<EMI ID=1.1>
<EMI ID=2.1> <EMI ID=3.1>
<EMI ID=4.1>
fièrement la surface des parois internes de la cellule.
<EMI ID=5.1>
spores non mobiles.
<EMI ID=6.1>
<EMI ID=7.1>
<EMI ID=8.1>
velles races capables de produire une quantité plus grande encore de lutéine. Les races août irradiées, par exemple pendant environ 20 environ 50 minutes, au moyen d'une
<EMI ID=9.1>
<EMI ID=10.1>
il en résulte une production de quantités relativement élevées de lutéine, par exemple de l'ordre d'environ 1 g... de lutéine par gallon (4,54 litres) de milieu.
La lutine est un composé connu présentant uns grands
<EMI ID=11.1>
<EMI ID=12.1>
de la volaille, dos oeufs, des denrées alimentaires et fourragères, etc.
On connaît déjà des procédés de production de
<EMI ID=13.1>
permet d'obtenir des rendements élevés en lutéine en l'absence de lumière et il évite ainsi les problèmes et les frais de l'éclairage, ainsi que les problèmes de génie
<EMI ID=14.1>
nation de la chaleur produite par les lampes, '.la prévention d'une contamination par d'autres organismes"
<EMI ID=15.1>
Un caractère important de la présente invention, oient la composition des milieux nutritifs utilisés pour cultiver les algues qu'on emploie dans le procédé de
<EMI ID=16.1>
milieux nutritifs sont essentiels en vue de l'obtention de rendements élevés en lutéine. En outre, d'autres
<EMI ID=17.1>
soient pas essentiels*
Les Ingrédients essentiels des milieux nutritifs sont les suivants!
(1) Une source d'hydrate de carbone. La source d'hydrate de carbone est de préférence de la dextrose} on préfère notamment de la dextrose additionnée de
<EMI ID=18.1>
spécialement de la dextrose additionnée de mélasse
de citron ou de mélasse de canne a suore intervertie', haut indice. On peut aussi utiliser, seuls ou en toute combinaison, d'autres sucres et des alcools dérivés de sucres, tels que maltose, fructose, mannose, dextrine, mannitol etc., mais leur efficacité n'atteint pas celle' des sucres préfères. La source d'hydrate de carbone est employée en une quantité comprise entre 1 et environ 19 %, de préférence entre environ 2,5 et environ 8 %, par rapport au poids du milieu nutritif. Lorsqu'on utilise une combi-
<EMI ID=19.1>
à une concentration comprise entre environ 0,25 et environ 4 %, de préférence entre environ 0,5 et environ 2 %, et
<EMI ID=20.1>
<EMI ID=21.1>
(2) De la vitamine B.. en une quantité comprise
<EMI ID=22.1>
tritif et de préférence d'environ 30 mg par litre. La
<EMI ID=23.1>
<EMI ID=24.1>
<EMI ID=25.1>
<EMI ID=26.1>
du nitrate ou du chlorure d'ammonium, de la guanidine ou un de ses sels, tels que le nitrate, le carbonate, l'acétate de guanidine, etc. La quantité de la source
<EMI ID=27.1>
<EMI ID=28.1>
<EMI ID=29.1>
en poids de la source d'azote, par rapport au poids du milieu nutritif. On préfère la guanidine ou le nitrate de guanidine, vu que non seulement Il* provoquent un changement favorable et prononcé du rapport entre la
<EMI ID=30.1>
ils exercent une action antiseptique Modérée sur le milieu nutritif, action qui aide a empêcher la croissance d'or-
<EMI ID=31.1>
trice est particulièrement importante pendant le stade
<EMI ID=32.1>
ou fongique.
<EMI ID=33.1>
ou inorganique soluble dans l'eau, par exemple du sulfate,
du chlorure, du nitrate, de l'acétate de magnésium etc., à une concentration comprise entre environ 0,02 et environ 0,8 g par litre et de préférence entre environ 0,2 et environ
<EMI ID=34.1>
de milieu.
<EMI ID=35.1>
ou inorganique soluble dans l'eau, par exemple du nitrate, de 1'acétate, du phosphate de potassium etc. La quantité
<EMI ID=36.1>
et environ 3 g par litre de milieu, <EMI ID=37.1>
<EMI ID=38.1>
<EMI ID=39.1>
introduit sous forme de phosphate. La concentration en-',
<EMI ID=40.1>
Les ingrédients préférés comprennent"
(1) Une source d'acide aminé. Des sources d'acide - :
aminé qui peuvent être utilisées comprennent un ou plusieurs
<EMI ID=41.1>
phénylalanine, de tyrosine, de méthionine et d'acide
<EMI ID=42.1>
<EMI ID=43.1>
<EMI ID=44.1>
<EMI ID=45.1>
<EMI ID=46.1>
de sodium, de potassium, de calcium, de magnésium, ferrique, d'ammonium, été. ou un ester de l'acide poétique
<EMI ID=47.1>
<EMI ID=48.1>
<EMI ID=49.1>
<EMI ID=50.1>
<EMI ID=51.1>
<EMI ID=52.1>
<EMI ID=53.1>
<EMI ID=54.1>
<EMI ID=55.1>
' algues. On peut utiliser d'autres agents de séquestration
<EMI ID=56.1>
est préféré, La quantité d'agent de séquestration utilisée <EMI ID=57.1>
<EMI ID=58.1>
<EMI ID=59.1>
est comprise entre environ 0,05 et environ 2,0 g par litre de milieu nutritif,
Le pH du milieu nutritif devrait être compris
<EMI ID=60.1>
<EMI ID=61.1>
<EMI ID=62.1>
à une irradiation par des rayons ultraviolet., dans un ' milieu nutritif tel que décrit ci-dessus à une température comprise entre environ 20 et environ 42 ,Ci de préférence
<EMI ID=63.1>
dans l'obscurité et le temps d'incubation est compris entre environ 2 et environ 8 Jours, de préférence entre environ
<EMI ID=64.1>
<EMI ID=65.1>
tes au cours du procédé sont ensuite séparées de la culture
<EMI ID=66.1> fugation suivie d'un séchage par pulvérisation afin d'éliminer l'eau résiduaire des cellules. Les cellules séohées sont recueillies sous forme d'une farine vert
<EMI ID=67.1>
comme adjonction à des alimente ou des fourrages"
LA* cellules séchées présentent l'avantage supplémentaire d'offrir une valeur nutritive, en plue de
<EMI ID=68.1>
tion du solvant, par exemple par évaporation ou distilla*
<EMI ID=69.1>
Dans une forme d'exécution préférée de l'invention,
<EMI ID=70.1>
<EMI ID=71.1>
environ 48 et environ 72 heures, on ajoute a la culture de la guanidine en quantité d'environ 0,1 pourcent. Selon une variante, l'adjonction de 0,1 pourcent de guanidine
peut être effectuée de façon continue pendant toute la
<EMI ID=72.1>
en deux portions ou plus. Il est également préférable d'ajouter la source d'hydrate de carbone par portions, <EMI ID=73.1>
est avantageuse lorsqu'on utilise des quantités d'hydrates de carbone dépassant 8 pouroent, et on la préfère égale* ment pour des quantités de 8 pouroent ou moins; par exemple, on ajoute au début une quantité de la source d'hydrate de carbone comprise entre environ 3 et
environ 5 pouroent, et par la suite on en ajoute encore
une quantité comprise entre environ 1 et environ 4 pour. cent, en une seule ou plusieurs portions, au coure de la' fermentation. En outre, lorsqu'on utilise plue de 1 pour*
<EMI ID=74.1>
Exemple 1
<EMI ID=75.1>
<EMI ID=76.1>
On introduit 100 ml de ce milieu à base d'âges
<EMI ID=77.1>
est recueillie par lavage dans 50 ml d'eau stérile.
Des portions de 100 ml d'un milieu nutritif présentant la composition suivante sont introduites dans des
<EMI ID=78.1>
<EMI ID=79.1>
<EMI ID=80.1>
<EMI ID=81.1>
sine, de l'acide glutamique, de la méthionine et de la phénylalanine, <EMI ID=82.1>
<EMI ID=83.1>
moyen d'une suspension de cellules préparée comme décrit) ci"
<EMI ID=84.1>
<EMI ID=85.1>
suivante
<EMI ID=86.1>
<EMI ID=87.1>
<EMI ID=88.1>
<EMI ID=89.1>
<EMI ID=90.1>
alanine, de la tyrosine, de la méthionine et de l'acide glutamique.
<EMI ID=91.1>
<EMI ID=92.1>
<EMI ID=93.1>
<EMI ID=94.1>
Exemple '
<EMI ID=95.1>
suivante :
<EMI ID=96.1>
<EMI ID=97.1>
<EMI ID=98.1>
et de phénylalanine..
<EMI ID=99.1>
<EMI ID=100.1>
<EMI ID=101.1>
de 500 ml, contenant chacun 50 ml du milieu nutritif décrit
<EMI ID=102.1>
Les flacons inoculés sont disposés dans un agitateur rotatif
<EMI ID=103.1>
<EMI ID=104.1>
<EMI ID=105.1>
mentation, afin de déterminer la croissance des cellules et
<EMI ID=106.1>
résultats de ces flacons d'essai* Tableau
<EMI ID=107.1>
<EMI ID=108.1>
noidax, <EMI ID=109.1>
<EMI ID=110.1>
<EMI ID=111.1>
<EMI ID=112.1>
<EMI ID=113.1>
contenant une source d'hydrate de carbone, de la vitamine
<EMI ID=114.1>
phosphate et des iona potassium, et ou récupère des
<EMI ID=115.1>
<EMI ID = 1.1>
<EMI ID = 2.1> <EMI ID = 3.1>
<EMI ID = 4.1>
proudly the surface of the internal walls of the cell.
<EMI ID = 5.1>
non-motile spores.
<EMI ID = 6.1>
<EMI ID = 7.1>
<EMI ID = 8.1>
such breeds capable of producing an even greater quantity of lutein. The August breeds irradiated, for example for about 20 about 50 minutes, by means of a
<EMI ID = 9.1>
<EMI ID = 10.1>
this results in the production of relatively high amounts of lutein, for example on the order of about 1 g ... of lutein per gallon (4.54 liters) of medium.
The pixie is a known compound exhibiting large
<EMI ID = 11.1>
<EMI ID = 12.1>
poultry, eggs, food and feed, etc.
Processes for the production of
<EMI ID = 13.1>
allows high yields of lutein to be obtained in the absence of light and thus avoids the problems and costs of lighting, as well as engineering problems
<EMI ID = 14.1>
nation of the heat produced by the lamps, '. the prevention of contamination by other organisms "
<EMI ID = 15.1>
An important feature of the present invention is the composition of the nutrient media used to cultivate the algae which is employed in the process of cultivation.
<EMI ID = 16.1>
Nutrient media are essential for obtaining high yields of lutein. In addition, others
<EMI ID = 17.1>
are not essential *
The essential ingredients of nutrient media are as follows!
(1) A source of carbohydrate. The source of carbohydrate is preferably dextrose} especially preferred is dextrose supplemented with
<EMI ID = 18.1>
especially dextrose with added molasses
lemon or sugar cane molasses inverted ', high index. Other sugars and alcohols derived from sugars, such as maltose, fructose, mannose, dextrin, mannitol etc. can also be used, alone or in any combination, but their effectiveness does not reach that of the preferred sugars. The carbohydrate source is employed in an amount of between 1 and about 19%, preferably between about 2.5 and about 8%, based on the weight of the nutrient medium. When using a combination
<EMI ID = 19.1>
at a concentration of between about 0.25 and about 4%, preferably between about 0.5 and about 2%, and
<EMI ID = 20.1>
<EMI ID = 21.1>
(2) Vitamin B .. in an amount included
<EMI ID = 22.1>
tritif and preferably about 30 mg per liter. The
<EMI ID = 23.1>
<EMI ID = 24.1>
<EMI ID = 25.1>
<EMI ID = 26.1>
ammonium nitrate or chloride, guanidine or a salt thereof, such as nitrate, carbonate, guanidine acetate, etc. The quantity of the source
<EMI ID = 27.1>
<EMI ID = 28.1>
<EMI ID = 29.1>
by weight of the nitrogen source, relative to the weight of the nutrient medium. Guanidine or guanidine nitrate is preferred, since it not only causes a favorable and marked change in the ratio of
<EMI ID = 30.1>
they exert a moderate antiseptic action on the nutrient medium, action which helps to prevent the growth of gold.
<EMI ID = 31.1>
trice is especially important during the stage
<EMI ID = 32.1>
or fungal.
<EMI ID = 33.1>
or inorganic soluble in water, for example sulphate,
magnesium chloride, nitrate, acetate etc., at a concentration of between about 0.02 and about 0.8 g per liter and preferably between about 0.2 and about
<EMI ID = 34.1>
middle.
<EMI ID = 35.1>
or inorganic soluble in water, eg nitrate, acetate, potassium phosphate etc. The amount
<EMI ID = 36.1>
and approximately 3 g per liter of medium, <EMI ID = 37.1>
<EMI ID = 38.1>
<EMI ID = 39.1>
introduced in the form of phosphate. The concentration in - ',
<EMI ID = 40.1>
Preferred ingredients include "
(1) A source of amino acid. Sources of acid -:
amino which can be used include one or more
<EMI ID = 41.1>
phenylalanine, tyrosine, methionine and acid
<EMI ID = 42.1>
<EMI ID = 43.1>
<EMI ID = 44.1>
<EMI ID = 45.1>
<EMI ID = 46.1>
sodium, potassium, calcium, magnesium, ferric, ammonium, summer. or an ester of poetic acid
<EMI ID = 47.1>
<EMI ID = 48.1>
<EMI ID = 49.1>
<EMI ID = 50.1>
<EMI ID = 51.1>
<EMI ID = 52.1>
<EMI ID = 53.1>
<EMI ID = 54.1>
<EMI ID = 55.1>
algae. Other sequestering agents can be used
<EMI ID = 56.1>
is preferred, The amount of sequestering agent used <EMI ID = 57.1>
<EMI ID = 58.1>
<EMI ID = 59.1>
is between approximately 0.05 and approximately 2.0 g per liter of nutrient medium,
The pH of the nutrient medium should be understood
<EMI ID = 60.1>
<EMI ID = 61.1>
<EMI ID = 62.1>
to irradiation with ultraviolet rays., in a nutrient medium as described above at a temperature of between about 20 and about 42, preferably Ci.
<EMI ID = 63.1>
in the dark and the incubation time is between about 2 and about 8 days, preferably between about
<EMI ID = 64.1>
<EMI ID = 65.1>
during the process are then separated from the culture
<EMI ID = 66.1> fugation followed by spray drying to remove waste water from the cells. The seoea cells are collected in the form of a green flour
<EMI ID = 67.1>
as an addition to feed or fodder "
LA * dried cells have the additional advantage of providing nutritional value, in addition to
<EMI ID = 68.1>
tion of the solvent, for example by evaporation or distillation *
<EMI ID = 69.1>
In a preferred embodiment of the invention,
<EMI ID = 70.1>
<EMI ID = 71.1>
About 48 and about 72 hours, guanidine is added to the culture in an amount of about 0.1 percent. Alternatively, the addition of 0.1 percent guanidine
can be carried out continuously throughout the
<EMI ID = 72.1>
in two or more portions. It is also better to add the carbohydrate source in portions, <EMI ID = 73.1>
is advantageous when using amounts of carbohydrates exceeding 8 percent, and also preferred for amounts of 8 percent or less; for example, an amount of the carbohydrate source of between about 3 and
about 5 percent, and then we add more
an amount between about 1 and about 4 percent. hundred, in one or more portions, during the 'fermentation. In addition, when using more than 1 for *
<EMI ID = 74.1>
Example 1
<EMI ID = 75.1>
<EMI ID = 76.1>
100 ml of this age-based medium are introduced
<EMI ID = 77.1>
is collected by washing in 50 ml of sterile water.
Portions of 100 ml of a nutrient medium having the following composition are introduced into
<EMI ID = 78.1>
<EMI ID = 79.1>
<EMI ID = 80.1>
<EMI ID = 81.1>
sine, glutamic acid, methionine and phenylalanine, <EMI ID = 82.1>
<EMI ID = 83.1>
means of a cell suspension prepared as described) "
<EMI ID = 84.1>
<EMI ID = 85.1>
next
<EMI ID = 86.1>
<EMI ID = 87.1>
<EMI ID = 88.1>
<EMI ID = 89.1>
<EMI ID = 90.1>
alanine, tyrosine, methionine and glutamic acid.
<EMI ID = 91.1>
<EMI ID = 92.1>
<EMI ID = 93.1>
<EMI ID = 94.1>
Example '
<EMI ID = 95.1>
next :
<EMI ID = 96.1>
<EMI ID = 97.1>
<EMI ID = 98.1>
and phenylalanine.
<EMI ID = 99.1>
<EMI ID = 100.1>
<EMI ID = 101.1>
500 ml, each containing 50 ml of the nutrient medium described
<EMI ID = 102.1>
The inoculated vials are placed in a rotary shaker
<EMI ID = 103.1>
<EMI ID = 104.1>
<EMI ID = 105.1>
mentation, to determine cell growth and
<EMI ID = 106.1>
results of these test vials * Table
<EMI ID = 107.1>
<EMI ID = 108.1>
noidax, <EMI ID = 109.1>
<EMI ID = 110.1>
<EMI ID = 111.1>
<EMI ID = 112.1>
<EMI ID = 113.1>
containing a source of carbohydrate, vitamin
<EMI ID = 114.1>
phosphate and potassium ions, and or recovers
<EMI ID = 115.1>