<EMI ID=1.1>
La présente invention concerne une nouvelle catégorie de composés de la céphalosporine présentant en position 3 un groupe-
<EMI ID=2.1>
un procédé pour leur préparation. Ces composés présentent un large spectre d'activité antibiotique gram-positive et gram-négative.
La présente invention fournit de nouveaux composés de la céphalosporine de formule I
<EMI ID=3.1>
<EMI ID=4.1>
inférieur ; R2 est l'hydrogène, un cation de métal alcalin, ou un groupement formant un ester facilement éliminable ; et R est l'hydrogène ou le groupement
0
n
R'-C- dans lequel R' est : l'hydrogène ; un groupement alkyle en
<EMI ID=5.1>
<EMI ID=6.1>
formule dans laquelle A est le groupement diphénylméthyle, p-
<EMI ID=7.1>
méthoxybenzyle et A' est un groupement alcanoyle en C2-C4, haloalcanoyle en C2-C4, benzoyle, halobenzoyle, 2,4-dinitrophényle, ou phtaloyle ;
ou R' est un groupement de formule
<EMI ID=8.1>
<EMI ID=9.1> un halogène, un hydroxyle ou un aminométhyle ;
Z est 0 ou S ; et
m est égal à 0 ou 1 :
ou R' est un groupement de formule
<EMI ID=10.1>
formule dans laquelle P est le groupement 2-thiényle, 3-thiényle,
<EMI ID=11.1>
<EMI ID=12.1>
formule dans laquelle a et a' sont comme définis ci-dessus ; et
Q est le groupement hydroxyle, formyloxy, acétoxy, carboxy, sulfo, amino, ou -NHY dans lequel Y est le groupement benzyloxycarbonyle, t-butyloxycarbonyle
<EMI ID=13.1>
<EMI ID=14.1> <EMI ID=15.1> il
0
<EMI ID=16.1>
groupement 2-thiényle ; 3-thiényle ; 2-furyle ; 2-oxazyle ; 2thiazyle ; 1-tëtrazyle ; benzotriazolyle ; l,3,4-thiadiazolyl-2thio ; 1,2,5-thiadiazolyl-3-thio ; 1,3,4-oxadiazolyl-2-thia ;
<EMI ID=17.1>
triazolyle.
La présente invention fournit également un procédé de préparation des composés de la céphalosporine de formule I, qui comprend:
<EMI ID=18.1>
formule II
<EMI ID=19.1>
formule dans laquelle R et R2 sont comme définis ci-dessus, avec un dérivé triazinylthio de formule .
<EMI ID=20.1>
<EMI ID=21.1>
l'acylation des composés ainsi obtenus dans lesquels R est l'hydrogène ou Q est le groupement amino ;
et si on le désire l'élimination des groupements de protection du groupement amino et/ou du groupement carboxyle.
<EMI ID=22.1>
rieur" signifie un groupement alkyle contenant de 1 à 4 atomes
de carbone, par exemple, le groupement méthyle, éthyle, n-propyle, isopropyle, n-butyle, butyle secondaire ou isobutyle. De préférence, R- est le groupement méthyle ou éthyle et, plus particulièrement
<EMI ID=23.1>
Des exemples de substituants résultants en position 3 de la
<EMI ID=24.1>
<EMI ID=25.1>
3-ylthiométhyle ; 4-méthyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-1,2,4- . triazin-3-ylthiométhyle ; 4-éthyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-1,2, 4-triazin-3-ylthiométhyle ; 4-n-propyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5dihydro-1,2,4-triazin-3-ylthiométhyle ; 4-isopropyl-5-oxo-6-
<EMI ID=26.1>
ylthiométhyle.
Le groupement R2 de la formule I est l'hydrogène, un cation de métal alcalin, tel que le lithium, le sodium ou le potassium, <EMI ID=27.1>
ou'un groupement formant un ester facilement éliminable. Le terme "groupement formant un ester facilement éliminable" se rapporte aux groupements de protection de l'acide carboxylique habituellement utilisés et que l'on utilise pour bloquer le
<EMI ID=28.1>
sporine. On élimine facilement de tels groupements par des techniques conventionnelles, et ils comprennent, par exemple, le
<EMI ID=29.1>
méthoxybenzyle, 2,2,2-trichloroéthyle, phénacyle, triméthylsilyle,
<EMI ID=30.1>
dissociables identiques.
Des exemples de groupements tertio-alkyle en C.-Cg comprennent, par exemple, le groupement t-butyle, t-amyle, et t-hexyle. Des
<EMI ID=31.1>
t-pentényle, et t-hexényle. Des exemples de groupements tertio-
<EMI ID=32.1>
Lorsque R2 est un groupement donnant un ester facilement éliminable, on préfère que ce soit le groupement t-butyle,
<EMI ID=33.1>
trichloroéthyle, triméthylsilyle, acétoxyméthyle, pivaloyloxyméthyle, ou phtalidyle. De préférence, lorsque R2 est un groupement donnant un ester facilement éliminable, c'est le groupement' [pound]nitrobenzyle, acétoxyméthyle ou pivaloyloxyméthyle.
Cependant, on préfère plus particulièrement que R2 soit l'hydrogène ou un cation de métal alcalin. Ces substituants de
<EMI ID=34.1>
sur le plan antibiotique.
La coupure de la partie ester en fonction 4-carboxylique libre est souhaitable pour donner une céphalosporine dans laquelle R2 est l'hydrogène ou un cation de métal alcalin. On réalise la coupure par traitement conventionnel. Celui-ci comprend, par exemple, le traitement de l'ester avec un acide tel que l'acide trif luoroacétique, ou l'acide chlorhydrique, ou avec du zinc et un acide, tel que l'acide formique, l'acide acétique ou l'acide chlorhydrique. De la même manière, on peut réaliser la coupure par hydrogénation de l'ester en présence de palladium, de rhodium ou d'un de leurs composés, en suspension ou sur un support tel que du sulfate de baryum, du carbone ou de l'alumine.
Dans la définition précédente du groupement R' le terme <EMI ID=35.1>
n-amyle, isoamyle, n-hexyle et 2,3-diméthylbutyle. Le terme
<EMI ID=36.1>
groupement chlorométhyle, bromométhyle, 2-iodoéthyle, 2-chloropropyle et 3-bromopropyle. Le terme "groupement cyanoalkyle en
<EMI ID=37.1>
méthyle, 2-cyanoêthyle, 3-cyanopropyle et 2-cyanopropyle. Le terme
<EMI ID=38.1>
tels que le groupement azidométhyle, 2-azidoéthyle, 3-azidopropyle,
<EMI ID=39.1>
rapporte à des groupements tels que le groupement hydroxyméthyle, 2-hydroxyéthyle, 3-hydroxypropyle, et 2-hydroxypropyle.
Dans la définition du reste d'ester 4-amino substitué-
<EMI ID=40.1>
noyle en C2-C4", "haloalcanoyle en C2-C4", et "halobenzoyle". Le terme "groupement alcanoyle en C2-C4" se rapporte au groupement acétyle, propionyle, ou butyryle. Le terme "groupement haloalcanoyle
<EMI ID=41.1>
2-chloropropionyle, ou 3-bromobutyryle. Le terme "groupement halobenzoyle" se rapporte aux groupements benzoyle chloro- et bromosubstitués tels que le groupement 4-chlorobenzoyle, 4-bromobenzoyle, et 2,4-dichlorobenzoyle.
Tel qu'on l'utilise ici, le terme "halogène" et le terme "halo" se rapportent chacun aux radicaux fluoro, chloro, bromo et iodo.
<EMI ID=42.1>
alkyle inférieurs en chaîne droite et en chaîne ramifiée tels
que le groupement méthyle, éthyle, n-propyle, isopropyle, n-butyle
<EMI ID=43.1>
groupement méthoxy, éthoxy, isopropoxy, ou n-butoxy.
Les groupement suivants sont des groupements illustratifs du groupement
0
et
<EMI ID=44.1>
formamido, acetamido, pro-
pionamido, butyramido, a-méthylpropionamido, valéramido,
<EMI ID=45.1> <EMI ID=46.1>
chlorobenzamido)valeramido.
Les groupements suivants sont des groupements illustratifs de 0
n
R'-C-NH dans la définition précédente dans laquelle R ' est
<EMI ID=47.1>
et dans laquelle m est égal à zéro : le groupement
<EMI ID=48.1>
Lorsque, dans la formule précédente, m est égal à 1 et Z représente
-0-, des groupes illustratifs comprennent les groupements suivants <EMI ID=49.1>
Lorsque, dans la formule précédente, m = l et Z représente S, des groupements illustratifs comprennent les groupements suivants :
<EMI ID=50.1>
<EMI ID=51.1> <EMI ID=52.1>
Lorsque R' représente un groupement de formule P-CH-, les
Q 0 groupements illustratifs présentant la formule globale R'-C-NHcomprennent:le groupement mandelamido de formule
<EMI ID=53.1>
ses dérivés de O-formyle et de 0-acétyle représentés par la formule générale
<EMI ID=54.1>
formule dans laquelle T est l'hydrogène ou le groupement méthyle ;
<EMI ID=55.1>
<EMI ID=56.1>
<EMI ID=57.1>
<EMI ID=58.1>
<EMI ID=59.1>
<EMI ID=60.1>
<EMI ID=61.1>
par la formule
<EMI ID=62.1>
formule dans laquelle Y est le groupement benzyloxycarbonyl, tbutyloxycarbonyle,
<EMI ID=63.1>
NH
exemple, le groupement phényle, halophényle, furyle, monométhylamino, diméthylamino, monoéthylamino, diéthyelamino, méthyléthyl-
<EMI ID=64.1>
amino, ou diphénylamino. Dans chacune des formules précédentes, R" ' peut être l'hydrogène ou un groupement alkyle en CI-Ç3' plus
<EMI ID=65.1>
<EMI ID=66.1>
ils sont fixés, former un noyau hétérocyclique de telle sorte que Y a la structure :
<EMI ID=67.1>
<EMI ID=68.1>
Sont également compris les groupements 2-thiênylacétamido, 3thiénylacétamido, et 1-tétrazylacétamido "-substitués dans lesquels, dans la formule précédente, le groupement phényle est remplacé
par un noyau 2-thiényle, 3-thiënylé ou 1-tétrazyle.
Des exemples illustratifs des groupements acêtamido précédents sont le groupement <EMI ID=69.1>
<EMI ID=70.1>
acetamido.
<EMI ID=71.1> définition précédente dans laquelle R' est R"-CH2- sont les groupements suivants :
<EMI ID=72.1>
<EMI ID=73.1>
représenté par la formule III suivante :
<EMI ID=74.1>
<EMI ID=75.1>
fications que définies ci-dessus. Des exemples illustratifs de ces composés préférés représentés sous la forme de leur acide libre sont les suivants :
<EMI ID=76.1>
carboxylique
l'acide 7-(2,5-dichlorophénylthioacétamido)-3-(4-isopropyl-
<EMI ID=77.1>
4-carboxylique, <EMI ID=78.1>
<EMI ID=79.1>
est celui représenté par la formule IV
<EMI ID=80.1>
formule dans laquelle R" représente le groupement 2-thiênyle,
<EMI ID=81.1>
signification que définie ci-dessus. Des exemples illustratifs des composés précédents représentés par la formule IV et présentés sous leur forme acide libre sont les suivants :
l'acide 7-(2-thiénylacétamido)-3-(4-méthyl-5-oxo-6-hydroxy-4,
<EMI ID=82.1>
<EMI ID=83.1>
celui représenté par la formule V suivante
<EMI ID=84.1>
<EMI ID=85.1>
phényle, ou phényle substitué comme défini ci-après et Q est un groupement hydroxyle, formyloxy, acétoxy, carboxy ou amino. Des exemples illustratifs des composés précédents représentés par la formule V et présentés sous leur forme acide libre sont les suivants :
<EMI ID=86.1>
<EMI ID=87.1>
carboxylique <EMI ID=88.1>
oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-1,2,4-triazin-3-ylthio)méthyl-3-céphem 4-carboxylique.
Un autre groupe préféré de céphalosporines de formule I est celui représenté par la formule VI suivante
<EMI ID=89.1>
Ces structures sont éminemment utilisables comme intermédiaires dans la préparation d'autres composés selon la présente invention. Elles sont facilement transformables en d'autres composés par
des procédés habituels d'acylation dans lesquels on soumet à l'acylation le substituant amino libre en position 7 avec l'un des autres substituants acyle définis ici. Des exemples illustratifs de ces composés représentés par la formule VI et présentés sous leur forme acide libre sont les suivants :
<EMI ID=90.1> <EMI ID=91.1>
On peut préparer les composés de formule I par des techniques bien connues de préparation de la céphalosporine. Les. produits sont aisément disponibles par déplacement d'une fonction acétoxy présente en position 3 d'un composé 3-acétoxyméthylé de céphalosporine. Par conséquent, on peut préparer l'une quelconque des
<EMI ID=92.1>
céphalosporines correspondantes par la réaction bien connue de déplacement. Par conséquent, une suite typique de préparations donnant des composés de formule I à partir de l'acide 7-aminocéphalosporanique facilement disponible (7-ACA) peut être la suivante :
<EMI ID=93.1>
<EMI ID=94.1>
<EMI ID=95.1>
du 7-ACA avec le dérivé triazinylthio défini. Le produit résultant est la 7-amino céphalosporine correspondante, un composé de formule I. On peut transformer ce composé, au moyen de techniques bien connues d'acylation, en l'une quelconque des 7-acylamidocéphalosporines définies de formule I.
On peut modifier la séquence précédente de telle sorte que le 7-ACA soit d'abord acylé en position 7 pour donner l'acide 7-acylamido céphalosporanique correspondant ou son aster. On dissocie ensuite le produit résultant, s'il est un ester, pour éliminer le groupement ester de protection en C4, puis on soumet l'acide résultant à la réaction de déplacement pour obtenir le composé de formule I. Tous les procédés utilisés pour réaliser ces transformations sont bien connus de la technique.
Le composé particulier qui est utilisé pour déplacer la fonction acétoxy en position 3 est une 3-mercapto-5-oxo-6-hydroxy4,5-dihydro-l,2,4-triazine non substituée en position 4, ou substituée d'une manière appropriée en position 4 par un groupement alkyle inférieur comme défini ici. On prépare ces 3-mercapto1,2,4-triazines par le procédé décrit par Pesson et coll., Bulletin de la Société Chimique de France, (1970), pages
1590-1599. Selon le procédé décrit dans cette publication, on obtient la 1,2,4-triazine par réaction d'un thiosemicarbazide
avec l'oxalate de diéthyle en présence d'éthylate de sodium. La séquence réactionnelle est la suivante :
<EMI ID=96.1>
<EMI ID=97.1>
groupement alkyle inférieur comme défini ici. Il faut noter que le produit existe sous des formes tautomères. L'aspect tautomère est détaillé par Pesson et coll., Bulletin de la Société
Chimique de France (1970), pages 1599-1606.
La réaction de déplacement mentionnée ci-dessus que l'on utilise dans la préparation des composés de formule I comprend la réaction du composé 3-acétoxyméthylé correspondant, de préférence dans un milieu polaire, avec le dérivé de 3-mercapto-1,2,4-triazine approprié de telle sorte que l'on déplace le groupement acétoxy.
On récupère ensuite le dérivé souhaité de céphalosporine. substitué en position 3.
On peut réaliser cette réaction d'une manière convenable en maintenant les réactifs en solution à une température telle que,
<EMI ID=98.1>
jusqu'à ce que l'on obtienne le dérivé souhaité avec un rendement optimal. On utilise avantageusement les réactifs dans le rapport d'environ 1 équivalent molaire de 3-acétoxyméthyl céphalosporine pour environ 1 à environ 10 équivalents molaires de la 3-mercapto-l,2,4-triazine. De préférence, on réalise la réaction en utilisant des quantités molaires équivalentes de ces réactifs ou un léger excès du composé triazine. On maintient avantageusement le pH de la solution de la réaction entre environ 5,0 et environ 8,0.
Il semble que la réaction se produise par un mécanisme polaire ou ionique. Il est par conséquent préférable d'utiliser
un milieu polaire pour la réaction. Ceci facilite l'avancement facile de la réaction souhaitée. On peut utiliser de l'eau comme milieu polaire et bien entendu on la préfère. On peut également utiliser l'un quelconque des autres solvants polaires typiques
et bien connus. Il est également possible d'utiliser comme milieu d'entretien de la réaction un excès du dérivé de déplacement de
<EMI ID=99.1>
On peut séparer le produit de réaction résultant du milieu réactionnel à l'aide d'un certain nombre de procédés comprenant la cristallisation, l'ionophorèse, la chromatographie sur sur papier et la chromatographie sur résine échangeuse d'ions.
On peut appliquer la réaction de déplacement soit à l'acide 7-amino- soit à l'acide 7-acylamino céphalosporanique. Lorsque l'on utilise l'acide 7-ACA, on peut ensuite acyler le produit <EMI ID=100.1>
est une réaction bien connue et on peut la réaliser par réaction de la céphalosporine avec un halogênure d'acide ou un anhydride mixte représentatif de la fonction acyle souhaitée. Le procédé d'acylation particulier n'est pas important en ce qui concerne la présente invention.
Les composés de formule I sont en eux-mêmes des produits actifs sur le plan antibiotique et/ou sont des intermédiaires de synthèse de composés antibiotiques actifs. Les composés qui présentent plus particulièrement une activité antibiotique sont ceux dans lesquels R2 est l'hydrogène ou un cation de métal alcalin. On transforme facilement les composés dans lesquels R2 est différent de l'hydrogène eu d'un cation de métal alcalin en composés les contenant par des techniques de coupure décrites précédemment.
Dans le tableau suivant, on donne les concentrations inhibitrices minimales (CIM) en microgrammes par millilitre (mcg/ ml) des composés de formule I vis-à-vis d'un organisme gramnégatif, Escherichia coli, et vis-à-vis d'un organisme grampositif Staphylococcus aureus, résistant à la pénicilline. On détermine les valeurs CIM par la technique de la plaque à gradient
<EMI ID=101.1>
<EMI ID=102.1>
TABLEAU , ........
Activité antibiotique
<EMI ID=103.1>
Conc. inhibitrice
<EMI ID=104.1>
<EMI ID=105.1>
TABLEAU
Activité antibiotique (suite)
Conc. inhibitrice
minimale
<EMI ID=106.1>
<EMI ID=107.1>
Activité antibiotique (suite)
Conc. inhibitrice
minimale
<EMI ID=108.1>
<EMI ID=109.1>
invention par les exemples suivants.
Préparation de 3-mercapto-4-méthyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-
dihydro-1,2,4-triazine
Dans un ballon d'une capacité dé 22 litres contenant 12,5 litres d'éthanol anhydre maintenu sous atmosphère d'azote on ajoute lentement 230 g de sodium. On maintient le mélange à température ambiante pendant une nuit, en admettant un courant faible mais constant d'azote dans le ballon. On chauffe ensuite le mélange à 50[deg.]C, et on ajoute 1050 g (10 moles) de 4-méthylthiosemicarbazide. La température du mélange tombe à 40[deg.]C. On ajoute ensuite au mélange 1530 g d'oxalate de diéthyle à travers un entonnoir. On pratique l'addition à une vitesse suffisante pour
<EMI ID=110.1>
<EMI ID=111.1>
On met le mélange sous reflux sous agitation pendant 4 heures, temps pendant lequel il se forme un précipité. Le précipité change d'aspect pendant la période de reflux. Par arrêt du chauffage et de l'agitation, il se dépose progressivement dans le fond du ballon un solide blanc qui laisse un liquide surnageant clair jaune-pâle. On abandonne le mélange pendant une nuit. On élimine la masse de liquide surnageant clair par aspiration et on recueille le produit cristallin sous la forme de son sel de sodium à partir du mélange résiduel par filtration puis on le lave à l'éthanol sec.
On dissout le produit dans l'eau et on ajuste le pH de la solution à 5,5. On élimine par filtration et on jette une petite quantité du produit. On ajuste ensuite le pH du filtrat à 1,5,
on le refroidit et on le filtre pour obtenir 211,5 g de produit,
<EMI ID=112.1>
Exemple 1
A 36 ml d'eau on ajoute sous agitation 1,44 g de 3-mercapto-
<EMI ID=113.1>
<EMI ID=114.1>
et on amène le pH à 7,6 par addition d'acide dilué. On ajoute au
<EMI ID=115.1>
carboxylique, et on ajuste le pH du mélange résultant à 6,9 alors que le composé de céphem se dissout lentement. On agite le mélange à 55[deg.]C. Au bout de 1,75 heure, le pH du mélange est de <EMI ID=116.1>
d'hydroxyde de sodium dilué. Au bout de 17,5 heures, le pH du mélange est de 6,1 et on l'ajuste à 6,95 par addition d'hydroxyde de sodium dilué. On chauffe le mélange au total pendant 21 heures.
On refroidit le mélange dans la glace, on le filtre, et on ajuste le filtrat à pH 1,5. Un solide précipite. On filtre le solide, on le lave avec de l'acide dilué (pH 1,5), et on le sèche à l'air pour obtenir 3,60 g d'une poudre jaune clair. On dissout la poudre dans 15 ml d'un mélange 2:1 d'eau et de méthanol à pH 6,5. On évapore le mélange à un volume faible (environ 3 ml) sur un évaporateur rotatif en ajoutant de l'alcool isopropylique pour éviter la congélation jusqu'à la fin de l'évaporation sur l'appareil rotatif. On place la solution résiduelle dans une colonne contenant 50 g de Sephadex G-10 et on l'élue à l'eau,
la première fraction étant de 5 ml et les autres fractions suivantes étant d'environ 15 ml. On mélange les fractions 5 à 8, et on ajuste le pH du mélange à 1,5 par addition d'acide chlorhydrique dilué. On recueille par filtration le produit qui a précipité, on le lave à l'acide dilué (pH 1,5), et on le sèche à
<EMI ID=117.1>
3-ylthio)méthyl-3-céphem-4-carboxylique sous la forme d'une poudre jaune clair.
<EMI ID=118.1>
2-CH2) ; 3,27 (s, 3H, triazine N-CH3) ; et 1,36 ppm
<EMI ID=119.1>
Exemple 2
On agite 404 mg du produit de l'exemple 1 dans 4,5 ml d'acétonitrile ; cependant, on n'obtient pas une solubilisation
<EMI ID=120.1>
bout de 5 minutes la solubilisation est complète, et un solide commence-à se séparer. Au bout de 1,5 heure, on ajoute 0,5 ml d'eau, puis on ajuste le pH du mélange à 5,0 par addition d'une solution aqueuse saturée de carbonate d'ammonium. On élimine la plus grande partie de l'acétonitrile par évaporation sur l'appareil rotatif, et on ajoute de l'alcool isopropylique au résidu agité jusqu'à ce qu'il apparaisse une légère précipitation. On élimine
le précipité par filtration avec un adjuvant de filtration. On note une certaine tendance à une précipitation supplémentaire par passage <EMI ID=121.1>
filtrat et on le dilue avec de l'alcool isopropylique pour obtenir un précipité supplémentaire que l'on recueille par filtration, que l'on lave avec un mélange d'alcool isopropylique et d'eau, et que l'on sèche à l'air pour obtenir 0,18 g d'une poudre jaune clair. On mélange cette poudre avec 2,0 g de produit semblable venant d'une
<EMI ID=122.1>
<EMI ID=123.1>
30 ml de méthanol . On ajuste lentement le pH du mélange à 7,0 par
<EMI ID=124.1>
une petite quantité de produit insoluble. On concentre le filtrat à environ 5 ml sur un évaporateur rotatif, en utilisant de l'alcool isopropylique dans les dernières phases pour éviter la congélation. On place la solution résiduelle dans une colonne de Sephadex G-10 (28 g, 1,5 cm) dans l'eau, et on recueille des fractions de 25 ml, l'eau étant utilisée comme éluànt. On combine les fractions 3 à 9. On ajuste le pH des fractions combinées à 3,5, et on recueille par filtration le produit qui précipite. On lave le solide avec de l'eau qui a été acidifiée à pH 3,6 par addition d'HCl, puis on le sèche pour obtenir 620 g d'acide 7-( -amino)
<EMI ID=125.1>
triazin-3-ylthio)méthyl-3-céphem-4-carboxylique sous la forme d'une poudre brun clair.
<EMI ID=126.1>
(s, 1H, C6H5-CH) ; 5,21 (d, 1H, 60(-H) ; 4,43 (q,
<EMI ID=127.1>
(s, 3H, triazine N-CH3)..
Exemple 3
<EMI ID=128.1>
6-hydroxy-4,5-dihydro-1,2,4-triazine (15 mmoles). On agite le mélange, qui a un pH de 2,8, puis on ajuste le pH à 7,25 par
<EMI ID=129.1>
<EMI ID=130.1>
carboxylique, et le pH du mélange résultant est de 3,2. On ajuste précautionneusement le pH à 7,2 par addition de 14,8 ml d'hydroxyde
<EMI ID=131.1>
4,25 heures, temps pendant lequel le pH du mélange passe à 5,35. On monte le pH à 7,17 par addition de 0,7 ml d'hydroxyde de
<EMI ID=132.1>
pendant lequel le pH du mélange devient 5,99. On ajuste ensuite <EMI ID=133.1>
<EMI ID=134.1>
le mélange dans un bain de glace, on le dilue à environ 120 ml par addition d'eau, et on ajuste son pH à 1,5 par addition, sous
<EMI ID=135.1>
filtration le précipité résultant, on le lave à l'acide chlorhydrique dilué (pH 1,5), et on le sèche à l'air pour obtenir une poudre blanchâtre (5,28 g).
On agite ce produit dans 40 ml d'eau, temps pendant lequel
<EMI ID=136.1>
concentre la solution résultante par addition d'alcool isopropylique et on pratique une évaporation sur appareil rotatif jusqu'à
ce qu'on ait éliminé l'alcool isopropylique. Le volume final du mélange est d'environ 10 ml. On place le mélange dans une colonne de Sephadex G-10 (110 g, 2,5 cm, dans l'eau). On élue la colonne
à l'eau et on recueille des fractions de 15 à 16 ml chacune. On prépare quatre fractions ou mélanges de fractions, plus particulièrement, les fractions 5 et 6, les fractions 7 et 8, fraction 9, et les fractions 10 à 12. Chacune est agitée à froid et on ajuste le pH de chacune à 1,5 par addition d'acide chlorhydrique
<EMI ID=137.1>
chaque précipité par filtration, on le lave à l'acide dilué
(pH 1,5), puis on le sèche à l'air pour obtenir des poudres blanchâtres (fractions 5 et 6, 1,26 g), (fractions 7 et 8 :
0,84 g), (fraction 9 : 0,31 g), et (fractions 10 à 12 : 0, 41 g) . Une chromatographie en couche mince (CCM) montre que chaque produit est identique, et on les combine tous pour obtenir 2,80 g d'une poudre blanchâtre.
On dissout ce produit dans l'eau, et on acidifie la solution
à pH 1,5. On filtre le précipité et on le sèche à l'air pour obtenir une poudre blanchâtre. On dissout la poudre dans 25 ml
de tétrahydrofurane et on ajoute de l'alcool isopropylique sous agitation jusqu'à obtention d'un volume total de 200 ml. On
filtre le mélange, on ajoute au filtrat 50 ml d'alcool isopropylique. On agite le mélange puis on le filtre. On évapore le filtrat à siccité et on dissout le résidu dans l'eau à pH 7.
On acidifie la solution à pH 1,5, on filtre et on sèche à l'air
<EMI ID=138.1>
comme produit souhaité.
<EMI ID=139.1>
2H, 3-CH2) ; et 3,31 (s, 3H, triazine N-CH3).
Exemple 4
A 20 ml d'eau on ajoute 3,46 g d'acide 7-formamido-3-
<EMI ID=140.1>
(12,55 mmoles). On agite le mélange résultant et on ajoute progressivement de l'hydroxyde de sodium IN jusqu'à ce que le pH reste à une valeur constante, 7,0. On agite ensuite le mélange à
<EMI ID=141.1>
à 20 ml et on l'acidifie à pH 1,2 par addition avec refroidissement d'acide chlorhydrique 3N. On filtre le précipité résultant et on le place immédiatement sous une cloche pour le sécher sous vide. On broie dans un mortier 2,75 g du produit sec, puis on le triture 3 fois chaque fois avec 150 ml d'alcool isopropylique bouillant. On évapore la solution d'alcool isopropylique à siccité et on triture le résidu 2 fois avec 30 ml d'acétate d'éthyle. On filtre le produit insoluble, on le lave à l'acétate d'éthyle, puis on le sèche pour obtenir 1,56 g d'acide 7-formamido-3-(4-méthyl-5-oxo-
<EMI ID=142.1>
4-carboxylique.
<EMI ID=143.1>
3,40 ppm (s, 3H, triazine N-CH3) .
Exemple 5
On agite 0,74 g du produit de l'exemple 4 dans 12 ml de méthanol sec, et on ajoute 1,5 ml d'acide chlorhydrique concentré, temps pendant lequel la solubilisation complète se produit. Après un temps court, un solide blanc commence à précipiter. On poursuit l'agitation pendant 1,7 heure,. et le mélange devient trouble avec un précipité blanc. On filtre le précipité et on le sèche. On montre par CCM sur 0,346 g de produit que ce produit est un échantillon extrêmement pur du chlorhydrate de l'acide 7-amino-3-
<EMI ID=144.1>
3,77 (b, 2H, 2-CH2) ; et 3,31 ppm (s, 3H, triazine N-CH3) .
<EMI ID=145.1>
A 36 ml d'eau on ajoute 1,44 g (9 mmoles) de 3-mercapto-4mëthyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazine. Le pH du mélange résultant est de 2,9 et on l'ajuste à 7,20 par addition de
<EMI ID=146.1>
(9 mmoles) du sel de sodium de l'acide 7-(2-thiényl)acétamido3-acétoxyméthyl-3-céphem-4-carboxylique. Le pH du mélange résultant est de 6,8 et on l'ajuste à 7,12 par addition de 2 gouttes
<EMI ID=147.1>
heures, temps pendant lequel le pH varie jusqu'à 6,03. On remonte
<EMI ID=148.1>
<EMI ID=149.1>
pendant lequel le pH varie jusqu'à 6,02. On porte le pH à 7,09
<EMI ID=150.1>
chauffage pendant 1,5 heure (le temps total à 55[deg.]C étant de 20 heures). On agite ensuite le mélange réactionnel résultant dans
<EMI ID=151.1>
<EMI ID=152.1>
filtration, que l'on lave à l'acide dilué (pH 1,5) et que l'on sèche à l'air pour obtenir une poudre jaune clair (3,51 g).
On agite le solide dans 25 ml d'eau, et on ajoute lentement
10 ml de méthanol. On ajuste le pH du mélange résultant à 6,8 par
<EMI ID=153.1>
un traitement intermédiaire aux ultra-sons sur le mélange résultant. On concentre la solution résultante à environ 5 ml sur un évaporateur rotatif, ce qui permet d'éliminer du mélange le méthanol, puis on place le concentrât dans une colonne de Sephadex G-10 (70 g, 2 cm de colonne dans l'eau). On élue la colonne à l'eau, en recueillant des fractions de 10 à 12 ml. On combine les fractions 3 à 5, les fractions 6 à 7, et les fractions 8 à 10, et on agite les trois fractions résultantes à froid et on ajuste le pH de
<EMI ID=154.1>
les trois précipités résultants par filtration, on les lave à l'acide chlorhydrique dilué (pH 1,5), et on les sèche à l'air pour obtenir des poudres blanchâtres, pesant respectivement 2,13 g, 0,69 g et 0,17 g. Des chromatographies en couche mince sur
chacun des produits indiquent qu'ils sont virtuellement iàentiques. Par conséquent, on combine les produits et on les dissout par agitation et ébullition dans un grand volume d'acétone (environ
1200 ml), puis on laisse évaporer la solution résultante pour <EMI ID=155.1>
4-carboxylique cristallin.
RMN, DMSO d6 : 9,1 (d, 1H, 7�-NH) : 7,36 et 6,95 (m, 3H, thiényl) ;
<EMI ID=156.1>
2H, 3-CH2) ; 3,79 (bs, 2H, 7-CH2) ; 3,68 (m, 2H, 2-CH2) ; et 3,33 ppm (s, 3H, triazine N-CH3).
Exemple 7
A 20 ml d'eau on ajoute 0,96 g de 3-mercapto-4-éthyl-5-oxo-6hydroxy-4,5-dihydro-1,2,4-triazine. Le pH du mélange résultant est de 2,3 et on l'ajuste à 6,5 par addition de 5 ml d'hydroxyde de
<EMI ID=157.1>
de l'acide 7-(2-thiényl)acétamido-3-acétoxyméthyl-3-céphem-4carboxylique. Le pH du mélange résultant est de 5,7 et on l'ajuste à 7,2 par addition d'hydroxyde de sodium IN. On agite le mélange résultant à 60[deg.]C pendant 18 heures au total, le pH final étant de 5,9. On refroidit le mélange dans la glace et on l'agite, on le dilue à environ 10 ml, et on ajuste son pH à 1,5 par addition
<EMI ID=158.1>
filtration, on le lave avec HC1 dilué (pH 1,5), et on le sèche à l'air pour obtenir une poudre blanchâtre (2,01 g). On dissout
le produit à pH 6,8 dans 20 ml d'un mélange 1:1 d'eau et de méthanol. On évapore la solution sur un évaporateur rotatif jusqu'à un volume faible (environ 3 ml), et on place la solution résiduelle dans une colonne de Sephadex G-10 (40 g, 1,6 cm de colonne). On élue la colonne à l'eau, la première fraction étant d'environ 18 ml et les fractions ultérieures d'environ 5 ml. On combine les fractions 4 à 11, et on abaisse leur pH à 1,5 par addition d'acide chlorhydrique dilué pour obtenir 1,171 g de solide. On dissout le solide dans environ 30 ml d'un mélange 3:1 d'acétone et de méthanol. On souffle de l'air sur la surface de la solution pour l'évaporer. On filtre et on lave à l'acétone les
<EMI ID=159.1>
5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-1,2,4-triazin-3-ylthio)méthyl-3-céphem4-carboxylique.
<EMI ID=160.1>
<EMI ID=161.1>
A 12 ml d'eau on ajoute sous agitation 531 mg (3 mmoles) de 3mercapto-4-méthyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-1,2,4-triazine. Le
pH du mélange résultant est de 2,3 et on l'ajuste à 6,5 par addition de 2,9 ml d'hydroxyde de sodium IN. On ajoute 1,54 g (3 mmoles)
<EMI ID=162.1>
céphem-4-carboxylique sous agitation et il se forme une masse
<EMI ID=163.1>
solubilisation et, tandis que l'on maintient le mélange à cette ) température, on ajuste le pH à 7,0 puis le mélange est maintenu à cette valeur pendant 19 heures. Après les 16 premières heures, le mélange est épais et gélatineux, à un point tel qu'on arrête l'agitation. On mélange intimement le mélange à l'aide d'une spatule, et on poursuit le chauffage sans agitation pendant les
<EMI ID=164.1>
refroidit le mélange dans un bain de glace et on l'acidifie à pH 1,5. On maintient la fluidité du mélange par dilution à environ
100 ml par addition d'eau. Après avoir agité à pH 1,5 à température ambiante pendant 1,5 heure, on filtre le mélange, on le lave avec
<EMI ID=165.1>
de couleur crème. On dissout la poudre dans le tétrahydrofurane
(THF), on filtre, et on dilue à l'éthanol. On place la solution résultante dans un courant d'air grâce auquel un solide se dépose suivi par une gomme jaune. On élimine la gomme à l'aide d'une spatule. On filtre le concentré résultant, et on lave le produit à l'éthanol et on le sèche à l'air pour obtenir 861 m de solide blanchâtre. On répète le mode opératoire de recristallisation
<EMI ID=166.1>
(4-méthyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-1,2,4-triazin-3-ylthio)méthyl3-cêphem-4-carboxylique sous la forme d'une poudre blanchâtre.
RMN, DMSO d6-D20 ; 7,4 (bm, 4H, 2,5-dichlorophényl) ; 5,70 (d, 1H,
<EMI ID=167.1>
3-CH2) ; 3,92 (b, 2H, 7-CH2) ; 3,69 (b, 2H, 2-CH2) ; et 3,33 (s, 3H, triazine N-CH3) .
Exemple 9
A 12 ml d'eau, on ajoute sous agitation 571 mg de 3-mercapto-
<EMI ID=168.1>
mélange résultant est de 2,3 et on l'ajuste à 6,6 par addition de 2,9 ml d' hydroxyde de sodium IN. On ajoute 1,54 g (3 mmoles) de
<EMI ID=169.1> <EMI ID=170.1> céphem-4-carboxylique.
RMN, DMSO d6-D20 : 7,4 (bm, 4H, 2,5-dichlorophényl) ; 5,68 (d, 1H,
<EMI ID=171.1>
<EMI ID=172.1>
Exemple 10
A 12 ml de THF anhydre on ajoute 350 mg (0,695 mmole) d'acide
<EMI ID=173.1>
l'addition de 917 mg (7 mmoles) de N-triméthylsilylacétamide.
Après mise en solution, on ajoute 1 ml d'oxyde de propylène suivi
<EMI ID=174.1>
(chloroformyl)-méthylamine dissoute dans 2 ml de THF sec. On réalise l'addition tout en maintenant le mélange à une température de -10[deg.]C. On agite le mélange résultant à -10[deg.]C pendant 10 minutes puis à température ambiante pendant 15 minutes. On ajoute ensuite 1 ml d'eau suivi par l'addition de 30 ml d'une solution aqueuse de bicarbonate de sodium. On refroidit ensuite le mélange avec
50 ml d'un mélange 6:1 d'acétate d'éthyle et de THF. On abaisse
<EMI ID=175.1>
de 50 ml d'un mélange 6:1 d'acétate d'éthyle frais et de THF. On sépare la couche organique et on la sèche sur sulfate de magnésium. On filtre ensuite le mélange et on l'évapore à siccité. On dissout ensuite le résidu pulvérulent dans de l'acétate d'éthyle chaud et on concentre la solution à l'acétate d'éthyle jusqu'à ce qu'elle devienne trouble. On ajoute ensuite de l'alcool isopropylique, et après remise en solution complète, on concentre à nouveau le mélange jusqu'à ce que la solution devienne trouble. On refroidit la solution concentrée pendant une nuit pour obtenir 234 mg
<EMI ID=176.1>
méthyl-3-céphem-4-carboxylique.
RMN, DMSO d6-D20 : 7,60 et 7,45 (deux b, 9H, aromatique) ;
<EMI ID=177.1>
5,05 (d, 1H, 6�-H) ; 3,66 (m, 2H, 2-CH2) ;
3,40 (s, 3H, triazine N-CH3) ; et 3,17 ppm
(s, 3H, CON (CH3)CO)..
Exemple 11
<EMI ID=178.1>
méla.nge à température ambiante pendant 2 heures. Après mise en solution, on ajoute 1 ml d'oxyde de propylène et on refroidit la
<EMI ID=179.1>
<EMI ID=180.1>
dans 5 ml de THF sec, et on agite le mélange réactionnel pendant
<EMI ID=181.1>
ajoute ensuite 5 ml d'eau, et on élimine le THF sous vide. On ajoute ensuite au résidu 50 ml d'une solution aqueuse de bicarbonate de sodium. On lave le mélange résultant à l'acétate d'éthyle, et
<EMI ID=182.1>
On extrait ensuite le mélange aqueux acidifié par 100 ml d'un mélange 6:1 d'acétate d'éthyle et de THF. On sépare la couche organique, on la sèche sur sulfate de magnésium, on la filtre,
et on évapore le filtrat à siccité. On dissout le résidu obtenu sous forme d'une mousse dans de l'acétate d'éthyle, et on ajoute de l'éther pour précipiter 140 mg d'acide 7- - 3-(2-chlorobenzoyl)-
<EMI ID=183.1>
que l'on recueille par filtration.
RMN, DMSO d6-D20 : 7,54 et 7,41 (deux b, 9H, aromatique) ; 5,73
(d, 1H, 7�-H) ; 5,59 (s, 1H, 7-CH) ; 4,07 (m, 2H, 3-CH2) ; 3,58 (m, 2H, 2-CH2) ; 3,28 (s, 3H, triazine N-CH3) ; et 2,94 ppm (s, 3H, CON(CH3CO).
Exemple 12
Dans 20 ml de THF sec on ajoute 350 mg (0,695 mmole) d'acide
<EMI ID=184.1>
l'addition de 786 mg (6 mmoles) de N-trimëthylsilylacétamide. On agite le mélange résultant à température ambiante pendant 2 heures, temps au bout duquel on obtient une solution. On ajoute ensuite
97,5 mg (0,71 mmole) de furoyl-2-isocyanate, et on agite le mélange réactionnel pendant 1 heure à température ambiante. On ajoute ensuite à la solution 20 ml d'eau. On réduit le volume du mélange jusqu'à ce qu'un trouble se développe, temps au bout duquel on ajoute 40 ml d'une solution aqueuse de bicarbonate de sodium. La <EMI ID=185.1>
d'éthyle. On sépare la couche aqueuse, et on diminue le pH à 2,0
<EMI ID=186.1>
50 ml d'acétate d'éthyle. On combine les extraits à l'acétate d'éthyle, on les sèche sur sulfate de magnésium, on les filtre et on les évapore pour obtenir un résidu sous forme de mousse. On dissout le résidu dans de l'éthanol chaud, et on concentre la solution éthanolique jusqu'à ce qu'il se développe un trouble. On refroidit ensuite la solution éthanolique ainsi concentrée pour
<EMI ID=187.1>
triazin-3-ylthio)méthyl-3-céphem-4-carboxylique.
<EMI ID=188.1>
<EMI ID=189.1>
2-CH2) ; et 3,32 ppm (s, 3H, triazine N-CH3) . Exemple_13
On prépare un mélange de 381 mg (1 mmole) d'acide 7-(lH-
<EMI ID=190.1>
200 mg (1,2 mmole) de 3-mercapto-4-mêthyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5dihydro-1,2,4-triazine, et de 1,25 mmole de bicarbonate de sodium dans 30 ml de tampon à pH 7. Une petite quantité de solide reste insoluble dans le mélange, le pH du mélange résultant étant d'environ 6,6. On chauffe le mélange à environ 64[deg.]C. Pendant la première heure, le pH du mélange monte à 7,5 puis diminue progressivement à environ 6,7. On poursuit le chauffage pendant 5 heures de plus, temps au bout duquel il ne se produit plus de changement du pH. On refroidit ensuite le mélange, on le décante à l'acétate d'éthyle, et on diminue le pH du mélange à 2,7 par addition d'acide chlorhydrique à 20 %. On sépare la couche organique, puis on lave la couche aqueuse avec de l'acétate d'éthyle supplémentaire.
On combine la couche originale d'acétate d'éthyle et la couche d'acétate d'éthyle de lavage, et on sèche
le mélange complet sur sulfate de magnésium, on le filtre, et on l'évapore pour obtenir 100 mg d'acide 7-(lH-tétrazoleacétamido)-3-
<EMI ID=191.1>
Théorie.: C, 37,42 ; H, 3,14 ; N, 26,18 <EMI ID=192.1>
Exemple 14
A 50 ml de tétrahydrofurane sec (THF) , on ajoute 1,85 g
(5 mmole) d'acide 7-amino-3-(4-méthyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-
<EMI ID=193.1>
jusqu'à l'obtention d'une solution. On refroidit ensuite la solution à -20[deg.]C.
Séparément, on ajoute 1,97 g (5 mmoles) du sel de sodium de
<EMI ID=194.1>
glycine à une solution de 0,085 g (0,5 mmole) de N-triméthylsilylsuccinimide dans 75 ml de tétrahydrofurane sec. On ajoute au mélange résultant 6 gouttes de N,N-diméthylbenzylamine. On refroidit ensuite la suspension résultante à -15[deg.]C, et on ajoute sous agitation 0,52 g (5,5 mmoles) de chloroformiate de méthyle.
<EMI ID=195.1>
solution précédente contenant le produit à noyau de céphalosporine. On agite le mélange réactionnel résultant pendant 2 heures à -20[deg.]C puis pendant 1 heure à température ambiante. Une chromatographie liquide sous pression élevée du mélange réactionnel indique la présence d'approximativement 60 % du produit désiré et de 40 % de produit de départ à noyau de céphalosporine.
On reprend le mélange réactionnel par addition au mélange de
10 ml de méthanol. Il se forme un précipité que l'on élimine par filtration. On ajoute ensuite au filtrat 10 ml d'eau. On agite le mélange pendant 15 minutes, et on filtre le précipité résultant. On évapore le filtrat sous vide à environ 40 ml, puis on refroidit le mélange concentré pendant une nuit dans un congélateur. Il se forme un précipité que l'on recueille par filtration.
On agite le solide recueilli résultant dans 15 ml d'eau. On ajuste le pH du mélange à 1,1 par addition de 3 gouttes d'acide chlorhydrique concentré. On agite ensuite le mélange acidifié pendant 5 minutes, et on filtre les produits insolubles. On porte le pH du filtrat à 3,0 par addition d'hydroxyde de sodium, et on agite le mélange résultant pendant 10 minutes à la température du bain de glace. Il se forme un précipité que l'on recueille par filtration. On ajoute au filtrat résultant 1 volume d'alcool isopropylique, et on évapore le mélange sous vide à environ 10 ml. On agite la solution concentrée dans un bain de glace pendant 15 minutes, et on recueille par filtration le précipité résultant, <EMI ID=196.1>
céphem-4-carboxylique.
<EMI ID=197.1>
<EMI ID=198.1>
3,54 ppm (b, 5H, triazine N-CH3 et 2-CH2).
Exemple 15
A 25 ml de THF sec on ajoute 252 mg (0,5 mmole) d'acide
<EMI ID=199.1>
650 mg (5 mmoles) de N-trimëthylsilylacëtamide. On agite le mélange pendant environ 3 heures, temps au bout duquel on obtient une
<EMI ID=200.1>
<EMI ID=201.1>
agite le mélange résultant pendant 1 heure à température ambiante, et on évapore le mélange sous vide pour obtenir une huile. On ajoute à l'huile 20 ml d'eau, et on porte le pH du mélange résultant à 8,0 par addition d'une solution aqueuse de bicarbonate de sodium. On lave le mélange résultant avec de l'acétate d'éthyle, et on diminue le pH de la couche aqueuse à 2,0 par addition
<EMI ID=202.1>
<EMI ID=203.1>
carboxylique.
RMN, DMSO d6-CD30D : 7,43 (b, 5H, CgHg) ; 5,76 (d, 1H, 7"-H) ;
5,61 (s, 1H, C6H5-CH) ; 5,05 (d, 1H, 6�-H) 4,16 (m, 2H, 3-CH2) ; 3,64 (b, 2H, 2-CH2) ;
<EMI ID=204.1>
<EMI ID=205.1>
Exemple 16
A 25 ml de THF sec on ajoute 554 mg (1,1 mmole) d'acide
<EMI ID=206.1>
pendant 3 heures jusqu'à ce que l'on obtienne une solution. On
<EMI ID=207.1>
de l-chloroformylimidazoline-2-one. On agite le mélange résultant
<EMI ID=208.1>
ambiante. On ajoute ensuite au mélange 2 ml d'eau. On évapore <EMI ID=209.1>
à l'huile 25 ml d'eau, et on porte le pH à 7,5 par addition de bicarbonate de sodium. On lave la solution à l'acétate d'éthyle, puis on acidifie la couche aqueuse à pH 1,8 par addition d'acide
<EMI ID=210.1>
avec du mêthanol, puis on filtre les insolubles au méthanol. On évapore lentement sous vide la solution méthanolique résultante jusqu'à obtention d'une huile. On ajoute à l'huile 25 ml d'eau, et on porte le pH à 7,5 par addition de bicarbonate de sodium. On lave la solution à l'acétate d'éthyle, puis on acidifie la couche aqueuse à pH 1,8 par addition d'acide, chlorhydrique IN. On filtre le solide résultant et on le triture au méthanol, puis on filtre les insolubles au mêthanol. On évapore lentement sous vide la solution méthanolique résultante jusqu'à ce que l'on obtienne un précipité. On filtre le précipité et on le sèche pour obtenir
<EMI ID=211.1>
ppm (s, 3H, triazine N-CH3).
Exemple 17
<EMI ID=212.1>
(5 mmoles) de N-triméthylsilylacétamide. On agite le mélange pendant environ 3 heures temps au bout duquel on obtient une
<EMI ID=213.1>
<EMI ID=214.1>
2-one. On agite le mélange réactionnel pendant environ 30 minutes
<EMI ID=215.1>
ajoute au mélange 2 ml d'eau. On évapore ensuite la solution sous vide jusqu'à obtention d'une huile. On ajoute ensuite 25 ml d'eau, et on augmente le pH du mélange à 7,5 par addition de bicarbonate de sodium. On lave ensuite la solution à l'acétate d'éthyle, et on sépare la couche aqueuse et on l'acidifie à pH 1,8 par addition
<EMI ID=216.1>
<EMI ID=217.1> <EMI ID=218.1>
(b, 4H, N-CH2-CH2-N) ; et 3,37 ppm (b, 6H,
<EMI ID=219.1>
Exemple 18
<EMI ID=220.1>
(10 mmoles) d'hydroxybenzotriazole et 2,57 g (10 mmoles) d'acide <EMI ID=221.1> <EMI ID=222.1>
carbodiimide. On agite le mélange en refroidissant au bain de glace pendant 2,75 heures. Puis on filtre rapidement le mélange, et on lave les solides avec 10 ml de THF sec. On maintient le filtrat que l'on a recueilli dans un bain de glace.
A'60 ml de THF sec contenant 9,8 g (75 mmoles) de N-triméthylsilylacétamide on ajoute 3,73 g (10 mmoles) d'acide 7-amino-3-
<EMI ID=223.1>
environ 1 heure, temps -au bout duquel il se produit une solubilisation presque complète. On agite ensuite la solution résultante dans un bain de glace et, au bout de 15 minutes, on l'ajoute rapidement au filtrat préparé ci-dessus contenant l'agent d'acylation. On agite le mélange résultant en refroidissant au bain de glace pendant 30 minutes puis à 32[deg.]C pendant 3 heures. On verse rapidement la solution brune résultante dans de l'eau glacée sous agitation. On ajoute de l'éther, et on ajuste le pH de la phase aqueuse à 8,2. On sépare les phases, et on lave la couche aqueuse avec un volume de plus d'éther. On soumet ensuite la phase aqueuse à une évaporation dans un appareil rotatif pour éliminer l'ëther résiduel. On ajoute de la glace à la solution aqueuse résultante, et on agite rapidement le mélange pendant que l'on ajuste le pH
<EMI ID=224.1>
résultant, et on lave le solide avec de l'acide chlorhydrique dilue (pH 1,8), on le sèche à l'air, puis on le sèche sous vide
<EMI ID=225.1>
jaune-brun pale.
<EMI ID=226.1>
<EMI ID=227.1> <EMI ID=228.1>
N-CH3) .
Exemple 19
On place 1,60 g du produit de l'exemple 18 dans un ballon muni d'un agitateur. Or refroidit ensuite le ballon dans un bain
de glace-acétone. On ajoute ensuite rapidement au ballon 60 ml d'acide trifluoroacétique qui a été refroidi au préalable dans un bain de glace-acétone. On agite le mélange résultant pendant 15 minutes, temps pendant lequel il se produit une solubilisation complète. Un chromatographie en couche mince (CCM) sur le mélange montre que la réaction est complète. On soumet ensuite le mélange rêactionnel à une évaporation dans un évaporateur rotatif pour obtenir une gomme. On ajoute à la gomme 60 ml d'acétate d'éthyle, et on soumet le mélange à un traitement aux ultra-sons, ce qui donne une poudre qu'on recueille par filtration, et qu'on lave à l'acétate d'éthyle, et qu'on sèche à l'air pour obtenir 155 g
d'un produit brun clair. On ajoute à la poudre un mélange de
75 ml d'eau et de 10 ml de méthanol. On soumet le mélange résultant
<EMI ID=229.1>
le mélange, et on ajuste le pH du filtrat à 3,7. On filtre à nouveau le mélange résultant, et on lave le solide que l'on a recueilli avec de l'acide dilué (pH 3,8) que l'on ajoute au filtrat. On ajoute ensuite au filtrat de l'alcool isopropylique et on soumet le total à une évaporation dans un appareil rotatif jusqu'à réduction à un faible volume. On ajoute au résidu de l'alcool isopropylique en supplément, et on filtre le mélange. On lave le solide recueilli avec un mélange 1:1 d'eau et d'alcool isopropylique maintenu à un pH de 3,8. On sèche le solide résultant pour
<EMI ID=230.1>
méthyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-1,2,4-triazin-3-ylthio)méthyl3-céphem-4-carboxylique.
<EMI ID=231.1>
(d, 1H, 7�-H) ; 5,38 (s, 1H, 7-CH) ; 4,99
(d, 1H, 6"-H) ; et 3,28 ppm (bs, 3H, triazine N-CH3 ) .
Exemple 20
A 24 ml de tétrahydrofurane sec, on ajoute 408 mg (0,8 mmole) du produit de l'exemple 19, et 919 mg (7 mmoles) de N-triméthylsilylacétamide. La solubilisation est complète au bout de 10 minutes, et au bout de 15 minutes, on place la solution dans un <EMI ID=232.1>
retire le mélange résultant du bain de glace et on le maintient
<EMI ID=233.1>
volume faible (environ 10 ml) et on ajoute de l'eau glacée. On agite ensuite la suspension résultante, et on ajuste le pH à 6,5. On lave la solution résultante avec 2 volumes d'éther, puis on soumet la phase aqueuse à une évaporation dans un appareil rotatif jusqu'à ce que l'on ait éliminé l'éther. On acidifie ensuite le mélange aqueux à pH 1,7, et on recueille par filtration le solide résultant et on le sèche partiellement sur le filtre. On sèche ensuite sous vide le produit humide pour obtenir 96 mg d'acide
<EMI ID=234.1>
3-(4-méthyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-1,2,4-triazin-3-ylthio) méthyl-3-céphem-4-carboxylique sous la forme d'une poudre jaunebrun pâle.
<EMI ID=235.1>
Exemple 21
En utilisant le même procédé que celui décrit dans l'exemple 20, mais en remplaçant la N-chloroformyl-N,N'-dimëthylurée par 217 mg
<EMI ID=236.1>
hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)méthyl-3-céphem-4carboxylique.
RMN, DMSO d6 : 9,52 (d, 1H, NH) ; 8,72 (d, 1H, NH) ; 7,45, 7,10 et
6,99 (m, 3H, thiényle) ; 5,88 (d, 1H, 7-CH) ;
5,74 (q, 1H, 7�-H) ; 5,08 (d, 1H, 6�-H) ; 4,08
(m, 2H, 3-CH2 ) ; 3,78 (b, 4H, N-CH2-CH2-N) ; 3,60
(m, 2H, 2-CH3) ; 3,3'4 et 3,28 ppm (deux s, 6H
<EMI ID=237.1>
Exemple 22
A 15 ml de THF sec, on ajoute 317 mg (0,5 mmole) du sel de
<EMI ID=238.1>
<EMI ID=239.1>
résultante 0,59 g de N-triméthylsilylacëtamide. On agite le mélange pendant 2 heures à température ambiante, temps au bout duquel se produit la solubilisation. On refroidit ensuite le
<EMI ID=240.1>
d'oxyde de propylène. On ajoute ensuite au mélange 123 mg (0,5
<EMI ID=241.1>
agite ensuite la solution résultante à température ambiante pendant 1,5 heure, temps au bout duquel on filtre le mélange réactionnel. On ajoute au filtrat 1 ml d'eau ; toutefois, il ne se produit pas de précipité. On évapore ensuite le mélange sous vide à environ
10 ml, et on lui ajoute 50 ml d'acétate d'éthyle suivi par l'addition de 50 ml d'eau. On amène le pH du mélange à 7,5 par addition de bicarbonate de sodium. On ajoute à la couche aqueuse
50 ml d'acétate d'éthyle frais et 15 ml de THF, et on abaisse le pH de la couche aqueuse à 2,5 par addition d'acide chlorhydrique
<EMI ID=242.1>
sèche sur sulfate de magnésium, et on la filtre. On évapore ensuite le filtrat sous vide à environ 10 ml, puis on ajoute 20 ml d'éther. On filtre ensuite le mélange pour obtenir 150 mg d'acide
<EMI ID=243.1>
3-ylthio)méthyl-3-céphem-4-carboxylique.
RMN, DMSO d6 : 7,35 (b, 4H, o-chlorobenzoyle) ; 6,96 (q, 4H,
p-hydroxyphényle) ; 5,83 (q, 1H, 7�-H) ; 5,47
<EMI ID=244.1>
Exemple 23
A 25 ml de THF sec contenant 1,18 g (9 mmoles) de N-triméthylsilylacétamide, on ajoute 634 mg (1,0 mmole) du sel trifluoro-
<EMI ID=245.1>
3-céphem-4-carboxyliqua. La solubilisation se produit 15 minutes après la fin de l'addition du composé de céphalosporine. On
<EMI ID=246.1>
glace-acétone, et on ajoute 84 mg (1 mmole) de bicarbonate de sodium suivi par l'addition de 1 ml d'oxyde de propylène. On ijoute ensuite au mélange résultant 226 mg (1 mmole) de 1-chloro- <EMI ID=247.1>
mélange réactionnel à température ambiante et on l'agite à température ambiante pendant 1,5 heure. On filtre ensuite le mélange réactionnel, et on ajoute au filtrat 1 ml d'eau. Il ne
se produit pas de précipitation. On évapore ensuite sous vide
le mélange à environ 10 ml, et on ajoute 100 ml d'un mélange 6:1 d'acétate d'éthyle et de THF en même temps que 50 ml d'eau. On porte le pH du mélange à 7,0 par addition de bicarbonate de sodium. On sépare ensuite la couche aqueuse de la couche organique, et on abaisse le pH de la couche aqueuse à 2,0 par addition d'acide chlorhydrique IN. On filtre ensuite le mélange et on lave le solide recueilli à l'alcool isopropylique et on le sèche pour obtenir
<EMI ID=248.1>
(q, 2H, 3-CH2) ; 4,08 (b, 4H, N-CH2-CH2-N) ; 3,7-3,5
(b, 5H, 2-CH2 et triazine N-CH3) ; et 3,44 ppm (s, 3H, S02CH3).
Exemple 24
En utilisant le procédé de l'exemple 22 à l'échelle de 1 mmole, on fait réagir la céphalosporine avec 151 mg (1 mmole) de N-chloroformyl-N,N'-diméthylurée en présence de bicarbonate de sodium à
la place de la triéthylamine utilisée dans l'exemple 22, pour
<EMI ID=249.1>
dihydro-1,2,4-triazin-3-ylthio) méthyl-3-céphem-4 -carboxylique. RMN, DMSO d6-D20 : 7,08 (q, 4H, p-hydroxyphënyle) ; 5,72 (d, 1H,
<EMI ID=250.1>
Exemple 25
En utilisant le procédé de l'exemple 24, mais en utilisant
<EMI ID=251.1>
<EMI ID=252.1>
<EMI ID=253.1>