KR870000824B1

KR870000824B1 - 5,6,7,7a-테트라하이드로-4H-티에노 [3,2-c]-피리딘-2-온 유도체의 제조방법

Info

Publication number: KR870000824B1
Application number: KR1019810004596A
Authority: KR
Inventors: 로버트 보이게그레인; 진-피에르 마프랜드; 노리오 스스키; 키우이치 마츠바야시; 시니치로 아시다
Original assignee: 사노피; 진 루이스 델라루에
Priority date: 1980-11-28
Filing date: 1981-11-27
Publication date: 1987-04-23
Also published as: CS224634B2; FI813730L; ES8207180A1; YU279081A; AR230285A1; PT73988B; EP0054442B1; HU183711B; DK520781A; NO155665C; PL233979A1; MA19331A1; ZA817874B; RO83129B; IE812683L; DD201903A5; MY8600008A; PL129598B1; ZW27481A1; IL64146A0

Abstract

내용 없음.

Description

5,6,7,7a-테트라하이드로-4H-티에노 [3,2-c]피리딘-2-온 유도체의 제조방법

본 발명은 5,6,7,7a-테트라하이드로-4H-티에노[3,2-c]피리딘-2-온 유도체의 제조방법에 관한 것이다. 본 발명은

a) 다음 일반식(V)으로 표시되는 붕소산 유도체를 산화하고,

b) 생성된 다음 일반식(VI)의 붕산 유도체를 가수분해하여 다음 일반식(I)으로 표시되는 화합물의 유도체를 제조하는 방법 및 이의 약학적으로 수용할 수 있는 무기산과 유기산과의 부가염의 제조방법을 제공한다 :

(상기식들에서 R은 수소원자 또는 페닐기이고, 페닐기는 최소한 하나의 할로겐원자 또는 저급알킬기, 저급알콕시기, 니트로기, 카르복실기, 알콕시카르보닐기 또는 시아노기로 임의로 치환될 수 있고 ; R'는 수소원자 또는 저급알킬기이고, n는 0,1,2,3 또는 4이고 ; R″는 수소원자 또는 저급알킬기이다)

본 발명에 따른 화합물의 바람직하기로는, R이 할로겐원자, C_l-C₄알킬기, 니트로기 또는 시아노기에 의하여 임의로 치환될 수 있는 페닐기이고, R'가 수소원자 또는 C_l-C₄알킬기이고, n가 1인것이다.

최소한 하나의 비대칭 탄소원자를 함유하는 이들 화합물은 몇몇 입체이성질체의 형태로 존재할 수 있다. (거울상 이성질체 또는 부분입체 이성질체) 또한 본 발명은 이러한 입체 이성질체와 이의 혼합물에 관한 것이다.

항-혈소판 응집성과 항-혈전증성을 갖는 이들 화합물은, 다음 토우토머 형으로 불란서 특허번호 제2,215,948호와 제2,345,150호에 표시된 다음 일반식으로 나타나 있다 :

(상기 식에서 R, R'와 n는 전술한 바와같다)

그러나 본 발명에 따른 화합물은 여기에 서술되어 있지 않다.

더우기, 본 발명 화합물의 독물학적 연구와 약리학적 연구에 의하면 효능과 내성에서와, 이들 성질의 실체적인 본성에서 특별한 성질을 나타낸다. 보로네이트(Va)또는 붕소산(Vb)인 붕소산 유도체의 산화는 반응혼합물의 온도상승을 막아주는 조건하에 불활성 용매에서 행한다.

일반식(V)으로 표시되는 붕소산 유도체의 제조는 화합물이 보로네이트(Va) 또는 붕소산(Vb)인 하기 인가에 따라 두개의 변이체로 행할 수 있으며, 이들 두변이체는 통상의 예비 출발점을 갖는다.

통상의 예비 출발점에서, X가 상술한-(CHR')n-R기 또는 트리메틸실릴기인 일반식(II)으로 표시되는 화합물을, 부틸리튬과 같은 알킬-리튬화합물, 또는 리튬, 디이소프로필아미드와 같은 리튬 아미드와 반응시켜 리튬 유도체(III)를 얻고, 이를 같은 반응기에서 일반식 B(OR₃''') (여기서 R'''는 트리-n-붕산부틸과 같은 저급알킬기를 뜻한다)의 알킬 붕산염과 축합시켜 일반식 (IV)의 보로네이트를 얻는다. 이를 반응식으로 표시하면 다음과 같다 : -

리튬 유도체의 형성은 -50∼+30℃의 온도에서 헥사 메틸 포스포트리아미드와 같은 착화제의 존재하에 디에틸 에테르, 테트라하이드로푸란, 또는 헥산과 같은 불활성 용매에서 일어난다.

붕산염은 -80°∼0℃의 온도에서 첨가한 다음, 온도를 다시 상온까지 상승시킨다.

X가 -(CHR')_n-R기인 첫변이체에 의하면, R″가 저급 알킬기인 일반식 (Va)의 보로네이트를 동일한 반응기에서 30% 수성과산화수소와 반응시킨다. 이로서 일반식 (VIa)의 붕산염을 얻으며, 여기서 반응혼합물의 가수분해가 즉시 일어나 일반식 (I)으로 표시되는 화합물을 얻는다. 이를 반응식으로 표시하면 다음과 같다 : -

통상적인 순서의 끝에 행하는 둘째 변이체에 따라, X가 트리메틸실릴기인 일반식(IV)의 보로네이트를 3N염산과 반응시킨다. 이의 반응식은 다음과 같다 :-

일반식(VII)의 생성된 붕소산을 일반식 R(CHR')_n-Y(여기서 R, R'와 n는 상술한 바와 같고 Y는 할로겐 원자 바람직하기로는 염소, 취소 또는 요소원자이거나 p-톨루엔술포닐옥시 또는 벤젠술포닐옥시기와 같은 알릴술포닐옥시기, 또는 메탄술포닐기와 같은 알킬술포닐옥시기이다)의 화합물로 알킬화하면, 일반식(Vb)의 붕소산인 홉습성 유도체를 얻는다. 이 화합물은 변환시키기전에 정체할 필요는 없이, 전술한 변이채로 일반식(Va)의 보로네이트를 사용한 동일한 반응과정에 따라 화합물(Vb)을 먼저 과산화수소 수용액과 반응시킨 다음, 일반식(VIb)의 붕산 유도체를 가수분해하므로서, 일반식 (VIb)의 붕산유도체에서 일반식(I)의 화합물로 변환시키는 것이다. 이를 반응식으로 표시하면 다음과 같다 :

유도체(VII)와 알킬화제 R(CHR')_n-Y의 축합은 유리된 HY산을 중화하는 탄산나트륨 또는 탄산칼륨과 같은 염기의 존재하에, 저급 알카놀, 테트라하이드로푸란, 디옥산 또는 디메틸포름아미드와 같은 불활성용매에서 행한다. 축합은 50℃에서 혼합물의 비점까지의 온도에서 행하는 것이 바람직하다.

붕소산(Vb)과 과산화수소의 산화는 테트라하이드로푸란 또는 디옥산과 같은 불활성 용매하에, 0-10℃의 온도에서 행한다. 본 발명의 방법에서 중간 생성물로 사용되는 일반식(VII)의 화합물과, X가 트리메틸실릴기인 일반식(II)의 화합물은 신규한 화합물이다.

X가 트히메틸실릴기인 일반식(II)의 화합물은 산 수용체인 유기 염기의 존재하에 불활성 용매에서 클로로메틸실란과 4,5,6,7-테트라하이드로-티에노-[3,2-c] 피리딘을 축합시켜 제조한다. 이 축합 반응은 상승된 온도에서 행하는 것이 바람직하다.

본 발명을 실시예를 들어 설명하면 다음과 같다.

[실시예 1]

5- (0-클로로벤질) -5,6,7,7a-테트라하이드로-4H- 티에노-[3,2-c] 피리딘 -2-온 :

일반식(I), R=2-Cl-C₆H₄; R'=H ; n=1 ,유도체번호 1

헥산(0. 147몰)에 용해된 79cc의 12% 부틸리튬 용액을 320cc 테트라하이드로푸란(THR)에 용해된 32.6g(0.123몰) 5-(0-클로로벤질)-4,5,6,7-테트라하이드로티에노[3,2-c] 피리딘의 -20℃까지 냉각된 용액에 적가한다.

적가가 종료되면, 리튬 유도체(III)를 침전시키고 온도를 0℃까지 내린다. 15cc의 헥사메틸포스포트리아미드(HMPT)를.먼저 4A°분자체에서 건조한 다음, 첨가한다. 침전물은 짙은 적색으로 된다.

온도를 -40℃로 낮추고, 40cc의 무수 테트라하이드로푸란에 용해한 39.8cc( 0.147몰)의 붕산트리부틸용액을 반시간 동안 적가한다. 침전물은 나타나지 않고 반응혼합물은 엷은 황색이 된다. 온도를 반시간동안 -40℃에서 유지한 다음 2시간 동안 10℃로 한다. 33cc(0.291몰)의 30%과산화수소를 적가하고, 반응혼합물의 온도를 30℃이하로 유지하면, 첨가하는 동안 격렬한 침전물이 형성한다. 1시간동안 상온에서 교반을 계속한다. 반응혼합물을 물에 부은 다음 3×200cc의 디에틸 에테르로 추출하고, 유기상을 무수황산나트륨상에서 건조하고, 40℃이하의 온도로 강압농축한다. 잔액을 실리카 컬럼 ˝(6/4 v/v 시클로헥산/초산에틸 혼합물을 사용한다)˝ 상에서 크로마토그라피하면 잔유물 HMPT가 제거된다. 얻은 용액을 증발시킨 후, 잔유물을 아세톤에서의 몰 당량의 옥살산으로 처리하고, 형성된 엷은 황색결정을 여별한다.

에탄올로 재결정하면, 베이지색 결정인 옥살레이트를 얻는다 : 수율, 이론치의 52% : 융점 170℃ : 적외선(KBr) : υCO : 1660cm^-1(넓이)

염기 : 융점 73-74.5℃(에탄올로 재결정) :

헥자기공명(CDCl₃) : 7.1-7.6(m, 4H) : 6.2(s, 1H) : 4.2-4.7(m, 1H) : 3.9(s, 2H) : 1.5-4.2(m, 6H)

염화수소 헤미히드레이트 : 융점 약 180℃에서 분해(아세톤으로 침전).

[실시예 2]

5-벤질-5,6,7,7a- 테트라하이드로- 4H- 티에노 [3,2-c] 피리딘-2-온 ;

일반식(I) : R=C₆H₅; R'=H ; n=1 ; 유도체번호 2

여기서는 5-벤질-4,5,6,7-테트라하이드로-티에노[3,2-c] 피리딘을 출발물질로하여, 실시예 1의 방법으로 제조한다.

말레인산염 : 베이지색 결정 : 융점 132-134℃(이소프로판올로 재결정한후) : 수율, 이론치의 33% : 적외선 (KBr) : 1680cm^-1

염 기 : 핵자기공명(CDCl₃) : 7.25(m, 5H) : 5.90(s, 1H) : 3, 60(s, 2H).

[실시예 3]

5-(p-클로로벤질)-5,6,7,7a-테트라하이드로-4H-티에노-[3,2-c] 피리딘-2-온 : 일반식(I) : R =4-Cl-C₆H₄; R'= H ; n= 1 ; 유도체번호 3.

이것은 5-(P-클로로벤질)-4,5,6,7-테트라하이드로티에노[3,2-c] 피리딘

말레인산염 : 베이지색 : 융점 158-160℃(에탄올로 재결정) : 수율, 이론치의 42% : 적외선(KBr) : υCO=1680cm^-1.

염기 : 핵자기공명(CDCl₃) : 7.30(m, 4H) : 6,0(s, 1H) : 3.50(s, 2H).

[실시예 4]

5- (0-메틸벤질) -5,6,7,7a- 테트라하이드로-4H-티에노-[3,2-c] 피리딘 -2-온;

일반식(I), R=2-CH₃-C₆H₄- ; R'=H ; n=1 ; 유도체번호 4

이것은 5-(0-메틸벤질)-4,5,6,7- 테트라하이드로티에노 [3,2-c] 피리딘을 출발물질로하여, 실시예1의 방법으로 제조한다.

옥살레이트 : 베이지색 결정 : 융점 195-197℃(메탄올로 재결정) : 수율, 이론치의 33% : 적외선(KBr) : νCO= 1690cm^-1

염기 : 핵자기공명(CDCl₃)=7.10(s, 4H) : 5.90(s, 1H) : 3.55(s, 2H) : 2.30(s, 3H)

[실시예 5]

5-[1-(2-클로로페닐)-에틸]-5,6,7,7a-테트라하이드로-4H-티에노[3,2-c] 피리딘-2-온:

일반식(I) : R=2-Cl-C₆H₄; R'=H ; n=1 ;유도체번호 5

이것은 5-[1-(2-클로로페닐)-에틸]-4,5,6,7-테트라하이드로티에노[3,2-c] 피리딘

염화수소산염 : 황색결정 : 융점 140-142℃ ; 수율, 이론치의 24%, 적외선 (KBr) : υCO=1690cm-1

염기 : 핵자기공명(CDCl₃) : 7.30(m, 4H) : 6.05와 5.95(2s, 1H)(2부분입체이성질체)

[실시예 6]

5-[1-(2-클로로페닐)-프로필]-5,6,7,7a-테트라하이드로-4H-티에노[3 ,2-c] 피리딘-2-온 ;

일반식(I): R=2-Cl-C₆H₄; R'C₂H₅; n=1 ; 유도체 번호 6

이것은 5-[1-(2-클로로페닐) -프로필]- 4,5,6,7-테트라하이드로티에노[3 ,2-c] 피리딘을 출발물질로하여 실시예 1의 방법에 따라 제조한다.

염화수소산염 : 베이지색 결정 : 융점 124-126℃ ;수율, 이론치의 27% ; 적외선(KBr) ; CO=1690cm^-1

염기 : 핵자기공명(CDCl₃) : 7.30(m,4H) ; 6,05와 5.90(2s, 1H)(2부분입체이성질체)

[실시예 7]

5-트리메틸실릴-4,5,6,7-테트라하이드로-티에노 [3,2-c] 피리딘 ;

일반식(II) ; X=(CH₃)₃Si

50cc의 톨루엔에서의 65g(0.628몰)클로로트리메틸실란을 질소 분위기하에, 1100cc 톨루엔에 용해한 80g(0.571몰)4,5,6,7-테트라하이드로-티에노 [3,2-c] 피리딘과 63.4g(0.28몰) 트리에틸아민의 용액에 가한다. 반응혼합물을 3시간동안 80℃ 가열한다. 냉각후, 얻은 트리에틸아민 염화수소산염의 백색 침전물을 여별하고 여과물을 감압하여 농축시킨다. 잔유물을 60-70℃/0.1mmHg에서 증류하면 무색액체 형태의 원하는 생성물을 얻는다 ; 수율, 이론치의 55%

[실시예 8]

4,5,6,7-테트라하이드로-티에노 [3,2-c] 피리딘-2-붕소산 ;

일반식(VII) 헥산(0.084몰)에 용해한 45.4cc의 부틸 리튬의 12% 용액을 질소 분위기하에, 150cc의 THF에 용해시키고, 실시예 7에서와 같이 제조한 15g(0.07몰)의 5-트리메틸실릴-4,5,6,7-테트라하이드로-티에노 [3,2-c] 피리딘의-20℃로 냉각된 용액에 적가한다. 반응 혼합물을 0℃로 하고 이에 3cc의 HMPT를 첨가한다.

이 혼합물을 -50℃로 냉각한 후, 30cc의 THF에 용해한 19.3g(0.084몰) 붕산 트리부틸용액을 적가한다. 2시간동안 교반을 계속한고, 혼합물을 상온으로 한다. 28cc의 3N염산(0.084몰)을 첨가한 다음 형성된 침전물을 여별한다. 결정은 아세톤으로 세척하고 디이소프로필 에테르로 세척한 다음 진공에서 건조한다. 회색을 띤 백색 결정을 정량수율로 얻는다.

융점 260℃ ; 핵자기공명(D₂O) ; 6.75(s, 1H) ; 4.10(m, 2H) ; 2.80-3.50 (m, 4H).

[실시예 9]

5-(0-시아노벤질)-4,5,6,7-테트라 하이드로-티에노-[3,2-c] 피리딘-2-붕소산 ; 일반식(Vb) ; R=2-CN-C₆H₄; R'=H , n=1 ;

실시예 8에서와 같이 제조한 3.68g(0.02몰) 4,5,6,7-테트라하이드로티에노 [3,2-c] 피리딘-2-붕소산과 40cc의 디메틸포름아미드에서의 9.09g(0.06몰)의 0-시아노벤질 클로라이드와 5.22g(0.04몰)의 탄산칼륨의 혼합물을 3시간동안 80℃로 가열한다. 용매를 증발제거후, 반응혼합물에 물을 가한 다음, 3×100cc의 염화 메틸렌으로 추출한다. 유기용액을 무수황산 나트륨에서 건조한 다음, 진공에서 증발시킨다. 얻은 결정체를 디이소프로필에테르로 세척하면, 원하는 생성물은 백색결정 형태로 얻는다 ; 융점140-142℃ ; 수율, 이론치의 45% ; 적외선(KBr) : CN=2220cm^-1; 핵자기공명 (DMSO, D₆) : 7.60(m, 4H) ; 7.25(s, 1H) ; 3.80(s, 2H) ; 3.50(s, 2H) ; 2.80(s, 4H).

[실시예 10]

5-(0-시아노벤질)-5,6,7,7a-테트라하이드로-4H-티에노-[3,2-c]-피리딘-2-온 ; 일반식(I) ; R=2-CN-C₆H₄; R'=H ; n=1 ; 유도체번호 7. 0.23g(0.006몰)의 30% 과산화수소용액을 30cc의 테트라하이드로푸란에 용해한, 실시예 9에서와 같이 제조한 1.8g(0.006몰)의 5-(0-시아노벤질)-4,5,6,7-테트라하이드로티에노 [3,2-c] 피리딘-2-붕소산의 5℃까지 냉각된 용액에 적가한다. 반응혼합물을 상온까지 올리고 2시간동안 교반을 계속한다. 물을 가한 다음 반응 혼합물을 염화 메틸렌으로 추출한다. 유기상을 무수황산나트륨상에서 건조한 다음 진공에서 농축시킨다. 잔유물을 실리카 컬럼상에서 크로마토 그라피한다(1/1v/v 시클로헥산/초산에틸 혼합물을 사용한다). 얻은 용액을 증발시킨 후, 잔유물을 아세톤에서 1몰 당량의 옥살산으로 처리하고 형성된 결정을 여별한다. 옥살레이트 : 베이지색 결정, 융점 176-178℃(아세토 니트릴로 재결정한 후) ; 수율, 이론치의 28% ; 적외선(KBr) : υCO : 1700cm^-1; νCN : 2210cm^-1.

염기 : 핵자기공명(CDCl₃) : 7.50(m, 4H) ; 6.00(s, 1H) ; 3.80(s, 2H).

[실시예 11]

5- (0-니트로벤질) -5,6,7,7a-테트라하이드로-4H-티에노 [3,2-c] -피리딘-2-온 ; 일반식(I) ; R=2-NO₂-C₆H₄; R'=4 ; n=1 ;유도체번호 8.

a) 5-(0-니트로벤질)-4,5,6,7-테트라하이드로 티에노[3,2-c] 피리딘-2-붕소산의 제조 ; 일반식(Vb) ; R=2-NO₂-C₆H₄; R'=H ; n=1 ; 이것은 4,5,6,7-테트라하이드로티에노 [3,2-c] 피리딘-2-붕소산과 0-니트로벤질클로라이드를 출발물질로하여 실시예 9의 방법으로 제조한다.

갈색결정 ; 융점 132-134℃ ; 수율, 이론치의 40% ; 핵자기공명 (DMSO, D₆) : 8.0(m, 4H.) ; 7.50(s, 1H) ; 4.00(s, 2H) ; 3.60(s, 2H) ; 2,70(m, 4H)

b) 유도체번호 8의 제조

이것은 상기에서와 같이 제조한 5-(0-니트로벤질)-4,5,6,7-테트라하이드로티에노 [3,2-c] 피리딘-2-붕소산을 출발물질로하여 실시예 10의 방법으로 제조한다.

옥살레이트 : 베이지색 결정 ; 융점 186-188℃(이소프로판올-에탄올로 재결정한 후) ; 수율, 이론치의 17% ; 적외선 : υCO=1685cm^-1

염기 : 핵자기공명(CDCl₃) : 7.50(m, 4H) ; 5.95(s, 1H) ; 3.90(s, 2H).

[실시예 12]

5-(0-브로모벤질)-5,6,7,7a-테트라하이드로-4H-티에노 [3,2-c]-피리딘 -2-온 ; 일반식(I) ; R=2=Br-C₆H₄; R'=H ; n=1 ; 유도체번호 9.

a) 5-(0-브로모벤질)-4,5,6,7-테트라하이드로티에노 [3,2-c] -피리딘-2-붕소산의 제조 ; 일반식(Vb) ; R=2-Br-C₆H₄; R'=H ; n=1 ;

이것은 4,5,6,7-테트라하이드로티에노 [3,2-c] 피리딘- 2-붕소산과 0-브로모벤질 브로마이드를 출발물질로하여 실시예 9의 방법으로 제조한다.

황색결정 ; 융점 129-131℃ ; 수율, 이론치의 35% ; 핵자기공명 (DMSO, D₆) : 7.50(m, 5H) ; 3.70(m,2H) ; 3.10(s, 2H) ; 2.80(m, 4H).

b) 유도체번호 9의 제조

이것은 상기에서 제조한 5-(0-브로모벤질)-4,5,6,7-테트라하이드로티에노 [3.2-c] 피리딘-2-붕소산을 출발물질로하여 실시예 10의 방법으로 제조한다.

옥살레이트 ; 베이지색 결정 ; 융점 151-153℃(이소프로판올로 재결정한 후) ;수율, 이론치의 5% ; 적외선 (KBr) : υCO= 1690cm^-1

염기 : 핵자기공명(CDCl₃) : 7.30(m, 4H) ; 5.95(s, 1H) ; 3.75(s, 2H).

하기에 보고된 독물학적 시험과 약리학적 시험의 결과로 일반식 (I)으로 표시되는 화합물의 우수한 독물학적 성질과 약리학적 성질이 입증된다.

이들 연구는 상기 언급한 두 불란서 특허 즉, 참고 화합물 A(불란서 특허번호 제2,215,948호의 화합물 번호 1)로 후술한 5-(2-클로로벤질)-4,5,6,7-테트라하이드로티에노 [3,2-c]피리딘과 참고 화합물 B(불란서 특허번호 제2,345,150호의 화합물번호 8)로 후술한 5-(2-시아노벤질)-4,5,6,7-테트라하이드로티에노 [3,2-c] 피리딘을 대표 화합물로 하여 비교를 행한 것이다.

독물학적 연구

이 연구는 급성, 만성, 준. 만성 및 지연된 독성에 관한 것이다. 다른 종류의 동물, 즉, 새앙쥐, 집쥐와 토끼는 행한 시험은 일반식( I )의 화합물의 낮은 독성은 물론 이들의 양호한 적합성을 입증한다.

실시예로서, 새앙쥐에 정맥 투약하기 위하여, 밀러 (Miller)와 테인터(Tainter)의 방법에 따라 계산한 LD 50/24시간/체중 kg은 하기 표 1에 표시했고, 여기에 비교화합물을 A와 B로 얻은 결과와 본 발명에 따른 유도체를 얻는 결과를 기록했다. 이 결과로 일반식(I)의 유도체가 비교 화합물 A와 B보다 최소한 두 인자 더 낮은 독성을 가짐을 알 수 있다.

[표 1]

또한 본 발명에 따른 화합물은 여러가지 행한 시험을 통하여, 여러가지 종류의 시험동물에서 어떠한 미시적 장애나 거시적 장애를 통상 가져오는 생물학적 억제에서 어떠한 국부 또는 전체 반응, 어떠한 변동을 일으키지 않음을 이 시험으로 알 수 있다.

연속적 발생연구의 결과 어떠한 기형적 작용을 나타내지 않는다.

약리학적 연구

이것은 비교화합물 A와 B와 비교한 혈소판 응집에 대한 억제 작용과 항-혈전증 활성에 관한 것이다

1)혈소판 응집에 대한 억제작용

집쥐의 경 정맥으로부터 혈액 시료를 취하고, 이를 먼저 시험할 화합물로 처리한다. 이 혈액을 구연산염으로 처리하고 원심분리하므로서, ㎣당 600,000±20,000 혈소판을 함유하는 혈장이 재구성되는데, 이를 모두 응집측정에 사용한다.

a)ADP에 의한 혈소판 응집 측정

0.4ml의 혈장을 실리콘으로된 막대자석을 갖는 실리콘관에서 처리한다. 관을 흡광도의 변화를 기록할수 있는 장치에 연결된 응집측정기에 넣는다. 투광이 안정치에 도달했을때, 10M의 ADP(아데노신 디포스폐이트)를 함유하는 0.5ml의 용액을 관에 주입시킨다.

혈소판 응집으로 투광이 증가한 다음, 계속적으로 응집이 없어짐으로 인하여 투광이 감소한다.

흡광도의 최대 변동은 혈소판 특성이 유리된 혈장의 것과 비교하여 응집강도를 측정하는 것이다.

혈액시료를 채취한 다음, 이 시료를 시험할 유도체로 처리한 후 3시간 보관하였다가 2시간동안 측정한다.

b)교원질에 의한 혈소판 응집의 측정

ADP 용액을 교원질 용액으로 대치한다(가축 힘줄로부터 추출한다).

c)결 과

20마리의 쥐 그룹을 사용한다. 각 그룹에 시험할 화합물을 1회양으로 경구투약했으며, 동일한 화합물을 5mg/kg-100mg/kg 범위의 다른 투약량으로 투약했다.

일반식(I)으로 표시되는 화합물의 활성은 12.5mg/kg의 투약량으로 우수성을 나타내는 반면에, 비교 화합물 A와 B의 경우에는, 비슷한 활성을 달성하는데 100mg/kg의 투약량을 사용하는 것이 필요하다.

얻은 결과는 다음 표 2와 3에 표시했으며, 이는 시험할 화합물로 처리하여 시간 후 비교실험으로 얻은 혈소판 응집의 억제 퍼센트를 나타낸다.

[표 2 ADP시험]

[표 3 교원질 시험]

d)혈소판 응집의 반응연구

이 실험은 일반식( I )으로 표시되는 화합물의 반응연구에 관하여 행한다. 유도체 번호 1과 비교화합물A을 프로필렌 글리콜에 용해시키고, 100mg/체중 kg의 투약량으로 집쥐의 복막내에 투약했고, 반면에 비교 새앙쥐에 다시 1ml 프로필렌글리콜의 kg만을 복막내에 투약했다.

상기 투악 후 10분과 60분에 혈액시료를 체취하고 원심분리하면 혈소판에서 증가한 혈장을 얻는다.

ADP를 주입한 혈장에서 혈소판응집은 본 내펠로 측정방법(Born's nephelome tric method)을 사용하여 브리스톤 응집측정기로 측정한다.

시간구분에 따라 이들 실험에 의하여 얻은 억제 퍼센트를 표시하면 다음 표 4와 같다 :

[표 4]

이 표는 일반식(I)으로 표시되는 유도체 번호 1이 비교화합물 A보다 더 큰 혈소판응집 억제활성을 가지고 또한 이 활성이 더 빠르게 나타남을 알 수 있다 ; 실험으로 전술한 결과를 확인할 수 있다.

2) 항-혈전증활성

이 활성은 우메츄와 소노이(Thrombos. Haemost., 39 1/1878)에 의하여 서술된 체외 순환으로 야기되는 실험적 혈전병 방법으로 연구했다.

좌측 경정맥과 우측외부동맥이 펜토바르비탈을 복막내 주사하므로서 마취된 쥐에서 노출되었다. 중앙 도뇨관과 두측면 도뇨관으로 구성되어 분로(分路)를 이룬다. 천연 백색 비단실을 중앙부분에 주입하고 순환을 20분동안 재개한다. 크램프를 죄어서 순환을 중지시킨 후, 실을 가볍게 뽑고 즉시 중량을 측정한다.

젖은 비단실의 평균 중량은 5.10mg이었다.

분로에서 혈액순환의 출발전에 48시간, 24시간과 2시간동안 처리한다.

시험 과합물을 10ml의 5% 아라비아고무 /kg의 현탁액 형태로 다른 동물 그룹에 경구 투약하고, 투약량은 12.5mg/kg, 25mg/kg, 100mg/kg과 200mg/kg을 사용했다.

일반식(I)으로 표시되는 유도체 1과 3으로 행한시험 결과는 다음 표 5에 표시했고 각 그룹의 동물에 대해 계산한 평균치를 표시했다.

[표 5]

이 시험은 25mg/kg 이상의 투약양으로 혈전의 평균 중량을 상당히 감소시키는 일반식(I)으로 표시되는 화합물의 활성을 나타내는 반면에, 비교화합물 A는 높은 투약량에도 항-혈전증 활성을 가지지 못함을 나타내고 있다. 더우기 이 시험으로 불란서 특허번호 제2,215,948호와 제2,345,150호의 화합물과 대비하여, 일반식(I)의 화합물이 항-염증성이나 혈관확장효력이 전혀 없음을 알 수 있다.

지금까지, 이들은 더 많은 선택적인 성질을 가지고, 이는 치료분야에서 매우 가치가 높은 것이며, 여기서 어떠한 추가적인 활성을 가지더라도, 이들을 원치않을 때는 환자에게 해로울 수 있다.

상기에서 보고한 바와 같은 독물학적 연구와 약리학적 연구로 일반식(I)의 화합물이 독성이 낮고 이들의 적합성이 양호함을 나타내는 것은 물론, 인체와 동물에 매우 유용하고 우수한 혈소판-응집억제성과항-혈전증성을 나타냄을 알 수 있다.

일반식(I)의 화합물은 정제, 당의정, 캡슐 또는 드롭의 형태로 경구투약할 수 있고, 주사용액형태로 비경구 투약할 수 있으며 좌약형태로 직장에 투약할 수 있다.

각 단위투약량은 0.010-0.500g의 활성물질을 함유하는 것이 좋고 일일투약량은 환자의 나이와 치료할 병의 상태에 따라 0.010-1.50g 범위의 활성물질을 사용할 수 있다.

일반식(I)의 화합물을 함유하는 몇몇 약학적 조성물의 예를 들면 다음과 같다.

1) 당의정

유도체 번호 1‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥0.050g

부형체 : 락토스, 미세결정성 셀루로즈, 스테아린산 마그네슘, 송진, 셜랙, 아라비아고무, 활석, 식용젤라틴, 백색왁스, 에리트로신.

2) 정 제

유도체 번호 3‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥0.075g

부형제 : 미세결정성 셀루로즈, 수크로스, 옥수수전분, 스테아린산 마그네슘.

3) 캡 슐

유도체 번호 4 : ‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥0.050g

부형제 : 밀전분, 활석, 락토스

4) 주사용액

유도체 번호 7‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥0.100g

부형제 : 5까지 구성되는 등장(等張)용액.

5) 좌 약

유도체 번호 8‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥0.075g

부형제 : 반합성 트리글리세리드

일반식(I)의 화합물은 이들의 항-혈소판 응집과 항-혈전증 활성 때문에 유익하게 사용된다. 동맥과 정맥혈전증을 형성하는 유기체에 함유되어 있는 어떠한 혈소판 작용을 억제하는 이들의 성질 때문에, 화합물은 체외 순환 기관에서 혈소판방해 또는 죽종(粥腫) 병발을 예방하고 치료하는데 사용할 수 있다.

Claims

a) 다음 일반식(V)으로 표시되는 붕소산 유도체를 산화하고

b) 생성된 다음 일반식(VI)의 붕산 유도체를 가수분해함을 특징으로 하는 다음 일반식(I)으로 표시되는 5,6,7,7a-테트라하이드로-4H-티에노 [3,2-c] 피리딘-2-온 유도체와 이의 약학적으로 수용할수 있는 무기산과 유기산과의 부가염의 제조방법.

(상기식들에서 R은 수소원자 또는 페닐기이고, 페닐기는 최소한 하나의 할로겐 원자 또는 저급알킬기, 저급알콕시기, 니트로기, 카르복실기, 알콕시카르보닐기, 또는 시아노기로 임의로 치환될 수 있고 ; R'는 수소원자 또는 저급알킬기이고 n는 0,1,2,3또는 4이고 ; R˝는 수소원자 또는 저급알킬기이다)
제1항에 있어서, 산화를 반응혼합물의 온도 상승을 막아주는 조건하에 불활성 용매에서 과산화수소로 행함을 특징으로 하는 제조방법.
제1항 또는 제2항에 있어서, 가수분해를 반응혼합물과 물을 접촉시켜서 행함을 특징으로하는 제조방법.
제1항에 있어서, R이 할로겐원자, C_l-C₄알킬기, 니트로기 또는 시아노기로 임의로 치환될 수 있는 페닐기이고, R'가 수소원자 또는 C_l-C₄알킬기이고, n가 1임을 특징으로 하는 제조방법.