WO2020101074A1 - N-아세틸-l-트립토판을 유효성분으로 포함하는 젖소용 사료첨가제 - Google Patents

N-아세틸-l-트립토판을 유효성분으로 포함하는 젖소용 사료첨가제 Download PDF

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WO2020101074A1
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cow
cows
tryptophan
additive composition
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박진승
전진우
문준옥
이주영
이홍구
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씨제이제일제당 (주)
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    • A23K20/10—Organic substances
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    • A23K50/00—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals
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    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs

Definitions

  • the present application relates to a feed additive composition for dairy cows comprising N-acetyl-L-tryptophan (NALT), and specifically, for cows containing N-acetyl-L-tryptophan as an active ingredient
  • NALT N-acetyl-L-tryptophan
  • a feed comprising the feed additive composition for cows;
  • N-acetyl-L-tryptophan as an active ingredient, a feed additive composition for cows, or feeding the cow with feed.
  • a method for increasing feed intake of a cow a method for increasing the weight of a calf produced by the cow, and a flow rate of the cow It relates to an increase method, a method for increasing the milk protein content of a cow, and a method for enhancing immunity of a calf produced by a cow.
  • the dry season of Holstein cows is an important time for resistance to diseases such as mastitis, fortification of body tissues for delivery and for calf health after birth.
  • the dry period in cow's milk is at the end of pregnancy (2 months before delivery), when the digestive tract is squeezed by the rapid growth of the fetus or uterus (at the time when 80% of the calf is born), or hormones to prepare for delivery and parables. It is also a time when appetite decreases because the hormone balance in the body is broken down due to secretion.
  • milking cows do not have a milking period and can continue to produce milk by stimulating the mammary gland until delivery, but unlike the milking time, genetic changes are made to hormone cycles that appear only during the milking time.
  • cows mismanaged during the dry period it can affect milk production and reproductive performance in milking cows after delivery in terms of epigenetics, which can cause a decrease in cow's productivity, as well as affect the growth of a fetus and calf after birth.
  • supplementary supplementation of nutrients necessary to improve the productivity of milking cows during fetal growth and postpartum delivery is an important consideration.
  • L-Tryptophan is one of the essential amino acids (EAA) that is nutritionally important for ruminants and is an essential component of protein synthesis. It is a precursor of serotonin, melatonin, and niacin, which has antioxidant and stress-relieving effects, promotes secretion of intestinal hormone cholecystokinin (CCK) in the small intestine, and promotes pancreas It increases the starch digestion rate through the secretion and activity of ⁇ -amylase.
  • EAA essential amino acids
  • L-tryptophan can adversely affect feed intake and growth performance, but ruminants are considered to be deficient in most amino acids, including L-tryptophan, due to rumen fermentation induced in the production of microbial proteins. .
  • ruminants are considered to be deficient in most amino acids, including L-tryptophan, due to rumen fermentation induced in the production of microbial proteins.
  • the amount of L-tryptophan required for dry cows is due to the rapid increase in the NRC (National Research Council, 2001) demand for protein synthesis in fetuses. It is an amino acid that needs to be supplemented because it is prone to lack.
  • L-tryptophan When L-tryptophan is supplemented and supplied to ruminants, it is used for microorganisms in the rumen to increase the amount of protein synthesis of microbial organisms, but as a result, it is not possible to use ammonia produced in large quantities, and the utilization rate of feed protein decreases. Therefore, it is necessary to feed in the form of rumen-bypass amino acids that can avoid the degradation of microorganisms in the rumen and can be degraded and absorbed in the small intestine of ruminants.
  • heat treatment In general, heat treatment, formaldehyde treatment (Subuh, et al., Animal Feed Science and Technolohy.
  • the present inventors as a result of intensive efforts to develop a feed additive for improving the feed intake and productivity of cows, N-acetyl-L, a form of conjugation of acetate and L-tryptophan -When fed by adding tryptophan (N-acetyl-L-tryptophan), it increases the feed intake of cows, the weight of the calf produced by the cow, the flow rate of the cow, the milk protein content of the cow, and improves the immunity of the calf produced by the cow. Upon confirming the enhancement, the present application was completed.
  • One object of the present application is to provide a feed additive composition for dairy cows comprising N-acetyl-L-tryptophan as an active ingredient.
  • Another object of the present application is to provide a feed comprising the feed additive composition for cows.
  • Another object of the present application is a feed additive composition for cows comprising N-acetyl-L-tryptophan as an active ingredient or a method for increasing feed intake of cows, including feeding the cows with cows, calf produced by cows It provides a method for increasing the weight, increasing the flow rate of the cow, increasing the milk protein content of the cow, and enhancing the immunity of the calf produced by the cow.
  • NALT N-acetyl-L-tryptophan
  • NALT N-acetyl-L-tryptophan
  • Figure 2 is a graph showing the change in milk fat content after delivery of dry cows according to N-acetyl-L-tryptophan feeding.
  • 3 is a graph showing the change in milk protein content after delivery of dry cows according to N-acetyl-L-tryptophan feeding.
  • one aspect of the present application provides a feed additive composition for dairy cows comprising N-acetyl-L-tryptophan (NALT) as an active ingredient.
  • NALT N-acetyl-L-tryptophan
  • the feed additive composition for cow's milk of the present application may include N-acetyl-L-tryptophan or a salt thereof.
  • NALT N-acetyl-L-tryptophan
  • the N-acetyl-L-tryptophan can be used without limitation in its source, and the preparation of the N-acetyl-L-tryptophan can be performed using various methods known in the art.
  • L-tryptophan' is one of the essential amino acids (EAAs) that are nutritionally important for ruminants and is an essential component of protein synthesis. L-tryptophan metabolites affect the maintenance of organ homeostasis by regulating nutrient metabolism and affect animal growth and development, reproduction and health. In addition, L-tryptophan is a precursor of serotonin, which acts as a neurotransmitter, and after passing through the blood-brain barrier, regulates emotional behavior to relieve stress.
  • EAAs essential amino acids
  • the term "dairy cattle” in the present application means a cow for the purpose of milk production among cattle raised as livestock, and Holstein, lowland, Guernsey, and Airshire species are representative varieties. If the cow in the present application corresponds to a cow capable of milking, regardless of breed, age, etc., all are included in the scope of the present application. Specifically, the cow may be a dry cow, and more specifically, it may mean a dry cow of a Holstein species, but is not limited thereto.
  • the term, 'dry organic period' may mean a preparation period during which the non-organic period ends, the next non-organic period begins, or a period before delivery. The dry period of the cow may be about 60 days, for example, 8 weeks before delivery, 7 weeks before delivery, or 6 weeks before delivery, but is not limited thereto. Cows in dry season may experience insufficient energy due to reduced feed intake.
  • feed additive in the present application means a substance added to feed, and the feed additive may be intended to improve productivity or health of a target individual, but is not limited thereto.
  • the feed additive may correspond to supplementary feed under the feed management law.
  • the feed additive composition of the present application may further include nutrients such as nucleotides, amino acids, calcium, phosphoric acid, and organic acids for improving productivity or health of the target individual, in addition to N-acetyl-L-tryptophan or a salt thereof, but is not limited thereto. Does not work.
  • salt in the present application means a salt that is a substance in which cations and anions are bound by electrostatic attraction, and is usually a metal salt, a salt with an organic base, a salt with an inorganic acid, a salt with an organic acid, a basic or And salts with acidic amino acids.
  • the metal salt may be an alkali metal salt (sodium salt, potassium salt, etc.), an alkaline earth metal salt (calcium salt, magnesium salt, barium salt, etc.), aluminum salt, or the like;
  • Salts with organic bases include triethylamine, pyridine, picoline, 2,6-lutidine, ethanolamine, diethanolamine, triethanolamine, cyclohexylamine, dicyclohexylamine, N, N-dibenzylethylenediamine Salt with the back;
  • Salts with inorganic acids can be salts with hydrochloric acid, hydrobromic acid, nitric acid, sulfuric acid, phosphoric acid, etc .;
  • Salts with organic acids can be salts with formic acid, acetic acid, trifluoroacetic acid, phthalic acid, fumaric acid, oxalic acid, tartaric acid, maleic acid, citric acid, succinic acid, methanesulfonic acid, benzenesulf
  • the feed additive composition for cows may be for increasing the feed intake of cows.
  • the present application provides the use of a feed additive composition for dairy cows containing N-acetyl-L-tryptophan as an active ingredient to increase feed intake of cows.
  • the feed intake of the NALT treatment group increased numerically compared to the feed intake amount of the control group.
  • the feed intake (7.69 kg) of the NALT treatment at week 4 was not statistically significant, but showed a numerical increase pattern of 1.43 kg compared to the feed intake of the control (6.46 kg), especially the feed intake of the NALT treatment at week 2 was significantly increased (P ⁇ 0.05) compared to the feed intake of the control.
  • the feed intake of cows can be measured by recording the remaining amount of feed, and specifically, it is possible to measure the amount of feed per day by recording the remaining amount of feed at a certain time every day, but is not limited thereto.
  • the feed additive composition for cows may be for weight gain of calves born by cows.
  • the present application provides the use of N-acetyl-L-tryptophan as an active ingredient in the feed additive composition for cows to increase the weight of calf produced by cows.
  • the birth weight (week 0) of the calf produced by the cows in the NALT treatment group compared to the control group is 5.47 on average. It was confirmed that the kg was heavier.
  • the average weight (weeks 2, 4, 6, and 8) of the calf produced by the cows in the NALT treatment group was about 5 kg (5.1 kg, 4.67 kg, respectively) compared to the average weight of the calf produced by the cows in the control group. , 4.22 kg and 5.9 kg).
  • the birth weight of a calf born by a cow can be measured immediately after delivery, and specifically after drying the body surface before colostrum feeding immediately after delivery, but is not limited thereto.
  • the average weight of a calf born by a cow can be specifically measured before feeding milk at intervals of two weeks, but is not limited thereto.
  • the feed additive composition for cows may be for increasing the flow rate of cows.
  • the present application provides the use of the feed additive composition for dairy cows containing N-acetyl-L-tryptophan as an active ingredient to increase the flow rate of cows.
  • the flow rate immediately after delivery (week 0) of the NALT treatment group is 4 kg on average compared to the flow rate immediately after delivery of the control group. It was confirmed that the increase was abnormal (Table 4). In addition, the average flow rate of the NALT treatment group also increased by more than 4 kg compared to the average flow rate of the control group.
  • the flow rate of the cow can be measured by recording the milked flow rate, and specifically, the milk flow rate can be measured by milking at a certain time (12 hour interval) every day, but is not limited thereto.
  • the increase in the flow rate of the cow may be continued for 10 weeks after delivery, 9 weeks after delivery, or 8 weeks after delivery, but is not limited thereto.
  • the feed additive may be for increasing the milk protein content of cows.
  • the present application provides the use of an N-acetyl-L-tryptophan as an active ingredient to increase the milk protein content of a cow's feed additive composition.
  • the milk protein content in colostrum immediately after delivery of the NALT treatment is compared to the milk protein content in colostrum immediately after delivery of the control. It was confirmed that the high value (Fig. 3 and Table 4).
  • milk protein content of cows can be measured by analyzing the general ingredients in milk of milked milk.
  • milk milk FT1 (foss; milk scanner FT1; Foss) is incorporated by integrating milked milk at a certain time (12 hour intervals) every day. Alle 1 DK-3400 Hilleroed, Denmark), but it is not limited thereto.
  • the feed additive composition for cows may be used for enhancing immunity of calf produced by cows.
  • the present application provides the use of N-acetyl-L-tryptophan as an active ingredient to enhance immunity of calf produced by cows in a feed additive composition for cows.
  • the NALT treatment group in the case of a calf produced by a cow compared to the case of a calf produced by a control cow Monocyte) indicator, mean corpuscular volume (MCV) initial indicator and mean red blood cell hemoglobin (Mean corpuscular hemoglobin; MCH) initial indicator were statistically significant differences were found (Table 5).
  • Immunity enhancement in the present application can be measured by analyzing changes in blood properties such as leukocytes, lymphocytes, monocytes, granulocytes, mean red blood cell volume, mean red blood cell hemoglobin, platelets in the blood, and specifically separating plasma by centrifuging the obtained blood And, it can be measured by dispensing in an EDTA-treated vacuum collection tube and analyzed through a VetScan HM2 Hematology System (ABAXIS, CA, USA), but is not limited thereto.
  • ABAXIS VetScan HM2 Hematology System
  • the N-acetyl-L-tryptophan may be rumen-protected.
  • rumen-protected in the present application means that the decomposition action by the microbial enzyme does not occur in the rumen, and it is processed to be able to decompose and absorb in the small intestine, and the rumen-bypass (rumen- bypass).
  • the term 'rumen' is a special digestive tract found in some animals of the lumber, which is divided into four rooms: a lump, a honeycomb, a layer of wrinkles, and a crease to remind. It is also referred to as a sauteed stomach, and it is called ruminant after swallowing food that has been swallowed once into the mouth and chewing it well, and the stomach that makes this rumen possible is called ruminant.
  • the rumen has microorganisms that are symbiotic, so it has the ability to degrade and decompose cellulose in plants that ordinary animals cannot digest.
  • N-acetyl-L-tryptophan of the present application is a form of conjugation of acetate and L-tryptophan, which is not degraded by microbial enzymes in the rumen and L-tryptophan in the small intestine. It is rumen-protected to be absorbed.
  • N-acetyl-L-tryptophan of the present application can be determined by a person skilled in the art in consideration of the object to be fed, the species to be fed, the weight, the timing of the feed, the type of feed to be fed, and the purpose of feeding.
  • N-acetyl-L-tryptophan is 0.01 to 5.0%, 0.01 to 4.0%, 0.05 to 3.0%, 0.05 to 2.5%, 0.05 to 2.0%, 0.05 to 1.5%, more specifically 1.5 to total dry weight of the feed.
  • % (w / w) may be included, but is not limited thereto.
  • Another aspect of the present application provides a feed comprising the feed additive composition for cows.
  • the feed of the present application may include a feed additive composition for dairy cows comprising N-acetyl-L-tryptophan or a salt thereof.
  • feed of the present application means any natural or artificial diet, one meal or the like, or a component of the one meal, for the individual to eat, ingest, and digest.
  • the type of the feed is not particularly limited, and a feed commonly used in the art may be used.
  • Non-limiting examples of the feed vegetable feed, such as grains, muscles, food processing by-products, algae, fiber, pharmaceutical by-products, fats and oils, starches, peels or grain by-products;
  • animal feeds such as proteins, inorganics, oils, minerals, oils, single-celled proteins, animal planktons, and food. These may be used alone or in combination of two or more.
  • Another aspect of the present application provides a method of increasing feed intake of a cow, comprising feeding the cow with a feed additive composition for cows comprising N-acetyl-L-tryptophan as an active ingredient or feeding the cow with feed.
  • the method for increasing feed intake of cows in the present application may include feeding a feed additive composition or feed for cows, including N-acetyl-L-tryptophan or a salt thereof.
  • Another aspect of the present application provides a method for increasing the weight of a calf produced by a cow, the method comprising feeding a cow with a feed additive composition for cows comprising N-acetyl-L-tryptophan as an active ingredient or feeding the cow with feed. .
  • the method for increasing the weight of a calf produced by a cow of the present application may include feeding a feed additive composition or feed for cows including N-acetyl-L-tryptophan or a salt thereof.
  • Another aspect of the present application provides a method for increasing the flow rate of a cow, comprising feeding the cow with a feed additive composition for cows comprising N-acetyl-L-tryptophan as an active ingredient or feed.
  • the method for increasing the flow rate of cow's milk in the present application may include feeding a feed additive composition or feed for cow's milk containing N-acetyl-L-tryptophan or a salt thereof.
  • Another aspect of the present application provides a method for increasing milk protein content in a cow, comprising feeding the cow with a feed additive composition for cows or feed comprising cow N-acetyl-L-tryptophan as an active ingredient.
  • the method for increasing milk protein content in cows of the present application may include feeding a feed additive composition or feed for cows, including N-acetyl-L-tryptophan or a salt thereof.
  • Another aspect of the present application provides a method for enhancing immunity of a calf produced by a cow, comprising feeding the cow with a feed additive composition or feed for cows comprising N-acetyl-L-tryptophan as an active ingredient. do.
  • the method for enhancing immunity of a calf produced by a cow of the present application may include feeding a feed additive composition or feed for cows including N-acetyl-L-tryptophan or a salt thereof.
  • the content of N-acetyl-L-tryptophan contained in the feed additive composition for cows is the same as described above.
  • the method may be paid according to the general specification management method, and may be specifically paid at a certain time every day, but is not limited thereto.
  • the amount of feeding is not particularly limited.
  • Example 1-1 Use of laboratory animals
  • This application is for the Holstein Friesian species at the end of pregnancy, and the control group (untreated), taking into account the birth time (expected delivery schedule ⁇ 15 days) and the number of births (preparation) among 60 days before delivery. A total of 8 heads, each of 4 heads, were used.
  • the basic feed fed at the time of dry milking and milking was provided with NRC (2001) total mixed ration (TMR), roughage, and thickened feed (Concentrates), in accordance with the nutrient requirements for dry milk. Treatment) was evaluated by adding N-acetyl-L-tryptophan (NALT) to the basic feed.
  • NALT N-acetyl-L-tryptophan Table 1 shows the analysis results of the general ingredients and amino acids in the basic feed. New calf was fed colostrum for 3 days, and then milk from the milking process was fed for 8 weeks.
  • Pre-delivery feed assessment with N-acetyl-L-tryptophan feeding was performed for 60 ⁇ 8 days (error due to expected delivery date difference).
  • the control group was fed the basic feed, and the treatment was additionally fed 15 g of NALT to the basic feed. From the start of the salary (week 0), NALT's salary was gradually increased to 5 g, 10 g, and 15 g and had an adaptation period of one week, mixed with 1 kg of complete blended feed and top dressing at 9:00 every morning (top dressing) method.
  • the calf born with cows from the test axis was dried immediately after delivery, and the body weight was measured (before colostrum feeding; body scale GL-6000S Series, G-Tech International Co., LTD).
  • the calf was weighed (weight before feeding milk).
  • the milk was fed to the calf by milking the mother's milk at 3 am and 3 pm, respectively. Thereafter, 3.8 L of milk was supplied per day, and in the case of concentrated feed, it was separated for each individual and provided so that it could be consumed without restriction in the feeder.
  • Table 3 shows the birth weight of the calf population born in dry cows fed NALT and the weight measured at two-week intervals for eight weeks. Specifically, in the case of the birth weight (0 week) of the calf born by the NALT-treated cows, the average weight was 5.53 kg heavier compared to the control, and the average weight of the calf produced by the NALT-treated cows (2 weeks, 4 weeks, 6 weeks, and Week 8) was about 5 kg (5.1 kg, 4.67 kg, 4.22 kg and 5.9 kg, respectively) heavier than the average weight of the calf produced by the control cow.
  • the flow rate milked at 3 am and 3 pm was recorded daily for 8 weeks for each of the 8 milking cows used in the present application, and the average milking amount was calculated after summing at intervals of 2 weeks after delivery.
  • the results of flow analysis of the control and NALT treatment for a total of 8 weeks immediately after delivery are shown in Table 4.
  • the flow rate immediately after delivery (week 0) of the NALT treatment group increased by an average of 4 kg or more compared to the flow rate immediately after delivery of the control group, and the average flow rate of the NALT treatment group increased by 4 kg or more compared to the average flow rate of the control group.
  • Milking milk is pooled at 3 am and 3 pm at 14 am intervals immediately after the initiation of the milk delivery, so that common ingredients in milk, such as milk fat, milk protein, lactose , Solid-not fat (SNF), somatic cells, milk urea nitrogen (MUN), acetone, beta-hydroxybutyrate (BHB) , Casein-beta, mono- and poly-unsaturated fatty acids, saturated fatty acids, total fatty acids milk scanner FT1 (milk scanner) FT1; Foss Alle 1 DK-3400 Hilleroed, Denmark).
  • SNF Solid-not fat
  • MUN milk urea nitrogen
  • BHB beta-hydroxybutyrate
  • Casein-beta mono- and poly-unsaturated fatty acids, saturated fatty acids, total fatty acids milk scanner FT1 (milk scanner) FT1; Foss Alle 1 DK-3400 Hilleroed, Denmark).
  • Table 4 shows the results of the oil analysis of the control and NALT treatment for a total of 8 weeks after delivery. NALT feeding did not affect foreclosure changes. Specifically, looking at the change pattern of milk fat production for each parking lot of the NALT treatment group, the milk fat content in colostrum immediately after delivery was lower than that of the control. However, while the maintenance amount of the control group showed a tendency to decrease as the experiment progressed, the maintenance amount of the NALT treatment group tended to remain constant (FIG. 2). Looking at the changes in milk protein production by parking in the NALT treatment group, the milk protein content in colostrum immediately after delivery was not statistically significant compared to the control, but showed a high value (FIG. 3).
  • Blood was obtained through the jugular vein before the morning feed feeding at 6 weeks dry season and immediately after delivery (cow and calf) for 8 weeks.
  • the obtained blood is dispensed into a plasma tube (BD Vacutainer, Madison, UK) and a heparin tube (Becton-Dickinson, Belliver Industrial Estate, Georgia, PL6 7BP, UK), followed by centrifugation (3,500 rpm 15 Min, 20 ° C.).
  • WBC White Blood Cell
  • Lymphocyte Lymphocyte
  • Monocyte Granulocyte
  • MCV Mean corpuscular volume
  • MH Mean corpuscular hemoglobin
  • EDTA ethylenediaminetetraacetic acid
  • Albumin Glutamic-oxalacetic transaminase (GOT), Blood urea nitrogen (BUN), Triglycerides (TG), Cholesterol (CHO), Glucose (Glucose; GLU), non-esterified fatty acid (NFA) samples for analysis of metabolic changes such as non-esterified fatty acid (NEFA) in a 1.5 mL tube (Eppendorf AG, Hamburg, Germany) by dispensing 500 ul each -80 °C Stored in a cryogenic freezer (deep freezer).
  • NEFA non-esterified fatty acid
  • Table 10 shows the results of the metabolic changes in the control and NALT-treated newborn calves for a total of 8 weeks after childbirth. Specifically, in the case of the new calf of the NALT-treated group, there was a statistically significant difference in the glucose (Glu) index compared to the new calf of the control.
  • Glu glucose

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Abstract

본 출원은 N-아세틸-L-트립토판(N-acetyl-L-tryptophan; NALT)을 포함하는 젖소용 사료첨가제 조성물에 관한 것으로, 구체적으로 N-아세틸-L-트립토판을 유효성분으로 포함하는 젖소의 사료섭취량 증가용, 젖소가 출산한 송아지의 체중 증가용, 젖소의 유량 증가용, 젖소의 유단백 함량 증가용 및 젖소가 출산한 송아지의 면역력 증강용 사료첨가제 조성물; 상기 젖소용 사료첨가제 조성물을 포함하는 사료; 및 N-아세틸-L-트립토판을 유효성분으로 포함하는 젖소용 사료첨가제 조성물 또는 사료를 젖소에 급여하는 단계를 포함하는 젖소의 사료섭취량 증가 방법, 젖소가 출산한 송아지의 체중 증가 방법, 젖소의 유량 증가 방법, 젖소의 유단백 함량 증가 방법, 젖소가 출산한 송아지의 면역력 증강 방법;에 관한 것이다. 본 출원의 N-아세틸-L-트립토판(N-acetyl-L-tryptophan; NALT)은 젖소의 사료섭취량, 젖소가 출산한 송아지의 체중, 젖소의 유량, 젖소의 유단백 함량을 증가시키고 젖소가 출산한 송아지의 면역력을 증강시키므로, 사료첨가제 조성물 또는 사료에 유효성분으로 포함되어 유용하게 사용될 수 있다.

Description

N-아세틸-L-트립토판을 유효성분으로 포함하는 젖소용 사료첨가제
본 출원은 N-아세틸-L-트립토판(N-acetyl-L-tryptophan; NALT)을 포함하는 젖소용 사료첨가제 조성물에 관한 것으로, 구체적으로 N-아세틸-L-트립토판을 유효성분으로 포함하는 젖소의 사료섭취량 증가용, 젖소가 출산한 송아지의 체중 증가용, 젖소의 유량 증가용, 젖소의 유단백 함량 증가용 및 젖소가 출산한 송아지의 면역력 증강용 사료첨가제 조성물; 상기 젖소용 사료첨가제 조성물을 포함하는 사료; 및 N-아세틸-L-트립토판을 유효성분으로 포함하는 젖소용 사료첨가제 조성물 또는 사료를 젖소에 급여하는 단계를 포함하는 젖소의 사료섭취량 증가 방법, 젖소가 출산한 송아지의 체중 증가 방법, 젖소의 유량 증가 방법, 젖소의 유단백 함량 증가 방법, 젖소가 출산한 송아지의 면역력 증강 방법;에 관한 것이다.
본 결과물은 농림축산식품부의 재원으로 농림식품기술기획평가원의 농생명산업기술개발사업의 지원을 받아 연구되었다(과제번호 117030-3).
홀스타인 젖소의 건유시기는 유방염과 같은 질병에 대한 저항성, 분만을 위한 체조직 보강 및 출생 후 송아지 건강에 중요한 시기이다. 특히, 젖소에서의 건유기는 임신말기(분만 전 2개월)로 태아나 자궁의 급격한 성장(출생 송아지의 80%의 성장이 이루어지는 시기)에 의해 소화관이 압박되거나 분만과 비유를 준비하기 위한 호르몬이 분비되어 체내에서의 호르몬 균형이 무너지게 되어 식욕이 감소하는 시기이기도 하다. 일반적으로, 착유우의 경우 건유시기를 가지지 않고 분만할 때 까지 유선에 자극을 주게 되면 계속적으로 우유를 생산을 할 수 있지만 착유시기와 다르게 건유시기에만 나타나는 호르몬 주기에 유전적으로 변화를 주게 된다. 아울러, 건유시기에 잘못 관리된 젖소의 경우 후성유전체학 측면에서 분만 후 착유우에 우유 생산과 번식성적에 영향을 미쳐 젖소의 생산성 감소에 원인이 됨은 물론 태아 및 출생 후 송아지의 성장에도 영향을 미칠 수 있다. 이러한 측면에서, 건유시기 태아성장 및 분만 후 착유우의 생산성 개선에 필요한 영양소의 보충급여는 중요하게 고려되어야 할 사항이다.
L-트립토판(L-Tryptophan)은 반추동물에 있어서 영양적으로 중요한 필수아미노산(essential amino acid; EAA) 중 하나로 단백질 합성의 필수 구성요소이다. 세로토닌(Serotonin), 멜라토닌(Melatonin), 니아신(Niacin)의 전구체로 항산화 효과는 물론 스트레스 완화 효과를 나타내기도 하며, 소장에서 장관호르몬인 콜레시스토키닌(cholecystokinin; CCK)의 분비를 촉진시키고, 췌장(pancreas) α-아밀라아제의 분비 및 활성을 통해 전분소화율을 증가시킨다. 이러한 L-트립토판이 부족하게 되면 사료 섭취량과 성장 성적에 악영향을 줄 수 있으나, 반추동물에 있어서는 미생물 단백질의 생산에 유도된 반추위 발효 때문에 L-트립토판을 포함하여 대부분의 아미노산이 결핍되지 않는 것으로 간주된다. 그러나, 임신말기 건유우의 경우 사료섭취량은 감소되는 반면 태아의 단백질 합성에 필요로 하는 L-트립토판의 NRC(National Research Council, 2001)요구량이 급증하는 시기이기 때문에 건유우에 필요로 하는 L-트립토판 요구량이 부족되기 쉬워 보충되어야 할 아미노산이다.
L-트립토판을 반추동물에게 보충 급여하면 반추위 내 미생물에게 이용되어 미생물체 단백질의 합성량은 증가하지만, 결과적으로 다량 생성된 암모니아를 이용하지 못할 뿐 아니라 사료 단백질의 이용률이 감소하게 된다. 따라서, 반추위에서 미생물의 분해를 피할 수 있고, 반추동물의 소장에서 분해 및 흡수 가능한 반추위 미분해(rumen-bypass) 아미노산 형태로 급여하는 것이 필요하다. 일반적으로, 반추위 내 미생물로부터 사료 단백질을 보호하기 위하여 열처리, 포름알데히드(formaldehyde) 처리(Subuh, et al., Animal Feed Science and Technolohy. Vol 57(3), 257-265), 탄닌(tannin) 처리, 에탄올(ethanol) 처리, 리그노설포네이트(lignosulfonate) 등 다양한 물리·화학적 처리 방법 및 지방산/pH에 민감한 고분자 혼합물로 표면을 코팅하거나, 불포화 지방산과 광물질 혼합물로 코팅하는 방법들이 연구되고 있다.
본 발명자들은 젖소의 사료섭취량 및 생산성을 개선시키기 위한 사료첨가제를 개발하고자 예의 노력연구한 결과, 아세테이트(acetate)와 L-트립토판(L-tryptophan)의 컨쥬게이션(conjugation) 형태인 N-아세틸-L-트립토판(N-acetyl-L-tryptophan)을 첨가하여 급여하는 경우, 젖소의 사료섭취량, 젖소가 출산한 송아지의 체중, 젖소의 유량, 젖소의 유단백 함량을 증가시키고 젖소가 출산한 송아지의 면역력을 증강시키는 것을 확인하여, 본 출원을 완성하였다.
본 출원의 하나의 목적은 N-아세틸-L-트립토판(N-acetyl-L-tryptophan)을 유효성분으로 포함하는 젖소용 사료첨가제 조성물을 제공하는 것이다.
본 출원의 다른 하나의 목적은 상기 젖소용 사료첨가제 조성물을 포함하는 사료를 제공하는 것이다.
본 출원의 또 다른 하나의 목적은 N-아세틸-L-트립토판을 유효성분으로 포함하는 젖소용 사료첨가제 조성물 또는 사료를 젖소에 급여하는 단계를 포함하는 젖소의 사료섭취량 증가 방법, 젖소가 출산한 송아지의 체중 증가 방법, 젖소의 유량 증가 방법, 젖소의 유단백 함량 증가 방법 및 젖소가 출산한 송아지의 면역력 증강 방법을 제공하는 것이다.
본 출원의 N-아세틸-L-트립토판(N-acetyl-L-tryptophan; NALT)은 젖소의 사료섭취량, 젖소가 출산한 송아지의 체중, 젖소의 유량, 젖소의 유단백 함량을 증가시키고 젖소가 출산한 송아지의 면역력을 증강시키므로, 사료첨가제 조성물 또는 사료에 유효성분으로 포함되어 유용하게 사용될 수 있다.
도 1은 N-아세틸-L-트립토판(N-acetyl-L-tryptophan; NALT) 급여에 따른 임신말기 건유우의 사료섭취량 변화를 나타낸 그래프이다. 이때, *p<0.05는 대조군(control)과 비교 시의 통계적 유의성을 의미한다.
도 2는 N-아세틸-L-트립토판 급여에 따른 건유우의 출산 후 유지방(milk fat) 함량 변화를 나타낸 그래프이다.
도 3은 는 N-아세틸-L-트립토판 급여에 따른 건유우의 출산 후 유단백(milk protein) 함량 변화를 나타낸 그래프이다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 출원의 하나의 양태는 N-아세틸-L-트립토판(N-acetyl-L-tryptophan; NALT)을 유효성분으로 포함하는 젖소용 사료첨가제 조성물을 제공한다.
구체적으로, 본 출원의 젖소용 사료첨가제 조성물은 N-아세틸-L-트립토판 또는 이의 염을 포함할 수 있다.
본 출원의 용어, "N-아세틸-L-트립토판(N-acetyl-L-tryptophan; NALT)"은 하기 화학식 1의 구조를 갖는 화합물을 의미한다. N-아세틸-L-트립토판은 황산마그네슘과 함께 뇌, 척수 및 신경 손상 치료 효과 및 단백질 산화 방지 효과 등의 다양한 특성을 가지고 있다고 알려져 있으나, 이를 포함한 사료 급여 시 젖소의 사료섭취량 증가, 젖소가 출산한 송아지의 체중 증가, 젖소의 유량 증가, 젖소의 유단백 함량 증가 및 젖소가 출산한 송아지의 면역력 증강 효과 등은 알려진 바 없었으며, 본 발명자에 의하여 최초로 규명되었다.
[화학식 1]
Figure PCTKR2018014039-appb-I000001
본 출원의 목적상 상기 N-아세틸-L-트립토판은 그 출처에 제한 없이 사용할 수 있으며, 상기 N-아세틸-L-트립토판의 제조는 당업계에 공지된 다양한 방법을 이용하여 수행될 수 있다.
상기 용어, 'L-트립토판(L-tryptophan)'은 반추동물에 있어서 영양적으로 중요한 필수아미노산(essential amino acid; EAA) 중 하나로 단백질 합성의 필수 구성요소이다. L-트립토판의 대사 산물은 영양 대사를 조절하여 기관들의 항상성을 유지하도록 영향을 주며, 동물의 성장과 발달, 번식 및 건강에 영향을 준다. 또한, L-트립토판은 신경 전달 물질로 작용하는 세로토닌(serotonin)의 전구체로서, 뇌 혈관 장벽(blood-brain barrier)을 통과한 후 정서적 행동을 조절하여, 스트레스를 완화할 수 있다.
본 출원의 용어, "젖소(dairy cattle)"는 가축으로 사육되는 소 중에서 우유 생산을 목적으로 하는 소를 의미하며, 홀스타인종, 저지종, 건지종, 에어셔종 등이 대표적인 품종이다. 본 출원에서의 젖소는 착유(milking)가 가능한 소에 해당하면 품종, 연령 등과 관계없이 모두 본 출원의 범주에 포함된다. 구체적으로, 상기 젖소는 건유기 젖소일 수 있으며, 보다 구체적으로 홀스타인 종의 건유기 젖소를 의미할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 상기 용어, '건유기'는 비유기가 끝나거나, 다음 비유기가 시작되는 준비 기간, 또는 분만 전 기간을 의미할 수 있다. 젖소의 건유기는 약 60일 내외일 수 있으며, 예를 들어 분만 전 8주, 분만 전 7주, 또는 분만 전 6주일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 건유기의 젖소는 사료 섭취량 저하로 인해 에너지가 부족한 현상이 발생할 수 있다.
본 출원의 용어, "사료첨가제"는 사료에 첨가되는 물질을 의미하며, 상기 사료첨가제는 대상 개체의 생산성 향상이나 건강을 증진시키기 위한 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 또한, 상기 사료첨가제는 사료 관리법상의 보조사료에 해당할 수 있다.
본 출원의 사료첨가제 조성물은 N-아세틸-L-트립토판 또는 이의 염 이외에도 대상 개체의 생산성 또는 건강 증진을 위한 뉴클레오티드류, 아미노산, 칼슘, 인산, 유기산 등의 영양소를 추가로 포함할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 출원의 용어, "염"은 양이온과 음이온이 정전기적 인력에 의해 결합하고 있는 물질인 염을 의미하며, 통상적으로 금속염, 유기염기와의 염, 무기산과의 염, 유기산과의 염, 염기성 또는 산성 아미노산과의 염 등이 될 수 있다. 예를 들어, 금속염으로는 알칼리 금속염(나트륨염, 칼륨염 등), 알칼리 토금속염(칼슘염, 마그네슘염, 바륨염 등), 알루미늄염 등이 될 수 있고; 유기염기와의 염으로는 트리에틸아민, 피리딘, 피콜린, 2,6-루티딘, 에탄올아민, 디에탄올아민, 트리에탄올아민, 시클로헥실아민, 디시클로헥실아민, N,N-디벤질에틸렌디아민 등과의 염이 될 수 있으며; 무기산과의 염으로는 염산, 브롬화수소산, 질산, 황산, 인산 등과의 염이 될 수 있고; 유기산과의 염으로는 포름산, 아세트산, 트리플루오로아세트산, 프탈산, 푸마르산, 옥살산, 타르타르산, 말레인산, 시트르산, 숙신산, 메탄술폰산, 벤젠술폰산, p-톨루엔술폰산 등과의 염이 될 수 있으며; 염기성 아미노산과의 염으로는 아르기닌, 라이신, 오르니틴 등과의 염이 될 수 있고; 산성 아미노산과의 염으로는 아스파르트산, 글루탐산 등과의 염이 될 수 있다.
본 출원에서, 상기 젖소용 사료첨가제 조성물은 젖소의 사료섭취량 증가용일 수 있다.
본 출원은 N-아세틸-L-트립토판을 유효성분으로 포함하는 젖소용 사료첨가제 조성물의 젖소의 사료섭취량 증가 용도를 제공한다.
본 출원의 구체적인 일 실시예에서는, 본 출원의 NALT를 유효성분으로 포함하는 젖소용 사료첨가제 조성물을 급여하는 경우 NALT 처리구의 전반적인 사료섭취량이 대조구의 사료섭취량과 비교하여 수치적으로 증가함을 확인하였다. 그 중 4주차 NALT 처리구의 사료섭취량(7.69 kg)은 통계적으로 유의하지는 않지만, 대조구(6.46 kg)의 사료섭취량과 비교하여 1.43 kg의 수치적 증가 패턴을 나타냈으며, 특히 2주차 NALT 처리구의 사료섭취량은 대조구의 사료섭취량과 비교하여 통계적으로 유의하게 증가하였다(P<0.05).
본 출원에서 젖소의 사료섭취량은 사료 잔량을 기록하여 측정할 수 있으며, 구체적으로 매일 일정한 시각에 사료 잔량을 기록하여 일당 사료섭취량을 측정할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 출원에서, 상기 젖소용 사료첨가제 조성물은 젖소가 출산한 송아지의 체중 증가용일 수 있다.
본 출원은 N-아세틸-L-트립토판을 유효성분으로 포함하는 젖소용 사료첨가제 조성물의 젖소가 출산한 송아지의 체중 증가 용도를 제공한다.
본 출원의 구체적인 일 실시예에서는, 본 출원의 NALT를 유효성분으로 포함하는 젖소용 사료첨가제 조성물을 급여하는 경우 NALT 처리구의 젖소가 출산한 송아지의 출생 체중(0주차)이 대조구와 비교하여 평균 5.47 kg 더 무거움을 확인하였다. 또한, NALT 처리구의 젖소가 출산한 송아지의 평균 체중(2주차, 4주차, 6주차 및 8주차)은 대조구의 젖소가 출산한 송아지의 평균 체중과 비교하여 약 5 kg(각각 5.1 kg, 4.67 kg, 4.22 kg 및 5.9 kg) 더 무거웠다.
본 출원에서 젖소가 출산한 송아지의 출생 체중은 분만 직후 측정할 수 있으며, 구체적으로 분만 직후 초유 급여 전 체표면을 건조한 후 측정할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 또한, 본 출원에서 젖소가 출산한 송아지의 평균 체중은 구체적으로 2주 간격으로 우유 급여 전 측정할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 출원에서, 상기 젖소용 사료첨가제 조성물은 젖소의 유량 증가용일 수 있다.
본 출원은 N-아세틸-L-트립토판을 유효성분으로 포함하는 젖소용 사료첨가제 조성물의 젖소의 유량 증가 용도를 제공한다.
본 출원의 구체적인 일 실시예에서는, 본 출원의 NALT를 유효성분으로 포함하는 젖소용 사료첨가제 조성물을 급여하는 경우 NALT 처리구의 분만 직후 유량(0주차)이 대조구의 분만 직후 유량과 비교하여 평균 4 kg이상 증가함을 확인하였다(표 4). 또한, NALT 처리구의 평균 유량 또한 대조구의 평균 유량과 비교하여 4 kg이상 증가하였다.
본 출원에서 젖소의 유량은 착유된 유량을 기록하여 측정할 수 있으며, 구체적으로 매일 일정한 시각(12시간 간격)에 착유하여 그 유량을 기록하여 측정할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 상기 젖소의 유량 증가는 분만 후 10주, 분만 후 9주, 또는 분만 후 8주 동안 지속되는 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 출원에서, 상기 사료첨가제는 젖소의 유단백 함량 증가용일 수 있다.
본 출원은 N-아세틸-L-트립토판을 유효성분으로 포함하는 젖소용 사료첨가제 조성물의 젖소의 유단백 함량 증가 용도를 제공한다.
본 출원의 구체적인 일 실시예에서는, 본 출원의 NALT를 유효성분으로 포함하는 젖소용 사료첨가제 조성물을 급여하는 경우 NALT 처리구의 분만 직후 초유에서의 유단백 함량이 대조구의 분만 직후 초유에서의 유단백 함량과 비교하여 높은 수치를 나타냄을 확인하였다(도 3 및 표 4).
본 출원에서 젖소의 유단백 함량은 착유된 원유의 우유 내 일반성분을 분석하여 측정할 수 있으며, 구체적으로 매일 일정한 시각(12시간 간격)에 착유된 원유를 통합하고 밀크 스캐너 FT1(milk scanner FT1; Foss Alle 1 DK-3400 Hilleroed, Denmark)을 이용하여 분석하여 측정할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 출원에서, 상기 젖소용 사료첨가제 조성물은 젖소가 출산한 송아지의 면역력 증강용일 수 있다.
본 출원은 N-아세틸-L-트립토판을 유효성분으로 포함하는 젖소용 사료첨가제 조성물의 젖소가 출산한 송아지의 면역력 증강 용도를 제공한다.
본 출원의 구체적인 일 실시예에서는, 본 출원의 NALT를 유효성분으로 포함하는 젖소용 사료첨가제 조성물을 급여하는 경우 NALT 처리구 젖소가 출산한 송아지의 경우 대조구 젖소가 출산한 송아지의 경우와 비교하여 단핵구(Monocyte) 지표, 평균 적혈구 용적(Mean corpuscular volume; MCV) 초기 지표 및 평균 적혈구 헤모글로빈(Mean corpuscular hemoglobin; MCH) 초기 지표에서 통계적으로 유의하게 차이가 나타남을 확인하였다(표 5).
본 출원에서 면역력 증강은 혈액 내 백혈구, 림프구, 단핵구, 과립구, 평균 적혈구 용적, 평균 적혈구 헤모글로빈, 혈소판 등의 혈액성상 변화를 분석하여 측정할 수 있으며, 구체적으로 확보한 혈액을 원심분리하여 혈장을 분리하고, EDTA-처리 진공채혈관에 분주하고 VetScan HM2 Hematology System(ABAXIS, CA, USA)을 통해 분석하여 측정할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 출원에서, 상기 N-아세틸-L-트립토판은 반추위-보호(rumen-protected)되는 것일 수 있다.
본 출원의 용어, "반추위-보호(rumen-protected)"는 반추위 내에서 미생물 효소에 의한 분해 작용이 일어나지 않고, 소장에서 분해 및 흡수가 가능하도록 처리된 것을 의미하며, 반추위-바이패스(rumen-bypass)라고도 한다. 상기 용어, '반추위'는 소목의 일부 동물에서 볼 수 있는 특수한 소화관으로, 일명 되새김을 하기 위해 위해 혹위, 벌집위, 겹주름위, 및 주름위의 4개의 방으로 나뉘어 있다. 되새김위라고도 불리며, 한번 삼킨 음식물을 다시 입안으로 토하여 잘 씹은 후에 삼키는 것을 반추라고 하고, 이런 반추를 가능하게 하는 위를 반추위라고 한다. 반추위에는 미생물이 공생하고 있어서 일반적인 동물들이 소화하지 못하는 식물의 셀룰로스를 분해하여 에너지화할 수 있는 능력을 갖게 된다.
본 출원의 N-아세틸-L-트립토판은 아세테이트(acetate)와 L-트립토판(L-tryptophan)의 컨쥬게이션(conjugation) 형태로, 반추위 내에서 미생물 효소에 의해 분해되지 않고, 소장에서 L-트립토판이 흡수될 수 있도록 반추위-보호(rumen-protected)된 것이다.
본 출원의 N-아세틸-L-트립토판은 급여 대상, 급여 대상의 종, 체중, 급여 시기, 급여 사료의 종류, 급여 목적 등을 고려하여 당업자가 그 함량을 결정할 수 있다. 구체적으로, N-아세틸-L-트립토판은 사료 총 건조중량 대비 0.01 내지 5.0%, 0.01 내지 4.0%, 0.05 내지 3.0%, 0.05 내지 2.5%, 0.05 내지 2.0%, 0.05 내지 1.5%, 보다 구체적으로 1.5% (w/w) 포함되는 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 출원의 다른 하나의 양태는 상기 젖소용 사료첨가제 조성물을 포함하는 사료를 제공한다.
구체적으로, 본 출원의 사료는 N-아세틸-L-트립토판 또는 이의 염을 포함하는 젖소용 사료첨가제 조성물을 포함할 수 있다.
이때, 상기 "N-아세틸-L-트립토판", "젖소", "사료첨가제" 및 "반추위-보호"에 대한 설명은 전술한 바와 동일하다.
본 출원의 용어, "사료"는 개체가 먹고, 섭취하며, 소화시키기 위한 또는 이에 적당한 임의의 천연 또는 인공 규정식, 한끼식 등 또는 상기 한끼식의 성분을 의미한다.
상기 사료의 종류는 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용되는 사료를 사용할 수 있다. 상기 사료의 비제한적인 예로는, 곡물류, 근과류, 식품 가공 부산물류, 조류, 섬유질류, 제약 부산물류, 유지류, 전분류, 박 류 또는 곡물 부산물류 등과 같은 식물성 사료; 단백질류, 무기물류, 유지류, 광물성류, 유지류, 단세포 단백질류, 동물성 플랑크톤류 또는 음식물 등과 같은 동물성 사료를 들 수 있다. 이들은 단독으로 사용되거나 2종 이상을 혼합하여 사용될 수 있다.
본 출원의 또 다른 하나의 양태는 N-아세틸-L-트립토판을 유효성분으로 포함하는 젖소용 사료첨가제 조성물 또는 사료를 젖소에 급여하는 단계를 포함하는 젖소의 사료섭취량 증가 방법을 제공한다.
구체적으로, 본 출원의 젖소의 사료섭취량 증가 방법은 N-아세틸-L-트립토판 또는 이의 염을 포함하는 젖소용 사료첨가제 조성물 또는 사료를 급여하는 단계를 포함할 수 있다.
본 출원의 또 다른 하나의 양태는 N-아세틸-L-트립토판을 유효성분으로 포함하는 젖소용 사료첨가제 조성물 또는 사료를 젖소에 급여하는 단계를 포함하는 젖소가 출산한 송아지의 체중 증가 방법을 제공한다.
구체적으로, 본 출원의 젖소가 출산한 송아지의 체중 증가 방법은 N-아세틸-L-트립토판 또는 이의 염을 포함하는 젖소용 사료첨가제 조성물 또는 사료를 급여하는 단계를 포함할 수 있다.
본 출원의 또 다른 하나의 양태는 N-아세틸-L-트립토판을 유효성분으로 포함하는 젖소용 사료첨가제 조성물 또는 사료를 젖소에 급여하는 단계를 포함하는 젖소의 유량 증가 방법을 제공한다.
구체적으로, 본 출원의 젖소의 유량 증가 방법은 N-아세틸-L-트립토판 또는 이의 염을 포함하는 젖소용 사료첨가제 조성물 또는 사료를 급여하는 단계를 포함할 수 있다.
본 출원의 또 다른 하나의 양태는 N-아세틸-L-트립토판을 유효성분으로 포함하는 젖소용 사료첨가제 조성물 또는 사료를 젖소에 급여하는 단계를 포함하는 젖소의 유단백 함량 증가 방법을 제공한다.
구체적으로, 본 출원의 젖소의 유단백 함량 증가 방법은 N-아세틸-L-트립토판 또는 이의 염을 포함하는 젖소용 사료첨가제 조성물 또는 사료를 급여하는 단계를 포함할 수 있다.
본 출원의 또 다른 하나의 양태는 N-아세틸-L-트립토판을 유효성분으로 포함하는 젖소용 사료첨가제 조성물 또는 사료를 젖소에 급여하는 단계를 포함하는, 젖소가 출산한 송아지의 면역력 증강 방법을 제공한다.
구체적으로, 본 출원의 젖소가 출산한 송아지의 면역력 증강 방법은 N-아세틸-L-트립토판 또는 이의 염을 포함하는 젖소용 사료첨가제 조성물 또는 사료를 급여하는 단계를 포함할 수 있다.
이때, 상기 "N-아세틸-L-트립토판", "젖소", "사료첨가제", "반추위-보호" 및 "사료"에 대한 설명은 전술한 바와 동일하다.
상기 젖소용 사료첨가제 조성물에 포함된 N-아세틸-L-트립토판의 함량은 전술한 바와 동일하다.
상기 방법은 일반적인 사양관리 방법에 따라 급여될 수 있으며, 구체적으로 매일 일정한 시각에 급여될 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 또한, 급여량은 특별히 제한되지 않는다.
이하 본 출원을 실시예를 통하여 보다 상세하게 설명한다. 그러나 이들 실시예는 본 출원을 예시적으로 설명하기 위한 것으로 본 출원의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.
실시예 1. 실험동물, 실험사료 및 실험방법
실시예 1-1. 실험동물의 사용
본 출원은 임신말기 홀스타인 프리에시안(Holstein Friesian) 종을 대상으로 분만 60일 전에 해당하는 개체 중 출산 시기(분만 예상 일정 ± 15일) 및 출산 횟수(산차) 등을 고려하여 대조구(미처리구)와 처리구 각각 4두씩, 총 8두를 선별하여 사용하였다.
실시예 1-2. 실험사료의 급여
본 출원에서 건유 및 착유시기에 급여한 기초사료는 NRC(2001) 건유우 영양소 요구량에 맞춰, 완전배합사료(Total Mixed Ration; TMR), 조사료(roughage) 및 농후사료(Concentrates)를 제공하였으며, 처리구(Treatment)의 경우 기초사료에 N-아세틸-L-트립토판(N-acetyl-L-tryptophan; NALT)을 첨가하여 평가를 진행하였다. 기초사료의 일반 성분과 아미노산 함량 분석 결과는 표 1에 나타난 바와 같다. 신생 송아지의 경우 3일간 초유를 급여하였으며, 이 후 착유 과정 동안 나온 우유를 8주 동안 급여하였다.
Figure PCTKR2018014039-appb-T000001
실시예 1-3. 실험방법의 설계
N-아세틸-L-트립토판 급여를 통한 분만 전 사료 급여 평가는 60 ± 8일 동안 수행하였다(예상 분만일 차이로 인한 오차 발생). 대조구(control)는 기초사료를 급여하였으며, 처리구(treatment)에는 기초사료에 NALT 15 g을 추가 급여하였다. 급여 개시 시점(0 주차)부터 NALT의 급여량을 5 g, 10 g, 15 g으로 점진적으로 늘리며 1주일 동안 적응기간을 가졌으며, 완전배합사료 1 kg과 혼합하여 매일 아침 9시에 톱 드레싱(top dressing) 방법으로 급여하였다.
실시예 2. 사료섭취량 분석
매일 아침 9시에 사료 잔량을 개체별로 기록하여 일(day)당 사료섭취량을 조사하였다.
총 6주간의 건유기 평가 기간 동안 대조구 및 NALT 처리구의 사료섭취량 분석 결과는 표 2에 나타난 바와 같으며, NALT 처리구의 전반적인 사료섭취량은 대조구의 사료섭취량과 비교하여 수치적으로 증가함을 알 수 있었다(도 1). 그 중 4주차 NALT 처리구의 사료섭취량(7.69 kg)은 통계적으로 유의하지는 않지만, 대조구(6.46 kg)의 사료섭취량과 비교하여 1.43 kg의 수치적 증가 패턴을 나타냈으며, 특히 2주차 NALT 처리구의 사료섭취량은 대조구의 사료섭취량과 비교하여 통계적으로 유의하게 증가하였다(P<0.05).
Figure PCTKR2018014039-appb-T000002
본 출원의 NALT를 유효성분으로 포함하는 젖소용 사료첨가제 조성물을 급여하는 경우, 소장에서의 L-트립토판 흡수량이 증가함에 따라 그렐린(ghrelin, 공복 호르몬) 분비가 촉진되었으며, 이로 인해 콜레시스토키닌(cholecystokinin, 담즙 호르몬) 및 α-아밀라아제(α-amylase, 전분 분해 효소) 분비 또한 촉진되어 사료섭취량이 증가하였다. 또한, 소장에서의 L-트립토판 흡수량이 증가함에 따라 멜라토닌(melatonin), 세로토닌(serotonin) 및 니아신(niacin) 분비가 촉진되었으며, 이로 인해 세포 내 대사를 촉진하고 소화과정 및 위장 운동에 영향을 미쳐 사료섭취량이 증가하였다. 즉, NALT 급여가 소장 내 전분 소화 능력을 개선하였음을 알 수 있었다.
실시예 3. 젖소가 출산한 송아지의 체중 분석
시험축으로부터 젖소가 출산한 송아지는 분만 직후 체표면을 건조한 후, 체중을 측정하였으며(초유 급여 전; 체중계 GL-6000S Series, G-Tech International Co.,LTD), 2주 간격으로 8주간 총 4회 송아지의 체중을 측정하였다(우유 급여 전 체중). 분만 후 3일까지 오전 3시 및 오후 3시에 각각 어미소의 초유를 착유하여 송아지에게 급여하였다. 이후, 하루에 3.8 L의 우유를 공급하였으며, 농후사료의 경우 개체 별로 분리하여 사료 먹이통에서 제한 없이 섭취할 수 있도록 제공하였다.
NALT를 급여한 건유우에서 태어난 송아지 개체군의 출생 체중과 8주 동안 2주 간격으로 측정한 체중은 표 3에 나타난 바와 같다. 구체적으로, NALT 처리구 젖소가 출산한 송아지의 출생 체중(0주차)의 경우 대조구와 비교하여 평균 5.53 kg 더 무거웠으며, NALT 처리구 젖소가 출산한 송아지의 평균 체중(2주차, 4주차, 6주차 및 8주차)의 경우 대조구 젖소가 출산한 송아지의 평균 체중과 비교하여 약 5 kg(각각 5.1 kg, 4.67 kg, 4.22 kg 및 5.9 kg) 더 무거웠다.
Figure PCTKR2018014039-appb-T000003
본 출원의 NALT를 유효성분으로 포함하는 젖소용 사료첨가제 조성물을 급여하는 경우, 소장에서의 L-트립토판 흡수량이 증가함에 따라 멜라토닌(melatonin) 분비가 촉진되었으며, 이로 인해 성장호르몬(growth hormone; GH) 분비가 촉진되어 송아지의 체중이 증가하였다. 또한, 어미소의 사료섭취량 증가로 인해 영양소를 충분히 공급 받아 송아지의 체중이 증가하였다.
실시예 4. 착유우의 유성적 분석
실시예 4-1. 유량 분석
본 출원에 사용된 총 8두의 착유우 개체 별로 오전 3시 및 오후 3시에 착유된 유량을 8주 동안 매일 기록하였으며, 분만 후 2주 간격으로 합산한 후 평균 착유량을 산출하였다.
분만 직후 총 8주 동안 대조구 및 NALT 처리구의 유량 분석 결과는 표 4에 나타난 바와 같다. NALT 처리구의 분만 직후 유량(0주차)은 대조구의 분만 직후 유량과 비교하여 평균 4 kg이상 증가하였으며, NALT 처리구의 평균 유량 또한 대조구의 평균 유량과 비교하여 4 kg이상 증가하였다.
Figure PCTKR2018014039-appb-T000004
Figure PCTKR2018014039-appb-I000002
본 출원의 NALT를 유효성분으로 포함하는 젖소용 사료첨가제 조성물을 급여하는 경우, 필수아미노산 요구량이 충족되어 착유우의 유량과 같은 생산성이 개선됨을 알 수 있었다.
실시예 4-2. 유질 분석
비유가 개시된 분만 직후부터 14일 간격으로 오전 3시 및 오후 3시에 착유된 원유를 통합(pooling)하여, 우유 내 일반성분, 즉 유지방(milk fat), 유단백(milk protein), 락토오스(lactose), 무지유고형분(solid-not fat; SNF), 체세포(somatic cells), 우유 중 요소 태질소(milk urea nitrogen; MUN), 아세톤(acetone), 베타-하이드록시부틸레이트(beta-hydroxybutyrate; BHB), 카제인-베타(casein-beta), 모노- 및 폴리-불포화 지방산(Mono- 및 Poly-unsaturated fatty acids), 포화 지방산(saturated fatty acid), 총 지방산(total fatty acid)을 밀크 스캐너 FT1(milk scanner FT1; Foss Alle 1 DK-3400 Hilleroed, Denmark)을 이용하여 분석하였다.
분만 후 총 8주 동안 대조구 및 NALT 처리구의 유질 분석 결과는 표 4에 나타난 바와 같다. NALT 급여는 유질 변화에 영향을 미치지 않았다. 구체적으로, NALT 처리구의 주차별 유지방(milk fat) 생산량 변화 양상을 살펴보면, 분만 직후 초유에서의 유지방 함량은 대조구에 비하여 낮은 수치를 보였다. 그러나, 대조구의 유지방량은 실험이 진행됨에 따라 감소하는 경향을 나타낸 반면, NALT 처리구의 유지방량은 일정하게 유지하는 경향을 나타내었다(도 2). NALT 처리구의 주차별 유단백(milk protein) 생산량 변화 양상을 살펴보면, 분만 직후 초유에서의 유단백 함량은 대조구에 비하여 통계적으로 유의하진 않지만 높은 수치를 나타냈다(도 3).
실시예 5. 혈액 분석
건유 시기 6주 및 분만 직후(젖소 및 송아지) 8주 동안 2주 간격으로 오전 사료 급여 전 경정맥을 통해 혈액을 확보하였다. 확보한 혈액은 혈장 튜브(Serum tube; BD Vacutainer, Plymouth, UK) 및 헤파린 튜브(Heparin tube; Becton-Dickinson, Belliver Industrial Estate, Plymouth, PL6 7BP, UK)에 분주한 후, 원심분리(3,500 rpm 15 분, 20℃)를 통해 혈장을 분리하였다.
실시예 5-1. 혈액성상 변화 분석
백혈구(White Blood Cell; WBC), 림프구(Lymphocyte), 단핵구(Monocyte), 과립구(Granulocyte), 평균 적혈구 용적(Mean corpuscular volume; MCV), 평균 적혈구 헤모글로빈(Mean corpuscular hemoglobin; MCH), 혈소판(Platelet) 등의 혈액성상 변화 분석을 위한 샘플은 에틸렌디아민테트라아세트산 (Ethylenediaminetetraacetic acid; EDTA)-처리 진공채혈관(vacutainer; Becton-Dickinson, Franklin Lakes, NJ, USA)에 분주한 후, VetScan HM2 Hematology System(ABAXIS, CA, USA)을 통해 분석하였다.
건유기 6주 및 출산 후 8주간의 시험기간 동안 대조구 및 NALT 처리구 젖소의 혈액성상 변화 분석 결과는 표 5(건유기) 및 표 6(출산 후)에 나타난 바와 같다. NALT 처리구 젖소의 혈액성상과 대조구 젖소의 혈액성상은 큰 차이가 없었다. 즉, NALT의 급여는 건유기 또는 출산 후 젖소의 혈액성상에 큰 영향을 미치지 않았다.
Figure PCTKR2018014039-appb-T000005
Figure PCTKR2018014039-appb-T000006
한편, 출산 후 총 8주 동안 대조구 및 NALT 처리구 젖소가 출산한 송아지의 혈액성상 변화 분석 결과는 표 7에 나타난 바와 같다. 구체적으로, NALT 처리구 젖소가 출산한 신생 송아지의 경우 대조구 젖소가 출산한 송아지와 비교하여 단핵구(Monocyte) 지표에서 통계적으로 유의하게 차이가 나타났으며, 평균 적혈구 용적(Mean corpuscular volume; MCV) 및 평균 적혈구 헤모글로빈(Mean corpuscular hemoglobin; MCH) 초기 지표에서 통계적으로 유의하게 차이가 나타났다.
Figure PCTKR2018014039-appb-T000007
본 출원의 NALT를 유효성분으로 포함하는 젖소용 사료첨가제 조성물을 급여하는 경우, L-트립토판의 흡수량이 증가함에 따라 젖소가 출산한 송아지의 면역반응에 긍정적인 영향 및 면역력 증강 효과를 나타낸다는 것을 알 수 있었다.
실시예 5-2. 대사적 변화 분석
알부민(Albumin), 글루타믹 옥살아세틱 트랜스아미나아제 (Glutamic-oxalacetic transaminase; GOT), 혈액요소질소(Blood urea nitrogen; BUN), 트리글리세라이드(Triglycerides; TG), 콜레스테롤(Cholesterol; CHO), 글루코오스(Glucose; GLU), 비-에스터형 지방산(Non-esterified fatty acid; NEFA) 등의 대사적 변화 분석을 위한 샘플은 1.5 mL 튜브(Eppendorf AG, Hamburg, Germany)에 500 ul 씩 분주하여 -80℃ 초저온 냉동고(deep freezer)에 보관하였다.
건유기 6주 및 출산 후 8주간의 시험기간 동안 대조구 및 NALT 처리구 젖소의 대사적 변화 분석 결과는 표 8(건유기) 및 표 9(출산 후)에 나타난 바와 같다. NALT 처리구 젖소의 대사적 변화와 대조구 젖소의 대사적 변화는 큰 차이가 없었다. 즉, NALT의 급여는 건유기 또는 출산 후 젖소의 대사적 변화에 큰 영향을 미치지 않았다.
Figure PCTKR2018014039-appb-T000008
Figure PCTKR2018014039-appb-T000009
출산 후 총 8주 동안 대조구 및 NALT 처리구 신생 송아지의 대사적 변화 분석 결과는 표 10에 나타난 바와 같다. 구체적으로, NALT 처리구 신생 송아지의 경우 대조구의 신생 송아지와 비교하여 글루코스(Glu) 지표에서 통계적으로 유의하게 차이가 나타났다.
Figure PCTKR2018014039-appb-T000010
본 출원의 NALT를 유효성분으로 포함하는 젖소용 사료첨가제 조성물을 급여하는 경우, L-트립토판의 흡수량이 증가함에 따라 소장 내 전분 소화 능력이 개선되어 젖소가 출산한 송아지의 혈중 글루코스 함량이 낮게 나타난다는 것을 알 수 있었다.
참조예. 통계적 분석
상기 실시예의 분석 등을 통해서 확보한 각 성적들은 평가 주차 별로 평균 값을 산출하였으며, 실험 결과에 대한 통계처리는 SPSS Ver.24 프로그램(IBM support; http://www01.ibm.com/support/)을 통해 두 그룹간 student`s t-test를 이용하여 P<0.05 수준에서 유의성을 두고 통계처리를 실시하였다.
이상의 설명으로부터, 본 출원이 속하는 기술분야의 당업자는 본 출원이 그 기술적 사상이나 필수적 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 실시될 수 있다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 이와 관련하여, 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적인 것이 아닌 것으로서 이해해야만 한다. 본 출원의 범위는 상기 상세한 설명보다는 후술하는 특허 청구범위의 의미 및 범위 그리고 그 등가 개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변형된 형태가 본 출원의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.

Claims (14)

  1. N-아세틸-L-트립토판을 유효성분으로 포함하는, 젖소용 사료첨가제 조성물.
  2. 제1항에 있어서, 상기 젖소는 건유기 젖소인 것인, 젖소용 사료첨가제 조성물.
  3. 제1항에 있어서, 상기 사료첨가제 조성물은 사료섭취량 증가용인 것인, 젖소용 사료첨가제 조성물.
  4. 제1항에 있어서, 상기 사료첨가제 조성물은 젖소가 출산한 송아지의 체중 증가용인 것인, 젖소용 사료첨가제 조성물.
  5. 제1항에 있어서, 상기 사료첨가제 조성물은 젖소의 유량 증가용인 것인, 젖소용 사료첨가제 조성물.
  6. 제1항에 있어서, 상기 사료첨가제 조성물은 젖소의 유단백 함량 증가용인 것인, 젖소용 사료첨가제 조성물.
  7. 제1항에 있어서, 상기 사료첨가제 조성물은 젖소가 출산한 송아지의 면역력 증강용인 것인, 젖소용 사료첨가제 조성물.
  8. 제1항에 있어서, 상기 N-아세틸-L-트립토판은 사료 총 건조중량 대비 0.01 내지 5.0% (w/w) 포함되는 것인, 젖소용 사료첨가제 조성물.
  9. 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항의 젖소용 사료첨가제 조성물을 포함하는, 사료.
  10. N-아세틸-L-트립토판을 유효성분으로 포함하는 젖소용 사료첨가제 조성물 또는 사료를 젖소에 급여하는 단계를 포함하는, 젖소의 사료섭취량 증가 방법.
  11. N-아세틸-L-트립토판을 유효성분으로 포함하는 젖소용 사료첨가제 조성물 또는 사료를 젖소에 급여하는 단계를 포함하는, 젖소가 출산한 송아지의 체중 증가 방법.
  12. N-아세틸-L-트립토판을 유효성분으로 포함하는 젖소용 사료첨가제 조성물 또는 사료를 젖소에 급여하는 단계를 포함하는, 젖소의 유량 증가 방법.
  13. N-아세틸-L-트립토판을 유효성분으로 포함하는 젖소용 사료첨가제 조성물 또는 사료를 젖소에 급여하는 단계를 포함하는, 젖소의 유단백 함량 증가 방법.
  14. N-아세틸-L-트립토판을 유효성분으로 포함하는 젖소용 사료첨가제 조성물 또는 사료를 젖소에 급여하는 단계를 포함하는, 젖소가 출산한 송아지의 면역력 증강 방법.
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