<EMI ID=1.1>
<EMI ID=2.1> La présente invention concerne de nouveaux dérivés phospholipidiques -de la formule définie dans la revendication 1.
Les phospholipides que l'on trouve dans la nature! _
<EMI ID=3.1>
cots de soja, de colza, d'arachide ou de tournesol, sont tour . jours constitués d'un mélange de phospholipides chimiquement
<EMI ID=4.1>
composants dominants. On sait depuis longtemps que la phosphatidylcholine ou les fractions phospholipidiques enrichies en phosphatidylcholine avec surtout des acides gras plusieurs fois insaturés ont une efficacité métabolique utile dans de nombreuses
<EMI ID=5.1>
diabète. On ne connaît cependant actuellement d'effet de ce genre que pour le glycérine-phospholipides qui contiennent de la choline. En revanche, la phosphatidyléthanolamine ne présente
<EMI ID=6.1>
sente plutôt un composant des phosphatides qui peut provoquer des effets secondaires indésirables lorsqu'on utilise des phospholipides. On sait que le groupe amino primaire de ce phosphatide peut être acylé par un anhydride d'acide polycarboxylique
<EMI ID=7.1>
priétés de solubilité. On connaît également par le brevet améri-
<EMI ID=8.1>
thine- et par les brevets anglais N[deg.] 766 394 et 974 432 ainsi que
<EMI ID=9.1>
phatides avec l'anhydride de l'acide acétique. On a trouvé des composés N-acyle d'acide gras supérieur de la phosphatidyléthanolamine en plus faible quantité dans les glycérinephospholipides que l'on trouve dans la nature et surtout dans le mélange phospholipidique des haricots de soja. Il s'agit ici de mélanges
<EMI ID=10.1>
où l'acide palmitique prédomine avec environ 65% en quantité.
On a trouvé de façon surprenante que l'on peut transformer des phosphatidyléthanolamines d'origine naturelle et synthétique par acylation avec l'acide oléique en nouvelles N-oléyl-phosphatidyléthanolamines qui présentent même à faible dose une _action anti-artérioscléro�ique ou anti-lipémique pro-noncée dans des expériences chez l'animal. Il faut considérer comme surprenant que ces effets ne s'observent nettement que
<EMI ID=11.1>
soient connus depuis longtemps comme substances faisant baisser les lipides. les spécialistes ne pouvaient donc prévoir, et il
<EMI ID=12.1>
oléyl-phosphatidyléthanolamines et rechercher leur effet antilipémiqus ou arti-artériosclérotique.
Pour préparer les dérivés N-oléyles selon l'inven- <EMI ID=13.1> des fractions phospholipidiques contenant de la phosphatidyléthanolamine, comme par exemple les phosphatides bruts ou les fractions phospholipidiques solubles ou insolubles dans l'alcool, dans un hydrocarbure aliphatique, cyclique ou chloré, ou le
<EMI ID=14.1>
composés basiques, comme la triéthylamine, la pyridine ou des
<EMI ID=15.1>
re de l'acide oléique ou selon le procédé de l'anhydride avec
<EMI ID=16.1>
Ce qui est surtout particulièrement intéressant du point de vue économique est le fait que l'on puisse utiliser des fractions phosphatides contenant de la cêphaline pour la
<EMI ID=17.1>
pour ce faire préparer facilement des mélanges phospholipidiques qui contiennent, outre la phosphatidylcholine biologiquèment
<EMI ID=18.1>
demande -et qui présentent à l'application orale une action lipémique et anti-artériosclérotique satisfaisante.
<EMI ID=19.1>
phospholipidiques selon l'invention dans des expériences effec-
<EMI ID=20.1> <EMI ID=21.1>
ceux: qui sont atteints d'une hypercholestérolémie de triton
<EMI ID=22.1>
de N-oléyl-phosphatidyléthanolamine selon l'invention par kg . de poids corporel chez les rats traités un net abissement des lipides -totaux, surtout du cholestérol et des triglycérides du sérum par rapport aux animaux témoins non traités.
Afin de préparer une forme de présentation thérapeutique orale appropriée, on peut répartir dans des capsules de gélatine molle les N-oléyl-phosphatidyléthanolamines selon l'invention après avoir ajouté par exemple de la vitamine E comme antioxydant, éventuellement, lorsqu'on a un mélange avec d'autres phospholipides, après avoir ajouté des mono-, di- ou tri-glycérides d'acides gras naturels. Pour une application orale sous forme solide on peut avoir recours à une adsorption sur par exemple de l'Aérosil ou diverses célites. Comme autres additifs pour la préparation de formes d'application solides,
on peut utiliser, outre des antioxydants comme le tocophérol ou l'acide ascorbique, le lactose, le carbonate de calcium et le stéarate de magnésium. Les préparations pharmaceutiques selon l'invention peuvent en outre contenir des colorants des aromates et des agents de conservation.
La dose de N-oléyl-phosphatidyléthanolamine à administrer quotidiennement dans une préparation pharmaceutique à
<EMI ID=23.1>
cette quantité pouvant en règle générale s'administrer en plusieurs petites doses de 50 à 500 mg par exemple 2 à 4 fois par jour..
Les exemples suivants servent à illustrer plus précisément l'invention.
<EMI ID=24.1>
au moyen d'une chromatographie sur colonne d'une fraction lécithine de -soja insoluble dans l'alcool riche en phosphatidyl- <EMI ID=25.1>
en agitant, on mélange avec une solution de 41,2 g de chlorure '
<EMI ID=26.1>
amine précipité et on retire le solvant sous vide à une tempéra** ture de bain de 60[deg.]C dans une atmosphère d'azote. Il reste la
<EMI ID=27.1>
EXEMPLE 2
<EMI ID=28.1>
<EMI ID=29.1>
<EMI ID=30.1>
avec 6,5 ml d'ester éthylique de l'acide chloroformique et au bout de 5 minutes avec une solution de 50 g de phosphatidyléthanolamine, préparée comme il est dit dans l'Exemple 1, dans 120
<EMI ID=31.1>
<EMI ID=32.1>
EXEMPLE 3
On dissout dans 800 ml de chloroforme 200 g d'une fraction phosphatide de soja soluble dans l'alcool, préparée par extraction répétée de phosphatide brut de haricots de soja
<EMI ID=33.1>
25 ml de-.pyridine, on mélange tout en agitant avec une solution
<EMI ID=34.1> forme. Après avoir agité pendant 1 h à la température ambiante
<EMI ID=35.1>
d'eau. On concentre la phase chloroforme après séchage avec du _ sulfate de sodium sous vide à 60[deg.]C de température du bain sous- . la protection d'un gaz inerte. Le mélange phosphatidique plas-
<EMI ID=36.1>
<EMI ID=37.1>
EXEMPLE 4
On dissout dans 2500 ml de n-hexane 500 g d'une fraction phosphatide de soja insoluble dans l'alcool avec une
<EMI ID=38.1>
se présente en tant que résidu dans la préparation de la fraction soluble dans l'alcool décrite dans l'Exemple 3, et après avoir ajouté 47 ml de triéthylamine, on mélange tout en agitant avec une solution de 52 g de chlorure de l'acide oléique dans
75 ml de n-hexane. Après avoir agité pendant 1 h à la température ambiante on sépare par filtration le chlorhydrate de triéthylamine précipité et on concentre la solution sous vide à
<EMI ID=39.1>
cessivement, tout en agitant à la température ambiante, une fois avec 500 ml et deux fois avec 250 ml d'acétone. A partir des extraits réunis d'acétone on obtient après avoir retiré le
<EMI ID=40.1>
<EMI ID=41.1>
d'une huile jaune-brun visqueuse avec une teneur en phosphatidylcholine d'environ. 25%. Rendement 240 g = 90% de la quantité théorique.
<EMI ID=42.1> a) Capsules remplies avec un liquide
On peut préparer de façon classique des capsules appropriées à l'administration orale en remplissant des capsules
<EMI ID=43.1>
parée selon l'invention, éventuellement en ajoutant de la vita- <EMI ID=44.1>
avec de l'Aerosil on peut préparer un matériau pulvérulent et que l'on peut verser, qui convient pour être mis dans des capsu.. les de gélatine dures :
<EMI ID=45.1>
<EMI ID=46.1>
Les capsules ainsi préparées peuvent être utilisées dans le traitement de l'hyperlipémie et de l'athérosclérose, pour lequel on doit administrer régulièrement 1 à 2 capsules 2 à 4 fois par jour.
L'examen pharmacologique des dérivés phospholipi.diques selon l'invention sur l'action antilipémique chez das animaux d'expérience a été effectué d'après les tests d'expérimentation suivants :
<EMI ID=47.1>
<EMI ID=48.1>
<EMI ID=49.1>
Application orale de la substance à tester ; 24 h
<EMI ID=50.1>
duction d'une hyperlipémie) ; 48 h après application du Triton détermination des lipides dans le sérum. Exploitation par rapport aux témoins.
2- Test aigu au Triton selon SchtSn et Schurr chez le rat (application thérapeutique)
Bibliographie comme sous 1.
<EMI ID=51.1>
plus tard application de la substance à tester ; 48 après application du Triton détermination des lipides dans le sérum. Exploitation par rapport aux témoins.
3- Expérimentation biochimique (rats non agressés) <EMI ID=52.1>
Application orale de la substance à tester; . 4 h plus tard détermination des lipides dans le sérum. Exploitationpar rapport aux témoins.
Les résultats des tests des composés de l'inven-
<EMI ID=53.1>
tableau suivant.
<EMI ID=54.1>
Comme le montre le Tableau, les composés de l'in-
<EMI ID=55.1>
<EMI ID=56.1>
<EMI ID=57.1>
<EMI ID=58.1>
<EMI ID=59.1>
<EMI ID=60.1>
En plus de cela, les composés de l'invention pré-
<EMI ID=61.1>
qui a pour conséquence une amélioration significative du domaine thérapeutique (cf. le Tableau).
REVENDICATIONS
<EMI ID=62.1>
<EMI ID=63.1>
<EMI ID=64.1>
droite ou ramifiée, saturés ou insaturés, et surtout d'acides gras que l'on trouve dans la nature et qui ont de 12 à 22 atomes de carbone et une ou plusieurs doubles liaisons dans la molécule.
<EMI ID=65.1>
<EMI ID = 1.1>
<EMI ID = 2.1> The present invention relates to novel phospholipid derivatives -of the formula defined in claim 1.
Phospholipids found in nature! _
<EMI ID = 3.1>
Soybean, rapeseed, peanut or sunflower costs are round. days consisting of a mixture of chemically phospholipids
<EMI ID = 4.1>
dominant components. It has long been known that phosphatidylcholine or phospholipid fractions enriched in phosphatidylcholine with mainly fatty acids several times unsaturated have a useful metabolic efficiency in many
<EMI ID = 5.1>
diabetes. However, no such effect is currently known except for glycerin-phospholipids which contain choline. In contrast, phosphatidylethanolamine does not present
<EMI ID = 6.1>
Rather, it feels a component of phosphatides which can cause unwanted side effects when using phospholipids. It is known that the primary amino group of this phosphatide can be acylated by a polycarboxylic acid anhydride.
<EMI ID = 7.1>
solubility properties. It is also known from the American patent
<EMI ID = 8.1>
thine- and by the English patents N [deg.] 766 394 and 974 432 as well as
<EMI ID = 9.1>
phatides with acetic acid anhydride. Higher fatty acid N-acyl compounds of phosphatidylethanolamine have been found in lower amounts in glycerinephospholipids that are found in nature and especially in the phospholipid mixture of soybeans. These are mixtures
<EMI ID = 10.1>
where palmitic acid predominates with about 65% in amount.
It has surprisingly been found that it is possible to transform phosphatidylethanolamines of natural and synthetic origin by acylation with oleic acid into new N-oleyl-phosphatidylethanolamines which exhibit even in low doses an anti-arteriosclerotic action or anti-lipemic reported in animal experiments. It should be considered surprising that these effects are only clearly observed
<EMI ID = 11.1>
have long been known as lipid-lowering substances. specialists could not therefore predict, and it
<EMI ID = 12.1>
oleyl-phosphatidylethanolamines and look for their antilipemic or arti-arteriosclerotic effect.
To prepare the N-oleyl derivatives according to the invention <EMI ID = 13.1> phospholipid fractions containing phosphatidylethanolamine, such as for example crude phosphatides or phospholipid fractions soluble or insoluble in alcohol, in an aliphatic, cyclic hydrocarbon or chlorinated, or
<EMI ID = 14.1>
basic compounds, such as triethylamine, pyridine or
<EMI ID = 15.1>
re oleic acid or according to the anhydride process with
<EMI ID = 16.1>
What is especially particularly interesting from the economic point of view is the fact that it is possible to use phosphatide fractions containing cephaline for the production.
<EMI ID = 17.1>
to do this easily prepare phospholipid mixtures which contain, in addition to phosphatidylcholine biologically
<EMI ID = 18.1>
request -and which present on oral application a satisfactory lipemic and anti-arteriosclerotic action.
<EMI ID = 19.1>
phospholipids according to the invention in experiments carried out
<EMI ID = 20.1> <EMI ID = 21.1>
those: who have newt hypercholesterolemia
<EMI ID = 22.1>
of N-oleyl-phosphatidylethanolamine according to the invention per kg. of body weight in the treated rats a marked decrease in total lipids, especially serum cholesterol and triglycerides compared to untreated control animals.
In order to prepare an appropriate form of oral therapeutic presentation, the N-oleyl-phosphatidylethanolamines according to the invention can be distributed in soft gelatin capsules according to the invention after adding for example vitamin E as an antioxidant, optionally, when there is a mixture with other phospholipids, after adding mono-, di- or tri-glycerides of natural fatty acids. For oral application in solid form, it is possible to resort to adsorption on, for example, Aerosil or various Celites. As other additives for the preparation of solid application forms,
it is possible to use, in addition to antioxidants such as tocopherol or ascorbic acid, lactose, calcium carbonate and magnesium stearate. The pharmaceutical preparations according to the invention may additionally contain colorants, flavorings and preservatives.
The dose of N-oleyl-phosphatidylethanolamine to be administered daily in a pharmaceutical preparation at
<EMI ID = 23.1>
this amount can generally be administered in several small doses of 50 to 500 mg, for example 2 to 4 times per day.
The following examples serve to illustrate the invention more precisely.
<EMI ID = 24.1>
by means of column chromatography of a lecithin fraction of -soybean insoluble in alcohol rich in phosphatidyl- <EMI ID = 25.1>
while stirring, it is mixed with a solution of 41.2 g of chloride '
<EMI ID = 26.1>
precipitated amine and the solvent was removed in vacuo at a bath temperature of 60 [deg.] C in a nitrogen atmosphere. There remains the
<EMI ID = 27.1>
EXAMPLE 2
<EMI ID = 28.1>
<EMI ID = 29.1>
<EMI ID = 30.1>
with 6.5 ml of chloroformic acid ethyl ester and after 5 minutes with a solution of 50 g of phosphatidylethanolamine, prepared as described in Example 1, in 120
<EMI ID = 31.1>
<EMI ID = 32.1>
EXAMPLE 3
200 g of an alcohol-soluble soybean phosphatide fraction, prepared by repeated extraction of crude soybean phosphatide, is dissolved in 800 ml of chloroform.
<EMI ID = 33.1>
25 ml of-.pyridine, mixed while stirring with a solution
<EMI ID = 34.1> form. After stirring for 1 h at room temperature
<EMI ID = 35.1>
of water. The chloroform phase is concentrated after drying with sodium sulfate in vacuo at 60.degree. C. sub bath temperature. the protection of an inert gas. The phosphatidic mixture plas-
<EMI ID = 36.1>
<EMI ID = 37.1>
EXAMPLE 4
500 g of an alcohol-insoluble soybean phosphatide fraction are dissolved in 2500 ml of n-hexane with a
<EMI ID = 38.1>
occurs as a residue in the preparation of the alcohol soluble fraction described in Example 3, and after adding 47 ml of triethylamine, mixing while stirring with a solution of 52 g of the acid chloride oleic in
75 ml of n-hexane. After stirring for 1 hour at room temperature, the precipitated triethylamine hydrochloride is filtered off and the solution is concentrated in vacuo to
<EMI ID = 39.1>
cessively, while stirring at room temperature, once with 500 ml and twice with 250 ml of acetone. From the combined extracts of acetone one obtains after removing the
<EMI ID = 40.1>
<EMI ID = 41.1>
of a viscous yellow-brown oil with a phosphatidylcholine content of approx. 25%. Yield 240 g = 90% of the theoretical amount.
<EMI ID = 42.1> a) Capsules filled with liquid
Capsules suitable for oral administration can conventionally be prepared by filling capsules.
<EMI ID = 43.1>
trimmed according to the invention, optionally by adding vita- <EMI ID = 44.1>
with Aerosil one can prepare a powdery and pourable material, which is suitable for placing in hard gelatin capsules:
<EMI ID = 45.1>
<EMI ID = 46.1>
The capsules thus prepared can be used in the treatment of hyperlipemia and atherosclerosis, for which 1 to 2 capsules should be administered regularly 2 to 4 times a day.
The pharmacological examination of the phospholipidic derivatives according to the invention on the antilipemic action in experimental animals was carried out according to the following experimental tests:
<EMI ID = 47.1>
<EMI ID = 48.1>
<EMI ID = 49.1>
Oral application of the test substance; 24h
<EMI ID = 50.1>
duction of hyperlipemia); 48 h after application of Triton, determination of the lipids in the serum. Exploitation in relation to witnesses.
2- Acute Triton test according to SchtSn and Schurr in rats (therapeutic application)
Bibliography as under 1.
<EMI ID = 51.1>
later application of the test substance; 48 after application of Triton determination of the lipids in the serum. Exploitation in relation to witnesses.
3- Biochemical experiment (non-attacked rats) <EMI ID = 52.1>
Oral application of the test substance; . 4 h later determination of the lipids in the serum. Exploitation in relation to witnesses.
The test results of the compounds of the invention
<EMI ID = 53.1>
following table.
<EMI ID = 54.1>
As shown in the Table, the compounds of the
<EMI ID = 55.1>
<EMI ID = 56.1>
<EMI ID = 57.1>
<EMI ID = 58.1>
<EMI ID = 59.1>
<EMI ID = 60.1>
In addition to this, the compounds of the invention pre-
<EMI ID = 61.1>
which results in a significant improvement in the therapeutic field (see Table).
CLAIMS
<EMI ID = 62.1>
<EMI ID = 63.1>
<EMI ID = 64.1>
straight or branched, saturated or unsaturated, and especially fatty acids that are found in nature and which have 12 to 22 carbon atoms and one or more double bonds in the molecule.
<EMI ID = 65.1>