[032]De modo específico, a preparação granular refere-se a uma forma granular sólida e pode ser preparada incubando a cepa de Beauveria bassiana ERL836 em um meio de cultura sólido e coletando o produto incubado.

[033]O meio de cultura sólido pode incluir qualquer um selecionado a partir de milheto, arroz branco, farelo de trigo, milheto italiano, sorgo e uma combinação destes.

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8/16 meio de cultura sólido pode ser misturado com um ácido orgânico. O meio de cultura sólido misturado com um ácido orgânico pode permitir absorver água por imersão em água a 80 a 100°C por 0,5 a 1,5 hora.

[034]Na presente invenção, o meio de cultura sólido é preparado pela adição de um ácido orgânico, tal como o ácido cítrico, ao milheto italiano, permitindo que a mistura absorva água por 0,5 a 1,5 hora enquanto é mantida a 80 a 100°C em banhomaria. E então, o meio de cultura sólido imerso é esterilizado por 10 a 40 minutos em uma temperatura de 110 a 130°C.

[035]O ácido orgânico pode ser usado sem qualquer limitação particular. Mais especificamente, pode ser usado qualquer um selecionado a partir de ácido cítrico, ácido propiônico, ácido butílico, ácido lático, ácido succínico, ácido glicônico, ácido valérico, ácido capróico e uma combinação destes. De preferência, o ácido cítrico pode ser usado como o ácido orgânico. A mistura do meio de cultura sólido com o ácido orgânico pode ser realizada adicionando o ácido orgânico ao meio de cultura sólido e misturando o meio de cultura sólido com o ácido orgânico.

[036]Um vaso de cultura em geral usado na técnica à qual a presente invenção pertence pode ser usado como um vaso de cultura para a cepa, e os tipos do vaso de cultura não estão limitados. Por exemplo, o vaso de cultura pode ser unido a um filtro de suprimento de oxigênio, que pode suprir oxigênio suavemente a um saco de polivinil e, então, pode ser usado para incubação.

[037]A cepa de Beauveria bassiana ERL836 é semeada em um meio sólido preparado e então cultivada a 20 a 30°C por 6 a 8 dias. De preferência, a cepa de Beauveria bassiana ERL836 é cultivada a 25°C por 7 dias. Um inóculo que pode ser usado no meio de cultura sólido pode ser obtido por subculture da cepa de Beauveria bassiana ERL836, e a cultura da cepa ERL836 pode ser realizada de acordo com um método convencional de subculture. Os tipos de meios necessários para a subculture não estão limitados. Como um exemplo de meio de subculture, pode ser usado um

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9/16 meio líquido que inclui um meio de caldo de dextrose de batata (PDB), farelo de arroz ou farelo de trigo, mas os tipos do meio líquido não estão limitados. O produto cultivado no meio sólido coletado é em geral produzido na forma de grânulos (ver a FIG. 1).

[038]Uma preparação em fase líquida refere-se a uma forma líquida e pode ser preparada incubando a cepa de Beauveria bassiana ERL836 em um meio de cultura sólido; colocando o produto incubado em um saco filtrável; e colocando o saco filtrável em água para eluira cepa de Beauveria bassiana ERL836 ou os seus esporos. O saco filtrável é um saco composto de material filtrável permeável à água. O saco filtrável é, de preferência, formado de um ou mais selecionados a partir do grupo que consiste em fibras sintéticas, como o poliéster, o nylon, o polietileno, o polipropileno e o vinylon; fibras semissintéticas, tais como o raiom, e similares; panos tecidos ou não tecidos compostos de fibras simples ou compostas de fibras naturais de Broussonetia kazinoki e Edgeworthia chrysantha; e papel para desenho misto e papel composto de cânhamo de Manila, polpa de madeira, fibra de polipropileno e similares.

[039]A preparação granular passa por um processo de produção mais simples do que a preparação em fase líquida e, assim, pode ser vantajosa em termos de redução do período e economia de custos.

[040]Por agora, porque a cepa de Beauveria bassiana GHA disponível comercialmente e semelhantes já são conhecidos por serem usados contra os tripés, porém sabe-se que as pragas de insetos no solo têm resistência a essa cepa. Assim, a cepa de Beauveria bassiana GHA é, em geral, submetida nas partes aéreas, tais como as folhas e similares (i.e., tratamento da folhagem). Por outro lado, quando a preparação granular da presente invenção é aplicada ao solo, a preparação granular mostrou um excelente efeito de controle contra as pupas de tripés, conforme será descrito abaixo.

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[041 ]Portanto, além do método convencional para o tratamento da cepa de Beauveria bassiana (i.e., tratamento da folhagem), o inseticida microbiano como uma formulação granular da presente invenção é particularmente aplicado ao solo (i.e., superfície do solo, solo misto, superfície do solo tratada, sulcos tratados e similares) para matar efetivamente as pupas de tripés. Além disso, a cepa da presente invenção tem uma vantagem visto que a cepa pode rapidamente formar colônias no solo para mostrar continuamente um efeito inseticida, pelo que reduzindo a aplicação repetida do inseticida ao mínimo.

[042]O inseticida microbiano da presente invenção pode adicionalmente incluir um aditivo disponível na técnica relacionada.

[043]Além disso, a presente invenção proporciona um método para controle de tripés, que inclui a aplicação do inseticida microbiano em uma praga de insetos, um habitat dele, uma planta a ser protegida da praga de insetos ou no solo.

[044]Os exemplos de culturas adequadas podem incluir todos os tipos de culturas cujas flores florescem, tais a planta de horticultura e o angiosperma, e similares, por exemplo, as culturas de Solanaceae, tais como tomate, pimenta, berinjela, batata e similares; as culturas de vegetais, tais como melancia, melão oriental, pepino, pimenta e similares; as angiospermas, tais como o lírio, o cravo, o crisântemo, a gérbera rosada e similares.

[045]O inseticida microbiano da presente invenção pode ser aplicado não apenas diretamente aos tripes (adultos, ovos, larvas e similares) na parte aérea da planta, como também aplicado a uma parte subterrânea para controlar os tripes (pupas) presentes no solo ao mesmo tempo. Assim, os tripés podem ser controlados em todos os estágios da vida. Em particular, o microrganismo inseticida (fungo) da presente invenção pode ser aplicado ao solo (sob as condições de alta umidade, a presença de nutrientes) ao invés da parte aérea para proliferar facilmente no solo, e pode ser colonizado no ecossistema a longo prazo. Com isso, o microrganismo

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11/16 inseticida da presente invenção pode efetivamente controlar os tripés que entram no solo.

[046]O inseticida microbiano que inclui a cepa de Beauveria bassiana ERL836 ou os seus esporos, de acordo com a presente invenção, é de preferência aplicado em uma quantidade de uso de 10⁴ a 10⁸ esporos/g de solo, quando aplicado ao solo. Quando o inseticida microbiano for pulverizado como uma formulação em fase líquida, o inseticida microbiano é aplicado de preferência em uma quantidade de uso de 10⁴ a 10⁸ esporos/mL. Quando o inseticida microbiano for usado nessa faixa, o inseticida microbiano pode em geral mostrar um efeito de controle suficiente.

[Modo para a Invenção]

[047]A seguir, são proporcionadas modalidades preferidas para ajudar no entendimento da presente invenção. No entanto, deve ser entendido que os exemplos que se seguem se destinam apenas a proporcionar um melhor entendimento da presente invenção e não se destinam a limitar o escopo da presente invenção.

Exemplo 1: Preparação do inseticida microbiano da presente invenção (preparação granular)

[048]A cepa de Beauveria bassiana ERL836 (KCCM11506P) (disponível do Korean Culture Center of Microorganisms) foi incubada em um meio de PDB líquido, na temperatura ambiente, por 3 dias, para obter uma suspensão (concentração: 1 x 10⁷ conídios/ml). Ao mesmo tempo, 200 g de milheto italiano foram colocados em um saco de polivinil para incubação e foi adicionado a ele 0,16 mL de ácido cítrico a 50%. Posteriormente, o milheto italiano foi tratado termicamente a 90°C, por uma hora, em banho-maria, de modo que o milheto italiano absorvesse suficientemente água, para preparar com isso um meio de cultura sólido. Nesse caso, o oxigênio foi fornecido suavemente através de uma abertura de um saco de polivinil usando um copo de papel e gaze estéril, e o saco de polivinil foi esterilizado em 121 °C, por 15 minutos, e usado. O meio de cultura sólido preparado foi resfriado até a temperatura ambiente e

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12/16 mL da suspensão da cepa de Beauveria bassiana ERL836 (1 x 10⁷ conidios/mL) foi semeado, incubado a 25°C por 7 dias e secado na temperatura ambiente por um dia, para obter o inseticida microbiano da presente invenção na forma de grânulos (vera FIG. 1).

Exemplo 2: Preparação do inseticida microbiano da presente invenção (preparação em fase líquida)

[049] 10 g dos grânulos preparados no Exemplo 1 foram colocados em um saco filtrável e selados, e 10 L de água foram adicionados a ele. Depois disso, a mistura resultante foi agitada para liberara cepa e os esporos na água, para com isso preparar uma preparação em fase líquida.

Exemplo 3: Confirmação da colonização no solo e do contato com os tripes após o tratamento do solo com o inseticida microbiano da presente invenção

[050]O solo foi tratado com 2 g dos grânulos de inseticida microbiano da presente invenção, obtidos no Exemplo 1, e a colonização no solo da cepa de Beauveria bassiana ERL836 e o contato com as larvas e as pupas de tripés foram observados após 7 dias. Os resultados são mostrados na FIG. 2 e na FIG. 3, respectivamente. A partir dos resultados, foi confirmado que a cepa de Beauveria bassiana 836 começou a crescer a partir de 3 dias após o tratamento do solo e foi colonizada suavemente no solo (ver a FIG. 2). Além disso, as pupas de tripés presentes no solo entram em contato ativo com as colônias de cepas da presente invenção (FIG. 3).

Exemplo 4: Confirmação do efeito inseticida do inseticida microbiano da presente invenção contra os tripes

[051]Uma experiência sobre o efeito inseticida contra os tripés foi realizada em uma cultura de tomate. Foi usada uma população da cultura de tomate tendo uma altura de 20 a 25 cm, e a cultura de tomate foi colocada em uma gaiola plástica (30 x 30 x 60 cm³ ) equipada com uma peneira tendo malha menor do que os tripés das

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13/16 flores ocidentais, para evitar que os tripés das flores ocidentais se movessem de uma zona de tratamento, e uma experiência foi então realizada.

[052]Um pote no qual uma cultura de tomate foi plantada foi tratado com 2 g dos grânulos de inseticida microbiano da presente invenção, preparados no Exemplo

1. Além disso, como o grupo de comparação, a cultura de tomate foi tratada com um produto químico agrícola (i.e., clotianidina), conhecido por mostrar um efeito inseticida potente contra os tripes em uma quantidade de 0,02 g (i.e., uma quantidade de 3 kg/10 a) por pote, e nenhum inseticida foi aplicado ao pote do grupo de controle.

[Tabela 1]

	Densidade de tripés (número/planta)
Após 20 dias	Após 40 dias
Grupo de controle não tratado	14,1 ± 1,7	38,0 ±5,1
Grupo de comparação	3,7 ±0,5	2,4 ±0,4
Grupo de tratamento com o inseticida inventivo	4,3 ±0,3	3,1 ±0,6

[053]Como pode ser visto na Tabela 1 e na FIG. 4, foi confirmado que o inseticida microbiano da presente invenção teve um efeito inseticida potente contra os tripes em um nível equivalente em relação à clotianidina (85 a 95%).

Exemplo 5: Confirmação do efeito inseticida do inseticida microbiano contra os tripes da presente invenção sob condições de estufa

[054]Um efeito inseticida do inseticida microbiano da presente invenção contra os tripes foi testado sob condições de estufa grande.

[055]O pepino foi plantado regularmente em uma estufa grande e uma superfície do solo sob o pepino foi tratada com os grânulos do inseticida (concentração: 10⁷ conídios/g) da presente invenção, preparados no Exemplo 1, em uma quantidade de entrada de 3 kg/10 a. Como um grupo de comparação, o espinetoram WDG (concentração: 5% em peso, na forma de grânulos dispersáveis

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14/16 em água), que era um inseticida conhecido por mostrar um efeito inseticida potente contra os tripés), foi submetido duas vezes ao tratamento da folhagem em uma quantidade de entrada de 0,5 g/L. Por outro lado, o grupo de controle não foi tratado com nenhum inseticida. As quantidades de tripés produzidos no grupo de tratamento, no grupo de comparação e no grupo de controle foram examinadas a olho nu em intervalos de uma semana após o tratamento com o inseticida, e as alterações nas densidades das populações foram analisadas por 6 semanas. Os resultados são mostrados na FIG. 5. Na FIG. 5, as unidades de uma densidade média são indicadas pelo número de tripés por planta.

[056]Além disso, a eficácia de controle foi calculada de acordo com a equação que se segue para avaliar a eficácia inseticida.

Eficácia de Controle ⁼ (Dcontrole - DTratado)/Dcontrole ^x 100 onde Dcontrole representa uma densidade média de tripes no grupo de controle que não foi tratado com nenhum inseticida e ÜTratado representa uma densidade média de tripés no grupo de tratamento que foi tratado com o inseticida.

[Tabela 2]

	Eficácia de controle (%)
Grupo de tratamento (ERL836)	91,3
Grupo de comparação (grupo tratado com espinetoram WDG)	85,5

[057]Como pode ser visto na Tabela 2 e na FIG. 5, foi confirmado que o inseticida microbiano da presente invenção teve um efeito inseticida superior contra os tripes, em comparação com o espinetoram WDG.

Exemplo 6: Comparação entre os efeitos inseticidas da ERL836 e da GHA contra os tripes (experiência de laboratório)

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[058]O efeito inseticida da cepa de Beauveria bassiana ERL836 da presente invenção contra os tripés foi confirmado em relação à cepa de Beauveria bassiana GHA convencional. Uma experiência inseticida foi realizada para uma cultura de crisântemo. Foi usada uma população da cultura de crisântemo tendo uma altura de aproximadamente 20 cm, e a cultura de crisântemo foi colocada em uma gaiola de plástico (30 x 30 x 60 cm3), equipada com uma peneira tendo malha menor do que os tripes das flores ocidentais, para evitar que os tripes das flores ocidentais se movessem de uma zona de tratamento, e uma experiência foi então realizada.

[059]Um pote no qual uma cultura de crisântemo foi plantada foi tratado com 2 g dos grânulos de inseticida microbiano da presente invenção, preparados no Exemplo 1. Além disso, como o grupo de comparação, o crisântemo foi tratado com 2 g dos grânulos obtidos depois que a cepa de GHA foi cultivada no solo, na mesma maneira que no Exemplo 1 em relação ao ERL836. Após uma semana de tratamento com o inseticida, cinco adultos de tripés das flores ocidentais foram liberados por pote nos dois grupos tratados com os microrganismos e no grupo de controle (não tratado), e as densidades de tripés foram examinadas em intervalos de 2 semanas, por 6 semanas. Os resultados estão listados na Tabela 3 a seguir e mostrados na FIG. 6

[Tabela 3]

	Densidade de tripés (número/planta)
Imediatamente após o tratamento	Após 2 semanas	Após 4 semanas	Após 6 semanas
Grupo de controle não tratado	5,0 ±0,0	10,1 ±2,5	55,8 ±6,5	102,3 ± 12,0
Grupo de comparação	5,0 ±0,0	9,3 ±2,1	37,0 ±4,7	54,2 ±8,1
Grupo de tratamento	5,0 ±0,0	8,6 ± 1,7	10,3 ±3,5	12,9 ±3,8

Petição 870200048677, de 17/04/2020, pág. 23/28

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com o inseticida inventivo

[060]Como pode ser visto na Tabela 3 e na FIG. 6, foi confirmado que o inseticida microbiano da presente invenção mostrou efeito inseticida excelente contra os tripés, em comparação com a cepa de Beauveria bassiana GHA conhecida na técnica relacionada

Claims

1. Inseticida microbiano para controle de tripés CARACTERIZADO pelo fato de que compreende a cepa de Beauveria bassiana ERL836 (KCCM11506P) ou um esporo, em que o inseticida microbiano está na forma de grânulos sólidos.

2. Inseticida microbiano, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que os tripes são tripes das flores ocidentais, tripes do melão, Frankliniella intonsa ou Thrips tabaci Lindeman.

3. Inseticida microbiano, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que está na forma dos grânulos sólidos obtidos por incubação da cepa de Beauveria bassiana ERL836 (KCCM11506P) em um meio de cultura sólido selecionado dentre milheto, arroz branco, farelo de trigo, milheto italiano, sorgo e uma combinação destes.

4. Inseticida microbiano, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que é aplicado ao solo.

5. Método para controle de tripés CARACTERIZADO pelo fato de que compreende:

aplicar o inseticida microbiano, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 4, a um inseto, um habitat dele, uma planta a ser protegida do inseto ou ao solo.

6. Método, de acordo com a reivindicação 5, CARACTERIZADO pelo fato de que o inseticida microbiano é aplicado ao solo.