WO2021190675A1 - Bioinsecticida con base en bacillus thuringiencis var israelensis en una matriz de micelio agotado de hongo pleurotus spp. y su método de obtención - Google Patents
Bioinsecticida con base en bacillus thuringiencis var israelensis en una matriz de micelio agotado de hongo pleurotus spp. y su método de obtención Download PDFInfo
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- WO2021190675A1 WO2021190675A1 PCT/CO2020/050001 CO2020050001W WO2021190675A1 WO 2021190675 A1 WO2021190675 A1 WO 2021190675A1 CO 2020050001 W CO2020050001 W CO 2020050001W WO 2021190675 A1 WO2021190675 A1 WO 2021190675A1
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- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N25/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators, characterised by their forms, or by their non-active ingredients or by their methods of application, e.g. seed treatment or sequential application; Substances for reducing the noxious effect of the active ingredients to organisms other than pests
- A01N25/12—Powders or granules
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- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N63/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
- A01N63/20—Bacteria; Substances produced thereby or obtained therefrom
- A01N63/22—Bacillus
- A01N63/23—B. thuringiensis
Definitions
- the present technology belongs to the general international class. What does it refer to CURRENT NEEDS OF LIFE
- this technology belongs to subclass A01 that refers to AGRICULTURE; FORESTRY; BREEDING; HUNTING; CAPTURE; FISHING
- subclass A01N refers to CONSERVATION OF HUMAN OR ANIMAL BODIES OR OF VEGETABLES OR PARTS OF THEM (preservation of food or food products A23); BIOCIDES, p. ex. WHEREAS THEY ARE DISINFECTANTS, PESTICIDES OR HERBICIDES (preparations for medical, dental or toilet use that eliminate or prevent the growth or proliferation of unwanted organisms A61K); PRODUCTS THAT ATTRACT OR REPEL ANIMALS; VEGETABLE GROWTH REGULATORS (mixtures of pesticides with C05G fertilizers)
- the subclass A01N63 / 00 was identified, which refers to Biocides, products that repel or attract harmful animals, or plant growth regulators, which contain microorganisms, viruses, microscopic fungi, animals, p. ex. nematodes, or substances produced by, or obtained from microorganisms, viruses, microscopic fungi or animals, eg. ex. enzymes or fermentation products (containing compounds of a certain constitution A01N 27 / 00- A01N 59/00) [2006.01]
- subclass A01N63 / 02 refers to Substances produced by, or obtained from, microorganisms or animals [2006.01] Other classifications within the same root.
- Biocides products that repel or attract harmful animals, or plant growth regulators, characterized by their shape, inactive ingredients or modes of application (fungicidal, bactericidal, insecticidal, disinfectant or antiseptic role D21H); Substances that reduce the harmful effects of active ingredients on organisms other than harmful [2006.01]
- the present invention refers to a bioinsecticide-larvicide based on a Bacillus thuringiensis var israeliensis in a matrix of depleted mycelium of the fungus Pleurotus spp. and its method of obtaining, for the control of vector mosquito larvae.
- This bioinsecticide-larvicide is composed of three main procedures or processes: a) Method of treating the raw material (exhausted mycelium of the fungus Orellana Pleurotus spp) b) Procedure for the preparation of the broth (Liquid medium-tryptone to mix with the raw material ) c) Procedure for the selection of the working strains and their subsequent cryopreservation in cryobeads d) Process for the implementation of mixing between the broth with the raw material (spent mycelium granules of Pleurotus spp fungus + corn cob if applicable)
- these processes use agricultural residues such as the depleted substrate of mycelium of the fungus Orellana Pleurotus spp. This is crushed through the 3/8 "9.53 mm 00.38 inch pore screen with the help of the hammer mill. Also the corn cob as raw material, which through a previous treatment allow to obtain pellets that make up the granulate where we are going to inoculate the spores found in the broth.
- insecticidal or larvicidal products that do not have effects against human health or against agricultural ecosystems (for example, beneficial insects), the environment, in its broadest sense, and non-target species , as well as landscapes and communities.
- beneficial insects for example, beneficial insects
- the environment in its broadest sense, and non-target species , as well as landscapes and communities.
- insecticides have had a disastrous impact on all those variables and other examples where the dangers they represented have been mitigated, in general the ecological consequences of the use of insecticides, particularly chemicals, cause great concern.
- Insecticides are among the agricultural tools that are most associated with environmental damage, because their specific objective is to kill insect pests and consequently may have a lethal or sublethal impact on non-target organisms (for example, soil nutrient recyclers, plant pollinators, and pest predators) and reduce or contaminate food products.
- non-target organisms for example, soil nutrient recyclers, plant pollinators, and pest predators
- Bioinsecticides make use of natural pathogens to combat insects in the most effective and selective way because they only kill the insects for which they are intended.
- a biological control agent CHARACTERIZED because it comprises a native strain of Bacillus thuringiensis deposited under registration number ATCC 202194, a strain that was characterized using the polymerase chain reaction (PCR) technique, and which is highly toxic against the insect of the order Lepidoptera whose scientific name is Spodoptera frugiperda.
- PCR polymerase chain reaction
- said strain produces a protein of 130 to 135 kilodaltons (KDa).
- KDa kilodaltons
- a biological control agent in accordance with Claim 2 which uses the protein contained in a crystal produced by said strain as an active ingredient.
- a biological control agent according to claims 1 to 3 which uses the spore produced by said strain as an active ingredient.
- the biological control agent according to Claims 1 to 4 characterized by having a medium lethal concentration (CL 50) for the Spodopte insect ra frugiperda between 80 and 160 nanograms (ng) of toxic protein per square centimeter of artificial diet under laboratory conditions.
- CL 50 medium lethal concentration
- ng nanograms
- the organism is seeded in 10% of the fermentation volume and grows to a density of 0.65 u.a. read at 600nm -Informs raw materials for cultivation and inoculation (carbon sources and nitrogen sources)
- ITU International Toxicity Units
- bioinsecticide formulation according to claim 1 wherein the Bti entomotoxin is presented in an impure form such as toxic biomass or Bti spores.
- the Bti entomotoxin is presented in an isolated form as toxic biomass or Bti spores.
- chemical driers have been selected from diatomaceous earth, calcite, clay, silica, kaolin, diatomite, bentonite, dolomite, calcium phosphate, leucite, montmorillonite, and calcined silica.
- bioinsecticide formulation according to claim 4 wherein the chemical driers are between 0.1 to 10% w / w of diatomite, 0.1 to 10% w / w of bentonite, 0, 1 to 10% w / w calcium phosphate and 0.1 to 10% w / w calcined silica
- the product is a dry powder
- An agglomerated controlled release carrier for pesticides and the like composed of preselected portions of the pith, the fine and coarse straw, and portions of woody rings of a corn cob which, when combined in varying proportions, define an overall release rate for the carrier and / or act as a bait for the target species
- the faster and slower release components are impregnated with a pesticide capable of binder with organic matter before being agglomerated.
- compositions and methods of use thereof are provided for administering an insecticide to waterborne insect larvae.
- insecticidal bacteria such as Bacillus thuringiensis israelensis (Bti)
- Bacillus thuringiensis israelensis Bacillus thuringiensis israelensis
- their use in aqueous environments is restricted by how long the bacterial cells remain suspended in water. and are therefore available for ingestion by the larvae.
- To increase the time that insecticidal bacteria remain in suspension it has now been found advantageous to mix bacterial suspensions with nanoparticles comprising carbon that bind to the outer surface of cells.
- a floating sustained release pesticide granule adapted for diffusion application to control a population of insects in an aquatic environment comprising an effective amount of an active ingredient suspended in a water soluble sunscreen agent and a flotation agent, said active ingredient, sunscreen agent and flotation agent embedded in an insoluble fibrous matrix so that when said granule is in contact with water, said water-soluble sunscreen agent dissolves over time, thus releasing the active ingredient into the water in a sustained release manner.
- the invention further relates to a method for the production of said granule and to a method for controlling an insect population by using said granule.
- - Active ingredient is between 5-60% by weight
- the flotation agent is derived from at least one of the group consisting of: pearlites, vermiculites, feather dust, peanut shells and cellulose by-products -The agents are treated with a hydrophobic material -The pesticide has a surfactant
- Pesticide granules especially for administering a biological pesticide in aquatic applications, have a wax core and the pesticide is secured to the core in a water-dispersible or water-soluble matrix. More specifically, the pesticide composition is fluid and buoyant in water, the biological pesticide being of the genus Bacillus and the protein coating matrix.
- -Paraffin wax has a melting point of at least 40 ° C
- -Film-forming adhesive material is hydrolyzed animal protein
- the water dispersible matrix that encapsulates said pesticide is composed of a fermentation residue comprising carbohydrate and at least 50% by weight of protein residue
- compositions and controlled delivery processes to treat organisms in a water column or on land Compositions and controlled delivery processes to treat organisms in a water column or on land
- Controlled release compositions of matter comprising complexes are described to treat a population of one or more aquatic organisms in a column of water.
- the complexes comprise at least one system in which the system comprises at least one bioactive agent as a component selected to treat a population of aquatic organisms, at least one carrier component and at least one coating component to regulate the rate of controlled release, and the release profile of the bioactive agent in water or at least one bioactive agent and a co-functional component that can serve as a support and coating to regulate the controlled release rate and the release profile of the bioactive agent in water, with or No optional binder components and / or additional formulation materials.
- the components are selected to sink or float so that the complexes permeate and / or remain in any flat or volumetric segment of a water column for a period of time that is sufficient to effectively treat a population of aquatic organisms.
- Methods for treating a water column are also described which comprise administering the compositions to a water column or a dry pre-flood area (pretreatment) to be developed in a water column or a flood area.
- pretreatment dry pre-flood area
- the composition and process can also be used to treat terrestrial organisms.
- the coating components consist of water soluble organic polymers (vindic alcohol), (ethylene oxide) hydroxypropyl methyl cellulose or methyl cellulose, fatty alcohols, fatty acids and their esters, or phthalyl esters
- -Vehicles are silicas, cellulose fibers, metal oxides, clays, infusive earth, finely ground slag or lava, polyvinyl alcohol, polyvinyl alcohol copolymers, polyethylene oxide, hydroxypropyl methylcellulose, paper, hydrophobic, wood chips, cetyl alcohol, alcohol stearyl, vermiculite, ground cork, bagasse, seed shells, paper, particulate carbon materials, starches or modified starches, carrageenan, algin, xanthates, agar, or powdered polymeric materials, and combinations thereof
- Composition for treatment against mosquito larvae and process for their preparation.
- the invention relates to insecticidal compositions comprising a Bacillus thuringiensis insecticide.
- the invention also relates to a process for the preparation of formulations of such compositions and to the use of insecticidal compositions for the control of mosquito larvae.
- the composition of the invention comprises an insecticidal component derived from the Bacillus thuringiensis strain M-H-14, a carrier component, a component for protection against sunlight and, optionally, the filler and excipients.
- the insecticidal component of Bacillus thuringiensis M-H-14 is a delta-endotoxin produced by the microorganism when it is dying.
- the carrier of the invention is made of plant material such as peat, corncob, corn kernel, wheat strain, cork, and palm kernel kernel.
- the method for the preparation of the insecticidal component comprises the fermentation steps of Bacillus thuringiensis MH-14 in a fermentation reactor until the completion of the sporulation, separating the solid components of the fermentation reactor by centrifugation to obtain a concentrated solution called concentrated cream, Spray drying concentrated cream to obtain a wettable powder by diluting the concentrated cream with an aqueous solution to obtain a pourable aqueous solution.
- -It has a component for protection against sunlight (smoke, bentonite, kaolin and coral powder) -It implements a load of 4% w / w of sterile sugar beet molasses. -Does not implement mycelium of the fungus Orellana Pleurotus spp
- a method to control Dipteran larvae or a method to inhibit the development of larvicidal resistance, control resistant populations and reduce resistance levels in Diptera by introducing a larvicidally effective amount of a combination of a Bacillus thuringiensis strain subspecies israelensis and a strain of Bacillus sphaericus in an environment containing Dipteran larvae; and a composition of the combination is described.
- both strains are not genetically modified.
- inert vehicle inorganic minerals such as kaolin, mica, gypsum, fertilizers, sand, phyllosilicates, carbonates, sulfates or phosphates; organic materials such as sugars, starches or cyclodextrins; or botanical materials such as wood products, cork, shells of rice, peanut shells, and walnut shells.
- -It has a preservative, a preservative, a humectant, a food stimulant, an attractant, a
- encapsulating agent a binder, an emulsifier, a dye, a UV protector, a buffer, a control agent
- the invention relates to certain ingestible insecticidal insecticidal compositions selected from the group consisting of DNA viruses, RNA viruses and bacteria of the order Bacillus such as, for example, Bacillus thuringiensis var. israelensis trapped by a suitable charged polymer.
- the invention also relates to a process for the preparation and use of such insecticidal compositions.
- -Ingestible biological insecticide is mixed with ultraviolet light stabilizer and a polymer loaded in an aqueous medium
- the insecticide is a DNA virus (nuclear polyhedrosis), or an RNA virus
- the invention relates to a new substance with activity against insect pests of the Diptera order.
- the invention further relates to the substance that acts together with a Bacillus-related pesticide, a chemical pesticide and / or a virus with pesticidal properties.
- the invention further relates to a new strain (s) of Bacillus thuringiensis that produces said substance.
- the invention further relates to pesticidal compositions comprising the pesticidal substance and carrier, or the Bacillus-related substance and pesticide, a chemical pesticide and / or a virus with pesticidal properties, as well as methods for using the pesticidal compositions to control a plague.
- -It is a nucleoside of uracil with three sugar residues and two phosphates and chemical shifts -A method to obtain a mutant or variant of a strain of Bacillus thuringiensis -It implements inert materials including inorganic minerals such as kaolin, mica, gypsum, fertilizers, phyllosilicates , carbonates, sulfates or phosphates; organic materials such as sugar, starches, or cyclodextrins; or botanical materials such as wood products, cork, rice hulls, peanut shells, and walnut shells.
- inert materials including inorganic minerals such as kaolin, mica, gypsum, fertilizers, phyllosilicates , carbonates, sulfates or phosphates; organic materials such as sugar, starches, or cyclodextrins; or botanical materials such as wood products, cork, rice hulls, peanut shells, and walnut shells.
- a method to control Dipteran larvae or a method to inhibit the development of larvicidal resistance, control resistant populations and reduce resistance levels in Diptera by introducing a larvicidally effective amount of a combination of a Bacillus thuringiensis strain subspecies israelensis and a strain of Bacillus sphaericus in an environment containing Dipteran larvae; and a composition of the combination is described.
- both strains are not genetically modified
- It implements a surfactant, an inert vehicle, a preservative, a humectant, a feeding stimulant, an attractant, an encapsulating agent, a binder, an emulsifier, a dye, an ultraviolet light shield, a buffer, a control agent of drift, a spray deposition aid, a free-flowing agent, and combinations thereof
- inert materials include inorganic minerals such as kaolin, mica, gypsum, fertilizers, sand, phyllosilicates, carbonates, sulfates or phosphates; organic materials such as sugars, starches, or cyclodextrins; or botanical materials such as wood products, cork, rice hulls, peanut shells, and walnut shells.
- inorganic minerals such as kaolin, mica, gypsum, fertilizers, sand, phyllosilicates, carbonates, sulfates or phosphates
- organic materials such as sugars, starches, or cyclodextrins
- botanical materials such as wood products, cork, rice hulls, peanut shells, and walnut shells.
- the invention refers to a larvicide that uses agricultural by-products as raw material but its use is exclusively environmental, in case it does not combat a pest that affected a specific crop, its functionality is due to the spores of Bacillus thuringiensis var.israeliensis that it contains proteins in the form of d-endotoxin crystals that show specific toxicity when ingested by the filter larvae of vector mosquitoes.
- d-endotoxin crystals are very sensitive to sunlight, but it has been proven that the depleted mycelium matrix of orellana, being a porous material, is slowly released and is more protected from the sun's rays.
- the product has a residual of 1 month from its application.
- Bioinsecticides make use of natural pathogens as biological control to combat insects in the most effective and selective way because they only kill the insects for which they are intended. Instead, insecticides may have a lethal or sublethal impact on non-target organisms (e.g. nutrient recyclers soil, plant pollinators and pest predators) and reduce or contaminate food products.
- non-target organisms e.g. nutrient recyclers soil, plant pollinators and pest predators
- the present invention discloses a bioinsecticide-larvicide based on a Bacillus thuringiencis var israelensis and its manufacturing process for the control of larvae or vector mosquitoes.
- the manufacturing process consists of three main procedures: to the Treatment method of the raw material / mycelium of the fungus Orellana Pleurotus spp ⁇
- cob or mycelium of the fungus Orellana Pleurotus spp is received in bundles, in the case of the cob it is previously clean, that is, without corn kernels, dry and free of any plague.
- -A grinding process is applied to it, which includes pouring the raw material into a hammer mill, initiating an endless screw movement, executing a 3/8 "1.94 cm sieve.
- the mill projects the particles into a silo, where it is collected, when the silo is full, it is transported in a cart with sacks of tow.
- the raw material is poured into the vibrating screen to separate the waste and establish the desired granulometry for the product.
- the screening is done, it is collected in 50-gallon jugs (Maximum capacity 200 liters and 10.8 kg), these can be arranged or not on pallets.
- the net weight with the product is approximately 47 kg.
- the mill has a capacity to grind 85.2 kg / half hour per cycle x 3 cycles / day equals 1022 kg / day. More than a ton.
- the cob will be used in the following two processes, both to leave the inoculum with the spores and to be used as a support medium for the structural matrix. b ⁇ Procedure for the preparation of the broth / Liquid medium- soy tryptone to mix with the raw material)
- Tryptone Soy Yeast Extract (TSB) broth with similar results.
- the previously treated cob is used to leave the inoculum with the spores overnight (equivalent to 12 hours) in yeast tryptone broth (liquid medium) at temperature environment (22 ° C ⁇ 2), to have as a result that the spores are activated and pass into the germination phase.
- the spectrophotometer is read using quartz cuvettes. As a blank, culture broth previously sterilized in an autoclave is used for 15 min at 15 pounds pressure at 121 ° C. For this purpose, we can use a 250 ml pyrex borosilicate bottle (cap blue) and then a reading is made every 24 hours, until I reached an absorbance of 0.6 at a wavelength of 600 nm, this remains in the visible spectrum. The following table shows in what time it reaches this absorbance and in what moment this absorbance was reached and that therefore is the optimal moment for nebulization.
- the broth is selected when it is at its maximum growth, since it is the key moment for nebulization.
- the contents are poured to carry out the nebulization process of the broth with the exponentially growing bacteria Bacillus thuringiensis with spraying system technology with low flow / hour.
- This process is linked to the raw material process flow chart previously sent. -The process indicates that a bottle is placed on a thermal plate for 15 min at 155 ° C and a speed of 7.7 rpm. In addition, it is necessary to locate a magnet with a length equivalent to the bottom of the bottle, leaving 1 cm on both sides of the wall of the bottle.
- -It is grown in a 20ml test tube (the reason for using a small volume is to have enough samples in case there is any contamination) these are put at 37 degrees with a shaker (200 rpm), until the middle of the phase
- a shaker 200 rpm
- distilled water is used as a blank and then a reading is made every 24 hours, until I reached an absorbance of 0.6 at a wavelength of 600 nm, this remains in the spectrum from the visible, this is to have a quantitative and qualitative analysis of the bacteria, that is, the broth is selected when it is at its maximum growth, since it is the key moment for nebulization.
- the broth is filtered with a vacuum pump or by gravity, in both procedures with a 120 pm mesh to remove pieces of mycelium to obtain the liquid free of residues (broth + bacteria).
- a -80 degree freezer is used. Cryopreservation with TSY or TSEYB broth at the 2 1: 100 dilution + 20% glycerol volume. (4 days are required to gradually lower the temperature):
- the resulting filtered broth with the resuspended bacteria Bacillus thuringiensis var.israeliensis is used to carry out a nebulization process (divide into small parts), said broth is added to a tank (pressurized in 5 gallon stainless steel with atomized nozzle with air in nickel-plated bronze) to apply through spraying system technology with low flow / hour, to the exhausted mycelium of Orellana, which will be used as a support medium for the structural matrix.
- the 11005 models combine the features of the JN and JCO offering a combination of needle lock and cleaning:
- nebulization Once the nebulization has been carried out, it is left to dry in a dry space for 24 or more hours at a temperature of 30 degrees and relative humidity less than 50%. Shelf life tests have been carried out for 2 years, in which it was appreciated that no type of opportunistic fungus or yeast has grown to damage the product. It was determined that the microstructure of these pellets is a sufficiently porous material to house these microorganisms, important since they maintain a minimum “Aw” water activity to prevent them from colonizing opportunistic microorganisms such as mesophiles, molds and yeasts.
- Active ingredient concentration 2.8% Bacillus thuringiensis var.israeliensis spores ( Guaranteed concentration). o 3253 grams / 341 kg (total raw material: depleted orellana mycelium + corn cob)
- the total weekly production that is processed for 15 shifts would be 5115 kg of finished product.
- a granulated product is obtained ready to be packed, which is used in a unit of laminated tow with internal polyethylene with dimensions of 90 cm x 60 cm, it must be ensured a protection from humidity, the use of the depleted mycelium of orellana keeps the water activity to a minimum, this prevents the growth of molds and yeast that can damage the product, the net weight of each package will be 20 kg. Additionally, commercial samples of the product whose weight is 26.4 gr can also be obtained.
- the product is ecologically sustainable, which is why it reduces agricultural waste, providing added value.
- the granulated product has two sizes depending on the mass of water where it is going to be applied - Stagnant water (Cooling basins, tanks and reservoirs of water in the open air, septic tanks, construction drums, hydrants) where a mill is implemented universal with a sieve diameter of 1 mm
- the product offers the benefits of being effective in the control of vector mosquito larvae, since it can be easily spread manually and in small amounts per unit area.
Abstract
La presente invención revela un bioinsecticida-larvicida con base en un Bacillus thuringiencis var israelensis y su método de obtención, para el control de larvas o mosquitos vectores. Este bioinsecticida-larvicida está caracterizado porque comprende: • Micelio agotado de orellana • tusa de maíz • ingrediente activo esporas Bacillus thuringiensis var.israeliensis Este bioinsecticida-larvicida se compone de tres procedimientos o procesos principales: a) Método de tratamiento de la materia prima (tusa o micelio del hongo Orellana Pleurotus spp) b) Procedimiento para la elaboración del caldo (Medio líquido-triptona para mezclar con la materia prima) c) Proceso para la implementación de mezcla entre el caldo con la materia prima
Description
MEMORIA DESCRIPTIVA DE LA SOLICITUD DE PATENTE
1. Título de la invención
BIOINSECTICIDA CON BASE EN BACILLUS THURINGIENCIS VAR ISRAELENSIS EN UNA MATRIZ DE MICELIO AGOTADO DE HONGO PLEUROTUS SPP. Y SU MÉTODO DE OBTENCIÓN
2. Campo de aplicación
Se identificaron los grupos generales en la clasificación:
Dentro del primer nivel, la presente tecnología pertenece a la clase internacional general A qué se refiere a NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA
En el segundo nivel, la presente tecnología pertenece a la subclase A01 que se refiere a AGRICULTURA; SILVICULTURA; CRIA; CAZA; CAPTURA; PESCA
Para el tercer nivel se identificó la subclase A01N que se refiere a CONSERVACION DE CUERPOS HUMANOS O ANIMALES O DE VEGETALES O DE PARTES DE ELLOS (conservación de alimentos o productos alimenticios A23); BIOCIDAS, p. ej. EN TANTO QUE SEAN DESINFECTANTES, PESTICIDAS O HERBICIDAS (preparaciones de uso médico, dental o para el aseo que eliminan o previenen el crecimiento o la proliferación de organismos no deseados A61K); PRODUCTOS QUE ATRAEN O REPELEN A LOS ANIMALES; REGULADORES DEL CRECIMIENTO DE LOS VEGETALES (mezclas de pesticidas con fertilizantes C05G)
Dentro del cuarto nivel se identificó la subclase A01N63/00 que se refiere a Biocidas, productos que repelen o atraen a los animales perjudiciales, o reguladores del crecimiento de los vegetales, que contienen microorganismos, virus, hongos microscópicos, animales, p. ej. nematodos, o sustancias producidas por, u obtenidas a partir de microorganismos, virus, hongos microscópicos o animales, p. ej. encimas o productos de fermentación (que contienen compuestos de constitución determinada A01N 27/00- A01N 59/00) [2006.01]
Dentro del quinto nivel se encontró la subclase A01N63/02 que se refiere a Sustancias producidas por, u obtenidas a partir de microorganismos o animales [2006.01]
Otras clasificaciones dentro de la misma raíz.
A01N25/12
Biocidas, productos que repelen o atraen a los animales perjudiciales, o reguladores del crecimiento de los vegetales, caracterizados por su forma, ingredientes inactivos o modos de aplicación (papel fungicida, bactericida, insecticida, desinfectante o antiséptico D21H); Sustancias que reducen los efectos nocivos de los ingredientes activos en organismos distintos a los perjudiciales [2006.01]
Polvos o granulados.
1. Descripción breve
La presente invención hace referencia a un bioinsecticida-larvicida con base en un Bacillus thuringiensis var israeliensis en una matriz de micelio agotado de hongo Pleurotus spp. y su método de obtención, para el control de larvas de mosquitos vectores. Se puede añadir tusa de maíz en la mezcla, pero la ventaja del micelio es que no hay riesgo de contaminación por otros hongos micromicetos invasores, además mantiene una actividad acuosa Aw mínima, dando una consistencia que facilita la molienda y una vida útil superior a 2 años.
Este bioinsecticida-larvicida se compone de tres procedimientos o procesos principales: a) Método de tratamiento de la materia prima (micelio agotado del hongo Orellana Pleurotus spp) b) Procedimiento para la elaboración del caldo (Medio líquido-triptona para mezclar con la materia prima) c) Procedimiento para la selección de las cepas de trabajo y su posterior criopreservación en crioperlas d) Proceso para la implementación de mezcla entre el caldo con la materia prima (gránulos de micelio agotado de hongo Pleurotus spp + tusa de maíz dado el caso)
Dichos procesos en resumen utilizan residuos agrícolas como el sustrato agotado de micelio del hongo Orellana Pleurotus spp. Este es triturado a través del tamiz con poro de 3/8" 9,53 mm 00,38 pulgadas con la ayuda del molino de martillos.
También la tusa del maíz como materia prima, los cuales a través de un tratamiento previo permiten obtener pellets que conforman el granulado dónde vamos a inocular las esporas que se encuentran en el caldo.
Con dichos procesos y materias primas permiten obtener un producto que es un matriz soporte estructural para las esporas de Bacillus thuringiensis var. israeliensis para su aplicación directa en el agua, para el control de larvas o mosquitos vectores.
2. Estado de la técnica
En la agricultura moderna se hace necesario emplear productos insecticidas o larvicidas que no tengan efectos contra la salud humana ni contra los ecosistemas agrícolas (ejemplo, los insectos beneficiosos), el medio ambiente, en su sentido más amplio y las especies que no son el objetivo, así como paisajes y comunidades. En este contexto es posible encontrar ejemplos donde los insecticidas han tenido un impacto desastroso en todas aquellas variables y otros ejemplos donde los peligros que representaban han sido mitigados, en general las consecuencias ecológicas del uso de insecticidas, particularmente químicos, causan gran preocupación.
Los insecticidas se encuentran entre las herramientas agrícolas que están más asociadas con el daño ambiental, debido a que su objetivo específico es matar plagas de insectos y por consecuencia puede que tenga un impacto letal o subletal en organismos que no son su objetivo (por ejemplo, recicladores de nutrientes del suelo, polinizadores de plantas y depredadores de plagas) y reducir o contaminar productos alimenticios.
Los bioinsecticidas hacen uso de agentes patógenos naturales para combatir los insectos de la manera más efectiva y selectiva debido a que solamente matan a los insectos a los que están destinados.
Se han evidenciado varias soluciones las cuales a través de sus composiciones permiten acabar con las larvas, pero que no funcionan en todos los climas debido a sus gránulos congelados, otros productos involucran soluciones pastosas, así mismo, otras formulaciones de bioinsecticida son secas y han sido una forma alternativa para resolver los problemas de larvas ya que son fáciles de almacenar, empacar y llevar a áreas infestadas.
A continuación, se hace una relación de las invenciones encontradas que apuntan a resolver el problema técnico planteado, así como sus principales diferencias y limitaciones con el concepto inventivo propuesto en la presente solicitud:
Descripción
1 Un agente de control biológico CARACTERIZADO porque comprende una cepa nativa de Bacillus thuringiensis depositada bajo número de registro ATCC 202194, cepa que se caracterizó empleando la técnica de reacción en cadena de la polimerasa (PCR), y la cual es altamente tóxica contra el insecto del orden Lepidoptera cuyo nombre científico es Spodoptera frugiperda.2.- Un agente de control biológico de conformidad con la reivindicación 1 en donde dicha cepa produce una proteína de 130 a 135 kilodaltons (KDa).3.- Un agente de control biológico de conformidad con la Reivindicación 2, que emplea como ingrediente activo la proteína contenida en un cristal producido por dicha cepa.4.- Un agente de control biológico de conformidad con las reivindicaciones 1 a 3, que emplea como ingrediente activo la espora que produce dicha cepa.5.- El agente de control biológico de acuerdo con las Reivindicaciones 1 a 4, que se caracteriza por poseer una concentración letal media (CL 50) para el insecto Spodoptera frugiperda entre 80 y 160 nanogramos (ng) de proteína tóxica por centímetro cuadrado de dieta artificial en condiciones de laboratorio.6.- Un procedimiento para la producción industrial de un agente de control biológico de que tratan las Reivindicaciones 1 a 5, que contiene medios de cultivo con combinaciones de componentes para alcanzar una concentración final entre 12 - 15 g/1 de ingrediente activo, con una actividad insecticida contra Spodoptera frugiperda entre 45 - 87.5% de mortalidad frente a un estándar de dosis letal 50, el cual es una fermentación que comprende las etapas de:- preparar un inoculo que corresponde al 10% del volumen del inoculo - activar el inoculo a partir de una cepa pura de Bacillus thuringiensis esporulada y conservada en un medio sólido - mantener el inoculo por un tiempo no mayor a 16 horas, - separar el medio de cultivo obtenido por filtración, - secar la torta obtenida del ingrediente activo y someterla a una etapa de reducción de tamaño en un molino, - agregar disolventes y/o coadyuvantes de formulación.
Diferencias
-Especial para larvas lepidopteras (Mariposas)
-Ataca al Insecto Spodoptera frugiperda (cogollero del maíz)
-Protege cultivos de maíz, algodón, sorgo, soya y arroz
-Emplea ingredientes en la elaboración del bioinsecticida (suelo, caldo Luria Bertani, acetato de sodio)
-La mezcla se incuba por 4 horas -Se calienta a 60 grados por 3 minutos
-La mezcla tratada con calor sobre placas de agar T3 (triptona, triposa, extrato de levadura, MgCi, Na2.HP04)
-Todo finalmente se incuba durante 16 horas a 30 grados -Se hace un repique de colonias y se vuelve a incubar a 30 grados por 24 horas -La cepa está en el banco de referencia de la American Type Culture Colletion -La cepa es caracterizada en el instituto de biotecnología de la UNAL
-El organismo se siembra en el 10% del volumen de fermentación y crece hasta una densidad de 0.65 u.a. leía a 600nm -Informa las materias primas para el cultivo y la inoculación (fuentes de carbono y fuentes de nitrógeno)
-El tiempo de incubación no supera las 16 horas -Para fermentar, se emplea un antiespumante
-El proceso de secado se hace a una temperatura no mayor de 30 grados -El producto resultante es un suspensión acuosa
Descripción
1.- Una formulación bioinsecticida con base en entomotoxinas obtenidas del Bacillus thuringiencis var israelensis con actividad tóxica contra insectos dípteros caracterizada por ser suministrada por un polvo seco con una actividad tóxica que está entre 500 a 1500 ITU (Unidades de Toxicidad lnternacionales)/mg de polvo seco, teniendo de otro lado aditivos tales como secadores químicos, dispersantes, agentes aglutinantes/humectantesy protectores contra la luz solar, lo que hace fácil la permanencia del componente activo en el área de aplicación durante por lo menos 10 días, manteniendo estable su actividad tóxica durante por lo menos 6 meses, sin causar daño al ecosistema.2.- La formulación bioinsecticida de acuerdo con la reivindicación 1 en donde la entomotoxina Bti se presenta bajo una forma impura como biomasa tóxica o esporas Bti.3.- La formulación bioinsecticida de acuerdo con la reivindicación 1 en donde la entomotoxina Bti se presenta bajo una forma aislada como biomasa tóxica o esporas Bti..4.- La formulación bioinsecticida de acuerdo con la reivindicación 1 en donde los secadores químicos han sido seleccionados entre tierras diatomáceas, calcita, arcilla, sílice, caolín, diatomita, bentonita, dolomita, fosfato de calcio, leucita, montmorillonita, y sílice calcinada.5.- La formulación bioinsecticida de acuerdo con la reivindicación 4 en donde los secadores químicos están entre 0,1 a 10% p/p de diatomita, 0,1 a 10% de p/p de bentonita, 0,1 a 10% de p/p de fosfato de calcio y 0,1 a 10% p/p de sílice calcinado
Diferencias
-El producto es un polvo seco
-En su composición involucra secadores químicos (Tierras diatomáceas, calcita, arcilla, etc.) -Involucra dispersantes, agentes aglutinantes / humectantes y protectores contra la luz solar -Está compuesto por agentes diluyentes, lubricantes -Involucra un proceso de deshidratación de mezcla
-El aislamiento y crecimiento de la cepa se hace a través de un proceso de fermentación -Involucra una técnica de centrifugación
5
Descripción
Un portador aglomerado de liberación controlada para pesticidas y similares, compuesto por porciones preseleccionadas de la médula, la paja fina y gruesa y porciones de anillos leñosos de una tusa de maíz que, cuando se combinan en proporciones variables, definen una tasa de liberación general para el portador y / o actúan como un cebo para las especies objetivo
Diferencias
-En el vehículo se puede implementar el pesticida clorpirifos, insecticida, un herbicida -Tiene un componente de liberación más rápida y un componente de liberación más lenta -Implementa como materia prima médula molida (ground pith) separada -Implementa paja de mazorca molida
-Los componentes de liberación más rápida y más lenta se impregnan con un pesticida capaz de aglutinante con materia orgánica antes de ser aglomerado.
-No Implementa micelio del hongo Orellana Pleurotus spp
-No Indica como es el procesamiento de la materia prima
-Falta información acerca del procedimiento de tamiz a la materia prima (tusa)
-No indica cómo se almacena la materia prima molida
-No informa acerca de Incluir triptona- levadura para realizar el inoculo con las esporas
-No informa del tiempo de activación de la fase germinativa / Indica una fase exponencial
-No aplica un proceso de plancha térmica a una temperatura indicada y a una velocidad establecida
-No informa del proceso de análisis cuantitativo y cualitativo (el caldo se encuentra en su máximo crecimiento de las bacterias)
-No presenta el proceso de nebulización con el caldo -No implementa un proceso de criopreservación de las cepas
PAGE INTENTIONALLY LEFT BLANK
Numero de Publicación
Estado Asignada
Descripción
Se proporcionan composiciones y métodos de uso de los mismos para administrar un insecticida a larvas de insectos transmitidas por agua. Mientras que las células individuales de las bacterias insecticidas, como Bacillus thuringiensis israelensis (Bti), son efectivas para matar las larvas de insectos cuando se ingieren, su uso en ambientes acuosos está restringido por el tiempo en que las células bacterianas permanecen suspendidas en el agua y, por lo tanto, están disponibles para la ingestión por las larvas. Para aumentar el tiempo que las bacterias insecticidas permanecen en suspensión, ahora se ha encontrado ventajoso mezclar suspensiones bacterianas con nanopartículas que comprenden carbono que se unen a la superficie externa de las células.
Diferencias
-Involucra nanopartículas de carbono que tienen una bacteria larvicida -Nanopartículas esféricas
Tienen tamaño de sección transversal de aproximadamente 50 nm a aproximadamente 1 pm
-Nanopartículas de carbono se mezcla con un medio líquido
-No Implementa micelio del hongo Orellana Pleurotus spp
-No Implementa residuos orgánicos como materia prima
-No Indica como es el procesamiento de la materia prima
-No informa acerca del proceso de molienda a la materia prima (tusa)
-No indica cómo se almacena la materia prima molida
-No informa acerca de Incluir triptona- levadura para realizar el inoculo con las esporas
-No informa del tiempo de activación de la fase germinativa / Indica una fase exponencial
-No aplica un proceso de plancha térmica a una temperatura indicada y a una velocidad establecida
-No informa del proceso de análisis cuantitativo y cualitativo (el caldo se encuentra en su máximo crecimiento de las bacterias)
-No Implementa un proceso de filtrado al líquido-caldo para quitar residuos
-No presenta el proceso de nebulización con el caldo
-No aclara como se almacena el producto en un tanque presurizado
-No implementa un proceso de criopreservación de las cepas
Descripción
Un gránulo de pesticida de liberación sostenida flotante adaptado para la aplicación de difusión para controlar una población de insectos en un ambiente acuático, que comprende una cantidad efectiva de un ingrediente activo suspendido en un agente protector solar soluble en agua y un agente de flotación, dicho ingrediente activo, agente protector solar y flotación agente incrustado en una matriz fibrosa insoluble de modo que cuando dicho gránulo está en contacto con el agua, dicho agente de filtro solar soluble en agua se disuelve con el tiempo, liberando así el ingrediente activo en el agua de una manera de liberación sostenida. La invención además se refiere a un método para la producción de dicho gránulo y a un método para controlar una población de insectos al usar dicho gránulo.
Diferencias
- Ingrediente activo está entre 5-60% en peso
-Tiene un pigmento protector solar natural que comprende humato
-El agente de flotación se deriva de al menos uno del grupo que consiste en: perlitas, vermiculitas, polvo de plumas, cáscaras de maní y subproductos de celulosa -Los agentes son tratados con un material hidrófobo -El pesticida tiene un tensioactivo
-Involucra un material de relleno inerte (Carbonato de calcio o un silicato)
-Tiene un estimulante de alimentación de larvas (harina de pescado, harina de soja, harina de semilla de algodón y harina o extractos de levadura)
-No Implementa micelio del hongo Orellana Pleurotus spp
-No Implementa residuos orgánicos como materia prima
-No informa acerca del proceso de molienda a la materia prima (tusa)
-Falta información acerca del procedimiento de tamiz a la materia prima (tusa)
-No indica cómo se almacena la materia prima molida
-No informa acerca de Incluir triptona- levadura para realizar el inoculo con las esporas
-No informa del tiempo de activación de la fase germinativa / Indica una fase exponencial
-No aplica un proceso de plancha térmica a una temperatura indicada y a una velocidad establecida
-No informa del proceso de análisis cuantitativo y cualitativo (el caldo se encuentra en su máximo crecimiento de las bacterias)
-No Implementa un proceso de filtrado al líquido-caldo para quitar residuos
-No presenta el proceso de nebulización con el caldo
-No implementa un proceso de criopreservación de las cepas
Numero de Publicación
Estado Expirada
Fecha Publicación 01/02/1994 Título Bacillus-containing pesticide granules
Gránulos de plaguicidas que contienen bacilo
Descripción
Los gránulos de pesticidas, especialmente para administrar un pesticida biológico en aplicaciones acuáticas, tienen un núcleo de cera y el pesticida está asegurado al núcleo en una matriz dispersable en agua o soluble en agua. Más específicamente, la composición de pesticida es fluida y flotable en agua, siendo el pesticida biológico del género Bacillus y la matriz de recubrimiento proteica.
Diferencias
-Tiene una superficie de cera de parafina normalmente sólida
-Tiene una matriz de recubrimiento de un material adhesivo proteináceo soluble en agua asegurado a dicha superficie de cera de parafina
-La cera de parafina tiene un punto de fusión de al menos 40°C
-El material adhesivo formador de película es proteína animal hidrolizada
-La matriz dispersable en agua que encapsula dicho pesticida está compuesta de un residuo de fermentación que comprende carbohidrato y al menos 50% en peso de residuo proteico
-No Implementa micelio del hongo Orellana Pleurotus spp
-No Implementa residuos orgánicos como materia prima
-No Indica como es el procesamiento de la materia prima
-No informa acerca del proceso de molienda a la materia prima (tusa)
-Falta información acerca del procedimiento de tamiz a la materia prima (tusa)
-No indica cómo se almacena la materia prima molida
-No informa acerca de Incluir triptona- levadura para realizar el inoculo con las esporas -No informa del tiempo de activación de la fase germinativa / Indica una fase exponencial -No aplica un proceso de plancha térmica a una temperatura indicada y a una velocidad establecida -No informa del proceso de análisis cuantitativo y cualitativo (el caldo se encuentra en su máximo crecimiento de las bacterias)
-No Implementa un proceso de filtrado al líquido-caldo para quitar residuos
-No presenta el proceso de nebulización con el caldo
-No aclara como se almacena el producto en un tanque presurizado
-No explica como aplica el caldo a través de un proceso de spray a la materia prima (Tusa, hongo, etc.)
-No implementa un proceso de criopreservación de las cepas
5
Numero de Publicación
Estado Expirada
Lecha Publicación 16/12/1997
Título Controlled delivery compositions and processes for treating organisms in a column of water or on land
Composiciones y procesos de entrega controlados para tratar organismos en una columna de agua o en tierra
Descripción
Se describen composiciones de liberación controlada de materia que comprenden complejos para tratar una población de uno o más organismos acuáticos en una columna de agua. Los complejos comprenden al menos un sistema en el que el sistema comprende al menos un agente bioactivo como un componente seleccionado para tratar una población de organismos acuáticos, al menos un componente portador y al menos un componente de recubrimiento para regular la velocidad de liberación controlada y el perfil de liberación de El agente bioactivo en el agua o al menos un agente bioactivo y un componente de función conjunta que puede servir como soporte y recubrimiento para regular la velocidad de liberación controlada y el perfil de liberación del agente bioactivo en agua, con o sin componentes aglutinantes opcionales y / o materiales de formulación adicionales. Los componentes se seleccionan para hundirse o flotar de modo que los complejos permeen y / o permanezcan en cualquier segmento plano o volumétrico de una columna de agua durante un período de tiempo que sea suficiente para tratar eficazmente una población de organismos acuáticos. También se describen métodos para tratar una columna de agua que comprende administrar las composiciones a una columna de agua o a un área seca de preinundación (pretratamiento) que se desarrollará en una columna de agua o un área de inundación. La composición y el proceso también se pueden usar para tratar organismos terrestres.
Diferencias
-Sistema controlado
-Implementa diferentes agentes bioactivos
-Los componentes de recubrimiento consiste en polímeros orgánicos solubles en agua (alcohol vindico), (óxido de etileno) hidroxipropil metil celulosa o metil celulosa, alcoholes grasos, ácidos grasos y sus ésteres, o ésteres de ftalilo
-Los vehículos son sílices, fibras de celulosa, óxidos metálicos, arcillas, tierra infusoria, escoria finamente molida o lava, alcohol polivinílico, copolímeros de alcohol polivinílico, óxido de polietileno, hidroxipropilmetilcelulosa, papel, hidrófobo, astillas de madera, alcohol cetílico, alcohol estearílico, vermiculita, corcho molido, bagazo, cáscaras de semillas, papel, materiales de carbono en partículas, almidones o almidones modificados, carragenina, algina, xantatos, agar o materiales poliméricos en polvo, y combinaciones del mismo
-No Implementa micelio del hongo Orellana Pleurotus spp -No Implementa residuos orgánicos como materia prima -No Indica como es el procesamiento de la materia prima -No informa acerca del proceso de molienda a la materia prima (tusa)
-No indica cómo se almacena la materia prima molida
-No informa acerca de Incluir triptona- levadura para realizar el inoculo con las esporas -No informa del tiempo de activación de la fase germinativa / Indica una fase exponencial
-No aplica un proceso de plancha térmica a una temperatura indicada y a una velocidad establecida -No informa del proceso de análisis cuantitativo y cualitativo (el caldo se encuentra en su máximo crecimiento de las bacterias)
-No Implementa un proceso de filtrado al líquido-caldo para quitar residuos
-No presenta el proceso de nebulización con el caldo
-No aclara como se almacena el producto en un tanque presurizado
-No explica cómo aplica el caldo a través de un proceso de spray a la materia prima (Tusa, hongo, etc.) -No implementa un proceso de criopreservación de las cepas
Numero de Publicación EP1306008A1 Estado Retirada
Fecha Publicación 02/05/2003 Título Composition for treatment against mosquito larvae and process for its preparation
Composición para tratamiento contra larvas de mosquito y proceso para su preparación.
Descripción
La invención se refiere a composiciones insecticidas que comprenden un insecticida de Bacillus thuringiensis. La invención también se refiere a un proceso para la preparación de formulaciones de tales composiciones y al uso de composiciones insecticidas para el control de larvas de mosquito.
La composición de la invención comprende un componente insecticida derivado de la cepa Bacillus thuringiensis M-H-14, un componente portador, un componente para la protección contra la luz solar y, opcionalmente, la carga y los excipientes. El componente insecticida de Bacillus thuringiensis M-H-14 es una delta-endotoxina producida por el microorganismo cuando se está muriendo. El portador de la invención es de material vegetal como turba, tusa de maíz, grano de maíz, cepa de trigo, corcho y grano de semilla de palma.
El método para la preparación del componente insecticida comprende los pasos de fermentación de Bacillus thuringiensis MH-14 en un reactor de fermentación hasta la finalización de la esporulación, separando los componentes sólidos del reactor de fermentación por centrifugación para obtener una solución concentrada llamada crema concentrada, secado por atomización crema concentrada para obtener un polvo humectable al diluir la crema concentrada con una solución acuosa para obtener una solución acuosa vertible.
Diferencias
-Implementa un proceso de fermentación y centrifugación
-Involucra otras materias primas vegetales como la turba, el grano de maíz, la cepa de trigo, el corcho y el grano de semilla de palma
-Obtiene un producto previo llamado crema concentrada
- Involucra un proceso de secado por aspersión a la crema concentrada para obtener un polvo humectable -Al diluir la crema obtiene una solución acuosa vertible
-Tiene un componente para la protección contra la luz solar (humo, bentonita, caolín y polvo de coral) -Implementa una la carga de 4% p / p de molasa de remolacha azucarera estéril.
-No Implementa micelio del hongo Orellana Pleurotus spp
-No Implementa residuos orgánicos como materia prima
-No Indica como es el procesamiento de la materia prima
-No informa acerca del proceso de molienda a la materia prima (tusa)
-No indica cómo se almacena la materia prima molida
-No informa acerca de Incluir triptona- levadura para realizar el inoculo con las esporas -No informa del tiempo de activación de la fase germinativa / Indica una fase exponencial -No aplica un proceso de plancha térmica a una temperatura indicada y a una velocidad establecida -No informa del proceso de análisis cuantitativo y cualitativo (el caldo se encuentra en su máximo crecimiento de las bacterias)
-No Implementa un proceso de filtrado al líquido-caldo para quitar residuos
-No presenta el proceso de nebulización con el caldo
-No aclara como se almacena el producto en un tanque presurizado
-No explica cómo aplica el caldo a través de un proceso de spray a la materia prima (Tusa, hongo, etc.) -No implementa un proceso de criopreservación de las cepas
Numero de Publicación US2003064060A Estado Abandonada
Descripción
Un método para controlar las larvas de Dipteran o un método para inhibir el desarrollo de la resistencia larvicida, controlar las poblaciones resistentes y reducir los niveles de resistencia en Díptera mediante la introducción de una cantidad efectiva en larvicida de una combinación de una cepa de Bacillus thuringiensis subespecie israelensis y una cepa de Bacillus sphaericus en un ambiente que contiene larvas de Dipteran; y se describe una composición de la combinación. Preferiblemente, ambas cepas no están genéticamente modificadas.
Diferencias
-Incluye un agente tensioactivo
-Involucra un vehículo inerte (minerales inorgánicos tales como caolín, mica, yeso, fertilizantes, arena, filosilicatos, carbonatos, sulfatos o fosfatos; materiales orgánicos tales como azúcares, almidones o ciclodextrinas; o materiales botánicos como productos de madera, corcho, cáscaras de arroz, cáscaras de maní y cáscaras de nueces.)
-Tiene un conservante, un conservante, un humectante, un estimulante de alimentación, un atrayente, un
agente encapsulante, un aglutinante, un emulsionante, un tinte, un UV protector, un tampón, un agente de control
-No Implementa micelio del hongo Orellana Pleurotus spp
-No Implementa residuos orgánicos como materia prima
-No Indica como es el procesamiento de la materia prima
-No informa acerca del proceso de molienda a la materia prima (tusa)
-No indica cómo se almacena la materia prima molida
-No informa acerca de Incluir triptona- levadura para realizar el inoculo con las esporas -No informa del tiempo de activación de la fase germinativa / Indica una fase exponencial -No aplica un proceso de plancha térmica a una temperatura indicada y a una velocidad establecida -No informa del proceso de análisis cuantitativo y cualitativo (el caldo se encuentra en su máximo crecimiento de las bacterias)
-No Implementa un proceso de filtrado al líquido-caldo para quitar residuos -No presenta el proceso de nebulización con el caldo
-No explica cómo aplica el caldo a través de un proceso de spray a la materia prima (Tusa, hongo, etc.)
Numero de Publicación US5560909
Estado Expirada
Descripción
La invención se refiere a ciertas composiciones insecticidas de insecticidas ingeribles seleccionados del grupo que consiste en virus de ADN, virus de ARN y bacterias del orden Bacillus tales como, por ejemplo, Bacillus thuringiensis var. israelensis atrapada por un polímero cargado adecuado. La invención también se refiere a un proceso para la preparación y el uso de tales composiciones insecticidas.
Diferencias
-Tiene un estabilizador de luz ultravioleta
-El insecticida biológico ingerible se mezcla con el estabilizador de luz ultravioleta y un polímero cargado en un medio acuoso
-El insecticida es un virus de ADN (polihedrosis nuclear), o un virus de ARN
-No Implementa micelio del hongo Orellana Pleurotus spp
-No Implementa residuos orgánicos como materia prima
-No Indica como es el procesamiento de la materia prima
-No informa acerca del proceso de molienda a la materia prima (tusa)
-Falta información acerca del procedimiento de tamiz a la materia prima (tusa)
-No indica cómo se almacena la materia prima molida
-No informa acerca de Incluir triptona- levadura para realizar el inoculo con las esporas -No informa del tiempo de activación de la fase germinativa / Indica una fase exponencial -No aplica un proceso de plancha térmica a una temperatura indicada y a una velocidad establecida -No informa del proceso de análisis cuantitativo y cualitativo (el caldo se encuentra en su máximo crecimiento de las bacterias)
-No Implementa un proceso de filtrado al líquido-caldo para quitar residuos
-No presenta el proceso de nebulización con el caldo
-No aclara como se almacena el producto en un tanque presurizado
-No explica cómo aplica el caldo a través de un proceso de spray a la materia prima (Tusa, hongo, etc.)
-No es un producto granulado
-No implementa un proceso de criopreservación de las cepas
Descripción
La invención se refiere a una nueva sustancia con actividad contra las plagas de insectos del orden Díptera. La invención se refiere además a la sustancia que actúa junto con un pesticida relacionado con Bacillus, un pesticida químico y / o un virus con propiedades pesticidas. La invención se refiere además a una (s) nueva (s) cepa (s) de Bacillus thuringiensis que produce dicha sustancia. La invención se refiere además a composiciones pesticidas que comprenden la sustancia y un vehículo pesticida, o la sustancia y un pesticida relacionado con Bacillus, un pesticida químico y / o un virus con propiedades pesticidas, así como métodos para usar las composiciones pesticidas para controlar una plaga.
Diferencias
-Es un nucleósido de uracilo con tres restos de azúcar y dos fosfatos y desplazamientos químicos -Un método para obtener un muíante o variante de una cepa de Bacillus thuringiensis -Implementa materiales inertes incluyen minerales inorgánicos tales como caolín, mica, yeso, fertilizantes, filosilicatos, carbonatos, sulfatos o fosfatos; materiales orgánicos tales como azúcar, almidones o ciclodextrinas; o materiales botánicos como productos de madera, corcho, cáscaras de arroz, cáscaras de maní y cáscaras de nueces.
-No Implementa micelio del hongo Orellana Pleurotus spp
-No Implementa residuos orgánicos como materia prima
-No Indica como es el procesamiento de la materia prima
-No informa acerca del proceso de molienda a la materia prima (tusa)
-Falta información acerca del procedimiento de tamiz a la materia prima (tusa)
-No indica cómo se almacena la materia prima molida
-No informa acerca de Incluir triptona- levadura para realizar el inoculo con las esporas -No informa del tiempo de activación de la fase germinativa / Indica una fase exponencial -No aplica un proceso de plancha térmica a una temperatura indicada y a una velocidad establecida -No informa del proceso de análisis cuantitativo y cualitativo (el caldo se encuentra en su máximo crecimiento de las bacterias)
-No Implementa un proceso de filtrado al líquido-caldo para quitar residuos -No presenta el proceso de nebulización con el caldo -No aclara como se almacena el producto en un tanque
-No explica cómo aplica el caldo a través de un proceso de spray a la materia prima (Tusa, hongo, etc.)
-No implementa un proceso de criopreservación de las cepas
Numero de Publicación US8454983B2 (En adelante PIO)
Estado Activo
Fecha Publicación 04 06 2013
Título Formulation and delivery of Bacillus thuringiensis subspecies israelensis and Bacillus sphaericus in combination for broadspectrum activity and management of resistance to biological mosquito larvicides
Formulación y suministro de la subespecie Bacillus thuringiensis israelensis y Bacillus sphaericus en combinación para la actividad de amplio espectro y el manejo de la resistencia a los larvicidas biológicos de mosquitos.
Descripción
Un método para controlar las larvas de Dipteran o un método para inhibir el desarrollo de la resistencia larvicida, controlar las poblaciones resistentes y reducir los niveles de resistencia en Díptera mediante la introducción de una cantidad efectiva en larvicida de una combinación de una cepa de Bacillus thuringiensis subespecie israelensis y una cepa de Bacillus sphaericus en un ambiente que contiene larvas de Dipteran; y se describe una composición de la combinación. Preferiblemente ambas cepas no están genéticamente modificadas
Diferencias
Implementa un agente tensioactivo, un vehículo inerte, un conservante, un humectante, un estimulante de alimentación, un atrayente, un agente encapsulante, un aglutinante, un emulsionante, un tinte, un protector de luz ultravioleta, un tampón, un agente de control de deriva, un auxiliar de deposición por pulverización, un agente de flujo libre y combinaciones de los mismos
-Eos ejemplos de materiales inertes incluyen minerales inorgánicos tales como caolín, mica, yeso, fertilizantes, arena, filosilicatos, carbonatos, sulfatos o fosfatos; materiales orgánicos tales como azúcares, almidones o ciclodextrinas; o materiales botánicos como productos de madera, corcho, cáscaras de arroz, cáscaras de maní y cáscaras de nueces.
-Combina una cepa de Bacillus thuringiensis subespecie israelensis y una cepa de Bacillus sphaericus
-No Implementa micelio del hongo Orellana Pleurotus spp
-No Implementa residuos orgánicos como materia prima
-No Indica como es el procesamiento de la materia prima
-No informa acerca del proceso de molienda a la materia prima (tusa)
-No establece el tamaño de los gránulos
-No indica cómo se almacena la materia prima molida
-No informa acerca de Incluir triptona- levadura para realizar el inoculo con las esporas
-No informa del tiempo de activación de la fase germinativa / Indica una fase exponencial
-No aplica un proceso de plancha térmica a una temperatura indicada y a una velocidad establecida
-No informa del proceso de análisis cuantitativo y cualitativo (el caldo se encuentra en su máximo crecimiento de las bacterias)
-No Implementa un proceso de filtrado al líquido-caldo para quitar residuos -No presenta el proceso de nebulización con el caldo
-No explica cómo aplica el caldo a través de un proceso de spray a la materia prima (Tusa, hongo, etc.) -No informa del proceso de secado por un tiempo y temperatura determinado
3. Descripción detallada 5
La invención hace referencia a un larvicida que utiliza como materia prima subproductos agrícolas pero su uso es exclusivamente ambiental, por si no combate una plaga que afecté a un cultivo en concreto, su funcionalidad se debe a las esporas de Bacillus thuringiensis var.israeliensis que contiene unas proteínas en forma de cristales d-endotoxina que presentan 10 una toxicidad específica cuando son ingeridos por las larvas filtradoras de mosquitos vectores.
Para lograr el efecto larvicida, la larva debe ingerir suficientes cristales para producir un desbalance osmótico que altere el sistema digestivo y que provoca que la larva colapse y muera. La novedad del uso de la matriz compuesta de micelio agotado de hongo orellana Pleurotus 15 spp, se hizo una proyección de pruebas en banco de hidráulica básica donde se evalúo las siguientes variables arrastre, flotabilidad, precipitación vs caudal.
Se puede decir que hay 3 factores críticos que determinan la ingesta-efectividad del producto por las larvas:
20 1. Fotolisis: Los cristales d-endotoxina son muy sensibles a la luz solar, pero se ha comprobado que la matriz de micelio agotado de orellana, al tratarse de un material poroso se va liberando lentamente y queda más protegido de los rayos solares.
2. Flotabilidad: La flotabilidad positiva permite que el principio activo se vaya liberando poco a poco en la parte superficial, dónde pasan la mayor parte del tiempo las larvas
25 alimentándose. El producto tiene una residualidad de 1 mes desde su aplicación.
3. Dosificación: Es necesario aplicar 2,2 gramos por metro cuadrado (m2) del espejo de agua, es importante aclarar que el producto se puede aplicar en seco y se activaría cuando se inunde. También no está de más decir que no se tiene en cuenta la profundidad por las larvas encontrarse en la mayor parte del tiempo en la parte
30 superficial.
Los bioinsecticidas hacen uso de agentes patógenos naturales como control biológico para combatir los insectos de la manera más efectiva y selectiva debido a que solamente matan a los insectos a los que están destinados. En cambio, los insecticidas puede que tenga un impacto letal o subletal en organismos que no son su objetivo (por ejemplo, recicladores de nutrientes
del suelo, polinizadores de plantas y depredadores de plagas) y reducir o contaminar productos alimenticios.
APLICACIÓN PREFERIDA:
La presente invención revela un bioinsecticida-larvicida con base en un Bacillus thuringiencis var israelensis y su proceso de fabricación para el control de larvas o mosquitos vectores.
El proceso de fabricación se compone de tres procedimientos principales: al Método de tratamiento de la materia prima /micelio del hongo Orellana Pleurotus sppí
-La tusa o micelio del hongo Orellana Pleurotus spp se recibe en bultos, en el caso de la tusa está previamente limpia, es decir sin granos de maíz, seca y libre de cualquier plaga.
-Se le aplica un proceso de molienda, el cual incluye verter la materia prima en un molino de martillos iniciando un movimiento de tornillo sinfín, ejecutando un tamiz de 3/8" 1.94 cm.
-El molino proyecta las partículas hacía un silo, dónde se recolecta, cuando está lleno el silo, se transporta en una carreta con sacos de estopa.
-Posteriormente, la materia prima se vierte en la zaranda vibratoria para separar los residuos y establecer la granulometría deseada para el producto.
-Una vez realizado el tamizaje se recolecta en garrafas de 50 galones (Capacidad máxima 200 litros y 10,8 kg), estos pueden estar dispuestos o no sobre estibas. El peso neto con el producto son aproximadamente 47 kg. El molino tiene una capacidad para moler 85.2 kg/media hora por ciclo x 3 ciclos/día equivale a 1022 kg/día. Más de una tonelada.
-La tusa va a ser usada en los dos procesos siguientes, tanto para dejar el inoculo con las esporas y para ser usada como medio de soporte de la matriz estructural. bí Procedimiento para la elaboración del caldo /Medio líquido- triptona de soya para mezclar con la materia prima)
-Además del caldo triptona de soya (TSB) también se puede utilizar el caldo Triptona Soja Extracto de Levadura (TSYEB) con resultados similares.
-Se utiliza la tusa ya previamente tratada para dejar el inoculo con las esporas durante toda la noche (equivale a 12 horas) en caldo triptona levadura (Medio liquido) a temperatura
ambiente (22°C ± 2), para tener como resultado que las esporas se activen y pasen a fase germinativa.
Descripción detallada del proceso en el que las bacterias se encuentran en fase germinativa con crecimiento vegetativo (exponencial) y están preparadas para su inoculación en la matriz (tusa de maíz):
1. Se pesan todos los componentes de la mezcla, dependiendo el tipo de caldo utilizado, en el punto 4 se expone el comportamiento que siguieron ambos medios. El motivo de utilizar 2 tipos de caldo diferentes es para tener alternativas con los proveedores, ya que los medios pueden tardar hasta 60 días en la importación. Podemos utilizar frasco Pyrex borosilicato de 500 mi o 250 mi.
Vamos a exponer el de 500 mi, este es aforado con agua destilada hasta la curva del frasco y todos los componentes que se pesaron en una balanza volumétrica con precisión (d = 0,001 gr) y un peso máximo de 250 gr:
2. Una vez se vierte cada uno de los ingredientes de la mezcla se afora con agua destilada.
3. Se coloca el frasco en la plancha térmica durante 15 min a 155°C y una velocidad de 7,7 rpm. Además, es necesario ubicar un magneto con una longitud equivalente a la base del frasco, dejando 1 cm a ambos lados de la pared del frasco.
4. Se procede a la lectura del espectrofotómetro utilizando unas cubetas de cuarzo, como blanco se utiliza caldo de cultivo previamente esterilizado en autoclave 15 min a 15 libras de presión a 121°C para tal fin podemos utilizar frasco pyrex borosilicato de 250 mi (tapa azul) y después se hace una lectura cada 24 horas, hasta que alcancé una absorbancia de 0,6 a una longitud de onda de 600 nm, esto queda en el espectro del visible.
En la siguiente tabla se muestra en qué tiempo llega a esa absorbancia y en qué momento se alcanzó esa absorbancia y que por lo tanto es el momento óptimo para la nebulización.
5. Se selecciona el caldo cuando se encuentra en su máximo crecimiento, ya que es el momento clave para la nebulización.
6. El contenido se vierte para realizar el proceso de nebulización del caldo con las bacterias en crecimiento exponencial Bacillus thuringiensis con tecnología spraying system con flujo/hora bajo. Este proceso se enlaza con el flujograma del proceso de la materia prima enviado anteriormente.
-El proceso indica que se coloca un frasco en una plancha térmica durante 15 min a 155°C y una velocidad de 7,7 rpm. Además, es necesario ubicar un magneto con una longitud equivalente a la base del frasco, dejando 1 cm a ambos lados de la pared del frasco.
-Se pone a crecer en un tubo de ensayo de 20ml (el motivo de utilizar un volumen pequeño es tener suficientes muestras por si hay alguna contaminación) estos se ponen a 37 grados con un agitador (200 rpm), hasta la mitad de la fase según la lectura del espectrofotómetro utilizando unas cubetas de cuarzo, como blanco se utiliza agua destilada y después se hace una lectura cada 24 horas, hasta que alcancé una absorbancia de 0,6 a una longitud de onda de 600 nm, esto queda en el espectro del visible, esto es para tener un análisis cuantitativo y cualitativo de las bacterias, es decir, se selecciona el caldo cuando se encuentra en su máximo crecimiento, ya que es el momento clave para la nebulización.
-Finalmente, el caldo se filtra con una bomba de vacío o por gravedad, en ambos procedimientos con malla de 120 pm para quitar trozos de micelio para obtener el líquido libre de residuos (caldo + bacterias). c) Procedimiento para ia seiección de ias cepas de trabaio v su
en
-Una vez alcanzamos 0,6 de absorbancia se hace una dilución seriada 1:100 (102) en fase exponencial (se pueden hacer otras diluciones pero se ha demostrado que se obtienen suficientes bacterias resuspendidas en dilución 1:100) a continuación colocamos las crioperlas en crioviales de 2 mi, previamente tenemos que seguir los siguientes pasos:
1. Tomar una pipeta de vidrio estéril, pipetear asépticamente 1,8 mL de la dilución -2 del inoculo con las bacterias resuspendidas más el caldo y añadir 0,2 mi de glicerol (criopreservante). Esta solución se compone:
• 0,2 mi de glicerol.
• 1,8 mi de caldo TSB o TSEYB con bacterias resuspendidas (inoculo).
2. En total serán 2 mi de la solución que será vertida en una caja de petri vidrio o plástica de 9 cm de diámetro.
3. A continuación, vertemos las crioperlas, en el caso de caja de petri de vidrio con el movimiento de nuestra muñeca realizando oscilaciones será suficiente, en caso de caja de petri plástica se puede utilizar un asa plana estéril para que rueden las crioperlas.
4. Los viales con crioperlas de cepas de trabajo, cuando van a ser usados, se debe sacar las perlas necesarias y en el menor tiempo posible debe ser guardado, nuevamente, el vial en el congelador. Se utilizan crioviales de 2 mililitros con crioperlas, ya que estas aumentan la relación superficie/volumen y además
impide que se tenga que descongelar toda la muestra del crioviales y sólo se tomé lo necesario para inocular al medio que se dispone en el tanque.
5. Una vez a la semana hay que valorar la viabilidad y pureza estableciendo la dilución mínima reduciendo la necesidad de realizar las diluciones seriadas y reduciendo tiempos.
Para conservar las cepas de trabajo se requiere tener la información sobre la procedencia, # pase (en este caso sería quinto pase) y fecha de congelación.
Se utiliza un congelador de -80 grados Criopreservación con caldo TSY o TSEYB a la dilución 2 1:100 + 20% del volumen de glicerol. (4 días se requieren para bajar gradualmente la temperatura):
4 grados
grados
grados 24 sS s I¾grados.
Mediante este proceso conseguimos aumentar la vida útil de las cepas de trabajo, estas pueden ser viables de 5 a 10 años a -80°C. Si se mantiene a -20°C o menos duran máximo 1 año.
Se conservan en crioviales de 2 mi correctamente marcados con número del lote (PTODDMMAA) está información facilitará la procedencia. Vamos a desglosar la información implícita en este número de lote:
• P Proveedor de materia prima (micelio agotado orellana u otros residuos agrícolas).
• T Turno de trabajo (1-2-3 donde se inoculó el caldo con las esporas).
• Número del técnico/operario del proceso de criopreservación.
• DDMMAA Fecha de congelación que se aíslo la cepa de trabajo, procedencia, # pase (en este caso sería quinto pase) y fecha de congelación (determinar fecha de caducidad a -80°C en 10 años y a -20°C en 1 año). d) Proceso para la ímDlementacion de mezcla entre el caldo con la materia prima
1. Se utiliza el caldo con las bacterias resuspendidas Bacillus thuringiensis var.israeliensis filtrado resultante, para realizar un proceso de nebulización (dividir en partes pequeñas), dicho caldo se agrega a un tanque (presurizado en acero Inoxidable de 5 galones con Boquilla atomizada con aire en bronce niquelado) para aplicar a través de tecnología spraying system con flujo/hora bajo, al micelio agotado de Orellana, el cual va a ser utilizado como medio de soporte de matriz estructural.
2. Operación de la boquilla manual:
Prueba de Caudal
Medición del Caudal de salida de la pieza a diferentes presiones de trabajo:
1. Prueba de Cobertura
Medición del Ángulo:
Altura de referencia: 100 mm
En la parte final de la tabla están los procesos óptimos para cumplir con los intervalos entre la molienda según la capacidad instalada para la fabricación del producto final.
• Los modelos 11005 combinan las características de las JN y las JCO ofreciendo una combinación de aguja de cierre y limpieza:
• Cuenta con una aguja de cierre manual que permite que se cierre el flujo del líquido a la boquilla. Ideal para aplicaciones de aspersión intermitentes donde el líquido se puede llegar a secar en el orificio entre usos.
• La aspersión del caldo a través de una cinta continua o puede ser por caída por gravedad en un codo PVC de 32” y ángulo de 45%. La ubicación del cabezal de la boquilla es ese punto es para evitar el impacto del chorro de manera perpendicular a la pared lo que produce que queden pegados la materia prima y puede llegar a taponar la tubería, además que habría
sobredosificación del caldo, no respetando la concentración garantizada de 2,8% esporas Bacillus thuringiensis.
Producto final
1. Una vez realizada la nebulización se deja secar en un espacio seco por 24 o más horas a una temperatura de 30 grados y humedad relativa menor del 50%. Se han realizado pruebas de vida útil durante 2 años, en los que se apreció que no ha crecido ningún tipo de hongo o levadura oportunista que dañe el producto. Se determinó que la microestructura de estos pellets es un material suficientemente poroso para albergar estos microorganismos, importante ya que mantienen una actividad de agua “Aw” mínima para impedir que puedan colonizar microorganismos oportunistas como mesófilos, mohos y levaduras.
2. Composición
Para calcular este valor nos basamos al peso del ii> producto terminado con la correspondiente materia prima que se muele en un turno, eso equivale a 341 kg / 2 horas (duración de la molienda) + incorporación del principio activo por lo tanto equivale a 344,2 kg. En el molino se introducirán ambas matrices en la proporción que aparece en la descripción inferior 60/40:
• Micelio agotado de orellana: o Densidad 382 kg/m3 o Volumen 0,53 m3 530 litros o Masa 205 kg ~ 60%
• Tusa de maíz o Densidad 480 kg/m3 o Volumen 0,28 m3= 280 litros o Masa 136 kg ~ 40%
Una vez se ha obtenido el tamaño del gránulo deseado a través del tamiz se ubica en una cinta sin fin de 10 centímetros de anchura dónde a continuación se realizará la aspersión.
• Concentración ingrediente activo: 2,8% esporas Bacillus thuringiensis var.israeliensis (Concentración garantizada). o 3253 gramos / 341 kg (materia prima total: micelio agotado de orellana + tusa de maíz)
A modo de resumen por cada kg de producto terminado tenemos:
1. 586 gramos micelio agotado de orellana
2. 386 gramos tusa de maíz
3. 28 gramos ingrediente activo esporas Bacillus thuringiensis var.israeliensis
La producción total semanal que se procesa para 15 turnos serían 5115 kg de producto terminado.
Finalmente se obtiene un producto granulado listo para empacar el cual se utiliza en unidad de estopa laminada con polietileno interno de dimensiones de 90 cm x 60 cm, debe asegurarse
una protección de la humedad, el uso del micelio agotado de orellana mantiene la actividad de agua al mínimo, esto evita el crecimiento de mohos y levadura que puedan dañar el producto, el peso neto de cada bulto serán 20 kg. Adicionalmente también se pueden obtener muestras comerciales del producto cuyo peso es 26,4 gr.
El producto es sostenible ecológicamente por lo cual reduce los residuos agrícolas brindando un valor agregado.
El producto granulado tiene dos tamaños dependiendo de la masa de agua donde se va a aplicar -Aguas estancadas (Pocetas de enfriamiento, depósitos y reservónos de agua al aire libre, pozos sépticos, bidones de obra, bocas de riego) donde se implementa un molinillo universal con un diámetro tamiz de 1 mm
-Aguas a escorrentía por lluvia (Sumideros y sistemas de acueducto con leve movimiento) donde se utiliza un diámetro tamiz de 4 mm
En general el producto brinda los beneficios de ser eficaz en el control de larvas de mosquitos vectores, debido a que se puede esparcir fácilmente de forma manual y en pequeñas cantidades por unidad de superficie.
Claims
4. Reivindicaciones
1. Bioinsecticida-larvicida con base en un Bacillus thuringiencis var israelensis para el control de larvas o mosquitos vectores, caracterizado porque comprende preferiblemente:
• Micelio agotado de orellana: o Con una densidad de al menos 382 kg/m3 o Con un volumen de al menos 0,53 m3 530 litros o Con una Masa de al menos 205 kg 60%
• Tusa de maíz o Con una densidad de al menos 480 kg/m3 o Con un volumen de al menos 0,28 m3 280 litros o Con una masa de al menos 136 kg 40%
• Concentración ingrediente activo: preferiblemente 2,8% esporas Bacillus thuringiensis var.israeliensis . o Al menos 3253 gramos / 341 kg
2. Método de obtención de un Bioinsecticida-larvicida con base en un Bacillus thuringiencis var israelensis para el control de larvas o mosquitos vectores caracterizado porque comprende los siguientes pasos: a) Realizar el tratamiento de la materia prima (micelio agotado del hongo Orellana Pleurotus spp): Este tratamiento comprende preferiblemente:
Aplicar un proceso de molienda al micelio del hongo Orellana Pleurotus spp que implica verter la materia prima, preferiblemente en un molino de martillos, iniciando un movimiento de tornillo sinfín, ejecutando un tamiz de 3/8" 1.94 cm.
Recolectar las partículas proyectadas por el molino en un silo.
Verter la materia prima en una zaranda vibratoria y separar los residuos.
Recolectar en garrafas de preferiblemente 50 galones con Capacidad máxima preferiblemente de 200 litros y 10,8 kg. b) Elaborar el caldo:
Mezclar la tusa ya previamente tratada para dejar el inoculo con las esporas durante en caldo triptona levadura (Medio liquido) a temperatura ambiente.
Realizar una dilución seriada 1:100
Colocar un frasco en una plancha térmica, preferiblemente durante 15 min, preferiblemente a 155°C y una velocidad preferida de 7,7 rpm.
Ubicar un magneto con una longitud, preferiblemente, equivalente a la base del frasco, dejando 1 cm a ambos lados de la pared del frasco.
Se pone a crecer en un tubo de ensayo de preferiblemente 20ml a 37 grados con un agitador (200 rpm), hasta la mitad de la fase según la lectura del espectrofotómetro utilizando unas cubetas de cuarzo, como blanco se utiliza agua destilada y después se hace una lectura cada 24 horas, hasta que alcancé una absorbancia de 0,6 a una longitud de onda de 600 nm, esto queda en el espectro del visible,
Seleccionar el caldo cuando se encuentra en su máximo crecimiento.
Filtrar el caldo con una bomba de vacío o malla. c) Implementar la mezcla entre el caldo con la materia prima
Realizar un proceso de nebulización utilizando el caldo con las cepas Bacillus thuringiensis del filtrado resultante.
Agregar dicho caldo a un tanque preferiblemente presurizado en acero Inoxidable de 5 galones con Boquilla atomizada con aire en bronce niquelado.
Aplicar el caldo a través de tecnología spraying system con flujo/hora bajo, a la tusa de maíz o al micelo de Orellana.
Dejar secar en un espacio seco por preferiblemente 24 horas, o más, a una temperatura preferida de 30 grados y humedad relativa preferida de menor del 50%.
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2022
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