WO2022129663A1 - Nuevo biomaterial para ingeniería tisular - Google Patents
Nuevo biomaterial para ingeniería tisular Download PDFInfo
- Publication number
- WO2022129663A1 WO2022129663A1 PCT/ES2021/070889 ES2021070889W WO2022129663A1 WO 2022129663 A1 WO2022129663 A1 WO 2022129663A1 ES 2021070889 W ES2021070889 W ES 2021070889W WO 2022129663 A1 WO2022129663 A1 WO 2022129663A1
- Authority
- WO
- WIPO (PCT)
- Prior art keywords
- cell
- tissue
- ossicle
- ossicles
- cells
- Prior art date
Links
- 239000012620 biological material Substances 0.000 title abstract description 21
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 23
- 241000258955 Echinodermata Species 0.000 claims abstract description 13
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 61
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 claims description 49
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 claims description 29
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 22
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 claims description 17
- 230000002500 effect on skin Effects 0.000 claims description 13
- 210000001612 chondrocyte Anatomy 0.000 claims description 12
- 241000258195 Holothuria Species 0.000 claims description 11
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 claims description 10
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 claims description 9
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 claims description 9
- 210000002997 osteoclast Anatomy 0.000 claims description 9
- 210000002901 mesenchymal stem cell Anatomy 0.000 claims description 8
- 210000004409 osteocyte Anatomy 0.000 claims description 8
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 7
- 239000000730 antalgic agent Substances 0.000 claims description 7
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 claims description 7
- 230000005714 functional activity Effects 0.000 claims description 6
- 229960005475 antiinfective agent Drugs 0.000 claims description 5
- 210000000963 osteoblast Anatomy 0.000 claims description 5
- 108010073385 Fibrin Proteins 0.000 claims description 3
- 102000009123 Fibrin Human genes 0.000 claims description 3
- BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N Fibrin monomer Chemical compound CNC(=O)CNC(=O)CN BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000004599 antimicrobial Substances 0.000 claims description 3
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 3
- 210000001671 embryonic stem cell Anatomy 0.000 claims description 3
- 229950003499 fibrin Drugs 0.000 claims description 3
- 210000003958 hematopoietic stem cell Anatomy 0.000 claims description 2
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract description 15
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 abstract description 5
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 abstract description 2
- 241000251511 Holothuroidea Species 0.000 description 19
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 16
- 230000002924 anti-infective effect Effects 0.000 description 15
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 12
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 11
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 11
- 229940121363 anti-inflammatory agent Drugs 0.000 description 11
- 239000002260 anti-inflammatory agent Substances 0.000 description 11
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 9
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 8
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 8
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 8
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 7
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 7
- 210000000845 cartilage Anatomy 0.000 description 7
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 7
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 7
- 229940021182 non-steroidal anti-inflammatory drug Drugs 0.000 description 7
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 7
- 108090000379 Fibroblast growth factor 2 Proteins 0.000 description 6
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 6
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 6
- 230000008569 process Effects 0.000 description 6
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 6
- 206010061363 Skeletal injury Diseases 0.000 description 5
- 229940035676 analgesics Drugs 0.000 description 5
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- -1 antianaerobics Substances 0.000 description 5
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 description 5
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 5
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 5
- 210000002303 tibia Anatomy 0.000 description 5
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 5
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 4
- 208000010392 Bone Fractures Diseases 0.000 description 4
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 102000000634 Cytochrome c oxidase subunit IV Human genes 0.000 description 4
- 108050008072 Cytochrome c oxidase subunit IV Proteins 0.000 description 4
- 102000003974 Fibroblast growth factor 2 Human genes 0.000 description 4
- 206010017076 Fracture Diseases 0.000 description 4
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 4
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 4
- 230000000842 anti-protozoal effect Effects 0.000 description 4
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 4
- 229940121375 antifungal agent Drugs 0.000 description 4
- 239000003699 antiulcer agent Substances 0.000 description 4
- 239000003246 corticosteroid Substances 0.000 description 4
- 229960001334 corticosteroids Drugs 0.000 description 4
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 4
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 4
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 4
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 4
- 239000002869 intravenous anesthetic agent Substances 0.000 description 4
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 4
- 239000003589 local anesthetic agent Substances 0.000 description 4
- 229960005015 local anesthetics Drugs 0.000 description 4
- 210000004663 osteoprogenitor cell Anatomy 0.000 description 4
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 4
- 229960001860 salicylate Drugs 0.000 description 4
- YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-M salicylate Chemical compound OC1=CC=CC=C1C([O-])=O YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 241000894007 species Species 0.000 description 4
- 241000258957 Asteroidea Species 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000018233 Fibroblast Growth Factor Human genes 0.000 description 3
- 108050007372 Fibroblast Growth Factor Proteins 0.000 description 3
- 241000258189 Holothuria tubulosa Species 0.000 description 3
- 101150017040 I gene Proteins 0.000 description 3
- 108020005196 Mitochondrial DNA Proteins 0.000 description 3
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 3
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 3
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 3
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 3
- 230000001355 anti-mycobacterial effect Effects 0.000 description 3
- 229940036589 antiprotozoals Drugs 0.000 description 3
- 239000003443 antiviral agent Substances 0.000 description 3
- 210000002805 bone matrix Anatomy 0.000 description 3
- 230000010478 bone regeneration Effects 0.000 description 3
- 210000004207 dermis Anatomy 0.000 description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 3
- 239000002934 diuretic Substances 0.000 description 3
- 229940030606 diuretics Drugs 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 3
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 3
- 239000003193 general anesthetic agent Substances 0.000 description 3
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 3
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 3
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 3
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 3
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 3
- GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N (±)-α-Tocopherol Chemical compound OC1=C(C)C(C)=C2OC(CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 2
- BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N Aspirin Chemical compound CC(=O)OC1=CC=CC=C1C(O)=O BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241001465748 Bilateria Species 0.000 description 2
- 206010061728 Bone lesion Diseases 0.000 description 2
- 229910021532 Calcite Inorganic materials 0.000 description 2
- 108090000209 Carbonic anhydrases Proteins 0.000 description 2
- 102000003846 Carbonic anhydrases Human genes 0.000 description 2
- JZUFKLXOESDKRF-UHFFFAOYSA-N Chlorothiazide Chemical compound C1=C(Cl)C(S(=O)(=O)N)=CC2=C1NCNS2(=O)=O JZUFKLXOESDKRF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 2
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 2
- 240000008067 Cucumis sativus Species 0.000 description 2
- 235000009849 Cucumis sativus Nutrition 0.000 description 2
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 2
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 2
- 241001466109 Deuterostomia Species 0.000 description 2
- 241000257465 Echinoidea Species 0.000 description 2
- ULGZDMOVFRHVEP-RWJQBGPGSA-N Erythromycin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](C)C(=O)O[C@@H]([C@@]([C@H](O)[C@@H](C)C(=O)[C@H](C)C[C@@](C)(O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@H](C[C@@H](C)O2)N(C)C)O)[C@H]1C)(C)O)CC)[C@H]1C[C@@](C)(OC)[C@@H](O)[C@H](C)O1 ULGZDMOVFRHVEP-RWJQBGPGSA-N 0.000 description 2
- 241000206602 Eukaryota Species 0.000 description 2
- 241000243318 Eumetazoa Species 0.000 description 2
- 102100024785 Fibroblast growth factor 2 Human genes 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N Haematoxylin Chemical compound C12=CC(O)=C(O)C=C2CC2(O)C1C1=CC=C(O)C(O)=C1OC2 WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000903261 Hemibrycon helleri Species 0.000 description 2
- 241000258196 Holothuriidae Species 0.000 description 2
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HEFNNWSXXWATRW-UHFFFAOYSA-N Ibuprofen Chemical compound CC(C)CC1=CC=C(C(C)C(O)=O)C=C1 HEFNNWSXXWATRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 2
- CMWTZPSULFXXJA-UHFFFAOYSA-N Naproxen Natural products C1=C(C(C)C(O)=O)C=CC2=CC(OC)=CC=C21 CMWTZPSULFXXJA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N Niacin Chemical compound OC(=O)C1=CC=CN=C1 PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000257458 Ophiuroidea Species 0.000 description 2
- 241001465255 Opisthokonta Species 0.000 description 2
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 2
- 108010067787 Proteoglycans Proteins 0.000 description 2
- 102000016611 Proteoglycans Human genes 0.000 description 2
- GUGOEEXESWIERI-UHFFFAOYSA-N Terfenadine Chemical compound C1=CC(C(C)(C)C)=CC=C1C(O)CCCN1CCC(C(O)(C=2C=CC=CC=2)C=2C=CC=CC=2)CC1 GUGOEEXESWIERI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940116731 Uricosuric agent Drugs 0.000 description 2
- 229930003270 Vitamin B Natural products 0.000 description 2
- 229930003316 Vitamin D Natural products 0.000 description 2
- QYSXJUFSXHHAJI-XFEUOLMDSA-N Vitamin D3 Natural products C1(/[C@@H]2CC[C@@H]([C@]2(CCC1)C)[C@H](C)CCCC(C)C)=C/C=C1\C[C@@H](O)CCC1=C QYSXJUFSXHHAJI-XFEUOLMDSA-N 0.000 description 2
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 2
- 229960004150 aciclovir Drugs 0.000 description 2
- MKUXAQIIEYXACX-UHFFFAOYSA-N aciclovir Chemical compound N1C(N)=NC(=O)C2=C1N(COCCO)C=N2 MKUXAQIIEYXACX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 2
- 230000001919 adrenal effect Effects 0.000 description 2
- 210000004504 adult stem cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 2
- 229940035674 anesthetics Drugs 0.000 description 2
- 230000003103 anti-anaerobic effect Effects 0.000 description 2
- 230000003474 anti-emetic effect Effects 0.000 description 2
- 239000002111 antiemetic agent Substances 0.000 description 2
- 229940125683 antiemetic agent Drugs 0.000 description 2
- 239000003430 antimalarial agent Substances 0.000 description 2
- 229940033495 antimalarials Drugs 0.000 description 2
- 229940034014 antimycobacterial agent Drugs 0.000 description 2
- 229940124522 antiretrovirals Drugs 0.000 description 2
- 229940121357 antivirals Drugs 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- BLFLLBZGZJTVJG-UHFFFAOYSA-N benzocaine Chemical compound CCOC(=O)C1=CC=C(N)C=C1 BLFLLBZGZJTVJG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 2
- 229960005084 calcitriol Drugs 0.000 description 2
- GMRQFYUYWCNGIN-NKMMMXOESA-N calcitriol Chemical compound C1(/[C@@H]2CC[C@@H]([C@]2(CCC1)C)[C@@H](CCCC(C)(C)O)C)=C\C=C1\C[C@@H](O)C[C@H](O)C1=C GMRQFYUYWCNGIN-NKMMMXOESA-N 0.000 description 2
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 2
- 230000002648 chondrogenic effect Effects 0.000 description 2
- MYSWGUAQZAJSOK-UHFFFAOYSA-N ciprofloxacin Chemical compound C12=CC(N3CCNCC3)=C(F)C=C2C(=O)C(C(=O)O)=CN1C1CC1 MYSWGUAQZAJSOK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 2
- 229960004022 clotrimazole Drugs 0.000 description 2
- VNFPBHJOKIVQEB-UHFFFAOYSA-N clotrimazole Chemical compound ClC1=CC=CC=C1C(N1C=NC=C1)(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 VNFPBHJOKIVQEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OROGSEYTTFOCAN-DNJOTXNNSA-N codeine Chemical compound C([C@H]1[C@H](N(CC[C@@]112)C)C3)=C[C@H](O)[C@@H]1OC1=C2C3=CC=C1OC OROGSEYTTFOCAN-DNJOTXNNSA-N 0.000 description 2
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 2
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 2
- DCOPUUMXTXDBNB-UHFFFAOYSA-N diclofenac Chemical compound OC(=O)CC1=CC=CC=C1NC1=C(Cl)C=CC=C1Cl DCOPUUMXTXDBNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960001259 diclofenac Drugs 0.000 description 2
- 239000003792 electrolyte Substances 0.000 description 2
- 210000002615 epidermis Anatomy 0.000 description 2
- 229940126864 fibroblast growth factor Drugs 0.000 description 2
- 238000002825 functional assay Methods 0.000 description 2
- 210000002288 golgi apparatus Anatomy 0.000 description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 2
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 2
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 2
- 229960002003 hydrochlorothiazide Drugs 0.000 description 2
- JYGXADMDTFJGBT-VWUMJDOOSA-N hydrocortisone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3[C@@H](O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 JYGXADMDTFJGBT-VWUMJDOOSA-N 0.000 description 2
- 229960001680 ibuprofen Drugs 0.000 description 2
- 239000003018 immunosuppressive agent Substances 0.000 description 2
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 2
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 2
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 2
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 2
- DKYWVDODHFEZIM-UHFFFAOYSA-N ketoprofen Chemical compound OC(=O)C(C)C1=CC=CC(C(=O)C=2C=CC=CC=2)=C1 DKYWVDODHFEZIM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960000991 ketoprofen Drugs 0.000 description 2
- 239000002171 loop diuretic Substances 0.000 description 2
- 230000002132 lysosomal effect Effects 0.000 description 2
- 239000003120 macrolide antibiotic agent Substances 0.000 description 2
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 2
- ZLNQQNXFFQJAID-UHFFFAOYSA-L magnesium carbonate Chemical compound [Mg+2].[O-]C([O-])=O ZLNQQNXFFQJAID-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000001095 magnesium carbonate Substances 0.000 description 2
- 229910000021 magnesium carbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- BQJCRHHNABKAKU-KBQPJGBKSA-N morphine Chemical compound O([C@H]1[C@H](C=C[C@H]23)O)C4=C5[C@@]12CCN(C)[C@@H]3CC5=CC=C4O BQJCRHHNABKAKU-KBQPJGBKSA-N 0.000 description 2
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 2
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 2
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 2
- 229960002009 naproxen Drugs 0.000 description 2
- CMWTZPSULFXXJA-VIFPVBQESA-N naproxen Chemical compound C1=C([C@H](C)C(O)=O)C=CC2=CC(OC)=CC=C21 CMWTZPSULFXXJA-VIFPVBQESA-N 0.000 description 2
- 229960003512 nicotinic acid Drugs 0.000 description 2
- 238000011580 nude mouse model Methods 0.000 description 2
- 239000003402 opiate agonist Substances 0.000 description 2
- 230000011164 ossification Effects 0.000 description 2
- 230000001599 osteoclastic effect Effects 0.000 description 2
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 2
- 239000003286 potassium sparing diuretic agent Substances 0.000 description 2
- 229940097241 potassium-sparing diuretic Drugs 0.000 description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 2
- 239000002325 prokinetic agent Substances 0.000 description 2
- LISFMEBWQUVKPJ-UHFFFAOYSA-N quinolin-2-ol Chemical compound C1=CC=C2NC(=O)C=CC2=C1 LISFMEBWQUVKPJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 2
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 2
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 2
- 229940072172 tetracycline antibiotic Drugs 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 239000003451 thiazide diuretic agent Substances 0.000 description 2
- 239000003383 uricosuric agent Substances 0.000 description 2
- 239000002996 urinary tract agent Substances 0.000 description 2
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 2
- 235000019156 vitamin B Nutrition 0.000 description 2
- 239000011720 vitamin B Substances 0.000 description 2
- 235000019166 vitamin D Nutrition 0.000 description 2
- 239000011710 vitamin D Substances 0.000 description 2
- 229940046008 vitamin d Drugs 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XMAYWYJOQHXEEK-OZXSUGGESA-N (2R,4S)-ketoconazole Chemical compound C1CN(C(=O)C)CCN1C(C=C1)=CC=C1OC[C@@H]1O[C@@](CN2C=NC=C2)(C=2C(=CC(Cl)=CC=2)Cl)OC1 XMAYWYJOQHXEEK-OZXSUGGESA-N 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- BEJKOYIMCGMNRB-GRHHLOCNSA-N (2s)-2-amino-3-(4-hydroxyphenyl)propanoic acid;(2s)-2-amino-3-phenylpropanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1.OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 BEJKOYIMCGMNRB-GRHHLOCNSA-N 0.000 description 1
- SGKRLCUYIXIAHR-AKNGSSGZSA-N (4s,4ar,5s,5ar,6r,12ar)-4-(dimethylamino)-1,5,10,11,12a-pentahydroxy-6-methyl-3,12-dioxo-4a,5,5a,6-tetrahydro-4h-tetracene-2-carboxamide Chemical compound C1=CC=C2[C@H](C)[C@@H]([C@H](O)[C@@H]3[C@](C(O)=C(C(N)=O)C(=O)[C@H]3N(C)C)(O)C3=O)C3=C(O)C2=C1O SGKRLCUYIXIAHR-AKNGSSGZSA-N 0.000 description 1
- FFTVPQUHLQBXQZ-KVUCHLLUSA-N (4s,4as,5ar,12ar)-4,7-bis(dimethylamino)-1,10,11,12a-tetrahydroxy-3,12-dioxo-4a,5,5a,6-tetrahydro-4h-tetracene-2-carboxamide Chemical compound C1C2=C(N(C)C)C=CC(O)=C2C(O)=C2[C@@H]1C[C@H]1[C@H](N(C)C)C(=O)C(C(N)=O)=C(O)[C@@]1(O)C2=O FFTVPQUHLQBXQZ-KVUCHLLUSA-N 0.000 description 1
- MINDHVHHQZYEEK-UHFFFAOYSA-N (E)-(2S,3R,4R,5S)-5-[(2S,3S,4S,5S)-2,3-epoxy-5-hydroxy-4-methylhexyl]tetrahydro-3,4-dihydroxy-(beta)-methyl-2H-pyran-2-crotonic acid ester with 9-hydroxynonanoic acid Natural products CC(O)C(C)C1OC1CC1C(O)C(O)C(CC(C)=CC(=O)OCCCCCCCCC(O)=O)OC1 MINDHVHHQZYEEK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WHTVZRBIWZFKQO-AWEZNQCLSA-N (S)-chloroquine Chemical compound ClC1=CC=C2C(N[C@@H](C)CCCN(CC)CC)=CC=NC2=C1 WHTVZRBIWZFKQO-AWEZNQCLSA-N 0.000 description 1
- GMRQFYUYWCNGIN-UHFFFAOYSA-N 1,25-Dihydroxy-vitamin D3' Natural products C1CCC2(C)C(C(CCCC(C)(C)O)C)CCC2C1=CC=C1CC(O)CC(O)C1=C GMRQFYUYWCNGIN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FUFLCEKSBBHCMO-UHFFFAOYSA-N 11-dehydrocorticosterone Natural products O=C1CCC2(C)C3C(=O)CC(C)(C(CC4)C(=O)CO)C4C3CCC2=C1 FUFLCEKSBBHCMO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FPIPGXGPPPQFEQ-UHFFFAOYSA-N 13-cis retinol Natural products OCC=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SUBDBMMJDZJVOS-UHFFFAOYSA-N 5-methoxy-2-{[(4-methoxy-3,5-dimethylpyridin-2-yl)methyl]sulfinyl}-1H-benzimidazole Chemical compound N=1C2=CC(OC)=CC=C2NC=1S(=O)CC1=NC=C(C)C(OC)=C1C SUBDBMMJDZJVOS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WZPBZJONDBGPKJ-UHFFFAOYSA-N Antibiotic SQ 26917 Natural products O=C1N(S(O)(=O)=O)C(C)C1NC(=O)C(=NOC(C)(C)C(O)=O)C1=CSC(N)=N1 WZPBZJONDBGPKJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 240000002921 Armeria maritima Species 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000258193 Aspidochirotida Species 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 102000055006 Calcitonin Human genes 0.000 description 1
- 108060001064 Calcitonin Proteins 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 1
- 102000005600 Cathepsins Human genes 0.000 description 1
- 108010084457 Cathepsins Proteins 0.000 description 1
- 229930186147 Cephalosporin Natural products 0.000 description 1
- 241000251556 Chordata Species 0.000 description 1
- 208000031404 Chromosome Aberrations Diseases 0.000 description 1
- MFYSYFVPBJMHGN-ZPOLXVRWSA-N Cortisone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3C(=O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 MFYSYFVPBJMHGN-ZPOLXVRWSA-N 0.000 description 1
- MFYSYFVPBJMHGN-UHFFFAOYSA-N Cortisone Natural products O=C1CCC2(C)C3C(=O)CC(C)(C(CC4)(O)C(=O)CO)C4C3CCC2=C1 MFYSYFVPBJMHGN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001490786 Crinoidea Species 0.000 description 1
- CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N Cyclophosphamide Chemical compound ClCCN(CCCl)P1(=O)NCCCO1 CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000005927 Cysteine Proteases Human genes 0.000 description 1
- 108010005843 Cysteine Proteases Proteins 0.000 description 1
- 102100025287 Cytochrome b Human genes 0.000 description 1
- 108010075028 Cytochromes b Proteins 0.000 description 1
- ZZZCUOFIHGPKAK-UHFFFAOYSA-N D-erythro-ascorbic acid Natural products OCC1OC(=O)C(O)=C1O ZZZCUOFIHGPKAK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MQJKPEGWNLWLTK-UHFFFAOYSA-N Dapsone Chemical compound C1=CC(N)=CC=C1S(=O)(=O)C1=CC=C(N)C=C1 MQJKPEGWNLWLTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000016911 Deoxyribonucleases Human genes 0.000 description 1
- 108010053770 Deoxyribonucleases Proteins 0.000 description 1
- 241000257462 Echinozoa Species 0.000 description 1
- XRHVZWWRFMCBAZ-UHFFFAOYSA-L Endothal-disodium Chemical compound [Na+].[Na+].C1CC2C(C([O-])=O)C(C(=O)[O-])C1O2 XRHVZWWRFMCBAZ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 1
- 102000010834 Extracellular Matrix Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010037362 Extracellular Matrix Proteins Proteins 0.000 description 1
- 101150019331 FGF2 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 229920002527 Glycogen Polymers 0.000 description 1
- 229920002683 Glycosaminoglycan Polymers 0.000 description 1
- 206010018852 Haematoma Diseases 0.000 description 1
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 1
- 229940122957 Histamine H2 receptor antagonist Drugs 0.000 description 1
- 241000551248 Holothuria sanctori Species 0.000 description 1
- 206010020649 Hyperkeratosis Diseases 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 1
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 1
- 102000006992 Interferon-alpha Human genes 0.000 description 1
- 108010047761 Interferon-alpha Proteins 0.000 description 1
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 description 1
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 1
- UETNIIAIRMUTSM-UHFFFAOYSA-N Jacareubin Natural products CC1(C)OC2=CC3Oc4c(O)c(O)ccc4C(=O)C3C(=C2C=C1)O UETNIIAIRMUTSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N L-methotrexate Chemical compound C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 241001484259 Lacuna Species 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NNJVILVZKWQKPM-UHFFFAOYSA-N Lidocaine Chemical compound CCN(CC)CC(=O)NC1=C(C)C=CC=C1C NNJVILVZKWQKPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000234435 Lilium Species 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BYBLEWFAAKGYCD-UHFFFAOYSA-N Miconazole Chemical compound ClC1=CC(Cl)=CC=C1COC(C=1C(=CC(Cl)=CC=1)Cl)CN1C=NC=C1 BYBLEWFAAKGYCD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 206010028851 Necrosis Diseases 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 108010067035 Pancrelipase Proteins 0.000 description 1
- 102000003982 Parathyroid hormone Human genes 0.000 description 1
- 108090000445 Parathyroid hormone Proteins 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 229930195708 Penicillin V Natural products 0.000 description 1
- 208000006735 Periostitis Diseases 0.000 description 1
- 244000064622 Physalis edulis Species 0.000 description 1
- 102000006270 Proton Pumps Human genes 0.000 description 1
- 108010083204 Proton Pumps Proteins 0.000 description 1
- 208000002607 Pseudarthrosis Diseases 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 102000006382 Ribonucleases Human genes 0.000 description 1
- 108010083644 Ribonucleases Proteins 0.000 description 1
- NCDNCNXCDXHOMX-UHFFFAOYSA-N Ritonavir Natural products C=1C=CC=CC=1CC(NC(=O)OCC=1SC=NC=1)C(O)CC(CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)N(C)CC1=CSC(C(C)C)=N1 NCDNCNXCDXHOMX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005708 Sodium hypochlorite Substances 0.000 description 1
- 208000007107 Stomach Ulcer Diseases 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- 229940123317 Sulfonamide antibiotic Drugs 0.000 description 1
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000007591 Tartrate-Resistant Acid Phosphatase Human genes 0.000 description 1
- 108010032050 Tartrate-Resistant Acid Phosphatase Proteins 0.000 description 1
- 239000004098 Tetracycline Substances 0.000 description 1
- WKDDRNSBRWANNC-UHFFFAOYSA-N Thienamycin Natural products C1C(SCCN)=C(C(O)=O)N2C(=O)C(C(O)C)C21 WKDDRNSBRWANNC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 1
- 102100040247 Tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000005789 Vascular Endothelial Growth Factors Human genes 0.000 description 1
- 108010019530 Vascular Endothelial Growth Factors Proteins 0.000 description 1
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 1
- FPIPGXGPPPQFEQ-BOOMUCAASA-N Vitamin A Natural products OC/C=C(/C)\C=C\C=C(\C)/C=C/C1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-BOOMUCAASA-N 0.000 description 1
- 229930003537 Vitamin B3 Natural products 0.000 description 1
- 229930003268 Vitamin C Natural products 0.000 description 1
- 229930003427 Vitamin E Natural products 0.000 description 1
- 229930003448 Vitamin K Natural products 0.000 description 1
- 239000004015 abortifacient agent Substances 0.000 description 1
- 231100000641 abortifacient agent Toxicity 0.000 description 1
- 229960001138 acetylsalicylic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 229940121353 acid pump inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 239000002535 acidifier Substances 0.000 description 1
- 210000000577 adipose tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 1
- FPIPGXGPPPQFEQ-OVSJKPMPSA-N all-trans-retinol Chemical compound OC\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-OVSJKPMPSA-N 0.000 description 1
- 230000000735 allogeneic effect Effects 0.000 description 1
- 229940052294 amide local anesthetics Drugs 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 1
- 239000002647 aminoglycoside antibiotic agent Substances 0.000 description 1
- 210000004381 amniotic fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000003098 androgen Substances 0.000 description 1
- 229940030486 androgens Drugs 0.000 description 1
- 230000002491 angiogenic effect Effects 0.000 description 1
- 229940069428 antacid Drugs 0.000 description 1
- 239000003159 antacid agent Substances 0.000 description 1
- 230000000507 anthelmentic effect Effects 0.000 description 1
- 229940124339 anthelmintic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000000921 anthelmintic agent Substances 0.000 description 1
- 230000002280 anti-androgenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001142 anti-diarrhea Effects 0.000 description 1
- 230000000843 anti-fungal effect Effects 0.000 description 1
- 230000001387 anti-histamine Effects 0.000 description 1
- 230000001139 anti-pruritic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002365 anti-tubercular Effects 0.000 description 1
- 230000000767 anti-ulcer Effects 0.000 description 1
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 1
- 239000000051 antiandrogen Substances 0.000 description 1
- 229940030495 antiandrogen sex hormone and modulator of the genital system Drugs 0.000 description 1
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 1
- 229940125714 antidiarrheal agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003793 antidiarrheal agent Substances 0.000 description 1
- 229960002708 antigout preparations Drugs 0.000 description 1
- 239000000739 antihistaminic agent Substances 0.000 description 1
- 239000003926 antimycobacterial agent Substances 0.000 description 1
- 239000003904 antiprotozoal agent Substances 0.000 description 1
- 239000003908 antipruritic agent Substances 0.000 description 1
- 239000003903 antiretrovirus agent Substances 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- KUCQYCKVKVOKAY-CTYIDZIISA-N atovaquone Chemical compound C1([C@H]2CC[C@@H](CC2)C2=C(C(C3=CC=CC=C3C2=O)=O)O)=CC=C(Cl)C=C1 KUCQYCKVKVOKAY-CTYIDZIISA-N 0.000 description 1
- 229960003159 atovaquone Drugs 0.000 description 1
- 229960002170 azathioprine Drugs 0.000 description 1
- LMEKQMALGUDUQG-UHFFFAOYSA-N azathioprine Chemical compound CN1C=NC([N+]([O-])=O)=C1SC1=NC=NC2=C1NC=N2 LMEKQMALGUDUQG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004099 azithromycin Drugs 0.000 description 1
- MQTOSJVFKKJCRP-BICOPXKESA-N azithromycin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](C)C(=O)O[C@@H]([C@@]([C@H](O)[C@@H](C)N(C)C[C@H](C)C[C@@](C)(O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@H](C[C@@H](C)O2)N(C)C)O)[C@H]1C)(C)O)CC)[C@H]1C[C@@](C)(OC)[C@@H](O)[C@H](C)O1 MQTOSJVFKKJCRP-BICOPXKESA-N 0.000 description 1
- WZPBZJONDBGPKJ-VEHQQRBSSA-N aztreonam Chemical compound O=C1N(S([O-])(=O)=O)[C@@H](C)[C@@H]1NC(=O)C(=N/OC(C)(C)C(O)=O)\C1=CSC([NH3+])=N1 WZPBZJONDBGPKJ-VEHQQRBSSA-N 0.000 description 1
- 229960003644 aztreonam Drugs 0.000 description 1
- 229940125717 barbiturate Drugs 0.000 description 1
- 238000002869 basic local alignment search tool Methods 0.000 description 1
- 229940092705 beclomethasone Drugs 0.000 description 1
- NBMKJKDGKREAPL-DVTGEIKXSA-N beclomethasone Chemical compound C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@]2(Cl)[C@@H]1[C@@H]1C[C@H](C)[C@@](C(=O)CO)(O)[C@@]1(C)C[C@@H]2O NBMKJKDGKREAPL-DVTGEIKXSA-N 0.000 description 1
- 229960005274 benzocaine Drugs 0.000 description 1
- 229940049706 benzodiazepine Drugs 0.000 description 1
- 150000001557 benzodiazepines Chemical class 0.000 description 1
- 239000003782 beta lactam antibiotic agent Substances 0.000 description 1
- 229960002537 betamethasone Drugs 0.000 description 1
- UREBDLICKHMUKA-DVTGEIKXSA-N betamethasone Chemical compound C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@]2(F)[C@@H]1[C@@H]1C[C@H](C)[C@@](C(=O)CO)(O)[C@@]1(C)C[C@@H]2O UREBDLICKHMUKA-DVTGEIKXSA-N 0.000 description 1
- 239000000560 biocompatible material Substances 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 239000000316 bone substitute Substances 0.000 description 1
- 210000003364 bony callus Anatomy 0.000 description 1
- BBBFJLBPOGFECG-VJVYQDLKSA-N calcitonin Chemical compound N([C@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(N)=O)C(C)C)C(=O)[C@@H]1CSSC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1 BBBFJLBPOGFECG-VJVYQDLKSA-N 0.000 description 1
- 229960004015 calcitonin Drugs 0.000 description 1
- 235000020964 calcitriol Nutrition 0.000 description 1
- 239000011612 calcitriol Substances 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 1
- 230000032823 cell division Effects 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 241000902900 cellular organisms Species 0.000 description 1
- 229940124587 cephalosporin Drugs 0.000 description 1
- 150000001780 cephalosporins Chemical class 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 229960005091 chloramphenicol Drugs 0.000 description 1
- WIIZWVCIJKGZOK-RKDXNWHRSA-N chloramphenicol Chemical compound ClC(Cl)C(=O)N[C@H](CO)[C@H](O)C1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 WIIZWVCIJKGZOK-RKDXNWHRSA-N 0.000 description 1
- 229960003677 chloroquine Drugs 0.000 description 1
- WHTVZRBIWZFKQO-UHFFFAOYSA-N chloroquine Natural products ClC1=CC=C2C(NC(C)CCCN(CC)CC)=CC=NC2=C1 WHTVZRBIWZFKQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001380 cimetidine Drugs 0.000 description 1
- CCGSUNCLSOWKJO-UHFFFAOYSA-N cimetidine Chemical compound N#CNC(=N/C)\NCCSCC1=NC=N[C]1C CCGSUNCLSOWKJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003405 ciprofloxacin Drugs 0.000 description 1
- YNNUSGIPVFPVBX-NHCUHLMSSA-N clemastine Chemical compound CN1CCC[C@@H]1CCO[C@@](C)(C=1C=CC(Cl)=CC=1)C1=CC=CC=C1 YNNUSGIPVFPVBX-NHCUHLMSSA-N 0.000 description 1
- 229960002881 clemastine Drugs 0.000 description 1
- 229960002227 clindamycin Drugs 0.000 description 1
- KDLRVYVGXIQJDK-AWPVFWJPSA-N clindamycin Chemical compound CN1C[C@H](CCC)C[C@H]1C(=O)N[C@H]([C@H](C)Cl)[C@@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](SC)O1 KDLRVYVGXIQJDK-AWPVFWJPSA-N 0.000 description 1
- FDJOLVPMNUYSCM-WZHZPDAFSA-L cobalt(3+);[(2r,3s,4r,5s)-5-(5,6-dimethylbenzimidazol-1-yl)-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] [(2r)-1-[3-[(1r,2r,3r,4z,7s,9z,12s,13s,14z,17s,18s,19r)-2,13,18-tris(2-amino-2-oxoethyl)-7,12,17-tris(3-amino-3-oxopropyl)-3,5,8,8,13,15,18,19-octamethyl-2 Chemical compound [Co+3].N#[C-].N([C@@H]([C@]1(C)[N-]\C([C@H]([C@@]1(CC(N)=O)C)CCC(N)=O)=C(\C)/C1=N/C([C@H]([C@@]1(CC(N)=O)C)CCC(N)=O)=C\C1=N\C([C@H](C1(C)C)CCC(N)=O)=C/1C)[C@@H]2CC(N)=O)=C\1[C@]2(C)CCC(=O)NC[C@@H](C)OP([O-])(=O)O[C@H]1[C@@H](O)[C@@H](N2C3=CC(C)=C(C)C=C3N=C2)O[C@@H]1CO FDJOLVPMNUYSCM-WZHZPDAFSA-L 0.000 description 1
- 229960004126 codeine Drugs 0.000 description 1
- 238000002648 combination therapy Methods 0.000 description 1
- 238000004891 communication Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 description 1
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 1
- 230000009537 cortical lesion Effects 0.000 description 1
- 229960004544 cortisone Drugs 0.000 description 1
- 229960004397 cyclophosphamide Drugs 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 1
- 229960000860 dapsone Drugs 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 210000003074 dental pulp Anatomy 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 229960003957 dexamethasone Drugs 0.000 description 1
- UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N dexamethasone Chemical compound C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@]2(F)[C@@H]1[C@@H]1C[C@@H](C)[C@@](C(=O)CO)(O)[C@@]1(C)C[C@@H]2O UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N 0.000 description 1
- 239000003866 digestant Substances 0.000 description 1
- 229940124568 digestive agent Drugs 0.000 description 1
- 230000001079 digestive effect Effects 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 230000006806 disease prevention Effects 0.000 description 1
- 229960003722 doxycycline Drugs 0.000 description 1
- 239000013583 drug formulation Substances 0.000 description 1
- 239000002895 emetic Substances 0.000 description 1
- 239000008144 emollient laxative Substances 0.000 description 1
- 230000003511 endothelial effect Effects 0.000 description 1
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 1
- YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N eosin Chemical compound [Na+].OC(=O)C1=CC=CC=C1C1=C2C=C(Br)C(=O)C(Br)=C2OC2=C(Br)C(O)=C(Br)C=C21 YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 229960003276 erythromycin Drugs 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 210000003722 extracellular fluid Anatomy 0.000 description 1
- 210000002744 extracellular matrix Anatomy 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- XUFQPHANEAPEMJ-UHFFFAOYSA-N famotidine Chemical compound NC(N)=NC1=NC(CSCCC(N)=NS(N)(=O)=O)=CS1 XUFQPHANEAPEMJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001596 famotidine Drugs 0.000 description 1
- 229960002428 fentanyl Drugs 0.000 description 1
- PJMPHNIQZUBGLI-UHFFFAOYSA-N fentanyl Chemical compound C=1C=CC=CC=1N(C(=O)CC)C(CC1)CCN1CCC1=CC=CC=C1 PJMPHNIQZUBGLI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- RFHAOTPXVQNOHP-UHFFFAOYSA-N fluconazole Chemical compound C1=NC=NN1CC(C=1C(=CC(F)=CC=1)F)(O)CN1C=NC=N1 RFHAOTPXVQNOHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004884 fluconazole Drugs 0.000 description 1
- ZZUFCTLCJUWOSV-UHFFFAOYSA-N furosemide Chemical compound C1=C(Cl)C(S(=O)(=O)N)=CC(C(O)=O)=C1NCC1=CC=CO1 ZZUFCTLCJUWOSV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003883 furosemide Drugs 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N gamma-tocopherol Natural products CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCC1CCC2C(C)C(O)C(C)C(C)C2O1 WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002963 ganciclovir Drugs 0.000 description 1
- IRSCQMHQWWYFCW-UHFFFAOYSA-N ganciclovir Chemical compound O=C1NC(N)=NC2=C1N=CN2COC(CO)CO IRSCQMHQWWYFCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004211 gastric acid Anatomy 0.000 description 1
- 210000001156 gastric mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 201000005917 gastric ulcer Diseases 0.000 description 1
- 239000004083 gastrointestinal agent Substances 0.000 description 1
- 229940125695 gastrointestinal agent Drugs 0.000 description 1
- 229940005494 general anesthetics Drugs 0.000 description 1
- 239000003862 glucocorticoid Substances 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940096919 glycogen Drugs 0.000 description 1
- 150000002344 gold compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 230000002440 hepatic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003485 histamine H2 receptor antagonist Substances 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012735 histological processing Methods 0.000 description 1
- 210000004276 hyalin Anatomy 0.000 description 1
- OROGSEYTTFOCAN-UHFFFAOYSA-N hydrocodone Natural products C1C(N(CCC234)C)C2C=CC(O)C3OC2=C4C1=CC=C2OC OROGSEYTTFOCAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000890 hydrocortisone Drugs 0.000 description 1
- WVLOADHCBXTIJK-YNHQPCIGSA-N hydromorphone Chemical compound O([C@H]1C(CC[C@H]23)=O)C4=C5[C@@]12CCN(C)[C@@H]3CC5=CC=C4O WVLOADHCBXTIJK-YNHQPCIGSA-N 0.000 description 1
- 229960001410 hydromorphone Drugs 0.000 description 1
- 229910052588 hydroxylapatite Inorganic materials 0.000 description 1
- ZSKVGTPCRGIANV-ZXFLCMHBSA-N imipenem Chemical compound C1C(SCC\N=C\N)=C(C(O)=O)N2C(=O)[C@H]([C@H](O)C)[C@H]21 ZSKVGTPCRGIANV-ZXFLCMHBSA-N 0.000 description 1
- 229960002182 imipenem Drugs 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 1
- 229960003444 immunosuppressant agent Drugs 0.000 description 1
- 229940125721 immunosuppressive agent Drugs 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 239000012678 infectious agent Substances 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 1
- 229950000038 interferon alfa Drugs 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QRXWMOHMRWLFEY-UHFFFAOYSA-N isoniazide Chemical compound NNC(=O)C1=CC=NC=C1 QRXWMOHMRWLFEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000002510 keratinocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229960004125 ketoconazole Drugs 0.000 description 1
- JCQLYHFGKNRPGE-FCVZTGTOSA-N lactulose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 JCQLYHFGKNRPGE-FCVZTGTOSA-N 0.000 description 1
- 229960000511 lactulose Drugs 0.000 description 1
- PFCRQPBOOFTZGQ-UHFFFAOYSA-N lactulose keto form Natural products OCC(=O)C(O)C(C(O)CO)OC1OC(CO)C(O)C(O)C1O PFCRQPBOOFTZGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008141 laxative Substances 0.000 description 1
- 229940125722 laxative agent Drugs 0.000 description 1
- 229960004194 lidocaine Drugs 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 210000005229 liver cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 210000003712 lysosome Anatomy 0.000 description 1
- 230000001868 lysosomic effect Effects 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 230000002175 menstrual effect Effects 0.000 description 1
- 210000003716 mesoderm Anatomy 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 229960000485 methotrexate Drugs 0.000 description 1
- 229960002509 miconazole Drugs 0.000 description 1
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 1
- 229960004023 minocycline Drugs 0.000 description 1
- 230000000116 mitigating effect Effects 0.000 description 1
- 239000003607 modifier Substances 0.000 description 1
- 210000005087 mononuclear cell Anatomy 0.000 description 1
- 229960005181 morphine Drugs 0.000 description 1
- 230000000921 morphogenic effect Effects 0.000 description 1
- 229960003128 mupirocin Drugs 0.000 description 1
- 229930187697 mupirocin Natural products 0.000 description 1
- DDHVILIIHBIMQU-YJGQQKNPSA-L mupirocin calcium hydrate Chemical compound O.O.[Ca+2].C[C@H](O)[C@H](C)[C@@H]1O[C@H]1C[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](C\C(C)=C\C(=O)OCCCCCCCCC([O-])=O)OC1.C[C@H](O)[C@H](C)[C@@H]1O[C@H]1C[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](C\C(C)=C\C(=O)OCCCCCCCCC([O-])=O)OC1 DDHVILIIHBIMQU-YJGQQKNPSA-L 0.000 description 1
- 230000003387 muscular Effects 0.000 description 1
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 1
- 229960000515 nafcillin Drugs 0.000 description 1
- GPXLMGHLHQJAGZ-JTDSTZFVSA-N nafcillin Chemical compound C1=CC=CC2=C(C(=O)N[C@@H]3C(N4[C@H](C(C)(C)S[C@@H]43)C(O)=O)=O)C(OCC)=CC=C21 GPXLMGHLHQJAGZ-JTDSTZFVSA-N 0.000 description 1
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 1
- 235000001968 nicotinic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011664 nicotinic acid Substances 0.000 description 1
- DFPAKSUCGFBDDF-UHFFFAOYSA-N nicotinic acid amide Natural products NC(=O)C1=CC=CN=C1 DFPAKSUCGFBDDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004872 nizatidine Drugs 0.000 description 1
- SGXXNSQHWDMGGP-IZZDOVSWSA-N nizatidine Chemical compound [O-][N+](=O)\C=C(/NC)NCCSCC1=CSC(CN(C)C)=N1 SGXXNSQHWDMGGP-IZZDOVSWSA-N 0.000 description 1
- 229960001180 norfloxacin Drugs 0.000 description 1
- OGJPXUAPXNRGGI-UHFFFAOYSA-N norfloxacin Chemical compound C1=C2N(CC)C=C(C(O)=O)C(=O)C2=CC(F)=C1N1CCNCC1 OGJPXUAPXNRGGI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000988 nystatin Drugs 0.000 description 1
- VQOXZBDYSJBXMA-NQTDYLQESA-N nystatin A1 Chemical compound O[C@H]1[C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](C)O[C@H]1O[C@H]1/C=C/C=C/C=C/C=C/CC/C=C/C=C/[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)[C@H](C)OC(=O)C[C@H](O)C[C@H](O)C[C@H](O)CC[C@@H](O)[C@H](O)C[C@](O)(C[C@H](O)[C@H]2C(O)=O)O[C@H]2C1 VQOXZBDYSJBXMA-NQTDYLQESA-N 0.000 description 1
- 229960000381 omeprazole Drugs 0.000 description 1
- 229940127240 opiate Drugs 0.000 description 1
- 210000003463 organelle Anatomy 0.000 description 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 1
- 239000002337 osmotic diuretic agent Substances 0.000 description 1
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004840 osteo-chondrogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004072 osteoblast differentiation Effects 0.000 description 1
- 229960001019 oxacillin Drugs 0.000 description 1
- UWYHMGVUTGAWSP-JKIFEVAISA-N oxacillin Chemical compound N([C@@H]1C(N2[C@H](C(C)(C)S[C@@H]21)C(O)=O)=O)C(=O)C1=C(C)ON=C1C1=CC=CC=C1 UWYHMGVUTGAWSP-JKIFEVAISA-N 0.000 description 1
- 229940094443 oxytocics prostaglandins Drugs 0.000 description 1
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 1
- 229940045258 pancrelipase Drugs 0.000 description 1
- 229960001319 parathyroid hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000000199 parathyroid hormone Substances 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 229940056360 penicillin g Drugs 0.000 description 1
- 229940056367 penicillin v Drugs 0.000 description 1
- 150000002960 penicillins Chemical class 0.000 description 1
- XYJRXVWERLGGKC-UHFFFAOYSA-D pentacalcium;hydroxide;triphosphate Chemical compound [OH-].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O XYJRXVWERLGGKC-UHFFFAOYSA-D 0.000 description 1
- 210000003668 pericyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000003460 periosteum Anatomy 0.000 description 1
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 1
- 210000004303 peritoneum Anatomy 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- BPLBGHOLXOTWMN-MBNYWOFBSA-N phenoxymethylpenicillin Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)COC1=CC=CC=C1 BPLBGHOLXOTWMN-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SHUZOJHMOBOZST-UHFFFAOYSA-N phylloquinone Natural products CC(C)CCCCC(C)CCC(C)CCCC(=CCC1=C(C)C(=O)c2ccccc2C1=O)C SHUZOJHMOBOZST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 229960004618 prednisone Drugs 0.000 description 1
- XOFYZVNMUHMLCC-ZPOLXVRWSA-N prednisone Chemical compound O=C1C=C[C@]2(C)[C@H]3C(=O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 XOFYZVNMUHMLCC-ZPOLXVRWSA-N 0.000 description 1
- DBABZHXKTCFAPX-UHFFFAOYSA-N probenecid Chemical compound CCCN(CCC)S(=O)(=O)C1=CC=C(C(O)=O)C=C1 DBABZHXKTCFAPX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003081 probenecid Drugs 0.000 description 1
- 229960004919 procaine Drugs 0.000 description 1
- MFDFERRIHVXMIY-UHFFFAOYSA-N procaine Chemical compound CCN(CC)CCOC(=O)C1=CC=C(N)C=C1 MFDFERRIHVXMIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WIKYUJGCLQQFNW-UHFFFAOYSA-N prochlorperazine Chemical compound C1CN(C)CCN1CCCN1C2=CC(Cl)=CC=C2SC2=CC=CC=C21 WIKYUJGCLQQFNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003111 prochlorperazine Drugs 0.000 description 1
- 230000007114 proinflammatory cascade Effects 0.000 description 1
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 1
- 150000003180 prostaglandins Chemical class 0.000 description 1
- 229960000620 ranitidine Drugs 0.000 description 1
- VMXUWOKSQNHOCA-LCYFTJDESA-N ranitidine Chemical compound [O-][N+](=O)/C=C(/NC)NCCSCC1=CC=C(CN(C)C)O1 VMXUWOKSQNHOCA-LCYFTJDESA-N 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 102000037983 regulatory factors Human genes 0.000 description 1
- 108091008025 regulatory factors Proteins 0.000 description 1
- NCDNCNXCDXHOMX-XGKFQTDJSA-N ritonavir Chemical compound N([C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@H](C[C@H](O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)OCC=1SC=NC=1)CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N(C)CC1=CSC(C(C)C)=N1 NCDNCNXCDXHOMX-XGKFQTDJSA-N 0.000 description 1
- 229960000311 ritonavir Drugs 0.000 description 1
- 238000005096 rolling process Methods 0.000 description 1
- 210000003935 rough endoplasmic reticulum Anatomy 0.000 description 1
- 150000003873 salicylate salts Chemical class 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 210000002027 skeletal muscle Anatomy 0.000 description 1
- SUKJFIGYRHOWBL-UHFFFAOYSA-N sodium hypochlorite Chemical compound [Na+].Cl[O-] SUKJFIGYRHOWBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004872 soft tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- NCEXYHBECQHGNR-QZQOTICOSA-N sulfasalazine Chemical compound C1=C(O)C(C(=O)O)=CC(\N=N\C=2C=CC(=CC=2)S(=O)(=O)NC=2N=CC=CC=2)=C1 NCEXYHBECQHGNR-QZQOTICOSA-N 0.000 description 1
- 229960001940 sulfasalazine Drugs 0.000 description 1
- NCEXYHBECQHGNR-UHFFFAOYSA-N sulfasalazine Natural products C1=C(O)C(C(=O)O)=CC(N=NC=2C=CC(=CC=2)S(=O)(=O)NC=2N=CC=CC=2)=C1 NCEXYHBECQHGNR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000001258 synovial membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 229940037128 systemic glucocorticoids Drugs 0.000 description 1
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 1
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 1
- 229960000351 terfenadine Drugs 0.000 description 1
- 210000001550 testis Anatomy 0.000 description 1
- 229960002180 tetracycline Drugs 0.000 description 1
- 229930101283 tetracycline Natural products 0.000 description 1
- 235000019364 tetracycline Nutrition 0.000 description 1
- 150000003522 tetracyclines Chemical class 0.000 description 1
- 230000002537 thrombolytic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000451 tissue damage Effects 0.000 description 1
- 231100000827 tissue damage Toxicity 0.000 description 1
- 230000017423 tissue regeneration Effects 0.000 description 1
- 231100000167 toxic agent Toxicity 0.000 description 1
- 239000003440 toxic substance Substances 0.000 description 1
- 230000001131 transforming effect Effects 0.000 description 1
- 230000008733 trauma Effects 0.000 description 1
- 239000000814 tuberculostatic agent Substances 0.000 description 1
- 230000005748 tumor development Effects 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003954 umbilical cord Anatomy 0.000 description 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
- 210000005167 vascular cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
- 238000012800 visualization Methods 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 235000019155 vitamin A Nutrition 0.000 description 1
- 239000011719 vitamin A Substances 0.000 description 1
- 235000019160 vitamin B3 Nutrition 0.000 description 1
- 239000011708 vitamin B3 Substances 0.000 description 1
- 235000019154 vitamin C Nutrition 0.000 description 1
- 239000011718 vitamin C Substances 0.000 description 1
- 150000003700 vitamin C derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 150000003710 vitamin D derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 235000019165 vitamin E Nutrition 0.000 description 1
- 229940046009 vitamin E Drugs 0.000 description 1
- 239000011709 vitamin E Substances 0.000 description 1
- 235000019168 vitamin K Nutrition 0.000 description 1
- 239000011712 vitamin K Substances 0.000 description 1
- 150000003721 vitamin K derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 229940045997 vitamin a Drugs 0.000 description 1
- 229940046010 vitamin k Drugs 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- HBOMLICNUCNMMY-XLPZGREQSA-N zidovudine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](N=[N+]=[N-])C1 HBOMLICNUCNMMY-XLPZGREQSA-N 0.000 description 1
- 229960002555 zidovudine Drugs 0.000 description 1
- 239000002132 β-lactam antibiotic Substances 0.000 description 1
- 229940124586 β-lactam antibiotics Drugs 0.000 description 1
- 150000003952 β-lactams Chemical class 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/56—Materials from animals other than mammals
- A61K35/616—Echinodermata, e.g. starfish, sea cucumbers or sea urchins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/36—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/50—Materials characterised by their function or physical properties, e.g. injectable or lubricating compositions, shape-memory materials, surface modified materials
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/50—Materials characterised by their function or physical properties, e.g. injectable or lubricating compositions, shape-memory materials, surface modified materials
- A61L27/54—Biologically active materials, e.g. therapeutic substances
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/50—Materials characterised by their function or physical properties, e.g. injectable or lubricating compositions, shape-memory materials, surface modified materials
- A61L27/56—Porous materials, e.g. foams or sponges
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
Definitions
- the present invention is within the field of biomedicine and tissue engineering. Specifically, it refers to a new biomaterial and an in vitro method of preparing it. It also refers to its uses in regenerative medicine.
- the holothuria is an animal belonging to the echinoderm phylum, class Holothuroidea and, as such, has numerous calcified elements immersed in its external tissues, especially in the skin ( Figure 1).
- sea cucumbers have microstructures called spicules, ossicles, dermal ossicles, sclerites or calcareous corpuscles that are independent of each other and allow the animal great freedom of movement in extreme conditions. relaxed, and a great resistance when the tissues contract and the ossicles approach each other.
- the morphology of these ossicles is specific to each holoturia species and, in fact, is used to identify the different species existing in nature (Figure 2).
- Figure 2 Regarding its composition, it is about elements constituted fundamentally by calcium carbonate mineralized as calcite, and it can contain 5-13% of magnesium carbonate in ionic substitution.
- Each ossicle is synthesized by one or several cells of the animal, which adhere intimately to the surface of the ossicle. For this reason, the surface and size of the ossicles is potentially highly biocompatible, which supports its clinical use as an inducing agent of bone regeneration.
- FIG. 1 Histological images of different tissues of Holothur ⁇ a sanctori stained with hematoxylin and eosin in which abundant ossicles can be seen inside the soft tissue (some ossicles are marked with arrows).
- FIG. 1 Ossicles of different holothurian species analyzed by light microscopy.
- A Rook-type ossicles.
- B Smooth buttons and rough buttons.
- C Different types of ossicles.
- FIG. 3 Artificial fibhna-agarose tissues with dermal ossicles inside and human fibroblasts. Above: two images of hematoxylin-eosin stained non-decalcified artificial tissue showing the particles at the base of fibrin agarose (FA). Bottom: artificial tissues decalcified for histological processing and stained with hematoxylin-eosin in which the morphology is observed. of the cells (arrows) and the empty spaces in which the particles were lodged before decalcification. The bottom right image shows a tubularized artificial tissue.
- FIG. 4 Histological analysis of the artificial tubularized fiber-agarose tissues implanted in nude mice.
- A fibhna-agarose without ossicles
- B fibhna-agarose with 0.25% ossicles
- C fibhna-agarose with 0.5% ossicles
- D fibhna-agarose with 1% ossicles
- E fibhna-agarose with 2% ossicles
- F fibhna-agarose with 3% ossicles.
- Figure 5 In vivo functionality assays. On the left, the rabbit tibia is shown in which 4 defects have been made, each one being treated with a different product. On the right, the result is shown 60 days after the intervention.
- the authors of the present invention propose to use a biomaterial that is highly biocompatible and that presents better results in terms of bone regeneration than other currently available materials.
- its natural origin, from highly abundant fishery products in nature, gives it a potential benefit as an enhancer of the development of local fishing communities.
- a first aspect of the invention relates to echinoderm ossicles, hereinafter ossicles of the invention, for use as a medicine or, alternatively, for use in medicine.
- the authors of the present invention have extracted and purified the ossicles from the skin of various genera of sea cucumbers belonging to the genus Holothuria (fundamentally H. tubulosa, H. helleri and H. san Diego). Therefore, more preferably the ossicles are dermal ossicles from organisms of the genus Holothuria.
- the endoskeleton of echinoderms is composed of calcium carbonate ossicles found in a dermis derived from the mesoderm and located below the epidermis. Beneath the dermis layer are muscle layers and the peritoneum of the coelom.
- the ossicles that make up the skeleton are calcite with small amounts of magnesium carbonate. They usually have spines (fixed or mobile) and also projections (such as tubercles or granules). In holothurians, the ossicles are very small and these animals have very well developed muscular layers.
- holothurians or holothuroidea commonly known as cucumbers, cucumbers, sea cairns, polloburro or sea carajos, are a class of the Echinodermata phylum that includes animals with an elongated and soft vermiform body that live in the bottoms of the seas around the world. world.
- organisms of the Phylum Echinodermata, or echinoderms are understood to mean those cellular organisms that belong to the superkingdom Eukaryota, ciado Opisthokonta, Kingdom Metazoa, ciado Eumetazoa, ciado Bilateria, ciado Deuterostomia.
- Echinoderms comprise several classes: Asteroidea (starfish), Ophiuroidea (brittle stars), Echinoidea (sea urchins), Crinoidea (sea lilies or commats), Concentricycloidea (sea daisies), and Holoturioidea (holothurians).
- the organisms of the genus Holothur ⁇ a belong to the superkingdom Eukariota, ciate Opisthokonta, Kingdom Metazoa, ciate Eumetazoa, ciate Bilateria, ciate Deuterostomia, Phylum Echinodermata, Superclass Echinozoa, Class Holothuroidea, Order Aspidochirotida, Family Holothuriidae
- the type species of the genus is Holothuria physalis Linnaeus 1758
- Holothuriidae also refers to a family of organisms having a nucleotide sequence homologous to the region corresponding to the cytochrome oxidase I gene of mitochondrial DNA with at least 70% identity to SEQ ID NO. 1, and more preferably at least 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, or 99% identity to SEQ ID NO: 1. More preferably, the Homologous sequence of the region corresponding to the cytochrome oxidase I gene of mitochondrial DNA has 100% identity with SEQ ID NO: 1.
- identity refers to the proportion of identical nucleotides between two nucleotide sequences when compared. Sequence comparison methods are known in the art, and include, but are not limited to, BLASTP, BLASTN, and FASTA (S.F. Altschul etal., "Basic Local Alignment Search Tool", J. Mol Biol. 1990 , 215, 403-410).
- homologous nucleotide sequence refers to a sequence that is equivalent to the fragment of the region corresponding to the cytochrome oxidase I gene of the mitochondrial DNA of sequence SEQ ID NO: 1 of Holothuria sp, preferably Tubular holothuria.
- sequence that is equivalent means a nucleotide sequence that is within the cytochrome b or equivalent region in that particular species of Holothuria, and performs the same function. The skilled person is able to identify these equivalent regions with routine protocols.
- % identity refers to the percentage (%) of identity between two or more nucleotide sequences or amino acids. % Identity is a count of the number of positions along the length of the alignment of two sequences where all of the nucleotides or amino acids at that position are identical. The % identity is calculated based on homologous sequences of the same length.
- echinoderm ossicles can be used in the treatment of patients with severe bone injuries that require the implantation of materials that enhance bone regeneration.
- another aspect of the invention relates to echinoderm ossicles to partially or completely increase, restore or replace the functional activity of a diseased or damaged tissue or organ.
- the diseased or damaged tissue is bone tissue.
- the ossicles are dermal ossicles from organisms of the genus Holothuria.
- drug refers to any substance used for the prevention, diagnosis, alleviation, treatment or cure of diseases in man and animals.
- composition of the invention comprising the ossicles of the invention. More preferably the ossicles are dermal ossicles from organisms of the genus Holothuria.
- compositions of the invention may comprise other components useful for the medical purpose of the invention, mainly for tissue regeneration. Therefore, in another preferred embodiment, the composition of the invention also comprises fibrin and agarose. In another even more preferred embodiment, the composition of the invention further comprises a cell.
- composition of the invention may therefore comprise one or more cells, giving rise to an artificial tissue. Therefore, another aspect of the invention refers to an artificial tissue, hereinafter artificial tissue of the invention, comprising: a) the biomaterial or the composition of the invention, and b) at least one cell.
- the cell is a human cell.
- the cell is selected from: human hyaline, elastic or fibrous cartilage chondrocytes, liver cells, epithelial cells (for example, keratinocytes), fibroblasts or vascular cells, among others, or any combination thereof.
- the biomaterial of the invention can be used to totally or partially repair or replace bone that does not solidify, or that forms a pseudarthrosis (bone graft for regeneration of lost bone tissue, or as a bone substitute). ).
- Bone repair or replacement as a result of injury or fracture closely resembles the normal osteogenesis process of the skeleton, although it differs in some respects such as inflammation and increased mechanical forces in adults. It can be divided into sequential stages involving various cell types and growth factors:
- hematoma proinflammatory cascade with release of cytokines (mainly IL-1, IL-6 and TNF-a).
- BMP bone morphogenic proteins
- the osteoprogenitor cells differentiate into osteoblasts to regenerate the bone. If it is unstable, it differentiates into chondrocytes to form a layer of collagen that acts as a bridge between the ends of the fracture, thus constituting what is known as a soft callus; it is then calcified to form a bony callus and subsequently remodeled to form lamellar bone.
- Different cell types participate in this repair process in a coordinated manner (osteoprogenitor cells, fibroblasts, macrophages, chondroblasts, osteoblasts, osteoclasts).
- the cell and/or the cell population is selected from the list consisting of: fibroblasts, osteoblasts, osteocytes, osteoclasts, chondroblasts, chondrocytes, mesenchymal stem cells, or any combination thereof.
- the cell is a stem cell. More preferably, the stem cell is selected from: mesenchymal stem cells, hematopoietic stem cells, embryonic stem cells, induced pluhpotent stem cells, adult stem cells, or combinations thereof. Even more preferably, it is a mesenchymal stem cell. More preferably, the mesenchymal stem cell is obtained from bone marrow, adipose tissue, liver, spleen, testes, menstrual blood, amniotic fluid, pancreas, periosteum, synovial membrane, skeletal muscle, dermis, pericytes, trabecular bone, umbilical cord, lung, dental pulp and peripheral blood.
- mesenchymal stem cells is obtained from bone marrow, adipose tissue, liver, spleen, testes, menstrual blood, amniotic fluid, pancreas, periosteum, synovial membrane, skeletal muscle, dermis, pericytes, trabecular bone,
- the cell of any aspect of the invention can be genetically modified by any conventional method including, by way of illustration, without limitation, transgenesis processes, deletions or insertions in its genome that modify the expression of genes that are important for their basic properties (proliferation, migration, differentiation, etc.), or by inserting nucleotide sequences that encode proteins of interest, such as proteins with therapeutic properties. Therefore, in another preferred embodiment, the cell of any aspect of the invention has been genetically modified.
- the progeny of a single clonal cell can be expanded by multiple passages without apparently suffering from any chromosomal abnormality, or loss of growth and differentiation properties.
- cells of any aspect of the invention may be clonally expanded using any method suitable for cloning cell populations.
- a proliferating population of cells can be harvested physically and plated on a separate plate (or in the wells of a "multi-well” plate).
- cells can be subcloned into a "multi-well” plate in a statistical ratio to facilitate placing a single cell in each well (eg, from about 0.1 to about one cell/well or even approximately 0.25 to 0.5 cells/well, such as 0.5 cells/well).
- Cells can, of course, be cloned at low density (eg, into a Peth dish or other suitable substrate) and isolated from other cells using devices such as cloning rings.
- the production of a clonal population can be expanded in any suitable culture medium.
- the isolated cells can be cultured to a suitable point where their developmental phenotype can be assessed.
- Another aspect of the invention relates to a population of isolated cells, hereinafter a population of cells of the invention, comprising at least one cell of any aspect of the invention, preferably an adult cell.
- the cell population of the invention comprises at least 20%, preferably 40% and even more preferably 50%, 60%, 80%, 90%, 95% or 99% of cells of the invention.
- the cell population of the invention comprises at least 20%, preferably 40% and even more preferably 50%, 60%, 80%, 90%, 95% or 99% of cells of the invention.
- it is a cell population.
- the cell of the invention may be of autologous, allogeneic or xenogeneic origin. Preferably, they are of autologous origin.
- adult stem cell means that the stem cell is isolated from a tissue or organ of a person or animal in a state of growth after the embryonic state.
- the stem cells of the invention have been isolated in a postnatal state.
- they have been isolated from a mammal, and more preferably from a human, including neonates, juveniles, adolescents, and adults.
- chondrocyte used in the present invention refers to a cell type present in cartilage, responsible for the production and maintenance of the cartilaginous matrix, which mainly comprises collagen and proteoglycans.
- the organization of this cell type in cartilage differs depending on the type of cartilage and the tissue where it is found.
- mesenchymal stem cells of mesodermal origin
- differentiate towards the osteochondrogenic lineage in reference to bone or cartilage.
- These undifferentiated mesenchymal stem cells proliferate and accumulate in a dense assembly of chondrogenic cells (cartilage) in the chondrification center.
- chondrogenic cells differentiate into chondroblasts capable of synthesizing the extracellular matrix of cartilage, which comprises proteoglycans, low osmotic potential glycosaminoglycans, and fibers.
- the chondroblasts are then confined to a small space or lacuna that is no longer in contact with the newly created matrix and contains extracellular fluid.
- the chondroblast at this stage is the chondrocyte, which is generally inactive but can still secrete and degrade matrix depending on conditions.
- osteocyte used in the present invention refers to a cell type formed from osteoblast differentiation, which in turn derives from osteoprogenitor cells.
- the osteocyte together with the osteoclast, constitutes the cellular element of bone tissue.
- the osteocyte is characterized by a slightly elongated and basophilic cytoplasm, with an enormous number of cytoplasmic extensions, a rough endoplasmic reticulum and an underdeveloped Golgi apparatus, presenting small lipid droplets and small amounts of glycogen. This cell type has the ability to secrete or reabsorb the surrounding bone matrix.
- osteoblasts are derived from osteoblasts that become trapped in matrix lacunae.
- osteoclast refers to those cells responsible for resorption of the bone matrix. They are large polynuclear cells that are located on bone surfaces firmly associated with the bone matrix. Osteoclasts are formed by the fusion of various mononuclear cells derived from a blood stem cell in the bone marrow, displaying many properties of macrophages. Osteoclasts are characterized by having a "wrinkled” portion of their membrane, brush-shaped, surrounded by a cytoplasm free of organelles, called “clear zone” with which it adheres to the surface of the bone through integhnas, specialized bone receptors.
- the resorption process begins when the cell's Golgi apparatus excretes lysosomes with enzymes capable of producing an acidic microenvironment below the wrinkled membrane as a consequence of proton transport by the ATP-dependent proton pump, Na+/H+ exchange. and carbonic anhydrase.
- the osteoclast lysosomal enzymes involved in this process are cysteine proteases such as cathepsin and, above all, tartrate-resistant acid phosphatase (the latter is used as a marker of the osteoclastic phenotype).
- the lysosomal enzymes are only released in the clear area near the wrinkled border, producing in this area the degradation reactions of the matrix that must occur before the acid medium dissolves the mineral salts of the bone.
- Osteoclastic resorption is dependent on a number of external regulatory factors such as parathyroid hormone, 1,25-dihydroxyvitamin D3, and calcitonin. Other factors that affect the functionality of osteoclasts are glucocorticoids and prostaglandins.
- proliferation or “expansion” in the context of the present invention is used to refer to an increase in cell number, resulting from cell division.
- subject includes any animal, in particular, vertebrate animals, preferably mammals, such as mice, rats, horses, pigs, rabbits, cats, sheep, dogs, cows, humans, etc.
- mammal refers to any organism of the superkingdom Eukaryota, kingdom Metazoa, Phylum Chordata, class Mammalia. Therefore, the cells used in the artificial tissue of the invention can belong to any animal, preferably a mammal. In another even more preferred embodiment, the mammal is human.
- composition of the invention or the artificial tissue of the invention for its use in medicine, or alternatively, for its use as a medicine.
- Another aspect of the invention refers to the composition of the invention or the artificial tissue of the invention to increase, restore or partially or totally replace the functional activity of a diseased or damaged tissue or organ. More preferably, the diseased or damaged tissue is bone tissue.
- the composition or artificial tissue of the invention further comprises a pharmaceutically acceptable carrier.
- the composition of the invention also comprises at least one active ingredient or therapeutic agent.
- Said therapeutic agent is preferably selected from an analgesic agent (in the treatment of inflammation and pain) or an anti-infective agent (in the prevention of infection). Even more preferably it comprises pharmaceutically acceptable excipients.
- therapeutic agents useful according to the invention include the following therapeutic categories: analgesics, such as nonsteroidal anti-inflammatory drugs, opiate agonists, and salicylates; anti-infective agents, such as anthelmintics, antianaerobics, antibiotics, aminoglycoside antibiotics, antifungal antibiotics, cephalosporins, macrolide antibiotics, various beta-lactam antibiotics, penicillins, quinolone antibiotics, sulfonamide antibiotics, tetracycline antibiotics, antimycobacterials, antituberculous antimycobacterials, antiprotozoals, antiprotozoals antimalarials, antiviral agents, anti-retroviral agents, scabicides, anti-inflammatory agents, anti-inflammatory corticosteroids, topical antipruritic/local anesthetics, anti-infectives, topical anti-infective antifungals, topical anti-infective antivirals, electrolyte and
- the therapeutic agents useful according to the previous categories include: (1) analgesics in general, such as lidocaine or its derivatives, and non-steroidal anti-inflammatory drugs (NSAIDs) analgesics, including diclofenac, ibuprofen, ketoprofen, naproxen and, ( 2) opioid agonist analgesics, such as codeine, fentanyl, hydromorphone, and morphine, (3) salicylate analgesics, such as aspirin (ASA), (4) antihistamine H1 blockers, such as terfenadine, clemastine, and (5) anti-inflammatory agents.
- analgesics in general such as lidocaine or its derivatives
- NSAIDs non-steroidal anti-inflammatory drugs
- opioid agonist analgesics such as codeine, fentanyl, hydromorphone, and morphine
- salicylate analgesics such as aspirin (ASA)
- ASA aspirin
- anti-infective antianaerobics such as chloramphenicol and clindamycin
- anti-infective antibiotic antifungals such as amphotehcin B, clotrimazole, fluconazole, and ketoconazole
- macrolide antibiotic -infectious such as azithromycin and ehthromycin
- various beta-lactam anti-infectives such as aztreonam and imipenem
- anti-infective penicillin antibiotic such as nafcillin, oxacillin, penicillin G, penicillin V and
- quinolone anti-infective antibiotics such as ciprofloxacin and norfloxacin
- anti-infective tetracycline antibiotic such as doxycycline, minocycline and tetracycline
- antiinfective antimycobacterial antituberculous agents such as isonia
- the therapeutic agent can be a growth factor or another molecule that affects cell differentiation and/or proliferation, such as, but not limited to, platelet derivative (PDGF), transforming (TGF), insulin (IGF), hepatic (HGF), epidermal (EGF), vascular endothelial (VEGF), fibroblast growth factor (FGF), or any of their combinations.
- PDGF platelet derivative
- TGF transforming
- IGF insulin
- HGF hepatic
- EGF epidermal
- VEGF vascular endothelial
- FGF fibroblast growth factor
- a variant can be generated by making conservative amino acid changes and testing the resulting variant in one of the functional assays described above or another functional assay known in the art.
- Conservative amino acid substitutions refer to the interchangeability of residues having similar side chains.
- one group of amino acids that have aliphatic side chains is glycine, alanine, valine, leucine, and isoleucine; a group of amino acids having aliphatic-hydroxyl in their side chains is serine and threonine;
- a group of amino acids that have amide-containing side chains is asparagine and glutamine; a group of amino acids having aromatic side chains is phenylalanine, tyrosine, and thptophan; a group of amino acids that have basic side chains is lysine, arginine, and histidine, and a group of amino acids that have sulfur-containing side chains is cysteine and methionine.
- Preferred amino acid substitution groups are: valine-leucine-isoleucine,
- polypeptide growth factor variants or fragments can be generated using conventional techniques, such as mutagenesis, including the creation of discrete point mutation(s), or by truncation.
- mutation can give rise to variants that retain substantially the same, or just a subset, of the biological activity of a polypeptide growth factor from which it was derived.
- the therapeutic agent can be Plasma Rich in Growth Factors PRGF (Plasma Rich in Growth Factors). It is based on the use of platelets as a vehicle for the controlled release of different cellular signals that accelerate and optimize the repair of damaged tissues for various reasons, such as surgical treatment, trauma or disease.
- PRGF Plasma Rich in Growth Factors
- the therapeutic agent is basic fibroblast growth factor.
- basic fibroblast growth factor or "bFGF” (basic fibroblast growth factor) or “FGF2" or “FGF-[3” refers to a factor that is a member of the family of fibroblast growth factors that allows the maintenance of of cells undifferentiated human embryonic stem cells, and that stimulates the proliferation of cells of mesodermal origin, as well as many cells of neuroectodermal, ectodermal and endodermal origin.
- bFGF is encoded by the FGF2 gene. This protein is activated during tissue damage or tumor development mediating angiogenic processes.
- pharmaceutically acceptable carrier means a carrier that must be approved by a federal or state government regulatory agency or listed in the United States Pharmacopoeia or European Pharmacopoeia, or other generally recognized pharmacopoeia for use in animals, and more specifically in humans.
- vehicle refers to a diluent, adjuvant, excipient or carrier with which the biomaterial or the composition of the invention must be administered. Obviously, said vehicle must be compatible with said biomaterial and with other components that the composition of the invention may comprise, for example, but not limited to, cells.
- active ingredient means any component that potentially provides a pharmacological activity or other different effect in the diagnosis, cure, mitigation, treatment, or prevention of disease, or affecting the structure or function of the body of man or other animals.
- the term includes those components that promote a chemical change in the drug formulation and are present in the drug in a modified form intended to provide the specific activity or effect.
- the pharmaceutical composition of the invention can be stored until the moment of its application by means of conventional procedures known to those skilled in the art.
- This pharmaceutical composition can also be stored together with additional drugs, useful in the treatment of diseases, in an active form that comprises a combined therapy.
- the invention consists of obtaining and using holoturia dermal ossicles for the treatment of bone lesions. To do this, first of all, we proceeded to extract and purify the skin ossicles of various genera of holothurians belonging to the genus Holothur ⁇ a (in our environment, fundamentally, H. tubulosa, H. helleri and H. sanctori).
- the ossicles After confirming the presence of the ossicles by means of direct visualization in a phase contrast microscope or polarized light, they are sterilized by treatment with 70% ethanol for 20 minutes, and then left to dry in a sterile laminar flow cabinet. These particles can also be sterilized by any other method, including autoclaving.
- the product obtained will contain buttons, towers, plates or other types of ossicles.
- the results show an adequate repair of the three lesions treated with holoturia ossicles, with or without associated biomaterials, while the hole without biomaterial seemed to have defects on its surface.
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Oral & Maxillofacial Surgery (AREA)
- Transplantation (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Botany (AREA)
- Marine Sciences & Fisheries (AREA)
- Zoology (AREA)
- Dispersion Chemistry (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
Nuevo biomaterial para ingeniería tisular. La presente invención propone un nuevo biomaterial basado en osículos de equinodermo, método in vitro de preparación del mismo y usos en medicina regenerativa.
Description
DESCRIPCIÓN
NUEVO BIOMATERIAL PARA INGENIERÍA TISULAR
CAMPO DE LA TÉCNICA
La presente invención se encuentra dentro del campo de la biomedicina e ingeniería tisular. Específicamente, se refiere a un nuevo biomaterial y un método in vitro de preparación del mismo. También se refiere a sus usos en medicina regenerativa.
ESTADO DE LA TÉCNICA ANTERIOR
Los enormes avances de la ingeniería de tejidos y los biomateriales han permitido desarrollar nuevos biomateriales para el tratamiento de las lesiones de la mayor parte de los tejidos y órganos humanos. Sin embargo, los tejidos duros, especialmente el hueso, son muy difíciles de tratar debido a sus especiales características biológicas y funcionales, y la mayoría de los biomateriales actualmente disponibles para el tratamiento de las lesiones óseas presentan muy escasa biocompatibilidad y funcionalidad in vivo.
Hasta la fecha, las lesiones graves del hueso humano se tratan mediante injerto de hueso humano procedente de donante, hueso de animal liofilizado, partículas de hidroxiapatita y materiales similares, cuya biointegración en el hueso es muy lenta y presenta bajas tasas de éxito. Por ello, la búsqueda de nuevos materiales altamente biocompatibles para uso en la reparación de defectos óseos es una prioridad en el campo de la traumatología.
En este contexto, la holoturia es un animal perteneciente al filo de los equinodermos, clase Holothuroidea y, como tal, posee numerosos elementos calcificados inmersos en sus tejidos externos, especialmente en la piel (Figura 1 ). A diferencia de otros equinodermos, la holoturia posee microestructuras denominadas espículas, osículos, osículos dérmicos, escleritos o corpúsculos calcáreos que son independientes unas de otras y permiten al animal una gran libertad de movimientos en condiciones
relajadas, y una gran resistencia cuando los tejidos se contraen y los osículos se acercan unos a otros.
En general, la morfología de estos osículos es propia de cada especie de holoturia y, de hecho, se utiliza para identificar las diferentes especies existentes en la naturaleza (Figura 2). Respecto a su composición, se trata de elementos constituidos fundamentalmente por carbonato cálcico mineralizado como calcita, y puede contener un 5 - 13% de carbonato magnésico en sustitución iónica.
Cada osículo es sintetizado por una o vahas células del animal, las cuales se adhieren íntimamente a la superficie del osículo. Por ese motivo, la superficie y el tamaño de los osículos es, potencialmente, altamente biocompatible, lo cual apoya su utilización clínica como agente inductor de la regeneración ósea.
Actualmente los biomatehales que se emplean en medicina regenerativa para reparar tejido duro (óseo) son muy poco biocompatibles, lo que hace necesario desarrollar nuevos biomatehales que tengan poros de un tamaño adecuado y una rugosidad que los haga óptimos para ser empleados en medicina regenerativa.
DESCRIPCIÓN DE LAS FIGURAS
Figura 1. Imágenes histológicas de distintos tejidos de Holothuría sanctori teñidos mediante hematoxilina y eosina en la que se aprecian abundantes osículos en el interior del tejido blando (se marcan algunos osículos con flechas). A: tejido branquial. B: epidermis. C: pared muscular.
Figura 2. Osículos de distintas especies de holoturia analizados mediante microscopía óptica. A: Osículos de tipo torre. B: Botones lisos y botones rugosos. C: Distintos tipos de osículos.
Figura 3. Tejidos artificiales de fibhna-agarosa con osículos dérmicos en su interior y fibroblastos humanos. Arriba: dos imágenes del tejido artificial no descalcificado teñido con hematoxilina-eosina en las que se observan las partículas en la base de la fibrina agarosa (FA). Abajo: tejidos artificiales descalcificados para su procesamiento histológico y teñidos con hematoxilina-eosina en los que se observa la morfología
normal de las células (flechas) y los espacios vacíos en los que se alojaban las partículas antes de la descalcificación. La imagen de abajo a la derecha muestra un tejido artificial tubulizado.
Figura 4. Análisis histológico de los tejidos artificiales tubulizados de fibhna-agarosa implantados en ratones desnudos. A: fibhna-agarosa sin osículos, B: fibhna-agarosa con 0.25% osículos, C: fibhna-agarosa con 0.5% osículos, D: fibhna-agarosa con 1 % osículos, E: fibhna-agarosa con 2% osículos, F: fibhna-agarosa con 3% osículos.
Figura 5. Ensayos de funcionalidad ¡n vivo. A la izquierda, se muestra la tibia del conejo en la que se han realizado 4 defectos, tratándose cada uno con un producto diferente. A la derecha, se muestra el resultado a los 60 días de la intervención.
Figura 6. Imagen histológica a bajo aumento de la tibia del conejo a los 60 días de la intervención quirúrgica.
DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN
Los autores de la presente invención proponen emplear un biomatehal altamente biocompatible y que presenta mejores resultados en términos de regeneración ósea que otros materiales actualmente disponibles. Además, su origen natural, procedente de productos de la pesca altamente abundantes en la naturaleza, le aporta un potencial beneficio como potenciador del desarrollo de las comunidades pesqueras locales.
Bl O MATERIAL DE LA INVENCIÓN
Por tanto, un primer aspecto de la invención se refiere a osículos de equinodermos, de ahora en adelante osículos de la invención, para su uso como medicamento o, alternativamente, para su uso en medicina.
Los autores de la presente invención han extraído y purificado los osículos de la piel de diversos géneros de holoturias pertenecientes al género Holothuria (fundamentalmente H. tubulosa, H. helleri y H. sanción). Por tanto, más
preferiblemente los osículos son osículos dérmicos de organismos del género Holothuría.
El endoesqueleto de los equinodermos está compuesto por osículos de carbonato cálcico que se encuentran en una dermis que deriva del mesodermo y que se encuentra debajo de la epidermis. Por debajo de la capa de dermis hay capas musculares y el peritoneo del celoma.
Los osículos que componen el esqueleto son de calcita con pequeñas cantidades de carbonato de magnesio. Suelen presentar espinas (fijas o móviles) y también salientes (como tubérculos o granulos). En las holoturias, los osículos son muy pequeños y estos animales poseen capas musculares muy bien desarrolladas.
Las holoturias u holoturoideos (Holothuroidea) conocidos vulgarmente como pepinos, cohombros, mojón de mar, pollaburro o carajos de mar, son una clase del filo Equinodermos que incluye animales de cuerpo vermiforme alargado y blando que viven en los fondos de los mares de todo el mundo.
En esta memoria, se entiende por organismos del Phylum Echinodermata, o equinodermos, a aquellos organismos celulares que pertenecen al superreino Eukariota, ciado Opisthokonta, Reino Metazoa, ciado Eumetazoa, ciado Bilateria, ciado Deuterostomia.
Los equinodermos comprenden vahas clases: Asteroidea (estrellas de mar), Ophiuroidea (ofiuras), Echinoidea (erizos de mar), Crinoidea (lirios de mar o comátulas), Concentricycloidea (margaritas del mar) y Holoturioidea (holoturias).
Los organismos del género Holothuría pertenecen al superreino Eukariota, ciado Opisthokonta, Reino Metazoa, ciado Eumetazoa, ciado Bilateria, ciado Deuterostomia, Phylum Echinodermata, Superclase Echinozoa, Clase Holothuroidea, Orden Aspidochirotida, Familia Holothuriidae
La especie tipo del género es Holothuría physalis Linnaeus 1758
Alternativamente, Holothuriidae también se refiere a una familiase un organismo que tiene una secuencia nucleotídica homologa de la región correspondiente al gen citocromo oxidasa I del ADN mitocondhal con una identidad de al menos un 70% con
la SEQ ID NO. 1 , y más preferiblemente una identidad de al menos un 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, o 99% con la SEQ ID NO: 1. Más preferiblemente, la secuencia homologa de la región correspondiente al gen citocromo oxidasa I del ADN mitocondhal tiene una identidad del 100% con la SEQ ID NO: 1.
SEQ ID NO: 1
Holothuría tubulosa cytochrome oxidase I (COI) gene, partial cds; mitocondhal (GenBank: GU797718.1 ) ataggagggtttggaaaatgactcatacctttaatgataggagctcccgatatggccttccctcgaatgaaaaacatga gcttctggttaatccccccatcctttatactactcttagcctcagcaggagtagaaagaggtgccggcacaggttggaca atttaccctccattgtccagaaacattgcccacgccggaggatcagtcgacctggctattttttccctacatttggccgga gcttcatcaatactagcctcaattaacttcataacaacaatcataaaaatgcggaccccaggagtaaccttcgaccgg ctcccactattcgtatggtctgttttcataacagcattcctactactactcagactcccagttctagcaggagcaataacaa tgctcttaacagaccgaaacataaaaacaaccttcttcgaccccgctggaggaggagaccctatactattccaacattt attctggttttttggacatccagaagtctacattctaatcctacctggattcgggatgatatcccacgtgataaccca
El término “identidad”, como se usa aquí, se refiere a la proporción de nucleótidos idénticos entre dos secuencias nucleotídicas cuando se comparan. Los métodos de comparación de las secuencias son conocidos en el estado del arte, e incluye, pero no se limita a, BLASTP, BLASTN, y FASTA (S.F. Altschul etal., “Basic Local Alignment Search Tool”, J. Mol Biol. 1990, 215, 403-410).
El término "secuencia de nucleótidos homologa", como se usa en este documento, se refiere a una secuencia que es equivalente al fragmento de la región correspondiente al gen citocromo oxidasa I del ADN mitocondhal de secuencia SEQ ID NO: 1 de Holothuría sp, preferiblemente Holothuría tubulosa. La expresión "una secuencia que es equivalente" significa una secuencia de nucleótidos que está dentro del citocromo b o región equivalente en esa especie de Holothuría en particular, y realiza la misma función. La persona experta es capaz de identificar estas regiones equivalentes con protocolos de rutina.
El término "% de identidad", como se entiende en esta invención, se refiere al porcentaje (%) de identidad entre dos o más secuencias de nucleótidos o
aminoácidos. El % de identidad es un recuento del número de posiciones sobre la longitud de la alineación de dos secuencias donde todos los nucleótidos o aminoácidos en esa posición son idénticos. El % de identidad se calcula en base a secuencias homologas de la misma longitud.
Los autores de la presente invención han demostrado que los osículos de equinodermos pueden emplearse en el tratamiento de pacientes con graves lesiones del hueso que requieran el implante de materiales potenciadores de la regeneración ósea.
Por tanto, otro aspecto de la invención se refiere a osículos de equinodermos para aumentar, restaurar o reemplazar parcial o completamente la actividad funcional de un tejido u órgano enfermo o dañado. En una realización preferida, el tejido enfermo o dañado es un tejido óseo. Más preferiblemente, los osículos son osículos dérmicos de organismos del género Holothuría.
El término “medicamento”, tal y como se usa en esta memoria, hace referencia a cualquier sustancia usada para prevención, diagnóstico, alivio, tratamiento o curación de enfermedades en el hombre y los animales
COMPOSICIONES Y TEJIDO ARTIFICIAL DE LA INVENCIÓN
Otro aspecto de la invención se refiere a una composición, de ahora en adelante composición de la invención, que comprende los osículos de la invención. Más preferiblemente los osículos son osículos dérmicos de organismos del género Holothuría.
Las composiciones de la invención pueden comprender otros componentes útiles para la finalidad médica de la invención, principalmente para la regeneración de tejidos. Por tanto, en otra realización preferida, la composición de la invención además comprende fibrina y agarosa. En otra realización aún más preferida, la composición de la invención además comprende una célula.
La composición de la invención puede, por tanto, comprender una o más células, dando lugar a un tejido artificial.
Por tanto, otro aspecto de la invención se refiere a un tejido artificial, de ahora en adelante tejido artificial de la invención, que comprende: a) el biomaterial o la composición de la invención, y b) al menos una célula.
En una realización preferida de la invención, la célula es una célula humana. En otra realización preferida, la célula se selecciona de entre: condrocitos de cartílago hialino, elástico o fibroso humano, células hepáticas, células epiteliales (por ejemplo, queratinocitos), fibroblastos o células vasculares, entre otras, o cualquiera de sus combinaciones.
Tal y como se muestra en los ejemplos, el biomaterial de la invención se puede emplear para reparar o reemplazar total o parcialmente el hueso que no solidifica, o que forma una pseudoartrosis (injerto óseo para regeneración de tejido perdido de hueso, o como sustituto óseo).
La reparación o reemplazamiento del hueso como consecuencia de una lesión o fractura se asemeja mucho al proceso de osteogénesis normal del esqueleto, aunque difiere en algunos aspectos tales como la inflamación y el aumento de fuerzas mecánicas en los adultos. Se puede dividir en etapas secuenciales que involucran vahos tipos celulares y factores de crecimiento:
1.- Respuesta inflamatoria: hematoma, cascada proinflamatoha con liberación de citoquinas (principalmente IL-1 , IL-6 y TNF-a).
2.- Expresión y liberación de proteínas morfogénicas óseas (BMP) por parte de células osteoprogenitoras cercanas a la fractura, y liberación de citoquinas que reclutan células mesenquimales.
3.- Si la fractura es mecánicamente estable, las células osteoprogenitoras se diferencian a osteoblastos para regenerar el hueso. Si es inestable, se diferencia a condrocitos para formar una capa de colágeno que actúa como puente entre los extremos de la fractura, constituyéndose así lo que se conoce como callo blando; luego es calcificado para formar un callo óseo y posteriormente se remodela para formar hueso laminar.
En este proceso de reparación participan coordinadamente diferentes tipos celulares (células osteoprogenitoras, fibroblastos, macrófagos, condroblastos, osteoblastos, osteoclastos).
Por tanto, en otra realización más preferida, la célula y/o la población celular se selecciona de la lista que consiste en: fibroblastos, osteoblastos, osteocitos, osteoclastos, condroblastos, condrocitos, células madre mesenquimales, o cualquiera de sus combinaciones.
En otra realización preferida de la invención, la célula es una célula madre. Más preferiblemente, la célula madre se selecciona de entre: células madre mesenquimales, células madre hematopoyéticas, células madre embrionarias, células madre pluhpotentes inducidas, células madre adultas o combinaciones de las mismas. Aún más preferiblemente, es una célula madre mesenquimal. Más preferiblemente, la célula madre mesenquimal se obtiene a partir de médula ósea, tejido adiposo, hígado, bazo, testículos, sangre menstrual, fluido amniótico, páncreas, periostio, membrana sinovial, músculo esquelético, dermis, pericitos, hueso trabecular, cordón umbilical, pulmón, pulpa dental y sangre periférica.
Si se desea, la célula de cualquier aspecto de la invención puede modificarse genéticamente mediante cualquier método convencional incluyendo, a modo de ilustración, sin limitación, procesos de transgénesis, deleciones o inserciones en su genoma que modifiquen la expresión de genes que son importantes por sus propiedades básicas (proliferación, migración, diferenciación, etc.), o mediante la inserción de secuencias de nucleótidos que codifiquen proteínas de interés como, por ejemplo, proteínas con propiedades terapéuticas. Por tanto, en otra realización preferida, la célula de cualquier aspecto de la invención ha sido modificada genéticamente.
En ciertos casos, la progenie de una sola célula clonal puede expandirse mediante numerosos pases, sin que aparentemente sufra ninguna anomalía cromosómica, o la pérdida de sus propiedades de crecimiento y diferenciación.
Por tanto, si se desea, las células de cualquier aspecto de la invención se pueden expandir clonalmente usando un método adecuado para clonar poblaciones celulares. Por ejemplo, una población proliferada de células puede recolectarse
físicamente y sembrarse en una placa separada (o en los pocilios de una placa de "múltiples pocilios"). Otra opción es que las células se pueden subclonar en una placa de "múltiples pocilios" en una relación estadística para facilitar la operación de colocar una sola célula en cada pocilio (por ejemplo, de aproximadamente 0,1 a aproximadamente una célula / pocilio o incluso aproximadamente 0,25 a 0,5 células / pocilio, como 0,5 células / pocilio). Por supuesto, las células pueden clonarse a baja densidad (por ejemplo, en una placa de Peth u otro sustrato adecuado) y aislarse de otras células usando dispositivos tales como anillos de clonación. La producción de una población clonal se puede expandir en cualquier medio de cultivo adecuado. En cualquier caso, las células aisladas se pueden cultivar hasta un punto adecuado en el que se pueda evaluar su fenotipo de desarrollo. Otro aspecto de la invención se refiere a una población de células aisladas, en adelante población de células de la invención, que comprende al menos una célula de cualquier aspecto de la invención, preferiblemente una célula adulta. En una realización preferida, la población celular de la invención comprende al menos el 20%, preferiblemente el 40% e incluso más preferiblemente el 50%, 60%, 80%, 90%, 95% o 99% de células de la invención. En una realización preferida, la población celular de la invención comprende al menos el 20%, preferiblemente el 40% e incluso más preferiblemente el 50%, 60%, 80%, 90%, 95% o 99% de células de la invención.
Por tanto, en una realización aún más preferida, es una población celular.
La célula de la invención, o la población celular de la invención, puede ser de origen autólogo, alogénico o xenogénico. Preferiblemente, son de origen autólogo.
El término "célula madre adulta" significa que la célula madre se aísla de un tejido u órgano de una persona o animal en un estado de crecimiento después del estado embrionario. Preferiblemente, las células madre de la invención se han aislado en un estado posnatal. Preferiblemente, se han aislado de un mamífero y, más preferiblemente, de un ser humano, incluidos neonatos, jóvenes, adolescentes y adultos.
El término "condrocito" empleado en la presente invención hace referencia a un tipo celular presente en el cartílago, responsable de la producción y mantenimiento de la matriz cartilaginosa, la cual comprende fundamentalmente colágeno y
proteoglucanos. La organización de este tipo celular en el cartílago difiere en función del tipo de cartílago y el tejido en donde se encuentre. En referencia al hueso o al cartílago, las células madre mesenquimales (de origen mesodérmico) se diferencian hacia el linaje osteocondrogénico. Dichas células madre mesenquimales no diferenciadas proliferan y se acumulan en un conjunto denso de células condrogénicas (cartílago) en el centro de condrificación. Estas células condrogénicas se diferencian a condroblastos capaces de sintetizar la matriz extracelular del cartílago, que comprende proteoglucanos, glucosaminoglucanos de bajo potencial osmótico y fibras. A continuación, los condroblastos quedan confinados en un espacio pequeño o laguna que ya no está en contacto con la matriz de nueva creación y que contiene líquido extracelular. El condroblasto en dicho estadio es el condrocito, que es generalmente inactivo pero aún pueden secretar y degradar la matriz dependiendo de las condiciones.
El término "osteocito" empleado en la presente invención hace referencia a un tipo celular formado a partir de la diferenciación del osteoblasto, que a su vez deriva de células osteoprogenitoras. El osteocito, junto con el osteoclasto, constituye el elemento celular del tejido óseo. El osteocito se caracteriza por presentar un citoplasma ligeramente alargado y basófilo, con una enorme cantidad de prolongaciones citoplásmaticas, retículo endoplásmico rugoso y aparato de Golgi poco desarrollados, presentando pequeñas gotas de lípidos y pequeñas cantidades de glucógeno. Este tipo celular tiene la capacidad de segregar o reabsorber la matriz ósea que le rodea. A pesar de la distancia que hay entre los osteocitos, y de la cantidad de matriz que los separa, estos permanecen en contacto a través de pequeños canales presentes a lo largo del hueso, de modo que la comunicación de los osteocitos es importante para controlar la cantidad de hueso que se forma y deteriora. Los osteocitos derivan de osteoblastos que quedan atrapados en las lagunas de la matriz.
El término "osteoclasto" hace referencia a aquellas células responsables de resorción de la matriz ósea. Son células polinucleadas de gran tamaño que se localizan en las superficies óseas firmemente asociadas a la matriz ósea. Los osteoclastos se forman por la fusión de vahas células mononucleares derivadas de una célula madre sanguínea de la médula ósea mostrando muchas propiedades de los macrofagos. Los osteoclastos se caracterizan por disponer de una porción de su membrana "arrugada",
en forma de cepillo, rodeada de un citoplasma libre de orgánulos, llamada "zona clara" con la que se adhiere a la superficie del hueso mediante integhnas, unos receptores especializados del hueso. El proceso de resorción se inicia cuando el aparato de Golgi de la células excreta lisosomas con enzimas capaces de producir un microambiente ácido por debajo de la membrana arrugada como consecuencia del transporte de protones mediante la bomba de protones ATP-dependiente, el intercambio Na+/H+ y la anhidrasa carbónica. Las enzimas lisosomales de los osteoclastos implicadas en este proceso son cistein-proteasas como la catepsina y sobre todo, la fosfatasa ácida tartrato-resistente (esta última se utiliza como marcador del fenotipo osteoclástico). Las enzimas lisosomales solo son liberadas en la zona clara en las proximidades del borde arrugado, produciéndose en este área las reacciones de degradación de la matriz que deben producirse antes de que le medio ácido disuelva las sales minerales del hueso. La resorción osteoclástica depende de una serie de factores reguladores externos como la hormona paratiroidea, la 1 ,25-dihidroxivitamina D3 y la calcitonina. Otros factores que afectan la funcionalidad de los osteoclastos son los glucocorticoides y las prostaglandinas.
El término "proliferación" o "expansión" en el contexto de la presente invención se emplea para hacer referencia a un aumento en el número celular, derivado de la división celular.
El término "sujeto" incluye cualquier animal, en particular, animales vertebrados, preferiblemente mamíferos, tales como ratones, ratas, caballos, cerdos, conejos, gatos, ovejas, perros, vacas, seres humanos, etc. El término mamífero, como se entiende aquí, se refiere a cualquier organismo del superreino Eukaryota, reino Metazoa, Phylum Chordata, clase Mammalia. Por tanto, las células que se emplean en el tejido artificial de la invención pueden pertenecer a cualquier animal, preferiblemente un mamífero. En otra realización incluso más preferida, el mamífero es el ser humano.
Otro aspecto se refiere a la composición de la invención o al tejido artificial de la invención para su uso en medicina, o alternativamente, para su uso como medicamento.
Otro aspecto de la invención se refiere a la composición de la invención o al tejido artificial de la invención para incrementar, restaurar o sustituir parcial o totalmente la actividad funcional de un tejido o un órgano enfermo o dañado. Más preferiblemente, el tejido enfermo o dañado es el tejido óseo.
En una realización preferida de este aspecto, la composición o el tejido artificial de la invención además comprende un vehículo farmacéuticamente aceptable. En otra realización preferida, la composición de la invención además comprende al menos un principio activo o agente terapéutico. Dicho agente terapéutico se selecciona, preferiblemente, de entre un agente analgésico (en el tratamiento de la inflamación y del dolor) o un agente anti infeccioso (en la prevención de infección). Aún más preferiblemente comprende excipientes farmacéuticamente aceptables.
En particular, ejemplos no limitantes de agentes terapéuticos de utilidad de acuerdo a la invención incluyen las siguientes categorías terapéuticas: analgésicos, como los medicamentos anti-inflamatorios no esteroideos, agonistas opiáceos y salicilatos; agentes anti-infecciosos, tales como antihelmínticos, antianaeróbicos, antibióticos, antibióticos aminoglucósidos, antibióticos antifúngicos, cefalosporinas, antibióticos macrólidos, diversos antibióticos beta-lactámicos, penicilinas, antibióticos quinolonas, antibióticos sulfonamidas, antibióticos de tetraciclina, antimicobactehanos, antimicobacterianos antituberculosos, antiprotozoarios, antiprotozoarios antimaláricos, agentes antivirales, agentes anti-retrovirales, escabicidas, agentes antiinflamatorios, corticosteroides antiinflamatorios, antipruriginosos/anestésicos tópicos locales, antiinfecciosos, antimicóticos tópicos antiinfecciosos, antivirales tópicos antiinfecciosos, agentes electrolíticos y renales, tales como agentes acidificantes, agentes alcalinizantes, diuréticos, inhibidores de la anhidrasa carbónica, diuréticos, diuréticos de asa, diuréticos osmóticos, diuréticos ahorradores de potasio, diuréticos de tiazida, suplementos de electrolitos, y agentes uricosúricos, enzimas, tales como enzimas pancreáticas y las enzimas trombolíticos, agentes gastrointestinales, tales como antidiarreicos, antieméticos, gastrointestinales agentes anti-inflamatorios gastrointestinales, el salicilato de agentes anti-inflamatorios, antiácidos anti-úlcera gástrica, agentes inhibidores de la bomba de ácido antiulcerosos agentes, mucosa gástrica antiulcerosos agentes bloqueantes H2, antiulcerosos, agentes colelitolíticos digestants, eméticos, laxantes y ablandadores de heces y agentes procinéticos,
anestésicos generales como los anestésicos inhalatorios halogenados anestésicos inhalatorios, anestésicos intravenosos, barbitúricos, benzodiazepinas anestésicos intravenosos anestésicos por vía intravenosa de opiáceos y anestésicos intravenosos agonistas, hormonas y modificadores hormonales, como abortivos, agentes corticosteroides suprarrenales, agentes suprarrenales, los andrógenos, antiandrógenos, inmunobiológicos agentes, tales como inmunoglobulinas, inmunosupresores, toxoides, y vacunas; anestésicos locales, tales como amida de los anestésicos locales y de los anestésicos locales de tipo éster, agentes musculoesqueléticos, tales como anti-gota agentes antiinflamatorios, corticosteroides anti-inflamatohos, agentes, compuestos de oro anti-inflamatoha agentes inmunosupresores, agentes antiinflamatorios, fármacos anti-inflamatohos no esteroideos (AINE), agentes anti-inflamatohos salicilato, minerales y vitaminas, como la vitamina A, vitamina B, vitamina C, vitamina D, vitamina E y vitamina K.
En una realización particular, los agentes terapéuticos útiles según las categorías anteriores incluyen: (1 ) analgésicos en general, tales como lidocaína o sus derivados, y fármacos antiinflamatorios no esteroideos (AINE) analgésicos, incluyendo diclofenaco, ibuprofeno, ketoprofeno, naproxeno y, (2) analgésicos opiáceos agonistas, como la codeína, fentanilo, hidromorfona y la morfina, (3) analgésicos de salicilato, como la aspirina (ASA), (4) bloqueadores H1 antihistamínicos, tales como terfenadina, clemastina y (5) agentes anti-infecciosos, tales como mupirocina; (6) antianaeróbicos anti-infecciosos, tales como cloranfenicol y clindamicina; (7) antifúngicos antibióticos antiinfecciosos, tales como anfotehcina B, clotrimazol, fluconazol y ketoconazol; (8) contra el antibiótico macrólido -infecciosos, tales como la azitromicina y ehtromicina; (9) diversos beta-lactámico antiinfecciosos, tales como aztreonam y imipenem; (10) antibiótico de penicilina antiinfecciosos, tales como nafcilina, oxacilina, penicilina G, penicilina V y; (11 ) quinolona antibióticos antiinfecciosos, tales como ciprofloxacina y norfloxacina; (12) antibiótico tetraciclina antiinfecciosos, tales como doxiciclina, minociclina y tetraciclina; (13) antituberculosos antimicobactehanos antiinfecciosos, tales como isoniazida (INH), hfampicina y; (14) antiprotozoarios antiinfecciosos, como atovacuona y dapsona; (15) antipalúdicos antiprotozoahos antiinfecciosos, tales como cloroquina y pihmetamina; (16) anti- retrovirales antiinfecciosos, tales como ritonavir y zidovudina; (17) contra el antiviral -
infeccioso agentes, tales como aciclovir, ganciclovir, interferon alfa, y hmantadina; (18) antifúngicos tópicos antiinfecciosos, tales como anfotehcina B, clotrimazol, miconazol, nistatina y; (19) antivirales tópicos antiinfecciosos, tales como el aciclovir; (20) agentes electrolíticas y renales, como la lactulosa; (21 ) diuréticos de asa, como la furosemida, (22) diuréticos ahorradores de potasio, como thamtereno; (23) diuréticos tiazídicos, tales como hidroclorotiazida (HCTZ), (24) agentes uricosúricos, tales como probenecid; (25) enzimas, tales como RNasa y DNasa; (26) antieméticos, tales como proclorperazina; (27) salicilato gastrointestinales inflamatorias anti-agentes, tales como sulfasalazina; (28) de la bomba gástrica de ácido anti-inhibidor agentes de úlceras, tales como el omeprazol; (29) bloqueantes H2, agentes anti-úlcera, tales como cimetidina, famotidina, nizatidina y ranitidina; (30) digestivos, tales como pancrelipase; (31 ) agentes procinéticos, tales como la eritromicina (32; éster) anestésicos locales, tales como benzocaína y procaína; (33) musculoesqueléticos corticosteroides anti-inflamatohos, agentes, tales como beclometasona, betametasona, cortisona, dexametasona, hidrocortisona, y prednisona; (34) musculoesqueléticos antiinflamatohos inmunosupresores, tales como azatiophna, ciclofosfamida y metotrexato; (35) musculoesqueléticos antiinflamatorios no esteroideos (AINE), tales como diclofenaco, ibuprofeno, ketoprofeno, ketorlac, y naproxeno; (36) minerales, tales como hierro, calcio y magnesio; (37) Los compuestos de vitamina B , tales como la cianocobalamina (vitamina B12) y la niacina (vitamina B3); (38) compuestos de vitamina C, tales como ácido ascórbico, y (39) compuestos de vitamina D, tales como calcitriol.
En otra realización preferida, el agente terapéutico puede ser un factor de crecimiento u otra molécula que afecta a la diferenciación celular y/o proliferación, como por ejemplo, pero sin limitarnos, el derivado de las plaquetas (PDGF), transformante (TGF), insulínico (IGF), hepático (HGF), epidérmico (EGF), endotelio vascular (VEGF), factor de crecimiento de fibroblastos (FGF), o cualquier de sus combinaciones. Los factores de crecimiento que inducen la diferenciación de estados finales son bien conocidos en la técnica, y puede ser seleccionado de cualquiera de esos factores que se ha demostrado que induce un estado de diferenciación final. Los factores de crecimiento para uso en los métodos aquí descritos pueden, en ciertas realizaciones, ser variantes o fragmentos de un factor de crecimiento de origen natural. Por ejemplo,
una variante puede ser generada al hacer cambios de aminoácidos conservadores y prueba de la vahante resultante en uno de los ensayos funcionales descritos anteriormente u otro ensayo funcional conocido en la técnica. Las sustituciones conservadoras de aminoácidos se refieren a la intercambiabilidad de residuos que tienen cadenas laterales similares. Por ejemplo, un grupo de aminoácidos que tienen cadenas laterales alifáticas es glicina, alanina, valina, leucina, e isoleucina; un grupo de aminoácidos que tienen alifático-hidroxilo en sus cadenas laterales es serina y treonina; un grupo de aminoácidos que tienen que contiene amida en las cadenas laterales es asparagina y glutamina; un grupo de aminoácidos que tienen cadenas laterales aromáticas es fenilalanina, tirosina y thptófano; un grupo de aminoácidos que tienen cadenas laterales básicas es lisina, arginina e histidina, y un grupo de aminoácidos que tienen que contiene azufre en las cadenas laterales es cisteína y metionina. Grupos preferidos de sustitución de aminoácidos son: valina-leucina- isoleucina, fenilalanina-tirosina, lisina-arginina, alanina-valina, y asparagina- glutamina.
Como los expertos en la técnica apreciarán, las variantes o fragmentos de factores de crecimiento de polipéptidos se pueden generar usando técnicas convencionales, tales como mutagénesis, incluyendo la creación de mutación de punto discreto (s), o por truncamiento. Por ejemplo, la mutación puede dar lugar a vahantes que conservan sustancialmente la misma, o simplemente un subconjunto, de la actividad biológica de un factor de crecimiento polipeptídico de la que se derivó.
En otra realización preferida, el agente terapéutico puede ser Plasma Rico en Factores de Crecimiento PRGF (Plasma Rich in Growth Factors). Se basa en la utilización de las plaquetas como vehículo para la liberación controlada de distintas señales celulares que aceleran y optimizan la reparación de los tejidos dañados por diversas razones como puede ser un tratamiento quirúrgico, un traumatismo o una enfermedad.
Aun más preferiblemente, es el el agente terapéutico es el factor de crecimiento de fibroblastos básico.
El término "factor de crecimiento de fibroblastos básico" o "bFGF" (basic fibroblast growth factor) o "FGF2" o "FGF-[3" hace referencia a un factor miembro de la familia de factores de crecimiento de fibroblastos que permite el mantenimiento de células
madre embrionarias humanas no diferenciadas, y que estimula la proliferación de células de origen mesodérmico, así como de muchas células de origen neuroectodérmico, ectodérmico y endodérmico. bFGF está codificado por el gen FGF2. Esta proteína se activa durante el daño tisular o el desarrollo tumoral mediando procesos angiogénicos.
El término “vehículo farmacéuticamente aceptable” se refiere a un vehículo que debe estar aprobado por una agencia reguladora del gobierno federal o un gobierno estatal o enumerado en la Farmacopea Estadounidense o la Farmacopea Europea, u otra farmacopea reconocida generalmente para su uso en animales, y más concretamente en humanos.
El término “vehículo” se refiere a un diluyante, coadyuvante, excipiente o portador con el que se debe administrar el biomaterial o la composición de la invención. Obviamente, dicho vehículo debe ser compatible con dicho biomaterial y con otros componentes que pueda comprender la composición de la invención, por ejemplo, pero sin limitarnos, células.
Como se emplea aquí, el término “principio activo”, “sustancia activa”, “sustancia farmacéuticamente activa”, “ingrediente activo” o “ingrediente farmacéuticamente activo” significa cualquier componente que potencialmente proporcione una actividad farmacológica u otro efecto diferente en el diagnóstico, cura, mitigación, tratamiento, o prevención de una enfermedad, o que afecta a la estructura o función del cuerpo del hombre u otros animales. El término incluye aquellos componentes que promueven un cambio químico en la elaboración del fármaco y están presentes en el mismo de una forma modificada prevista que proporciona la actividad específica o el efecto.
La composición farmacéutica de la invención, si se desea, se puede almacenar hasta el momento de su aplicación mediante los procedimientos convencionales conocidos por los técnicos en la materia. Esta composición farmacéutica también se puede almacenar junto a medicamentos adicionales, útiles en el tratamiento en enfermedades, en una forma activa que comprende una terapia combinada.
A lo largo de la descripción y las reivindicaciones, la palabra "comprende" y las variantes de la misma no pretenden excluir otras características técnicas,
suplementos, componentes o pasos. Para los expertos en la técnica, otros objetos, ventajas y características de la invención se entenderán en parte a partir de la descripción y en parte a partir de la práctica de la invención. Los siguientes ejemplos y dibujos se proporcionan a modo de ilustración y no pretenden limitar la presente invención.
EJEMPLOS DE LA INVENCIÓN
La invención consiste en la obtención y utilización de osículos dérmicos de holoturia para el tratamiento de lesiones óseas. Para ello, en primer lugar, se procedió a extraer y purificar los osículos de la piel de diversos géneros de holoturias pertenecientes al género Holothuría (en nuestro medio, fundamentalmente, H. tubulosa, H. helleri y H. sanctori).
Para la extracción, varios ejemplares de holoturia fueron sumergidos en una solución de hipoclorito sódico al 1 -2% durante 6h en un decantador o embudo de decantación. Tras ello, se recuperó el componente depositado en la parte inferior del decantador, el cual se lavó varias veces con abundante agua corriente. Las partículas así recogidas se purificaron a continuación con una solución al 5-10% de peróxido de hidrógeno en agua, lavándose varias veces con abundante agua corriente.
Tras confirmar la presencia de los osículos mediante visualizaron directa en un microscopio de contraste de fases o luz polarizada, se procede a su esterilización mediante tratamiento con etanol 70% durante 20 minutos, dejándose secar a continuación en una cabina de flujo laminar estéril. Estas partículas también pueden esterilizarse mediante cualquier otro método, incluyendo el autoclavado.
Dependiendo de la especie escogida, el producto obtenido contendrá botones, torres, placas u otros tipos de osículos.
Para determinar la biocompatibilidad de los osículos dérmicos, se realizaron ensayos a diferente nivel:
1 ) Análisis de biocompatibilidad ex vivo en cultivos celulares puestos en contacto indirecto con los osículos.
2) Análisis de biocompatibilidad ex vivo en sistemas tridimensionales consistentes en tejidos artificiales de fibrina-agarosa y osículos dérmicos con células humanas en su interior.
3) Análisis de biocompatibilidad in vivo de tejidos artificiales de fibrina-agarosa y osículos dérmicos con células humanas en su interior.
4) Análisis de eficacia in vivo en un modelo animal de lesión ósea.
La metodología utilizada y los principales resultados obtenidos en cada caso, se resumen brevemente a continuación:
1) Contacto indirecto con los osículos. En primer lugar, se cultivaron fibroblastos humanos en la base de un inserto de membrana porosa para cultivo celular, depositándose a continuación los osículos dérmicos en la parte superior del sistema. De este modo, las células no contactaban directamente con las partículas, pero sí con cualquier metabolite o agente tóxico que éstas pudieran liberar.
Los resultados mostraron que las células eran viables, no existiendo ninguna alteración morfológica o funcional derivada de la presencia de los osículos dérmicos, y sugieren que éstos son altamente biocompatibles.
2) Sistemas tridimensionales ex vivo. En este caso, se generaron biomatehales de fibrina-agarosa que contenían diferentes concentraciones de osículos dérmicos (0, 0.05, 0.1 , 0.2, 0.3, 1 , 2 y 3% p/v) con células humanas en su interior (fibroblastos). Estos tejidos fueron sometidos a nanoestructuración una vez generados, y algunos de ellos se tubulizaron para fabricar cilindros macizos concéntricos mediante enrollamiento del material sobre sí mismo. El resultado mostró que las células mantenían su viabilidad en el interior de los tejidos artificiales, no habiéndose detectado ningún tipo de alteración morfológica o funcional en las mismas. Es importante destacar que las partículas se concentraron fundamentalmente en la base del biomatehal de fibrina-agarosa, probablemente debido a su tendencia a decantar en medios líquidos (Figura 3).
3) Sistemas tridimensionales in vivo. Una vez generados los diferentes tejidos artificiales de fibrina-agarosa-osículos con fibroblastos humanos en su interior, se procedió a su implante subcutáneo en ratones desnudos (inmunodeficientes) para determinar su biocompatibilidad in vivo. En este caso, se utilizaron tejidos artificiales tubulizados. Los resultados a los 12 días del implante (Figura 4) mostraron adecuada biocompatibilidad in vivo, con ausencia de signos de necrosis, tumoración, infección, hemorragia o rechazo. Únicamente se observó un proceso normal de biointegración del biomaterial de fibhna-agarosa.
4) Eficacia in vivo en un modelo animal de lesión ósea. Para determinar el potencial regenerativo de los osículos de holoturia, se utilizó un modelo animal de lesión ósea (Figura 5). En concreto, se utilizó la tibia del conejo Wistar de laboratorio, realizándose una lesión cortical ósea en cuatro puntos de la tibia utilizando una fresa de 4 mm de diámetro. Tras ello, se trató cada lesión de forma diferente: la lesión más proximal se dejó sin tratar (control no reparado), la siguiente, se trató con un biomaterial de fibhna-agarosa nanoestructurado que contenía un 1 % de osículos de holoturia en su interior, y las dos lesiones más distales se trataron con partículas de holoturia directamente inyectadas en el orificio con una jeringuilla. 60 días más tarde, se sacrificaron los animales y se procedió a su análisis.
A nivel macroscópico y clínico, los resultados muestran una adecuada reparación de las tres lesiones tratadas con osículos de holoturia, con o sin biomatehales asociados, mientras que el orificio sin biomaterial parecía tener defectos en su superficie.
A nivel microscópico, una vez descalcificadas las tibias, se observó mayor regeneración y adecuada estructura ósea en los defectos óseos reparados con osículos de holoturia que en el control que se dejó sin tratar (Figura 6).
Todos estos resultados nos permiten concluir que la utilización de los osículos de holoturia favorece la generación y reparación ósea.
Claims
REIVINDICACIONES
1 Un osículo de equinodermo para su uso como medicamento.
2.- El osículo según la reivindicación anterior, donde el osículo es un osículo dérmico de organismos del género Holothuría.
3.- El osículo según cualquiera de las reivindicaciones 1 -2, para aumentar, restaurar o reemplazar parcial o completamente la actividad funcional de un tejido u órgano enfermo o dañado.
4.- Una composición que comprende el osículo según cualquiera de las reivindicaciones 1 -3, fibrina y agarosa.
5.- La composición según la reivindicación 4 para su uso como medicamento.
6.- La composición según cualquiera de las reivindicaciones 4-5, para aumentar, restaurar o reemplazar parcial o completamente la actividad funcional de un tejido u órgano enfermo o dañado.
7.- La composición según cualquiera de las reivindicaciones 4-6, que además comprende un vehículo farmacéuticamente aceptable.
8.- La composición según cualquiera de las reivindicaciones 4-7, que además comprende otro principio activo.
9.- Un tejido artificial que comprende:
- un osículo según se describe en cualquiera de las reivindicaciones 1 -8,
- al menos una célula.
10.- El tejido artificial según la reivindicación 9, donde la célula se selecciona de la lista que consiste en: fibroblastos, osteoblastos, osteocitos, osteoclastos, condroblastos, condrocitos, células madre mesenquimales, o cualquiera de sus combinaciones.
11.- El tejido artificial según cualquiera de las reivindicaciones 9-10, donde la célula es una célula madre que se selecciona de la lista que consiste en: células madre mesenquimales, células madre hematopoyéticas, células madre embrionarias, células madre pluhpotentes inducidas, células madre adultas o combinaciones de las mismas.
12.- El tejido artificial según cualquiera de las reivindicaciones 9-11 , donde la célula es un fibroblasto.
13.- El tejido artificial según cualquiera de las reivindicaciones 9-12, que además comprende otro principio activo.
14.- La composición según la reivindicación 8, o el tejido artificial según la reivindicación 13, donde el otro principio activo se selecciona de la lista que consiste en: un agente analgésico, un agente antiinfeccioso, un factor de crecimiento, o cualquiera de sus combinaciones.
15.- El tejido artificial según cualquiera de las reivindicaciones 9-14, para su uso como medicamento.
16.- El tejido artificial según cualquiera de las reivindicaciones 9-15, para aumentar, restaurar o reemplazar parcial o completamente la actividad funcional de un tejido u órgano enfermo o dañado.
17.- El osículo según cualquiera de las reivindicaciones 1 -3, la composición cualquiera de las reivindicaciones 4-8, el tejido artificial según cualquiera de las reivindicaciones 9-16, para aumentar, restaurar o reemplazar parcial o completamente la actividad funcional de un tejido u órgano enfermo o dañado, donde el tejido u órgano enfermo o dañado es el tejido óseo.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
ESP202031250 | 2020-12-15 | ||
ES202031250 | 2020-12-15 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
WO2022129663A1 true WO2022129663A1 (es) | 2022-06-23 |
Family
ID=82058980
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
PCT/ES2021/070889 WO2022129663A1 (es) | 2020-12-15 | 2021-12-14 | Nuevo biomaterial para ingeniería tisular |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
WO (1) | WO2022129663A1 (es) |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
ES2353990A1 (es) * | 2009-08-25 | 2011-03-09 | Fundacion Para Ala Investigacion Biosanitaria De Andalucia Oriental (Fibao) | Elaboracion de tejidos artificiales mediante ingenieria tisular utilizando biomateriales de fibrina y agarosa. |
-
2021
- 2021-12-14 WO PCT/ES2021/070889 patent/WO2022129663A1/es active Application Filing
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
ES2353990A1 (es) * | 2009-08-25 | 2011-03-09 | Fundacion Para Ala Investigacion Biosanitaria De Andalucia Oriental (Fibao) | Elaboracion de tejidos artificiales mediante ingenieria tisular utilizando biomateriales de fibrina y agarosa. |
Non-Patent Citations (4)
Title |
---|
ALTHUNIBAT O Y ET AL.: "Antioxidant and cytotoxic properties of two sea cucumbers, Holothuria edulis Lesson and Stichopus horrens Selenka", ACTA BIOLOGICA HUNGARICA, vol. 64, no. 1, 31 December 2012 (2012-12-31), pages 10 - 20, ISSN: 0236-5383, DOI: 10.1556/ABiol.64.2013.1.2 * |
EBRAHIMI HADI, VAZIRIZADEH AMIR, NAJAFI AKRAM, NABIPOUR IRAJ: "In vitro study of antibacterial activities of ethanol, methanol and acetone extracts from sea cucumber Holothuria parva", IRANIAN JOURNAL OF FISHERIES SCIENCES, vol. 17, no. 3, 1 January 2018 (2018-01-01), pages 542 - 551, XP055950169, DOI: 10.22092/IJFS.2018.116472 * |
MARTINA, M. ; SUBRAMANYAM, G. ; WEAVER, J.C. ; HUTMACHER, D.W. ; MORSE, D.E. ; VALIYAVEETTIL, S.: "Developing macroporous bicontinuous materials as scaffolds for tissue engineering", BIOMATERIALS, vol. 26, no. 28, 1 October 2005 (2005-10-01), AMSTERDAM, NL , pages 5609 - 5616, XP027767513, ISSN: 0142-9612 * |
S.A. CLARKE; P. WALSH; C.A. MAGGS; F. BUCHANAN;: "Designs from the deep: Marine organisms for bone tissue engineering", BIOTECHNOLOGY ADVANCES, vol. 29, no. 6, 12 April 2011 (2011-04-12), GB , pages 610 - 617, XP028306397, ISSN: 0734-9750, DOI: 10.1016/j.biotechadv.2011.04.003 * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Hasan et al. | Advances in osteobiologic materials for bone substitutes | |
Kang et al. | Functionally graded multilayer scaffolds for in vivo osteochondral tissue engineering | |
Lin et al. | Optimization of photocrosslinked gelatin/hyaluronic acid hybrid scaffold for the repair of cartilage defect | |
Song et al. | The homing of bone marrow MSCs to non-osseous sites for ectopic bone formation induced by osteoinductive calcium phosphate | |
Schmitt et al. | Application of stem cells in orthopedics | |
ES2357224T3 (es) | Matrices de proteína del plasma y métodos para su preparación. | |
Badylak et al. | Macrophage phenotype as a determinant of biologic scaffold remodeling | |
US8618258B2 (en) | Freeze-dried fibrin matrices and methods for preparation thereof | |
Li et al. | Nanoscaled bionic periosteum orchestrating the osteogenic microenvironment for sequential bone regeneration | |
Beigi et al. | Activated platelet‐rich plasma improves cartilage regeneration using adipose stem cells encapsulated in a 3D alginate scaffold | |
KR101472045B1 (ko) | 코어-쉘 섬유상 세포전달체 및 이를 포함하는 골조직 또는 연골조직 재생용 조성물 | |
KR20090113849A (ko) | 연골 질환 치료용 조성물 | |
BRPI0614534A2 (pt) | uso de células estromais derivadas de tecido adiposo em fusão espinal | |
Nie et al. | Musculoskeletal tissue engineering by endogenous stem/progenitor cells | |
KR101850206B1 (ko) | 이온방출형 생활성 글라스 나노파티클을 포함하는 코어-쉘 섬유상 세포전달체 및 이의 용도 | |
Yu et al. | Engineered periosteum-diaphysis substitutes with biomimetic structure and composition promote the repair of large segmental bone defects | |
Laurence et al. | Translating regenerative medicine to the clinic | |
JP2014511864A (ja) | 骨及び軟骨の自己ヒト成体多能性極小胚様(hVSEL)幹細胞再生 | |
WO2022129663A1 (es) | Nuevo biomaterial para ingeniería tisular | |
ES2930011T3 (es) | Complejo que comprende lisado sin condrocitos y células madre para promover la diferenciación del cartílago y uso del mismo | |
Feng et al. | Age-related regeneration of osteochondral and tibial defects by a fibrin-based construct in vivo | |
ES2824575T3 (es) | Materiales y métodos para la regeneración de tejidos | |
Liao et al. | Overview of decellularized materials for tissue repair and organ replacement | |
Chen et al. | Strontium-Doped Hydroxyapatite Coating Improves Osteo/Angiogenesis for Ameliorative Graft-Bone Integration via the Macrophage-Derived Cytokines-Mediated Integrin Signal Pathway | |
WO2011148025A1 (es) | Biomarcador de células cartilaginosas humanas |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
121 | Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application |
Ref document number: 21905872 Country of ref document: EP Kind code of ref document: A1 |
|
NENP | Non-entry into the national phase |
Ref country code: DE |
|
122 | Ep: pct application non-entry in european phase |
Ref document number: 21905872 Country of ref document: EP Kind code of ref document: A1 |