BR102021005995A2

BR102021005995A2 - PHARMACEUTICAL COMPOSITION FOR THE TREATMENT OF DENTINE HYPERSENSITIVITY BASED ON BRAZILIAN RED PROPOLIS, ITS USE AND PRODUCTION PROCESS

Info

Publication number: BR102021005995A2
Application number: BR102021005995-8A
Authority: BR
Inventors: Suellen De Lima Mendes Vieira
Original assignee: Suellen De Lima Mendes Vieira; Gisele Fernanda Rocha E Silva; Vivian Fernandes Furletti De Góes; Giovana Renata Gouvêa; Alan Conrado Gomes Coelho; Viviane Veroni Degan; Giovana Cherubin Venezian; Carolina Carmo De Menezes; Mario Vedovello Filho; Silvia Amélia Scudeler Vedovello
Priority date: 2021-03-28
Filing date: 2021-03-28
Publication date: 2022-10-04

Abstract

A presente invenção consiste de Produto Gel caracterizado por compreender o uso do extrato da própolis vermelha coletada no mangue da região Nordestina no tratamento da hipersensibilidade da dentina, seu uso e seu processo de produção. Embora a hipersensibilidade dentinária (HSB) seja uma doença dentária muito prevalente na população mundial, não existe nenhum tratamento universalmente aceito. Os produtos encontrados comercialmente para o tratamento dessa afecção bucal apresentam clinicamente resultados lentos e necessitam de uso contínuo para que o efeito desejado seja obtido. Nesse sentido, o produto Gel a base de extrato de própolis com concentrações variando entre 9% a 12% auxilia os cirurgiões dentistas, no tratamento da hipersensibilidade dentinária. Dado que a própolis vermelha brasileira é rica em isoflavonas, composto orgânico com potencial anti-inflamatório, possui eficácia clínica e uso seguro em seres humanos comprovada. Caracterizada por ser uma formulação de fácil aplicação, com alívio imediato da dor da hipersensibilidade da dentina (HDS), otimiza a dinâmica terapêutica da HSD bem como, agrega valor socioeconômico as comunidades que possuem a própolis como principal meio de subsistência.

The present invention consists of a Gel Product characterized by the use of red propolis extract collected from mangroves in the Northeastern region in the treatment of dentin hypersensitivity, its use and its production process. Although dentin hypersensitivity (HSB) is a very prevalent dental disease in the world population, there is no universally accepted treatment. The products found commercially for the treatment of this oral condition show clinically slow results and require continuous use for the desired effect to be obtained. In this sense, the product Gel based on propolis extract with concentrations ranging from 9% to 12% helps dentists in the treatment of dentin hypersensitivity. Given that Brazilian red propolis is rich in isoflavones, an organic compound with anti-inflammatory potential, it has proven clinical efficacy and safe use in humans. Characterized by being an easy-to-apply formulation, with immediate pain relief from dentin hypersensitivity (HDS), it optimizes the therapeutic dynamics of HSD as well as adds socioeconomic value to communities that have propolis as their main means of subsistence.

Description

PHARMACEUTICAL COMPOSITION FOR TREATMENT OF DENTINARY HYPERSENSITIVITY BASED ON BRAZILIAN RED PROPOLIS, ITS USE AND PRODUCTION PROCESS

field of invention

[001] A presente invenção trata-se de uma formulação à base de própolis vermelha brasileira, com concentrações variando entre 9 a 12%, com objetivo do tratamento da hipersensibilidade dentinária.[001] The present invention is a formulation based on Brazilian red propolis, with concentrations ranging from 9 to 12%, with the aim of treating dentin hypersensitivity.

Fundamentals of the invention

[002] Esta invenção refere-se a um gel à base da própolis vermelha brasileira (PVB) para o tratamento da hipersensibilidade da dentina. Dado que o extrato da PVB é um produto resinoso natural complexo produzido por abelhas da espécie Apis mellifera a partir de substâncias coletadas de diferentes partes de plantas como ramos, brotos, exsudatos, entre outros ricos em polifenóis.[002] This invention relates to a gel based on Brazilian red propolis (PVB) for the treatment of dentin hypersensitivity. Given that the PVB extract is a complex natural resinous product produced by bees of the Apis mellifera species from substances collected from different parts of plants such as branches, buds, exudates, among others rich in polyphenols.

[003] A própolis vermelha brasileira é produzida por abelhas com o objetivo de proteger as suas colmeias contra insetos e agentes infecciosos. Em geral, a própolis é composta por resinas e bálsamos (50%-60%), ceras (30%-40%), óleos essenciais (5%-10%), grãos de pólen (5%), microelementos e vitaminas (Piccinelli et al., 2011; Rufatto et al., 2017). A PVB é encontrada nas regiões norte e nordeste do Brasil, principalmente nos estados da Paraíba, Pernambuco, Alagoas e Sergipe. Possui coloração avermelhada devido aos exsudatos vermelhos presentes na superfície da espécie vegetal Dalbergia ecastophyllum, popularmente conhecida por rabo-de-bugio que é coletada por abelhas que vivem nessas regiões (Corrêa et al., 2017; Rufatto et al., 2017).[003] Brazilian red propolis is produced by bees in order to protect their hives against insects and infectious agents. In general, propolis is composed of resins and balms (50%-60%), waxes (30%-40%), essential oils (5%-10%), pollen grains (5%), microelements and vitamins ( Piccinelli et al., 2011; Rufatto et al., 2017). PVB is found in the north and northeast regions of Brazil, mainly in the states of Paraíba, Pernambuco, Alagoas and Sergipe. It has a reddish color due to the red exudates present on the surface of the plant species Dalbergia ecastophyllum, popularly known as howler tail, which is collected by bees that live in these regions (Corrêa et al., 2017; Rufatto et al., 2017).

[004][004]

[005] Dentre as atividades biológicas da PVB, foram evidenciadas a partir de pesquisas científicas seu elevado potencial antibacteriano (Regueira et al., 2017; Silva et al., 2017), fungicida (Neves et al., 2016) anticárie (Bueno-Silva et al., 2015; Martins et al, 2018), anti-inflamatório (Bueno-Silva et al., 2015; Bueno-Silva et al., 2017) e também no processo de cicatrização de feridas (Corrêa et al., 2017).[005] Among the biological activities of PVB, scientific research has shown its high antibacterial potential (Regueira et al., 2017; Silva et al., 2017), fungicide (Neves et al., 2016) anticaries (Bueno- Silva et al., 2015; Martins et al., 2018), anti-inflammatory (Bueno-Silva et al., 2015; Bueno-Silva et al., 2017) and also in the wound healing process (Corrêa et al., 2017).

[006] Em outra pesquisa foi verificado que a diversidade de atividades biológicas do extrato da própolis vermelha brasileira se deve à presença de compostos químicos como: flobafenos, taninos, catequinas, flavonas, flavonóis, chalconas, pterocarpanas, isoflavonóides, biflavonóides, pentacíclicos triterpenóides, xantonas e gutiferonas (Mendonça et al, 2015; Bueno-Silva et al., 2015;Cavendish et al., 2015; Bueno-Silva et al., 2017).[006] In another research, it was verified that the diversity of biological activities of the Brazilian red propolis extract is due to the presence of chemical compounds such as: phlobaphenes, tannins, catechins, flavones, flavonols, chalcones, pterocarpans, isoflavonoids, biflavonoids, pentacyclic triterpenoids, xanthones and gutiferones (Mendonça et al., 2015; Bueno-Silva et al., 2015; Cavendish et al., 2015; Bueno-Silva et al., 2017).

[007] A hipersensibilidade dentinária (HSD) é caracterizada por dor de curta duração, aguda e súbita, sugerida pela exposição dentinária em resposta a estímulos térmicos, evaporativos, tácteis, osmóticos ou químicos que não podem ser atribuídos a nenhuma outra forma de defeito ou patologia dentária (Mehta et al., 2014).[007] Dentin hypersensitivity (HSD) is characterized by short-term, sharp, and sudden pain suggested by dentin exposure in response to thermal, evaporative, tactile, osmotic, or chemical stimuli that cannot be attributed to any other form of defect or dental pathology (Mehta et al., 2014).

[008] A sensibilidade dentinária experimentada é principalmente atribuída à exposição da dentina, na qual os túbulos dentinários de diâmetro de aproximadamente 0,5 μm situados na região periférica da dentina, normalmente protegidos por uma camada de esmalte, são expostos devido a remoção do esmalte ou a recessão gengival que expõe as superfícies radiculares de um dente. A exposição desses túbulos pode resultar em áreas altamente sensíveis aos estímulos (West et al., 2013).[008] The dentin sensitivity experienced is mainly attributed to exposure of the dentin, in which the dentinal tubules of diameter of approximately 0.5 μm located in the peripheral region of the dentin, normally protected by a layer of enamel, are exposed due to enamel removal or gingival recession that exposes the root surfaces of a tooth. Exposure of these tubules can result in areas that are highly sensitive to stimuli (West et al., 2013).

[009] A teoria hidrodinâmica apresentada por Brännstrӧn na década de 60 continua sendo a melhor explicação para a transmissão dolorosa dentinária. De acordo com essa teoria, quando um estímulo é aplicado à dentina, ocorre o deslocamento de fluido dentro dos túbulos dentinários. O movimento do fluido em direção a polpa ou em sentido contrário, promove uma deformação mecânica das fibras nervosas que se encontram no interior dos túbulos ou na interface polpa/dentina, que é transmitida como uma sensação dolorosa (Brännstrӧn, 1986, Mehta et al.,2014).[009] The hydrodynamic theory presented by Brännstrӧn in the 60's remains the best explanation for dentin pain transmission. According to this theory, when a stimulus is applied to dentin, fluid is displaced within the dentinal tubules. The movement of the fluid towards the pulp or in the opposite direction, promotes a mechanical deformation of the nerve fibers that are found inside the tubules or at the pulp/dentin interface, which is transmitted as a painful sensation (Brännstrӧn, 1986, Mehta et al. ,2014).

[0010] Estudos de prevalência a respeito da HSD variam muito dependendo de como os dados foram coletados. Em uma pesquisa realizada por West et al., (2013) com 3.187 pacientes adultos, na faixa etária de 18 a 35 anos de idade, em 07 países europeus, 42% relataram hipersensibilidade dentinária, sendo considerada uma patologia de alta prevalência e preocupação mundial.[0010] Prevalence studies regarding HSD vary greatly depending on how the data were collected. In a survey carried out by West et al., (2013) with 3,187 adult patients, aged 18 to 35 years old, in 07 European countries, 42% reported dentin hypersensitivity, being considered a pathology of high prevalence and worldwide concern. .

[0011] Muitos estudos têm sido realizados com a finalidade de se descobrir tratamentos eficazes para hipersensibilidade dentinária, mas nenhum tratamento é aceito universalmente. De acordo com a teoria da hidrodinâmica, a prevenção e/ou alívio da dor podem ser realizadas selando a extremidade externa dos túbulos dentinários, por coagulação dos protoplasmas dentinário, bloqueando a extremidade pulpar dos túbulos dentinários pela formação de dentina secundária e por último, por anestesia das terminações nervosas da polpa (Cummins,2009; Rӧsing et al., 2009).[0011] Many studies have been conducted in order to discover effective treatments for dentin hypersensitivity, but no treatment is universally accepted. According to the theory of hydrodynamics, prevention and/or relief of pain can be accomplished by sealing the outer end of the dentinal tubules, by coagulation of the dentinal protoplasms, by blocking the pulpal end of the dentinal tubules by the formation of secondary dentin, and lastly, by anesthesia of nerve endings in the pulp (Cummins,2009; Rӧsing et al., 2009).

[0012] O problema do tratamento efetivo da hipersensibilidade dentinária ainda é válido e não totalmente resolvido. Uma preparação eficaz usada para eliminar a hipersensibilidade da dentina deve ter as seguintes características: deve ser suave à polpa e não a irritar, produzir rapidamente o efeito terapêutico desejado, ser de fácil aplicação, proporcionar efeito terapêutico duradouro, não causar dor durante a aplicação e também não deve pigmentar os dentes. Apesar de muitas tentativas, ainda não foi desenvolvida uma formulação que atenda a todas as expectativas dos dentistas e forneça eficácia clínica completa (Tanasiewicz et al., 2017).[0012] The problem of effective treatment of dentine hypersensitivity is still valid and not fully resolved. An effective preparation used to eliminate dentin hypersensitivity should have the following characteristics: it should be gentle on the pulp and not irritate it, quickly produce the desired therapeutic effect, be easy to apply, provide a long-lasting therapeutic effect, not cause pain during application, and it should also not pigment the teeth. Despite many attempts, a formulation that meets all expectations of dentists and provides complete clinical efficacy has yet to be developed (Tanasiewicz et al., 2017).

[0013] Devido à escassez no mercado de produtos eficazes para o tratamento da HSD e em meio ao advento da fitoterapia no Brasil, surge a necessidade de testar produtos de origem natural que possuam aplicações no cotidiano das clínicas odontológicas, sendo uma delas a própolis vermelha brasileira. Este produto tem sido utilizado na medicina popular de inúmeros países devido a sua riqueza química, baixo custo, fácil acesso. Foi considerada uma das substâncias mais heterogêneas encontradas em fontes naturais, sendo que mais de 300 constituintes já foram identificados e caracterizados em diferentes amostras (Lustosa et al., 2008; Souza et al., 2013).[0013] Due to the scarcity in the market of effective products for the treatment of SDH and amid the advent of phytotherapy in Brazil, there is a need to test products of natural origin that have applications in the daily life of dental clinics, one of which is red propolis Brazilian. This product has been used in popular medicine in many countries due to its chemical richness, low cost and easy access. It was considered one of the most heterogeneous substances found in natural sources, with more than 300 constituents already identified and characterized in different samples (Lustosa et al., 2008; Souza et al., 2013).

[0014] À medida que novos materiais e preparações que são utilizados na odontologia surgem e melhoram, as avaliações de sua eficácia são acompanhadas de pesquisas sobre os efeitos potencialmente prejudiciais que podem ter sobre os tecidos moles da boca, ou seja, polpa, mucosa, tecido gengival (Tanasiewicz et al., 2017). Aspectos como não-toxicidade para as células hospedeiras e atividade residual duradoura (substantividade) devem ser considerados (Freires et al., 2016).[0014] As new materials and preparations that are used in dentistry emerge and improve, assessments of their effectiveness are accompanied by research into the potentially harmful effects they can have on the soft tissues of the mouth, i.e., pulp, mucosa, gingival tissue (Tanasiewicz et al., 2017). Aspects such as non-toxicity to host cells and lasting residual activity (substantivity) should be considered (Freires et al., 2016).

[0015] De acordo com os trabalhos citados anteriormente há uma grande diversidade de atividades biológicas apresentadas pela própolis vermelha brasileira e escassez de produtos eficazes para o tratamento da hipersensibilidade da dentina, sendo assim, foi desenvolvida uma formulação em gel dentinário de própolis vermelha brasileira eficiente para o tratamento desta patologia.[0015] According to the works cited above, there is a great diversity of biological activities presented by Brazilian red propolis and a shortage of effective products for the treatment of dentin hypersensitivity, therefore, an efficient Brazilian red propolis dentin gel formulation was developed for the treatment of this pathology.

[0016] O objetivo dessa invenção é a utilização do extrato da própolis vermelha e seu processo produtivo para o tratamento da hipersensibilidade dentinária a partir da formulação de um gel dentário rico em isoflavonóides, com concentrações variando entre 9% a 12%.[0016] The purpose of this invention is the use of red propolis extract and its production process for the treatment of dentin hypersensitivity from the formulation of a dental gel rich in isoflavonoids, with concentrations ranging from 9% to 12%.

[0017] A pesquisa de anterioridade foi realizada através de busca nos sites específicos, utilizando como palavras-chaves: própolis, red propolis, red and propolis, própolis vermelha, hipersensibilidade dentinária e dentin hypersensitivity. Utilizou-se as seguintes etapas:

a) Pesquisas: no Google Academics, Periódico CAPES e ScieLO, em português e inglês, utilizando as palavras chave descritas, nas seguintes composições: (“PROPOLIS” OR “RED PROPOLIS” OR “PRÓPOLIS VERMELHA” OR “HIPERSENSIBILIDADE DENTINÁRIA” OR “DENTIN HYPERSENSITIVITY”).
b) Patentes: Pesquisas realizadas no INPI, Plataforma Orbit Quest, Google Patents, Patentscope utilizando as mesmas palavras-chave da pesquisa já mencionadas. Foi realizada a busca por patentes, caso houvesse algo semelhante ou que possibilite o maior desenvolvimento da pesquisa. Algumas patentes para uso odontológico de própolis vermelha foram depositadas nacionalmente e estão descritas abaixo.

[0017] The previous research was carried out by searching the specific sites, using the following keywords: propolis, red propolis, red and propolis, red propolis, dentin hypersensitivity and dentin hypersensitivity. The following steps were used:

a) Searches: in Google Academics, Periódico CAPES and ScieLO, in Portuguese and English, using the keywords described, in the following compositions: (“PROPOLIS” OR “RED PROPOLIS” OR “PRÓPOLIS VERMELHA” OR “HIPERSENSIBILIDADE DENTINÁRIA” OR “DENTIN HYPERSENSITIVITY”).
b) Patents: Searches carried out at INPI, Orbit Quest Platform, Google Patents, Patentscope using the same search keywords mentioned above. A search for patents was carried out, in case there was something similar or that would allow the further development of the research. Some patents for the dental use of red propolis have been deposited nationally and are described below.

[0018] Solução colutória contendo própolis vermelha para combate de infecções da cavidade bucal (Pontes et al., 2018, número do pedido BR 10 2018 003663 7 A2) onde a presente invenção apresenta um produto natural à base de extrato de própolis vermelha como alternativa para o combate de infecções da cavidade bucal, uma vez que as soluções colutórias existentes no mercado contendo clorexidina, com ampla indicação na área médica e odontológica, apresenta vários efeitos colaterais indesejados. A referida invenção é constituída de uma solução colutória hidroalcoólica de extrato de própolis vermelha proveniente de Dalbergia ecastophyllum (L.) Taub., que apresenta potente efeito antibacteriano contra bactérias de importância odontológica em crescimento livre assim como em biofilme moo espécie e multe espécie, sem apresentar efeitos tóxicos. Esta solução colutória para bochecho com alta eficácia também pode ser associada com a clorexidina, o que reduz as concentrações necessárias para produzir o mesmo efeito antibacteriano.[0018] Mouthwash solution containing red propolis to combat infections of the oral cavity (Pontes et al., 2018, application number BR 10 2018 003663 7 A2) where the present invention presents a natural product based on red propolis extract as an alternative for combating infections in the oral cavity, since the existing mouthwash solutions on the market containing chlorhexidine, widely indicated in the medical and dental field, have several unwanted side effects. Said invention consists of a hydroalcoholic mouthwash solution of red propolis extract from Dalbergia ecastophyllum (L.) Taub., which has a potent antibacterial effect against bacteria of dental importance in free growth as well as in biofilm moo species and multispecies, without have toxic effects. This highly effective mouthwash solution can also be combined with chlorhexidine, which reduces the concentrations needed to produce the same antibacterial effect.

[0019] Furtado Junior et al.,(2017) depositaram um pedido de patente (número BR 10 2017 011097 4 A2) onde relata o desenvolvimento de dentifrícios incorporados com própolis vermelha brasileira associados a arginina, flúor e hidroxiapatita para controle de microrganismos orais, já que a própolis vermelha brasileira tem sido testada quanto à sua atividade antimicrobiana sobre as bactérias orais, com bons resultados in vitro e in vivo o que concede credibilidade ao uso clínico do medicamento. Não foram encontradas patentes de dentifrícios com própolis vermelha brasileira, nem associadas com substâncias remineralizadoras como o flúor e a hidroxiapatita.[0019] Furtado Junior et al.,(2017) filed a patent application (number BR 10 2017 011097 4 A2) where they report the development of toothpastes incorporated with Brazilian red propolis associated with arginine, fluoride and hydroxyapatite to control oral microorganisms, since Brazilian red propolis has been tested for its antimicrobial activity on oral bacteria, with good in vitro and in vivo results, which lends credibility to the clinical use of the drug. No patents were found for dentifrices with Brazilian red propolis, nor associated with remineralizing substances such as fluoride and hydroxyapatite.

[0020] Dantas-Lobo et al.,(2016) depositaram um pedido de patente (número BR 10 2016 019014 2 A2) sobre o desenvolvimento de verniz dentário de própolis vermelha para controle de cárie dentária, e o mesmo se caracterizou por possuir fácil aplicação clínica, uma boa adesão à superfície dentária em crianças, não apresentando contraindicação. A própolis vermelha tem sido testada quanto à sua atividade antimicrobiana sobre as bactérias orais, com bons resultados in vitro e in vivo o que concede credibilidade ao uso clínico do medicamento.[0020] Dantas-Lobo et al.,(2016) deposited a patent application (number BR 10 2016 019014 2 A2) on the development of red propolis dental varnish to control dental caries, and it was characterized by having easy clinical application, good adhesion to the dental surface in children, with no contraindication. Red propolis has been tested for its antimicrobial activity on oral bacteria, with good in vitro and in vivo results, which lends credibility to the clinical use of the drug.

[0021] Já com relação a tratamentos para hipersensibilidade da dentina, também foram depositadas algumas patentes tanto internacionais quanto nacionais que estão descritas abaixo.[0021] With regard to treatments for dentine hypersensitivity, some international and national patents have also been deposited, which are described below.

[0022] Strand et al.,(2013) depositaram pedido de patente (número BR 11 2016 010708 0 A2) intitulada por regime para controlar ou reduzir a hipersensibilidade da dentina onde a referida invenção mostra um método de tratamento de uma superfície dental para controlar ou reduzir a hipersensibilidade da dentina, compreendendo as etapas: (a) contato da superfície dental com uma primeira composição compreendendo um organofosfato; e, em seguida, (b) contato da superfície dental com uma segunda composição compreendendo um fosfato de cálcio insolúvel em água.[0022] Strand et al., (2013) filed a patent application (number BR 11 2016 010708 0 A2) entitled by regimen to control or reduce dentin hypersensitivity where said invention shows a method of treating a dental surface to control or reducing dentin hypersensitivity, comprising the steps: (a) contacting the tooth surface with a first composition comprising an organophosphate; and then (b) contacting the tooth surface with a second composition comprising a water-insoluble calcium phosphate.

[0023] Charles Richard Parkinson (2010) depositou uma patente (número BR 11 2012 014354 9 A2) denominada por composição para cuidado oral, processo para a preparação de uma composição para cuidado oral, e, método para o tratamento de hipersensibilidade de dentina onde a invenção se refere a composições para cuidado oral que compreendem certos alginatos para o tratamento de hipersensibilidade de dentina e a seu uso.[0023] Charles Richard Parkinson (2010) filed a patent (number BR 11 2012 014354 9 A2) named for oral care composition, process for preparing an oral care composition, and method for treating dentin hypersensitivity where The invention relates to oral care compositions comprising certain alginates for the treatment of dentin hypersensitivity and their use.

[0024] Em 2014 a patente de uma composição contra a hipersensibilidade foi concedida a Joziak et al., intitulada por "Composição dentária, e, método para eliminar ou reduzir o desconforto e a dor associados com a hipersensibilidade dentinária". Uma composição dentária que elimina ou substancialmente reduz o desconforto e a dor associados com a hipersensibilidade dentinária e exibe benefícios anticáries e de remineralização melhorados, composição esta que contém um sal remível de um íon fluoreto e de um íon potássio e tem um pH na faixa de cerca de 8 a cerca de 9,9, o pH sendo tamponado com sal de fosfato.[0024] In 2014 a patent for a composition against hypersensitivity was granted to Joziak et al., entitled "Dental composition, and method for eliminating or reducing discomfort and pain associated with dentin hypersensitivity". A dental composition that eliminates or substantially reduces the discomfort and pain associated with dentin hypersensitivity and exhibits improved anticaries and remineralization benefits, which composition contains a redeemable salt of a fluoride ion and a potassium ion and has a pH in the range of about 8 to about 9.9, the pH being buffered with the phosphate salt.

[0025] Em 2000, Gambogi et al., depositaram uma patente “composição dental de dois componentes, e, processo para eliminar ou reduzir o desconforto e a dor associados com a hipersensibilidade da dentina”, composição essa que compreende um primeiro componente de dentifrício tendo um pH alcalino, um segundo componente de dentifrício tendo um pH ácido, e pelo menos um dos componentes contendo um composto liberador de íon potássio, o primeiro e o segundo componentes sendo mantidos separados um do outro até que dispensados e combinados para aplicação aos dentes necessitando de alívio da hipersensibilidade da dentina, por meio de que maior dessensibilização experimentada pelo usuário. Esses se tratam de dentifrícios que os resultados são a longo prazo.[0025] In 2000, Gambogi et al., deposited a patent “two-component dental composition, and, process to eliminate or reduce the discomfort and pain associated with dentin hypersensitivity”, which composition comprises a first component of dentifrice having an alkaline pH, a second dentifrice component having an acidic pH, and at least one of the components containing a potassium ion releasing compound, the first and second components being kept separate from each other until dispensed and combined for application to the teeth needing relief from dentin hypersensitivity, whereby greater desensitization experienced by the user. These are dentifrices that the results are in the long term.

Brief description of the drawings

[0026] O pedido de patente aqui descrito possui 3 figuras:
A Figura 1 mostra que ocorre diferença da viabilidade celular em fibroblastos.
A Figura 2 mostra o método da análise química do Gel Dentário à base de própolis vermelha brasileira para o tratamento da hipersensibilidade dentinária.
A figura 3 mostra os estágios do estudo clínico através da relação entre o tempo de aplicação e o gel utilizado.[0026] The patent application described here has 3 figures:
Figure 1 shows that there is a difference in cell viability in fibroblasts.
Figure 2 shows the method of chemical analysis of the Dental Gel based on Brazilian red propolis for the treatment of dentin hypersensitivity.
Figure 3 shows the stages of the clinical study through the relationship between the application time and the gel used.

Description of the invention

[0027] A presente invenção compreende, inicialmente, etapas de preparação das formulações dispostas, conforme descritas a seguir:[0027] The present invention initially comprises steps for preparing the formulations arranged, as described below:

I- Stages of preparation

[0028] A amostra da própolis vermelha brasileira bruta usada no preparo do gel dentário foi comprada na Associação Comunitária Rural Riacho dos Currais na Paraíba. Os géis testados foram divididos em 02 categorias: 1) Formulação de um gel Dentário à base de própolis vermelha brasileira para o tratamento da hipersensibilidade dentinária, preparado de acordo com um planejamento experimental de metodologia apresentada a seguir. 2) Formulação comercial: Oxa-gel®, para efeito comparativo.[0028] The sample of raw Brazilian red propolis used in the preparation of the dental gel was purchased from the Associação Comunitária Rural Riacho dos Currais in Paraíba. The tested gels were divided into 02 categories: 1) Formulation of a Dental gel based on Brazilian red propolis for the treatment of dentin hypersensitivity, prepared according to an experimental planning methodology presented below. 2) Commercial formulation: Oxa-gel®, for comparative purposes.

II- Methodology

[0029] A partir do extrato seco da própolis vermelha brasileira, foi preparado um extrato alcoólico na concentração entre 9% a 12% em temperatura ambiente (já que a própolis é insolúvel em água). A esse extrato foi adicionado petrolato de polietileno (qsp) para dar a consistência de um gel.[0029] From the dry extract of Brazilian red propolis, an alcoholic extract was prepared at a concentration between 9% and 12% at room temperature (since propolis is insoluble in water). Polyethylene petrolatum (qsp) was added to this extract to give the consistency of a gel.

III - In vitro cytotoxicity analysis

[0030] A análise de citotoxicidade “in vitro” do Gel Dentário à base de própolis vermelha brasileira para o tratamento da hipersensibilidade dentinária foi realizado através do ensaio de viabilidade celular (MTT). O brometo de 3-(4,5-dimetiltiazol-2)-2,5-difeniltetrazólio é reduzido por células metabolicamente ativas, em parte pela ação das enzimas desidrogenases mitocondriais para gerar equivalentes redutores tais como NADH (Nicotinamida Adenina Dinucleotídeo) e NADPH (Fosfato de dinucleótido de nicotinamida e adenina), levando à formação intracelular do sal de formazan, proporcional ao número de células funcionais. Fibroblastos NIH/3T3 (32a passagem) foram plaqueados em triplicata na quantidade de 6x103 células por poço, em placas de 96 poços, sendo incubados com meio de cultivo completo (DME+15% de soro fetal bovino), com adição da própolis vermelha. As culturas foram mantidas sob atmosfera úmida a 37°C contendo 5% de CO2 durante 48h. Como controle positivo, foi utilizado meio de cultivo completo e fibroblastos NIH/3T3 (1x103 células por poço); para o controle negativo, foi utilizado adição de DMSO 50% (dimetilsulfóxido) ao meio de cultivo completo. Após 24h e 48h, foi adicionado 180 μL de meio DME sem vermelho de fenol e 20 μL de MTT 0,5% em DMPBS (5 mg/mL), seguindo para incubação por 3h protegido da luz, em estufa a 37°C contendo 5% de CO2. Após a retirada do MTT, foram adicionados 200 μl de DMSO para dissolver os cristais de formazan formados. A absorbância em cada poço foi medida a 540 nm em leitor de microplacas. Para a análise da proliferação celular, os valores de absorbância menores que as do controle positivo indicaram uma redução da taxa de proliferação celular. Para o cálculo da viabilidade celular, foi utilizada a seguinte fórmula: VIABILIDADE CELULAR (%) = (Absorbância da amostra / Absorbância do controle positivo) x 100 (Mohammadi et al., 2015, Krishnan et al., 2014, Qiao et al., 2014).[0030] The "in vitro" cytotoxicity analysis of the Dental Gel based on Brazilian red propolis for the treatment of dentin hypersensitivity was carried out using the cell viability assay (MTT). 3-(4,5-Dimethylthiazol-2)-2,5-diphenyltetrazolium bromide is reduced by metabolically active cells, in part by the action of mitochondrial dehydrogenase enzymes to generate reducing equivalents such as NADH (Nicotinamide Adenine Dinucleotide) and NADPH ( Nicotinamide adenine dinucleotide phosphate), leading to intracellular formation of formazan salt, proportional to the number of functional cells. NIH/3T3 fibroblasts (32nd passage) were plated in triplicate in the amount of 6x103 cells per well, in 96-well plates, being incubated with complete culture medium (DME+15% fetal bovine serum), with the addition of red propolis. Cultures were maintained under a humid atmosphere at 37°C containing 5% CO2 for 48 hours. As a positive control, complete culture medium and NIH/3T3 fibroblasts (1x103 cells per well) were used; for the negative control, DMSO 50% (dimethylsulfoxide) was added to the complete culture medium. After 24h and 48h, 180 μL of DME medium without phenol red and 20 μL of 0.5% MTT in DMPBS (5 mg/mL) were added, followed by incubation for 3 hours protected from light, in an oven at 37°C containing 5% CO2. After withdrawing the MTT, 200 μl of DMSO were added to dissolve the formed formazan crystals. The absorbance in each well was measured at 540 nm in a microplate reader. For the analysis of cell proliferation, absorbance values lower than those of the positive control indicated a reduction in the rate of cell proliferation. To calculate cell viability, the following formula was used: CELL VIABILITY (%) = (Sample absorbance / Positive control absorbance) x 100 (Mohammadi et al., 2015, Krishnan et al., 2014, Qiao et al. , 2014).

[0031] A Figura 1 mostra que foi possível observar que houve diferença da viabilidade celular em fibroblastos NIH 3T3, sendo que o gel de própolis vermelha brasileira apresentou a melhor viabilidade celular (55,61 % no tempo de 24 horas e 43,96% a 48h) enquanto que o gel Oxa-gel ® mostrou a menor viabilidade celular (15,72% a 24horas e 15,37% a 48 horas).[0031] Figure 1 shows that it was possible to observe that there was a difference in cell viability in NIH 3T3 fibroblasts, and the Brazilian red propolis gel showed the best cell viability (55.61% at 24 hours and 43.96% at 48h) while the Oxa-gel ® gel showed the lowest cell viability (15.72% at 24h and 15.37% at 48h).

IV - Chemical analysis

[0032] A Figura 2 mostra o método da análise química do Gel Dentário à base de própolis vermelha brasileira para o tratamento da hipersensibilidade dentinária foi feita de acordo com o método modificado descrito por Markham et al. (1996) e Proestos et al. (2006). Os constituintes químicos presentes na própolis vermelha brasileira (EPVB e fração bioativa) foram identificados usando um cromatógrafo a gás CG 2010 (Shimadzu Co.) acoplado a um espectrômetro QP 2010 Plus (Shimadzu Co.). Foram adicionados, aproximadamente, 5 mg de extrato / fração de própolis liofilizada 100 mL de reagente de derivação N-metil-N- (trimetilsilil) -acetamida trifluor (MSTFA). A mistura foi homogeneizada e aquecida a 70°C por 10 min. O reagente foi evaporado sob fluxo de gás nitrogênio e produto de derivatização (derivados trimetilsilil - TMS) que foi diluído, novamente, em hexano (600 a 800 mL). Após a homogeneização, o sobrenadante foi transferido para outro frasco que seguiu a injeção em CG/EM. As amostras foram separadas em um coluna capilar a uma temperatura inicial de 80°C (1 min), a taxa de aquecimento de 20°C / min atingindo 250°C (1 min), depois 300°C (5 min) a uma taxa de 6°C /min, até 310°C (5 min)a uma taxa de 15°C/min, até 320°C(10 min) a uma taxa de 20°C por minuto. O tempo total de análise foi de 55/min. O hélio foi usado como gás de arraste. A temperatura do injetor era de 280°C e o volume da injeção de 0,5 mL no modo sem divisão. A interface foi mantida em 280°C e o detector foi operado em varredura (m/z40—800). A integração foi realizada usando o LabSolutions-Software GC-MS. Flavonóides, ácidos fenólicos e derivados foram identificados por comparação com os dados obtidos do CG-EM (tempo de retenção e fragmentação de íons) de silano e autênticos eluídos nas mesmas condições, e também usando a biblioteca equipamento (Willey-138 e Nist-98).[0032] Figure 2 shows the method of chemical analysis of the Dental Gel based on Brazilian red propolis for the treatment of dentin hypersensitivity was carried out according to the modified method described by Markham et al. (1996) and Proestos et al. (2006). The chemical constituents present in Brazilian red propolis (EPVB and bioactive fraction) were identified using a CG 2010 gas chromatograph (Shimadzu Co.) coupled to a QP 2010 Plus spectrometer (Shimadzu Co.). Approximately 5 mg of extract / fraction of lyophilized propolis and 100 mL of derivation reagent N-methyl-N-(trimethylsilyl)-acetamide trifluor (MSTFA). The mixture was homogenized and heated at 70°C for 10 min. The reagent was evaporated under nitrogen gas flow and derivatization product (trimethylsilyl derivatives - TMS) which was diluted, again, in hexane (600 to 800 mL). After homogenization, the supernatant was transferred to another vial that followed the GC/MS injection. The samples were separated in a capillary column at an initial temperature of 80°C (1 min), the heating rate of 20°C / min reaching 250°C (1 min), then 300°C (5 min) at a rate of 6°C/min, up to 310°C (5 min)at a rate of 15°C/min, up to 320°C(10 min) at a rate of 20°C per minute. The total analysis time was 55/min. Helium was used as carrier gas. Injector temperature was 280°C and injection volume 0.5 mL in splitless mode. The interface was maintained at 280°C and the detector was operated in scan (m/z40—800). Integration was performed using LabSolutions-Software GC-MS. Flavonoids, phenolic acids and derivatives were identified by comparison with data obtained from GC-MS (retention time and ion fragmentation) of silane and authentic eluates under the same conditions, and also using library equipment (Willey-138 and Nist-98 ).

Examples of embodiments of the invention V- Clinical study

[0033] Foi realizado ensaio clínico duplo-cego, controlado e randomizado (a mesma variável foi medida antes e após do tratamento nos mesmos indivíduos). O presente estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa em Seres Humanos sob número CAAE 82375917.2.0000.5385 da UNIARARAS - Fundação Hermínio Ometto.[0033] A double-blind, controlled, randomized clinical trial was performed (the same variable was measured before and after treatment in the same subjects). The present study was approved by the Human Research Ethics Committee under number CAAE 82375917.2.0000.5385 of UNIARARAS - Fundação Hermínio Ometto.

[0034] A amostra foi dimensionada com a realização de cálculo amostral levando-se em consideração os resultados encontrados na literatura (Brahmbhatt et al., 2012; Samuel et al., 2015), nível de significância de 0,05, poder do teste de 0,80, chegando-se a um tamanho mínimo de 32 voluntários, porém a amostra final foi composta por 43 voluntários que receberam três tratamentos distintos para hipersensibilidade dentinária. As análises foram realizadas nos programas Gpower (Faul et al., 2007) e SAS (2010).[0034] The sample was sized by performing a sample calculation taking into account the results found in the literature (Brahmbhatt et al., 2012; Samuel et al., 2015), significance level of 0.05, test power of 0.80, reaching a minimum size of 32 volunteers, but the final sample consisted of 43 volunteers who received three different treatments for dentin hypersensitivity. The analyzes were performed using the Gpower (Faul et al., 2007) and SAS (2010) programs.

[0035] Foram incluídos nesse estudo pacientes na faixa etária de 18 a 35 anos, gozando de boa saúde sistêmica e que possuíam pelo menos três elementos dentários diagnosticados com hipersensibilidade dentinária e que ainda apresentassem relato de sintomatologia dolorosa na escala VAS (visual analog scale) com score >5 (presença de dor espontânea relatada pelo paciente). Quando o paciente possuía vários elementos com sensibilidade por hemiarco, foi selecionado o elemento em que o relato da sensação dolorosa apresentou o maior escore. Foram excluídos pacientes portadores de doença sistêmica crônica; mulheres grávidas e lactantes; pessoas que faziam uso de fármacos analgésicos; indivíduos com histórico de tratamento pregresso à dessensibilizantes por até três meses antes desse estudo; pacientes portadores de doença periodontal ativa; indivíduos que possuíam elementos dentários com pulpite, lesão de cárie ativa, restaurações defeituosas, trincas, rachaduras de esmalte e aqueles que tivessem elementos dentários pilares de próteses removíveis. Todos os participantes foram instruídos pelo profissional sobre higiene e cuidados de escovação e também receberam kits padronizados de higiene oral contendo escova Colgate® Twister (São Bernardo do Campo, São Paulo, Brasil) cabeça compacta e creme dental Condor® sem flúor (para crianças entre 0-2 anos) (São Bento do Sul, Santa Catarina, Brasil).[0035] This study included patients aged 18 to 35 years, enjoying good systemic health and who had at least three dental elements diagnosed with dentin hypersensitivity and who still reported painful symptoms on the VAS scale (visual analog scale) with a score >5 (presence of spontaneous pain reported by the patient). When the patient had several elements with sensitivity per hemiarch, the element in which the report of painful sensation had the highest score was selected. Patients with chronic systemic disease were excluded; pregnant and lactating women; people who used analgesic drugs; individuals with a history of previous treatment with desensitizers for up to three months prior to this study; patients with active periodontal disease; individuals who had dental elements with pulpitis, active carious lesions, defective restorations, cracks, enamel cracks and those who had dental elements pillars of removable prostheses. All participants were instructed by the professional about hygiene and brushing care and also received standardized oral hygiene kits containing Colgate® Twister brush (São Bernardo do Campo, São Paulo, Brazil) compact head and fluoride-free Condor® toothpaste (for children between 0-2 years) (São Bento do Sul, Santa Catarina, Brazil).

[0036] Previamente à execução da dessensibilização foi feita uma profilaxia com pedra pomes. Realizou-se um isolamento relativo com rolinho de algodão e sugador e em seguida os voluntários selecionados receberam os seguintes tratamentos em géis: Gel Dentário à base de própolis vermelha brasileira para o tratamento da hipersensibilidade dentinária e o Oxa-gel®.[0036] Prior to carrying out the desensitization, a prophylaxis with pumice stone was performed. Relative isolation was performed with a cotton roll and suction cup, and then the selected volunteers received the following treatments in gels: Dental Gel based on Brazilian red propolis for the treatment of dentin hypersensitivity and Oxa-gel®.

[0037] A hipersensibilidade dentinária foi avaliada antes e após a aplicação das formulações por meio de escala ordinal (nenhuma dor = 0 e pior dor = 10) (Quadros 4 e 5). Os voluntários foram submetidos a 4 aplicações de cada gel randomizadas inicialmente, com intervalo de 7 dias a cada aplicação, sendo que cada elemento dentário recebia o mesmo dessensibilizante, sorteado previamente. Cada produto foi aplicado e aguardava-se 2 min., para que o efeito dessensibilizante pudesse ser quantificado. Após a aplicação dos dessensibilizantes foi realizado o primeiro teste para avaliar a sensação dolorosa com um jato de ar, a qual foi medida pela escala visual analógica (VAS). Em seguida, o investigador aplicou um estímulo táctil, passando uma sonda exploradora no 05 suavemente, através das áreas dos dentes avaliados e com aplicação prévia dos dessensibilizantes, em sentido vertical e horizontal. Então, os pacientes eram solicitados a pontuar a sensação dolorosa novamente por meio de escala VAS que consiste em uma linha horizontal de 100 mm, com a classificação sem dor e dor máxima nas duas extremidades. Os pacientes foram instruídos a marcar uma linha vertical ao longo da VAS, que melhor representa a intensidade da dor. Os participantes foram orientados a passar 30 minutos sem ingerir alimentos sólidos e/ou líquidos (inclusive água) e o mesmo tempo sem realizar qualquer tipo de higiene oral.[0037] Dentin hypersensitivity was assessed before and after application of the formulations using an ordinal scale (no pain = 0 and worst pain = 10) (Tables 4 and 5). Volunteers were submitted to 4 applications of each randomized gel initially, with an interval of 7 days between each application, and each dental element received the same desensitizer, drawn in advance. Each product was applied and 2 minutes were waited so that the desensitizing effect could be quantified. After the application of the desensitizers, the first test was performed to assess the painful sensation with an air jet, which was measured by the visual analogue scale (VAS). Then, the investigator applied a tactile stimulus, passing an exploratory probe at 05 gently, through the areas of the evaluated teeth and with previous application of the desensitizers, in vertical and horizontal directions. Then, the patients were asked to score the painful sensation again using the VAS scale, which consists of a 100 mm horizontal line, with the classification of no pain and maximum pain in both extremities. Patients were instructed to mark a vertical line along the VAS that best represents pain intensity. Participants were instructed to spend 30 minutes without ingesting solid foods and/or liquids (including water) and the same time without performing any type of oral hygiene.

[0038] A figura 3 mostra que ao início do estudo clínico pode-se observar, na primeira consulta, antes da aplicação de qualquer gel dessensibilizante, que não havia diferença significativa em relação ao relato de dor entre os dentes avaliados (p>0,05). O alívio imediato da sensação dolorosa de hipersensibilidade foi evidenciado dentre os participantes que receberam a aplicação do gel de PV10% (própolis vermelha a 10%). Ainda foi observado que a sensação dolorosa com o referido gel foi significativamente menor que o relato de dor evidenciado pelos pacientes que receberam o gel Ox (Oxalato - monopotassio-monohidrogenado ) e OxPV10% (Oxalato -monopotassiomonohidrogenado a própolis vermelha a 10%). Foi observada a diminuição progressiva do relato de dor após a aplicação de todos os géis, da primeira a terceira consulta (p0,05), ou seja, para todas as substâncias avaliadas notou-se diminuição significativa da dor no transcorrer do tempo até a terceira semana de aplicação (p<0,05).[0038] Figure 3 shows that at the beginning of the clinical study it can be observed, in the first consultation, before the application of any desensitizing gel, that there was no significant difference in relation to the report of pain between the evaluated teeth (p>0, 05). Immediate relief from the painful sensation of hypersensitivity was evidenced among the participants who received the application of the PV10% gel (10% red propolis). It was also observed that the painful sensation with the referred gel was significantly lower than the pain reported by the patients who received the Ox gel (Oxalate - monopotassium-monohydrogenated) and OxPV10% (Oxalate -monopotassium-monohydrogenated to 10% red propolis). A progressive decrease in pain reports was observed after the application of all gels, from the first to the third visit (p0.05), that is, for all evaluated substances, a significant decrease in pain was observed over time until the third visit. week of application (p<0.05).

Claims

PHARMACEUTICAL COMPOSITION FOR USE IN THE TREATMENT OF DENTINARY HYPERSENSITIVITY, characterized by containing Brazilian red propolis extract in gel texture in alcoholic extract.

PHARMACEUTICAL COMPOSITION, according to claim 1, characterized in that a gel was prepared in alcoholic extract of red propolis at a concentration ranging from 9% to 12%.

PHARMACEUTICAL COMPOSITION, according to claim 1, characterized in that it also contains polyethylene petrolatum (qsp).

APPLICATION PROCESS OF THE PHARMACEUTICAL COMPOSITION FOR USE IN THE TREATMENT OF DENTINARY HYPERSENSITIVITY, characterized by containing red propolis extract in a concentration that varies from 9% to 12% in gel texture in alcoholic extract and polyethylene petrolatum (qsp), being carried out, to the aforementioned Gel, 4 applications on the tooth that vary from 2 to 3 minutes and with an interval of 7 days between them.