BR102012017421A2 - Peptídeo, composicão farmacêutica, ligante de receptor cb, metodo para modular a funcao de receptor cb, uso, método para o tratamento de obesidade, e, método para promover a redução de peso estetica em um indivíduo - Google Patents

Abstract

Peptídeo, composição farmacêutica de receptor cb, método para modular a função de receptor cb, uso, método para o tratamento de obesidade, e, método para promover a redução de peso estética e um indivíduo. A presente invenção revela um novo peptídeo não natural de sequência (seqid: 1) e seus derivados, consistindo de até 70% de similaridade ao dito peptídeo, que pdoe ser eficazmente utilziado no tratamento de doenças através da modulação da atividade de receptor canabinóide (cb)

Description

Relatório Descritivo de Patente de Invenção PEPTÍDEO, COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA, LIGANTE DE RECEPTOR CB, MÉTODO PARA MODULAR A FUNÇÃO DE RECEPTOR CB, USO, MÉTODO PARA O TRATAMENTO DE OBESIDADE, E, MÉTODO PARA PROMOVER A REDUÇÃO DE PESO ESTÉTICA EM UM INDIVÍDUO

Campo da Invenção A presente invenção descreve um novo peptídeo modificado, que atua como modulador da atividade de receptores canabinóides (CB), especialmente CB1 e CB2, suas formulações farmacêuticas, métodos associados e usos. A presente invenção se situa no campo de biomedicina.

Antecedentes da Invenção O sistema canabinóide, compreendido pelos receptores canabinóides (CB), constituído por seus receptores CB1 e CB2 e seus ligantes endógenos atuam no controle de ingestão de alimentos e no metabolismo de energia e é amplamente expresso no cérebro, incluindo córtex, hipocampos, amígdala, pituitário e hipotálamo. Adicionalmente, os receptores CB, particularmente CB1 já foram identificados em inúmeros órgãos periféricos e tecidos incluindo glândula tiroidal, glândula adrenal, órgãos reprodutivos, tecido adiposo, fígado, músculos e trato gastrointestinal.

Diversos compostos já foram detectados na técnica que conferem a atividade de modulação desse receptor e dentre eles o composto rimonabanto, fármaco que era utilizado para redução de peso e afinamento da cintura e que foi amplamente utilizado no mercado farmacêutico. Entretanto, esse composto foi subsequentemente detectado como promotor de doenças psiquiátricas em humanos, principalmente por conseguir atravessar a camada hematoencefálica, sendo assim subsequentemente removido do mercado mundial. A barreira hematoencefálica é uma barreira altamente seletiva que protege o cérebro pela prevenção da entrada de substâncias potencialmente prejudiciais ao sistema nervoso central pela circulação sistêmica. Assim, há uma necessidade na técnica de se obter novos compostos que consigam modular a atividade de receptores canabinóides, preferencialmente do receptor CB1 e/ou CB2, porém sem que haja uma passagem do mesmo pela camada hematoencefálica. A presente invenção descreve um novo peptídeo, não-natural, o qual apresenta resultados surpreendentes quanto a sua atividade, mais especialmente quanto ao seu uso e/ou sua atividade de modulação de receptores canabinóides. O peptídeo da presente invenção, adicionalmente, possui a vantagem de poder ser utilizado, entre outros usos como, por exemplo, para a redução da obesidade, possuindo ainda a vantagem adicional de não apresentar resultados indicando que o mesmo atravessa a barreira hematoencefálica.

Foram encontrados alguns documentos relacionados a presente invenção que serão descritos abaixo, sendo os mesmos colocados aqui unicamente com o objetivo de servir de base ao estado da técnica atual, uma vez que nenhum deles antecipa ou sugere o objeto da presente invenção. O documento US 2007/213302 apresenta novos compostos de interação com o receptor CB1 consistindo de pirazóis e seus sais farmaceuticamente aceitáveis que atuam como antagonistas ou agonistas inversos do receptor CB1. A presente invenção difere do referido documento, dentre outros motivos, por apresentar um peptídeo novo, não-natural, que não compreendem pirazóis ou seus sais, cujos resultados mostram-se surpreendentes, especialmente em relação a interação com receptores canabinóides, fato não descrito e nem citado no referido documento. O documento WO 2011/011847 revela o uso da hemopressina para o tratamento da obesidade em um indivíduo e é adicionalmente revelado que hemopressina não atravessa a camada hematoencefálica bem como é um composto que se liga eficazmente ao receptor CB1. A presente invenção difere desse documento, dentre outros motivos, por apresentar um peptídeo novo, não-natural, derivado de enzimas conversoras de angiotensina. Portanto, não é em nada semelhante a hemopressina, cujos resultados mostram-se surpreendentes, especialmente em relação a interação com receptores canabinóides, fato não descrito e nem citado no referido documento.

Alguns estudos apresentados em “Novel Natural Peptide Substrates for Endopeptidase 24.15 Neurolysin, and Angiotensin-converting Enzyme” {Vanessa Rioli, Fabio C. Gozzo, Andréa S. Heimann, Alessandra Linardi, Jose' E. Krieger, Cláudio S. Shida, Paulo C. Almeida, Stephen Hyslop, Marcos N. Eberlin, Emer S. Ferro; 7 de Março de 2003) demonstram uma técnica eficaz de “pescagem” de novos peptídeos as quais foram utilizadas na presente invenção para detecção de um novo peptídeo natural de sequencia para a regulação de proteínas específicas. Entretanto, nenhuma utilidade com relação ao sistema canabinóide foi encontrada com esse peptídeo. A presente invenção difere desse documento, dentre outras razões, por apresentar um peptídeo novo, não-natural, cujos resultados mostram-se surpreendentes, especialmente em relação a interação com receptores canabinóides, fato não descrito e nem citado em nenhum documento do estado da técnica.

Assim, a presente invenção apresenta novos ligantes para o receptor CB que não possuem os inconvenientes decorrentes de interação com a camada hemato-encefálica e que adicionalmente sejam ligantes adequados para os fins pretendidos. Em especial, é aqui revelado um novo peptídeo de sequência não natural DIIADDEPLT (SeqlD: 1), eficazmente utilizado na modulação da atividade de receptor canabinóide. Adicionalmente, o novo peptídeo, além de ser um ligante superior aos da técnica, ainda não interage com a camada hemato-encefálica.

Do que se depreende da literatura pesquisada, não foram encontrados documentos antecipando ou sugerindo os ensinamentos da presente invenção, de forma que a solução aqui proposta possui novidade e atividade inventiva frente ao estado da técnica.

Sumário da Invenção A presente invenção vem resolver uma série de problemas conhecidos do estado da técnica como, por exemplo, a modulação de receptores canabinóides; não passar pela barreira hemato-encefálica; proporcionar um novo ligante; proporcionar novos métodos para tratamento de obesidade. Em uma realização preferencial, a presente invenção adicionalmente revela uma composição farmacêutica compreendendo o dito peptídeo como componente ativo e a administração da dita composição farmacêutica permitindo a interação do peptídeo com os receptores canabinóides. É, portanto, um objeto da presente invenção um peptídeo modificado compreendendo a sequência não natural que consiste em uma similaridade de até 70% do peptídeo DIIADDEPLT (SeqlD: 1).

Em uma realização preferencial, o dito peptídeo de (SeqlD: 1) é um peptídeo na forma cíclica.

Adicionalmente, a presente invenção revela uma composição farmacêutica que compreende o dito peptídeo (SeqlD: 1) e/ou seus derivados e veículo farmaceuticamente aceitável.

Em uma realização preferencial, o dito peptídeo pode adicionalmente ser administrado com outros princípios ativos.

Em uma realização preferencial, a dita composição farmacêutica reduz gordura corporal.

Adicionalmente, a presente invenção revela um novo ligante de receptor CB compreendendo o peptídeo de (SeqlD: 1).

Em uma realização preferencial o dito ligante é um antagonista ou agonista inverso de CB.

Em uma realização preferencial o dito ligante é um antagonista ou agonista inverso de CB1.

Adicionalmente é compreendido um método para modular a função de receptor CB compreendendo a etapa de contatar o peptídeo de SeqlD:1 da presente invenção com receptor CB em um indivíduo.

Em uma realização preferencial, o dito método compreende a modulação somente do receptor CB1 dentro do sistema de receptores CB.

Ainda, é previsto pela presente invenção o uso do dito peptídeo (SeqlD: 1) na preparação de uma composição para modular a função de receptor CB.

Em uma realização preferencial a dita composição para modular a função de receptor CB ser um medicamento para tratar obesidade, prevenção de sobrepeso, regulação do apetite, indução de saciedade, prevenção de ganho de peso após perda de peso com sucesso, aumento do consumo de energia, tratamento de uma doença ou estado relacionado ao sobrepeso ou obesidade, tratamento da bulimia. A presente invenção adicionalmente revela um método para o tratamento de obesidade ou prevenção de sobrepeso, regulação do apetite, induzir saciedade, prevenir ganho de peso após perda de peso com sucesso, aumentar consumo de energia, tratamento de uma doença ou estado relacionado ao sobrepeso ou obesidade, tratamento da bulimia, em que dito método compreende a administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz do dito peptídeo a um indivíduo. Em uma realização preferencial, o dito método pode promover a redução de peso estética em um indivíduo.

Estes e outros objetos da invenção serão imediatamente valorizados pelos versados na arte e pelas empresas com interesses no segmento, e serão descritos em detalhes suficientes para sua reprodução na descrição a seguir.

Descrição das Figuras Espera-se que a partir da descrição detalhada e das figuras em anexo, as principais características e realizações do presente desenvolvimento se tornem evidentes. As figuras apresentadas não devem ser entendidas de forma limitativa e servem somente para ilustrar as realizações preferidas do presente desenvolvimento. A figura 1 apresenta um screening de novos ligantes para o receptor CB1. A figura 2 apresenta resultados de teste de dor após a administração do peptídeo da invenção (SeqlD:1) em comparação com outros peptídeos da técnica. A figura 3 apresenta resultados de testes de depressão (nado forçado) após a administração do peptídeo da presente invenção (SeqlD:1) em comparação com outros peptídeos da técnica. A figura 4 apresenta resultados de testes de medição de tecido adiposo retroperitoneal após administração do peptídeo da presente invenção (SeqlD:1). A figura 5 apresenta resultados de testes de medição de tecido adiposo inguinal após administração do peptídeo da presente invenção (SeqlD:1). A figura 6 apresenta resultados de testes de medição de tecido adiposo gonadal após administração do peptídeo da presente invenção (SeqlD:1). A figura 7 apresenta resultados de testes de medição de tecido adiposo mesentérico após administração do peptídeo da presente invenção (SeqlD:1). A figura 8 apresenta resultados de testes de medição de tecido adiposo marrom após administração do peptídeo da presente invenção (SeqlD:1). A figura 9 apresenta resultados da medição do índice de adiposidade após administração do peptídeo da presente invenção (SeqlD:1).

Descrição Detalhada da Invenção A presente invenção revela um novo peptídeo de sequência DIIADDEPLT (SeqlD: 1) que pode ser eficazmente utilizado no tratamento de doenças que podem ser tratadas através da modulação da atividade de receptor canabinoide (CB) sem que ocorram efeitos indesejáveis conhecidos do estado da técnica. A presente invenção age particularmente como um antagonista de CB1, agindo de forma superior à técnica e não atravessando a barreira hemato-encefálica.

Adicionalmente, conforme será demonstrado nos exemplos subsequentes, o presente peptídeo pode ser administrado à um indivíduo oralmente, ou seja, não se degrada durante a ingestão oral. Essa característica é particularmente inesperada, uma vez que as enzimas naturais de um indivíduo não degradarão ou degradarão muito pouco o peptídeo quando no trato digestivo e o mesmo atuará eficazmente quando administrado pela via oral.

No contexto do presente pedido de patente, deve-se entender “peptídeo modificado” como um peptídeo não natural, modificado artificialmente a fim de atingir os objetivos da presente invenção.

No contexto do presente pedido de patente, deve-se entender “similaridade de até 70%” como o fato de se manter até 70% de identidade com o peptídeo de (SeqlD: 1). No contexto do presente peptídeo, isso seria ao mesmo que se modificar até 3 aminoácidos de tal forma que o peptídeo mantenha a mesma atividade apresentada ao longo desse pedido de patente. É comum à técnica a modificação de sequências com mesmas características, e.g. hidrofobicidade ou hidrofilicidade, a fim de se otimizar sua função ou mesmo para fins práticos ou econômicos. Técnicos no assunto, facilmente identificação que a substituição de até 3 aminiácidos em uma sequência de 10 aminoácidos é obvia na técnica e que se espera que mais de uma sequência similar ao peptídeo de (SeqlD: 1) atue de forma similar ao mesmo.

No contexto do presente pedido de patente, deve-se entender, “peptídeo cíclico” ou “circular” como um peptídeo que teve uma ligação covalente entre as duas extremidades de uma molécula linear de ácido nucleico (simples ou dupla fita) envolvendo a união do 3’-hidroxil ao 5’-fosfato através de qualquer método conhecido da técnica, particularmente pela atividade da enzima ligase. O peptídeo cíclico pode ser utilizado em substituição ao peptídeo linear devido ao fato de ser mais difícil de ser degradado, já que suas extremidades ou zonas de ataque por enzimas hidrolizantes não estão tão expostas quanto em um peptídeo linear.

No contexto do presente pedido de patente, deve-se entender “ligante ao receptor CB” como um composto ou molécula que interaja com o sistema CB e/ou receptores CB1 ou CB2 de forma a promover algum efeito direto ou indireto de ligação aos ditos receptores.

No contexto do presente pedido de patente, deve-se entender “agonista” como uma droga, hormônio, neurotransmissor ou outra molécula sinalizadora que forma um complexo com um sítio receptor, dessa forma acionando uma resposta ativa de uma célula. No contexto do presente pedido de patente, deve-se entender “agonista inverso ou antagonista” como a interação entre duas ou mais substâncias (e.g. drogas, hormônios ou enzimas) possuindo efeitos opostos em um sistema, de tal forma que a ação de um inibe parcialmente ou totalmente o efeito da outra. Particularmente, um composto será um agonista inverso quando atua na presença de um agonista mas reduzindo sua atividade, um antagonista será um composto que bloqueará totalmente a atividade do agonista.

No contexto do presente pedido de patente, deve-se entender “modular a função de receptor CB” como uma interação que acarreta na alteração da atividade do receptor CB, particularmente CB1 ou CB2 positivamente "agonismo” ou negativamente “antagonismo”.

No contexto do presente pedido de patente, deve-se entender “composição farmacêutica” como toda e qualquer composição que contenha um princípio ativo, com fins profiláticos, paliativos e/ou curativos, atuando de forma a manter e/ou restaurar a homeostase, podendo ser administrada de forma tópica, parenteral, enteral e/ou intratecal.

No contexto do presente pedido de patente, deve-se entender “formulação farmaceuticamente aceitável” uma formulação contendo excipientes e carreadores farmaceuticamente aceitáveis bem conhecidos por técnicos no assunto, como é o desenvolvimento de doses e tratamentos convenientes para uso em composições particulares que podem ser descritas em uma série de regimentos de tratamento, incluindo oral, parenteral, intravenoso, intranasal, intravítreo e intramuscular, intracerebral, intracerebroventricular e intraocular e sua administração e/ou formulação.

Ainda, a presente invenção revela uma composição farmacêutica que compreende o peptídeo da presente invenção. A presente composição farmacêutica pode ser adicionalmente acrescida de sais farmaceuticamente aceitáveis e opcionalmente um veículo farmaceuticamente aceitável. O dito peptídeo sendo o componente ativo da dita composição e pode ser administrado na forma de tablete, gel, solução injetável ou qualquer outra forma de administração adequada para fins farmacêuticos e médicos.

Em uma realização preferencial o peptídeo da presente invenção atua como ligante de receptor CB1, mais preferencialmente o dito receptor é um antagonista de CB1.

Em uma realização preferencial é adicionalmente proporcionado um método para modular a função de receptor CB1 que compreende contatar um peptídeo conforme definido na reivindicação 1 com o dito receptor CB1 em um indivíduo. O dito método de contato entre o peptídeo e o receptor pode ocorrer in vitro ou in vivo. Quando in vivo, o dito contato entre o peptídeo e o receptor ocorre através da administração do dito peptídeo por qualquer via comumente encontrada na técnica tais como via oral, via injeção, via suspensória, via aérea, entre outros.

Em uma realização preferencial o dito peptídeo de SeqlD:1 é usado para a preparação de uma composição para modular a função de receptor CB1. Mais preferencialmente a dita composição para modular a função de receptor CB1 é usada para preparar um medicamento para tratar obesidade, prevenção de sobrepeso, regulação do apetite, indução de saciedade, prevenção de ganho de peso após perda de peso com sucesso, aumento do consumo de energia, tratamento de uma doença ou estado relacionado ao sobrepeso ou obesidade, tratamento da bulimia, tratamento este consistindo em administrar uma quantidade terapeuticamente eficaz do dito medicamento.

Em uma realização preferencial, é adicionalmente proporcionado um método para o tratamento de obesidade, prevenção de sobrepeso, regulação do apetite, indução de saciedade, prevenção de ganho de peso após perda de peso com sucesso, aumento do consumo de energia, tratamento de uma doença oü-estado relacionado ao sobrepeso ou obesidade, tratamento da bulimia. Referido método é caracterizado por compreender a administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz do peptídeo, conforme definido na reivindicação 1, a um indivíduo. O peptídeo da presente invenção é também útil para a preparação de medicamentos para o para tratamento de aterosclerose, hipertensão, diabetes, diabetes tipo 2, tolerância comprometida de glicose (ITG), dislipidemia, doenças coronárias do coração, doenças da vesícula biliar, pedra na vesícula, osteoartite, câncer, disfunções sexuais e riscos de morte prematura.

Em uma realização preferencial, é adicionalmente proporcionado um método para promover a redução de peso estética em um indivíduo, que compreende a administração do peptídeo da presente invenção à um indivíduo. Como perda de peso estética, entende-se a perda de peso de um indivíduo que não possua nenhuma indicação médica para que seja necessária a redução de sua massa corpórea.

Os exemplos aqui mostrados têm o intuito somente de exemplificar uma das inúmeras maneiras de se realizar a invenção, contudo, sem limitar o escopo da mesma.

Exemplo 1. Realização Preferencial Foi identificado, utilizando o método de screening de GPCR um peptídeo que age como agonista inverso do receptor CB1 (figura 1) de sequência DIIADDEPLT (denominado SeqlD:1). A figura 1 demonstra que os novos ligantes para o receptor CB1 através de ELISA com membranas de stirato (5pg/poço) tratadas com 1μΜ de cada droga por 2 horas à temperatura ambiente e incubadas com o anticorpo anti-CB1 (1:500). A porcentagem de ativação do receptor foi calculada em relação ao controle, membrana não tratada (100%). Os resultados são mostrados como média +- SEM (n=5). Diferenças significativas estão indicadas e p<0,05.

Através da detecção da efetiva interação com o receptor CB1 foi subsequentemente realizados os testes de dor constantes na Figura 2 que apresenta a atividade antihiperalgésica do peptídeo da presente invenção, hemopressina e outros peptídeos, in vivo. Análise comparativa da administração intraplantar dos peptídeos sobre a hiperalgesia induzida por carragenana. Ratos foram tratados os peptídeos (20g por pata) imediatamente antes da administração intraplantar de carragenana (200g por pata) e foram avaliados usando um aparato de pressão Ugo Basileantes (Oh e patas vazias) e 3h após administração de carragenana (patas pretas). Os ratos administrados intraplantarmente com veículo (salina) foram submetidos ao mesmo protocolo (grupo controle) e os resultados foram apresentados como média SEM, n=6-8. A figura 3 apresenta os efeitos da aplicação do peptídeo da presente invenção em um modelo de depressão (nado forcado) e foi constatado que o peptídeo ao contrario do rimonabanto não causa depressão. O teste de nado forçado foi realizado baseado em testes prévios ([harkin et al.„ 2004], [Petit-Demouliere et al., 2005] e [Treit e Menard, 1998]). Os ratos foram postos em uma piscina com água (24+-1 °C) até 1m do fundo (para que o rato não possa tocar o fundo) e 20cm da piscina o tempo de imobilidade (quando o animal não se move exceto de pequenos movimentos necessários para sua flutuação) foi gravado por 3 experimentos após 1, 6 e 9 minutos.

Além disso, em um modelo agudo de tratamento (3 dias de tratamento via oral em ratos wistar não obesos) verificou-se a ativação do tecido adiposo marrom, bem como redução dos tecidos adiposos retroperitonial, inguinal e marrom, bem como do índice de adiposidade (figuras 4 a 9), não observado com o com rimonabanto.

Particularmente, pode-se verificar que o presente peptídeo possui atividade mesmo quando administrado pela via oral. Esse fato é de difícil ocorrência na técnica e possui diversas vantagens em termos farmacêuticos e de administração comercial de um medicamento.

Os versados na arte valorizarão os conhecimentos aqui apresentados e poderão reproduzir a invenção nas modalidades apresentadas e em outros variantes, abrangidos no escopo das reivindicações anexas.

PEPTÍDEO, COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA, L1GANTE DE RECEPTOR CB, MÉTODO PARA MODULAR A FUNÇÃO DE RECEPTOR CB, USO, MÉTODO PARA O TRATAMENTO DE OBESIDADE, E, MÉTODO PARA PROMOVER A REDUÇÃO DE PESO ESTÉTICA EM UM INDIVÍDUO

Claims (14)

1. Peptídeo, caracterizado por consistir de 70% de similaridade ao peptídeo de (SeqlD:1).

2. Peptídeo, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por consistir de um peptídeo cíclico.

3. Composição farmacêutica caracterizada por compreender o peptídeo, conforme definido na reivindicação 1 ou 2, sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo e um veículo farmaceuticamente aceitável.

4. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 3 caracterizado pelo dito peptídeo ser o componente ativo.

5. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 3 ou 4 caracterizada por se apresentar na forma de tablete, gel ou solução injetável.

6. Ligante de receptor CB caracterizado por compreender um peptídeo conforme definido na reivindicação 1 ou 2.

7. Ligante, de acordo com a reivindicação 6 caracterizado por ser um antagonista ou agonista inverso de receptor CB.

8. Ligante, de acordo com a reivindicação 7, caracterizado por ser um antagonista ou agonista inverso de receptor CB1.

9. Método para modular a função de receptor CB, caracterizado por compreender contatar um peptídeo, conforme definido na reivindicação 1 ou 2 com o receptor CB em um indivíduo.

10. Método, de acordo com a reivindicação 9, caracterizado pelo dito receptor CB consistir do receptor CB1.

11. Uso, de um peptídeo, conforme definido na reivindicação 1 ou 2, caracterizado por ser para a preparação de um composição para modular a função de receptor CB.

12. Uso, de acordo com a reivindicação 11, caracterizado pela dita composição para modular a função de receptor CB ser um medicamento para tratar obesidade, prevenção de sobrepeso, regulação do apetite, indução de saciedade, prevenção de ganho de peso após perda de peso com sucesso, aumento do consumo de energia, tratamento de uma doença ou estado relacionado ao sobrepeso ou obesidade, tratamento da bulimia.

13. Método para o tratamento de obesidade, prevenção de sobrepeso, regulação do apetite, indução de saciedade, prevenção de ganho de peso após perda de peso com sucesso, aumento do consumo de energia, tratamento de uma doença ou estado relacionado ao sobrepeso ou obesidade, tratamento da bulimia, caracterizado por compreender a administração a um indivíduo de uma quantidade terapeuticamente eficaz do peptídeo, conforme definido na reivindicação 1 ou 2.

14. Método para promover a redução de peso estética em um indivíduo, caracterizado por compreender a administração a um indivíduo de uma quantidade eficaz do peptídeo, conforme definido na reivindicação 1 ou 2.