WO2021100704A1 - Composition for improving sleep quality - Google Patents

Composition for improving sleep quality Download PDF

Info

Publication number
WO2021100704A1
WO2021100704A1 PCT/JP2020/042796 JP2020042796W WO2021100704A1 WO 2021100704 A1 WO2021100704 A1 WO 2021100704A1 JP 2020042796 W JP2020042796 W JP 2020042796W WO 2021100704 A1 WO2021100704 A1 WO 2021100704A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
pharmaceutically acceptable
acceptable salt
astaxanthin
sleep
composition
Prior art date
Application number
PCT/JP2020/042796
Other languages
French (fr)
Japanese (ja)
Inventor
萌 鶴成
祐貴 川嶋
雅浩 林
Original Assignee
Ｅｎｅｏｓ株式会社
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Ｅｎｅｏｓ株式会社 filed Critical Ｅｎｅｏｓ株式会社
Publication of WO2021100704A1 publication Critical patent/WO2021100704A1/en

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/12—Ketones
    • A61K31/122—Ketones having the oxygen directly attached to a ring, e.g. quinones, vitamin K1, anthralin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/20—Hypnotics; Sedatives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P23/00—Preparation of compounds containing a cyclohexene ring having an unsaturated side chain containing at least ten carbon atoms bound by conjugated double bonds, e.g. carotenes

Abstract

The present invention provides a novel composition for improving sleep quality. In more detail, a composition for improving sleep quality is employed, the composition containing a carotenoid that contains: astaxanthin or a pharmaceutically acceptable salt thereof; adonirubin or a pharmaceutically acceptable salt thereof; and adonixanthin or a pharmaceutically acceptable salt thereof.

Description

睡眠の質の改善のための組成物Compositions for improving sleep quality 関連出願の参照Reference of related application
　本特許出願は、２０１９年１１月１８日に出願された日本国特許出願２０１９－２０８０２６号に基づく優先権の主張を伴うものであり、かかる先の特許出願における全開示内容は、引用することにより本明細書の一部とされる。 This patent application is accompanied by a priority claim based on Japanese Patent Application No. 2019-208026 filed on November 18, 2019, and all the disclosures in the previous patent application are by citation. It is a part of this specification.
　本発明は、睡眠の質の改善のための組成物に関し、より詳しくは、アスタキサンチンまたはその薬学的に許容可能な塩、アドニルビンまたはその薬学的に許容可能な塩、およびアドニキサンチンまたはその薬学的に許容可能な塩を含むカロテノイドを含んでなる、睡眠の質の改善のための組成物に関する。 The present invention relates to compositions for improving sleep quality, more particularly astaxanthin or a pharmaceutically acceptable salt thereof, adonylbin or a pharmaceutically acceptable salt thereof, and adonixanthin or a pharmaceutically acceptable salt thereof. Containing carotenoids containing acceptable salts in the composition for improving sleep quality.
　良質な睡眠は、心身の健康を維持するための基盤である。睡眠の質が損なわれると、「就床してもなかなか寝付けない」（入眠困難）、「夜中に何度も目が覚める」（中途覚醒）といった諸症状となって表れる。睡眠におけるこれらの諸症状が顕在化した場合には、心身に様々な影響が生じかねないため、睡眠の質の低下を解消することが必要になる。したがって、睡眠の質を改善し得る手段が求められている。 Good sleep is the basis for maintaining physical and mental health. When the quality of sleep is impaired, various symptoms such as "it is difficult to fall asleep even after going to bed" (difficulty falling asleep) and "wake up many times in the middle of the night" (midway awakening) appear. When these various symptoms of sleep become apparent, various effects may occur on the mind and body, and it is necessary to eliminate the deterioration of sleep quality. Therefore, there is a need for means that can improve sleep quality.
　一方、アスタキサンチン、アドニルビン、およびアドニキサンチンはカロテノイドの一種であり、動物、植物、微生物に広く分布している。 On the other hand, astaxanthin, adonylvin, and adonixanthin are a type of carotenoid and are widely distributed in animals, plants, and microorganisms.
　ここで、アスタキサンチンには種々の効果があることが報告されている。例えば、特許文献１には、アスタキサンチンを有効成分として含有する日内リズム正常化作用を有する飲食物および医薬組成物が記載されている。特許文献２には、アスタキサンチンを含有することを特徴とする睡眠改善効果を有するペット用食品が記載されている。特許文献３には、アスタキサンチンとメラトニンとを併せて動物に投与するステップを含む、動物の睡眠を促進するための方法が記載されている。特許文献４には、アスタキサンチン類と赤ワインエキスを含有する油性組成物を用いた睡眠不足改善剤が記載されている。 Here, it has been reported that astaxanthin has various effects. For example, Patent Document 1 describes foods and drinks and pharmaceutical compositions having astaxanthin as an active ingredient and having a diurnal rhythm normalizing action. Patent Document 2 describes a pet food having a sleep improving effect, which is characterized by containing astaxanthin. Patent Document 3 describes a method for promoting sleep in an animal, which comprises a step of administering astaxanthin and melatonin together to the animal. Patent Document 4 describes a sleep deprivation improving agent using an oily composition containing astaxanthins and a red wine extract.
　また、特許文献５には、カロテノイドであるクロシンを有効成分として含む睡眠改善剤が記載されている。 Further, Patent Document 5 describes a sleep improving agent containing crocin, which is a carotenoid, as an active ingredient.
　しかしながら、アスタキサンチンまたはその薬学的に許容可能な塩、アドニルビンまたはその薬学的に許容可能な塩、およびアドニキサンチンまたはその薬学的に許容可能な塩を含むカロテノイドと、睡眠の質の改善との関係については何ら報告されていない。 However, the relationship between carotenoids containing astaxanthin or a pharmaceutically acceptable salt thereof, adonylbin or a pharmaceutically acceptable salt thereof, and adonixanthin or a pharmaceutically acceptable salt thereof and improved sleep quality. Nothing has been reported about.
国際公開第２００１／０８７２９１号International Publication No. 2001/087291 国際公開第２００５／０５８０６４号International Publication No. 2005/058064 特表２０１４－５０５０３１号公報Special Table 2014-505031 特開２００９－１５９９２９号公報JP-A-2009-159929 国際公開第２０１０／０６１５７４号International Publication No. 2010/061574
　本発明は、睡眠の質の効果的な改善のための新たな技術的手段を提供することを目的としている。 An object of the present invention is to provide a new technical means for effectively improving the quality of sleep.
　本発明者らは、今般、アスタキサンチンまたはその薬学的に許容可能な塩、アドニルビンまたはその薬学的に許容可能な塩、およびアドニキサンチンまたはその薬学的に許容可能な塩を含むカロテノイドが、睡眠の質の効果的な改善を示すことを見出した。 We have now found that carotenoids, including astaxanthin or a pharmaceutically acceptable salt thereof, adonylbin or a pharmaceutically acceptable salt thereof, and adonixanthin or a pharmaceutically acceptable salt thereof, are used for sleep. We have found that it shows an effective improvement in quality.
　本発明には、以下の発明が包含される。
［１］　アスタキサンチンまたはその薬学的に許容可能な塩、アドニルビンまたはその薬学的に許容可能な塩、およびアドニキサンチンまたはその薬学的に許容可能な塩を含むカロテノイドを含んでなる、睡眠の質の改善のための組成物。
［２］　前記睡眠の質の改善が、起床時眠気、入眠と睡眠維持、夢み、および睡眠時間の満足感からなる群から選択される少なくとも一種のものの改善である、［１］に記載の組成物。
［３］　前記カロテノイドが、微生物、動物もしくは植物由来物または化学合成品である、［１］または［２］に記載の組成物。
［４］　前記微生物が、パラコッカス・カロティニファシエンス(Paracoccus carotinifaciens)である、［３］に記載の組成物。
［５］　ヒトのための、［１］～［４］のいずれか一つに記載の組成物。
［６］　前記ヒトが健常者である、［５］に記載の組成物。
［７］　前記ヒトが抑うつ気分または疲労感を有するヒトである、［５］または［６］に記載の組成物。
［８］　前記組成物が飲食品または食品添加物である、［１］～［７］のいずれか一つに記載の組成物。
［９］　前記組成物が機能性食品である、［１］～［８］のいずれか一つに記載の組成物。
［１０］　前記組成物が医薬品である、［１］～［５］および［７］のいずれか一つに記載の組成物。
［１１］　睡眠の質の改善のための組成物の製造における、アスタキサンチンまたはその薬学的に許容可能な塩、アドニルビンまたはその薬学的に許容可能な塩、およびアドニキサンチンまたはその薬学的に許容可能な塩を含むカロテノイドの使用。
［１２］　対象の睡眠の質を改善する方法であって、アスタキサンチンまたはその薬学的に許容可能な塩、アドニルビンまたはその薬学的に許容可能な塩、およびアドニキサンチンまたはその薬学的に許容可能な塩を含むカロテノイドの有効量を、それを必要とする対象に投与することまたは摂取させることを含んでなる、方法。
［１３］　睡眠の質の改善のための、アスタキサンチンまたはその薬学的に許容可能な塩、アドニルビンまたはその薬学的に許容可能な塩、およびアドニキサンチンまたはその薬学的に許容可能な塩を含むカロテノイド。 The present invention includes the following inventions.
[1] A quality of sleep comprising astaxanthin or a pharmaceutically acceptable salt thereof, adonylbin or a pharmaceutically acceptable salt thereof, and a carotenoid containing adonixanthin or a pharmaceutically acceptable salt thereof. Composition for improvement.
[2] The composition according to [1], wherein the improvement in sleep quality is an improvement in at least one selected from the group consisting of drowsiness when waking up, falling asleep and maintaining sleep, dreaming, and satisfaction of sleep time. Stuff.
[3] The composition according to [1] or [2], wherein the carotenoid is a microbial, animal or plant-derived product or a chemically synthesized product.
[4] The composition according to [3], wherein the microorganism is Paracoccus carotinifaciens.
[5] The composition according to any one of [1] to [4] for humans.
[6] The composition according to [5], wherein the human is a healthy person.
[7] The composition according to [5] or [6], wherein the human has a depressed mood or a feeling of fatigue.
[8] The composition according to any one of [1] to [7], wherein the composition is a food or drink or a food additive.
[9] The composition according to any one of [1] to [8], wherein the composition is a functional food.
[10] The composition according to any one of [1] to [5] and [7], wherein the composition is a pharmaceutical product.
[11] Astaxanthin or a pharmaceutically acceptable salt thereof, adonylbin or a pharmaceutically acceptable salt thereof, and adonixanthin or a pharmaceutically acceptable salt thereof in the manufacture of a composition for improving sleep quality. Use of carotenoids containing salt.
[12] A method of improving the sleep quality of a subject, astaxanthin or a pharmaceutically acceptable salt thereof, adonylbin or a pharmaceutically acceptable salt thereof, and adonixanthin or a pharmaceutically acceptable salt thereof. A method comprising administering or ingesting an effective amount of a carotenoid, including a salt, to a subject in need thereof.
[13] Carotenoids containing astaxanthin or a pharmaceutically acceptable salt thereof, adonylbin or a pharmaceutically acceptable salt thereof, and adonixanthin or a pharmaceutically acceptable salt thereof for improving sleep quality. ..
　本発明によれば、効果的に対象の睡眠の質を改善することができる。また、本発明の組成物は、起床時眠気、入眠と睡眠維持、夢み、および／または睡眠時間の満足感の改善からなる群から選択される少なくとも一種で示される睡眠の質を改善することができる上で有利である。 According to the present invention, the sleep quality of the subject can be effectively improved. The compositions of the present invention may also improve the quality of sleep exhibited by at least one selected from the group consisting of improved drowsiness when waking up, falling asleep and maintaining sleep, dreaming, and / or improving sleep time satisfaction. It is advantageous to be able to do it.
発明の具体的説明Specific description of the invention
　本発明の、睡眠の質の改善のための組成物は、アスタキサンチンまたはその薬学的に許容可能な塩、アドニルビンまたはその薬学的に許容可能な塩、およびアドニキサンチンまたはその薬学的に許容可能な塩を含むカロテノイドを含んでなることを特徴としている。上述のようなカロテノイドが後述の試験例１に示される通り、睡眠の質を顕著に改善しうることは意外な事実である。 The compositions for improving sleep quality of the present invention include astaxanthin or a pharmaceutically acceptable salt thereof, adonylbin or a pharmaceutically acceptable salt thereof, and adonixanthin or a pharmaceutically acceptable salt thereof. It is characterized by containing carotenoids containing salts. It is a surprising fact that carotenoids as described above can significantly improve sleep quality, as shown in Test Example 1 below.
カロテノイド
　一つの態様によれば、本発明のカロテノイドとしては、アスタキサンチンまたはその薬学的に許容可能な塩、アドニルビンまたはその薬学的に許容可能な塩、およびアドニキサンチンまたはその薬学的に許容可能な塩を含むカロテノイド（カロテノイド混合物と称してもよい）が挙げられる。 Carotenoids According to one aspect, the carotenoids of the invention include astaxanthin or a pharmaceutically acceptable salt thereof, adonylbin or a pharmaceutically acceptable salt thereof, and adonixanthin or a pharmaceutically acceptable salt thereof. Carotenoids containing (may be referred to as a carotenoid mixture) include.
　アスタキサンチンは、赤色の色素でカロテノイドの一種キサントフィルに属しており、その化学式は3,3’-dihydroxy-β,β-carotene-4,4’-dione （C40H5204、分子量596.852）であり、構造式は下記式で表される。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000001
 Astaxanthin belongs to the kind xanthophyll carotenoid red pigment, its chemical formula is 3,3'-dihydroxy-β, β- carotene-4,4'-dione (C 40 H 52 0 4, molecular weight 596.852) Yes, the structural formula is represented by the following formula.
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000001
　アドニルビンの化学式は3-hydroxy-β,β-carotene-4,4’-dione （C40H5203、分子量580.853）であり、構造式は下記式で表される。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000002
 The chemical formula of adonirubin is 3-hydroxy-β, β- carotene-4,4'-dione (C 40 H 52 0 3, molecular weight 580.853) and the structural formula is represented by the following formula.
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000002
　アドニキサンチンの化学式は3,3’-dihydroxy-β,β-carotene-4-one （C40H5403、分子量582.869）であり、構造式は下記式で表される。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000003
 The chemical formula of adonixanthin is 3,3'-dihydroxy-β, β- carotene-4-one (C 40 H 54 0 3, molecular weight 582.869) and the structural formula is represented by the following formula.
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000003
　また、別の態様によれば、本発明のカロテノイドとしては、アスタキサンチン、アドニルビン、アドニキサンチンおよびそれらの薬学的に許容可能な塩から選択される一種以上のカロテノイドが挙げられる。 According to another aspect, the carotenoids of the present invention include one or more carotenoids selected from astaxanthin, adonylbin, adonixanthin and pharmaceutically acceptable salts thereof.
　また、別の態様によれば、本発明のカロテノイドとしては、アスタキサンチンを主成分とするカロテノイドが挙げられる。 According to another aspect, the carotenoid of the present invention includes a carotenoid containing astaxanthin as a main component.
　また、本発明のカロテノイドは、遊離体、脂肪酸エステル体であってもよい。上記カロテノイドは、吸収性の観点から、遊離体を使用することが好ましい。 Further, the carotenoid of the present invention may be a free form or a fatty acid ester form. From the viewpoint of absorbability, it is preferable to use a free carotenoid.
　また、本発明のカロテノイドは、光学異性体、シス-トランス異性体等の立体異性体であってもよい。
　アスタキサンチンの光学異性体としては、例えば、３Ｓ，３’Ｓ－体、３Ｓ，３’Ｒ－体（ｍｅｓｏ－体）、および３Ｒ，３’Ｒ－体からなる群から選ばれる少なくとも１つを挙げることができ、好ましくは、３Ｓ，３’Ｓ－体である。また、アスタキサンチンは分子中央の共役二重結合のシス体、トランス体（ａｌｌ　Ｅ－アスタキサンチン）である異性体またはそれら組み合わせであってもよい。シス体としては、例えば、９－シス体（９Ｚ－アスタキサンチン）、１３－シス体（１３Ｚ－アスタキサンチン）、１５－シス体、ジシス体またはそれらの組み合わせが挙げられる。アスタキサンチンは、好ましくは、シス体、トランス体の異性体の組み合わせである。
　アドニルビンのシス-トランス異性体としては、シス体、トランス体またはそれらの組み合わせであってもよく、シス体としては１３－シス体を挙げることができる。
　アドニキサンチンの光学異性体としては、３Ｓ，３’Ｒ－体、３Ｓ，３’Ｓ－体、３Ｒ，３’Ｓ－体および３Ｒ，３’Ｒ－体からなる群から選ばれる少なくとも１つを挙げることができ、好ましくは、３Ｓ，３’Ｒ－体である。また、アドニキサンチンのシス-トランス異性体としては、シス体、トランス体またはそれらの組み合わせであってもよい。アドニキサンチンのシス-トランス異性体として、好ましくは、シス体およびトランス体の組み合わせである。 Further, the carotenoid of the present invention may be a stereoisomer such as an optical isomer or a cis-trans isomer.
Examples of the optical isomer of astaxanthin include at least one selected from the group consisting of 3S, 3'S-form, 3S, 3'R-form (meso-form), and 3R, 3'R-form. It can be, preferably a 3S, 3'S-form. Further, astaxanthin may be a conjugated double bond cis form in the center of the molecule, an isomer which is a trans form (all E-astaxanthin), or a combination thereof. Examples of the cis form include 9-cis form (9Z-astaxanthin), 13-cis form (13Z-astaxanthin), 15-cis form, Zisis form and combinations thereof. Astaxanthin is preferably a combination of cis and trans isomers.
The cis-trans isomer of adonylbin may be a cis isomer, a trans isomer or a combination thereof, and the cis isomer may be a 13-cis isomer.
The optical isomer of adonixanthine is at least one selected from the group consisting of 3S, 3'R-form, 3S, 3'S-form, 3R, 3'S-form and 3R, 3'R-form. It can be mentioned, preferably 3S, 3'R-form. Further, the cis-trans isomer of adonixanthine may be a cis isomer, a trans isomer or a combination thereof. The cis-trans isomer of adonixanthine is preferably a combination of cis and trans isomers.
　また、本発明のカロテノイドは、有効成分として用いることが好ましい。 Further, the carotenoid of the present invention is preferably used as an active ingredient.
　本発明の一つの態様によれば、本発明のカロテノイドにおける、アスタキサンチンまたはその薬学的に許容可能な塩、アドニルビンまたはその薬学的に許容可能な塩、およびアドニキサンチンまたはその薬学的に許容可能な塩の質量比（アスタキサンチンまたはその薬学的に許容可能な塩：アドニルビンまたはその薬学的に許容可能な塩：アドニキサンチンまたはその薬学的に許容可能な塩）は、好ましくは１：０．０１～１０：０．０１～１０であり、より好ましくは１：０．０３～９：０．０３～９であり、さらに好ましくは１：０．０５～８：０．０５～８である。 According to one aspect of the invention, astaxanthin or a pharmaceutically acceptable salt thereof, adonylbin or a pharmaceutically acceptable salt thereof, and adonixanthin or a pharmaceutically acceptable salt thereof in the carotenoid of the present invention. The mass ratio of the salt (astaxanthin or a pharmaceutically acceptable salt thereof: adonylbin or a pharmaceutically acceptable salt thereof: adonixanthin or a pharmaceutically acceptable salt thereof) is preferably from 1: 0.01 to. It is 10: 0.01 to 10, more preferably 1: 0.03 to 9: 0.03 to 9, and even more preferably 1: 0.05 to 8: 0.05 to 8.
　本発明の別の態様によれば、本発明のカロテノイドにおける、アスタキサンチンまたはその薬学的に許容可能な塩と、アドニルビンまたはその薬学的に許容可能な塩およびアドニキサンチンまたはその薬学的に許容可能な塩との質量比（アスタキサンチンまたはその薬学的に許容可能な塩：アドニルビンまたはその薬学的に許容可能な塩およびアドニキサンチンまたはその薬学的に許容可能な塩）は、好ましくは１：０．０１～２０であり、より好ましくは１：０．０３～１５であり、さらに好ましくは１：０．０５～１２である。 According to another aspect of the invention, astaxanthin or a pharmaceutically acceptable salt thereof and adonylbin or a pharmaceutically acceptable salt thereof and adonixanthin or a pharmaceutically acceptable salt thereof in the carotenoid of the present invention. The mass ratio to salt (astaxanthin or pharmaceutically acceptable salt thereof: adonylbin or pharmaceutically acceptable salt thereof and adonixanthin or pharmaceutically acceptable salt thereof) is preferably 1: 0.01. It is ~ 20, more preferably 1: 0.03 to 15, and even more preferably 1: 0.05 to 12.
　本発明の別の態様によれば、本発明のカロテノイドにおける、アドニルビンまたはその薬学的に許容可能な塩とアドニキサンチンまたはその薬学的に許容可能な塩との質量比（アドニルビンまたはその薬学的に許容可能な塩：アドニキサンチンまたはその薬学的に許容可能な塩）は、好ましくは１：０．００１～１００であり、より好ましくは１：０．００２～９５であり、さらに好ましくは１：０．００３～９０である。 According to another aspect of the invention, the mass ratio of adonylbin or a pharmaceutically acceptable salt thereof to adonixanthine or a pharmaceutically acceptable salt thereof in the carotenoid of the present invention (adenylbin or a pharmaceutically acceptable salt thereof). Acceptable salt: adonixanthin or a pharmaceutically acceptable salt thereof) is preferably 1: 0.001 to 100, more preferably 1: 0.002 to 95, and even more preferably 1: It is 0.003 to 90.
　本発明において、カロテノイドは、薬学的に許容可能な塩の形態であってもよく、これらの塩も本発明におけるカロテノイドに含まれる。本発明において、カロテノイドは、酸または塩基と塩を形成する場合もある。本発明において、薬学的に許容可能な塩は、アスタキサンチン、アドニルビンおよび／またはアドニキサンチンと薬学的に許容可能な塩を形成するものであれば特に限定されない。具体的には、例えば、ハロゲン化水素酸塩（例えば、フッ化水素酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩等）、無機酸塩（例えば、硫酸塩、硝酸塩、過塩素酸塩、リン酸塩、炭酸塩、重炭酸塩等）、有機カルボン酸塩（例えば、酢酸塩、シュウ酸塩、マレイン酸塩、酒石酸塩、フマル酸塩、クエン酸塩等）、有機スルホン酸塩（例えば、メタンスルホン酸塩、トリフルオロメタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、トルエンスルホン酸塩、カンファースルホン酸塩等）、アミノ酸塩（例えば、アスパラギン酸塩、グルタミン酸塩等）、四級アミン塩、アルカリ金属塩（例えば、ナトリウム塩、カリウム塩等）、アルカリ土類金属塩（例えば、マグネシウム塩、カルシウム塩等）等が挙げられるが、これに限定されない。 In the present invention, the carotenoid may be in the form of pharmaceutically acceptable salts, and these salts are also included in the carotenoid in the present invention. In the present invention, carotenoids may also form salts with acids or bases. In the present invention, the pharmaceutically acceptable salt is not particularly limited as long as it forms a pharmaceutically acceptable salt with astaxanthin, adonylbin and / or adonixanthin. Specifically, for example, hydrohalogenate (for example, hydrofluoride salt, hydrochloride, hydrobromide, hydroiodide, etc.), inorganic acid salt (for example, sulfate, nitrate, excess). Chlorates, phosphates, carbonates, bicarbonates, etc.), organic carboxylates (eg, acetates, oxalates, maleates, tartrates, fumarates, citrates, etc.), organic sulfone Acid salts (eg, methane sulfonate, trifluoromethane sulfonate, ethane sulfonate, benzene sulfonate, toluene sulfonate, camphor sulfonate, etc.), amino acid salts (eg, asparaginate, glutamate, etc.) ), Tertiary amine salts, alkali metal salts (eg, sodium salts, potassium salts, etc.), alkaline earth metal salts (eg, magnesium salts, calcium salts, etc.), etc., but are not limited thereto.
　本発明のカロテノイドは、市販品であってもよく、あるいは従来の化学合成法により製造された化学合成品、微生物による発酵法、または微生物、動物もしくは植物等からの抽出および精製等により製造された微生物、動物または植物由来物（天然由来）を使用することができる。かかる微生物は、細菌、藻類、酵母を含む。ここで、微生物、動物または植物由来物とは、微生物、動物または植物から得られる産生物であり、好ましくは、パラコッカス属微生物由来物である。ここで、パラコッカス（Paracoccus）属微生物としては、パラコッカス・カロティニファシエンス（Paracoccus carotinifaciens）、パラコッカス・マークシイ（Paracoccus marcusii）、パラコッカス・ヘウンデシス（Paracoccus haeundaensis）およびパラコッカス・ゼアキサンチニファシエンス（Paracoccus zeaxanthinifaciens）が好ましく用いられ、より好ましくは、パラコッカス・カロティニファシエンスである。パラコッカス属微生物の具体的な菌株の例として、パラコッカス・カロティニファシエンス　Ｅ－３９６株およびパラコッカス属細菌Ａ５８１－１株（ＦＥＲＭ　ＢＰ－４６７１）が挙げられ、これらの変異株も本発明に好ましく用いられる。 The carotenoid of the present invention may be a commercially available product, or is produced by a chemically synthesized product produced by a conventional chemical synthesis method, a fermentation method using a microorganism, or extraction and purification from a microorganism, an animal, a plant, or the like. Microbial, animal or plant-derived products (naturally-derived) can be used. Such microorganisms include bacteria, algae and yeast. Here, the microorganism, animal or plant-derived product is a product obtained from the microorganism, animal or plant, and is preferably a product derived from a Paracoccus genus microorganism. Here, examples of the Paracoccus genus microorganisms include Paracoccus carotinifaciens, Paracoccus marcusii, Paracoccus haeundaensis and Paracoccus haeundaensis and Paracoccus zeaxianthis. Is preferably used, and more preferably Paracoccus carotinifaciens. Examples of specific strains of Paracoccus microorganisms include Paracoccus carotinifaciens E-396 strain and Paracoccus bacterium A581-1 strain (FERM BP-4671), and these mutant strains are also preferably used in the present invention. Be done.
　パラコッカス属微生物の培養方法（すなわち、パラコッカス属微生物からのカロテノイドの産生方法）、およびカロテノイドの抽出および精製方法は、例えば、下記の方法が挙げられる。 Examples of the method for culturing Paracoccus microorganisms (that is, the method for producing carotenoids from Paracoccus microorganisms) and the methods for extracting and purifying carotenoids include the following methods.
　パラコッカス属微生物の培養方法は、かかる微生物を培養できる方法であれば特に限定されないが、例えば、特開２００７－３１９０１５号公報の実施例１に記載の方法に準じて実施できる。以下に簡単に記載する。
　グルコース、肉エキス、ペプトン、塩化ナトリウム等を含む培地を試験管に入れ、蒸気殺菌する。これにＥ－３９６菌株（ＦＥＲＭ　ＢＰ－４２８３）を植菌し、往復振とう培養を行う。この培養液を遠心分離した後凍結乾燥し、カロテノイドを含む乾燥菌体を得る。 The method for culturing a microorganism belonging to the genus Paracoccus is not particularly limited as long as it is a method capable of culturing such a microorganism, and can be carried out according to, for example, the method described in Example 1 of JP-A-2007-31901. It is briefly described below.
A medium containing glucose, meat extract, peptone, sodium chloride, etc. is placed in a test tube and sterilized by steam. The E-396 strain (FERM BP-4283) is inoculated into this and subjected to reciprocating shaking culture. This culture solution is centrifuged and then freeze-dried to obtain dried cells containing carotenoids.
　カロテノイドの抽出および精製方法は、カロテノイドを抽出および精製できる方法であれば特に限定されないが、例えば、国際公開第２０１４／０５４６６９号に記載の方法に準じて実施できる。以下に簡単に記載する。
＜エタノール抽出工程＞　上記で得られた、カロテノイドを含むパラコッカス属微生物の乾燥菌体に、エタノールを加え、高圧容器内で窒素雰囲気下約９０℃にて攪拌しながらカロテノイドの抽出を行う。冷却後（例えば、液温６５℃）、圧力容器を開放し、濾過にて抽出液から菌体を除き、更に菌体ケークをエタノールにて洗浄して、カロテノイド含有抽出液を得る。
＜抽出液の濃縮および結晶化工程＞　上記のエタノール抽出工程で得られた抽出液を、減圧度を調節したロータリー・エバポレーターを用いてエタノールの一部を留去し、抽出液の固形分を濃縮し（例えば、１．２５～２０倍）、その後、この濃縮液について一晩熟成（例えば、３０℃）を行い、結晶を析出させる。
＜結晶の濾取および乾燥工程＞　上記の抽出液の濃縮および結晶化工程で得られた結晶を含む液から、濾過にて結晶を回収する。回収した結晶を減圧乾燥（例えば、１００℃で２時間）してカロテノイドの乾燥結晶を得る。 The method for extracting and purifying the carotenoid is not particularly limited as long as it can extract and purify the carotenoid, but can be carried out according to, for example, the method described in International Publication No. 2014/0546669. It is briefly described below.
<Ethanol extraction step> Ethanol is added to the dried cells of the Paracoccus microorganism containing carotenoids obtained above, and the carotenoids are extracted while stirring in a high-pressure container at about 90 ° C. in a nitrogen atmosphere. After cooling (for example, the liquid temperature is 65 ° C.), the pressure vessel is opened, the cells are removed from the extract by filtration, and the cell cake is further washed with ethanol to obtain a carotenoid-containing extract.
<Concentration and crystallization step of extract> A part of ethanol was distilled off from the extract obtained in the above ethanol extraction step using a rotary evaporator in which the degree of reduced pressure was adjusted, and the solid content of the extract was concentrated. After that (for example, 1.25 to 20 times), the concentrated solution is aged overnight (for example, 30 ° C.) to precipitate crystals.
<Crystal filtration and drying steps> Crystals are collected by filtration from the liquid containing the crystals obtained in the above-mentioned extraction solution concentration and crystallization steps. The recovered crystals are dried under reduced pressure (for example, at 100 ° C. for 2 hours) to obtain dried crystals of carotenoids.
　さらに、本発明の組成物において、本発明のカロテノイドは、アスタキサンチン、アドニルビンおよびアドニキサンチンに加え、カンタキサンチン、アステロイデノン、β－カロテン、エキネノンおよび３－ヒドロキシエキネノンからなる群から選択される少なくとも一つをさらに含むことが好ましい。また、本発明のカロテノイドとして、アスタキサンチン、アドニルビンおよびアドニキサンチンに加え、カンタキサンチン、アステロイデノン、β－カロテン、エキネノンおよび３－ヒドロキシエキネノンをさらに含むことがより好ましい。例えば、特開２００７－２６１９７２号公報、特開２００９－５０２３７号公報に記載の方法に準じてパラコッカス・カロティニファシエンスの乾燥菌体から抽出したカロテノイドは、アスタキサンチン、アドニルビンおよびアドニキサンチンを含み、好ましくはカンタキサンチン、アステロイデノン、β－カロテン、エキネノンおよび３－ヒドロキシエキネノンからなる群から選択される少なくとも一つをさらに含む。 Further, in the composition of the present invention, the carotenoid of the present invention is selected from the group consisting of canthaxanthin, asteroidenone, β-carotene, echinenone and 3-hydroxyechinenone in addition to astaxanthin, adonylvin and adonixanthin. It is preferable to further include at least one of these. Further, as the carotenoid of the present invention, it is more preferable to further contain canthaxanthin, asteroidenone, β-carotene, echinenone and 3-hydroxyechinenone in addition to astaxanthin, adonylvin and adonixanthin. For example, carotenoids extracted from dried cells of Paracoccus carotinifaciens according to the methods described in JP-A-2007-261972 and JP-A-2009-50237 include astaxanthin, adonylvin and adonixanthin. It further comprises at least one selected from the group consisting of canthaxanthin, asteroidenone, β-carotene, echinenone and 3-hydroxyechinenone.
　本発明の組成物におけるカロテノイドの含有量は、本発明の効果を妨げない限り特に限定されないが、組成物全体に対し、例えば、０．００１～９９．９質量％が挙げられ、好ましくは０．００５～９９．８質量％、より好ましくは０．００７～９９．７質量％、さらに好ましくは０．０１～９９．６質量％である。なお、上記カロテノイドの含有量は、例えば、上記カロテノイドがアスタキサンチンのみである場合アスタキサンチンの含有量であり、上記カロテノイドが複数種のカロテノイド（例えば、アスタキサンチン、アドニルビンおよびアドニキサンチン）である場合、複数種のカロテノイドの合計の含有量とされる。本発明の組成物におけるアスタキサンチン、アドニルビンおよび／またはアドニキサンチンの含有量の測定は、高速液体クロマトグラフ（ＨＰＬＣ）法により測定される。このような測定は、市販のＨＰＬＣ装置（例えば、Ｗａｔｅｒｓ製）およびカラム（例えば、Ｌｕｎａ、５μｍ、Ｓｉｌｉｃａ（２）、１００Å，（１５０ｍｍｘφ４．６ｍｍ）（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ製））を用いることにより、簡便に行うことができる。上記測定としては、例えば、以下の条件により行うことができる。分析装置：２４８９　ＵＶ／Ｖｉｓ　検出器（Ｗａｔｅｒｓ）を備えたＡｌｌｉａｎｃｅ　ｅ２６９５　Ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ　Ｍｏｄｕｌｅｓ（Ｗａｔｅｒｓ）、カラム：Ｌｕｎａ、５μｍ、Ｓｉｌｉｃａ（２）、１００Å，（１５０ｍｍｘφ４．６ｍｍ）（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ製）、移動相：ｎ－ヘキサン／アセトン混合液（容量比８２：１２）、流量：毎分１．２ｍＬ、温度：室温付近一定温度、検出：４７０ｎｍ。ここで、より正確な濃度測定のためには、既知の濃度を有する標準液を用いることが望ましい。 The content of the carotenoid in the composition of the present invention is not particularly limited as long as it does not interfere with the effect of the present invention, but is, for example, 0.001 to 99.9% by mass, preferably 0. It is 005 to 99.8% by mass, more preferably 0.007 to 99.7% by mass, still more preferably 0.01 to 99.6% by mass. The content of the carotenoid is, for example, the content of astaxanthin when the carotenoid is only astaxanthin, and when the carotenoid is a plurality of carotenoids (for example, astaxanthin, adonylbin and adonixanthin), a plurality of types. It is considered to be the total content of carotenoids. Measurement of the content of astaxanthin, adonylbin and / or adonixanthin in the composition of the present invention is measured by a high performance liquid chromatography (HPLC) method. Such measurements are conveniently performed by using a commercially available HPLC apparatus (eg, Waters) and a column (eg, Luna, 5 μm, Silica (2), 100 Å, (150 mm x φ 4.6 mm) (Phenomenex)). be able to. The measurement can be performed under the following conditions, for example. Analyzer: Room temperature e2695 Separation Models (Waters) equipped with 2489 UV / Vis detectors (Waters), Column: Luna, 5 μm, Silka (2), 100 Å, (150 mm x φ4.6 mm) (manufactured by Phenomenex), mobile phase: n -Hexane / acetone mixed solution (volume ratio 82:12), flow rate: 1.2 mL / min, temperature: constant temperature near room temperature, detection: 470 nm. Here, for more accurate concentration measurement, it is desirable to use a standard solution having a known concentration.
　本発明の組成物は、上記カロテノイドと共に、所望により経口上許容可能または薬学的に許容可能な添加剤を配合した組成物として提供することができる。上記添加剤として、溶剤、溶解補助剤、溶解剤、滑沢剤、乳化剤、等張化剤、安定化剤、保存剤、防腐剤、界面活性剤、ゲル化剤、調整剤、キレート剤、ｐＨ調整剤、緩衝剤、賦形剤、増粘剤、着色剤、芳香剤、甘味料または香料等が挙げられる。 The composition of the present invention can be provided as a composition containing the above carotenoids and optionally an orally acceptable or pharmaceutically acceptable additive. As the above additives, solvents, solubilizers, solubilizers, lubricants, emulsifiers, tonicity agents, stabilizers, preservatives, preservatives, surfactants, gelling agents, regulators, chelating agents, pH Examples include regulators, buffers, excipients, thickeners, colorants, fragrances, sweeteners or fragrances.
　本発明の組成物は、上記カロテノイドおよび所望により経口上許容可能または薬学的に許容可能な添加剤を混合、溶解、分散、懸濁するなどの公知の手法により、調製することができる。また、本発明の組成物の調製においては、本発明の効果を妨げない限り、上記手法により調製された混合物、溶解物、分散物、懸濁物などに、均質化処理、殺菌処理や乾燥処理を施してもよい。 The composition of the present invention can be prepared by a known method such as mixing, dissolving, dispersing and suspending the carotenoid and optionally an orally acceptable or pharmaceutically acceptable additive. Further, in the preparation of the composition of the present invention, as long as the effect of the present invention is not impaired, the mixture, solution, dispersion, suspension and the like prepared by the above method are subjected to homogenization treatment, sterilization treatment and drying treatment. May be applied.
　また、本発明の組成物の形態は、本発明の効果を妨げない限り、特に制限されず、好ましくは、固形状、半固形状（ペースト状、ゲル状、ゼリー状を含む）または液状（油状、スラリー状を含む）が挙げられる。 The form of the composition of the present invention is not particularly limited as long as it does not interfere with the effects of the present invention, and is preferably solid, semi-solid (including paste, gel, jelly) or liquid (oily). , Including slurry).
　また、本発明の組成物の剤形は、本発明の効果を妨げない限り特に限定されないが、注射剤、錠剤（例えば、裸錠、糖衣錠、フィルムコーティング錠、腸溶錠、徐放錠、口腔内崩壊錠、舌下錠、チュアブル錠等）、カプセル剤（例えば、硬カプセル、軟カプセル）、エリキシル剤、丸剤、粉剤、散剤、顆粒剤、水剤、トローチ剤、シロップ剤、ドライシロップ剤、乳剤、懸濁剤、液剤、ゼリー剤、吸入剤、エアロゾル剤、粉末吸入剤、坐剤、軟膏、クリーム剤、ゲル剤、貼付剤、バップ剤、ローション剤、点滴剤、眼軟膏剤、点眼剤、点鼻剤が挙げられる。本発明の組成物の剤形は、経口摂取または投与用の剤形であることが好ましく、錠剤、カプセル剤、丸剤、粉剤、散剤、顆粒剤、シロップ剤、ドライシロップ剤、乳剤、液剤、懸濁剤、水剤、トローチ剤、ゼリー剤等が挙げられる。 The dosage form of the composition of the present invention is not particularly limited as long as the effect of the present invention is not impaired, but injections, tablets (for example, naked tablets, sugar-coated tablets, film-coated tablets, enteric coated tablets, sustained-release tablets, oral cavity). Internally disintegrating tablets, sublingual tablets, chewable tablets, etc.), capsules (eg, hard capsules, soft capsules), elixirs, rounds, powders, powders, granules, liquids, troches, syrups, dry syrups, Emulsion, Suspension, Liquid, Jelly, Inhalant, Aerosol, Powder Inhalant, Suppository, Ointment, Cream, Gel, Patch, Bop, Lotion, Drip, Eye Ointment, Eye Ointment , Nasal drops can be mentioned. The dosage form of the composition of the present invention is preferably a dosage form for oral ingestion or administration, and is a tablet, capsule, pill, powder, powder, granule, syrup, dry syrup, emulsion, liquid, suspension. Examples include turbid agents, liquid agents, troche agents, jelly agents and the like.
　本発明の組成物の摂取または投与方法としては、特に限定されないが、点滴、静脈内注射、筋肉内注射、皮下注射、皮内注射等の注射、経口、経粘膜、経皮、鼻腔内、口腔内、腹腔内等による摂取または投与が挙げられ、好ましくは、経口摂取または経口投与である。 The method for ingesting or administering the composition of the present invention is not particularly limited, but is limited to injections such as infusion, intravenous injection, intramuscular injection, subcutaneous injection, and intradermal injection, oral, transmucosal, transdermal, intranasal, and oral. Ingestion or administration by intraperitoneal injection or intraperitoneal administration is preferable, and oral ingestion or oral administration is preferable.
　本発明の組成物としては、食品もしくは飲料等の飲食品、食品添加物等の飲食品添加物、飼料、医薬品、医薬部外品、または化粧料が挙げられ、摂取の簡便性の観点から飲食品が好ましい。 Examples of the composition of the present invention include foods and drinks such as foods and beverages, food and drink additives such as food additives, feeds, pharmaceuticals, quasi-drugs, and cosmetics. Goods are preferred.
　本発明の飲食品は、本発明の組成物をそのまま飲食品として調製したもの、各種タンパク質、糖類、脂肪、微量元素、ビタミン類、他の有効成分（例えば、乳酸菌、バチルス属菌（Bacillus）等の細菌、酵母等の真菌、食物繊維、ＤＨＡまたはＥＰＡ）等を更に配合したもの、本発明の組成物を溶液状等の液状、半固形状または固形状にしたものでよく、また、本発明の組成物を一般の飲食品へ添加したものであってもよい。 The food or drink of the present invention is prepared by preparing the composition of the present invention as it is as a food or drink, various proteins, sugars, fats, trace elements, vitamins, other active ingredients (for example, lactic acid bacteria, Bacillus) and the like. Bacteria, fungi such as yeast, dietary fiber, DHA or EPA), etc. may be further blended, or the composition of the present invention may be in a liquid, semi-solid or solid form such as a solution, and the present invention may be used. The composition of the above may be added to general foods and drinks.
　上記飲食品としては、具体的には、例えば、即席麺、レトルト食品、缶詰、電子レンジ食品、即席スープ・みそ汁類、フリーズドライ食品等の即席食品類；清涼飲料、果汁飲料、野菜飲料、豆乳飲料、コーヒー飲料、茶飲料、粉末飲料、濃縮飲料、アルコール飲料、ゼリー飲料等の飲料類；栄養ドリンク；パン、パスタ、麺、ケーキミックス、パン粉等の小麦粉製品；飴、グミ、ゼリー、キャラメル、チューイングガム、チョコレート、クッキー、ビスケット、ケーキ、パイ、スナック、クラッカー、和菓子、デザート菓子等の菓子類；栄養バー；スポーツバー；ソース、トマト加工調味料、風味調味料、調理ミックス、たれ類、ドレッシング類、つゆ類、カレー・シチューの素類等の調味料；加工油脂、バター、マーガリン、マヨネーズ等の油脂類；乳飲料、ヨーグルト類、乳酸菌飲料、アイスクリーム類、クリーム類等の乳製品；農産缶詰、ジャム・マーマレード類、シリアル等の農産加工品；ハム、ベーコン、ソーセージ、焼き豚等の畜肉加工食品：冷凍食品等を例示することができるが、これらに限定されない。 Specific examples of the above-mentioned foods and drinks include instant foods such as instant noodles, retort foods, canned foods, microwave foods, instant soups / miso juices, and freeze-dried foods; soft drinks, fruit juice drinks, vegetable drinks, and soy milk. Beverages, coffee beverages, tea beverages, powdered beverages, concentrated beverages, alcoholic beverages, jelly beverages and other beverages; nutritional drinks; bread, pasta, noodles, cake mixes, bread flour and other wheat flour products; candy, gummy, jelly, caramel, Chewing gum, chocolate, cookies, biscuits, cakes, pies, snacks, crackers, Japanese sweets, desserts and other sweets; nutrition bar; sports bar; sauces, tomato processing seasonings, flavor seasonings, cooking mixes, sauces, dressings , Soups, curry and stew ingredients, etc .; processed fats and oils, butter, margarine, mayonnaise and other fats and oils; dairy beverages, yogurts, lactic acid bacteria beverages, ice creams, creams and other dairy products; canned agricultural products , Jam, marmalades, processed agricultural products such as cereals; processed livestock foods such as ham, bacon, sausage, and roasted pork: frozen foods and the like can be exemplified, but not limited thereto.
　本発明の飲食品には、健康食品、サプリメント、機能性食品（例えば、特定保健用食品、栄養機能食品または機能性表示食品を含む）、栄養補助食品、特別用途食品（例えば、病者用食品、乳児用調製粉乳、妊産婦、授乳婦用粉乳またはえん下困難者・咀嚼困難者用食品を含む）または乳児用液体調製乳（乳児用液体ミルクともいう）も包含される。後述のように、本発明の組成物は睡眠の質の改善作用を有することから、睡眠の質の改善のための飲食品が提供される。すなわち、本発明の飲食品は、例えば、起床時に眠気が強いヒトのため、または、睡眠に問題があるヒトのための飲食品として提供できる。さらに、機能性食品等の飲食品において、「眠りが浅くぐっすり眠れていない方に」、「睡眠の質が気になる方に」等の表示を付して提供してもよい。 The foods and drinks of the present invention include health foods, supplements, functional foods (including, for example, foods for specified health use, foods with nutritional function or foods with functional claims), nutritional supplements, foods for special purposes (for example, foods for the sick). , Infant prepared milk powder, pregnant women, lactating women powdered milk or foods for people with swallowing / chewing difficulties) or infant liquid prepared milk (also referred to as infant liquid milk) are also included. As will be described later, since the composition of the present invention has an effect of improving sleep quality, foods and drinks for improving sleep quality are provided. That is, the food or drink of the present invention can be provided, for example, as a food or drink for a person who is very drowsy when waking up or for a person who has a sleep problem. Further, foods and drinks such as functional foods may be provided with labels such as "for those who sleep lightly and do not sleep soundly" and "for those who are concerned about the quality of sleep".
　本発明の組成物の摂取量または投与量は、特に限定されず、組成物の処方、カロテノイドの種類、純度、対象の種類、対象の年齢または体重、症状、摂取または投与時間、組成物の形態、摂取または投与方法、本発明のカロテノイド以外のカロテノイドまたは薬剤の組み合わせ等に依存して決定できる。また、本発明の組成物は、睡眠の質の改善のための有効量となるように、１日の摂取量単位の形態から構成されることが好ましい。例えば、本発明の組成物を経口摂取する場合、アスタキサンチンまたはその薬学的に許容可能な塩、アドニルビンまたはその薬学的に許容可能な塩、およびアドニキサンチンまたはその薬学的に許容可能な塩を含むカロテノイドが体重６０ｋｇの成人１人１日当たり０．０１～１０００ｍｇ、好ましくは０．０５～１００ｍｇ、より好ましくは０．１～５０ｍｇの範囲の摂取量または投与量となるように該カロテノイドを組成物に配合することができる。本発明のカロテノイドと組み合わせて用いる本発明のカロテノイド以外のカロテノイドまたは薬剤も、それぞれ臨床上用いられる摂取量または投与量を基準として適宜決定できる。 The intake or dose of the composition of the present invention is not particularly limited, and the formulation of the composition, the type and purity of the carotenoid, the type of the subject, the age or body weight of the subject, the symptoms, the intake or administration time, and the form of the composition It can be determined depending on the method of ingestion or administration, the combination of carotenoids or drugs other than the carotenoids of the present invention, and the like. In addition, the composition of the present invention is preferably composed in the form of a daily intake unit so as to be an effective amount for improving the quality of sleep. For example, when the compositions of the present invention are taken orally, they include astaxanthin or a pharmaceutically acceptable salt thereof, adonylbin or a pharmaceutically acceptable salt thereof, and adonixanthin or a pharmaceutically acceptable salt thereof. The carotenoid is added to the composition so that the intake or dose of the carotenoid is in the range of 0.01 to 1000 mg, preferably 0.05 to 100 mg, more preferably 0.1 to 50 mg per day for an adult weighing 60 kg. Can be blended. Carotenoids or drugs other than the carotenoids of the present invention used in combination with the carotenoids of the present invention can also be appropriately determined based on the clinically used intake or dose, respectively.
　また、本発明の組成物の１日の摂取量または投与量は、上述の組成物の摂取量または投与量と同様、組成物の処方等に応じて適宜選択されるものである。本発明の組成物の１日の摂取量または投与量は、例えば１回または複数回で対象に摂取させるかまたは投与してもよいが、１～５回で対象に摂取させるかまたは投与することが好ましい。したがって、本発明の組成物の１日の摂取または投与回数は、１日に１～５回であり、好ましくは、１日に１～３回であり、より好ましくは、１日に１～２回である。 Further, the daily intake or dose of the composition of the present invention is appropriately selected according to the formulation of the composition and the like, similarly to the intake or dose of the composition described above. The daily intake or dose of the composition of the present invention may be, for example, one or more times to be ingested or administered to the subject, but one to five times to be ingested or administered to the subject. Is preferable. Therefore, the number of times of ingestion or administration of the composition of the present invention per day is 1 to 5 times a day, preferably 1 to 3 times a day, and more preferably 1 to 2 times a day. Times.
　本発明の一つの態様によれば、本発明の組成物を適用する対象は、本発明の効果を妨げない限り、特に限定されないが、好ましくは哺乳動物であり、より好ましくはヒト等の霊長類、犬、猫である。当該対象は健常者（健常動物）であっても患者（患者動物）であってもよい。 According to one aspect of the present invention, the subject to which the composition of the present invention is applied is not particularly limited as long as it does not interfere with the effects of the present invention, but is preferably a mammal, and more preferably a primate such as a human. , Dogs, cats. The subject may be a healthy person (healthy animal) or a patient (patient animal).
　本発明の好ましい態様によれば、本発明の組成物を適用する対象としては、抑うつ気分のヒトが挙げられる。ここで、抑うつ気分としては、悲しい、むなしい、憂鬱だ、気が滅入る、気が沈むなど、気分が落ち込んだ状態が挙げられ、例えば、後述のＰＯＭＳ（Ｐｒｏｆｉｌｅ　ｏｆ　Ｍｏｏｄ　Ｓｔａｔｅｓ）２日本語版を用いて評価することができる。かかる抑うつ気分であるとは、好ましくは、ＰＯＭＳ２日本語版の［抑うつと落ち込み（Ｄｅｐｒｅｓｓｉｏｎ－Ｄｅｊｅｃｔｉｏｎ：ＤＤ）］のＴスコアが６５点より高いことが挙げられる。かかる［抑うつと落ち込み］のＴスコアの上限値としては、９２点が挙げられ、好ましくは、９１点であり、より好ましくは、９０点である。 According to a preferred embodiment of the present invention, an object to which the composition of the present invention is applied includes a person in a depressed mood. Here, the depressed mood includes a state of depression such as sadness, vainness, depression, depression, and depression. For example, POMS (Profile of Mood States) 2 Japanese version described later is used. Can be evaluated. Such a depressed mood preferably means that the T score of the Japanese version of POMS2 [Depression-Depression (DD)] is higher than 65 points. As the upper limit of the T score of such [depression and depression], 92 points can be mentioned, preferably 91 points, and more preferably 90 points.
　本発明の別の好ましい態様によれば、本発明の組成物を適用する対象としては、疲労感を有するヒトが挙げられる。ここで、疲労感を有するヒトとしては、例えば、日本疲労学会の抗疲労臨床評価ガイドライン第５版の疲労感ＶＡＳ（Visual Analogue Scale）検査において、疲労感ＶＡＳが７０ｍｍ以上であるヒトが挙げられる。かかる疲労感ＶＡＳの上限値としては、１００ｍｍが挙げられ、好ましくは、９９ｍｍであり、より好ましくは、９８ｍｍである。 According to another preferred embodiment of the present invention, an object to which the composition of the present invention is applied includes a person having a feeling of fatigue. Here, as a person having a feeling of fatigue, for example, a person having a feeling of fatigue VAS of 70 mm or more in the fatigue feeling VAS (Visual Analogue Scale) test of the anti-fatigue clinical evaluation guideline 5th edition of the Japanese Society of Fatigue can be mentioned. Examples of the upper limit value of the fatigue feeling VAS include 100 mm, preferably 99 mm, and more preferably 98 mm.
　本発明における「睡眠の質」とは、身体および脳が睡眠によりどの程度休むことができているか、つまり睡眠の良好さの程度を意味し、睡眠障害を有する不安症の患者の睡眠の質は除かれる。したがって、本発明の好ましい態様によれば、上記「睡眠の質」は、健常者の睡眠の質である。睡眠の質は、例えば、起床時眠気（sleepiness on rising）（起床時における眠気と称してもよい）、入眠と睡眠維持（initiation and maintenance of sleep）（例えば、スムースな入眠および睡眠の維持、またはすぐに寝付いて中途覚醒などなく安定して睡眠が続くこと）、夢み（frequent dreaming）（例えば、頻繁に夢を見ることや悪夢を見ることがないこと）、および睡眠時間（sleep length）の満足感（睡眠時間に対する満足感と称してもよい）（例えば、時間不足感のない睡眠）からなる群から選択される少なくとも一種のもので示される。このうち、睡眠の質は、起床時眠気で示されることが好ましい。睡眠の質は、試験例に示すとおり、睡眠の質ＶＡＳを用いて評価できる。また、起床時眠気、入眠と睡眠維持、夢み、および睡眠時間の満足感は、試験例に示すとおり、ＯＳＡ起床時睡眠感調査票（ＭＡ版）を用いて評価できる。 The "sleep quality" in the present invention means how much the body and brain are able to rest by sleep, that is, the degree of good sleep, and the sleep quality of anxiety patients with sleep disorders is Be excluded. Therefore, according to a preferred embodiment of the present invention, the "sleep quality" is the sleep quality of a healthy person. The quality of sleep is, for example, sleepiness on rising (may be referred to as sleepiness when waking up), initiation and maintenance of sleep (eg, smooth sleep onset and maintenance of sleep), or Satisfaction with falling asleep quickly and staying stable without awakening), frequent dreaming (for example, not having frequent dreams or night dreams), and sleep length It is indicated by at least one selected from the group consisting of sensations (which may be referred to as satisfaction with sleep time) (eg, sleep without feeling of lack of time). Of these, sleep quality is preferably indicated by drowsiness when waking up. Sleep quality can be evaluated using sleep quality VAS, as shown in the test examples. In addition, sleep onset during wake-up, sleep onset and sleep maintenance, dreaming, and satisfaction with sleep time can be evaluated using the OSA wake-up sleep sensation questionnaire (MA version) as shown in the test example.
　本発明の組成物によれば、睡眠の質を改善することができ、好ましくは、起床時眠気、入眠と睡眠維持、夢み、および睡眠時間の満足感からなる群から選択される少なくとも一種のものを改善することができる。したがって、本発明の組成物によれば、睡眠の質を改善することが可能である。したがって、本発明の一つの態様によれば、本発明の組成物は、睡眠の質の改善のための組成物として提供される。本発明において「睡眠の質の改善」とは、好ましくは、上記の睡眠の質の改善または向上を意味する。睡眠の質の改善とは、例えば、起床時の眠気が改善されていること（例えば、気持ちよく目覚めること）、入眠と睡眠維持（例えば、寝つきと熟眠感）が改善されていること、夢み（夢見）が改善されていること（例えば、頻繁に夢を見ることや悪夢を見ることがなくなる）、睡眠時間の満足感（例えば、睡眠時間に不足感がない）が改善されていることから判断できる。睡眠の質が改善されていることは、試験例の条件にて確認することができる。特に、本発明の好ましい態様によれば、本発明の組成物は、アスタキサンチンと共に、アドニルビンおよびアドニキサンチンを含有することにより、起床時の眠気、入眠と睡眠維持、夢み（夢見）、および睡眠時間の満足感の全てを改善できる上で有利である。 According to the compositions of the present invention, the quality of sleep can be improved, preferably at least one selected from the group consisting of wake-up drowsiness, sleep onset and sleep maintenance, dreams, and sleep time satisfaction. Can be improved. Therefore, according to the composition of the present invention, it is possible to improve the quality of sleep. Therefore, according to one aspect of the invention, the composition of the invention is provided as a composition for improving sleep quality. In the present invention, "improvement of sleep quality" preferably means the above-mentioned improvement or improvement of sleep quality. Improvements in sleep quality include, for example, improved drowsiness when waking up (eg, waking up comfortably), improved sleep onset and sleep maintenance (eg, falling asleep and deep sleep), and dreaming (dreaming). ) Is improved (for example, you do not dream frequently or have nightmares), and the satisfaction of sleep time (for example, there is no feeling of lack of sleep time) is improved. .. The improvement in sleep quality can be confirmed under the conditions of the test examples. In particular, according to a preferred embodiment of the present invention, the composition of the present invention contains astaxanthin together with adonylbin and adonixanthin to cause drowsiness when waking up, sleep onset and sleep maintenance, dreaming, and sleep time. It is advantageous in being able to improve all of the satisfaction of.
　本発明の別の態様によれば、対象の睡眠の質を改善する方法であって、アスタキサンチンまたはその薬学的に許容可能な塩、アドニルビンまたはその薬学的に許容可能な塩、およびアドニキサンチンまたはその薬学的に許容可能な塩を含むカロテノイドの有効量を、それを必要とする対象に投与することまたは摂取させることを含んでなる、方法が提供される。本発明のさらに別の態様によれば、アスタキサンチンまたはその薬学的に許容可能な塩、アドニルビンまたはその薬学的に許容可能な塩、およびアドニキサンチンまたはその薬学的に許容可能な塩を含むカロテノイドを有効量含んでなる組成物を対象に投与することまたは摂取させることを含んでなる、対象の睡眠の質を改善する方法が提供される。上記睡眠の質の改善としては、起床時眠気、入眠と睡眠維持、夢み、および睡眠時間の満足感からなる群から選択される少なくとも一種のものの改善が好ましい。ここで、「有効量」とは、１日の摂取量単位における、アスタキサンチンまたはその薬学的に許容可能な塩、アドニルビンまたはその薬学的に許容可能な塩、およびアドニキサンチンまたはその薬学的に許容可能な塩を含むカロテノイドの含有量等と同様に設定することができる。本発明のさらに別の態様によれば、上述の睡眠の質を改善する方法は、対象が健常者である場合、ヒトに対する医療行為を除く非治療的方法とされる。ここで、ヒトに対する医療行為とは、医師等の処方を必要として、ヒトに対して医薬品を摂取させる（投与する）行為等を意味する。本発明の睡眠の質を改善する方法は、本発明の組成物について、本明細書に記載された内容に従って実施することができる。 According to another aspect of the invention, a method of improving the sleep quality of a subject, astaxanthin or a pharmaceutically acceptable salt thereof, adonylbin or a pharmaceutically acceptable salt thereof, and adonixanthin or A method is provided comprising administering or ingesting an effective amount of a carotenoid containing its pharmaceutically acceptable salt to a subject in need thereof. According to yet another aspect of the invention, carotenoids comprising astaxanthin or a pharmaceutically acceptable salt thereof, adonylbin or a pharmaceutically acceptable salt thereof, and adonixanthin or a pharmaceutically acceptable salt thereof. Provided are methods of improving the sleep quality of a subject, comprising administering or ingesting a composition comprising an effective amount to the subject. The improvement in sleep quality is preferably at least one selected from the group consisting of wake-up drowsiness, sleep onset and sleep maintenance, dreams, and sleep time satisfaction. Here, the "effective amount" means astaxanthin or a pharmaceutically acceptable salt thereof, adonylbin or a pharmaceutically acceptable salt thereof, and adonixanthin or a pharmaceutically acceptable salt thereof in a daily intake unit. It can be set in the same manner as the content of carotenoids containing possible salts. According to yet another aspect of the present invention, the above-mentioned method for improving sleep quality is a non-therapeutic method excluding medical treatment for humans when the subject is a healthy person. Here, the medical practice for a human means an act of ingesting (administering) a drug to a human, requiring a prescription from a doctor or the like. The method of improving the quality of sleep of the present invention can be carried out for the composition of the present invention in accordance with the contents described herein.
　また、本発明の別の態様によれば、睡眠の質の改善のための、アスタキサンチンまたはその薬学的に許容可能な塩、アドニルビンまたはその薬学的に許容可能な塩、およびアドニキサンチンまたはその薬学的に許容可能な塩を含むカロテノイドの使用が提供される。上記睡眠の質の改善としては、起床時眠気、入眠と睡眠維持、夢み、および睡眠時間の満足感からなる群から選択される少なくとも一種のものの改善が好ましい。 Also, according to another aspect of the invention, astaxanthin or a pharmaceutically acceptable salt thereof, adonylbin or a pharmaceutically acceptable salt thereof, and adonixanthin or a pharmacy thereof for improving the quality of sleep. The use of carotenoids containing qualibly acceptable salts is provided. The improvement in sleep quality is preferably at least one selected from the group consisting of wake-up drowsiness, sleep onset and sleep maintenance, dreams, and sleep time satisfaction.
　また、本発明の別の態様によれば、睡眠の質の改善のための組成物としての、アスタキサンチンまたはその薬学的に許容可能な塩、アドニルビンまたはその薬学的に許容可能な塩、およびアドニキサンチンまたはその薬学的に許容可能な塩を含むカロテノイドの使用が提供される。上記睡眠の質の改善としては、起床時眠気、入眠と睡眠維持、夢み、および睡眠時間の満足感からなる群から選択される少なくとも一種のものの改善が好ましい。 Also, according to another aspect of the invention, astaxanthin or a pharmaceutically acceptable salt thereof, adonylbin or a pharmaceutically acceptable salt thereof, and adoni as a composition for improving the quality of sleep. The use of carotenoids containing xanthine or a pharmaceutically acceptable salt thereof is provided. The improvement in sleep quality is preferably at least one selected from the group consisting of wake-up drowsiness, sleep onset and sleep maintenance, dreams, and sleep time satisfaction.
　また、本発明の別の態様によれば、睡眠の質の改善のための組成物の製造における、アスタキサンチンまたはその薬学的に許容可能な塩、アドニルビンまたはその薬学的に許容可能な塩、およびアドニキサンチンまたはその薬学的に許容可能な塩を含むカロテノイドの使用が提供される。上記睡眠の質の改善としては、起床時眠気、入眠と睡眠維持、夢み、および睡眠時間の満足感からなる群から選択される少なくとも一種のものの改善が好ましい。 Also, according to another aspect of the invention, astaxanthin or a pharmaceutically acceptable salt thereof, adonylbin or a pharmaceutically acceptable salt thereof, and an ad in the production of a composition for improving sleep quality. The use of carotenoids containing astaxanthin or a pharmaceutically acceptable salt thereof is provided. The improvement in sleep quality is preferably at least one selected from the group consisting of wake-up drowsiness, sleep onset and sleep maintenance, dreams, and sleep time satisfaction.
　また、本発明の別の態様によれば、睡眠の質の改善のための、アスタキサンチンまたはその薬学的に許容可能な塩、アドニルビンまたはその薬学的に許容可能な塩、およびアドニキサンチンまたはその薬学的に許容可能な塩を含むカロテノイドが提供される。上記睡眠の質の改善としては、起床時眠気、入眠と睡眠維持、夢み、および睡眠時間の満足感からなる群から選択される少なくとも一種のものの改善が好ましい。 Also, according to another aspect of the invention, astaxanthin or a pharmaceutically acceptable salt thereof, adonylbin or a pharmaceutically acceptable salt thereof, and adonixanthin or a pharmacy thereof for improving the quality of sleep. Carotenoids containing qualibly acceptable salts are provided. The improvement in sleep quality is preferably at least one selected from the group consisting of wake-up drowsiness, sleep onset and sleep maintenance, dreams, and sleep time satisfaction.
　上記の使用、化合物（カロテノイド）の態様は何れも、本発明の組成物または方法に関する記載に準じて実施することができる。 Any of the above-mentioned uses and aspects of the compound (carotenoid) can be carried out according to the description regarding the composition or method of the present invention.
　以下、調製例、試験例により、本発明をより具体的に説明するが、本発明の技術範囲は、これらの例示に限定されるものではない。なお、特に記載しない限り、本発明で用いられる全部のパーセンテージや比率は質量による。また、特に記載しない限り、本明細書に記載の単位や測定方法はJIS規格による。 Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Preparation Examples and Test Examples, but the technical scope of the present invention is not limited to these examples. Unless otherwise specified, all percentages and ratios used in the present invention depend on mass. Unless otherwise specified, the units and measurement methods described in this specification are in accordance with JIS standards.
　以下の調製例における、アスタキサンチン等のカロテノイドの定量は、次のようにして行った。 The quantification of carotenoids such as astaxanthin in the following preparation examples was performed as follows.
アスタキサンチン等のカロテノイドの定量方法
　アスタキサンチン等のカロテノイドの定量は、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）を用いて行った。カラムはＬｕｎａ、５μｍ、Ｓｉｌｉｃａ（２）、１００Å（１５０ｍｍ ｘ φ４．６ｍｍ）（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ製）を使用した。分析装置は、２４８９ＵＶ／Ｖｉｓ　検出器（Ｗａｔｅｒｓ）を備えたＡｌｌｉａｎｃｅ　ｅ２６９５　Ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ　Ｍｏｄｕｌｅｓ（Ｗａｔｅｒｓ）を用いた。溶出は、移動相であるｎ－ヘキサン／アセトン混合液（容量比８２：１２）を室温付近一定の温度にて毎分１．２ｍＬの流量で流通することで行った。測定においては、移動相にて希釈したサンプル１０μＬを注入量とし、カラム溶離液中のカロテノイドの検出は波長４７０ｎｍで行った。また、定量のための標準品としては、シグマ社製アスタキサンチン（Ｃａｔ．Ｎｏ．Ａ９３３５）を用いた。標準液のアスタキサンチン濃度の設定は、標準液の４７４ｎｍの吸光度（Ａ）および上記条件でＨＰＬＣ分析を行ったときの標準液のａｌｌ　Ｅ－アスタキサンチン（トランス体）のピークの面積百分率％（Ｂ）を測定した後に、以下の式を用いて行った。
　　標準液のアスタキサンチンの濃度（ｍｇ／Ｌ）＝Ａ÷２１２１×Ｂ×希釈倍率・・・（１） Method for Quantifying Carotenoids such as Astaxanthin The quantification of carotenoids such as astaxanthin was performed using high performance liquid chromatography (HPLC). The column used was Luna, 5 μm, Silica (2), 100 Å (150 mm x φ4.6 mm) (manufactured by Phenomenex). As an analyzer, Alliance e2695 Separation Models (Waters) equipped with a 2489UV / Vis detector (Waters) was used. Elution was carried out by circulating a mobile phase n-hexane / acetone mixed solution (volume ratio 82:12) at a constant temperature near room temperature at a flow rate of 1.2 mL / min. In the measurement, 10 μL of the sample diluted in the mobile phase was used as the injection amount, and the carotenoid in the column eluate was detected at a wavelength of 470 nm. Astaxanthin (Cat. No. A9335) manufactured by Sigma Co., Ltd. was used as a standard product for quantification. To set the astaxanthin concentration of the standard solution, set the absorbance (A) of the standard solution at 474 nm and the area percentage (B) of the peak area of all E-astaxanthin (trans form) of the standard solution when HPLC analysis was performed under the above conditions. After the measurement, the following formula was used.
Concentration of astaxanthin in standard solution (mg / L) = A ÷ 2121 × B × dilution ratio ・ ・ ・ (1)
（サンプル調製方法）
　乾燥菌体の場合：
　以下、テトラヒドロフランは、酸化防止剤であるブチルヒドロキシトルエン　２５０ｐｐｍ含有品を使用した。５０ｍＬのチューブに、サンプル５５～７５ｍｇを精秤し、次いで蒸留水を１５０μＬ添加した。ここに、テトラヒドロフラン／メタノール＝２０／１を１５ｍＬ添加し、５分間十分混合した後、ヘキサンを３０ｍＬ添加した。得られた液を遠心分離して不溶物を沈殿させ、上清をＨＰＬＣの移動相で１０倍希釈し、ＨＰＬＣで分析を行った。
　乾燥結晶の場合：
　５０ｍＬのメスフラスコに、サンプル１７～２３ｍｇを精秤し、テトラヒドロフラン／メタノール＝２０／１を１５ｍＬ添加し、５分間十分混合した後、テトラヒドロフラン／メタノール＝２０／１で５０ｍＬにメスアップした。得られた液５ｍＬを別の５０ｍＬメスフラスコに採取し、ＨＰＬＣの移動相で５０ｍＬにメスアップし希釈液を得た。得られた希釈液５ｍＬをさらに別の５０ｍＬメスフラスコに採取し、ＨＰＬＣの移動相で５０ｍＬにメスアップして得られた注入液を用いて、ＨＰＬＣで分析を行った。
　アスタキサンチン含有粉末の場合：
　５０ｍＬチューブに、サンプル０．１５～０．２５ｇを精秤し、次いで蒸留水を２．５ｍＬ添加し、超音波処理２分を行った。その後、テトラヒドロフラン／メタノール＝２０／１を５ｍＬ添加し、ボルテックスミキサー攪拌抽出した。そこに１０ｍＬのｎ－ヘキサンを添加混合した後に遠心し、得られた上層を５０ｍＬメスフラスコに採取した（１回目）。下層にテトラヒドロフラン／メタノール＝２０／１を５ｍＬ添加し、ボルテックスミキサー攪拌抽出した。そこに、１０ｍＬのｎ－ヘキサンを添加混合した後に遠心し、得られた上層を１回目の上層が入っている５０ｍＬメスフラスコに採取した（２回目）。同様に３回目の抽出を行い、上層を上記５０ｍＬメスフラスコに採取した。その後、上記５０ｍＬメスフラスコにおいて、得られた上層をＨＰＬＣ移動相で５０ｍＬにメスアップし希釈液を得た。得られた希釈液５ｍＬを新たな５０ｍＬメスフラスコに採取し、再度ＨＰＬＣ移動相で５０ｍＬにメスアップして得られた注入液を用いて、ＨＰＬＣ分析を行った。 (Sample preparation method)
For dried mycelium:
Hereinafter, as tetrahydrofuran, a product containing 250 ppm of butylhydroxytoluene, which is an antioxidant, was used. 55-75 mg of the sample was precisely weighed into a 50 mL tube, then 150 μL of distilled water was added. To this, 15 mL of tetrahydrofuran / methanol = 20/1 was added, and after sufficiently mixing for 5 minutes, 30 mL of hexane was added. The obtained liquid was centrifuged to precipitate an insoluble matter, and the supernatant was diluted 10-fold with a mobile phase of HPLC and analyzed by HPLC.
For dried crystals:
17-23 mg of the sample was precisely weighed in a 50 mL volumetric flask, 15 mL of tetrahydrofuran / methanol = 20/1 was added, and the mixture was thoroughly mixed for 5 minutes, and then the volumetric flask was adjusted to 50 mL with tetrahydrofuran / methanol = 20/1. 5 mL of the obtained liquid was collected in another 50 mL volumetric flask, and the volumetric flask was adjusted to 50 mL by the mobile phase of HPLC to obtain a diluted liquid. 5 mL of the obtained diluent was collected in another 50 mL volumetric flask, and the injection solution obtained by measuring up to 50 mL with the mobile phase of HPLC was used for analysis by HPLC.
For astaxanthin-containing powder:
0.15 to 0.25 g of the sample was precisely weighed in a 50 mL tube, then 2.5 mL of distilled water was added, and sonication was performed for 2 minutes. Then, 5 mL of tetrahydrofuran / methanol = 20/1 was added, and the mixture was extracted by stirring with a vortex mixer. After adding and mixing 10 mL of n-hexane there, the mixture was centrifuged, and the obtained upper layer was collected in a 50 mL volumetric flask (first time). 5 mL of tetrahydrofuran / methanol = 20/1 was added to the lower layer, and the mixture was extracted by stirring with a vortex mixer. After adding and mixing 10 mL of n-hexane there, the mixture was centrifuged, and the obtained upper layer was collected in a 50 mL volumetric flask containing the first upper layer (second time). Similarly, the third extraction was performed, and the upper layer was collected in the above 50 mL volumetric flask. Then, in the above 50 mL volumetric flask, the obtained upper layer was made up to 50 mL with an HPLC mobile phase to obtain a diluted solution. 5 mL of the obtained diluted solution was collected in a new 50 mL volumetric flask, and the injection solution obtained by measuring up to 50 mL with the HPLC mobile phase was used for HPLC analysis.
（計算方法）
　アスタキサンチン濃度は式（２）に従って、その他カロテノイド濃度は式（３）に従って算出した。
　　アスタキサンチン（ｍｇ／ｇ）＝（標準液中のアスタキサンチン濃度（ｍｇ／Ｌ））／（アスタキサンチン標準液のピークエリア）×（サンプル中のアスタキサンチンピークエリア）／（サンプル質量（ｍｇ））×係数＊１×Ｃ＊２・・・（２）
　その他のカロテノイド濃度は、式（３）に従って算出した。
　　その他カロテノイド＊３（ｍｇ／ｇ）＝（標準液中のアスタキサンチン濃度（ｍｇ／Ｌ））／（アスタキサンチン標準液のピークエリア）×（サンプル中の対象カロテノイドピークエリア＊４）／（サンプル質量（ｍｇ））×係数＊１×Ｃ＊２・・・（３）
　いずれもトランス体およびシス体の量を合計した。
（＊１：係数はａｌｌ　Ｅ－アスタキサンチン（トランス体）と比べ、ＨＰＬＣ面積当たりの濃度が異なると想定されたものに対して用いる。具体的には、９Ｚ－アスタキサンチンが１．２、１３Ｚ－アスタキサンチンが１．６、アドニキサンチンが１．５であり、その他は１とした。)
（＊２：Ｃは、乾燥菌体の場合、４５０ｍｌであり、乾燥結晶の場合、５，０００ｍｌであり、アスタキサンチン含有粉末の場合、５００ｍｌである。）
（＊３：その他カロテノイドとは、アドニルビン、アドニキサンチンをいう。）
（＊４：その他カロテノイドのピークに関し、その他カロテノイドの溶出時間は、事前に精製し質量分析を行ったカロテノイドを用いて確認した。） (Method of calculation)
The astaxanthin concentration was calculated according to the formula (2), and the other carotenoid concentration was calculated according to the formula (3).
Astaxanthin (mg / g) = (astaxanthin concentration in standard solution (mg / L)) / (peak area of astaxanthin standard solution) x (astaxanthin peak area in sample) / (sample mass (mg)) x coefficient * 1 × C * 2 ... (2)
Other carotenoid concentrations were calculated according to equation (3).
Other carotenoids * 3 (mg / g) = (astaxanthin concentration in standard solution (mg / L)) / (peak area of astaxanthin standard solution) x (target carotenoid peak area in sample * 4 ) / (sample mass (mg) )) × Coefficient * 1 × C * 2・ ・ ・ (3)
In both cases, the amounts of trans form and cis form were totaled.
( * 1 : The coefficient is used for those whose concentration per HPLC area is assumed to be different from that of all E-astaxanthin (trans form). Specifically, 9Z-astaxanthin is 1.2 and 13Z-astaxanthin. Was 1.6, astaxanthin was 1.5, and the others were 1.)
( * 2 : C is 450 ml in the case of dried mycelium, 5,000 ml in the case of dried crystals, and 500 ml in the case of astaxanthin-containing powder.)
( * 3 : Other carotenoids refer to adonylbin and adonixanthin.)
( * 4 : Regarding the peak of other carotenoids, the elution time of other carotenoids was confirmed using carotenoids that had been purified in advance and subjected to mass spectrometry.)
調製例１：アスタキサンチン含有食品の調製
　国際公開第２０１４／０５４６６９号の実施例２に記載の方法に準じて、パラコッカス・カロティニファシエンス(Paracoccus carotinifaciens)からアスタキサンチン含有結晶を得た。その後、得られたアスタキサンチン含有結晶を用いてアスタキサンチンを含むカロテノイドを含有する粉末（以下、アスタキサンチン含有粉末ともいう）を得た。以下に簡単に記載する。 Preparation Example 1: Preparation of Astaxanthin-Containing Food Astaxanthin-containing crystals were obtained from Paracoccus carotinifaciens according to the method described in Example 2 of International Publication No. 2014/0546669. Then, the obtained astaxanthin-containing crystals were used to obtain a powder containing a carotenoid containing astaxanthin (hereinafter, also referred to as astaxanthin-containing powder). It is briefly described below.
工程１：Ｅ－３９６菌株の培養工程
　特開２００７－３１９０１５号公報の実施例１に記載の方法に準拠してＥ－３９６菌株（ＦＥＲＭ ＢＰ－４２８３）の培養を行い、培養物として１ｇ中に約１７ｍｇのアスタキサンチンを含むカロテノイドを含有する乾燥菌体を得た。 Step 1: Culturing step of E-396 strain E-396 strain (FERM BP-4283) is cultured according to the method described in Example 1 of JP-A-2007-31901, and the culture is contained in 1 g. Dried cells containing a carotenoid containing about 17 mg of astaxanthin were obtained.
工程２：エタノール抽出工程
　本調製例の工程１で得られた乾燥菌体１００ｋｇに、エタノール２２００ｋｇを加え、高圧容器内で窒素雰囲気下９０℃にて１５分間攪拌しながらアスタキサンチンを含むカロテノイドの抽出を行った。液温を６５℃に冷却後、圧力容器を開放し、濾過にて抽出液から菌体を除き、更に菌体ケークをエタノールにて洗浄してアスタキサンチン０．０７％（ｗｔ／ｗｔ）、カロテノイド重量濃度０．１％（ｗｔ／ｗｔ）の抽出液２２００ｋｇを得た。 Step 2: Ethanol extraction step 2200 kg of ethanol was added to 100 kg of dried cells obtained in step 1 of this preparation example, and carotenoids containing astaxanthin were extracted while stirring in a high-pressure container at 90 ° C. for 15 minutes. went. After cooling the liquid temperature to 65 ° C., open the pressure vessel, remove the cells from the extract by filtration, and wash the cell cake with ethanol to make astaxanthin 0.07% (wt / wt), carotenoid weight. 2200 kg of an extract having a concentration of 0.1% (wt / wt) was obtained.
工程３：抽出液の濃縮、加熱処理（インキュベーション）および結晶化工程
　本調製例の工程２で得られた抽出液を、缶温３０℃となるように減圧度を調節し、ロータリー・エバポレーターを用いてエタノールの一部を留去し、固形分濃度を抽出液の５倍（アスタキサンチン重量濃度０．３５％（ｗｔ／ｗｔ）、カロテノイド重量濃度０．５％（ｗｔ／ｗｔ））に濃縮し、その後この濃縮液を６０℃で４時間窒素雰囲気下に加熱（インキュベーション）処理し、その後缶温３０℃で一晩熟成を行い、結晶を析出させた。 Step 3: Concentration, heat treatment (incubation) and crystallization step of the extract The extract obtained in step 2 of this preparation example is adjusted to a reduced pressure so that the can temperature becomes 30 ° C., and a rotary evaporator is used. A part of ethanol was distilled off, and the solid content concentration was concentrated to 5 times that of the extract (astaxanthin weight concentration 0.35% (wt / wt), carotenoid weight concentration 0.5% (wt / wt)). Then, this concentrated solution was heated (incubated) at 60 ° C. for 4 hours in a nitrogen atmosphere, and then aged overnight at a can temperature of 30 ° C. to precipitate crystals.
工程４：結晶の濾取、洗浄および乾燥工程
　本調製例の工程３で得られた結晶を含む液から、濾過にて結晶を回収した。この結晶を１００℃で２時間減圧乾燥して乾燥結晶１７００ｇを得た。 Step 4: Crystal filtration, washing and drying steps Crystals were recovered by filtration from the liquid containing the crystals obtained in step 3 of this preparation example. The crystals were dried under reduced pressure at 100 ° C. for 2 hours to obtain 1700 g of dried crystals.
　工程１～４を繰り返し、得られた乾燥結晶を一つに混合し、まとめた。カロテノイド含有量を上述の「アスタキサンチン等のカロテノイドの定量方法」により定量した。その結果、カロテノイド含有量は、アスタキサンチン含量７０％、アドニルビン含量１０％、アドニキサンチン１６％であった。 Steps 1 to 4 were repeated, and the obtained dried crystals were mixed into one and put together. The carotenoid content was quantified by the above-mentioned "method for quantifying carotenoids such as astaxanthin". As a result, the carotenoid content was astaxanthin content 70%, adonylbin content 10%, and adonixanthin 16%.
工程５：アスタキサンチン含有粉末の調製工程
　本調製例の工程４で得られた乾燥結晶に、アラビアガム、マルトデキストリン、トコフェロール、中鎖脂肪酸およびアスコルビン酸を添加し、混合し、水中で溶解させた。その後、乳化させ、スプレードライすることで、アスタキサンチン含有粉末を得た。
　得られた粉末のカロテノイド含有量は、アスタキサンチン１％、アドニルビン０．１７％およびアドニキサンチン０．１８％であった。 Step 5: Preparation of Astaxanthin-Containing Powder To the dried crystals obtained in Step 4 of this Preparation Example, gum arabic, maltodextrin, tocopherol, medium-chain fatty acid and ascorbic acid were added, mixed, and dissolved in water. Then, it was emulsified and spray-dried to obtain an astaxanthin-containing powder.
The carotenoid content of the obtained powder was astaxanthin 1%, adonylbin 0.17% and adonixanthin 0.18%.
　アスタキサンチンが２ｍｇとなるように上記アスタキサンチン含有粉末を含み、さらに、キシリトール、ｐＨ調整剤、甘味料、ゲル化剤、香料（ミックスベリー）および水を表１の含有量で含むゼリー状のアスタキサンチン含有食品を調製した。アスタキサンチン含有粉末の代わりに食用色素（食用赤色２号、アマランス）および水を用い、各成分の含有量を表１に示した通りとした以外はアスタキサンチン含有食品と同様にして、対照食品を調製した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000004
 A jelly-like astaxanthin-containing food containing the above astaxanthin-containing powder so that the amount of astaxanthin is 2 mg, and further containing xylitol, a pH adjuster, a sweetener, a gelling agent, a flavor (mixed berry), and water in the contents shown in Table 1. Was prepared. A control food was prepared in the same manner as the astaxanthin-containing food except that the food coloring (edible red No. 2, amaranth) and water were used instead of the astaxanthin-containing powder and the content of each component was as shown in Table 1. ..
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000004
試験例１：アスタキサンチン含有食品による睡眠の質への影響の検討
　試験概要は以下の通りであった。
・対象：年齢２０～６４歳の成人男女
・被験者数：６０名（３０名×２群）
　なお、被験者の体重（ｋｇ）は以下の通りであった（平均値±標準偏差）。
　アスタキサンチン含有食品摂取群：５８．４７±９．７７
　対照食品摂取群：　　　　　　　　５７．９７±１２．６７
・研究デザイン：無作為化二重盲検プラセボ対照並行群間比較研究
・摂取量：アスタキサンチン１２ｍｇ／日
・摂取方法：１日に２回、朝食後および夕食後に各３袋（合計３０ｇ）ずつ、合計６袋
・摂取期間：８週間 Test Example 1: Examination of the effect of astaxanthin-containing food on sleep quality The outline of the test was as follows.
・ Target: Adult men and women aged 20 to 64 years ・ Number of subjects: 60 (30 people x 2 groups)
The body weight (kg) of the subjects was as follows (mean ± standard deviation).
Astaxanthin-containing food intake group: 58.47 ± 9.77
Control food intake group: 57.97 ± 12.67
-Study design: Randomized, double-blind, placebo-controlled, parallel-group comparative study-Intake: Astaxanthin 12 mg / day-Intake: 2 times daily, 3 bags each after breakfast and dinner (30 g total) 6 bags in total ・ Ingestion period: 8 weeks
＜被験者の選択＞
　次の選択基準に合致し、除外基準に抵触しない者を被験者として選択した。
　選択基準
（１）　年齢２０歳以上６４歳以下の男女
（２）　ＰＯＭＳ２日本語版の［抑うつ－落ち込み］のスコアが上位の者から優先して選択する。
　除外基準
（１）　事前検査時の自覚症状の調査（ＶＡＳ）の結果、「日常生活でのストレスの感じ方の強さ」が０ｍｍ（まったく感じられない）の者
（２）　現在、アスタキサンチンを含む健康食品、サプリメント、医薬部外品、医薬品を常用している者
（３）　本研究期間中に昼夜交代制勤務や夜勤を行う者または重量物運搬等の肉体労働に従事している者
（４）　喫煙習慣のある者
（５）　就寝時刻が２：００以降の者
（６）　飲酒量が１日平均純アルコール量として６０ｇを超える者
（７）　定期的な労務に従事していない者
（８）　これまでにサージカルテープでかぶれたことがある者、あるいは肌が弱くかぶれる可能性がある者、またはテープがはがれやすい者
（９）　治療中の疾患を有する者、または治療が必要と判断される疾患を有する者
（１０）　睡眠時無呼吸症候群の治療中または診断歴がある者、あるいはそれが強く疑われる者
（１１）　慢性疲労症候群と診断されたことがある者
（１２）　事前検査の１ヶ月前から現在、あるいは研究期間中に、歯や口腔内の治療（定期的なスケーリング（歯の掃除）も含む、虫歯、歯周病等の治療）を行っている、あるいは行う予定がある者
（１３）　出血を伴う歯や口腔内のトラブル（口内炎など）がある、あるいは高頻度で発症し、結果に影響すると考えられる者
（１４）　糖尿病、肝疾患、腎疾患、心疾患等の重篤な疾患のある者およびその既往症を有する者
（１５）　生活習慣アンケートや各種アンケートの回答から、被験者として不適当と判断された者
（１６）　本研究期間中に実施する各種検査の手順を規定どおりに実施できない者（起床直後のＯＳＡ睡眠調査票ＭＡ版への記入など）
（１７）　研究に関連してアレルギー発症のおそれがある者
（１８）　摂取開始前の身体測定値、理学検査値および臨床検査値に、基準範囲から著しく外れた値がみられる者
（１９）　本研究への参加同意取得前１ヶ月以内に他の臨床試験・研究に参加していた者および参加同意取得後に他の臨床試験・研究に参加予定の者
（２０）　研究期間中に妊娠、授乳の予定がある者
（２１）　その他、実施医師責任者が被験者として不適当と判断した者 <Selection of subjects>
Those who met the following selection criteria and did not violate the exclusion criteria were selected as subjects.
Selection Criteria (1) Men and women aged 20 to 64 (2) POMS2 Japanese version of [Depression-Depression] score is selected from the highest score.
Exclusion criteria (1) As a result of the investigation of subjective symptoms (VAS) at the time of pre-examination, those who "strength of feeling stress in daily life" is 0 mm (not felt at all) (2) Currently contains astaxanthin Those who regularly use health foods, supplements, non-medicinal products, and pharmaceuticals (3) Those who work day and night shifts or night shifts during this study period, or those who are engaged in physical labor such as heavy load transportation (4) ) Those who have a smoking habit (5) Those who go to bed after 2:00 (6) Those who drink more than 60 g of average daily pure alcohol (7) Those who are not engaged in regular labor (8) ) Those who have been irritated by surgical tape, those who may have weak skin irritation, or those who are liable to peel off the tape (9) Those who have a disease under treatment or those who are judged to need treatment (10) Those who are being treated for or have a history of sleep apnea syndrome, or those who are strongly suspected of it (11) Those who have been diagnosed with chronic fatigue syndrome (12) One month of pre-examination Those who have or are planning to perform treatments for teeth and oral cavity (treatments for worm teeth, periodontal diseases, etc., including regular scaling (cleaning of teeth)) from before to now or during the research period ( 13) Those who have tooth or oral problems with bleeding (stomatitis, etc.) or who develop the disease frequently and are thought to affect the results (14) Serious diseases such as diabetes, liver disease, kidney disease, and heart disease. Persons with illness and those with a history of illness (15) Persons judged to be inappropriate as subjects based on the answers to lifestyle questionnaires and various questionnaires (16) Procedures for various tests to be performed during this study period are as specified. Those who cannot do it (fill in the OSA sleep questionnaire MA version immediately after waking up, etc.)
(17) Those who may develop allergies in connection with the study (18) Those who have significantly out of the standard range in the physical measurement values, physical test values and clinical test values before the start of ingestion (19) Those who participated in other clinical trials / studies within one month before obtaining consent to participate in the research and those who plan to participate in other clinical trials / studies after obtaining consent to participate (20) Pregnancy and lactation during the research period Those who have a plan (21) Others who are judged to be inappropriate as subjects by the person in charge of the conducting doctor
＜試験スケジュール＞
（１）　被験者候補を事前検査に来院させ、体調確認・計測・一般臨床検査（採血・採尿）の他に生活習慣アンケート、ＰＯＭＳ２日本語版、自覚症状の調査（ＶＡＳ（ストレス、睡眠、疲労感））への記入を実施した。ここで、計測では、身長（事前検査のみ）、体重の測定、理学検査（血圧、脈拍の測定）、ＢＭＩの算出を行った。また、一般臨床検査としては、以下の検査を行った。
［血液学検査］　白血球数、赤血球数、血色素量、ヘマトクリット、血小板数
［血液生化学検査］　総蛋白、アルブミン、総ビリルビン、直接ビリルビン、間接ビリルビン、ＡＬＰ、ＡＳＴ（ＧＯＴ）、ＡＬＴ（ＧＰＴ）、ＬＤ、γＧＴ（γＧＴＰ）、総コレステロール、中性脂肪、ＨＤＬコレステロール、ＬＤＬコレステロール、尿素窒素、クレアチニン、尿酸、Ｎａ、Ｋ、ＣＬ、血糖、ＨｂＡ１ｃ（事前検査のみ）
［尿検査（定性）］　蛋白、糖、潜血反応
（２）　事前検査結果から研究の目的に適した被験者を６０名選択し、説明会にてＯＳＡ－ＭＡを配付した。
（３）　選択した被験者に対して、摂取開始時検査の検査日前の勤務日１０日間のうち、５日間の朝にＯＳＡ睡眠調査票ＭＡ版（ＯＳＡ－ＭＡ）を実施させた。なお、ＯＳＡ－ＭＡは起床後５分以内に実施させた。なお、摂取開始時の得点としては５日間のうち検査日に最も近い日に実施したＯＳＡ－ＭＡの得点を採用した。
（４）　選択した被験者を摂取開始時検査に来院させ、体調確認、採血、ＰＯＭＳ２　日本語版、ＶＡＳ（ストレス、睡眠、疲労感）への記入を実施した。検査が終了した被験者に、摂取期間中日誌を配布し、アスタキサンチン含有食品または対照食品の摂取および摂取期間中日誌の記録を開始させた。
（５）　被験者に対して、４週目検査日前の勤務日１０日間のうち、５日間の朝にＯＳＡ睡眠調査票ＭＡ版（ＯＳＡ－ＭＡ）を実施させた。なお、４週目検査日の得点としては５日間のうち検査日に最も近い日に実施したＯＳＡ－ＭＡの得点を採用した。
（６）　被験者を摂取から４週目（２９日目）、８週目（５７日目）に来院させ、各種検査として、体調確認、ＰＯＭＳ２日本語版、ＶＡＳ（ストレス、睡眠、疲労感）への記入を実施させた。さらに８週目検査では計測、一般臨床検査（採血・採尿）も実施した。 <Test schedule>
(1) Subject candidates are sent to the hospital for pre-examination, and in addition to physical condition confirmation / measurement / general clinical examination (blood collection / urine collection), lifestyle-related questionnaire, POMS2 Japanese version, survey of subjective symptoms (VAS (stress, sleep, feeling of fatigue) )) Was filled out. Here, in the measurement, height (preliminary examination only), weight measurement, physical examination (measurement of blood pressure and pulse), and BMI were calculated. In addition, as general clinical tests, the following tests were performed.
[Blood test] Leukocyte count, erythrocyte count, blood pigment level, hematocrit, platelet count [Blood biochemical test] Total protein, albumin, total bilirubin, direct bilirubin, indirect bilirubin, ALP, AST (GOT), ALT (GPT), LD, γGT (γGTP), total cholesterol, neutral fat, HDL cholesterol, LDL cholesterol, urea nitrogen, creatinine, uric acid, Na, K, CL, blood test, HbA1c (preliminary test only)
[Urinalysis (qualitative)] Protein, sugar, occult blood reaction (2) From the preliminary test results, 60 subjects suitable for the purpose of the study were selected and OSA-MA was distributed at the briefing session.
(3) The selected subjects were asked to carry out the OSA sleep questionnaire MA version (OSA-MA) on the morning of 5 days out of 10 working days before the test day of the test at the start of intake. OSA-MA was performed within 5 minutes after waking up. As the score at the start of ingestion, the score of OSA-MA performed on the day closest to the test date out of 5 days was adopted.
(4) The selected subjects were sent to the hospital for the examination at the start of ingestion, and physical condition confirmation, blood sampling, POMS2 Japanese version, and VAS (stress, sleep, fatigue) were filled out. A diary was distributed to the subjects who completed the test during the intake period, and the astaxanthin-containing food or the control food was ingested and the diary was started to be recorded during the intake period.
(5) The subjects were asked to carry out the OSA sleep questionnaire MA version (OSA-MA) on the morning of 5 days out of 10 working days before the 4th week examination day. As the score on the 4th week inspection day, the score of OSA-MA performed on the day closest to the inspection date out of 5 days was adopted.
(6) The subjects were sent to the hospital on the 4th week (29th day) and 8th week (57th day) after ingestion, and as various tests, physical condition confirmation, POMS2 Japanese version, VAS (stress, sleep, fatigue) Was made to fill in. Furthermore, in the 8th week examination, measurement and general clinical examination (blood collection / urine collection) were also performed.
＜検査内容＞
（１）　ＰＯＭＳ２日本語版では、［怒り－敵意（ＡＨ）］、［混乱－当惑（ＣＢ）］、［抑うつ－落ち込み（ＤＤ）］、［疲労－無気力（ＦＩ）］、［緊張－不安（ＴＡ）］、［活気－活力（ＶＡ）］、［友好（Ｆ）］の７尺度と、総合的に表す「ＴＭＤ得点」からの気分状態を評価した。ＰＯＭＳ２日本語版としては成人用全項目版を用い、ＰＯＭＳ２日本語版マニュアル（株式会社金子書房ＰＯＭＳ２日本語版マニュアル）の成人用　全項目版　Ｔ得点表（２０代～６０代）に従い、Ｔスコアを算出した。
（２）　自覚症状の調査（ＶＡＳ（疲労感））では、「疲労感」について日本疲労学会の抗疲労臨床評価ガイドライン第５版（http://www.hirougakkai.com/guideline.pdf）の疲労感ＶＡＳ（Visual Analogue Scale）検査（http://www.hirougakkai.com/VAS.pdf）を用い、自覚症状の調査を行った。具体的には、疲労感ＶＡＳ検査は、各被験者に、左端（０ｍｍ）を「これまで経験したことのないような、疲れを全く感じない最良の感覚」とし、右端（１００ｍｍ）を「これまで経験したことのないような、何もできないほど疲れきった最悪の感覚」として設定された１００ｍｍの直線上に、来院時感じている疲労感を示してもらう方法で行われた。
　ＶＡＳ（睡眠）、ＶＡＳ（ストレス）では、それぞれ「睡眠の質」、「日常生活でのストレスの感じ方の強さ」について疲労感ＶＡＳを参考として作成するＶＡＳにより自覚症状の調査を行った。具体的には、「睡眠の質」に関しては、各被験者に、左端（０ｍｍ）を「これまで経験したことのないような、睡眠の質が最良の感覚」とし、右端（１００ｍｍ）を「これまで経験したことのないような、睡眠の質が最悪の感覚」として設定された１００ｍｍの直線上に、来院時に感じた睡眠の質を示してもらう方法で行われた。「日常生活でのストレスの感じ方の強さ」に関しては、各被験者に、左端（０ｍｍ）を「これまで経験したことのないような、ストレスを全く感じない最良の感覚」とし、右端（１００ｍｍ）を「これまで経験したことのないような、ストレスフルな最悪の感覚」として設定された１００ｍｍの直線上に、来院時に感じたストレスを示してもらう方法で行われた。
（３）　ＯＳＡ－ＭＡ（起床時の睡眠評価）では、ＯＳＡ起床時睡眠感調査票（ＭＡ版）を用いて睡眠の質の評価を行った。具体的には、「山本由華吏他、中高年・高齢者を対象としたＯＳＡ睡眠感調査票（ＭＡ版）の開発と標準化、脳と精神の医学、１９９９、１０、４０１－４０９」で報告されている方法に従い、被験者にＯＳＡ起床時睡眠感調査票を記入させ、因子Ｉ（起床時眠気）、因子ＩＩ（入眠と睡眠維持）、因子ＩＩＩ（夢み）、因子ＩＶ（疲労回復）、因子Ｖ（睡眠時間）について、一般社団法人日本睡眠改善協議会にて配布されている睡眠内省得点変換用ファイル(http://www.jobs.gr.jp/osa_ma.htmlから入手可能なOSA_MAforZ.xls)を基にＺｃ得点（反応尺度値）を算出した。ＯＳＡ起床時睡眠感調査票（ＭＡ版）は、各因子の信頼性、妥当性ともに検証されており、いずれの因子においても得点が高い方が改善方向である。 <Inspection content>
(1) In the Japanese version of POMS2, [Angry-Hostility (AH)], [Confusion-Embarrassment (CB)], [Depression-Depression (DD)], [Fatigue-Lethargy (FI)], [Tension-Anxiety (Tension-Anxiety) TA)], [Vitality-Vitality (VA)], and [Friendship (F)], and the mood state from the comprehensive "TMD score" were evaluated. For the POMS2 Japanese version, use the adult full-item version, and follow the adult full-item version T score table (20s-60s) of the POMS2 Japanese version manual (Kaneko Shobo Co., Ltd. POMS2 Japanese version manual). Was calculated.
(2) In the survey of subjective symptoms (VAS (fatigue)), about "fatigue" Fatigue of the Anti-Fatigue Clinical Evaluation Guideline 5th Edition (http://www.hirougakkai.com/guideline.pdf) of the Japan Fatigue Society The subjective symptoms were investigated using the Fatigue VAS (Visual Analogue Scale) test (http://www.hirougakkai.com/VAS.pdf). Specifically, in the fatigue VAS test, the left end (0 mm) is defined as "the best feeling that you have never experienced before, and you do not feel tired at all", and the right end (100 mm) is "the best feeling so far". The procedure was performed so that the feeling of fatigue felt at the time of visit was shown on a straight line of 100 mm, which was set as "the worst feeling of being exhausted so much that nothing could be done" that I had never experienced.
In VAS (sleep) and VAS (stress), subjective symptoms were investigated by VAS created with reference to fatigue VAS for "quality of sleep" and "strength of how to feel stress in daily life", respectively. Specifically, regarding "sleep quality", for each subject, the left end (0 mm) is "the best feeling of sleep quality that has never been experienced", and the right end (100 mm) is "this". It was done by having the person show the quality of sleep that he felt at the time of his visit on a straight line of 100 mm, which was set as "the worst feeling of sleep quality that he had never experienced before". Regarding "strength of how to feel stress in daily life", for each subject, the left end (0 mm) was set as "the best feeling that you do not feel stress at all like you have never experienced", and the right end (100 mm). ) Was set as "a stressful and worst sensation that I have never experienced", and the stress felt at the time of the visit was shown on a straight line of 100 mm.
(3) In OSA-MA (sleep evaluation when waking up), the quality of sleep was evaluated using the OSA sleep sensation questionnaire (MA version) when waking up. Specifically, it was reported in "Yuka Yamamoto et al., Development and standardization of OSA sleep sensation questionnaire (MA version) for middle-aged and elderly people, Brain and Psychiatric Medicine, 1999, 10, 401-409". The subjects were asked to fill out the OSA wake-up sleep sensation questionnaire according to the above method, and factor I (wake-up sleepiness), factor II (sleep onset and sleep maintenance), factor III (dream), factor IV (fatigue recovery), and factor V. Regarding (sleep time), OSA_MAforZ.xls available from the sleep onset score conversion file (http://www.jobs.gr.jp/osa_ma.html) distributed by the Japan Sleep Improvement Council ), The Zc score (reaction scale value) was calculated. The OSA wake-up sleep sensation questionnaire (MA version) has been verified for both reliability and validity of each factor, and the higher the score for any of the factors, the better.
＜試験結果＞
　６０名の被験者のうち、１名（対照食品摂取群）が本人の意思で脱落し、所定の研究スケジュールや研究内容を終了した者は５９名であった。アスタキサンチン含有食品摂取群では、摂取が終了した３０名のうち４名についてアスタキサンチン含有食品摂取が確認されず、１名について過度な飲酒が確認されたため有効性解析から除外された。その結果、５４名で有効性解析が行われた。 <Test result>
Of the 60 subjects, 1 (control food intake group) dropped out at their own will, and 59 completed the prescribed study schedule and research content. In the astaxanthin-containing food intake group, astaxanthin-containing food intake was not confirmed in 4 of the 30 patients who had completed the intake, and excessive drinking was confirmed in 1 patient, so they were excluded from the efficacy analysis. As a result, an efficacy analysis was performed on 54 people.
　上記解析として、摂取開始時のＰＯＭＳ２のＤＤ（抑うつ－落ち込み）または摂取開始時の疲労感ＶＡＳで被験者を層別し解析を行った。具体的には、ＰＯＭＳ２のＤＤによる層別解析では、各群の被験者を、各群のＰＯＭＳ２のＤＤの中央値である６５点より高い層と６５点以下の層に分けた。アスタキサンチン含有食品摂取群のうち、ＰＯＭＳ２のＤＤのＴスコアが６５点より高い層は１２名であり、ＤＤのＴスコアが６５点以下の層は１３名であった。対照食品摂取群のうち、ＰＯＭＳ２のＤＤのＴスコアが６５点より高い層は１４名であり、ＤＤのＴスコアが６５点以下の層は１５名であった。なお、各層における被験者背景（性別、年齢、身長、体重、ＢＭＩ、血圧、脈拍数、ＰＯＭＳ２のスコア）で群間に有意な差がみられた項目はなかった。ここで、ＰＯＭＳ２のＤＤのＴスコアが６５点より高い層における、アスタキサンチン含有食品摂取群の体重（ｋｇ）（平均値±標準偏差）は６１．３３±８．７５であり、当該層における対照食品摂取群の体重（ｋｇ）（平均値±標準偏差）は５９．１５±１３．８８であった。また、ＰＯＭＳ２のＤＤのＴスコアが６５点より高い層における、アスタキサンチン含有食品摂取群のＰＯＭＳ２のＤＤのＴスコア（平均値±標準偏差）は７１．８±４．２であり、当該層における対照食品摂取群のＰＯＭＳ２のＤＤのＴスコア（平均値±標準偏差）は６９．９±２．１であった。
　また、疲労感ＶＡＳによる層別解析では、各群の被験者を疲労感ＶＡＳが７０ｍｍ以上の層と、疲労感ＶＡＳが７０ｍｍ未満の層に分けた。アスタキサンチン含有食品摂取群のうち、疲労感ＶＡＳが７０ｍｍ以上の層は１３名であり、疲労感ＶＡＳが７０ｍｍ未満の層は１２名であった。対照食品摂取群のうち、疲労感ＶＡＳが７０ｍｍ以上の層は１５名であり、疲労感ＶＡＳが７０ｍｍ未満の層は１４名であった。なお、各層における被験者背景（性別、年齢、身長、体重、ＢＭＩ、血圧、脈拍数、ＰＯＭＳ２のスコア）で群間に有意な差がみられた項目はなかった。ここで、疲労感ＶＡＳが７０ｍｍ以上の層における、アスタキサンチン含有食品摂取群の体重（ｋｇ）（平均値±標準偏差）は５８．７４±７．７３であり、当該層における対照食品摂取群の体重（ｋｇ）（平均値±標準偏差）は６１．２７±１５．３５であった。また、疲労感ＶＡＳが７０ｍｍ以上の層における、アスタキサンチン含有食品摂取群の疲労感ＶＡＳ（平均値±標準誤差）は８０．２９±１．６８ｍｍであり、対照食品摂取群の疲労感ＶＡＳ（平均値±標準誤差）は７８．１８±１．５０ｍｍであった。 As the above analysis, the subjects were stratified and analyzed based on the DD (depression-depression) of POMS2 at the start of ingestion or the fatigue feeling VAS at the start of ingestion. Specifically, in the stratification analysis by DD of POMS2, the subjects in each group were divided into a layer higher than the median DD of POMS2 of each group of 65 points and a layer of 65 points or less. Among the astaxanthin-containing food intake groups, 12 people had a DD T-score of POMS2 higher than 65 points, and 13 people had a DD T-score of 65 points or less. Among the control food intake groups, 14 people had a DD T-score of POMS2 higher than 65 points, and 15 people had a DD T-score of 65 points or less. There were no significant differences between the groups in the subject background (gender, age, height, weight, BMI, blood pressure, pulse rate, POMS2 score) in each group. Here, the body weight (kg) (mean ± standard deviation) of the astaxanthin-containing food intake group in the layer having a DD T score of POMS2 higher than 65 points was 61.33 ± 8.75, and the control food in the layer. The body weight (kg) (mean ± standard deviation) of the ingestion group was 59.15 ± 13.88. In addition, the DD T score (mean ± standard deviation) of POMS2 in the astaxanthin-containing food intake group in the layer having a DD T score of POMS2 higher than 65 points was 71.8 ± 4.2, which was a control in the layer. The DD T score (mean ± standard deviation) of POMS2 in the food intake group was 69.9 ± 2.1.
In the stratification analysis by fatigue VAS, the subjects in each group were divided into a layer having a fatigue VAS of 70 mm or more and a layer having a fatigue VAS of less than 70 mm. Among the astaxanthin-containing food intake groups, 13 people had a fatigue VAS of 70 mm or more, and 12 people had a fatigue VAS of less than 70 mm. Among the control food intake groups, 15 people had a fatigue VAS of 70 mm or more, and 14 people had a fatigue VAS of less than 70 mm. There were no significant differences between the groups in the subject background (gender, age, height, weight, BMI, blood pressure, pulse rate, POMS2 score) in each group. Here, the weight (kg) (mean ± standard deviation) of the astaxanthin-containing food intake group in the layer with a fatigue feeling VAS of 70 mm or more is 58.74 ± 7.73, and the weight of the control food intake group in the layer. (Kg) (mean ± standard deviation) was 61.27 ± 15.35. The fatigue VAS (mean ± standard error) of the astaxanthin-containing food intake group in the layer with a fatigue VAS of 70 mm or more was 80.29 ± 1.68 mm, and the fatigue VAS (mean value) of the control food intake group. ± standard error) was 78.18 ± 1.50 mm.
　ＰＯＭＳ２のＤＤによる層別解析では、ＤＤのＴスコアが６５点より高い層において、アスタキサンチン含有食品摂取群におけるＯＳＡ－ＭＡの因子Ｉ（起床時眠気）、因子ＩＩ（入眠と睡眠維持）、因子ＩＩＩ（夢み）、因子Ｖ（睡眠時間）の４週目における変化量が、対照食品摂取群の変化量と比較して有意に増加（改善）した。なお、変化量は４週目の得点と摂取開始時の得点の差（４週目の得点－摂取開始時の得点）である。結果を表２に示す。表２から、アスタキサンチンと共にアドニキサンチンおよびアドニルビンを含有するアスタキサンチン含有食品を摂取した群は、因子Ｉ（起床時眠気）、因子ＩＩ（入眠と睡眠維持）、因子ＩＩＩ（夢み）および因子Ｖ（睡眠時間）の全てが有意に改善されたことがわかる。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000005
 In the stratified analysis of POMS2 by DD, in the group with a DD T score higher than 65 points, OSA-MA factor I (sleep onset), factor II (sleep onset and sleep maintenance), and factor III in the astaxanthin-containing food intake group. (Dream), the amount of change in factor V (sleep time) at 4 weeks was significantly increased (improved) as compared with the amount of change in the control food intake group. The amount of change is the difference between the score at the 4th week and the score at the start of intake (the score at the 4th week-the score at the start of intake). The results are shown in Table 2. From Table 2, the group that ingested the astaxanthin-containing food containing astaxanthin and adonylvin together with astaxanthin was factor I (sleep onset), factor II (sleep onset and sleep maintenance), factor III (dream) and factor V (sleep). It can be seen that all of the time) was significantly improved.
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000005
　疲労感ＶＡＳによる層別解析では、疲労感ＶＡＳが７０ｍｍ以上である層において、アスタキサンチン含有食品摂取群のＶＡＳ（睡眠）の８週目における変化量が対照食品摂取群の変化量と比較して有意に減少（改善）した。なお、変化量は８週目の実測値と摂取開始時の実測値の差（８週目の実測値－摂取開始時の実測値）である。結果を表３に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000006
 In the stratified analysis by fatigue VAS, the change in VAS (sleep) in the astaxanthin-containing food intake group at 8 weeks was significant as compared with the change in the control food intake group in the layer in which the fatigue VAS was 70 mm or more. Decreased (improved). The amount of change is the difference between the measured value at the 8th week and the measured value at the start of ingestion (measured value at the 8th week-measured value at the start of ingestion). The results are shown in Table 3.
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000006

Claims (13)

  1. 　アスタキサンチンまたはその薬学的に許容可能な塩、アドニルビンまたはその薬学的に許容可能な塩、およびアドニキサンチンまたはその薬学的に許容可能な塩を含むカロテノイドを含んでなる、睡眠の質の改善のための組成物。 For improving sleep quality, comprising astaxanthin or a pharmaceutically acceptable salt thereof, adonylbin or a pharmaceutically acceptable salt thereof, and a carotenoid containing adonixanthin or a pharmaceutically acceptable salt thereof. Composition.
  2. 　前記睡眠の質の改善が、起床時眠気、入眠と睡眠維持、夢み、および睡眠時間の満足感からなる群から選択される少なくとも一種のものの改善である、請求項１に記載の組成物。 The composition according to claim 1, wherein the improvement in sleep quality is an improvement in at least one selected from the group consisting of drowsiness when waking up, falling asleep and maintaining sleep, dreaming, and satisfaction of sleep time.
  3. 　前記カロテノイドが、微生物、動物もしくは植物由来物または化学合成品である、請求項１または２に記載の組成物。 The composition according to claim 1 or 2, wherein the carotenoid is a microbial, animal or plant-derived product or a chemically synthesized product.
  4. 　前記微生物が、パラコッカス・カロティニファシエンス(Paracoccus carotinifaciens)である、請求項３に記載の組成物。 The composition according to claim 3, wherein the microorganism is Paracoccus carotinifaciens.
  5. 　ヒトのための、請求項１～４のいずれか一項に記載の組成物。 The composition according to any one of claims 1 to 4 for humans.
  6. 　前記ヒトが健常者である、請求項５に記載の組成物。 The composition according to claim 5, wherein the human is a healthy person.
  7. 　前記ヒトが抑うつ気分または疲労感を有するヒトである、請求項５または６に記載の組成物。 The composition according to claim 5 or 6, wherein the human has a depressed mood or a feeling of fatigue.
  8. 　前記組成物が飲食品または食品添加物である、請求項１～７のいずれか一項に記載の組成物。 The composition according to any one of claims 1 to 7, wherein the composition is a food or drink or a food additive.
  9. 　前記組成物が機能性食品である、請求項１～８のいずれか一項に記載の組成物。 The composition according to any one of claims 1 to 8, wherein the composition is a functional food.
  10. 　前記組成物が医薬品である、請求項１～５および７のいずれか一項に記載の組成物。 The composition according to any one of claims 1 to 5 and 7, wherein the composition is a pharmaceutical product.
  11. 　睡眠の質の改善のための組成物の製造における、アスタキサンチンまたはその薬学的に許容可能な塩、アドニルビンまたはその薬学的に許容可能な塩、およびアドニキサンチンまたはその薬学的に許容可能な塩を含むカロテノイドの使用。 Astaxanthin or a pharmaceutically acceptable salt thereof, adonylbin or a pharmaceutically acceptable salt thereof, and adonixanthin or a pharmaceutically acceptable salt thereof in the production of a composition for improving sleep quality. Use of carotenoids, including.
  12. 　対象の睡眠の質を改善する方法であって、アスタキサンチンまたはその薬学的に許容可能な塩、アドニルビンまたはその薬学的に許容可能な塩、およびアドニキサンチンまたはその薬学的に許容可能な塩を含むカロテノイドの有効量を、それを必要とする対象に投与することまたは摂取させることを含んでなる、方法。 A method of improving the sleep quality of a subject, including astaxanthin or a pharmaceutically acceptable salt thereof, adonylbin or a pharmaceutically acceptable salt thereof, and adonixanthin or a pharmaceutically acceptable salt thereof. A method comprising administering or ingesting an effective amount of carotenoid to a subject in need thereof.
  13. 　睡眠の質の改善のための、アスタキサンチンまたはその薬学的に許容可能な塩、アドニルビンまたはその薬学的に許容可能な塩、およびアドニキサンチンまたはその薬学的に許容可能な塩を含むカロテノイド。 Carotenoids containing astaxanthin or a pharmaceutically acceptable salt thereof, adonylbin or a pharmaceutically acceptable salt thereof, and adonixanthin or a pharmaceutically acceptable salt thereof for improving sleep quality.
PCT/JP2020/042796 2019-11-18 2020-11-17 Composition for improving sleep quality WO2021100704A1 (en)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2019-208026 2019-11-18
JP2019208026A JP2022188309A (en) 2019-11-18 2019-11-18 Composition for improving quality of sleep

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2021100704A1 true WO2021100704A1 (en) 2021-05-27

Family

ID=75980565

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/JP2020/042796 WO2021100704A1 (en) 2019-11-18 2020-11-17 Composition for improving sleep quality

Country Status (2)

Country Link
JP (1) JP2022188309A (en)
WO (1) WO2021100704A1 (en)

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2001087291A1 (en) * 2000-05-16 2001-11-22 Suntory Limited Compositions normalizing circadian rhythm
JP2012025712A (en) * 2010-07-27 2012-02-09 Jx Nippon Oil & Energy Corp Anti-anxiety composition
WO2014054669A1 (en) * 2012-10-02 2014-04-10 株式会社ダイセル Method for producing carotenoid-containing composition, and carotenoid-containing composition
WO2014054651A1 (en) * 2012-10-03 2014-04-10 富士フイルム株式会社 Sleep-improving agent, non-rem sleep time-increasing agent, and sedative agent
WO2017213176A1 (en) * 2016-06-08 2017-12-14 アスタリール株式会社 Food or beverage composition containing astaxanthin
JP2019135242A (en) * 2019-04-01 2019-08-15 Ｊｘｔｇエネルギー株式会社 Carotenoid-containing composition

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2001087291A1 (en) * 2000-05-16 2001-11-22 Suntory Limited Compositions normalizing circadian rhythm
JP2012025712A (en) * 2010-07-27 2012-02-09 Jx Nippon Oil & Energy Corp Anti-anxiety composition
WO2014054669A1 (en) * 2012-10-02 2014-04-10 株式会社ダイセル Method for producing carotenoid-containing composition, and carotenoid-containing composition
WO2014054651A1 (en) * 2012-10-03 2014-04-10 富士フイルム株式会社 Sleep-improving agent, non-rem sleep time-increasing agent, and sedative agent
WO2017213176A1 (en) * 2016-06-08 2017-12-14 アスタリール株式会社 Food or beverage composition containing astaxanthin
JP2019135242A (en) * 2019-04-01 2019-08-15 Ｊｘｔｇエネルギー株式会社 Carotenoid-containing composition

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
HAYASHI,M. ET AL.: "Effect of astaxanthin-rich extract derived from Paracoccus carotinifaciens on the status of stress and sleep in adults", J. CLIN. BIOCHEM. NUTR., vol. 66, no. 2, 14 February 2020 (2020-02-14), pages 92 - 102, XP055825823 *

Also Published As

Publication number Publication date
JP2022188309A (en) 2022-12-21

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR101974975B1 (en) Composition for improving in vivo metabolism parameter
KR20150145262A (en) Agent or method for treatment and/or prevention of accelerated energy expenditure and/or diminished energy expenditure functionality
KR20060022668A (en) Compositions and foods and drinks contiaing higher fatty acid derivative
JP6991092B2 (en) Sleep quality improver
JP5240810B2 (en) Use of D-psicose to suppress an increase in blood D-fructose concentration
EP2030629B1 (en) Alpha-s-casein as lipid-metabolism-improving agent
WO2019107531A1 (en) Composition for suppressing increase in or reducing blood lipids
JP2006335725A (en) Composition for improving bloodstream
WO2021100704A1 (en) Composition for improving sleep quality
JP2022159178A (en) Anti-aging composition
JP7274725B2 (en) therapeutic agent for chronic fatigue syndrome
JP6976030B2 (en) Composition for prevention or improvement of non-alcoholic fatty liver disease
WO2020059745A1 (en) Composition for suppressing or treating brain tumor or symptoms attributable thereto
JP2006335721A (en) Stiffened shoulders improving composition
JP6039051B2 (en) Muscle contracture preventive
JP6049108B2 (en) Awakening time extender
JP2006022064A (en) Prophylactic and/or ameliorative agent for arteriosclerosis, functional food, or cosmetic
JP6173850B2 (en) Muscle bulking agent, muscle bulking agent when used together with exercise, and food and drink for muscle weight gain
JP7317256B1 (en) Agent for improving concentration and/or information processing ability
JP2004292355A (en) Anti-stress agent
JP2006335708A (en) Blood flow improving composition, and food and drink, feed, medicinal supplement and medicine containing the same
JP2006137746A (en) Orexin-inducing composition
WO2020095881A1 (en) Composition for increasing retention of carotenoid in blood
Mahata Can Diet Reverse Ageing? Diet and Ageing: Role and Relation
CN115023234A (en) Composition for improving sleep quality

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 20890553

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

122 Ep: pct application non-entry in european phase

Ref document number: 20890553

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: JP