BR112013020681B1

BR112013020681B1 - Métodos para tratar papel de filtro e para o manuseio de material biológico

Info

Publication number: BR112013020681B1
Application number: BR112013020681-0A
Authority: BR
Inventors: Hanne Marika Lindroos; Outi Maria Lehtinen; Pekka Tapani Mattsson; Elina Maaret Tuomola
Original assignee: Wallac Oy
Priority date: 2011-02-18
Filing date: 2012-02-02
Publication date: 2021-08-24
Also published as: US9677810B2; WO2012110693A1; US20140000124A1; FI20115157A0; EP2676117A1; CA2827554C; ES2947561T3; EP2676117C0; CA2827554A1; BR112013020681A2; EP2676117B1

Abstract

método para melhorar a qualidade e funcionalidade de papel de filtro apropriado para coleta de amostras biológicas. a presente invenção refere-se a um método para diminuir a variação entre e/ou dentro de folhas individuais de papel de filtro, que são adequados para a coleta de amostras de material biológico, por exemplo, de sangue, é descrito. o método compreende, pelo menos, um dos seguintes: submeter as folhas de papel de filtro à substância gasosa contendo pelo menos 30 gramas por metro cúbico de água e/ou molhar as folhas de papel de filtro com água e, subsequentemente, a secagem das folhas de papel de filtro. de acordo com os testes, o tratamento acima descrito, reduz significativamente a variação indesejável entre os resultados analisados a partir de folhas de papel de filtro e impregnadas com o mesmo material biológico para fins de teste.

Description

Campo da invenção

[001] A invenção refere-se a um método para melhorar as propri edades de papel de filtro apropriado para a coleta de amostras de material biológico, por exemplo, sangue. Mais particularmente, a invenção refere-se a um método para diminuir a variação de propriedades entre e/ou dentro de folhas individuais de papel de filtro. Além disso, a invenção refere-se a um método para o tratamento de material biológico com a ajuda de papel de filtro. Além do mais, a invenção refere-se a um método para diminuir a variação entre os resultados a serem analisados a partir de folhas de papel de filtro, cada uma impregnada com, pelo menos, uma amostra de material biológico.

Antecedentes

[002] Uma prática convencional é a de impregnar uma ou mais gotas de amostra de material biológico a ser examinado em uma folha de papel de filtro, secar a folha de papel de filtro impregnada com o material biológico, e depois enviar a folha de papel de filtro para um laboratório para análise. O material biológico a ser examinado pode ser, por exemplo, o sangue de um bebê recém-nascido. No laboratório, um ou mais discos de amostras contendo o material biológico a ser examinado são cortados ou perfurados da folha de papel de filtro e, em seguida, um ou mais discos de amostras que tenham sido cortados ou perfurados são submetidos à análise. No entanto, descobriu-se que propriedades do papel de filtro podem variar entre papéis de filtro. Em alguns casos, estas variações em propriedades podem resultar de variação entre resultados de medições obtidas a partir de folhas de papel de filtro impregnadas com o mesmo material biológico. A Figura 1 mostra um histograma de resultados medidos num caso de exemplo em que o sangue foi impregnado em sete diferentes folhas de papel de filtro a partir de diferentes lotes de papel de filtro. A substância a analisar foi medida por eluição do sangue a partir do disco de amostra perfurado do papel de filtro impregnado com sangue e por ensaio da substância do analito. Os resultados foram obtidos por medição de fluorescência. O eixo vertical do histograma mostrado na figura 1 é o número de contagem obtido com o fotodetector. O número de contagem é inversamente proporcional à atividade do analito. Neste caso de exemplo, o analito que é medido é biotinidase, que é uma enzima que catalisa a clivagem de biotina, vitamina H, a partir de pequenos peptí- deos biotinilados e biocitina, assim, reciclando a vitamina. A reação é hidrolítica, em que o substrato, ou seja, as moléculas no início da reação, é convertido para os produtos da reação. Por exemplo, biocitina pode ser convertida para biotina e lisina. Biotinidase também pode catalisar a clivagem de substratos sintéticos que liberam um corante fluorescente, tal como biotina-6-aminoquinolina, para triagem de recém- nascidos para a deficiência da biotinidase. A atividade de enzima é definida como os moles de substrato convertidos por unidade de tempo. A atividade enzimática é uma medida da quantidade de enzima ativa presente e, portanto, é dependente das condições que devem ser es-pecificados. A unidade SI é o katal, 1 katal = 1 mol s-1. Um valor mais prático e comumente usado é a unidade de enzima, 1 (U) = 1 μmol min-1. 1 U corresponde a 16,67 nanocatais. Como pode ser visto a partir da figura 1, existe, neste caso exemplificativo, relativamente forte variação entre os resultados obtidos com as diferentes folhas S1-S7 de papel de filtro.

[003] Um inconveniente relacionado com o fenômeno descrito acima é que ele pode causar um trabalho adicional e requisitos adicionais para o pessoal de coleta das amostras de material biológico, para o pessoal que executa as medições em laboratórios, e também para os especialistas que interpretam os resultados da análise.

Sumário

[004] O seguinte apresenta um resumo simplificado, a fim de prover uma compreensão básica de alguns aspectos das várias modalidades da invenção. O resumo não é uma visão geral ampla da invenção. Ele não se destina a identificar elementos-chave ou críticos da invenção, nem a delinear o escopo da invenção. O resumo a seguir apenas apresenta alguns conceitos da invenção em uma forma simplificada como um prelúdio para uma descrição mais detalhada de modalidades de exemplo da invenção.

[005] De acordo com o primeiro aspecto da invenção, é provido um novo método para diminuir a variação entre e/ou dentro de folhas individuais de papel de filtro, que são adequados para a coleta de amostras de material biológico. O método compreende:- submeter cada folha de papel de filtro a substância gasosa contendo, pelo menos, 30 gramas de água por metro cúbico, e/ou- molhagem, por exemplo, por imersão ou lavagem, de cada folha de papel de filtro com água e subsequentemente a secagem da folha de papel de filtro.

[006] De acordo com o segundo aspecto da invenção, é proporcionado um novo método para o manuseio de material biológico com a ajuda de papel de filtro. O método compreende:- o tratamento de uma folha de papel de filtro, em pelo menos uma das seguintes maneiras (i, ii): (i) sujeitar a folha de papel de filtro a substância gasosa contendo pelo menos 30 gramas de água por metro cúbico, e/ou (ii) umedecimento da folha de papel de filtro com água e, subsequentemente, secagem da folha de papel de filtro e, subsequentemente- Impregnar pelo menos uma amostra de material biológico para a folha de papel de filtro.

[007] Em conformidade com o terceiro aspecto da invenção, é proporcionado um novo método para diminuir a variação entre os resultados a ser analisados a partir de folhas de papel de filtro, cada um sendo impregnado com pelo menos uma amostra de material biológico. O método compreende o tratamento de cada uma das folhas de papel de filtro, em pelo menos uma das seguintes maneiras (i, ii) antes da impregnação, pelo menos, de uma amostra do material biológico em que papel de filtro:- (I) submeter o papel de filtro à substância gasosa contendo pelo menos 30 gramas de água por metro cúbico, e/ou- (Ii) umidificação do papel de filtro com água e, subsequen-temente, secagem do papel de filtro.

[008] O fato de que a qualidade e as propriedades do papel de filtro podem ser melhoradas nas formas acima descritas, tem significado, pelo menos, para os seguintes grupos: os produtores de métodos analíticos, os fabricantes de papel de filtro, os fabricantes de dispositivos de medição e análise, o pessoal de coleta de amostras, o pessoal que executa análises de laboratório, e especialistas em interpretar os resultados da análise.

[009] Um certo número de modalidades exemplificativas, isto é,não limitativas, está descrito nas reivindicações dependentes em anexo.

[0010] Várias modalidades exemplificativas da invenção, tanto quanto a construções e aos métodos de operação, junto com objetos e vantagens adicionais dos mesmos, serão melhor compreendidas a partir da descrição a seguir das modalidades exemplificas específicas, quando lidas em conexão com os desenhos em anexo.

[0011] Os verbos "compreender" e "incluir" são usados neste documento como limitações abertas que não requerem nem excluem a existência de características não citadas. Os recursos citados em rei- vindicações dependentes são mutuamente livremente combináveis, salvo expressamente indicado em contrário.

Breve descrição das figuras

[0012] As modalidades exemplificativas da invenção e as suas vantagens são explicadas em maior detalhe a seguir, no sentido de exemplos e com referência aos desenhos anexos, nos quais:

[0013] a figura 1 mostra um histograma de resultados medidos em um caso de exemplo em que o sangue foi impregnado em sete diferentes folhas de papel de filtro a partir de diferentes lotes de papel de filtro,

[0014] as figuras 2a e 2b mostram diagramas de fluxo de acordo com modalidades exemplificativas da invenção para diminuir a variação entre e/ou dentro de folhas individuais de papel de filtro, que são adequados para a coleta de amostras de material biológico,

[0015] as figuras 3a e 3b mostram fluxogramas de métodos de acordo com modalidades exemplificativas da invenção para o manuseio de material biológico com a ajuda de papel de filtro, e

[0016] a figura 4 mostra um histograma de resultados medidos em um caso de exemplo em que o sangue foi impregnado em sete diferentes folhas de papel de filtro tiradas a partir dos mesmos lotes de papel de filtro, como no caso de exemplo da figura 1 e, além disso, tratados com um método de acordo com uma modalidade exemplificativa da invenção, para fins de comparação, a figura 4 também mostra o histograma dos resultados mostrados na figura 1.

[0017] A figura 1 já foi explicada em conjunto com a descrição da técnica anterior relacionada na seção "antecedentes" do presente documento.

Descrição das modalidades

[0018] A Figura 2a mostra um fluxograma de um método de acordo com uma modalidade exemplificativa da invenção para diminuir a variação entre e/ou dentro de folhas individuais de papel de filtro, que são adequados para a coleta de amostras de material biológico. O método compreende submeter, na fase 201, as folhas de papel de filtro a substância gasosa contendo pelo menos 30 gramas de água por metro cúbico. Mais preferivelmente, a substância gasosa contém pelo menos 40 gramas de água por metro cúbico, e ainda mais preferivelmente, a substância gasosa contém pelo menos 50 gramas de água por metro cúbico, e, ainda mais preferencialmente, a substância gasosa contém pelo menos 70 gramas de água por metro cúbico. A substância gasosa pode ser, por exemplo, ar úmido no qual há, pelo menos, 30 gramas de água por metro cúbico.

[0019] Em um método de acordo com uma modalidade exemplifi-cativa da presente invenção, as folhas de papel de filtro são submetidas a vapor com temperatura de pelo menos 100 ° C, ou, mais vantajosamente, pelo menos, 120° C. As folhas de papel de filtro podem ser submetidas ao vapor durante um período de tempo de, por exemplo, pelo menos 15 minutos.

[0020] A Figura 2b mostra um diagrama de fluxo de um método de acordo com uma outra modalidade exemplificativa da presente invenção para diminuir a variação entre e/ou dentro de folhas individuais de papel de filtro, que são adequadas para a coleta de amostras de material biológico. O processo compreende molhar, na fase 202, as folhas de papel de filtro com água e, posteriormente, na fase 203, a secagem das folhas de papel de filtro.

[0021] A Figura 3a mostra um diagrama de fluxo de um método de acordo com uma modalidade exemplificativa da invenção para o manuseio de material biológico com a ajuda de papel de filtro. O método compreende submeter, na fase 301, uma folha de papel de filtro à substância gasosa, contendo, pelo menos, 30 gramas de água por metro cúbico, e, subsequentemente, na fase 304, a impregnação de, pelo menos, uma amostra de material biológico para a folha de papel de filtro. O material biológico pode ser, por exemplo, sangue.

[0022] A Figura 3b mostra um fluxograma de um método de acordo com uma outra modalidade exemplificativa da presente invenção para o manuseio de material biológico com a ajuda de papel de filtro. O método compreende, em sucessivas fases 302 e 303, o molhamen- to de uma folha de papel de filtro com água e secagem da folha de papel de filtro e, subsequentemente, na fase 304, impregnar, pelo menos, uma amostra de material biológico para a folha de filtro de papel.

[0023] Um método de acordo com uma modalidade exemplificative da presente invenção compreende ainda a medição de um analito quantitativamente e/ou qualitativamente a partir do material biológico, por exemplo, sangue, impregnado na folha de papel de filtro.

[0024] Em um método de acordo com uma modalidade exemplifi-cativa da invenção, a atividade e/ou concentração do analito é medida a partir de material biológico, por exemplo, sangue, impregnado na folha de papel de filtro.

[0025] Em um método de acordo com uma modalidade exemplifi-cativa da presente invenção, a medição do analito a partir do material biológico, por exemplo, sangue impregnado na folha de papel de filtro, é realizado como uma medição da fluorescência. Deve ser, no entanto, observado que métodos de acordo com várias modalidades da presente invenção são aplicáveis também com vários outros métodos de medição, tais como, por exemplo, absorvância, tempo de fluorescência resolvida, luminescência, análise de massa.

[0026] Um método de acordo com uma modalidade exemplificative da invenção compreende a medição da atividade da enzima biotinida- se a partir de sangue impregnado na folha de papel de filtro.

[0027] A Figura 4 mostra um histograma 401 de resultados medidos em um caso exemplo em que o sangue foi impregnado em sete fo- lhas diferentes ST1-ST7 de papel de filtro que foi tratado com um método de acordo com uma modalidade exemplificativa da invenção. Neste caso exemplificativo, o tratamento foi de autoclavagem, ou seja, a submissão das folhas ST1-ST7 de papel de filtro a alta pressão de vapor saturado a 120° C ou mais durante um período de tempo tipicamente de 15 - 20 minutos. As folhas ST1-ST7 de papel de filtro foram tomadas a partir dos mesmos lotes de papel de filtro que as folhas não tratadas S1-S7 de papel de filtro utilizado no caso de exemplo representado na figura 1. Para efeitos de comparação, a figura 4 também mostra o histograma 402 de resultados que estão mostrados na figura 1 e que se relacionam com as folhas não tratadas correspondentes S1-S7 de papel de filtro. O eixo vertical dos histogramas 401 e 402 mostrados na figura 4 é o número de contagem obtido com um detector de foto. O número de contagem é inversamente proporcional à atividade do analito que é medido. Neste caso de exemplo, o analito que é medido é biotinidase.

[0028] Os exemplos específicos fornecidos na descrição dada acima não devem ser interpretados como limitativos. Desta maneira, a invenção não se limita apenas às modalidades exemplificativas descritas acima.

Claims

1. Método para tratar folhas de papel de filtro, cada folha de papel de filtro sendo posteriormente adequada para uma prática em que pelo menos uma gota de amostra de material biológico é impregnada na folha de papel de filtro, a folha de papel de filtro impregnada com o material biológico é seca e pelo menos um disco de amostra contendo o material biológico é cortado ou perfurado a partir da folha seca de papel de filtro e sujeito a análise do material biológico, o método caracterizado pelo fato de que compreende:submeter (201, 301) as folhas de papel de filtro à substância gasosa contendo pelo menos 30 gramas de água por metro cúbico, e/ouumedecer (202, 302) das folhas de papel de filtro com água e, subsequentemente, a secagem (203, 303) da folha de papel de filtro,para diminuir a variação entre os resultados de um analito a partir de um material biológico impregnado nas folhas de papel filtro.

2. Método de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que a substância gasosa é o ar úmido em que há pelo menos 30 gramas de água por metro cúbico.

3. Método de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que as folhas de papel de filtro são submetidas a vapor com temperatura de pelo menos 100° C.

4. Método de acordo com a reivindicação 3, caracterizado pelo fato de que a temperatura do vapor é de pelo menos 120° C.

5. Método de acordo com a reivindicação 3 ou 4, caracterizado pelo fato de que as folhas de papel de filtro são submetidos ao vapor durante um período de tempo de pelo menos 15 minutos.

6. Método para o manuseio de material biológico, caracterizado pelo fato de que compreende: tratar folhas de papel de filtro com um método, como definido em qualquer das reivindicações 1 a 5, para diminuir a variação entre os resultados de um analito a partir de um material biológico impregnado nas folhas de papel filtro e, subsequentementeimpregnar (304), pelo menos, uma amostra de material biológico em cada uma das folhas de papel de filtro,em que cada uma das folhas de papel de filtro impregnadas com o material biológico é adequada para uma prática em que a folha de papel de filtro impregnada com o material biológico é seca e pelo menos um disco de amostra contendo o material biológico é cortado ou perfurado a partir da folha seca de papel de filtro e sujeito a análise do material biológico.

7. Método de acordo com a reivindicação 6, caracterizado pelo fato de que o material biológico é sangue.

8. Método de acordo com a reivindicação 6 ou 7, caracterizado pelo fato de que compreende ainda a medição de um analito quantitativa e/ou qualitativamente a partir de material biológico impregnado nas folhas de papel de filtro.

9. Método de acordo com a reivindicação 8, caracterizado pelo fato de que a medição é realizada como um dos seguintes: uma medição da fluorescência, uma medição de absorção, uma medição de tempo de fluorescência resolvida, uma medição de luminescência, uma medida de análise de massa.

10. Método de acordo com a reivindicação 8, caracterizado pelo fato de que a atividade e/ou concentração do analito é medida a partir do sangue impregnado nas folhas de papel de filtro.

11. Método de acordo com a reivindicação 9, caracterizado pelo fato de que a medição é realizada como uma medição de fluorescência.

12. Método de acordo com a reivindicação 7, caracterizado pelo fato de que compreende a medição da atividade da enzima bioti- nidase a partir de sangue impregnado nas folhas de papel de filtro.