BR102016011810A2 - Composition for the modulation of genes responsible for general skin functions, method for modulating expression of genes responsible for general skin functions and use of jatobá xyloglucan and a sodium cocoil amino acids and sarcosin and potassium aspartate and magnesium aspartate mix - Google Patents
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Abstract
a presente invenção refere-se a composições para a modulação de genes responsáveis pelas funções gerais da pele compreendendo xiloglucano de jatobá, uma mistura de sódio cocoil aminoácidos e sarcosina e aspartato de potássio e aspartato de magnésio e veículo cosmeticamente aceitável, bem como de um método para a modulação da expressão de genes responsáveis pelas funções gerais da pele e uso de xiloglucano de jatobá, uma mistura de sódio cocoil aminoácidos e sarcosina e aspartato de potássio e aspartato de magnésio na preparação de uma composição para a modulação de genes responsáveis pelas funções gerais da pele.
Description
COMPOSIÇÃO PARA A MODULAÇÃO DE GENES RESPONSÁVEIS PELAS FUNÇÕES GERAIS DA PELE, MÉTODO PARA A MODULAÇÃO DA EXPRESSÃO DE GENES RESPONSÁVEIS PELAS FUNÇÕES GERAIS DA PELE E USO DE XILOGLUCANO DE JATOBÁ E UMA MISTURA DE SÓDIO COCOIL AMINOÁCIDOS E SARCOSINA E ASPARTATO DE POTÁSSIO E ASPARTATO DE MAGNÉSIO CAMPO DA INVENÇÃO
[1] A presente invenção refere-se a composições para a modulação de genes responsáveis pelas funções gerais da pele compreendendo xiloglucano de jatobá, uma mistura de sódio cocoil aminoácidos e sarcosina e aspartato de potássio e aspartato de magnésio e veiculo cosmeticamente aceitável, bem como de um método para a modulação da expressão de genes responsáveis pelas funções gerais da pele e uso de xiloglucano de jatobá, uma mistura de sódio cocoil aminoácidos e sarcosina e aspartato de potássio e aspartato de magnésio na preparação de uma composição para a modulação de genes responsáveis pelas funções gerais da pele.
FUNDAMENTO DA INVENÇÃO
[2] Considerada o maior órgão do corpo humano, a pele é sede de muitos processos complexos e dinâmicos. Entre esses processos estão funções de barreira e imunológicas, produção de melanina, síntese de vitamina D, sensações, regulação térmica, proteção contra lesões por radiação ultravioleta e estética.
[3] 0 bom funcionamento das funções gerais da pele pode ser associado a um grupo de genes que, uma vez modulados, pode ser estratégia interessante para o desenvolvimento de produtos com finalidade cosmética.
[4] Entretanto, há um número limitado de compostos que efetivamente atuem na modulação de genes associados às funções gerais da pele.
[5] Portanto existe a necessidade de uma composição que atue na modulação de tais genes, fornecendo um tratamento efetivo para cuidado da pele.
BREVE DESCRIÇÃO DAS FIGURAS
[6] As figuras 1 e 2 apresentam da proteína colágeno relativo à amostra controle não tratada, dado em medidas de fluorescência e porcentagem.
[7] As figuras 3 e 4 apresentam aumento da proteína elastina relativo à amostra controle não tratada, dado em medidas de fluorescência e porcentagem.
[8] As figuras 5 e 6 apresentam aumento da proteína ácido hialurônico relativo à amostra controle não tratada, dado em medidas de fluorescência e porcentagem. DESCRIÇÃO DA INVENÇÃO
[9] A presente invenção trata de uma composição para a modulação de genes responsáveis pelas funções gerais da pele compreendendo xiloglucano de jatobá, uma mistura de sódio cocoil aminoácidos e sarcosina e aspartato de potássio e aspartato de magnésio e veículo cosmeticamente aceitável.
[10] Xiloglucano é um princípio ativo presente na Hymenaea courbaril, também conhecida como jatobá.
[11] A mistura de sódio cocoil aminoácidos e sarcosina e aspartato de potássio e aspartato de magnésio é comercializada como Seppicalm por Seppic.
[12] De maneira individualizada, os efeitos terapêuticos e cosméticos de ambos componentes têm sido estudados.
[13] Entretanto, de maneira surpreendente, a Depositante verificou que, de maneira combinada, em uma composição, xiloglucano de jatobá, uma mistura de sódio cocoil aminoácidos e sarcosina e aspartato de potássio e aspartato de magnésio apresentam efeito na modulação de genes responsáveis pelas funções gerais da pele.
[14] Tais genes incluem pelo menos um dos genes CAT, GPX1, MSRA, N0X1, PRDX6, S0D2, DSC2, IGFlR, ITGAl, ITGBl, LAMBÍ, LAMB3, DEFB4A, CDHl, CAMP, CLDNl, CLDN4, CLDN7, CDSN, DSG4, DSP, EL0VL3, GBA, ITGA6, ITGB4, KRT19, KRT10, KRT14, KRT16, KRT17, KRTl, KRT6A, OR2AT4, LAMA5, OCLN, PKP1, PLEC, TGM5, TGMl, RNASE7, SMPDl, SDC1, TJPl, VCL, BTC, FLTl, PDGFRA, HAS1, HAS2, SIRTl, SRD5A1, PRLR, HSD17B2, TPHl, AANAT, ASMT, MTNRlA, AR, ESR2, CYP19A1, HTR2A, HTR2B, MTOR, AQP3, CTSB, CTSE, CTSL, CD44, HAL, PADI3, PADIl, CASP14, FLG, ST14, IL13, IL18, IL19, ITGA2, IL1A, ILlB, IL22, IL17A, ILlRl, IL10, IL6, F2RL1, TRPVl, CALCA, ACACA, ASAHl, UGCG, SPTLC1, SREBF2, GLBl, ADAM9, MMPl, MMP10, MMP2, MMP3, MMP9, SERPINEl, TIMPl, TIMP2, TMPRSS6, FBLN5, FBNl, MMP12, MMP13, MMP14, TYR, GPNMB, MAP1LC3B, POMC, OPRMl, MC1R, MITF, CANX, HSPBl, HSPAlA, EGFR, TGFBl, TGFBRl, NGF, PDGFA, VEGFA, VEGFB, FGFR1, FGFR2, FGFl, FGF2, MMP11, HYALl, HYAL2, ELN, LOX, COLlAl, COL1A2, AC02, ANXA5.
[15] De maneira ainda mais surpreendente, a Depositante verificou que, em quantidades cerca de 0,25% de xiloglucano de jatobá e cerca de 1,5% de uma mistura de sódio cocoil aminoácidos e sarcosina e aspartato de potássio e aspartato de magnésio, há modulação sinérgica em tais genes, particularmente na modulação da expressão de colágeno, da proteína elastina e/ou da expressão da proteína ácido hialurônico, propiciando seu uso em aplicações cosméticas na pele em geral.
[16] A presente invenção também está relacionada a um método para a modulação da expressão de tais genes responsáveis pelas funções gerais da pele, o qual compreende a etapa de administrar uma composição de acordo com a presente invenção, bem como uso de xiloglucano de jatobá e uma mistura de sódio cocoil aminoácidos e sarcosina e aspartato de potássio e aspartato de magnésio na preparação de uma composição para a modulação de genes responsáveis pelas funções gerais da pele.
[17] Os genes de acordo com a presente invenção e sua correlação com as funções gerais da pele estão definidos na tabela a seguir.
Tabela 1. Definição de genes e correlação com a função geral da pele.
[18] Os veículos cosmeticamente aceitáveis de acordo com a presente invenção incluem, sem qualquer limitação, aqueles conhecidos da técnica.
[19] Os exemplos a seguir, sem impor qualquer limitação, ilustram a presente invenção, particularmente no que diz respeito aos efeitos na modulação de genes associados às funções gerais da pele.
EXEMPLOS
Exemplo 1. Ensaio de atividade molecular [20] Foi realizado ensaio em larga escala do perfil de expressão gênica (por PCR array) de 180 genes em explantes de pele obtidas após cirurgia de blefaroplastia e submetidos a tratamentos independentes com a presente invenção.
[21] Inicialmente, foram obtidos explantes de pele de pálpebras de mulheres com idades entre 45 e 55 anos, sendo 3 doadores diferentes para cada. Os explantes foram divididos em duas porções e inseridos, em triplicata de cada doador, imediatamente em meio de cultura e mantidos por 24 horas (porção 1) e 72 horas (porção 2) em atmosfera úmida, 37°C, C02 5%. Durante esse período, os explantes foram submetidos aos tratamentos com 2mg/cm2 de cada amostra aplicados topicamente sobre os explantes, sem qualquer diluição. Além disso, uma condição controle foi realizada pela manutenção dos explantes, em triplicata de cada doador, em meio de cultura somente. Uma análise de viabilidade prévia foi realizada para garantir a integridade dos tecidos durante todo o protocolo do estudo para todas as fórmulas investigadas.
[22] A porção (1) foi coletada e submetida à extração de RNA total. A qualidade do RNA extraído foi validada qualitativa (Bioanalyzer microcapillary electrophoresis) e quantitativamente (Nanodrop spectrophotometer) . A partir do RNA, foi confeccionado o cDNA e este foi submetido à etapa de RT-PCR (Polymerase-Chain Reaction) em tempo real para avaliação da expressão de 180 genes utilizando a plataforma customizada Taqman PCR Array (ThermoFisher). Os genes testados foram aqueles listados na tabela 1 com o auxílio do equipamento StepOne Plus (Life Technologies). O perfil de expressão gênica e seleção dos genes diferencialmente expressos foram realizados com o auxílio do Expression Suite Software v.1.0.3 (Life Technologies). Os valores de ACt para o gene referência GAPDH (glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase) e o gene alvo foram calculados pela subtração dos valores dos grupos experimentais. Posteriormente, o ACt do grupo experimental foi subtraído do grupo controle (explante de pele sem tratamento) para a obtenção do AACt. Por fim, a quantificação relativa dos genes alvos foi determinada pela equação: RQ = 2-AACt. Foram selecionados apenas os genes que apresentaram um threshold de 1,3, ou seja, 30% de aumento ou redução em relação ao controle. A significância estatística foi avaliada pelo teste-t acompanhado do método de Benjamini-Hochberg (FDR - false discovery rate), sendo que p-value < 0,05 foram considerados significantes. Os valores detectados como estatisticamente significantes foram carregados no software Ingenuity Pathway Analysis (IPA) (http://www.ingenuity.com) Para investigar as relações funcionais entre os genes identificados. Para cada via/rede estabelecida foi gerado um p-score [p-score = -loglO (p-value)] refletindo a probabilidade de esta rede ser gerada ao acaso e onde o p-value foi calculado pelo Fisher's exact test. Isso significa que se uma via tem um p-score de 10, a chance de esta rede ser gerada ao acaso é menos do que 1 em 1010. Esses resultados mostram os genes e funções moduladas pelas composições e métodos da presente invenção.
[23] A porção (2) foi coletada, fixadas em paraformaldeído 4% (pH 7,4) por 24 horas e crioprotegidas em solução de sacarose 30% por 48 horas. Em seguida, cortes seriados de 10 pm foram coletados diretamente em lâminas silanizadas com o auxílio de Criostato (Leica - CN1850). Ao término da coleta dos cortes, os mesmos foram submetidos a lavagens com PB 0,1 M e incubados overnight com anticorpos referentes a proteínas de interesse selecionadas. Em seguida, as lâminas foram analisadas em Microscópio de Fluorescência (Leica - DM 1000) com auxílio do Software LAS (Leica Application Suite). 0 parâmetro avaliado foi a intensidade de fluorescência emitida pela marcação com anticorpo especifico. Para análise estatística foi utilizada a análise de variância (ANOVA). Em todos os grupos estudados, foram considerados estatisticamente significativos aqueles cujos valores de P foram inferiores a 0,05.
[24] Foram investigados o controle não tratado, uma composição de base cosmética isenta de princípios ativos, uma composição de base cosmética idêntica incluindo 0,25% de xiloglucano de jatobá, uma composição de base cosmética idêntica incluindo 1,5% de Seppicalm e uma base cosmética idêntica incluindo 0,25% de xiloglucano de jatobá e 1,5% de Seppicalm.
[25] No que diz respeito à expressão gênica, em relação ao controle não tratado, observou-se que a amostra xiloglucano de jatobá foi capaz de modular 114 genes, a amostra Seppicalm foi capaz de modular 128 genes e a combinação de xiloglucano de jatobá e Seppicalm foi capaz de modular 153 genes. Os principais mecanismos identificados foram firmeza, estímulo de fibras elásticas, diferenciação celular, preenchimento, hidratação, anti-inflamatório, coesão dermo-epiderme e formação do envelope cornifiçado / reforço de barreira.
[26] No que diz respeito à expressão proteica, a combinação xiloglucano de jatobá e Seppicalm promoveu aumentos de 122,4% na expressão da proteína colágeno (Figuras 1 e 2), 37,2% na expressão da proteína elastina (Figuras 3 e 4) e de 25,3% na expressão da proteína ácido hialurônico (Figuras 5 e 6).
[27] O homem da técnica saberá prontamente avaliar, por meio dos ensinamentos contidos no texto e nos exemplos apresentados, vantagens da invenção e propor variações e alternativas equivalentes de realização, sem fugir ao escopo da invenção, conforme definido nas reivindicações anexas.
REIVINDICAÇÕES
Claims (8)
1. Composição para a modulação de genes responsáveis pelas funções gerais da pele caracterizada pelo fato de que compreende xiloglucano de jatobá, uma mistura de sódio cocoil aminoácidos e sarcosina e aspartato de potássio e aspartato de magnésio e veiculo cosmeticamente aceitável.
2. Composição, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de ser para modulação de pelo menos um dos genes CAT, GPXl, MSRA, N0X1, PRDX6, S0D2, DSC2, IGFlR, ITGAl, ITGBl, LAMBÍ, LAMB3, DEFB4A, CDHl, CAMP, CLDNl, CLDN4, CLDN7, CDSN, DSG4, DSP, EL0VL3, GBA, ITGA6, ITGB4, KRT19, KRT10, KRT14, KRT16, KRT17, KRTl, KRT6A, OR2AT4, LAMA5, OCLN, PKPl, PLEC, TGM5, TGMl, RNASE7, SMPDl, SDC1, TJP1, VCL, BTC, FLTl, PDGFRA, HAS1, HAS2, SIRTl, SRD5A1, PRLR, HSD17B2, TPHl, AANAT, ASMT, MTNRlA, AR, ESR2, CYP19A1, HTR2A, HTR2B, MTOR, AQP3, CTSB, CTSE, CTSL, CD44, HAL, PADI3, PADIl, CASP14, FLG, ST14, IL13, IL18, IL19, ITGA2, ILlA, ILlB, IL22, IL17A, ILlRl, IL10, IL6, F2RL1, TRPVl, CALCA, ACACA, ASAHl, UGCG, SPTLC1, SREBF2, GLBl, ADAM9, MMPl, MMP10, MMP2, MMP3, MMP9, SERPINEl, TIMPl, TIMP2, TMPRSS6, FBLN5, FBNl, MMP12, MMP13, MMP14, TYR, GPNMB, MAP1LC3B, POMC, OPRMl, MC1R, MITF, CANX, HSPBl, HSPAlA, EGFR, TGFBl, TGFBRl, NGF, PDGFA, VEGFA, VEGFB, FGFRl, FGFR2, FGFl, FGF2, MMPll, HYALl, HYAL2, ELN, LOX, COLlAl, C0L1A2, AC02, ANXA5.
3. Composição, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de compreender cerca de 0,25% de xiloglucano de jatobá e cerca de 1,5% de uma mistura de sódio cocoil aminoácidos e sarcosina e aspartato de potássio e aspartato de magnésio.
4. Composição, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de ser para modulação da expressão de colágeno, da proteína elastina e/ou da expressão da proteína ácido hialurônico.
5. Método para a modulação da expressão de genes responsáveis pelas funções gerais da pele caracterizado pelo fato de que compreende a etapa de administrar uma composição como definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 4 a um indivíduo.
6. Método, de acordo com a reivindicação 5, caracterizado pelo fato de ser para modulação de pelo menos um dos genes CAT, GPXl, MSRA, N0X1, PRDX6, S0D2, DSC2, IGF1R, ITGAl, ITGBl, LAMBÍ, LAMB3, DEFB4A, CDHl, CAMP, CLDN1, CLDN4, CLDN7, CDSN, DSG4, DSP, EL0VL3, GBA, ITGA6, ITGB4, KRT19, KRT10, KRT14, KRT16, KRT17, KRTl, KRT6A, OR2AT4, LAMA5, OCLN, PKPl, PLEC, TGM5, TGMl, RNASE7, SMPDl, SDC1, TJP1, VCL, BTC, FLTl, PDGFRA, HAS1, HAS2, SIRTl, SRD5A1, PRLR, HSD17B2, TPHl, AANAT, ASMT, MTNRlA, AR, ESR2, CYP19A1, HTR2A, HTR2B, MTOR, AQP3, CTSB, CTSE, CTSL, CD44, HAL, PADI3, PADIl, CASP14, FLG, ST14, IL13, IL18, IL19, ITGA2, ILlA, ILlB, IL22, IL17A, ILlRl, IL10, IL6, F2RL1, TRPVl, CALCA, ACACA, ASAHl, UGCG, SPTLC1, SREBF2, GLBl, ADAM9, MMPl, MMP10, MMP2, MMP3, MMP9, SERPINEl, TIMPl, TIMP2, TMPRSS6, FBLN5, FBNl, MMP12, MMP13, MMPl4, TYR, GPNMB, MAP1LC3B, POMC, OPRMl, MC1R, MITF, CANX, HSPBl, HSPAlA, EGFR, TGFBl, TGFBRl, NGF, PDGFA, VEGFA, VEGFB, FGFRl, FGFR2, FGFl, FGF2, MMPll, HYALl, HYAL2, ELN, LOX, COLlAl, C0L1A2, AC02, ANXA5.
7. Uso de xiloglucano de jatobá e uma mistura de sódio cocoil aminoácidos e sarcosina e aspartato de potássio e aspartato de magnésio caracterizado pelo fato de ser para a preparação de uma composição para a modulação de genes responsáveis pelas funções gerais da pele.
8. Uso, de acordo com a reivindicação 7, caracterizado pelo fato dos genes serem selecionados de pelo menos um dentre CAT, GPXl, MSRA, N0X1, PRDX6, S0D2, DSC2, IGFlR, ITGAl, ITGBl, LAMBÍ, LAMB3, DEFB4A, CDHl, CAMP, CLDNl, CLDN4, CLDN7, CDSN, DSG4, DSP, EL0VL3, GB A, ITGA6, ITGB4, KRT19, KRT10, KRT14, KRT16, KRT17, KRTl, KRT6A, OR2AT4, LAMA5, OCLN, PKPl, PLEC, TGM5, TGMl, RNASE7, SMPDl, SDC1, TJP1, VCL, BTC, FLTl, PDGFRA, HAS1, HAS2, SIRTl, SRD5A1, PRLR, HSD17B2, TPHl, AANAT, ASMT, MTNRlA, AR, ESR2, CYP19A1, HTR2A, HTR2B, MTOR, AQP3, CTSB, CTSE, CTSL, CD44, HAL, PADI3, PADIl, CASP14, FLG, ST14, IL13, IL18, IL19, ITGA2, ILlA, ILlB, IL22, IL17A, ILlRl, IL10, IL6, F2RL1, TRPVl, CALCA, ACACA, ASAHl, UGCG, SPTLC1, SREBF2, GLBl, ADAM9, MMPl, MMP10, MMP2, MMP3, MMP9, SERPINEl, TIMPl, TIMP2, TMPRSS6, FBLN5, FBNl, MMP12, MMP13, MMP14, TYR, GPNMB, MAP1LC3B, POMC, OPRMl, MC1R, MITF, CANX, HSPBl, HSPAlA, EGFR, TGFBl, TGFBRl, NGF, PDGFA, VEGFA, VEGFB, FGFRl, FGFR2, FGFl, FGF2, MMPll, HYALl, HYAL2, ELN, LOX, COLlAl, COL1A2, AC02, ANXA5.
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| CL2020002646A CL2020002646A1 (es) | 2016-05-24 | 2020-10-13 | Composición para modular genes responsables de las funciones generales de la piel, que comprende al menos un extracto vegetal seleccionado de casearia sylvestris y schinus terebinthfolius y ácido hialurónico (divisional de la solicitud 03354-2018) |
| CL2020002644A CL2020002644A1 (es) | 2016-05-24 | 2020-10-13 | Composición para modular genes responsables de las funciones generales de la piel, que comprende la combinación de un extracto de hymenaea courbaril y una mezcla de cocoilaminoácidos de sodio y sarcosina y aspartato de potasio y aspartato de magnesio (divisional de la solicitud 03354-2018) |
| CL2020002643A CL2020002643A1 (es) | 2016-05-24 | 2020-10-13 | Composición para modular genes responsables de las funciones generales de la piel, que comprende al menos un extracto vegetal seleccionado de hymenaea courbaril, paeonia albiflora, secale cereale y avena sativa (divisional de la solicitud 03354-2018) |
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