BG67555B1 - Nmda-рецепторен антагонист с антимикробна активност - Google Patents
Nmda-рецепторен антагонист с антимикробна активност Download PDFInfo
- Publication number
- BG67555B1 BG67555B1 BG113103A BG11310320A BG67555B1 BG 67555 B1 BG67555 B1 BG 67555B1 BG 113103 A BG113103 A BG 113103A BG 11310320 A BG11310320 A BG 11310320A BG 67555 B1 BG67555 B1 BG 67555B1
- Authority
- BG
- Bulgaria
- Prior art keywords
- amide
- amino
- dimethyladamantane
- propane
- acid
- Prior art date
Links
- 229940099433 NMDA receptor antagonist Drugs 0.000 title abstract description 4
- 239000003703 n methyl dextro aspartic acid receptor blocking agent Substances 0.000 title abstract description 4
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 title description 13
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 35
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 8
- 239000000816 peptidomimetic Substances 0.000 claims description 8
- QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N Alanine Chemical compound CC([NH3+])C([O-])=O QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- UCMIRNVEIXFBKS-UHFFFAOYSA-N beta-alanine Chemical compound NCCC(O)=O UCMIRNVEIXFBKS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- XWHHYOYVRVGJJY-UHFFFAOYSA-N 4-fluorophenylalanine Chemical compound OC(=O)C(N)CC1=CC=C(F)C=C1 XWHHYOYVRVGJJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Chemical compound CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 235000013905 glycine and its sodium salt Nutrition 0.000 claims description 4
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Chemical compound OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- DOIRUXCDSGNCMX-UHFFFAOYSA-N 2-(azaniumylmethyl)-1,3-thiazole-4-carboxylate Chemical compound NCC1=NC(C(O)=O)=CS1 DOIRUXCDSGNCMX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 claims description 3
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 abstract description 16
- 241000894007 species Species 0.000 abstract description 11
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 10
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract description 9
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 abstract description 7
- 241000233866 Fungi Species 0.000 abstract description 7
- 201000010099 disease Diseases 0.000 abstract description 4
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 abstract description 4
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 abstract description 3
- 230000002265 prevention Effects 0.000 abstract description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 abstract description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 abstract description 2
- IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N Dimethyl sulfoxide Chemical compound [2H]C([2H])([2H])S(=O)C([2H])([2H])[2H] IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N 0.000 description 36
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 34
- LDDHMLJTFXJGPI-UHFFFAOYSA-N memantine hydrochloride Chemical group Cl.C1C(C2)CC3(C)CC1(C)CC2(N)C3 LDDHMLJTFXJGPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 29
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 18
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 18
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 16
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 15
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 14
- 229960004640 memantine Drugs 0.000 description 13
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 11
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 11
- 241001138501 Salmonella enterica Species 0.000 description 10
- 238000002330 electrospray ionisation mass spectrometry Methods 0.000 description 10
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 10
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 9
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 8
- 238000004455 differential thermal analysis Methods 0.000 description 8
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 8
- 241000192125 Firmicutes Species 0.000 description 7
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241000194107 Bacillus megaterium Species 0.000 description 6
- HOKKHZGPKSLGJE-GSVOUGTGSA-N N-Methyl-D-aspartic acid Chemical compound CN[C@@H](C(O)=O)CC(O)=O HOKKHZGPKSLGJE-GSVOUGTGSA-N 0.000 description 6
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 6
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 6
- 230000000324 neuroprotective effect Effects 0.000 description 6
- 238000002411 thermogravimetry Methods 0.000 description 6
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 5
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 5
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 5
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 5
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 5
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 5
- -1 neuroleptics Substances 0.000 description 5
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N Trichloro(2H)methane Chemical compound [2H]C(Cl)(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N 0.000 description 4
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 4
- 230000006870 function Effects 0.000 description 4
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 4
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 4
- 229960000967 memantine hydrochloride Drugs 0.000 description 4
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 4
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 4
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 4
- 238000012916 structural analysis Methods 0.000 description 4
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 4
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 3
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 3
- 102000013455 Amyloid beta-Peptides Human genes 0.000 description 3
- 108010090849 Amyloid beta-Peptides Proteins 0.000 description 3
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 description 3
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 3
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 3
- MIDZLCFIAINOQN-WPRPVWTQSA-N Phe-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 MIDZLCFIAINOQN-WPRPVWTQSA-N 0.000 description 3
- 239000004098 Tetracycline Substances 0.000 description 3
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical class OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 3
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 3
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 3
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 3
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 3
- 229940100601 interleukin-6 Drugs 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000004770 neurodegeneration Effects 0.000 description 3
- 208000015122 neurodegenerative disease Diseases 0.000 description 3
- 229960000988 nystatin Drugs 0.000 description 3
- VQOXZBDYSJBXMA-NQTDYLQESA-N nystatin A1 Chemical compound O[C@H]1[C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](C)O[C@H]1O[C@H]1/C=C/C=C/C=C/C=C/CC/C=C/C=C/[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)[C@H](C)OC(=O)C[C@H](O)C[C@H](O)C[C@H](O)CC[C@@H](O)[C@H](O)C[C@](O)(C[C@H](O)[C@H]2C(O)=O)O[C@H]2C1 VQOXZBDYSJBXMA-NQTDYLQESA-N 0.000 description 3
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 3
- 108010024607 phenylalanylalanine Proteins 0.000 description 3
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 3
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 3
- 230000011514 reflex Effects 0.000 description 3
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 3
- 229960002180 tetracycline Drugs 0.000 description 3
- 229930101283 tetracycline Natural products 0.000 description 3
- 235000019364 tetracycline Nutrition 0.000 description 3
- 150000003522 tetracyclines Chemical class 0.000 description 3
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 2
- 241000223195 Fusarium graminearum Species 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 230000000843 anti-fungal effect Effects 0.000 description 2
- 230000003385 bacteriostatic effect Effects 0.000 description 2
- 239000000544 cholinesterase inhibitor Substances 0.000 description 2
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 2
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 2
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 2
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 2
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 2
- 238000009331 sowing Methods 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 238000000547 structure data Methods 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- 125000005931 tert-butyloxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(OC(*)=O)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 2
- JWDYCNIAQWPBHD-UHFFFAOYSA-N 1-(2-methylphenyl)glycerol Chemical compound CC1=CC=CC=C1OCC(O)CO JWDYCNIAQWPBHD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001644 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 1
- DGXWNDGLEOIEGT-UHFFFAOYSA-N 4-fluoroamphetamine Chemical compound CC(N)CC1=CC=C(F)C=C1 DGXWNDGLEOIEGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UHPMCKVQTMMPCG-UHFFFAOYSA-N 5,8-dihydroxy-2-methoxy-6-methyl-7-(2-oxopropyl)naphthalene-1,4-dione Chemical compound CC1=C(CC(C)=O)C(O)=C2C(=O)C(OC)=CC(=O)C2=C1O UHPMCKVQTMMPCG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940100578 Acetylcholinesterase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 229940124810 Alzheimer's drug Drugs 0.000 description 1
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonium chloride Substances [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000006847 BOC protecting group Chemical group 0.000 description 1
- 208000031729 Bacteremia Diseases 0.000 description 1
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 1
- 241000222120 Candida <Saccharomycetales> Species 0.000 description 1
- JPVYNHNXODAKFH-UHFFFAOYSA-N Cu2+ Chemical compound [Cu+2] JPVYNHNXODAKFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010012289 Dementia Diseases 0.000 description 1
- QUSNBJAOOMFDIB-UHFFFAOYSA-N Ethylamine Chemical compound CCN QUSNBJAOOMFDIB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010017533 Fungal infection Diseases 0.000 description 1
- 241000223218 Fusarium Species 0.000 description 1
- 230000005526 G1 to G0 transition Effects 0.000 description 1
- 208000004547 Hallucinations Diseases 0.000 description 1
- 206010019233 Headaches Diseases 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 201000009906 Meningitis Diseases 0.000 description 1
- 208000034762 Meningococcal Infections Diseases 0.000 description 1
- 208000031888 Mycoses Diseases 0.000 description 1
- 102000004868 N-Methyl-D-Aspartate Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108090001041 N-Methyl-D-Aspartate Receptors Proteins 0.000 description 1
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 239000007832 Na2SO4 Substances 0.000 description 1
- 206010028813 Nausea Diseases 0.000 description 1
- 241000228143 Penicillium Species 0.000 description 1
- 241001149509 Penicillium vulpinum Species 0.000 description 1
- 241001030146 Rhodotorula sp. Species 0.000 description 1
- 208000013738 Sleep Initiation and Maintenance disease Diseases 0.000 description 1
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 description 1
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 description 1
- 206010041349 Somnolence Diseases 0.000 description 1
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 1
- ATJFFYVFTNAWJD-UHFFFAOYSA-N Tin Chemical compound [Sn] ATJFFYVFTNAWJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LDDHMLJTFXJGPI-LFPUEVJFSA-N [(3s,5r)-3,5-dimethyl-1-adamantyl]azanium;chloride Chemical compound Cl.C1C(C2)C[C@@]3(C)C[C@]1(C)CC2(N)C3 LDDHMLJTFXJGPI-LFPUEVJFSA-N 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011114 ammonium hydroxide Nutrition 0.000 description 1
- 238000005280 amorphization Methods 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 1
- 230000007131 anti Alzheimer effect Effects 0.000 description 1
- 230000000656 anti-yeast Effects 0.000 description 1
- 239000000935 antidepressant agent Substances 0.000 description 1
- 229940005513 antidepressants Drugs 0.000 description 1
- 239000004599 antimicrobial Substances 0.000 description 1
- 239000002249 anxiolytic agent Substances 0.000 description 1
- 230000000949 anxiolytic effect Effects 0.000 description 1
- 229940005530 anxiolytics Drugs 0.000 description 1
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 238000007664 blowing Methods 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 210000004958 brain cell Anatomy 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000011097 chromatography purification Methods 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- GVPFVAHMJGGAJG-UHFFFAOYSA-L cobalt dichloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Co+2] GVPFVAHMJGGAJG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 230000003930 cognitive ability Effects 0.000 description 1
- 208000010877 cognitive disease Diseases 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000010835 comparative analysis Methods 0.000 description 1
- 238000004320 controlled atmosphere Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 229910001431 copper ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002178 crystalline material Substances 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000007850 degeneration Effects 0.000 description 1
- 230000003412 degenerative effect Effects 0.000 description 1
- 238000003795 desorption Methods 0.000 description 1
- 230000006866 deterioration Effects 0.000 description 1
- CYOBXMQBHXAZSU-UHFFFAOYSA-L dichlorocobalt;pyridine-3-carboxamide Chemical compound Cl[Co]Cl.NC(=O)C1=CC=CN=C1.NC(=O)C1=CC=CN=C1 CYOBXMQBHXAZSU-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 235000021186 dishes Nutrition 0.000 description 1
- 208000002173 dizziness Diseases 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- VFRSADQPWYCXDG-LEUCUCNGSA-N ethyl (2s,5s)-5-methylpyrrolidine-2-carboxylate;2,2,2-trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F.CCOC(=O)[C@@H]1CC[C@H](C)N1 VFRSADQPWYCXDG-LEUCUCNGSA-N 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000012458 free base Substances 0.000 description 1
- 238000004362 fungal culture Methods 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 230000000855 fungicidal effect Effects 0.000 description 1
- 239000000417 fungicide Substances 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 229930195712 glutamate Natural products 0.000 description 1
- 230000009036 growth inhibition Effects 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 125000001475 halogen functional group Chemical group 0.000 description 1
- 235000015220 hamburgers Nutrition 0.000 description 1
- 231100000869 headache Toxicity 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 150000002469 indenes Chemical class 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 1
- 206010022437 insomnia Diseases 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 1
- 230000008693 nausea Effects 0.000 description 1
- 230000001537 neural effect Effects 0.000 description 1
- 230000016273 neuron death Effects 0.000 description 1
- 239000002858 neurotransmitter agent Substances 0.000 description 1
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 235000012015 potatoes Nutrition 0.000 description 1
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 1
- 238000004451 qualitative analysis Methods 0.000 description 1
- 238000012205 qualitative assay Methods 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 229940044551 receptor antagonist Drugs 0.000 description 1
- 239000002464 receptor antagonist Substances 0.000 description 1
- 239000002469 receptor inverse agonist Substances 0.000 description 1
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- WBHQBSYUUJJSRZ-UHFFFAOYSA-M sodium bisulfate Chemical compound [Na+].OS([O-])(=O)=O WBHQBSYUUJJSRZ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229910000342 sodium bisulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 238000000859 sublimation Methods 0.000 description 1
- 230000008022 sublimation Effects 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N tfa trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F.OC(=O)C(F)(F)F WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000001757 thermogravimetry curve Methods 0.000 description 1
- YFNCATAIYKQPOO-UHFFFAOYSA-N thiophanate Chemical compound CCOC(=O)NC(=S)NC1=CC=CC=C1NC(=S)NC(=O)OCC YFNCATAIYKQPOO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 1
- 238000010626 work up procedure Methods 0.000 description 1
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 1
- 239000007222 ypd medium Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Thiazole And Isothizaole Compounds (AREA)
Abstract
Изобретението се отнася до съединение с обща формула (I), до метод за неговото получаване и до приложението му, като NMDA-рецепторен антагонист за профилактика и лечение на болестта на Алцхаймер, както и като средство за профилактика и лечение на заболявания, причинени от клинично значими, условно патогенни бактериални видове и гъби.
Description
Област на изобретението
Изобретението се отнася до антагонист на N-метил-D-аспартат (NMDA) рецепторите с антимикробна активност, приложимо при пациенти с болестта на Алцхаймер с бактериална и гъбична инфекции, причинени от клинично значими, условно патогенни бактериални видове и гъби.
Предшестващо състояние на изобретението
Много невродегенеративни заболявания са резултат от прогресивна загуба на структура или функция на невроните, включително умъртвяване на неврони. Това са трудно лечими заболявания, които водят до прогресираща дегенерация и/или загуба на нервни клетки. Понастоящем се счита, че прогресивното влошаване на когнитивните възможности, обозначено като болест на Алцхаймер, е нелечимо, дегенеративно и терминално заболяване. Лечението обикновено е симптоматично - използват се антидепресанти, анксиолитици, невролептици, инхибитори на холинестеразата и други симптоматици. Доколкото обаче, заболяването е резултат от нарушено изпращане на сигнали в мозъка, важна роля в което играят така наречените N-метил-D-аспартат (NMDA) - рецептори, напоследък се използват средства за свързване на NMDA рецепторите върху клетките на мозъка и блокиране активността на невротрансмитера глутамат. Такова средство е мемантинът, което е единственото одобрено от Американската Агенция по Храните и Лекарствата (FDA) лекарство за лечение на болестта на Алцхаймер (БА) [1]. Това е основание, съгласно заявка за патент US 2019336509 А1, за включването на мемантина, като NMDA - рецепторен антагонист заедно с хистамин-3 рецепторен инверсен агонист и ацетилхолинестеразен инхибитор в състав за лечение на когнитивни нарушения.
Независимо от доказаното терапевтично действие при средни и остри състояния на БА и деменция, обаче мемантинът манифестира някои негативни прояви, които лимитират употребата му, а именно - твърде висока степен на разтворимост във вода, което представлява предизвикателство за получаване на лекарствените форми, както и някои неблагоприятни странични ефекти при използването му, като объркване, виене на свят, сънливост, главоболие, безсъние, гадене и халюцинации.
От друга страна, според Pisa, D. и сътр. (2017) [2], инфекции от различен тип могат да стоят в основата на невродегенеративното заболяване БА, а проучване на Yu, J. У. и сътр. 2015 [3], предназначено да идентифицира неизвестни антимикробни свойства на известни лекарства, показва за първи път, че мемантинът може ефективно да блокира бактериемия и менингит, причинен от Е. coli при модел на мишки. Резултатите от изследванията установяват, че мемантинът притежава потенциал за лечение на менингококова инфекция, но той е насочен по-скоро към гостоприемника, отколкото към бактериалния патоген, защото in vitro не показва антимикробната активност.
Задача на изобретението е да предложи съединение, представляващо антагонист на N-метил-D-аспартат (NMDA) рецепторите и метод за неговото получаване, приложимо както като средство за превенция и лечение на хроничното невродегенеративно заболяване болест на Алцхаймер, така и като средство срещу клинично значими, условно патогенни бактериални видове и гъби.
Същност на изобретението
Изобретението се отнася до съединение с обща формула (I), z NH
BG 67555 Bl
0) където R представлява аминокиселина или пептидомиметик, избрани от групата, включваща: аминоетанова киселина, 2-амино-З-метилбутанова киселина, 2-аминопропанова киселина, 3-аминопропанова киселина, 2-амино-З-фенилпропанова киселина, 2-амино-3-(4-хидроксифенил)пропанова киселина, 2-амино3-(4-флуорофенил)пропанова киселина, 2-(аминометил)-1,3-тиазол-4-карбоксилна киселина и 2(аминометил)-1 ’,3 ’-тиазолил-4’-2-( 1,3-тиазол)-4-карбоксилна киселина.
Химичното съединение с обща формула (I) се получава в следната последователност от операции:
Изходното съединение, включващо защитено със защитната група Х-(трет-бутоксикарбонил) (ВОС) аминокиселина или пептидомиметик, избрани от групата, включваща Х-(трет-бутоксикарбонил)аминоетанова киселина, Х-(трет-бутоксикарбонил)-2-амино-3-метилбутанова киселина, Ν-(τρετбутоксикарбонил)-2-аминопропанова киселина, Х-(трет-бутоксикарбонил)-3-аминопропанова киселина, Ν(трет-бутоксикарбонил)-2-амино-3-(4-флуорофенил)пропанова киселина, Х-(трет-бутоксикарбонил)-2-амино3-фенилпропанова киселина, Х-(трет-бутоксикарбонил)-2-амино-3-(4-хидроксифенил)пропанова киселина, Ν(трет-бутоксикарбонил)-2-(аминометил)-1,3-тиазол-4-карбоксилна киселина и Х-(трет-бутоксикарбонил)-2(аминометил)-1 ’,3’-тиазолил-4’-2-(1,3-тиазол)-4-карбоксилна киселина), се разтваря в диметилформамид, като при непрекъснато разбъркване се добавят триетиламин (TEA) и дициклохексилкарбодиимид (ДСС) [4].
Мемантин хидрохлорид се разтваря в диметилформамид и се прибавя след двадесет минути. Ходът на реакцията се следи посредством тънкослойна хроматография (TLC). След приключването на реакцията се извършва двукратно промиване с разтвор на 5% NaHCOj, разтвор на 5% NaHSO4 и еднократно промиване с вода. Органичният слой се суши с безводен Na2SO4. След изпаряване на разтворителя се получава междинно съединение, което в съответствие с изходното съединение, представлява (М-(трет-бутоксикарбонил)аминоетан-К-(3,5-диметиладамантан)-амид;Х-(трет-бутоксикарбонил)-2-амино-3-метилбутан-К-(3,5диметиладамантан)-амид; Х-(трет-бутоксикарбонил)-2-аминопропан-Х-(3,5-диметиладамантан)-амид; N(трет-бутоксикарбонил)-3-аминопропан-М-(3,5-диметиладамантан)-амид;Х-(трет-бутоксикарбонил)-2-амино3-(4-флуорофенил)пропан-Х-(3,5-диметиладамантан)-амид;К-(трет-бутоксикарбонил)-2-амино-3фенилпропан-Х-(3,5-диметиладамантан)-амид;К-(трет-бутоксикарбонил)-2-амино-3-(4хидроксифенил)пропан-К-(3,5-диметиладамантан)-амид;К-(трет-бутоксикарбонил)-2-(аминометил)-1,3тиазол-4-карбокси-Х-(3’,5’-диметиладамантан)-амид и Х-(трет-бутоксикарбонил)-2-(аминометил)-Г,3’тиазолил-4’-2-(1,3-тиазол)-4-карбокси-Х-(3”,5”-диметиладамантан)-амид) под формата на масло.
Към междинното съединение, охладено до 0°С и разтворено в дихлорметан, се прибавя еквивалентен обем трифлуороцетна киселина (TFA) на капки за деблокиране на защитната ВОС група. Разтворът се разбърква при 0°С и процесът се следи хроматографски до деблокиране на ВОС групата.
След изпаряването на разтворителите се добавя неколкократно диетилов етер, който съответно се изпарява. Към полученият маслообразен продукт, в зависимост от разтворимостта, се добавят смеси на етилацетат/хексан или метанол/диетилов етер, в резултат на което се получават кристали от трифлуорацетати на химични съединения, които в съответствие с изходните съединения, представляват производни на мемантина както следва:
1. аминоетан-N-(3,5-диметиладамантан)-амид
2. 2-амино-3-метилбутан^-(3’,5’-диметиладамантан)-амид
3. 2-амино-пропан-N-(3’,5’-диметиладамантан)-амид
4. 3 -амино-пропан-N-(3’,5’-диметиладамантан)-амид
5. 2-амино-3-(4-флуорофенил)пропан-N-(3”,5”-диметиладамантан)-амид
6. 2-амино-3-фенилпропан-N-(3’,5’-диметиладамантан)-амид
7. 2-амино-3-(4-хидроксифенил)пропан-N-(3”,5”-диметиладамантан)-амид
8. 2-(аминометил)-1,3-тиазол-4-карбокси-N-(3’,5’-диметиладамантан)-амид
9. 2-(αмuнометил)-1’,3’-тuазолил-4’-2-(1,3-тuазол)-4-кαрбоксu-N-(3”,5”-дuметилαдαмαнтαн)-αмuд.)
Разтворителите се изпаряват и към кристалите се добавя вода, метанол и/или ацетонитрил и pH на разтвора се довежда до 7.5 - 8.0 посредством 25%-ен разтвор на амоняк. Следва двукратна екстракция с етилацетат, изпаряване на разтворителя и хроматографско пречистване на получените кристали.
Добивът на различните мемантинови производни варира в границите от 28% до 45%.
1. аминоетан-N-(3,5-диметиладамантан)-амид 1Н (DMSO-d6) δ (ppm): 0.82 (s, 6Н, 2хСН3), 1.12 (m, 2Н), 1.26 (d, 2Н, J=12.6 Hz), 1.32 (dd, 2Н, J=2.8 Hz, J=12.5 Hz), 1.55 (d, 2H, J=11.9 Hz), 1.60 (d, 2H, J=11.6 Hz), 1.77 (d, 2H, J=2Hz) 2.09 (m, 1H), 3.45 (s, 2H), 7.9 (brs, 1H, NH-amide), 7.95 (brs, 2H, NH2-amine). 13C (DMSO-d6) δ (ppm): 29.9 (CH), 30.5 (CH3), 32.3 (Cquat), 39.81 (CH2), 40.8 (CH2), 44.6 (CH2), 47.4 (CH2), 50.5 (CH2), 53.3 (Cquat), 165.2 (CO). ESI-MS: m/z: 237, [M+H]+
2. 2-амино-3-метилбутан-N-(3’,5’-диметиладамантан)-амид 1H (DMSO-d6) δ (ppm): 0.82 (s, 6H, 2xCH3), 0.91 (d, 3H, J=6.9 Hz, CH3), 0.92 (d, 3H, J=6.9 Hz, CH3), 1.12 (m, 2H), 1.26 (d, 2H, J=12.6 Hz), 1.32 (dd, 2H, J=2.8 Hz, J=12.5 Hz), 1.55 (d, 2H, J=11.9 Hz), 1.62 (d, 2H, J=11.6 Hz), 1.78 (m, 2H), 2.00 (m, 1H), 2.09 (m, 1H), 3.48 (d, 1H, J=6 Hz), 7.91 (brs, 1H, NH-amide), 8.02 (brs, 2H, NH2-amine). 13C (DMSO-d6) δ (ppm): 18.1 (CH3), 18.8 (CH3), 29.9 (CH), 30.3 (CH), 30.4 (CH3), 32.3 (Cquat), 39.7 (CH2), 42.6 (CH2), 47.3 (CH2), 47.3 (CH2), 50.5 (CH2), 53.2 (Cquat), 58.0 (CH), 167.3 (CO).ESI-MS: m/z: 279, [M+H]+
3. 2-амино-пропан-N-(3’,5’-диметиладамантан)-амид 1H (DMSO-d6) δ (ppm): 0.82 (s, 6H, 2xCH3), 0.91 (d, 3H, J=6.9 Hz, CH3), 0.92 (d, 3H, J=6.9 Hz, CH3), 1.12 (m, 2H), 1.26 (d, 2H, J=12.6 Hz), 1.32 (dd, 2H, J=2.8 Hz, J=12.5 Hz), 1.55 (d, 2H, J=11.9 Hz), 1.62 (d, 2H, J=11.6 Hz), 1.78 (m, 2H), 2.00 (m, 1H), 2.09 (m, 1H), 3.48 (d, 1H, J=6 Hz), 7.91 (brs, 1H, NH-amide), 8.02 (brs, 2H, NH2- amine).
13C (DMSO-d6) δ (ppm): 18.1 (CH3), 29.9 (CH), 30.5 (CH3), 32.3 (Cquat), 39.7 (CH2), 42.6 (CH2), 47.3 (CH2), 47.3 (CH2), 48.8 (CH), 50.5 (CH2), 53.2 (Cquat), 169.0 (CO). ESI-MS: m/z: 251, [M+H]+
4. 3-амино-пропан-N-(3’,5’-диметиладамантан)-амид 1H (DMSO-d6) δ (ppm): 0.81 (s, 6H, 2xCH3), 1.10 (m, 2H), 1.25 (d, 2H, J=12.6 Hz), 1.30 (d, 2H, J=12.5 Hz), 1.58 (m, 4H). 1.75 (d, 2H, J=2.8 Hz), 2.07 (m, 1H), 2.39 (t, 2H, J=7.0 Hz), 2.92 (t, 2H, J=7.0 Hz), 7.64 (brs, 1H, NH-amide), 7.73 (brs, 2H, NH2-amine). 13C (DMSO-d6) δ (ppm): 29.9 (CH), 30.5 (CH3), 32.3 (Cquat), 32.8 (CH2), 35.8 (CH2), 39.9 (CH2), 42.7 (CH2), 47.4 (CH2), 50.6 (CH2), 52.9 (CH2), 52.9 (Cquat), 169.3 (CO). ESI-MS: m/z: 251, [M+H]+.
5. 2-амино-3-(4-флуорофенил)пропан-№(3”,5”-диметиладамантан)-амид Ή (DMSO-d6) δ (ppm): 0.80 (s, 6H, 2xCH3), 1.07 (d, 2H, J=12.5 Hz), 1.10 (d, 2H, J=12.5 Hz), 1.24 (d, 2H, J=12.4 Hz), 1.28 (d, 2H, J=12.5 Hz), 1.44 (m, 2H). 1.5 (d, 2H, J=12.0 Hz), 1.68 (m, 2H), 2.06 (m, 1H), 2.95 (d, 2H, J=7.0 Hz), 3.88 (m, 1H), 7.16, (br, 2H, Ar), 7.26 (m, 2H, Ar), 7.82 (brs, 1H, NH-amide), 8.14 (brs, 2H, NH2-amine). 13C (DMSO-d6) δ (ppm): 29.8 (CH), 30.4 (CH3), 32.3 (Cquat), 36.9 (CH2), 39.6 (CH2), 42.6 (CH2), 47.2 (CH2), 50.5 (CH2), 53.3 (Cquat), 54.0 (CH), 115.6 (CHAr, 3JCF=22.0 Hz), 131.6 (Cquat-Ar), 132.0 (CH-Ar, 4JCF=8.3 Hz), 162.8 (Cquat, 1JCF=243 Hz), 167.1 (CO). ESIMS: m/z: 345, [M+H]+
6. 2-амино-3-фенилпропан-N-(3’,5’-диметиладамантан)-амид 1H (DMSO-d6) δ (ppm): 0.78 (br, 3H, H-2’), 1.33 (m, 3H, H-2a), 1.41 (m, 3H, H-2b), 1.426 (s, 9H, tBu), 1.560 (m, 3H, H-4b), 1.66 (m, 3H, H-4a), 2.99 (dd, 1H, 3J=9.6, 2J=13.5, CH2, PheAla), 3.11 (dd, 1H, 3J=6.2,2J=13.8, CH2, PheAla), 3.59 (m, 1H, H-3’), 4.24 (br q, 1H, CH, PheAla), 5.20 (br, 1H, NH), 5.41 (br, 1H, NH), 7.23 (m, 3H), 7.30 (t, 2H). 13C (DMSO-d6) δ (ppm): 14.2 (СН3, C-2’), 28.2 (Mem C-3), 36.9 (CH2, C-4), 38.1 (CH2, C-2), 38.2 (Mem-CH2, C-2), 38.2 (PheAla-CH2), 53.0 (CH, C-l’), 56.2 (Mem-CH), 126.9 (Ph), 128.7 (Ph), 129.4 (Ph), 170.2 (CO). ESI-MS: m/z: 326, [M+H]+
7. 2-амино-3-(4-хидроксифенил)пропан-N-(3”,5”-диметиладамантан)-амид 1H-NMR: (DMSO-d6) δ (ppm): 0.75. (d, J=6.7 Hz, 3H, H-2’, D2), 0.93 (d, J=6.7 Hz, 3H, H-2’), 1,49 (3H, H-4b), 1,57 (3H, H-4a’), 1.84 (br, 3H, H-3, D1), 2.87 (m, 2H, CH2, D1+D2), 3.44 (D1+D2) 3.93 (m, 1H, CH, D2), 6.69 (m, 2H, Ar, D1), 6.70 (m, 2H, Ar), 7.04 (m, 2H, Ar), 7.01 (m, 2H, Ar), 7.78 (d, 1H, J=9.4 Hz, NH - amide), 7.89 (d, 2H, J=9.4 Hz, NH - amide), 8.12 (br., 1H, NH2); 13C-NMR: (DMSO-d6) δ (ppm): 13.6 (CH3, D2), 13.9 (CH3), 27.5 (CH) 27.6 (CH), 37.5 (C-4), 37.6 (C-4), 37.5 (C-2), 37.6 (C-2), 52.7 (CH), 53.6 (CH), 53.5 (CH), 115 (CH-Ar), 130.4 (CH-Ar) 130.2 (CH-Ar), 156.5 (Cquat), 167.1 (CO); ESI-MS: m/z: 343, [M+H]+
8. 2-(аминометил)-1,3-тиазол-4-карбокси-N-(3’,5’-диметиладамантан)-амид 1H-NMR (CDCI3) δ (ppm): 1.12 (m, 2H), 1.26 (d, 2H, J=12.6 Hz), 1.32 (dd, 2H, J=2.8 Hz, J=12.5 Hz), 1.55 (d, 2H, J=11.9 Hz), 1.60 (d, 2H, J=11.6 Hz), 1.77 (d, 2H, J = 2 Hz) 2.09 (m, 1H), 3.45 (s, 2H), 4.39 (d, 2H, CH2), 7.25 (s, 1H, NH), 8.04 (br t, 1H, NH), 8.95 (s, 1H, CHThz). 13C (DMSO-d6) d (ppm): 171.9 (COamide), 156.2 (C-Thz), 150.6 (C-Thz), 123.6 (CH-Thz), 79.9 (C), 50.6 (CH2), 47.4 (CH2), 42.7 (CH2), 42.4 (CH2), 29.6 (CH), 35.7 (CH2), 38.1 (CH2), 29.6 (CH). ESI-MS: m/z: 320, [M+H]+
9. 2-(аминометил)-1 ’,3’-тиазолил-4’-2-(1,3-тиазол)-4-карбокси-N-(3”,5”-диметиладамантан)-амид 1HNMR (CDCI3) δ (ppm): 0.79 (s, 6H, CH3), 1.18 (m, 2H), 1.31 (d, 2H, J=13.2 Hz), 1.39 (d, 2H, J=12.9 Hz), 1.81 (m, d, 2H, J=12.2 Hz), 1.71 (m, d, 2H, J=10.6 Hz), 1.99 (m, 2H), 2.16 (m, 1H), 4.26 (t, 1H, J=6.5 Hz), 4.42 (d, 2H, J=6.2 Hz), 4.53 (d, 2H, J=6.7 Hz), 7.34 (t, J=7.5 Hz, 2H), 7.43 (t, J=7.5 Hz, 2H), 7.45 (s, 1H), 7.72 (d, J=7.7 Hz, 2H), 7.91 (d, J=7.7 Hz, 2H), 8.26 (s, 1H), 8.37 (s, 1H). 13C NMR (DMSO-d6) δ (ppm): 15.2 (CH3, C-2’, D1), 15.4 (CH3, C-2’, D2), 28.4 (Mem C-3, D2), 28.6 (Mem C-3, D1), 28.1 (C(CH3)3, D2), D1), 37.1 (CH2, C-4, D2), 37.9 (CH2, C-4, D1), 38.1 (СН2, D2), 38.2 (Mem-CH2, С-2, D1), 53.3 (CH, С-1’, D1), 53.5 (CH, C-1’, D2), 56.4 (Mem-CH, D2+D1), 132.5 (C5 Thz), 147.9 (C4 Thz), 163.1 (C2 Thz). ESI-MS: m/z: 366, [M+H]+
Етапите на синтеза на съединението с формула (I), съгласно изобретението, са обобщени на Схема I подолу:
tDCCTIAHTTA
Схема I
BG 67555 Bl
Където:
BOC е Х-(трет-бутоксикарбонил);
R е изходното съединение, избрано от групата, посочена по-горе и представляващо амино киселина или пептидо миметик;
BOC- R е Вос- защитена аминокиселина или пептидомиметик.
Постигнатата по този начин химична модификация на съществуващото лекарствено средство за борба с болестта на Алцхаймер мемантин с природните аминокиселини аминоетанова киселина, 2-амино-Зметилбутанова киселина, 2-аминопропанова киселина, 3-аминопропанова киселина, 2-амино-Зфенилпропанова киселина, 2-амино-3-(4- хидроксифенил)пропанова киселина, неприродната аминокиселина 2-амино-3-(4-флуорофенил)пропанова киселина и пептидомиметиците 2-(аминометил)-1,3-тиазол-4карбоксилна киселина и 2-(аминометил)-Г,3’-тиазолил-4’-2-(1,3-тиазол)-4-карбоксилна киселина, води до получаването на ново съединение, което в условията на организма се хидролизира и се разделя на двете участващи компоненти: компонент 1 - мемантин и компонент 2 - съответната аминокиселина или пептидомиметик. По този начин в организма се създават условия новосинтезираното съединение да действа както като NMDA-рецепторен антагонист, така и като транспортна молекула, улесняваща преминаването на мемантина през клетъчната мембрана, когато втората компонента е аминокиселина или антимикробен агент, както и когато втората компонента е модифицирана аминокиселина или пептидомиметик. Така съединението, съгласно настоящото изобретение, е едновременно ефективно, както за преодоляване на развиваща се инфекция, причинена от клинично значими, условно патогенни бактериални видове и гъби, така и при лечение на Болестта на Алцхаймер.
Изобретението се илюстрира със следните примерни изпълнения без да ограничават неговият обхват.
Пример 1: Получаване на 2-амино-3-(4-флуорофенил)пропан-Х-(3”,5”-диметиладамантан)-амид, съгласно изобретението.
За получаване на съединение 2-амино-3-(4-флуорофенил)пропан-М-(3”,5”- диметиладамантан)-амид, 10 mmol Х-(трет-бутоксикарбонил)-2-амино-3-(4-флуорофенил)пропанова киселина се разтварят в 3 ml диметилформамид при стайна температура и непрекъснато разбъркване. Към този разтвор се добавят 10 mmol триетиламин (TEA) и 14 mmol от свързващия реагент дициклохексилкарбодиимид (ДСС). В отделен съд 11 mmol мемантин хидрохлорид се разтварят в 2 ml диметилформамид и след двадесет минути след приготвянето на първия разтвор, разтворите се смесват. Ходът на реакцията се следи хроматографски. Продължителността на реакцията е около 7 часа. След приключването й се извършва двукратно промиване с разтвор на 5% NaHSO3, разтвор на 5% NaHSO4 и еднократна промивка с вода. Органичният слой се суши с безводен Na2SO4, след което се филтрува, а разтворителя се изпарява. Продуктът (Х-(трет-бутоксикарбонил)-2-амино-3-(4флуорофенил)пропан-Х-(3”,5”-диметиладамантан)-амид) се изолира.
Към получения и изолиран №(трет-бутоксикарбонил)-2-амино-3-(4-флуорофенил)пропан-№ (3”,5”диметиладамантан)-амид, охладен до 0°С, се прибавя на капки трифлуороцетна киселина. Разтворът се разбърква при 0°C до пълното премахване на защитната (трет-бутоксикарбонил) група. Процесът се следи хроматографски. Разтворителите се изпаряват, след което се добавят трикратно 30 ml диетилов етер с последващо изпаряване. Към полученият маслообразен продукт се добавят няколко капки етилацетат и около 10-20 ml диетилов етер. В резултат на обработката се получават кристали трифлуорацетатна сол на 2 -амино-3(4-флуорофенил)пропан-№(3”,5”-диметиладамантан)-амида. Разтворителите се изпаряват и към кристалите се добавя 3 ml вода, 1 ml метанол и 1 ml ацетонитрил. Към получения разтвор се добавя 25%-ен амоняк до достигане на pH 7.5-8. Следва неколкократна екстракция с етилацетат, сушене на органичния слой с безводен Na2SO4, филтруване и изпаряване на разтворителя. Получените кристали се пречистват чрез колонна хроматография.
Полученият продукт е 2-амино-3-(4-флуорофенил)пропан-N-(3”,5”-диметиладамантан)-амид - свободна база. Добив 2002,5 mg (45%).
Полученото съединение е с наименование по IUPAC: 2-амино-3-(4-флуорофенил)пропан-N- (3”,5”диметиладамантан)-амид.
1Н (DMSO-d6) δ (ppm): 0.80 (s, 6Н, 2хСН3), 1.07 (d, 2Н, J = 12.5 Hz), 1.10 (d, 2Н, J = 12.5 Hz), 1.24 (d, 2H, J = 12.4 Hz), 1.28 (d, 2H, J = 12.5 Hz), 1.44 (m, 2H). 1.5 (d, 2H, J = 12.0 Hz), 1.68 (m, 2H), 2.06 (m, 1H), 2.95 (d, 2H, J = 7.0 Hz), 3.88 (m, 1H), 7.16, (br, 2H, Ar), 7.26 (m, 2H, Ar), 7.82 (brs, 1H, NH-amide), 8.14 (brs, 2H, NH2amine). 13C (DMSO-d6) δ (ppm): 29.8 (CH), 30.4 (CH3), 32.3 (Cquat), 36.9 (CH2), 39.6 (CH2), 42.6 (CH2), 47.2 (CH2), 50.5 (CH2), 53.3 (Cquat), 54.0 (CH), 115.6 (CHAr, 3JCF = 22.0 Hz), 131.6 (Cquat-Ar), 132.0 (CH-Ar, 4JCF = 8.3 Hz), 162.8 (Cquat, 1JCF = 243 Hz), 167.1 (CO). ESI-MS: m/z: 345, [M+H]+
Пример 2: Невропротективно действие на мемантинови производни, съгласно изобретението
Биологични изследвания in vitro
Резултатите от in vitro изследванията показват, че изследваните производни имат благоприятен невропротективен ефект. Те подържат жизнеспособността на невроналните клетки, въпреки цитотоксичността, индуцирана от бета амилоида. В сравнение с контролната група клетки, третирани с мемантин, 2-амино-3-(4флуорофенил)пропан-N-(3”,5”-диметиладамантан)-амид демонстрира сравнително еквивалентен невропротективен ефект при наномолни концентрации, докато 2-амино-3-фенилпропан-N-(3”,5”диметиладамантан)-амид и 2-амино-3-(4-хидроксифенил)пропан-N-(3”,5”-диметиладамантан)-амид показват много по-добър невропротективен ефект. От Таблица 1 по-долу е видно, че сред тестваните съединения, ароматните аминокиселинни аналози притежават еквивалентен, а в някои случаи дори по-добър невропротективен ефект спрямо контролните, в сравнение с тези на алифатните аминокиселини.
Таблица 1: Невропротективен ефект на мемантинови производни.
| Съвлннвния | Cli’-ECta (нМ) | CoCIj.ECm | LPS(TNF-n} ЧСи (μΜ) | LPSjILi) WM1 |
| Миин4 m | 3.34410^1 ΟΜΗίΡ | 01U1 ±0.047 | 0 0Ш £ о 017 | 014361 0 Dt17 |
| ммнмтян-щз.а- Дим ттвдам а нпа н] - аммд | ίϊ47± 1 ВЗ | α 7434 i 0 Ίίί& | 21.75±ЗВ8 | 26 KJtDM |
| IT,5-диМегмп»лзч»гт>»1зиид | «Д7± s.a | 0.230B±DDM | Ή.234 3.t8 | Μ77±&66 |
| 4 и мгтнпад е кчн т» ϊ-ям ид | 4l.09t319 | Μ9Ϊ±Τ44 | 321713^ | 3D 2215.19 |
| 3-aMWro· npmaw- 4-)3,5- | 33.1715 54 | (ЩЦКММТ | 4Ϊ ίί ± 1 29 | «2 3914 9? |
| 2-а мимо 3-Г4- * п у ил| прала н N (ЗЛ^-дом^йлвдомвигвн·)- | 1 o вехю= | 04141 1-3.055 | влам ± оди | 0 ΪΪ70 t 0 K>7X |
| ^амммр-з-фвчнглрапанМ-^.б-ИМ^иЛАДамш-п*·) амид | DWE5 | MiTitaow | ||
| КМДДОмШфЬ ИЛ | π ра пам М |3Т-днуетшчдаийнтлм)· лмид_____________ ____ | Д-яе-ю» ΙΜί | D БбМ 1 001В9 | msiujwih | 1 |
BG 67555 Bl
Cir-EGo обозначава ефективната концентрация на изследваното съединение при индуцирана от бета амилоид (Αβ) цитотоксичност, стимулирана от медни йони.
C0CI2-EC5O обозначава ефективната концентрация на изследваното съединение при индуциране от бета амилоид (Αβ) цитотоксичност, стимулирана от кобалтов дихлорид.
LPS(TNF-a)-IC5o обозначава инхибиращата концентрация на изследваното съединение при индуциране от тумор-некротизиращ фактор алфа (TNF-a) цитотоксичност, стимулирана от липозахариди. '
LPS(IL-6)-IC5o обозначава инхибиращата концентрация на изследваното съединение при индуцирана от интерлевкин - 6 (IL-6) цитотоксичност, стимулирана от липозахариди.
Пример 3: In vitro тестване за антимикробна активност на мемантинови производни
На изследване са подложени следните мемантинови производни, номерирани както следва:
1. аминоетан-М-(3,5-диметиладамантан)-амид;
2. 2-амино-3-(4-флуорофенил)пропан-М-(3”,5”-диметиладамантан)-амид;
3. 2-амино-З-метилбутан-М-(3 ’,5 ’-диметиладамантан)-амид;
4. 3 -амино-пропан-N-(3 ’ ,5 ’ -диметиладамантан)-амид;
5. 2-(аминометил)-1,3-тиазол-4-карбокси-К-(3 ’,5’-диметиладамантан)-амид
Тест култури
Моделните тест култури са от НБПМКК и колекция на Биологически факултет при СУ „Св. Климент Охридски“.
• Бактерии: За експериментите са използвани Грам положителни и Грам отрицателни клинично значими условно патогенни бактерии Escherichia coli НБПМКК 3397, Salmonella enterica НБПМКК 8691, Staphylococcus aureus НБПМКК 6538 и Bacillus megaterium БФ 145. Тест културите са изготвяни чрез посев в хранителна среда месо-пептонен бульон (МПБ) със състав (g/L): 5 пептон, 3 говежди екстракт, 5. NaCI, pH 7.0 и култивирани за 16 часа при Т = 37°С. Използвани са култури с плътност OD585 = 0.5 McF (стандарт за оптична плътност по Макферланд).
• Дрождеви микроорганизми: Тест културите Rhodotorula sp. БФ 16-25 и Candida lusitniae БФ 74-4 са изготвяни чрез посев в течна хранителна среда YPD със състав (g/L): 20 глюкоза, 10 пептон, 5 дрождев екстракт и култивиране на клатачен апарат при 220 rpm за 16 h, при Т = 28°С. Използвани са работни култури с плътност OD585 = 0.8 McF.
Методи: Качествен анализ на антимикробна активност - метод на дифузия в агар
Бактериалните и дрождеви тест култури се изготвят, както е описано по-горе.
Бактериалните култури се инокулират дълбочинно, а дрождевите-повърхностно в съответните агаризирани хранителни среди при концентрация 1 ml тест култура за бактериите и 0.1 ml за дрождите към 15 ml подходяща хранителна среда. След посев, в хранителните среди се правят ямки с диаметър 9 mm, в които се поставят по 50 μΐ от изследваните проби. След инкубиране за 1.5 h на 4°С за дифундиране на пробата се провежда култивиране за 24 - 48 h при 28/37°С.
Ефективността на изследваните съединения в концентрации от 10 mМ се определя чрез измерване на зоната на инхибиране (в mm) и сравнява с тази на контролите DMSO, мемантин и търговски препарати тетрациклин и нистатин (30 μg/disk) и немдатин (мемантин-HCI, 10 mg/tablet).
Количествен анализ на антимикробна активност: определяне на минималната инхибираща концентрация (МИК)
Тест културите са приготвени, както е описано по-горе. От 10 mМ мемантинови конюгати са приготвени поредица разтвори с двукратно намаляващи концентрации. Аликвоти (20 μl) от тези разтвори се накапват върху петриеви панички с тест култури и инкубират 24/48 h на оптимална за микробния вид температура. Отчитат се зоните на инхибиране и се определя МИК.
Влияние на клетъчната плътност на бактериалните култури върху инхибиторния ефект на изследваните МЕМ-конюгати
Тест култури се приготвят, както е описано по-горе с начална концентрация 0.1,0.3 и 0.5 McF. Към всяка култура се добавя по 0.5 ml 1 шМ разтвор на тестваните конюгати. Пробите се инкубират на 37°С. Измервания на OD585 се извършват на 2, 3, 4, 5, 6 и 7 h от инкубирането. Резултатите от изпитването, съгласно настоящия пример са представени на Таблици 2, 3 и 4 по- долу. От всички изследвани субстанции, вещества № 1 - 5 проявяват инхибиторен ефект към отделни тест-микроорганизми. Вещество № 3 оказва по-голяма ефективност към Грам-отрицателните бактерии, а към Грам-положителните, повлиява растежа само на В. megaterium БФ 145. Съединение № 4 оказва ефект единствено по отношение растежа на S. enterica НБПМКК 8691, а № 5 има по-добър инхибиторен ефект срещу Грам-положителните бактерии. Наблюдава се видова специфичност по отношение на ефекта на различните производни на мемантина, с изключение на конюгат № 2, който е ефективен към всички изследвани щамове. Инхибиторният му ефект е съизмерим с този на положителните контроли търговски препарати тетрациклин и нистатин.
Оценката на ефекта на клетъчната плътност на моделните бактериални култури върху инхибиторния ефект на изследваните МЕМ-конюгати дава възможност да се изведе модел на преживяемостта на щамовете, представен на Таблица 3. Физиологичният показател преживяемост нараства право пропорционално с повишаване на начална концентрация на бактериалния инокулум. За период от 5 h, когато нетретираната култура навлиза в стационарна фаза, в пробите се наблюдава потискане на растежа в различен обхват. Той е специфичен както по отношение на изпитваните вещества, така и по отношение на видовата принадлежност на тест културите. Най-чувствителна е S. enterica НБПМКК 8691 към вещество № 2, при която се регистрират най-ниски стойности на преживяемост на културата.
Таблица 2: Антимикробна активност на мемантинови производни
| Г рам-отрицателни бактерии | Грам- папажитвЛНН бактерии | ДрСЖДОРН МйКР^Аргвннмн | ||||
| Съединение· Ns | $ en№rJVa НЕПМКК №91 | Е eati НБПМКК 3397 II | Si. aureus НБПМКК 6518 | В. 6Ф145 | ЕФ 16-26 | Canada tuatlniae БФ 74-4 |
| 1 | НС | Ht | не | не | чй | не |
| 2 | 20 | 22 | 21 | 22 | 2S | 23 |
| 3 | 11 | 11 | не | 16 | на | не |
| 4 | 16 | не | не | не | не | не |
| 5 | не | 13 | 10 | 16 | не | |
| MEM-HCI | не | не | « | не | че | нй |
| МЕМ | не | нй | не | Ηΐ | не | Нй |
| 2-ам1+но-3-^флудраф&ил)пр млюм киселина | № | не | не | ме | не | Нй |
| □MSO | мй | не | не | не | не | ме |
| Твтрациклим | 26 | 26 | 34 | 34 | - | - |
| Пилата | - | - | - | - | 26 | 24 |
*На съединенията, номерирани от 1 до 5 съответстват:
1. аминоетан-М-(3,5-диметиладамантан)-амид;
2. 2-амино-3-(4-флуорофенил)пропан-М-(3”,5”-диметиладамантан)-амид;
3. 2-амино-З-метилбутан-М-(3 ’,5’-диметиладамантан)-амид;
4. 3 -амино-пропан-N-(3 ’ ,5 ’ -диметиладамантан)-амид;
5. 2-(аминометил)-1,3-тиазол-4-карбокси-К-(3 ’,5’-диметиладамантан)-амид.
Зоните на инхибиране на растежа на тест микроорганизмите са представени в mm и включват ямката за нанасяне на пробата; „не”- не се наблюдава зона на инхибиране.
Таблица 3: Минимална инхибираща концентрация (МИК) на мемантинови производни
BG 67555 Bl
| Г рам-отрнцат&лн н £внтврии | Г рам-положителни бактерии | Дрождеви микрпорганими | ||||
| С>.ФД. № (гпМ| | 5. frtWTJ НБПМКК №91 | Е eoft НЕПМКК 3397 П | SL aureus НБПМКК 6W6 | В msgaranum БФ 145 | ар. Б® 16-16 | ЕФ 74-1 |
| 1 | 1 25 | 6 | 0 | 1.25 | 0 | 0.3125 |
| 2 | 0 156 | 1 25 | 1 25 | 0.625 | 0.Q7B | 0 076 |
| 3 | 1 25 | 5 | 10 | 25 | 0 | 0 3125 |
| 4 | 0 | 10 | 0 | 0 | 0 | 0 076 |
| 5 | 5 | 5 | 10 | 10 | 1.25 | 0 3125 |
- няма зона на инхибиране;
МИК на съединенията е представена в тМ.
Таблица 4: Модел на преживяемостта на условно патогенни бактерии спрямо изследваните вещества; култивиране - 5 h.
| Съедин. QDms | Прежиаяемост | ||||
| Е. cofi НБПМКК 3337 | НБПМКК 8631 | St iwwi неп»ккб53« | В. megaterlum БФ 145 | ||
| t | 0.1 0 з 0 5 | 5 36 | 16.05 | Μ.4θ | 16 6? |
| t Б7 | 17.65 | 56.35 | 20. W | ||
| 26 | 25 | 55 | 0 | ||
| 2 | 0 1 0 3 0 S | □ | 0 | 0 | 0 |
| 0 | 0 | 0 | 0 | ||
| □ | 0 | 5 | 0 | ||
| 3 | 0 1 0.3 0 5 | 5 26 | 0 | 15.38 | 16 67 |
| 26 67 | 11 76 | 31.52 | О | ||
| 53 Μ | 625 | 40 | 0 | ||
| 1 4 | 0 1 0 3 0.5 | 21 05 | 0.52 | 19.23 | 0 |
| _______ь 30_____ 40 | 11.76 31 26 | 54 55 25 | 33.33 [} | ||
| 1 5 | 0 1 03 05 | 21 05 | а | 15.35 | 15.Б7 |
| 33 33 | 5 56 | 36.36 | 0 | ||
| 46 57 | 6 26 | 35 | 80 |
BG 67555 Bl
Пример 4. In vitro тестване антимикробна активност на 2-амино-3-(4-флуорофенил)пропан-Х- (3”,5”диметиладамантан) -амид
Тест култури.
Моделните бактериални и дрождеви тест култури и тяхното изготвяне са както в Пример 3. Тест култури от филаментозните гъби Fusarium graminearum - НБПМКК 2294 и Penicillium claviforme БТ 136 са изготвяни чрез посев върху хранителна среда картофено - глюкозен агар (КГА) със състав (g/L): 200 картофи, 10 глюкоза, 15 агар и култивиране за 5 дни при Т = 28°С.
Методи:
Качественият анализ за антибактериална и антидрождева активност на 2-амино-3-(4флуорофенил)пропан-Х-(3”,5”-диметиладамантан)-амид в концентрации от 0,1 mM, 1 тМ и 10 тМ е проведен, както е описано в Пример 3. За качествена оценка на активността срещу филаментозни гъби се изготвят спорови суспензии от пет дневни култури върху КГА в концентрация 1 х 105 spores/ml, определени чрез броителна камера на Бюргер. Антигъбният ефект се оценява чрез инокулиране на свежа хранителна среда КГА (15 ml) в натриева паничка с 3 μΐ от съответната спорова суспензия и култивиране за 5 дни при 28°С. Инхибирането на радиалната скорост на растеж (Кг) на гъбните култури, измерена като увеличение на диаметъра на гъбната колония (mm) за единица време (h) се изчислява, като процент от тази на нетретирана контрола. Положителна контрола е търговският фунгициден препарат топсин.
Определяне на минимална бактерицидна концентрация (МБК)
Минималната бактерицидна концентрация е оценена по следната схема: в МПБ, съдържащ различни концентрации на 2-амино-3-(4-флуорофенил)пропан-М-(3”,5”-диметиладамантан)-амид (10 mM, 1 тМ, 0.5 тМ, 0.01 тМ) се инокулират 10 μΐ от изследваната тест култура с OD585 = 0.5 McF. Пробите се инкубирани за 24 h при оптимална за микробния вид температура. След инкубацията, епруветките са прегледани за наличие на растеж. От последната епруветка без видим растеж се изготвят разреждания 1:1 и 1:10, 1:100 и 1:1000. Последните са инкубирани при същите условия за 24 h. След това 10 μΐ от всяка епруветка се посява върху МПА, инкубира се за 24 h и проверява за наличие/липса на растеж за определяне на минимална бактерицидна концентрация.
„Time-kill“ тест за оценка на бактериостатичен/бактерициден ефект.
Тест културите се приготвят, както е описано в Пример 3 с начална концентрация 0.1,0.3 и 0.5 McF. Към всяка култура се добавя по 0.5 ml 1 mM разтвор на 2-амино-3-(4-флуорофенил)пропан-М-(3”,5”диметиладамантан)-амид. Пробите се инкубират на 37°С. Измервания на OD585 се извършват на 2, 3, 4, 5, 6 и 7 h от инкубирането. В пробите се определят CFU/ml (xi) и се сравняват с данните за контрола (без инхибитор) от същия час (хк). Резултатите се интерпретират по следната схема: при xi > хк - съединението стимулира растежа на микроорганизмите; при xi = хк - съединението няма ефект; при xi = CFU/ml преди инкубирането ефектът на съединението е бактериостатичен; при xi < хк - ефектът на съединението е бактерициден.
Резултатите от изпитването, съгласно настоящия пример, са представени на Таблици 5 и 6 по-долу и се илюстрират с приложената Фигура 1, представяща динамиката на растеж на S. enterica НБПМКК 8691 в присъствие на 1 mM 2-амино-3-(4-флуорофенил)пропан-М-(3”,5”-диметиладамантан)-амид. При 0.1 mM 2амино-3-(4-флуорофенил)пропан-М-(3”,5”-диметиладамантан)-амид, инхибиторен ефект върху бактериалния растеж не се наблюдава, при 1 mM такъв се регистрира срещу St aureus НБПМКК 6538 и В. megaterium БФ 145, а при 10 mM се потиска растежа на всички изследвани бактериални видове. Определянето на МИК в Пример 3 показва, че най-чувствителен е видът S. enterica НБПМКК 8691 (МИК = 0.156 mM), следван от В. megaterium БФ 145 (МИК = 0.625 mM). За S. enterica НБПМКК 8691 МБК = 0.3 mM.
„Time-kill“ тестът на 2-амино-3-(4-флуорофенил)пропан-М-(3”,5”-диметиладамантан)-амид, проведен с най-чувствителния бактериален вид - Salmonella enterica НБПМКК 8691 показва бактерициден ефект и 100% инхибиране на бактериалния растеж след 7 h култивиране в присъствие на изследваното веществото. За същия период контролата достига клетъчна плътност над 6 х 108 CFU/ml.
Таблица 5: Антимикробна активност на 2-амино-3-(4-флуорофенил)пропан-М-(3”,5”-диметиладамантан)амид
BG 67555 Bl
| Грам-отрицателни бактерии | Грам- положителни бактерии | Дрождеаи μ и крй й рган нмй | ||||
| 4)eHMnanaHMnij4-FJl-N ди иетнп-ядама-нтан Ьамид (mM) | S. enterica НБПМКК 6691 | Е. ton НБПМКК 3397 а | Sf. awius НБПМКК 6536 | а megaterium ЕФ | ufa sp БФ 16-25 | fusrinide ЕФ 744 |
| 0 1 | не | МС | МИ | НС | не | не |
| 1 | нЕ | НС | а | 12 | не | не |
| ιΰ | м | 22 | 21 | 22 | 2& | 23 |
| не | не | МИ | нй | че ‘ не | ||
| МЕМ | не | не | на | не | не | не |
| 2-амнно-3-<4флуорпфенкН} пр&чамОМ мимиина | не | не | НЕ | не | не | не |
| не | Mfr | не | не | не | НС |
Зоните на инхибиране на растежа на тест микроорганизмите са представени в mm и включват ямката за нанасяне на пробата; „не”- означава, че не се наблюдава зона на инхибиране.
Ha Таблица 6 по- долу е показан силно изразен инхибиторен ефект на 2-амино-3-(4-флуорофенил)пропанМ-(3”,5”-диметиладамантан)-амид върху растежа на филаментозните фунги. Той е в обхват 9.5% при Penicillium chaviforme БТ 136 и 39.4% при Fusarium graminearum НБПМКК 2294.
Таблица 6: Инхибиране радиалната скорост на растеж на филаментозни гъби от 2-амино-3-(4флуорофенил)пропан-М-(3 ”,5”-диметиладамантан)-амид
| Час (И) | PenidiHum ctiavifofme d (mm) | Fusarium ^minaarum d | ||||||
| K | Толсин | DMSO | N2 | K | Топени | □ MSO | N2 | |
| 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
| 24 | 5.5 | ол> | 3.5 | 6.6 | 6.5 | 15.0 | 21,0 | 7,0 |
| 43 | 11.5 | (№ | 13,5 | 1П.5 | 25.6 | 39.D | 39.0 | 35.0 |
| 72 | 16.0 | two | 13,5 | 14.5 | 50.5 | 44.0 | 66.0 | 46.0 |
| 93 | 21,0 | № | 23,0 | 19.5 | 70 5 | 47,0 | 92,5 | 43.0 |
| 120 | 25,0 | Djli | 27,0 | 210 | 55.0 | 50,0 | Θ5Ό | 52.0 |
| Кг [тпим) | 0.21 | 0 | 022 | 0.19 | 0.71 | 0.42 | 0.71 | 0 43 |
BG 67555 Bl
Физико-химични характеристики
Рентгеноструктурен анализ
Понастоящем, рентгеноструктурен анализ е водещият метод, даващ еднозначна информация за структурата на веществата в твърдо състояние. Методът изисква източник на монохроматично лъчение, монокристал или поликристал (прах), гониометрична система и детектор на рентгенови лъчи. Лъчението се насочва към кристалите, като по този начин се получават снопове отразени лъчи който се регистрират от детектора. Комбинацията от дифракционен интензитет и положението му (рефлекс) генерира набор от рефлекси, които са специфични за всеки кристален материал. Рентгеноструктурният анализ използван за доказване на кристалната структура на веществата беше проведен на апарат Supemovadual, Oxford diffraction или D2Phasr Bruker, при стайна температура на образците с Мо или Си лъчение.
Диференциален термичен анализ (ДТА, DTA)
ДТА се използва за измерване на ендотермични или екзотермични ефекти свързани с преходи (фазови и др.) във функция от температурата. Преходите включват кристализация, аморфизация, десорбция, топене и сублимация. Експериментът се провежда в контролирана атмосфера (въздух). Базира се на отчитане на разликата между температурата на изследваното вещество и тази на еталон. Чрез ДТА може да се определя температура на топене на органични молекули.
Термогравиметричен анализ (ТГА, TGA)
ТГА измерва промяната на теглото на веществата, като функция от температурата и/или времето. Найчесто този метод се употребява за определяне на тегловни промени свързани с разлагане, окисление или абсорбиране на влага и т. н. Диференциалния термичен анализ (ДТА) и термогравиметричния анализ (ТГ) бяха проведени на апарат STA (Simultaneous thermal analyzer) Stanton Redcroft 1500. Условия на експеримента: нагряване от стайна температура до 250°С, със скорост на покачване на температурата - 5°C.min·1; продухващ газ-въздух.
ДТА кривата на 3-амино-пропан-Х-(3’,5’-диметиладамантан)-амид, представена на Фигура 2а, показва два ефекта при 160°С и в областта 200-250°С. Тези ендо ефекти отговарят съответно на стапяне (фазов преход) на кристалната структура и последваща деструкция. При ТГА се наблюдава рязък спад в теглото на пробата (80%), започващ от около 215°С. При охлаждането не се регистрират ефекти свързани с кристализация. ДТА и ТГА кривите на 2-амино-3-(4-флуорофенил)пропан-Х-(3”,5”-диметиладамантан)-амид, представени на Фигура 2Ь, отново показват два ендо ефекта, свързани със стапяне (-150°) и деструкция (~210°С) съпроводена с тегловни загуби.
Праховият рентгеноструктурен анализ на веществата, представен на Фигура За и ЗЬ, показва еднозначно наличие на една фаза при 3-амино-пропан-Х(3’,5’-диметиладамантан)-амид, и 2-амино-3-(4флуорофенил)пропан-Х-(3”,5”-диметиладамантан)-амид. При разтваряне и последващо изпарение на разтворителя, кристалната фаза се запазва, като степента на кристалност нараства, докато аморфното хало на практика изчезва.
Данните от термичния и праховия рентгенофазов анализ разкриват стабилността на веществата, липса на фазови преходи във функция от температурата (термична стабилност) и липса на фазови преходи след разтваряне (липса на полимоорфизъм).
Решени са и кристалните структури на 3-амино-пропан-Х-(3’,5’-диметиладамантан)-амид и 2-амино-3-(4флуорофенил)пропан-Х-(3”,5”-диметиладамантан)-амид. Таблица 7 по-долу представя основните данни за кристална структура на мемантиновите аналози. Докато съединението 3-aMHHO-nponaH-N-(3’,5’диметиладамантан)-амид кристализира в центросиметрична пространствена група (P2i/c, No 14), то 2-амино3-(4-флуорофенил)пропан^(3”,5”-диметиладамантан)-амид кристализира в нецентросиметрична пространствена група (P2i2i2i, No 19). Именно с наличието на рацемична смес и липсата на такава могат да се обяснят разликите в наблюдаваните антимикробни активности.
Таблица 7: Данни за кристалната структура на мемантиновите производни
BG 67555 Bl
| Вещество | duMBmunaddMiHntaMj-einird | i-W μ и g - 3-/4 л y op σ Ш1 Jirp ο л w-ft- |
| Темперятурв/К | гзвд | 290(21 |
| Кристала система | monoclinic | Drthar horn tin |
| Прастммствеиа rpvns | P2,>c | P2,2,2i |
| а/А | 15 6374(10) | 5.9402(6) |
| Ь/А | 11 5090(6) | 10 4856(7} |
| с/А | to 9889(8) | 35 454(3) |
| of' | SO | 90 |
| μ* | 110.205(0) | 90 |
| уГ | SO | 90 |
| Обеи/А’ | 1920.4(2) | 25800)4) |
| 2 | 4 | |
| t 260 | 1 227 | |
| uTmirr1 | 0.105 | D.1Q2 |
| F(000) | 776.0 | 1ИВ0 |
| Pijuep на KpMcrana?mmJ | 3.3 «015« 0.15 | 93^02 = 015 |
| Лъчение | MoKo (λ = 0 71073) | MdKd (λ = 0.7)073) |
| 2$ range for dets wlfection/ | 5.522 to 60. M6 | 5.982 id 57.35 |
| Събрани рефлекси | M11 | 9244 |
| Независими рефлеосм | 3370 [R* = 0.0634] | 5265 = 0 0&BB[ |
| D0tB/teslFainl3/piarBmetes | 337orara29 | 5265/37,331 |
| Емфтегз-рГ-ГЦ ОП FT | 1.038 | 0.957 |
| Fmai fl indenes [>=2σ да | R, = 0.0693, wRa = 0 2410 | 0 0855. wRT =0 2062 |
| Final R indexes [all (fata] | R, = 0 >608. wR; = 0 3960 | R, =0.2169 wR_- =0.2762 |
| Large-il iff рвакЛнЯв / e AJ | Ο.32Λ0.3Ο | 0 7Щ-0 18 |
Данните от изследванията по-горе показват, че съединението, съгласно настоящото изобретение е стабилно в условията на стомашно-чревния тракт (pH 1.0 и pH 7.4), като най- добра антибактериална ефективност както към Грам-отрицателните, така и към Грам-положителните бактерии проявява съединение 2-амино-3-(4-флуорофенил)пропан^-(3”,5”-диметиладамантан)-амид. Инхибиторният му ефект е съизмерим с този на положителната контрола търговски препарат тетрациклин. Антибактериалната активност на съединения 2-амино-3-метилбутан-№(3’,5’-диметиладамантан)-амид и 2-(аминометил)-1,3-тиазол-4карбокси-N-(3’,5’-диметиладамантан)-амид е съизмерима, но по-ниска и варира между 10 и 16 mm зона на инхибиране. Съединението 3-амино-пропан-N-(3’,5’-диметиладамантан)-амид демонстрира ефект само срещу S. enterica НБПМКК 8691, а при съединение 2-(аминометил)-1’,3’-тиазолил-4’-2-(1,3-тиазол)-4-карбокси-N(3,5”-диметиладамантан)-амид инхибиторен ефект не се наблюдава. Всички изследвани вещества са разтворени в DMSO. Този разтворител, 2-амино-3-(4-флуорофенил)пропанова киселина, мемантин и мемантин хидрохлорид (MEM-HCI) са заложени, като контроли на експеримента.
Сравнителният анализ на антимикробната активност по отношение на Грам-статуса на тест-бактериите показва, че веществото 2-амино-3-метилбутан-N-(3’,5’-диметиладамантан)-амид оказва по-голяма ефективност към Грам-отрицателните бактерии, а към Грам-положителните, повлиява растежа на Bacillus megaterium БФ 145. Съединение 3-амино-пропан-N-(3’,5’-диметиладамантан)-амид оказва ефект по отношение растежа на S. enterica НБПМКК 8691, а 2-(аминометил)-1,3-тиазол-4-карбокси-№(3’,5’-диметиладамантан)амид има по-добър инхибиторен ефект срещу Грам-положителните бактерии. Наблюдава се видова специфичност по отношение на ефекта на различните производни на мемантина, с изключение на конюгат 2амино-3-(4-флуорофенил)пропан-№(3”,5”-диметиладамантан)-амид, който е ефективен към всички изследвани щамове.
При изследване на 1 тМ концентрация от мемантиновите конюгати, инхибиторен ефект на бактериалния растеж проявява вещество 2-амино-3-(4-флуорофенил)пропан^-(3,5”-диметиладамантан)-амид срещу Грамположителните St. aureus НБПМКК 6538 и В. megaterium БФ 145.
Антигъбен ефект проявява съединение 2-амино-3-(4-флуорофенил)пропан-№(3”,5”- диметиладамантан)амид. Количествено, той е съизмерим с този на положителната контрола-търговски препарат нистатин.
Експерименталните данни показват, че мемантиновите производни: аминоетан -N-(3,5диметиладамантан)-амид, 2-амино-3-метилбутан-N-(3’,5’-диметиладамантан)-амид, 3-амино-пропан-N-(3’,5’диметиладамантан)-амид, 2-амино-3-(4-флуорофенил)пропан-N-(3”,5”-диметиладамантан)-амид и 2(аминометил)-1,3-тиазол-4-карбокси-N-(3’,5’-диметиладамантан)-амид проявяват определен антимикробен ефект както срещу моделните прокариотни видове, така и срещу изследваните еукариотни култури.
Claims (1)
- Съединение с обща формула (I), където R представлява аминокиселина или пептидомиметик, избрани от групата, включваща аминоетанова киселина, 2-амино-3-метилбутанова киселина, 2-аминопропанова киселина, 3- аминопропанова киселина, 2-амино-3-фенилпропанова киселина, 2-амино-3-(4- хидроксифенил)пропанова киселина, 2-амино-3-(4-флуорофенил)пропанова киселина, 2-(аминометил)- 1,3-тиазол-4-карбоксилна киселина и 2-(аминометил)-1’,3’-тиазолил-4’-2-(1,3- тиазол)-4-карбоксилна киселина
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| BG113103A BG67555B1 (bg) | 2020-03-17 | 2020-03-17 | Nmda-рецепторен антагонист с антимикробна активност |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| BG113103A BG67555B1 (bg) | 2020-03-17 | 2020-03-17 | Nmda-рецепторен антагонист с антимикробна активност |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| BG113103A BG113103A (bg) | 2021-09-30 |
| BG67555B1 true BG67555B1 (bg) | 2023-07-17 |
Family
ID=80735357
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| BG113103A BG67555B1 (bg) | 2020-03-17 | 2020-03-17 | Nmda-рецепторен антагонист с антимикробна активност |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| BG (1) | BG67555B1 (bg) |
-
2020
- 2020-03-17 BG BG113103A patent/BG67555B1/bg unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| BG113103A (bg) | 2021-09-30 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US20220281814A1 (en) | Hdac6 inhibitors and uses thereof | |
| EP1047692B1 (en) | Methods of synthesizing and screening inhibitors of bacterial nad synthetase enzyme, compounds thereof and methods of treating bacterial and microbial infections with these inhibitors | |
| US10556856B2 (en) | Antibacterial agents | |
| Khan et al. | Syntheses of a library of molecules on the marine natural product ianthelliformisamines platform and their biological evaluation | |
| CN109952297B (zh) | 化合物 | |
| CA3160903A1 (en) | Thiazololactam compound as erk inhibitor and use thereof | |
| Li et al. | Synthesis and bioactivities of new N-terminal dipeptide mimetics with aromatic amide moiety: Broad-spectrum antibacterial activity and high antineoplastic activity | |
| CN108101780A (zh) | 一类氟比洛芬查尔酮类化合物、其制备方法和用途 | |
| AU2016306694B2 (en) | Phenylsulfonamido-benzofuran derivatives and uses thereof in the treatment of proliferative diseases | |
| CN102438612A (zh) | 腈衍生物及其药学用途与组合物 | |
| CN111170884B (zh) | 一类水杨酰胺类化合物、其制备方法和用途 | |
| US20230331679A1 (en) | Naphthalene monoimide compounds and methods thereof | |
| US11434198B2 (en) | Compounds and methods for the treatment of neurodegenerative diseases | |
| Pańczyk et al. | Synthesis and anticonvulsant activity of phenoxyacetyl derivatives of amines, including aminoalkanols and amino acids | |
| BG67555B1 (bg) | Nmda-рецепторен антагонист с антимикробна активност | |
| CN114478451B (zh) | 6-(羟基苄氧基)苯酞曼尼希碱类化合物、其制备方法和用途 | |
| CN105646439A (zh) | 一类抗真菌药物增效剂及其制备与应用 | |
| CN108285424B (zh) | 棉酚希夫碱衍生物及制备和在抗植物烟草花叶病毒病方面的应用 | |
| JP2010526133A (ja) | ３，４−ジヒドロキナゾリン誘導体 | |
| CN110003033B (zh) | 氟比洛芬查尔酮曼尼希碱类化合物、其制备方法和用途 | |
| CN110003034B (zh) | 一类羟基氟比洛芬曼尼希碱类化合物、其制备方法和用途 | |
| CN113372296A (zh) | 用于抑制多重耐药的金黄色葡萄球菌的硒啉类化合物及用途 | |
| KR19980079905A (ko) | 신규한 벤족사진디온 유도체, 이의 제조 방법 및 이의 용도 | |
| Dahiya et al. | Synthesis and antimicrobial screening of some novel halogenated phenoxyacetyl amino acid and peptide analogs | |
| JP2009503047A (ja) | 抗腫瘍性化合物 |