WO2023190675A1

WO2023190675A1 - ＴｒｋＢ結合活性を有するペプチド複合体

Info

Publication number: WO2023190675A1
Application number: PCT/JP2023/012777
Authority: WO
Inventors: 芳典鈴木; 憲宏柴田
Original assignee: ペプチドリーム株式会社
Priority date: 2022-03-30
Filing date: 2023-03-29
Publication date: 2023-10-05
Also published as: TW202342494A

Abstract

【解決課題】ＴｒｋＢ結合活性を有する新しい化合物を提供する。【解決手段】　Ｘ１－Ｘ２－Ｘ３－Ｘ４－３Ｐｙ－Ｗ－Ｘ５－Ｘ６－Ｘ７－Ｘ８－Ｘ９－Ｘ１０－Ｖ－Ｘ１１－Ｃ（配列番号１）で示されるアミノ酸配列を有するか，１～４個のアミノ酸が，置換，欠失，付加又は挿入されたアミノ酸配列からなり，　Ｘ１及びＸ１０は，側鎖に芳香族環を有するアミノ酸であり，　Ｘ２，Ｘ９及びＸ１１は，任意のアミノ酸であり，　Ｘ３及びＸ５は，２級アミノ酸であり，　Ｘ４及びＸ７は，側鎖に置換されていても良い芳香族環を有するアミノ酸であり，　Ｘ６及びＸ８は，側鎖に鎖状アルキル基を有するアミノ酸である第１のペプチドを含み，ＴｒｋＢ結合活性を有するペプチド複合体。

Description

ＴｒｋＢ結合活性を有するペプチド複合体

　この出願は，ＴｒｋＢ結合活性を有する新しいペプチド複合体やそのペプチド複合体を含む医薬品組成物に関する。また，この出願は，ＴｒｋＢアゴニスト活性を有する新しいペプチド複合体やそのペプチド複合体を含む医薬品組成物に関する。

　ＴｒｋＢ（トロポミオシン受容体キナーゼＢ）は，ＴｒｋＡ及びＴｒｋＣを含む単一膜貫通型受容体チロシンキナーゼのファミリーに属する。これらの受容体キナーゼは，神経細胞の生存および発生に必要とされるニューロトロフィンの活性を仲介する。ニューロトロフィンは，神経成長因子（ＮＧＦ），脳由来神経栄養因子（ＢＤＮＦ），ニューロトロフィン－３（ＮＴ－３），およびニューロトロフィン－４／５（ＮＴ－４／５）の４種が知られており，これらの高親和性受容体であるＴｒｋＡ，ＴｒｋＢ，及びＴｒｋＣとそれぞれ特異的に結合する。ＴｒｋＢは，ＢＤＮＦの高親和性受容体であり，ＮＴ－３やＮＴ－４／５に結合することも知られている。二量体であるＢＤＮＦのＴｒｋＢへの結合は，受容体であるＴｒｋＢの二量化を引き起こし，受容体上の特定のチロシン残基の自己リン酸化，ならびにマイトジェン活性化タンパク質キナーゼ（ＭＡＰＫ），ホスファチジルイノシトール３－キナーゼ（ＰＩ３Ｋ），およびホスホリパーゼＣ－γ（ＰＬＣ－γ）を含むシグナル伝達経路の活性化をもたらす。ＴｒｋＢは，ＢＤＮＦに結合した後，神経細胞の分化および生存を含む，ニューロトロフィンの複数の作用を仲介する。ＴｒｋＢは，神経細胞の生存，分化，および機能において主要な役割を果たすため，ＴｒｋＢアゴニストは，多数の神経変性障害および精神神経疾患の治療に用いられることが期待される。
　天然に存在するＴｒｋＢアゴニストであるＢＤＮＦは，上記疾患の治療薬として臨床試験が進められていたが，薬物動態などの問題があり，その後の研究開発に進展は見られない。近年，ＢＤＮＦの代替として，ＴｒｋＢアゴニスト抗体（特許文献２，５，非特許文献３，４），低分子化合物（特許文献８，非特許文献１，２）やペプチド（特許文献９）が報告されている。

特表２０１０－５１３４６１特表２０１１－５１００２１特表２０１８－５２２０１６特表２０１９－５１７７８７特表２０２０－５１３８０６特表２０２１－５０７６７７特表２０２１－５２７０７０特許第５９４６４５４号国際公開ＷＯ２０２２／００９９９２号パンフレット

ＰＬＯＳ　ＯＮＥ　２０１４，　９，　ｅ８７９２３．Ｓｃｉ．　Ｓｉｇｎａｌ．　２０１７，　１０，　ｅａａｌ１６７０．ＰＮＡＳ，　１１５，　Ｅ７０２３．Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌｏｇｙ　ｏｆ　Ｄｉｓｅａｓｅ　２０１９，　１３２，　１０４５９０．

　ＴｒｋＢ結合活性を有する新しい化合物を提供する。また，ＴｒｋＢアゴニスト活性を有する新しい化合物をも提供する。

　この明細書の最初の発明は，ペプチド複合体に関する。
　このペプチド複合体は，第１のペプチドを含み，ＴｒｋＢ結合活性を有する。
　第１のペプチドは，
　Ｘ^１－Ｘ^２－Ｘ^３－Ｘ^４－３Ｐｙ－Ｗ－Ｘ^５－Ｘ^６－Ｘ^７－Ｘ^８－Ｘ^９－Ｘ^１０－Ｖ－Ｘ^１１－Ｃ（配列番号１）で示されるアミノ酸配列を有するか，又は
　配列番号１で示されるアミノ酸配列において，１～４個のアミノ酸が，置換，欠失，付加又は挿入されたアミノ酸配列からなる。
　Ｘ^１は，側鎖に芳香族環を有するアミノ酸である。
　Ｘ^２は，任意のアミノ酸である。
　Ｘ^３は，２級アミノ酸である。
　Ｘ^４は，側鎖に置換されていても良い芳香族環を有するアミノ酸である。
　Ｘ^５は，２級アミノ酸である。
　Ｘ^６は，側鎖に鎖状アルキル基を有するアミノ酸である。
　Ｘ^７は，側鎖に置換されていても良い芳香族環を有するアミノ酸である。
　Ｘ^８は，側鎖に鎖状アルキル基を有するアミノ酸である。
　Ｘ^９は，任意のアミノ酸である。
　Ｘ^１０は，側鎖に芳香族環を有するアミノ酸である。
　Ｘ^１１は，任意のアミノ酸である。　

　この発明によれば，ＴｒｋＢ結合活性を有する新しい化合物を提供できる。また，この発明は，さらに，ＴｒｋＢアゴニスト活性を有する新しい化合物を提供できる。

図１は，本発明のペプチド複合体及び脳由来神経栄養因子（ＢＤＮＦ）を用いた，ｐＥＲＫ１／２　ＡｌｐｈａＬＩＳＡアッセイによるＴｒｋＢアゴニスト活性測定の結果を示す。図中，○は脳由来神経栄養因子を示し，黒丸はＴｒｋＢアゴニスト活性ペプチド複合体（ペプチド（ペプチド配列番号１５）とリンカー（リンカー構造番号７）の複合体（表３におけるダイマー構造番号４８））を示し，黒三角はＴｒｋＢアゴニスト活性ペプチド複合体（ペプチド（ペプチド配列番号１７）とリンカー（リンカー構造番号７）の複合体（表３におけるダイマー構造番号５６））を示す。横軸はペプチド複合体又は脳由来神経栄養因子の濃度（ｎＭ）を，縦軸は脳由来神経栄養因子で誘導される活性化シグナルの最大値を１００としたときの活性化シグナルの相対値を示す。図２は，本発明のペプチド複合体及び脳由来神経栄養因子（ＢＤＮＦ）を用いた，ＮＦＡＴアッセイによるＴｒｋＢアゴニスト活性測定の結果を示す。図中，○は脳由来神経栄養因子を示し，黒丸はＴｒｋＢアゴニスト活性ペプチド複合体（ペプチド（ペプチド配列番号１５）とリンカー（リンカー構造番号７）の複合体（表３におけるダイマー構造番号４８））を示し，黒三角はＴｒｋＢアゴニスト活性ペプチド複合体（ペプチド（ペプチド配列番号１７）とリンカー（リンカー構造番号７）の複合体（表３におけるダイマー構造番号５６））を示す。横軸はペプチド複合体又は脳由来神経栄養因子の濃度（ｎＭ）を，縦軸は脳由来神経栄養因子で誘導される活性化シグナルの最大値を１００としたときの活性化シグナルの相対値を示す。図３は，本発明のペプチド複合体及び脳由来神経栄養因子（ＢＤＮＦ）を用いた，ＰａｔｈＨｕｎｔｅｒアッセイによるＴｒｋＢアゴニスト活性測定の結果を示す。図中，○は脳由来神経栄養因子を示し，黒丸はＴｒｋＢアゴニスト活性ペプチド複合体（ペプチド（ペプチド配列番号１５）とリンカー（リンカー構造番号７）の複合体（表３におけるダイマー構造番号４８））を示し，黒三角はＴｒｋＢアゴニスト活性ペプチド複合体（ペプチド（ペプチド配列番号１７）とリンカー（リンカー構造番号７）の複合体（表３におけるダイマー構造番号５６））を示す。横軸はペプチド複合体又は脳由来神経栄養因子の濃度（ｎＭ）を，縦軸は脳由来神経栄養因子で誘導される活性化シグナルの最大値を１００としたときの活性化シグナルの相対値を示す。図４は，ＴｒｋＡ，ＴｒｋＢ，ＴｒｋＣに対する，本発明のペプチド複合体の表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）による分子間相互作用の測定結果を示す。なお，上段は表３におけるダイマー構造番号４８のペプチド複合体を用いたときの結果を，下段は表３におけるダイマー構造番号５６のペプチド複合体を用いたときの結果を示す。

　以下，図面を用いて本発明を実施するための形態について説明する。本発明は，以下に説明する形態に限定されるものではなく，以下の形態から当業者が自明な範囲で適宜修正したものも含む。

　この明細書の最初の発明は，ペプチド複合体に関する。このペプチド複合体は，第１のペプチドを含み，ＴｒｋＢ結合活性を有する。また，このペプチド複合体は，ＴｒｋＢアゴニスト活性を有する。

　ペプチド複合体
　ペプチド複合体は，第１のペプチドとその他のペプチドや化合物を含むペプチド，ペプチド含有化合物，又はその薬学的に許容される塩である。ペプチド複合体は，第１のペプチドを１つ又は２つ以上（３つ以上又は４つ以上）含んでもよい。ペプチド複合体は，さらに第１のペプチドとは異なる部分ペプチドを１又は２つ以上含んでもよい。ペプチド複合体は，第１のペプチドや部分ペプチドがリンカーを介して結合していることが好ましい。ペプチド複合体は，同一のアミノ酸配列を有するペプチドのみを含むホモマルチマーであってよい。ペプチド複合体は，異なるアミノ酸配列を有するペプチドを含むヘテロマルチマーであってよい。ペプチド複合体は，同じアミノ酸配列を有する第１のペプチドを２つ有し，２つの第１のペプチドがリンカーを介して結合するホモダイマーが好ましい。ペプチド複合体がＴｒｋＢ結合活性を有すればよい。もっとも，ペプチド複合体を構成する第１のペプチドや部分ペプチドが，ＴｒｋＢ結合活性を有するものも好ましい。実施例により示された通り，第１のペプチドはリンカーを介しペプチド複合体構造をとることで，ＴｒｋＢアゴニスト活性を示す。

　ペプチド複合体は，第１のペプチドと第２のペプチドと，第１のペプチドと第２のペプチドを接続するリンカーとからなるものであってもよい。この場合，第２のペプチドは，第１のペプチドと同一でも異なってもよく，配列番号１で示されるアミノ酸配列を有するか，又は配列番号１で示されるアミノ酸配列において，１～４個のアミノ酸が，置換，欠失，付加又は挿入されたアミノ酸配列からなるものが好ましい。第１のペプチドと第２のペプチドの相同性が８０％以上１００％以下であるものが好ましい。第１のペプチドと第２のペプチドが実質的に同じなホモダイマーであるものが好ましい。

　第１のペプチド
　第１のペプチドは，Ｘ^１－Ｘ^２－Ｘ^３－Ｘ^４－３Ｐｙ－Ｗ－Ｘ^５－Ｘ^６－Ｘ^７－Ｘ^８－Ｘ^９－Ｘ^１０－Ｖ－Ｘ^１１－Ｃ（配列番号１）で示されるアミノ酸配列を有するか，又は配列番号１で示されるアミノ酸配列において，１～４個（１個，２個，３個又は４個）のアミノ酸が，置換，欠失，付加又は挿入されたアミノ酸配列からなる。置換されたアミノ酸には，アミノ酸の薬学的に許容される塩が含まれる。配列番号１で示されるアミノ酸配列において，アミノ酸が，置換，欠失，付加又は挿入されたアミノ酸配列からなる配列を有するペプチドの好ましい例は，配列番号１で示されるアミノ酸配列において，保存的アミノ酸置換がなされた配列を有するペプチドである。

　保存的アミノ酸置換
　特定の配列から，１個，２個又は３個のアミノ酸残基が置換，欠失，付加又は挿入される場合，保存的アミノ酸置換がなされることが好ましい。「保存的アミノ酸置換（ｃｏｎｓｅｒｖａｔｉｖｅ　ａｍｉｎｏ　ａｃｉｄ　ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｉｏｎ）」とは，機能的に等価または類似のアミノ酸との置換を意味する。ペプチドにおける保存的アミノ酸置換は，該ペプチドのアミノ酸配列に静的変化をもたらす。例えば，同様の極性を有する一つまたは二つ以上のアミノ酸は機能的に等価に作用し，かかるペプチドのアミノ酸配列に静的変化をもたらす。一般に，あるグループ内の置換は構造および機能について保存的であると考えることができる。しかしながら，当業者には自明であるように，特定のアミノ酸残基が果たす役割は当該アミノ酸を含む分子の三次元構造における意味合いにおいて決定され得る。例えば，システイン残基は，還元型の（チオール）フォームと比較してより極性の低い，酸化型の（ジスルフィド）フォームをとることができる。アルギニン側鎖の長い脂肪族の部分は構造的および機能的に重要な特徴を構成し得る。また，芳香環を含む側鎖（トリプトファン，チロシン，フェニルアラニン）はイオン－芳香族相互作用または陽イオン－ｐｉ相互作用に寄与し得る。かかる場合において，これらの側鎖を有するアミノ酸を，酸性または非極性グループに属するアミノ酸と置換しても，構造的および機能的には保存的であり得る。プロリン，グリシン，システイン（ジスルフィド・フォーム）等の残基は主鎖の立体構造に直接的な効果を与える可能性があり，しばしば構造的ゆがみなしに置換することはできない。
　保存的アミノ酸置換は，以下に示すとおり，側鎖の類似性に基づく特異的置換（レーニンジャ，生化学，改訂第２版，１９７５年刊行，７３乃至７５頁：Ｌ．　　Ｌｅｈｎｉｎｇｅｒ，　　Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，　　２ｎｄ　　ｅｄｉｔｉｏｎ，　　ｐｐ７３～７５，　　Ｗｏｒｔｈ　　Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒ，　　Ｎｅｗ　　Ｙｏｒｋ　　（１９７５））および典型的置換を含む。

　また，保存的アミノ酸置換は，例えば，以下のように天然のアミノ酸をその共通する側鎖の性質に基づいて分けたグループにおいて，あるアミノ酸が属するグループと同じグループに属するアミノ酸への置換が好ましい。
　疎水性（非極性ともいう）アミノ酸：疎水性（非極性）を示すアミノ酸であって，アラニン（「Ａｌａ」または単に「Ａ」とも記す），グリシン（「Ｇｌｙ」または単に「Ｇ」とも記す），バリン（「Ｖａｌ」または単に「Ｖ」とも記す），ロイシン（「Ｌｅｕ」または単に「Ｌ」とも記す），イソロイシン（「Ｉｌｅ」または単に「Ｉ」とも記す），プロリン（「Ｐｒｏ」または単に「Ｐ」とも記す），フェニルアラニン（「Ｐｈｅ」または単に「Ｆ」とも記す），トリプトファン（「Ｔｒｐ」または単に「Ｗ」とも記す），チロシン（「Ｔｙｒ」または単に「Ｙ」とも記す），メチオニン（「Ｍｅｔ」または単に「Ｍ」とも記す）を含む。
　なお，疎水性アミノ酸はさらに以下のグループに分けることもできる。
脂肪族アミノ酸：側鎖に脂肪酸又は水素を有するアミノ酸であって，Ａｌａ，Ｇｌｙ，Ｖａｌ，Ｉｌｅ，Ｌｅｕを含む。
　脂肪族・分岐鎖アミノ酸：側鎖に分岐型脂肪酸を有するアミノ酸であって，Ｖａｌ，Ｉｌｅ，Ｌｅｕを含む。
　芳香族アミノ酸：側鎖に芳香環を有するアミノ酸であって，Ｔｒｐ，Ｔｙｒ，Ｐｈｅを含む。
　親水性（極性ともいう）アミノ酸：親水性（極性）を示すアミノ酸であって，セリン（「Ｓｅｒ」または単に「Ｓ」とも記す），スレオニン（「Ｔｈｒ」または単に「Ｔ」とも記す），システイン（「Ｃｙｓ」または単に「Ｃ」とも記す），アスパラギン（「Ａｓｎ」または単に「Ｎ」とも記す），グルタミン（「Ｇｌｎ」または単に「Ｑ」とも記す），アスパラギン酸（「Ａｓｐ」または単に「Ｄ」とも記す），グルタミン酸（「Ｇｌｕ」または単に「Ｅ」とも記す），リジン（リシンとも記す。「Ｌｙｓ」または単に「Ｋ」とも記す），アルギニン（「Ａｒｇ」または単に「Ｒ」とも記す），ヒスチジン（「Ｈｉｓ」または単に「Ｈ」とも記す）を含む。
　なお，親水性アミノ酸はさらに以下のグループに分けることもできる。
　酸性アミノ酸：側鎖が酸性を示すアミノ酸であって，Ａｓｐ，Ｇｌｕを含む，
　塩基性アミノ酸：側鎖が塩基性を示すアミノ酸であって，Ｌｙｓ，Ａｒｇ，Ｈｉｓを含む。
　中性アミノ酸：側鎖が中性を示すアミノ酸であって，Ｓｅｒ，Ｔｈｒ，Ａｓｎ，Ｇｌｎ，Ｃｙｓを含む。
　また，Ｇｌｙ及びＰｒｏについては，「主鎖の方角に影響を与えるアミノ酸」に分けることもでき，側鎖に硫黄分子を含むアミノ酸，Ｃｙｓ及びＭｅｔは，「含硫アミノ酸」に分けることもできる。

　本明細書において，「アミノ酸」は，天然のアミノ酸のみならず，非天然のアミノ酸も含む。非天然のアミノ酸には，例えば，上記記載した天然のアミノ酸がＮ－アルキル化されたＮ－アルキルアミノ酸，ペプチド結合を形成する窒素が分岐した若しくは分岐しない低級（例えば，Ｃ１－Ｃ５の，好ましくは，Ｃ１－Ｃ３，より好ましくはＣ１）のアルキル基で修飾されたもの，が含まれる。Ｎ－アルキルアミノ酸においては，好ましくはＮ－エチルアミノ酸，Ｎ－ブチルアミノ酸又はＮ－メチルアミノ酸であり，さらに好ましくはＮ－メチルアミノ酸である。また，非天然のアミノ酸には，Ｄ型アミノ酸（Ｄ－アミノ酸とも記す），β－アミノ酸，γ－アミノ酸，アミノ酸変異体，アミノ酸誘導体等の化学修飾されたアミノ酸，ノルロイシンやオルニチン等の生体内でタンパク質の構成材料とならないアミノ酸などが含まれる。さらに，天然のアミノ酸の側鎖に官能基がさらに付加された又は別の官能基に置換されたアミノ酸（例えば，側鎖のアリーレン基，アルキレン基等の部分に置換や付加を有するアミノ酸，側鎖のアリーレン基，アルキレン基やアルキル基のＣ数が増加したアミノ酸，側鎖の芳香環に置換を有するアミノ酸や，複素環化や縮合環化したアミノ酸など）が含まれる。
　なお，天然のアミノ酸の側鎖に官能基等の構造が付加または置換等されることで，天然のアミノ酸とは異なる性質を付与することができる。例えば，Ａ４ｐは側鎖にピペリジル基が付加されたアラニンであるが，当該ピペリジル基が付加されたことで，非極性アミノ酸グループに属するアラニンとは異なり，塩基性となり，極性を示す。
　すなわち，天然のアミノ酸をその共通する側鎖の性質に基づいて分けた，前述のグループに，同様の側鎖の性質を有する非天然アミノ酸を含めることが出来る。例えば，塩基性アミノ酸に属するアルギニンのＮ－メチル化アミノ酸であるＮ－メチルアルギニン（ＭｅＲ）は，非天然アミノ酸であるが，塩基性を示すため，塩基性アミノ酸に分類することができる。このように，あるアミノ酸と同様の側鎖の性質を示す非天然アミノ酸についても，保存的アミノ酸置換の対象として含むことができる。
　非限定的に，非天然のアミノ酸には，Ｎ－メチルアミノ酸，４Ｐｙ，ａｌＴ，Ｃｉｔ，Ｐ４Ｓｈ，Ｆ４ＣＯＮ，Ｆ４ＣＯＯ，３Ｐｙ，ＨｙＰ，ＳＭｅ，Ａ４ｐａａ，Ａｔｐ，Ｈｇｌ，ＫＡｃ，Ｎａｌ１，Ｗ６Ｎ，Ｗ７Ｎ，ＰｅＧ等を含む。なお，Ｎ－メチルアミノ酸については，Ｎ－アルキルアミノ酸として分類することもでき，Ｎ－メチル化されていない元のアミノ酸の側鎖の性質に従い分類することもできる。

　ペプチド長
　第１のペプチドは，例えば，配列番号２～４１に記載されるアミノ酸配列，またはそれらアミノ酸配列の１～１５番目のアミノ酸配列に加えて，付加的なアミノ酸残基を含んでもよい。付加的なアミノ酸残基は，環状構造を成すペプチドに含まれてもよいし，当該環状ペプチドからさらにアミノ酸残基がリンカー状に付加されていてもよい。ペプチド，ペプチド部位のアミド結合の数（アミノ酸の数・長さ）は特に限定されないが，総アミノ酸残基（環状構造を成すペプチドに含まれるアミノ酸残基数をいい，当該環状ペプチドからさらにアミノ酸残基がリンカー状に付加されている場合は，それらのアミノ酸は含めない）が，２０残基以内であることが好ましい。好ましいペプチド長は，アミノ酸残基が６以上，７以上，８以上，９以上，１０以上，１１以上であり，好ましくはアミノ酸残基が１９以下，１８以下，である。更に好ましいペプチド長は，アミノ酸残基が１５以上１７以下であり，最も好ましくはアミノ酸が１６である。

　第１のペプチドの好ましい例は，
　Ｘ^１は，側鎖に芳香族環を有するアミノ酸であり，
　Ｘ^２は，任意のアミノ酸であり，
　Ｘ^３は，２級アミノ酸であり，
　Ｘ^４は，側鎖に置換されていても良い芳香族環を有するアミノ酸であり，
　Ｘ^５は，２級アミノ酸であり，
　Ｘ^６は，側鎖に鎖状アルキル基を有するアミノ酸であり，
　Ｘ^７は，側鎖に置換されていても良い芳香族環を有するアミノ酸であり，
　Ｘ^８は，側鎖に鎖状アルキル基を有するアミノ酸であり，
　Ｘ^９は，任意のアミノ酸であり，
　Ｘ^１０は，側鎖に芳香族環を有するアミノ酸であり，
　Ｘ^１１は，任意のアミノ酸である。

　第１のペプチドの好ましい例は，
　Ｘ^２は，側鎖に鎖状または環状アルキル基を有するアミノ酸であり，
　Ｘ^３は，プロリン又はプロリン誘導体であり，
　Ｘ^４は，チロシン又はチロシンの側鎖の水酸基が他の官能基に置換されたアミノ酸であり，
　Ｘ^５は，プロリン又はプロリン誘導体であり，
　Ｘ^６は，側鎖に鎖状アルキル基と極性基を有するアミノ酸であり，
　Ｘ^７は，チロシン又はチロシンの側鎖の水酸基が他の官能基に置換されたアミノ酸であり，
　Ｘ^８は，側鎖に鎖状アルキル基と極性基を有するアミノ酸であり，
　Ｘ^９は，側鎖における官能基の炭素数が３以上のアミノ酸である。

　第１のペプチドの好ましい例は，
　Ｘ^２は，側鎖に極性基をさらに有するアミノ酸（側鎖に鎖状または環状アルキル基と極性基を有するアミノ酸）であり，
　Ｘ^６は，側鎖に鎖状アルキル基と水酸基を有するアミノ酸であり，
　Ｘ^７は，チロシン又はチロシンの側鎖の水酸基が他の官能基に置換されたアミノ酸であり，
　Ｘ^８は，側鎖に鎖状アルキル基と置換されても良い水酸基を有するアミノ酸であり，
　Ｘ^９は，側鎖に鎖状または環状アルキル基を有するアミノ酸である。

　側鎖に置換されていても良い芳香族環を有するアミノ酸
　「側鎖に置換されていてもよい芳香族環を有するアミノ酸」とは，側鎖に芳香環を有するアミノ酸であって，例えば芳香環としてフェニル基やインドール環を有し，その一部のＣなどがＮなど他の分子への置換があってよい。芳香族環は複素環であってもよい。また，例えば，チロシンの側鎖の水酸基が他の官能基に置換されているようなアミノ酸であっていてもよい。「側鎖に置換されていてもよい芳香族環を有するアミノ酸」は，一態様において，好ましくは側鎖に縮合環を有するアミノ酸である。例えば，インドール環やナフタレン構造を有するアミノ酸であってよく，さらにその一部のＣなどがＮなど他の分子への置換があってよい。置換基は特に限定されず，アルキル基，シクロアルキル基，水酸基，ハロゲン等に任意に選択される。「側鎖に置換されていてもよい芳香族環を有するアミノ酸」は，例えば，チロシン，トリプトファン，ヒスチジン，フェニルアラニン等を含む。非天然型アミノ酸，例えば，４Ｐｙ，Ｆ４ＣＯＮ，Ｆ４ＣＯＯ又は３Ｐｙであってもよい。
　「側鎖に置換されていても良い芳香族環を有するアミノ酸」は，「側鎖に芳香族環を有するアミノ酸」であってもよい。

　側鎖に鎖状または環状アルキル基を有するアミノ酸
　「側鎖に鎖状または環状アルキル基を有するアミノ酸」とは，側鎖にアルキル基を有するアミノ酸，例えば，リシン，アラニン，プロリン，グリシン，ロイシン等であって，これらのアミノ酸の側鎖が，置換されていても，置換されていなくてもよいアミノ酸であり，当該アルキル基は，鎖状でも環状でもよい。
　「側鎖に鎖状アルキル基を有するアミノ酸」は，側鎖に鎖状アルキル基を有するアミノ酸である。

　側鎖に極性基を有するアミノ酸
　「側鎖に極性基を有するアミノ酸」とは，側鎖に極性基を有するアミノ酸であって，例えばチロシン，リシン，アルギニン，グルタミン酸，グルタミン，セリン，トレオニン等が挙げられる。結合する極性基としては，例えば，非限定的に，水酸基，ウレア基，カルボン酸，アミド基，エーテルなどが挙げられる。

　チロシンの側鎖の水酸基が他の官能基に置換されたアミノ酸
　「チロシンの側鎖の水酸基が他の官能基に置換されていてもよいアミノ酸」とは，チロシンの水酸基が他の極性基，例えば，非限定的に，ウレア基，カルボン酸，アミド基，エーテルなどに置換されているアミノ酸であってよい。例えば，非限定的に，Ｆ４ＣＯＮ，Ｆ４ＣＯＯ，及びＹなどが挙げられる。

　２級アミノ酸
　２級アミノ酸は，２級アミン（アミノ基に水素以外の基が２つ付いたアミノ酸）を有するアミノ酸を意味する。２級アミノ酸の例は，プロリン及びプロリン誘導体である。プロリン誘導体の例は，ＨｙＰ及びＰ４Ｓｈである。

　側鎖に鎖状アルキル基と極性基を有するアミノ酸
　側鎖に鎖状アルキル基と極性基を有するアミノ酸における鎖状アルキル基及び極性基は先に説明した通りである。極性基の例は水酸基である。側鎖に鎖状アルキル基と極性基を有するアミノ酸の例は，Ｓ，及びＳＭｅである。

　側鎖に鎖状または環状アルキル基と極性基を有するアミノ酸
　側鎖に鎖状または環状アルキル基と極性基を有するアミノ酸における鎖状または環状アルキル基及び極性基は先に説明した通りである。側鎖に鎖状または環状アルキル基と極性基を有するアミノ酸の例は，ａｌＴ，Ｃｉｔ，Ｄ，Ｅ，Ｌ，Ｑ，及びＳである。

　側鎖における官能基の炭素数が３以上のアミノ酸
　側鎖における官能基の炭素数が３以上のアミノ酸とは，側鎖に１又は複数の官能基があり，官能基に含まれる炭素の数の合計が３以上であるアミノ酸を意味する。側鎖における官能基の炭素数が３以上のアミノ酸の例は，Ａ４ｐａａ，Ａｔｐ，Ｅ，Ｈｇｌ，ＫＡｃ，及びＬである。

　第１のペプチドの好ましい例は，
　Ｘ^１は，３－（４－ピリジル）－Ｌ－アラニン（４Ｐｙ）又はＦであり，
　Ｘ^２は，アロ－スレオニン（ａｌＴ），Ｌ－シトルリン（Ｃｉｔ），Ｄ，Ｅ，Ｌ，Ｑ，又はＳであり，
　Ｘ^３は，Ｐ，又はｃｉｓ－４－ヒドロキシ－Ｌ－プロリン（Ｐ４Ｓｈ）であり，
　Ｘ^４は，Ｌ－４－カルバモイルフェニルアラニン（Ｆ４ＣＯＮ），４－カルボキシル－Ｌ－フェニルアラニン（Ｆ４ＣＯＯ），又はＹであり，
　Ｘ^５は，ヒドロキシプロリン（ＨｙＰ），Ｐ，又はｃｉｓ－４－ヒドロキシ－Ｌ－プロリン（Ｐ４Ｓｈ）であり，
　Ｘ^６は，Ｓ，又はＴであり，
　Ｘ^７は，Ｌ－４－カルバモイルフェニルアラニン（Ｆ４ＣＯＮ），又はＹであり，
　Ｘ^８は，Ｓ，又は（Ｓ）－２－アミノ－３－メトキシプロパン酸（ＳＭｅ）であり，
　Ｘ^９は，（Ｓ）－２－アミノ－３－（１－（カルボキシメチル）ピぺラジン－４－イル）プロパン酸（Ａ４ｐａａ），（２Ｓ）－２－アミノ－３－（オキサン－４－イル）プロパン酸（Ａｔｐ），Ｅ，Ｌ－２－アミノアジピン酸（Ｈｇｌ），Ｎ６－アセチル－Ｌ－リシン（ＫＡｃ），又はＬであり，
　Ｘ^１０は，３－（３－ピリジル）－Ｌ－アラニン（３Ｐｙ）又は３－（４－ピリジル）－Ｌ－アラニン（４Ｐｙ）であり，
　Ｘ^１１は，Ａ，Ｅ，Ｎ－メチルグルタミン酸（ＭｅＥ），Ｐ，Ｓ，又はＷである。

　第１のペプチドの好ましい例は，Ｆ－Ｌ－Ｐ－Ｙ－３Ｐｙ－Ｗ－Ｐ－Ｔ－Ｙ－Ｓ－Ｌ－３Ｐｙ－Ｖ－Ｗ－Ｃ（配列番号２）で示されるアミノ酸配列を有するか（３ｐｙは３－（３－ピリジル）－Ｌ－アラニンを意味する），又は配列番号２で示されるアミノ酸配列において，１～４個のアミノ酸が，置換，欠失，付加又は挿入されたアミノ酸配列からなるペプチドである。アミノ酸が置換又は欠失される場合，そのアミノ酸の位置は，配列番号２における，アミノ酸配列の１番目，２番目，３番目，４番目，７番目，８番目，９番目，１０番目，１１番目，１２番目及び１４番目のいずれかであることが好ましい。

　第１のペプチドの好ましい例は，Ｃ末端にさらにグリシンが付加したアミノ酸配列を有する。

　第１のペプチドの好ましい例は，第１のペプチドが，配列番号２～４１のいずれかで示されるアミノ酸配列からなるペプチド又はその薬学的に許容される塩である。薬学的に許容される塩の例は，無機酸塩，有機酸塩，無機塩基塩，有機塩基塩，酸性または塩基性アミノ酸塩である。無機酸塩の例は，塩酸塩，臭化水素酸塩，硫酸塩，硝酸塩，リン酸塩である。有機酸塩の例は，酢酸塩，コハク酸塩，フマル酸塩，マレイン酸塩，酒石酸塩，クエン酸塩，乳酸塩，ステアリン酸塩，安息香酸塩，メタンスルホン酸塩，及びｐ－トルエンスルホン酸塩である。無機塩基塩の例は，ナトリウム塩，カリウム塩などのアルカリ金属塩，カルシウム塩，マグネシウム塩などのアルカリ土類金属塩，アルミニウム塩，及びアンモニウム塩である。有機塩基塩の例は，ジエチルアミン塩，ジエタノールアミン塩，メグルミン塩，及びＮ，Ｎ’－ジベンジルエチレンジアミン塩である。酸性アミノ酸塩の例は，アスパラギン酸塩，及びグルタミン酸塩である。塩基性アミノ酸塩の例は，アルギニン塩，リジン塩，及びオルニチン塩である。第１のペプチド及び複合体は，薬学的に許容される塩や溶媒和物であってもよい。溶媒和物の例は，水和物である。

　第１のペプチドの好ましい例は，環状ペプチドである。第１のペプチドの好ましい例は，Ｎ末端のアミノ酸残基がクロロアセチル化したアミノ酸残基であり，ペプチド内のシステイン残基を有し，Ｎ末端のアミノ酸残基と，システイン残基とが結合した環状ペプチドである。

　環状ペプチド
　環状ペプチドとは，ペプチド中の２つのアミノ酸が結合し，その全部または一部が環状になっているものをいう。なお，本願においては，ペプチド中のアミノ酸が架橋構造を形成したもの，ラクタム環形成又はマクロ環化反応により環状構造を形成したものや，ラッソペプチド状構造を有するもの等をも包含される。すなわち，本願において環状ペプチドは，その一部が環状構造を形成するものであればよく，直鎖部を有していてもよい。　

　本明細書において，ペプチドの環化のためにアミノ酸の一部を改変する場合がある。ペプチドには，そのような一部の改変がなされたアミノ酸を含むペプチドも包含する。環化のための改変の例として，Ｎ末端に位置するアミノ酸にクロロアセチル基を付加し，ペプチド中のシステイン残基と結合し環化するような場合がある。クロロアセチル基が付加された各種（天然／非天然）アミノ酸を含むペプチドも本願のペプチドに包含される。

　ペプチドは，一般的に生体内において代謝安定性が悪く，またサイズが大きいので細胞膜を透過しづらいという問題がある。そのような課題に対し，ペプチドを環化させるという方法がとられてきた。ペプチドを環化すると，プロテアーゼ耐性が向上し代謝安定性が向上し，またコンフォメーション変化にも制限が加わるため，剛直性が増して膜透過性や標的タンパク質との親和性が向上することが示唆されてきた。

　ペプチドの環化については，公知の方法に従って行うことができる。これに限られるものではないが，例えば，ペプチドに２個以上のシステイン残基を含むよう設計することで，翻訳された後，ジスルフィド結合により環状構造を形成できる。また，Ｇｏｔｏらの方法（Ｙ．　Ｇｏｔｏ，　ｅｔ　ａｌ．　ＡＣＳ　Ｃｈｅｍ．　Ｂｉｏｌ．　３　１２０－１２９　（２００８））に従い，遺伝暗号のリプログラミング技術により，Ｎ末端にクロロアセチル基を有するペプチドを合成し，ペプチド中にシステイン残基を配置しておくことによっても環状化できる。これにより，翻訳後に自発的にメルカプト基がクロロアセチル基に求核攻撃し，ペプチドがチオエーテル結合により環化する。遺伝暗号のリプログラミング技術により，結合して環状を形成するその他のアミノ酸の組合せをペプチド内に配置して環化してもよい。あるいは，Ｎ末端にシクロアミドを有するペプチドを合成し，ペプチド中にＬ－２－アミノアジピン酸残基を配置し，それらの間で結合することによって，環化してもよい。このように，公知の環化方法であれば，特に制限されず用いることができる。

　リンカー
　第１のペプチドや部分ペプチドは，リンカーが付加されていても良い。また，リンカーは，ペプチドを含む複合体において複数のペプチドを含む化合物を互いにつなぐ構造であってもよい。リンカーとしては，例えば，アミノ酸リンカー（ペプチドリンカー），化学リンカー，脂肪酸リンカー，核酸リンカー，及び糖鎖リンカーが挙げられ，また，例えば化学リンカーとペプチドリンカーなどの複合体であってもよい。化学リンカーの例は，ＰＥＧ（Ｐｏｌｙｅｔｈｙｌｅｎｅｇｌｙｃｏｌ）リンカーである。ＰＥＧリンカーは，１～２４個，又は１～３６個のエチレングリコール単位からなるリンカーであってよい。また，リンカーは，脂肪酸から誘導される二価化学部分を含む脂肪酸リンカーでもよい。アミノ酸（ペプチド）リンカーは，少なくとも１個のアミノ酸を含むリンカーであり，例えば，米国特許第７，２７１，１４９号に記載のような，配列［Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｓｅｒ］ｎ（式中，ｎは１，２，３，４，５または６である）を有するペプチドなどのグリシン－リッチペプチドや，米国特許第５，５２５，４９１号に記載のセリン－リッチペプチドリンカーを用いることができる。非限定的に，リンカーの付加によりペプチドの物性（例えば溶解度）が変化する場合がある。さらに，上記のリンカーの組合せで合ってよい。例えば，アミノ酸リンカーとしてＧｌｙ－Ｌｙｓが結合し，さらに当該Ｌｙｓの側鎖末端にＰＥＧリンカーが結合した形であってよい。また，リンカーは，ＰＥＧ―アミノ酸－ＰＥＧのように，アミノ酸とＰＥＧが交互に結合する構造をとっていてもよい。リンカーの好ましい例は，表２に示される構造を有するリンカーである。
　リンカーの付加位置については，どこに付加されていても良い。例えば，ペプチドのＮ末端側に位置しており，１番目のアミノ酸と結合し環状構造を形成するＣｙｓに結合していてもよく，環状ペプチドに含まれるアミノ酸に結合していても良い。リンカーの好ましい例は，Ｎ末端側に位置するＣｙｓに結合しているか，環状ペプチドに含まれるアミノ酸の側鎖に結合しているものである。
　なお，例えば配列番号３～４１に表されるアミノ酸配列において，１６番目のＧｌｙをリンカーとみなすこともできる。非限定的に，例えば，配列番号３～４１に表されるアミノ酸配列の１番目のアミノ酸が１５番目のアミノ酸であるＣｙｓと結合した環状ペプチドであって，１５番目のＣｙｓにさらにグリシンが付加された環状ペプチド構造体が２つ，当該付加されたグリシンから表２に表される構造を介してダイマー構造を取っている場合においては，リンカー構造は，表２に表される構造ということもでき，またグリシンに表２に表される構造が結合した構造とみなすこともできる。

　ＴｒｋＢ
　ＴｒｋＢは，トロポミオシン受容体キナーゼＢを指す。ＴｒｋＢは，チロシン受容体キナーゼＢ，ＢＤＮＦ／ＮＴ－４受容体，及び高親和性ニューロトロフィン受容体としても知られている。ヒトのＴｒｋＢは，ＮＴＲＫ２遺伝子によってコードされるタンパク質である（Ｅｎｔｒｅｚ　Ｇｅｎｅ　ＩＤ：　４９１５）。ＴｒｋＢは，細胞膜に配置されており，リガンドが受容体の細胞外ドメインに結合することによって活性化される。ＴｒｋＢは，脳由来神経栄養因子（ＢＤＮＦ）のための受容体であり，リガンド特異的な方式でＢＤＮＦと結合する。二量体であるＢＤＮＦがＴｒｋＢに結合すると，ＴｒｋＢが二量体化し，キナーゼドメインによってチロシン残基の自己リン酸化がおこり，その結果としてマイトジェン活性化タンパク質キナーゼ（ＭＡＰＫ），ホスファチジルイノシトール３－キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）およびホスホリパーゼＣ－γ１（ＰＬＣ－γ１）を含む３つの主要なシグナル伝達経路の活性化が起こる。数種のニューロトロフィン，例えばＢＤＮＦ，ニューロトロフィン－４（ＮＴ－４）およびニューロトロフィン－３（ＮＴ－３）が，ＴｒｋＢを活性化し，それによってニューロンの分化，ニューロン修復，ニューロン可塑性，増殖および生存などの複数の作用を活性化することが報告されている。本明細書におけるＴｒｋＢは，非限定的に，ヒトＴｒｋＢまたは非ヒト動物ＴｒｋＢ，例えばマウスＴｒｋＢ，ラットＴｒｋＢ，ウサギＴｒｋＢであって，好ましくはヒトＴｒｋＢである。

　ＴｒｋＢ結合活性
　本発明のペプチド複合体は，ＴｒｋＢ結合活性を有する。この発明のペプチド複合体は，ＴｒｋＢに特異的に結合するものが好ましい。例えば，この発明のペプチド複合体は，ＴｒｋＡやＴｒｋＣには結合性を示さず，ＴｒｋＢには結合性を示すものが好ましい。ＴｒｋＡは，ＴｒｋＢと同じニューロトロフィンファミリーに属し，ＴｒｋＢと異なりＢＮＤＦではなくＮＧＦ（神経成長因子）が結合する。ＴｒｋＣは，ＴｒｋＢと同じニューロトロフィンファミリーに属し，ニューロトロフィン－３が結合する。また，非限定的に，ＴｒｋＢに対する本発明のペプチドの結合状態は，親和性定数Ｋａ，解離定数Ｋｄ，結合速度定数ｋｏｎ，及び解離速度定数ｋｏｆｆなどを指標として表すことができる。

　親和性定数Ｋａ及び解離定数Ｋｄは，平衡状態にある２分子間の結合親和性，すなわち結合の強さを示す指標であり，解離定数Ｋｄは親和性定数Ｋａの逆数である。そして解離定数Ｋｄの値が小さいほど，結合が強いことを意味する。前記ペプチドのＴｒｋＢ（例えば，ヒトＴｒｋＢ）に対する結合状態を示す親和性定数Ｋａ，解離定数Ｋｄ，結合速度定数ｋｏｎ，及び解離速度定数ｋｏｆｆなどは，当業者に周知の任意の分子間相互作用測定法を用いて決定することができる。ＴｒｋＢに対する前記ペプチドの結合状態は，例えば，表面プラズモン共鳴スペクトル解析（ＳＰＲ）によって測定することができる。非限定的に，表面プラズモン共鳴スペクトル解析は，例えば，バイオセンサー（生体分子間相互解析装置）であるＢＩＡＣＯＲＥシステム（ＢＩＡＣＯＲＥ社）を用いて行うことができる。

　ペプチドのＴｒｋＢ結合活性の指標の１つとして解離定数Ｋｄがある。解離定数Ｋｄが低いほど結合活性（親和性）が高い。非限定的に，前記ペプチドとヒトＴｒｋＢとの結合の解離定数Ｋｄは，１００ｎＭ以下，７５ｎＭ以下，５０ｎＭ以下，３０ｎＭ以下，２０ｎＭ以下，１５ｎＭ以下，１０ｎＭ以下，５ｎＭ以下，１ｎＭ以下，１００ｐＭ以下である。前記ペプチドとヒトＴｒｋＢとの結合の解離定数ｋｏｆｆの下限は特に限定されない。

　ＴｒｋＢアゴニスト活性
　本発明のペプチド複合体は，好ましくは，ＴｒｋＢアゴニスト活性を有する。
　ＴｒｋＢアゴニスト活性とは，天然に存在するＴｒｋＢアゴニストであるＢＤＮＦおよびＮＴ４によってもたらされる効果に類似する効果をもたらす能力をいう。また，特異的にＴｒｋＢに結合し，上述の受容体の２量化およびシグナル伝達経路を活性化する能力をいう。
　「ＴｒｋＢアゴニスト活性」は，例えば，標的タンパク質としてＴｒｋＢを用いたキナーゼアッセイ系等によって評価しても良い。例えば，非限定的に，ＥＲＫのリン酸化を検出するＡｌｐｈａＬＩＳＡ　アッセイ　やＮＦＡＴアッセイ，β－ガラクトシダーゼ活性による加水分解された基質の化学発光シグナルのレベルを測定することにより受容体型チロシンキナーゼに対する化合物の作用を同定するＰａｔｈｈｕｎｔｅｒアッセイなどにより評価することができる。非限定的に，例えば，ＨｕｎｔｅｒＰａｔｈＨｕｎｔｅｒ（登録商標）　ｅＸｐｒｅｓｓ　ＴｒｋＢ　Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　Ａｓｓａｙ　キット（ＤｉｓｃｏｖｅＲｘ社），ＰａｔｈＨｕｎｔｅｒ（登録商標）　ＴｒｋＢ　Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　Ａｓｓａｙキット（コスモバイオ社），ＣｅｌｌＳｅｎｓｏｒ（登録商標）　ＴｒｋＢ－ＮＦＡＴ－ｂｌａ　ＣＨＯ－Ｋ１　Ｃｅｌｌ　Ｌｉｎｅ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社）などを用いた評価が挙げられる。いずれの評価系であっても，標準の手順に従い，最適条件において最適濃度のペプチドまたはペプチド複合体を使用した場合にＴｒｋＢアゴニスト活性を検出できるときに，ＴｒｋＢアゴニスト活性を有するという。非限定的に，ＥＣ５０をもってペプチドのアゴニスト活性を算出することができる。

　核酸
　この明細書は，第１のペプチドや，ペプチド複合体をコードする核酸をも提供する。　本明細書において「核酸」は，天然であっても非天然であってもよく，ＤＮＡ，ＲＮＡ，及びこれらのキメラを含むが，これらに限定されない。この核酸は，第１のペプチドや，ペプチド複合体の配列を基に公知の方法で設計し，製造できる。

　ペプチドドラックコンジュゲート（ＰＤＣ）
　ペプチド複合体の例は，上記のいずれかのペプチドと，これらのペプチドと結合したリンカーと，このリンカーに結合した物質とを含む複合体である。上記ペプチドは，ＴｒｋＢに結合することができるため，複合体は，物質をＴｒｋＢに運搬することが可能である。
　物質はＴｒｋＢに送達することを希望する物質であれば，当業者の希望する何らの物質であってよい。前記物質の例としては，限られないが，以下が挙げられる：
　化合物：低分子化合物，中分子化合物を含み，例えば公知の低分子薬剤が挙げられる。
　ペプチド：体内の標的に結合して何らかの効果を示すペプチドであってよく，例えば環状ペプチドであってよい。
　ＲＩ：放射性同位元素でラベルした低分子，中分子化合物や抗体等，放射性同位元素でラベルされた化合物であれば何でもよい。例えば，ＰＥＴ検査用の化合物が挙げられる。
　タンパク質：抗体，酵素等の，体内にて有用な機能を示すタンパク質であれば何でもよい。例えば，酵素補充療法に用いられる酵素が挙げられる。
　核酸：ＤＮＡ，ＲＮＡ等，核酸を含むものであれば何でもよい。例えば，核酸医薬品が挙げられる。
　ドラッグデリバリーシステム（ＤＤＳ）に用いる分子：リポソームやミセルなどのＤＤＳに使われる公知の分子であってよい。当該ＤＤＳ分子には内部にさらに医薬品などの化合物が含まれていてもよい。
　ＴｒｋＢに送達することを希望する物質は，上記に挙げた物質の複合体であってよい。

　組成物
　ペプチド複合体と担体とを含む組成物に関する。担体の例は，滅菌水，純水，蒸留水などの水；生理食塩水；ブドウ糖溶液；エタノールなどのアルコール；グリセロール，プロピレングリコール，ポリエチレングリコールなどのポリアルコール；滅菌有機溶媒；又は水性デンプン；ＰＢＳのいずれか１種又は２種以上の混合物である。

　医療用組成物
　医療用組成物（本明細書において「医薬組成物」ともいう）としては，上記したペプチド，その薬学的に許容される塩又は溶媒和物（簡単のため，以下ではこれらを単にペプチドとも表記する）を含む。この医薬組成物は，上述のペプチドを有効成分として有効量含むものが好ましい。
　医薬の対象となるＴｒｋＢに関連する疾患は，ＴｒｋＢの発現または活性の増加または減少によって引き起こされる，それによって悪化する，またはそれ以外でそれに関連するあらゆる疾患，またはＢＤＮＦシグナル伝達，またはＴｒｋＢを介して活性化される他のあらゆる細胞内シグナル伝達カスケードの減少によって引き起こされる，またはそれによって悪化する障害を指す。このような神経障害および精神障害の例としては，神経変性疾患（これらに限定されないが，アルツハイマー病とそれに関連する認知症，パーキンソン病，ハンチントン病，レヴィ小体病とそれに関連する運動障害，筋委縮性側索硬化症，緑内障およびフリードライヒ運動失調症とそれに関連する脊髄小脳失調症など），うつ病，不安，自閉症，統合失調症，および心的外傷後ストレス障害，ＣＮＳ障害，卒中および外傷性脳傷害などが挙げられる。代謝性疾患の例としては，肥満症および多食症が挙げられる。がんまたはがん性疾患は，悪性細胞の成長または新生物，異常な増殖，浸潤または転位を特徴とするあらゆる医学的疾患を指し，そのようなものとしては，固形腫瘍がんおよび非固形がん（血液系腫瘍）の両方，例えば白血病が挙げられる。固形腫瘍としては，肉腫および癌腫が挙げられる。肉腫は，血管，骨，脂肪組織，靭帯，リンパ管，筋肉または腱における非上皮性腫瘍であり，それに対して癌腫は，皮膚，腺および臓器の内層における上皮性腫瘍である。腫瘍は，新生物および／または悪性細胞の個体塊を指す。

　上記医薬組成物の投与形態は特に限定されず，経口的投与でも非経口的投与でもよい。非経口的投与としては，例えば，筋肉内注射，静脈内注射，皮下注射等の注射投与，経皮投与，経粘膜（経鼻，経口腔，経眼，経肺，経膣，経直腸）投与等が挙げられる。
　医薬組成物中のペプチドは，代謝及び排泄されやすい性質に鑑みて，各種の修飾を行うことができる。例えば，ポリペプチドにポリエチレングリコール（ＰＥＧ）や糖鎖を付加して血中滞留時間を長くし，抗原性を低下させることができる。また，ポリ乳酸・グリコール（ＰＬＧＡ）などの生体内分解性の高分子化合物，多孔性ヒドロキシアパタイト，リポソーム，表面修飾リポソーム，不飽和脂肪酸で調製したエマルジョン，ナノパーティクル，ナノスフェア等を徐放化基剤として用い，これにポリペプチドを内包させてもよい。経皮投与する場合，弱い電流を皮膚表面に流して角質層を透過させることもできる（イオントフォレシス法）。

　医薬組成物は，有効成分をそのまま用いてもよいし，薬学的に許容できる担体，賦形剤，添加剤等を加えて製剤化してもよい。剤形としては，例えば，液剤（例えば注射剤），分散剤，懸濁剤，錠剤，丸剤，粉末剤，坐剤，散剤，細粒剤，顆粒剤，カプセル剤，シロップ剤，トローチ剤，吸入剤，軟膏剤，点眼剤，点鼻剤，点耳剤，パップ剤等が挙げられる。
　　製剤化は，例えば，賦形剤，結合剤，崩壊剤，滑沢剤，溶解剤，溶解補助剤，着色剤，矯味矯臭剤，安定化剤，乳化剤，吸収促進剤，界面活性剤，ｐＨ調整剤，防腐剤，抗酸化剤などを適宜使用し，常法により行うことができる。

　製剤化に用いられる成分の例としては，精製水，食塩水，リン酸緩衝液，デキストロース，グリセロール，エタノール等薬学的に許容される有機溶剤，動植物油，乳糖，マンニトール，ブドウ糖，ソルビトール，結晶セルロース，ヒドロキシプロピルセルロース，デンプン，コーンスターチ，無水ケイ酸，ケイ酸アルミニウムマグネシウム，コラーゲン，ポリビニルアルコール，ポリビニルピロリドン，カルボキシビニルポリマー，カルボキシメチルセルロースナトリウム，ポリアクリル酸ナトリウム，アルギン酸ナトリウム，水溶性デキストラン，カルボキシメチルスターチナトリウム，ぺクチン，メチルセルロース，エチルセルロース，キサンタンガム，アラビアゴム，トラガント，カゼイン，寒天，ポリエチレングリコール，ジグリセリン，グリセリン，プロピレングリコール，ワセリン，パラフィン，ミリスチン酸オクチルドデシル，ミリスチン酸イソプロピル，高級アルコール，ステアリルアルコール，ステアリン酸，ヒト血清アルブミン，等が挙げられるがこれらに限定されない。

　難吸収性薬物の吸収を改善する吸収促進剤として，ポリオキシエチレンラウリルエーテル類，ラウリル硫酸ナトリウム，サポニン等の界面活性剤；グリココール酸，デオキシコール酸，タウロコール酸等の胆汁酸塩；ＥＤＴＡ，サリチル酸類等のキレート剤；カプロン酸，カプリン酸，ラウリン酸，オレイン酸，リノール酸，混合ミセル等の脂肪酸類；エナミン誘導体，Ｎ－アシルコラーゲンペプチド，Ｎ－アシルアミノ酸，シクロデキストリン類，キトサン類，一酸化窒素供与体等を用いてもよい。

　丸剤又は錠剤は，糖衣，胃溶性，腸溶性物質で被覆することもできる。注射剤は，注射用蒸留水，生理食塩水，プロピレングリコール，ポリエチレングリコール，植物油，アルコール類等を含むことができる。さらに，湿潤剤，乳化剤，分散剤，安定化剤，溶解剤，溶解補助剤，防腐剤等を加えることができる。

　本発明の医薬組成物は，上記疾患に有用な他の医薬や治療法と併用投与してもよい。

　本発明の医薬組成物を哺乳類（例えば，ヒト，マウス，ラット，モルモット，ウサギ，イヌ，ウマ，サル，ブタ，ヒツジ等），特にヒトに投与する場合の投与量は，症状，患者の年齢，性別，体重，感受性差，投与方法，投与間隔，有効成分の種類，製剤の種類によって異なり，特に限定されないが，例えば，３０μｇ～１０００ｍｇ，１００μｇ～５００ｍｇ，１００μｇ～１００ｍｇを１回又は数回に分けて投与することができる。注射投与の場合，患者の体重により，１μｇ／ｋｇ～３０００μｇ／ｋｇ，３μｇ／ｋｇ～１０００μｇ／ｋｇを１回又は数回に分けて投与してもよい。

　診断用組成物
　本発明のペプチドは，ＴｒｋＢに結合するため，ＴｒｋＢを検出する診断薬としても使用し得る。診断薬としては，ＴｒｋＢの発現量を検出する検出薬であってよく，検出薬として用いる場合は，本発明のペプチドは，検出可能に標識してもよい。このようにして，第１のペプチドやペプチド複合体又はそれらを含む組成物は，ＴｒｋＢを検出する診断薬として利用できる。

　研究用組成物
　本発明のペプチドは，ＴｒｋＢに結合するため，ＴｒｋＢが関与する研究に好ましく用いることができる。

　細胞培養用組成物
　細胞培養用組成物は，細胞培養に用いられる組成物である。本願のペプチドは，ＴｒｋＢアゴニスト活性を有するため，細胞培養のための培地，好ましくは哺乳類細胞，さらに好ましくはヒト細胞の培養のための培地用試薬，添加剤としても使用しうる。
　また，本発明のペプチドは，神経変性疾患等の治療に用いる移植用神経細胞を作製するための培地への試薬・添加剤としても使用し得る。上記移植用神経細胞は，非限定的に，多能性幹細胞，複能性幹細胞，または前駆細胞を培養することによって作製される。天然に存在するＴｒｋＢアゴニストであるＢＤＮＦは，骨，軟骨，腎臓，歯胚などの非神経系の組織にも発現しており，細胞レベルでも，歯周靭帯細胞，骨芽細胞，免疫担当細胞，血管内皮細胞，上皮細胞が産生する。このようにＢＤＮＦが神経細胞だけでなく，種々の非神経系細胞において機能的な役割を果たしているシグナル分子であることから，本願のペプチドは，上記のような様々な細胞を作製するための試薬及び添加剤として利用されうる。

　培地は，細胞又は組織を培養するための培地であれば特に限定はされない。培地は，血清培地であってよく，好ましくは無血清培地や低血清培地である。
　培養用培地添加物は，溶液の形態であっても，乾燥した固体（例えば，固形状，粉末状等）の形態であってもよい。溶液の形態である場合には，そのまま培養用の培地として用いてもよいし，溶媒で希釈し，必要に応じて上述した添加剤を加えたものを，培養用の培地として用いてもよい。希釈する際に用いる溶媒としては，例えば，水，緩衝液，生理食塩水，各種細胞や組織培養に用いられる培地等が挙げられ，これらは単独で用いても，２種以上を組み合わせて用いてもよい。
　培養用培地添加物が乾燥した固体の形態である場合には，例えば，水，緩衝液，生理食塩水，各種細胞や組織培養に用いられる培地等の溶媒に溶解し，必要に応じて上述した添加剤を加えたものを，培養用の培地として用いてもよい。
　細胞又は組織を培養するための培地中，又はこれから得られた細胞用の培地中の本発明のペプチド複合体の含有量は，例えば，組成物全量又は培地全量に対して，最終濃度として，約０．０１～約１００００ｎｍｏｌ／Ｌ，好ましくは約０．１～約１０００ｎｍｏｌ／Ｌ，より好ましくは約０．５～約１０００ｎｍｏｌ／Ｌ，更に好ましくは約１～約１００ｎｍｏｌ／Ｌであり得る。

　略語（一般）
オングストローム（単位）としてÅ；
ウシ血清アルブミンとしてＢＳＡ；
クロロアセチルとしてＣｌＡｃ；
ジクロロメタン又は塩化メチレンとしてＤＣＭ；
Ｎ，Ｎ’－ジイソプロピルカルボジイミドとしてＤＩＰＣＩ；
Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミンとしてＤＩＰＥＡ又はＤＩＥＡ；
ジメチルスルホキシドとしてＤＭＳＯ；
Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミドとしてＤＭＦ；
３，６－ジオキサー１，８－オクタンジチオールとしてＤＯＤＴ；
ダルベッコ改変イーグル培地としてＤＭＥＭ；
５０％効果濃度としてＥＣ５０；
ウシ胎児血清としてＦＢＳ；
９－フルオレニルメチルオキシカルボニルとしてＦｍｏｃ；
Ｎ^２，Ｎ^６－ビス（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）－Ｌ－リジンとしてＦｍｏｃ－Ｌｙｓ（Ｆｍｏｃ）－ＯＨ；
グラム（単位）としてｇ；
Ｏ－（７－アザベンゾトリアゾールー１－イル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウムヘキサフルオロりん酸塩としてＨＡＴＵ；
高速液体クロマトグラフィーとしてＨＰＬＣ；
液体クロマトグラフィー質量分析計としてＬＣ－ＭＳもしくはＬＣ／ＭＳ；
モーラー（単位）としてＭ；
ミリグラム（単位）としてｍｇ；
ミリリットル（単位）としてｍＬ；
ミリモーラー（単位）としてｍＭ；
アセトニトリルとしてＭｅＣＮ；
分（単位）としてｍｉｎ：
ミリメートル（単位）としてｍｍ；
Ｎ－ヒドロキシコハク酸イミドとしてＮＨＳ；
ナノメートル（単位）としてｎｍ；
マイクロリットル（単位）としてμＬ；
スクシンイミドとしてＯＳｕ；
２，２，４，６，７－ペンタメチルジヒドロベンゾフラン－５－スルホニル基としてＰｂｆ；
ポリエチレングリコールとしてＰＥＧ；
回転毎分（単位）としてｒｐｍ；
トリフルオロ酢酸としてＴＦＡ；
トリイソプロピルシランとしてＴＩＳ；
トリチル基としてＴｒｔまたはＴｒ；

　略語（非天然アミノ酸）
Ａｈｐ　（Ｓ）－２－アミノヘプタン酸（ＣＡＳ番号：４４９０２－０２－５）
Ａｔｐ　（２Ｓ）－２－アミノ－３－（オキサン－４－イル）プロパン酸（ＣＡＳ番号：１３４４９１０－９１－３）
Ａ４ｐａａ　（Ｓ）－２－アミノ－３－（１－（カルボキシメチル）ピぺラジン－４－イル）プロパン酸（キシダ化学株式会社）
Ｃｉｔ　Ｌ－シトルリン（ＣＡＳ番号：３７２－７５－８）
ｃＰＥＧ１ｃ　３，３‘－オキシジプロピオン酸
ｃＰＥＧ５ｃ　４，７，１０，１３，１６－ペンタオキサノナデカンジオイック酸
ｃＰＥＧ９ｃ　４，７，１０，１３，１６，１９，２２，２５，２８－ノナオキサヘントリアコンタンジオイック酸
ｃＰＥＧ１３ｃ　４，７，１０，１３，１６，１９，２２，２５，２８，３１，３４，３７，４０－トリデカオキサトリテトラコンタンジオイック酸
ｃＰＥＧ１７ｃ　４，７，１０，１３，１６，１９，２２，２５，２８，３１，３４，３７，４０，４３，４６，４９，５２－ヘプタデカオキサペンタペンタコンタンジオイック酸
ｄｆ　Ｄ－フェニルアラニン
ｄｃ　Ｄ－システイン
Ｆ４ＣＯＮ　Ｌ－４－カルバモイルフェニルアラニン（ＣＡＳ番号：２２３５９３－０４－２）
Ｆ４ＣＯＯ　４－カルボキシル－Ｌ－フェニルアラニン（ＣＡＳ番号：１２６１０９－４２－０）
Ｈｇｌ　Ｌ－２－アミノアジピン酸（ＣＡＳ番号：１１１８－９０－７）
Ｈｔｙ　ホモ－Ｌ－チロシン（ＣＡＳ番号：２２１２４３－０１－２）
ＫＡｃ　Ｎ６－アセチル－Ｌ－リシン（ＣＡＳ番号：９２－０４－６）
ＭｅＦ　Ｎ－メチル－Ｌ－フェニルアラニン
ＭｅＡ　Ｎ－メチル－Ｌ－アラニン
ＭｅＧ　Ｎ－メチルグリシン
ＮＨＳ－ｃＰＥＧ１３ｃ－ＮＨＳ　ビス（２，５－ジオキソピロリジン－１－イル）４，７，１０，１３，１６，１９，２２，２５，２８，３１，３４，３７，４０－トリデカオキサトリテトラコンタンジオエート
ＮＨＳ－ＯＣＯＰＥＧ１３ＯＣＯ－ＮＨＳ　ビス（２，５－ジオキソピロリジン－１－イル）（３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４，２７，３０，３３－ウンデカオキサペンタトリアコンタン－１，３５－ジイル）ビスカーボネート
ＯＣＯＰＥＧ１３ＯＣＯ　３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４，２７，３０，３３－ウンデカオキサペンタトリアコンタン－１，３５－ジイルビス（炭酸水素塩）
ＰＥＧ２ｃ　３－（２－（２－アミノエトキシ）エトキシ）プロパン酸
ＰＥＧ４ｃ　１－アミノ－３，６，９，１２－テトラオキサペンタデカン－１５－オイック酸
ＰＥＧ６ｃ　１－アミノ－３，６，９，１２，１５，１８－ヘキサオキサヘンイコサン－２１－オイック酸
ＰＥＧ８ｃ　１－アミノ－３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４－オクタオキサヘプタコサン－２７－オイック酸
ＰＥＧ１２ｃ　１－アミノ－３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４，２７，３０，３３，３６－ドデカオキサノナトリアコンタン－３９－オイック酸
Ｐ４Ｓｈ　ｃｉｓ－４－ヒドロキシ－Ｌ－プロリン（ＣＡＳ番号：６１８－２７－９）
ＳＭｅ　（Ｓ）－２－アミノ－３－メトキシプロパン酸（ＣＡＳ番号：３２６２０－１１－４）
Ｔｉｃ　Ｌ－１，２，３，４－テトラヒドロイソキノリン－３－カルボン酸（ＣＡＳ番号：７４１６３－８１－８）
３Ｐｙ　３－（３－ピリジル）－Ｌ－アラニン（ＣＡＳ番号：６４０９０－９８－８）
４Ｐｙ　３－（４－ピリジル）－Ｌ－アラニン（ＣＡＳ番号：３７５３５－４９－２）
ａｌＴ　アロ－スレオニン
ＨｙＰ　ヒドロキシプロリン
ＭｅＥ　Ｎ－メチルグルタミン酸

　以下，実施例に基づいて本発明を詳細に説明するが，本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。当業者は本明細書の記載に基づいて容易に本発明に修飾・変更を加えることができ，それらは本発明の技術的範囲に含まれる。

　化学合成
　以下の実施例における化学合成において使用された全ての原料，ビルディングブロック，試薬，酸，塩基，固相樹脂，溶媒は，市販品をそのまま用いたか，もしくは当業者にて有機化学的手法を用いて合成できるものである。なお，保護基を含むアミノ酸は特記が無い限り市販品をそのまま用いた。
　固相樹脂におけるペプチド鎖の伸長は，それぞれの実施例に記載された樹脂を出発原料とし，通常用いられるペプチドカップリング反応条件とＦｍｏｃ除去反応条件を用いて行った。反応はペプチド自動合成機であるＢｉｏｔａｇｅ社のＳｙｒｏ　Ｉ，Ｂｉｏｔａｇｅ社のＳｙｒｏ　ＩＩ，ＣＥＭ社のＬｉｂｅｒｔｙ　Ｂｌｕｅ，ＣＥＭ社のＬｉｂｅｒｔｙ　Ｂｌｕｅ　ＨＴ１２，又はＣＥＭ社のＬｉｂｅｒｔｙ　Ｐｒｉｍｅを使用し，製造元のマニュアルに従い行った。
　使用した樹脂は，ＮｏｖａＰＥＧ　Ｒｉｎｋ　Ａｍｉｄｅ　ｒｅｓｉｎ，又はＳｅｉｂｅｒ　Ａｍｉｄｅ　ｒｅｓｉｎを用い，使用した量は各ペプチドに応じて５ｍｇ－２ｇの範囲であった。
　側鎖の脱保護および固相樹脂からの切り出しに用いる反応剤カクテルは，各ペプチドに応じて４ｍＬ－５０ｍＬであり，以下の組成の溶液を用いた。
Ａ：ＴＦＡ／Ｈ_２Ｏ／ＴＩＳ／ＤＯＤＴ（９２．５／２．５／２．５／２．５）
Ｂ：ＴＦＡ／Ｈ_２Ｏ／ＴＩＳ／ＤＯＤＴ（９０／２．５／２．５／５）
　使用した一般的なアミノ酸を下記に列挙し，側鎖保護基はカッコ内に示した。
　Ｆｍｏｃ－Ａｌａ－ＯＨ；
　Ｆｍｏｃ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－ＯＨ；
　Ｆｍｏｃ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－ＯＨ；
　Ｆｍｏｃ－Ａｓｐ（ＯＭｐｅ）－ＯＨ；
　Ｆｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－ＯＨ；
　Ｆｍｏｃ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－ＯＨ；
　Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－ＯＨ；
　Ｆｍｏｃ－Ｇｌｙ－ＯＨ；
　Ｆｍｏｃ－Ｌｅｕ－ＯＨ；
　Ｆｍｏｃ－Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）－ＯＨ；
　Ｆｍｏｃ－Ｌｙｓ（Ｆｍｏｃ）－ＯＨ；
　Ｆｍｏｃ－Ｐｈｅ－ＯＨ；
　Ｆｍｏｃ－Ｐｒｏ－ＯＨ；
　Ｆｍｏｃ－Ｓｅｒ（ｔＢｕ）－ＯＨ；
　Ｆｍｏｃ－Ｓｅｒ（Ｔｒｔ）－ＯＨ；
　Ｆｍｏｃ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＯＨ；
　Ｆｍｏｃ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－ＯＨ；
　Ｆｍｏｃ－Ｔｙｒ（ｔＢｕ）－ＯＨ；
　Ｆｍｏｃ－Ｖａｌ－ＯＨ。

　得られた粗精製ペプチドの精製方法としては，特に記載がない限り，以下ａ）／ｂ）／ｃ）／ｄ）のいずれかの逆相分取精製装置を用いた。
ａ）：Ｓｈｉｍａｄｚｕ　ｐｒｅｐ－ＨＰＬＣ　ｓｙｓｔｅｍ　（ＬＣ－２０ＡＰ，　ＳＰＤ－Ｍ２０Ａ，　ＣＴＯ－２０ＡＣ，　ａｎｄ　ＣＢＭ－２０Ａ）；
ｂ）：Ｗａｔｅｒｓ　ＡｕｔｏＰｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ　Ｓｙｓｔｅｍ；
ｃ）：Ｗａｔｅｒｓ　ＡｕｔｏＰｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ　Ｓｙｓｔｅｍ　ｗｉｔｈ　ＳＱＤ；
ｄ）：Ｗａｔｅｒｓ　Ｐｒｅｐａｒａｔｉｖｅ　ＨＰＬＣ　Ｓｙｓｔｅｍ；

　なお，使用したカラムを含む精製条件はそれぞれの実施例に示した。
　化学合成されたペプチドの構造決定は，目的配列に従って用いたアミノ酸と必要に応じて用いたビルディングブロックを考慮し計算された分子量を，質量スペクトル分析法におけるＥＳＩ－ＭＳ（＋）により確認した。なお，“ＥＳＩ－ＭＳ（＋）”とは，正イオンモードで実施したエレクトロスプレーイオン化質量スペクトル分析法を示す。検出された質量は“ｍ／ｚ”単位表記によって報告された。なお，分子量がおおよそ１０００より大きい化合物は，多価イオンとして高頻度で検出された。
　以下の実施例において合成されたペプチドの質量スペクトル分析には、特に記載がない限り，以下の基本分析装置および基本条件１または２を用いた。勾配Ｂ（％）はＸ／Ｙ／Ｚのいずれかの条件を用いて分析を行った。

　基本分析装置および基本条件１
　装置：Ｓｈｉｍａｄｚｕ　ＬＣ／ＭＳ　ｓｙｓｔｅｍ　（ＬＣ－２０ＡＤＸＲ，　ＣＴＯ－２０ＡＣ，　ＳＰＤ－Ｍ２０Ａ，　ＳＩＬ－２０ＡＸＲ，　ＣＢＭ－２０Ａ　ａｎｄ　ＬＣＭＳ－２０２０）
カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ　ＥＶＯ　Ｃ１８　２．６μｍ　２．１　ｘ　１５０ｍｍ，　１００Å
カラム温度：６０℃
移動相Ａ：０．０２５％　ＴＦＡ　ｉｎ　Ｈ_２Ｏ
移動相Ｂ：０．０２５％　ＴＦＡ　ｉｎ　ＭｅＣＮ
流速：０．５ｍＬ／ｍｉｎ
波長：２２５ｎｍ　ＰＤＡ
勾配Ｂ（％）：Ｘ：２０－６０％／７．１５ｍｉｎ，６０－９５％／０．３ｍｉｎ，９５－９５％／１．５５ｍｉｎ；Ｙ：５－４５％／７．１５ｍｉｎ，４５－９５％／０．３ｍｉｎ，９５－９５％／１．５５ｍｉｎ

　基本分析装置および基本条件２
装置：　ＵＰＬＣ　Ｈ－Ｃｌａｓｓ　ｗｉｔｈ　ＳＱＤ２　ｍａｓｓ　ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｅｒ　（Ｗａｔｅｒｓ）
カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ　ＥＶＯ　Ｃ１８　１．７μｍ　２．１　ｘ　５０ｍｍ，　１００Å
カラム温度：６０℃
移動相Ａ：０．０２５％　ＴＦＡ　ｉｎ　Ｈ_２Ｏ
移動相Ｂ：０．０２５％　ＴＦＡ　ｉｎ　ＭｅＣＮ
流速：０．６ｍＬ／ｍｉｎ
波長：２２０ｎｍ
勾配Ｂ（％）：Ｚ：５－９５％／２．１０ｍｉｎ，９５－９５％／０．７５ｍｉｎ

　実施例１　ペプチド複合体（ダイマー構造番号２）の合成
　本実施例では，以下の構造を有するペプチド複合体（ペプチド配列番号３とリンカー構造番号２の複合体であり，表３のダイマー構造番号２）を合成した。当該ペプチド複合体は，実施例１－１又は実施例１－２のいずれの方法を用いても合成することができる。

実施例１－１
　ＮｏｖａＰＥＧ　Ｒｉｎｋ　ａｍｉｄｅ　ｒｅｓｉｎ　（Ｍｅｒｃｋ，　０．４９ｍｍｏｌ／ｇ）を用い，前述の一般的方法にてＦｍｏｃ基の除去から開始し，目的のペプチドを合成した。その際，Ｂｉｏｔａｇｅ社のＳｙｒｏ　ＩＩを固相合成機として使用し，製造元のマニュアルに従って合成を行った。各残基の導入には樹脂１当量に対し，Ｆｍｏｃ－ＡＡ／ＨＡＴＵ／ＤＩＥＡ　（１２．６当量／１１．２当量／２５．２当量）を用い２５℃下，６０分間２回反応を行った。ただしリンカー部分ＰＥＧ８ｃの導入は２５℃下，６０分間１回反応を行った。
　Ｆｍｏｃ除去は，２５℃下２０％ピペリジンのＤＭＦ溶液と５分間反応させた後，溶液を除去後，再度２５℃下２０％ピペリジンのＤＭＦ溶液と１５分間反応させた。
　クロロアセチル基の導入は，前工程で得られたＦｍｏｃ保護されたペプチドが保持された固相樹脂に対し，前述した方法でα－アミノ基のＦｍｏｃ基を除去したのち，クロロ酢酸（１２．６当量）のＤＭＦ溶液，ＨＣＴＵ（１２当量）のＤＭＦ溶液，ＤＩＥＡ（２５当量）のＤＭＦ溶液を固相樹脂に加え室温にて３０分振盪することにより行った。
　側鎖の脱保護および固相樹脂からの切り出しは，まずクロロアセチル基導入工程後に得られた樹脂をＤＭＦで５回と塩化メチレンで３回洗浄した後，減圧下乾燥し，続いて固相樹脂の入った反応容器に，反応剤カクテル－Ａ（ＴＦＡ／Ｈ_２Ｏ／ＴＩＳ／ＤＯＤＴの体積比９２．５：２．５：２．５：２．５の混合物）を加え，室温で６０分振盪した。反応液をフリットより濾過回収した。この濾液を冷やした過剰のジイソプロピルエーテルに加えると白濁沈殿が生じ，この混合物を遠心分離し，溶液をデカンテーションした。得られた固体を再度冷やした少量のジエチルエーテル／ヘキサン（１／１）の混合溶媒にて洗浄後，減圧下乾燥した。得られた固体を次の環化反応に用いた。
　ペプチドの環化反応は，ペプチドの終濃度が固相樹脂のモル数を基に２．５ｍＭとなるようにＤＭＳＯに溶解後，トリエチルアミン（１０当量）を加えて，室温で終夜振盪した。得られた反応溶液をＧｅｎｅｖａｃ　ＥＺ－２　Ｅｌｉｔｅを用いてペプチド濃度が２５ｍＭになるように減圧濃縮した。
　得られた上記反応溶液はギルソン社のカラムを用い固相抽出した（カラム：Ｇｉｌｓｏｎ　ＡＳＰＥＣ　Ｃ１８　５０ｍｇ　１ｍＬ）：（１）カラムを抽出液Ａ（０．１％　ＴＦＡ　ｉｎ　９５％ＭｅＣＮ／Ｈ_２Ｏ，０．３ｍＬ）で洗浄した。（２）抽出液Ｂ（０．１％　ＴＦＡ　ｉｎ　５％ＭｅＣＮ／Ｈ_２Ｏ，０．３ｍＬ）でカラムを平衡化した。（３）上記反応溶液０．０２ｍＬをカラムにローディングした。（４）抽出液Ｂ（０．４ｍＬ）でカラムを洗浄した。（５）抽出液Ａ（０．４ｍＬ）で抽出した。得られた抽出液をＥＺ－２　Ｅｌｉｔｅを用いて減圧濃縮した。
　目的物の主たるピークの一つの純度は以下の分析条件のＬＣ／ＭＳ（ＵＶ波長２２０ｎｍ）クロマトグラムの面積比から算出し５５．３％であった。　
　分析条件：保持時間＝１．５２分；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ　ＥＶＯ　Ｃ１８　１．７μｍ　２．１　ｘ　５０ｍｍ，　１００Å；移動相：Ａ　＝　０．０２５％　ＴＦＡ　ｉｎ　Ｈ_２Ｏ，Ｂ　＝　０．０２５％　ＴＦＡ　ｉｎ　ＭｅＣＮ；温度：６０℃；グラジエント（％Ｂ　ｃｏｎｃ）：２．１０分間かけて５－９５％，その後０．７５分間かけて　９５－９５％；流速：０．６ｍＬ／分
ＥＳＩ－ＭＳ（＋）　観測値ｍ／ｚ＝　１２７４．４（Ｍ＋４Ｈ）４＋．

　実施例１－２
　ＮｏｖａＰＥＧ　Ｒｉｎｋ　ａｍｉｄｅ　ｒｅｓｉｎ　（Ｍｅｒｃｋ，　０．４９ｍｍｏｌ／ｇ）を用い，前述の一般的方法にてＦｍｏｃ基の除去から開始し，目的のペプチドを合成した。その際，Ｂｉｏｔａｇｅ社のＳｙｒｏ　Ｉを固相合成機として使用し，製造元のマニュアルに従って合成を行った。各残基の導入には樹脂１当量に対し，Ｆｍｏｃ－ＡＡ／ＨＡＴＵ／ＤＩＥＡ　（８．４当量／８当量／１６当量）を用いＤＭＦ中７５℃下，２０分間２回反応を行った。ただし１５残基目は室温下，２０分間１回反応を行った。１６残基目，リンカー部分ＰＥＧ８ｃ，およびＫの導入は７５℃下，２０分間１回反応を行った。
　Ｆｍｏｃ除去は，室温下２０％ピペリジンのＤＭＦ溶液と５分間反応させた後，溶液を除去後，再度室温下２０％ピペリジンのＤＭＦ溶液と１５分間反応させた。
　クロロアセチル基の導入は，前工程で得られたＦｍｏｃ保護されたペプチドが保持された固相樹脂に対し，前述した方法でα－アミノ基のＦｍｏｃ基を除去した後，クロロ酢酸（１０．６当量），ＤＩＰＣＩ（１０．５当量）とＨＯＳｕ（１０．６当量）をＤＣＭ中撹拌しＤＣＭと同量のＤＭＦを加えＣｌＡｃＯＳｕのＤＣＭ／ＤＭＦ溶液を調整したものを固相樹脂に加え室温にて１５０分間振盪することにより行った。
　側鎖の脱保護および固相樹脂からの切り出しは，まずクロロアセチル基導入工程後に得られた樹脂をＤＭＦで５回と塩化メチレンで３回洗浄した後，減圧下乾燥し，続いて固相樹脂の入った反応容器に，反応剤カクテル－Ａ（ＴＦＡ／Ｈ_２Ｏ／ＴＩＳ／ＤＯＤＴの体積比９２．５：２．５：２．５：２．５の混合物）を加え，室温で９０分振盪した。反応液をフリットより濾過回収した。この濾液を冷やした過剰のジイソプロピルエーテルに加えると白濁沈殿が生じ，この混合物を遠心分離し，溶液をデカンテーションした。得られた固体を再度冷やした少量のジエチルエーテルにて洗浄後，減圧下乾燥した。得られた固体を次の環化反応に用いた。
　ペプチドの環化反応は，ペプチドの終濃度が固相樹脂のモル数を基に１ｍＭとなるようにＤＭＳＯ／Ｈ_２Ｏ（９／１）に溶解後，トリエチルアミン（１０当量）を加えて，室温で３時間攪拌した。得られた反応溶液に酢酸を加えたのち、Ｇｅｎｅｖａｃ　ＨＴ－１２を用いて減圧濃縮した。

　得られた粗生成物を以下の条件を用いて精製した。（カラム：Ｗａｔｅｒｓ　ＸＢｒｉｄｇｅ（登録商標）　Ｃ１８，　５０　ｘ　１５０ｍｍ；移動相：Ａ　＝　０．１％　ＴＦＡ　ｉｎ　Ｈ_２Ｏ，Ｂ　＝　０．１％　ＴＦＡ　ｉｎ　ＭｅＣＮ；温度：４０℃；グラジエント（％Ｂ　ｃｏｎｃ）：３分間かけて１２－３７％，その後８分間かけて３７－４２％，その後１分間かけて４２－６０％；流速：１２０ｍＬ／分。
　目的物の純度は以下の分析条件のＬＣ／ＭＳ（ＵＶ波長２２５ｎｍ）クロマトグラムの面積比から算出し８５．０３％であった。
　分析条件：保持時間＝４．８２分；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ　ＥＶＯ　Ｃ１８，　２．６μｍ　２．１　ｘ　１５０ｍｍ，　１００Å；移動相：Ａ　＝　０．０２５％　ＴＦＡ　ｉｎ　Ｈ_２Ｏ，Ｂ　＝　０．０２５％　ＴＦＡ　ｉｎ　ＭｅＣＮ；温度：６０　℃；グラジエント（％Ｂ　ｃｏｎｃ）：７．１５分間かけて２０－６０％，その後０．３０分間かけて　６０－９５％，その後１．５５分間かけて９５－９５％；流速：０．５ｍＬ／分
　ＥＳＩ－ＭＳ（＋）　観測値ｍ／ｚ＝　１２７４．１（Ｍ＋４Ｈ）４＋．

　実施例２　ペプチド複合体（ダイマー構造番号４８）の合成　
　本実施例では，以下の構造を有するペプチド複合体（ペプチド配列番号１５とリンカー構造番号７の複合体であり，表３のダイマー構造番号４８）を合成した。

　Ｓｉｅｂｅｒ　ａｍｉｄｅ　ｒｅｓｉｎ　（渡辺化学，　０．５７ｍｍｏｌ／ｇ）を用い，前述の一般的方法にてＦｍｏｃ基の除去から開始し，目的のペプチドを合成した。その際，ＣＥＭ社のＬｉｂｅｒｔｙ　Ｂｌｕｅを固相合成機として使用し，製造元のマニュアルに従って合成を行った。各残基の導入には樹脂１等量に対し，Ｆｍｏｃ－ＡＡ／ＤＩＰＣＩ／Ｏｘｙｍａ　ｐｕｒｅ　（４．２当量／８当量／４当量）を用いＤＭＦ中７５℃下，１０分間１回反応を行った。ただし２残基目，３残基目，６残基目，７残基目は７５℃下，１０分間２回反応を行った。１５残基目は５０℃下，２０分間１回反応を行った。　Ｆｍｏｃ除去は，７５℃下２０％ピペリジンのＤＭＦ溶液と３分間反応させる条件を基本として用いた。ただし１残基目，５残基目は室温下２０％ピペリジンのＤＭＦ溶液と５分間反応させた後，溶液を除去後，再度室温下２０％ピペリジンのＤＭＦ溶液と１０分間反応させる条件を用いた。
　クロロアセチル基の導入は，前工程で得られたＦｍｏｃ保護されたペプチドが保持された固相樹脂に対し，前述した方法でα－アミノ基のＦｍｏｃ基を除去したのち，０．２Ｍ　クロロ酢酸（５当量）のＤＭＦ溶液，０．５Ｍ　ＨＡＴＵ（５当量）のＤＭＦ溶液，及び１Ｍ　ＤＩＥＡ（１０当量）のＤＭＦ溶液を固相樹脂に加え室温にて３０分間振盪することにより行った。
　側鎖の脱保護および固相樹脂からの切り出しは，まずクロロアセチル基導入工程後に得られた樹脂をＤＭＦで５回と塩化メチレンで３回洗浄した後，減圧下乾燥し，続いて固相樹脂の入った反応容器に，反応剤カクテル－Ａ（ＴＦＡ／Ｈ_２Ｏ／ＴＩＳ／ＤＯＤＴの体積比９２．５：２．５：２．５：２．５の混合物）を加え，室温で６０分間振盪した。反応液をフリットより濾過回収した。反応容器に残った固相樹脂は切り出し用カクテルと再度振盪し，フリットより溶液成分を回収，前述の濾液と混合した。この濾液を冷やした過剰のジエチルエーテル／ヘキサン（１／１）の混合溶媒に加えると白濁沈殿が生じ，この混合物を遠心分離し，溶液をデカンテーションした。得られた固体を再度冷やした少量のジエチルエーテルにて洗浄後，減圧下乾燥した。得られた固体を次の環化反応に用いた。
ペプチドの環化反応は，ペプチドの終濃度が固相樹脂のモル数を基に５ｍＭとなるようにＭｅＣＮ／Ｈ_２Ｏ（１／１）に溶解後，トリエチルアミン（１０当量）を加えて，室温で６時間振盪した。得られた反応溶液をＧｅｎｅｖａｃ　ＨＴ－１２を用いて減圧濃縮した。
　得られた粗生成物を以下の条件を用いて精製した。（カラム：Ｗａｔｅｒｓ　ＸＢｒｉｄｇｅ（登録商標）　Ｃ１８，　５０　ｘ　１５０ｍｍ；移動相：Ａ　＝　０．１％　ＴＦＡ　ｉｎ　Ｈ_２Ｏ，Ｂ　＝　０．１％　ＴＦＡ　ｉｎ　ＭｅＣＮ；温度：４０℃；グラジエント（％Ｂ　ｃｏｎｃ）：２分間５％，その後１分間かけて５－１９％，その後８分間かけて１９－２４％，その後１分間かけて２４－６０％；流速：１分間（２０ｍＬ／分），　その後１分間かけて（２０ｍＬ／分－１２０ｍＬ／分），　その後（１２０ｍＬ／分）。
　ここで得られた環状ペプチドをペプチドＡとし，その純度は以下の分析条件のＬＣ／ＭＳ（ＵＶ波長２２５ｎｍ）クロマトグラムの面積比から算出し９９．４３％であった。
　分析条件：保持時間＝４．５２分；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ　ＥＶＯ　Ｃ１８，　２．６μｍ　２．１　ｘ　１５０ｍｍ，　１００Å；移動相：Ａ　＝　０．０２５％　ＴＦＡ　ｉｎ　Ｈ_２Ｏ，Ｂ　＝　０．０２５％　ＴＦＡ　ｉｎ　ＭｅＣＮ；温度：６０　℃；グラジエント（％Ｂ　ｃｏｎｃ）：７．１５分間かけて５－４５％，その後０．３０分間かけて　４５－９５％，その後１．５５分間かけて９５－９５％；流速：０．５ｍＬ／分
　ＥＳＩ－ＭＳ（＋）　観測値ｍ／ｚ＝　７１０．４（Ｍ＋３Ｈ）３＋．
　ペプチド複合体の合成は，上記で得られたペプチドＡをペプチド複合体の終濃度が２５ｍＭとなるようにＤＭＦに溶解後，１０当量のトリエチルアミンを加えた後，０℃で０．５当量のＮＨＳ－ｃＰＥＧ１３ｃ－ＮＨＳを加え，室温で１時間振盪した。
　得られた粗生成物を以下の条件を用いて精製した（カラム：Ｗａｔｅｒｓ　ＸＢｒｉｄｇｅ（登録商標）　Ｃ１８，　３０　ｘ　１５０ｍｍ；移動相：Ａ　＝　０．１％　ＴＦＡ　ｉｎ　Ｈ_２Ｏ，Ｂ　＝　０．１％　ＴＦＡ　ｉｎ　ＭｅＣＮ；温度：５０　℃；グラジエント（％Ｂ　ｃｏｎｃ）：３分間かけて５－２６％，その後８分間かけて２６－３１％，その後１分間かけて３１－６０％；流速：４５ｍＬ／分。
　目的物の純度は以下の分析条件のＬＣ／ＭＳ（ＵＶ波長２２５ｎｍ）クロマトグラムの面積比から算出し９３．８８％であった。
　分析条件：保持時間＝６．０２分；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ　ＥＶＯ　Ｃ１８　２．６μｍ　２．１　ｘ　１５０ｍｍ，　１００Å；移動相：Ａ　＝　０．０２５％　ＴＦＡ　ｉｎ　Ｈ_２Ｏ，Ｂ　＝　０．０２５％　ＴＦＡ　ｉｎ　ＭｅＣＮ；温度：６０　℃；グラジエント（％Ｂ　ｃｏｎｃ）：７．１５分間かけて５－４５％，その後０．３０分間かけて　４５－９５％，その後１．５５分間かけて９５－９５％；流速：０．５ｍＬ／分
ＥＳＩ－ＭＳ（＋）　観測値ｍ／ｚ＝　１２２８．８（Ｍ＋４Ｈ）４＋．　

　実施例３　ペプチド複合体（ダイマー構造番号５７）の合成
　本実施例では，以下の構造を有するペプチド複合体（ペプチド配列番号１７とリンカー構造番号１４の複合体であり，表３のダイマー構造番号５７）を合成した。

　Ｓｉｅｂｅｒ　ａｍｉｄｅ　ｒｅｓｉｎ　（渡辺化学，０．５７ｍｍｏｌ／ｇ）を用い，前述の一般的方法にてＦｍｏｃ基の除去から開始し，目的のペプチドを合成した。その際，ＣＥＭ社のＬｉｂｅｒｔｙ　Ｂｌｕｅを固相合成機として使用し，製造元のマニュアルに従って合成を行った。各残基の導入には樹脂１等量に対し，Ｆｍｏｃ－ＡＡ／ＤＩＰＣＩ／Ｏｘｙｍａ　ｐｕｒｅ　（４．２当量／８当量／４当量）を用いＤＭＦ中７５℃下、１０分間１回反応を行った。ただし２残基目，６残基目は７５℃下，１０分間２回反応を行った。１５残基目は５０℃下，１５分間，又は２０分間１回反応を行った。
　Ｆｍｏｃ除去は，室温下２０％ピペリジンのＤＭＦ溶液と５分間反応させた後，溶液を除去後，再度室温下２０％ピペリジンのＤＭＦ溶液と１０分間反応させる条件，又は７５℃下２０％ピペリジンのＤＭＦ溶液と３分間反応させる条件を用いた。
　クロロアセチル基の導入は，前工程で得られたＦｍｏｃ保護されたペプチドが保持された固相樹脂に対し，前述した方法でα－アミノ基のＦｍｏｃ基を除去した後，クロロ酢酸（５当量），ＤＩＰＣＩ（５当量）とＨＯＳｕ（５当量）をＤＣＭ中撹拌しＤＣＭと同量のＤＭＦを加えＣｌＡｃＯＳｕのＤＣＭ／ＤＭＦ溶液を調整したものを固相樹脂に加え室温にて６０分間振盪することにより行った。
　側鎖の脱保護および固相樹脂からの切り出しは，まずクロロアセチル基導入工程後に得られた樹脂をＤＭＦで５回と塩化メチレンで３回洗浄した後，減圧下乾燥し，続いて固相樹脂の入った反応容器に，反応剤カクテル－Ｂ（ＴＦＡ／Ｈ_２Ｏ／ＴＩＳ／ＤＯＤＴの体積比９０：２．５：２．５：５の混合物）を加え，室温で９０分間振盪した。反応液をフリットより濾過回収した。反応容器に残った固相樹脂は切り出し用カクテルと再度振盪し，フリットより溶液成分を回収，前述の濾液と混合した。この濾液を０℃に冷やした過剰のジイソプロピルエーテル／ヘキサン（１／１）の混合溶液に加えると白濁沈殿が生じ，この混合物を遠心分離し，溶液をデカンテーションした。得られた固体を再度０℃に冷やした少量のジエチルエーテルにて洗浄後，減圧下乾燥した。得られた固体を次の環化反応に用いた。
　ペプチドの環化反応は，ペプチドの終濃度が固相樹脂のモル数を基に５ｍＭとなるようにＤＭＳＯ／Ｈ_２Ｏ（９／１）に溶解後，トリエチルアミン（１０当量）を加えて，室温で１０時間振盪した。得られた反応溶液をＧｅｎｅｖａｃ　ＨＴ－１２を用いて減圧濃縮した。
　得られた粗生成物を以下の条件を用いて精製した（カラム：Ｗａｔｅｒｓ　ＸＢｒｉｄｇｅ（登録商標）　Ｃ１８，　５０　ｘ　１５０ｍｍ；移動相：Ａ　＝　０．１％　ＴＦＡ　ｉｎ　Ｈ_２Ｏ，Ｂ　＝　０．１％　ＴＦＡ　ｉｎ　ＭｅＣＮ；温度：４０℃；グラジエント（％Ｂ　ｃｏｎｃ）：２分間５％，その後１分間かけて５－１９％，その後８分間かけて１９－２４％，その後１分間かけて２４－６０％；流速：１分間（２０ｍＬ／分），　その後１分間かけて（２０ｍＬ／分－１２０ｍＬ／分），　その後（１２０ｍＬ／分）。
　ここで得られた環状ペプチドをペプチドＢとし，その純度は以下の分析条件のＬＣ／ＭＳ（ＵＶ波長２２５ｎｍ）クロマトグラムの面積比から算出し９９．６９％であった。
　分析条件：保持時間＝４．５１分；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ　ＥＶＯ　Ｃ１８　２．６μｍ　２．１　ｘ　１５０ｍｍ，　１００Å；移動相：Ａ　＝　０．０２５％　ＴＦＡ　ｉｎ　Ｈ_２Ｏ，Ｂ　＝　０．０２５％　ＴＦＡ　ｉｎ　ＭｅＣＮ；温度：６０　℃；グラジエント（％Ｂ　ｃｏｎｃ）：７．１５分間かけて５－４５％，その後０．３０分間かけて　４５－９５％，その後１．５５分間かけて９５－９５％；流速：０．５ｍＬ／分
　ＥＳＩ－ＭＳ（＋）　観測値ｍ／ｚ＝　７２４．４（Ｍ＋３Ｈ）３＋．
　ペプチド複合体の合成は，上記で得られたペプチドＢをペプチド複合体の終濃度が２５ｍＭとなるようにＤＭＦに溶解後，１０当量のトリエチルアミンを加えた後，０℃で０．５当量のＮＨＳ－ＯＣＯＰＥＧ１３ＯＣＯ－ＮＨＳを加え，室温で１時間振盪した。
　得られた混合物は以下の条件を用いて精製した（カラム：Ｗａｔｅｒｓ　ＸＢｒｉｄｇｅ（登録商標）　Ｃ１８，　３０　ｘ　１５０ｍｍ；移動相：Ａ　＝　０．１％　ＴＦＡ　ｉｎ　Ｈ_２Ｏ，Ｂ　＝　０．１％　ＴＦＡ　ｉｎ　ＭｅＣＮ；温度：５０　℃；グラジエント（％Ｂ　ｃｏｎｃ）：３分間かけて５－２６％，その後８分間かけて２６－３１％，その後１分間かけて３１－６０％；流速：４５ｍＬ／分）。
　目的物の純度は以下の分析条件のＬＣ／ＭＳ（ＵＶ波長２２５ｎｍ）クロマトグラムの面積比から算出し９１．０４％であった。　
　分析条件：保持時間＝５．９５分；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ　ＥＶＯ　Ｃ１８　２．６μｍ　２．１　ｘ　１５０ｍｍ，　１００Å；移動相：Ａ　＝　０．０２５％　ＴＦＡ　ｉｎ　Ｈ_２Ｏ，Ｂ　＝　０．０２５％　ＴＦＡ　ｉｎ　ＭｅＣＮ；温度：６０　℃；グラジエント（％Ｂ　ｃｏｎｃ）：７．１５分間かけて５－４５％，その後０．３０分間かけて４５－９５％，その後１．５５分間かけて９５－９５％；流速：０．５ｍＬ／分
　ＥＳＩ－ＭＳ（＋）　観測値ｍ／ｚ＝　１２３５．７（Ｍ＋４Ｈ）４＋．　

　実施例４　ペプチド複合体（ダイマー構造番号４０）の合成
　本実施例では，以下の構造を有するペプチド複合体ペプチド配列番号３６とリンカー構造番号４の複合体であり，表３のダイマー構造番号４０）を合成した。

　Ｓｉｅｂｅｒ　ａｍｉｄｅ　ｒｅｓｉｎ　（渡辺化学，　０．４８ｍｍｏｌ／ｇ）を用い，前述の一般的方法にてＦｍｏｃ基の除去から開始し，目的のペプチドを合成した。その際，ＣＥＭ社のＬｉｂｅｒｔｙ　Ｂｌｕｅを固相合成機として使用し，製造元のマニュアルに従って合成を行った。各残基の導入には樹脂１等量に対し，Ｆｍｏｃ－ＡＡ／ＤＩＰＣＩ／Ｏｘｙｍａ　ｐｕｒｅ　（４．２当量／８当量／４当量）を用いＤＭＦ中９０℃下、３分間１回反応を行った。ただし２残基目，３残基目，６残基目，７残基目は９０℃下，３分間２回反応を行った。１５残基目は５０℃下，１５分間１回反応を行った。
　Ｆｍｏｃ除去は，室温下１０％ピロリジンのＤＭＦ溶液と１分間反応させた後，溶液を除去後，再度室温下１０％ピロリジンのＤＭＦ溶液と１分間反応させる条件，又は９０℃下１０％ピロリジンのＤＭＦ溶液と１分間反応させる条件を用いた。
　クロロアセチル基の導入は前工程で得られたＦｍｏｃ保護されたペプチドが保持された固相樹脂に対し，前述した方法でα－アミノ基のＦｍｏｃ基を除去したのち，０．２Ｍ　クロロ酢酸（５当量）のＤＭＦ溶液，０．５Ｍ　ＨＡＴＵ（５当量）のＤＭＦ溶液，及び１Ｍ　ＤＩＥＡ（１０当量）のＤＭＦ溶液を固相樹脂に加え室温にて３０分振盪することにより行った。
　側鎖の脱保護および固相樹脂からの切り出しは，まずクロロアセチル基導入工程後に得られた樹脂をＤＭＦで５回と塩化メチレンで３回洗浄した後，減圧下乾燥し，続いて固相樹脂の入った反応容器に，反応剤カクテル－Ａ（ＴＦＡ／Ｈ_２Ｏ／ＴＩＳ／ＤＯＤＴの体積比９２．５：２．５：２．５：２．５の混合物）を加え，室温で９０分間振盪した。反応液をフリットより濾過回収した。反応容器に残った固相樹脂は切り出し用カクテルと再度振盪し，フリットより溶液成分を回収，前述の濾液と混合した。この濾液を冷やした過剰のジエチルエーテル／ヘキサン（１／１）の混合溶媒に加えると白濁沈殿が生じ，この混合物を遠心分離し，溶液をデカンテーションした。得られた固体を再度０℃に冷やした少量のジエチルエーテルにて洗浄後，減圧下乾燥した。得られた固体を次の環化反応に用いた。
　ペプチドの環化反応は，ペプチドの終濃度が固相樹脂のモル数を基に２．５ｍＭとなるようにＤＭＳＯ／Ｈ_２Ｏ（９／１）に溶解後，トリエチルアミン（１０当量）を加えて，室温で４時間振盪した。得られた反応溶液をＧｅｎｅｖａｃ　ＥＺ－２　Ｅｌｉｔｅを用いて減圧濃縮した。得られた粗生成物をペプチド複合体の合成に用いた。
　ペプチド複合体の合成は，ペプチドの終濃度が固相樹脂のモル数を基に２５ｍＭとなるようにＤＭＳＯに溶解後，ＮＨＳ－ｃＰＥＧ１ｃ－ＮＨＳ（０．４６当量），及びＤＩＥＡ（５当量）を加えて室温で２時間振盪した後，酢酸を加えた。
　得られた粗生成物を以下の条件を用いて精製した（カラム：Ｗａｔｅｒｓ　ＸＢｒｉｄｇｅ（登録商標）　Ｃ１８，　３０　ｘ　１５０ｍｍ；移動相：Ａ　＝　０．１％　ＴＦＡ　ｉｎ　Ｈ_２Ｏ，Ｂ　＝　０．１％　ＴＦＡ　ｉｎ　ＭｅＣＮ；温度：５０　℃；グラジエント（％Ｂ　ｃｏｎｃ）：０．１分間かけて５－１．１％，その後４．９分間かけて１．１％，その後１分間かけて１．１－５％，その後３分間かけて５－３０．６％，その後９分間かけて３０．６－３５．７％，その後１分間かけて３５．７－６０％；流速：０．１分間かけて（４４ｍＬ／分－９ｍＬ／分），　その後４．９分間（９ｍＬ／分），その後１分間かけて（９ｍＬ／分－４４ｍＬ／分），　その後（４４ｍＬ／分）
　目的物の純度は以下の分析条件のＬＣ／ＭＳ（ＵＶ波長２２５ｎｍ）クロマトグラムの面積比から算出し７９．８７％であった。
　分析条件：保持時間＝３．７５分；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ　ＥＶＯ　Ｃ１８　２．６　μｍ　２．１　ｘ　１５０ｍｍ，　１００Å；移動相：Ａ　＝　０．０２５％　ＴＦＡ　ｉｎ　Ｈ_２Ｏ，Ｂ　＝　０．０２５％　ＴＦＡ　ｉｎ　ＭｅＣＮ；温度：６０　℃；グラジエント（％Ｂ　ｃｏｎｃ）：７．１５分間かけて２０－６０％，その後０．３０分間かけて　６０－９５％，その後１．５５分間かけて９５－９５％；流速：０．５ｍＬ／分
　ＥＳＩ－ＭＳ（＋）　観測値ｍ／ｚ＝　１３４１．８（Ｍ＋４Ｈ）４＋．

　実施例５　各種ペプチド合成
　本実施例では，実施例１～４と同様に，各種ペプチド複合体を化学合成した。合成した環状ペプチドの配列を表１，リンカーの構造を表２，環状ペプチドがリンカーを介してダイマー化したペプチド複合体を表３に示す。
合成したペプチド複合体は，実施例１～４に記載する分析条件で分析し，質量スペクトル分析法におけるＥＳＩ－ＭＳ（＋）により構造を確認した。得られたＥＳＩ－ＭＳ（＋）観測値と保持時間，その場合における価数を表３に示す。

　実施例６　ｐＥＲＫ　ＡｌｐｈａＬＩＳＡアッセイによるＴｒｋＢアゴニスト活性評価
　本発明のＴｒｋＢアゴニストペプチドのＴｒｋＢの活性化能を評価する為に，ＥＲＫのリン酸化を検証した。ＣｅｌｌＳｅｎｓｏｒ（登録商標）　ＴｒｋＢ－ＮＦＡＴ－ｂｌａ　ＣＨＯ－Ｋ１　Ｃｅｌｌ　（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を１０％　ＦＢＳ　（Ｔｈｅｒｍｏ）と１×Ｎｏｎ－ｅｓｓｅｎｔｉａｌ　ａｍｉｎｏ　ａｃｉｄｓ（Ｔｈｅｒｍｏ），　２５ｍＭ　ＨＥＰＥＳ（Ｔｈｅｒｍｏ），　５０ｕｇ／ｍＬ　Ｇｅｎｔａｍｉｃｉｎ，　５ｕｇ／ｍＬ　Ｂｌａｓｔｉｃｉｄｉｎ　（Ｔｈｅｒｍｏ）　，２００ｕｇ／ｍＬ　Ｚｅｏｃｉｎ　（Ｔｈｅｒｍｏ）を含むＤＭＥＭ，　ｈｉｇｈ　ｇｌｕｃｏｓｅ，　ＧｌｕｔａＭＡＸ（登録商標）　Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ，　ｐｙｒｕｖａｔｅ（Ｔｈｅｒｍｏ）で培養した。Ａｃｃｕｔａｓｅ（Ｉｎｎｏｖａｔｉｖｅ　ｃｅｌｌ　ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を用いて細胞を剥離後，１ウェルあたり１２５００細胞となるように接着細胞用９６穴プレートに播種し，一晩培養した。翌日スタベーションの為上記の培養液からＦＢＳとＢｌａｓｔｉｃｉｄｉｎ，　Ｚｅｏｃｉｎを除いた培地に０．１％　ＢＳＡ　（Ｓｉｇｍａ）が含まれた栄養飢餓培地に交換し４時間培養した。その後Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ　Ｈｕｍａｎ　ＢＤＮＦ　Ｐｒｏｔｅｉｎ　（Ｒ＆Ｄ　ｓｙｓｔｅｍｓ）もしくはペプチドを加え，１５分刺激後，ＡｌｐｈａＬＩＳＡ　ＳｕｒｅＦｉｒｅ　Ｕｌｔｒａ　ｐ－Ｅｒｋ１／２　（Ｔｈｒ２０２／Ｔｙｒ２０４）　Ａｓｓａｙ　キット　（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）に付属するＬｙｓｉｓ　Ｂｕｆｆｅｒで細胞を溶解した。キットのプロトコールに沿って実施し，シグナルの検出にはＳｐｅｃｔｒａＭａｘ　Ｐａｒａｄｉｇｍ　ｍｕｌｔｉｍｏｄｅ　ｍｉｃｒｏｐｌａｔｅ　ｒｅａｄｅｒ　（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　Ｄｅｖｉｃｅｓ）を使用した。得られたシグナルをＧｒａｐｈＰａｄ　Ｐｒｉｓｍで解析し，ＢＤＮＦで誘導されるシグナルの最大値を１００％，無刺激を０％として％　ａｃｔｉｖｉｔｙを計算した。ペプチドを１ｎＭ添加時に５０％以上活性があるものをＡ、１０ｎＭ添加時に５０％以上活性があるものをＢとした。
　ＢＤＮＦの添加濃度は１０ｎＭから４倍希釈で８点（０．０００６ｎＭ～１０ｎＭ）で評価した。
ペプチドの添加濃度はダイマー構造番号１～３については１，１０，１００ｎＭ，それ以外については　０．１，１，１０ｎＭで評価した。また濃度依存性曲線作成時は１００ｎＭから４倍希釈で８点（０．００６ｎＭ～１００ｎＭ）で評価した。

　結果を表４及び図１に示す。表４に示されたとおり，合成したペプチド複合体はＴｒｋＢアゴニスト活性を有することが示された。また，図１に示されたとおり，合成したペプチド複合体（表３におけるダイマー構造番号４８及び５６）は脳由来神経栄養因子（ＢＤＮＦ）と同様のＴｒｋＢアゴニスト活性を有することが示された。

　実施例７　ＮＦＡＴアッセイによるＴｒｋＢアゴニスト活性評価
　本発明のＴｒｋＢアゴニストペプチドのＴｒｋＢの活性化能を評価する為に，レポーターによる転写活性を検証した。ＡｌｐｈａＬＩＳＡで使用したＣｅｌｌＳｅｎｓｏｒ（登録商標）　ＴｒｋＢ－ＮＦＡＴ－ｂｌａ　ＣＨＯ－Ｋ１　Ｃｅｌｌ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を上記の培地で培養した。Ａｃｃｕｔａｓｅ（Ｉｎｎｏｖａｔｉｖｅ　ｃｅｌｌ　ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を用いて細胞を剥離後，１ウェルあたり１２５００細胞となるように，培地からＢｌａｓｔｉｃｉｄｉｎとＺｅｏｃｉｎを除いたアッセイ用培地で懸濁後，接着細胞用９６穴プレートに播種し，一晩培養した。その後，ＢＤＮＦまたはペプチドを入れてＣＯ_２インキュベーターで５時間培養した。インキュベーターから取り出し室温に戻した後，遮光下で検出試薬（ＬｉｖｅＢＬＡｚｅｒ（登録商標）－ＦＲＥＴ　Ｂ／Ｇ　（ＣＣＦ４－ＡＭ）　Ｓｕｂｓｔｒａｔｅ　Ｍｉｘｔｕｒｅ）を加えて，蓋をして湿箱内で遮光下２時間インキュベートした。シグナルの検出にはＭｕｌｔｉｌａｂｅｌ　Ｒｅａｄｅｒ　Ｅｎｖｉｓｉｏｎ　２１０４　（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）を使用し，４６０ｎｍ／５３５ｎｍ励起シグナルを算出した。得られた数値をＧｒａｐｈＰａｄ　Ｐｒｉｓｍで解析し，ＢＤＮＦで誘導されるシグナルの最大値を１００％，無刺激を０％として％　ａｃｔｉｖｉｔｙを計算した。ペプチドを１ｎＭ添加時に５０％以上活性があるものをＡ、１０ｎＭ添加時に５０％以上活性があるものをＢ、１００ｎＭ添加時に５０％以上活性があるものをＣとした。また評価を実施しなかったものについてはｎｏｔ　ｔｅｓｔｅｄとした。
ＢＤＮＦの添加濃度は１０ｎＭから４倍希釈で７点（０．００２４ｎＭ～１０ｎＭ）で評価した。
ペプチドの添加濃度はダイマー構造番号１～３は１，１０，１００ｎＭ，それ以外は　０．１，１，１０ｎＭで評価した。また濃度依存性曲線作成時は２５ｎＭから４倍希釈で７点（０．００６ｎＭ～１００ｎＭ）で評価した。

　結果を表４及び図２に示す。表４に示されたとおり，合成したペプチド複合体はＴｒｋＢアゴニスト活性を有することが示された。また，図２に示されたとおり，合成したペプチド複合体（表３におけるダイマー構造番号４８及び５６）は脳由来神経栄養因子（ＢＤＮＦ）と同様のＴｒｋＢアゴニスト活性を有することが示された。

　実施例８　ＰａｔｈＨｕｎｔｅｒアッセイによるＴｒｋＢアゴニスト活性評価
　本発明のＴｒｋＢアゴニストペプチドのＴｒｋＢの活性化能を評価する為に，ＴｒｋＢのリン酸化を検証した。ＰａｔｈＨｕｎｔｅｒ（登録商標）　ｅＸｐｒｅｓｓ　ＴｒｋＢ　Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　Ａｓｓａｙ　キット（ＤｉｓｃｏｖｅＲｘ社；　細胞，９６穴プレート，培地，検出試薬付属）を用いて添付のプロトコールに沿って実施し評価した。凍結細胞を融解し培地で懸濁後９６穴プレートに１ウェルあたり１００００細胞播種し，４８時間培養した。その後Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ　Ｈｕｍａｎ　ＢＤＮＦ　Ｐｒｏｔｅｉｎ　（Ｒ＆Ｄ　ｓｙｓｔｅｍｓ）もしくはペプチドを加え３時間刺激後，検出試薬を加えた。遮光下室温で６０分反応させて，ＳｐｅｃｔｒａＭａｘ　Ｐａｒａｄｉｇｍ　ｍｕｌｔｉｍｏｄｅ　ｍｉｃｒｏｐｌａｔｅ　ｒｅａｄｅｒ　（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　Ｄｅｖｉｃｅｓ）で発光シグナルを測定した。得られたシグナルをＧｒａｐｈＰａｄ　Ｐｒｉｓｍで解析し，ＢＤＮＦで誘導されるシグナルの最大値を１００％，無刺激を０％として％　ａｃｔｉｖｉｔｙを計算した。
ＢＤＮＦの添加濃度は１００ｎＭから４倍希釈で８点（０．００６ｎＭ～１００ｎＭ）で評価し，ペプチドの添加濃度は以下に示すＡ～Ｃの測定レンジで評価した。
測定レンジＡ＝１００ｎＭから５倍希釈で６点（０．０３２ｎＭ～１００ｎＭ）
測定レンジＢ＝１００ｎＭから４倍希釈で８点（０．００６１０４ｎＭ～１００ｎＭ）
測定レンジＣ＝１０ｎＭから１０倍希釈で４点（０．０１ｎＭ～１０ｎＭ）

　結果を表５及び図３に示す。表５に示されたとおり，合成したペプチド複合体はＴｒｋＢアゴニスト活性を有することが示された。また，図３に示されたとおり，合成したペプチド複合体（表３におけるダイマー構造番号４８及び５６）は脳由来神経栄養因子（ＢＤＮＦ）と同様のＴｒｋＢアゴニスト活性を有することが示された。

　実施例９　表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）によるＴｒｋＡ，ＴｒｋＢ，ＴｒｋＣとペプチドとの分子間相互作用評価試験
　本実施例では，合成したペプチド複合体（表３におけるダイマー構造番号４８及び５６）について，ＴｒｋＡ，ＴｒｋＢ，ＴｒｋＣに対するペプチドの表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）による分子間相互作用を，以下に示す方法によって試験を実施した。具体的な試験方法を以下に示す。
［ＳＰＲ測定］
　ＢｉａｃｏｒｅＴ２００（Ｃｙｔｉｖａ）にＣＭ５センサーチップ（Ｃｙｔｉｖａ）を挿入し，ランニング緩衝液：ＨＢＳ－ＥＰ＋（Ｃｙｔｉｖａ）でプライム操作を３回実施し，流速３０μＬ／ｍｉｎで平衡化した。６０ｍＭ　ＥＤＣ溶液（Ｃｙｔｉｖａ），６５０ｍＭ　ＮＨＳ溶液（Ｃｙｔｉｖａ）を各々５０μＬずつ混合させた後，流速１０μＬ／ｍｉｎで４２０秒反応させた。１０ｍＭ　酢酸溶液（ｐＨ５．０）で希釈して３０ｎｇ／ｕＬＡｎｔｉ－ｈｕｍａｎＩｇＧ（Ｆｃ）ａｎｔｉｂｏｄｙ（Ｃｙｔｉｖａ）溶液１３５μＬ調製し，流速１０μＬ／ｍｉｎで３６０秒反応させＣＭ３センサーチップにＡｎｔｉ－ｈｕｍａｎＩｇＧ（Ｆｃ）ａｎｔｉｂｏｄｙを固定化した。固定化後，１．０Ｍ　エタノールアミン水溶液（Ｃｙｔｉｖａ）を流速１０μＬ／ｍｉｎで４２０秒反応させキャッピングを行った。流速１０μＬ／ｍｉｎで２００ｎＭ　Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ　Ｈｕｍａｎ　ＴｒｋＡ　Ｆｃ　Ｃｈｉｍｅｒａ　Ｐｒｏｔｅｉｎ，Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ　Ｈｕｍａｎ　ＴｒｋＢ　Ｆｃ　Ｃｈｉｍｅｒａ　Ｐｒｏｔｅｉｎ，Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ　Ｈｕｍａｎ　ＴｒｋＣ　Ｆｃ　Ｃｈｉｍｅｒａ　Ｐｒｏｔｅｉｎ（Ｒ＆Ｄ　ｓｙｓｔｅｍｓ）溶液を６０秒反応させ，キャプチャーさせた。ＤＭＳＯ溶液中で１０ｍＭに調製されたペプチド溶解液を，終濃度が１０μＭのペプチド溶解液になるようにランニング緩衝液で希釈した後，５０ｎＭ，２５ｎＭ，１２．５ｎＭ，５ｎＭ，２．５ｎＭのペプチド溶液を作製した。上述のサンプルを用い，ＴｒｋＡ，ＴｒｋＢ，ＴｒｋＣに対するペプチドのカイネティクスをＳＰＲ測定により取得した。ＴｒｋＡ，ＴｒｋＢ，ＴｒｋＣとペプチドを反応させた後，３Ｍ　ＭｇＣｌ溶液を１０μＬ／ｍｉｎで１８０秒反応させ，再生化を実施した。
　カイネティックス評価モデルは，Ｓｉｎｇｌｅ　Ｃｙｃｌｅ　Ｋｉｎｅｔｉｃｓとし，Ｂｉａｃｏｒｅ　Ｔ２００　Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ　Ｓｏｆｔｗａｒｅ　Ｖｅｒｓｉｏｎ　３．０（Ｃｙｔｉｖａ）を使用してカーブフィッティングを行った。得られたセンサーグラムに対して，最小二乗法によるカーブフィッティングを実施し，そのＫｄ値（解離定数）を求めることでペプチドのＴｒｋＡ，ＴｒｋＢ，ＴｒｋＣに対する結合を評価した。
　結果を図４に示す。図４に示されたとおり，合成したペプチド複合体（表３におけるダイマー構造番号４８および５６）はＴｒｋＡおよびＴｒｋＣへの結合は見られず，ＴｒｋＢに対してのみ結合が確認された。合成したペプチド複合体のＴｒｋＢへの結合において，ｋｏｆｆ（解離速度定数）が測定限界を超えたため，下限理論値ｋｏｆｆ：０．００００１（１／ｓ）を採用してＫｄを算出した。Ｋｄは１００ｐＭ以下であった。

　　この発明は，医薬産業や生物工学産業において利用されうる。

Claims

　第１のペプチドを含み，ＴｒｋＢ結合活性を有するペプチド複合体であって，
　前記第１のペプチドは，
　Ｘ^１－Ｘ^２－Ｘ^３－Ｘ^４－３Ｐｙ－Ｗ－Ｘ^５－Ｘ^６－Ｘ^７－Ｘ^８－Ｘ^９－Ｘ^１０－Ｖ－Ｘ^１１－Ｃ（配列番号１）で示されるアミノ酸配列を有するか，又は
　配列番号１で示されるアミノ酸配列において，１～４個のアミノ酸が，置換，欠失，付加又は挿入されたアミノ酸配列からなり，
　Ｘ^１は，側鎖に芳香族環を有するアミノ酸であり，
　Ｘ^２は，任意のアミノ酸であり，
　Ｘ^３は，２級アミノ酸であり，
　Ｘ^４は，側鎖に置換されていても良い芳香族環を有するアミノ酸であり，
　Ｘ^５は，２級アミノ酸であり，
　Ｘ^６は，側鎖に鎖状アルキル基を有するアミノ酸であり，
　Ｘ^７は，側鎖に置換されていても良い芳香族環を有するアミノ酸であり，
　Ｘ^８は，側鎖に鎖状アルキル基を有するアミノ酸であり，
　Ｘ^９は，任意のアミノ酸であり，
　Ｘ^１０は，側鎖に芳香族環を有するアミノ酸であり，
　Ｘ^１１は，任意のアミノ酸である，
　ペプチド複合体。
　請求項１に記載のペプチド複合体であって，
　Ｘ^２は，側鎖に鎖状または環状アルキル基を有するアミノ酸であり，
　Ｘ^３は，プロリン又はプロリン誘導体であり，
　Ｘ^４は，チロシン又はチロシンの側鎖の水酸基が他の官能基に置換されたアミノ酸であり，
　Ｘ^５は，プロリン又はプロリン誘導体であり，
　Ｘ^６は，側鎖に鎖状アルキル基と極性基を有するアミノ酸であり，
　Ｘ^７は，チロシン又はチロシンの側鎖の水酸基が他の官能基に置換されたアミノ酸であり，
　Ｘ^８は，側鎖に鎖状アルキル基と極性基を有するアミノ酸であり，
　Ｘ^９は，側鎖における官能基の炭素数が３以上のアミノ酸である，
　ペプチド複合体。
　請求項２に記載のペプチド複合体であって，
　Ｘ^２は，側鎖に極性基をさらに有するアミノ酸であり，
　Ｘ^６は，側鎖に鎖状アルキル基と水酸基を有するアミノ酸であり，
　Ｘ^７は，チロシン又はチロシンの側鎖の水酸基が他の官能基に置換されたアミノ酸であり，
　Ｘ^８は，側鎖に鎖状アルキル基と置換されても良い水酸基を有するアミノ酸であり，
　Ｘ^９は，側鎖に鎖状または環状アルキル基を有するアミノ酸である，
　ペプチド複合体。
　請求項１に記載のペプチド複合体であって，
　Ｘ^１は，４Ｐｙ又はＦであり，
　Ｘ^２は，ａｌＴ，Ｃｉｔ，Ｄ，Ｅ，Ｌ，Ｑ，又はＳであり，
　Ｘ^３は，Ｐ又はＰ４Ｓｈであり，
　Ｘ^４は，Ｆ４ＣＯＮ，Ｆ４ＣＯＯ，又はＹであり，
　Ｘ^５は，ＨｙＰ，Ｐ，又はＰ４Ｓｈであり，
　Ｘ^６は，Ｓ，又はＴであり，
　Ｘ^７は，Ｆ４ＣＯＮ，又はＹであり，
　Ｘ^８は，Ｓ，又はＳＭｅであり
　Ｘ^９は，Ａ４ｐａａ，Ａｔｐ，Ｅ，Ｈｇｌ，ＫＡｃ，又はＬであり，
　Ｘ^１０は，３Ｐｙ又は４Ｐｙであり，
　Ｘ^１１は，Ａ，Ｅ，ＭｅＥ，Ｐ，Ｓ，又はＷである，
　ペプチド複合体。
　請求項１に記載のペプチド複合体であって，
　前記第１のペプチドは，
　Ｆ－Ｌ－Ｐ－Ｙ－３Ｐｙ－Ｗ－Ｐ－Ｔ－Ｙ－Ｓ－Ｌ－３Ｐｙ－Ｖ－Ｗ－Ｃ（配列番号２）で示されるアミノ酸配列を有するか，又は
　配列番号２で示されるアミノ酸配列において，１～３個のアミノ酸が，置換，欠失，付加又は挿入されたアミノ酸配列からなる，
　ペプチド複合体。　
　請求項１に記載のペプチド複合体であって，
　前記第１のペプチドは，Ｃ末端にグリシンが付加したアミノ酸配列を有する，ペプチド複合体。
　請求項１に記載のペプチド複合体であって，
　前記第１のペプチドは，配列番号２～４１のいずれかで示されるアミノ酸配列からなるペプチドである，ペプチド複合体。
　請求項１に記載のペプチド複合体であって，
　前記第１のペプチドは，環状ペプチドである，ペプチド複合体。
　請求項１に記載のペプチド複合体であって，ＴｒｋＢアゴニスト活性を有するペプチド複合体。
　請求項１に記載のペプチド複合体であって，
　前記第１のペプチドは，Ｎ末端のアミノ酸残基がクロロアセチル化したアミノ酸残基であり，ペプチド内のシステイン残基を有し，前記Ｎ末端のアミノ酸残基と，前記システイン残基とが結合した環状ペプチドである，ペプチド複合体。
　請求項１に記載のペプチド複合体であって，
　前記ペプチド複合体は，前記第１のペプチドと第２のペプチドと，前記第１のペプチドと前記第２のペプチドを接続するリンカーとからなり，
　前記第２のペプチドは，前記第１のペプチドと同一でも異なってもよく，配列番号１で示されるアミノ酸配列を有するか，又は
　配列番号１で示されるアミノ酸配列において，１～４個のアミノ酸が，置換，欠失，付加又は挿入されたアミノ酸配列からなる，
　ペプチド複合体。
　請求項１１に記載のペプチド複合体であって，前記第１のペプチドと前記第２のペプチドの相同性が８０％以上１００％以下である，ペプチド複合体。
　請求項１１に記載のペプチド複合体であって，前記第１のペプチドと前記第２のペプチドが実質的に同じホモダイマーである，ペプチド複合体。
　請求項１１に記載のペプチド複合体であって，前記リンカーがＰＥＧリンカーである，ペプチド複合体。
　請求項１に記載のペプチド複合体と担体とを含む組成物。
　請求項１に記載のペプチド複合体と担体とを含み，医療用，診断用又は研究用に用いられる組成物。
　請求項１に記載のペプチド複合体と担体とを含み，細胞培養に用いられる細胞培養用組成物。