AT507056B1 - IMMUNOCHROMATOGRAPHIC PROCESS AND TEST SYSTEM FOR DETERMINING AT LEAST ONE ANALYTE IN A TEST SOLUTION TO BE INVESTIGATED - Google Patents
IMMUNOCHROMATOGRAPHIC PROCESS AND TEST SYSTEM FOR DETERMINING AT LEAST ONE ANALYTE IN A TEST SOLUTION TO BE INVESTIGATED Download PDFInfo
- Publication number
- AT507056B1 AT507056B1 ATA8011/2009A AT80112009A AT507056B1 AT 507056 B1 AT507056 B1 AT 507056B1 AT 80112009 A AT80112009 A AT 80112009A AT 507056 B1 AT507056 B1 AT 507056B1
- Authority
- AT
- Austria
- Prior art keywords
- analyte
- test
- zone
- antibody
- specific
- Prior art date
Links
- 239000012491 analyte Substances 0.000 title claims abstract description 165
- 238000012360 testing method Methods 0.000 title claims abstract description 139
- 239000012085 test solution Substances 0.000 title claims abstract description 39
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 35
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 74
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims abstract description 56
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 55
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 15
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 claims description 11
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 claims description 5
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 claims description 3
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 claims description 3
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 3
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 23
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 11
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 7
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 6
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 6
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 6
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 5
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 4
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 4
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 4
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 4
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 4
- 102000011632 Caseins Human genes 0.000 description 3
- 108010076119 Caseins Proteins 0.000 description 3
- 102000004407 Lactalbumin Human genes 0.000 description 3
- 108090000942 Lactalbumin Proteins 0.000 description 3
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 3
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 3
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 3
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 3
- 235000021241 α-lactalbumin Nutrition 0.000 description 3
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 2
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 2
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 238000011158 quantitative evaluation Methods 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 102000008192 Lactoglobulins Human genes 0.000 description 1
- 108010060630 Lactoglobulins Proteins 0.000 description 1
- 230000002009 allergenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000004040 coloring Methods 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 230000004907 flux Effects 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 230000001788 irregular Effects 0.000 description 1
- 238000012125 lateral flow test Methods 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 238000012067 mathematical method Methods 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000012466 permeate Substances 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 230000009897 systematic effect Effects 0.000 description 1
- 239000010409 thin film Substances 0.000 description 1
- 238000012549 training Methods 0.000 description 1
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 1
- 235000021249 α-casein Nutrition 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/536—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with immune complex formed in liquid phase
- G01N33/537—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with immune complex formed in liquid phase with separation of immune complex from unbound antigen or antibody
- G01N33/538—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with immune complex formed in liquid phase with separation of immune complex from unbound antigen or antibody by sorbent column, particles or resin strip, i.e. sorbent materials
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
- G01N33/54366—Apparatus specially adapted for solid-phase testing
- G01N33/54386—Analytical elements
- G01N33/54387—Immunochromatographic test strips
- G01N33/54388—Immunochromatographic test strips based on lateral flow
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Hematology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Immunochromatographisches Verfahren zur Bestimmung eines Analyten in einer Testlösung, in welchem auf einer Membran eine analytspezifische Testzone, getrennt von der spezifischen Testzone (7, 13) für den Analyten (3, 10) eine spezifische Kontrollzone (8, 14 ) für den Analyten sowie eine einen Antikörper für eine Kontrollsubstanz (12) enthaltende Kontrollzone (15) aufgebracht wird, wobei in die zu untersuchende Testlösung (2) ein markierter Antikörper (4, 11) für den zu bestimmenden Analyten (3, 10) eingebracht und eine markierte Kontrollsubstanz (12) zugesetzt und die Membran (6) in die Testlösung (2) eingetaucht wird, sodass der Analyt (3, 10), der markierte Antikörper (4, 11) und die markierte Kontrollsubstanz (12) von der Membran (6) aus der Testlösung (2) aufgenommen und über die analytspezifische Testzone (7, 13), die analytspezifische Kontrollzone (8, 14) und die Kontrollzone (15) für eine Kontrollsubstanz (12) laufen gelassen werden und aus dem Vergleich der Farbintensität zwischen der analytspezifischen Testzone (7, 13), der analytspezifischen Kontrollzone (8 , 14) und der Kontrollzone (15) für die Kontrollsubstanz (12) die Konzentration des Analyten (3, 10) bestimmt wird.Immunochromatographic method for the determination of an analyte in a test solution, in which on a membrane an analyte-specific test zone, separate from the specific test zone (7, 13) for the analyte (3, 10), a specific control zone (8, 14) for the analyte and a an antibody is applied to a control zone (15) containing a control substance (12), wherein a labeled antibody (4, 11) for the analyte to be determined (3, 10) is introduced into the test solution (2) to be examined and a labeled control substance (12 ) and the membrane (6) is immersed in the test solution (2), so that the analyte (3, 10), the labeled antibody (4, 11) and the labeled control substance (12) from the membrane (6) from the test solution (2) and run over the analyte-specific test zone (7, 13), the analyte-specific control zone (8, 14) and the control zone (15) for a control substance (12), and from the comparison of the color int between the analyte-specific test zone (7, 13), the analyte-specific control zone (8, 14) and the control zone (15) for the control substance (12) the concentration of the analyte (3, 10) is determined.
Description
Beschreibung [0001] Die vorliegende Erfindung bezieht sich auf ein immunochromatographisches Verfahren zur Bestimmung von wenigstens einem Analyten in einer zu untersuchenden Testlösung zum Nachweis von unerwünschten Inhaltsstoffen bzw. Kontaminanten von agrarischen Produkten, in welchem auf einer auf einem Träger festgelegten immunochromatographischen Membran eine für den Analyten spezifische Testzone aufgetragen wird, wobei auf der Membran gemäß einem immunochromatographischen Trennprinzip getrennt von der spezifischen Testzone für den Analyten eine spezifische Kontrollzone für den Analyten aufgebracht wird.Description: The present invention relates to an immunochromatographic method for the determination of at least one analyte in a test solution to be tested for the detection of undesirable ingredients or contaminants of agricultural products, in which one for the analyte on an immunochromatographic membrane fixed on a support specific test zone is applied, wherein a specific control zone for the analyte is applied to the membrane according to an immunochromatographic separation principle separate from the specific test zone for the analyte.
[0002] Immunochromatographische Verfahren sowie Testsysteme, in welchen Analyten, insbesondere biologische Analyten nachgewiesen werden können, sind in einer großen Anzahl bekannt, und die meisten dieser Verfahren und Testsysteme sind entweder zeitaufwendig oder erlauben entweder einen qualitativen, einen halb quantitativen oder quantitativen Nachweis einer zu untersuchenden Probe. Insbesondere ist eine Vielzahl von Verfahren und Testsystemen bekannt, bei welchen eine Dünnschichttechnik eingesetzt wird, bei welcher Teststreifen bzw. Testplatten und auf den Testplatten bzw. Teststreifen aufgebrachte, immunochromatographische Membranen mit einem Laufmittel, in welchem die untersuchende Probe zu transportieren ist, in Kontakt gebracht werden, um anschließend entweder durch einen direkten, optischen Vergleich oder mittels Eichkurven einer qualitativen, quantitativen oder auch halb quantitativen Auswertung unterzogen zu werden.Immunochromatographic methods as well as test systems in which analytes, particularly biological analytes can be detected, are known in large numbers and most of these methods and test systems are either time consuming or allow for either qualitative, semi-quantitative or quantitative detection of one examining sample. In particular, a variety of methods and test systems are known in which a thin-film technique is used in which test strips or test plates and applied to the test plates or test strips, immunochromatographic membranes with an eluent, in which the sample to be transported is brought into contact be subsequently subjected either by a direct, optical comparison or by calibration curves of a qualitative, quantitative or even semi-quantitative evaluation.
[0003] Des Weiteren ist beispielsweise aus der WO 03/058242 ein System mit innerem Kalibrierungssystem für einen Durchflusstest bekannt geworden. Bei diesem System bzw. Verfahren wird eine poröse Membran eingesetzt, welche in Fluidwechselwirkung mit Probenkonjugaten steht, welche ein spezifisches Bindungsglied für eine detektierbare Probe enthalten. Die poröse Membran definiert eine Detektionszone und eine Kalibrierungszone, wobei die Kalibrierungszone zwei oder mehrere Kalibrierungsbereiche beinhaltet, welche unterschiedliche Mengen eines Bindemittels enthalten, welche konfiguriert sind, um sich mit den Probenkonjugaten zu verbinden. Als ein Ergebnis werden Kalibrierungssignale generiert, welche leicht visuell, quantitativ oder dgl. mit einem Detektionssignal verglichen werden können, um die Anwesenheit oder Menge eines Analyten in einer Testprobe zu bestimmen.Furthermore, for example, from WO 03/058242 a system with internal calibration system for a flow test has become known. In this system, a porous membrane is used which is in fluid interaction with sample conjugates containing a specific binding member for a detectable sample. The porous membrane defines a detection zone and a calibration zone, where the calibration zone includes two or more calibration regions containing varying amounts of a binder configured to bind to the sample conjugates. As a result, calibration signals are generated which can be easily visually, quantitatively or the like compared to a detection signal to determine the presence or amount of an analyte in a test sample.
[0004] Aus der WO 2007/027231 A1 ist ein Diagnosetestsystem für das genaue Detektieren eines Testanalyten über einen breiten Bereich von möglichen Konzentrationen bekannt geworden. Ein Merkmal dieses Systems ist, dass es fähig ist anzuzeigen, ob ein Analyt innerhalb des Bereichs einer Überschusskonzentration bzw. des Bereichs des "Hook Effekts" vorhanden ist. Die Analytenkonzentration kann in diesem Fall unter Verwendung von einem Teil einer Dosisantwortkurve bestimmt werden.From WO 2007/027231 A1, a diagnostic test system for accurately detecting a test analyte over a wide range of possible concentrations has become known. A feature of this system is that it is capable of indicating whether an analyte is within the range of excess concentration or the range of the " Hook effect " is available. The analyte concentration in this case can be determined using part of a dose response curve.
[0005] Der EP 0 171 150 A2 ist ein Verfahren und eine Vorrichtung zum Untersuchen und Messen von wenigstens einem Analyten in einer einzigen Probe entnehmbar, wobei auf einem festen Träger, der eine Mehrzahl von Rezeptoren daran festgelegt aufweist, unterschiedliche Analyten selektiv an den Rezeptoren gebunden werden, um eine Differentialanalyse zwischen den verschiedenen Analyten durchführen zu können.EP 0 171 150 A2 discloses a method and apparatus for assaying and measuring at least one analyte in a single sample, wherein on a solid support having a plurality of receptors attached thereto, different analytes selectively at the receptors be bound to perform a differential analysis between the different analytes.
[0006] Die WO 97/38312 beschreibt eine Diagnosetestvorrichtung, auf welcher auf einer Trägermatrix ein markiertes spezifische Bindungsreagens für den Analyten festgelegt ist, welches markierte, spezifische Bindungsreagens frei innerhalb der Trägermatrix bewegbar ist, wenn sich die Trägermatrix in einem feuchten bzw. nassen Zustand befindet, sowie zusätzlich einen Aufnahmefaden, der ein nicht markiertes spezifisches Bindungsreagens für denselben Analyten aufweist, wobei für den Nachweis des Analyten die Testprobe, die auf die Testvorrichtung aufgebracht wurde, das markierte Bindungsreagens für den Analyten mobilisieren kann, welcher nachfolgend in den Aufnahmefaden permeiert, wobei der an das Reagens gebundene Analyt durch den Aufnahmefaden derart aufgenommen wird, dass die Anwesenheit des Analyten beobachtet werden kann.WO 97/38312 describes a diagnostic test device on which a labeled specific binding reagent for the analyte is fixed on a carrier matrix, which labeled specific binding reagent is freely movable within the carrier matrix when the carrier matrix is in a wet state and additionally a receiving filament having an unlabelled specific binding reagent for the same analyte, wherein for the detection of the analyte the test sample applied to the assay device can mobilize the labeled binding reagent for the analyte which subsequently permeates the receiving filament, wherein the analyte-bound analyte is taken up by the receiving filament such that the presence of the analyte can be observed.
[0007] Der US 2007/0148717 A1 ist ein Verfahren zur Quantifizierung eines Analyten in einer flüssigen Probe zu entnehmen, welches aus einer Festphasenapparatur besteht, die wiederum aus einem Membranstreifen, einem Auftragspunkt, einer Probenerfassungszone und einer Kontrollerfassungszone aufgebaut ist. In diesem Verfahren wird eine Menge von gefriergetrockneten analyt-bindenden Partikeln, die mit einem analytbindenden Stoff gecoatet sind, in einer Pipettenspitze eingesetzt, in dieser zur Lösung gebracht und nach einem Aufträgen auf den Auftragspunkt der Membran über diese laufen gelassen und schließlich die Farbreduktion in der Probenerfassungszone und der Kontrollerfassungszone detektiert.The US 2007/0148717 A1 discloses a method for quantifying an analyte in a liquid sample, which consists of a solid phase apparatus, which in turn is composed of a membrane strip, a point of application, a sample detection zone and a control detection zone. In this method, an amount of freeze-dried analyte-binding particles coated with an analyte-binding agent are placed in a pipette tip, solubilized therein, and run over the membrane after application to the point of application of the membrane, and finally color reduction in the pipette Sample detection zone and the control detection zone detected.
[0008] Die WO 2003/023371 A beschreibt ein Verfahren zum Hinzufügen einer offensichtlichen Nicht-Signallinie zu einem Schnelldiagnoseverfahren, bei welchem ein Support eine Markierung trägt sowie weiters eine Matrix, die einen axialen Flusspfad definiert, auf dem Support festgelegt ist. Schließlich weist der Support eine Probenaufnahmezone, eine Markierungszone und einen Beobachtungsbereich auf, wobei die Markierung auf dem Support durch ein Beobachtungsfenster detektierbar ist.WO 2003/023371 A describes a method for adding an obvious non-signal line to a rapid diagnostic method in which a support carries a marker and further a matrix defining an axial flow path is defined on the support. Finally, the support has a sample receiving zone, a marking zone and an observation area, wherein the marking on the support can be detected by an observation window.
[0009] Der WO 2000/31539 ist ein Verfahren und eine Vorrichtung zum Durchführen eines lateralen Flussversuchs entnehmbar, wobei auf einem Teststreifen, welcher eine Aufbringzone, auf welchem die Probe aufgebracht werden kann, eine Analytenmeßzone beinhaltend ein Ana-lytenbindungsagens, eine Kontrollzone und eine zweite Messzone beinhaltend ein zweites Kontrollagens eine Untersuchung durchgeführt wird, wobei während dem Betrieb des Teststreifens der Analyt, der auf die Aufbringzone aufgebracht wird, zu der Analytenmeßzone diffundiert und das Kontrollbindungsagens zu den ersten und zweiten Kontrollmesszonen diffundiert.[0009] WO 2000/31539 discloses a method and apparatus for performing a lateral flow test, wherein on a test strip having an application zone to which the sample can be applied, an analyte measurement zone comprising an analyte binding agent, a control zone and an analyte second assay zone containing a second control agent, an assay wherein during operation of the test strip the analyte applied to the application zone diffuses to the analyte measurement zone and the control binding agent diffuses to the first and second control measurement zones.
[0010] Schließlich beschreibt die GB 2 300 914 A eine Analytendetektionsvorrichtung für flüssige Proben, in welcher auf einer Membran, entlang welcher sich die Flüssigkeit bewegen kann, eine Mehrzahl von ersten detektierbaren Teilchen, die mit einem Probenbereich der Vorrichtung assoziiert sind, auf welchem Flüssigkeit aufgebracht wird, sich entlang des Supports bewegen, wobei auf dem Support eine erstes Bindungsagens immobilisiert ist, welches einen Komplex mit den Analytenspezies bilden kann. Darüber hinaus sind ein Schwellwertbereich sowie ein Detektionsbereich auf dem Support aufgebracht, um einen Komplex, der zwischen dem ersten Bindungsagens, das auf dem Support immobilisiert ist, und der Analytenspezies ausgebildet wird, zu detektieren.Finally, GB 2 300 914 A describes an analyte detection device for liquid samples in which, on a membrane along which the liquid can move, a plurality of first detectable particles associated with a sample area of the device on which liquid is applied, move along the support, wherein on the support a first binding agent is immobilized, which can form a complex with the analyte species. In addition, a threshold region and a detection region are applied to the support to detect a complex formed between the first binding agent immobilized on the support and the analyte species.
[0011] Schließlich ist aus der EP 0 987 551 A2 ein Verfahren zum Bestimmen einer Analyten-konzentration in einem Sandwich-Immunoassay mit lateralem Fluss bekannt geworden, welcher einen Hook Effekt bei hoher Dosis ausübt. In diesem Verfahren wird die Konzentration eines Analyten in einem fluiden Testmedium durch Verwendung eines immunochromatographischen Teststreifens bestimmt, wobei der Teststreifen wenigstens zwei Aufnahmebanden und gegebenenfalls eine oder mehrere Sammelbande(n) aufweist, welche markierte Antianalyten-Antikörper einfangen, um ein detektierbares Signal zur Verfügung zu stellen. Die Signale von der Markierung werden quantitativ in jeder der Banden detektiert, um ein Muster von Signalen zur Verfügung zu stellen, welches für die Konzentration des Analyten in dem Testfluid einzigartig ist. Das Muster der Signale wird in der Folge mathematisch kombiniert, um eine monotone Dosisantwortkurve auszubilden.Finally, EP 0 987 551 A2 has disclosed a method for determining an analyte concentration in a lateral flow sandwich immunoassay which exerts a hook effect at a high dose. In this method, the concentration of an analyte in a fluid test medium is determined by using an immunochromatographic test strip, the test strip having at least two recipient bands and optionally one or more collection bands which capture labeled anti-analyte antibodies to provide a detectable signal put. The signals from the label are quantitatively detected in each of the bands to provide a pattern of signals unique to the concentration of the analyte in the test fluid. The pattern of the signals is subsequently mathematically combined to form a monotone dose response curve.
[0012] Die vorliegende Erfindung zielt nun darauf ab, ein einfaches und insbesondere schnelles Verfahren zur Verfügung zu stellen, mit welchem es möglich ist, die Abwesenheit, die Anwesenheit oder eine Überschusskonzentration des Analyten, nämlich den Hook Effekt, zu bestimmen, ohne dass gleichzeitig komplizierte Rechenverfahren bzw. übermäßig komplizierte, immu-nochromatographische Membranen zur Verfügung gestellt werden müssen.The present invention now aims to provide a simple and especially rapid method, with which it is possible to determine the absence, the presence or an excess concentration of the analyte, namely the hook effect, without simultaneously complicated calculation methods or excessively complicated, immunochromatographic membranes must be made available.
[0013] Zur Lösung dieser Aufgaben ist das erfindungsgemäße Verfahren im wesentlichen dadurch gekennzeichnet, dass auf der immunochromatographischen Membran eine einen Antikörper für die Kontrollsubstanz enthaltende Kontrollzone vorgesehen wird, dass in die zu untersuchende Testlösung ein an eine eine Farbreaktion bewirkende Substanz gekoppelter bzw. damit markierter Antikörper für den zu bestimmenden Analyten eingebracht wird, sowie eine an eine eine Farbreaktion bewirkende Substanz gekoppelte bzw. damit markierte Kontroll-To solve these objects, the inventive method is essentially characterized in that on the immunochromatographic membrane an antibody containing an antibody for the control substance control zone is provided that in the test solution to be examined coupled to a color reaction causing substance or thus labeled Antibody is introduced for the analyte to be determined, as well as a control unit coupled to or labeled with a substance causing a color reaction.
Substanz zugesetzt wird, dass weiters die immunochromatographische Membran 1 bis 20 Minuten, insbesondere 2 bis 15 Minuten in der zu untersuchenden Testlösung eingetaucht wird, dass der Analyt und der markierte Antikörper von der immunochromatographischen Membran aus der Testlösung aufgenommen werden und über die spezifische Testzone und die spezifische Kontrollzone laufen gelassen werden und das aus dem Vergleich der Farbintensität zwischen der spezifischen Testzone und der spezifischen Kontrollzone die Abwesenheit, die Anwesenheit oder eine Überschusskonzentration des Analyten bestimmt wird zusätzlich zu der zu untersuchenden Testlösung. Indem auf der immunochromatographischen Membran neben einer spezifischen Testzone für den zu bestimmenden Analyten auch eine spezifische Kontrollzone aufgebracht ist bzw. wird, welche auf den zu untersuchenden Analyten exakt abgestimmt ist, gelingt es einfach und ohne komplizierte, mathematische Rechensysteme lediglich durch Zusatz eines mit einer eine Farbreaktion bewirkenden Substanz versetzen bzw. damit markierten Antikörpers für den zu bestimmenden Analyten zu bestimmen, ob der zu untersuchende bzw. zu bestimmende Analyt in der zu untersuchenden Testlösung vorhanden ist.Substance is added, further, that the immunochromatographic membrane is immersed for 1 to 20 minutes, in particular 2 to 15 minutes in the test solution to be examined that the analyte and the labeled antibody from the immunochromatographic membrane are taken from the test solution and the specific test zone and the specific control zone are run and that from the comparison of the color intensity between the specific test zone and the specific control zone the absence, the presence or an excess concentration of the analyte is determined in addition to the test solution to be examined. By also having a specific control zone for the analyte to be determined and / or being applied to the immunochromatographic membrane, which is exactly matched to the analyte to be investigated, it is possible to achieve this simply and without complicated mathematical calculation systems merely by adding one with one Substance causing color reaction or to determine therewith labeled antibody for the analyte to be determined whether the analyte to be investigated or to be determined is present in the test solution to be examined.
[0014] Bejahendenfalls, und sofern der zu untersuchende Analyt unterhalb einer für den Analyten definierten Konzentration in der Testlösung enthalten ist, wird eine Nachweislinie in der spezifischen Testzone durch den in der spezifischen Testzone festgelegten Antikörper sowie eine weitere in der spezifischen Kontrollzone, durch die in der spezifischen Kontrollzone festgelegte Substanz und den an eine eine Farbreaktion bewirkende Substanz gekoppelten bzw. damit markierten Antikörper ausgebildet. Im Falle einer Überschusskonzentration des zu untersuchenden Analyten wird weder in der spezifischen Testzone noch in der spezifischen Kontrollzone eine Farbreaktion bewirkt, da sämtliche Bindungsstellen der mit einer eine Farbreaktion bewirkende Substanz gekoppelten Antikörper, sowie die Bindungsstellen des in der spezifischen Testzone festgelegten Antikörpers mit dem zu untersuchenden Analyt belegt sind, wodurch die an die farbgebende Substanz gekoppelten Antikörper in Ermangelung freier Bindungsstellen sowohl über die spezifische Testzone, als auch über die spezifische Kontrollzone hinweg laufen, so dass in diesen Zonen eine Farbreaktion nicht mehr bewirkt werden kann.If so, and if the analyte to be tested is contained in the test solution below a concentration defined for the analyte, one detection line in the specific test zone will be established by the antibody determined in the specific test zone and another in the specific control zone through which the substance defined in the specific control zone and the antibody coupled to or labeled with a substance causing a color reaction are formed. In the case of an excess concentration of the analyte to be examined, a color reaction is not effected either in the specific test zone or in the specific control zone, since all binding sites of the antibody coupled with a colorant-causing substance, as well as the binding sites of the antibody determined in the specific test zone, are the same Analyte are occupied, whereby the antibody coupled to the coloring substance run in the absence of free binding sites both over the specific test zone, as well as the specific control zone away, so that in these zones a color reaction can not be effected.
[0015] Dadurch, dass zusätzlich zu der zu untersuchenden Testlösung eine an eine eine Farbreaktion bewirkende Substanz gekoppelte bzw. markierte Kontrollsubstanz zugesetzt wird und weiters auf der immunochromatographischen Membran eine einen Antikörper für die Kontrollsubstanz enthaltende Kontrollzone aufgebracht ist, gelingt es, eine zusätzlich gefärbte Reaktionszone auf der immunochromatographischen Membran auszubilden, aus welcher unmittelbar ersehen werden kann, ob ein Test gültig ist oder nicht. Dadurch, dass das Laufmittel mit der an eine eine Farbreaktion bewirkende Substanz gekoppelten bzw. damit markierten Kontrollsubstanz bis zur einen Antikörper für die Kontrollsubstanz enthaltende Kontrollzone gelaufen ist, kann die Gültigkeit des Tests anhand der in dieser einen Antikörper für die Kontrollsubstanz enthaltende Kontrollzone stattfindenden Farbreaktion unmittelbar ohne jede weitere spezifische Auswertung bestimmt werden. In diesem Fall wird eine weitere Vereinfachung der Verfahrensführung erzielt werden, da unmittelbar die Gültigkeit des Versuchs nachgewiesen werden kann.Characterized in that in addition to the test solution to be examined, a color reaction to a substance causing effect coupled or labeled control substance is added and further on the immunochromatographic membrane an antibody containing the control substance for the control zone is applied, it succeeds, an additional colored reaction zone on the immunochromatographic membrane from which it can be seen immediately whether a test is valid or not. Since the eluent with the control substance coupled to or marked with a dye reaction has run to the control zone containing an antibody for the control substance, the validity of the test can be directly determined by the color reaction taking place in this control antibody-containing control zone be determined without any further specific evaluation. In this case, a further simplification of the procedure will be achieved since the validity of the experiment can be demonstrated immediately.
[0016] Durch Anwendung dieses einfachen Verfahrens gelingt es, unmittelbar lediglich durch optischen Vergleich festzustellen, ob der zu untersuchende Analyt in einer zu untersuchenden Probe vorhanden war, nicht vorhanden war und bzw. ob eine Überschusskonzentration des Analyten in der Probe vorhanden war.By using this simple method, it is possible to determine directly only by optical comparison, whether the analyte to be examined was present in a sample to be examined, was not present and / or whether an excess concentration of the analyte was present in the sample.
[0017] Indem die Laufzeit der zu untersuchenden Testlösung auf der immunochromatographischen Membran zwischen 1 und 20 Minuten, insbesondere 2 und 15 Minuten gewählt wird, kann einerseits ein langsames und stetiges Laufen der zu unersuchenden Testlösung sichergestellt werden und andererseits können innerhalb kurzer Zeit spezifische und insbesondere sogar guantitative Ergebnisse erhalten werden, wodurch ein rasches und zuverlässiges Verfahren zur Bestimmung von wenigstens einem Analyten in einer zu untersuchenden Testlösung unabhängig von der Konzentration des Analyten in der Testlösung zur Verfügung gestellt werden kann.By the duration of the test solution to be examined is selected on the immunochromatographic membrane between 1 and 20 minutes, especially 2 and 15 minutes, on the one hand a slow and steady running of the test to be tested solution can be ensured and on the other hand, specific and in particular within a short time even guantitative results can be obtained, whereby a rapid and reliable method can be provided for the determination of at least one analyte in a test solution to be tested, independently of the concentration of the analyte in the test solution.
[0018] Um das immunochromatographische Verfahren gemäß der Erfindung insbesondere auch quantitativ führen zu können, ist das Verfahren dahingehend weitergebildet, dass sowohl die Menge des an eine eine Farbreaktion bewirkende Substanz gekoppelten bzw. damit markierten Antikörpers für den Analyten, als auch die Menge des Antikörpers des Analyten, die auf der immunochromatographischen Membran festgelegt wird, quantitativ bestimmt werden. Indem sowohl die Menge des an eine eine Farbreaktion bewirkende Substanz gekoppelten bzw. damit markierten Antikörpers für den Analyten als auch die Menge des Antikörpers des Analyten auf der immunochromatographischen Membran festgelegt sind, kann auch eine quantitative Umsetzung des zu untersuchenden Analyten einfach und ohne großen apparativen oder verfahrenstechnischen Aufwand erzielt werden.In order to be able to carry out the immunochromatographic method according to the invention, in particular quantitatively, the method is further developed in that both the amount of antibody to a color reaction-causing substance or labeled antibody for the analyte, as well as the amount of the antibody of the analyte, which is determined on the immunochromatographic membrane, can be determined quantitatively. By both the amount of antibody bound to a dye-causing substance or labeled therewith for the analyte and the amount of the antibody of the analyte on the immunochromatographic membrane are fixed, and a quantitative conversion of the analyte to be examined easily and without large-scale apparatus or procedural effort can be achieved.
[0019] Dadurch, dass in Laufrichtung der Testlösung auf der immunochromatographischen Membran zuerst die spezifische Testzone und nachgeschaltet die spezifische Kontrollzone sowie gegebenenfalls die einen Antikörper für die Kontrollsubstanz enthaltende Kontrollzone angeordnet wird bzw. werden, wie dies einer weiteren bevorzugten Ausführungsform entspricht, können fehlerhafte Ergebnisse beim Auswerten der immunochromatographischen Membran insbesondere aufgrund eines unregelmäßigen Laufens der zu untersuchenden Testlösung mit Sicherheit hintangehalten werden. Durch die paarweise Anordnung von jeweils einer spezifischen Testzone und einer nachgeschalteten, spezifischen Kontrollzone ist die Wahrscheinlichkeit, dass bei einer positiven Farbreaktion der spezifischen Kontrollzone Fehler in der Membran aufgetreten sind, verschwindend klein.Characterized in that in the direction of the test solution on the immunochromatographic membrane first the specific test zone and downstream of the specific control zone and optionally containing an antibody for the control substance control zone is or will be, as this corresponds to a further preferred embodiment, erroneous results when evaluating the immunochromatographic membrane in particular due to an irregular running of the test solution to be examined are certainly withheld. Due to the paired arrangement of a specific test zone and a downstream, specific control zone, the probability that faults in the membrane occurred during a positive color reaction of the specific control zone is negligible.
[0020] Gemäß dem erfindungsgemäßen Verfahren ist es, wie dies einer bevorzugten Weiterbildung des Verfahrens entspricht, problemlos möglich, eine Mehrzahl von zu untersuchenden Analyten gleichzeitig zu untersuchen. Hiebei werden jeweils Paare bestehend aus spezifischer Testzone und spezifischer Kontrollzone hintereinander auf der immunochromatographischen Membran aufgebracht sowie gegebenenfalls eine einen Antikörper für die Kontrollsubstanz enthaltende Kontrollzone in jenem Bereich der immunochromatographischen Membran aufgebracht, welche vom Startpunkt des Laufens der zu untersuchenden Substanz am weitesten entfernt liegt. In diesem Pall kann jeder der zu untersuchenden Analyten gesondert und ohne Beeinflussung durch den bzw. die anderen in einer zu untersuchenden Probelösung vorgelegten Analyten untersucht werden. In weiterer Folge können bei einer derartigen paarweisen Anordnung von spezifischer Test- und Kontrollzone auch in der Membran auftretende Fehler leicht erkannt und entweder die Membranen ausgeschieden werden oder der Versuch unmittelbar wiederholt werden.According to the method according to the invention, as this corresponds to a preferred development of the method, it is easily possible to simultaneously examine a plurality of analytes to be examined. Hiebei pairs each consisting of specific test zone and specific control zone are successively applied to the immunochromatographic membrane and optionally applied a containing an antibody for the control substance control zone in that region of the immunochromatographic membrane, which is furthest from the starting point of running the substance to be examined. In this Pall, each of the analytes to be examined can be examined separately and without being influenced by the other analyte (s) present in a sample solution to be examined. Subsequently, with such a pairwise arrangement of specific test and control zones, errors occurring in the membrane can easily be detected and either the membranes are eliminated or the experiment is repeated immediately.
[0021] Indem, wie dies einer bevorzugten Weiterbildung des Verfahrens entspricht, das Verfahren so geführt ist, dass zur Auswertung des Verfahrens zuerst die Gültigkeit des Testergebnisses durch Vergleichen der Farbintensität von entweder der bzw. den spezifischen Kontrollzo-ne(n) und/oder der einen Antikörper für die Kontrollsubstanz enthaltende Kontrollzone bzw. eine nicht analytspezifische Kontrollzone mit einer Farbkarte bestimmt wird und/oder die Farbintensität der spezifischen Testzone mit einer Farbkarte oder mittels photometrischen Messgeräten verglichen oder gemessen wird, gelingt es, ohne komplizierte und aufwendige Rechenverfahren und insbesondere zuverlässig die Anwesenheit/ Abwesenheit und/oder Überschusskonzentration eines Analyten nachzuweisen. Durch eine Überschusskonzentration könnte beispielsweise ein falsches Negativsignal bewirkt werden, obwohl der Analyt in übermäßig großer Menge in der zu untersuchenden Substanz enthalten ist. Durch Vergleich der photometrisch gemessenen Intensitäten der spezifischen Testzone oder der spezifischen Kontrollzone und nachfolgendes Vergleichen mit der Intensität einer Eichkurve gelingt es bei Kenntnis der aufgebrachten Menge des Antikörpers des Analyten auf der immunochromatographischen Membran sowie der an eine eine Farbreaktion bewirkende Substanz gekoppelten bzw. markierten Menge eines Antikörpers, rasch und zuverlässig quantitativ und somit aussagekräftig die Menge des zu untersuchenden Analyten zu bestimmen.By, as this corresponds to a preferred embodiment of the method, the method is performed so that for the evaluation of the method, first, the validity of the test result by comparing the color intensity of either the or the specific Kontrollzo ne (s) and / or the control zone containing an antibody for the control substance or a non-analyte-specific control zone with a color chart is determined and / or the color intensity of the specific test zone is compared or measured with a color chart or by means of photometric measuring equipment, it is possible without complex and complicated calculation methods and in particular reliable to detect the presence / absence and / or excess concentration of an analyte. By an excess concentration, for example, a false negative signal could be effected, although the analyte is contained in an excessively large amount in the substance to be examined. By comparison of the photometrically measured intensities of the specific test zone or the specific control zone and subsequent comparison with the intensity of a calibration curve, it is possible with knowledge of the applied amount of the antibody of the analyte on the immunochromatographic membrane as well as the amount of a labeled substance coupled to a substance causing a color reaction Antibody, quickly and reliably quantitatively and thus meaningful to determine the amount of the analyte to be examined.
[0022] Im Falle einer Überschusskonzentration des zu untersuchenden Analyten, d.h. im Falle des Fehlens einer Farbreaktion sowohl an der spezifischen Testzone als auch der spezifischen Kontrollzone, d.h. bei Vorhandensein eines sogenannten Hook-Effekts, kann bzw. sollte in weiterer Folge die Probe entsprechend verdünnt werden und eine neuerliche Analyse durchgeführt werden, so dass es möglich ist, quantitativ die Menge des in der Probe vorhandenen Analyten zu bestimmen.In the case of an excess concentration of the analyte to be examined, i. in the case of lack of color reaction at both the specific test zone and the specific control zone, i. in the presence of a so-called hook effect, the sample may subsequently be diluted appropriately and a further analysis carried out, so that it is possible to quantitatively determine the amount of analyte present in the sample.
[0023] Bei einem Testsystem zur Bestimmung von wenigstens einem Analyten in einer zu untersuchenden Testlösung ist in Träger vorgesehen ist, auf welchem sich eine in der Dimension definierte, immunochromatographischen Membran befindet, auf welcher der immunochroma-tographischen Membran eine spezifische Testzone, enthaltend insbesondere einen Antikörper für den Analyten, festgelegt ist, wobei weiterhin auf der immunochromatographischen Membran in Abstand von der spezifischen Testzone eine spezifische Kontrollzone, enthaltend den Analyten oder ein Homolog festgelegt ist, sowie wenigstens eine einen Antikörper für die Kontrollsub-stanz enthaltende Kontrollzone aufgebracht sein kann, und zusätzlich ein photometrisches Messgerät zur Bestimmung eines durch die spezifische Testzone gelaufenen Analyten sowie des an eine eine Farbreaktion bewirkende Substanz gekoppelten bzw. damit markierten Antikörpers für den zu bestimmenden Analyten enthalten ist. Durch Vorsehen eines Testsystems zur Bestimmung von wenigstens einem Analyten in einer zu untersuchenden Lösung, bei welchem auf einer immunochromatographischen Membran in spezifischen Testzonen Antikörper für den Analyten oder ein Homolog festgelegt sind und auf der immunochromatographischen Membran zusätzlich und in Abstand von der spezifischen Testzone eine spezifische Kontrolle enthaltend den Analyten festgelegt ist, gelingt es mittels eines an eine eine Farbreaktion bewirkende Substanz gekoppelten bzw. damit markierten Antikörpers für den zu bestimmenden Analyten rasch und zuverlässig eine aussagekräftige Farbreaktion auf der immunochromatographischen Membran zu erhalten, welche in weiterer Folge einfach und ohne komplizierte mathematische Verfahren mittels eines photometrischen Messgeräts auswertbar ist, wodurch rasch und zuverlässig quantitative Messungen eines zu untersuchenden Analyten durchgeführt werden können.In a test system for the determination of at least one analyte in a test solution to be tested is provided in carrier, on which there is a defined in the dimension, immunochromatographic membrane, on which the immunochromatographic membrane a specific test zone, containing in particular a Antibodies for the analyte, wherein further on the immunochromatographic membrane at a distance from the specific test zone, a specific control zone containing the analyte or a homolog is fixed, and at least one containing an antibody for the control substance control zone may be applied, and in addition a photometric measuring device for determining an analyte passed through the specific test zone and the antibody coupled or labeled with a substance causing a color reaction for the analyte to be determined is contained. By providing a test system for the determination of at least one analyte in a solution to be examined, in which antibodies for the analyte or a homolog are defined on an immunochromatographic membrane in specific test zones and on the immunochromatographic membrane additionally and at a distance from the specific test zone a specific control containing the analyte, it is possible to quickly and reliably obtain a meaningful color reaction on the immunochromatographic membrane by means of an antibody coupled or thus labeled to a substance causing a color reaction for the analyte to be determined, which subsequently can be obtained simply and without complicated mathematical methods can be evaluated by means of a photometric measuring device, whereby quantitative measurements of an analyte to be examined can be carried out quickly and reliably.
[0024] Hierbei kann das Testsystem als photometrisches Messgerät, als photometrisches Reflexionsgerät, als Spektrometer oder eine CCD-Kamera beinhaltend ausgebildet sein. Indem ein photometrisches Messgerät, ein photometrisches Reflexionsgerät, ein Spektrometer oder eine CCD-Kamera eingesetzt werden kann, können feine Farbunterschiede, insbesondere feine Unterschiede der Farbintensität eindeutig und reproduzierbar nachgewiesen werden und neben den qualitativen Ergebnissen auch eindeutig reproduzierbare, quantitative Ergebnisse betreffend die Menge eines zu untersuchenden Analyten in einer Probe erhalten werden.In this case, the test system can be designed as a photometric measuring device, as a photometric reflection device, as a spectrometer or a CCD camera. By using a photometric measuring device, a photometric reflection device, a spectrometer or a CCD camera, fine color differences, in particular fine differences in color intensity, can be clearly and reproducibly detected and, in addition to the qualitative results, also clearly reproducible, quantitative results relating to the amount of examining analytes in a sample.
[0025] Indem zusätzlich auf dem Messgerät eine Anzeige vorgesehen ist, welche das Messergebnis unmittelbar anzeigt, kann das Testsystem für Schnelltests angewandt werden, wodurch rasch und eindeutig, beispielsweise pathogene Substanzen in Nahrungsmitteln, Futtermitteln oder dgl. nachgewiesen werden können.In addition, by providing a display on the measuring instrument which directly displays the measurement result, the test system can be used for rapid tests, whereby it is possible to quickly and clearly detect, for example, pathogenic substances in foods, feedstuffs or the like.
[0026] Indem das System derart ausgebildet sein kann, dass auf einer immunochromatographischen Membran eine Mehrzahl von jeweils paarweise nebeneinander oder hintereinander angeordneten, spezifischen Testzonen und spezifischen Kontrollzonen sowie wenigstens eine einen Antikörper für die Kontrollsubstanz enthaltende Kontrollzone bzw. Kontrolllinie aufgebracht sind, kann gleichzeitig rasch und zuverlässig eine Mehrzahl von zu untersuchenden Analyten auf ein und derselben immunochromatographischen Membran nachgewiesen werden, können insbesondere auch eine Mehrzahl von zu untersuchenden Substanzen, wie beispielsweise Proteine, unerwünschte Inhaltsstoffe bzw. Kontaminanten von agrarischen Produkten, genetisch veränderte Mikroorganismen und dgl., nachgewiesen werden.By the system can be designed such that on a immunochromatographic membrane a plurality of each paired next to each other or arranged in succession, specific test zones and specific control zones and at least one containing an antibody for the control substance control zone or control line are applied simultaneously can rapidly and reliably detecting a plurality of analytes to be examined on one and the same immunochromatographic membrane, in particular, a plurality of substances to be examined, such as proteins, undesirable ingredients or contaminants of agricultural products, genetically modified microorganisms and the like, can be detected.
[0027] Auch kann das Testsystem dahingehend weitergebildet sein, dass es aus einer Mehrzahl von nebeneinander, gegebenenfalls voneinander trennbar angeordneten Teststreifen gebildet ist. Mit einer derartigen Ausführung gelingt es insbesondere, eine Vielzahl von Analyten gleichzeitig zu untersuchen oder aber gegebenenfalls einen Teil des Testsystems, welcher als gesonderter Teststreifen ausgebildet ist, von dem Testsystem abzutrennen und einzeln zur Anwendung bzw. Auswertung zu bringen. Dadurch gelingt es nicht nur, eine Vielzahl von Analyten gleichzeitig zu untersuchen, sondern im Bedarfsfall auch die relativ kostenintensiven Test-Also, the test system can be further developed to the effect that it is formed from a plurality of juxtaposed, optionally separated from each other arranged test strip. With such an embodiment, it is possible, in particular, to simultaneously examine a multiplicity of analytes or, if appropriate, to separate off part of the test system, which is designed as a separate test strip, from the test system and to apply it individually for use or evaluation. This not only makes it possible to study a large number of analytes simultaneously, but also, if necessary, the relatively costly test
Systeme gezielt und sparsam einzusetzen.Systematic and economical use.
[0028] Beim Auswerten derartiger Testsysteme kann zur Vereinfachung und um ein präziseres Testergebnis zu erzielen das Testsystem vor Auswertung in die Einzelstreifen getrennt werden, um diese einzeln beispielsweise mit Farbkarten oder dgl. zu vergleichen, so dass ein zuverlässiges und präzises Ergebnis erzielt werden kann. In gleicher Weise kann jedoch aus das gesamte Testsystem in einen Testkartenleser eingebracht werden und zur Gänze ausgelesen werden, wodurch das Testsystem nicht nur an eine Vielzahl von Anwendungsmöglichkeiten anpassbar ist, sondern auch rasche und zuverlässige Ergebnisse liefern kann.When evaluating such test systems, the test system can be separated into the individual strips before evaluation in order to simplify and achieve a more precise test result, in order to compare these individually with, for example, color cards or the like, so that a reliable and precise result can be achieved. In the same way, however, the entire test system can be inserted into a test card reader and read out in its entirety, which not only makes the test system adaptable to a large number of possible applications, but can also provide rapid and reliable results.
[0029] Weiterhin kann das Testsystem so ausgebildet sein, dass zwischen den nebeneinander angeordneten Teststreifen Unterbrechungen, insbesondere Schlitze oder Perforierungen, ausgebildet sind, in welchem Fall es möglich ist, den Analyseansprüchen entsprechend entweder den Test für mehrere Analyten gleichzeitig einzusetzen oder, wie bereits ausgeführt, das Testsystem nach Durchführung des Tests in die einzelnen Streifen an den Perforationslinien zu trennen, worauf in weiterer Folge die Einzelstreifen gesondert ausgewertet werden können.Furthermore, the test system can be designed so that between the juxtaposed test strips interruptions, in particular slots or perforations are formed, in which case it is possible to use the analysis claims either the test for multiple analytes simultaneously or, as already stated to separate the test system after the test in the individual strips on the perforation lines, whereupon subsequently the individual strips can be evaluated separately.
[0030] Die Erfindung wird nachfolgend anhand von in der Zeichnung dargestellten Ausführungsbeispielen näher erläutert, in welchen: [0031] Fig. 1a schematisch eine Versuchsanordnung gemäß der vorliegenden Erfindung darstellt, in welcher in Fig. 1a ein valides, allerdings negatives Versuchergebnis dargestellt ist und [0032] Fig. 1b dieselbe Versuchsordnung zeigt, bei welcher jedoch ein valides, negativesThe invention will be explained in more detail below with reference to exemplary embodiments illustrated in the drawing, in which: Fig. 1a shows schematically a test arrangement according to the present invention, in which a valid but negative test result is shown in Fig. 1a and Fig. 1b shows the same experimental order, in which, however, a valid, negative
Versuchsergebnis dargestellt ist; [0033] Fig. 2 eine ähnliche Versuchsanordnung darstellt, bei welcher jedoch zwei verschie dene, zu untersuchende Analyten in der Testlösung enthalten sind und zusätzlich auf der immunochromatographischen Membran eine einen Antikörper für die Kontrollsubstanz enthaltende Kontrollzone aufgebracht ist, wobei [0034] Fig. 2a einen Versuch darstellt, welcher gültig ist, bei welchem ein erster Analyt ein valides und positives Ergebnis zeigt und ein zweiter zu untersuchender Analyt ein in Verdünnung zu wiederholendes, weil überladenes Ergebnis zeigt; [0035] Fig. 2b einen Fall darstellt, bei welchem der Test gültig ist, aber sowohl der erste Analyt als auch der zweite Analyt ein valides, jedoch negatives Ergebnis zeigen; [0036] Fig. 2c schließlich eine Versuchsanordnung darstellt, in welcher der Test gültig ist undTest result is shown; Fig. 2 shows a similar experimental arrangement in which, however, two different, to be examined analytes contained in the test solution and in addition to the immunochromatographic membrane is applied an antibody containing the control substance for the control zone, wherein Fig. 2a represents an experiment which is valid, in which a first analyte shows a valid and positive result and a second analyte to be examined shows a result to be repeated in dilution, because overloaded; Fig. 2b illustrates a case in which the test is valid, but both the first analyte and the second analyte show a valid but negative result; Fig. 2c finally illustrates an experimental setup in which the test is valid and
Analyt 1 valid und positiv ist und Analyt 2 valid und negativ ist; [0037] Fig. 3a das Beispiel einer Testkarte zeigt, auf welcher sich zwei Testlinien befinden; [0038] Fig. 3b das Beispiel einer Karte zeigt, auf welcher sich drei Testlinien befinden; [0039] Fig. 4 eine doppelt breit ausgebildete Testkarte darstellt, auf welcher in jedem Teil zwei Analyten nachgewiesen werden können; [0040] Fig. 5a eine Testkarte zeigt, welche in drei Teile unterteilbar ist, auf welchen drei Analy ten nebeneinander aufgebracht werden können; und [0041] Fig. 5b eine dreiteilbare Testkarte zeigt, in welcher drei Analyten, welche in einer MatrixAnalyte 1 is valid and positive and analyte 2 is valid and negative; Fig. 3a shows the example of a test card on which there are two test lines; Fig. 3b shows the example of a card on which there are three test lines; Fig. 4 illustrates a dual-width test card on which two analytes can be detected in each part; Fig. 5a shows a test card which is subdividable into three parts, on which three analy th can be applied side by side; and Fig. 5b shows a tripartite test card in which three analytes which are in a matrix
Vorkommen können, gleichzeitig untersucht werden können.Occurrences can be studied simultaneously.
[0042] Im Einzelnen ist in Fig. 1 mit 1 schematisch ein Gefäß dargestellt, in welchem eine zu untersuchende Testlösung 2 enthalten ist. In dieser Testlösung 2 ist einerseits mit 3 der zu untersuchende Analyt bezeichnet und andererseits ist mit 4 ein an eine eine Farbreaktion bewirkende Substanz gekoppelter bzw. damit markierter Antikörper bezeichnet. Im Einzelnen sind die in Fig. 1 gewählten Symbole auf dem Gebiet der Biochemie üblich und bedeuten folgendes: [0043] o Analyt [0044] Y Antikörper für den Analyt [0045] * eine eine Farbreaktion bewirkende Substanz [0046] ^ an eine eine spezifische Farbreaktion bewirkende Substanz gekoppelter Antikör per für den Analyten [0047] In das Reaktionsgefäß 1 wird in der Folge ein Teststreifen, welcher schematisch mit 5 bezeichnet ist, eingetaucht, auf welchem eine immunochromatographische Membran 6 aufgebracht ist. Auf der immunochromatographischen Membran 6 ist einerseits ein Antikörper 7 für einen zu untersuchenden Analyten 3 als spezifische Testzone in einer quantitativen Menge festgelegt und es ist andererseits in Abstand von dieser spezifischen Testzone 7 in einer spezifischen Kontrollzone 8 eine quantitative Menge eines in der Probe erwarteten Analyten bzw. dessen Homolog festgelegt.In detail, 1 schematically shows a vessel in FIG. 1, in which a test solution 2 to be examined is contained. In this test solution 2, on the one hand, the analyte to be examined is designated 3, and on the other hand, 4 denotes an antibody coupled to a substance causing a color reaction or labeled therewith. Specifically, the symbols chosen in the field of biochemistry are common in Fig. 1 and denote the following: analyte [0044] Y antibody for the analyte a substance causing a color reaction to a specific one Color reaction-causing substance Coupled antibody per for the analyte In the reaction vessel 1 is subsequently immersed a test strip, which is schematically indicated 5, on which an immunochromatographic membrane 6 is applied. On the immunochromatographic membrane 6, on the one hand, an antibody 7 for an analyte 3 to be examined is defined as a specific test zone in a quantitative amount and, on the other hand, at a distance from this specific test zone 7 in a specific control zone 8, a quantitative amount of an analyte or analyte expected in the sample whose homologue is fixed.
[0048] Wenn die zu untersuchende Lösung 2 in Laufrichtung 9 des Teststreifens 5 läuft, wird in der spezifischen Testzone 7 im Falle eines positiven Nachweises an dem Antikörper für den Analyten einerseits der Analyt 3 und andererseits an dem Analyten 3 der an eine eine Farbreaktion bewirkende Substanz festgelegte Antikörper für den Analyten 4 festgelegt. Beim Weiterlaufen der Testlösung 2 in Laufrichtung 9 wird in weiterer Folge der an eine eine Farbreaktion bewirkende Substanz festgelegte Antikörper für einen Analyten 4, an welchen auch der Analyt 3 festgelegt ist, an der spezifischen Kontrollzone 8, nämlich dem auf der immunochromatographischen Membran 6 festgelegten Analyten festgehalten und eine Farbreaktion bewirken, in welchem Fall bei Auswertung des Teststreifens 5 zwei eine farbige Reaktion zeigende Balken nachgewiesen werden können, welche voneinander räumlich getrennt sind. Aus der Farbintensität kann in weiterer Folge auf die Konzentration des in der Testlösung 2 enthaltenen Analyten 3 geschlossen werden, da einerseits sowohl die Dimension der immunochromatographischen Membran 6 als auch die Menge des aufgebrachten Antikörpers 7 für den Analyten als auch die Menge des aufgebrachten Analyten oder Homologs 8 auf der immunochromatographischen Membran 6 ebenso wie die Menge des an eine eine Farbreaktion bewirkende Substanz festgelegten Antikörpers 4 in der Testlösung 2 bekannt waren, so dass durch einfachen Vergleich mit einer Eichkurve nicht nur die Gültigkeit des Versuchs sondern auch der positive Nachweis des in der Testlösung 2 enthaltenen Analyten 3 geführt werden können.If the solution to be examined 2 runs in the direction of 9 of the test strip 5, in the specific test zone 7 in the case of a positive detection of the antibody for the analyte on the one hand, the analyte 3 and on the other hand to the analyte 3 of the one causing a color reaction Substance specified antibodies for the analyte 4 set. As the test solution 2 continues to run in the direction 9, the antibody for an analyte 4, to which the analyte 3 is also attached, is subsequently determined at the specific control zone 8, namely the analyte fixed on the immunochromatographic membrane 6, to a substance causing a color reaction held and cause a color reaction, in which case can be detected on evaluation of the test strip 5, two colored reaction-showing bars, which are spatially separated from each other. From the color intensity, the concentration of the analyte 3 contained in the test solution 2 can subsequently be deduced, since on the one hand both the dimension of the immunochromatographic membrane 6 and the amount of antibody 7 applied for the analyte and the amount of analyte or homolog applied 8 on immunochromatographic membrane 6 as well as the amount of antibody 4 attached to a substance causing color reaction were known in test solution 2, so that by simple comparison with a calibration curve not only the validity of the experiment but also the positive detection of that in the test solution 2 contained analyte 3 can be performed.
[0049] Fig. 1a und Fig. 1b stellen Versuchsanordnungen gemäß dem Stand der Technik dar, wobei Fig. 1b den Fall darstellt, dass in der zu untersuchenden Testlösung 2 der Analyt 3 nicht enthalten ist, sondern lediglich der an eine eine Farbreaktion bewirkende Substanz gekoppelte Antikörper für den Analyten 4 enthalten ist. Wenn in diese Testlösung 2 der Teststreifen 5 eingetaucht wird und entlang der Laufrichtung 9 laufen gelassen wird, wird es an der Stelle 7, wo der Antikörper für den Analyten festgelegt ist, keinerlei Reaktion geben, da kein Analyt in der Probe 2 enthalten war. Darüber hinaus wird es an der Stelle 8, wo der Analyt oder sein Homolog auf der immunochromatographischen Membran 6 festgelegt ist, eine sehr intensive Farbreaktion des an eine eine Farbreaktion bewirkende Substanz gekoppelten Antikörpers für den Analyten 4 geben, so dass unmittelbar auf die Gültigkeit des Versuchs geschlossen werden kann und gleichzeitig festgehalten werden kann, dass der Versuch aufgrund des Fehlens einer Reaktion an der Stelle 7 negativ verlaufen ist.Fig. 1a and Fig. 1b represent experimental arrangements according to the prior art, wherein Fig. 1b illustrates the case that in the test solution to be examined 2 of the analyte 3 is not included, but only to a causing a color reaction substance coupled antibody for the analyte 4 is included. When the test strip 5 is immersed in this test solution 2 and run along the running direction 9, it will not give any reaction at the point 7 where the antibody for the analyte is fixed because no analyte was contained in the sample 2. Moreover, at point 8, where the analyte or its homologue is fixed on the immunochromatographic membrane 6, there will be a very intense color reaction of the antibody coupled to a colorant-causing substance for the analyte 4, thus directly affecting the validity of the experiment can be concluded and it can be noted at the same time that the experiment was negative due to the lack of a reaction at the point 7.
[0050] Die erfindungsgemäße Versuchsanordnung gemäß Fig. 2 ist ähnlich zu jener von Fig. 1, wobei jedoch in der Testlösung 2 neben dem Analyten 3 weitere Analyten 10, sowie jeweils ein an eine Farbreaktion bewirkende Substanz festgelegter Antikörper für den Analyten 3 bzw. 10, nämlich 4 bzw. 11 enthalten sind. Schließlich ist in der Testlösung 2 noch eine weitere Substanz 12 enthalten, welche wiederum ein an eine eine Farbreaktion bewirkende Substanz gekoppelter Antikörper 12 ist, wobei jedoch dieser Antikörper nicht spezifisch ist und somit lediglich dafür verwendet wird, um nachzuweisen, ob der Versuch bzw. Test gültig ist oder nicht.The test arrangement according to the invention according to FIG. 2 is similar to that of FIG. 1, but in the test solution 2, in addition to the analyte 3, further analytes 10, and in each case an antibody for the analyte 3 or 10 defined for a substance causing a color reaction , namely 4 or 11 are included. Finally, in the test solution 2, another substance 12 is contained, which in turn is an antibody 12 coupled to a substance causing a color reaction, but this antibody is non-specific and thus used only to detect whether the experiment or test is valid or not.
[0051] Im Einzelnen sind die in Fig. 2 gewählten Symbole auf dem Gebiet der Biochemie üblich und bedeuten folgendes: [0052] erster Analyt [0053] Y Antikörper für den Analyt [0054] O zweiter Analyt [0055] * eine eine Farbreaktion bewirkende Substanz [0056] erster an eine eine spezifische Farbreaktion bewirkende Substanz gekoppelter Antikörper für den Analyten [0057] zweiter an eine eine spezifische Farbreaktion bewirkende Substanz gekoppelter Antikörper für den Analyten [0058] # ein an eine spezifische Farbreaktion bewirkende Substanz gekoppelter Antikör per einer Kontroll-Substanz.More specifically, the symbols chosen in Figure 2 are common in the field of biochemistry and are as follows: [0052] first analyte [0053] Y antibody for the analyte second analyte [0055] a color reaction causing a color reaction Substance first antibody coupled to a substance causing a specific color reaction substance for the analyte second antibody coupled to a substance causing a specific color reaction substance for the analyte a antibody coupled to a specific color reaction by means of a control Substance.
[0059] Auf dem Teststreifen 5 sind sowohl in Fig. 2a, 2b als auch 2c hintereinander folgende Substanzen festgelegt: ein Antikörper 7 für den Analyten 3, der Analyt in der spezifischen Kon-trollzone 8, ein Antikörper für den Analyten 10, welcher mit 13 bezeichnet ist, ein Analyt 14 in der spezifischen Kontrollzone, sowie ein Antikörper für den nichtspezifischen an eine eine Farbreaktion bewirkende Substanz festgelegten Analyten 12, welcher mit 15 bezeichnet ist. Wenn der Teststreifen 5 in die untersuchende Lösung 2 getaucht wird und entlang der Laufrichtung 9 die zu untersuchende Testlösung läuft, wird im Falle der Fig. 2a sich an den Antikörper 7 der Analyt 3 festlegen, sowie an den Analyten 3 der an eine eine Farbreaktion bewirkende Substanz gekoppelte Antikörper 4 anlagern. An den Analyt bzw. das Homolog 8 wird sich wiederum der an eine eine Farbreaktion bewirkende Substanz angelagerte bzw. gekoppelte Antikörper 4 festlegen, an welchen Antikörper 4 zusätzliche Analytenteilchen 3 gekoppelt sind. Schließlich wird an den Antikörper 13 der Analyt 10 gekoppelt und an dem Analyten 14 wird keine Reaktion stattfinden, da sämtliche Bindungsstellen des an eine eine Farbreaktion bewirkende Substanz gekoppelten Antikörpers 11 durch Analytenteilchen 10 belegt sind, so dass eine Kopplung des an eine eine Farbreaktion bewirkende Substanz gekoppelten Antikörpers 11 und an den Analyten 14 nicht mehr möglich ist. Am Ende in der Laufrichtung 9 auf der immuno-chromatographischen Membran 6 wird eine Farbreaktion zwischen dem dort festgelegten Antikörper 15 und dem nicht spezifischen Analyten 12 stattfinden, welcher der Probe während des Versuchs zugesetzt wurde, um die Gültigkeit des Versuchs nachweisen zu können.On the test strip 5, the following substances are sequentially defined in both FIGS. 2a, 2b and 2c: an antibody 7 for the analyte 3, the analyte in the specific control zone 8, an antibody for the analyte 10, which with 13, an analyte 14 in the specific control zone, as well as an antibody for the nonspecific analyte 12 attached to a substance causing a color reaction, designated 15. If the test strip 5 is immersed in the investigating solution 2 and runs along the running direction 9, the test solution to be examined, in the case of Fig. 2a, the analyte 3 is determined on the antibody 7, as well as the analyte 3 of the one causing a color reaction Attach substance-coupled antibody 4. To the analyte or the homolog 8, in turn, the antibody 4 attached or coupled to a substance causing a color reaction will determine to which antibody 4 additional analyte particles 3 are coupled. Finally, the analyte 10 is coupled to the antibody 13 and no reaction will take place on the analyte 14, since all binding sites of the antibody 11 coupled to a substance causing a color reaction are occupied by analyte particles 10, thus coupling the substance to a color reaction coupled antibody 11 and to the analyte 14 is no longer possible. At the end in the running direction 9 on the immunochromatographic membrane 6, a color reaction will take place between the antibody 15 determined there and the nonspecific analyte 12 which was added to the sample during the test in order to be able to prove the validity of the experiment.
[0060] Der Test gemäß Fig. 2a ist somit in Bezug auf den Analyten 3 valide und positiv und der Analyt 3 kann nachgewiesen werden. In Bezug auf den Analyten 10 ist er nicht valid, da zuviel des Analyten 10 in der zu untersuchenden Testlösung 2 enthalten ist und somit weder in der spezifischen Testzone noch in der spezifischen Kontrollzone in Bezug auf den Analyten 10 eine Farbreaktion beobachtet werden kann. Aus diesem Fehlen der Farbreaktion kann bei Auswertung des Tests auf die Überschussmenge des Analyten geschlossen werden und in weiterer Folge die Testlösung 2 entsprechend verdünnt werden und der Versuch mit einer entsprechend verdünnten Lösung wiederholt werden.The assay according to FIG. 2a is thus valid and positive in relation to the analyte 3 and the analyte 3 can be detected. With respect to the analyte 10, it is not valid because too much of the analyte 10 is contained in the test solution 2 to be tested, and thus neither in the specific test zone nor in the specific control zone with respect to the analyte 10 can a color reaction be observed. From this lack of color reaction can be concluded on evaluation of the test on the excess amount of the analyte and subsequently the test solution 2 are diluted accordingly and the experiment is repeated with a correspondingly dilute solution.
[0061] Die Auswertung des Versuches gemäß Fig. 2b zeigt einen gültigen Test, da die nicht spezifische Kontrollsubstanz bzw. der Antikörper 15 für die nicht spezifische Kontrollsubstanz 12 eine Reaktion zeigt, an der spezifischen Testzone, nämlich an dem Antikörper 7 keine Reaktion stattfindet, an der spezifischen Kontrollzone 8 eine Reaktion mit einem an eine eine Farbreaktion bewirkende Substanz gekoppelten Antikörper für den Analyten stattfindet, an der zweiten spezifischen Testzone 13 keine Farbreaktion stattfindet, da auch der zweite, zu untersuchende Analyt 10 in der zu untersuchenden Testlösung 2 nicht enthalten ist, und in einer zweiten, spezifischen Kontrollzone 14 eine Farbreaktion nachgewiesen werden kann, da der an eine eine Farbreaktion bewirkende Substanz gekoppelte Antikörper 11 für den Analyten 10 an den auf der Position 14 festgelegten Analyten 10 gekoppelt hat. Der Test gemäß Fig. 2b ist daher gültig und sowohl in Bezug auf den Analyten 3 als auch in Bezug auf den Analyten 10 valide, jedoch negativ.The evaluation of the experiment according to FIG. 2b shows a valid test, since the non-specific control substance or the antibody 15 for the nonspecific control substance 12 shows a reaction at the specific test zone, namely at which antibody 7 no reaction takes place, At the specific control zone 8, a reaction with an antibody for a substance causing a color reaction takes place for the analyte, at the second specific test zone 13 no color reaction takes place, since also the second analyte 10 to be examined is not contained in the test solution 2 to be investigated and in a second, specific control zone 14, a color reaction can be detected because the antibody 11 coupled to a substance causing a color reaction has coupled to the analyte 10 at the analyte 10 fixed at position 14. The test according to FIG. 2b is therefore valid and valid with respect to both the analyte 3 and the analyte 10, but negative.
[0062] Schließlich zeigt Fig. 2c einen Fall, in welchem der Test, welcher wie oben beschrieben durchgeführt wurde, in Bezug auf den Analyten 3 valide und positiv ist, und in Bezug auf denFinally, Fig. 2c shows a case in which the test performed as described above is valid and positive with respect to the analyte 3, and with respect to the
Analyten 10 valide und negativ ist, da dieser in der untersuchenden Lösung 2 nicht enthalten ist.Analytes 10 is valid and negative, since this is not included in the investigating solution 2.
[0063] Selbstverständlich können neben den Varianten mit ein und zwei zu untersuchenden Analyten auch beispielsweise fünf oder mehr Analyten in der zu untersuchenden Probe enthalten sein und, wie bereits ausgeführt, kann die Auswertung des Versuchsergebnisses sowohl optisch durch rein visuelle Auswertung der Farbintensitäten der erhaltenen Reaktionsbalken durchgeführt werden, als auch mittels entsprechender Messgeräte und durch Vergleichen mit Eichkurven, beispielsweise quantitativ durchgeführt werden.Of course, in addition to the variants with one and two analytes to be examined, for example, five or more analytes in the sample to be examined and, as already stated, the evaluation of the test result both optically by purely visual evaluation of the color intensities of the reaction bar obtained be carried out, as well as by means of appropriate measuring instruments and by comparing with calibration curves, for example, carried out quantitatively.
[0064] Fig. 3a zeigt einen Teststreifen, auf welchem eine immuno- chromatographische Membran 6 aufgebracht ist. In Laufrichtung 9 der Membran, welche mit einem Pfeil angedeutet ist, sind hintereinander zwei Testlinien für zu untersuchende Analyten A1/1 und A2/1 aufgebracht, mit welchen beispielsweise alpha-Laktalbumin (Analyt A1) und Kasein (Analyt A2) nachgewiesen werden kann.FIG. 3a shows a test strip on which an immunochromatographic membrane 6 is applied. In the running direction 9 of the membrane, which is indicated by an arrow, two test lines for analytes A1 / 1 and A2 / 1 to be examined are applied in succession, with which, for example, alpha-lactalbumin (analyte A1) and casein (analyte A2) can be detected.
[0065] In Abstand von den zwei Testlinien A1/1 und A2/1 sind die entsprechenden spezifischen Kontrolllinien A1/1 und A2/2 aufgebracht. Am Ende des Teststreifens 5 ist die nicht analytspezi-fische Kontrollzone 12 aufgebracht.At a distance from the two test lines A1 / 1 and A2 / 1, the corresponding specific control lines A1 / 1 and A2 / 2 are applied. At the end of the test strip 5, the non-analyte-specific control zone 12 is applied.
[0066] In gleicher Weise zeigt Fig. 3b eine Testkarte 5, in welcher in Flussrichtung 9 drei Paare von Analyten samt spezifischer Kontrolllinie hintereinander aufgebracht sind. So zeigt beispielsweise A1/1 den zu untersuchenden Analyten, beispielsweise alpha-Laktalbumin, die Linie A1/2 zugehörige, spezifische Kontrolllinien, die Linie A2/1 einen zweiten zu untersuchenden Analyten, wie beispielsweise Kasein, die Linie A2/2 die zugehörige, spezifische Kontrolllinie und die Linie A3/1 einen dritten zu untersuchenden Analyten, wie beispielsweise beta-Laktoglobulin, und die Linie A3/2 die zugehörige, spezifische Kontrolllinie. Mit 12 ist wiederum die einen Antikörper für die Kontrollsubstanz enthaltende Kontrolllinie dargestellt.In the same way, FIG. 3b shows a test card 5 in which three pairs of analytes together with a specific control line are applied one behind the other in the direction of flow 9. Thus, for example, A1 / 1 shows the analyte to be examined, for example, alpha-lactalbumin, the line A1 / 2 associated, specific control lines, the line A2 / 1 a second analyte to be examined, such as casein, the line A2 / 2 the associated, specific Control line and the line A3 / 1 a third analyte to be examined, such as beta-lactoglobulin, and the line A3 / 2 the associated specific control line. The number 12 again shows the control line containing an antibody for the control substance.
[0067] Fig. 4 zeigt wiederum eine Testkarte 5, welche jedoch abweichend von den vorhergehenden Ausbildungen zweiteilig ausgebildet ist. Die Testkarte 5 ist hierbei in der Mitte entlang einer Perforationslinie 16 in zwei Teile 17 und 18 trennbar. Auf den zwei Teilen der Testkarte können nun jeweils zwei Analyten- paare aufgetragen werden, so dass mit ein und derselben Testkarte 5 insgesamt vier Analyten gleichzeitig untersucht werden können. Aufgrund einer derartigen Ausbildung können entweder alle vier Analyten gleichzeitig qualitativ ausgewertet werden oder nach Bedarf jeweils nur die beiden auf einem Streifen bzw. Teil 17 bzw. 18 der Testkarte 5 befindlichen Analyten. Je nach Verfügbarkeit der zur Verfügung stehenden Auswerteeinrichtungen kann weiterhin das Verfahren so geführt werden, dass auch eine quantitative Auswertung aller vier Analyten in einem entsprechenden Lesegerät gleichzeitig durchgeführt werden kann oder nach Trennung des Teststreifens 5 in die Teile 17 bzw. 18, welche jeweils eine immunochromatographische Membran 6 tragen, diese gesondert ausgewertet werden.4 again shows a test card 5, which, however, deviating from the previous embodiments is formed in two parts. The test card 5 is in this case in the middle along a perforation 16 in two parts 17 and 18 separable. Two analyte pairs can now be applied to the two parts of the test card so that a total of four analytes can be examined simultaneously with one and the same test card 5. Due to such a configuration, either all four analytes can be qualitatively evaluated at the same time or, if necessary, only the two analytes located on a strip or part 17 or 18 of the test card 5. Depending on the availability of the available evaluation devices, the method can furthermore be carried out in such a way that a quantitative evaluation of all four analytes in a corresponding reading device can be carried out simultaneously or after separation of the test strip 5 into parts 17 and 18, each of which has an immunochromatographic Wear membrane 6, these are evaluated separately.
[0068] In gleicher Weise kann, wie dies in Fig. 5a und 5b dargestellt ist, die Testkarte auch aus mehreren Teilen, beispielsweise drei, wie in Fig. 5a und 5b dargestellt, ausgebildet sein. Die Testkarte 5 umfasst in diesem Fall drei Teile 17, 18 und 19, wobei auf jedem Teil der Testkarte 5 jeweils ein Analyt sowie die zugehörige, spezifische Kontrolllinie, nämlich A1/1 bzw. A1/2, A2/1 bzw. A2/2 und A3/1 bzw. A3/2, aufgetragen sind.In the same way, as shown in Fig. 5a and 5b, the test card also from several parts, for example, three, as shown in Fig. 5a and 5b, be formed. The test card 5 in this case comprises three parts 17, 18 and 19, wherein on each part of the test card 5 in each case one analyte and the associated, specific control line, namely A1 / 1 or A1 / 2, A2 / 1 or A2 / 2 and A3 / 1 and A3 / 2, respectively.
[0069] Zur besseren Lesbarkeit ist in Fig. 5a hierbei jeweils die spezifische Test- und Kontrolllinie in Abstand voneinander auf den Einzelkarten 17, 18 und 19 aufgebracht, so dass mit einem derartigen System nicht nur eine vereinfachte Lesbarkeit des Tests erreicht werden kann, sondern auch eine bessere Übersichtlichkeit erzielt wird. Zur Vervollständigung des Tests ist in allen drei Teilkarten 17, 18, 19 des Teststreifens 5 jeweils eine einen Antikörper für die Kontrollsubstanz enthaltende Kontrolllinie 12 aufgebracht.For better readability, in this case in each case the specific test and control line is spaced apart on the individual cards 17, 18 and 19 applied, so that not only a simplified readability of the test can be achieved with such a system, but also a better clarity is achieved. To complete the test, a control line 12 containing an antibody for the control substance is applied in each of the three partial maps 17, 18, 19 of the test strip 5.
[0070] In diesem Fall ist es beispielsweise möglich, nach einem positiven Ergebnis auf einem der Streifen eine weitere Analyse mit einem weiteren Streifen durchzuführen, um ein verfeinertes Ergebnis zu erhalten.In this case, for example, after a positive result on one of the strips, it is possible to carry out a further analysis with another strip in order to obtain a refined result.
[0071] Fig. 5b zeigt wiederum eine Testkarte 5, in welcher drei voneinander verschiedene Analyten untersucht werden können, wobei die Ausbildung gemäß Fig. 5b insbesondere für die Untersuchung von Analyten, welche in einer Matrix Vorkommen, geeignet ist, beispielsweise kann hier Milch angeführt werden, in welcher verschiedene allergene Komponenten, wie alpha-Laktalbumin, Kasein oder beta-Laktalbumin, enthalten sein können. Die Testkarte 5 ist hierbei wiederum in drei Teile 17, 18 und 19 unterteilt und in Laufrichtung 9 des Flussmittels sind sämtliche, spezifischen Test- und Kontrolllinien auf selber Höhe ebenso wie eine einen Antikörper für die Kontrollsubstanz enthaltende Kontrolllinie 12 aufgebracht. Die Testkarte 5 gemäß Fig. 5b ist im Unterschied zu jener von Fig. 5a dahingehend weitergebildet, dass lediglich eine Perforierung 21 im oberen Teil, insbesondere im Griffbereich 20, der Testkarte vorgesehen ist, so dass die Streifen leicht voneinander abgerissen werden können. Die Teststreifen 17, 18 und 19 sind im unteren Bereich, d.h. im Bereich, wo der Test durchgeführt wird, vollständig voneinander getrennt ausgebildet und weisen keine Perforierungen auf.Fig. 5b again shows a test card 5, in which three mutually different analytes can be examined, the training of Fig. 5b in particular for the study of analytes, which is in a matrix occurrence, suitable, for example, can be given here milk in which various allergenic components, such as alpha-lactalbumin, casein or beta-lactalbumin, may be included. The test card 5 is in turn subdivided into three parts 17, 18 and 19, and in the running direction 9 of the flux all the specific test and control lines at the same level as a control line 12 containing an antibody for the control substance are applied. The test card 5 according to FIG. 5b is developed in contrast to that of FIG. 5a in that only one perforation 21 is provided in the upper part, in particular in the grip region 20 of the test card, so that the strips can easily be torn off one another. The test strips 17, 18 and 19 are in the lower region, i. in the area where the test is carried out completely separated from each other and have no perforations.
[0072] Bei einer derartigen Ausbildung können insbesondere einzelne Streifen 17, 18 oder 19 von der Testkarte 5 ohne Beschädigung des Versuchs sicher und zuverlässig abgetrennt werden.In such a configuration, in particular individual strips 17, 18 or 19 can be separated from the test card 5 safely and reliably without damaging the experiment.
[0073] Selbstverständlich kann das System dahingehend weitergebildet sein, dass auf der Testkarte 5 lediglich ein einziger Analyt in verschiedenen Bereichen 17, 18 oder 19 der Testkarte detektiert wird, wobei beispielsweise in den einzelnen Streifen der Testkarte 5 unterschiedliche Konzentrationen von ein und demselben Analyten aufgebracht werden, um unmittelbar ein quantitatives, sicheres und zuverlässiges Ergebnis zu erzielen.Of course, the system can be developed to the effect that on the test card 5 only a single analyte in different areas 17, 18 or 19 of the test card is detected, for example, applied in the individual strips of the test card 5 different concentrations of the same analyte directly to achieve a quantitative, safe and reliable result.
Claims (7)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| ATA8011/2009A AT507056B1 (en) | 2008-06-17 | 2008-06-17 | IMMUNOCHROMATOGRAPHIC PROCESS AND TEST SYSTEM FOR DETERMINING AT LEAST ONE ANALYTE IN A TEST SOLUTION TO BE INVESTIGATED |
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| ATA8011/2009A AT507056B1 (en) | 2008-06-17 | 2008-06-17 | IMMUNOCHROMATOGRAPHIC PROCESS AND TEST SYSTEM FOR DETERMINING AT LEAST ONE ANALYTE IN A TEST SOLUTION TO BE INVESTIGATED |
| AT3432008 | 2008-06-17 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| AT507056A1 AT507056A1 (en) | 2010-01-15 |
| AT507056B1 true AT507056B1 (en) | 2015-05-15 |
Family
ID=41480258
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| ATA8011/2009A AT507056B1 (en) | 2008-06-17 | 2008-06-17 | IMMUNOCHROMATOGRAPHIC PROCESS AND TEST SYSTEM FOR DETERMINING AT LEAST ONE ANALYTE IN A TEST SOLUTION TO BE INVESTIGATED |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| AT (1) | AT507056B1 (en) |
Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0171150A2 (en) * | 1984-06-12 | 1986-02-12 | Orgenics Ltd. | Method and apparatus for assaying with optional reagent quality control |
| GB2300914A (en) * | 1995-04-28 | 1996-11-20 | Tepnel Medical Ltd | Analyte detection device for liquid samples |
| WO1997038312A1 (en) * | 1996-04-10 | 1997-10-16 | Scripps Laboratories, Inc. | Diagnostic test device utilizing filaments containing reagents |
| WO2000031539A1 (en) * | 1998-11-23 | 2000-06-02 | Praxsys Biosystems, Inc. | Method and apparatus for performing a lateral flow assay |
| DE10054093A1 (en) * | 2000-11-01 | 2002-05-29 | Pe Diagnostik Gmbh | Detecting antigens by fluorescence immunoassay, useful e.g. for diagnosis, by performing both competitive and sandwich assays to cover a broad concentration range |
| WO2003023371A1 (en) * | 2001-09-10 | 2003-03-20 | Quidel Corporation | Method for adding an apparent non-signal line to a rapid diagnostic assay |
| US20070148717A1 (en) * | 2002-04-10 | 2007-06-28 | Fong Whalley K | Sensitive immunochromatographic assay |
-
2008
- 2008-06-17 AT ATA8011/2009A patent/AT507056B1/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0171150A2 (en) * | 1984-06-12 | 1986-02-12 | Orgenics Ltd. | Method and apparatus for assaying with optional reagent quality control |
| GB2300914A (en) * | 1995-04-28 | 1996-11-20 | Tepnel Medical Ltd | Analyte detection device for liquid samples |
| WO1997038312A1 (en) * | 1996-04-10 | 1997-10-16 | Scripps Laboratories, Inc. | Diagnostic test device utilizing filaments containing reagents |
| WO2000031539A1 (en) * | 1998-11-23 | 2000-06-02 | Praxsys Biosystems, Inc. | Method and apparatus for performing a lateral flow assay |
| DE10054093A1 (en) * | 2000-11-01 | 2002-05-29 | Pe Diagnostik Gmbh | Detecting antigens by fluorescence immunoassay, useful e.g. for diagnosis, by performing both competitive and sandwich assays to cover a broad concentration range |
| WO2003023371A1 (en) * | 2001-09-10 | 2003-03-20 | Quidel Corporation | Method for adding an apparent non-signal line to a rapid diagnostic assay |
| US20070148717A1 (en) * | 2002-04-10 | 2007-06-28 | Fong Whalley K | Sensitive immunochromatographic assay |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| AT507056A1 (en) | 2010-01-15 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DE3322373C2 (en) | Test means and methods for the detection of antigens and / or antibodies | |
| DE60126002T2 (en) | Method and apparatus for producing visible results using colorimetric strips | |
| DE2427221C3 (en) | Method for analyzing a liquid sample for a component and device for carrying out the method | |
| DE68921650T2 (en) | Immunoassays. | |
| DE68922704T2 (en) | Method for distinguishing between strips for different experiments in an automatic apparatus. | |
| DE171150T1 (en) | METHOD AND DEVICE FOR TEST METHODS BY OPTIONAL FOR QUALITY CONTROLLED REAGENTS. | |
| DE102006025714B4 (en) | Apparatus and method for discriminating among lateral flow assay test indicators | |
| DE60215771T2 (en) | LATERAL FLOW TESTER WITH CHEMICAL RESOURCE ONBOARD | |
| DE3586380T2 (en) | METHOD FOR MEASURING RADIATION RADIATORS AND USING THE SAME TO DETECT AN ANALYT. | |
| DE69804612T2 (en) | METHOD FOR CHARACTERIZING SAMPLES USING STATISTICAL INTERMEDIATE DATA | |
| DE3786388T2 (en) | Analytical device and method for the detection of Chlamydia Trachomatis and Neisseria Gonorrhoeae. | |
| AT505372A2 (en) | Quantitative determination of analyte e.g. mycotoxins, ochratoxin and moniliformin, comprises contacting e.g. analyte with carrier, flowing e.g. analyte through test/reaction zone and determining intensities e.g. color intensity of analyte | |
| DE3617710C2 (en) | ||
| EP2288916B1 (en) | Immunochromatographic method and test system for determining at least one analyte in a test solution under examination | |
| DE60013243T2 (en) | Immunochromatographic test kit and chromatographic analysis method | |
| DE2840680A1 (en) | METHOD OF MEASURING LIPOPROTEID CHOLESTEROLS | |
| EP0520202A2 (en) | Analyzing device for the immunological and quantitative determination of harmful substances | |
| EP1531331A3 (en) | Method for the determination of an analyte by means of an extraction layer | |
| DE19540098A1 (en) | Method and multi-channel bio-sensor for multi-component analysis of mixtures | |
| WO2000067547A2 (en) | Method for detecting serum and for determining the quality thereof, and corresponding devices | |
| EP2131197B1 (en) | Device for determining an analyte in a fluid sample and analysis device | |
| AT507056B1 (en) | IMMUNOCHROMATOGRAPHIC PROCESS AND TEST SYSTEM FOR DETERMINING AT LEAST ONE ANALYTE IN A TEST SOLUTION TO BE INVESTIGATED | |
| DE4340827C1 (en) | Method and device for determining the effectiveness of a skin protection agent | |
| DE4036288A1 (en) | Immunological dye - using marker particles carrying antigen or antibody reactive with analyte previously immobilised on vessel wall | |
| DE102011055070B3 (en) | A sample analysis apparatus for determining samples in a sample matrix and methods for determining samples in one or more sample matrices |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM01 | Lapse because of not paying annual fees |
Effective date: 20210617 |