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La présente Invention concerne la préparation de nouveaux esters d'un disaccharide, par exemple du cellobiose, du maltose ou, en particulier, du tréhalose avec au moins deux acides carboxyliques de poids moléculaire élevé, en particulier avec des acides carboxyliques ayant plus de 10 atomes de carbone, et leurs sels.
Ces acides carboxyliques de poids moléculaire élevé sont, en premier lieu, des acides carboxyliques aliphatiques ou cycloaliphatiques supérieurs
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dont les chaînes carbonées peuvent être droites ou ramifiées et qui peuvent présenter d'autres substituants, comme des groupes hydroxyles ou oxo libres ou substituée par exemple les acides stéarique, béhénique, montanique, phleimycolique, mycolique, mycolanique, corynomycolique, ou ehaulmoogrique.
Les deux groupements ester se trouvent particulièrement en position 2,2'- ou 6,6'- du disaccharide. Des groupes hydroxy des disaccharides peuvent aussi être remplacés par des groupes aminogènes, libres ou substitués. De préférence, lesdits esters contiennent des groupes hydroxyles libres ou se présentent sous la forme de leurs sels.
Ces nouveaux composés possèdent de précieuses propriétés pharmacologiques. Ainsi, ils influencent dans le sens favorable le développement et le cours de l'infection tuberculeuse. On peut les utiliser comme remède dans les maladies humaines et animales occasionnées par le Mycobac- terium tuberculosis, ou comme produits intermédiaires pour la préparation d'autres produits précieux.
On obtient ces nouveaux composés en transformant des disaccharides en lesdits esters et en préparant, si on le désire, des sels de ceux-ci ou en transformant éventuelle- ment les sels obtenus en les composés libres. Ainsi, on peut faire réagir des halogénures d'acides carboxyliques de poids moléculaire élevé, en particulier des chlorures, ou des anhydrides de ces acides, sur des disaccharides ou sur leurs
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sels, comme les sels alcalins ou alcalino-terreux, de préfé- rence les sels de sodium ou de potassium.
De plus, il est aussi possible d'obtenir ces nouveaux composés en faisant réagir des acides carboxyliques de poids moléculaircélevé ou leurs sels sur des esters réactifs des disaccharides, par exemple sur des esters d'acides sulfoniques, en particulier de l'acide toluène-sulfonique ou de l'acide méthane-sulfonique, ou sur des esters d'hydraoides halogénés. Les hydroxyles ne prenant pas part à la réaction peuvent être protégés par exemple par transformation en groupes méthylènedioxy, comme le groupe benzylièdne-dioxy, ou en groupes triarylméthoxy, corsas les groupas trityloxy, en groupes benzyloxy,
carbobenzoxy ou acétoxy. Après l'estérification effectuée suivant l'invention, ces groupes se laissent 'Se nouveau scinder, par exemple par traitement avec des agents faiblement acides, comme l'acide chlorhydrique dilué dans le dioxanne, ou avec des agents basiques, comme l'hydroxylamine ou au moyen d'agents hydro- gênants .
Pour la préparation des composés 6,6'-diacylés, une protection intermédiaire des groupes hydroxyles ne prenant pas part à la réaction n'est pas nécessaire. Les composés 2,2'-diacylés ne peuvent être obtenus par contre qu'on protégeant temporairement les groupes hydroxyles dans les positions 4 et 6. La réaction est effectuée, avantageusement, avec des matières de départ bien sèches, en présence de
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solvants et/ou d'agents de condensation, comme la pyridine.
Lorsque les matières de départ utilisées pour le présent procédé ne sont pas décrites, elles peuvent être préparées par des méthodes en elles-mêmes connues.
Les nouveaux composés de la présente invention peuvent être utilisés comme médicaments, par exemple sous la forme de préparations pharmaceutiques les renfermant, eux ou leurs sels, en mélange avec un excipient pharmaceutique, organique ou inorganique approprié pour un plication enter ale, parentérale ou topique. Pour la formation de cet excipient, on envisage les substances ne réagissant pas avec les nouveaux composés, par exemple l'eau, la gélatine, le lactose, l'amidon, le stéarate de magnésium, le talc, les huiles végétales, les alcools benzyliques, des gommes, des polyalcoylène-glycols, de la vaseline, de la cholestérine ou d'autres excipients connus.
Ces préparations pharmaceutiques peuvent se présenter sous forme de tablettes, de dragées, d'onguents, de crèmes, ou sous forme liquide à l'état de .solutions, de suspensions ou d'émulsions. Le cas échéant, elles sont stérilisées et/ou renferment des substances auxiliaires comme des agents de conservation, de stabilisation, des agents mouillants ou émulsifiants, des sels pour faire varier la pression osmotique ou des tampons, Elles peuvent encore renfermer d'autres substances actives en thérapeutique, par exemple des substances anti-bactériennes ou anti-virus.
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La présente intention concerne également, titre de produits industriels nouveaux, les produits conformes a ceux définis ci-dessus.
L'invention est décrite plus en détail dans les exemples non limitatifs qui suivent. Les température sont indiquées en degrés centigrades.
Exemple 1.
Dans 30 cm3 de diméthylformamide, on dissout à chaud 1,8 g de dihydrate de tréhalose, puis on ajoute 30 cm3 de benzène et l'on évapore à sec dans le vide. On répète deux fois cette opération On dissout le résidu dans 40 cm3 de di- méthyl-formamide, mélange avec 20 cm3 de pyridine et porte la solution à 70 - 80 . On Meute ensuite en trois portions , au total 3,95 g de chlorure de l'acide béhénique, et laisse le mélange reposer pendant 18 heures, à 50 - 55 . On le refroidit ensuite, et le verse dans de l'eau glacée. On fait sécher le précipité dans un exsiccateur à vide, et le fait recristalliser dans de l'ester acétique.
On obtient ainsi le 6,6'-dibéhénoyl- [alpha],[alpha]'-tréhalose de formule :
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fondant à 78 - 80 ;rendement 3,6 g (73% de la théorie). Pour l'analyse, on fait recristalliser encore une fois dans de l'alcool. Point de fusion - 71 - 73 , [[alpha]]D24 = + 60 ¯ 4 (dans le chloroforme c = 0,57).
Exemple 2.
On secoue pendant 24 heures à la température ambiante, 6,84 g de tréhalose finement pulvérisé, séché dans le vide poussé (2 heures, 0,01 m de Hg, 80 C), avec 4 g de chlorure de zinc fraîchement fondu et 24 car de benzaldéhyde fraîchement distillé. On ajoute alors 20 car d'eau glacée et 20 car d'éther de pétrole,, et l'on essore le précipité.
On obtient ainsi 7,7 g de 4,6,4',6'-dibenzylidène-[alpha],[alpha]'- tréhalose brut, fondant à 125 - 135 .Pour l'analyse, on fait recristalliser trois fois dans l'ester acétiques @ de fusion =- 195 - 198 , [[alpha]]D23 + 88 ¯ 4 (alcool, c = 0,&9).
On dissout 0,52 g de dibenzylidène-tréhalose dans 5 cm3 de pyridine absolue et mélange avec 0,66 g de chlorure de stéaroyle dans 5 cm3 de benzène. Au bout de 24 heures de repos à la température ambiante, on ajoute 20 cm3 d'eau glacée et l'on essore le précipité. On le sèche dans l'exsiccateur à vide. La séparation par chromatographie donne
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0,3 due 2,2i¯âl$ê&#o$l¯µs6/%\&*"êbnï%liûhn*asa,*"t$tè'' halose* Point de fusion 186 - 188 . pouv l'êiiâlfse, on le rgerlatalllse deux fois dans lealcool. Point do fusion 88 -" 1909.
On dissout Del g âe g±,gs-âî8téai"ate le dans 1 fi,ro3 tae los&Tme mélange avec 0,2 car d8aoi<3 ehlc'yyÊq'3 siitiB ê9 a 0t fait iboalllir à 2 minutes* On ajoe sloir-s f> osa* c32oan glasëo sehe la précipité dans l'ôssiosaftej1 à e où fait ....35'alAscx" dans l'alcool. On obtient 8iSZ o;)BO de Ss2'5 iis'ôéa?.-./î- a,a'-tréhalose de formule
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Point de fusion 160 - l80Q Ap3?s e. autres cit111- tiens, il fond "à 175 - 185o [a]D + 80 - 8 (ppridlne s - 0,5)' .s''n.? o On Mélange 0,52 g de 1bny11de-téhaloe daaa 5 cm de pyrid1ne absolue aP.r 018 g de 81..#. do lOc1de tJâii3.é,9', dans 5 osa de tÂ'&'#3y'", au bout de Ë4 fo@#?B de repos, on ajoute 20 <s!M ea glacé et aaf103'G 1@ précipité.
On sèche celui "ci dans la@1@cQteur à vide et on 3. absorbe sur de 18aumine. Après élut101 la fraction cMes'oforsalqua donne 0,340 9 de 2,2'-d3amD4' c6.y3$e-
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a,a -tréhalose, fondant à 168 - 17 0 Pour l'analyse, on fait racristalliser trois fois dans It4r i80popvl1Que. Point de fusion 179 - 182 .
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Dans 1 cnr de dioxanne, on dissout à chaud 0,1 g de 2,2'-dibéhénate de'd1benzy11d0ns-tréhalose. On ajoute 0,2 cm3 d'acide chlorhydrique aqueux 6,5 n, fait bouilli? 1 à 2 minutes, refroidit et ajoute 4 cm3 d'eau glacée. Après
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séchage dans l'exalecateur à 1d*, on fait recristalliser le précipité dans l'alcool. On obtient ainsi 1,080 g de 2.,2t-dlbéhénoyl- ,al-trêhalot.e fondant à 115 - 125 . Après deux autres rec1Gta1118&tlon8 dans l'alcool, point de fusion - 125 - 127 , [a]6 - 4- 7' t 6 (pyridine, e - 0,42).
,Exemple¯ 4.
Comme décrit dans l'exemple 1, on sèche bien 0,36 g
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de tréhalose, puis on dissout dans 5 car de diméth1l1toX'ma.m1de absolu et 5 em3 de pyridine eahydyet On ajoute alors goutte à goutte, lentement, à environ 70 - 80 , le6 g de chlorure de 2-elcosyl-3-aedtoxy-têtracosanoyie dans 5 car de benzène absolu. On laisse reposer ce mélange 24 heures à 50 - 55 , évapore dans le vide et traite le résidu par chromatographie.
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On obtient ainsi le 6.,68-di-(2"-elcosyl-311-acétoxy-tétra- cosanoyl)-tr6halose de formule :
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Il fond à 53 - 55 CJg ro *±* Òo (dans le eîiloroforât; Bans 3.@ sets scsi . 0*' oiet1; aussi, le 6t,6\S"%rl" (2''-@iel-3-aeét'-'s.so@snoyl)' Ë.als q obtient lor@ lie la ;p!ï.fîo1sAa '3m:'"'py'" jàlîirie 6.!'; H'it, ##/$#±& et HAj, apR4.' -j','."1 f"!ftt1!'t,"l Of.':! r{.O'{1'!::f gs'M;? due mêtkwnal, fond 5o # t 3 ¯ * 3 /?"''''>t'1'J '1\ 0? (ib1;:'.,!;,t 31fJ:)1 A@S (jJ0t;: Bîes 'a'StâF ],M,1?,nd Maintint lo isiélang réfiistiasasi à 5 Gssa,la@µ a 1 tesap'iratwy a.Nbla.n'&e lieis de 4 hoNss h 50 lU 55 On chauffe 90 heures 125 , 0'-6? û 66 ? dan2 0±-? de 'Sis!éh'lfoFB!i<3@ avec 0756 g do sel de potassium au 2 @io@yl-3-ds'oxy-' et une goîi'ët à8eu.
On 2*frlâife alos's la 501ut19n, ajouta 10 en d8a8id SKlfurlse afaei# normaal et extrait à l'éther. -14,as kta1t8 éth3?s<, îavés t Bêches sur du sulfate de sodîtssa s'oat évaporés dans le vide. On obtient ainsi 0968 g d'un fî,mbl!!tla'.nc qui, appas tzéprat1on chromât graphique sur du gel de si liée Davloonp av*o ee l'éther de pêty.'-';.let fonn1t 0759 g de 66<3"(3"-eiMsyl-
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-hyroxy-tëtx'acosanoyl ) -hexaaetyl-'tyT.loo # ap'x'&j purification au moyen d'éthi-,r et de méthanol, fond à 55 [o;]D= <} 67 .
La désacétylatlon du produit obtenu, d'après les méthodes usuelles, donne du 6 6 t-di-(2w-alca3i'l-3w-hy<3:e>G:sy- tétrseo8aïioyl)-tïiéhalosa fondant à 124 - 12s0j[a]D 8 40
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(dans le chloroforme 5*
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On chauffe 6X heures à 115 - 125 24 heur-.5 a 130-1:;5 0,19 g de 6ï6l-ditO31 h&5:aaeétyi¯t2 éîîaloe(â, <2ani3 7 em3 de dlmëthyltorinamide, avec 0,625 g du sol de potassium de l'aide },x-d1hYdroxymyolan1qUe (Cq7H17 Ojï>K}. avoir isolé le produit réactionnel du Solange, comm0 décrit a. l'exemple 5, on obtient 0,642 g d'une substaaes u1, apris séparation chromatographiquo 8ur 12 g de gel de silice Baisonj et élution avec de l'être? de pétrole, j, fournit 0,52 g de 6t6,- <Si'-(3"<x-e!ihydyoxy-a'eolanoyl)-h&xaacëtyl'-tyéha3.oss. Point da fusion 400 J [a]D D 114 .
Za désacdtylatlon du produit ci-dessus, de manière usuelle, donne du 6,,6 n -d1-tS" "xu..dihydroxy-mycolenoyl)- tréhalose (C186H366û17 t 10 CHr,). Point de fusion 42 , C 3D * 3CO (dans le chlorofoinrte).
¯'OlG 7.
A o,43} g de tréhalogo anhydre dans 30 em3 de pyridine sèche" on ajoute 5,3 g de chlorure de l'acide x-mé-
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-nique n'!\1;ft n )" élh;l2<lms dans 5 m51:3 de pyridine, et laisss le Riélang s"epo:." semaines environ 20 On éJ:::,:.'t{f# alors la P;P:':iCUli!0 c1ana le vide at adsorbe le résidu obtenu (3,26 g) sur 90 g do Cal de uilîao Davle;on. On élue Ilooter de tJréh..lo& Q\'0C (3uk fois 250 mn.1 d'éther de pétiole, le Cb'Of(;;J.tOg!].phi@ tb ,\otmea.u suy 79 g û"&q6<b silicâque 211ineks?oât a qa@l -'. été a,j#ifeés 36 g de Gllt<3, '$In élu,9.tl!; avec dom fsp&âtîosG e efeatasi 200 cm} des solvants sui :.3 ;ttte!é' de pdtrole P- fî'?&e2.cn .,2,SHg@ tey pëtrole-beyjEe (1:1) f2"a.<3Me beasono f-efeios?, rfiélsags benzèlne-ét)1Jlez> (Isl) fs'aeticns ëthcs' 4 aetions.
A partes? e fractions on obtlonfe, après évaporât ion et purification au moyen d'éther @t as méth&nol, le 606te2 ( '? ) -tri- t; gl-cétoxy -tU! -mé'i;h02l:;i ""i'lii)@olQl1oyl .. tréh,lo!i3e l' SOU5 .'oyfsa d5 a@ poudre b3,aneh@p fondant à 37 - 380 Ha] D , cg. e4o (dam le chlol'oforn 1 Jj C 1,9 74) .
.Par va:pON11on des f'g>ct1ons dans cri obtient le 6,6 ' " -d- (5K"=ct;o25r¯ïîl" fflétlî02î|1-'mycolno5rl) tî?ételose, qui, après purification au moyen d'éther et de méthanol, fond il 35 - 37 ![<x] 25 (dans le chloroforme, JI C ':11 2 ,31) . le chlorure de l'aolde myool&nique utilisé comme si,ibstance de départ pout gtro obtenu de la Manière suivante On laisse reposer pendant une nuit, à 25 - 3 $ 5*5 g dOac1ae 3-hydroÀ"Yu':-mé'/:;hoxy-micolan1q12e ("Test Il}; 881'1176 4 15 en2)
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dans 17,5 cm3 de pyridine sèche à laquelle ont été ajoutés 6,3 cm3 d'anhydride acétique. On évapore la pyridine dans le vide, reprend le résidu par l'éther, lave la solution avec de l'eau, concentre à 10 cm3 et ajoute 20 cm3 de méthanol, l'acide 3-acétoxy-x-méthoxy-mycolanique précipitant.
Point de fusion 37 . On dissout 3,3 g de cet acide dans 17,5 cm3 de benzène exempt d'eau, ajoute 2 cm3 de chlorure d'oxalyle et laisse reposer une heure à la température ambiante. Après évaporation à sec dans le vide, le résidu peut être utilisé directement.
Exemple 8.
A 1,78 g de 2-eicosyl-tétracos-2-ène-oïque, dans 16 cm3 de benzène, on ajoute 1,4 cm3 de chlorure d'oxalyle et 1 goutte de pyridine. On laisse reposer pendant une nuit à la température ambiante, chauffe 3 heures à 70 puis évapore dans le vide, en ajoutant deux ou trois fois un peu de benzène. Le chlorure d'acide ainsi formé est repris dans 30 cm3 de pyridine et l'on ajoute 0,508 mg de tréhalose anhydre. On laisse reposer la solution pendant 2 semaines à 25 , extrait alors le produit réactionnel avec du chloro- forme et l'on obtient, après évaporation de la solution chlore-
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formique dans le vide, 0,84 g d'unq substance qu'on pout faire rQèr1atGl11l!Hr dans de l t.cêt Y.'i,e d'éthyle.
Par chromato- graphie sur de l'acide aillelquee on obtient 0,28 g de
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qui
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après r0cr1stal11cation dans de .acétate d'éthyle, fond à 97 - 1000. [a|p #* 550 (dano le chloroforma).
On évapore à se là colutloii dans le vîde. Le résidu donne , appea ehroHï&togï'aghi our du gel de silice et de l'acide elllelque 0,05 s de 6ê.6s 2(?)-(2" -eicosy 1-té toaeos-S18 -bne-oy 1 ) "téhalose qi fond à 72 - 73 1 a] D + 42 .
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Exemple 9
On dissout 0,75 g d'acide 3-x-dihydroxy-mycolani- que (2;H-37 Rv) dans 5 car de chloroforme, et neutralise en présence de phénolphtaléine, avec 1,67 cm3 d'une solution méthanolique d'hydroxyde de potassium binormale, évapore à sec, reprend le résidu dans de l'éther et précipite avec du méthanol le sel de potassium formé. On fait bouillir au reflux pendant 3 jours à 140 , 0,4 g de ce sel avec 6 car de diméthyl- formamide et 0,154 g de 6,6-di-tosyl-2,3,4,2,3',4'-hexaacétyl- tréhalose; on extrait le mélange réactionnel avec de l'éther et, de la solution éthérée, on précipite avoo du méthanol le produit formé (rendement 0,515 g).
On chromatographie celui- ci sur 10 g de gel de silice Davison et 5 g de Celite et élue avec 30 cm3 d'éther de pétrole. On obtient ainsi le 6,6'- (3",x"-dihydroxy-mycolanoyl)-2,3,4,2',3',4'-hexaacétyl- tréhalose qui, après précipitation de sa solution dans l'éther de pétrole par le méthanol., fond à 38-39 [[alpha]]D = + 440 (dans le chloroforme, c:1,5).
On en dissout 0,13 g dans 50 cm d'éther et 5 cm3 de solutiond'hydroxylamine (voir exemple 11), élimine immédiatement l'éther par distillation au bain-marie, à 60 , et reprend de nouveau le résidu dans de l'éther. On lave la solution éthérée avec de l'acide sulfurique dilué, l'évapore à sec et reprend de nouveau le résidu dans de l'éther, puis précipite avec du méthanol. On dissout le précipité dans 2 cm3
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d'éther do pétrole et adsorbe sur une colonne de 2,5 g de
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gel de silice Devloon et de le2 g da Gelife Après 4lutlon avec 20 com d'éther de pétrole, on obtient 0,098 g do 6,6'- dl-(3\xH-dihydroxy-mycolanoyl)-tréhaiose qui fond à 40-41.
[[alpha]]D = + 36 .
Exemple 10
A 0,43 g de tréhalose anhydre, dissous dans
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30 cm de pyridine sèohj, on ajoute le eh-,5,ure Ci 801<"<8 ob... tenu à partir de 3,3 g dtacide 3-actoxy-x-R:ëthoxysolaiqu@. dissous dans 5 cm ' de pyrl<tlni3. On laisse reposer le mélange 2 semaines à environ 20 et isole le produit de la réaction comme décrit dans les exemples précédents. Par chromatographie
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sur du gel de silice et de l'acide s111c1qué$ on obtient le 6,61...di...(3tt..acétoxy...xu-méthoxy-myoolanoyl)-tréhalos$ fon- dant à 38 , la]D = + 250 (chloroforme) et le 6,6'-2(P)'.tri- (3"-aoétoxy-x0-méthoxy-înycolaìoyl)¯tréhalose fondant à 37 0 ta]D + 240 (dans le chloroforme).
Exemple 11 On fait bouillir 3 jours au reflux, à 140 ,
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0,4 g du sel de potassium de l'acide 3¯hydro3cy-x-méthoxy - .mycolan1que ("Test"), avec 6 em3 de d1méthylf'ormamide et 0,154 de dîtosylhexewaacdtyl-trêhalose, On chromatographie le produit de la réaction sur du gel de silice Davison, et
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élue avec de l'éther de pétrole.. On obtient ainsi 0,44 g du
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6,6'-di(3"'-hydroxy-x'-!!iëthoxy-Nycolanoyl)-.2j,342'34''- hexoétY1-tréhaloGe fondant à 390 [c&3jj 440 (dans le chloroforme).
On dissout 0,25 g de ce produit dans 10 car
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d'éther sec et l'on ajoute 4 crar d'une solution dthydroxylam1ne (obtenue à partir de 2 cm3 d'une solution à 3% de chlorhydrate d'hydroxylamine dans de l'alcool à 95%;, neutralisée avec 2 car d'une solution à 3% d'hydrosyde de sodium dans de
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l'alcool à 95% et débarrasse par centl"'ifugati'" du chlorure de sodium formé). On secoue 2 minutes et lave aussitôt avec
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de l'eau acidulde;îl se forme une émulsion. On extrait avec de l'éther, lave la solution éthérée avec de l'eau, jusqu'au point neutre, sèche sur sulfate de sodium puis évapore à sec.
On obtient ainsi 240 mg dure cire jaune clair que l'on chromatographie sur 5 g de gel de silice avisos. la fraction
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dlude avec de l'éther de pétrole tst de nouveau chromato- graphide sur de l'acide sîllc%ue.On obtient ainsi par élution avec un mélange benzène-éther (1:1) 160 mg de 66'-d1- (3"-hydroxy-xn¯iaéthoxy-mycolanoyl)-tréhalose, fondant à 44 Ea]D + 31 0 (dans le chloroforme).
Si l'on effectue les opérations de cet exemple de la même manière avec un acide mycolanique di-hydroxylë,
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comme l'acide 3,x-dlhydroxy-mycolanique (CaiH17404),on obtient le 6,6 '-di-(5"*xft-dlhydroxy-mycolanoyl)-tréhalose,
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fondant à 2 [a]D m + 30 (dans le chloroforme).
Exemple 12 '110..-----.:10¯......." A une solution de 200 mg de mycolate d'argent dans 2 cm de benzène, on ajoute 50 mg de 66'-di-iodo'<'hexa- acétyl-tréhalose (obtenu à partir de 6,6'-dlmy.-hoxa aeétyl-tréhalose par réaction sur de l'iodure de sodium dans de l'acétone en tube scellé, à 1050). dissous dans 1 cm d'acétone et l'on chauffe.
Après 10 minutes, on ajoute 1 cm3 de pyridine sèche, et l'on fait bouillir la solution au reflux pendant 1 heure 1/2, puis on évapore à sec dans le vide. On dissout le résidu dans le benzène, secoue la solution benzénique avec de l'acide chlorhydrique concentréjusqu'à disparition de la coloration brune, concentre dans le vide, filtre à travers un filtre de porcelaine poreuse, puis évapore à sec.On reprend le résidu dans un peu de chloroforme et l'on précipite le produit de la réaction avec du méthanol.
On obtient ainsi une poudre blanche, fondant à 47-53
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la]D - 15 . 3 (dans le chloroforme), o s 1,0.
On chromatographie le produit encore impur sur
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un mélange de? silicate de magnésium et de Cëllte(2!l) et l'on obtient par dlution avec le mélange benzène-éther (2 il) 36 mg de 6p6l-dlmycoloyl-hexa,--acétyl-tréhalose, fondant à 38-46 .
On dissout 20 mg de ce produit dans 4 ami de benzène, ajoute em3 d'une solution ammoniacale 1,43 normale benzène ajoute cm' d'une solution ammoniacale i, 3 normale
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dans le méthanol et 0,05 cm3 d'une solution déoinormale de méthylate de sodium dans un mélange benzène-méthanol (2 il).
Après repos de 48 heures à la température ambiante, on éva- pore, lave le résidu au méthanol, le dissout dans de l'éther et précipite avec du méthanol. On obtient ainsi le 6,6"-di- mycoloyl-tréhalose.
Exemple 13
A 0,432 g de 2,3,4,2',3',4'-hexaacétyl-tréhalose dans 6 cm3 de pyridine, on ajoute 1,08 g du chlorure de l'acide béhénique. Après bref secouage, ;on laisse reposer le mélange pendant 12 heures à la température ambiante, puis le verse dans de l'eau glacée. On filtre, reprend le résidu dans du Chloroforme et lave la solution ohloroformique avec une so- lution saturée de bicarbonate de sodium. Après séchage sur du sulfate de sodium, on évapore dans le vide et fait cristal- liser le résidu dans de l'alcool. On obtient ainsi le 6,6'- di-béhénoyl-hexaacétyl-[alpha],[alpha]'-tréhalose, de formule
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fondant à 43-45 qui, après recristallisation dans l'alcool et l'ester acétique, fond à 51 .
Le produit obtenu est iden- tique à celui qui est obtenu par acétylation du 6,6'-dibéhénoyl- [alpha],[alpha]'-tréhalose décrit dans l'exemple 1 avec de l'anhydride
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acétique dans de la pyridine.
Exemple 14
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On dissout à chaud le8 g de dihydrate de trdhaloae dans 30 OM3 de d1mÓthYlfomm1dèl on ajoute 30 car de bonzéne et l'on évapore le mélange à sec dans le vide. On répète 1* opération deux fois. On dissout le résidu ainsi obtenu
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dans 40 em3 dE! dimthylfo am1dè et 20 cra3 de pyridine et ajoute en 3 portions & total :;.(102 g de chlorurez âlïaytoyie, On laisse le mélange ropomer pendant 18 heures à 30-550 ra- troidît à la température ambiante, et verse dans do l'eau glacée. On filtre et aêche le résidu dans lt a1eaateur à vide et lé purifie au moyen d'alcool.
On obtient ainsi du 6 6l-dlpalmltoyl Gsat tî'éhalose û formuler
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fondant à 63-65 . On fait recristalliser 10 fois la préparation encore souillée d'esters supérieurs , dans de l'alcool, et
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l'on obtient le dieater pur, fondant à 104-110 (suinta z 70 ) [a]p <- + 93 t 40 (dans la pyria"ne, 0 0,64).
Exemple 15 On dissout à chaud 1,8 g de dihydrate de
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tréhalose dans 30 cm '5 de dlm6thylfo!cmida pois ajoute 30 en,3 de bonz%ene et on évapora le m61ango véaotionnel à oec, dans le vide. On répète cette opération deux fois.
On dissout le résidu ainsi obtenu dans 40 om de diméthylforrnam1dG et 20 car de pirldine et ajoute en 3 portions, au total 3,33 g de chlorure de stéaroyle. On laisse reposer le mélange pendant 18 heures à la température ambiante, le verse ensuite dans de l'eau glacée, et filtre. On sèche le résidu dans l'exsic- cateur à vide et le fait récris talliser dans de l'ester
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acétique. on obtint ainsi le 6,6 -dibéhénoyl'-aaat¯ts?éhalose, de formule:
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fondant à 58-600. Après $ eor1stalliaations dans de l'alcool et de l'ester acétique, il fond à 64-67 [ 3 #. + 91 1 s\9 (dans la pyridine, a = 0,59).
Des lessives-mères réunies des reor1stal11aatione, on peut isoler par chromatographie sur -alumine (Woolm, Activité 1. neutre), et élution avec un mélange chloroforrao-mêthanol (9 si) du tristéarate de tréhalose, fondant à 74-77 [a]4 = + 68 t 4 (dans la pyridine, o 0,77).
Exemple 16 On dissout à chaud 1,8 g de dihydrate de
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tréhalose dans 30 cet "5 de dîffiétlformamc15 on ajoute alovs 30 cm de banzènê et l'on évapore le mdiang's à eee as 2.@
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vide, On répète cette opération deux fois. La résidu ainsi
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obtenu est dissous dans 40 cl de d1n16thYlfolam1dê et 20 o!û3 de pyridine, puis additionna du chlorure d'acide montaiilque préparé à partir de 4,66 g décida montanîque, par action de chlorure de thlonylo à 980 pendant une heure.
On chauffe le Mélange à 80-900 juuqura O* qu'il se produlso UNO solution clair puis on maintient ê110o:tte 1 heure à 35ce chauffe CJI;1âOj:'e â 8o et Maintient de nouveau 3. heure à 350, On laipse le mélange éaatiok1nl refroidir à la t<S!nppatuFe ambiantett le verse dans do Itsau glacez filtre et mêcho ce qui reate sur le dans à vide. Par tfôôï'l&t&lUisatîon dans l'ester aoétlqtioe on obtient le 66'"diNontanoyl-Ks trëhalogie de formule
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fondant à 9-? v aoi suinté à 80 ). Apres plusieurs reoristallisatione dans l'alcool et 13estêr acétiqu, il fond à 92-97 . (a]3 = + 650 4 (dans la pyridineD Q 0,74).
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Exemple 17
On dissout lj,71 g de celloblose sèche dans 40 cm3 de diméthylformamide et 20 cm3 de pyridine et ajoute en 3 portions, au total 3,94 g de chlorure de bénénoyle. On laisse le mélange reposer pendant 18 heures à 70-80 , refroi- dit alors et le verse dans de l'eau glacée. Le produit obtenu par filtration et séchage dans l'exsiccateur à vide est sou- mis à une recristallisation dans de l'alcool et de l'estor acétique. On obtient ainsi la 6,6'-dibéhénoyl-cellobiose de formule
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fondant à 118-119 [[alpha]]D22 = + 33 ¯ 4 (dans la pyridine, 0,62).
Exemple 18
On dissout 3,42 g de lactose sec dans 80 cm3 de diméthylformamide et 40 cm3 de pyridine et ajoute en 3 portions, au total 6,66 g de chlorure de stéaroyle. Après repos d'une heure à la température ambiante, on verse la so- lution dans de l'eau glacée, filtre, sèche le précipité dans l'exsiccateur à vide et fait recristalliser deux fois dans
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de l'ester acétique. On obtient ainsi le 6,6q-distdaroyi- lactose de formule
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fondant à 74*.8Si. Après deux recristailloattonz dans de l'alcool, ce produit fond à 78-82 (suint 3 à 74') [aJ2 =- + 32 t 1/.0 (dans la pyridine, e - 0,63).
Exemple 19
Oh dissout 3,42 g de saccharose sec dans 80 car
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de dimëthylforB;amit3e t 40 em3 de p yrîdîne et ajouta en 3 portions, au total 12 g de chlorure de l'aoide bh6n1que9 On chauffe' brièvement le mélange à 70-80 , puis on le maintient pendant 18 heures à 50-55 .Après refroidissement à la température ambiante, on verse dans de l'eau glacée, filtre sèche le produit obtenu dans l'exsiccateur à vide et fait
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reoriatalliser dans de l'alcool. On obtient ainsi le 1,lf6- tribëhëïloyi-aaocharose de formule:
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fondant à 80-830. Pour l'analyse, on le fait s'ecriMtallie'ar trois fois dans de l'alcool.
Point do fusion 80,,",82o a] 23 + 17 4 (dans la pyridine, c == 11102).
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Exemple 20
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Dans 40 crJ; de dimétbylfoïiaaïïiid et 20 cm '5 de pyridine, on dissout 3t42 g de maltose sec, puis ajoute 6,66 g de chlorure de stéaroyle on 3 portions. Au bout 4o 18 heures à la température ambiante, on verse le mdlaHse L-'3aetio %el dans de l'eau glacée, sèche le précipité dans leasidoûtouï* à vide' et le fait recrîstallloor dans de l'ester acétiquo. On obtient ainsi 10 tristdarate de maltose, fondant à 74-78 .
Après trois rearitalllsat1onD dans l'ester acétique, le point de fusion monte à 83-85 . ta 121 320 i 4' (dans la pyridine, o m 0,92).
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The present invention relates to the preparation of novel esters of a disaccharide, for example cellobiose, maltose or, in particular, trehalose with at least two high molecular weight carboxylic acids, in particular with carboxylic acids having more than 10 atoms. carbon, and their salts.
These high molecular weight carboxylic acids are, in the first place, higher aliphatic or cycloaliphatic carboxylic acids.
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the carbon chains of which may be straight or branched and which may have other substituents, such as free or substituted hydroxyl or oxo groups, for example stearic, behenic, montanic, phleimycolic, mycolic, mycolanic, corynomycolic or ehaulmoogric acids.
The two ester groups are found particularly in the 2,2'- or 6,6'- position of the disaccharide. Hydroxy groups of disaccharides can also be replaced by aminogenic groups, free or substituted. Preferably, said esters contain free hydroxyl groups or are in the form of their salts.
These new compounds have valuable pharmacological properties. Thus, they favorably influence development and course of tuberculous infection. They can be used as a remedy in human and animal diseases caused by Mycobacterium tuberculosis, or as intermediates for the preparation of other valuable products.
These new compounds are obtained by converting disaccharides into said esters and by preparing salts thereof, if desired, or by optionally converting the salts obtained into the free compounds. Thus, high molecular weight carboxylic acid halides, in particular chlorides, or anhydrides of these acids, can be reacted with disaccharides or their
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salts, such as alkali or alkaline earth salts, preferably sodium or potassium salts.
In addition, it is also possible to obtain these new compounds by reacting carboxylic acids of high molecular weight or their salts with reactive esters of disaccharides, for example with esters of sulfonic acids, in particular of toluene acid. sulfonic or methanesulfonic acid, or on esters of halogenated hydraoids. The hydroxyls not taking part in the reaction can be protected for example by transformation into methylenedioxy groups, such as the benzylieden-dioxy group, or into triarylmethoxy groups, corsas the trityloxy groups, into benzyloxy groups,
carbobenzoxy or acetoxy. After the esterification carried out according to the invention, these groups can be split again, for example by treatment with weakly acidic agents, such as hydrochloric acid diluted in dioxane, or with basic agents, such as hydroxylamine or by means of hydrating agents.
For the preparation of the 6,6'-diacyl compounds, intermediate protection of the hydroxyl groups not taking part in the reaction is not necessary. The 2,2'-diacyl compounds cannot be obtained, on the other hand, if the hydroxyl groups in the 4 and 6 positions are temporarily protected. The reaction is advantageously carried out with very dry starting materials in the presence of
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solvents and / or condensing agents, such as pyridine.
When the starting materials used for the present process are not described, they can be prepared by methods known per se.
The new compounds of the present invention can be used as medicaments, for example in the form of pharmaceutical preparations containing them or their salts, in admixture with a pharmaceutical, organic or inorganic excipient suitable for an enter al, parenteral or topical plication. For the formation of this excipient, substances which do not react with the new compounds are considered, for example water, gelatin, lactose, starch, magnesium stearate, talc, vegetable oils, benzyl alcohols. , gums, polyalkylene glycols, petroleum jelly, cholesterin or other known excipients.
These pharmaceutical preparations can be in the form of tablets, dragees, ointments, creams, or in liquid form in the form of solutions, suspensions or emulsions. Where appropriate, they are sterilized and / or contain auxiliary substances such as preservatives, stabilizers, wetting or emulsifying agents, salts to vary the osmotic pressure or buffers, They may also contain other active substances in therapy, for example anti-bacterial or anti-virus substances.
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This intention also concerns, as new industrial products, products conforming to those defined above.
The invention is described in more detail in the non-limiting examples which follow. Temperatures are shown in degrees centigrade.
Example 1.
1.8 g of trehalose dihydrate are dissolved in 30 cm3 of dimethylformamide, then 30 cm3 of benzene are added and evaporated to dryness in vacuo. This operation is repeated twice. The residue is dissolved in 40 cm3 of dimethyl-formamide, mixed with 20 cm3 of pyridine and the solution is brought to 70-80. Then mixed in three portions, in total 3.95 g of behenic acid chloride, and allowed to stand for 18 hours, at 50-55. It is then cooled, and poured into ice water. The precipitate is dried in a vacuum desiccator, and recrystallized from acetate ester.
We thus obtain 6,6'-dibhenoyl- [alpha], [alpha] '- trehalose of formula:
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mp 78 - 80; yield 3.6 g (73% of theory). For analysis, recrystallize again from alcohol. Melting point - 71 - 73, [[alpha]] D24 = + 60 ¯ 4 (in chloroform c = 0.57).
Example 2.
Shake for 24 hours at room temperature, 6.84 g of finely powdered trehalose, dried in a high vacuum (2 hours, 0.01 m Hg, 80 C), with 4 g of freshly melted zinc chloride and 24 because of freshly distilled benzaldehyde. Then 20 car of ice water and 20 car of petroleum ether are added, and the precipitate is filtered off.
7.7 g of crude 4,6,4 ', 6'-dibenzylidene- [alpha], [alpha]' - trehalose are thus obtained, melting at 125 - 135. For analysis, recrystallization is carried out three times in l. fusion acetic ester @ = - 195 - 198, [[alpha]] D23 + 88 ¯ 4 (alcohol, c = 0, & 9).
0.52 g of dibenzylidene-trehalose is dissolved in 5 cm3 of absolute pyridine and mixed with 0.66 g of stearoyl chloride in 5 cm3 of benzene. After standing for 24 hours at room temperature, 20 cm3 of ice-cold water are added and the precipitate is filtered off. It is dried in the vacuum desiccator. Separation by chromatography gives
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0.3 due 2,2īâl $ ê &# o $ l¯µs6 /% \ & * "êbnï% liûhn * asa, *" t $ tè '' halose * Melting point 186 - 188. can be removed, it is mixed twice in alcohol. Melting point 88 - "1909.
We dissolve Del g âe g ±, gs-âî8téai "ate le in 1 fi, ro3 tae los & Tme mixture with 0.2 because d8aoi <3 ehlc'yyÊq'3 siitiB ê9 a 0t iboalllir at 2 minutes * We add sloir-s f> osa * c32oan glasëo sehe the precipitate in the ôssiosaftej1 to e where does .... 35'alAscx "in alcohol. One obtains 8iSZ o;) BO of Ss2'5 iis'ôea? .-. / Î- a, a'-trehalose of formula
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Melting point 160-180Q Ap3? S e. other cit111- like, it melts "at 175 - 185o [a] D + 80 - 8 (ppridlne s - 0.5) '.s''n.? o On Mix 0.52 g of 1bny11de-téhaloe daaa 5 cm of absolute pyridene aP.r 018 g of 81 .. #. do lOc1de tJâii3.é, 9 ', in 5 osa of tÂ' &'# 3y' ", at the end of Ë4 fo @ #? B of rest, we add 20 <s! M ea ice cold and aaf103'G 1 @ precipitated.
This is dried in the vacuum filter and absorbed over alumina. After eluting the cMes'oforsalqua fraction gives 0.340% of 2,2'-d3amD4 'c6.y3 $ e-
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α, α -trehalose, m.p. 168-170 For analysis, the crystallization is carried out three times in It4r i80popvl1Que. Melting point 179 - 182.
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0.1 g of 2,2'-dibhenate de'd1benzy11d0ns-trehalose is dissolved in 1 cnr of dioxane. Add 0.2 cm3 of 6.5 n aqueous hydrochloric acid, boiled? 1 to 2 minutes, cool and add 4 cm3 of ice water. After
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drying in the exalecateur at 1d *, the precipitate is recrystallized from alcohol. 1.080 g of 2., 2t-dlbéhénoyl-, al-trehalot.e are thus obtained, melting at 115-125. After two more reclGta1118 & tlon8 in alcohol, melting point - 125 - 127, [a] 6 - 4 - 7 't 6 (pyridine, e - 0.42).
, Example 4.
As described in Example 1, 0.36 g is dried well
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trehalose, then dissolved in 5 char of absolute dimethl1toX'ma.m1de and 5 em3 of pyridine eahydyet Then added dropwise, slowly, at about 70 - 80, the 6 g of 2-elcosyl-3-aedtoxy- chloride téttracosanoyie in 5 because of absolute benzene. This mixture is left to stand for 24 hours at 50-55, evaporated in vacuo and the residue treated by chromatography.
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6., 68-di- (2 "-elcosyl-311-acetoxy-tetra-cosanoyl) -tr6halose is thus obtained of the formula:
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It melts at 53 - 55 CJg ro * ± * Òo (in eîiloroforât; Bans 3. @ sets scsi. 0 * 'oiet1; also, the 6t, 6 \ S "% rl" (2' '- @ iel-3 -aeét'-'s.so@snoyl) 'Ë.als q obtains lor @ lie la; p! ï.fîo1sAa' 3m: '"' py '" jàlîirie 6.!'; H'it, ## / $ # ± & and HAj, apR4. '-J', '. "1 f"! Ftt1!' T, "l Of. ':! r {.O' {1 '! :: f gs'M ;? due metal, bottom 5o # t 3 ¯ * 3 /? "'' ''> t'1'J '1 \ 0? (ib1;:'.,!;, t 31fJ:) 1 A @ S (jJ0t ;: Bîes 'a'StâF], M, 1?, Nd Maintint lo isiélang refiistiasasi at 5 Gssa, la @ µ has 1 tesap'iratwy a.Nbla.n' & e lieis de 4 hoNss h 50 lU 55 We heat 90 hours 125, 0'-6? Û 66? Dan2 0 ± -? De 'Sis! Éh'lfoFB! I <3 @ with 0756 g of 2 @ io @ yl-3-ds'oxy-' potassium salt and a goîi ' was at 8eu.
We filter 2 alos's 501ut19n, add 10 in d8a8id SKlfurlse afaei # normaal and extract with ether. -14, as kta1t8 eth3? S <, iavés t Spades over sodium sulfate evaporated in a vacuum. We thus obtain 0968 g of a fî, mbl !! tla'.nc which, graphically chromate appearing on the Davloonp bound si gel with the pêty ether .'- ';. let form 0759 g of 66 <3 "(3" -eiMsyl-
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-hyroxy-tëtx'acosanoyl) -hexaaetyl-'tyT.loo # ap'x '& j purification using ethi-, r and methanol, melts at 55 [o;] D = <} 67.
The deacetylation of the product obtained, according to the usual methods, gives 6 6 t-di- (2w-alca3i'l-3w-hy <3: e> G: sy- tetrseo8aiioyl) -tïiéhalosa, melting at 124 - 12s0j [ a] D 8 40
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(in chloroform 5 *
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Heated 6X hours at 115 - 125 24 hours - 5 to 130-1:; 5 0.19 g of 6ï6l-ditO31 h & 5: aaeétyït2 éîîaloe (â, <2ani3 7 em3 of dlmëthyltorinamide, with 0.625 g of the soil of potassium using}, x-d1hYdroxymyolan1qUe (Cq7H17 Ojï> K}. having isolated the reaction product from Solange, as described in example 5, 0.642 g of a substance u1 is obtained, after chromatographic separation 8ur 12 g of Baisonj silica gel and elution with petroleum being, j, gives 0.52 g of 6t6, - <Si '- (3 "<xe! ihydyoxy-a'eolanoyl) -h & xaacëtyl'-tyéha3.oss Melting point 400 J [a] DD 114.
Za deacetylation of the above product, in the usual manner, gives 6,6 n -d1-tS "" xu..dihydroxy-mycolenoyl) - trehalose (C186H36617 t 10 CHr 3). Melting point 42, C 3D * 3CO (in chloroform).
¯'OlG 7.
To 0.43 g of anhydrous trehalogo in 30 em3 of dry pyridine "5.3 g of x-me-acid chloride are added.
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-nique n '! \ 1; ft n) "elh; l2 <lms in 5 m51: 3 of pyridine, and let the Riélang s" epo :. "weeks about 20 We eJ :::,:.' t {f # then the P; P: ': iCUli! 0 c1ana the vacuum and adsorbs the residue obtained (3.26 g) on 90 g of Cal from uilîao Davle; on. Ilooter de tJréh..lo & Q \' 0C (3uk times 250 mn.1 of petiole ether, the Cb'Of (;; J.tOg!]. phi @ tb, \ otmea.u suy 79 g û "& q6 <b silicâque 211ineks? oât a qa @ l - ' . was a, j # ifeés 36 g of Gllt <3, '$ In elected, 9.tl !; with dom fsp & âtîosG e efeatasi 200 cm} of the following solvents: .3; ttte! é' de pdtrole P- fî '? & e2.cn., 2, SHg @ tey pëtrole-beyjEe (1: 1) f2 "a. <3Me beasono f-efeios ?, rfiélsags benzèlne-ét) 1Jlez> (Isl) fs'aeticns ëthcs' 4 aetions.
Leave? e fractions are obtained, after evaporation and purification by means of ether @t as meth & nol, the 606te2 ('?) -tri- t; gl-ketoxy -tU! -mé'i; h02l:; i "" i'lii) @ olQl1oyl .. tréh, lo! i3e SOU5 .'oyfsa d5 a @ powder b3, aneh @ p melting at 37 - 380 Ha] D, cg. e4o (dam le chlol'oforn 1 Jj C 1.9 74).
By va: pON11on des f'g> ct1ons in cri obtains the 6,6 '"-d- (5K" = ct; o25r¯ïîl "fflétlî02î | 1-'mycolno5rl) tî? Etelose, which, after purification by means of of ether and methanol, melts 35 - 37! [<x] 25 (in chloroform, JI C ': 11 2, 31). the chloride of myool & nique aldehyde used as if, the starting substance for gtro obtained in the following manner Leave to stand overnight at 25 - 3 $ 5 * 5 g of 3-hydro A "Yu ': - moi' / :; hoxy-micolan1q12e (" Test II}; 881'1176 4 15 en2)
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in 17.5 cm3 of dry pyridine to which was added 6.3 cm3 of acetic anhydride. The pyridine is evaporated off in vacuo, the residue is taken up in ether, the solution washed with water, concentrated to 10 cm3 and 20 cm3 of methanol added, the 3-acetoxy-x-methoxy-mycolanic acid precipitating.
Melting point 37. 3.3 g of this acid are dissolved in 17.5 cm3 of water-free benzene, 2 cm3 of oxalyl chloride are added and left to stand for one hour at room temperature. After evaporation to dryness in vacuum, the residue can be used directly.
Example 8.
To 1.78 g of 2-eicosyl-tetracos-2-ene-oic, in 16 cm3 of benzene, 1.4 cm3 of oxalyl chloride and 1 drop of pyridine are added. Allowed to stand overnight at room temperature, heat for 3 hours at 70 and then evaporate in a vacuum, adding a little benzene two or three times. The acid chloride thus formed is taken up in 30 cm3 of pyridine and 0.508 mg of anhydrous trehalose is added. The solution is left to stand for 2 weeks at 25, then the reaction product is extracted with chloroform and, after evaporation of the chlorine solution is obtained.
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formic in vacuum, 0.84 g of a substance which can be made rQèr1atGl11l! Hr in ethyl t.cet Y.'i.
By chromatography on aillelquee acid, 0.28 g of
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who
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after re-staling in ethyl acetate, melts at 97-1000. [a | p # * 550 (in chloroforma).
We evaporate there colutloii in the vide. The residue gives, called ehroHï & togï'aghi our silica gel and elllelque acid 0.05 s of 6ê.6s 2 (?) - (2 "-eicosy 1-té toaeos-S18 -bne-oy 1)" tehalose which melts at 72 - 73 1 a] D + 42.
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Example 9
0.75 g of 3-x-dihydroxy-mycolanic acid (2; H-37 Rv) is dissolved in 5 char of chloroform, and neutralized in the presence of phenolphthalein, with 1.67 cm3 of a methanolic solution of d Binormal potassium hydroxide, evaporated to dryness, the residue is taken up in ether and the potassium salt formed precipitates with methanol. Boiled under reflux for 3 days at 140, 0.4 g of this salt with 6 char of dimethylformamide and 0.154 g of 6,6-di-tosyl-2,3,4,2,3 ', 4' -hexaacetyl- trehalose; the reaction mixture is extracted with ether and, from the ethereal solution, the product formed is precipitated with methanol (yield 0.515 g).
This is chromatographed on 10 g of Davison silica gel and 5 g of Celite and eluted with 30 cm3 of petroleum ether. This gives 6,6'- (3 ", x" -dihydroxy-mycolanoyl) -2,3,4,2 ', 3', 4'-hexaacetyl-trehalose which, after precipitation from its solution in ether petroleum with methanol., melts at 38-39 [[alpha]] D = + 440 (in chloroform, c: 1.5).
0.13 g is dissolved in 50 cm3 of ether and 5 cm3 of hydroxylamine solution (see Example 11), the ether is immediately removed by distillation in a water bath at 60, and the residue is taken up again in water. 'ether. The ethereal solution is washed with dilute sulfuric acid, evaporated to dryness and the residue taken up again in ether, then precipitated with methanol. The precipitate is dissolved in 2 cm3
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petroleum ether and adsorbed on a 2.5 g column of
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Devloon silica gel and 2 g of Gelife After diluting with 20 com of petroleum ether, 0.098 g of 6,6'-dl- (3 \ xH-dihydroxy-mycolanoyl) -trehaiose is obtained which melts at 40-41 .
[[alpha]] D = + 36.
Example 10
0.43 g of anhydrous trehalose, dissolved in
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30 cm of pyridine seohj, one adds the eh-, 5, ure Ci 801 <"<8 obtained from 3.3 g of 3-actoxy-xR acid: ëthoxysolaiqu @. Dissolved in 5 cm 'of pyrl The mixture is left to stand for 2 weeks at about 20 and the reaction product is isolated as described in the preceding examples.
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on silica gel and s111c1qué acid $ we obtain the 6,61 ... di ... (3tt..acetoxy ... xu-methoxy-myoolanoyl) -trehalos $ melting at 38, la] D = + 250 (chloroform) and 6,6'-2 (P) '. Tri- (3 "-aoetoxy-x0-methoxy-înycolaìoyl) ¯trehalose melting at 370 ta] D + 240 (in chloroform) .
Example 11 The mixture is boiled for 3 days at reflux, at 140,
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0.4 g of the potassium salt of 3¯hydro3cy-x-methoxy - .mycolan1que acid ("Test"), with 6 em3 of d1methylf'ormamide and 0.154 of ditosylhexewaacdtyl-trehalose. The reaction product is chromatographed on Davison silica gel, and
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eluted with petroleum ether. 0.44 g of
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6,6'-di (3 "'- hydroxy-x' - !! iethoxy-Nycolanoyl) -. 2j, 342'34 '' - hexoethyl-trehaloGe melting at 390 [c & 3jj 440 (in chloroform).
0.25 g of this product is dissolved in 10 car
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of dry ether and 4 crar of a hydroxylamine solution (obtained from 2 cm3 of a 3% solution of hydroxylamine hydrochloride in 95% alcohol ;, neutralized with 2 car d '' a 3% solution of sodium hydroside in
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95% alcohol and frees by centl "'ifugati'" of the sodium chloride formed). Shake for 2 minutes and wash immediately with
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acidulous water; an emulsion is formed. Extracted with ether, the ethereal solution washed with water until neutral, dried over sodium sulphate and then evaporated to dryness.
240 mg of hard light yellow wax is thus obtained which is chromatographed on 5 g of avisos silica gel. fraction
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dlude with petroleum ether and chromatograph again on sllc% ue acid. Elution is thus obtained with a benzene-ether mixture (1: 1) 160 mg of 66'-d1- (3 " -hydroxy-xn¯iaethoxy-mycolanoyl) -trehalose, melting at 44 Ea] D + 31 0 (in chloroform).
If the operations of this example are carried out in the same way with a di-hydroxylated mycolanic acid,
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as 3, x-dlhydroxy-mycolanic acid (CaiH17404), 6,6 '-di- (5 "* xft-dlhydroxy-mycolanoyl) -trehalose is obtained,
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melting at 2 [a] D m + 30 (in chloroform).
Example 12 '110 ..----- .: 10¯ ....... "To a solution of 200 mg of silver mycolate in 2 cm of benzene, 50 mg of 66'-di- are added iodo '<' hexa-acetyl-trehalose (obtained from 6,6'-dlmy.-hoxa aeetyl-trehalose by reaction with sodium iodide in acetone in a sealed tube, at 1050). dissolved in 1 cm of acetone and heated.
After 10 minutes, 1 cm3 of dry pyridine is added, and the solution is boiled under reflux for 1 1/2 hours, then evaporated to dryness in vacuum. The residue is dissolved in benzene, the benzene solution is shaken with concentrated hydrochloric acid until the brown coloring has disappeared, concentrated in vacuo, filtered through a porous porcelain filter, then evaporated to dryness. in a little chloroform and the reaction product is precipitated with methanol.
A white powder is thus obtained, melting at 47-53
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la] D - 15. 3 (in chloroform), o s 1.0.
The still impure product is chromatographed on
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a mix of? magnesium silicate and Celt (2! l) and by dilution with a benzene-ether mixture (2 ll) is obtained 36 mg of 6p6l-dlmycoloyl-hexa, - acetyl-trehalose, melting at 38-46.
20 mg of this product are dissolved in 4 amm of benzene, add em3 of a normal 1.43 ammoniacal solution benzene add cm 'of a normal i, 3 ammoniacal solution
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in methanol and 0.05 cm3 of a deoinormal solution of sodium methoxide in a benzene-methanol mixture (2 μl).
After standing for 48 hours at room temperature, the mixture is evaporated, the residue washed with methanol, dissolved in ether and precipitated with methanol. In this way 6,6 "-di-mycoloyl-trehalose is obtained.
Example 13
To 0.432 g of 2,3,4,2 ', 3', 4'-hexaacetyl-trehalose in 6 cm 3 of pyridine, 1.08 g of behenic acid chloride is added. After shaking briefly, the mixture is left to stand for 12 hours at room temperature, then poured into ice water. The residue is filtered off, taken up in chloroform and the chloroform solution washed with saturated sodium bicarbonate solution. After drying over sodium sulfate, it is evaporated in vacuo and the residue crystallized in alcohol. This gives 6,6'-di-behenoyl-hexaacetyl- [alpha], [alpha] '- trehalose, of formula
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melting at 43-45 which, after recrystallization from alcohol and acetic ester, melts at 51.
The product obtained is identical to that obtained by acetylation of the 6,6'-dibhenoyl- [alpha], [alpha] '- trehalose described in Example 1 with anhydride.
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acetic in pyridine.
Example 14
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The 8 g of trdhaloae dihydrate is dissolved hot in 30 OM3 of d1mÓthYlfomm1d, 30 carbs of bonzene are added and the mixture is evaporated to dryness in vacuo. The operation is repeated twice. The residue thus obtained is dissolved
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in 40 em3 dE! Dimethylfo am1de and 20 cm3 of pyridine and added in 3 portions & total: (102 g of alïaytoyie chloride, The mixture is left ropomer for 18 hours at 30-550 to cool to room temperature, and poured into the mixture. ice-water The residue is filtered and drained in a vacuum evaporator and purified with alcohol.
This gives 6 6l-dlpalmltoyl Gsat tî'éhalose to formulate
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melting at 63-65. The preparation, still soiled with higher esters, is recrystallized 10 times in alcohol, and
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the pure dieater is obtained, melting at 104-110 (ooze z 70) [a] p <- + 93 t 40 (in the pyria "ne, 0 0.64).
Example 15 1.8 g of dihydrate are dissolved hot.
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trehalose in 30 cm-5 of dlm6thylfo! cmida pea add 30 en, 3 of bonz% ene and the vapotional mixture was evaporated to oec in vacuum. This operation is repeated twice.
The residue thus obtained is dissolved in 40 µm of dimethylforrnam1dG and 20 µm of pirldine and added in 3 portions, a total of 3.33 g of stearoyl chloride. The mixture is left to stand for 18 hours at room temperature, then poured into ice water, and filtered. The residue is dried in the vacuum extractor and crystallized in ester.
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acetic. we thus obtained 6,6 -dibhenoyl'-aaat¯ts? ehalose, of formula:
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melting at 58-600. After installation in alcohol and acetic ester, it melts at 64-67 [3 #. + 91 1 s \ 9 (in pyridine, a = 0.59).
From the combined mother liquors of the reor1stal11aatione, one can isolate by chromatography on -alumina (Woolm, Activity 1.neutral), and elution with a chloroforrao-methanol (9 si) mixture of trehalose tristearate, melting point 74-77 [a] 4 = + 68 t 4 (in pyridine, o 0.77).
Example 16 1.8 g of dihydrate are dissolved hot.
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trehalose in this 30 "5 of dîffietlformamc15 one adds alovs 30 cm of banzene and one evaporates the mdiang's to eee as 2. @
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empty, this operation is repeated twice. The residue as well
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obtained is dissolved in 40 cl of d1n16thYlfolam1de and 20% of pyridine, then added montaiilque acid chloride prepared from 4.66 g montanic decida, by the action of thlonylo chloride at 980 for one hour.
The mixture is heated to 80-900 juuqura O * that it produces a clear solution then one maintains ê110o: all 1 hour at 35th CJI heat; 1âOj: 'e at 8o and Maintain again 3. hour at 350, We remove the heated mixture to cool at the ambient temperature and pour it into the ice cream filter and mix what is created on the vacuum chamber. By tfôôï'l & t & lUisatîon in the ester aoétlqtioe one obtains the 66 '"diNontanoyl-Ks trëhalogie of formula
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fondant at 9-? v aoi seeped at 80). After several reoristallization in alcohol and acetate 13 ester, it melts at 92-97. (a] 3 = + 650 4 (in pyridineD Q 0.74).
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Example 17
1.11 g of dry celloblose are dissolved in 40 cm3 of dimethylformamide and 20 cm3 of pyridine and added in 3 portions, a total of 3.94 g of benenoyl chloride. The mixture is allowed to stand for 18 hours at 70-80, then cooled and poured into ice water. The product obtained by filtration and drying in the vacuum desiccator is subjected to recrystallization from alcohol and acetic ester. This gives 6,6'-dibhenoyl-cellobiose of formula
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mp 118-119 [[alpha]] D22 = + 33 ¯ 4 (in pyridine, 0.62).
Example 18
3.42 g of dry lactose are dissolved in 80 cm3 of dimethylformamide and 40 cm3 of pyridine and added in 3 portions, a total of 6.66 g of stearoyl chloride. After standing for one hour at room temperature, the solution is poured into ice-cold water, filtered, the precipitate dried in a vacuum desiccator and recrystallized twice from
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acetate ester. This gives 6,6q-distdaroyilactose of formula
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melting at 74 * .8Si. After recrystalloattonz twice in alcohol, this product melts at 78-82 (oozes 3 to 74 ') [aJ2 = - + 32 t 1 / .0 (in pyridine, e - 0.63).
Example 19
Oh dissolves 3.42 g of dry sucrose in 80 char
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of dimethylforB; amit3e t 40 em3 of p yrîdine and added in 3 portions, a total of 12 g of bh6n1que9 aid chloride. The mixture is heated briefly to 70-80, then kept for 18 hours at 50-55. After cooling to room temperature, poured into ice water, the product obtained is filtered and dried in the vacuum desiccator and made
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reoriatallize in alcohol. We thus obtain 1,1f6- tribëhëïloyi-aaocharose of the formula:
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melting at 80-830. For analysis, it is made to crystallize three times in alcohol.
Melting point 80%, 82 ° a] 23 + 17 4 (in pyridine, c = = 11102).
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Example 20
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In 40 crJ; of dimetbylfoïiaaïïiid and 20 cc of pyridine, 3t42 g of dry maltose are dissolved, then 6.66 g of stearoyl chloride are added in 3 portions. After 40 to 18 hours at room temperature, the mixture is poured into ice water, the precipitate is dried in the vacuum cleaner and recreated in acetate ester. In this way 10 maltose tristdarate is obtained, melting at 74-78.
After three rearitalllsat1onD in the acetic ester, the melting point rises to 83-85. ta 121 320 i 4 '(in pyridine, o m 0.92).