BR112017016093B1

BR112017016093B1 - composição sólida, curativo de ferida, e, método de fabricação de uma composição

Info

Publication number: BR112017016093B1
Application number: BR112017016093-5A
Authority: BR
Inventors: Hoggarth Andrew; Hardy Craig
Original assignee: Medtrade Products Limited
Priority date: 2015-01-27
Filing date: 2016-01-27
Publication date: 2021-05-11
Also published as: AU2016210991A1; GB201501330D0; CA2975043A1; EP3250243B1; EP3250243A1; KR102608156B1; GB2537008B; AU2016210991B2; GB201601531D0; WO2016120620A1; PT3250243T; SA517381996B1; GB2537008A; ES2944592T3; DK3250243T3; RU2017129870A3; CN107580506A; PL3250243T3; KR20170107011A; PL3250243T4

Abstract

COMPOSIÇÃO SÓLIDA, CURATIVO DE FERIDA, E, MÉTODO DE FABRICAÇÃO DE UMA COMPOSIÇÃO. A presente invenção refere-se a uma composição que pode ser usada como ou como parte de um curativo de ferida e aos curativos de ferida compreendendo a mesma. Mais especificamente, a presente invenção refere-se a uma composição que rompe e mata bactérias dentro de um biofilme e também evita a formação de biofilmes. A composição sólida compreende um primeiro componente selecionado do grupo consistindo de quitosana, quitina, derivados de quitosana, derivados de quitina, e combinações dos mesmos; e pelo menos um ácido triprótico.

Description

[0001] A presente invenção refere-se a uma composição que pode ser usada como ou como parte de um curativo de ferida e para curativos de ferida compreendendo a mesma. Mais especificamente, a presente invenção refere-se a uma composição que rompe e mata bactérias dentro de um biofilme e também evita a formação de biofilmes.

[0002] Uma explicação útil de biofilmes é apresentada por Philips PL, et al., Biofilms Made Easy, Wounds International 2010, 1 (3) sendo aqui resumida. Um biofilme é qualquer grupo de microorganismos em que as células efetivamente aderem umas nas outras sobre uma superfície. Um biofilme pode ser tipicamente uma comunidade microbiana complexa contendo bactérias e fungos. Os microorganismos são frequentemente incorporados dentro de uma matriz auto- produzida de substância polimérica extracelular (EPS). Biofilme EPS, que também é chamado de ‘lodo’ (embora seja apreciado que nem tudo mencionado como lodo seja um biofilme), é um conglomerado polimérico, geralmente composto de DNA extracelular, proteínas e polissacarídeos. A matriz de EPS pode fixar o biofilme firmemente a superfícies vivas ou não vivas.

[0003] Sabe-se que os biofilmes se formam sobre as superfícies de dispositivos médicos, como cateteres urinários, implantes e suturas. Eles são problemáticos, porque contribuem para doenças que são caracterizadas por uma infecção bacteriana subjacente e inflamação crônica.

[0004] O campo da presente invenção é principalmente o dos cuidados com feridas. Biofilmes são comumente encontrados em feridas, mas foi somente relativamente recentemente que eles foram aceitos como causadores de um atraso na cicatrização de feridas. Foi mesmo sugerido que quase todas as feridas crônicas apresentam comunidades de biofilme sobre, pelo menos, uma parte do leito da ferida.

[0005] Biofilmes podem se formar sobre superfícies vivas ou não vivas e podem prevalecer em ambientes naturais, industriais e hospitalares. Sob condições naturais, microorganismos, como bactérias, podem se fixar nas superfícies e formar biofilmes. À medida que as bactérias se multiplicam, elas se tornam mais firmemente fixadas à superfície. Uma vez fixadas, as bactérias secretam EPS para formar uma matriz protetora. Isso leva, então, a pequenas colônias de bactérias formando um biofilme inicial. Ao longo do tempo, o biofilme pode se dispersar e fixar em outras partes do leito da ferida, formando novas colônias de biofilme.

[0006] A formação de biofilmes pode ocorrer de modo relativamente rápido, com um biofilme capaz de se formar em menos de 24 horas.

[0007] Pensa-se que biofilmes estimulam uma resposta inflamatória crônica na tentativa de eliminar a ferida do biofilme. Esta resposta resulta em abundantes neutrófilos e macrófagos circundando os biofilmes. Essas células inflamatórias secretam níveis elevados de espécies de oxigênio reativas (ROS) e proteases (metaloproteinases de matriz (MMPs) e elastase). As proteases podem ajudar a romper as fixações entre biofilmes e o tecido, desalojando os biofilmes da ferida. No entanto, as ROS e as proteases também danificam os tecidos normais e cicatrizantes, proteínas e células imunes. A resposta inflamatória crônica nem sempre é bem-sucedida na remoção do biofilme e foi formulada a hipótese de que a resposta é do interesse do biofilme. Ao induzir uma resposta inflamatória ineficaz, o biofilme protege os microrganismos que ele contém e aumenta a produção de exsudato, o que fornece uma fonte de nutrição e ajuda a perpetuar o biofilme.

[0008] Atualmente, um dos métodos mais eficazes para reduzir os efeitos adversos dos biofilmes consiste em remover fisicamente o biofilme, conhecido como desbridamento. Desbridamento envolve a remoção de tecido morto e contaminado da ferida. No entanto, esse processo tem suas limitações, uma vez que nenhuma forma de desbridamento pode remover a totalidade de um biofilme. Consequentemente, o biofilme tem o potencial de se restaurar em um curto período de tempo. Como resultado, um paciente deve sofrer desbridamento em uma base frequente.

[0009] Tentativas de evitar uma restauração do biofilme também foram pesquisadas. Predominantemente, esses métodos usam agentes antimicrobianos para matar microrganismos. No entanto, existem várias limitações para este método, no sentido de que os agentes antimicrobianos podem ser usados de diferentes modos e sensibilidades e alergias dos pacientes precisam ser consideradas.

[0010] Portanto, existe a necessidade de desenvolver métodos aperfeiçoados de matar bactérias dentro de um biofilme e também impedir a restauração do biofilme.

[0011] A presente invenção foi realizada a partir de uma consideração das limitações e problemas acima mencionados.

[0012] De acordo com um primeiro aspecto da presente invenção, é fornecida uma composição sólida compreendendo um primeiro componente selecionado do grupo consistindo de quitosana, quitina, derivados de quitosana, derivados de quitina e qualquer combinação dos mesmos; e pelo menos um ácido triprótico.

[0013] Verificou-se, de modo surpreendente, que uma composição sólida compreendendo o primeiro componente e pelo menos um ácido triprótico é capaz de romper e evitar a formação de biofilmes e tem um efeito antimicrobiano sobre microorganismos no interior do biofilme.

[0014] O biofilme aqui referido é preferivelmente um biofilme de base microbiana, embora a invenção não seja assim limitada.

[0015] O termo "ácido triprótico" (que também pode ser referido aqui como um "ácido tribásico") é aqui usado para se referir a um ácido tendo três íons hidrogênio para doar a uma base em uma reação ácido-base. Em outras palavras, uma molécula triprótica tem três átomos de hidrogênio substituíveis.

[0016] A composição pode compreender um ou mais ácidos tripróticos. A composição pode, portanto, compreender dois, três, quatro ou mais ácidos tripróticos. Tipicamente, a composição compreende um ácido triprótico.

[0017] O ácido triprótico pode ser selecionado do grupo consistindo de ácido cítrico, ácido fosfórico ou misturas dos mesmos.

[0018] Preferivelmente, o ácido triprótico é ácido cítrico.

[0019] Ácidos triptóticos podem estar na forma de grânulos, flocos, pós ou soluções. Tipicamente, o ácido triprótico é obtido de uma fonte na forma de um pó.

[0020] Na preparação da composição da presente invenção, o ácido triprótico está tipicamente na forma de uma solução ácida. Tal solução é preparada por dissolução de uma quantidade de ácido triprótico, tipicamente em forma de pó, em um volume de água e/ou um solvente. O solvente pode ser aquoso ou não aquoso, mas é preferivelmente não aquoso.

[0021] A composição pode compreender uma mistura do primeiro componente e do ácido triprótico. O ácido triprótico pode ser contatado com o primeiro componente.

[0022] Tipicamente, o ácido triprótico é absorvido em, ou revestido sobre, pelo menos, uma porção do primeiro componente. Preferivelmente, o ácido triprótico é revestido sobre, pelo menos, uma porção da superfície do primeiro componente. Mais preferencialmente, o ácido triprótico é revestido sobre substancialmente a totalidade da superfície do primeiro componente.

[0023] Agentes antimicrobianos são geralmente referidos como substâncias que matam, ou inibem o crescimento de, microorganismos. É aceito, de modo geral, na cicatrização de feridas que, para que uma substância reivindique eficácia antimicrobiana, ela deve demonstrar uma taxa de morte bacteriana Log4.

[0024] O termo "antimicrobiano" é aqui usado para se referir a um agente ou substância capaz de demonstrar uma taxa de morte bacteriana Log4 no prazo de 24 horas. Por outro lado, o termo "não antimicrobiano" é aqui usado para se referir a um agente ou substância que demonstra abaixo de uma taxa de morte bacteriana Log4 no prazo de 24 horas

[0025] O primeiro componente pode ser não antimicrobiano.

[0026] A razão do primeiro componente para o pelo menos um ácido triprótico pode ser de pelo menos 2:1.

[0027] O primeiro componente pode estar na forma de fibras, grânulos, flocos, pó ou combinações dos mesmos.

[0028] O primeiro componente pode ser revestido de modo total ou parcial com o ácido triprótico.

[0029] Tipicamente, o primeiro componente compreende fibras. As fibras podem ser tecidas ou não tecidas. Preferivelmente, as fibras são não tecidas. As fibras podem ser revestidas total ou parcialmente com o ácido triprótico.

[0030] Alternativamente, a composição pode compreender porções separadas do primeiro componente e do ácido triprótico. Por exemplo, o primeiro componente pode estar na forma de fibras, grânulos, flocos, pó, uma ou mais folhas ou combinações dos mesmos e o ácido triprótico pode estar na forma de grânulos, flocos ou pó em que o primeiro componente e o ácido triptótico estão localizados em porções separadas da composição. As porções separadas podem, por exemplo, estar na forma de camadas. Alternativamente, o ácido triprótico e o primeiro componente podem ser misturados.

[0031] Adicionalmente ou alternativamente, o ácido triprótico pode estar associado a um material carreador. A composição sólida pode, portanto, compreender um primeiro componente selecionado do grupo consistindo de quitosana, quitina, derivados de quitosana, derivados de quitina e combinações dos mesmos; e pelo menos um ácido triprótico, em que o ácido triprótico está associado com um material carreador.

[0032] O ácido triprótico pode ser absorvido, ou revestido sobre, no material carreador. O material carreador pode atuar como um carreador para o ácido triprótico. Em tais modalidades, o ácido triprótico não deve reagir ou se ligar irreversivelmente com o material carreador. O material carreador pode compreender qualquer material apropriado que possa absorver, receber ou atuar como um veículo para um ácido triprótico. Os materiais típicos incluem, mas não estão limitados a, polímeros como celulose, derivados de celulose (por exemplo, etilcelulose, metilcelulose, etc.), algodão, alginato, viscose, polipropileno, polietileno ou qualquer combinação de tais materiais. Preferivelmente, o material carreador é viscose.

[0033] Tipicamente, o material carreador é fibroso. Em algumas modalidades, o primeiro componente e o material carreador podem ser combinados juntos para formar um pano não tecido. O primeiro componente e o material carreador podem ser cardados ou agulhados juntos.

[0034] Preferivelmente, no entanto, a composição não compreende um material carreador. O ácido triprótico é preferivelmente revestido sobre pelo menos uma porção do primeiro componente, como explicado acima.

[0035] O ácido triprótico pode ser revestido sobre o primeiro componente e/ou o material carreador por quaisquer meios apropriados conhecidos na técnica.

[0036] Geralmente, um ácido triprótico, tipicamente em forma de pó, é dissolvido em água para formar uma solução ácida. A solução ácida pode ser, então, misturada com um solvente. O primeiro componente é então misturado com a mistura de solução de ácido/solvente. O solvente e opcionalmente pelo menos uma porção da água podem ser removidos por evaporação, por exemplo, para dar uma composição sólida da presente invenção. Tipicamente, a composição compreende o ácido triprótico revestido sobre o primeiro componente.

[0037] Alternativamente, o ácido triprótico pode ser misturado com água e/ou um solvente, como explicado acima, e pulverizado sobre o primeiro componente.

[0038] Preferivelmente, o primeiro componente não é dissolvido em um solvente durante a preparação da composição. Preferivelmente, o primeiro componente é insolúvel na solução de ácido ou mistura de solução de ácido/solvente.

[0039] Foi observado que a preparação da composição sólida da presente invenção, sem dissolver inicialmente o primeiro componente em um solvente, e/ou pelo que o primeiro componente não dissolve na mistura de solução de ácido/solvente, permite a preparação eficiente de uma composição tendo uma maior quantidade do primeiro componente que pode ser liberada na ferida. Isto é benéfico com relação à utilização de um primeiro componente que é inicialmente dissolvido em um solvente, uma vez que a quantidade global de primeiro componente disponível fica diluída pela presença do solvente. Além disso, em situações em que um primeiro componente é dissolvido durante preparação, a composição final não pode estar na forma de fibras, grânulos ou pó, o que limita os usos potenciais e as formas da composição. O primeiro componente pode, portanto, ser insolúvel.

[0040] Em casos em que o primeiro componente compreende fibras de quitosana, o solvente é preferivelmente um solvente não aquoso, como álcool isopropílico.

[0041] O ácido triprótico é preferivelmente liberado na forma de uma solução de ácido. A solução de ácido (ácido em água) pode ter uma concentração de em torno de 5-80%, preferivelmente em torno de 20-60% e o mais preferivelmente em torno de 40-50%.

[0042] O ácido triprótico pode estar presente na composição em uma quantidade maior do que em torno de 2% do primeiro componente, preferivelmente maior do que em torno de 5% do primeiro componente, mais preferivelmente maior do que em torno de 10% do primeiro componente e o mais preferivelmente maior do que em torno de 25% do primeiro componente. O ácido triprótico pode estar presente em uma composição em uma quantidade de pelo menos em torno de 2% do primeiro componente, preferivelmente pelo menos em torno de 5% do primeiro componente, mais preferivelmente pelo menos em torno de 10% do primeiro componente e o mais preferivelmente pelo menos em torno de 25% do primeiro componente.

[0043] O ácido triprótico pode estar presente em uma quantidade de em torno de 2-75% do primeiro componente, preferivelmente em torno de 10-75% do primeiro componente, mais preferivelmente em torno de 20-75% do primeiro componente e o mais preferivelmente em uma quantidade de em torno de 25-60% do primeiro componente. Bons resultados foram observados com ácido triprótico presente em uma quantidade de em torno de 60% do primeiro componente. Os valores percentuais de ácido referidos representam quantidades relativas de ácido triprótico comparadas com a quantidade total do primeiro componente na composição. Por exemplo, se a quantidade total do primeiro componente in a composição foi 1g, uma composição compreendendo 20% ácido triprótico deve conter 0,2g do ácido triprótico.

[0044] Foi descoberto, em testes, que uma quantidade maior de ácido triprótico em uma composição resulta em uma maior eficácia contra os microorganismos. A composição pode, assim, compreender ácido triprótico em uma quantidade de pelo menos em torno de 25%, preferivelmente pelo menos em torno de 35%, mais preferivelmente pelo menos em torno de 50% e o mais preferivelmente pelo menos em torno de 60% do primeiro componente.

[0045] O primeiro componente é selecionado do grupo consistindo de quitosana, quitina, derivados do quitosana, derivados da quitina e qualquer combinação dos mesmos.

[0046] O termo "derivado" é aqui usado para se referir a um composto que é derivado de quitosana ou quitina após uma ou mais reações químicas ou modificações. A uma ou mais reações químicas ou modificações pode envolver a substituição de um ou mais dos prótons amino ou hidroxila em quitosana ou quitina; ou desacetilação parcial de quitina. Por exemplo, um derivado de quitina pode incluir uma quitina parcialmente desacetilada, que pode ter diferentes percentagens de desacetilação, como desejado. Tipicamente, a quitina parcialmente desacetilada, apropriada para uso na presente invenção, tem um grau de desacetilação de pelo menos cerca de 50%, mais tipicamente pelo menos cerca de 75% e o mais tipicamente pelo menos cerca de 85%. Também estão incluídos nos termos "derivados de quitosana ou de quitina" os produtos de reação de quitosana ou quitina com outros compostos. Tais produtos de reação incluem, mas não são limitados a, carboximetil quitosana, hidroxil butil quitina, N-acil quitosana, O-acil quitosana, N-alquil quitosana, O-alquil quitosana, N-alquilideno quitosana, N- arilideno quitosana, O-sulfonil quitosana, quitosana ou quitina sulfatada, quitosana ou quitina fosforilada, quitosana ou quitina nitrada, deoxi-halo quitosana, quitina alcalina, quitosana alcalina, ou quelatos de metal com quitosana, sais orgânicos, etc. Os derivados de quitosana ou quitina, incluindo os aqui mencionados, também podem conter grupos funcionais ligados aos mesmos via ligações covalentes ou não covalentes.

[0047] Tipicamente, o primeiro componente é quitosana ou um derivado de quitosana. Preferivelmente, o primeiro componente é quitosana.

[0048] Quitosana é um derivado de resíduos sólidos do processamento de frutos do mar e pode ser extraída da cultura de fungos. Ela é um material polimérico catiônico que é insolúvel em água. A quitosana é um hemostático conhecido para uso em curativos de ferida. O termo "hemostático" é aqui usado para se referir a qualquer agente que seja capaz de produzir um coágulo ou tampão que interrompe ou reduz sangramento quando entra em contato com sangue ou outro fluido corporal, tal como exsudato de ferida, a partir de um sítio alvo fisiológico ou local de ferida de um humano ou animal.

[0049] Existem muitos tipos diferentes de quitosana que podem ser usados como material em curativos de ferida, com diferentes propriedades de absorção. Os diferentes tipos de quitosana podem ter diferentes pesos moleculares, diferentes graus de desacetilação, diferentes arranjos de monômeros β -(1-4)D-glucosamina ligada e N-acetil-D-glucosamina, diferentes formas quirais ou eles podem ser derivados de diferentes espécies ou fontes (e fungos), ou podem ter sido tratados de modo diferente durante a fabricação. Cada uma e todas destas diferentes variações de materiais de quitosana estão previstas para uso na presente invenção.

[0050] O primeiro componente quitosana pode ter um grau de desacetilação maior do que 70%, preferivelmente maior do que 80% e mais preferivelmente maior do que 85%.

[0051] Materiais de quitosana podem exibir propriedades de gelificação quando na forma de um sal. Para obter um sal de quitosana, quitosana é tipicamente misturada com um ácido apropriado. As propriedades de gelificação dos sais de quitosana tornam os mesmos desejáveis para uso como materiais em curativos de ferida.

[0052] A quitosana e/ou derivado de quitosana podem estar sob qualquer forma apropriada, como, por exemplo, fibras, grânulos, pó, flocos, folhas, contas e combinações de dois ou mais dos acima mencionados. Tipicamente, a quitosana e/ou derivado de quitosana está na forma de fibras. Preferivelmente, as fibras são não tecidas. As fibras podem ser de qualquer diâmetro ou comprimento desejado e podem ser formadas em um tecido têxtil ou um tampão para uso.

[0053] Tipicamente, o peso molecular do primeiro componente usado na composição da presente invenção é menor do que cerca de 2.000.000, mais tipicamente menor do que cerca de 1.000.000, e ainda mais tipicamente menor do que cerca de 500.000, e o mais tipicamente menor do que cerca de 175.000.

[0054] O primeiro componente em uma solução de ácido acético a 1% pode ter uma viscosidade maior do que 150cps.

[0055] A composição da presente invenção pode estar na forma de grânulos, flocos, fibras, pó, têxteis não tecidos ou um tecido de malha. As fibras podem ser tecidas ou não tecidas. Preferivelmente, as fibras são não tecidas.

[0056] Tipicamente, a composição está na forma de fibras. Mais tipicamente, a composição está na forma de fibras não tecidas ou de um têxtil não tecido.

[0057] A composição da presente invenção pode ser insolúvel em fluido fisiológico. O termo "fluido fisiológico" é aqui usado para se referir a qualquer fluido excretado pelo corpo humano ou animal, incluindo sangue e os vários componentes do sangue, saliva, suor, urina e similares.

[0058] A composição pode ser aplicada em um mecanismo de liberação.

[0059] O mecanismo de liberação pode incluir uma espuma de poliuretano, uma película de poliuretano, um têxtil tecido, um material superabsorvente, um dispositivo médico, como um cateter, um stent e similares. O mecanismo de liberação pode compreender mais de um de cada um dos componentes acima mencionados e/ou pode compreender uma combinação de um ou mais dos anteriores.

[0060] Por exemplo, o mecanismo de liberação pode compreender uma ou mais espumas de poliuretano e uma película de poliuretano. Alternativamente, o mecanismo de liberação pode compreender um têxtil de viscose tecido.

[0061] O termo "material superabsorvente" é aqui usado para se referir a um material hidrofílico que é intumescível em água, mas não solúvel em água, e que é capaz de absorver fluido a mais de 2000% com uma retenção de fluido superior a 85%. Preferivelmente, o material superabsorvente é capaz de absorver fluido a mais de 2500% com uma retenção de fluido maior do que 90%.

[0062] O termo "intumescível em água" é aqui usado para se referir a um material que, quando contatado com água ou fluido contendo água, irá absorver o fluido e intumescer, mas não se dissolverá substancialmente nesse fluido.

[0063] O termo "solúvel em água" é aqui usado para se referir a um material que, quando contatado com água ou um fluido contendo água, irá se dissolver nesse fluido.

[0064] O material superabsorvente pode ser selecionado dentre materiais poliméricos, como álcool poli(vinílico) (PVA), poli(óxido de etileno) (PEO) e poli(ácido acrílico). O material superabsorvente pode ser quimicamente modificado. Por exemplo, o material superabsorvente pode ser um material polimérico obtido por polimerização por enxerto de ácido acrílico sobre uma cadeia de carboximetil celulose. O material superabsorvente pode compreender um material quimicamente modificado selecionado a partir de amido, celulose e materiais poliméricos como álcool poli(vinílico) (PVA), poli(óxido de etileno) (PEO) e poli(ácido acrílico). O poli(ácido acrílico) pode ser poli(ácido acrílico) parcialmente neutralizado, altamente reticulado.

[0065] Os termos "reticulação" e "reticulado" são aqui usados para se referir a duas ou mais cadeias de polímero sendo ligadas por uma ligação primária, como uma ligação covalente. O termo "levemente reticulado" é aqui usado para se referir a modalidades em que o número de ligações primárias de reticulação no material superabsorvente é menor do que o número total de ligações de reticulação possíveis.

[0066] Em algumas modalidades, o material superabsorvente é selecionado a partir de materiais poliméricos, como PVA, PEO e poli(ácido acrílico), preferivelmente um poli(ácido acrílico) parcialmente neutralizado, levemente reticulado. Tipicamente, o material superabsorvente é um poli(ácido acrílico) parcialmente neutralizado e levemente reticulado.

[0067] O material superabsorvente pode estar na forma de fibras. Tipicamente, o material superabsorvente está na forma de fibras não tecidas. O comprimento das fibras pode ser de até 100mm, e tipicamente de 20-75mm, mais tipicamente de 32 a 51mm.

[0068] O mecanismo de liberação pode ser um curativo de ferida conhecido na técnica.

[0069] A composição da presente invenção pode ser aplicada ao mecanismo de liberação por qualquer meio apropriado conhecido na técnica.

[0070] A composição da presente invenção pode compreender um primeiro componente selecionado do grupo consistindo de quitosana, quitina, derivados de quitosana, derivados de quitina e combinações dos mesmos; e pelo menos um ácido triprótico, em que o primeiro componente é revestido pelo menos parcialmente com o ácido triprótico.

[0071] A composição pode compreender um primeiro componente fibroso selecionado do grupo consistindo de quitosana, quitina, derivados de quitosana, derivados de quitina e combinações dos mesmos; e pelo menos um ácido triprótico, em que as fibras do primeiro componente estão revestidas pelo menos parcialmente com o ácido triprótico.

[0072] Tipicamente, a composição compreende um primeiro componente de quitosana fibroso, pelo menos parcialmente revestido com um ácido triprótico. Preferivelmente, a composição compreende um primeiro componente de quitosana fibroso não tecido, pelo menos parcialmente revestido com ácido cítrico. Preferivelmente ainda, a composição compreende um primeiro componente de quitosana fibroso não tecido, substancialmente totalmente revestido com ácido cítrico

[0073] A composição da presente invenção pode ainda compreender um ácido solubilizante.

[0074] O termo "ácido solubilizante" é usado aqui para se referir a um ácido que, quando aplicado a ou associado com o primeiro componente, torna o primeiro componente mais solúvel em fluidos corporais aquosos.

[0075] A composição pode compreender um ou mais ácidos solubilizantes. A composição pode, assim, compreender dois, três, quatro ou mais ácidos solubilizantes. Tipicamente, a composição compreende um ácido solubilizante.

[0076] O ácido solubilizante pode ser selecionado dentre o grupo consistindo de ácido succínico, ácido málico, ácido sulfúrico, ácido acrílico, ácido láctico, ácido fórmico, ácido acético, ácido clorídrico, ácido nítrico, e misturas de qualquer um ou mais dos mesmos.

[0077] O ácido solubilizante pode preferivelmente ser um ácido monoprótico.

[0078] O termo "ácido monoprótico" (que também pode ser referido aqui como um "ácido monobásico") é usado aqui para se referir a um ácido que tem um íon hidrogênio para doar a uma base em uma reação ácido-base. Em outras palavras, uma molécula monoprótica tem um átomo de hidrogênio substituível.

[0079] O ácido monoprótico pode ser selecionado do grupo consistindo de ácido láctico, ácido fórmico, ácido acético, ácido clorídrico, ácido nítrico e misturas de qualquer um ou mais dos mesmos.

[0080] Preferivelmente, o ácido monoprótico é ácido láctico, ácido acético ou mistura dos mesmos. Mais preferencialmente, o ácido monoprótico é ácido láctico.

[0081] O ácido solubilizante pode estar na forma de grânulos, flocos, pó ou solução. Tipicamente, o ácido solubilizante está na forma de uma solução. Tal solução é preparada por dissolução de uma quantidade de ácido solubilizante em um volume de água e/ou solvente.

[0082] A composição pode compreender uma mistura do primeiro componente, pelo menos um ácido triprótico e pelo menos um ácido solubilizante.

[0083] O ácido solubilizante pode ser misturado com o ácido triprótico e contatado com o primeiro componente do mesmo modo que descrito acima em relação ao ácido triprótico sozinho. Alternativamente, os ácidos triprótico e solubilizante podem ser contatados com porções separadas do primeiro componente e, então, reunidos na composição. Por exemplo, onde o primeiro componente está na forma de fibras, uma seleção das fibras pode ser parcialmente ou completamente revestida com ácido triprótico e uma seleção separada das fibras pode ser parcialmente ou completamente revestida com um ácido solubilizante.

[0084] Tipicamente, o ácido solubilizante será misturado com o ácido triprótico e contatado com o primeiro componente.

[0085] O pelo menos um ácido solubilizante ou a mistura de, pelo menos, um ácido solubilizante e pelo menos um ácido triprótico pode ser absorvido em, ou revestidos sobre, pelo menos, uma porção do primeiro componente. Preferivelmente, o pelo menos um ácido solubilizante ou a mistura de, pelo menos, um ácido solubilizante e pelo menos um ácido triprótico é revestido substancialmente em toda a superfície do primeiro componente. Em algumas modalidades, o ácido triprótico pode ser absorvido em, ou revestido sobre, pelo menos, uma porção do primeiro componente e o ácido solubilizante pode então ser absorvido em ou revestido sobre, pelo menos, uma porção do mesmo, ou vice-versa.

[0086] Alternativamente, a composição pode compreender porções separadas do primeiro componente, o pelo menos um ácido triprótico e pelo menos um ácido solubilizante. Por exemplo, o primeiro componente pode estar na forma de fibras, grânulos, flocos, pó, folha ou combinações dos mesmos e os ácidos triprótico e solubilizante podem estar na forma de grânulos, flocos e/ou um pó, pelo que o primeiro componente e os ácidos estão localizados em porções separadas da composição. Por exemplo, as porções separadas podem, por exemplo, estar na forma de camadas. Alternativamente, o primeiro componente, ácido triprótico e ácido solubilizante podem ser misturados.

[0087] Em algumas modalidades, o pelo menos um ácido triprótico e o pelo menos um ácido solubilizante podem estar associados com os mesmos ou separados materiais carreadores. A composição pode, assim, compreender um primeiro componente selecionado do grupo consistindo de quitosana, quitina, derivados de quitosana, derivados de quitina e combinações dos mesmos; pelo menos um ácido triprótico e pelo menos um ácido solubilizante, em que o ácido triprótico e/ou o ácido solubilizante estão associados com os mesmos ou separados materiais carreadores.

[0088] O ácido solubilizante pode estar associado ao material carreador do mesmo modo que aqui descrito com referência ao ácido triprótico.

[0089] O ácido solubilizante pode ser revestido sobre o primeiro componente e o ácido triprótico pode ser revestido sobre um material carreador, ou vice-versa.

[0090] O primeiro componente pode compreender fibras revestidas com ácido solubilizante e o material carreador pode ser revestido com ácido triprótico. O material carreador pode ser viscose.

[0091] O pelo menos um ácido solubilizante pode ser revestido sobre o primeiro componente e/ou o material carreador pelos mesmos meios que descritos para o ácido triprótico.

[0092] O primeiro componente pode ser parcialmente ou completamente revestido com ácido solubilizante.

[0093] O ácido solubilizante é preferivelmente liberado na forma de uma solução ácida. A solução ácida (ácido em água) pode ter uma concentração de pelo menos em torno de 40%, preferivelmente pelo menos em torno de 60% e mais preferencialmente pelo menos em torno de 80%.

[0094] O pelo menos um ácido solubilizante pode estar presente em uma quantidade maior do que em torno de 2% do primeiro componente, preferivelmente maior do que 5% do primeiro componente, e mais preferencialmente maior do que em torno de 10% do primeiro componente.

[0095] O pelo menos um ácido solubilizante pode estar presente em uma quantidade em torno de 2-50% do primeiro componente, preferivelmente em torno de 10-40% do primeiro componente, ou mais preferencialmente em torno de 20-30% do primeiro componente. Preferivelmente, o pelo menos um ácido solubilizante pode estar presente em uma quantidade em torno de 25% do primeiro componente. Do mesmo modo que para o ácido triprótico, os valores percentuais referidos representam quantidades relativas de ácido solubilizante em comparação com a quantidade total do primeiro componente.

[0096] Foi descoberto, em desenvolvimento, que uma composição tendo um teor de ácido solubilizante em torno de 15 a 30% do primeiro componente pode reduzir a quantidade de ácido triprótico requerida para alcançar o efeito desejado. Por exemplo, uma composição tendo um teor de ácido triprótico maior do que 20% demonstrou produzir resultados comparáveis a uma composição tendo um teor de ácido solubilizante de 15-20%, mas com um teor reduzido de ácido triptótico em torno de 5% ou menos.

[0097] Assim, uma modalidade da presente invenção compreende uma composição compreendendo um primeiro componente selecionado do grupo consistindo de quitosana, quitina, derivados de quitosana, derivados de quitina e combinações dos mesmos; 20-75% de pelo menos um ácido triprótico e 10-40% de pelo menos um ácido solubilizante.

[0098] Bons resultados foram observados para uma composição tendo um teor de ácido solubilizante de 20-35%, particularmente 25-30%, do primeiro componente e um teor de ácido triprótico de 25-45%, particularmente 30-40%, do primeiro componente.

[0099] A razão do pelo menos um ácido triprótico para o pelo menos um ácido solubilizante é pelo menos 1:1.

[00100] De acordo com um outro aspecto da presente invenção, é fornecido um curativo de ferida compreendendo uma composição, como aqui descrita.

[00101] O curativo de ferida pode ser um curativo de ferida que geleifica após contato com um fluido, como exsudato da ferida. No campo de curativos de ferida gelificantes, que se focalizam na contenção do fluxo sanguíneo de uma ferida sangrando, a composição da presente invenção é particularmente surpreendente uma vez que ácidos tripróticos sobre curativos de ferida não tecidos tendem a não gelificar e têm sido conhecidos como mostrando efeitos prejudiciais sobre a absorção e retenção de água.

[00102] O curativo de ferida pode compreender uma composição como aqui descrita e um mecanismo de liberação, como aqui descrito. A composição pode ser aplicada ao mecanismo de liberação por revestimento ou similar. A composição e o mecanismo de liberação podem formar um curativo de ferida em camadas.

[00103] A composição da presente invenção, ou um curativo de feridas compreendendo essa composição, pode também compreender componentes adicionais. Tais componentes adicionais incluem, mas não estão limitados aos agentes antimicrobianos; agentes farmacêuticos; agentes quelantes; agentes umectantes, como tensoativos; fatores de crescimento; citocinas; agentes que absorvem agentes que retardam cicatrização, como MMP (metaloproteinases de matriz) e elastase; e/ou outro componente de curativo, como cálcio, vitamina K, fibrinogênio, trombina, fator VII, fator VIII, argilas como caulim, celulose regenerada oxidada, gelatina ou colágeno, etc.

[00104] Agentes antimicrobianos apropriados podem ser selecionados da lista compreendendo prata, poli-hexametileno biguanida (PHMB), iodo, octenidina, cobre, gluconato de clorexidina (CHG), miconazol, metronidazol e combinações de um ou mais dos mesmos.

[00105] O agente antimicrobiano pode ser revestido sobre ou absorvido no primeiro componente e/ou um material carreador do mesmo modo que aqui descrito em relação aos ácidos triprótico e/ou solubilizante.

[00106] A composição da presente invenção pode ser misturada com outras composições utilizáveis em cuidado de feridas. Em algumas modalidades, a composição da presente invenção pode ser misturada ou misturada com um ou mais hemostáticos. Os hemostáticos podem estar na forma ou fibras, grânulos, flocos, pó ou qualquer combinação dos mesmos. Preferivelmente, o hemostático está na forma de grânulos.

[00107] Por exemplo, uma composição da presente invenção como aqui descrita pode ser misturada com um hemostático como grânulos de Celox®, um hemostático à base de quitosana comercialmente disponível.

[00108] De acordo com outro aspecto da presente invenção, é fornecida uma composição como aqui descrita para uso como um agente terapêutico.

[00109] De acordo com outro aspecto da presente invenção, é fornecida uma composição como aqui descrita para uso no tratamento de ferida.

[00110] De acordo com outro aspecto da presente invenção, é fornecida uma composição como aqui descrita para uso em ruptura e morte de bactérias no interior de um biofilme.

[00111] De acordo com outro aspecto da presente invenção, é fornecida uma composição como aqui descrita para uso na prevenção da formação de um biofilme.

[00112] De acordo com outro aspecto da presente invenção, é fornecido um método de fabricação de uma composição sólida compreendendo um primeiro componente selecionado dentre o grupo consistindo de quitosana, quitina, derivados de quitosana, derivados de quitina, e combinações dos mesmos; pelo menos um ácido triprótico, o método compreendendo as etapas de: (a) revestir pelo menos uma porção do primeiro componente com o pelo menos um ácido triprótico; e/ou (b) absorver em pelo menos uma porção do primeiro componente o pelo menos um ácido triprótico.

[00113] De acordo com outro aspecto da presente invenção, é fornecido um método de fabricação de uma composição compreendendo um primeiro componente selecionado dentre o grupo consistindo de quitosana, quitina, derivados de quitosana, derivados de quitina, e combinações dos mesmos; pelo menos um ácido triprótico e, opcionalmente, pelo menos um ácido solubilizante, o método compreendendo as etapas de: (c) misturar um ácido triprótico com água e/ou um solvente para dar uma solução de ácido triprótico; (d) opcionalmente misturar a solução de ácido triprótico com uma solução de ácido solubilizante preparada por mistura de um ácido solubilizante com água e/ou um solvente, para dar uma solução de ácido misturada; (e) misturar a solução de ácido triprótico ou a solução de ácido misturada com um solvente; e (f) adicionar o primeiro componente à solução obtida na etapa (c).

[00114] O método pode ainda compreender a etapa (e) de secar a mistura obtida na etapa (d). A etapa de secagem pode remover algum ou todo o solvente e/ou teor de água da composição.

[00115] Para composições em que o primeiro componente compreende fibra de quitosana, o solvente de etapas (a) a (c) pode ser tipicamente não aquoso.

[00116] Os outros aspectos da presente invenção podem incorporar qualquer uma ou todas as características descritas com relação ao primeiro aspecto da presente invenção como desejado ou como apropriado.

[00117] Modalidades da presente invenção serão agora ainda descritas com referência aos seguintes exemplos não limitativos e figuras em anexo, em que:

[00118] Figura 1: é um gráfico mostrando os resultados de testes usando o Ensaio de MBEC para Pseudomonas aeruginosa ATCC 13359;

[00119] Figura 2: é um gráfico mostrando os resultados de testes usando o Ensaio de MBEC para Staphylococcus haemolyticus;

[00120] Figura 3: é um gráfico mostrando os resultados de testes usando o Ensaio de MBEC para MRSA 308;

[00121] Figura 4: é um gráfico mostrando os resultados de testes usando o Modelo de Reator CDC para Pseudomonas aeruginosa ATCC 10434;

[00122] Figura 5: é um gráfico mostrando os resultados de testes usando o Modelo de Reator CDC para Staphylococcus haemolyticus NCTC 11042;

[00123] Figura 6: é um gráfico mostrando os resultados de testes usando o Modelo de Reator CDC para Staphylococcus aureus 308 resistente a meticilina;

[00124] Figura 7: é um gráfico mostrando os resultados de testes usando o Modelo de Reator CDC para Pseudomonas aeruginosa ATCC 10434;

[00125] Figura 8: é um gráfico mostrando os resultados de testes usando o Modelo de Reator CDC para Pseudomonas aeruginosa ATCC 10434;

[00126] Figura 9: é um gráfico mostrando os resultados de testes usando o Modelo de Reator CDC para Staphylococcus aureus;

[00127] Figura 10: é um gráfico mostrando os resultados de testes usando o Modelo de Reator CDC para Staphylococcus aureus;

[00128] Figura 11: é um gráfico mostrando a quantidade de Staphylococcus aureus viáveis recuperados de um biofilme de 24 horas pré-formado após tratamento de 24 horas com cada agente;

[00129] Figura 12: é um gráfico mostrando a quantidade de Staphylococcus aureus viáveis recuperados de um biofilme de 72 horas pré-formado após tratamento de 24 horas com cada agente. Método geral para preparação de amostra Método geral 1: Primeiro componente e ácido triprótico

[00130] Pó de ácido triprótico (por exemplo, ácido cítrico) foi dissolvido em água deionizada e, então, misturado com solvente não aquoso (por exemplo, IPA). O primeiro componente, tipicamente em forma de fibra não tecida, foi colocado na solução de ácido triprótico e deixado absorver a solução. A solução foi então secada usando secagem térmica, para deixar uma quitosana sólida, quitina ou derivado das mesmas revestidas com o ácido triprótico. Método geral 2: Primeiro componente com ácido triprótico e ácido monoprótico

[00131] Pó de ácido triprótico (por exemplo, ácido cítrico) foi dissolvido em água deionizada e, então, misturado com uma solução de ácido solubilizante (por exemplo, ácido láctico). Esta foi, então, misturada com solvente não aquoso (por exemplo, IPA). O primeiro componente, tipicamente em forma de fibra não tecida, foi colocado na solução de ácido misturada e deixado absorver a solução. A solução foi então secada usando secagem térmica, para deixar uma quitosana sólida, quitina ou derivado das mesmas revestidas com uma mistura de ácido triprótico e ácido solubilizante.

Composições de exemplo

[00132] Os seguintes são exemplos de composições preparadas de acordo com a presente invenção. Exemplo 1:

[00133] Não tecido 100% de fibra de quitosana (1,35g) foi revestido com ácido cítrico (0,439g) para dar uma composição a 32,5% nominais. Exemplo 2:

[00134] Não tecido 100% de fibra de quitosana (1,35g) foi revestido com ácido cítrico (0,027-0,068g) para dar uma composição a 2-5% nominais. Exemplo 3:

[00135] Não tecido 100% de fibra de quitosana (1,35g) foi revestido com ácido cítrico (0,27-0,41g) para dar uma composição a 20-30% nominais. Exemplo 4:

[00136] Não tecido 100% de fibra de quitosana (1,35g) foi revestido com ácido cítrico (0,81-0,94g) para dar uma composição a 60-70% nominais. Exemplo 5:

[00137] Não tecido 100% de fibra de quitosana (1,35g) foi revestido com ácido cítrico (0,027-0,068g) e ácido láctico (0,34g) para dar uma composição de ácido triprótico a 2-5% e ácido monoprótico a 25% nominais. Exemplo 6:

[00138] Não tecido 100% de fibra de quitosana (1,35g) foi revestido com ácido cítrico (0,27-0,41g) e ácido láctico (0,34g) para dar uma composição de ácido triprótico a 20-30% e ácido monoprótico a 25% nominais. Exemplo 7:

[00139] Tecido 100% de fibra de quitosana (1,35g) foi revestido com ácido cítrico (0,81-0,94g) e ácido láctico (0,41g) para dar uma composição de ácido triprótico a 60-70% e ácido monoprótico a 30% nominais. Exemplo 8:

[00140] Não tecido 100% de fibra de quitosana (1,35g) foi revestido com ácido cítrico (0,04g) e ácido láctico (0,2g) para dar uma composição de ácido triprótico a 3% e ácido monoprótico a 15% nominais. Exemplo 9:

[00141] Não tecido 100% de fibra de quitosana (1,35g) foi revestido com ácido cítrico (0,34g) e ácido láctico (0,2g) para dar uma composição de ácido triprótico a 25% e ácido monoprótico a 15% nominais. Exemplo 10:

[00142] Não tecido 100% de fibra de quitosana (1,35g) foi revestido com ácido cítrico (0,81g) e ácido láctico (0,27g) para dar uma composição de ácido triprótico a 60% e ácido monoprótico a 20% nominais. Exemplo 11:

[00143] Não tecido 100% de fibra de quitosana (1,35g) foi revestido com ácido cítrico (0,41g) e ácido láctico (0,34g) para dar uma composição de ácido triprótico a 30% e ácido monoprótico a 25% nominais. Exemplo 12:

[00144] Não tecido 100% de fibra de quitosana (1,35g) foi revestido com ácido cítrico (0,54g) e ácido láctico (0,34g) para dar uma composição de ácido triprótico a 40% e ácido monoprótico a 25% nominais. Exemplo 13:

[00145] Não tecido 100% de fibra de quitosana (1,35g) foi revestido com ácido cítrico (0,54g) e ácido láctico (0,41g) para dar uma composição de ácido triprótico a 40% e ácido monoprótico a 30% nominais. Curativos de ferida de exemplo Exemplo 14:

[00146] Uma composição da presente invenção é preparada contendo nominalmente 2g de não tecido 100% de fibra de quitosana em 8g água deionizada com 0,6g ácido cítrico. A composição foi revestida sobre a superfície de uma espuma de poliuretano não reticulado e deixada secar. A espuma contendo a composição secada da presente invenção foi, então, ligada por adesivo a uma espuma de poliuretano, distante de uma camada de filme de poliuretano ligado, para formar uma camada de contato com a ferida. Exemplo 15:

[00147] Uma composição da presente invenção é preparada contendo nominalmente 2g de não tecido 100% de fibra de quitosana em 8g água deionizada com 0,6g ácido cítrico. A composição foi revestida sobre a superfície de um têxtil de viscose tecido e deixada secar. Ensaio de MBEC 1

[00148] Para determinar a eficácia de antimicrobianos contra biofilmes de vários microrganismos, um Ensaio de MBEC (Concentração de erradicação de biofilme mínima).

[00149] O Ensaio de MBEC é um ensaio de triagem de alto rendimento usado para determinar a eficácia de antimicrobianos contra biofilmes de vários microrganismos. O inoculador de biofilme MBEC consiste de uma tampa de plástico com 96 pinos e uma base correspondente. Existem dois tipos de bases que podem ser usadas com a tampa de MBEC. Uma base contém 96 cavidades individuais. As cavidades individuais permitem o crescimento de uma variedade de microorganismos na mesma tampa do pino. O outro tipo de base é uma base passante ondulada que pode conter apenas um único microorganismo. Biofilmes são estabelecidos nos pinos em condições de batelada (sem fluxo de nutrientes para dentro ou fora de uma cavidade individual) com mistura suave. O biofilme estabelecido é transferido para uma nova placa de 96 cavidades para teste de eficácia antimicrobiana. O projeto do ensaio permite o teste simultâneo de biocidas múltiplos em múltiplas concentrações com amostras replicadas, tornando-se uma ferramenta de triagem eficiente. Microorganismos de teste Pseudomonas aeruginosa ATCC 13359 Staphylococcus haemolyticus MRSA 308 Amostras testadas Controle: Solução salina tamponada com fosfato (PBS)

[00150] Amostra A: Não tecido 100% de fibra de quitosana com Ag (nominalmente 1%) e ácido láctico para fornecer uma composição de ácido monoprótico a 25% nominais (amostra comparativa)

[00151] Amostra B: Não tecido de fibra de celulose carboximetilada com Ag (nominalmente 1%) (amostra comparativa - Aquacel Ag®)

[00152] Amostra C: Não tecido 100% de fibra de quitosana com ácido láctico para fornecer uma composição de ácido monoprótico a 25% nominais (amostra comparativa)

[00153] Amostra D: Não tecido 100% de fibra de quitosana com ácido acético para fornecer uma composição de ácido monoprótico a 25% nominais (amostra comparativa)

[00154] Amostra E: Não tecido 100% de fibra de quitosana com ácido cítrico para fornecer uma composição de ácido triprótico a 25% nominais (Exemplo 3) Preparação de inóculo bacteriano

[00155] Uma cultura de 24 horas de cada microorganismo foi coletada de ou uma placa agar de triptona e soja (TSA) ou placa de agar de infusão de cérebro e coração (BHIA) e colocada em suspensão em ou 20ml de caldo de triptona e soja (TSB) ou 20ml de caldo de infusão de cérebro e coração (BHIB). A suspensão bacteriana resultante foi diluída para dar um OD590 inicial = 0,10 ± 0,03, que corresponde a uma concentração bacteriana de 108 cfuml-1. Este inóculo inicial foi diluído em série com mais seis vezes a fim de representar progressivamente cargas bacterianas menores (isto é, 107, 106, 105, 104, 103 cfuml-1). A concentração bacteriana de partida para cada organismo foi tipicamente 1 x 108 ± 5 x 107 cfuml-1. Ensaio de MBEC

[00156] Os biofilmes de cada microorganismo foram cultivados em projeções de tampa de pino de uma placa de microtitulação durante 48 horas a 37°C, 50 rpm. Após 48 horas, as tampas dos pinos foram removidas, lavadas brevemente em solução salina tamponada com fosfato (PBS) para remover bactérias planctônicas e então colocadas na placa de desafio do agente durante 24 horas. Para a preparação da placa de desafio para os curativos de ferida, pedaços de 1 cm2 foram cortados com tesoura esterilizada e colocados nas cavidades designados de uma placa de microtitulação. A placa de desafio para os agentes de teste de grânulos foi preparada pesando 30mg ± 3mg de cada formulação de grânulos nas cavidades de uma placa de microtitulação. Os curativos de ferida e os grânulos foram então ativados com 150 μl de PBS. Após tratamento, as projeções da tampa de pinos foram lavadas duas vezes em PBS, depois transferidas para 200 μl de neutralizador e colocadas em um banho de água sônico durante 5 minutos a fim de recuperar bactérias fixadas restantes. As diluições em série foram realizadas no caldo de recuperação resultante e placas de gotejamento foram usadas para quantificar as bactérias recuperadas. Todas as amostras foram testadas em triplicata salvo indicado ao contrário.

[00157] Os resultados são mostrados na Tabela 1 e Figuras 1 a 3. Os resultados em Figuras 1 a 3 referem-se a Amostras B, C e E.

[00158] É evidente, a partir dos gráficos mostrados nas Figuras 1 a 3 que Amostra E compreendendo quitosana revestida com um ácido triprótico é eficaz contra os três microrganismos testados. Amostra C compreendendo fibras de quitosana revestidas com um ácido monoprótico mostrou concentrações de microorganismos para todos os três microorganismos testados. Finalmente, Amostra B compreendendo celulose carboximetilada com prata apresentou bons resultados para Staphylococcus haemolyticus que não foi eficaz contra ambos Pseudomonas aeruginosa ATCC 13359 e MRSA 308.

Tabela 1: Resultados de teste após Ensaio de MBEC Modelo de reator CDC 1

[00159] Para determinar as capacidades de remoção de biofilme de sete curativos de ferida, contra três espécies bacterianas, usando um método de reator CDC. Microorganismos de teste Staphylococcus haemolyticus NCTC 11042 Pseudomonas aeruginosa ATCC 10434 Staphylococcus aureus 308 resistente a meticilina Amostras Testadas Controle: Solução salina tamponada com fosfato (PBS)

[00160] Amostra F: Não tecido 100% de fibra de quitosana com 15% ácido láctico e 3% ácido cítrico. Isto equivalente a 1,35g quitosana, 0,2g ácido láctico e 0,04g ácido cítrico (Exemplo 8).

[00161] Amostra G: Não tecido 100% de fibra de quitosana com 15% ácido láctico e 25% ácido cítrico. Isto equivalente a 1,35g quitosana, 0,2g ácido láctico e 0,34g ácido cítrico (Exemplo 9).

[00162] Amostra H: Não tecido 100% de fibra de quitosana com 20% ácido láctico e 60% ácido cítrico. Isto equivalente a 1,35g quitosana, 0,27g ácido láctico e 0,81g ácido cítrico (Exemplo 10).

[00163] Amostra I: Não tecido 100% de fibra de quitosana com 3% ácido cítrico. Isto equivalente a 1,35g quitosana e 0,04g ácido cítrico (Exemplo 2).

[00164] Amostra J: Não tecido 100% de fibra de quitosana com 25% ácido cítrico. Isto equivalente a 1,35g quitosana e 0,34g ácido cítrico (Exemplo 3).

[00165] Amostra K: Não tecido 100% de fibra de quitosana com 60% ácido cítrico. Isto equivalente a 1,35g quitosana e 0,81g ácido cítrico (Exemplo 4).

[00166] As amostras foram preparadas seguindo os métodos descritos acima.

[00167] Amostras de curativos foram cortadas em pedaços de aproximadamente 1,5cm2 antes do uso. Solução salina tamponada com fosfato (PBS) foi usada como o controle. Preparação de inóculo bacteriano

[00168] Uma cultura de 24 horas das bactérias de teste foi coletada de uma placa agar de triptona e soja (TSA) usando um cotonete estéril e recolocada em suspensão em 20ml de caldo de triptona e soja (TSB). A suspensão bacteriana foi diluída para dar um OD590 = 0,10 ± 0,03 que corresponde a uma concentração bacteriana de 108 ± 5 x107 cfuml-1. Esta foi ainda diluída em TSB e usada como o inóculo para o Reator CDC contendo os cupons de teste. O reator CDC foi incubado durante 48 horas a 37°C, agitando a 50rpm a fim de incentivar o crescimento do biofilme. Tratamento do biofilme

[00169] Após 48 horas os cupons de teste foram removidos do reator CDC e lavados 3 vezes em PBS estéril a fim de remover as bactérias planctônicas. Os cupons lavados foram, então, tratados, ensanduichando o cupom entre duas amostras de curativo de 1,5 cm2. Os curativos foram ativados antes do teste pela adição de 350μl PBS (75% saturação) para cada pedaço de 1,5 cm2. Cupons de controle foram submersos em 2ml de PBS para P. aeruginosa (ou no caso de S. haemolyticus e MRSA em 2ml PBS + 0,1% TSB). Todas as amostras foram testadas em triplicata. Microorganismos foram recuperados dos cupons após 24 horas de tratamento e quantificados por realização de diluições em série e placas de gotejamento.

[00170] Os resultados são mostrados nas Figuras 4 a 6.

[00171] É evidente a partir dos gráficos mostrados em Figuras 4 a 6 que Amostras G, H e K são eficazes contra todos os três microorganismos testados. Amostras G e H compreendem fibras de quitosana revestidas com um ácido triprótico e um ácido monoprótico. Amostra K compreende uma fibra de quitosana revestida com uma quantidade maior de um ácido triprótico. Enquanto Amostras F, I e J foram eficazes contra Staphylococcus aureus 308 resistente a meticilina, elas foram menos eficazes contra ambos Staphylococcus haemolyticus NCTC 11042 e Pseudomonas aeruginosa ATCC 10434.

[00172] Os resultados do modelo de reator CDC mostram que uma quitosana revestida com quantidades crescentes de ácido triprótico, por exemplo, em torno de 60%, é mais eficaz contra microorganismos do que uma quantidade menor de em torno de 25% ou menor. Também, os resultados mostram que incluindo um ácido monoprótico com um ácido triprótico pode ser eficaz na redução da quantidade de ácido triprótico requerido, por exemplo, reduzindo a quantidade de ácido triprótico a em torno de 25%. Modelo de reator CDC 2

[00173] Para determinar as capacidades de remoção de biofilme de seis curativos de ferida, contra duas espécies bacterianas, usando o método de reator CDC. Microorganismos de teste Staphylococcus haemolyticus NCTC 8325 Pseudomonas aeruginosa ATCC 10434 Amostras Testadas Controle: Solução salina tamponada com fosfato (PBS)

[00174] Amostra L: Não tecido 100% de fibra de quitosana com 25% ácido láctico e 30% ácido cítrico. Isto equivalente a 1,35g quitosana, 0,34g ácido láctico e 0,41g ácido cítrico (Exemplo 11).

[00175] Amostra M: Não tecido 100% de fibra de quitosana com 25% ácido láctico e 40% ácido cítrico. Isto equivalente a 1,35g quitosana, 0,34g ácido láctico e 0,54g ácido cítrico (Exemplo 12).

[00176] Amostra N: Não tecido 100% de fibra de quitosana com 30% ácido láctico e 40% ácido cítrico. Isto equivalente a 1,35g quitosana, 0,41g ácido láctico e 0,54g ácido cítrico (Exemplo 13).

[00177] Amostra O: Não tecido 100% de fibra de quitosana.

[00178] Amostra P: Não tecido 55% fibra de quitosana / 45% fibra de viscose com 25% ácido láctico. Isto equivalente a 0,74g fibra de quitosana, 0,61g fibra de Viscose e 0,34g ácido láctico

[00179] Amostra Q: Não tecido de carboximetilcelulose com formulação antibiofilme contendo prata iônica.

[00180] As amostras foram preparadas seguindo os métodos descritos acima.

[00181] Amostras de curativos foram cortadas em pedaços de aproximadamente 1,5cm2 antes do uso. Solução salina tamponada com fosfato (PBS) foi usada como o controle. Preparação de inóculo bacteriano

[00182] Uma cultura de 24 horas de cada microorganismo foi coletada a partir de uma placa de agar de triptona e soja (TSA) e recolocada em suspensão em 20 ml de caldo de triptona e soja (TSB). A suspensão bacteriana resultante foi diluída para dar uma OD590 inicial = 0,10 ± 0,03, o que corresponde a uma concentração bacteriana de 108 ± 5 x 107 cfuml-1. Isto foi ainda diluído a aproximadamente 107 cfuml-1 em TSB e foi usado como inóculo inicial para o reator CDC. O reator CDC foi incubado durante 24 e 72 horas a 37° C, agitando a 50 rpm a fim de incentivar o crescimento do biofilme. Tratamento de Biofilme

[00183] Após 24 horas e 72 horas, os cupons de teste foram removidos do reator CDC e lavados 3 vezes em solução salina tamponada com fosfato estéril (PBS) a fim de remover as bactérias planctônicas. Os cupons lavados foram então tratados ensanduichando cada cupom entre dois pedaços de material de curativo de ferida. Os curativos foram ativados antes do teste pela adição de 350 μl de PBS contendo 1% TSB. Os cupons de controle foram submersos em 2 ml de PBS contendo 1% TSB. Após o período de tratamento de 24 horas, os cupons foram colocados em 2 ml de neutralizador e sonicados durante 15 minutos para recuperar as bactérias fixadas restantes. As diluições em série foram realizadas no caldo de recuperação resultante e foram usadas placas de gotejamento para quantificar as bactérias recuperadas. Todas as amostras foram testadas em triplicata.

[00184] Os resultados são apresentados em Figuras 7 a 10.

[00185] Figura 7 mostra a quantidade de Pseudomonas aeruginosa viável recuperada a partir de biofilmes pré-formados de 24 horas após tratamento de 24 horas com os curativos de ferida de amostra. Controles foram tratados com PBS + 1% TSB.

[00186] Figura 8 mostra a quantidade de Pseudomonas aeruginosa viável recuperada a partir de biofilmes pré-formados de 72 horas após tratamento de 24 horas com os curativos de ferida de amostra. Controles foram tratados com PBS + 1% TSB.

[00187] Figura 9 mostra a quantidade de Staphylococcus aureus viável recuperada a partir de biofilmes pré-formados de 24 horas após tratamento de 24 horas com os curativos de ferida de amostra. Controles foram tratados com PBS + 1% TSB.

[00188] Figura 10 mostra a quantidade de Staphylococcus aureus viável recuperada a partir de biofilmes pré-formados de 72 horas após tratamento de 24 horas com os curativos de ferida de amostra. Controles foram tratados com PBS + 1% TSB.

[00189] É evidente a partir dos gráficos mostrados em Figuras 7 a 10 que Amostras L, M e N da presente invenção são eficazes contra ambos microorganismos testados. Enquanto Amostras Q e P foram eficazes contra Staphylococcus aureus, elas foram menos eficazes contra Pseudomonas aeruginosa ATCC 10434. Ensaio de MBEC 2 Microorganismo de teste Staphylococcus aureus NCTC 8325 Agentes testados

[00190] Todos os agentes de teste foram preparados por revestimento de grânulos de quitosana tendo um grau de desacetilação > 75% com o(s) ácido(s) especificado(s) usando um solvente não aquoso. Isto formou um sal de quitosana sólido na forma de um grânulo. Os grânulos foram então misturados em uma formulação de gel usando água deionizada com o gel contendo entre 5-10% de sal de quitosana. Ensaio de MBEC

[00191] O biofilme de S. aureus foi cultivado em projeções de tampa de pinos de uma placa de microtitulação durante 24 horas e 72 horas a 37°C. Após 24 horas e 72 horas, as tampas dos pinos foram removidas, lavadas brevemente em solução salina tamponada com fosfato estéril (PBS) para remover bactérias planctônicas e depois colocadas na placa de desafio do agente durante 24 horas. Para a preparação da placa de desafio, uma quantidade de cada formulação de gel foi colocada nas cavidades de uma placa de microtitulação. As projeções positivas e negativas da tampa de pino de controle foram colocadas em PBS + 1% TSB. Após tratamento, as projeções de tampa de pino foram lavadas duas vezes em PBS e então colocadas em um neutralizador. As placas foram sonicadas. Diluições em série foram realizadas no caldo de recuperação resultante e foram usadas placas de gotejamento para quantificar as bactérias recuperadas. Todas as amostras foram testadas em triplicata. Biofilme de vinte e quatro horas

[00192] Todos os agentes testados com sucesso reduziram o número de bactérias viáveis recuperadas do interior dos biofilmes de 24 horas pré-formados de S. aureus após tratamento durante 24 horas a 37°C, como mostrado em Figura 11. Isto representou uma redução logarítmica de 5,84 ± 0,53 em bactérias viáveis comparado com os controles não tratados. Biofilme de setenta e duas horas

[00193] Todos os agentes testados com sucesso reduziram o número de bactérias viáveis recuperadas do interior dos biofilmes de 72 horas pré-formados de S. aureus após tratamento durante 24 horas a 37°C, como mostrado em Figura 12. Para cada agente, isto representou uma redução logarítmica de 5,52 ± 0,22 em bactérias viáveis comparado com os controles não tratados.

[00194] Como evidente, deve ser entendido que a presente invenção não é destinada a ser limitada pelos exemplos acima, que são descritos a título de exemplo apenas.

Claims

1. Composição sólida caracterizada pelo fato de compreender um primeiro componente selecionado do grupo consistindo em quitosana, quitina, derivados de quitosana, derivados de quitina, e qualquer combinação dos mesmos; e pelo menos um ácido triprótico, em que o ácido triprótico está presente em uma quantidade de pelo menos 10% do primeiro componente, em que o pelo menos um ácido triprótico é revestido sobre pelo menos uma porção do primeiro componente e/ou absorvido em pelo menos uma porção do primeiro componente.

2. Composição de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que a composição é insolúvel em fluido fisiológico; e/ou em que o primeiro componente é não antimicrobiano.

3. Composição de acordo com qualquer uma das reivindicações precedentes, caracterizada pelo fato de que a razão do primeiro componente para o pelo menos um ácido triprótico é pelo menos 2:1.

4. Composição de acordo com qualquer uma das reivindicações precedentes, caracterizada pelo fato de que o primeiro componente é quitosana; e/ou em que o ácido triprótico é ácido cítrico.

5. Composição de acordo com a reivindicação 4, caracterizada pelo fato de que a quitosana tem um grau de desacetilação de pelo menos 70%; e/ou em que o primeiro componente tem uma viscosidade maior do que 150cps em solução de ácido acético a 1%.

6. Composição de acordo com qualquer uma das reivindicações precedentes, caracterizada pelo fato de que o primeiro componente está na forma de fibras, grânulos, flocos, pó, ou qualquer combinação dos mesmos; e/ou em que a composição está na forma de grânulos, flocos, fibras, pó, pano não tecido ou têxtil tricotado.

7. Composição de acordo com qualquer uma das reivindicações precedentes, caracterizada pelo fato de que o ácido triprótico está presente em uma quantidade em torno de 25 a 60% do primeiro componente.

8. Composição de acordo com qualquer uma das reivindicações precedentes, caracterizada pelo fato de que o ácido triprótico é revestido sobre um material carreador.

9. Composição de acordo com qualquer uma das reivindicações precedentes, caracterizada pelo fato de ainda compreender um componente adicional selecionado do grupo consistindo em agentes antimicrobianos; agentes farmacêuticos; agentes quelantes; agentes umectantes; fatores de crescimento; citocinas; agentes que absorvem agentes que retardam a cicatrização, como MMP’s (metaloproteinases de matriz) e elastase; cálcio; vitamina K; fibrinogênio; trombina; fator VII; fator VIII; argilas; celulose regenerada oxidada; gelatina; e colágeno.

10. Curativo de ferida, caracterizado pelo fato de compreender uma composição conforme definida em qualquer uma das reivindicações precedentes.

11. Composição de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-9, caracterizada pelo fato de ser para uso como agente terapêutico.

12. Composição de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-9, caracterizada pelo fato de ser para uso no tratamento de feridas; ou para uso na ruptura e morte de bactérias em um biofilme; ou para uso na prevenção da formação de um biofilme.

13. Método de fabricação de uma composição compreendendo um primeiro componente selecionado do grupo consistindo em quitosana, quitina, derivados de quitosana, derivados de quitina, e combinações dos mesmos; e pelo menos um ácido triprótico, em que o ácido triprótico está presente em uma quantidade de pelo menos 10% do primeiro componente, o método caracterizado pelo fato de compreender as etapas de: a. revestir pelo menos uma porção do primeiro componente com o pelo menos um ácido triprótico; e/ou b. absorver em pelo menos uma porção do primeiro componente o pelo menos um ácido triprótico.