WO2019125204A1 - Композиция на основе бромелаина и лизата бактерий для профилактики заболеваний полости рта - Google Patents

Композиция на основе бромелаина и лизата бактерий для профилактики заболеваний полости рта Download PDF

Info

Publication number
WO2019125204A1
WO2019125204A1 PCT/RU2018/000213 RU2018000213W WO2019125204A1 WO 2019125204 A1 WO2019125204 A1 WO 2019125204A1 RU 2018000213 W RU2018000213 W RU 2018000213W WO 2019125204 A1 WO2019125204 A1 WO 2019125204A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
composition according
lysate
lactobacillus
bromelain
oral cavity
Prior art date
Application number
PCT/RU2018/000213
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
Светлана Анатольевна ЗАКИРОВА
Павел Павлович НЕСМИЯНОВ
Original Assignee
Общество с ограниченной ответственностью "СПЛАТ-КОСМЕТИКА"
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Общество с ограниченной ответственностью "СПЛАТ-КОСМЕТИКА" filed Critical Общество с ограниченной ответственностью "СПЛАТ-КОСМЕТИКА"
Publication of WO2019125204A1 publication Critical patent/WO2019125204A1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/99—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from microorganisms other than algae or fungi, e.g. protozoa or bacteria
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
    • A61K33/42—Phosphorus; Compounds thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74—Bacteria
    • A61K35/741—Probiotics
    • A61K35/742—Spore-forming bacteria, e.g. Bacillus coagulans, Bacillus subtilis, clostridium or Lactobacillus sporogenes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74—Bacteria
    • A61K35/741—Probiotics
    • A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74—Bacteria
    • A61K35/741—Probiotics
    • A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
    • A61K35/745—Bifidobacteria
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74—Bacteria
    • A61K35/741—Probiotics
    • A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
    • A61K35/747—Lactobacilli, e.g. L. acidophilus or L. brevis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/06—Fungi, e.g. yeasts
    • A61K36/062—Ascomycota
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
    • A61K38/46—Hydrolases (3)
    • A61K38/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
    • A61K38/4873—Cysteine endopeptidases (3.4.22), e.g. stem bromelain, papain, ficin, cathepsin H
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/02—Stomatological preparations, e.g. drugs for caries, aphtae, periodontitis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q11/00—Preparations for care of the teeth, of the oral cavity or of dentures; Dentifrices, e.g. toothpastes; Mouth rinses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q11/00—Preparations for care of the teeth, of the oral cavity or of dentures; Dentifrices, e.g. toothpastes; Mouth rinses
    • A61Q11/02—Preparations for deodorising, bleaching or disinfecting dentures
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y304/00—Hydrolases acting on peptide bonds, i.e. peptidases (3.4)
    • C12Y304/22—Cysteine endopeptidases (3.4.22)
    • C12Y304/22032—Stem bromelain (3.4.22.32)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y304/00—Hydrolases acting on peptide bonds, i.e. peptidases (3.4)
    • C12Y304/22—Cysteine endopeptidases (3.4.22)
    • C12Y304/22033—Fruit bromelain (3.4.22.33), i.e. juice bromelain
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0053—Mouth and digestive tract, i.e. intraoral and peroral administration
    • A61K9/0056—Mouth soluble or dispersible forms; Suckable, eatable, chewable coherent forms; Forms rapidly disintegrating in the mouth; Lozenges; Lollipops; Bite capsules; Baked products; Baits or other oral forms for animals

Definitions

  • the present invention relates to an innovative immunomodulatory complex for use in the oral cavity, which is a composition for use in the oral cavity, containing a combination of the proteolytic enzyme bromelain and a lysate of bacteria.
  • the invention can be used in the care of the oral cavity, as well as for the prevention of diseases of the teeth, gums and / or oral cavity.
  • Oral health is provided by a number of physiological systems that provide homeostasis;
  • the important components of these systems are the immune system of the mucous membrane and the microbiota of the various compartments of the oral cavity interacting with it.
  • Under adverse conditions features of diet, somatic diseases, smoking, etc.
  • the normal physiological state of these systems is disturbed, which provokes the development of various oral diseases: gingivitis, periodontitis, stomatitis, xerostomia, caries (Kinane DF, 2017; Acharya A, 2017).
  • These diseases carry a huge burden on the health systems of the whole world, being largely controlled (Petersen PE, 2005).
  • gingivitis When gingivitis was found, part of the dysbiotic flora enters the bloodstream and causes bacteremia, and, as a result of incomplete phagocytosis, bacteria can migrate to the atherosclerotic focus inside phagocytes. Isolation of pro-inflammatory cytokines in the periodontal zone can trigger systemic inflammatory response, thereby creating the prerequisites for the development of vascular inflammation. It is also noted that periodontitis greatly changes the composition of the intestinal microflora, reducing its anti-inflammatory abilities and causing systemic inflammation.
  • Caries is characterized by the demineralization of the inorganic part of enamel and the destruction of its organic matrix, which leads to the destruction of hard tissues of the tooth and the occurrence of inflammatory complications of the pulp and periodontal.
  • Admission with a diet of simple carbohydrates leads to a decrease in pH, as a result of which acid-resistant species survive - S. mutans, lactobacilli, bifidobacteria. In addition to S.
  • mutans, bacteria and other types play a role in the development of children's caries - Granulicatella, Actinomyces, Actinobaculum, Scardovia, Atopobium, Aggregatibacter, Slackia, Bifidobacteria, Prevotella (Tanner A.C., 2016; Marsh PD, 2015; Arweiler NB, 2016).
  • lactobacilli remains twofold - on the one hand, in the early stages they provide competition with S. mutans, and on the other hand, they are a predictor of caries development and are the dominant species in deep lesions with severe caries in children.
  • Gingivitis inflammation of the gums without compromising the integrity of the periodontal joint. Most often occurs due to accumulation of microbial plaque on the teeth, as a result of non-compliance with oral hygiene. Bacteria (less commonly - viruses, fungi) are the direct cause of gum disease (Fusobacterium nucleatum, Lachnospiraceae, Lautropia, Prevotella oulorum). Gingivitis is a reversible condition that can be eliminated by establishing an adequate hygienic regime. If untreated, gingivitis can progress to a destructive form of periodontal disease — periodontitis.
  • Periodontitis is an inflammatory disease of periodontal tissues characterized by the progressive destruction of the normal structure of the alveolar process of the jaw. In severe periodontitis, Porphyromonas gingivalis, Actinobacillus actinomycetemcomitans, Prevotella intermedia, Treponema denticola are most often found. Another reason is traumatic, which, in addition to the anatomical features and the presence of orthodontic structures, includes improper use of a toothbrush. For the prevention of periodontitis it is necessary to maintain an adequate hygienic regime. As in the case of caries, periodontitis should not be considered as an infectious process, but as dysbiotic.
  • xerostomia Dry mouth is dryness in the oral cavity caused by reduced or completely stopped salivation.
  • xerostomia increases the risk of infectious diseases of the oral cavity, including fungal diseases.
  • Stomatitis is an ulcerative lesion of the oral mucosa, caused by the reaction of the immune system to stimuli. The cause of its occurrence is also believed to be local factors: lack of oral hygiene.
  • Diseases of the gastrointestinal tract, such as gastritis, duodenitis, colitis, as well as worm infestation can be the cause of catarrhal stomatitis. In this disease, the mucous membrane of the mouth becomes swollen, painful, hyperemic, it can be covered with white or yellow bloom.
  • the population has a need for a complex tool that would provide a cleansing, lightening, anti-caries, anti-inflammatory, desensitizing, immunomodulating effect and would help normalize the balance of the oral microbiota.
  • Hydroxyapatite is a mineral that allows to remineralize tooth tissues.
  • the HAP is able to close the dentinal tubules in the naked dentin.
  • Amplifier cleansing ability is a particle that provides a gentle cleansing and polishing tooth enamel.
  • the enhancer of the cleaning ability can be represented as silica (silica), calcium carbonate, dicalcium phosphate dihydrate, calcium pyrophosphate, aluminum oxide, perlite, sodium bicarbonate, charcoal, hydrogen peroxide, calcium peroxide, sodium citrate, sodium pyrophosphate, sodium tripolyphosphate, sodium hexametaphosphate, calcium peroxide.
  • the film former is a substance that prevents the formation of plaque and staining of tooth enamel, as well as removes plaque.
  • Bromelain is a mixture of proteolytic enzymes, which are sulfhydryl proteases. Bromelain breaks down proteins that make up plaque and lysates.
  • Microorganism lysates associated with healthy oral cavity selected from Bifidobacterium longum, Bifidobacterium bifidum and Bifidobacterium adolescentis and Lactobacillus casei, Streptococcus mutans, Streptococcus sanguinis, Veillonella parvula, Candida albicans and Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus fermentum, Lactobacillus bulgaricus, Sir.
  • Thermophilus are fragments of cell walls and organelles of bacteria and fungi, obtained by chemical, physical or biological effects on these microorganisms. According to studies conducted by the authors of the present invention, these lysates act on the cells of the immune system through TLR receptors, and also serve as a prebiotic substrate for beneficial microorganisms.
  • the synergy of the components of this complex leads to a powerful enhancement of the cleansing action, and by affecting the oral microbiota and restoring the homeostasis of the immune system, prevention of diseases of the oral cavity and maintenance of the sub-inflammatory, that is, normal neutrophil activation status is provided. All of the above can significantly improve the properties of oral hygiene products.
  • compositions for the oral cavity such as toothpastes, gels, elixirs, balms, ointments, rinses, foams, chewing gums, sprays are designed to remove plaque and / or prevent its formation.
  • dental plaque is a multicomponent, constantly evolving biotope of the oral cavity, which is based on almost all representatives of the oral microflora in a conglomerate with proteins and polysaccharides.
  • the antigens of these microorganisms stimulate the activity of immunobiological resistance factors of the organism.
  • a pronounced change in the composition of the microflora occurs.
  • early plaque forms with the predominance of aerobic and facultatively anaerobic bacteria: streptococci, staphylococci, neisseria and lactobacilli.
  • the total bacterial content is no more than 100–1000 per 1 g.
  • Therapeutic and prophylactic toothpaste used for the prevention of inflammatory periodontal diseases is known from RU2494724C2 (publ. 10/10/2013).
  • the proposed toothpaste contains as active ingredients 0.001-5.0% by weight of the lyophilized mass of live bifidobacteria, 0.01-5.0% by weight of lysozyme; 0.01-5.0 wt.% Papain; 2,00-20,00 wt.% Abrasive component; 5.00–20.88 wt.% Of the humidifier; 0.05-5.0 wt.% Hydrocolloid; 0.10-2.00 wt.% Surfactant; 0.10-0.32 wt.% Sodium fluoride; 0.50-5.00 wt.% Tetropotassium pyrophosphate; 0.15-0.40 wt.% Preservative; 0.05-1.50 wt.% Flavor; 30.00-87.029 wt.% Water.
  • the complex declared by the authors of the present invention differs from RU2494724C2 in that it contains not a lyophilized mass of live bifidobacteria, the viability of which in the finished composition is extremely low, but a bacterial lysate that contains antigens already prepared for recognition by the immune system.
  • bromelain contained in RU2494724C2 does not destroy immunoglobulin molecules to small non-functional fragments (Matharu Z, 2012).
  • the claimed complex contains an amplifier of cleaning ability, CaMgZn-HAP and
  • the smell from the mouth which is not characteristic of the healthy state of the oral cavity, is caused, inter alia, by volatile sulfur compounds, which are mixed with the exhaled air. These include hydrogen sulfide, 1,5-diaminopentane and methanethiol. These substances are formed, for example, by bacterial decomposition of food residues or in dead tissues. Local or systemic factors can be considered as a trigger for breath odor. In 80-90% of cases, the smell is due to local factors acting either in the oral cavity or in the nasopharynx.
  • Streptococcus mutans is of particular importance.
  • probiotic cultures in the composition of the above means have a very short pot life, therefore, the claimed effect cannot be realized in commercial samples of hygiene products intended for wide consumption, in particular, since special storage conditions of a commercial product are required. Also, the designated complex does not have a cleansing effect.
  • the complex declared by the authors differs from DE20200901 1379U1 in that it does not contain probiotic cultures, the viability of which in the finished composition is extremely low, but the lysate of bifidobacteria, which contains antigens already prepared for recognition by the immune system.
  • the claimed complex contains bromelain, power of cleaning ability, CaMgZn-HAP and PVP, complementing properties of lysates for the purpose of effective cleaning and remineralization of tooth enamel and enhancing the activity of lysates.
  • a toothpaste containing a bacterial lysate made of the following components, is known: 0.001-5.0% may. lysate of bacteria Streptococcus pyogenes Malawi A, Enterococcus faecium, Enterococcus faecalis, Streptococcus sanguis, Staphylococcus aureus subsp. aureus, Klebsiella pneumoniae subsp. pneumoniae, Corynebacterium pseudodiphtheriticum, Fusobacterium nucleatum subsp.
  • nucleatum may.
  • Candida albicans Lactobacillus acidophilius, Lactobacillus fermentum, Lactobacillus helveticus, Lactobacillus delbrueckii subsp. Lactus, 0.01 -5.0% May. lysozyme, 0.01-5.0% may. papain, 2.00-20.00% wt. abrasive component, 5.00 - 20.88% May. humidifier, 0.05-5.0% may. hydrocolloid, 0.10-2.00% may. surfactants, 0.05-0.32% may. sodium fluoride, 0.50-5.00% may. pyrophosphate tetrakalium, 0.15-0.40% May. preservative, 0.05-1, 50% May.
  • flavoring agent 30.00-87.029% may. water.
  • Using the proposed toothpaste allows you to activate phagocytosis, increase the content of lysozyme saliva, increases the number of immune cells, has a strong cleansing, anti-inflammatory and hemostatic effect.
  • the negative properties of this toothpaste include the fact that the lysates of bacteria contained in it are not associated with the healthy state of the oral cavity, and, therefore, can be recognized by the immune system as foreign, which can aggravate the existing inflammatory process or lead to the development of inflammation. This is confirmed by the effect of this composition - it increases the number of immunocompetent cells, which directly indicates an increase in their migration and the realization of an active inflammatory process: an increase in “cellularity”, that is, the number of immunocompetent cells is a reliable sign of the development of inflammation.
  • the complex claimed by the authors differs from RU2496468C2 in that it contains lysates of bacteria that purposefully modulate the immune response in order to prevent the development of the inflammatory status characteristic of gingivitis and periodontitis, and not to activate phagocytosis. Also, the claimed complex does not increase the number of immune cells (which would indicate an increase in inflammation), but contributes to the formation of an adequate balance of subpopulations of these cells. In addition, the claimed complex contains bromelain, power of cleaning ability, CaMgZn-HAP and PVP, which have a synergistic effect. From JP2004250374A (publ. 10/27/2013) a composition is known that is effective in removing plaque and is safe for the human body.
  • Such a composition contains lactic acid bacteria or a fermentation solution of lactic acid and gluconate and / or oligosaccharide.
  • Any form of lactic acid bacteria can be used, for example, powdered lyophilized products. Examples of how to use lacticates, inorganic organisms, lactic acidic organisms, lactic acid bacteria, lactic acid bacteria, lactic acid bacteria, lactic acid bacteria, lactic acid bacteria, lactic acid bacteria, lactobacid bacteria, lactobacies, liquefies, and liquefies are
  • the fermentation solution of lactic acid is preferably a fermentation solution obtained by fermentation of lactic acid using lactic acid bacteria in a medium containing lactose or glucose as the main component.
  • the lactic acid bacteria used for the fermentation of lactic acid can be any of the lactic acid bacteria commonly used in the production of conventional lactic acid drinks, fermented milk, etc., and examples thereof include Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus bulgaricus, Lactobacillus casei, Lactobacillus Brantaram, Lactobacillus antharcillus, Lactobacillus bulgaricus, Lactobacillus casei, Lactobacillus Brantaram, Lactobacillus, Lactobacillus casei, Lactobacillus Brantaram, Lactobacillus, Lactobacillus casei , Lactobacillus Brantaram, Lactobacillus, Lactobacillus casei , Lactobacillus fermentum, Lactobacillus brevis, Lactobacillus buffner, Lactobacillus cellobios, Streptococcus thermophilus and the like.
  • the claimed complex differs from JP2004250374A in that it does not contain probiotic cultures of acid-producing bacteria, the viability of which, moreover, is extremely low in the finished composition, but the lysate of bifidobacteria that contains antigens already prepared for recognition by the immune system. It should be noted that bromelain, which enhances the activity of lysates, as well as the remineralizing enamel CaMgZn-HAP and PVP with an amplifier of cleaning ability, improve the beneficial properties of this complex.
  • a toothpaste or mouthwash contains sphingomyelinase to increase the levels of ceramides in the skin and mucous membranes, and they use sphingomyelinase gram. positive bacteria, gram-negative bacteria, lactobacilli, or mixtures thereof.
  • Lactobacilli are selected from the group consisting of Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus brevis, Lactobacillus buchneri, Lactobacillus casei, Lactobacillus catenaforme, Lactobacillus cellobiosus, Lactobacillus crispatus, Lactobacillus curvatus, Lactobacillus delbrueckii, Lactobacillus fermentum, Lactobacillus jensenii, Lactobacillus leichmanii, Lactobacillus minutus, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus rogosae , Lactobacillus salivarius, Bifidobacterium adolescentis, Bifidobacterium angulatum, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium breve, Bifidobacterium catenulatum, Bifidobacterium dentium, Bifidobacterium erik
  • the claimed complex differs from JP2004250374A in that it does not contain sphingomyelinase, which does not have positive effects on the immune system of the oral cavity, but a lysate of bifidobacteria, including antigens already prepared for recognition by the immune system.
  • the claimed complex contains bromelain, enhancing the activity of lysates, as well as having synergistic PVP, power of cleaning ability and CaMgZn-HAP.
  • this toothpaste contains papain, which destroys immunoglobulins (one of the key factors of anti-infective protection in the oral cavity) to smaller molecules that do not have useful functionality that violates the immunity of the oral cavity.
  • the lysates of bacteria contained in it are not associated with the healthy state of the oral cavity.
  • the claimed complex differs from this toothpaste in that it contains lysates of bacteria that purposefully modulate the immune response in order to prevent the development of the inflammatory status characteristic of gingivitis and periodontitis.
  • the enhancement of the effects of the claimed complex is achieved by the presence in its composition of an amplifier of purifying ability, CaMgZn-HAP and PVP, as well as bromelain, which does not destroy immunoglobulins to small fragments.
  • Dental-Lac competes with undesirable strains of bacteria in the oral cavity, including S. mutans, thereby helping to maintain healthy teeth and gums.
  • the claimed complex differs in that it contains not probiotic cultures, but a lysate of bifidobacteria that contains antigens already prepared for recognition by the immune system.
  • the activity of lysates is intensified by bromelain, an amplifier of cleansing ability, CaMgZn-hydroxyapatite and PVP.
  • the present invention relates generally to an oral composition comprising a combination of a proteolytic enzyme bromelain and a bacterial lysate.
  • the invention is an oral composition comprising a combination of a proteolytic enzyme, bromelain and a bacterial lysate.
  • the bacterial lysate may be a lysate of bifidobacteria.
  • the lysate of bifidobacteria can be a lysate of Bifidobacterium longum, Bifidobacterium bifidum and Bifidobacterium adolescentis.
  • the lysate of bacteria can be a lysate
  • Lactobacillus casei Streptococcus mutans, Streptococcus sanguinis, Veillonella parvula and Candida albicans.
  • the lysate of bacteria can be a lysate
  • Lactobacillus acidophilus Lactobacillus fermentum, Lactobacillus bulgaricus and Sir. Thermophilus.
  • composition according to the invention may contain 0.005-0.2% wt. proteolytic enzyme bromelain.
  • composition according to the invention may contain 0.05-1.5% wt. lysate bacteria.
  • composition according to the invention may additionally contain an enhancer of cleaning ability, which can be selected from the group: silica (silica), calcium carbonate, dicalcium phosphate dihydrate, calcium pyrophosphate, aluminum oxide, perlite, sodium bicarbonate, charcoal, hydrogen peroxide, calcium peroxide, sodium citrate, sodium pyrophosphate, sodium tripolyphosphate, sodium hexametaphosphate, calcium peroxide, and mixtures thereof.
  • an enhancer of cleaning ability can be selected from the group: silica (silica), calcium carbonate, dicalcium phosphate dihydrate, calcium pyrophosphate, aluminum oxide, perlite, sodium bicarbonate, charcoal, hydrogen peroxide, calcium peroxide, sodium citrate, sodium pyrophosphate, sodium tripolyphosphate, sodium hexametaphosphate, calcium peroxide, and mixtures thereof.
  • composition according to the invention may additionally contain hydroxyapatite, which may be selected from the group: hydroxyapatite enriched with calcium, magnesium and zinc.
  • composition according to the invention may additionally contain a film-forming component (film former), which may be selected from the group: polyvinylpyrrolidone, polyvinyl alcohol, wax-like substances, and mixtures thereof.
  • film former may be selected from the group: polyvinylpyrrolidone, polyvinyl alcohol, wax-like substances, and mixtures thereof.
  • composition according to the invention may additionally contain a film-forming agent, an amplifier of cleaning ability, hydroxyapatite and auxiliary substances,% may .:
  • the composition is used in the oral cavity for the treatment of diseases of the teeth, gums and / or oral cavity, which are selected from gingivitis, glossitis, caries and xerostomia, post-traumatic inflammations caused by orthodontic structures
  • the composition may be in the form of a toothpaste, gel, elixir, balsam, spray, foam, chewing gum, or rinse.
  • FIG. 1. presents data on the diversity of microbiota gingival fluid.
  • FIG. 2. presents data on various types of microorganisms at the end of the study in experimental groups.
  • bifidobacteria The influence of bifidobacteria on the mucosal immunity was found. However, some species of bifidobacteria are the so-called allochthonous, or “transit” microflora, i.e. do not colonize the mucous membranes, at the same time managing to exert a regulatory effect on the immune system during the passage. In the oral cavity, the presence of live bifidobacteria is also undesirable, since this genus belongs to acid-resistant species associated with caries. Since the positive role of bifidobacteria in any case is mediated by the components of their cell wall (membrane) and intracellular structures, the use of lysates, rather than live bacteria, is rational. All of the above also necessitates the need for continuous or long-term use of products containing bacterial lysates.
  • T-lymphocytes TNFa and MCP-1, IL-12 and IFNy, and an increase in the "anti-inflammatory" cytokine IL-10.
  • TNFa and MCP-1, IL-12 and IFNy Changes in the composition of lymphocyte subpopulations were accompanied by suppression of the synthesis of pro-inflammatory cytokines TNFa and MCP-1, IL-12 and IFNy, and an increase in the "anti-inflammatory" cytokine IL-10.
  • In cell cultures of B. longum subsp. inf antis JCM 1222T also suppressed IL-17A production.
  • the anti-inflammatory effect of lysates is initially realized when their membrane structures are recognized by TLR2 and T1L9 receptors of immune cells and Nod receptors.
  • TLR2 and T1L9 receptors of immune cells and Nod receptors One of the consequences of this is the preservation of tight contacts between cells (probably due to the inhibition of TNFa synthesis) and the counteraction of mucosal cell apoptosis due to an increase in the synthesis of COX-2 cyclooxygenase and prostaglandin PGE (2).
  • the anti-inflammatory effect has also been demonstrated for the secreted components Bifidobacterium longum, Veillonella parvula, Lactobacillus bulgaricus, Str. Thermophilus, partly due to the regulation of the composition of the microbiota and a decrease in the degree of lipid peroxidation.
  • B. bifidum may suppress inflammation caused by mechanical trauma of the oral mucosa, as well as reduce the risk of colonization of C. albicans when using dental prostheses.
  • Buttsman's postcards Thermophilus and the proteolytic enzyme bromelain have a synergistic effect, which is further confirmed in non-limiting examples.
  • the claimed invention is a composition for use in the oral cavity, containing a combination of a proteolytic enzyme bromelain and a lysate of bacteria.
  • the bacterial lysate may be a lysate of bifidobacteria.
  • the lysate of bifidobacteria can be a lysate of Bifidobacterium longum, Bifidobacterium bifidum and Bifidobacterium adolescentis.
  • the lysate of bacteria can be a lysate
  • Lactobacillus casei Streptococcus mutans, Streptococcus sanguinis, Veillonella parvula and Candida albicans.
  • the lysate of bacteria can be a lysate
  • Lactobacillus acidophilus Lactobacillus fermentum, Lactobacillus bulgaricus, Sir. Thermophilus.
  • composition according to the invention may contain 0.005-0.2% wt. proteolytic enzyme bromelain, preferably 0.05-0.20% m., more preferably 0.1% m.
  • composition according to the invention may contain 0.05-1.5% wt. bacterial lysate, preferably 0.5-1.0% by weight, more preferably 0.7% by weight.
  • composition according to the invention may additionally contain an enhancer of cleansing ability, comprising silica (silica), calcium carbonate, dicalcium phosphate dihydrate, calcium pyrophosphate, alumina, perlite, sodium bicarbonate, charcoal, hydrogen peroxide, calcium peroxide, sodium citrate , sodium pyrophosphate, sodium tripolyphosphate, sodium hexametaphosphate, calcium peroxide.
  • an enhancer of cleansing ability comprising silica (silica), calcium carbonate, dicalcium phosphate dihydrate, calcium pyrophosphate, alumina, perlite, sodium bicarbonate, charcoal, hydrogen peroxide, calcium peroxide, sodium citrate , sodium pyrophosphate, sodium tripolyphosphate, sodium hexametaphosphate, calcium peroxide.
  • composition according to the invention may contain an amplifier of cleansing ability in the amount of 2, 5-5.0% May, preferably 3, 5-4.0% May, more preferably 3.7% May.
  • the composition according to the invention may additionally contain hydroxyapatite.
  • the specified ingredient is traditionally used in toothpastes.
  • the composition according to the invention may contain hydroxyapatite enriched with calcium, magnesium and zinc CaMgZn in an amount of 0.1-10.0% May, preferably 1, 0-8.0% May, more preferably 3, 0-6.0% May ., most preferably 5.0% May.
  • the composition according to the invention may additionally contain a film former, preferably polyvinylpyrrolidone. Specified ingredient is traditionally used in toothpastes.
  • the composition according to the invention may contain a foaming agent in an amount of 0.3-1.0% by weight, preferably 0.5-0, 8% by weight, more preferably 0.7% by weight.
  • composition according to the invention may contain:
  • excipients are traditionally used in the field, for example, neutral carriers, target additives, pharmaceutically acceptable excipients, substances for creating the base or the basis of the composition or the finished form.
  • the composition is used in the oral cavity for the treatment of diseases of the teeth, gums and / or oral cavity, which can be selected from gingivitis, caries and xerostomia.
  • composition of the invention may be incorporated into a toothpaste.
  • toothpaste can be used for the prevention and treatment of inflammatory conditions in the oral cavity, such as, but without limitation, gingivitis, glossitis, caries, xerostomia, post-traumatic inflammation caused by orthodontic structures.
  • the invention may relate to the use of the composition in a method for the prevention and / or treatment of diseases of the teeth, gums, and / or oral cavity.
  • the invention may be a method for the prevention and / or treatment of diseases of the teeth, gums, and / or oral cavity, including the use of such toothpaste.
  • lysate Bifidobacterium longum, Bifidobacterium bifidum and Bifidobacterium adolescentis or Lactobacillus casei, Streptococcus mutans, Streptococcus sanguinis, Veillonella parvula, Candida albicans allows you to restore the inflammatory status of the oral cavity, to repair the body, to fix the oral program, to repair the body, to fix the oral cavity, to repair the body, to fix the oral problem, to repair the program, to repair the body, to fix it.
  • Bifidobacterium longum, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium adolescentis or Lactobacillus casei, Streptococcus mutans, Streptococcus sanguinis, Veillonella parvula, Candida albicans in the complex allows for effective prevention, and in the application, the administrator, and a non-administrator, and a non-administrator, and a non-administrator, you can make the administrator, and a non-administrator, you can use the application, and you can make an appointment of the administrator, and you can use the administrator, the Bifidobacterium bacterium, Bibidobacterium longum, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium adolescentis and viral infections of the oral mucosa, tongue, upper respiratory tract, halitosis, glossitis, post-traumatic inflammations caused by orthodontic appliances and other diseases
  • compositions which as the active components included the claimed complex containing bromelain and bacterial lysates in a percentage of 0.005 and 0.05% may (Table N ° 1), as well as a film former (polyvinylpyrrolidone) - 0.3% May, the power of cleansing ability (silicon dioxide) - 2.5% May, hydroxyapatite (hydroxyapatite enriched with calcium, magnesium and zinc) in the form of a 10% suspension - 0.1% May.
  • a prospective, randomized, double-blind study was conducted on 200 subjects (107 men and 93 women), randomized into four equal age and gender groups. Patients used the composition in the form of toothpaste 2 times a day for 6 weeks.
  • the parameter for assessing the effectiveness of drugs was the average gingival index (GBI), determined by the dentist. Changes in local immunity were also determined by assessing the amount of defensins hBD-l and hBD-2 in the gingival fluid taken within 30 seconds.
  • bromelain is a protease
  • this effect can be explained by the fact that under its action new epitopes of protein antigens that make up the lysate of bifidobacteria, the lactate of Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus fermentum, Lactobacillus bulgaricus and Sir become available.
  • Thermophilus or lysate of Lactobacillus casei, Streptococcus mutans, Streptococcus sanguinis, Veillonella parvula and Candida albicans which allows you to further stimulate immune cells that carry out regulatory reactions in relation to the inflammatory process.
  • a prospective, randomized, double-blind study was conducted on 150 subjects (74 men and 76 women), randomized into three equal sex and age groups. Patients used the composition in the form of toothpaste 2 times a day for 6 weeks.
  • the parameter for assessing the effectiveness of drugs was the average gingival index (GBI), determined by the dentist.
  • GBI gingival index
  • the composition of the microbiota in the gingival pocket was determined.
  • M group arithmetic mean
  • Me median
  • SD standard deviation
  • SEM standard error of the mean
  • interquartile ranges 90% CI were calculated.
  • the results were processed using IBM SPSS Statistics 22.0 (StatSoft, Russia).
  • the probability of differences in the mean values in the groups was determined using the Mann-Whitney test. Differences were considered significant at a significance level of p ⁇ 0.05.
  • group 1 which used the composition with the bromelain complex and the lactate Lactobacillus casei, Streptococcus mutans, Streptococcus sanguinis, Veillonella parvula and Candida albicans, after the end of the study revealed an increase in the representation of the Capnocytophaga genera, Corynebacterium Iphax, and we were established by the authors, we applied the same procedure.
  • Strep acnes, Propionivibrio pelophilus, Rothia dentocariosa, Streptococcus sanguinis, Treponema socranskii, pr It is known that their representation is 20% higher in healthy individuals than in periodontitis sufferers (Fig. 2).
  • the use of the complex of bromelain and lysate Lactobacillus casei, Streptococcus mutans, Streptococcus sanguinis, Veillonella parvula and Candida albicans allows for the normalization of the composition of the oral microbiota with a shift in the representation of species in the direction characteristic of the healthy state of the oral cavity.
  • a prospective, randomized, double-blind study was conducted on 100 children 6–9 years old (57 boys and 43 girls) randomly assigned to two equal sex and age groups. For 52 weeks, Group A brushed her teeth twice a day with toothpaste containing bromelain and lysate Bifidobacterium longum, Bifidobacterium bifidum and Bifidobacterium adolescentis according to the invention. Group B cleaned the teeth twice a day with a toothpaste containing bromelain and lysate Lactobacillus casei, Streptococcus mutans, Streptococcus sanguinis, Veillonella parvula, Candida albicans according to the invention.
  • Group B brushed her teeth twice a day with toothpaste containing bromelain and lysate Lactobacillus casei, Streptococcus mutans, Streptococcus sanguinis, Veillonella parvula, Candida albicans of the invention.
  • Group G cleaned her teeth twice a day with toothpaste, similar in composition to that used by Group A, B, C, but not containing lysate and bromelain. Evaluated the risk of increasing the number of carious changes in the groups before and after using toothpastes. In group A, there was a decrease in the relative risk of increasing carious lesions to a value of 0.87 as compared with group G.
  • Group A 25 people cleaned the teeth twice a day with toothpaste containing bromelain and lysate Bifidobacterium longum, Bifidobacterium bifidum and Bifidobacterium adolescentis by the invention.
  • Group B 25 people cleaned the teeth twice a day with toothpaste containing bromelain and lysate Lactobacillus casei, Streptococcus mutans, Streptococcus sanguinis, Veillonella parvula, Candida albicans no invention.
  • Group B (25 people) cleaned the teeth twice a day with toothpaste containing bromelain and lysate Lactobacillus casei, Streptococcus mutans, Streptococcus sanguinis, Veillonella parvula, Candida albicans no invention.
  • Group G (25 people) brushed her teeth twice a day with toothpaste, similar in composition to that used by Group A, B, C, but not containing lysate and bromelain. The results were recorded according to the standard questionnaire for persons suffering from xerostomia. At the end of the study period, an improvement in the oral cavity was noted by 13 people from group A, 14 people from group B, and 13 people from group B, compared to 6 people studied from group G. Thus, the use of lysate paste helped to reduce the symptoms associated with dry mouth
  • Group A brushed her teeth twice a day with toothpaste containing bromelain and lysate Bifidobacterium longum, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium adolescentis according to the invention.
  • Group B brushed her teeth twice a day with toothpaste containing bromelain and lysate Lactobacillus casei, Streptococcus mutans, Streptococcus sanguinis, Veillonella parvula, Candida albicans according to the invention.
  • Group B brushed her teeth twice a day with toothpaste containing bromelain.
  • Group G cleaned your teeth twice a day with a toothpaste containing Bifidobacterium longum lysate, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium adolescentis.
  • Group D cleaned the teeth twice a day with a toothpaste containing bromelain and lysate Lactobacillus casei, Streptococcus mutans, Streptococcus sanguinis, Veillonella parvula, Candida albicans according to the invention.
  • the average gingival bleeding index (GBI) was evaluated in groups before and after using toothpastes. The use of all pastes led to a decrease in the severity of gingivitis, however, the effectiveness in groups A, B and D was significantly higher than in groups C and G.
  • a prospective, randomized, double-blind study was conducted on 100 subjects (52 men and 48 women), randomized into three equal age and gender groups. For six weeks, Group A cleaned the teeth twice a day with toothpaste containing bromelain, lysate Bifidobacterium longum, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium adolescentis, and polyvinylpyrrolidone of the invention. Group B brushed her teeth twice a day with toothpaste containing bromelain and polyvinylpyrrolidone.
  • Group B cleaned the teeth twice a day with toothpaste containing Bifidobacterium longum lysate, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium adolescentis and polyvinylpyrrolidone.
  • Group G cleaned your teeth twice a day with a toothpaste containing bromelain and lysate Bifidobacterium longum, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium adolescentis no invention.
  • the average gingival bleeding index (GBI) was evaluated in groups before and after using toothpastes. The use of all pastes led to a decrease in the severity of gingivitis, however, the effectiveness in group A was higher than in group G, and in general higher than in groups B and B.
  • a prospective, randomized, double-blind study was conducted in 60 subjects (30 men and 30 women), randomized into three equal age and gender groups. For six weeks, group A daily, after each meal and tooth brushing, applied a rinse containing a complex comprising Bifidobacterium longum lysate, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium adolescentis. Group B used a conditioner containing bromelain and polyvinylpyrrolidone. Group B applied a conditioner containing Bifidobacterium longum lysate, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium adolescentis and polyvinylpyrrolidone. The average gingival bleeding index (GBI) was evaluated in groups before and after using the rinse aid. The use of all rinses led to a decrease in the severity of gingivitis, but the effectiveness in group A was higher than in groups B and B.
  • GBI gingival bleeding index
  • the method for preparing the composition of the invention comprises the following steps.
  • Bacteria Lactobacillus casei, Streptococcus mutans, Streptococcus sanguinis, Veillonella parvula and Candida albicans fungus are cultured under standard conditions to obtain a concentration of 10 l 5 CFU / ml.
  • the cultures are washed three times by centrifugation at 3000 rpm for 10 minutes and concentrated 10 times.
  • Thermal inactivation of microorganisms is carried out at 80 ° C for 30 minutes.
  • microorganisms are destroyed using ultrasound (fourfold sounding, sounding time - 5 min, pause time between pulses - 60 s, amplitude - 9 ⁇ m).
  • the lysate is clarified by centrifugation for 20 minutes at 3000 rpm in the cold, the components of the bacterial cells are precipitated by centrifugation at 20,000 g for 1 hour while cooling. The precipitate is washed in the same mode and resuspended in sterile saline.
  • the resulting bromelain and lysates are introduced into the composition in accordance with the production flow chart.

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Oral & Maxillofacial Surgery (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Cosmetics (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

Изобретение относится к композиции для применения в полости рта, содержащей комбинацию протеолитического фермента бромелаина и лизата бактерий. Изобретение позволяет эффективно бороться с заболеваниями зубов, десен и/или полости рта.

Description

КОМПОЗИЦИЯ НА ОСНОВЕ БРОМЕЛАИНА И ЛИЗАТА БАКТЕРИЙ ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ ЗАБОЛЕВАНИЙ ПОЛОСТИ РТА
ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ
Настоящее изобретение относится к инновационному иммуномодулирующему комплексу для применения в полости рта, представляющему собой композицию для применения в полости рта, содержащую комбинацию протеолитического фермента бромелаина и лизат бактерий. Изобретение может быть использовано при уходе за полостью рта, а также для профилактики заболеваний зубов, десен и/или полости рта.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
Здоровье полости рта обеспечивается рядом физиологических систем, обеспечивающих гомеостаз; важными составляющими этих систем являются иммунная система слизистой оболочки и взаимодействующая с ней микробиота различных компартментов ротовой полости. При неблагоприятных условиях (особенности диеты, соматические заболевания, курение и т.п.) нарушается нормальное физиологическое состояние этих систем, что провоцирует развитие различных заболеваний полости рта: гингивита, пародонтита, стоматита, ксеростомии, кариеса (Kinane DF, 2017; Acharya А, 2017). Эти заболевания осуществляют огромную нагрузку на системы здравоохранения всего мира, являясь во многом контролируемыми {Petersen РЕ, 2005). По данным ВОЗ, в мире 60-90% детей школьного возраста и до 100% взрослых имеют кариотические поражения, которые предотвратимы. Тяжелые поражения пародонта встречаются у 15- 20% людей возраста 35-44 лет (Oral health. Fact sheet N°318. April 2012. Статья он-лайн. URL: <httD://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs318/en/>). Заболевания ротовой полости отражаются не только в косметическом эффекте; они в значительной мере влияют на качество жизни, социальные аспекты жизни человека, а также обусловливают развитие системных патологий - атеросклероза, болезни Альцгеймера и др. Наиболее сильная ассоциация в этой группе состояний выявлена между гингивитом и атеросклерозом. Обнаружено, что при гингивите часть дисбиотической флоры попадает в кровь и вызывает бактериемию, а кроме того вследствие незавершенного фагоцитоза бактерии могут мигрировать в атеросклеротический очаг внутри фагоцитов. Выделение провоспалительных цитокинов в зоне пародонтита может спровоцировать системный воспалительный ответ, тем самым создав предпосылки к развитию воспаления сосудов. Также отмечено, что пародонтит сильно меняет состав кишечной микрофлоры, снижая ее противовоспалительные способности и вызывая системное воспаление.
Увеличение риска аутоиммунных заболеваний возникает за счет ферментов Р. gingivalis, модифицирующих аргинин в белках и превращающих его в цитруллин, не меняя сам белок. Цитрулиннированные белки собственного организма способны вызвать иммунный ответ: в случае ревматоидного артрита у пациентов обнаруживаются антитела к цитруллинированным белкам.
Присутствие ключевых патогенов - Р. gingivalis и Fusobacterium nucleatum - также связано с риском возникновения плоскоклеточной орофарингеальной карциномы, рака поджелудочной железы, рака толстой кишки.
Заболевания полости рта также неблагоприятно влияют на плод при беременности. Отмечено снижение массы новорожденного, повышение риска преждевременных родов, выкидыша и мертворождения вследствие проникновения микроорганизмов через плаценту и возникновения в организме матери провоспалительного фона.
Наиболее распространенными заболеваниями являются кариес и пародонтит. Кариес характеризуется деминерализацией неорганической части эмали и разрушением ее органического матрикса, что приводит к деструкции твердых тканей зуба и к возникновению воспалительных осложнений со стороны пульпы и периодонта. Поступление с диетой простых углеводов приводит к снижению pH, вследствие чего выживают кислотоустойчивые виды - S. mutans, лактобактерии, бифидобактерии. Помимо S. mutans в развитии детского кариеса играют роль бактерии и других типов - Granulicatella, Actinomyces, Actinobaculum, Scardovia, Atopobium, Aggregatibacter, Slackia, Bifidobacteria, Prevotella ( Tanner A.C., 2016; Marsh PD, 2015; Arweiler NB, 2016). Роль лактобактерий при этом остается двоякой - с одной стороны, на ранних сроках они обеспечивают конкуренцию с S. mutans, а с другой стороны - являются предиктором развития кариеса и являются доминирующим видом в глубоких поражениях при тяжелом кариесе у детей. В связи с этим использование некоторых видов живых лактобактерий в составе средств гигиены для полости рта нежелательно. С появлением новых методов исследования, становится понятно, что в развитии заболевания имеет значение не один микроорганизм, а целое сообщество. В частности, микробиота слюны у детей 6-8 лет, страдающих кариесом, отличается большим разнообразием по сравнению со здоровыми детьми (Gomez А, 2017; Huang R, 2011; Mark Welch J.L. 2016).
Гингивит - воспаление десен без нарушения целостности зубодесневого соединения. Наиболее часто возникает из-за скопления микробного налета на зубах, в результате несоблюдения гигиены полости рта. Бактерии (реже — вирусы, грибы) являются непосредственной причиной воспаления десен ( Fusobacterium nucleatum, Lachnospiraceae, Lautropia, Prevotella oulorum). Гингивит является обратимым состоянием, которое можно устранить при установлении адекватного гигиенического режима. При отсутствии лечения гингивит может прогрессировать в деструктивную форму заболеваний пародонта— пародонтит. Пародонтит - воспалительное заболевание тканей пародонта, характеризующееся прогрессирующим разрушением нормальной структуры альвеолярного отростка челюсти. При тяжелом течении пародонтита чаще всего обнаруживаются Porphyromonas gingivalis, Actinobacillus actinomycetemcomitans, Prevotella intermedia, Treponema denticola. Другая причина - травматическая, что, помимо анатомических особенностей и наличия ортодонтических конструкций, включает в себя неправильное использование зубной щетки. Для профилактики пародонтита необходимо соблюдение адекватного гигиенического режима. Как и в случае кариеса, пародонтит следует рассматривать не как инфекционный процесс, но как дисбиотический. Состояние пародонта в норме и пародонтите во многом зависит от функционирования нейтрофилов. Уничтожение бактерий нейтрофилами в норме происходит без развития активной фазы воспаления. Курение, плохая диета, физическое повреждение приводит к увеличению колонизации микробного сообщества бактерией Р. gingivalis, в результате нейтрофилы выходят в соединительную ткань, но не мигрируют в очаг инфекции, что ведет к усилению воспаления. В результате происходит дополнительное привлечение нейтрофилов в ткани и разрушение тканей ( Uriarte SM, 2016; Olsen I, 2017)
Таким образом, современные представления о патогенезе пародонтита описываются моделью «полимикробной синергии и дисбиоза»: ключевые микроорганизмы изменяют иммунный ответ в области пародонта, дополнительные патогены колонизируют ее, приводя к усилению воспаления. Здоровая микробиота околодесневой области обладает меньшим разнообразием по сравнению с пораженной пародонтитом. Сложные экологические отношения микробиоты полости рта не предполагают простых решений с заболеваемостью пародонтитом и требуют комплексного подхода ( Diaz P.L, 2016; Arweiler NB, 2016; Abiko Ύ, 2003; Campbell EH 2011).
Менее распространенными заболеваниями являются ксеростомия и стоматит. Ксеростомия - это сухость в ротовой полости, вызванная уменьшенным или полностью прекращенным слюноотделением. При ксеростомии возрастает риск возникновения инфекционных заболеваний полости рта, в том числе грибковых болезней. Стоматит - язвенное поражение слизистой оболочки полости рта, обусловленное реакцией иммунной системы на раздражители. Причиной его возникновения также считают местные факторы: несоблюдение гигиены полости рта. Заболевания желудочно-кишечного тракта, такие как гастрит, дуоденит, колит, а также глистная инвазия, могут быть причиной катарального стоматита. При этом заболевании слизистая оболочка рта становится отечной, болезненной, гиперемированной, она может быть покрыта белым или желтым налетом.
Для профилактики описанных патологий необходимо исключение вредных внешних факторов: нормализация диеты, отказ от курения, соблюдение принципов здорового образа жизни в целом и применение продуктов гигиены, обладающих комплексным воздействием - зубных паст, ополаскивателей, и др. К этим средствам предъявляются следующие требования: очищение поверхности зубов от налета, профилактика кариеса, профилактика гингивита и пародонтита (противовоспалительное действие).
Таким образом, у населения есть потребность в комплексном средстве, которое обеспечивало бы очищающий, осветляющий, противокариесный, противовоспалительный, десенситивный, иммуномодулирующий эффект и способствовало бы нормализации баланса микробиоты полости рта.
Авторы настоящего изобретения видят необходимость и возможность решения данной проблемы через создание инновационного комплекса «SP.WHITE SYSTEM» (альтернативное название «ВЮ SP.WHITE SYSTEM») для полости рта, состоящего из следующих компонентов:
Гидроксиапатит представляет собой минерал, позволяющий добиться реминерализации тканей зуба. Кроме того, ГАП способен закрывать дентинные канальцы в обнаженном дентине.
Усилитель очищающей способности представляет собой частицы, обеспечивающие мягкое очищение и полирующие эмаль зуба. В настоящем изобретении усилитель очищающей способности может быть представлен в виде силики (диоксида кремния), карбоната кальция, дикальция фосфата дигидрата, кальция пирофосфата, оксида алюминия, перлита, бикарбоната натрия, древесного угля, перекиси водорода, кальция пероксида, цитрата натрия, пирофосфата натрия, триполифосфата натрия, гексаметафосфата натрия, кальция пероксида.
Пленкообразователь представляет собой вещество, предотвращающее образование налета и окраски зубной эмали, а также удаляющее налет.
Бромелаин является смесью протеолитических ферментов, представляющих собой сульфгидрильные протеазы. Бромелаин расщепляет белки, входящие в состав зубного налета и в состав лизатов.
Лизаты микроорганизмов, ассоциированных со здоровым состоянием полости рта, выбранных из Bifidobacterium longum, Bifidobacterium bifidum и Bifidobacterium adolescentis и Lactobacillus casei, Streptococcus mutans, Streptococcus sanguinis, Veillonella parvula, Candida albicans и Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus fermentum, Lactobacillus bulgaricus, Sir. Thermophilus представляют собой фрагменты клеточных стенок и органелл бактерий и грибков, полученные путем химического, физического или биологического воздействия на эти микроорганизмы. Согласно исследованиям, проведенным авторами настоящего изобретения, указанные лизаты воздействуют на клетки иммунной системы через TLR-рецепторы, а также служат пребиотическим субстратом для благотворных микроорганизмов .
Синергия компонентов данного комплекса приводит к мощному усилению очищающего действия, а путем воздействия на микробиоту полости рта и восстановления гомеостаза иммунной системы обеспечивается профилактика заболеваний полости рта и поддержание субвоспалительного, то есть нормального статуса активации нейтрофилов. Все вышеперечисленное позволяет значительно улучшить свойства средств гигиены полости рта.
Композиции для полости рта, такие как зубные пасты, гели, эликсиры, бальзамы, мази, ополаскиватели, пенки, жевательные резинки, спреи предназначены для удаления зубного налета и/или предупреждения его образования.
В уровне техники раскрыто, что зубной налет представляет собой многокомпонентный, постоянно формирующийся биотоп полости рта, основу которого составляют практически все представители микрофлоры полости рта в конгломерате с протеинами и полисахаридами. Антигены этих микроорганизмов стимулируют активность факторов иммунобиологической резистентности организма. В процессе образования зубного налета происходит выраженное изменение состава микрофлоры. В первой фазе длительностью 2-4 часа образуется ранний зубной налет с преобладанием аэробных и факультативно-анаэробных бактерий: стрептококков, стафилококков, нейссерий и лактобактерий. Общее содержание бактерий составляет не более 100-1000 в 1 г. Во второй фазе (4-5-е сутки) происходит сдвиг аэробной и факультативно-анаэробной микрофлоры в сторону анаэробных лептотрихий и фузобактерий. Общее содержание бактерий увеличивается до 1-10 млн/г. В третьей фазе (6-7-е сутки и далее) заканчивается формирование качественного состава зубного налета, резко снижается содержание аэробов и факультативных анаэробов и преобладают облигатные анаэробы (бактероиды, фузобактерий, вейлонеллы, актиномицеты, пептострептококки), выделяющие комплекс токсических веществ, вызывающих разрушение IgA и IgG, резкий сдвиг pH в кислую сторону, что приводит к прогрессированию микробной инвазии, развитию кариеса и заболеваний пародонта.
Лечебно-профилактическая зубная паста, используемая для профилактики воспалительных заболеваний пародонта, известна из RU2494724C2 (опубл. 10.10.2013). Предлагаемая зубная паста содержит в качестве активных ингредиентов 0,001-5,0 мас.% лиофилизированной массы живых бифидобактерий, 0,01-5,0 мас.% лизоцима; 0,01-5,0 мас.% папаина; 2,00-20,00 мас.% абразивного компонента; 5,00-20,88 мас.% увлажнителя; 0,05-5,0 мас.% гидроколлоида; 0,10-2,00 мас.% ПАВ; 0,10-0,32 мас.% натрия фторида; 0,50-5,00 мас.% тетракалия пирофосфата; 0,15-0,40 мас.% консерванта; 0,05-1,50 мас.% ароматизатора; 30,00-87,029 мас.% воды.
Недостаток данной зубной пасты состоит в том, что живые бифидобактерии в составе зубной пасты нежизнеспособны, в том числе, по причине наличия в композиции консерванта. Следовательно, заявленный эффект не может быть реализован в коммерческих образцах средств гигиены, предназначенных для широкого потребления. Даже при условии жизнеспособности, бифидобактерии являются кислотопродуцирующими бактериями, что влечет риск деминерализации и появления кариотических изменений зубов. Кроме того, папаин, содержащийся в составе RU2494724C2, разрушает иммуноглобулины (один из ключевых факторов противоинфекционной защиты в полости рта) до менее крупных молекул, не обладающих полезным функционалом, что нарушает иммунитет полости рта.
Заявленный авторами настоящего изобретения комплекс отличается от RU2494724C2 тем, что содержит не лиофилизированную массу живых бифидобактерий, жизнеспособность которых в готовой композиции крайне мала, а лизат бактерий, который содержит антигены, уже подготовленные к распознаванию иммунной системой. В отличие от папаина, бромелаин, содержащийся в составе RU2494724C2, не разрушает молекулы иммуноглобулинов до мелких нефункциональных фрагментов {Matharu Z, 2012). Также заявленный комплекс содержит усилитель очищающей способности, CaMgZn-ГАП и
ПВП, в значительной мере увеличивающей полезные эффекты.
Из DE20200901 1379U1 (опубл. 30.12.2010) известно содержащее пробиотик средство для ухода за полостью рта, характеризующееся включением пробиотических культур из группы: Bacilli, Actinobacteria, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus casei, Lactobacillus crispatus, Lactobacillus gallinarum, Lactobacillus gasseri, Lactobacillus johnsonii, Lactobacillus paracasej, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus reuteri, Lactobacillus rhamnosus , Lactobacillus salvarius, Bifidobacterium anolescentis, Bifidobacterium animalis, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium breve, Bifidobacterium infantis, Bifidobacterium lactis, Bifidobacterium longum, Enterococcus faecalis, Enterococcus faecium, Lactococcus lactis, Leuc. Mesenteroides, Ped. Acidilactici, Sporolactobacillus inulinus, Streptococcus thermophilus, Bacilus cereus, Escherichia coli, Propionibacterium freudenreichii и Saccharomyces cerevisiae.
Раскрыто, что запах изо рта, не характерный для здорового состояния ротовой полости, вызван, в том числе, летучими соединениями серы, которые смешиваются с выдыхаемым воздухом. К ним относятся сероводород, 1,5-диаминопентан и метантиол. Эти вещества образуются, например, при бактериальном разложении пищевых остатков или в мертвых тканях. В качестве триггера запаха изо рта можно рассматривать локальные или системные факторы. В 80-90% случаев запах обусловлен локальными факторами, действующими либо в полости рта, либо в области носоглотки.
Среди патогенных бактерий ротовой полости особое значение имеет Streptococcus mutans.
Существуют различные способы борьбы с запахом изо рта. Для этой цели в препаратах для стоматологического ухода используются различные средства. Наиболее распространенными являются антибактериальные агенты (напр., триклозан, хлоргексидин). Стоматологические чистящие средства, доступные на рынке в различных формах, в первую очередь служат для очистки поверхности зубов и предотвращения их разрушения. Они обычно содержат комбинацию полирующих веществ, поверхностно-активных веществ, связующих веществ, ароматизаторов и активных антимикробных ингредиентов. Однако использование таких агентов может иметь недостатки в отдельных случаях из-за вкусовых характеристик, эстетической природы, проблем с устойчивостью терапии, нарушением естественной флоры полости рта. Раскрытое средство для ухода за полостью рта эффективно борется с запахом изо рта и не имеет таких недостатков.
Однако пробиотические культуры в составе обозначенного выше средства обладают очень коротким временем жизнеспособности, следовательно, заявленный эффект не может быть реализован в коммерческих образцах средств гигиены, предназначенных для широкого потребления, в частности, поскольку требуются особые условий хранения коммерческого продукта. Также, обозначенный комплекс не обладает очищающим эффектом.
Заявленный авторами комплекс отличается от DE20200901 1379U1 тем, что содержит не пробиотические культуры, жизнеспособность которых в готовой композиции крайне мала, а лизат бифидобактерий, который содержит антигены, уже подготовленные к распознаванию иммунной системой. Кроме того, заявленный комплекс содержит бромелаин, усилитель очищающей способности, CaMgZn-ГАП и ПВП, дополняющие свойства лизатов с целью эффективного очищения и реминерализации эмали зуба и усиления активности лизатов.
Из RU2496468C2 (опубл. 27.10.2013) известна зубная паста, содержащая лизат бактерий, изготовленная из следующих компонентов: 0,001-5,0 % мае. лизата бактерий Streptococcus pyogenes groupe A, Enterococcus faecium, Enterococcus faecalis, Streptococcus sanguis, Staphylococcus aureus subsp. aureus, Klebsiella pneumoniae subsp. pneumoniae, Corynebacterium pseudodiphtheriticum, Fusobacterium nucleatum subsp. nucleatum, Candida albicans, Lactobacillus acidophilius, Lactobacillus fermentum, Lactobacillus helveticus, Lactobacillus delbrueckii subsp. Lactus, 0,01 -5,0 % мае. лизоцима, 0,01-5,0 % мае. папаина, 2,00-20,00 %мас. абразивного компонента, 5,00- 20,88 % мае. увлажнителя, 0,05-5,0 % мае. гидроколлоида, 0,10-2,00 % мае. поверхностно-активного вещества, 0,05-0,32 % мае. натрия фторида, 0,50-5,00 % мае. тетракалия пирофосфата, 0,15-0,40 % мае. консерванта, 0,05-1 ,50 % мае. ароматизатора, 30,00-87,029 % мае. воды. Использование предлагаемой зубной пасты позволяет активировать фагоцитоз, увеличить содержание лизоцима слюны, способствует увеличению количества иммунокомпетентных клеток, обладает выраженным очищающим, противовоспалительным и кровоостанавливающим действием.
К отрицательным свойствам данной зубной пасты относится то, что лизаты бактерий, содержащиеся в ней, не ассоциированы со здоровым состоянием полости рта, а, следовательно, могут быть распознаны иммунной системой как чужеродные, что может усугубить имеющийся воспалительный процесс или привести к развитию воспаления. Это подтверждается эффектом данного состава - он увеличивает количество иммунокомпетентных клеток, что напрямую свидетельствует об усилении их миграции и реализации активного воспалительного процесса: увеличение «клеточности», то есть количества иммунокомпетентных клеток является надежным признаком развития воспаления.
Заявленный авторами комплекс отличается от RU2496468C2 тем, что содержит лизаты бактерий, целенаправленно модулирующих иммунный ответ в целях предотвращения развития воспалительного статуса, характерного для гингивита и пародонтита, а не для активации фагоцитоза. Также заявленный комплекс не увеличивает количество иммунокомпетентных клеток (что говорило бы об усилении воспаления), а способствует формированию адекватного баланса субпопуляций этих клеток. Кроме того, заявленный комплекс содержит бромелаин, усилитель очищающей способности, CaMgZn- ГАП и ПВП, обладающие синергическим эффектом. Из JP2004250374A (опубл. 27.10.2013) известна композиция, которая эффективна в отношении удаления налета и безопасна для человеческого организма. Такая композиция содержит молочнокислые бактерии или ферментационный раствор молочной кислоты и глюконат и/или олигосахарид. Могут быть использованы любые формы молочнокислых бактерий, например, порошкообразные лиофилизированные продукты. Примерами используемых молочнокислых бактерий являются Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus bulgaricus, Lactobacillus casei, Lactobacillus brandarum, Lactobacillus salivarius, Lactobacillus fermentum, Lactobacillus brevis, Lactobacillus buffner, Lactobacillus Cellobios, Streptococcus thermophilus, Streptococcus faecalis, Bifidobacterium longum, Bacillus coagulans и т.д. Ферментационный раствор молочной кислоты предпочтительно представляет собой ферментационный раствор, полученный ферментацией молочной кислоты с использованием молочнокислых бактерий в среде, содержащей лактозу или глюкозу в качестве основного компонента. Молочнокислые бактерии, используемые для ферментации молочной кислоты, могут быть любыми из молочнокислых бактерий, обычно используемых при производстве обычных молочнокислых напитков, ферментированного молока и т.п., а их примеры включают Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus bulgaricus, Lactobacillus casei, Lactobacillus Brantaram, Lactobacillus salivarius, Lactobacillus fermentum, Lactobacillus brevis, Lactobacillus buffner, Lactobacillus cellobios, Streptococcus thermophilus и тому подобное.
Недостаток данной композиции в том, что живые бактерии в составе зубной пасты нежизнеспособны и, следовательно, заявленный эффект не может быть реализован в коммерческих образцах средств гигиены, предназначенных для широкого потребления. Кроме того, даже при достижении жизнеспособности, данные молочнокислые бактерии будут создавать кислую среду вблизи поверхности зуба, что приведет к деминерализации и спровоцирует развитие кариотических изменений.
Заявленный комплекс отличается от JP2004250374A тем, что содержит не пробиотические культуры кислотопродуцирующих бактерий, жизнеспособность которых, к тому же, в готовой композиции крайне мала, а лизат бифидобактерий, который содержит антигены, уже подготовленные к распознаванию иммунной системой. Необходимо отметить, что бромелаин, усиливающий активность лизатов, а также реминерализующий эмаль CaMgZn-ГАП и ПВП с усилителем очищающей способности улучшают полезные свойства данного комплекса.
Из ЕА001741В1 (опубл. 27.08.2001) известна зубная паста или жидкость для полоскания рта, содержащая сфингомиелиназу для повышения уровней церамидов в коже и слизистых оболочках, причем используют сфингомиелиназу грам- положительных бактерий, грам-отрицательных бактерий, лактобактерий или их смесей. Лактобактерии выбирают из группы, включающей Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus brevis, Lactobacillus buchneri, Lactobacillus casei, Lactobacillus catenaforme, Lactobacillus cellobiosus, Lactobacillus crispatus, Lactobacillus curvatus, Lactobacillus delbrueckii, Lactobacillus fermentum, Lactobacillus jensenii, Lactobacillus leichmanii, Lactobacillus minutus, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus rogosae, Lactobacillus salivarius, Bifidobacterium adolescentis , Bifidobacterium angulatum, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium breve, Bifidobacterium catenulatum, Bifidobacterium dentium, Bifidobacterium eriksonii, Bifidobacterium infantis, Bifidobacterium longum, Bifidobacterium plantarum, Bifidobacterium pseudocatenulatum, Bifidobacterium pseudolongum, Streptococcus lactis, Streptococcus raffinolactus и Streptococcus thermophilus.
Тем не менее, данная зубная паста или жидкость не лишена недостатков. Так, сфингомиелиназа не обладает положительными эффектами в отношении слизистой, отражающимися в улучшении состояния полости рта, снижении риска кариеса, пародонтита и других заболеваний. Повышение количества церамидов может быть полезным в кожных покровах, где они участвуют в поддержании адекватного уровня гидратации эпидермиса, но не в слизистой.
Заявленный комплекс отличается от JP2004250374A тем, что содержит не сфингомиелиназу, которая не обладает положительными эффектами в отношении иммунной системы полости рта, а лизат бифидобактерий, включающий антигены, уже подготовленные к распознаванию иммунной системой. Кроме того, заявленный комплекс содержит бромелаин, усиливающий активность лизатов, а также обладающие синергизмом ПВП, усилитель очищающей способности и CaMgZn-ГАП.
Помимо композиций зубных паст, раскрытых в указанных выше патентных документах, некоторые пасты, содержащие лактобактерии, присутствуют на рынке.
Так, известна зубная паста N-Zim Prebio производства АртЛайф («Зубная паста N-Zim Prebio». Статья он-лайн. URL: <http://artlife-msk.ru/zubnaja-pasta-n-zim-prebio-lOO- gr>), содержащая сорбитол 70%, кремния диоксид Tixosil 73, кремния диоксид Tixosil 43, дикальций фосфат дигидрат, полиэтиленгликоль ПЭГ -400, натрия лаурилсаркозинат Amin LS 30, натрия карбоксиметилцеллюлозу, CEKOL 2000, ароматизатор Тусминт ВВМ 230, Д-пантенол, натрия лаурилсульфат, лизин, титана диоксид, папаин, натрия фторид, аминофторид Rona Care olaflur, аллантоин, натрия сахаринат, лизат лактобактерий, натрия метилпарабен, натрия пропилпарабен, стевиозид, горофит алоэ, воду деминерализованную. Однако, данная зубная паста содержит папаин, который разрушает иммуноглобулины (один из ключевых факторов противоинфекционной защиты в полости рта) до менее крупных молекул, не обладающих полезным функционалом, что нарушает иммунитет полости рта. Лизаты бактерий, содержащиеся в ней, не ассоциированы со здоровым состоянием полости рта.
Заявленный комплекс отличается от данной зубной пасты тем, что содержит лизаты бактерий, целенаправленно модулирующих иммунный ответ в целях предотвращения развития воспалительного статуса, характерного для гингивита и пародонтита. Кроме того усиление эффектов заявленного комплекса достигается наличием в его составе усилителя очищающей способности, CaMgZn-ГАП и ПВП, а также бромелаина, не разрушающего иммуноглобулины до мелких фрагментов.
Известна зубная паста PerioBiotic Toothpaste производства Designs For Health Inc. («Designs For Health PerioBiotic Toothpaste - Spearmint Flavor». Статья он-лайн. <URL: http:// https://www.needs.com/product/Designs_For_Health_PerioBiotic_Toothpaste_Spearmint_Flavo r_H8/pc_Toothpaste>), содержащая воду, карбонат кальция, глицерофосфат кальция, глицерин, ксилит, бикарбонат натрия, масло мяты ( Foeniculum Vulgare), каррагенан, мальтодекстрин, Dental-Lac™ ( Lactobacillus paracasei ), сорбат калия, порошок юкки (Y. filamentosa ), экстракт листьев стевии ( Eupatorium rebaudianum bertoni ), хлорид цинка. Раскрыто, что Dental-Lac конкурирует с нежелательными штаммами бактерий в полости рта, включая S. mutans, тем самым помогая поддерживать здоровье зубов и десен.
Недостаток данной зубной пасты в том, что живые бактерии Dental-Lac™ ( Lactobacillus paracasei) в составе зубной пасты не могут быть жизнеспособны и, следовательно, заявленный эффект не может быть реализован в коммерческих образцах средств гигиены, предназначенных для широкого потребления.
Заявленный комплекс отличается тем, что содержит не пробиотические культуры, а лизат бифидобактерий, который содержит антигены, уже подготовленные к распознаванию иммунной системой. Активность лизатов интенсифицируется бромелаином, усилителем очищающей способности, CaMgZn-гидроксиапатитом и ПВП.
Таким образом, в уровне техники отсутствуют решения сведения о комбинированном средстве на основе протеолитического фермента бромелаина, лизата бактерий, усилителя очищающей способности, ПВП и CaMgZn-ГАП, позволяющих добиться значительного синергического действия, заключающегося в усилении очищения, противовоспалительного, противокариесного, иммуномодулирующего эффекта и коррекции микробиоты полости рта. Компоненты, входящие в состав заявленного комбинированного средства, проявляют синергетическое действие, что подтверждается далее.
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Настоящее изобретение, в целом, относится к композиции для применения в полости рта, содержащей комбинацию протеолитического фермента бромелаина и лизата бактерий.
В одном воплощении изобретение представляет собой композицию для применения в полости рта, содержащую комбинацию протеолитического фермента бромелаина и лизата бактерий.
В другом воплощении лизат бактерий может представлять собой лизат бифидобактерий.
В дополнительном воплощении лизат бифидобактерий может представлять собой лизат Bifidobacterium longum, Bifidobacterium bifidum и Bifidobacterium adolescentis .
В другом воплощении лизат бактерий может представлять собой лизат
Lactobacillus casei, Streptococcus mutans, Streptococcus sanguinis, Veillonella parvula и Candida albicans.
В другом воплощении лизат бактерий может представлять собой лизат
Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus fermentum, Lactobacillus bulgaricus и Sir. Thermophilus.
В другом воплощении композиция по изобретению может содержать 0,005-0,2 % мае. протеолитического фермента бромелаина.
В другом воплощении композиция по изобретению может содержать 0,05-1,5 % мае. лизата бактерий.
В другом воплощении композиция по изобретению может дополнительно содержать усилитель очищающей способности, который может быть выбран из группы: силика (диоксид кремния), карбонат кальция, дикальция фосфат дигидрат, кальция пирофосфат, оксид алюминия, перлит, бикарбонат натрия, древесный уголь, перекись водорода, кальция пероксид, цитрат натрия, пирофосфат натрия, триполифосфат натрия, гексаметафосфат натрия, кальция пероксид и их смеси.
В другом воплощении композиция по изобретению может дополнительно содержать гидроксиапатит, который может быть выбран из группы: гидроксиапатит, обогащенный кальцием, магнием и цинком.
В другом воплощении композиция по изобретению может дополнительно содержать пленкообразуюший компонент (пленкообразователь), который может быть выбран из группы: поливинилпирролидон, поливиниловый спирт, воскоподобные вещества и их смеси.
В другом воплощении композиция по изобретению может дополнительно содержать пленкообразователь, усилитель очищающей способности, гидроксиапатит и вспомогательные вещества, % мае.:
протеолитический фермент бромелаин 0,005-0,2,
лизат бактерий 0,05-1,5,
пленкообразователь 0,3 -1,0,
усилитель очищающей способности 2, 5-5,0,
гидроксиапатит 0,1-10,0,
вспомогательные вещества до 100.
В другом воплощении композицию применяется в полости рта для лечения заболеваний зубов, десен и/или полости рта, которые выбраны из гингивита, глоссита, кариеса и ксеростомии, посттравматических воспалений, вызванных ортодонтическими конструкциями
В другом воплощении композиция может находиться в форме зубной пасты, геля, эликсира, бальзама, спрея, пенки, жевательных резинок, или ополаскивателя.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ
На Фиг. 1. представлены данные о разнообразии микробиоты десневой жидкости.
На Фиг. 2. представлены данные о различных видах микроорганизмов по окончании исследования в экспериментальных группах.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
В данной области техники существует потребность в предоставлении альтернатив имеющимся на рынке средствам для ухода за полостью рта, для использования в полости рта, таким как зубные пасты и другие формы. Расширение арсенала таких средств за счет заявленного средства позволит преодолеть существующие трудности и недостатки, известные специалистам в данной области техники, и выйти на новый уровень очистки зубов, профилактики и лечения воспалительных состояний.
Авторы неожиданно обнаружили, что вещества, входящие в состав лизатов бактерий Bifidobacterium longum, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium adolescentis и Lactobacillus casei, Streptococcus mutans, Streptococcus sanguinis, Veillonella parvula, Candida albicans и Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus fermentum, Lactobacillus bulgaricus, Sir. Thermophilus обладают противовоспалительными свойствами. Этот эффект достигается за счет индукции противовоспалительного иммунного ответа ( Bifidobacterium longum, Veillonella parvula, Lactobacillus bulgaricus, Str. Thermophilus), формирования иммунного ответа к кариесогенным и другим патогенным видам микроорганизмов (Bifidobacterium bifidum, Lactobacillus casei, Streptococcus mutans, Candida albicans, Lactobacillus acidophilus) и действия бактериоцинов, содержащихся в составе лизатов пробиотических бактерий (Bifidobacterium adolescentis, Streptococcus sanguinis, Lactobacillus fermentum).
Обнаружено влияние бифидобактерий на иммунитет слизистых. Однако, некоторые виды бифидобактерий являются так называемой аллохтонной, или «транзитной» микрофлорой, т.е. не колонизируют слизистые оболочки, в то же время успевая оказывать регулирующее действие на иммунную систему во время прохождения. В ротовой полости присутствие живых бифидобактерий также нежелательно, поскольку этот род относится к кислотоустойчивым видам, ассоциированным с кариесом. Поскольку положительная роль бифидобактерий в любом случае опосредована компонентами их клеточной стенки (мембраны) и внутриклеточных структур, рациональным является применение не живых бактерий, а их лизатов. Все вышеперечисленное также обуславливает необходимость постоянного или длительного применения продуктов, содержащих бактериальные лизаты.
Механизм противовоспалительного действия лизатов на слизистых связывают с расширением популяции регуляторных Т-лимфоцитов (Treg), в частности, это было продемонстрировано для В. longum на клетках кишечника. Изменение состава субпопуляций лимфоцитов сопровождалось подавлением синтеза провоспалительных цитокинов TNFa и МСР-1, IL-12 и IFNy, увеличением «противовоспалительного» цитокина IL-10. В культурах клеток В. longum subsp. inf antis JCM 1222T также подавлял продукцию IL-17A.
Противовоспалительный эффект лизатов первоначально реализуется при распознавании их мембранных структур TLR2 и Т1Л9-рецепторами иммунных клеток и Nod-рецепторами. Одним из следствий этого является сохранение плотных контактов между клетками (вероятно, за счет ингибирования синтеза TNFa) и противодействие апоптозу клеток слизистой за счет увеличения синтеза циклооксигеназы СОХ-2 и простагландина PGE(2).
Помимо компонентов клеточной стенки противовоспалительное действие было продемонстрировано и для секретируемых компонентов Bifidobacterium longum, Veillonella parvula, Lactobacillus bulgaricus, Str. Thermophilus, отчасти за счет регуляции состава микробиоты и снижения степени перекисного окисления липидов.
Исследований в данной области техники, посвященных действию лизатов на слизистую оболочку полости рта, крайне мало. Установлено, что В. bifidum может подавлять воспаление, вызванное механической травмой слизистой полости рта, а также снижать риск колонизации С. albicans при использовании зубных протезов.
Таким образом, использование лизатов бактерий для профилактики и коррекции состояний, связанных с воспалительными процессами в слизистой оболочке ротовой полости, представляется целесообразным.
Авторы неожиданно обнаружили, что вещества, входящие в состав лизатов (смеси) бактерий Lactobacillus casei, Streptococcus mutans, Streptococcus sanguinis, Veillonella parvula и Candida albicans, Lactobacillus bulgaricus, Str. Thermophilus также обладают противовоспалительными свойствами. Этот эффект также достигается за счет индукции противовоспалительного иммунного ответа.
Таким образом, использование лизатов бактерий Lactobacillus casei, Streptococcus mutans, Streptococcus sanguinis, Veillonella parvula и Candida albicans, Lactobacillus bulgaricus, Str. Thermophilus для профилактики и коррекции состояний, связанных с воспалительными процессами в слизистой оболочке ротовой полости, также представляется целесообразным.
Авторы также неожиданно обнаружили, что комбинации лизатов бактерий Bifidobacterium longum, Bifidobacterium bifidum и Bifidobacterium adolescentis и Lactobacillus casei, Streptococcus mutans, Streptococcus sanguinis, Veillonella parvula, Candida albicans или Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus fermentum, Lactobacillus bulgaricus, Str. Thermophilus и протеолитического фермента бромелаина обладают синергетическим действием, что подтверждается далее в неограничивающих примерах.
Авторы также неожиданно обнаружили, что комбинации лизатов бактерий Bifidobacterium longum, Bifidobacterium bifidum и Bifidobacterium adolescentis и Lactobacillus casei, Streptococcus mutans, Streptococcus sanguinis, Veillonella parvula, Candida albicans или Lactobacillus casei, Streptococcus mutans, Streptococcus sanguinis, Veillonella parvula, Candida albicans, и протеолитического фермента бромелаина, и пленкообразователя обладают синергетическим действием, что подтверждается далее в неограничивающих примерах.
Авторы также неожиданно обнаружили, что сочетание бромелаина и лизата таких бактерий потенцирует их совместное действие, приводя к синергетическому взаимодействию и противовоспалительному действию, а также способствует установлению баланса микробиоты полости рта, характерного для здорового состояния, что подтверждается далее в неограничивающих примерах.
Некоторые воплощения заявленного изобретения раскрыты далее. В одном воплощении заявленное изобретение представляет собой композицию для применения в полости рта, содержащую комбинацию протеолитического фермента бромелаина и лизата бактерий.
В другом воплощении лизат бактерий может представлять собой лизат бифидобактерий.
В дополнительном воплощении лизат бифидобактерий может представлять собой лизат Bifidobacterium longum, Bifidobacterium bifidum и Bifidobacterium adolescentis.
В другом воплощении лизат бактерий может представлять собой лизат
Lactobacillus casei, Streptococcus mutans, Streptococcus sanguinis, Veillonella parvula и Candida albicans.
В другом воплощении лизат бактерий может представлять собой лизат
Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus fermentum, Lactobacillus bulgaricus, Sir. Thermophilus.
В другом воплощении композиция по изобретению может содержать 0,005-0,2 % мае. протеолитического фермента бромелаина, предпочтительно 0,05-0,20 % мае., более предпочтительно 0,1 % мае.
В другом воплощении композиция по изобретению может содержать 0,05-1,5 % мае. лизата бактерий, предпочтительно 0, 5-1,0 % мае., более предпочтительно 0,7 % мае.
В другом воплощении композиция по изобретению может дополнительно содержать усилитель очищающей способности, представляющие собой силику (диоксид кремния), карбонат кальция, дикальция фосфат дигидрат, кальция пирофосфат, оксид алюминия, перлит, бикарбонат натрия, древесный уголь, перекись водорода, кальция пероксид, цитрат натрия, пирофосфат натрия, триполифосфат натрия, гексаметафосфат натрия, кальция пероксид.
Указанные ингредиенты являются традиционно используемыми в зубных пастах. Композиция по изобретению может содержать усилитель очищающей способности в количестве 2, 5-5,0 % мае., предпочтительно 3, 5-4,0 % мае., более предпочтительно 3,7 % мае.
В другом воплощении композиция по изобретению может дополнительно содержать гидроксиапатит. Указанный ингредиент является традиционно используемым в зубных пастах. Композиция по изобретению может содержать гидроксиапатит, обогащенный кальцием, магнием и цинком CaMgZn в количестве 0,1-10,0 % мае., предпочтительно 1, 0-8,0 % мае., более предпочтительно 3, 0-6,0 % мае., наиболее предпочтительно 5,0 % мае.
В другом воплощении композиция по изобретению может дополнительно содержать пленкообразователь, предпочтительно поливинилпирролидон. Указанный ингредиент является традиционно используемым в зубных пастах. Композиция по изобретению может содержать пленкообразователь в количестве 0,3- 1,0 % мае., предпочтительно 0,5-0, 8 % мае., более предпочтительно 0,7 % мае.
В другом воплощении композиция по изобретению может содержать:
протеолитический фермент бромелаин 0,005-0,2,
лизат бактерий 0,05-1,5,
пленкообразователь 0,3 - 1 ,0,
усилитель очищающей способности 2, 5-5,0,
гидроксиапатит 0,1-10,0,
вспомогательные вещества до 100.
Указанные вспомогательные вещества являются традиционно используемыми в данной области, например, нейтральными носителями, целевыми добавками, фармацевтически приемлемыми вспомогательными веществами, веществами для создания базы или основы композиции или готовой формы.
В другом воплощении композицию применяют в полости рта для лечения заболеваний зубов, десен и/или полости рта, которые могут быть выбраны из гингивита, кариеса и ксеростомии.
В другом воплощении композиция по изобретению может быть включена в зубную пасту. Такая зубная паста может применяться для профилактики и лечения воспалительных состояний в полости рта, таких как, но без ограничения, гингивит, глоссит, кариес, ксеростомия, постравматические воспаления, вызванных ортодонтическими конструкциями.
В другом воплощении изобретение может относиться к применению композиции в способе профилактики и/или лечения заболеваний зубов, десен и/или полости рта.
В другом воплощении изобретение может представлять собой способ профилактики и/или лечения заболеваний зубов, десен и/или полости рта, включающий применение такой зубной пасты.
Использование лизата Bifidobacterium longum, Bifidobacterium bifidum и Bifidobacterium adolescentis или Lactobacillus casei, Streptococcus mutans, Streptococcus sanguinis, Veillonella parvula, Candida albicans позволяет нормализовать воспалительный статус тканей ротовой полости и восстановить соотношение микроорганизмов, характерное для здоровой ротовой полости. Целенаправленное введение бактериального лизата Bifidobacterium longum, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium adolescentis или Lactobacillus casei, Streptococcus mutans, Streptococcus sanguinis, Veillonella parvula, Candida albicans в состав комплекса позволяет производить эффективную профилактику одновременно гингивита, пародонтита, ксеростомии, кариеса, бактериальных, грибковых и вирусных инфекций слизистой ротовой полости, языка, верхних дыхательных путей, галитоза, глоссита, посттравматических воспалений, вызванных ортодонтическими конструкциями и других заболеваний, вовлекающих иммунную систему и микробиоту ротовой полости и верхних дыхательных путей.
ПРИМЕРЫ
Включенные в настоящее описание примеры не являются ограничивающими заявленное изобретение и приведены лишь с целью иллюстрации и подтверждения достижения ожидаемых технических результатов. Эти примеры являются одними из многих экспериментальных данных, полученных авторами изобретения, которые подтверждают эффективность средств, находящихся в пределах объема изобретения.
Были проведены клинические исследования по оценке эффективности.
Пример 1.
В экспериментальных группах пациенты использовали следующие композиции, которые в качестве активных компонентов включали заявленный комплекс, содержащий бромелаин и бактериальные лизаты в процентном содержании 0,005 и 0,05 % мае (Таблица N° 1), а также пленкообразователь (поливинилпирролидон) - 0,3% мае, усилитель очищающей способности (диоксид кремния) - 2,5% мае, гидроксиапатит (гидроксиапатит, обогащенный кальцием, магнием и цинком) в виде 10% суспензии - 0,1% мае.
Таблица » 1. Исследуемые группы
Figure imgf000019_0001
В качестве базы для включения компонентов применялась зубная паста с составом, приведенным в Таблице N°2. Таблица JVe 2. Состав базы зубной пасты
Figure imgf000020_0001
Проведено проспективное рандомизированное двойное слепое исследование на 200 субъектах (107 мужчин и 93 женщины), рандомизированных в четыре равные половозрастные группы. Пациенты применяли композиции в виде зубной пасты 2 раза в день на протяжении 6 недель.
Параметром для оценки эффективности действия препаратов выступал средний индекс кровоточивости десен (GBI), определяемый врачом-стоматологом. Также определяли изменения локального иммунитета, оценивая количество дефензинов hBD-l и hBD-2 в десневой жидкости, отобранной в течение 30 секунд.
Для всех количественных данных вычисляли групповое среднее арифметическое (М), медиану (Me), стандартное отклонение (SD) и стандартную ошибку среднего (SEM), интерквартильные размахи, 90%ДИ. Полученные результаты обрабатывали с помощью ПО IBM SPSS Statistics 22.0 (StatSoft, Россия). Вероятность различий показателей средних в группах определяли с использованием критерия Манна-Уитни. Различия считали достоверными при уровне значимости р<0,05.
Результаты.
Через 6 недель после начала исследования наблюдали выраженные изменения оцениваемых показателей в группах исследования. В группе 1 , применявшей композицию с комплексом, содержащим лизат бифидобактерий и бромелаин, значение GBI на конец исследования его значение составило 0,04±0,02, что меньше по сравнению с начальными показателями (0,16±0,03; Р=0,014). В группе 2 и 3, применявшей композицию с лизатом бифидобактерий и лактобактерий соответственно, было отмечено менее выраженное изменение GBI, на конец исследования его значение составило 0,10±0,03 и 0,09±0,04 по сравнению с начальными показателями (0,15±0,03; Р=0,023), в то время как в группе 4, применявшей композицию с бромелаином, подобных изменений не наблюдалось - GBI на начало исследования составлял 0,16±0,02, по завершении исследования - 0,12±0,04; Р=0,43.
Таблица ^ 3. Значения GBI в исследуемых группах
Figure imgf000021_0001
Таким образом, использование пасты с комплексом, содержащим бромелаин и лизат бифидобактерий или бромелаин и лизат Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus fermentum, Lactobacillus bulgaricus и Str. Thermophilus привело к уменьшению выраженности гингивита, причем данный эффект был более выражен, чем при использовании лизата бифидобактерий и бромелаина по отдельности, что говорит о синергизме действия обоих компонентов.
Применение пасты с заявленным комплексом также привело к снижению концентраций дефензинов в десневой жидкости, что свидетельствует о нормализации локального иммунного ответа.
Таблица N° 4. Суммарная концентрация дефензинов hBD-l и hBD-2 в десневой жидкости, собранной за 30 секунд, в исследуемых группах, пг/мл
Figure imgf000021_0002
Поскольку бромелаин является протеазой, полученный эффект можно объяснить тем, что под его действием становятся доступными новые эпитопы белковых антигенов, входящих в состав лизата бифидобактерий, лизата Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus fermentum, Lactobacillus bulgaricus и Sir. Thermophilus или лизата Lactobacillus casei, Streptococcus mutans, Streptococcus sanguinis, Veillonella parvula и Candida albicans, что позволяет дополнительно стимулировать иммунные клетки, осуществляющие регуляторные реакции в отношении воспалительного процесса.
Пример 2.
В экспериментальных группах пациенты использовали следующие композиции, которые в качестве активных компонентов включали бромелаин и лизат Lactobacillus casei, Streptococcus mutans, Streptococcus sanguinis, Veillonella parvula и Candida albicans в процентном содержании 0,005 и 0,05% (Таблица JV 5). . Исследуемые группы
Figure imgf000022_0001
В качестве базы для включения компонентов применялась зубная паста с составом, приведенным в Таблице N» 2 (Пример 1).
Проведено проспективное рандомизированное двойное слепое исследование на 150 субъектах (74 мужчины и 76 женщин), рандомизированных в три равные половозрастные группы. Пациенты применяли композиции в виде зубной пасты 2 раза в день на протяжении 6 недель.
Параметром для оценки эффективности действия препаратов выступал средний индекс кровоточивости десен (GBI), определяемый врачом-стоматологом. Кроме этого, определялся состав микробиоты в десневом кармане. Для всех количественных данных вычисляли групповое среднее арифметическое (М), медиану (Me), стандартное отклонение (SD) и стандартную ошибку среднего (SEM), интерквартильные размахи, 90%ДИ. Полученные результаты обрабатывали с помощью ПО IBM SPSS Statistics 22.0 (StatSoft, Россия). Вероятность различий показателей средних в группах определяли с использованием критерия Манна-Уитни. Различия считали достоверными при уровне значимости р<0,05.
Результаты.
Через 6 недель после начала исследования наблюдали выраженные изменения оцениваемых показателей в группах исследования. В группе 1, применявшей композицию с комплексом лизат Lactobacillus casei, Streptococcus mutans, Streptococcus sanguinis, Veillonella parvula и Candida albicans и бромелаин, значение GBI на конец исследования его значение составило 0,03±0,02, что меньше по сравнению с начальными показателями (0,17±0,03; Р=0,01). В группе 2, применявшей композицию с лизатом Lactobacillus casei, Streptococcus mutans, Streptococcus sanguinis, Veillonella parvula и Candida albicans, было отмечено менее выраженное изменение GBI, на конец исследования его значение составило 0,09±0,03 по сравнению с начальными показателями (0,17±0,03; Р=0,03), в то время как в группе 3, применявшей композицию с бромелаином, подобных изменений не наблюдалось - GBI на начало исследования составлял 0,16±0,04, по завершении исследования - 0,13±0,02; Р=0,18.
Таблица N° 6. Значения GBI в исследуемых группах
Figure imgf000023_0001
Таким образом, использование пасты с комплексом бромелаин и лизат Lactobacillus casei, Streptococcus mutans, Streptococcus sanguinis, Veillonella parvula и Candida albicans привело к уменьшению выраженности гингивита, причем данный эффект был более выражен, чем при использовании лизата бифидобактерий и бромелаина по отдельности, что говорит о синергизме действия обоих компонентов.
При анализе состава микробиоты были выявлены следующие особенности.
После применения зубной пасты с комплексом бромелаин и лизат Lactobacillus casei, Streptococcus mutans, Streptococcus sanguinis, Veillonella parvula и Candida albicans было отмечено снижение разнообразия микробиоты в десневой жидкости. Это свидетельствует об улучшении сдерживающих факторов иммунитета и установлении микроокружения, неблагоприятного для колонизации патогенными микроорганизмами. В частности, уменьшилась представленность родов Anaeroglobus, Bulleidia, Desulfobulbus, Filifactor, Mogibacterium, Phocaeicola, Schwartzia или TM7, ассоциируемых с развитием гингивита и пародонтита (Фиг. 1).
В сравнении с группами 2 и 3, у группы 1, применявшей композицию с комплексом бромелаин и лизат Lactobacillus casei, Streptococcus mutans, Streptococcus sanguinis, Veillonella parvula и Candida albicans, по завершении исследования выявлено увеличение представленности родов Capnocytophaga, Corynebacterium, Gemella, Haemophilus, Leptotrichia, Streptococcus и Veillonella, ассоциируемых со здоровым состоянием полости рта, в частности, видов Capnocytophaga ochracea, Eubacterium saburreum, Fusobacterium nucleatum, Haemophilus egyptius, Haemophilus infuenzae, Kingella oralis, Mogibacterium vescum, Mycoplasma salivarium, Neisseria canis, Porphyromonas catoniae, Prevotella oris, Propionibacterium acnes, Propionivibrio pelophilus, Rothia dentocariosa, Streptococcus sanguinis, Treponema socranskii, про которые известно, что представленность их на 20% выше у здоровых лиц, чем у страдающих периодонтитами (Фиг. 2).
Таким образом, применение комплекса бромелаин и лизат Lactobacillus casei, Streptococcus mutans, Streptococcus sanguinis, Veillonella parvula и Candida albicans позволяет добиться нормализации состава микробиоты ротовой полости со смещением представленности видов в направлении, характерном для здорового состояния ротовой полости. Особую важность это представляет в связи с тем, что под действием комплекса снижается представленность видов, наличие которых при воспалительном процессе в ротовой полости (гингивит, пародонтит) ассоциировано с развитием патологии сердечно- сосудистой системы (атеросклероз, ишемическая болезнь сердца, инфаркт миокарда, острый коронарный синдром), что позволяет предполагать потенциальное уменьшение риска развития данных заболеваний при применении комплекса.
Пример 3.
Проведено проспективное рандомизированное двойное слепое исследование на 100 детях 6-9 лет (57 мальчиков и 43 девочки), рандомизированных в две равные половозрастные группы. На протяжении 52 недель группа А чистила зубы дважды в день зубной пастой, содержащей бромелаин и лизат Bifidobacterium longum, Bifidobacterium bifidum и Bifidobacterium adolescentis по изобретению. Группа Б чистила зубы дважды в день зубной пастой, содержащей бромелаин и лизат Lactobacillus casei, Streptococcus mutans, Streptococcus sanguinis, Veillonella parvula, Candida albicans по изобретению. Группа В чистила зубы дважды в день зубной пастой, содержащей бромелаин и лизат Lactobacillus casei, Streptococcus mutans, Streptococcus sanguinis, Veillonella parvula, Candida albicans по изобретению. Группа Г чистила зубы дважды в день зубной пастой, аналогичной по составу применяемой группой А, Б, В, но не содержащей лизата и бромелаина. Оценивали риск увеличения количества кариозных изменений в группах до и после использования зубных паст. В группе А было отмечено снижение относительного риска увеличения кариозных поражений до значения 0,87 по сравнению с группой Г. В группе Б было отмечено снижение относительного риска увеличения кариозных поражений до значения 0,79 по сравнению с группой Г. В группе В было отмечено снижение относительного риска увеличения кариозных поражений до значения 0,83 по сравнению с группой Г. Таким образом, использование пасты с лизатом и бромелаином привело к уменьшению риска развития кариеса.
Пример 4.
Проведено проспективное рандомизированное двойное слепое исследование на 75 субъектах старшего возраста, страдающих ксеростомией. На протяжении 4 недель группа А (25 человек) чистила зубы дважды в день зубной пастой, содержащей бромелаин и лизат Bifidobacterium longum, Bifidobacterium bifidum и Bifidobacterium adolescentis no изобретению. Группа Б (25 человек) чистила зубы дважды в день зубной пастой, содержащей бромелаин и лизат Lactobacillus casei, Streptococcus mutans, Streptococcus sanguinis, Veillonella parvula, Candida albicans no изобретению. Группа В (25 человек) чистила зубы дважды в день зубной пастой, содержащей бромелаин и лизат Lactobacillus casei, Streptococcus mutans, Streptococcus sanguinis, Veillonella parvula, Candida albicans no изобретению. Группа Г (25 человек) чистила зубы дважды в день зубной пастой, аналогичной по составу применяемой группой А, Б, В, но не содержащей лизата и бромелаина. Результаты фиксировались по стандартному опроснику для лиц, страдающих ксеростомией. В конце периода исследования улучшение состояния ротовой полости отметили 13 человек из группы А, 14 человек из группы Б, и 13 человек из группы В, по сравнению с 6 исследуемыми из группы Г. Таким образом, использование пасты с лизатами способствовало снижению симптомов, ассоциированных с ксеростомией.
Пример 5.
Проведено проспективное рандомизированное двойное слепое исследование на 60 субъектах (33 мужчины и 27 женщин), рандомизированных в три равные половозрастные группы. На протяжении шести недель группа А чистила зубы дважды в день зубной пастой, содержащей бромелаин и лизат Bifidobacterium longum, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium adolescentis по изобретению. Группа Б чистила зубы дважды в день зубной пастой, содержащей бромелаин и лизат Lactobacillus casei, Streptococcus mutans, Streptococcus sanguinis, Veillonella parvula, Candida albicans по изобретению. Группа В чистила зубы дважды в день зубной пастой, содержащей бромелаин. Группа Г чистила зубы дважды в день зубной пастой, содержащей лизат Bifidobacterium longum, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium adolescentis . Группа Д чистила зубы дважды в день зубной пастой, содержащей бромелаин и лизат Lactobacillus casei, Streptococcus mutans, Streptococcus sanguinis, Veillonella parvula, Candida albicans по изобретению. Оценивали средний индекс кровоточивости десен (GBI) в группах до и после использования зубных паст. Использование всех паст привело к уменьшению выраженности гингивита, однако эффективность в группах А, Б и Д была значительно выше, чем в группах В и Г.
Пример 6.
Проведено проспективное рандомизированное двойное слепое исследование на 100 субъектах (52 мужчины и 48 женщин), рандомизированных в три равные половозрастные группы. На протяжении шести недель группа А чистила зубы дважды в день зубной пастой, содержащей бромелаин, лизат Bifidobacterium longum, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium adolescentis и поливинилпирролидон по изобретению. Группа Б чистила зубы дважды в день зубной пастой, содержащей бромелаин и поливинилпирролидон. Группа В чистила зубы дважды в день зубной пастой, содержащей лизат Bifidobacterium longum, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium adolescentis и поливинилпирролидон. Группа Г чистила зубы дважды в день зубной пастой, содержащей бромелаин и лизат Bifidobacterium longum, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium adolescentis no изобретению. Оценивали средний индекс кровоточивости десен (GBI) в группах до и после использования зубных паст. Использование всех паст привело к уменьшению выраженности гингивита, однако эффективность в группе А была выше, чем в группе Г, и в общем выше, чем в группах Б и В.
Пример 7.
Проведено проспективное рандомизированное двойное слепое исследование на 60 субъектах (30 мужчины и 30 женщин), рандомизированных в три равные половозрастные группы. На протяжении шести недель группа А ежедневно после каждого приема пищи и чистки зубов применяла ополаскиватель, содержащий комплекс, включающий в состав лизат Bifidobacterium longum, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium adolescentis. Группа Б применяла ополаскиватель, содержащий бромелаин и поливинилпирролидон. Группа В применяла ополаскиватель, содержащий лизат Bifidobacterium longum, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium adolescentis и поливинилпирролидон. Оценивали средний индекс кровоточивости десен (GBI) в группах до и после использования ополаскивателя. Использование всех ополаскивателей привело к уменьшению выраженности гингивита, однако эффективность в группе А была выше, чем в группах Б и В.
Пример 8
Способ получения композиции по изобретению включает следующие этапы.
1) Получение бромелаина:
К двум образцам по 250 г измельченной массы верхушек ананаса добавляют по 500 мл воды или 0,05 М раствора бикарбоната аммония и проводят дальнейшее измельчение и экстракцию в гомогенизаторе. Полученную массу отжимают через несколько слоев марли, центрифугируют при 5500 об/мин и супернатант лиофильно высушивают. Получают по 4 г препарата бромелаина с активностью 1,1 и 1,2 ед/мг белка при использовании в качестве экстрагента воды и 0,05М раствора бикарбоната аммония соответственно.
2) Получение лизатов:
Бактерии Lactobacillus casei, Streptococcus mutans, Streptococcus sanguinis, Veillonella parvula и грибок Candida albicans культивируют в стандартных условиях до получения концентрации 10л5 КОЕ/мл. Культуры отмывают трехкратно центрифугированием при 3000 об/мин в течение 10 минут и концентрируют в 10 раз. Проводят термоинактивацию микроорганизмов проводят при 80 °С в течение 30 минут. Для дезинтеграции и получения компонентов клеточной стенки и органелл микроорганизмы разрушают с помощью ультразвука (четырехкратное озвучивание, время озвучивания - 5 мин, время паузы между импульсами - 60 с, амплитуда - 9 мкм). После разрушения лизат осветляют центрифугированием в течение 20 минут при 3000 об/мин на холоде, компоненты бактериальных клеток осаждают центрифугированием при 20000 g в течение 1 часа при охлаждении. Осадок промывают в том же режиме и ресуспендируют в стерильном физиологическом растворе.
Полученные бромелаин и лизаты вводят в состав композиции в соответствии с технологической картой производства.
Таким образом в материалах заявки было подтверждено достижение всех ожидаемых результатов, продемонстрирована высокая эффективность заявленного средства и его промышленная применимость.
Список литературы:
1. АЫко Y, Nishimura М, Каки Т. Defensins in saliva and the salivary glands. Med Electron Microsc. 2003;36(4):247-52.
2. Acharya A, Chan Y, Kheur S et al. Salivary microbiome in non-oral disease: A summary of evidence and commentary. Arch Oral Biol. 2017;83:169-173. 3. Anveiler NB, Netuschil L. The Oral Microbiota. Microbiota Hum. body, Springer International Publishing; 2016, p. 45-60.
4. Campbell EL, Serhan CN, Colgan SP. Antimicrobial aspects of inflammatory resolution in the mucosa: a role for proresolving mediators. J Immunol. 2011;187(7):3475-81.
5. Diaz P.I., Hoare A., Hong B.Y. Subgingival Microbiome Shifts and Community Dynamics in Periodontal Diseases. Journal of the California Dental Association, 2016;44(7):421-435.
6. Gomez A, Nelson KE. The Oral Microbiome of Children: Development, Disease, and Implications Beyond Oral Health. Microb Ecol. 2017; 73(2):492-503.
7. Huang R, Li M, Gregory RL. Bacterial interactions in dental biofilm. Virulence. 2011; 2(5): 435-444.
8. Kinane DF, Stathopoulou PG, Papapanou PN. Periodontal diseases. Nat Rev Dis Primers. 2017;3:17038.
9. Mark Welch J.L. et al. Biogeography of a human oral microbiome at the micron scale. PNAS 2016; 113(6): E791-E800.
10. Marsh PD, Head DA, Devine DA. Ecological approaches to oral biofilms: control without killing. Caries Res 2015;49(suppl l):46-54.
11. Matharu Z, Bandodkar AJ, Gupta V. Fundamentals and application of ordered molecular assemblies to affinity biosensing. Chem Soc Rev. 2012 Feb 7;41(3): 1363-402.
12. Olsen I, Lambris JD, Hajishengallisc G. Porphyromonas gingivalis disturbs host- commensal homeostasis by changing complement function. J Oral Microbiol. 2017; 9(1): 1340085.
13. Petersen PE, Bourgeois D, Ogawa H, et al. The global burden of oral diseases and risks to oral health. Bull World Health Organ. 2005;83(9):661-9.
14. Tanner A.C., Kressirer C.A., Faller L.L. Understanding Caries From the Oral Microbiome Perspective. Journal of the California Dental Association, 2016;44(7):437-446.
15. Uriarte SM, Edmisson JS, Jimenez-Florez E. Human neutrophils and oral microbiota: a constant tug-of-war between a harmonious and a discordant coexistence. Immunological Reviews 2016; 273: 282-298.

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
1. Композиция для применения в полости рта, содержащая комбинацию протеолитического фермента бромелаина и лизата бактерий.
2. Композиция по п. 1, в которой лизат бактерий представляет собой лизат бифидобактерий.
3. Композиция по п. 2, в которой лизат бифидобактерий представляет собой лизат Bifidobacterium longum, Bifidobacterium bifidum и Bifidobacterium adolescentis.
4. Композиция по п. 1, в которой лизат бактерий представляет собой лизат Lactobacillus casei, Streptococcus mutans, Streptococcus sanguinis, Veillonella parvula и Candida albicans.
5. Композиция по п. 1, в которой лизат бактерий представляет собой лизат Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus fermentum, Lactobacillus bulgaricus и Str. Thermophilus
6. Композиция по п. 1, содержащая 0,005-0,2 %мас. протеолитического фермента бромелаина.
7. Композиция по п. 1, содержащая 0,05-1 ,5 % мае. лизата бактерий.
8. Композиция по п. 1, дополнительно содержащая усилитель очищающей способности.
9. Композиция по п. 8, в которой усилитель очищающей способности выбран из группы: силика (диоксид кремния), карбонат кальция, дикальция фосфат дигидрат, кальция пирофосфат, оксид алюминия, перлит, бикарбонат натрия, древесный уголь, перекись водорода, кальция пероксид, цитрат натрия, пирофосфат натрия, триполифосфат натрия, гексаметафосфат натрия, кальция пероксид.
10. Композиция по п. 1, дополнительно содержащая гидроксиапатит.
11. Композиция по п. 10, в которой гидроксиапатит обогащен элементами, выбранными из группы: кальций, магний, цинк.
12. Композиция по п. 1, дополнительно содержащая пленкообразующий компонент.
13. Композиция по п. 12, в которой пленкообразующий компонент выбран из группы: поливинилпирролидон, поливиниловый спирт, воскоподобные вещества и их смеси.
14. Композиция по п. 1, дополнительно содержащая пленкообразователь, усилитель очищающей способности, гидроксиапатит и вспомогательные вещества, % мае.:
протеолитический фермент бромелаин 0,005-0,2,
лизат бактерий 0,05-1,5,
пленкообразователь 0,3 - 1 ,0,
усилитель очищающей способности 2, 5-5,0,
гидроксиапатит 0,1-10,0,
вспомогательные вещества до 100.
15. Композиция по п. 1 для применения в полости рта для лечения заболеваний зубов, десен и/или полости рта.
16. Композиция по п. 15, где указанные заболевания выбраны из гингивита, пародонтита, глоссита, стоматита, кариеса, ксеростомии, постравматических воспалений, вызванных ортодонтическими конструкциями.
17. Композиция по п. 1, находящаяся в форме зубной пасты, геля, спрея, жевательной резинки, пенки, эликсира, мази, бальзама или ополаскивателя.
PCT/RU2018/000213 2017-12-21 2018-04-02 Композиция на основе бромелаина и лизата бактерий для профилактики заболеваний полости рта WO2019125204A1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2017145068A RU2748594C2 (ru) 2017-12-21 2017-12-21 Композиция на основе бромелаина и лизата бактерий для профилактики заболеваний полости рта
RU2017145068 2017-12-21

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2019125204A1 true WO2019125204A1 (ru) 2019-06-27

Family

ID=63490655

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/RU2018/000213 WO2019125204A1 (ru) 2017-12-21 2018-04-02 Композиция на основе бромелаина и лизата бактерий для профилактики заболеваний полости рта

Country Status (2)

Country Link
RU (1) RU2748594C2 (ru)
WO (1) WO2019125204A1 (ru)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2021025584A3 (ru) * 2019-08-08 2021-04-01 Общество С Ограниченной Ответственности "Сплат Глобал" Фуллеренсодержащие средства для ухода за полостью рта

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE202009011379U1 (de) * 2009-08-24 2010-12-30 Khalifa, Samir Orale Präparate zur Mund- und Zahnpflege und Bekämpfung von Mundgeruch
RU2496468C2 (ru) * 2012-01-11 2013-10-27 Владимир Николаевич Иванов Зубная паста, содержащая смесь лизатов бактерий
US20150079040A1 (en) * 2012-04-13 2015-03-19 The University Of Manchester Probiotic bacteria

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2004250374A (ja) * 2003-02-20 2004-09-09 Nippon Zettoc Co Ltd 口腔用組成物
RU2416391C1 (ru) * 2009-09-03 2011-04-20 Общество с ограниченной ответственностью "СПЛАТ-КОСМЕТИКА" Композиция для ухода за полостью рта
RU2494724C2 (ru) * 2012-01-13 2013-10-10 Владимир Николаевич Иванов Зубная паста, содержащая лиофилизированную массу живых бифидобактерий
RU2535045C1 (ru) * 2013-07-02 2014-12-10 Владимир Николаевич Иванов Зубная паста, содержащая стимуляторы регенерации

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE202009011379U1 (de) * 2009-08-24 2010-12-30 Khalifa, Samir Orale Präparate zur Mund- und Zahnpflege und Bekämpfung von Mundgeruch
RU2496468C2 (ru) * 2012-01-11 2013-10-27 Владимир Николаевич Иванов Зубная паста, содержащая смесь лизатов бактерий
US20150079040A1 (en) * 2012-04-13 2015-03-19 The University Of Manchester Probiotic bacteria

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ARAVIND KRISHNAN ET AL: "EXTRACTION, PURIFICATION OF BROMELAIN FROM PINEAPPLE AND DETERMINATION OF ITS EFFECT ON BACTERIA CAUSING PERIODONTITIS | INTERNATIONAL JOURNAL OF PHARMACEUTICAL SCIENCES AND RESEARCH", INTERNATIONAL JOURNAL OF PHARMACEUTICAL SCIENCES AND RESEARCH, 1 December 2015 (2015-12-01), pages 5284 - 5294, XP055476538, Retrieved from the Internet <URL:http://ijpsr.com/bft-article/extraction-purification-of-bromelain-from-pineapple-and-determination-of-its-effect-on-bacteria-causing-periodontitis/?view=fulltext> [retrieved on 20180517] *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2021025584A3 (ru) * 2019-08-08 2021-04-01 Общество С Ограниченной Ответственности "Сплат Глобал" Фуллеренсодержащие средства для ухода за полостью рта

Also Published As

Publication number Publication date
RU2748594C2 (ru) 2021-05-27
RU2017145068A3 (ru) 2019-06-21
RU2017145068A (ru) 2019-06-21

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP5916846B2 (ja) 細菌性感冒に対する新規な乳酸菌及びそれを含有する組成物
ES2404165T3 (es) Utilización de una fracción lipopolisacarídica de vitreoscilla filiformis como agente para estimular la síntesis de péptidos antimicrobianos de la piel
US9403181B2 (en) Oral care product formulation
WO2007061328A1 (fr) Composition de soins et de prevention pour la cavite buccale
JP2004521880A (ja) 口腔組成物及びその使用方法
RU2381021C2 (ru) Зубная паста, содержащая липосомы
JP2010053062A (ja) 口腔用組成物
JP4826790B2 (ja) 加水分解シルクを含有する口腔用組成物
RU2494724C2 (ru) Зубная паста, содержащая лиофилизированную массу живых бифидобактерий
RU2496468C2 (ru) Зубная паста, содержащая смесь лизатов бактерий
RU2748594C2 (ru) Композиция на основе бромелаина и лизата бактерий для профилактики заболеваний полости рта
JP2007131601A (ja) 口腔用組成物
JP5925431B2 (ja) 虫歯予防剤
JP2013510799A (ja) 抗バイオフィルム糖ペプチド
JP2012211195A (ja) 歯科用製剤におけるオステオポンチンの使用
Sharma et al. A comparative evaluation of efficacy of probiotic and chlorhexidine mouthrinses on gingival health and plaque accumulation in 6-9 Year old children
JPH0717839A (ja) 口腔用組成物
Fierro-Monti¹ et al. Role of probiotics as bacteriotherapy in dentistry: A literature review
Zope et al. Effect of oil pulling on oral health
JP7177568B1 (ja) 水溶性組成物及びその製造方法
JP2006117601A (ja) 口腔用組成物
Nadelman et al. The Effect of Probiotics on Oral Health
JP7215026B2 (ja) 口腔用組成物
RU2527692C1 (ru) Зубная паста, содержащая комплекс гидролаз
Arakawa et al. Unique functions of hydroxyapatite with mutans streptococci adherence.

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 18765209

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

122 Ep: pct application non-entry in european phase

Ref document number: 18765209

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1