BR112018014030A2

BR112018014030A2 - lubrificante desenvolvido

Info

Publication number: BR112018014030A2
Application number: BR112018014030A
Authority: BR
Inventors: J Shaw Arthur Iv; Meyer Giorno Dit Journo Denis; Vidalin Olivier; Tsakraklides Vasiliki; B Rajgarhia Vineet
Original assignee: Novogy Inc
Priority date: 2016-01-14
Filing date: 2017-01-13
Publication date: 2019-09-10
Also published as: WO2017123913A1; US20190309208A1; EP3402879A4; CN108473965A; EP3402879A1

Abstract

a presente invenção refere-se a composições para perfuração e/ou manutenção de um furo de poço, por exemplo, fluidos de perfuração e lamas de perfuração, compreendendo levedura oleaginosa. a levedura oleaginosa pode compreender pelo menos cerca de 45% em peso de óleo. a levedura oleaginosa pode compreender uma modificação genética que, ou aumenta o teor de óleo da levedura, altera a composição de lipídeo da levedura, e/ou proporciona uma vantagem seletiva para a levedura, por exemplo, relativa a uma levedura não-modificada da mesma espécie.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para

LUBRIFICANTE DESENVOLVIDO”.

PEDIDO RELACIONADO [0001] Este pedido reivindica o benefício de prioridade ao Pedido de Patente Provisório dos Estados Unidos número de série 62/278.519, depositado em 14 de janeiro de 2016.

ANTECEDENTES [0002] Quando se perfura em formações subterrâneas, os fluidos de perfuração servem para resfriar e lubrificar a broca de perfuração. As brocas de perfuração frequentemente encontram fricção de poço aumentada que ocorre de mudanças nas pressões do poço, mudanças na composição geológica de uma formação, e mudanças na direção da perfuração, especialmente quando da perfuração de um poço horizontal. O aumento na fricção pode conduzir a uma taxa reduzida de penetração, e limita a capacidade da broca de perfuração alcançar seu destino alvo precisamente e eficientemente. Por exemplo, o aumento do torque rotacional de uma broca de perfuração para determinar mudanças friccionais aumentadas pode conduzir a reticulação da broca de perfuração de sua trajetória pretendida e/ou encurvamento da tubulação. A fricção aumentada pode também acelerar o desgaste na broca de perfuração, diminuindo os tempos de vida de serviço, e aumentando a necessidade de manutenção e de substituição de equipamento.

[0003] Os métodos atuais para redução de fricção de poço envolvem tipicamente a adição de lubrificantes ao fluido de perfuração. Diesel foi inicialmente usado como um lubrificante, mas lubrificantes à base de diesel estavam fora de fase quando o despejo de perfuração gerado com uso de tais lubrificantes torna-se classificado como despejo nocivo. Glicóis e ésteres de ácido graxo podem ser usados como lubrificantes alternados, bem como lubrificantes mecânicos, tal como

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2/39 esferas de vidro, esferas de plásticos, e grafite. Lubrificantes menos custosos e lubrificantes com propriedades aperfeiçoadas, contudo, permanecem desejáveis.

SUMÁRIO [0004] Um aspecto da invenção se relaciona a uma composição para uso na perfuração ou manutenção de um furo de poço, compreendendo uma levedura oleaginosa, no qual a composição é um fluido de perfuração ou lama de perfuração.

[0005] Em alguns aspectos, a invenção se relaciona a um método para perfuração ou manutenção de um furo de poço, compreendendo a etapa de perfurar o furo de poço com uma sonda de perfuração, no qual o furo de poço compreende uma composição compreendendo uma levedura oleaginosa.

[0006] Em alguns aspectos, a invenção se relaciona a um método para perfuração ou manutenção de um furo de poço, compreendendo as etapas de contatar uma broca de perfuração ou uma haste de perfuração com uma composição compreendendo uma levedura oleaginosa, e perfuração do furo de poço com a broca de perfuração ou a haste de perfuração.

[0007] Em algumas concretizações, a levedura oleaginosa compreende uma modificação genética. Por exemplo, a modificação genética pode aumentar o teor de óleo da levedura oleaginosa, alterar a composição de lipídeo da levedura oleaginosa, ou proporcionar uma vantagem seletiva para a levedura oleaginosa, relativa a uma levedura não-modificada da mesma espécie.

[0008] Em algumas concretizações, uma levedura oleaginosa compreende pelo menos cerca de 45% em peso de óleo. Em algumas concretizações, pelo menos cerca de 10 peso % dos lipídeos de uma levedura oleaginosa pode ser ácido oleico. Em algumas concretizações, menos do que cerca de 10 peso % dos lipídeos de uma levedura

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3/39 oleaginosa são poli-insaturados. Em certas concretizações, a levedura oleaginosa não é Rhodoturula glutinis.

BREVES DESCRIÇÕES DOS DESENHOS [0009] A Figura 1 é duas imagens de fluidos de perfuração compreendendo levedura oleaginosa estirpe N432. As imagens mostram sólidos visíveis observados durante teste em um Testador de Pressão Extrema e de Lubrificação OFITE.

[0010] A Figura 2 é um gráfico mostrando o fator de fricção de fluido de perfuração compreendendo várias quantidades de óleo como um lubrificante, suprido como levedura estirpe N432, versus tempo em um Testador de Pressão Extrema e de Lubrificação OFITE.

[0011] A Figura 3 é um gráfico mostrando o fator de fricção de fluidos de perfuração não compreendendo lubrificante (Lama), 3% de lubrificante Baroid BaroLube GoldSeal, ou 3% de óleo suprido como levedura estirpe NS432, versus tempo em um Testador de Pressão Extrema e de Lubrificação OFITE. Água é plotada como um controle negativo.

DESCRIÇÃO DETALHADA [0012] Alguns aspectos da invenção se relacionam à descoberta que a levedura oleaginosa pode diminuir o fator de fricção de um fluido de perfuração.

Definições [0013] Os artigos um e uma são aqui usados para se referir a um ou a mais do que um (isto é, a pelo menos um) do objetivo gramatical do artigo. Por meio de exemplo, um elemento significa um elemento ou mais do que um elemento.

[0014] O termo atividade se refere à capacidade total de uma célula realizar uma função. Por exemplo, uma modificação genética que diminui a atividade de uma enzima em uma célula pode reduzir a quantidade da enzima em uma célula, ou reduzir a eficiência da enzima.

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Uma eliminação reduz a atividade de uma proteína por redução da quantidade da proteína na célula. Alternativamente, uma mutação a um gene pode reduzir a eficiência de seu produto de proteína com pouco efeito na quantidade da proteína na célula. Mutações que reduzem a eficiência de uma enzima podem afetar o local ativo, por exemplo, por mudança de um ou mais resíduos de local ativo; elas podem afetar as cinéticas da enzima, por exemplo, por substratos ou produtos estericamente de bloqueio; elas podem afetar o desdobramento ou dinâmicas da proteína, por exemplo, por redução da proporção de enzimas corretamente desdobradas; elas podem afetar a localização da proteína, por exemplo, por prevenção da proteína de se localizar nas partículas de lipídeo; ou elas podem afetar a degradação da proteína, por exemplo, por adição de um ou mais locais de divagem de proteína, ou por adição de um ou mais resíduos ou sequências de amino ácido que direcionam a proteína para proteólise. Estas mutações afetam as regiões de codificação. Mutações que diminuem a atividade de uma proteína podem, ao invés, afetar a transcrição ou translação do gene. Por exemplo, a mutação de um intensificador ou promotor pode reduzir a atividade de uma proteína por redução de sua expressão. A mutação ou anulação das porções de não-codificação de um gene, tal como seus introns, pode também reduzir a transcrição ou translação. Adicionalmente, as mutações aos reguladores à montante de um gene podem afetar a atividade de seu produto de proteína; por exemplo, a sobre expressão de um ou mais repressores pode diminuir a atividade de uma proteína, e uma eliminação ou mutação de um ou mais ativadores pode similarmente diminuir a atividade de uma proteína.

[0015] Uma modificação genética que aumenta a atividade de uma proteína em uma célula pode aumentar a quantidade da proteína na célula, ou aumentar a eficiência da proteína (por exemplo, a eficiência de uma enzima). Por exemplo, a modificação genética pode

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5/39 simplesmente inserir uma cópia adicional da proteína na célula tal que a cópia adicional é transcrita e transladada na proteína funcional adicional. O gene adicionado pode ser nativo ao organismo hospedeiro, ou de um organismo diferente. Alternativamente, mutação ou anulação das porções de não-codificação de um gene, tal como seus introns, pode também aumentar a translação. Um gene nativo pode ser alterado por adição de um novo promotor que causa mais transcrição. Similarmente, intensificadores podem ser adicionados ao gene para aumentar transcrição, ou silenciadores podem ser mutados ou anulados a partir do gene para aumentar a transcrição. Mutações para uma região de codificação de gene nativo podem também aumentar a atividade da proteína, por exemplo, por produção de uma variante de proteína que não interage com as proteínas inibitórias ou moléculas. A sobre expressão de um ou mais ativadores pode aumentar a atividade de uma proteína pelo aumento da expressão da proteína, e uma eliminação ou mutação de um ou mais repressores de enzima pode similarmente aumentar a atividade da proteína.

[0016] O termo porção biologicamente ativa se refere a uma sequência de amino ácido que é menor do que uma sequência de amino ácido de comprimento total, mas exibe pelo menos uma atividade da sequência de comprimento total. Por exemplo, uma porção biologicamente ativa de um diacilglicerol aciltransferase pode se referir a um ou mais domínios de DGA1, DGA2, ou DGA3 tendo atividade biológica para converter acil-CoA e diacilglicerol a triacilglicerol. Tipicamente, porções biologicamente ativas compreendem um domínio ou motivo tendo uma atividade catalítica, tal como atividade catalítica para produção de uma molécula em uma trajetória de biossíntese de ácido graxo. Uma porção biologicamente ativa de uma proteína inclui porções da proteína que têm a mesma atividade como o peptídeo de comprimento e toda porção que tem mais atividade do que antecedente.

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Por exemplo, uma porção biologicamente ativa de uma enzima pode ter 0,1%, 0,5%, 1%, 2%, 3%, 4%, 5%, 10%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 99,5%, 99,6%, 99,7%, 99,8%, 99,9%, 100%, 100,1%, 100,2%, 100,3%, 100,4%, 100,5%, 100,6%, 100,7%, 100,8%, 100,9%, 101%, 105%, 110%, 115%, 120%, 125%, 130%, 135%, 140%, 145%, 150%, 160%, 170%, 180%, 190%, 200%, 220%, 240%, 260%, 280%, 300%, 320%, 340%, 360%, 380%, 400%, ou atividade mais alta relativa a uma enzima de comprimento total. Uma porção biologicamente ativa de uma proteína pode incluir porções de uma proteína que carece de um domínio que direciona a proteína a um compartimento celular.

[0017] O termo domínio se refere a uma parte da sequência de amino ácido de uma proteína que é capaz de se desdobrar em uma estrutura estável tridimensional independente do restante da proteína. [0018] Os termos fluido de perfuração e lama de perfuração são usados intercambeavelmente aqui, e incluem composições de fluido para perfuração ou manutenção de um furo de poço.

[0019] Peso seco e peso seco de célula significa peso determinado na ausência relativa de água. Por exemplo, referência à levedura oleaginosa como compreendendo uma percentagem especificada de um componente particular por peso seco significa que a percentagem é calculada baseado no peso da célula após substancialmente toda água ter sido removida.

[0020] O termo codifica se refere a ácidos nucleicos que compreendem uma região de codificação, porção de uma região de codificação, ou complementos destas. Ambos DNA e RNA podem codificar um gene. Ambos DNA e RNA podem codificar uma proteína. [0021] O termo expressão se refere à quantidade de uma sequência de ácido nucleico ou sequência de amino ácido (por exemplo,

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7/39 peptídeo, polipeptídeo, ou proteína) em uma célula. A expressão aumentada de um gene se refere à transcrição aumentada daquele gene. A expressão aumentada de uma sequência de amino ácido, peptídeo, polipeptídeo, ou proteína se refere à translação aumentada de um ácido nucleico que codifica a sequência de amino ácido, peptídeo, polipeptídeo, ou proteína.

[0022] O termo ácido graxo se refere a cadeias alifáticas compreendendo um ácido carboxílico e derivados deste, incluindo diglicerídeos, triglicerídeos, e fosfolipídeos. Em concretizações preferidas, um ácido graxo pode ser produzido por uma trajetória biosintética natural ou modificada em levedura, por exemplo, de outros ácidos graxos, ou de acetil-CoA.

[0023] O termo gene, conforme aqui usado, pode envolver sequências genômicas que contêm exons, particularmente, sequências de polinucleotídeo que codificam sequências de polipeptídeo envolvidas em uma atividade específica. O termo adicionalmente envolve ácidos nucleicos sintéticos que não derivam de sequência genômica. Em certas concretizações, os genes carecem de introns, à medida que eles são sintetizados baseados na sequência de DNA conhecida de cDNA e sequência de proteína. Em outras concretizações, os genes são cDNA não-nativos sintetizados, no qual os códons foram otimizados para expressão em Y. lipolytica baseada em uso de códon. O termo pode adicionalmente incluir moléculas de ácido nucleico compreendendo sequências à montante, à jusante, e/ou sequências de nucleotídeo de intron.

[0024] O termo modificação genética se refere ao resultado de uma transformação. Transformação se refere à transferência de um ácido nucleico em um organismo hospedeiro resultando em hereditariedade geneticamente estável. Toda transformação causa uma modificação genética por definição.

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8/39 [0025] O termo mutação eliminatória ou eliminação se refere a uma modificação genética que impede um gene nativo de ser transcrito e transladado em uma proteína funcional.

[0026] O termo nativo se refere à composição de uma célula ou célula de origem antes de um evento de transformação. Um gene nativo se refere à uma sequência de nucleotídeo que codifica uma proteína que não foi introduzida em uma célula por um evento de transformação. Uma proteína nativa se refere a uma sequência de amino ácido que é codificada por um gene nativo.

[0027] O termo óleo se refere a lipídeos. Exemplos de lipídeos incluem ácidos graxos (saturados e insaturados); moléculas compreendendo pelo menos um ácido graxo; glicerídeos ou glicerolipídeos (tal como monoglicerídeos, diglicerídeos, triglicerídeos, gorduras neutras, fosfoglicerídeos, e glicerofosfolipídeos); nonglicerídeos (esfingolipídeos, lipídeos esteróis incluindo colesterol, hormônios esteróis, lipódeos prenol incluindo terpenóides, álcoois graxos, ceras, e policetídeos); e derivados de lipídeo complexo (lipídeos ligados a açúcar, glicolipídeos, e lipídeos ligados a proteína).

[0028] Os termos triacilglicerídeo, triacilglicerol, triglicerídeo, e TAG são ésteres compreendendo glicerol e três ácidos graxos.

[0029] O termo peso % de óleo se refere ao peso de óleo (isto é, moléculas de lipídeo) em uma célula como uma percentagem de peso seco de célula.

VISÃO GERAL [0030] Um aspecto da invenção se relaciona a uma composição para uso na perfuração ou manutenção de um furo de poço, compreendendo uma levedura oleaginosa.

[0031] Em alguns aspectos, a invenção se relaciona a um método para perfuração ou manutenção de um furo de poço, compreendendo a etapa de perfurar o furo de poço com uma sonda de perfuração, no qual

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9/39 o furo de poço compreende uma composição compreendendo uma levedura oleaginosa.

[0032] Em alguns aspectos, a invenção se relaciona a um método para perfuração ou manutenção de um furo de poço, compreendendo as etapas de contatar uma broca de perfuração ou uma haste de perfuração com uma composição compreendendo uma levedura oleaginosa, e perfuração do furo de poço com a broca de perfuração ou a haste de perfuração.

[0033] Em algumas concretizações, a levedura compreende uma modificação genética. Por exemplo, a modificação genética pode aumentar o teor de óleo da levedura, a modificação genética pode alterar a composição de lipídeo da levedura, ou a modificação genética pode proporcionar uma vantagem seletiva para a levedura, relativa a uma levedura não-modificada da mesma espécie.

II. FLUIDO DE COMPOSIÇÕES DE PERFURAÇÃO [0034] Vários aspectos da invenção se relacionam à composições que podem ser usadas como um fluido de perfuração ou lama de perfuração. Uma composição pode ser usada para produção de óleo ou gás natural, para operações de completação, operações de controle de areia, operação de manutenção de poços, e para serviços de bombeio, tal como cimentação, fraturamento hidráulico, e acidificação. Uma composição pode ser um fluido de perfuração, um fluido interno de perfuração, um fluido de manutenção de poços, um fluido de manchamento, um fluido de cimentação, um fluido de reservatório, um fluido de produção, um fluido de fraturamento, ou um fluido de completação.

[0035] Em certas concretizações, uma composição da invenção compreende uma levedura oleaginosa. Uma composição pode não compreender uma levedura oleaginosa, contudo, por exemplo, quando a composição é usada em um método no qual o método compreende

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10/39 adicionar a levedura oleaginosa à composição. A levedura oleaginosa pode ser intacta, lisada, ou parcialmente lisada. A levedura pode ser secada. Por exemplo, a levedura pode ser suprida como levedura secada, ou como um bolo ou um creme. A capacidade de suprir uma composição como levedura secada ou como um bolo ou creme proporciona vantagens para manuseio e transporte da composição, relativa a aditivos à base de algas ou bactérias, que podem lisar após secagem. Em algumas concretizações, a levedura compreende menos do que 10 peso % de água, tal como menos do que 5 peso % de água. Desse modo, uma composição da invenção pode compreender levedura oleaginosa, no qual as leveduras oleaginosas são leveduras secadas. Similarmente, uma composição pode compreender levedura oleaginosa, no qual a levedura compreende menos do que 10 peso % de água, menos do que 9 peso % de água, menos do que 8 peso % de água, menos do que 7 peso % de água, menos do que 6 peso % de água, menos do que 5 peso % de água, menos do que 4 peso % de água, menos do que 3 peso % de água, ou ainda menos do que 2 peso % de água.

[0036] Uma composição da invenção pode compreender cerca de 0,1% a cerca de 20% da levedura oleaginosa (isto é, por peso), tal como cerca de 0,2% a cerca de 10% de levedura oleaginosa, cerca de 0,5% a cerca de 5% de levedura oleaginosa, ou cerca de 1% a cerca de 4% de levedura oleaginosa, Uma composição da invenção pode compreender cerca de 0,0%, 0,1%, 0,2%, 0,3%, 0,4%, 0,5%, 0,6%, 0,7%, 0,8%, 0,9%, 1,0%, 1,1%, 1,2%, 1,3%, 1,4%, 1,5%, 1,6%, 1,7%,

1,8%, 1,9%, 2,0%, 2,1%, 2,2%, 2,3%, 2,4%, 2,5%, 2,6%, 2,7%, 2,8%,

2,9%, 3,0%, 3,1%, 3,2%, 3,3%, 3,4%, 3,5%, 3,6%, 3,7%, 3,8%, 3,9%,

4,0%, 4,1%, 4,2%, 4,3%, 4,4%, 4,5%, 4,6%, 4,7%, 4,8%, 4,9%, 5,0%,

5,1%, 5,2%, 5,3%, 5,4%, 5,5%, 5,6%, 5,7%, 5,8%, 5,9%, 6,0%, 6,1%,

6,2%, 6,3%, 6,4%, 6,5%, 6,6%, 6,7%, 6,8%, 6,9%, ou 7,0% de levedura

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11/39 oleaginosa (isto é, por peso).

[0037] Uma composição da invenção pode compreender 50% a 100% de levedura oleaginosa, por peso, por exemplo, no qual a composição é um aditivo de fluido de perfuração (por exemplo, um lubrificante). Uma composição pode compreender 60% a 100% de levedura oleaginosa, 70% a 100% de levedura oleaginosa, 80% a 100% de levedura oleaginosa, 90% a 100% de levedura oleaginosa, ou 95% a 100% de levedura oleaginosa. Uma composição pode compreender pelo menos 60%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, ou 99% de levedura oleaginosa. Uma composição pode compreender 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, ou 100% de levedura oleaginosa. Composições compreendendo pelo menos 60% de levedura oleaginosa podem estar na forma de um bolo ou de um creme e, por exemplo, tais composições podem compreender menos do que 10 peso % de água, menos do que 9 peso % de água, menos do que 8 peso % de água, menos do que 7 peso % de água, menos do que 6 peso % de água, menos do que 5 peso % de água, menos do que 4 peso % de água, menos do que 3 peso % de água, ou ainda menos do que 2 peso % de água.

[0038] Uma composição da invenção pode compreender cerca de 0,1% a cerca de 20% de óleo por peso, tal como cerca de 0,2% a cerca de 10% de óleo, cerca de 0,5% a cerca de 5% de óleo, ou cerca de 1% a cerca de 4% de óleo, por exemplo, no qual a composição compreende levedura oleaginosa, e a levedura oleaginosa compreende pelo menos metade do óleo na composição, Por exemplo, uma composição pode compreender levedura oleaginosa, e cerca de 0,1% a cerca de 20% de óleo, e a levedura oleaginosa pode compreender substancialmente todo do óleo na composição, Uma composição da invenção pode compreender cerca de 0,0%, 0,1%, 0,2%, 0,3%, 0,4%, 0,5%, 0,6%, 0,7%, 0,8%, 0,9%, 1,0%, 1,1%, 1,2%, 1,3%, 1,4%, 1,5%, 1,6%, 1,7%,

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1,8%, 1,9%, 2,0%, 2,1%, 2,2%, 2,3%, 2,4%, 2,5%, 2,6%, 2,7%, 2,8%,

2,9%, 3,0%, 3,1%, 3,2%, 3,3%, 3,4%, 3,5%, 3,6%, 3,7%, 3,8%, 3,9%,

4,0%, 4,1%, 4,2%, 4,3%, 4,4%, 4,5%, 4,6%, 4,7%, 4,8%, 4,9%, 5,0%,

5,1%, 5,2%, 5,3%, 5,4%, 5,5%, 5,6%, 5,7%, 5,8%, 5,9%, 6,0%, 6,1%,

6,2%, 6,3%, 6,4%, 6,5%, 6,6%, 6,7%, 6,8%, 6,9%, ou 7,0% de óleo por peso.

[0039] Uma composição da invenção pode compreender cerca de 0,1% a cerca de 20% de ácidos graxos por peso, tal como cerca de 0,2% a cerca de 10% de ácidos graxos, cerca de 0,5% a cerca de 5% de ácidos graxos, ou cerca de 1% a cerca de 4% de ácidos graxos, por exemplo, no qual a composição compreende levedura oleaginosa, e a levedura oleaginosa compreende pelo menos metade dos ácidos graxos na composição, For exemplo, uma composição pode compreender levedura oleaginosa, e cerca de 0,1% a cerca de 20% de ácidos graxos, e a levedura oleaginosa pode compreender substancialmente todos dos ácidos graxos na composição, Uma composição da invenção pode compreender cerca de 0,0%, 0,1%, 0,2%, 0,3%, 0,4%, 0,5%, 0,6%, 0,7%, 0,8%, 0,9%, 1,0%, 1,1%, 1,2%,

1,3%, 1,4%, 1,5%, 1,6%, 1,7%, 1,8%, 1,9%, 2,0%, 2,1%, 2,2%, 2,3%,

2,4%, 2,5%, 2,6%, 2,7%, 2,8%, 2,9%, 3,0%, 3,1%, 3,2%, 3,3%, 3,4%,

3,5%, 3,6%, 3,7%, 3,8%, 3,9%, 4,0%, 4,1%, 4,2%, 4,3%, 4,4%, 4,5%,

4,6%, 4,7%, 4,8%, 4,9%, 5,0%, 5,1%, 5,2%, 5,3%, 5,4%, 5,5%, 5,6%,

5,7%, 5,8%, 5,9%, 6,0%, 6,1%, 6,2%, 6,3%, 6,4%, 6,5%, 6,6%, 6,7%,

6,8%, 6,9%, ou 7,0% de ácidos graxos por peso.

[0040] Uma composição da invenção pode compreender água, por exemplo, água fresca.

[0041] Uma composição da invenção pode compreender carbonato de sódio, por exemplo, à uma concentração de cerca de 100 g/m³ a cerca de 10 kg/m³, tal como cerca de 200 g/m³ a cerca de 5 kg/m³, ou cerca de 500 g/m³ a cerca de 2 kg/m³.

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13/39 [0042] Uma composição da invenção pode compreender hidróxido de sódio, por exemplo, à uma concentração de cerca de 100 g/m³ a cerca de 10 kg/m³, tal como cerca de 200 g/m³ a cerca de 5 kg/m³, ou cerca de 500 g/m³ a cerca de 2 kg/m³.

[0043] Uma composição da invenção pode compreender cloreto de sódio, por exemplo, à uma concentração de cerca de 10 kg/m³ a cerca de 500 kg/m³, tal como cerca de 25 kg/m³ a cerca de 400 kg/m³, ou cerca de 50 kg/m³ a cerca de 250 kg/m³.

[0044] Uma composição da invenção pode compreender amido modificado, por exemplo, à uma concentração de cerca de 1 kg/m³ a cerca de 500 kg/m³, tal como cerca de 5 kg/m³ a cerca de 100 kg/m³, ou cerca de 10 kg/m³ a cerca de 50 kg/m³.

[0045] Uma composição da invenção pode compreender carbonato de cálcio, por exemplo, à uma concentração de cerca de 10 kg/m³ a cerca de 500 kg/m³, tal como cerca de 25 kg/m³ a cerca de 400 kg/m³, ou cerca de 50 kg/m³ a cerca de 250 kg/m³. O carbonato de cálcio pode compreender partículas variando de tamanho de cerca de 1 pm a cerca de 500 pm, tal como cerca de 2 pm a cerca de 200 pm.

[0046] Uma composição da invenção pode compreender um agente de controle de perda de fluido, tal como um amido nãomodificado, hidroxipropil amido, carboximetil amido, celulose nãomodificada, carboximetil-celulose, hidroxietil celulose, e/ou celulose polianiônica.

[0047] Uma composição da invenção pode compreender um solvente aquoso ou não-aquoso. Por exemplo, uma composição pode compreender água.

[0048] Uma composição da invenção pode compreender um viscosificador. Uma composição pode compreender um polímero de alginate, tal como um ou mais de alginato de sódio, sódio alginato de cálcio, amônia alginato de cálcio, alginato de amônia, alginato de

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14/39 potássio, e/ou alginato de propilenoglicol. Uma composição pode compreender argila organofílica, poliacrilamida, e/ou goma xantana. Por exemplo, uma composição pode compreender uma mistura de goma xantana e um derivado de celulose, por exemplo, com uma proporção de peso de cerca de 80:20 a cerca de 20:80. Um derivado de celulose pode ser selecionado de hidroxietilcelulose, hidroxipropilcelulose, carboximetilcelulose, e misturas dos precedentes. Uma composição pode compreender argila bentonítica.

[0049] Uma composição da invenção pode compreender um polissacarídeo não-iônico solúvel em água, tal como um derivado celulósico solúvel em água não-iônico, e/ou um derivado guar solúvel em água, não-iônico. Uma composição pode compreender um polissacarídeo solúvel em água, aniônico, tal como um carboximetil celulose e/ou polissacarídeo de Xanthomonas campestris. Uma composição pode compreender um poliglicol de peso molecular intermediário, tal como polietileno glicol, polipropileno glicol, e/ou poli(alcanodiol), por exemplo, tendo um peso molecular médio de cerca de 600 a cerca de 30.000 amu.

[0050] Uma composição da invenção pode compreender um aphron, partícula de polímero, partícula de polímero de termocura, e/ou particulado de nanocomposto. Aphrons podem ser cerca de 50 a cerca de 100 pm de diâmetro, tal como 25-100 pm, 25-50 pm, 5-50 pm, 5-25 pm, 7-15 pm, ou cerca de 10 pm de diâmetro. Uma composição pode compreender cerca de 0,001% a cerca de 5% de aphrons por massa.

[0051] Uma composição da invenção pode compreender uma partícula de polímero. Uma partícula de polímero pode ser substancialmente esférica. Tipicamente, uma partícula de polímero é sólida, e tem uma gravidade específica de cerca de 1,06. Uma partícula de polímero pode ter um grau fino ou grosseiro. Uma composição pode compreender uma partícula de polímero à uma concentração de cerca

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15/39 de 2 ppb a cerca de 12 ppb (por exemplo, cerca de 5 a cerca de 35 kg/m³), tal como cerca de 2 ppb a cerca de 8 ppb, ou cerca de 8 ppb a cerca de 12 ppb.

[0052] Uma composição da invenção pode compreender uma partícula de polímero de termocura. Uma composição pode compreender um particulado de nanocomposto. Uma composição pode compreender uma esfera de copolimero, tal como Alpine Drill Beads (Alpine Specialty Chemicals, Houston, TX).

[0053] Uma composição da invenção pode compreender um ou mais agentes de alcalinidade, inibidores de corrosão, antiespumantes, dispersantes, emulsificantes, agentes de controle de perda de fluido, agentes de espumamento (por exemplo, para fluidos à base de gás), inibidores de corrosão, lubrificantes, agentes de mistura, purificadores de oxigênio, purificadores de hidrosulfito, biocidas, inibidores de escala, removedores de escala, inibidores de xisto, solventes, surfactantes especializados, estabilizadores térmicos, viscosificadores e/ou purificadores de água.

[0054] Uma composição pode compreender um ou mais lubrificantes em adição à levedura oleaginosa. Um lubrificante pode compreender um ou mais de petróleo, destilado de petróleo, parafina, óleo de petróleo à base de parafina, destilado de petróleo leve hidrotratado, óleo mineral, glicol éter, polioxialquileno glicol monoalquil éter, polietileno glicol, 1-(2-butóxi-1-metiletoxi)propan-2-ol, alquenos (por exemplo, C16 alquenos, C14-C18 alquenos), alquenos lineares, olefinas, hidrocarbonetos C8-26 ramificados e lineares, hidrocarbonetos C10-25, hidrocarbonetos sintéticos, ácido graxo, ésteres de ácido graxo, ácidos graxos polimerizados, ésteres graxos polimerizados, tall-oil, emulsificantes, dietilenotriamina, tetraetilenopentamina, trietilenotetramina, anidrido maleico, imidazolina, diesel, óleo diesel, querosene, etilbenzeno, naftaleno, metanol, grafite, silica, silica

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16/39 cristalina, sal de silicate, quartzo, cristobalita, tridimita, gipsita, cal, calcário, montmorilonita organoamônia quaternária, argila de caulim, amônia bentonita alquil quaternária, lignita, asfalto, gilsonita, cloreto de cálcio, salmoura de cloreto de cálcio, celulose, hexahidrato de cloreto cromo (III), sulfato de bário, e potássio sulfato de magnésio. O um ou mais lubrificantes pode ser selecionado de ácidos graxos, tall oil, detergentes sulfonatados, ésteres fosfato, alcanolamidas, sulfonates de asfalto, grafite, e esferas de vidro.

[0055] Uma composição da invenção pode compreender um ou mais modificadores de densidade (por exemplo, um agente de pesagem ou aditivo de pesagem), tal como barita, hematita, óxido de manganês, carbonato de cálcio, carbonato de ferro, óxido de ferro, sulfite de chumbo, siderato, e/ou ilmenita.

[0056] Uma composição da invenção pode compreender um ou mais emulsificantes. Por exemplo, uma composição pode compreender um emulsificante não-iônico, tal como um alquilfenol etoxilatado ou álcool etoxilatado linear, ou um emulsificante aniônico, tal como um alquilaril sulfonato, álcool éter sulfonato, alquil amina sulfonato, sulfonato de petróleo, ou fosfato éter.

[0057] Uma composição da invenção pode compreender um ou mais aditivos selecionados de bentonita, goma xantana, goma guar, amido, carboximetilcelulose, hidroxietil celulose, celulose polianiônica, um biocida, um agente de ajuste de pH, poliacrilamida, um purificador de oxigênio, um purificador de sulfito de hidrogênio, um espumador, um desemulsificador, um inibidor de corrosão, um agente de controle de argila, um dispersante, um floculante, um redutor de fricção, um agente de ponte, um lubrificante, um viscosificante, um sal, um surfactante, um ácido, um aditivo de controle de perda de fluido, um gás, um emulsificante, um modificador de densidade, combustível de diesel, e/ou um aphron.

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III. LEVEDURA OLEAGINOSA [0058] As leveduras oleaginosas adequadas para uso em uma composição da invenção incluem, mas não são limitadas a Arxula, Aspergillus, Aurantiochytrium, Candida, Claviceps, Cryptococcus, Cunninghamella, Geotrichum, Hansenula, Kluyveromyces, Kodamaea, Leucosporidiella, Lipomyces, Mortierella, Ogataea, Pichia, Prototheca, Rhizopus, Rhodosporidium, Rhodotorula, Saccharomyces, Schizosaccharomyces, Tremella, Trichosporon, Wickerhamomyces, e Yarrowia.

[0059] Em algumas concretizações, a levedura oleaginosa é selecionada a partir do grupo consistindo de Arxula adeninivorans, Aspergillus niger, Aspergillus orzyae, Aspergillus terreus, Aurantiochytrium limacinum, Candida utilis, Claviceps purpurea, Cryptococcus albidus, Cryptococcus curvatus, Cryptococcus ramirezgomezianus, Cryptococcus terreus, Cryptococcus wieringae, Cunninghamella echinulata, Cunninghamella japonica, Geotrichum fermentans, Hansenula polymorpha, Kluyveromyces lactis, Kluyveromyces marxianus, Kodamaea ohmeri, Leucosporidiella creatinivora, Lipomyces lipofer, Lipomyces starkeyi, Lipomyces tetrasporus, Mortierella isabellina, Mortierella alpina, Ogataea polymorpha, Pichia ciferrii, Pichia guilliermondii, Pichia pastoris, Pichia stipites, Prototheca zopfii, Rhizopus arrhizus, Rhodosporidium babjevae, Rhodosporidium toruloides, Rhodosporidium paludigenum, Rhodotorula glutinis, Rhodotorula mucilaginosa, Saccharomyces cerevisiae, Schizosaccharomyces pombe, Tremella enchepala, Trichosporon cutaneum, Trichosporon fermentans, Wickerhamomyces ciferrii, e Yarrowia lipolytica.

[0060] Em algumas concretizações, a levedura oleaginosa não é Rhodoturula glutinis ou Rhodosporidium toruloides Ban no.

[0061] Yarrowia lipolytica e Arxula adeninivorans são bem

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18/39 adequadas para uso como uma levedura oleaginosa da invenção porque elas podem acumular uma grande percentagem de seu peso como óleo. Desse modo, a levedura oleaginosa pode ser Yarrowia lipolytica ou Arxula adeninivorans.

[0062] Em certas concretizações, a levedura oleaginosa pode ser uma levedura tolerante à alta temperatura, tal como Kluyveromyces marxianus.

[0063] Em algumas concretizações, a levedura oleaginosa não é Candida apicola, Candida sp., Cryptococcus curvatus, Cryptococcus terricolus, Debaromyces hansenii, Endomycopsis vernalis, Geotrichum carabidarum, Geotrichum cucujoidarum, Geotrichum histeridarum, Geotrichum silvicola, Geotrichum vulgare, Hyphopichia burtonii, Lipomyces lipofer, Lypomyces orentalis, Lipomyces starkeyi, Lipomyces tetrasporous, Pichia mexicana, Rodosporidium sphaerocarpum, Rhodosporidium toruloides, Rhodotorula aurantiaca, Rhodotorula dairenensis, Rhodotorula diffluens, Rhodotorula glutinus, Rhodotorula glutinis var. glutinis, Rhodotorula gracilis, Rhodotorula graminis Rhodotorula minuta, Rhodotorula mucilaginosa, Rhodotorula mucilaginosa var. mucilaginosa, Rhodotorula terpenoidalis, Rhodotorula toruloides, Sporobolomyces alborubescens, Starmerella bombicola, Torulaspora delbruekii, Torulaspora pretoriensis, Trichosporon behrend, Trichosporon brassicae, Trichosporon domesticum, Trichosporon laibachii, Trichosporon loubieri, Trichosporon loubieri var. loubieri, Trichosporon montevideense, Trichosporonpullulans, Trichosporon sp., Wickerhamomyces Canadensis, Yarrowia lipolytica, ou Zygoascus meyerae.

[0064] Em algumas concretizações, a levedura oleaginosa não é Mortierella, Mortierrla vinacea, Mortierella alpine, Pythium debaryanum, Mucor circinelloides, Aspergillus ochraceus, Aspergillus terreus, Pennicillium iilacinum, Hensenulo, Chaetomium, Cladosporium,

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Malbranchea, Rhizopus, ou Pythium.

[0065] Em certas concretizações, a levedura oleaginosa compreende pelo menos cerca de 45% em peso de óleo, tal como pelo menos cerca de 46, 47, 48, 49, 50, 51,52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61,62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71,72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81,82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91,92, 93, 94, ou 95 peso % de óleo. A levedura oleaginosa pode compreender cerca de 45% em peso de óleo a 100 peso % de óleo, tal como cerca de 50 peso % de óleo a cerca de 95 peso % de óleo, cerca de 55 peso % de óleo a cerca de 90 peso % de óleo, cerca de 60 peso % de óleo a cerca de 85 peso % de óleo, cerca de 63 peso % de óleo a cerca de 80 peso % de óleo, ou cerca de 65 peso % de óleo a cerca de 75 peso % de óleo. A levedura oleaginosa pode compreender cerca de 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61,62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81,82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91,92, 93, 94, ou 95 peso % de óleo.

[0066] Em certas concretizações, a levedura oleaginosa compreende pelo menos cerca de 45% em peso de ácidos graxos, tal como pelo menos cerca de 46, 47, 48, 49, 50, 51,52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61,62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71,72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81,82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91,92, 93, 94, ou 95 peso % de ácidos graxos. A levedura oleaginosa pode compreender cerca de 45% em peso de ácidos graxos ao 100 peso % de ácidos graxos, tal como cerca de 50 peso % de ácidos graxos a cerca de 95 peso % de ácidos graxos, cerca de 55 peso % de ácidos graxos a cerca de 90 peso % de ácidos graxos, cerca de 60 peso % de ácidos graxos a cerca de 85 peso % de ácidos graxos, cerca de 63 peso % de ácidos graxos a cerca de 80 peso % de ácidos graxos, ou cerca de 65 peso % de ácidos graxos a cerca de 75 peso % de ácidos graxos. A levedura oleaginosa pode compreender cerca de 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52,

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53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61,62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71,

72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81,82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90,

91,92, 93, 94, ou 95 peso % de ácidos graxos.

[0067] Em certas concretizações, a levedura oleaginosa compreende pelo menos cerca de 50% de ácido oleico como uma percentagem de lipídeos total. Em certas concretizações, a levedura oleaginosa compreende pelo menos cerca de 50% de ácido oleico como uma percentagem de lipídeos total C16 e C18. Estirpe Yarrowia lipolytica YB-392 da Coleta de Cultura ARS, por exemplo, compreende cerca de 50% a cerca de 62% de ácido oleico como uma percentagem de lipídeos totais C12 e C18. Os lipídeos C16 incluem ácido palmítico (16:0) e ácido palmitoleico (16:1), e lipídeos C18 incluem ácido estérico (18:0), ácido oleico (18:1), ácido linoleico (18:2), e ácido a-linolenico (18:3).

[0068] Em certas concretizações, a levedura oleaginosa compreende pelo menos cerca de 50% de ácido oleico como uma percentagem de lipídeos total, tal como pelo menos cerca de 51%, 52%, 53%, 54%, 55%, 56%, 57%, 58%, 59%, 60%, 61%, 62%, 63%, 64%,

65%, 66%, 67%, 68%, 69%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%,

77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%,

89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, ou 95% de ácido oleico como uma percentagem de lipídeos total. A levedura oleaginosa pode compreender 45% a 100% de ácido oleico como uma percentagem de lipídeos total, tal como 50% a 100%, 55% a 100%, 60% a 100%, 65% a 100%, 70% a 100%, cerca de 50% a cerca de 95%, cerca de 55% a cerca de 95%, cerca de 60% a cerca de 95%, cerca de 65% a cerca de 95%, cerca de 70% a cerca de 95%, cerca de 50% a cerca de 90%, cerca de 55% a cerca de 90%, cerca de 60% a cerca de 90%, cerca de 65% a cerca de 90%, ou cerca de 70% a cerca de 90% de ácido oleico como uma percentagem de lipídeos total. A levedura oleaginosa pode

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21/39 compreender cerca de 50% de ácido oleico como uma percentagem de lipídeos total, tal como cerca de 51%, 52%, 53%, 54%, 55%, 56%, 57%,

58%, 59%, 60%, 61%, 62%, 63%, 64%, 65%, 66%, 67%, 68%, 69%,

70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%,

82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%,

94%, ou 95% de ácido oleico como uma percentagem de lipídeos total.

[0069] Em certas concretizações, a levedura oleaginosa compreende pelo menos cerca de 50% de ácido oleico como uma percentagem de lipídeos total C16 e C18, tal como pelo menos cerca de 51%, 52%, 53%, 54%, 55%, 56%, 57%, 58%, 59%, 60%, 61%, 62%,

63%, 64%, 65%, 66%, 67%, 68%, 69%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%,

75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%,

87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, ou 95% de ácido oleico como uma percentagem de lipídeos total C16 e C18. A levedura oleaginosa pode compreender 45% a 100% de ácido oleico como uma percentagem de lipídeos total C16 e C18, tal como 50% a 100%, 55% a 100%, 60% a 100%, 65% a 100%, 70% a 100%, cerca de 50% a cerca de 95%, cerca de 55% a cerca de 95%, cerca de 60% a cerca de 95%, cerca de 65% a cerca de 95%, cerca de 70% a cerca de 95%, cerca de 50% a cerca de 90%, cerca de 55% a cerca de 90%, cerca de 60% a cerca de 90%, cerca de 65% a cerca de 90%, ou cerca de 70% a cerca de 90% de ácido oleico como uma percentagem de lipídeos total C16 e C18. A levedura oleaginosa pode compreender cerca de 50% de ácido oleico como uma percentagem de lipídeos total C16 e C18, tal como cerca de 51%, 52%, 53%, 54%, 55%, 56%, 57%, 58%, 59%, 60%, 61%, 62%, 63%, 64%, 65%, 66%, 67%, 68%, 69%, 70%, 71%, 72%, 73%,

74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%,

86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, ou 95% de ácido oleico como uma percentagem de lipídeos total C16 e C18.

[0070] Uma levedura oleaginosa pode ser estável à pressões de

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0,8 atm a 2 atm, 0,8 atm a 3 atm, 0,8 atm a 4 atm, 0,8 atm a 5 atm, 0,8 atm a 6 atm, 0,8 atm a 7 atm, 0,8 atm a 8 atm, 0,8 atm a 9 atm, 0,8 atm a 10 atm, 0,8 atm a 20 atm, 0,8 atm a 30 atm, 0,8 atm a 40 atm, 0,8 atm a 50 atm, 0,8 atm a 60 atm, 0,8 atm a 70 atm, 0,8 atm a 80 atm, 0,8 atm a 90 atm, 0,8 atm a 100 atm, 0,8 atm a 150 atm, 0,8 atm a 200 atm, 0,8 atm a 250 atm, 0,8 atm a 300 atm, 0,8 atm a 350 atm, 0,8 atm a 400 atm, 0,8 atm a 450 atm, 0,8 atm a 500 atm, 0,8 atm a 550 atm, 0,8 atm a 600 atm, 0,8 atm a 650 atm, 0,8 atm a 700 atm, 0,8 atm a 750 atm, 0,8 atm a 800 atm, 0,8 atm a 850 atm, 0,8 atm a 900 atm, 0,8 atm a 950 atm, ou 0,8 atm a 1000 atm. Uma levedura oleaginosa pode ser estável à uma pressão menor do que ou igual a 2 atm, 3 atm, 4 atm, 5 atm, 6 atm, 7 atm, 8 atm, 9 atm, 10 atm, 11 atm, 12 atm, 13 atm, 14 atm, 15 atm, 16 atm, 17 atm, 18 atm, 19 atm, 20 atm, 25 atm, 30 atm, 40 atm, 50 atm, 60 atm, 70 atm, 80 atm, 90 atm, 100 atm, 150 atm, 200 atm, 250 atm, 300 atm, 350 atm, 400 atm, 450 atm, 500 atm, 550 atm, 600 atm, 650 atm, 700 atm, 750 atm, 800 atm, 850 atm, 900 atm, 950 atm, ou 1000 atm. O termo estável, conforme usado em relação à uma levedura oleaginosa a uma certa pressão, pode se referir à estabilidade da membrana, tal como resistência à lise da membrana da célula, e/ou estabilidade da parede da célula, tal como resistência à ruptura da parede da célula. O termo estável, conforme usado em relação à uma levedura oleaginosa a uma certa pressão, pode se referir a pressões não-letais. Em contraste com muitas algas e bactérias, a levedura permanece viável à pressões hidroestáticas de até 1000 atm; e modificações genéticas, tal como a adição de triptofano permease Tat2, pode adicionalmente aumentar a estabilidade da levedura à pressões elevadas (ver, por exemplo, Abe, F. and K. Horikoshi, Mol. Cell. Biol. 20(21):8093-01 (2000)). A capacidade da levedura oleaginosa suportar altas pressões permite a liberação controlada de lipídeos da levedura por cisaihamento (por exemplo, por uma broca de perfuração)

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23/39 preferivelmente do que por pressões intra-poço, que podem se aproximar de 1000 atm em alguns casos (por exemplo, em profundidades que se aproximam de 10 km).

[0071] Uma levedura oleaginosa da invenção pode ser desenvolvida em meio compreendendo um substrato, tal como um açúcar de lignocelulose, acetato, ou glicerol (por exemplo, no qual um substrato é um produto de despejo obtido de despejo de refinaria de açúcar). Levedura, tal como Y. lipolytica, pode se desenvolver a baixo pH, e não requer nutrientes complexos. Por exemplo, Yarrowia pode se desenvolver em meio compreendendo um substrato de açúcar simples, fosfato de di-amônia, ou ureia, e vitaminas, por exemplo, a um pH de cerca de 5 a cerca de 6. Açúcares simples incluem açúcares de lignocelulose C5 e C6 (que são disponíveis a cerca de 10 ç/lb), acetato (que é disponível a menos do que 10 ç/lb), e glicerol (que é disponível a menos do que 10 ç/lb). Tais condições de crescimento podem ser escaladas sem rendimentos que afetam significantemente, permitindo, desse modo, a produção comercial de aditivos de fluido de perfuração poucos custosos. Adicionalmente, a levedura oleaginosa e condições de crescimento podem ser selecionadas para produção em sistemas não-esterilizados, permitindo economimas adicionais de custo.

IV. MODIFICAÇÕES GENÉTICAS À LEVEDURA OLEAGINOSA [0072] Uma levedura oleaginosa da invenção pode compreender uma ou mais modificações genéticas que afetam seu teor de lipídeo ou composição de lipídeo. Por exemplo, a expressão de um diacilglicerol aciltransferase pode aumentar o teor de óleo de uma levedura (isto é, peso % de óleo). Similarmente, a anulação de um triacilglicerol lipase pode aumentar o teor de óleo de uma levedura.

[0073] Uma levedura oleaginosa da invenção pode compreender uma modificação genética que aumenta atividade de diacilglicerol aciltransferase, por exemplo, conforme descrita na Publicação PCT No.

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WO 2015/168531 (desse modo, incorporado por referência em sua totalidade). Por exemplo, uma levedura oleaginosa pode ser transformada com um ácido nucleico que codifica um diacilglicerol aciltransferase, por exemplo, para expressar o diacilglicerol aciltransferase na levedura. O diacilglicerol aciltransferase pode ser um diacilglicerol aciltransferase do tipo 1, diacilglicerol aciltransferase do tipo 2, diacilglicerol aciltransferase do tipo 3, ou qualquer outra proteína que catalisa a conversão de diacilglicerol em um triacilglicerídeo. Em algumas concretizações, o diacilglicerol aciltransferase é DGA1. Por exemplo, o diacilglicerol aciltransferase pode ser uma proteína de DGA1 codificada por um gene DGAT2 encontrado em um organismo selecionado a partir do grupo consistindo de Arxula adeninivorans, Aspergillus terreus, Aurantiochytrium limacinum, Claviceps purpurea, Gloeophyllum trabeum, Lipomyces starkeyi, Microbotryum violaceum, Pichia guilliermondii, Phaeodactylum tricornutum, Puccinia graminis, Rhodosporidium diobovatum, Rhodosporidium toruloides, Rhodotorula graminis, e Yarrowia lipolytica.

[0074] Em algumas concretizações, o diacilglicerol aciltransferase é DGA2. Por exemplo, o diacilglicerol aciltransferase pode ser uma proteína de DGA2 codificada por um gene DGAT1 encontrado em um organismo selecionado a partir do grupo consistindo de Arxula adeninivorans, Aspergillus terreus, Chaetomium globosum, Claviceps purpurea, Lipomyces starkeyi, Metarhizium acridum, Ophiocordyceps sinensis, Phaeodactylum tricornutum, Pichia guilliermondii, Rhodosporidium toruloides, Rhodotorula graminis, Trichoderma virens, e Yarrowia lipolytica.

[0075] Em algumas concretizações, o diacilglicerol aciltransferase é DGA3. Por exemplo, o diacilglicerol aciltransferase pode ser uma proteína de DGA3 codificada por um gene DGAT3 encontrado em um organismo selecionado a partir do grupo consistindo de Ricinus

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25/39 communis e Arachis hypogaea.

[0076] Os genes DGAT1, DGAT2, e DGAT3 podem compreender substiutuições, anulações e/ou inserções conservativas, enquanto que ainda codificam uma proteína que tem atividade funcional de diacilglicerol aciltransferase. Por exemplo, os códons de DGAT1, DGAT2, ou DGAT3 podem ser otimizados para uma célula hospedeira particular, codons diferentes podem ser substituídos por conveniência, tal como para introduzir um local de restrição, ou criar primeres de PCR ótimos, ou códons podem ser substituídos para outra proposta. Similarmente, a sequência de nucleotídeo pode ser alterada para criar substituições, anulações e/ou inserções de amino ácido conservativas. Os polipeptídeos de DGA1, DGA2, e DGA3 podem compreender substituições, anulações e/ou inserções conservativas, enquanto que ainda mantêm atividade funcional de diacilglicerol aciltransferase. Substituições de amino ácido conservativas são bem conhecidas (ver, por exemplo, Creighton, Proteins (2d. ed., 1992)).

[0077] Substituições, anulações e/ou inserções de DNA e/ou amino ácido podem prontamente serem produzidas usando técnicas de manipulação de DNA recombinante. Métodos para a manipulação de sequências de DNA para produzir substituições, inserções, ou anulações são bem conhecidos, e incluem mutagênese de M13, mutagênese de T7-Gen in vitro (USB, Cleveland, OH), mutagênese Direcionada de Local de Mudança Rápida (Stratagene, San Diego, CA), mutagênese direcionada de local mediada por PCR, e outros protocolos de mutagênese direcionada de local.

[0078] Um triacilglicerol lipase exaure um triacilglicerol da célula por remoção de uma ou mais cadeias de ácido graxo. Desse modo, a diminuição da atividade de triacilglicerol lipase líquida de uma levedura pode aumentar o peso % de óleo da levedura. Este aumento pode ser efetuado por redução da eficiência da enzima, por exemplo, por

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26/39 mutação de amino ácidos em seu local ativo, ou por redução da expressão da enzima. Por exemplo, uma mutação eliminatória TGL3 aumentará a atividade de um triacilglicerol lipase porque tais mutações impedem a célula de transcrição de TGL3.

[0079] Em algumas concretizações, o triacilglicerol lipase é TGL3, TGL3/4, ou TGL4.

[0080] O gene TGL3 em Y. lipolytica codifica a proteína triacilglicerol lipase. Métodos para eliminação de gene TGL3 em Y. lipolytica são descritos na Publicação de Pedido de Patente PCT No. WO 2015/168531, publicada em 5 de novembro de 2015 (desse modo, incorporada por referência em sua totalidade). Métodos similares podem ser usados para reduzir a atividade do gene TGL4 em Y. lipolytica, ou para reduzir a atividade de um triacilglicerol lipase (por exemplo, TGL4, TGL3/4, ou TGL4) em uma levedura oleaginosa diferente.

[0081] A anulação de vários genes e/ou expressão de várias enzimas em uma levedura pode aumentar o teor de ácido oleico da levedura (ver, por exemplo, US 62/090,169, depositada em 10 de dezembro de 2014, desse modo incorporada por referência em sua totalidade). A anulação do gene Δ12 desaturase de Y. lipolytica, por exemplo, pode aumentar a percentagem de ácido oleico a cerca de 70% como uma percentagem de lipídeos totais C16 e C18, relativa ao tipo selvagem. A sobre expressão de um gene Δ9 desaturase, tal como um gene Δ9 desaturase de Y. lipolytica ou Puccinia graminis, pode também aumentar ácido oleico como uma percentagem de lipídeos totais de C16 e C18. A sobre expressão de um gene elongase, tal como um ELO1 de Y. lipolytica, pode similarmente aumentar ácido oleico como uma percentagem de lipídeos totais C16 e C18.

EXEMPLIFICAÇÂO

Exemplo 1 - Estirpes de Levedura

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27/39 [0082] Estirpe NS432 é uma estirpe recombinante de Yarrowia lipolytica descrita na Publicação de Pedido de Patente PCT No. WO 2015/168531, publicada em 5 de novembro de 2015 (desse modo, incorporado por referência em sua totalidade). A NS432 expressa DGA1 de Rhodosporidium toruloides e DGA2 de Claviceps purpurea, e compreende a eliminatória do gene TGL3. Brevemente, DGA1 de R. toruloides foi sobre expresso na estirpe Y. lipolytica YB-392 da Coleta de Cultura ARS. Uma levedura recombinante compreendendo um alto teor de lipídeo foi selecionada, e o gene para TGL3 foi eliminado desta estirpe. DGA2 de C. purpurea foi sobre expresso na eliminatória resultante, e a levedura compreendendo o teor mais alto de lipídeo foi denominado NS432. A estirpe NS432 compreende cerca de 63 peso % de óleo a cerca de 75 peso % de óleo quando desenvolvida em condições de laboratório. O produto NS432 usado como um lubrificante nos seguintes exemplos contém 70,1 peso % de óleo.

[0083] A estirpe NS551 é também uma estirpe recombinante de Y.lipolytica que foi gerada da estirpe YB-392 da Coleta de Cultura ARS. NS551 foi gerado por primeira sobre expressão de Y. lipolytica DGA1, então sobre expressando C. purpurea DGA2, então eliminando o gene Δ12 desaturase, então sobre expressando Y. lipolytica ELO1, então sobre expressando Y. lipolytica Δ9 desaturase. A estirpe NS551 compreende 87% de ácido oleico como uma percentagem de lipídeos totais C16 e C18. O produto NS551 usado como um lubrificante nos seguintes exemplos contém 65,3 peso % de óleo.

[0084] Exemplo 2 - Preparação do Fluido de Perfuração [0085] Um fluido de perfuração de água fresca foi preparado em um misturador Silverson de acordo com a Tabela 1.

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28/39 [0086] Tabela 1. Composição e Preparação de um Fluido de

Perfuração

Produto	Tipo	Concentração	Tempo de mistura
Água fresca		1 m³
Carbonato de sódio	controle de pH	1 kg/m³	2 min
Soda cáustica	controle de pH	1 kg/m³	2 min
NaCI	Salinidade	134 kg/m³	5 min
Verificação -Filtro Baroid	Controle de filtração (amido modificado)	20 kg/m³	15 min
Baroid Barazan D	Controle da viscosidade (polímero XC e outros polímeros)	4 kg/m³	15 min
CaCOs-5 μ	Controle de filtração	20 kg/m³	5 min
CaCOs-25 μ	Controle de filtração	40 kg/m³	5 min
CaCOs - 50 μ	Controle de filtração	40 kg/m³	5 min

[0087] Após preparação da formulação de acordo com a Tabela 1, lubrificantes foram adicionados por 5 minutos em um misturador Raynerie. O misturador Raynerie foi usado para adicionar os lubrificantes para evitar cisalhamento no misturador Silverson. Os fluidos de perfuração foram preparados usando 1%, 2%, 3%, e 4% de óleo adicionado como estirpe NS432, estirpe NS551, ou Baroid BAROLUBE GOLD SEAL. A levedura foi normalizada de acordo com o teor de óleo, isto é, NS432, que contém 70,1% de óleo, e NS551, que contém

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65,3% de óleo, foram adicionadas para alcançar 1%, 2%, 3%, ou 4% de óleo total nas misturas de fluido de perfuração. Adicionalmente, um fluido de perfuração foi preparado sem óleo como um controle.

[0088] A folha de dados do produto BARO-LUBE GOLD SEAL recomenda adicionar 2% por volume do lubrificante ao fluido de perfuração, até 5% por volume para casos severos e/ou para fluidos de perfuração demasiadamente pesados. A Folha de Dados de Segurança de Material BARO-LUBE GOLD SEAL cita que ele compreende 60100% de óleo de soja e 5-10% de polipropileno glicol.

Exemplo 3 - Testes de Avaliação para Definir Concentrações Ótimas do Lubrificante [0089] O desempenho de vários fluidos de perfuração foi avaliado em um Testador de Pressão Extremo e de Lubrificação OFITE. O instrumento aplica força entre duas superfícies de aço endurecida, um bloco e um anel que gira à uma velocidade desejada. Os fluidos de perfuração contendo 1%, 2%, ou 3% de óleo como Baroid Baro-Lube Gold Seal foram avaliados com 125 polegada x Ibs força e rotação de 150 RPM para protocolos de teste de lubrificante padrão de espelho (por exemplo, Johnson, P. et a!., Am. Assoc. Drilling Engineers, Fluids Technical Conference and Exhibition, Paper #AADE-14-FTCE-10 (Houston, TX, April 15-16, 2014), disponível em

Leuturas adequadas foram obtidas, e fatores de fricção não mostram dependência do tempo.

[0090] Tabela 2. Desempenho dos Fluidos de Perfuração Compreendendo Várias Concentrações de Lubrificante Baroid BaroLube Gold Seal

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BARO-LUBE GOLD SEAL™ 1%
Tempo min	Temperatura Ό	Fator de fricção
0	22,4	0,05
2	22,6	0,05
4	22,8	0,04
15	23,9	0,04
30	24,9	0,04

BARO-LUBE GOLD SEAL™ 2%
Tempo min	Temperatura Ό	Fator de fricção
0	22,8	0,04
2	23	0,04
15	24,7	0,04
41	27	0,045
65	28,6	0,04

BARO-LUBE GOLD SEAL™ 3%
Tempo min	Temperatura Ό	Fator de fricção
0	23,1	0,04
2	23,6	0,04
39	28	0,045

[0091] O fator de fricção de água fresca foi avaliado com 150 polegadas x Ibs força e 50 RPM como um controle. Um fator de fricção de 0,34 foi observado, que é consistente com resultados conhecidos. A temperatura do fluido de perfuração aumenta sobre o curso do experimento, consistente com o fator de fricção elevado.

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31/39 [0092] Tabela 3. Fatores de fricção para Água fresca

Água fresca
Tempo min	Temperatura Ό	Fator de fricção
0	24Ό	0,34
15	45Ό	0,34
120	78Ό	0,34

[0093] Fluidos de perfuração contendo 1 %, 2%, 3%, ou 4% de óleo total como NS432, providos como um pó, foram avaliados com 125 polegadas x Ibs forças e rotação de 150 RPM em um Testador de Pressão Extremo e de Lubrificação OFITE. O fator de fricção diminui com o aumento do tempo, sugerindo que óleo foi liberado durante o curso do teste. A 1% e 3% de óleo, os fatores de fricção diminuem à um mínimo, e então tendem a aumentar com o tempo. O aumento observado no fator de fricção pode ser causado por aumento de sólidos no fluido de perfuração com o tempo. A Figura 1, por exemplo, é uma fotografia de uma amostra de 3% de óleo total para NS432, que representa sólidos no fundo do vaso.

[0094] Tabela 4. Desempenho dos Fluidos de Perfuração

Compreendendo Várias Concentrações de Lubrificante NS432

NS432 1%
Tempo min	Temperatura ^QC	Fator de fricção
0	22,6	0,13
1	23	0,11
2	23,4	0,1
5	24,5	0,095
10	26	0,1
15	27,4	0,1
30	30,8	0,1
45	33	0,1
60	34,9	0,105

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NS432 1%
Tempo min	Temperatura ^QC	Fator de fricção
75	36,8	0,11
90	40,4	0,13
120	41,9	0,14

NS432 2%
Tempo min	Temperatura ^QC	Fator de fricção
0	20,8	0,17
2	21,8	0,15
4	22,8	0,13
10	23,9	0,11
15	26,2	0,105
20	28,1	0,105
30	29,7	0,1
45	31,9	0,1
60	33,5	0,1
75	34,3	0,1
90	34,8	0,09
105	35	0,09
120	35,1	0,09

NS432 3%
Tempo min	Temperatura ^QC	Fator de fricção
0	22,2	0,12
2	23,1	0,12
5	24	0,115
10	25,8	0,12
20	28,6	0,115

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NS432 3%
Tempo min	Temperatura ^QC	Fator de fricção
37	31,9	0,105
45	32,8	0,105
60	34,9	0,11
75	37	0,12
120	40,2	0,12

NS432 4%
Tempo min	Temperatura ^QC	Fator de fricção
0	21,4	0,19
0,5	21,6	0,17
1	22	0,19
2	23	0,2
3	23,5	0,21
5	24,4	0,215
10	27,7	0,19
15	30	0,17
30	34	0,155
49	36,5	0,135
60	37,2	0,13
75	37,8	0,12
90	37,9	0,11
105	37,9	0,11
120	37,9	0,11

[0095] Estes testes demonstram que NS432 é um lubrificante de fluido de perfuração eficiente à base de água, que pode proporcionar um fator de fricção de menos do que 0,10, e até uma redução de 74% no fator de fricção relativa à água. Baseado nestes testes, 2% de óleo total como NS432 foi usado em experimentos subsequentes.

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34/39 [0096] Fluidos de perfuração contendo 1%, 2%, ou 3% de óleo total como NS551, providos como um pó, foram avaliados com 125 polegadas x Ibs forças e rotação de 150 RPM em um Testador de Pressão Extremo e de Lubrificação OFITE. O fator de fricção diminui com o aumento do tempo, sugerindo que óleo foi liberado durante o curso do teste.

[0097] Estes testes demonstram que NS551 é um lubrificante de fluido de perfuração eficiente à base de água, que pode proporcionar até uma redução de 59% no fator de fricção relativa à água. Baseado nestes testes, 1% de óleo total como NS551 foi usado nos experimentos subsequentes.

[0098] Tabela 5. Desempenho de Fluidos de Perfuração

Compreendendo Várias Concentrações de Lubrificante NS551

NS551 1%
Tempo min	Temperatura ^QC	Fator de fricção
0	22,4	0,16
1	22,5	0,145
2	22,9	0,17
3	23,4	0,185
5	24,9	0,185
10	27,8	0,18
15	30	0,155
20	32,1	0,15
30	35,7	0,145
47	38,9	0,15
60	41,5	0,16
95	43,3	0,155
120	45,8	0,165

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NS551 2%
Tempo min	Temperatura ^QC	Fator de fricção
0	22	0,215
1	22,8	0,195
2	23,5	0,185
5	25,3	0,17
10	27,5	0,16
20	32,4	0,16
30	35,4	0,16
45	38,9	0,16
60	42	0,17
105	48	0,2
107	50,8	0,22
120	52,5	0,225

NS155 3%
Tempo min	Temperatura ^QC	Fator de fricção
0	21,6	0,23
1	21,7	0,22
2	22,6	0,22
5	25	0,215
10	28,7	0,215
15	32,5	0,21
33	40,4	0,2
50	43,9	0,2
60	45,8	0,195
90	48	0,19
105	48,7	0,195
120	49,7	0,2

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Exemplo 4 - Desempenho do Lubrificante [0099] Fluidos de perfuração foram preparados de acordo com o Exemplo 2, compreendendo lama sem lubrificante, lama com 3% de lubrificante BARO-LUBE GOLD SEAL, e lama com 3% de óleo total suprido como NS432. Cada fluido de perfuração foi laminado à quente por 16 horas a 600 para similar condições de poço. O lubrificante NS432 não mostra efeitos adversos na lama de perfuração, e a perda de fluido foi reduzida. O NS432 revelou um efeito na reologia, com uma diluição do fluido a valores que não foram nocivos à flutuabilidade dos sólidos, e nenhuma decantação foi observada.

[00100] Tabela 6. Desempenho de Vários Fluidos de Perfuração após 16 Horas de Laminação à Quente a 60Ό

TESTE	Unidades	Lama	Lama + 3% de Barolube	Lama + 3% de NS 432
DENSIDADE @ 27^QC	SG	1,15	1,15	1,15
REOLOGIA	Lama	Lama + 3% de Barolube	Lama + 3% de NS 432
	Unidades
	Temp ^QC	30	30	30
600 rpm		88	88	47
300 rpm		64	64	32
200 rpm		53	53	26
100 rpm		39	39	19
60 rpm		32	32	16
30 rpm		23	25	13
6 rpm		14	10	7
3 rpm		11	12	6
GELS 10”	lbf/100ft²	12	12	6
GELS 10”	lbf/100ft²	16	15	9
VISCOSIDADE PLÁSTICA (PV=F600-F300)	Cp	24	25	15

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TESTE	Unidades	Lama	Lama + 3% de Barolube	Lama + 3% de NS 432
DENSIDADE @ 27^QC	SG	1,15	1,15	1,15
REOLOGIA	Lama	Lama + 3% de Barolube	Lama + 3% de NS 432
	Unidades
	Temp ^QC	30	30	30
PONTO DE RENDIMENTO (YP=F300-PV)	lbf/100ft²	40	40	17
RENDIMENTO DE BAIXO CISALHAMENTO = 0,5 x (F3+F6) TENSÃO DE RENDIMENTO = 2 x F3-F6		12,5	11	6,5
	lbf/100ft²	8	14	5
FILTRAÇÃO HPHT	Unidades	Lama	Lama + 3% de Barolube	Lama + 3% de NS 432
Temperatura	^QC	TA	TA	TA
Pressão Diferencial	psi	100	100	100
Volume coletado @ 30 min	mL	6	4	4
ESPESSURA DO BOLO	mm	1	2	1
pH	Unidades	Lama	Lama + 3% de Barolube	Lama + 3% de NS 432
pH	8,7	8,7	8,3

[00101] Reologias foram medidas novamente, apenas após mistura, para determinar se o comportamento de diluição observado para NS432 ocorreu antes ou após laminação à quente. Sob estas condições, o fluido de perfuração compreendendo 3% de óleo como

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NS432 mostrou os mesmos parâmetros reológicos como fluido de perfuração sem lubrificante (Tabela 7).

[00102] Tabela 7. Reologias de Vários Fluidos de Perfuração sem

Laminação À Quente

REOLOGIA bis		Lama	Lama + 3% de NS 432
		Unidades
		Temp ^QC	30	30
	600 rpm		83	93
	300 rpm		57	65
	200 rpm		46	53
	100 rpm		33	38
	60 rpm		26	31
	30 rpm		19	23
	6 rpm		10	12
	3 rpm		8	9
	lbf/100ft²	9	-
GELS 10”	lbf/100ft²	11	-
VISCOSIDADE PLÁSTICA (PV=F600-F300)	cP	26	28
PONTO DE RENDIMENTO (YP=F300-PV)	lbf/100ft²	31	37
RENDIMENTO DE BAIXO CISALHAMENTO = 0,5 x (F3+F6)		9	10,5
TENSÃO DE RENDIMENTO = 2 x F3-F6	lbf/100ft²	6	6

[00103] A lubrificação foi medida sob as condições descritas no Exemplo 3 para os fluidos de perfuração compreendendo lama sem

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39/39 lubrificante, lama com 3% de lubrificante BARO-LUBE GOLD SEAL, e lama com 3% de óleo total suprido como NS432, após laminação à quente de cada fluido (Figura 3). O fluido de perfuração sem lubrificante exibiu um fator de fricção menor do que a água fresca, mas resultou em forte marcador no bloco, requerendo cessamento prematuro do experimento. O fluido de perfuração laminado à quente compreendendo 3% de BARO-LUBE GOLD SEAL resultou em um fator de fricção que estabiliza a cerca de 0,14 após 30 minutos. O fluido de perfuração laminado à quente compreendendo 3% de óleo suprido como NS432 resultou em um fator de fricção que estabiliza a cerca de 0,16.

INCORPORAÇÃO POR REFERÊNCIA [00104] Todas das patentes, pedidos de patente publicados, e outras referências aqui citadas são, desse modo, incorporados por referência.

EQUIVALENTES [00105] Aqueles técnicos no assunto reconhecerão, ou serão capazes de determinar usando não mais do que experimentação de rotina, muitos equivalentes às concretizações específicas da invenção aqui descrita. Tais equivalentes são pretendidos para serem envolvidos pelas seguintes reivindicações.

Claims

REIVINDICAÇÕES

1. Composição para uso na perfuração ou manutenção de um furo de poço, caracterizada pelo fato de compreender uma levedura oleaginosa, no qual a levedura oleaginosa não é Rhodoturula glutinis.
2. Composição para uso na perfuração ou manutenção de um furo de poço, caracterizada pelo fato de compreender uma levedura oleaginosa, no qual a levedura oleaginosa compreende uma modificação genética selecionada a partir do grupo consistindo de:

uma modificação genética que aumenta o teor de óleo da levedura;

uma modificação genética que altera a composição de lipídeo da levedura; e uma modificação genética que proporciona uma vantagem seletiva para a levedura, relativa a uma levedura não-modificada da mesma espécie.
3. Composição para uso na perfuração ou manutenção de um furo de poço, caracterizada pelo fato de compreender uma levedura oleaginosa, no qual a levedura oleaginosa compreende pelo menos cerca de 45% em peso de óleo.
4. Composição para uso na perfuração ou manutenção de um furo de poço, caracterizada pelo fato de compreender uma levedura oleaginosa, no qual pelo menos cerca de10 peso % dos lipídeos da levedura são ácido oleico.
5. Composição para uso na perfuração ou manutenção de um furo de poço, caracterizada pelo fato de compreender uma levedura oleaginosa, no qual menos do que cerca de 10 peso % dos lipídeos da levedura são poli-insaturados.
6. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, caracterizada pelo fato de que a levedura

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2/5 oleaginosa compreende pelo menos cerca de 60 peso % de óleo.
7. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizada pelo fato de que pelo menos cerca de 70 peso % dos lipídeos da levedura são ácido oleico.
8. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, caracterizada pelo fato de que a levedura oleaginosa compreende uma modificação genética que aumenta atividade de diacilglicerol aciltransferase.
9. Composição, de acordo com a reivindicação 8, caracterizada pelo fato de que a modificação genética que aumenta a atividade de diacilglicerol aciltransferase é transformação com um amino ácido que codifica um diacilglicerol aciltransferase.
10. Composição, de acordo com a reivindicação 9, caracterizada pelo fato de que o diacilglicerol aciltransferase é DGA1, DGA2, ou DGA3.
11. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 10, caracterizada pelo fato de que a levedura oleaginosa compreende uma modificação genética que diminui atividade de triacilglicerol lipase.
12. Composição, de acordo com a reivindicação 11, caracterizada pelo fato de que a modificação genética que diminui atividade de triacilglicerol lipase é uma mutação eliminatória.
13. Composição, de acordo com a reivindicação 12, caracterizada pelo fato de que o triacilglicerol lipase é TGL3, TGL3/4, ou TGL4.
14. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 13, caracterizada pelo fato de que a levedura oleaginosa é selecionada a partir do grupo consistindo de Arxula, Aspergillus, Aurantiochytrium, Candida, Claviceps, Cryptococcus, Cunninghamella, Geotrichum, Hansenula, Kluyveromyces, Kodamaea,

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Leucosporidiella, Lipomyces, Mortierella, Ogataea, Pichia, Prototheca,

Rhizopus, Rhodosporidium, Rhodotorula, Saccharomyces,

Schizosaccharomyces, Tremella, Trichosporon, Wickerhamomyces, e

Yarrowia.
15. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 14, caracterizada pelo fato de que a levedura oleaginosa é selecionada a partir do grupo consistindo de Arxula adeninivorans, Aspergillus niger, Aspergillus orzyae, Aspergillus terreus, Aurantiochytrium limacinum, Candida utilis, Claviceps purpurea, Cryptococcus albidus, Cryptococcus curvatus, Cryptococcus ramirezgomezianus, Cryptococcus terreus, Cryptococcus wieringae, Cunninghamella echinulata, Cunninghamella japonica, Geotrichum fermentans, Hansenula polymorpha, Kluyveromyces lactis, Kluyveromyces marxianus, Kodamaea ohmeri, Leucosporidiella creatinivora, Lipomyces lipofer, Lipomyces starkeyi, Lipomyces tetrasporus, Mortierella isabellina, Mortierella alpina, Ogataea polymorpha, Pichia ciferrii, Pichia guilliermondii, Pichia pastoris, Pichia stipites, Prototheca zopfii, Rhizopus arrhizus, Rhodosporidium babjevae, Rhodosporidium toruloides, Rhodosporidium paludigenum, Rhodotorula glutinis, Rhodotorula mucilaginosa, Saccharomyces cerevisiae, Schizosaccharomyces pombe, Tremella enchepala, Trichosporon cutaneum, Trichosporon fermentans, Wickerhamomyces ciferrii, e Yarrowia lipolytica.
16. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 14, caracterizada pelo fato de que a levedura oleaginosa não é Aspergillus ochraceus, Aspergillus terreus, Candida apicola, Candida sp., Cladosporium, Cryptococcus curvatus, Cryptococcus terricolus, Debaromyces hansenii, Endomycopsis vernalis, Geotrichum carabidarum, Geotrichum cucujoidarum, Geotrichum histeridarum, Geotrichum silvicola, Geotrichum vulgare,

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Hensenulo, Chaetomium, Hyphopichia burtonii, Lipomyces lipofer, Lypomyces orentalis, Lipomyces starkeyi, Lipomyces tetrasporous, Malbranchea, Mortierella, Mortierrla vinacea, Mortierella alpine, Mucor circinelloides, Pennicillium iilacinum, Pichia mexicana, Pythium, Pythium debaryanum, Rhizopus, Rodosporidium sphaerocarpum, Rhodosporidium toruloides, Rhodotorula aurantiaca, Rhodotorula dairenensis, Rhodotorula diffluens, Rhodotorula glutinus, Rhodotorula glutinis var. glutinis, Rhodotorula gracilis, Rhodotorula graminis Rhodotorula minuta, Rhodotorula mucilaginosa, Rhodotorula mucilaginosa var. mucilaginosa, Rhodotorula terpenoidalis, Rhodotorula toruloides, Sporobolomyces alborubescens, Starmerella bombicola, Torulaspora delbruekii, Torulaspora pretoriensis, Trichosporon behrend, Trichosporon brassicae, Trichosporon domesticum, Trichosporon laibachii, Trichosporon loubieri, Trichosporon loubieri var. loubieri, Trichosporon montevideense, Trichosporon pullulans, Trichosporon sp., Wickerhamomyces Canadensis, Yarrowia lipolytica, ou Zygoascus meyerae.
17. Composição, de acordo com a reivindicação 15, caracterizada pelo fato de que a levedura oleaginosa é Yarrowia lipolytica ou Arxula adeninivorans.
18. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 17, caracterizada pelo fato de que a parede da célula da levedura oleaginosa é estável à pressão de 0,8 atmosfera a 5 atmosferas.
19. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 18, caracterizada pelo fato de que a composição é um bolo ou creme.
20. Método para perfuração ou manutenção de um furo de poço, caracterizado pelo fato de compreender a etapa de perfurar o furo de poço com uma sonda de perfuração, no qual o furo de poço

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5/5 compreende uma composição para uso como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 19.
21. Método para perfuração ou manutenção de um furo de poço, caracterizado pelo fato de compreender as etapas de contatar uma broca de perfuração ou uma haste de perfuração com a composição de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 19, e perfuração do furo de poço com a broca de perfuração ou com a haste de perfuração.